RU2654705C2 - Глютенозависимые расстройства - Google Patents
Глютенозависимые расстройства Download PDFInfo
- Publication number
- RU2654705C2 RU2654705C2 RU2014150934A RU2014150934A RU2654705C2 RU 2654705 C2 RU2654705 C2 RU 2654705C2 RU 2014150934 A RU2014150934 A RU 2014150934A RU 2014150934 A RU2014150934 A RU 2014150934A RU 2654705 C2 RU2654705 C2 RU 2654705C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- paracasei cba
- cells
- gluten
- cba
- gliadin peptide
- Prior art date
Links
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 title claims abstract description 97
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 title claims abstract description 95
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 claims abstract description 247
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 148
- 108010061711 Gliadin Proteins 0.000 claims abstract description 95
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 91
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 65
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 41
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims abstract description 37
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 claims abstract description 30
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 21
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims abstract description 19
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims abstract description 18
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 claims abstract description 16
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 claims abstract description 16
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims abstract 4
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 claims description 61
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 40
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 38
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 34
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 16
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims description 15
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 11
- 235000006171 gluten free diet Nutrition 0.000 claims description 9
- 235000020884 gluten-free diet Nutrition 0.000 claims description 9
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 claims description 7
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 claims description 7
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 claims description 7
- 230000036512 infertility Effects 0.000 claims description 7
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 claims description 7
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 claims description 7
- 206010019663 Hepatic failure Diseases 0.000 claims description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 6
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 claims description 6
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 6
- 208000007903 liver failure Diseases 0.000 claims description 6
- 231100000835 liver failure Toxicity 0.000 claims description 6
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 claims description 6
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 claims description 6
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 claims description 5
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 claims description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 5
- 230000037213 diet Effects 0.000 claims description 5
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 230000005945 translocation Effects 0.000 claims description 5
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 claims description 5
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 4
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 claims description 4
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 claims description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 4
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 claims 4
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 claims 4
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 claims 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 claims 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 abstract description 87
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 84
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 60
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 194
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 91
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 45
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 31
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 30
- 239000000047 product Substances 0.000 description 25
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 21
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 19
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 19
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 19
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 17
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 17
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 17
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 15
- -1 for example Proteins 0.000 description 15
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 13
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 13
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 13
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 13
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 13
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 12
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 12
- 206010003591 Ataxia Diseases 0.000 description 11
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 11
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 11
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 10
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 10
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 10
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 10
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 10
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 10
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 9
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 9
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 9
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 9
- 230000001159 endocytotic effect Effects 0.000 description 8
- 235000011868 grain product Nutrition 0.000 description 8
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 7
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 7
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 6
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 6
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 6
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 6
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 6
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 6
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 6
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 6
- HZWWPUTXBJEENE-UHFFFAOYSA-N 5-amino-2-[[1-[5-amino-2-[[1-[2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C1CCC(C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O)N1C(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 HZWWPUTXBJEENE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 5
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 5
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 5
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 5
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 5
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 5
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 5
- 208000024330 bloating Diseases 0.000 description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 5
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 5
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 5
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 5
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 5
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 4
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 4
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 108010047762 HLA-DQ8 antigen Proteins 0.000 description 4
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 4
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 235000008452 baby food Nutrition 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010050792 glutenin Proteins 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 4
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 4
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 4
- 230000034701 macropinocytosis Effects 0.000 description 4
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 4
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 235000009854 Cucurbita moschata Nutrition 0.000 description 3
- 206010012559 Developmental delay Diseases 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000015710 Iron-Deficiency Anemia Diseases 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 206010041969 Steatorrhoea Diseases 0.000 description 3
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 3
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 3
- 235000021434 dietary agent Nutrition 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 229940066758 endopeptidases Drugs 0.000 description 3
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 235000013575 mashed potatoes Nutrition 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 229930010796 primary metabolite Natural products 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 235000015067 sauces Nutrition 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 208000001162 steatorrhea Diseases 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N Acetoin Chemical compound CC(O)C(C)=O ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000291564 Allium cepa Species 0.000 description 2
- 235000002732 Allium cepa var. cepa Nutrition 0.000 description 2
- 108010062877 Bacteriocins Proteins 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 2
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 2
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 2
- 235000011299 Brassica oleracea var botrytis Nutrition 0.000 description 2
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 2
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 2
- 240000003259 Brassica oleracea var. botrytis Species 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000045232 Canavalia ensiformis Species 0.000 description 2
- 235000009849 Cucumis sativus Nutrition 0.000 description 2
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 2
- 240000001980 Cucurbita pepo Species 0.000 description 2
- 241000219130 Cucurbita pepo subsp. pepo Species 0.000 description 2
- 235000003954 Cucurbita pepo var melopepo Nutrition 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 2
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 2
- 239000004278 EU approved seasoning Substances 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 241000392810 Inbio Species 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 2
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 2
- 208000002033 Myoclonus Diseases 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 2
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 2
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000020221 Short stature Diseases 0.000 description 2
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 2
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 2
- 241000736131 Sphingomonas Species 0.000 description 2
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 2
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 2
- 108060008539 Transglutaminase Proteins 0.000 description 2
- 244000078534 Vaccinium myrtillus Species 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N adipic acid Chemical compound OC(=O)CCCCC(O)=O WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 230000006395 clathrin-mediated endocytosis Effects 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 2
- 230000010013 cytotoxic mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 2
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 244000013123 dwarf bean Species 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 239000012055 enteric layer Substances 0.000 description 2
- 210000001842 enterocyte Anatomy 0.000 description 2
- 208000037902 enteropathy Diseases 0.000 description 2
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 2
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 235000013569 fruit product Nutrition 0.000 description 2
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007366 host health Effects 0.000 description 2
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 2
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 2
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 230000007233 immunological mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 description 2
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 235000008960 ketchup Nutrition 0.000 description 2
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 235000015927 pasta Nutrition 0.000 description 2
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 2
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N pyridoxine Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- 230000010837 receptor-mediated endocytosis Effects 0.000 description 2
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 2
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 2
- 102000003601 transglutaminase Human genes 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- CTBBEXWJRAPJIZ-VHPBLNRZSA-N (1S,2S,3S,6R,8R,9S,10R)-2-benzoyl-1,3,8,10-tetrahydroxy-9-(4-methoxy-6-oxopyran-2-yl)-5-oxatricyclo[4.3.1.03,8]decan-4-one Chemical compound O1C(=O)C=C(OC)C=C1[C@H]1[C@]([C@@H]2O)(O)[C@H](C(=O)C=3C=CC=CC=3)[C@@]3(O)C(=O)O[C@@H]2C[C@]31O CTBBEXWJRAPJIZ-VHPBLNRZSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WTLNOANVTIKPEE-UHFFFAOYSA-N 2-acetyloxypropanoic acid Chemical compound OC(=O)C(C)OC(C)=O WTLNOANVTIKPEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010015463 ALV003 Proteins 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000009434 Actinidia chinensis Nutrition 0.000 description 1
- 244000298697 Actinidia deliciosa Species 0.000 description 1
- 235000009436 Actinidia deliciosa Nutrition 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 235000005254 Allium ampeloprasum Nutrition 0.000 description 1
- 240000006108 Allium ampeloprasum Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Natural products OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000003416 Asparagus officinalis Species 0.000 description 1
- 235000005340 Asparagus officinalis Nutrition 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 235000010082 Averrhoa carambola Nutrition 0.000 description 1
- 240000006063 Averrhoa carambola Species 0.000 description 1
- 235000000832 Ayote Nutrition 0.000 description 1
- 206010006002 Bone pain Diseases 0.000 description 1
- 235000011297 Brassica napobrassica Nutrition 0.000 description 1
- 235000011293 Brassica napus Nutrition 0.000 description 1
- 235000004221 Brassica oleracea var gemmifera Nutrition 0.000 description 1
- 235000017647 Brassica oleracea var italica Nutrition 0.000 description 1
- 244000308368 Brassica oleracea var. gemmifera Species 0.000 description 1
- 244000304217 Brassica oleracea var. gongylodes Species 0.000 description 1
- 235000000540 Brassica rapa subsp rapa Nutrition 0.000 description 1
- 235000004936 Bromus mango Nutrition 0.000 description 1
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 1
- 240000004160 Capsicum annuum Species 0.000 description 1
- 235000008534 Capsicum annuum var annuum Nutrition 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 206010008025 Cerebellar ataxia Diseases 0.000 description 1
- 241000282994 Cervidae Species 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 1
- 240000000560 Citrus x paradisi Species 0.000 description 1
- 241001112696 Clostridia Species 0.000 description 1
- 241001112695 Clostridiales Species 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003949 Cucurbita mixta Nutrition 0.000 description 1
- 240000004244 Cucurbita moschata Species 0.000 description 1
- 235000009852 Cucurbita pepo Nutrition 0.000 description 1
- 235000009804 Cucurbita pepo subsp pepo Nutrition 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N D-cystine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CSSC[C@@H](N)C(O)=O LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N D-isoascorbic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N Diacetyl Chemical group CC(=O)C(C)=O QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010374 Down Syndrome Diseases 0.000 description 1
- CTBBEXWJRAPJIZ-UHFFFAOYSA-N Enterocin Natural products O1C(=O)C=C(OC)C=C1C1C(C2O)(O)C(C(=O)C=3C=CC=CC=3)C3(O)C(=O)OC2CC31O CTBBEXWJRAPJIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 240000009088 Fragaria x ananassa Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 101710087459 Gamma-gliadin Proteins 0.000 description 1
- 201000003741 Gastrointestinal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 241001091440 Grossulariaceae Species 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 208000004044 Hypesthesia Diseases 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 description 1
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 description 1
- 241001147746 Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis Species 0.000 description 1
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 description 1
- ORFLZNAGUTZRLQ-ZMBVWFSWSA-N Larazotide Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O ORFLZNAGUTZRLQ-ZMBVWFSWSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010025280 Lymphocytosis Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 206010025476 Malabsorption Diseases 0.000 description 1
- 208000004155 Malabsorption Syndromes Diseases 0.000 description 1
- 244000070406 Malus silvestris Species 0.000 description 1
- 235000014826 Mangifera indica Nutrition 0.000 description 1
- 240000007228 Mangifera indica Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 240000005561 Musa balbisiana Species 0.000 description 1
- 208000007101 Muscle Cramp Diseases 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010053775 Nisin Proteins 0.000 description 1
- NVNLLIYOARQCIX-MSHCCFNRSA-N Nisin Chemical compound N1C(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)[C@@H]([C@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)[C@H](N)[C@H](C)CC)CSC[C@@H]1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]2C(NCC(=O)N[C@H](C)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CS[C@@H]2C)C(=O)N[C@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]2C(N[C@H](C)C(=O)N[C@@H]3C(=O)N[C@@H](C(N[C@H](CC=4NC=NC=4)C(=O)N[C@H](CS[C@@H]3C)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N[C@H]([C@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=3NC=NC=3)C(=O)N[C@H](C(C)C)C(=O)NC(=C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(O)=O)=O)CS[C@@H]2C)=O)=O)CS[C@@H]1C NVNLLIYOARQCIX-MSHCCFNRSA-N 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 101710183587 Omega-gliadin Proteins 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 235000010617 Phaseolus lunatus Nutrition 0.000 description 1
- 241000758706 Piperaceae Species 0.000 description 1
- 101710088675 Proline-rich peptide Proteins 0.000 description 1
- 102000056251 Prolyl Oligopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 101710178372 Prolyl endopeptidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 101710118538 Protease Proteins 0.000 description 1
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 240000005809 Prunus persica Species 0.000 description 1
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 241000220324 Pyrus Species 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 235000001537 Ribes X gardonianum Nutrition 0.000 description 1
- 235000001535 Ribes X utile Nutrition 0.000 description 1
- 235000002357 Ribes grossularia Nutrition 0.000 description 1
- 235000016919 Ribes petraeum Nutrition 0.000 description 1
- 244000281247 Ribes rubrum Species 0.000 description 1
- 235000002355 Ribes spicatum Nutrition 0.000 description 1
- 240000007651 Rubus glaucus Species 0.000 description 1
- 229920001800 Shellac Polymers 0.000 description 1
- 206010054184 Small intestine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 description 1
- 235000009184 Spondias indica Nutrition 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 1
- 235000019714 Triticale Nutrition 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000026928 Turner syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 235000003095 Vaccinium corymbosum Nutrition 0.000 description 1
- 235000017537 Vaccinium myrtillus Nutrition 0.000 description 1
- 235000017606 Vaccinium vitis idaea Nutrition 0.000 description 1
- 244000077923 Vaccinium vitis idaea Species 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000002096 Vicia faba var. equina Nutrition 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 241000219094 Vitaceae Species 0.000 description 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 241000212749 Zesius chrysomallus Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000003070 absorption delaying agent Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N acetaldehyde Chemical compound [14CH]([14CH3])=O IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N 0.000 description 1
- 229940081735 acetylcellulose Drugs 0.000 description 1
- 230000023739 actin modification Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 239000001361 adipic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011037 adipic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 235000020194 almond milk Nutrition 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000021016 apples Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000021015 bananas Nutrition 0.000 description 1
- ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N benzo-alpha-pyrone Natural products C1=CC=C2OC(=O)C=CC2=C1 ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 235000021029 blackberry Nutrition 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 235000021014 blueberries Nutrition 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- UPLCYFWQZHLPFH-UHFFFAOYSA-N butane-1,1-diol;butane-2,3-diol Chemical compound CCCC(O)O.CC(O)C(C)O UPLCYFWQZHLPFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001217 buttock Anatomy 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003340 calcium silicate Drugs 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 1
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 210000001638 cerebellum Anatomy 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 208000019902 chronic diarrheal disease Diseases 0.000 description 1
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 1
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 1
- FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+3].N#[C-].N([C@@H]([C@]1(C)[N-]\C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C(\C)/C1=N/C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C\C1=N\C([C@H](C1(C)C)CCC(N)=O)=C/1C)[C@@H]2CC(N)=O)=C\1[C@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](N2C3=CC(C)=C(C)C=C3N=C2)O[C@@H]1CO FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000012059 conventional drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 235000014510 cooky Nutrition 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 235000001671 coumarin Nutrition 0.000 description 1
- 150000004775 coumarins Chemical class 0.000 description 1
- 238000009223 counseling Methods 0.000 description 1
- 235000012495 crackers Nutrition 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000009295 crossflow filtration Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000003436 cytoskeletal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 1
- 238000000586 desensitisation Methods 0.000 description 1
- 235000021185 dessert Nutrition 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000021004 dietary regimen Nutrition 0.000 description 1
- 235000001916 dieting Nutrition 0.000 description 1
- 230000037228 dieting effect Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 235000015177 dried meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 238000002036 drum drying Methods 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 235000005489 dwarf bean Nutrition 0.000 description 1
- 239000008157 edible vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000010894 electron beam technology Methods 0.000 description 1
- 235000020883 elimination diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 1
- 235000010350 erythorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 235000013332 fish product Nutrition 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 239000012054 flavored emulsion Substances 0.000 description 1
- 235000020375 flavoured syrup Nutrition 0.000 description 1
- 238000012921 fluorescence analysis Methods 0.000 description 1
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- FTSSQIKWUOOEGC-RULYVFMPSA-N fructooligosaccharide Chemical compound OC[C@H]1O[C@@](CO)(OC[C@@]2(OC[C@@]3(OC[C@@]4(OC[C@@]5(OC[C@@]6(OC[C@@]7(OC[C@@]8(OC[C@@]9(OC[C@@]%10(OC[C@@]%11(O[C@H]%12O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]%12O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]%11O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]%10O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]9O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]8O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]7O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]6O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]5O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]4O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]3O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]2O)[C@@H](O)[C@@H]1O FTSSQIKWUOOEGC-RULYVFMPSA-N 0.000 description 1
- 229940107187 fructooligosaccharide Drugs 0.000 description 1
- 235000013572 fruit purees Nutrition 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- 238000003633 gene expression assay Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 1
- 235000007919 giant pumpkin Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 125000004383 glucosinolate group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 1
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 1
- 235000021021 grapes Nutrition 0.000 description 1
- 235000021331 green beans Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000007887 hard shell capsule Substances 0.000 description 1
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000005802 health problem Effects 0.000 description 1
- ZSIAUFGUXNUGDI-UHFFFAOYSA-N hexan-1-ol Chemical class CCCCCCO ZSIAUFGUXNUGDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 235000019692 hotdogs Nutrition 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- GFAZHVHNLUBROE-UHFFFAOYSA-N hydroxymethyl propionaldehyde Natural products CCC(=O)CO GFAZHVHNLUBROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 208000034783 hypoesthesia Diseases 0.000 description 1
- 229960003943 hypromellose Drugs 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005934 immune activation Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000010874 in vitro model Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 206010021654 increased appetite Diseases 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 201000002313 intestinal cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000003870 intestinal permeability Effects 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 210000005024 intraepithelial lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940026239 isoascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 235000014705 isoleucine Nutrition 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 1
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 1
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 description 1
- JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N lactulose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N 0.000 description 1
- 229960000511 lactulose Drugs 0.000 description 1
- PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N lactulose keto form Natural products OCC(=O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950000060 larazotide Drugs 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 1
- 235000005772 leucine Nutrition 0.000 description 1
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 239000011344 liquid material Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 235000006109 methionine Nutrition 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 235000020802 micronutrient deficiency Nutrition 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 210000000110 microvilli Anatomy 0.000 description 1
- 235000021243 milk fat Nutrition 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000002850 nasal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000004309 nisin Substances 0.000 description 1
- 235000010297 nisin Nutrition 0.000 description 1
- 230000001937 non-anti-biotic effect Effects 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000862 numbness Toxicity 0.000 description 1
- 230000031787 nutrient reservoir activity Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 229940100691 oral capsule Drugs 0.000 description 1
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 238000009931 pascalization Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 235000021017 pears Nutrition 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 229940023041 peptide vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- 229930015704 phenylpropanoid Natural products 0.000 description 1
- 125000001474 phenylpropanoid group Chemical group 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 238000011197 physicochemical method Methods 0.000 description 1
- 229940023488 pill Drugs 0.000 description 1
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 235000021018 plums Nutrition 0.000 description 1
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 235000013324 preserved food Nutrition 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 235000011962 puddings Nutrition 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 235000015136 pumpkin Nutrition 0.000 description 1
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N pyridoxal hydrochloride Natural products CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 235000021013 raspberries Nutrition 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002105 relative biological effectiveness Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 208000029138 selective IgA deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009394 selective breeding Methods 0.000 description 1
- 239000012056 semi-solid material Substances 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 238000009589 serological test Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004208 shellac Substances 0.000 description 1
- 229940113147 shellac Drugs 0.000 description 1
- ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N shellac Chemical compound OCCCCCC(O)C(O)CCCCCCCC(O)=O.C1C23[C@H](C(O)=O)CCC2[C@](C)(CO)[C@@H]1C(C(O)=O)=C[C@@H]3O ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N 0.000 description 1
- 235000013874 shellac Nutrition 0.000 description 1
- 235000021391 short chain fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004666 short chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002832 shoulder Anatomy 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007886 soft shell capsule Substances 0.000 description 1
- 239000011343 solid material Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 235000013322 soy milk Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 235000020354 squash Nutrition 0.000 description 1
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 1
- 239000012058 sterile packaged powder Substances 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 235000021012 strawberries Nutrition 0.000 description 1
- 235000020790 strict gluten-free diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 238000004381 surface treatment Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N texas red Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S(Cl)(=O)=O)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 1
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 230000004102 tricarboxylic acid cycle Effects 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 1
- 235000014393 valine Nutrition 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- 235000019158 vitamin B6 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011726 vitamin B6 Substances 0.000 description 1
- 229940082632 vitamin b12 and folic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940011671 vitamin b6 Drugs 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 210000004127 vitreous body Anatomy 0.000 description 1
- 235000012431 wafers Nutrition 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
- 235000020985 whole grains Nutrition 0.000 description 1
- 235000008939 whole milk Nutrition 0.000 description 1
- 241000228158 x Triticosecale Species 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/164—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/30—Dietetic or nutritional methods, e.g. for losing weight
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
- A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
- A61K31/401—Proline; Derivatives thereof, e.g. captopril
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/4164—1,3-Diazoles
- A61K31/4172—Imidazole-alkanecarboxylic acids, e.g. histidine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
- A61K31/708—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid having oxo groups directly attached to the purine ring system, e.g. guanosine, guanylic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
- A61P29/02—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID] without antiinflammatory effect
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/335—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Lactobacillus (G)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к медицине и касается композиции для уменьшения симптомов токсичности пептида глиадина у субъекта, имеющего связанное с глютеном расстройство, содержащей пробиотический микроорганизм Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, и/или супернатант культуры, продуцируемый ферментирующими Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, в комбинации с одним или более физиологически приемлемым носителем. Группа изобретений также касается способа лечения субъекта, имеющего связанное с глютеном расстройство, включающего введение эффективного количества указанной композиции; набора для уменьшения симптомов токсичности пептида глиадина у субъекта, имеющего связанное с глютеном расстройство, содержащего дозированное количество указанной композиции. Группа изобретений обеспечивает уменьшение проникновения пептидов глиадина в клетки слизистой оболочки кишечника у субъекта. 4 н. и 27 з.п. ф-лы, 27 ил., 13 пр.
Description
Перекрестная ссылка на родственные заявки
[1] Данная заявка испрашивает приоритет на дату подачи предварительной заявки США №61/661105, поданной 18 июня 2012 года, и предварительной заявки США №61/725693, поданной 13 ноября 2012 года. В целях любой заявки США, в которой может испрашиваться приоритет предварительной заявки США №61/661105 и предварительной заявки США №61/725693, содержание ранее поданных заявок включены в данное описание посредством ссылки во всей своей полноте.
Область техники, к которой относится изобретение
[2] Изобретение относится к пробиотическим микроорганизмам и композициям, содержащим метаболиты, продуцируемые пробиотическими микроорганизмами. Эти композиции пригодны для лечения связанных с глютеном расстройств, например, целиакии.
Предпосылки создания изобретения
[3] Глютеновые и родственные глютену полипептиды обнаружены во многих зерновых культурах, включая пшеницу, рожь и ячмень. Для людей со связанными с глютеном расстройствами, такими как целиакия и чувствительность к глютену, употребление содержащих глютен продуктов может иметь серьезные и длительные последствия для здоровья. Целиакия является аутоиммунным заболеванием тонкого кишечника, которое вызывается потреблением глютена у генетически предрасположенных людей. Некоторые фрагменты глютена («глиадины») стимулируют иммунный ответ, который постоянно поражает тонкий кишечник и препятствует поглощению питательных веществ. Целиакия может проявляться широким спектром симптомов. Наиболее распространенные из них - хронический понос, вздутие живота, потеря веса и задержка в развитии (у детей). Целиакия может быть также связана с железодефицитной анемией, остеопорозом, небольшим ростом, артритом, бесплодием, периферической нейропатией и печеночной недостаточностью. Пациенты с целиакией также подвергаются повышенному риску в отношении определенных видов рака, таких как небольшие карциномы кишечника и неходжкинская лимфома. Частота заболевания целиакией среди популяций людей европейского происхождения, по оценкам, составляет от 0,5 до 1,5%. Заболеваемость растет как в США, так и в Европе, а также в Азии, в частности в связи с внедрением прозападных режимов питания. Целиакия обычно диагностируется в младенчестве или в детстве, хотя число диагнозов, сделанных в зрелом возрасте, также растет. В настоящее время способов лечения целиакии нет, стандартными способами лечения является соблюдение безглютеновой диеты на протяжении всей жизни.
[4] Чувствительность к глютену не так хорошо изучена, как целиакия. Она проявляется во многом такими же симптомами, но не включает повреждение тонкой кишки. Диагноз, как правило, ставится по критериям исключения и улучшения симптомов после назначения пациенту безглютеновой диеты.
[5] Соблюдение безглютеновой диеты требует строгого исключения продуктов из пшеницы, ржи и ячменя. Это может оказаться сложной задачей, определяемой отсутствием достаточной информации о содержании глютена в пищевых продуктах на этикетках; вероятностью загрязнения во время обработки и приготовления пищи, особенно это касается пищи, приготовленной вне дома; материальными затратами на безглютеновые продукты, а также силой воли, которая требуется для строгого соблюдения диеты. На соблюдение диеты также могут влиять доступ к просвещению и консультациям, поддержка семьи и социальная поддержка, а также психологические факторы. Кроме того, строгое соблюдение безглютеновой диеты может привести к дефициту питательных микроэлементов. Такой дефицит, особенно витаминов В (витамин В6, витамин В12 и фолиевая кислота) и некоторых микроэлементов, например, железа, цинка и меди, может привести к потенциально существенным проблемам со здоровьем, особенно у детей. Существует постоянная потребность в терапевтических агентах для лечения связанных с глютеном расстройств.
Сущность изобретения
[6] Настоящее изобретение относится к композициям, содержащим один или несколько метаболитов, продуцируемых Lactobacillusparacasei СВА L74, инвентарный номер LMG Р-24778 в Международном депозитарии. Метаболиты могут снижать токсичность пептидов глиадина у субъекта, имеющего связанное с глютеном расстройство. Метаболиты, которые в основном устойчивы к температуре выше стандартных физиологических значений температуры, уменьшают клеточное проникновение пептидов глиадина. Пептид глиадина может изменяться и может включать пептиды, которые охватывают один или несколько эпитопов, распознаваемых Т-клетками, например, Р57-68, и пептиды, которые распознаются природной иммунной системой, например, Р31-43. Иллюстративные пептиды включают пептиды α-глиадина, например, пептиды, имеющие аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из LGQQQPFPPQQPY (SEQ ID NO: 1); QLQPFPQPQLPY (SEQ ID NO: 2); LGQQQPFPPQQPYPQPQPF (SEQ ID NO: 3); и LQLQPFPQPQLPYPQPQLPYPQPQLPYPQPQPF (SEQ ID NO: 4). В некоторых вариантах осуществления метаболиты частично или в основном не содержат клетки Lactobacillus paracasei СВА L74, инвентарный номер LMG Р-24778 в Международном депозитарии. Композиции могут также включать физиологически приемлемый носитель, например, пищевой продукт или фармацевтический носитель.
[7] Предложены также способы лечения субъекта, имеющего связанное с глютеном расстройство, способ включает идентификацию субъекта, нуждающегося в лечении, и введение эффективного количества композиции, содержащей метаболит, продуцируемый Lactobacillus paracasei СВА L74, инвентарный номер LMG Р-24778 в Международном депозитарии, отличающийся тем, что метаболит снижает токсичность пептидов глиадина. Способы и композиции пригодны для использования в лечении любого связанного с глютеном расстройства, в том числе целиакии, включая различные подтипы, например, классическая целиакия, атипичная целиакия, скрытая целиакия и тихая целиакия, дерматит герпетиформный, глютеновая атаксия и чувствительность к глютену. Способы и композиции могут применяться одновременно со стандартными способами лечения связанных с глютеном расстройств, например, диетические способы лечения.
Краткое описание чертежей
[8] Эти и другие признаки и преимущества настоящего изобретения более полно раскрыты, или представлены наглядно, в нижеследующем подробном описании предпочтительного варианта осуществления изобретения, который следует рассматривать совместно с прилагаемыми чертежами, на которых одинаковые номера относятся к одинаковым частям:
[9] Фиг. 1 - анализ влияния Lactobacillus paracasei, штамм СВА L74 на проникновение P31-43liss в клетки СаСо2.
[10] Фиг. 2 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния различных концентраций Lactobacillus paracasei, штамм СВА L74 на проникновение P31-43liss в клетки СаСо2.
[11] Фиг. 3 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния различных концентраций Lactobacillus paracasei, штамм СВА L74 на проникновение 57-68liss в клетки СаСо2.
[12] Фиг. 4 - анализ влияния Lactobacillus paracasei, ДНК штамма СВА L74 на проникновение P31-43liss в клетки СаСо2.
[13] Фиг. 5а - график, иллюстрирующий результаты анализов влияния Lactobacillus paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение Р31-43liss в клетки СаСо2. Фиг. 5b - анализ влияния Lactobacillus paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение P31-43liss в клетки СаСо2.
[14] Фиг. 6а - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния Lactobacillus paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение P57-68liss в клетки СаСо2. Фиг. 6b - анализ влияния Lactobacillus paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение P57-68liss в клетки СаСо2.
[15] Фиг. 7а - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния тепловой обработки Lactobacillus paracasei, супернатанта штамма СВА L74 на проникновение P31-43liss в клетки СаСо2. Фиг. 7b - анализ влияния тепловой обработки Lactobacillus paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение Р31-43liss в клетки СаСо2.
[16] Фиг. 8 - анализ влияния Lactobacillus paracasei, супернатант штамма СВА L74 от ферментированного риса на проникновение P31-43liss в клетки СаСо2.
[17] Фиг. 9 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния Lactobacillus paracasei, супернатант штамма СВА L74 от ферментированного риса и ферментированного овса на проникновение P31-43liss в клетки СаСо2.
[18] Фиг. 10 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния Lactobacillus paracasei, супернатант штамма СВА L74 от ферментированного риса и ферментированного овса на проникновение декстран-Texas Red в клетки СаСо2.
[19] Фиг. 11 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния Lactobacillus paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение Alexa Fluor®-коньюгированного EGF [ЭФР] в клетки СаСо2.
[20] Фиг. 12 - анализ влияния Lactobacillus paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение Alexa Fluor®-коньюгированного EGF в клетки СаСо2.
[21] Фиг. 13а, 13b, 13с и 13d - анализ влияния Lactobacillus paracasei, штамма СВА L74 на проникновение P31-431iSS в клетки СаСо2. На Фиг. 13а показаны необработанные контрольные клетки. На Фиг. 13b показаны клетки СаСо2, обработанные с помощью 104 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74. На Фиг. 13с показаны клетки СаСо2, обработанные с помощью 106 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74. На Фиг. 13d показаны клетки СаСо2, обработанные с помощью 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74.
[22] Фиг. 14 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния различных концентраций Lactobacillus paracasei, штамм СВА L74 на проникновение P31-43liss в клетки СаСо2.
[23] Фиг. 15а, 15b, 15с, 15d - анализ влияния Lactobacillus paracasei, штамм СВА L74 на проникновение P57-68liss в клетки СаСо2. На Фиг. 15а показаны необработанные контрольные клетки. На Фиг. 15b показаны клетки СаСо2, обработанные с помощью 104 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74. На Фиг. 15с показаны клетки СаСо2, обработанные с помощью 106 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74. На Фиг. 15d показаны клетки СаСо2, обработанные с помощью 108 КОЕ/мл I. paracasei СВА L74.
[24] Фиг. 16 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния различных концентраций Lactobacillus paracasei, штамм СВА L74 на проникновение P57-68liss в клетки СаСо2.
[25] Фиг. 17 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния 108 КОЕ/мл Lactobacillus paracasei, штамм СВА L74 на проникновение P31-43liss и P57-68liss в клетки СаСо2.
[26] Фиг. 18а, 18b и 18с - анализ влияния Lactobacillus paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение P31-43liss в клетки СаСо2. На Фиг. 18а показаны необработанные контрольные клетки. На Фиг. 18b показаны клетки СаСо2, обработанные с помощью 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74. На Фиг. 18с показаны клетки СаСо2, обработанные супернатантом, собранным от 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74.
[27] Фиг. 19 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния L.paracasei, клетки штамма СВА L74 и L.paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение P31-43liss в клетки СаСо2.
[28] Фиг. 20а, 20b и 20с - анализ влияния L.paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение P57-68liss в клетки СаСо2. На Фиг. 20а показаны необработанные контрольные клетки. На Фиг. 20b показаны клетки СаСо2, обработанные с помощью 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74. На Фиг. 20с показаны клетки СаСо2, обработанные супернатантом, собранным от 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74.
[29] Фиг. 21 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния L.paracasei, клетки штамма СВА L74, и L.paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение P57-68liss в клетки СаСо2.
[30] Фиг. 22а и 22b - анализ влияния L.paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение EGF-Alexa 488 в клетки СаСо2. На Фиг. 20а показаны необработанные контрольные клетки. На Фиг. 20b показаны клетки СаСо2, обработанные супернатантом, собранным от эквивалента 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74.
[31] Фиг. 23 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния L.paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение EGF-Alexa 488 в клетки Сасо2.
[32] Фиг. 24а, 24b и 24с - анализ влияния удаления L.paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение P31-43liss в клетки Сасо2. На Фиг. 20а показаны необработанные контрольные клетки. На Фиг. 20b показаны клетки Сасо2, обработанные супернатантом L.paracasei СВА L74. На Фиг. 20с показаны клетки Сасо2, обработанные супернатантом L.paracasei СВА L74, который был удален.
[33] Фиг. 25 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния обработки, а затем удаления L.paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение P31-43liss в клетки СаСо2.
[34] Фиг. 26а, 26b, 26с, 26d - анализ влияния тепловой обработки L.paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение P31-43llss в клетки Сасо2. На Фиг. 26а показаны необработанные контрольные клетки. На Фиг. 26b показаны клетки Сасо2, обработанные супернатантом L.paracasei СВА L74. На Фиг. 26с показаны клетки Сасо2, обработанные супернатантом L.paracasei СВА L74, который подвергался кипячению. На Фиг. 26d показаны клетки Сасо2, обработанные супернатантом L.paracasei СВА L74, который нагревали при 80°С.
[35] Фиг. 27 - график, иллюстрирующий результаты анализа влияния тепловой обработки L.paracasei, супернатант штамма СВА L74 на проникновение P31-43liss в клетки СаСо2.
Подробное описание предпочтительного варианта осуществления
[36] Данное описание предпочтительных вариантов осуществления следует читать в сочетании с прилагаемыми рисунками, которые должны рассматриваться как часть полного письменного описания настоящего изобретения. Представленные рисунки не обязательно изображены в определенном масштабе, а некоторые признаки изобретения могут быть показаны в увеличенном масштабе или в несколько схематичном виде в интересах ясности и краткости. В описании относительные термины, такие как «горизонтальный», «вертикальный», «вверх», «вниз», «сверху» и «снизу», а также их производные (например, «горизонтально», «внизу», «вверху» и т.д.) следует толковать как относящиеся к ориентации, как затем описано или как показано на рассматриваемом чертеже. Эти относительные термины приняты для удобства описания и обычно не предназначены для указания конкретной ориентации. Термины, включающие «внутрь» по сравнению с «наружу», «продольный» по сравнению с «поперечный» и т.п., следует понимать по отношению друг к другу или по отношению к продольной оси, или оси или центра вращения, по обстоятельствам. Термины, касающиеся прикреплений, связи и т.п., такие как «связаны» и «взаимосвязаны», относятся к отношениям, когда соединение структур друг к другу либо прямое, либо непрямое, через промежуточные структуры, а также к подвижным или жестким присоединениям или связям, если специально не указано иное. Понятие «функционально связаны» означает такое прикрепление, связь или соединение, которое позволяет соответствующим структурам работать по назначению в силу такой связи. Если показана только одна машина, термин «машина» также следует принимать, как включающий любую группу машин, которые по отдельности или совместно выполняют набор (или несколько наборов) инструкций по осуществлению одного или нескольких методик, описанных здесь. В формуле изобретения пункты, совмещающие средство-плюс-функция, если используются, предназначены для охвата конструкций, описанных, предложенных или представленных очевидными согласно письменному описанию или рисункам для выполнения указанной функции, в том числе не только структурные эквиваленты, но и эквивалентные структуры.
[37] Настоящее изобретение основано, частично, на открытии авторов изобретения, что культуры пробиотического микроорганизма Lactobacillus paracasei, штамм СВА L74, могут уменьшать проникновение некоторых компонентов глютена в интестинальные клетки человека. Более конкретно, авторами изобретения установлено, что выделенные супернатанты L.paracasei СВА L74 и культуральные супернатанты от L.paracasei СВА L74 уменьшили проникновение пептидов α-глиадина в культивируемые человеческие интестинальные эпителиальные клетки. Кроме того, уменьшение проникновения пептида также наблюдалось и в отношении продуктов, которые были ферментированы с помощью L.paracasei СВА L74. Действие на проникновение пептида наблюдалось даже тогда, когда культуральные супернатанты подвергались тепловой обработке. Соответственно, данное изобретение относится к композициям, которые могут ослабить токсическое воздействие пептидов глиадина. Композиции могут включать Lactobacillus paracasei, клетки штамма СВА L74, метаболиты, продуцируемые Lactobacillus paracasei, штамм СВА L74, или комбинацию Lactobacillus paracasei, клетки штамма СВА L74, и метаболитов, продуцируемых Lactobacillus paracasei, штамм СВА L74.
[38] Lactobacillus paracasei, штамм СВА L74, был выделен авторами и сдан на хранение согласно условиям Будапештского Договора о международном признании хранения микроорганизмов для целей процедуры выдачи патента [the Budapest Treaty on the International Recognition of the Deposit of Micro-organisms for the Purposes of Patent Procedure] 9 сентября 2008 года в Бельгийской координированной коллекции микроорганизмов (ВССМ) Лаборатории микробиологии [Laboratorium voor Microbiologie] (LMG), Гент, Бельгия. Международным депозитарным органом [International Depositary Authority] присвоен инвентарный номер LMG Р-24778. Для удобства чтения далее по тексту фраза «инвентарный номер LMG Р-24778» не будет повторяться. Следует понимать, что, когда авторы делают ссылку на L.paracasei, штамм СВА L74, они ссылаются на депонированный штамм под инвентарным номером LMG Р-24778.
[39] Несмотря на то что авторы полагают, что они понимают определенные события, которые происходят при введении композиций, содержащих или составленных путем ферментации с помощью L.paracasei СВА L74, композиции по настоящему изобретению не ограничиваются теми из них, которые работают за счет воздействия на любой конкретный клеточный механизм. Рабочая гипотеза авторов состоит в том, что композиции, содержащие L.paracasei СВА L74, супернатант от культур или ферментатов L.paracasei СВА L74, а также метаболиты, продуцируемые L.paracasei СВА L74, могут обеспечить повышенный барьер для транслокации глютеновых и родственных глютену полипептидов через кишечную слизистую оболочку и, таким образом, смягчить действие глютеновых и родственных глютену полипептидов у лиц, имеющих связанное с глютеном расстройство, например, целиакию или чувствительность к глютену. Авторами настоящего изобретения установлено, что L.paracasei СВА L74, супернатант, снизил поглощение клетками молекул, которые проникают в клетки по различным эндоцитозным путям, напр., фагоцитоз, макропиноцитоз, клатрин-опосредованный эндоцитоз (также известный как рецептор-опосредованный эндоцитоз) и кавеолы. Например, L.paracasei СВА L74, супернатант, уменьшил клеточное проникновение как декстрана, который, как известно, проникает в клетки через макропиноцитоз, так и эпидермального фактора роста (EGF), который проникает в клетку через рецептор-опосредованный эндоцитоз. Положительного действия композиций, описанных здесь, можно получить, например, от метаболитов, продуцируемых во время ферментации, например, органических кислот, таких как молочная кислота, масляная кислота или уксусная кислота. Альтернативно или в дополнение, воздействие на клеточный ответ на глютеновые и родственные глютену полипептиды могут оказывать фрагменты бактериальной клеточной стенки и другие субклеточные бактериальные компоненты, такие как белки, углеводы, фрагменты нуклеиновой кислоты и липиды.
[40] Соответственно, в настоящем изобретении предлагаются композиции и способы, которые могут использоваться для защиты клеток от потенциально токсичного действия глютеновых и родственных глютену пептидов. Композиции могут включать среды, в которых были выращены L.paracasei СВА L74, или пищевые продукты, например, молочные продукты или зерновые продукты, которые были ферментированы с помощью L.paracasei СВА L74. В некоторых вариантах осуществления, среды или пищевые продукты могут обрабатываться, напр., физико-химическими способами, такими как центрифугирование, с целю удаления всех или в основном всех клеток L.paracasei СВА L74, которые были культивированы в этих средах или пищевом продукте. В некоторых вариантах осуществления композиции могут включать выделенные L.paracasei СВА L74 и физиологический носитель. Носитель может быть пищевым продуктом, но изобретение не ограничивается этим, и в некоторых вариантах осуществления носителем может быть фармакологический носитель.
[41] Кроме того, предлагаются способы изготовления и применения композиций. Способы в соответствии с изобретением включают способы получения композиций, содержащих L.paracasei СВА L74, способы ферментации пищевых продуктов с помощью L.paracasei СВА L74 и способы введения композиций субъекту, имеющему связанное с глютеном расстройство. Способы могут применяться на людях или в ветеринарии. Независимо от субъекта (человек или субъект кроме человека) любой из настоящих способов может включать стадию идентификации субъекта. Например, способы могут включать этап определения, нуждается ли субъект в лечении.
Композиции
L.paracasei СВА LI4
[42] Композиции в соответствии с изобретением могут включать пробиотический микроорганизм L.paracasei СВА L74. Всемирная организация здравоохранения определила пробиотики как: «Живые микроорганизмы, которые при введении в адекватных количествах приносят пользу здоровью хозяина». В некоторых вариантах осуществления, L.paracasei СВА L74 может подвергаться обработкам, которые делают его нереплицируемым, например, воздействие тепла, γ-облучение или УФ-облучение. Нереплицируемой L.paracasei СВА L74 может быть мертвая клетка или живая клетка, которую сделали неспособной к клеточному делению. Нереплицируемой L.paracasei СВА СВА L74 может быть интактная клетка или клетка, которая претерпела частичный или полный лизис. В некоторых вариантах осуществления нереплицируемые клетки могут включать смесь интактных и лизированных клеток.
[43] В некоторых вариантах осуществления, композиции могут включать ферментаты L.paracasei СВА L74, из которых удалены все или в основном все клетки L.paracasei СВА L74. Способы выделения клеток из питательных сред хорошо известны в данной области и могут быть основаны на физических способах, например, центрифугирование для получения дебриса и культурального супернатанта, фильтрация, ультрафильтрация, тангенциальная поточная фильтрация, фильтрация нормального потока или обратный осмос. Альтернативно или в дополнение, способ выделения может быть на основе лиганда и включать, например, антитело, которое специфически связывается с L.paracasei СВА L74. Антитело может быть соединено с твердой подложкой, например, магнитным шариком.
[44] Композиции включают один или несколько метаболитов L.paracasei СВА L74, т.е. любое вещество, продуцируемое L.paracasei СВА L74. Метаболит может быть закодирован одним или несколькими генами или он может генерироваться ферментативной активностью одного или нескольких генных продуктов. Метаболиты включают, например, малые молекулы, например, аминокислоты, нуклеозиды, нуклеотиды, а также более крупные полимерные структуры, такие как полипептиды, углеводы, нуклеиновые кислоты, протеогликаны и липиды. Метаболит может быть первичным метаболитом, например, метаболит, непосредственно участвующий в функии нормальной клетки, или вторичным метаболитом, например, метаболитом, который, как правило, не требуется для основных клеточных функций. Метаболит может также включать любой метаболический интермедиат, генерируемый в процессе синтеза первичного или вторичного метаболита. Интермедиаты могут включать, но не ограничиваются этим, интермедиаты пути Эмбдена-Мейергофа, пентозофосфатного (пентоза-Р) пути, пути Энтнер-Дудорова, цитратного цикла и аминокислотного биосинтеза.
[45] Иллюстративные первичные метаболиты включают, без ограничения, спирты, напр., этанол, метанол, бутанол; аминокислоты, напр., лизин, аргинин, орнитин, гистидин, цитруллин, изолейцин, аланин, валин, лейцин, глицин, треонин, серии, пролин, фенилаланин, тирозин, триптофан, цистеин, цистин, метионин, глутаминовая кислота, аспарагиновая кислота, глутамин и аспарагин; нуклеотиды, напр., 5' гуаниловая кислота; антиоксиданты, напр., изоаскорбиновая кислота; органические кислоты, напр., уксусная кислота, молочная кислота, лимонная кислота, муравьиная кислота; витамины, напр., витамин В12; сахара, жирные кислоты, напр., короткоцепочечные жирные кислоты; полиамины; пептиды, напр., бактериоцины, такие как лантибиотик, напр., низин, или нелантибиотик, напр., энтероцин, плантарицин W, плантарицин S.
[46] Метаболит может также быть вторичным метаболитом. Вторичными метаболитами обычно являются такие метаболиты, которые не требуются для фундаментальных клеточных функций. Вторичные метаболиты могут широко варьироваться; иллюстративные вторичные метаболиты включают антибиотики, гормоны, флавониды, терпеноиды, алкалоиды, фенилпропаноиды, производные фенила, производные гексанола, кумарины, стильбены, циангидрины, глюкозинолаты, стерины и сапонины.
[47] Лактобактерии обычно продуцируют следующие метаболиты в процессе ферментации молочных продуктов: молочная кислота/лактат, ацетат, этанол, формиат, ацетальдегид, α-ацетолактат, ацетоин, диацетил и 2,3 бутиленгликоль (бутандиол) в процессе ферментации молочных продуктов. Ферментацией может быть любой процесс, в котором микроб вызывает расщепление или способствует расщеплению сложного органического вещества на более простые вещества.
[48] Метаболит L.paracasei СВА L74 может содержаться в средах, ферментатах или культуральных супернатантах. В некоторых вариантах осуществления метаболит может быть частично или в основном выделен из сред, ферментатов или культуральных супернатантов. Таким образом, функциональный метаболит, т.е. метаболит, который уменьшает клеточное проникновение пептида глиадина, может включать или исключать любой из описанных выше метаболитов. Способы выделения метаболитов будут варьироваться в зависимости от структуры и химического состава конкретного метаболита. Частично или в основном выделенный метаболит сохраняет функциональную активность, то есть способность уменьшать проникновение в клетку глиадина пептидов, сред, ферментатов или культуральных супернатантов. Таким образом, если супернатант культуры L.paracasei СВА L74 может уменьшать проникновение пептида глиадина в клетки, можно предполагать, что частично или в основном выделенный метаболит из культурального супернатанта L.paracasei СВА L74 также будет уменьшать проникновение пептида глиадина в клетки. Для выделения и характеризации метаболитов L.paracasei СВА L74 могут использоваться с тандартные известные способы. Иллюстративные способы включают, например, анализы устойчивости, напр., устойчивости к нагреву, рН и/или ферментативная активность; хроматографический анализ, напр., эксклюзионная хроматография, высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), газовая хроматография, тонкослойная хроматография, ионообменная хроматография, аффинная хроматография, хроматография с обращенной фазой; масс-спектрометрия. В некоторых вариантах осуществления метаболит устойчив к нагреванию, то есть он сохраняет свою функциональную активность, т.е. способность предотвращать проникновение в клетку пептидов глиадина после воздействия температур за пределами нормального физиологического диапазона, напр., 50°С, 60°С, 70°С, 80°С, 90°С или 100°С.
Глютеновые и родственные глютену полипептиды
[49] Независимо от конкретной формы описанные здесь композиции уменьшают клеточное поглощение глютеновых и родственных глютену полипептидов. Глютеновые и родственные глютену полипептиды являются основными запасными белками диетических хлебных злаков. Глютен содержится в пшенице. Близкородственные белки, гордеины и секалины, содержатся в ячмене и ржи, соответственно. Описано несколько сотен генов, кодирующих глютеновые и родственные глютену белки. Дополнительно к своим питательным свойствам глютен играет ключевую роль в определении уникального хлебопекарного качества пшеницы за счет придания водопоглощающей способности, склеиваемости, вязкости и эластичности тесту. Глютен фактически представляет собой комплекс из двух полипептидных фракций, которые классифицированы на основании их растворимости в водных спиртах: растворимые глиадины и нерастворимые глютенины. Обе фракции состоят из многочисленных родственных белковых компонентов, характеризующихся высоким содержанием глутамина и пролина.
[50] Глиадины представляют собой мономерные белки с молекулярной массой (MW) примерно 28000-55000 и изоэлектрической точкой примерно рН=3,0-4,0. Существуют четыре класса полипептидов глиадина: α-глиадина, β-глиадина, γ-глиадина и ω-глиадина. Иллюстративные аминокислотные последовательности для α-глиадина можно найти в Генном Банке [GenBank] в Gl: 7209265 (тритикум аестивум 290 аминокислот, SEQ ID NO: 7); Gl: 7209263 (тритикум аестивум 269 аминокислот, SEQ ID NO: 8); Gl: 376341626 (тритикум аестивум 210 аминокислот, SEQ ID NO: 9); Gl: 282721198 тритикум аестивум, 313 аминокислот, SEQ ID NO: 10).
[51] Глютенин является более крупным мультимерным белком в диапазоне молекулярной массы от примерно 100000 до более чем 10000000 со средней молекулярной массой около 3000000. Изоэлектрические точки для глютенина находятся в диапазоне от примерно 6,5 до 7,0. После уменьшения дисульфидных связей получаемые в результате субъединицы глютенина демонстрируют растворимость в водных спиртов аналогичную глиадинам. Исходя из первичной структуры, субъединицы глютенина разделены на высокомолекулярные (HMW) субъединицы (MW=67000-88000) и низкомолекулярные (LMW) субъединицы (MW=32000-35000). Глиадины, глютенины, гордеины и секалины имеют высокое содержание пролина и глутамина. Высокое содержание пролина делает эти белки устойчивыми к полному протеолитическому расщеплению энзимами желудка, поджелудочной железы и щеточной каймы в кишечнике человека, поскольку у этих энзимов недостаточная активность пролил эндопептидазы. Это может привести к накоплению относительно больших пептидных фрагментов (порядка 50 аминокислот в длину) с высоким содержанием пролина и глутамина в тонком кишечнике.
[52] Специфические аминокислотные последовательности для глиадина могут варьироваться, но все они содержат Т-клеточные эпитопы, которые запускают иммунные ответы, участвующие в патогенезе целиакии. Именно эти глютеновые специфические ответы Т-клеток в тонком кишечнике играют важную роль в создании воспалительной реакции, что, в конечном счете приводит к характерной атрофии кишечных ворсинок и гиперплазии крипт. Специфические нативные пептиды глютена могут связываться с HLA-DQ2/8, типы HLA, наиболее сильно связанные с целиакией. Такое связывание HLA индуцирует CD4 Т-клеточные ответы собственной пластинки, которые в свою очередь приводят к повреждению слизистой оболочки тонкого кишечника. Повреждение тканей инициирует секрецию раноисцеляющей трансглутаминазы тканевого энзима (tTG). Однако, tTG также дезамидирует пептиды глюкена. Дезамидирование преобразует нейтральные остатки глутамина в отрицательно заряженные остатки глутаминовой кислоты. Эти дезамидированные пептиды значительно повысили аффинность связывания для HLA-DQ2/8 по отношению к пептидам, которые не были деамидированы. Этот процесс приводит к повышенной антигенной презентации глиадина. Связывание дезамидированных пептидов дополнительно активирует глютен-специфические клетки CD4+ Т-хелпер 1 (Th1) в собственной пластинке, которая в свою очередь увеличивает интраэпителиальный лимфоцитоз, гиперплазию крипт, продуцирование цитокинов, ведущие к атрофии ворсинок, а также расширение В-клеток, которые продуцируют антитела к глиадину и tTG.
[53] В α- и γ-глиадинах, а также в глютенинах были идентифицированы мотивы множественных Т-клеточных эпитопов. Большинство из них показали повышенное узнавание Т-клеток после дезамидирования. Кроме того, пациенты с целиакией, как правило, чувствительны к нескольким пептидам глютена. Хотя взаимодействие DQ2/8 представляет наиболее значимую ассоциацию с целиакией, определенную до настоящего времени, неиммуногенные пептиды глютена могут также влиять на врожденную иммунную систему.
[54] Пептиды глиадина Р31-43 и Р31-49, как правило, не распознаются Т-клетками. Эти пептиды индуцируют врожденный иммунный ответ в чревной слизистой оболочке. Пептид Р31-43 задерживает созревание эндоцитозных пузырьков и, следовательно, уменьшает деградацию рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) и продлевает активацию EGFR. Было продемонстрировано, что продленная активация EGFR вызывает повышенную пролиферацию клеток и модификации актина как в энтероцитах чревных крипт, так и в культивируемых клеточных линиях. После проникновения в кишечные энтероциты или в интестинальную линию клеток человека, СаСо2, Р31-43 взаимодействует с ранними эндоцитозными пузырьками, снижает их подвижность и задерживает их созревание до поздних эндосом.
[55] В ходе развития целиакии участвуют различные пептиды глютена. Есть две группы биологически активных пептидов, производных от α-глиадина. Группа серин-содержащих пептидов, по-видимому, является практически цитотоксической, тогда как тирозин-содержащая группа обладает способностью запускать иммунологические реакции у больных целиакией. Активность серин-содержащих пептидов связана с наличием PSQQ и QQQP мотивов. Тирозин-содержащие пептиды, напр., QQPY и/или QPYP, ассоциированы с иммунологической активностью.
[56] Пептиды глиадина могут значительно различаться по последовательностям. Полипептид, который имеет последовательность, которая идентична части последовательности глиадина и которая функционирует (напр., для одной или нескольких из описанных здесь целей), является пептидом глиадина. Непроцессированный глиадин содержит последовательность пептида глиадина и один или несколько из описанных здесь пептидов могут находиться частично или полностью в пределах последовательности глиадина. Пептид, который имеет последовательность, отличающуюся в определенной ограниченной степени от последовательности, которая встречается в природном глиадине и которая сохраняет способность функционировать (например, сохраняет достаточную активность, чтобы передавать токсичность пептида глиадина), является биологически активным вариантом пептида глиадина. Авторы намерены использовать термины «глиадин» для обозначения непроцессированных белков природного глиадина и термины «полипептид» и «пептид» в отношении их фрагментов (т.е. фрагментов глиадина) и их биологически активных вариантов. Поскольку полипептиды или пептиды могут иметь последовательность, которая идентична последовательности, встречающейся в глиадине, полипептиды или пептиды являются производными фрагментов глиадина.
[57] Хотя последовательности имеющихся полипептидов могут варьироваться, полезные полипептиды могут включать фрагменты SEQ ID NO: 7-10. Полипептиды могут включать или состоять из аминокислотной последовательности глиадина, которая естественным образом экспрессируется в растительной клетке. Биологически активный вариант может включать, например, аминокислотную последовательность, которая отличается от фрагмента глиадина дикого типа из-за содержания одного или нескольких консервативных аминокислотных замещений. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере 50% аминокислотных остатков варианта идентичны остаткам в соответствующем фрагменте глиадина дикого типа. Биологически активные варианты могут также включать аминокислотные последовательности, которые отличаются от фрагмента глиадина дикого типа благодаря неконсервативным аминокислотным замещениям, добавлениям и/или делециям.
[58] Авторы ссылаются на некоторые аминокислотные последовательности как «полипептиды», чтобы сообщить, что они являются линейными полимерами аминокислотных остатков, и чтобы можно было отличать их от непроцессированных белков. Следует иметь в виду, что полипептиды могут, следовательно, включать только фрагмент глиадина (или его биологически активный вариант), но в такой же мере могут включать дополнительные остатки. Полипептиды в соответствии с изобретением могут изменяться по длине. Например, полипептиды могут быть длиной 8-40 (например, 12, 14, 18, 18, или 20) аминокислот или длиннее (например, вплоть до примерно 40 остатков).
[59] Полипептиды, которые являются биологически активными вариантами глиадина, можно охарактеризовать с точки зрения степени, в какой их последовательность аналогична или идентична соответствующему фрагменту глиадина. Например, последовательность биологически активного варианта может быть по меньшей мере или примерно на 60% идентичной соответствующим остаткам в глиадине дикого типа. Например, биологически активный вариант полипептида глиадина может иметь аминокислотную последовательность по меньшей мере или примерно с 60% идентичностью последовательности (например, по меньшей мере или примерно 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 98% или 99% идентичностью последовательности) глиадину (например, аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 7-10, или другому полипептиду, как описано здесь (напр., полипептид, представленный, например, SEQ ID NO: 1-6) или его гомологу или ортологу).
[60] Биологически активный вариант полипептида глиадина будет сохранять достаточную биологическую активность, чтобы передавать токсичность субъекту, имеющему связанное с глютеном расстройство. Биологическую активность можно определять способами, известными обычному специалисту в данной области техники, они включают без ограничения анализы клеточного поглощения, анализы экспрессии генов или животные модели in vivo. Биологически активные варианты можно идентифицировать, например, путем сравнения относительной активности вариантного полипептида с относительной активностью активного фрагмента пептида глиадина. Анализы могут включать неродственный контрольный полипептид (напр., можно было бы включать в любой заданный анализ пептид, который имеет такое же содержание аминокислот, расположенных случайным образом, а также контрольную группу только с носителем). Некоторые биологически активные варианты могут даже обладать даже большей биологической активностью, чем родственный природный фрагмент или непроцессированный глиадин. Более конкретно, биологически активный вариант может иметь по меньшей мере или примерно 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 98% или более биологической активности полипептида нативной формы.
[61] Иллюстративные пептиды α-глиадина, которые играют некоторую роль в целиакии, включают Р31-43, LGQQQPFPPQQPY, (SEQ ID NO.: 1); Р31-49 LGQQQPFPPQQPYPQPQPF (SEQ ID NO: 3); P44-55; PQQPFPSQLP (SEQ ID NO.: 5; P57-68 QLQPFPQPQLPY (SEQ ID NO.: 2); P56-88, LQLQPFPQPQLPYPQPQLPYPQPQLPYPQPQPF (SEQ ID NO: 4) и P63-76 QPQLPYPQPQLPYP (SEQ ID NO.: 6).
Пищевые продукты
[62] Композиции в соответствии с изобретением могут включать физиологически приемлемый носитель. Физиологический носитель может быть пищевым продуктом или фармацевтическим носителем. Авторы используют термины «физиологически приемлемый» (или «фармакологически приемлемый») в отношении молекулярных частиц и композиций, которые не вызывают побочную, аллергическую или иную неблагоприятную реакцию при введении животному или человеку, по обстоятельствам. Таким образом, композиции в соответствии с настоящим изобретением включают пищевые продукты, ферментированные пробиотическим микроорганизмом, L.paracasei СВА L74. Пищевой продукт может включать клетки L.paracasei СВА L74, либо живые, либо нереплицируемые. В некоторых вариантах осуществления пищевой продукт может обрабатываться для удаления всех или в основном всех клеток L.paracasei СВА L74. Использовать можно любой пищевой продукт, поддающийся ферментации с помощью L.paracasei СВА L74. Пищевым продуктом может быть молочный продукт, например, молоко или продукт на молоке. Иллюстративными источниками молока включают, без ограничения, крупный рогатый скот, овец, коз, яков, буйволов, лошадей, ослов, оленей и верблюдов. Независимо от источника, молоко или молочные продукты могут быть в любой форме, пригодной для ферментации с помощью L.paracasei СВА L74. Например, молоко может быть цельным молоком или молоком, которое было обработано с целью удаления некоторого количества или всего молочного жира, напр., 2% молоко, 1% молоко или обезжиренное молоко. Альтернативно или в дополнение, молоко может быть предварительно подвергнуто пастеризации и/или гомогенизации, сушке и восстановлению или сгущению. Также могут использоваться фракции молочных продуктов, включая казеин, белок молочной сыворотки или лактозу. В некоторых вариантах осуществления молочный продукт может составлять от примерно 1% до примерно 30% восстановленного сухого обезжиренного молока, например, примерно 2%, примерно 5%, примерно 7%, примерно 9%, примерно 10%, примерно 12%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30% восстановленного сухого обезжиренного молока. Перед ферментацией молочный продукт может соединяться с одним или несколькими из следующего: а) углевод (напр., дисахарид, такой как декстроза или крахмал; b) липид; с) витамин и d) минерал. Например, обезжиренное сухое молоко может соединяться с декстрозой примерно до 2%, напр., примерно до 0,25%, примерно до 0,50%, 0,75%, 1,0%, 1,5%, или примерно до 2,0%.
[63] Пищевой продукт может представлять собой зерновой продукт, например, рис, овес, кукуруза, сорго или просо. В некоторых вариантах осуществления зерновым продуктом может быть пшеница, ячмень, рожь или тритикале. Зерновой продукт может быть в виде цельного зерна или может быть измельчен до состояния муки. Пищевой продукт может представлять собой один вид зерновых или смесь двух или более видов зерновых, напр., овсяная мука плюс рисовая мука. Зерновые продукты могут быть класса и типа, пригодных для потребления человеком или могут быть продуктами, пригодными для потребления домашними животными. Как правило, зерновой продукт перед ферментацией подвергается гидратации. Концентрация злаков может варьироваться, но применимые диапазоны включают от примерно 5% до примерно 50% вес/объем, например, примерно 8% вес/объем, примерно 10% вес/объем, примерно 12% вес/объем, примерно 15% вес/объем, примерно 18% вес/объем, примерно 20% вес/объем, примерно 22% вес/объем, примерно 25% вес/объем, примерно 30% вес/объем, примерно 35% вес/объем, примерно 40% вес/объем, примерно 45% вес/объем или примерно 50% вес/объем. Иллюстративные концентрации включают 15% вес/объем риса или смесь из 18,5% вес/объем овсяной муки плюс 5% вес/объем солодовой ячменной муки. Значение рН гидратированных зерновых можно регулировать с помощью любой кислоты, пригодной для потребления. Кислота может быть, например, органической кислотой. Пригодные органические кислоты включают уксусную кислоту, лимонную кислоту, молочную кислоту, адипиновую кислоту, яблочную кислоту и винную кислоту. Можно использовать любую комбинацию двух или более кислот. В некоторых вариантах осуществления с помощью лимонной кислоты значение рН можно отрегулировать до примерно 4,0.
[64] Пищевой продукт также может представлять собой растительный или фруктовый продукт, например, сок, пюре, концентрат, паста, соус, рассол или кетчуп. Иллюстративные овощи и фрукты включают, без ограничения, кабачки, напр., цукини, желтый сквош, зимний сквош, тыква; картофель, спаржа, брокколи, брюссельская капуста, фасоль, напр., зеленые бобы, восковая фасоль, лимская фасоль, конские бобы, соевые бобы, капуста, морковь, цветная капуста, огурцы, кольраби, лук-порей, зеленый лук, репчатый лук, сахарный горох, английский горох, перец, репа, брюква, помидоры, яблоки, груши, персики, сливы, клубника, малина, ежевика, черника, брусника, бойзенова ягода, крыжовник, виноград, смородина, апельсины, лимоны, грейпфруты, бананы, манго, киви и карамбола.
[65] Пищевой продукт может также представлять собой «молоко», полученное из орехов или бобовых, например, соевое молоко или миндальное молоко.
[66] Кроме того, предусматриваются пищевые продукты, содержащие белки животного происхождения, например, мясо, например, сосиски, сушеное мясо, сушеная рыба и продукты из сушеной рыбы.
[67] Независимо от типа используемого пищевого продукта, продукт соединяется с L.paracasei СВА L74 и инкубируется при температуре и в течение времени, достаточных для осуществления ферментации. Может использоваться любой стандартный способ ферментации, известный в данной области. Конкретные условия ферментации будут варьироваться в зависимости от многих факторов, включая, например, тип пищевого продукта, концентрацию пищевого продукта, используемый инструментарий, объем образца, начальную концентрацию инокулума L.paracasei СВА L74, наличие, если имеется, ко-инокулума, органолептические свойства ферментированного пищевого продукта и предполагаемое использование ферментированного пищевого продукта.
[68] И инструментарий, и субстрат (т.е. пищевой продукт, подлежащий ферментации) подвергают стерилизации перед инокуляцией L.paracasei СВА L74, чтобы снизить уровень жизнеспособных бактерий и/или грибков, и/или инфекционных вирусов, или удалить их. Инструментарий можно стерилизовать, применяя стандартные способы, или в соответствии с инструкциями изготовителя. Выбор конкретного способа стерилизации субстрата будет зависеть отчасти от устойчивости субстрата к способу стерилизации. Например, субстрат может стерилизоваться паром и под давлением, напр., автоклавированием, повторяющимися циклами нагрева и охлаждения (например, тиндализацией), воздействием высоких давлениях (напр., паскализацией), ультрафильтрацией или излучением (например, воздействием гамма-, х-лучами, электронным пучком и/или ультра-фиолетом (длина волны 10 нм - 320 нм, напр., 50 нм - 320 нм, 100 нм - 320 нм, 150 нм - 320 нм, 180 нм - 320 нм или 200 нм - 300 нм). Аликвоты субстрата могут быть удалены после обработки и высева на подходящие среды для подтверждения отсутствия бактериальных и/или грибковых загрязняющих веществ. Если субстрат стерилизован путем воздействия высоких температур, его необходимо охладить по меньшей мере до 37°С перед инокуляцией L.paracasei СВА L74.
[69] Субстрат может быть инокулирован с L.paracasei СВА L74 в соответствии со стандартными способами, например, из свежей жидкой культуры или лиофилизированной культуры, которая была ресуспендирована в водной среде в течение короткого периода времени перед посевом. Как правило, L.paracasei СВА L74 добавляют в концентрации от примерно 0,5×106 до 1×106 КОЕ/мл субстрата, напр., примерно 1×106 КОЕ/мл, примерно 2×106 КОЕ/мл, примерно 5×106 КОЕ/мл, 7×106 КОЕ/мл, 8×106 КОЕ/мл. Культуру необходимо перемешать в достаточной мере до получения относительно равномерного распределения бактерий и субстрата, но не слишком сильно, так как L.paracasei СВА L74 - это анаэробная бактерия. Например, пять литров культуры можно перемешивать при скорости примерно 150 об/мин. Температура ферментации обычно составляет 37°С. Различные параметры, например рН, парциальное давление О2, скорость мешалки, температура, перемешивание газом, уровень пены и концентрация субстрата можно контролировать во время ферментации и соответствующим образом регулировать. Рост L.paracasei СВА L74 можно контролировать с помощью стандартных микробиологических способов. Ферментация выполняется до тех пор, пока концентрация L.paracasei СВА L74 не достигнет значения в интервале от примерно 108/мл до примерно 109/мл. В зависимости от субстрата и других условий такая концентрация может быть достигнута примерно через 10-30 часов после инокуляции, напр., примерно через 12 часов, примерно через 15 часов, примерно через 18 часов, примерно через 24 часов, примерно через 30 часов.
[70] Контроль качества образцов субстрата можно выполнять до, во время и после ферментации, используя стандартные микробиологические способы. Иллюстративные способы включают, но не ограничиваются этим, рост на агаре Рогоза для L.paracasei СВА L74, рост на агаре чашечного подсчета (РСА) для всех аэробов, рост на агаре McConkay для колиформных бактерий, рост на усиленном клостридийном агаре (RCM) для клостридий. Дополнительно к определению количества колоний можно наблюдать морфологию колоний и сравнивать с контрольными образцами.
[71] В некоторых вариантах осуществления вместе с L.paracasei СВА L74 можно добавлять ко-инокулум для содействия инициированию ферментации. Пригодные ко-инокулумы для ферментации молочных продуктов включают, например, без ограничения, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus salivarious, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus casei, Lactobacillus lactis, Lactobacillus delbrueckii, подвиды Bulgaricus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus brevis или Leuconostoc mesenteroides. В общем, концентрация ко-инокулума будет ниже, чем L.paracasei СВА L74, например, примерно 1×104/мл ×105/мл. Конечная концентрация S. thermophilus может варьироваться от примерно 0,5×108/мл до примерно 2,5×108/мл.
[72] После того как будет достигнута соответствующая концентрация L.paracasei СВА L74, ферментированные пищевые продукты могут подвергаться дополнительной обработке для использования. В некоторых вариантах осуществления ферментированный пищевой продукт может подвергаться фракционированию для удаления всех или в основном всех клеток L.paracasei СВА L74. В некоторых вариантах осуществления значение рН ферментированного пищевого продукта можно регулировать, например, от примерно 3,0 до почти нейтральности, напр., 6,5, путем добавления NaOH или КОН. В некоторых вариантах осуществления ферментированный пищевой продукт может подвергаться сушке. Сушить ферментированный пищевой продукт можно любым способом, известным в данной области техники, который сохраняет иммуномодулирующие свойства ферментированного пищевого продукта Иллюстративные способы сушки включают сушку распылением, сублимационную сушку, например, лиофилизация или барабанная сушка. Конечное содержание воды в ферментированном пищевом продукте может варьироваться, но может быть в пределах от прииерно 1% до прииерно 10% или более. В некоторых вариантах осуществления в процессе сушки L.paracasei СВА L74 может стать нереплицируемым.
[73] Высушенные ферментированные пищевые продукты могут гидратироваться перед применением. В зависимости от количества жидкости, используемой при гидратации, ферментированные продукты могут содержать эквивалент примерно 102, примерно 103, примерно 104, примерно 105, примерно 106, примерно 107, примерно 108, примерно 109, примерно 1010, примерно 1011 и примерно 1012 КОЕ/мл бактерий L.paracasei СВА L74. Высушенные L.paracasei СВА L74 не образуют колоний, значит, следует понимать, что это количество вычислено на основании количества живых бактерий, которые присутствовали в ферментированных пищевых продуктах до стадии сушки. В некоторых вариантах осуществления ферментированные пищевые продукты могут включать эквивалент от примерно 107 до примерно 1012 КОЕ/г, напр., примерно 5×107 КОЕ/ г, примерно 1×108 КОЕ/г, примерно 1×108 КОЕ/г, примерно 1×109 КОЕ/г, примерно 5×109 КОЕ/г, примерно 1×1010 КОЕ/г, примерно 5×1010 КОЕ/г, примерно 1×1011 КОЕ/г, примерно 5×1011 КОЕ/г сухой массы.
[74] Перед введением два или более ферментированных пищевых продукта, приготовленных по способам в соответствии с изобретением, можно объединять. Например, ферментированные молочные продукты можно объединять с ферментированными зерновыми продуктами. Альтернативно, ферментированный пищевой продукт можно объединять с другими пищевыми продуктами, например, неферментированными пищевыми продуктами или пищевыми продуктами, ферментированными с использованием других бактериальных штаммов. Может быть использована любая комбинация, при условии что воздействие на пептиды глиадина ферментированного продукта сохраняется. Иллюстративные пищевые продукты включают, без ограничения, молочные продукты, напр., молоко, йогурт, творог, сыр и сырные продукты, кисломолочные продукты, продукты на основе кисломолочных продуктов, ферментированные продукты на молочной основе, порошки на основе молока, детские смеси, протертые продукты детского питания на основе молока, мороженое, холодный десерт, пудинги, супы, соусы, пюре или приправы, пищевые формулы для пожилых людей; крупяные продукты, напр., детская питательная смесь, протертые продукты детского питания на зерновой основе, овсяные хлопья, крахмал, манная крупа, полента, макаронные изделия, печенье, крекеры, энергетические батончики; растительные продукты, напр., пюре, продукты детского питания на овощной основе, маринованные овощи, включая огурцы, капусту, морковь, фасоль, сладкий перец или приправы; фруктовые продукты, напр., протертые продукты детского питания на фруктовой основе, томатные продукты, пюре, соусы, пасты, кетчупы, фруктовые пюре; или продукты на белковой основе, напр., бобовые, сосиски, хот-доги или протертое мясо. В некоторых вариантах осуществления ферментированный пищевой продукт может быть объединен с консервами для домашних животных или кормами для животных. Фармацевтические композиции
[75] Композиции, описанные здесь, могут соединяться с фармацевтически приемлемым носителем. Термин «фармацевтически приемлемый носитель» в данном контексте включает любые и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные, изотонические и задерживающие всасывание агенты, буферы, наполнители, связующие вещества, смазывающие вещества, гели, поверхностно-активные вещества и т.п., которые могут быть использованы в качестве сред для фармацевтически приемлемого вещества.
[76] Таким образом, изобретение также включает фармацевтические композиции, содержащие в качестве активного ингредиента L.paracasei СВА L74 или один или несколько метаболитов, продуцируемых L.paracasei СВА L74, описанных здесь, в комбинации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями. В некоторых вариантах осуществления L.paracasei СВА L74 может подвергаться стерилизации с использованием обычных методов стерилизации до или после соединения с фармацевтически приемлемым носителем. При изготовлении композиций в соответствии с изобретением L.paracasei СВА L74 или один или несколько метаболитов, продуцируемых L.paracasei СВА L74, обычно смешивают с наполнителем, разбавляют наполнителем или заключают в такой носитель в виде, например, капсулы, таблетки, саше, бумаги, или другого контейнера. Когда наполнитель выполняет функцию разбавителя, это может быть твердый, полутвердый или жидкий материал (напр., физиологический раствор), который действует как среда-наполнитель, носитель или среда для активного ингредиента. Таким образом, композиции могут быть в форме таблеток, пилюль, порошков, лепешек, саше, крахмальных облаток, эликсиров, суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (как твердое вещество или в жидкой среде), мазей, мягких и твердых желатиновых капсул, суппозиториев, стерильных растворов для инъекций и стерильных упакованных порошков. Как известно в данной области техники, тип разбавителя может варьироваться в зависимости от предполагаемого способа введения. Получаемые в результате композиции могут включать дополнительные агенты, такие как консерванты. Наполнитель или носитель выбирают на основании режима и способа введения. Пригодные фармацевтические носители, а также фармацевтические необходимые составляющие для использования в фармацевтических составах описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences [Фармацевтические науки Ремингтона] (Е.W. Martin), известный текст для ссылок в данной области, и в USP/NF (United States Pharmacopeia and the National Formulary) [Фармакопея и Национальный формуляр США]. Некоторые примеры пригодных наполнителей включают лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, крахмалы, аравийскую камедь, фосфат кальция, альгинаты, трагакант, желатин, силикат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, целлюлозу, воду, сироп и метилцеллюлозу. Составы могут дополнительно включать: смазьтающие агенты, такие как тальк, стеарат магния и минеральное масло; смачивающие агенты; эмульгирующие и суспендирующие агенты; консерванты, такие как метил- и пропилгидрокси-бензоаты; подсластители; а также вкусовые добавки. Фармацевтические композиции могут быть составлены таким образом, чтобы обеспечивалось быстрое, замедленное или отсроченное высвобождение активного ингредиента после введения пациенту с помощью процедур, известных в данной области.
[77] Фармацевтически приемлемые композиции для применения в представленных способах, включая те, в которых L.paracasei СВА L74 или один или несколько метаболитов, продуцируемых L.paracasei СВА L74, заключены в коллоид для пероральной доставки, можно получать по стандартым методикам. L.paracasei СВА L74 или один или несколько метаболитов, продуцируемых L.paracasei СВА L74, можно высушивать и прессовать путем перемалывания или измельчения в порошок и вставлять в капсулу для перорального приема. В некоторых вариантах осуществления L.paracasei СВА L74 или один или несколько метаболитов, продуцируемых L.paracasei СВА L74, можно соединять с одним или несколькими наполнителями, например, разрыхлителем, заполнителем, глидантом или консервантом. Пригодные капсулы включают капсулы с твердой оболочкой или капсулы с мягкой оболочкой. Для формирования капсулы можно использовать любой коллоид на основе липидов или на основе полимеров. Иллюстративные полимеры, используемые для коллоидных препаратов, включают желатин, полисахариды растений или их производные, такие как каррагинаны, и модифицированные формы крахмала и целлюлозы, напр., гипромеллоза. При желании, в раствор гелеобразующего агента могут быть добавлены другие ингредиенты, например пластификаторы, такие как глицерин и/или сорбит для уменьшения твердости капсулы, красители, консерванты, разрыхлители, смазывающие вещества и обработка поверхности капсулы. В некоторых вариантах осуществления капсула не содержит желатин. В других вариантах осуществления капсула не содержит растительные полисахариды или их производные.
[78] Независимо от их первоначального источника или способа получения, L.paracasei СВА L74 или один или несколько метаболитов, продуцируемых L.paracasei СВА L74, можно получать составы в соответствии с их применением. Такие композиции можно приготовить хорошо известным в фармацевтической области способом и можно вводить разными путями в зависимости от того, требуется местное или системное лечение, а также от области, подлежащей лечению. Введение может быть пероральным или местным (включая офтальмологическое и в слизистые оболочки, включая интраназальную, вагинальную и ректальную доставку). В некоторых вариантах осуществления введение может быть пульмональным (напр., путем ингаляции или инсуффляции порошков или аэрозолей, в том числе с помощью распылителя; интратрахеально, интраназально, трансдермально и эпидермально) или офтальмологическим. Способы офтальмологической доставки могут включать местное введение (глазные капли), субконъюнктивальную, периокулярную инъекцию или инъекцию в стекловидное тело или введение баллонного катетера или офтальмологических вставок, которые помещаются хирургическим путем в конъюнктивальный мешок. Парентеральное введение включает внутривенную, внутриартериальную, подкожную, внутрибрюшинную или внутримышечную инъекцию или вливание; или внутричерепное, напр., интратекальное или интравентрикулярное введение. Парентеральное введение может быть в виде разовой болюсной дозы или может быть, например, выполнено с помощью насоса непрерывной перфузии. Фармацевтические композиции и составы для местного введения могут включать трансдермальные пластыри, мази, лосьоны, кремы, гели, капли, суппозитории, спреи, жидкости, порошки и т.п. Необходимыми или желательными могут быть обычные фармацевтические носители, водные, порошковые или масляные основы, загустители и т.п.
[79] Композиции могут быть приготовлены в виде стандартной дозы, каждая доза содержит, например, от примерно 0,005 мг до примерно 2000 мг L.paracasei СВА L74 или одного или нескольких метаболитов, продуцируемых L.paracasei СВА L74, на каждую суточную дозу. В некоторых вариантах осуществления композиции могут содержать эквивалент примерно 102, примерно 103, примерно 104, примерно 105, примерно 106, примерно 107, примерно 108, примерно 109, примерно 1010, примерно 1011 и примерно 1012 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74. Термин «стандартные дозы» относится к физически дискретным единицам, пригодным в качестве единичных дозировок для человека и других млекопитающих, причем каждая единица содержит заданное количество активного материала, рассчитанного на получение желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с пригодным фармацевтическим наполнителем. Для приготовления твердых композиций, например таблеток, основной активный ингредиент смешивают с фармацевтическим наполнителем с образованием твердой композиции до придания ей лекарственной формы, содержащей однородную смесь соединения в соответствии с настоящим изобретением. Если рассматривать эти предварительные композиции как однородные, активный ингредиент обычно равномерно распределяется по всей композиции, так что композицию можно легко разделить на одинаково эффективные стандартные дозы, такие как таблетки, пилюли и капсулы. Такой твердый предварительный состав затем разделяется на стандартные дозы описанного выше типа, содержащие от, например, 0,005 мг до примерно 1000 мг L.paracasei СВА L74 или одного или нескольких метаболитов, продуцируемых L.paracasei СВА L74, в соответствии с настоящим изобретением.
[80] Композиции могут быть составлены в виде стандартной дозы, причем каждая доза содержит, например, от примерно 0,1 мг до примерно 50 мг, от примерно 0,1 мг до примерно 40 мг, от примерно 0,1 мг до примерно 20 мг, от примерно 0,1 мг до примерно 10 мг, от примерно 0,2 мг до примерно 20 мг, от примерно 0,3 мг до примерно 15 мг, от примерно 0,4 мг до примерно 10 мг, от примерно 0,5 мг до примерно 1 мг; от примерно 0,5 мг до примерно 100 мг, от примерно 0,5 мг до примерно 50 мг, от примерно 0,5 мг до примерно 30 мг„ от примерно 0,5 мг до примерно 20 мг, от примерно 0,5 мг до примерно 10 мг, от примерно 0,5 мг до примерно 5 мг; от примерно 1 мг до от примерно 50 мг, от примерно 1 мг до примерно 30 мг„ от примерно 1 мг до примерно 20 мг, от примерно 1 мг до примерно 10 мг, от примерно 1 мг до примерно 5 мг; от примерно 5 мг до примерно 50 мг, от примерно 5 мг до примерно 20 мг, от примерно 5 мг до примерно 10 мг; от примерно 10 мг до примерно 100 мг, от примерно 20 мг до примерно 200 мг, от примерно 30 мг до примерно 150 мг, от примерно 40 мг до примерно 100 мг, от примерно 50 мг до примерно 100 мг активного ингредиента.
[81] В некоторых вариантах осуществления таблетки или пилюли в соответствии с настоящим изобретением могут иметь покрытие или иным образом составлены для получения лекарственной формы, обеспечивающей пролонгированное действие. Например, таблетка или пилюля может содержать внутренний дозированный и наружный дозированный компонент, причем последний в виде оболочки поверх первого. Два компонента могут быть разделены энтеросолюбильным слоем, который предназначен для защиты от разрушения в желудке и чтобы внутренний компонент поступал неповрежденным в двенадцатиперстную кишку или чтобы обеспечивалось его отсроченное высвобождение. Для таких энтеросолюбильных слоев или покрытий могут использоваться различные материалы, включающие многие полимерные кислоты и смеси полимерных кислот с такими материалами, как шеллак, цетиловый спирт и ацетат целлюлозы.
[82] Жидкие формы, в которые композиции по настоящему изобретению могут быть включены для введения перорально или путем инъекции, включают водные растворы, надлежащим образом ароматизированные сиропы, водные или масляные суспензии и ароматизированные эмульсии с пищевыми маслами, такими как хлопковое масло, кунжутное масло, кокосовое масло или арахисовое масло, а также эликсиры и подобные фармацевтические носители.
[83] Пропорция или концентрация композиций в соответствии с изобретением в фармацевтической композиции может варьироваться в зависимости от ряда факторов, включающих дозировку, химические характеристики (напр., гидрофобность), и от способа введения. Например, L.paracasei СВА L74 или один или несколько метаболитов, продуцируемых L.paracasei СВА L74, в соответствии с изобретением могут изготавливаться в виде капсулы, содержащей от примерно 0,005 мг до примерно 1000 мг для перорального введения.
Способы применения
Связанные с глютеном растройства
[84] Композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, в целом и в отдельности пригодны для лечения связанных с глютеном расстройств. Субъекты, на которых такое лечение оказывает благоприятное воздействие, включают тех, кто испытывает или имеет повышенный риск токсичных эффектов при приеме внутрь глютеновых и родственных глютену полипептидов. Такие токсические эффекты могут охватывать широкий спектр симптомов, включая, но не ограничиваясь этим, воспаление, аутоиммунные реакции, желудочно-кишечные симптомы, такие как диарея, стеаторея, вздутие живота, потеря веса, анемия, остеопороз, артрит, бесплодие, периферическая невропатия, печеночная недостаточность и депрессия. Токсичность пептидов глиадина может обусловливаться цитотоксическими или иммунологическими механизмами или комбинацией цитотоксических и иммунологических механизмов. Симптом токсичности пептидов глиадина может включать воспаление, аутоиммунные реакции, желудочно-кишечные симптомы, такие как диарея, стеаторея, вздутие живота, потеря веса, анемия, остеопороз, артрит, бесплодие, периферическая невропатия, печеночная недостаточность и депрессия. Связанные с глютеном расстройства включают целиакию, в том числе различные подтипы, напр., классическую целиакию, атипичную целиакию, скрытую целиакию и молчащую целиакию, дерматит герпетиформный, глютеновую атаксию и чувствительность к глютену
[85] Подтипы целиакии включают классическую целиакию, атипичную целиакию, скрытую целиакию и молчащую целиакию. Классическими симптомами, ассоциированными с целиакией, являются диарея, вздутие живота и задержка в развитии. Эти симптомы чаще всего наблюдаются у детей в возрасте от 6 до 24 месяцев. Атипичная целиакия характеризуется умеренными желудочно-кишечными симптомами. Это связано с внекишечными проявлениями, такими как железодефицитная анемия, остеопороз, небольшой рост, артрит, бесплодие, периферическая невропатия, гипертрансаминаземия и, в некоторых случаях, печеночная недостаточность на момент постановки диагноза. Скрытая целиакия относится к пациентам, у которых присутствуют HLA-DQ2 и/или HLA-DQ8, с или без положительной серологии, и у которых до этого времени не развилась атрофия ворсинок, но может быть умеренное воспаление или иммунная активация. Пациенты в этой субпопуляции могут быть асимптоматичными или могут иметь внекишечные проявления. Молчащая целиакия характеризуется положительной серологией и атрофией ворсинок у в других отношениях асимптоматичного пациента. После проведения безглютеновой диеты некоторые бессимптомные пациенты замечают улучшение различных физических и психологических аспектов жизни, таких, как повышение аппетита, снижение усталости или сокращение числа поведенческих отклонений. Независимо от подтипа, многие случаи целиакии протекают нераспознанными, что подвергает пациентов риску долгосрочных осложнений, например, бесплодия и злокачественных опухолей, например, лимфомы и рака кишечника.
[86] Проявление целиакии может варьироваться в широких пределах. Целиакия обычно проявляется у детей в виде задержки в развитии, ассоциированной с классическими симптомами мальабсорбции: преимущественно потеря веса, стеаторея и ряд дефицитов, хотя могут присутствовать другие внекишечные симптомы, например, задержка в развитии осевого скелета и задержка менструаций у девочек.
[87] Распространенность целиакии возрастает в условиях риска, таких, как семейный анамнез целиакии, аутоиммунные заболевания, дефицит иммуноглобулина А, некоторые генетические синдромы (синдром Дауна, синдром Тернера и синдромы Уильяма) и особенно диабет 1 типа и тиреоидит.
[88] Важную роль в целиакии играет генетическая предрасположенность. Целиакия прочно связана со специфическими генами человеческого лейкоцитарного антигена класса II (HLA), HLA-DQ2 и HLA-DQ8, расположенными на хромосоме 6р21. Большинство пациентов с целиакией (примерно 95%) экспрессируют гены, кодирующие белок HLA-DQ2 главного комплекса гистосовместимости (МНС) класса II. Остальные пациенты, как правило, HLA-DQS-положительны. HLA-DQ2 гаплотип является общим и присутствует примерно у 30% жителей Кавказа, что предполагает, что присутствие HLA-DQ2 и/или HLA-DQ8 является необходимым для развития болезни, но не достаточно само по себе, поскольку его эффект оцененного риска составляет только 36% - 53%. Гены non-HLA также содействуют предрасположенности к целиакии.
[89] Диагностика целиакии обычно опирается на ряд критериев, включая: 1) проявление с симптомами типичной целиакии; 2) положительность серологических тестов, в том числе, например, высокий титр IgA антител к tTG (анти-tTG), высокий титр антител к дезамидированым пептидам α-глиадина; 3) генотипы HLA-DQ2 и/или HLA-DQ8; 4) энтеропатия целиакии, обнаруженная на биопсии тонкого кишечника; и 5) реакция на безглютеновую диету. Широкий диапазон проявления целиакии побудило некоторых врачей к принятию количественного подхода, определяемого как «четыре из пяти правил». То есть диагноз целиакии подтверждается, если выполняются по меньшей мере четыре из пяти критериев.
[90] Герпетиформный дерматит - это кожное проявление целиакии в виде пузырчатой сыпи и патогномоничных отложений IgA в коже. Преобладающими симптомами являются сильный зуд и жжение. Сыпь имеет характерное симметричное распределение. Локти и верхняя часть предплечий поражаются более чем у 90% пациентов. Другими обычно вовлеченными местами являются ягодицы, колени, плечи, крестец, лицо, голова, шея и туловище. Атрофия ворсинок брюшного типа в верхней слизистой оболочке тонкой кишки обнаруживается у 65% - 75% пациентов с герпетиформным дерматитом. Даже у пациентов с явно нормальной биопсией трудно уловимые изменения в слизистой оболочке, такие как увеличение количества интраэпителиальных лимфоцитов, указывают на чувствительность к глютену. Пациенты с герпетиформным дерматитом могут демонстрировать такой же набор проявлений, ассоциированных расстройств и осложнений, как и больные целиакией (аутоиммунные заболевания, железодефицитная анемия, остеопороз и злокачественные опухоли). Пациентов с герпетиформным дерматитом, как правило, держат на безглютеновой диете, потому что сыпь герпетиформного дерматита чувствительна к глютену.
[91] Глютеновая атаксия была определена как иная идиопатическая спорадическая атаксия с положительными серологическими маркерами по чувствительности к глютену. Подобно целиакии, она является аутоиммунным заболеванием, характеризующимся повреждением мозжечка, приводящем к атаксии. Пациенты с глютеновой атаксией, как правило, имеют высокий титр антиглиадиновых антител. У пациентов с глютеновой атаксией отложение антител трансглутаминазы с широким разбросом было обнаружено вокруг сосудов головного мозга. Глютеновая атаксия обычно проявляется простой мозжечковой атаксией или, реже, атаксией в сочетании с миоклонусом, небным тремором или глазным миоклонусом. Глютеновая атаксия, как правило, имеет постепенное развитие в среднем возрасте после 53 лет. У многих пациентов проявление э нтеропатии обнаруживается на биопсии кишечника. Пациентов, положительных к анти-глиадиновым антителам или анти-tTG антителам при отсутствии альтернативной причины для атаксии, как правило, держат на строгой безглютеновой диете при регулярном последующем врачебным наблюдении.
[92] Чувствительность к глютену, также известная как нецелиакийная чувствительность к глютену или непереносимость глютена, как правило, характеризуется как функциональное, морфологическое и иммунологическое расстройство, при полном отсутствии всех признаков целиакии, но, тем не менее, реагирующее на исключение глютена. Чувствительность к глютену отличается от целиакии и не сопровождается анти-tTG аутоантителами или другими аутоиммунными сочетанными заболеваниями. Тонкий кишечник у пациентов с чувствительностью к глютену, как правило, в норме. Симптомы чувствительности к глютену могут напоминать симптомы, ассоциированные с целиакией, но с преобладанием внекишечных симптомов, таких как поведенческие изменения, боли в костях или в суставах, мышечные судороги, онемение ног, потеря веса и хроническая усталость. Не существует лабораторных биомаркеров, специфичных в отношении чувствительности к глютену. Обычно диагностика основывается на критериях исключения; элиминационная диета в отношении глютенсодержащих продуктов с последующей открытой пищевой провокацией (т.н. тест «open challenge») чаще всего используется для оценки, улучшается ли здоровье при исключении или уменьшении глютена из рациона пациента или нет.
Способы лечения
[93] Лечение субъекта считается эффективным, когда наступает клинически благоприятный результат. Это может означать, например, полное прекращение симптомов, ассоциированных со связанным с глютеном расстройством, уменьшение тяжести симптомов, ассоциированных со связанным с глютеном расстройством, или замедление прогрессирования симптомов, ассоциированных со связанным с глютеном расстройством. Эти способы могут также включать стадии а) идентификации субъекта (например, пациент и, более конкретно, пациент-человек), у которого имеется связанное с глютеном расстройство; и b) предоставление субъекту композиции, содержащей L.paracasei СВА L74 или один или несколько метаболитов L.paracasei СВА L74, описанных здесь, например, любой ферментированный пищевой продукт или композиция, содержащая L.paracasei СВА L74, в физиологически приемлемом носителе. Количество такой композиции, предоставленной субъекту, которое приводит к полному прекращению симптомов, ассоциированных со связанным с глютеном расстройством, уменьшению тяжести симптомов, ассоциированных со связанным с глютеном расстройством, или замедлению прогрессирования симптомов, ассоциированных со связанным с глютеном расстройством, считается терапевтически эффективным количеством. Данные способы также могут включать стадию мониторинга для оптимизации дозирования и планирования, а также прогнозирования исхода.
[94] Способы, описанные здесь, могут применяться к широкому кругу видов, напр., люди, не являющихся человеком приматы (напр., обезьяны), лошади, свиньи, коровы или другие домашние животные, собаки, кошки или другие млекопитающие, содержащиеся как домашние животные, крысы, мыши или другие лабораторные животные. Композиции, описанные здесь, могут быть полезны в терапевтических композициях и схемах или для изготовления лекарственного средства для применения в лечении состояний, описанных здесь (напр., связанные с глютеном расстройства.)
[95] Композиции, описанные здесь, могут назначаться для перорального приема в рамках обычного ежедневного рациона пациента. Пищевые композиции можно вводить в виде дополнительного питания как детям, так и взрослым. После приготовления в виде фармацевтических препаратов, композиции можно вводить в любую часть тела хозяина для последующей доставки в клетки-мишени. Композиция может быть доставлена, без ограничения, в мозг, спинномозговую жидкость, суставы, слизистую оболочку носа, кровь, легкие, кишечник, мышечные ткани, кожу или в брюшную полость млекопитающего. С точки зрения маршрутов доставки композицию можно вводить путем внутривенной, внутричерепной, внутрибрюшинной, внутримышечной, подкожной, внутримышечной, ректальной, интравагинальной, интратекальной, внутритрахиальной, внутрикожной или чрескожной инъекции, путем перорального или назального введения или путем постепенной перфузии в течение длительного периода времени. В другом примере, аэрозольный препарат композиции может быть предоставлен хозяину путем ингаляции.
[96] Независимо от того, приготовлены композиции в виде продуктов питания или в виде лекарственных средств, требуемая дозировка будет зависеть от пути введения, природы состава, характера состояния субъекта, напр., недоразвитие иммунной системы или желудочно-кишечное нарушение, размера, веса, площади поверхности, возраста и пола субъекта, других вводимых лекарств, а также решения лечащих врачей. Приемлемые дозы находятся в интервале от 0,01-1000 мг/кг. Некоторые типичные диапазоны доз составляют от примерно 1 μг/кг до примерно 1 г/кг массы тела в день. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от примерно 0,01 мг/кг до около 100 мг/кг веса тела в день. В некоторых вариантах осуществления доза может быть, например, 1 мг/кг, 2 мг/кг, 5 мг/кг, 10 мг/кг, 20 мг/кг, 50 мг/кг или 100 мг/кг. Дозировка может зависеть от таких переменных, как тип и степень прогрессирования заболевания или расстройства, общего состояния здоровья конкретного пациента, относительной биологической эффективности выбранного соединения, состава наполнителя и пути введения.
[97] Эффективные дозы могут быть экстраполированы из кривых доза-ответ, полученных из тест-систем in vitro или животной модели. Например, может быть полезным исследование воздействия на проникновение в клетку пептидов глиадина в клеточных анализах. Композиции также можно исследовать на воздействие на иммунный ответ, продуцирование цитокинов и Т-клеточные ответы.
[98] Следует предполагать широкие вариации необходимых доз, принимая во внимание спектр симптомов, ассоциированных со связанными с глютеном расстройствами, различные клеточные мишени и разную эффективность различных путей введения. Вариации этих уровней дозировки можно корректировать, используя стандартные эмпирические процедуры для оптимизации, как это хорошо известно в данной области техники. Введение может быть одноразовым или многоразовым (например, 2- или 3-, 4-, 6-, 8-, 10-, 20-, 50-, 100-, 150-, или более раз). Инкапсуляция соединений в подходящем носителе для доставки (напр., полимерные микрочастицы или имплантируемые устройства) может повысить эффективность доставки.
[99] Продолжительность лечения любой композиции, представленной здесь, может занимать любой период времени от максимально короткого один день и на протяжении продолжительности жизни хозяина (напр., в течение многих лет). Например, композицию можно вводить один раз в неделю (в течение, например, 4 недель до многих месяцев или лет); один раз в месяц (например, от трех до двенадцати месяцев или в течение многих лет); или один раз в год в течение периода 5 лет, десять лет или больше. Следует также отметить, что частота лечения может быть переменной. Например, предлагаемые композиции можно вводить один раз (или два раза, три раза, и т.д.) ежедневно, еженедельно, ежемесячно или ежегодно.
[100] Любой способ, известный в данной области, может быть использован для определения, индуцируется или нет конкретный ответ. Для определения, индуцируется или нет конкретный ответ, могут использоваться клинические методы, которые могут оценить степень конкретного состояния заболевания. Например, мониторинг субъекта может осуществляться в отношении облегчения симптомов, напр., избавление от диареи, боли в животе, спазмов, вздутия живота, и способность переносить провокационную пробу глютена. Альтернативно или в дополнение могут использоваться сывороточные маркеры, методы визуализации, напр., ультразвук, рентгенограмма и эндоскопические методы.
[101] Композиции можно также вводить в сочетании с другими терапевтическими методиками. Эти терапевтические методики будут варьироваться в зависимости от конкретного расстройства, но могут включать, например, диетические средства, такие как безглютеновая диета. В некоторых вариантах осуществления диетические средства могут включать введение продуктов из пшеницы из штаммов, которые были разработаны с помощью селекционного разведения или рекомбинантных технологий для экспрессии форм глиадина, которые уменьшили количество токсичных Т-клеточных эпитопов. В некоторых вариантах осуществления диетическое средство может включать введение пребиотика, т.е. вещества, которое стимулирует рост или активность одного или нескольких видов кишечной флоры, полезных для здоровья хозяина. Примеры пребиотиков включают транс-галактоолигосахарид, инулин, фруктоолигосахариду и лактулозу.
[102] Другие терапевтические методики включают введение терапевтического агента. Терапевтический агент может представлять собой фермент, например эндопептидазу (также упоминается как глютеназа), который разрушает глютен, нацеливаясь на пролин-богатые пептиды, которые иначе противостоят природным протеазам организма и содержат высоко иммуногенные пептиды. Иллюстративные эндопептидазы включают пролилэндопептидазы и ALV003, комбинацию цистеин эндопротеазы, полученной из прорастающих семян ячменя, и пролил эндопептидазы из сфингомонаса капсулированного [Sphingomonas capsulate].
[103] Другие терапевтические агенты включают ингибиторы повышенной кишечной проницаемости, типичной для целиакии, например, AT-1001 (ларазотид) октапептидный ингибитор парацеллюлярной проницаемости, который ингибирует глиадин-индуцированную цитоскелетную реаранжировку интестинальных эпителиальных клеток, разборку плотного контакта и пиковое приращение F-актина. Другие терапевтические агенты включают ингибиторы tTG, модуляторы иммуной системы и терапию десенсибилизации с вакцинами на основе пептидов (Newax2).
[104] При одновременном введении двух или более терапевтических агентов не требуется, чтобы агенты вводились в одно и то же время или по одному и тому же пути, поскольку существует частичное совпадение периода времени, в течение которого агенты оказывают свое терапевтическое действие. Одновременное или последовательное введение предполагается как введение в разные дни или недели.
Изделия
Композиции, описанные здесь, также можно собирать в наборы вместе с инструкцией по применению. Например, наборы могут включать дозированные количества композиции, включающей один или несколько пищевых продуктов, ферментированных L.paracasei СВА L74. Инструкции по применению могут предоставляться на любых подходящих носителях. Например, они могут быть напечатаны на бумажном вкладыше на одном или нескольких языках или поставляться в звуковом или визуальном варианте (напр., на компакт-диске). Материалы для упаковки могут включать упаковочные материалы, например, флаконы, пакеты, контейнеры. В некоторых вариантах осуществления наборы могут включать дозированные количества композиции, содержащей L.paracasei СВА L74, в физиологически приемлемом носителе вместе с упаковочными материалами и инструкциями по применению в любом формате или в форматах, описанных выше. В некоторых вариантах осуществления наборы могут включать дозированные количества композиции, содержащей один или несколько метаболитов L.paracasei СВА L74. В некоторых вариантах осуществления композиции могут исключать клетки L.paracasei СВА L74, т.е. метаболиты могут быть частично или в основном отделены от клеток L.paracasei СВА L74. Компоненты в наборе могут быть пригодны для немедленного применения. Тем не менее, изобретение охватывает наборы, которые включают концентрированные составы и/или материалы, требующие разбавления перед применением.
Примеры
Пример 1: Материалы и способы
[105] Пептиды: α-глиадин Р31-Р43 (SEQ ID NO.: 1)и Р57-68 (SEQ ID NO.: 2) были синтезированы in vitro и связаны с флуорохромом, лиссамином, фирма Inbios, Неаполь, Италия. Хроматографические анализы показали, что пептиды имели чистоту 99%.
[106] Анализ на проникновение пептида Сасо2: Культуры клеток Сасо2, линия клеток эпителиальной раковой опухоли толстой кишки человека, инкубировали с мечеными пептидами в течение 15 минут. Меченые пептиды удалили путем многократной промывки и клетки исследовали под конфокальным микроскопом. Морфологический анализ показал, что после 15 минут инкубации меченые пептиды попадали в клетки и локализовались в эндоцитозных пузырьках, которые появились в виде маленьких цветных пятен. Количественный анализ проводили с использованием специализированного программного пакета, который оценил интенсивность флуоресценции множественных микроскопических полей.
[107] Культура клеток Сасо2: Клетки Сасо-2 были выращены в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (DMEM) (GIBCO, Сан-Джулиано-Миланезе, Италия), 10% фетальной бычьей сыворотке (FBS) (GIBCO, Сан-Джулиано-Миланезе, Италия) и 1 мМ глутамина (GIBCO, Сан-Джулиано-Миланезе, Италия), в инкубаторе при температуре 37°С при концентрации СО2 5%.
[108] Культура L.paracasei СВА L74: L.paracasei СВА L74 (инвентарный номер LMG Р-24778 в Международном депозитарии) была выделена, как описано в заявке WO 2012/177556, которая включена в данном документе по ссылке в полном объеме. Клетки выращивали в 50 мл среды DMEM с добавлением FBS и Glu в течение ночи при 37°С при 160 колебаний в минуту. Бактериальную концентрацию измеряли спектрофотометрически в спектрофотометре Бекман DU-7 при длине волны 600 нм. Показание оптической плотности (OD) использовали для расчета концентрации бактерий следующим образом: OD2=1,5×109 КОЕ/мл. Различные бактериальные концентрации, используемые для экспериментов, были получены разбавлением бактериальной культуры в свежей среде без антибиотика. Для экспериментов с использованием только супернатанта, бактериальную культуру центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 минут при комнатной температуре. Супернатант извлекли и профильтровали через фильтр с размером пор 0,2 микрон.
[109] Пептиды глиадина и EGF-Alexa-488: Синтетические пептиды (Inbios, чистота 95%, анализ MALDI-Toff, как и предполагалось) были получены фильтрацией Ultrasart-D20 (Sartorius AG, Геттинген, Германия). Пептид Р31-43 имел аминокислотную последовательность: LGQQQPFPPQQPY (SEQ ID NO.: 1). Пептид Р57-68 имел аминокислотную последовательность: QLQPFPQPQLPY (SEQ ID NO.: 1). Пептиды были конъюгированы лиссамином, красным флуорохромом, возбужденным HeNel лазером (543 нм) с эмиссией в диапазоне сверхвысоких частот 610 нм. EGF-Alexa-488 получен от Molecular Probes, Сан-Джулиано-Миланезе, Италия.
[110] Флуоресцентный анализ: Авторами выполнена проверка действия L.paracasei СВА L74 на проникновение пептидов глиадина или EGF-Alexa в клетки Сасо-2. Клетки Сасо2 выраптивали на стерильных покровных стеклах, переносили в 24-луночные планшеты и обрабатывали различными концентрациями L.paracasei СВА L74, в диапазоне от 104 до 108 КОЕ/мл. Для экспериментов, в которых использовали не содержащий клетки супернатант, клетки Сасо2 обрабатывали с помощью L.paracasei СВА L74, супернатант собрали от культур L.paracasei СВА L74, которые достигли плотности 108 КОЕ/мл. Супернатант использовали свежий или после воздействия тепла. В некоторых экспериментах супернатант нагревали при 80°С в течение 15 минут. В других экспериментах супернатант кипятили в течение 5 минут. Клетки Сасо2 обрабатывали различными бактериальными препаратами в атмосфере 5% СО2 при 37°С в течение 30 минут, а затем инкубировали с пептидами глиадина Р31-43-лиссамин (liss) или P57-68liss или с EGF-Alexa-488. Концентрации пептидов были следующие: P31-43liss и P57-68liss при 20 микрограмм/мл: немеченые пептиды использовали при концентрации 50 микрограмм/мл; EGF-Alexa-488 при концентрации 10 микрограмм/мл. После добавления пептидов клетки инкубировали в атмосфере 5% CO2 при 37°С в течение 30 минут. Затем среду удаляли путем трех промывок в среде PBS IX (Gibco). Покровные стекла фиксировали в течение короткого периода (5 минут) параформальдегидом 3% (Sigma-Aldrich) при комнатной температуре, а затем устанавливали и обследовали с помощью конфокального микроскопа (LSM 510 Zeiss). Изображения были получены и проанализированы с помощью программного обеспечения AIS Zeiss для оценки интенсивности флуоресценции исследуемого микроскопического поля. Увеличение микрофотографий было одинаковым для всех показанных чертежах (63х объектив). Меченые пептиды и EGF-Alexa оказались в эндоцитозных пузырьках, которые появляются в виде маленьких точек, окрашенных в красный цвет (пептиды) или в зеленый цвет (EGF).
[111] Статистический анализ: Статистический анализ и графики были получены от GraphPad Prism. Были рассчитаны средние и стандартные отклонения. Они оценивались по тесту Стьюдента. Результаты со значениями р<0,05 считались значимыми.
Пример 2: Влияние живых L.paracasei СВА L74 на проникновение пептида α-глиадина
[112] Живые L.paracasei СВА L74 уменьшили проникновение как Р31-43, так и Р57-68 в клетки СаСо2. На Фиг. 1 показаны конфокальные флюоресцентные изображения. Контрольные клетки (левые секции), которые инкубировали с меченым лиссамином Р31-43 в отсутствие L.paracasei СВА L74, показали разные профили флуоресценции, которые соответствовали Р31-43, содержащего эндоцитотические пузырьки (белые стрелки). В отличие от этого, флуоресценция была снижена в клетках, которые были инкубированы меченым лиссамином Р31-43 в присутствии L.paracasei СВА L74 (правые секции).
[113] Количественный анализ показал, что действие L.paracasei СВА L74 на проникновение Р31-43 зависело от дозы и было статистически значимым. На Фиг. 2 показаны результаты пяти независимых экспериментов на дублирующих образцах. Интенсивность флуоресценции рассчитали для 30 случайных полей в каждом образце. Как показано на Фиг. 2, обработка клеток СаСо2 с помощью 104, 106 и 108 L.paracasei СВА L74 привела к статистически значимому, дозозависимому уменьшению проникновения Р31-43.
[114] Аналогичное действие наблюдалось в отношении пептида Р57-68. Эксперимент, показанный на Фиг. 3, проводили точно так же, как и эксперимент на Фиг. 2, за исключением того, что вместо Р31-43 был использован Р57-68. Как показано на Фиг. 3, обработка клеток СаСо2 с помощью 104, 106 и 108 L.paracasei СВА L74 привела к статистически значимому, дозозависимому уменьшению проникновения Р57-68.
Пример 3: Действие выделенной ДНК L.paracasei СВА L74 на проникновение пептида α-глиадина
[115] ДНК из L.paracasei СВА L74 была извлечена и очищена с помощью стандартных способов. Как показано на Фиг. 4, обработка клеток СаСо2 с помощью Р31-43 в присутствии количества ДНК L.paracasei СВА L74, эквивалентного 108 клеткам, не блокировала проникновение пептида.
Пример 4: Действие супернатанта культуры L.paracasei СВА L74 на проникновение пептида α-глиадина
[116] Супернатант культуры L.paracasei СВА L74 собрали центрифугированием и культуральный супернатант профильтровали для удаления живых бактерий и клеточного дебриса. Супернатант от эквивалента 108 клеток нанесли на клетки СаСо2 в присутствии пептида Р31-43. Контрольные клетки CaCO2 обработали с помощью 108 живых клеток L.paracasei СВА L74. На Фиг. 5 приведены результаты четырех независимых экспериментов на дублирующих образцах. Интенсивность флуоресценции рассчитали для 30 случайных полей в каждом образце.
[117] Как показано на гистограмме на Фиг. 5а, обработка клеток СаСо2 живыми клетками L.paracasei СВА L74 снова привела к статистически существенному уменьшению проникновения пептида Р31-43. Обработка клеток СаСо2 супернатантом культуры L.paracasei СВА L74 привела к уменьшению такой же величины. Конфокальные изображения для данного эксперимента показаны на Фиг. 5b. Эти изображения наглядно демонстрируют, что супернатант культуры L.paracasei СВА L74 уменьшил проникновение пептида Р31-43.
[118] Результаты аналогичного эксперимента, в котором вместо Р31-43 был использован Р57-68, представлены на Фиг. 6. Обработка клеток СаСо2 живыми клетками L.paracasei СВА L74 снова привела к статистически значимому снижению проникновения пептида Р57-68 (Фиг. 6а). Обработка клеток СаСо2 супернатантом культуры L.paracasei СВА L74 привела к уменьшению такой же величины. Конфокальные изображения для данного эксперимента представлены на Фиг. 6b. Эти изображения наглядно показывают, что супернатант культуры L.paracasei СВА L74 уменьшил проникновение пептида Р57-68.
Пример 5: Действие термообработанного супернатанта культуры L.paracasei СВА L74 на проникновение пептида α-глиадина
[119] Супернатант культуры L.paracasei СВА L74 собирали в соответствии со способом из Примера 4 и затем нагревали в течение 30 минут либо при 37°, либо при 80°С в течение 30 минут. Нагретые супернатанты затем охладили и нанесли на клетки Сасо2 в присутствии Р31-43. На Фиг. 7 представлены результаты пяти независимых экспериментов на дублирующих образцах для контрольных клеток, не обработанных супернатантом, пяти независимых экспериментов на дублирующих образцах для контрольных клеток, обработанных неподогретым супернатантом («37°С») и двух независимых экспериментов на дублирующих образцах для клеток, прошедших обработку нагретым супернатантом («80°С»). Интенсивность флуоресценции рассчитали для 30 случайных полей в каждом образце. Как показано на Фиг. 7, нагретый до 80°С супернатант сохранил способность неподогретого супернатанта по блокировке проникновения пептида Р31-43 в клетки СаСо2. Конфокальные изображения для этого эксперимента показаны в правой секции Фиг. 7. Эти изображения наглядно демонстрируют, что термообработанный супернатант культуры L.paracasei СВА L74 уменьшил проникновение пептида Р31-43 в такой же степени, как и супернатант культуры L.paracasei СВА L74 без тепловой обработки. Взятые вместе, эти данные свидетельствуют о том, что действие супернатанта культуры L.paracasei СВА L74 не было результатом ферментативной активности.
Пример 6: Действие риса и овса, ферментированных L.paracasei СВА L74, на проникновение пептида α-глиадина
[120] Приготовили рис, ферментированный L.paracasei СВА L74.
Ферментированный рис, супернатант от ферментированного риса или термообработанный супернатант от ферментированного риса нанесли на клетки СаСо2 в присутствии пептида Р31-43 и проникновение пептида контролировали в соответствии со способом из Примера 2. Как показано на Фиг. 8, все три варианта - ферментированный рис, супернатант от ферментированного риса или термообработанный супернатант от ферментированного риса, уменьшили проникновение пептида по сравнению с необработанными клетками СаСо2. Как показано на Фиг. 9, уменьшение проникновения пептида Р31-43 в присутствии ферментированного риса было статистически значимым (правые столбцы). Аналогичное, статистически значимое действие наблюдалось в присутствии ферментированного овса (левые столбцы).
Пример 7: Действие риса и овса, ферментированных L.paracasei СВА L74, на проникновение декстран-техасского красного [Texas Red] в клетки СаСо2
[121] Приготовили ферментированные L.paracasei СВА L74 рис и овес. Как показано на Фиг. 10, инкубация клеток СаСо2 либо с ферментированным рисом, либо с ферментированным овсом приводила к статистически значимому уменьшению проникновения в клетки декстран- техасского красного по отношению к клеткам, которые были обработаны неферментированным рисом или овсом соответственно. Поскольку декстран, как правило, поглощается клетками через макропиноцитоз, эти данные свидетельствуют о том, что метаболиты L.paracasei СВА L74 могут блокировать макропиноцитозный путь.
Пример 8: Действие супернатанта культуры L.paracasei СВА L74 на проникновение эпидермального фактора роста (EGF) в клетки Сасо2
[122] Супернатант культуры L.paracasei СВА L74 собирали в соответствии со способом из Примера 4 и наносили на клетки Сасо2 в присутствии Alexa Fluor®-конъюгированного EGF (Invitrogen). Как показано на гистограмме на Фиг. 11, обработка клеток СаСо2 супернатантом культуры L.paracasei СВА L74 привела к статистически значимому уменьшению проникновения EGF в клетки. Конфокальные изображения по этому эксперименту представлены на Фиг. 12. Поскольку поглощение EGF требует связывания со специфическим рецептором, напр., с рецептором EGF, эти данные свидетельствуют о том, что метаболиты L.paracasei СВА L74 могут блокировать клатрин-опосредованный эндоцитозный путь.
Пример 9: Зависимое от концентрации действие L.paracasei СВА L74 на прникновение Р31-43 и Р57-68 в клетки Сасо2
[123] Клетки Сасо2 обработали с увеличением концентраций L.paracasei СВА L74 и затем инкубировали с пептидами глиадина P31-43liss или P57-68liss, как описано в Примере 1. Эндоцитозные пузырьки, которые содержали меченый Р31-43 или меченый Р57-68, появились в виде красных пятен с цитозольным распределением после 30 минут воздействия. Обработка клетками L.paracasei СВА L74 привела к дозозависимому уменьшению проникновения как Р31-43, так и Р57-68 в клетки Сасо-2. Как показано на Фиг. 13b, 13с и 13d, в отношении Р31-43, обработка с помощью 104, 106 и 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74 соответственно привела к уменьшению интенсивности флуоресценции по сравнению с интенсивностью флуоресценции в необработанных контрольных клетках (Фиг. 13а). Белые стрелки обозначают пузырьки, содержащие P31-43liss. Эти результаты представлены количественно на Фиг. 14. Интенсивность флуоресценции рассчитали для 30 случайных полей для каждого образца. Данные на Фиг. 14 представляют пять независимых экспериментов. На гистограмме на Фиг. 14 сравнивается интенсивность флуоресценции для необработанных контрольных клеток («UN») с интенсивностью флуоресценции клеток, которые подвергались воздействию Р31-43liss в присутствии 104, 106 или 108 КОЕ/мл клеток L.paracasei СВА L74. Обработка L.paracasei СВА L74 привела к статистически значимому уменьшению интенсивности флуоресценции на 50%, 70% и 75%, соответственно, для 104, 106 или 108 КОЕ/мл клеток L.paracasei СВА L74 (***=р<0,001).
[124] Как показано на Фиг. 15b, 15с и 15d для P57-68liss, обработка с помощью 104, 106 и 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74, соответственно, привела к уменьшению интенсивности флуоресценции по сравнению с интенсивностью флуоресценции в необработанных контрольных клетках (Фиг. 15а). Белые стрелки обозначают пузырьки, содержащие P57-68liss. Эти результаты представлены количественно на Фиг. 16. Интенсивность флуоресценции рассчитали для 30 случайных полей для каждого образца. Данные на Фиг. 16 представляют пять независимых экспериментов. На гистограмме на Фиг. 16 сравнивается интенсивность флуоресценции в отношении необработанных контрольных клеток («UN») с интенсивностью флуоресценции клеток, которые подвергались воздействию P57-68liss в присутствии 104, 106 или 108 КОЕ/мл клеток L.paracasei СВА L74. Обработка клетками L.paracasei СВА L74 привела к статистически значимому уменьшению интенсивности флуоресценции на 25%, 25% и 50% соответственно, для 104, 106 или 10 КОЕ/мл клеток L.paracasei СВА L74. Как показано на Фиг. 15b, 15c и 15d, для Р57-68, обработка с помощью 104, 106 и 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74 привела к уменьшению интенсивности флуоресценции на 25%, 25% и 50%, соответственно, по сравнению с необработанными контрольными клетками (***=р<0,001).
[125] Как показано на Фиг. 17, обработка с помощью 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74 уменьшила интенсивность флуоресценции на 75% в отношении Р31-43 и на 50% в отношении Р57-68. Эти данные свидетельствуют о том, что L.paracasei СВА L74 может быть более эффективным в уменьшении проникновения Р41-43, чем в уменьшении проникновения Р57-68, возможно, отражая различные эндоцитозные пути.
Пример 10: Зависимое от концентрации действие супернатанта L.paracasei СВА 174 на проникновение Р31-43 и Р57-68 в клетки Сасо2
[126] Клетки Сасо2 обработали супернатантом L.paracasei СВА L74 или ДНК L.paracasei СВА L74, как описано в Примере 1. Клетки Сасо2 инкубировали в течение 30 минут в супернатанте или ДНК из эквивалента 108 КОЕ/мл. Как показано на Фиг. 18b и 18с, обработка либо клетками L.paracasei СВА L74, либо супернатантом L.paracasei СВА L74, соответственно, привела к уменьшению интенсивности флуоресценции в клетках, подвергнутых воздействию Р31-43liss, по сравнению с тем, что наблюдается в необработанных контрольных клетках (Фиг. 18а). Эти результаты представлены количественно на Фиг. 19. Интенсивность флуоресценции рассчитали для 30 случайных полей для каждого образца. Данные на Фиг. 19 представляют пять независимых экспериментов. На гистограмме на Фиг. 19 сравнивается интенсивность флуоресценции для необработанных контрольных клеток («UN») с интенсивностью флуоресценции клеток, подвергнутых воздействию P31-43-liss в присутствии 108 КОЕ/мл клеток L.paracasei СВА L74 («LP 108») или супернатанта L.paracasei СВА L74 от культуры 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74 («Sup LP 108»). Как показано на Фиг. 19, супернатант L.paracasei СВА L74 значительно уменьшил проникновение Р31-43 в клетки СаСо2, рассчитанное как снижение интенсивности флуоресценции, примерно на 25% по сравнению с необработанными контрольными клетками (***=р 0,001).
[127] Как показано на Фиг. 20b и 20с, обработка либо клетками L.paracasei СВА L74, либо супернатантом L.paracasei СВА L74, соответственно, привела к снижению интенсивности флуоресценции в клетках, подвергнутых воздействию P57-68liss, по сравнению с тем, что наблюдается в необработанных контрольных клетках (Фиг. 20а). Эти результаты представлены количественно на Фиг. 21. На гистограмме на Фиг. 21 сравнивается интенсивность флуоресценции для необработанных контрольных клеток («UN») с интенсивностью флуоресценции клеток, подвергнутых воздействию P57-681iss в присутствии 108 КОЕ/мл клеток L.paracasei СВА L74 («LP 108») или супернатанта L.paracasei СВА L74 («Sup LP 108») от культуры 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74. Как показано на Фиг. 21, супернатант L.paracasei СВА L74 значительно уменьшил проникновение Р31-43 в клетки СаСо2, рассчитанное как снижение интенсивности флуоресценции, примерно на 40% по сравнению с необработанными контрольными клетками (***=р<0,001).
[128] В отличие от этого, обработка очищенной ДНК из L.paracasei СВА L74 не оказала никакого влияния на проникновение Р31-43 или Р57-68 в клетки СаСо2. Взятые вместе, эти данные свидетельствуют о том, что метаболит, отвечающий за уменьшение проникновения пептида, может секретироваться в бактериальный культуральный супернатант.
Пример 11: Влияние супернатанта L.paracasei СВА L74 на проникновение EGF-Alexa 488 в клетки Сасо2
[129] Клетки Сасо2 обработали супернатантом L.paracasei СВА L74 от культуры 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74 с последующей инкубацией с EGF-Alexa 488 в течение 30 минут, как описано в Примере 1. Как показано на Фиг. 22b, обработка супернатантом L.paracasei СВА L74 привела к снижению интенсивности флуоресценции в клетках, подвергнутых воздействию EGF-Alexa 488, по сравнению с тем, что наблюдается в необработанных контрольных клетках (Фиг. 22а). Эти результаты представлены количественно на Фиг. 23. Интенсивность флуоресценции рассчитали для 30 случайных полей для каждого образца. Данные на Фиг. 23 представляют пять независимых экспериментов. На гистограмме на Фиг. 23 сравнивается интенсивность флуоресценции для необработанных контрольных клеток («UN») с интенсивностью флуоресценции клеток, подвергнутых воздействию EGF-Alexa 488 в присутствии супернатанта L.paracasei СВА L74 («Sup LP 108»). Как показано на Фиг. 23, супернатант L.paracasei СВА L74 значительно уменьшил проникновение EGF-Alexa 488 в клетки СаСо2, рассчитанное как снижение интенсивности флуоресценции, примерно на 50% по сравнению с необработанными контрольными клетками. Оказалось, что проникновение EGF-Alexa 488 блокируется на клеточной мембране (***=р<0,001).
Пример 12: Действие супернатанта L.paracasei СВА L74 на проникновение Р31-43 в клетки Сасо2 после удаления супернатанта
[130] Клетки Сасо2 инкубировали с супернатантом L.paracasei СВА L74 от культуры 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74 в течение 30 минут, как описано в Примере 1. Супернатант L.paracasei СВА L74 затем удалили и заменили DMEM. Добавили P31-43liss, контроль проникновения пептида осуществляли, как описано в Примере 1. Как показано на Фиг. 24с, проникновение Р31-43-liss значительно уменьшилось по сравнению с необработанными контрольными клетками (Фиг. 24а) даже после удаления супернатанта L.paracasei СВА L74 и замены средой DMEM. На Фиг. 24b показана клетка Сасо2, которая была обработана супернатантом L.paracasei СВА L74, который не был удален. На гистограмме на Фиг. 25 сравнивается интенсивность флуоресценции для необработанных контрольных клеток («UN»); клеток, подвергнутых воздействию Р31-43-liss в присутствии супернатанта L.paracasei СВА L74 («Sup LP 108») и клеток, подвергнутых воздействию Р31-43-liss с последующим удалением супернатанта L.paracasei СВА L74 («МЕМ») (***=р<0,001).
Пример 13: Действие термообработанного супернатанта L.paracasei СВА L74 на проникновение Р31-43 в клетки Сасо2
[131] Клетки Сасо2 инкубировали с супернатантом L.paracasei СВА L74 (из культуры 108 КОЕ/мл L.paracasei СВА L74), которые подвергались тепловой обработке кипячением в течение 5 минут или путем инкубации при 80°С в течение 15 минут. Проникновение Р31-43-liss проанализировали, как описано в Примере 1. Как показано на Фиг. 26d, проникновение Р31-43-liss уменьшилось по сравнению с необработанными контрольными клетками (Фиг. 24а) даже после нагрева супернатанта L.paracasei СВА L74 до 80°С. Наоборот, проникновение Р31-43-liss уменьшалось незначительно (Фиг. 26с) по сравнению с необработанными контрольными клетками (Фиг. 24а), когда супернатант L.paracasei СВА L74 нагревали при 95°С - 100°С. На Фиг. 26b показаны клетки Сасо2, которые были обработаны супернатантом L.paracasei СВА L74, который не подвергали тепловой обработке. На гистограмме на Фиг. 27 сравнивается интенсивность флуоресценции для необработанных контрольных клеток («UN»); клеток, подвергнутых воздействию P31-43-liss в присутствии супернатанта L.paracasei СВА L74 («Sup LP 108»), не подвергавшемся тепловой обработке; клеток, подвергнутых воздействию P31-43-liss в присутствии супернатанта L.paracasei СВА L74, который подвергли кипячению («95° - 100°»); и клеток, подвергнутых воздействию P31-43-liss в присутствии супернатанта L.paracasei СВА L74, который нагревали при 80°С («70° - 80°»). Взятые вместе, эти данные свидетельствуют о том, что биологический эффектор в супернатанте L.paracasei СВА L74 не мог быть ферментом, поскольку ферментативная активность, как правило, разрушается под действием температуры 80°С (***=р<0,001).
Claims (33)
1. Композиция для уменьшения симптомов токсичности пептида глиадина у субъекта, имеющего связанное с глютеном расстройство, содержащая пробиотический микроорганизм Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, и/или супернатант культуры, продуцируемый ферментирующими Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, в комбинации с одним или более физиологически приемлемым носителем, где пробиотический микроорганизм и/или супернатант культуры уменьшает симптом токсичности пептида глиадина у субъекта, имеющего связанное с глютеном расстройство, за счет обеспечения повышенного барьера для транслокации пептида глиадина через слизистую оболочку кишечника у субъекта.
2. Композиция по п. 1, где супернатант культуры является термостабильным.
3. Композиция по п. 1, где супернатант культуры в основном не содержит клетки Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778.
4. Композиция по п. 1, где пептид глиадина представляет собой пептид α-глиадин.
5. Композиция по п. 4, где пептид α-глиадин имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из LGQQQPFPPQQPY (SEQ ID NO: 1); QLQPFPQPQLPY (SEQ ID NO: 2); LGQQQPFPPQQPYPQPQPF (SEQ ID NO: 3); и LQLQPFPQPQLPYPQPQLPYPQPQLPYPQPQPF (SEQ ID NO: 4).
6. Композиция по п. 1, где связанное с глютеном расстройство представляет собой целиакию или чувствительность к глютену.
7. Композиция по п. 1, где физиологически приемлемым носителем является пищевой продукт или фармацевтический носитель.
8. Композиция по п. 1, где в случае, если композиция содержит клетки пробиотического микроорганизма Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, указанные клетки являются нереплицирующимися.
9. Способ лечения субъекта, имеющего связанное с глютеном расстройство, содержащий:
a) идентификацию субъекта, нуждающегося в лечении;
b) введение эффективного количества композиции, содержащей пробиотический микроорганизм Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, и/или супернатант культуры, продуцируемый ферментирующими Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, в комбинации с одним или более физиологически приемлемым носителем, где пробиотический микроорганизм и/или супернатант культуры уменьшает симптом токсичности пептида глиадина за счет обеспечения повышенного барьера для транслокации пептида глиадина через слизистую оболочку кишечника у субъекта.
10. Способ по п. 9, где супернатант культуры является термостабильным.
11. Способ по п. 9, где супернатант культуры в основном не содержит клетки Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778.
12. Способ по п. 9, где пептид глиадин представляет собой пептид α-глиадин.
13. Способ по п. 12, где пептид α-глиадин имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из LGQQQPFPPQQPY (SEQ ID NO: 1); QLQPFPQPQLPY (SEQ ID NO: 2); LGQQQPFPPQQPYPQPQPF (SEQ ID NO: 3); и LQLQPFPQPQLPYPQPQLPYPQPQLPYPQPQPF (SEQ ID NO: 4).
14. Способ по п. 9, где связанное с глютеном расстройство представляет собой целиакию или чувствительность к глютену.
15. Способ по п. 9, где симптом токсичности пептида глиадина включает воспаление, аутоиммунную реакцию, желудочно-кишечный симптом, потерю веса, анемию, остеопороз, артрит, бесплодие, периферическую невропатию или печеночную недостаточность.
16. Способ по п. 9, где возраст субъекта не более 21 года.
17. Способ по п. 9, где способ дополнительно содержит стадию применения второго вида лечения в отношении связанного с глютеном расстройства.
18. Способ по п. 17, где вторым видом лечения является диетотерапия или лекарственная терапия.
19. Способ по п. 18, где диетотерапия представляет собой безглютеновую диету.
20. Способ по п. 9, где в случае, если композиция содержит клетки пробиотического микроорганизма Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, указанные клетки являются нереплицирующимися.
21. Применение пробиотического микроорганизма Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, и/или супернатанта культуры, продуцируемого ферментирующими Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, в комбинации с одним или более физиологически приемлемым носителем для приготовления композиции для уменьшения симптома токсичности пептида глиадина у субъекта, имеющего связанное с глютеном расстройство, где пробиотический микроорганизм и/или супернатант культуры уменьшает симптом токсичности пептида глиадина за счет обеспечения повышенного барьера для транслокации пептида глиадина через слизистую оболочку кишечника у субъекта.
22. Применение по п. 21, где супернатант культуры является термостабильным.
23. Применение по п. 21, где супернатант культуры в основном не содержат клетки Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778.
24. Применение по п. 21, где пептид глиадин представляет собой пептид α-глиадин.
25. Применение по п. 24, где пептид α-глиадин имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из LGQQQPFPPQQPY (SEQ ID NO: 1); QLQPFPQPQLPY (SEQ ID NO: 2); LGQQQPFPPQQPYPQPQPF (SEQ ID NO: 3); и LQLQPFPQPQLPYPQPQLPYPQPQLPYPQPQPF (SEQ ID NO: 4).
26. Применение по п. 21, где физиологически приемлемый носитель представляет собой пищевой продукт или фармацевтический носитель.
27. Применение по п. 21, где симптом токсичности пептида глиадина включает воспаление, аутоиммунную реакцию, желудочно-кишечный симптом, потерю веса, анемию, остеопороз, артрит, бесплодие, периферическую невропатию или печеночную недостаточность.
28. Применение по п. 21, где в случае, если композиция содержит клетки пробиотического микроорганизма Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, указанные клетки являются нереплицирующимися.
29. Набор для уменьшения симптомов токсичности пептида глиадина у субъекта, имеющего связанное с глютеном расстройство, содержащий дозированное количество композиции, содержащей пробиотический микроорганизм Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, и/или супернатант культуры, продуцируемый ферментирующими Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, в комбинации с одним или более физиологически приемлемым носителем, где пробиотический организм и/или супернатант культуры уменьшает симптом токсичности пептида глиадина у субъекта, имеющего связанное с глютеном расстройство, за счет обеспечения повышенного барьера для транслокации пептида глиадина через слизистую оболочку кишечника у субъекта, и одну или несколько позиций, выбранных из группы, состоящей из упаковочного материала, листовки-вкладыша с инструкциями по применению, стерильной жидкости, шприца и стерильного контейнера.
30. Набор по п. 29, где физиологически приемлемый носитель представляет собой пищевой продукт или фармацевтический носитель.
31. Набор по п. 29, где в случае, если композиция содержит клетки пробиотического микроорганизма Lactobacillus paracasei СВА L74, номер международного депонирования LMG Р-24778, указанные клетки являются нереплицирующимися.
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261661105P | 2012-06-18 | 2012-06-18 | |
US61/661,105 | 2012-06-18 | ||
US201261725693P | 2012-11-13 | 2012-11-13 | |
US61/725,693 | 2012-11-13 | ||
PCT/US2013/046286 WO2013192163A1 (en) | 2012-06-18 | 2013-06-18 | Gluten-related disorders |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2014150934A RU2014150934A (ru) | 2016-08-10 |
RU2654705C2 true RU2654705C2 (ru) | 2018-05-22 |
Family
ID=49769279
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2014150934A RU2654705C2 (ru) | 2012-06-18 | 2013-06-18 | Глютенозависимые расстройства |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10245300B2 (ru) |
EP (3) | EP2861242B1 (ru) |
CN (1) | CN104661671B (ru) |
AU (2) | AU2013277316B2 (ru) |
BR (1) | BR112014031666B1 (ru) |
CA (1) | CA2876963C (ru) |
DK (2) | DK3351554T3 (ru) |
ES (2) | ES2883552T3 (ru) |
IN (1) | IN2014DN10798A (ru) |
MX (1) | MX363899B (ru) |
NZ (1) | NZ702936A (ru) |
PL (2) | PL2861242T3 (ru) |
PT (2) | PT3351554T (ru) |
RU (1) | RU2654705C2 (ru) |
TR (1) | TR201814973T4 (ru) |
WO (1) | WO2013192163A1 (ru) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MY171851A (en) | 2011-06-20 | 2019-11-04 | Heinz Co Brands H J Llc | Probiotic compositions and methods |
PL2994150T3 (pl) | 2013-05-10 | 2019-09-30 | H.J. Heinz Company Brands Llc | Probiotyki i sposoby zastosowania |
AU2018207946A1 (en) * | 2017-01-12 | 2019-07-25 | Probi Ab | Probiotic compositions and uses thereof |
CN108567800A (zh) * | 2017-03-07 | 2018-09-25 | 景岳生物科技股份有限公司 | 副干酪乳杆菌菌株gmnl-653用于制备抗骨质流失的组合物的用途 |
KR102244007B1 (ko) * | 2019-02-14 | 2021-04-23 | 주식회사 메디뉴트롤 | 글루텐 분해능을 가지는 락토바실러스 파라카제이 glu70 균주를 유효성분으로 함유하는 글리아딘으로 야기된 염증성 장 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110293724A1 (en) * | 2002-02-14 | 2011-12-01 | Felix Hausch | Enzyme Treatment of Foodstuffs for Celiac Sprue |
Family Cites Families (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US1003929A (en) | 1911-04-04 | 1911-09-19 | Jacob T Lutz | Trace-carrier. |
EP0130228A1 (en) | 1983-07-01 | 1985-01-09 | Microlife Technics, Inc. | Fermentation method using a selected lactobacillus |
RU2134583C1 (ru) | 1996-02-29 | 1999-08-20 | Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия | Способ санации женщин с массивной микробной обсемененностью грудного молока |
AU3173497A (en) | 1996-06-21 | 1998-01-14 | Quest International B.V. | Fermentation of fruit products |
SE510813C2 (sv) | 1997-12-08 | 1999-06-28 | Arla Ekonomisk Foerening | Bakteriestam av arten Lactobacillus Paracasei subsp. paracasei, sammansättning därav för användning i livsmedel, samt produkt innehållande stammen |
EP1034787A1 (en) | 1999-03-11 | 2000-09-13 | Société des Produits Nestlé S.A. | Lactobacillus strains preventing diarrhea caused by pathogenic bacteria |
FI110668B (fi) | 2000-06-20 | 2003-03-14 | Aboatech Ab Oy | Probioottien käyttö atooppisten sairauksien primaariseen ehkäisyyn |
SE0003100D0 (sv) | 2000-09-01 | 2000-09-01 | Probi Ab | New strains |
KR100419132B1 (ko) | 2000-12-29 | 2004-02-18 | 조성근 | 위·장 점막 부착성과 증식성, 내산성, 내담즙성 및헬리코박터 파일로리, 대장균 0157:h7에 대한 항균성이우수한 락토바실러스 파라카제이 서브스패시즈 파라카제이csk 01 |
EP1364586A1 (en) | 2002-05-24 | 2003-11-26 | Nestec S.A. | Probiotics and oral tolerance |
ES2311729T5 (es) | 2002-06-28 | 2013-02-14 | Biosearch S.A. | Cepas probióticas, un procedimiento para la selección de ellas, composiciones de las mismas y su uso |
US7955834B2 (en) | 2004-06-03 | 2011-06-07 | Biogaia Ab | Method for improved breast milk feeding to reduce the risk of allergy |
WO2007066773A1 (ja) | 2005-12-08 | 2007-06-14 | Kirin Holdings Kabushiki Kaisha | イソフムロン類包接体およびそれを含有する組成物 |
US20110165127A1 (en) | 2006-06-09 | 2011-07-07 | Fabiola Masri | Dairy-derived probiotic compositions and uses thereof |
WO2008003782A1 (en) | 2006-07-07 | 2008-01-10 | Alpro Nv | Method for preparing a dairy analogue |
CN101451158A (zh) | 2007-12-04 | 2009-06-10 | 黑龙江大学 | 副干酪乳杆菌产生的抗菌肽的分离纯化方法 |
EP2110027A1 (en) | 2008-04-01 | 2009-10-21 | Nestec S.A. | Long-chain polyunsaturated fatty acids (LC-PUFA) in maternal nutrition during pregnancy and lactation |
BRPI0912106A2 (pt) | 2008-05-27 | 2015-10-13 | Nestec Sa | probióticos para melhorar a microbiota intestinal |
EP2138187A1 (en) | 2008-06-24 | 2009-12-30 | Nestec S.A. | Probiotics, secretory IgA and infection |
US20100196341A1 (en) | 2009-02-05 | 2010-08-05 | Syngen Biotech Co., Ltd. | Novel Lactobacillus paracasei subsp. paracasei SG96, a Bacteriostatic Composition Containing the same and Use Thereof |
EP2308498A1 (en) | 2009-09-30 | 2011-04-13 | Nestec S.A. | Administration of Bifidobacterium breve during infancy to prevent inflammation later in life |
US20130121976A1 (en) | 2010-03-12 | 2013-05-16 | Agusti Montserrat Carreras | Lactic Acid Bacteria for Coeliac Disease |
CN102021127B (zh) | 2010-07-28 | 2012-05-30 | 江南大学 | 一株副干酪乳杆菌及其应用 |
EP2449891A1 (en) | 2010-11-05 | 2012-05-09 | Nestec S.A. | Drinking yoghurt preparations containing non-replicating probiotic micro-organisms |
EP2449890A1 (en) | 2010-11-05 | 2012-05-09 | Nestec S.A. | Powdered cereal compositions comprising non-replicating probiotic microorganisms |
EP2455094A1 (en) | 2010-11-11 | 2012-05-23 | Nestec S.A. | Non-replicating probiotic micro-organisms protect children against gastrointestinal infections |
EP2510932A1 (en) | 2011-04-15 | 2012-10-17 | Nestec S.A. | Lactobacillus paracasei NCC2461 (ST11) for use by perinatal maternal administration in the reduction and prevention of allergies in progeny |
MY171851A (en) | 2011-06-20 | 2019-11-04 | Heinz Co Brands H J Llc | Probiotic compositions and methods |
EP2761691A4 (en) | 2011-09-28 | 2015-04-22 | Phillips 66 Co | COMPOSITE SOLID OXIDE FUEL CELL ELECTROLYTE |
PL2994150T3 (pl) | 2013-05-10 | 2019-09-30 | H.J. Heinz Company Brands Llc | Probiotyki i sposoby zastosowania |
-
2013
- 2013-06-18 US US14/408,108 patent/US10245300B2/en active Active
- 2013-06-18 PL PL13807318T patent/PL2861242T3/pl unknown
- 2013-06-18 TR TR2018/14973T patent/TR201814973T4/tr unknown
- 2013-06-18 CN CN201380032073.2A patent/CN104661671B/zh active Active
- 2013-06-18 IN IN10798DEN2014 patent/IN2014DN10798A/en unknown
- 2013-06-18 PT PT181579905T patent/PT3351554T/pt unknown
- 2013-06-18 AU AU2013277316A patent/AU2013277316B2/en active Active
- 2013-06-18 ES ES18157990T patent/ES2883552T3/es active Active
- 2013-06-18 BR BR112014031666-0A patent/BR112014031666B1/pt active IP Right Grant
- 2013-06-18 PT PT13807318T patent/PT2861242T/pt unknown
- 2013-06-18 DK DK18157990.5T patent/DK3351554T3/da active
- 2013-06-18 RU RU2014150934A patent/RU2654705C2/ru active
- 2013-06-18 CA CA2876963A patent/CA2876963C/en active Active
- 2013-06-18 EP EP13807318.4A patent/EP2861242B1/en active Active
- 2013-06-18 MX MX2014015314A patent/MX363899B/es active IP Right Grant
- 2013-06-18 NZ NZ702936A patent/NZ702936A/en unknown
- 2013-06-18 EP EP21165677.2A patent/EP3901164A1/en active Pending
- 2013-06-18 EP EP18157990.5A patent/EP3351554B1/en active Active
- 2013-06-18 PL PL18157990T patent/PL3351554T3/pl unknown
- 2013-06-18 WO PCT/US2013/046286 patent/WO2013192163A1/en active Application Filing
- 2013-06-18 ES ES13807318.4T patent/ES2691087T3/es active Active
- 2013-06-18 DK DK13807318.4T patent/DK2861242T3/en active
-
2018
- 2018-05-21 AU AU2018203543A patent/AU2018203543B2/en active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110293724A1 (en) * | 2002-02-14 | 2011-12-01 | Felix Hausch | Enzyme Treatment of Foodstuffs for Celiac Sprue |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
D ARIENZO R., et al., Modulation of the immune response by probiotic strains in a mouse model of gluten sensitivity.Cytokine. 2009 Dec;48(3):254-9. doi: 10.1016/j.cyto.2009.08.003. Epub 2009 Sep 6. * |
D ARIENZO R., et al., Modulation of the immune response by probiotic strains in a mouse model of gluten sensitivity.Cytokine. 2009 Dec;48(3):254-9. doi: 10.1016/j.cyto.2009.08.003. Epub 2009 Sep 6. DI CAGNO R., et al., Use of selected sourdough strains of Lactobacillus for removing gluten and enhancing the nutritional properties of gluten-free bread.J Food Prot. 2008 Jul;71(7):1491-5. RIZZELLO CG., et al., Highly efficient gluten degradation by lactobacilli and fungal proteases during food processing: new perspectives for celiac disease.Appl Environ Microbiol. 2007 Jul;73(14):4499-507. Epub 2007 May 18. * |
DI CAGNO R., et al., Use of selected sourdough strains of Lactobacillus for removing gluten and enhancing the nutritional properties of gluten-free bread.J Food Prot. 2008 Jul;71(7):1491-5. * |
RIZZELLO CG., et al., Highly efficient gluten degradation by lactobacilli and fungal proteases during food processing: new perspectives for celiac disease.Appl Environ Microbiol. 2007 Jul;73(14):4499-507. Epub 2007 May 18. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104661671B (zh) | 2020-10-23 |
AU2013277316A1 (en) | 2015-01-22 |
PL2861242T3 (pl) | 2019-04-30 |
CA2876963C (en) | 2021-07-06 |
EP3351554A1 (en) | 2018-07-25 |
IN2014DN10798A (ru) | 2015-09-04 |
AU2018203543A1 (en) | 2018-06-07 |
PT3351554T (pt) | 2021-08-06 |
CA2876963A1 (en) | 2013-12-27 |
ES2691087T3 (es) | 2018-11-23 |
DK2861242T3 (en) | 2018-10-29 |
PT2861242T (pt) | 2018-11-07 |
RU2014150934A (ru) | 2016-08-10 |
MX2014015314A (es) | 2015-10-29 |
PL3351554T3 (pl) | 2021-11-15 |
US20150174199A1 (en) | 2015-06-25 |
WO2013192163A1 (en) | 2013-12-27 |
US10245300B2 (en) | 2019-04-02 |
ES2883552T3 (es) | 2021-12-09 |
EP2861242A4 (en) | 2016-01-20 |
TR201814973T4 (tr) | 2018-11-21 |
EP2861242A1 (en) | 2015-04-22 |
AU2018203543B2 (en) | 2020-02-27 |
DK3351554T3 (da) | 2021-08-30 |
MX363899B (es) | 2019-04-05 |
AU2013277316B2 (en) | 2018-03-01 |
NZ702936A (en) | 2017-06-30 |
BR112014031666A2 (pt) | 2017-10-31 |
EP3901164A1 (en) | 2021-10-27 |
EP3351554B1 (en) | 2021-06-09 |
BR112014031666B1 (pt) | 2022-10-04 |
EP2861242B1 (en) | 2018-08-08 |
CN104661671A (zh) | 2015-05-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2018203543B2 (en) | Gluten-related disorders | |
RU2748839C2 (ru) | Композиции, способы и наборы для стимулирования мукозальной иммунной системы | |
AU2006215205B2 (en) | Composition for immunostimulation | |
EP3470074B1 (en) | Probiotics | |
WO2019129807A1 (en) | Serpin production | |
AU2017235999B2 (en) | Probiotic compositions and methods | |
Abdou et al. | Lysozyme under holder pasteurized denaturation enhance the antioxidant's stability and quality attributes of functional yogurt | |
CN114402062A (zh) | 产生丝氨酸蛋白酶抑制剂 | |
NZ619099B2 (en) | Probiotic compositions and methods |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant |