SK15652001A3

SK15652001A3 - Farmaceutický prípravok obsahujúci inhibítor karboxypeptidázy U a inhibítor trombínu

Info

Publication number: SK15652001A3
Application number: SK1565-2001A
Authority: SK
Inventors: Tommy Abrahamsson; Viveca Nerme; Magnus Polla
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 1999-05-03
Filing date: 2000-05-03
Publication date: 2002-07-02
Also published as: IL145951A0; KR100725206B1; CZ20013932A3; CN100518820C; AU4447200A; NO20015308D0; HK1042442B; MY126962A; KR20020003386A; EE200100578A; EP1181048A1; ES2335383T3; US6974800B1; AR023819A1; AU763772B2; MXPA01011044A; ATE447964T1; TR200103151T2; HK1042442A1; HUP0201615A3

Description

Oblasť techniky

Predložený vynález sa týka farmaceutických prípravkov inhibítora karboxypeptidázy U (CPU) a inhibítora trombínu v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom, ako aj kitu súčastí, spôsobu liečenia a použitia prípravkov na liečenie stavu, pri ktorom je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia CPU a/alebo inhibícia trombínu.

Doterajší stav techniky

Koagulácia krvi je kľúčovým procesom podieľajúcim sa ako na hemostáze (t.j. zamedzení straty krvi z poškodených ciev) tak aj na trombóze (t.j. patologickej oklúzii krvných ciev vplyvom tvorby krvnej zrazeniny). Koagulácia je výsledkom komplexných sérií enzymatických reakcií, kde jedným z finálnych krokov je konverzia proenzýmu protrombínu na aktívny enzým trombín.

Je známe, že trombín hrá ústrednú úlohu pri koagulácii. Aktivuje krvné doštičky, konvertuje fibrinogén na monoméry fibrínu, ktoré spontánne polymerizujú na vlákna a aktivujú faktor XIII, ktorý zosieťuje polymér na nerozpustný fibrín. Trombín ďalej aktivuje faktor V a faktor VIII pri pozitívnej spätnej reakcii. Preto sa očakáva, že inhibítory trombinu budú účinnými antikoagulačnými činidlami prostredníctvom inhibície krvných doštičiek, tvorby fibrínu a stabilizácie fibrínu. Očakáva sa, že prostredníctvom inhibície pozitívneho spätného mechanizmu sa uplatňuje prvotná inhibícia v reťazci v prípadoch vedúcich ku koagulácii a trombóze.

Fibrinolýza je výsledkom sérií enzymatických reakcií, ktoré majú za následok degradáciu fibrínu vplyvom plazminu. Aktivácia plazminogénu je ústredným procesom pri fibrinolýze. Štiepenie plazminogénu za vzniku plazminu sa uskutočňuje prostredníctvom plazminogénnych aktivátorov, plazminogénneho aktivátora tkanivového typu (t-PA) alebo plazminogénneho aktivátora urokinázového typu (u-PA). Počiatočná plazmínová degradácia fibrínu vytvára lyzínové zvyšky s terminálnymi karboxylovými skupinami, ktoré slúžia ako väzbové

-2miesta s vysokou afinitou pre plazminogén. Pretože plazminogén viazaný ku fibrínu sa oveľa ľahšie aktivuje na plazmín než voľný plazminogén, tento mechanizmus poskytuje pozitívnu spätnú reguláciu fibrinolýzy.

Jedným z endogénnych inhibítorov fibrinolýzy je CPU. CPU je tiež známe ako karboxypeptidáza B plazmy, aktívny trombínom aktivovateľný inhibitor fibrinolýzy (TAFIa), karboxypeptidázy R a indukovateľnej aktivity karboxypeptidázy. CPU sa tvorí zo svojho prekurzora, prokarboxypeptidázy U (proCPU), účinkom proteolytických enzýmov, napríklad trombínu, komplexu trombínu-trombomodulínu alebo plazmínu. CPU štiepi základné aminokyseliny na karboxy-terminálnych fragmentoch fibrínu. Strata karboxy-terminálnych lyzínov a tým väzbových miest lyzínu pre plazminogén slúži potom na inhibíciu fibrinolýzy.

Podstata vynálezu

Predložený vynález sa týka farmaceutických prípravkov obsahujúcich inhibitor CPU a inhibitor trombínu v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom a/alebo nosičom, ako aj spôsobu liečenia a použitia prípravkov na liečenie stavu, pri ktorom je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia CPU a/alebo inhibícia trombínu.

Vynález sa ďalej týka kitu súčastí a nádobiek obsahujúcich CPU inhibitor a inhibitor trombínu a inštrukcie na podávanie inhibítorov pacientovi, ktorý to potrebuje.

Predložený vynález sa ďalej tiež týka kitu súčastí prípravkov obsahujúcich CPU inhibitor a inhibitor trombínu, každý v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom a/alebo nosičom.

Podrobný opis vynálezu

Prekvapujúco sme zistili, že v porovnaní s použitím CPU a inhibítorov trombínu oddelene, predložený vynález zahrňujúci kombináciu inhibítora CPU a inhibítora trombínu umocňuje antitrombotické účinky, v dôsledku čoho znižuje riziko trombózy a nadmernej zrážanlivosti v krvi a tkanivách cicavcov. Okrem toho, predložený vynález umožňuje podávanie nižších dávok účinných zložiek, v dôsledku čoho sa znižuje riziko možných vedľajších účinkov inhibítorov trombínu.

-3Ešte ďalej sa predložený vynález teda týka farmaceutických prípravkov, ktoré obsahujú:

(i) inhibítor karboxypeptidázy U alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ, a (ii) inhibítor trombínu alebo jeho derivát,

I ’

I v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom.

Predložený vynález sa ešte ďalej týka kitov súčastí zahrňujúcich:

(í) nádobku obsahujúcu inhibítor karboxypeptidázy U, alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ;

(ii) nádobku obsahujúcu inhibítor trombínu, alebo jeho derivát, a inštrukcie na postupné, oddelené alebo súčasné podávanie inhibítorov (i) a (ii) pacientovi, ktorý to potrebuje.

Ešte ďalej sa vynález týka kitov súčastí obsahujúcich:

(i) farmaceutický prípravok obsahujúci inhibítor karboxypeptidázy U, alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ, v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom; a (ii) farmaceutický prípravok obsahujúci inhibítor trombínu, alebo jeho derivát, v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom;

pričom každý z inhibítorov (i) a (ii) sa poskytuje vo forme, ktorá je vhodná na podávanie spoločne s druhou formou.

Pod výrazom podávanie spoločne s sa rozumie, že príslušné prípravky, obsahujúce CPU inhibítor a inhibítor trombínu sa podávajú postupne, oddelene a/alebo súčasne, v priebehu liečenia príslušného stavu, pričom tento stav môže byť akútny alebo chronický. Výhodne tento termín znamená, že tieto dva prípravky sa podávajú (prípadne opakovane) v blízkom časovom období postačujúcom na to, aby mali priaznivý účinok pre pacienta, pričom tento účinok je väčší, v porovnaní s priebehom liečenia relevantného stavu, než ak sa každý z týchto dvoch

-4prípravkov podáva (prípadne opakovane) samotný, bez prítomnosti ďalšieho prípravku, počas rovnakého obdobia liečenia. Stanovenie, či kombinácia poskytuje väčší priaznivý účinok v porovnaní s a v priebehu liečenia príslušného stavu, bude závisieť na stave, ktorý sa má liečiť alebo pri ktorom má slúžiť ako prevencia, avšak odborník skúsený v odbore toto môže dosiahnuť v bežnej praxi.

Termín vo vzájomnej konjunkcii teda znamená to, že jeden alebo ďalší z dvoch prípravkov sa môže podávať (prípadne opakovane) pred, po a/alebo v rovnakom čase ako podávanie s ďalšou zložkou. Ak sa v tomto kontexte používajú termíny podávané súčasne a podávané v rovnakom čase ako to znamená, že jednotlivé dávky inhibítora CPU a inhibítora trombínu sa navzájom podávajú v rozpätí 48 hodín, napríklad 24 hodín.

Predložený vynález sa ešte ďalej týka spôsobu zhotovenia kitu súčastí, ako je tu definované, pričom tento spôsob zahrňuje uvedenie zložky (a), definovanej vyššie, do spojenia so zložkou (b), definovanou vyššie, pričom týmto sa poskytujú dve zložky vhodné na podávanie vo vzájomnej konjunkcii.

Uvedenie týchto dvoch zložiek do vzájomného spojenia znamená, že zložky (a) a (b) sa môžu:

(i) poskytnúť ako oddelené prípravky (t.j. navzájom nezávisle jeden od druhého), ktoré sa následne spolu spoja na použitie vo vzájomnej konjunkcii alebo v kombinovanej terapii; alebo (ii) balia sa a poskytujú sa spoločne ako oddelené zložky v kombinovanom balení na použitie vo vzájomnej konjunkcii v kombinovanej terapii.

Predložený vynález sa ešte ďalej týka spôsobov liečenia pacienta trpiaceho alebo náchylného na stav, pri ktorom je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia trombínu a/alebo inhibícia karboxypeptidázy U, pričom tento spôsob zahrňuje podávanie pacientovi terapeuticky účinného celkového množstva (i) inhibítora karboxypeptidázy U, alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli, v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom, v konjunkcii s

-5(ii) inhibítorom trombínu, alebo s jeho derivátom, v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom.

Ešte ďalším predmetom predloženého vynálezu je spôsob liečenia pacienta trpiaceho alebo náchylného na stav, pri je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia trombínu a/alebo inhibícia karboxypeptidázy U, pričom tento spôsob zahrňuje podávanie pacientovi farmaceutického prípravku, ktorý obsahuje:

(i) inhibítor karboxypeptidázy U alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ, a (ii) inhibítor trombínu alebo jeho derivát, v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom.

Ešte ďalším predmetom tohto vynálezu je použitie farmaceutických prípravkov obsahujúcich:

(i) inhibítor karboxypeptidázy U alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ, a (ii) inhibítor trombínu alebo jeho derivát, v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom, na výrobu liečiva na liečenie a stavu, pri ktorom je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia trombínu a/alebo inhibícia karboxypeptidázy U.

Aby sa vylúčili akékoľvek pochybnosti, termín liečenie zahrňuje terapeutickú a/alebo profylaktickú liečbu.

Inhibítory CPU

Inhibítory CPU uvedené v tejto prihláške, zahrňujú inhibítory karboxypeptidázy s nízkou molekulovou hmotnosťou, pričom molekulová hmotnosť predstavuje menej ako približne 1000, výhodne menej ako 700.

V predloženej prihláške vynálezu inhibítorom CPU je výhodne (i) zlúčenina všeobecného vzorca I

-6γ>4 W

Ŕ* alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo jej solvát, alebo solvát takejto soli, kde

R¹ predstavuje

Ci-C6-alkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden heteroatóm zvolený z S alebo O, a substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

alebo arylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina,

R predstavuje atóm vodíka, acylovú skupinu, acylaminoskupinu, alkylovú skupinu, alkylkarbamoylovú skupinu, alkyltioskupinu, alkoxyskupinu, aroylovú skupinu, aroylaminoskupinu, aryloxyskupinu, aryltioskupinu, amidinoskupinu, aminoskupinu, arylovú skupinu, karbamoylovú skupinu, karboxylovú skupinu, kyanoskupinu, cykloalkylovú skupinu, formylovú skupinu, guanidinoskupinu, halogén, heterocyklylovú skupinu, hydroxylovú

-7 skupinu, oxoskupinu, nitroskupinu, tiolovú skupinu, skupinu Z₂N-CO-O-, ZO-CO-NZ- alebo Z₂N-CO-NZ-,

R³ predstavuje COOR⁵, SO(OR⁵), SO3R⁵, P=O(OR⁵)2, B(OR⁵)₂, P=OR⁵(OR⁵) alebo tetrazol, alebo akýkoľvek izostér karboxylovej kyseliny,

R⁴ predstavuje SH, S-CO-Ci-C6-alkylovú skupinu alebo S-CO-arylovú skupinu,

R predstavuje atóm vodíka, C^Ce-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

R⁶ predstavuje atóm vodíka alebo C-i-C₆-alkylovú skupinu,

X predstavuje O, S, SO, SO₂, C(Z)₂, N(Z), NR⁶SO₂, SO₂NR⁶, NR⁶CO alebo CONR⁶,

Y predstavuje C(Z)₂,

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka, Ci-C₆-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu alebo heterocyklylovú skupinu, alebo (ii) zlúčenina všeobecného vzorca ll

alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo jej solvát, alebo solvát takejto soli, pričom , .

R⁷ predstavuje

Ci-C₆-alkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

-8cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

alebo arylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina, θ

R predstavuje atóm vodíka, acylovú skupinu, acylaminoskupinu, alkylovú skupinu, alkylkarbamoylovú skupinu, alkyltioskupinu, alkoxyskupinu, aroylovú skupinu, aroylaminoskupinu, aryloxylovú skupinu, aryltioskupinu, amidinoskupinu, aminoskupinu, arylovú skupinu, karbamoylovú skupinu, karboxylovú skupinu, kyanoskupinu, cykloalkylovú skupinu, formylovú skupinu, guanidinoskupinu, halogén, heterocyklylovú skupinu, hydroxylovú skupinu, oxoskupinu, nitroskupinu, tiolovú skupinu, skupinu Z2N-CO-O-, ZO-CO-NZ- alebo Z₂N-CO-NZ-,

R⁹ predstavuje COOR¹¹, SO(O¹¹),

P=OR¹¹(OR¹¹) alebo tetrazol alebo karboxylovej kyseliny, '^fí

R predstavuje skupinu 9

-P-R«O alebo skupinu Q

A-^r

R predstavuje atóm vodíka, Ci-C₆-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

SO₃R¹¹, P=O(OR)2, Β(ΟΡ^1ί)2, akýkoľvek alebo akýkoľvek izostér

Á-^0H alebo skupinu /3

-9R¹² predstavuje Ci-C₆-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, heterocyklylovú skupinu alebo prípadne N-substituovanú H₂NC(Z)-CONH-C(Z)- alebo H₂N-C(Z)- skupinu,

R¹³ predstavuje atóm vodíka alebo Ci-C₆-alkylovú skupinu,

X predstavuje O, S, SO, SO₂, C(Z)₂, N(Z), NR¹³SO₂, SO₂NR¹³, NR¹³CO alebo CONR¹³,

Y predstavuje O, N(Z), S, C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu,.

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka, Ci-C6-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu alebo heterocyklylovú skupinu, pod podmienkou, že ak X predstavuje O, S, SO, SO₂, N(Z), NR⁷SO2, SO2NR⁷alebo NR⁷CO, potom Y znamená C(Z)2 alebo jednoduchú väzbu.

Výhodné inhibítory CPU zahrňujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, alebo ich farmaceutický prijateľnú soľ alebo ich solvát, alebo solvát takejto soli, pričom sa uplatňujú nasledujúce individuálne a osobité výhody:

R¹ predstavuje, cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

R² predstavuje atóm vodíka, acylovú skupinu, acylaminoskupinu, alkylovú skupinu, alkylkarbamoylovú skupinu, alkyltioskupinu, alkoxyskupinu,

-10aroylovú skupinu, aroylaminoskupinu, aryloxylovú skupinu, aryltioskupinu, amidinoskupinu, aminoskupinu, arylovú skupinu, karbamoylovú skupinu, karboxylovú skupinu, kyanoskupinu, cykloalkylovú skupinu, formylovú skupinu, guanidinoskupinu, halogén, heterocyklylovú skupinu, hydroxylovú skupinu, oxoskupinu, nitroskupinu, tiolovú skupinu, skupinu Z₂N-CO-O-, ZO-CO-NZ- alebo Z₂N-CO-NZ-,

R³ predstavuje COOR⁵,

R⁴ predstavuje SH, S-CO-Ci-C6-alkylovú skupinu alebo S-CO-arylovú skupinu,

R⁵ predstavuje atóm vodíka, Ci-C6-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

R⁶ predstavuje atóm vodíka alebo Ci-C6-alkylovú skupinu,

X predstavuje O, S, SO, SO₂, C(Z)₂, N(Z), NR⁶SO₂, SO₂NR⁶ alebo CONR⁶,

Y predstavuje C(Z)₂,

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka, CrC₆-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu alebo heterocyklylovú skupinu.

Rovnako výhodné inhibítory CPU zahrňujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, alebo ich farmaceutický prijateľnú soľ, pričom sa uplatňujú nasledujúce individuálne a osobité výhody:

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

-11 R² predstavuje atóm vodíka, Ci-C3-alkylovú skupinu, aminoskupinu, halogén alebo hydroxylovú skupinu,

R³ predstavuje COOR⁵,

R⁴ predstavuje SH, S-CO-C_rC₆-alkylovú skupinu alebo S-CO-arylovú skupinu,

I

R⁵ predstavuje atóm vodíka, C-i-Ce-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

X predstavuje C(Z)₂,

Y predstavuje C(Z)₂,

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka alebo Ci-C6-álkylovú skupinu.

Výhodné inhibítory CPU zahrňujú zlúčeniny všeobecného vzorca II, alebo ich farmaceutický prijateľnú soľ alebo jej solvát, alebo solvát takejto soli, pričom sa uplatňujú nasledujúce individuálne a osobité výhody:

R⁷ predstavuje,

CrCe-alkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina, heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

-12.R*

O

-Ŕ-R*

II .

o

Λ„-^θΗ alebo skupinu g

R⁹ predstavuje COOR¹¹,

R¹⁰ predstavuje skupinu

O alebo skupinu

R predstavuje atóm vodíka, Ci-C6-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

R predstavuje Ci-C6-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, heterocyklylovú skupinu alebo prípadne N-substituovanú H₂NC(Z)-CONH-C(Z)- skupinu alebo H₂N-C(Z)- skupinu,

R predstavuje atóm vodíka alebo Ci-C₆-alkylovú skupinu,

X predstavuje C(Z)₂,

Y predstavuje O, N(Z), S, C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu,.

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka, Ci-C₆-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu alebo heterocyklylovú skupinu.

Rovnako predovšetkým výhodné inhibítory CPU zahrňujú zlúčeniny všeobecného vzorca II, alebo ich farmaceutický prijateľnú soľ alebo ich solvát, alebo solvát takejto soli, pričom sa uplatňujú nasledujúce individuálne a osobité výhody:

- 13R⁷ predstavuje, cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, arnidinoskupina a/alebo guanidinoskupina, heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden heteroatóm zvolený z S alebo O, a substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, arnidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

g

R predstavuje atóm vodíka, Ci-C3-alkylovú skupinu, aminoskupinu, halogén, hydroxylovú skupinu,

R⁹ predstavuje COOR¹¹, s

R predstavuje skupinu o —p-r'^2,

II ⁿO

R¹¹ predstavuje atóm vodíka, Ci-C6-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

R predstavuje CrC₆-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, heterocyklylovú skupinu alebo prípadne N-substituovanú H2NC(Z)-CONH-C(Z)- skupinu alebo H₂N-C(Z)- skupinu,

X predstavuje C(Z)2,

Y predstavuje O alebo C(Z)₂,

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka alebo C-i-Ce-alkylovú skupinu.

V celej opise prihlášky a v patentových nárokoch sa používajú nasledujúce definície:

Termín zásaditá skupina označuje zásaditú skupinu, kde konjugovaná kyselina uvedenej zásaditej skupiny má hodnotu pKa od približne -5 do asi 25, výhodne od 1 do 15.

-14Termín izostér karboxylovej kyseliny označuje kyslú skupinu, ktorá má hodnotu pKa od približne -5 do asi 25, výhodne od 1 do 15.

Termín CrCe-alkylová skupina označuje alkylovú skupinu, lineárnu alebo rozvetvenú, nasýtenú alebo nenasýtenú, substituovanú alebo nesubstítuovanú, ktorá obsahuje 1 až 6 atómov uhlíka v reťazci, pričom alkylová skupina môže byť prípadne prerušená jedným alebo viacerými heteroatómami, ktoré sú zvolené z O, N alebo S. Príklady uvedenej alkylovej skupiny zahrňujú, ale nie sú obmedzené na, metyl, etyl, etenyl, etinyl, n-propyl, /zo-propyl, propenyl, /zo-propenyl, propinyl, nbutyl, /zo-butyl, sek-butyl, terc-butyl, butenyl, /zo-butenyl, butinyl a pentyl a hexyl s lineárnym a rozvetveným reťazcom.

Termín CrCa-alkylová skupina označuje alkylovú skupinu, lineárnu alebo rozvetvenú, nasýtenú alebo nenasýtenú, substituovanú alebo nesubstítuovanú, ktorá obsahuje 1 až 3 atómy uhlíka v reťazci, pričom alkylová skupina môže byť prípadne prerušená jedným alebo viacerými heteroatómami, ktoré sú zvolené z O, N alebo S. Príklady uvedenej alkylovej skupiny zahrňujú, ale nie sú obmedzené na, metyl, etyl, etenyl, etinyl, n-propyl, /zo-propyl, propenyl, /zo-propenyl, propinyl.

Termín Ci-alkylová skupina označuje substituovanú alebo nesubstítuovanú alkylovú skupinu, ktorá obsahuje 1 atóm uhlíka. Príklad uvedenej alkylovej skupiny zahrňuje, ale nie je obmedzený na, metyl,

Termín CrCô-alkoxylová skupina označuje alkyl-O-skupinu, kde CrC6alkyl je definovaný vyššie.

Termín CrC3-alkoxylová skupina označuje alkyl-O-skupinu, kde CrC3alkyl je definovaný vyššie.

Termín heterocyklylová skupina označuje substituovaný alebo nesubstituovaný, 4- až 10-členný monocyklický alebo multicyklický kruhový systém, v ktorom jeden alebo viac z atómov kruhu alebo kruhov predstavuje iný prvok ako uhlík, napríklad dusík, kyslík alebo síra, predovšetkým 4-, 5- alebo 6-členné aromatické alebo alifatické heterocyklické skupiny, a zahrňuje, ale nie je obmedzený na, azetidínovú, furánovú, tiofénovú, pyrolovú, pyrolínovú, pyrolidínovú, dioxolánovú, oxatiolánovú, oxazolánovú, oxazolovú, tiazolovú, imidazolovú,

-15imidazolínovú, imidazolidínovú, pyrazolovú, pyrazolínovú, pyrazolidínovú, izoxazolovú, izotiazolovú, oxadiazolovú, furazanovú, triazolovú, tiadiazolovú, pyránovú, pyridínovú, piperidínovú, dioxánovú, morfolínovú, ditiánovú, oxatiánovú, tiomorfolínovú, pyridazínovú, pyrimidínovú, pyrazínovú, piperazínovú, triazínovú, tiadiazínovú, ditiazínovú, azaindolovú, azaindolínovú, indolovú, indolínovú, naftyridínovú skupinu, a treba rozumieť, že zahrňuje všetky izoméry vyššie uvedených skupín. Termín ''azetidinyľ je napríklad potrebné rozumieť tak, že zahrňuje 2- a 3-izoméry a termíny pyridyl a piperidinyl je napríklad potrebné rozumieť tak, že zahrňuje 2-, 3- a 4-izoméry.

Termín cykloalkylová skupina označuje nasýtený alebo nenasýtený, substituovaný alebo nesubstituovaný, nearomatický kruh obsahujúci 3,. 4, 5, 6 alebo 7 atómov uhlíka, a zahrňuje, ale nie je obmedzený na, cyklopropylovú, cyklobutylovú, cyklopentylovú, cyklohexylovú, cykloheptylovú, cyklobutenylovú, cyklopentenylovú, cyklohexenylovú, cykloheptenylovú, cyklopentadienylovú, cyklohexadienylovú a cykloheptadienylovú skupinu,

Termín halogén zahrňuje skupiny fluóru, chlóru, brómu a jódu.

Termín arylová skupina označuje substituovaný alebo nesubstituovaný C₆Ci4-aromatický uhľovodík a zahrňuje, ale nie je obmedzený na, fenyl, naftyl, indenyl, antracenyl, fenantrenyl a fluorenyl.

Termín aryloxylová skupina označuje aryl-O-skupinu, kde aryl je definovaný vyššie.

Termín acylová skupina označuje alkyl-CO-skupinu, kde alkyl je definovaný vyššie.

Termín aroylová skupina označuje aryl-CO-skupinu, kde aryl je definovaný vyššie.

Termín alkyltioskupina označuje alkyl-S-skupinu, kde alkyl je definovaný vyššie.

Termín aryltioskupina označuje aryl-S-skupinu, kde aryl je definovaný vyššie.

-16Termín aroylaminoskupina označuje aroyl-N(Z)-skupinu, kde aroyl a Z sú definované vyššie.

Termín acylaminoskupina označuje acyl-N(Z)-skupinu, kde acyl a Z sú definované vyššie.

Termín karbamoylová skupina označuje H₂N-CO-skupinu.

Termín alkylkarbamoylová skupina označuje Z₂N-CO-skupinu, kde Zje definované vyššie.

Termín substituovaný označuje Ci-alkylovú skupinu, Ci-C3-alkylovú skupinu, Ci-C6-alkylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu“, heterocyklylovú skupinu, arylovú skupinu, skupinu H₂N-C(Z)-CONH-C(Z)- alebo skupinu H₂NC(Z)-, definované vyššie, ktoré sú substituované jednou alebo viacerými skupinami, ako je acylová skupina, acylaminoskupina, alkylová skupina, alkylkarbamoylová skupina, alkyltioskupina, alkoxyskupina, aroylová skupina, aroylaminoskupina, aryloxyskupina, aryltioskupina, amidinoskupina, aminoskupina, arylová skupina, karbamoylová skupina, karboxylová skupina, kyanoskupina, cykloalkylová skupina, formylová skupina, guanidinová skupina, halogén, heterocyklylová skupina, hydroxylová skupina, oxoskupina, nitroskupina, tiolová skupina, tioskupina, skupina Z₂N-CO-O-, ZO-CO-NZ- alebo skupina Z₂N-CO-NZ-.

Okrem toho, zlúčeniny vzorca I, v ktorom R⁴ znamená merkaptoskupinu, môžu byť prítomné vo forme diméru, ktorý je viazaný prostredníctvom väzby -S-S-, ktoré sú taktiež zahrnuté do tohto vynálezu.

Do rozsahu predloženého vynálezu sú taktiež zahrnuté čisté enantioméry, racemické zmesi a nerovnorodé zmesi dvoch enantiomérov. Je tiež potrebné si uvedomiť, že všetky možné diastereoizomérne formy spadajú do rozsahu predloženého vynálezu.

V závislosti od podmienok spracovania, zlúčeniny všeobecného vzorca I a II sa môžu získať v neutrálnej forme, ako soli, napríklad ako farmaceutický prijateľné soli, alebo ako solváty, napríklad hydráty, z ktorých všetky spadajú do rozsahu predloženého vynálezu.

-17Predložený vynález zahrňuje tiež deriváty zlúčenín vzorca I a II, ktoré majú biologickú funkciu zlúčenín vzorca I a II. Napríklad pred stupňom finálneho odstránenia chrániacich skupín sa môžu pripraviť určité chránené deriváty zlúčenín vzorca I alebo II, za vzniku zlúčenín vzorca I a II.

Použitie chrániacich skupín je opísané v „Protective Groups in Organíc Synthesis“, 2^nd Edítion, T.W. Greene & P.G.M. Wutz, Wiley-lnterscience (1991). Chrániacou skupinou môže byť tiež polymérna živica, ako je Wangova živica alebo 2-chlórtritylchloridová živica.

Odborníci skúsení v odbore si tiež budú vedomí toho, že hoci takéto chránené deriváty zlúčenín vzorca I alebo II samotné nemusia vykazovať farmakologickú aktivitu, môžu sa podávať parenterálne alebo orálne, spolu s inhibítorom trombínu a následne sa metabolizovať v tele za vzniku zlúčenín vzorca I alebo II, ktoré sú farmakologicky účinné. Takéto deriváty sa preto môžu opísať ako prekurzory. Všetky prekurzory zlúčenín vzorca I alebo II sú zahrnuté do rozsahu tohto vynálezu.

V predloženej prihláške CPU inhibítory zahrňujú chemické modifikácie, ako sú estery, prekurzory a metabolity, či už aktívne alebo neaktívne, a farmaceutický prijateľné soli ktorýchkoľvek z nich.

Príprava inhibítorov CPU všeobecného vzorca I

Inhibítory CPU všeobecného vzorca I sa môžu pripraviť s použitím nasledujúcich spôsobov A až C.

Spôsob A

Spôsob A na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I; kde R¹, R³, R⁴ a Y majú vyššie definované významy, a R² znamená H a X predstavuje C(Z)₂, zahrňuje nasledujúce kroky:

a) Zlúčeniny všeobecného vzorca III,

R¹-X-OH (III)

-18ή kde R má význam definovaný pri vzorci I a X znamená C(Z)_2l ktoré sú buď komerčne dostupné alebo sa dajú získať s použitím známych postupov, sa môžu konvertovať na zlúčeninu všeobecného vzorca IV,

R¹-X-L (IV) kde L znamená vhodnú odstupujúcu skupinu, ako je chlór, bróm, jód, triflát alebo tozyl, pri štandardných podmienkach s použitím vhodného reakčného činidla, ako je PPh3/CBr₄, TosCI/pyridín alebo (CF3SO₂)₂O/TEA.

b) Zlúčeniny všeobecného vzorca IV sa potom môžu nechať reagovať so zlúčeninami všeobecného vzorca V t

R xk ⁴

HOOC R (V) kde R² a R³ majú významy definované pri vzorci I, ktoré sú buď komerčne dostupné alebo

R l

X,

R.

HOOC^F?

(VI) sú dostupné s použitím známych postupov, v prítomnosti vhodnej zásady, ako je K₂CO₃ alebo NaH, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca VI.

c) Zlúčeniny všeobecného vzorca VI, kde R¹ a R³ majú významy definované vo vzorci I a X predstavuje C(Z)₂ a R² znamená H, sa potom môžu konvertovať na zlúčeniny všeobecného vzorca VII,

(VH) reakciou s formaldehydom v prítomnosti vhodnej zásady, ako je Et₂NH, pri štandardných podmienkach.

d) Zlúčeniny všeobecného vzorca VII sa môžu tiež pripraviť reakciou zlúčenín všeobecného vzorca VIII, /x * (R5O)₂OP R (VDD kde R³ a R⁵ majú významy definované vo vzorci I, s alkylačným činidlom všeobecného vzorca IV v prítomnosti vhodne zásady, ako je LDA alebo NaH, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca IX, (R5O)₂OP

(K)

e) Zlúčeniny všeobecného vzorca IX sa potom môžu nechať reagovať s vhodným aldehydom alebo ketónom OC(Z)₂, v prítomnosti vhodnej zásady, ako je KOŕBu, LDA alebo NaH, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca VII.

(VH)

-20f) Zlúčeniny všeobecného vzorca VII môžu ďalej reagovať so zlúčeninami všeobecného vzorca X,

R⁵ - SH (X) kde R⁵ znamená vhodnú chrániacu skupinu, ako je Ac, Bz, PMB alebo Bn, samotné alebo v prítomnosti vhodnej zásady, ako je NaOMe, NaH alebo trietylamín, alebo alternatívne v prítomnosti iniciátora s voľnými radikálmi, ako j e AIBN, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca I, kde R¹, R³, R⁴ a Y majú významy definované vo vzorci I a R² znamená H a X predstavuje C(Z)₂.

Spôsob B

Spôsob B na výrobu zlúčenín všeobecného vzorca I, kde R¹, R², R³ a R⁴majú významy definované vo vzorci l a Y predstavuje CH₂ a X znamená O, S, SO, SO₂, C(Z)₂ alebo N(Z), zahrňuje nasledujúce kroky:

a) Reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca XI,

R¹-X-H (XI) kde R¹ má význam definovaný vo vzorci I ad X znamená O, S alebo N(Z), s alkylačným činidlom všeobecného vzorca XII, rfA? (ΧΠ)

O Q kde R a R majú významy definované vo vzorci I a L znamená vhodnú odstupujúcu skupinu, ako je chlór, bróm, jód, triflát alebo tozylátová skupina, pri štandardných podmienkach, s použitím vhodných reagentov, ako je NaH, Ag₂CO₃alebo B^NHSOVNaOH, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca XIII,

b) Zlúčeniny všeobecného vzorca XIII sa potom môžu nechať reagovať s oxidom uhličitým v prítomnosti vhodnej zásady, ako je LDA alebo KHMDS pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca XIV,

HOOC

R

(XIV) (c) Zlúčeniny všeobecného vzorca XIV sa ďalej môžu nechať reagovať s alkylchlórformiátom, ako je CICOOMe, v prítomnosti zásady, ako je trietylamín, a potom sa vytvorený zmesný anhydrid nechá redukovať s vhodným redukčným činidlom, ako je NaBH₄, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca XV,

OH (d) Zlúčeniny všeobecného vzorca XV sa ďalej môžu nechať reagovať so zlúčeninou všeobecného vzorca X

R⁵ - SH (X) kde R⁵ znamená vhodnú chrániacu skupinu, ako je Ac alebo Bz, v prítomnosti vhodného reakčného činidla, ako je PPh₃/DIAD, pri štandardných podmienkach, za

-22vzniku zlúčenín všeobecného vzorca I, kde R¹, R², R³ a R⁴ majú vyššie definované významy a Y znamená CH2 a X predstavuje O, S, C(Z)2 alebo N(Z).

e) Zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde R¹, R², R³, R⁴ a Y majú vyššie definované významy a X znamená S, sa môžu ďalej nechať reagovať s vhodným oxidačným reakčným činidlom, ako je MCPBA, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R¹, R², R³, R⁴ a Y majú vyššie definované významy a X znamená SO alebo SO₂.

Spôsob C

Spôsob C na výrobu zlúčenín všeobecného vzorca I, kde R¹, R², R³, R⁴ a Y majú vyššie definované významy a X znamená NR⁶CO, CONR⁶, SO2NR⁶ alebo NR⁶SO2, zahrňuje nasledujúce kroky:

a) Reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca XVI, ť z

R· HN_xxR_a | _r ^R (XVI)

SR’ kde R², R³, R⁶ a Y majú významy definované vo vzorci I a R⁵ znamená vhodnú chrániacu skupinu, ako je Ac, Bz, PMB alebo Bn, so zlúčeninou všeobecného vzorca XVII,

R¹ - X (XVII) kde R¹ má význam definovaný vo vzorci I a X predstavuje COOH alebo SO2CI , v prítomnosti vhodných kopulačných reakčných činidiel, ako sú PyBOP/DIPEA, DCC/HOBt, EDC/TEA/DMAP alebo pyridínu, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R¹, R², R³, R⁴ a Y majú vyššie definované významy a X predstavuje NR⁶CO alebo NR⁶SO2.

b) Reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca XVIII,

-232.

^χ R y^r⁴ (xvm) s r SR kde R², R³ a Y majú významy definované vo vzorci I a X znamená COOH alebo SO₂CI a R⁵ znamená vhodnú chrániacu skupinu, ako je Ac, Bz, PMB alebo Bn, so zlúčeninou všeobecného vzorca XIX,

R⁶-NH₂ (XIX) g

kde R má význam definovaný vo vzorci I, v prítomnosti vhodných kopulačných reakčných činidiel, ako sú PyBOP/DIPEA, DCC/HOBt, EDC/TEA/DMAP alebo pyridín, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R¹, R², R³, R⁴ a Y majú vyššie definované významy a X predstavuje CONR⁶ alebo SO₂NR⁶.

Príprava inhibítorov CPU všeobecného vzorca II

Inhibítory CPU všeobecného vzorca II sa môžu pripraviť s použitím nasledujúcich spôsobov D až G.

Spôsob D

Spôsob D na výrobu zlúčenín všeobecného vzorca II, kde R⁷, R¹¹, R¹² a Z majú vyššie definované významy a R⁸ znamená H, R⁹ predstavuje COOR¹¹, predstavuje skupinu .R o

' 12.

-p- P

II o

X znamená C(Z)₂, Y predstavuje C(Z)₂ a zahrňuje nasledujúce kroky:

a) Zlúčeniny všeobecného vzorca XX,

-24R⁷-X-OH (XX) kde R⁷ a Z majú významy definované vo vzorci II a X predstavuje C(Z)₂, ktoré sú buď komerčne dostupné alebo sú dostupne s použitím známych postupov, sa môžu konvertovať na zlúčeninu všeobecného vzorca XXI,

R⁷-X-L (XXI) kde L znamená vhodnú odstupujúcu skupinu, ako je chlór, bróm, jód, triflát alebo tozylová skupina, pri štandardných podmienkach s použitím vhodného reakčného činidla, ako je PPľi3/CBr₄, TosCI/pyridín alebo (CF₃SO₂)2O/TEA).

b) Zlúčeniny všeobecného vzorca XXI sa môžu potom nechať reagovať so zlúčeninami všeobecného vzorca XXII,

ΥΎ°

OH OH (XXII) ktoré sú buď komerčne dostupné alebo sú dostupné s použitím známych postupov, v prítomnosti vhodnej zásady, ako je K₂CO₃ alebo NaH, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca XXIII,

(XXIII)

c) Zlúčeniny všeobecného vzorca XXIII sa potom môžu konvertovať na zlúčeniny všeobecného vzorca XXIV,

(XXIV) reakciou s formaldehydom v prítomnosti vhodnej zásady, ako je Et₂NH, pri štandardných podmienkach.

Avšak, ak Y predstavuje CH(Z), potom sa zlúčeniny všeobecného vzorca XXIV môžu pripraviť reakciou zlúčenín všeobecného vzorca XXV, (MeO)₂OP (XXV)

OH s alkylačným činidlom všeobecného vzorca XXI,

R⁷-X-L (XXI) kde R⁷ má význam definovaný vo vzorci 11 a L znamená vhodnú odstupujúcu skupinu, ako je chlór, bróm, jód, triflát alebo tozylová skupina, v prítomnosti vhodnej zásady, ako je LDA alebo NaH, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca XXVI,

R' (MeO)₂OP /V /O

X (XXVI)

OH

-26Zlúčeniny všeobecného vzorca XXVI sa potom môžu nechať reagovať s vhodným aldehydom CHO(Z), kde Z má význam definovaný vo vzorci II, v prítomnosti vhodnej zásady, ako je KOŕBu. LDA alebo NaH, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca XXIV.

d) Zlúčeniny všeobecného vzorca XXIV môžu ďalej reagovať so zlúčeninami všeobecného vzorca XXVII

R¹²PO₂H₂ (XXVII) kde R má význam definovaný vo vzorci II, v prítomnosti vhodného reakčného činidla, ako je BSA alebo HMDS, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca II, kde R⁷, R¹¹, R¹² a Z majú vyššie definované významy, R⁸ znamená H, R⁹ predstavuje COOR¹¹,

R¹⁰ predstavuje skupinu -p-r*¹ o

X znamená C(Z)₂ a Y predstavuje C(Z)₂.

Spôsob E

Spôsob E na výrobu zlúčenín všeobecného vzorca II, v ktorom R⁷, R⁸, R¹¹, R¹² a Z majú vyššie definované významy, R⁹ predstavuje COOR¹¹, X znamená C(Z)₂, Y predstavuje O, a o

R¹⁰ predstavuje skupinu —-PtA o

zahrňuje nasledujúce kroky:

a) Reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca XXVIII,

R⁷ - XCO - R⁸ (XXVIII)

-2Ί 7 Ô kde R , R a Z majú významy definované vo vzorci II a X predstavuje C(Z)₂, v prítomnosti vhodných reakčných činidiel, ako je TMSCN/Ž’.nl₂ alebo KCN/HOAc, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca XXIX,

R

I

X.

HO

R

Ϊ1Ι

N (XXIX) kde R⁷ a R⁸ majú významy definované vo vzorci II a X znamená C(Z)₂.

b) Zlúčeniny všeobecného vzorca XXIX sa potom môžu nechať reagovať s vhodnými reakčnými činidlami, ako je HCI alebo HCI/MeOH, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca XXX ψ

R

X f/

HO'^COOH (XXX) kde R⁷ a R⁸ majú významy definované vo vzorci II a X predstavuje C(Z)₂.

c) Zlúčeniny všeobecného vzorca XXX sa potom môžu nechať reagovať so zlúčeninami všeobecného vzorca XXXI

R¹²PO₃H₂ (XXXI) kde R¹² má význam definovaný vo všeobecnom vzorci H, ktoré sú buď komerčne dostupné, dobre známe v literatúre, alebo sú dostupné s použitím známych postupov, v prítomnosti vhodných kopulačných reakčných činidiel, ako je DCC/DMAP, PyBop/DIPEA alebo SOCI₂, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca II, kde R⁷, R⁸, R¹¹, R¹² a Z majú vyššie definované významy, R⁹ znamená COOR¹¹,

-28R¹⁰ predstavuje skupinu ?

-PI)

O

X znamená C(Z)₂ a Y predstavuje O.

Spôsob F

Spôsob F na výrobu zlúčenín všeobecného vzorca II, kde R⁷ a R⁸ majú vyššie definované významy a X a Y znamenajú C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu a R⁹a R¹⁰ predstavujú COOR¹¹, zahrňuje nasledujúce kroky,

a) reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca XXXII,

R%OC.

I ΐή

OR (XXXil) kde R⁸ a R¹¹ majú významy definované vo vzorci II a Y predstavuje C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu, ktoré sú buď komerčne dostupné; dobre známe v literatúre alebo sú dostupné s použitím známych postupov, so zlúčeninou všeobecného vzorca XXI,

R⁷-X-L (XXI) •7 kde R má význam definovaný vo vzorci II, X znamená C(Z)₂ a L predstavuje vhodnú odstupujúcu skupinu, ako je Cl, Br, I alebo tozyl, v prítomnosti vhodnej zásady, ako je LDA alebo NaH, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca XXXIII,

R OOC

R

I

X.

V r°

OR*^f (XXX11I)

-29b) hydrolýzu zlúčeniny všeobecného vzorca XXXIII, napríklad reakciou s vodným NaOH alebo vodným TFA pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca II, kde R⁷ a R⁸ majú vyššie definované významy a X a Y znamenajú C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu a R⁹ a R¹⁰ predstavujú COOH.

Spôsob G

Spôsob G na výrobu zlúčenín všeobecného vzorca II, kde R⁷, R⁸, R¹¹ R¹³, X, Y a Z majú vyššie definované významy, R⁹ predstavuje COOR¹¹ a

R¹⁰ predstavuje skupinu ,oh

R¹ ,43 zahrňuje nasledujúce kroky

a) Zlúčeniny všeobecného vzorca XXXIII,

4í

R OOC

R

I

X.

yOR

O .4* (XXXHI) môžu reagovať so zlúčeninami všeobecného vzorca XXXIV,

HR¹³NOH (XXXIV) kde R¹³ má význam definovaný vo vzorci II, v prítomnosti vhodných reakčných činidiel, ako je DCC/DMAP, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca II, kde R⁷, R⁸, R¹¹, R¹³, X, Y a Z majú vyššie definované významy, R⁹ predstavuje COOR¹¹ a

-3010 predstavuje skupinu o

A_n-°h

Á#

Inhibítory trombínu

Inhibítory trombínu uvedené v tejto prihláške zahrňujú, ale nie sú obmedzené na, inhibítory trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou. Termín inhibítor trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou bude pre odborníkov v odbore zrejmý. Tento termín sa dá tiež chápať tak, že zahrňuje kompozíciu látky (napríklad chemickej zlúčeniny), ktorá inhibuje trombín do experimentálne detegovateľného stupňa v in vivo a/alebo v in vitro testoch, a ktorá má molekulovú hmotnosť menej ako približne 2 000, výhodne menej ako približne 1 000.

Výhodné inhibítory trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou zahrňujú inhibítory trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou na báze peptidov, na báze aminokyselín a/alebo na báze analógov peptidov,

Termín inhibítory trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou na báze peptidov, na báze aminokyselín a/alebo na báze analógov peptidov budú pre odborníka v odbore dobre známe a zahrňujú inhibítory trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou s jednou až štyrmi peptidovými väzbami a zahrňujú inhibítory, ako sú opísané v publikovanom prehľade Claessona v Blood Coagul. Fibrin. (1994) 5, 411, ako aj tie, ktoré sú uvedené v americkom patentovom dokumente US č. 4,346,078, v medzinárodných patentových prihláškach WO

93/11152,	WO	93/18060,	WO	93/05069,	WO	94/20467,	WO	94/29336,	WO
95/35309,	WO	95/23609,	WO	96/03374,	WO	96/06832,	WO	96/06849,	WO
96/25426,	WO	96/32110,	WO	97/01338,	WO	97/02284,	WO	97/15190,	WO
97/30708,	WO	97/40024,	WO	97/46577,	WO	98/06740,	WO	97/49404;	WO
97/11693,	WO	97/24135,	WO	97/47299,	WO	98/01422,	WO	98/57932,	WO
99/29664,	WO	98/06741,	WO	99/37668,	WO	99/37611,	WO	98/37075,	WO
99/00371,	WO	99/28297,	WO	99/29670,	WO	99/40072,	WO	99/54313,	WO

96/31504, WO 00/01704 a WO 00/08014; a v európskych patentových prihláškach 648 780, 468 231, 559 046, 641 779, 185 390, 526 877, 542 525, 195 212, 362

-31 002, 364 344, 530 167, 293 881, 686 642, 669 317, 601 459 a 623 596, pričom všetky tieto dokumenty sú tu týmto začlenené formou odkazu.

V predloženej prihláške deriváty inhibítorov trombínu zahrňujú chemické modifikácie, ako sú estery, prekurzory a metabolity, či už aktívne alebo neaktívne, a farmaceutický prijateľné soli a solváty, ako sú hydráty, ktorýchkoľvek z nich,, a solváty akýchkoľvek takýchto solí.

Výhodne inhibítory s nízkou molekulovou hmotnosťou na báze peptidov zahrňujú také inhibítory, ktoré sú známe pod spoločným názvom ako gatrany. Gatrany, ktoré možno predovšetkým spomenúť, zahrňujú HOOCCH₂-(R)Cha-PicNag-H (známy ako inogatran) a HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H (známy ako melagatran) (pozri medzinárodné patentové prihlášky WO 93/11152 a WO 94/29336, a tam uvedené zoznamy skratiek).

Medzinárodná patentová prihláška WO 97/23499 opisuje celý rad zlúčenín, o ktorých sa zistilo, že sú využiteľné ako prekurzory inhibítorov trombínu. Uvedené prekurzory majú všeobecný vzorec

R^aOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-R^b kde R^a predstavuje H, benzyl alebo Cvio-alkylovú skupinu, R^b (ktorý nahradzuje jeden z atómov vodíka v amidínovej jednotke Pab-H) predstavuje OH, OC(O)R^calebo C(O)OR^d, R^c predstavuje Ci-i7-alkylovú skupinu, fenylovú skupinu alebo 2naftylovú skupinu a R^d predstavuje C-t_i2-alkylovú skupinu, fenylovú skupinu, C1.3alkylfenylovú skupinu alebo 2-naftylovú skupinu. Výhodné zlúčeniny zahrňujú R^aOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH, kde R^a predstavuje benzyl alebo Cvio-alkylovú skupinu, napríklad etyl alebo izopropyl, predovšetkým výhodne EtOOC-CH2(R)CglAze-Pab-OH. Samotné aktívne inhibítory trombínu sú opísané v medzinárodnom patentovom dokumente WO 94/29336.

Farmaceutické prípravky

Predložený vynález sa týka farmaceutických kompozícií obsahujúcich inhibítor CPU a inhibítor trombínu, alebo ich farmaceutický prijateľných solí, ako účinných zložiek.

-32Výhodné kombinácie inhibítora CPU a inhibítora trombínu sú také, v ktorých inhibítor CPU je zlúčeninou všeobecného vzorca I alebo II a inhibítor trombínu je HOOC-CH₂-(R)Cgl“Aze-Pab-H, ich deriváty alebo prekurzory, predovšetkým EtOOC CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.

Vhodné prípravky na použitie s HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H, ich deriváty a prekurzory sú opísané v literatúre, napríklad ako je okrem iného opísané medzinárodných patentových prihláškach WO 94/29336, WO 96/14084, WO 96/16671, WO 97/23499, WO 97/39770, WO 97/45138, WO 98/16252, WO 99/27912 a WO 99/27913, pričom všetky tieto dokumenty sú tu týmto začlenené formou odkazu.

V predloženom vynáleze prípravok a/alebo kity súčastí môžu obsahovať dva alebo viac inhibítorov CPU v kombinácii s inhibítorom trombínu, dva alebo viac inhibítorov trombínu v kombinácii s inhibítorom CPU alebo ich akúkoľvek kombináciu. Dva alebo viac inhibítorov obsahujú kombinácie účinnej zložky a jedného z jej medziproduktov.

Pre klinické použitie sa inhibítor CPU a inhibítor trombínu formulujú do farmaceutického prípravku na orálny, intravenózny, subkutánny, tracheálny, bronchiálny, intranazálny, pulmonálny, transdermálny, bukálny, rektálny, parenterálny alebo niektorý ďalší spôsob podávania. Farmaceutický prípravok obsahuje inhibítory v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom a/alebo nosičom.

Celkové množstvo účinných zložiek je vhodne v rozsahu od približne 0,1 % (hmot./hmot.) do asi 95 % (hmot./hmot.) z prípravku, výhodne od 0,5 % do 50 % (hmot./hmot.) ad predovšetkým výhodne od 1 % do 25 % (hmot./hmot.).

Molárny pomer medzi inhibítorom CPU a inhibítorom trombínu môže byť v rozsahu od približne 1000 : 1 do asi 1 : 1000. Molárny pomer medzi inhibítorom CPU a inhibítorom trombínu je výhodne v rozsahu od 300 : 1 do 1 : 300 a predovšetkým výhodne od 50 : 1 do 1 : 50.

Pri príprave farmaceutických prípravkov podľa predloženého vynálezu sa účinné zložky môžu zmiešať s pevnými práškovými zložkami, ako je laktóza,

-33sacharóza, sorbitol, manitol, škrob, amylopektín, deriváty celulózy, želatína alebo ďalšie vhodné zložky, ako aj s dezintegračnými činidlami a mastiacimi činidlami, ako je stearát horečnatý, stearát vápenatý, stearylfumarát sodný a polyetylénglykolové vosky Zmesi sa potom môžu spracovať na granuly alebo lisovať do tabliet.

Účinné zložky sa môžu separátne vopred zmiešať s ďalšími neúčinnými zložkami predtým, ako zmiešajú za vzniku prípravku. Účinné zložky sa môžu tiež zmiešať navzájom predtým, ako sa zmiešajú s neúčinnými zložkami za vzniku prípravku.

Mäkké želatínové kapsule sa môžu pripraviť ako kapsule obsahujúce zmes účinných zložiek podľa predloženého vynálezu, rastlinný olej, tuk alebo ďalšie vhodné vehikulum pre mäkké želatínové kapsule. Tvrdé želatínové kapsule môžu obsahovať granule účinných zložiek. Tvrdé želatínové kapsule môžu tiež obsahovať účinné zložky v kombinácii spevnými práškovými zložkami, ako je laktóza, sacharóza, sorbitol, manitol, zemiakový škrob, kukuričný škrob, amylopektín, deriváty celulózy alebo želatína.

Dávkové jednotky na rektálne podávanie sa môžu pripraviť (i) vo forme čípkov, ktoré obsahujú účinnú zložku zmiešanú s neutrálnou tukovou bázou; (ii) vo forme želatínovej rektálnej kapsule, ktorá obsahuje účinnú zložku v zmesi s rastlinným olejom alebo ďalším vhodným vehikulom pre želatínové rektálne kapsule; (iii) vo forme hotových mikro-črevných nálevov alebo (iv) vo forme suchých prípravkov na mikro-črevné nálevy, ktoré sa rekonštitujú vo vhodnom rozpúšťadle bezprostredne pred podávaním.

Kvapalné prípravky sa môžu pripraviť vo forme sirupov alebo suspenzií, napríklad roztokov alebo suspenzií obsahujúcich účinné zložky a zvyšok pozostávajúci napríklad z cukru alebo cukorných alkoholov a zmesi etanolu, vody, glycerolu, propylénglykolu a polyetylénglykolu. Ak je to potrebné, takéto kvapalné prípravky môžu obsahovať farbiace činidlá, aromatické činidlá, konzervačné látky, sacharín a karboxymetylcelulózu alebo ďalšie zahusťovacie činidlá. Kvapalné prípravky sa môžu tiež pripraviť vo forme suchého prášku, ktorý sa pred použitím rekonštituje s vhodným rozpúšťadlom.

-34Roztoky na parenterálne podávanie sa môžu pripraviť ako roztok prípravku podľa vynálezu vo farmaceutický prijateľnom rozpúšťadle. Tieto roztoky môžu tiež obsahovať stabilizačné zložky, konzervačné látky a/alebo pufrovacie činidlá. Roztoky na parenterálne podávanie sa môžu tiež pripraviť ako uché prípravky, ktoré sa pred použitím rekonštitujú s vhodným rozpúšťadlom.

I

Dávka zlúčeniny, ktorá sa má podávať, bude závisieť od príslušnej indikácie, od veku, hmotnosti a pohlavia pacienta a môže ju určiť ošetrujúci lekár. Dávka sa výhodne bude pohybovať v rozsahu od 0,01 mg/kg do 10 mg/kg.

Typická denná dávka účinných zlúčenín varíruje v širokom rozpätí a bude závisieť od rozličných faktorov, ako je príslušná indikácia, spôsob podávania, vek, hmotnosť a pohlavie pacienta a môže ju určiť ošetrujúci lekár. Vo všeobecnosti, orálne a parenterálne dávky sa budú pohybovať v rozpätí od 0,1 do 1 000 mg celkových účinných zložiek na deň.

V predloženom vynáleze terapeuticky účinné celkové množstvo sa týka celkového množstva inhibítora CPU a inhibítora trombínu, ktorý, ak sa podáva v kombinácii, poskytuje terapeutický účinok, napriek tomu, že každé množstvo, ak sa podáva oddelene, môže znamenať menej ako terapeuticky účinné množstvo.

Lekárske a farmaceutické použitie

Predložený vynález poskytuje tiež prípravky a kity súčastí na použitie v lekárskej terapii; použite prípravkov podľa predloženého vynálezu na výrobu liekov na použitie pri liečbe stavu, pri ktorom sa je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia trombínu a/alebo inhibícia CPU, a spôsoby lekárskeho ošetrenia alebo zahrňuje podávanie terapeuticky účinného množstva inhibítora CPU a inhibítora trombínu predloženého vynálezu pacientovi, ktorý trpí alebo je náchylný na stav, pri ktorom sa je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia trombínu a/alebo inhibícia CPU.

Inhibítor CPU a inhibítor trombínu sa môžu podávať postupne, oddelene a/alebo súčasne. Navyše, inhibítor CPU sa môže podávať pred podávaním inhibítora trombínu, alebo naopak.

-35Termín „lekárska terapia“ ako sa tu používa, je mienený tak, že zahrňuje profylaktické, diagnostické a terapeutické režimy uskutočňované in vivo alebo ex vivo na ľuďoch alebo na iných cicavcoch.

Prípravky podľa predloženého vynálezu obsahujú inhibítor CPU a inhibítor trombínu, buď priamo ich samotné alebo, v prípade prekurzorov, po podaní. Dá sa ' I ¹ teda očakávať, že prípravky podľa predloženého vynálezu budú sa využívať pri takých stavoch, pri ktorých je užitočná inhibícia CPU a/alebo inhibícia trombínu, ako je liečenie trombózy a nadmerná zrážanlivosť v krvi a v tkanivách cicavcov, vrátane človeka.

Termín stav, pri ktorom je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia trombínu bude pre odborníkov v odbore zrejmý vtom, že zahrňuje nasledovné: liečenie a/alebo profylaxiu trombózy a nadmernú zrážanlivosť v krvi a v tkanivách zvierat, vrátane človeka. Je známe, že nadmerná zrážanlivosť môže viesť ku tromboembolickým ochoreniam. Stavy spojené s nadmernou zrážanlivosťou a tromboembolickými ochoreniami, ktoré možno uviesť, zahrňujú zdedenú alebo získanú rezistenciu aktivovaného proteínu C, ako je faktor V-mutácie (faktor V Leiden), a zdedenú alebo získanú nedostatočnosť antitrombínu III, proteínu C, proteínu S, heparínového kofaktora II. Ďalšie stavy, o ktorých je známe, že sú spojené s nadmernou zrážanlivosťou a tromboembolickým ochorením, zahrňujú cirkuláciu antifosfolipidových protilátok (Ĺupus anticoagulanf), homocysteinémiu, heparínom vyvolanú trombocytopéniu a poruchy fibrinolýzy.

Liečenie stavov, pri ktorých sa vyskytuje nežiaduci nadbytok trombínu bez príznakov nadmernej zrážanlivosti, napríklad pri neurodegeneratívnych ochoreniach, ako je Alzheimerova choroba.

Príslušné chorobné stavy, ktoré možno spomenúť, zahrňujú terapeutické a/alebo profylaktické liečenie žilovej trombózy (napríklad DVT) a pulmonálnej embólie, arteriálnej trombózy (napríklad pri infarkte myokardu, nestabilnej angíne, mŕtvici na základe trombózy a periferálnej arteriálnej trombózy) a systémovej embólie zvyčajne z predsiene počas arteriálnej fibrilácie alebo z ľavej komory po transmurálnom infarkte myokardu, alebo spôsobené kongestívnym zlyhaním srdca; profylaxiu re-oklúzie (t.j. trombózy) po trombolýze, perkutánnej trans-luminálnej

-36angioplastii (PTA) a koronárnych bypassových operáciách; prevenciu re-trombózy po mikrochirurgickom zákroku a všeobecne po vaskulárnom chirurgickom zákroku.

Ďalšie indikácie zahrňujú terapeutické a/alebo profylaktické liečenie roztrúsenej intravaskulárnej koagulácie spôsobenej baktériou, viacnásobnej traumy, intoxikácie alebo niektorého iného ústrojenstva; antikoagulačnú liečbu, ak krv je v kontakte s cudzími povrchmi v tele, ako sú vaskulárne štepy, vaskulárne stenty, vaskulárne katétre, mechanické a biologické protetické chlopne alebo akékoľvek ďalšie lekárske zariadenie; a antikoagulačné liečenie, ak krv je v kontakte s lekárskymi zariadeniami mimo tela, ako počas kardiovaskulárneho chirurgického zákroku pri použití stroja srdce-pľúca alebo pri hemodialýze; terapeutické a/alebo profylaktické liečenie idiopatického syndrómu a syndrómu respiračnej nedostatočnosti dospelých, pulmonálnej fibrózy po liečbe ožarovaním alebo po chemoterapii, septického šoku, septikémie, zápalových odoziev, ktoré zahrňujú, ale nie sú obmedzené na, edém, akútnu alebo chronickú aterosklerózu, ako je koronárne arteriálne ochorenie, cerebrálne arteriálne ochorenie, periferálne arteriálne ochorenie, reperfúzne poškodenie a restenóza po perkutánnej transluminálnej angioplastii (PTA).

Príklady uskutočnenia vynálezu

Nasledujúce príklady slúžia na ilustráciu, ale v žiadnom prípade neobmedzujú rozsah predloženého vynálezu.

Materiály a metódy

Materiály

Batroxobin No. 520 CRY (American Diagnostica Inc., Greenwich, CT, USA) sa udržiaval pri teplote 8 °C pričom sa lyofilizoval a rozpúšťal vo fyziologickom roztoku na koncentráciu 10 BU/ml. V rozpätí 5 dní sa použil v experimentoch. Zostávajúce liečivo sa vymrazilo a udržiavalo sa pri teplote 20 °C počas maximálne 30 dní.

Endotoxín L-3129 (Sigma, St. Louis, MO, USA) sa rozpustil vo fyziologickom roztoku na koncentráciu 50 pg/ml. Pre každý pokus sa pripravil čerstvý roztok.

-37¹²⁵l-značený ľudský fibrinogén (Amersharn, Little Chalfont, Buck., UK) sa skladoval pri teplote 8 °C za lyofilizovania. Po rozpustení v zmesi fyziologický roztok/destilovaná voda (80/20 obj./obj.) na zásobný roztok s približne 0,8 MBq/ml (20 pCi/ml) sa rozdelil na alikvotné podiely (jeden pre každý pokus), rýchle sa vymrazil a skladoval sa pri teplote -20 °C. Použil sa v experimentoch v rozpätí 14 daní po dátume prípravy. .

Inactin, sodná soľ tiobutabarbitalu (Research Biochemicals International. Natick, USA) sa rozpustil v zmesi fyziologický roztok/destilovaná voda. (50/50 obj./obj.) na koncentráciu 50 mg/ml.

Inhibítor trombínu inogatran sa rozpustil v 40 % (hmot./hmot.) cyklodextrínu (HPpCD) na koncentráciu 5 mg/ml a skladoval sa pri teplote -20 °C. Ďalej sa zriedil so 40 % cykodextrínu, predtým ako sa použil v rozličných experimentoch. V štúdiách sa liečivo podávalo subkutánne.

Inhibítor trombínu melagatran sa rozpustil vo fyziologickom roztoku.

Inhibítor CPU MERGETPA a zlúčenina A sa rozpustili v deoxygenovanom fyziologickom roztoku. Fyziologický roztok sa deoxygenoval pomocou ultrazvuku počas 20 minút a následne zavádzaním dusíka počas ďalších 20 minút. Roztoky sa pre každý pokus pripravovali čerstvé. Inhibítor CPU sa podával potkanom pomocou intravenóznej infúzie počas 5 minút.

Zvieratá

V týchto pokusoch sa použili samce potkanov kmeňa Sprague Dawley (Charles River, Švédsko) s telesnou hmotnosťou 325 až 425 g. Zvieratá sa nechali adaptovať vAstraZeneca R & D, Mólndal, Švédsko počas jedného týždňa pred použitím.

Príprava zvierat

Anestéza sa vyvolala a udržiavala sa pomocou intraperitoneálne podaného inactinu 100 mg/kg,.

-38Dva katétre sa vložili do ľavej jugulárnej žily, jeden na podávanie ¹²⁵lfibrinogénu a batroxobinu a druhý na podávanie endotoxínu a inhibítora CPU alebo ich zodpovedajúcich pomocných látok. Tretí katéter sa vložil do krčnej artérie na odoberanie vzoriek krvi a meranie stredného arteriálneho krvného tlaku a tepovej frekvencie. Aby sa zabránilo tvorbe krvných zrazenín varteriálnom katétri, udržiavala sa počas experimentu mierna infúzia fyziologického roztoku (približne 1,0 ml/kg.hod). Potkany sa tracheotomizovali, aby sa uľahčilo spontánne dýchanie. Telesná teplota sa monitorovala a udržiavala sa na 38 °C pomocou externého zahrievania.

Experimentálny protokol

Zvieratám sa intravenóznou injekciou na začiatku experimentu podal endotoxín (50 pg/kg). O dve hodiny neskôr sa injekčné subkutánne podal inhibítor trombínu alebo jeho pomocná látka a o ďalších 15 minút neskôr sa pomocou intravenóznej injekcie podal ¹²⁵l-fibrinogén (0,04 MBq). Po 5 minútach sa začala infúzia inhibítora CPU alebo jeho pomocnej látky, ktorá trvala počas päť minút. Po 5 minútach sa intravenózne počas jednej minúty podal injekčné bolus batroxobinu (10BU/kg).

Vzorky krvi na stanovenie obsah ¹²⁵l sa odoberali vo všetkých experimentoch bezprostredne pred a 5, 20 a 30 minút po podaní batroxobinu. Na konci experimentu sa pľúca resekovali, tkanivo sa jemne premylo vo fyziologickom roztoku a potom sa vysalo a odvážilo. Stanovil sa obsah I vo vzorkách tkaniva a krvi, s použitím čítacieho zariadenia Wallac 1282 Compugamma. Koncentrácia ¹²⁵l v plazme a v pľúcach sa vyjadrila ako percento rádioaktivity v referenčnej vzorke arteriálnej krvi, ktorá sa odobrala bezprostredne pred podaním injekcie batroxobinu.

Príklad 1

Inhibítor CPU mergetpa (DL-2-merkaptometyl-3-guanidinoetyltiopropánová kyselina), známy napríklad z Biochimica & Biophysica Acta 1034 (1990) 86 - 92 sa použil v kombinácii s inhibítorom trombínu, inogatranom.

-39Výsledky experimentov sú zrejmé z tabuľky 1. Výsledky sú vyjadrené ako zostávajúci fibrín v pľúcach po ošetrení, t.j. 100 % znamená žiadny účinok. Písmeno n označuje počet experimentov (potkanov).

-40Tabuľka I

Účinok na depozíciu fibrínu v pľúcach u anestetizovaných potkanov v experimentoch s MERGETPA a/alebo inogatranom

Inhibítor CPU	Inhibítor trombínu	Inhibítor CPU +
inhibítor	trombínu
Dávka (pmol/kg)	Zostávajúci fibrín po ošetrení (%±SD)	Dávka (pmol/kg)	Zostávajúci fibrín po ošetrení (%±SD)	Dávka (pmol/kg)	Zostávajúci fibrín po ošetrení (%±SD)
2,1	—	0,6	—	2,1+0,6	100 ±23,9 n = 6
4,2	—	1,2	—	4,2 + 1,2	62 ±21,9 n = 6
8,4	90 ±18,1 n = 6	2,3	94 ± 20,2 n = 6	8,4 + 2,3	26 ±13,3 n = 6
21,1	37 ± 19,3 n = 6	3,4	72 ±23,6 n = 6	—
33,7	23 ±17,3 n = 6	5,7	41 ±20,3 n = 6	—	—
--	—	17,2	39 ±15,9 n = 6	—	—

Z tabuľky I je zrejmé, že podávanie kombinácie inhibítora CPU a inhibítora trombínu je lepšie ako podávanie buď jedného alebo druhého inhibítora, pokiaľ ide o zostávajúci fibrín po ošetrení.

Príklad 2

Inhibítor CPU (kyselina 3-(6-aminopyridin-3-yl)-2-merkaptometyl-propánová) (zlúčenina A) sa použila v kombinácii s inhibítorom trombínu, melagatran.

Výsledky experimentov sú zrejmé z tabuľky ll. Výsledky sú vyjadrené ako zostávajúci fibrín v pľúcach po ošetrení, t.j. 100 % sa rovná žiadnemu účinku, n znamená počet experimentov (potkanov).

-41 Tabuľka II

Účinok na depozíciu fibrínu v pľúcach u anestetizovaných potkanov v experimentoch so zlúčeninou A a/alebo melagatranom

Inhibítor CPU	Inhibítor trombínu I	Inhibítor CPU +
inhibítor	trombínu
Dávka (pmol/kg)	Zostávajúci fibrín po ošetrení (%±SD)	Dávka (pmol/kg)	Zostávajúci fibrín po ošetrení (%+SD)	Dávka (pmol/kg)	Zostávajúci fibrín po ošetrení (%±SD)
0,20	100± 25,8 n = 8	0,23	97 ±12,4 n = 6	0,20 + 0,23	75 ± 35,2 n = 5
0,28	88 ± 23,2 n = 4	0,35	77 ±22,4 n = 4	0,28 + 0,35	19 ± 13,9 n = 8
0,4	87 ± 50,6 n = 6	0,58	62 ±17,0 n = 2	—	—
2,0	49 ± 30,0 n = 7	1,75	31 ±13,3 n = 4	—	—
4,0	15 ±9,3 n = 4	3,5	55 ±21,7 n = 4	—	—
20,0	7 ±1,4 n = 2	—	—	—	—

Z tabuľky II je zrejmé, že podávanie kombinácie inhibítora CPU a inhibítora trombínu je lepšie ako podávanie buď jedného alebo druhého inhibítora, pokiaľ ide o zostávajúci fibrín po ošetrení.

Príklad 3

Inhibítor CPU (kyselina 3-(6-aminopyridin-3-yl)-2-merkaptometyl-propánová) (zlúčenina A) sa použila v kombinácii s inhibítorom trombínu, rnelagatran

Výsledky experimentov sú zrejmé z tabuľky III Výsledky sú vyjadrené ako zostávajúci fibrín v pľúcach po ošetrení, t.j. 100 % sa rovná žiadnemu účinku, n znamená počet experimentov (potkanov).

-42Skúška synergického účinku na depozíciu fibrínu v pľúcach u anestetizovaných potkanov v experimentoch so zlúčeninou A a melagatranom

Tabuľka III

Inhibítor CPU (zlúčenina A)	Inhibítor trombínu (melagatran)	Inhibítor CPU +
inhibítor	trombínu
Dávka (pmol/kg)	Zostávajúci fibrín po ošetrení (%±SD)	Dávka (pmol/kg)	Zostávajúci fibrín po ošetrení (%±SD)	Dávka (pmol/kg)	Zostávajúci fibrín po ošetrení (%±SD)
0,20	97 ±24,1 n = 10	0,18	110 ± 15,2 n = 3	—	--
0,20	97 + 24,1 n = 10	0,23	98 ± 11,5 n = 7	0,20 + 0,23	70 ± 33,8 n = 6
0,20	97 ±24,1 n= 10	0,30	87 ± 27,6 n = 3	0,20 + 0,30	51 ±33,3 n = 5
0,20	97 ±24,1 n = 10	0,35	77 ±22,4 n = 4	0,20 + 0,35	35 ± 24,3 n = 5
0,20	97 ±24,1 n = 10	0,70	—	0,20 + 0,70	18 ±12,7 n = 2
0,28	81 ± 24,5 n = 5	0,18	110 ± 15,2 n = 3	0,28 + 0,18	71 ±33,2 n = 5
0,28	81 ±24,5 n = 5	0,23	98 ± 11,5 n = 7	0,28 + 0,23	42 ± 28,3 n = 5
0,28	81 ±24,5 n = 5	0,30	87 ± 27,6 n = 3	—
0,28	81 ±24,5 n = 5	0,35	77 ± 22,4 n = 4	0,28 + 0,35	20 ±13,3 n = 9
0,28	81 ± 24,5 n = 5	0,42	—	0,28 + 0,42	9 ±3,5 n = 2

Pre každú zo štyroch rozličných kombinácií dávok, samotný inhibítor CPU, samotný inhibítor trombínu, inhibítor, trombinu spolu s inhibítorom CPU v dávkach 0,2 a 0,28 pmol/kg, zostavili sa separátne E-max modely. Modely sa uspôsobili na logaritmickú stupnicu, pričom poskytli stanovenie strednej účinnej dávky, t.j. dávky, kedy polovica populácie má účinok 50 %. Na obrázku 1 graficky znázornené intervaly spoľahlivosti týchto ED₅o hodnôt.

Pri neprítomnosti synergického účinku ED₅₀ pre kombináciu inhibítora CPU a inhibítora trombínu by ležali sa čiare spájajúcej hodnoty ED₅o pre každé liečivo podávané samotné (pozri obr. 1). Aby sa stanovil synergický účinok, všetky štyri kombinácie dávok sa zostavili na E-max model, pričom sa sformulovalo ED50 pre

-43inhibítor trombínu spolu s inhibítorom CPU pri dávkach 0,2 a 0,28 μιτιοΙ/kg, s použitím parametra ?, ako je uvedené na obrázku. Parameter ? sa určil na 0,52 s intervalom spoľahlivosti 95 % [0,116, 0,934], a bol štatisticky signifikantný od 0, p <0,001.

Skratky

Ac = acetát

AIBN = α,α'-azoizobutyronitril

Aze = (S)-azetidín-2-karboxylová kyselina

Bn = benzyl

Bu = butyl

BU = batroxobinové jednotky, definované spoločnosťou American Diagnostica Inc., USA)

Bz = benzoyl

Cha = β-cyklohexylalanín

Cgl = (S)-cyklohexylglycín

DCC = dicyklohexylkarbodiimid

DIAD = diizopropylester kyseliny azodikarboxylovej

DIPEA = diizopropyletyamín

DMAP = Ν,Ν-dimetylaminopyridín

EDC = 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid

EtOH = etanol

HMDS = hexametyldisilazan

HOAc = kyselina octová

HOBt = 1-hydroxybenzotriazol

HP3CD = hydroxypropyl-p-cyklodextrín

KHMDS = potasium-bis(trimetylsilyl)amid

LDA = lítiumdiizopropylamid

Me = metyl

-44MeOH = metanol

Nag-H = noragmatin

Pab-H = 1-amidino-4-aminometylbenzén

Ph = fenyl

Pic = pipekolínová kyselina

PMB = 4-metoxybenzyl

PyBOP = (benzotriazol-l-yloxy)tripyrolidinofosfónium hexafluórfosfát

SD = štandardná odchýlka

TEA = trietylamín

TFA = trifluóroctová kyselina

THF = tetrahydrofurán

TMSCN = trimetylsilylkyanid

Tos(yl) = toluén-4-sulfonyl

-45?P ý 5^290?

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Farmaceutický prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje (i) inhibítor karboxypeptidázy U alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ, a (ii) inhibítor trombínu alebo jeho derivát v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom.
2. Farmaceutický prípravok podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom karboxypeptidázy U je zlúčenina všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo jej solvát, alebo solvát takejto soli, kde

R predstavuje

Ci-C₆-alkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden heteroatóm zvolený z S alebo O, a substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými

-46skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

alebo arylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina,

R² predstavuje atóm vodíka, acylovú skupinu, acylaminoskupinu, alkylovú skupinu, alkylkarbamoylovú skupinu, alkyltioskupinu, alkoxyskupinu, aroylovú skupinu, aroylaminoskupinu, aryloxyskupinu, aryltioskupinu, amidinoskupinu, aminoskupinu, arylovú skupinu, karbamoylovú skupinu, karboxylovú skupinu, kyanoskupinu, cykloalkylovú skupinu, formylovú skupinu, guanidinoskupinu, halogén, heterocyklylovú skupinu, hydroxylovú skupinu, oxoskupinu, nitroskupinu, tiolovú skupinu, skupinu Z2N-CO-O-, ZO-CO-NZ- alebo Z₂N-CO-NZ-,

R³ predstavuje COOR⁵, SO(OR⁵), SO3R⁵, P=O(OR⁵)2, B(OR⁵)2,

P=OR⁵(OR⁵) alebo tetrazol, alebo akýkoľvek izostér karboxylovej kyseliny,

R⁴ predstavuje SH, S-CO-CrC₆-alkylovú skupinu alebo S-CO-arylovú skupinu,

R⁵ predstavuje atóm vodíka, Ci-C6-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

R⁶ predstavuje atóm vodíka alebo Ci-C6-alkylovú skupinu,

X predstavuje O, S, SO, SO₂, C(Z)₂, N(Z), NR⁶SO₂, SO₂NR⁶, NR⁶CO alebo CONR⁶,

Y predstavuje C(Z)_2l

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka, Ci-C6-alkýlovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu alebo heterocyklylovú skupinu.
3. Farmaceutický prípravok podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom karboxypeptidázy U je zlúčenina všeobecného vzorca II

-47*

R

I f ^Xx/R /s?

Ŕ* (W alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo jej solvát, alebo solvát takejto soli, pričom

R⁷ predstavuje

C-i-C₆-alkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

heterocykiylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden heteroatóm zvolený z S alebo O, a substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

alebo arylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina,

R⁸ predstavuje atóm vodíka, acylovú skupinu, acylaminoskupinu, alkylovú skupinu, alkylkarbamoylovú skupinu, alkyltioskupinu, alkoxyskupinu, aroylovú skupinu, aroylaminoskupinu, aryloxylovú skupinu, aryltioskupinu, amidinoskupinu, aminoskupinu, arylovú skupinu, karbamoylovú skupinu, karboxylovú skupinu, kyanoskupinu, cykloalkylovú skupinu, formylovú skupinu, guanidinoskupinu, halogén,

-48heterocyklylovú skupinu, hydroxylovú skupinu, oxoskupinu, nitroskupinu, tiolovú skupinu, skupinu Z₂N-CO-O-, ZO-CO-NZ- alebo Z₂N-CO-NZ-,

R⁹ predstavuje COOR¹¹, SO(O¹¹), SO3R¹¹, P=O(OR¹¹)2, B(OR¹¹)₂,

P=OR¹¹(OR¹¹) alebo tetrazol alebo akýkoľvek izostér karboxylovej kyseliny,

R¹⁰ predstavuje skupinu alebo skupinu

A'^0H alebo skupinu

R¹¹ predstavuje atóm vodíka, C^Cg-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

R¹² predstavuje C_rC₆-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, heterocyklylovú skupinu alebo prípadne N-substituovanú H₂NC(Z)-CONH-C(Z)- alebo H₂N-C(Z)- skupinu,

R¹³ predstavuje atóm vodíka alebo Ci-C₆-alkylovú skupinu,

X predstavuje O, S, SO, SO₂, C(Z)₂, N(Z), NR¹³SO₂, SO₂NR¹³, NR¹³CO alebo CONR¹³,

Y predstavuje O, N(Z), S, C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu, .

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka, CrCe-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu alebo heterocyklylovú skupinu, pod podmienkou, že ak X predstavuje O, S, SO, SO₂, N(Z), NR⁷SO2, SO2NR⁷alebo NR⁷CO, potom Y znamená C(Z)2 alebo jednoduchú väzbu.
4. Farmaceutický prípravok podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom trombínu je inhibítor trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou.

-495. Farmaceutický prípravok podľa nároku 4, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou je inhibítor trombínu na báze peptidov, na báze aminokyselín a/alebo na báze analógov peptidov, s jednou až štyrmi peptidovými väzbami.
6. Farmaceutický prípravok podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou je HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H alebo jeho prekurzor.
7. Farmaceutický prípravok podľa nároku 6, vyznačujúci sa tým, že prekurzorom je EtOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.
8. Farmaceutický prípravok podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, vyznačujúci sa tým, že molárny pomer medzi inhibítorom karboxypeptidázy U a inhibítorom trombínu je v rozsahu od približne 1000 : 1 do asi 1 : 1000, výhodne od 50 : 1 do 1 : 50.
9. Kit súčastí, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje (í) nádobku obsahujúcu inhibítor karboxypeptidázy U, alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ;

(ii) nádobku obsahujúcu inhibítor trombínu, alebo jeho derivát, a inštrukcie na postupné, oddelené alebo súčasné podávanie inhibítorov (i) a (ii) pacientovi, ktorý to potrebuje.
10. Kit súčastí podľa nároku 9, vyznačujúci sa tým, že inhibítoróm karboxypeptidázy U je zlúčenina definovaná v nároku 2 alebo 3.
11. Kit súčastí podľa nárokov 9 alebo 10, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom trombínu je inhibítor trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou.
12. Kit súčastí podľa nároku 11, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou je inhibítor trombínu na báze peptidov, na báze aminokyselín a/alebo na báze analógov peptidov, s jednou až štyrmi peptidovými väzbami.

-5013. Kit súčastí podľa nároku 12, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou je HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H alebo jeho prekurzor.
14. Kit súčastí podľa nároku 13, vyznačujúci sa tým, že prekurzorom je EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.
15. Kit súčastí podľa ktoréhokoľvek z nárokov 9 až 14, vyznačujúci sa tým, že molárny pomer medzi inhibítorom karboxypeptidázy U a inhibítorom trombínu je v rozsahu od približne 1000 : 1 do asi 1 : 1000, výhodne od 50 : 1 do 1 : 50.
16. Kit súčastí, vyznačujúci sa tým, že obsahuje (i) farmaceutický prípravok obsahujúci inhibítor karboxypeptidázy U, alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ, v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom; a (ii) farmaceutický prípravok obsahujúci inhibítor trombínu, alebo jeho derivát, v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom;

pričom každý z inhibítorov (i) a (ii) sa poskytuje vo forme, ktorá je vhodná na podávanie spoločne s druhou formou.
17. Kit súčastí podľa nároku 16, vyznačujúci sa tým, že inhibítory (i) a (ii) sú vhodné na postupné, oddelené alebo súčasné podávanie.
18. Kit súčastí podľa nároku 16 alebo 17, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom karboxypeptidázy U je zlúčenina definovaná v nároku 2 alebo 3.
19. Kit súčastí podľa ktoréhokoľvek z nárokov 16 až 18, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom trombínu je inhibítor trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou.
20. Kit súčastí podľa nároku 19, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou je inhibítor trombínu na báze peptidov, na báze aminokyselín a/alebo na báze analógov peptidov, s jednou až štyrmi peptidovým i väzbami.

-51
21. Kit súčastí podľa nároku 20, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou je HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H alebo jeho prekurzor.
22. Kit súčastí podľa nároku 21, vyznačujúci sa tým, že prekurzorom je EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.

I ‘
23. Kit súčastí podľa ktoréhokoľvek z nárokov 16 až 22, vyznačujúci sa tým, že molárny pomer medzi inhibítorom karboxypeptidázy U a inhibítorom trombínu je v rozsahu od približne 1000 :1 do asi 1 : 1000, výhodne od 50 : 1 do 1 ; 50.
24. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 8 alebo kit súčastí podľa ktoréhokoľvek z nárokov 9 až 23, na použitie v lekárskej terapii.
25. Spôsob liečenia pacienta trpiaceho alebo náchylného na stav, pri ktorom je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia trombínu a/alebo inhibícia karboxypeptidázy U, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje podávanie pacientovi terapeuticky účinného celkového množstva (i) inhibitora karboxypeptidázy U, alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli, v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom, v konjunkcii s (ii) inhibítorom trombínu, alebo s jeho derivátom, v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom.
26. Spôsob podľa nároku 25, vyznačujúci sa tým, že podávanie inhibítorov (i) a (ii) je postupné, oddelené alebo súčasné.
27. Spôsob podľa niektorého z nárokov 25 a 26, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom karboxypeptidázy U je zlúčenina definovaná v nároku 2 alebo 3.
28. Spôsob podľa ktoréhokoľvek z nárokov 25 až 27, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom trombínu je inhibítor trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou.
29. Spôsob podľa nároku 28, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou je inhibítor trombínu na báze peptidov, na báze

-52aminokyselín a/alebo na báze analógov peptidov, s jednou až štyrmi peptidovými väzbami.
30. Spôsob podľa nároku 29, vyznačujúci sa tým, že inhibítorom trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou je HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H alebo jeho prekurzor.
31. Spôsob podľa nároku 30, vyznačujúci sa tým, že prekurzorom je EtOOC-CH₂(R)Cgl-Aze-Pab-OH.
32. Spôsob podľa ktoréhokoľvek z nárokov 25 až 31, vyznačujúci sa tým, že molárny pomer medzi inhibítorom karboxypeptidázy U a inhibítorom trombínu je v rozsahu od približne 1000 :1 do asi 1 : 1000, výhodne od 50 : 1 do 1 : 50.
33. Spôsob liečenia pacienta trpiaceho alebo náchylného na stav, pri ktorom je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia trombínu a/alebo inhibícia karboxypeptidázy U, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje podávanie pacientovi prípravku definovaného v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 8.
34. Použitie prípravku podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 8, na výrobu liečiva na liečenie stavu, pri ktorom je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia trombínu a/alebo inhibícia karboxypeptidázy U.
35. Použitie podľa nároku 34, kde inhibítorom karboxypeptidázy U je zlúčenina definovaná v nároku 2 alebo 3.
36. Použitie podľa nároku 34 alebo 35, kde inhibítorom trombínu je inhibítor trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou.
37. Použitie podľa nároku 36, kde inhibítorom trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou je inhibítor trombínu na báze peptidov, na báze aminokyselín a/alebo na báze analógov peptidov, s jednou až štyrmi peptidovými väzbami.
38. Použitie podľa nároku 37, kde inhibítorom trombínu s nízkou molekulovou hmotnosťou je HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H alebo jeho prekurzor.
39. Použitie podľa nároku 38, kde prekurzorom je EtOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.

-5340. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 34 až 39, kde molárny pomer medzi inhibítorom karboxypeptidázy U a inhibítorom trombínu je v rozsahu od približne 1000 : 1 do asi 1 :1000, výhodne od 50 :1 do 1 : 50.