RU2642327C1 - Способ прогноза развития патогенетического процесса по некультивируемому или культивируемому типу в эксперименте - Google Patents
Способ прогноза развития патогенетического процесса по некультивируемому или культивируемому типу в эксперименте Download PDFInfo
- Publication number
- RU2642327C1 RU2642327C1 RU2016139330A RU2016139330A RU2642327C1 RU 2642327 C1 RU2642327 C1 RU 2642327C1 RU 2016139330 A RU2016139330 A RU 2016139330A RU 2016139330 A RU2016139330 A RU 2016139330A RU 2642327 C1 RU2642327 C1 RU 2642327C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- day
- cultured
- alt
- development
- alkaline phosphatase
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G09—EDUCATION; CRYPTOGRAPHY; DISPLAY; ADVERTISING; SEALS
- G09B—EDUCATIONAL OR DEMONSTRATION APPLIANCES; APPLIANCES FOR TEACHING, OR COMMUNICATING WITH, THE BLIND, DEAF OR MUTE; MODELS; PLANETARIA; GLOBES; MAPS; DIAGRAMS
- G09B23/00—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes
- G09B23/28—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes for medicine
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к патофизиологии, и может быть использовано для прогноза развития патогенетического процесса по культивируемому и некультивируемому типу при инфекционных заболеваниях. Способ заключается в том, что от больных с гнойно-воспалительными процессами выделяют культуры P. aeruginosa и S. aureus, получают из них фракции культивируемых и некультивируемых бактерий. Затем ассоциацию таких бактерий вводят кроликам подкожно в количестве 104-105 микробных клеток в 1 мл. На 1-2 и 4-5 сутки после этого определяют щелочную фосфатазу и АЛТ в сыворотке крови животных. При показателе щелочной фосфатазы на 1-2 сутки 205,0-391,0 u/L, а на 4-5 сутки - 308,0-483,0 u/L и показателе АЛТ на 1-2 сутки 53,0-63,0 u/L, а на 4-5 сутки - 57,0-69,0 u/L прогнозируют развитие инфекционного процесса по некультивируемому типу. При показателе щелочной фосфатазы на 4-5 сутки 485,0-652,0 u/L и АЛТ 36,5-38,0 u/L прогнозируют развитие инфекционного процесса по культивируемому типу. Способ обеспечивает прогноз развития различных типов инфекционного процесса при простоте и дешевизне моделирования, результаты которого могут быть использованы в изучении патогенеза заболевания у людей при разработке методов диагностики и лечения таких больных. 2 пр., 2 табл.
Description
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к патофизиологии, и может быть использовано для прогноза динамики развития патогенетического процесса по культивируемому или некультивируемому типу при инфекционном процессе на основании биохимических тестов.
Одной из наиболее сложных проблем здравоохранения, имеющих медицинскую и социально-экономическую значимость, является развитие инфекционного процесса по культивируемому и некультивируемому типу.
В настоящее время известно более 70 видов микроорганизмов, относящихся к 40 родам, которые способны переходить в некультивируемые состояние. Выделено более 60% видов грамотрицательных некультивируемых форм бактерий (НФБ) и около 40% грамположительных [Соколенко А.В., Шаманская Е.П. Некультивируемые формы патогенных бактерий и здоровье человека // Валеология. - 2008. - №2. - С. 10-20; Козлов Л.Б., Диц Е.В. Роль микробных ассоциаций в инфекционной патологии человека // Фундаментальные исследования, 2013. - №9. - С. 366-370; Соколенко А.В. Некультивируемые формы бактерий: распространение в природе, индукторы некультивируемого состояния и реверсии // Современные наукоемкие технологии. - 2006. - №2 - С. 11-15; Heim S. Et al. The viable but nonculturable state and starvation are different stress responses of Enterococcus faecalis, as determined by proteome analysis // J. Bacteriol - 2002. - Vol. 184. - №23. - P. 6739-6745].
В опытах на животных установлены различия в динамике развития патологических процессов, возникающих при инфекционных заболеваниях, вызванных культивируемыми и некультивируемыми бактериями. Инфекционный процесс, вызванный ассоциацией культивируемых бактерий P. aeruginosa и S. Aureus, обуславливал развитие патологического процесса в организме кроликов, несовместимых с жизнью, на 8-9 день болезни (погибло 69,3% кроликов взятых в опыт), а некультивируемые бактерии этих же видов уже на вторые сутки вызывали гибель кроликов (через 54 часа болезни кроликов погибло 30,8% животных), то есть выявлены различия в динамике развития инфекционного процесса по культивируемому и некультивируемому типу. Динамика развития инфекционного процесса при культивируемом и некультивируемом типе была обусловлена различиями патологических изменений в организме животных. При культивируемом типе инфекционного процесса патогенез заболевания характеризовался преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта с летальным исходом на 8 день болезни, а при некультивируемом типе инфекционного процесса патогенез заболевания характеризовался преимущественным поражением тканей головного мозга с летальным исходом на второй день болезни животных [Сахаров С.П., Козлов Л.Б. Система диагностики инфекционных осложнений и прогнозирование исходов ожоговой болезни у детей (клинико-экспериментальные исследования): монография // Екатеринбург: Изд-во Урал. ун-та, 2014. 252 с.].
Результаты проведенных исследований свидетельствуют о различиях в клинике и патогенезе инфекционного процесса, вызванного культивируемыми и некультивируемыми бактериями, но не представлено данных, позволяющих прогнозировать развитие патогенетического процесса по культивируемому или по некультивируемому типу.
В патентной литературе описано выделение некультивируемых бактерий [патент RU №2470074 от 20.12.2012 г. Бюл. №35], прогнозирование течения клещевых инфекций, внебольничных пневмоний, воспалительных заболеваний органов мочевой системы, используя клинические и иммунологические данные [патент RU №2376938 от 27.12.2009 г. Бюл. №36; патент RU №2472155 от 10.01.2013 г. Бюл. №1; патент RU №2517110 от 27.05.2014 г. Бюл. №15], прогнозирование течения экземы по определению кортизола, гастрина, аполипопротеина А1 и IL-6 [патент RU №2461836 от 20.09.2012 г. Бюл. №26].
В перечисленных патентах прогнозирование инфекционного процесса бактериальной природы проводят преимущественно в случае развития инфекционного процесса по культивируемому типу. Данных об особенностях развития патогенетического процесса по некультивируемому типу в описанной литературе не представлено.
Известен способ прогнозирования исхода заболевания больных распространенным гнойным перитонитом [патент RU №2292048 С2 от 20.01.2007 г. Бюл. №2]. В данном изобретении не учитывается влияние некультивируемых бактерий на инфекционный процесс, а прогноз клинического течения заболевания основан на основании изменения сложных показателей липидного обмена в сыворотках крови больных.
Следовательно, нам не удалось выявить способа-аналога с аналогичным назначением, представленным в материалах настоящей заявки. Выявлены аналоги с другим назначением.
Задачей настоящего изобретения является выявить достоверные критерии, позволяющие прогнозировать развитие патогенетического процесса по культивируемому или по некультивируемому типу на основании биохимических тестов, определяемых при исследовании сывороток крови.
Технический результат - простой, не требующий больших материальных затрат, и основан на исследовании сывороток крови в конце инкубационного периода или в продромальном периоде для прогноза патогенетического процесса по некультивируемому или по культивируемому типу на основании динамики изменения концентрации щелочной фосфатазы и аланинаминотрансферазы (АЛТ) в сыворотках крови.
Теоретическое обоснование возможности использования предложенных биохимических тестов нашло отражение в периодической литературе.
Щелочная фосфатаза участвует в транспорте фосфора в организме. При патологическом процессе происходит повышение ее количества в сыворотке крови в основном за счет разрушения клеток, богатых фосфором, в частности при заболеваниях печени.
АЛТ - эндогенный внутриклеточный фермент, который выделяется в кровь при разрушении клеток, а также при некрозе клеток. Для этого фермента не характерна органная специфичность.
Технический результат предложенного способа достигается тем, что способ прогноза развития патогенетического процесса по некультивируемому или культивируемому типу в эксперименте, заключающийся в том, что от больных с гнойно-воспалительными процессами выделяют культуры P. aeruginosa и S. aureus, получают из них фракции культивируемых и некультивируемых бактерий, и вводят ассоциацию таких бактерий кроликам подкожно в количестве 104-105 микробных клеток в 1 мл, затем на 1-2 и 4-5 сутки после этого определяют щелочную фосфатазу и АЛТ в сыворотке крови животных, и при показателе щелочной фосфатазы на 1-2 сутки 205,0-391,0 u/L, а на 4-5 сутки - 308,0-483,0 u/L и показателе АЛТ на 1-2 сутки 53,0-63,0 u/L, а на 4-5 сутки - 57,0-69,0 u/L прогнозируют развитие инфекционного процесса по некультивируемому типу, а при показателе щелочной фосфатазы на 4-5 сутки 485,0-652,0 u/L и АЛТ 36,5-38,0 u/L прогнозируют развитие инфекционного процесса по культивируемому типу.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образам: от больных с гнойно-воспалительными процессами выделяют культуры P. aeruginosa и S. aureus. Популяции выделенных бактерий содержат культивируемые и некультивируемые бактерии соответствующих видов. Смесь бактерий вводят кроликам породы «шиншилла» мужского пола массой 2230-2295 г подкожно в левое бедро в концентрации 104-105 микробных клеток в 1 мл. На 1-2 сутки, а затем на 4-5 сутки у кроликов берут кровь и определяют наличие в сыворотках крови количество щелочной фосфатазы и АЛТ. При показателе щелочной фосфатазы на 1-2 сутки болезни кроликов 205,0-391,0 u/L, а на 4-5 сутки - 308,0-483,0 u/L и показателе АЛТ на 1-2 сутки 53,0-63,0 u/L, а на 4-5 сутки - 57,0-69,0 u/L прогнозируют развитие патогенетического процесса по некультивируемому типу, а при показателе щелочной фосфатазы на 4-5 сутки 485,0-652,0 u/L и показателе АЛТ 36,5-38,0 u/L прогнозируют развитие патогенетического процесса по культивируемому типу.
Примеры практического использования предлагаемого способа
Пример 1. От больного с гнойно-воспалительным процессом выделены культуры P. aeruginosa и S. aureus. Популяции выделенных бактерий содержали культивируемые и некультивируемые формы бактерий соответствующих видов. В качестве экспериментальной модели взят кролик породы «шиншилла» мужского пола массой 2260 г. Смесь бактерий P. aeruginosa и S. aureus ввели кролику подкожно в левое бедро в концентрации 104-105 микробных клеток в 1 мл.
На 2 сутки у кролика взяли кровь из вены для определения в сыворотке крови количества щелочной фосфатазы и АЛТ. Показатель щелочной фосфатазы составил 362,0 u/L, а показатель АЛТ - 59,3 u/L. На основании проведенных биохимических исследований прогнозировано развитие инфекционного процесса по некультивируемому типу. Животное погибло на 6 сутки после заражения. Гистологические исследования показали, что патологический процесс развивался по некультивируемому типу, с преимущественным поражением тканей головного мозга.
Пример 2. От больного с гнойно-воспалительным процессом выделили культуры P. aeruginosa и S. Aureus, содержащие культивируемые и некультивируемые формы бактерий. В качестве экспериментальной модели взят кролик породы «шиншилла» мужского пола массой 2280 г. Бактерии P. aeruginosa и S. aureus ввели кролику подкожно в левое бедро в концентрации 104-105 микробных клеток в 1 мл. На 4 сутки болезни кролика у животного взяли кровь и определили наличие в сыворотке крови количество щелочной фосфатазы и АЛТ. Показатель щелочной фосфатазы составил 623,0 u/L, а АЛТ 37,1-u/L. На основании проведенных биохимических исследований прогнозировано развитие инфекционного процесса по культивируемому типу. Животное погибло на 11 день болезни. Результаты гистологических исследований показали, что патогенетический процесс развивался по культивируемому типу, с признаками преимущественного поражения желудочно-кишечного тракта.
Пример 3. От больного с гнойно-воспалительным процессом выделены культуры P. aeruginosa и S. Aureus, содержащие культивируемые и некультивируемые формы бактерий. В качестве экспериментальной модели взят кролик породы «шиншилла» мужского пола массой 2260 г. Бактерий P. aeruginosa и S. aureus ввели кролику подкожно в левое бедро в концентрации 104-105 микробных клеток в 1 мл.
На 4 сутки у кролика взяли кровь из вены и определили наличие в сыворотках крови количество щелочной фосфатазы и АЛТ. Показатель щелочной фосфатазы составил 410,0 u/L, а показатель АЛТ - 68,3 u/L. На основании проведенных биохимических исследований прогнозировано развитие инфекционного процесса по некультивируемому типу. Животное погибло на 4 сутки после заражения. Гистологические исследования показали, что патогенетический процесс развивался по некультивируемому типу, с преимущественным поражением тканей головного мозга.
Приведенные примеры свидетельствуют о возможности применения данного способа для выявления развития инфекционного процесса по культивируемому или по некультивируемому типу.
Результаты биохимических исследований сывороток крови кроликов инфицированных культивируемыми и некультивируемыми бактериями представлены в таблицах 1 и 2.
Экспериментальные исследования на кроликах проведены в виварии ФГБОУ ВПО Государственного аграрного университета Северного Зауралья, микробиологические исследования проведены на базе микробиологической лаборатории Тюменского филиала ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии по железнодорожному транспорту», а биохимические исследования проведены на автоматическом биохимическом анализаторе BS 200 (Mindray) на базе ФБУН ТНИИКИП Роспотребнадзора. Всего в эксперименте находилось 72 кролика породы «шиншилла».
Предложенный способ легко воспроизводим, не требует больших материальных затрат и в продромальном периоде заболевания позволяет прогнозировать развитие инфекционного процесса по некультивируемому или культивируемому типу. Выявленная динамика биохимических показателей в организме кроликов может быть использована для экстраполяции полученных данных в процессе анализа патогенеза инфекционных заболеваний у людей, что является необходимым для совершенствования диагностики и лечения инфекционных больных.
Claims (1)
- Способ прогноза развития патогенетического процесса по некультивируемому или культивируемому типу в эксперименте, заключающийся в том, что от больных с гнойно-воспалительными процессами выделяют культуры P. aeruginosa и S. aureus, получают из них фракции культивируемых и некультивируемых бактерий и вводят ассоциацию таких бактерий кроликам подкожно в количестве 104-105 микробных клеток в 1 мл, затем на 1-2 и 4-5 сутки после этого определяют щелочную фосфатазу и АЛТ в сыворотке крови животных, и при показателе щелочной фосфатазы на 1-2 сутки 205,0-391,0 u/L, а на 4-5 сутки - 308,0-483,0 u/L и показателе АЛТ на 1-2 сутки 53,0-63,0 u/L, а на 4-5 сутки - 57,0-69,0 u/L прогнозируют развитие инфекционного процесса по некультивируемому типу, а при показателе щелочной фосфатазы на 4-5 сутки 485,0-652,0 u/L и АЛТ 36,5-38,0 u/L прогнозируют развитие инфекционного процесса по культивируемому типу.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016139330A RU2642327C1 (ru) | 2016-10-06 | 2016-10-06 | Способ прогноза развития патогенетического процесса по некультивируемому или культивируемому типу в эксперименте |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016139330A RU2642327C1 (ru) | 2016-10-06 | 2016-10-06 | Способ прогноза развития патогенетического процесса по некультивируемому или культивируемому типу в эксперименте |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2642327C1 true RU2642327C1 (ru) | 2018-01-24 |
Family
ID=61023612
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016139330A RU2642327C1 (ru) | 2016-10-06 | 2016-10-06 | Способ прогноза развития патогенетического процесса по некультивируемому или культивируемому типу в эксперименте |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2642327C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2817665C1 (ru) * | 2023-07-14 | 2024-04-17 | Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Тюменский Государственный Медицинский Университет" Министерства Здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования инфекционного процесса, вызванного культивируемыми и некультивируемыми бактериями Pseudomonas aeruginosa, в эксперименте |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0648490A2 (en) * | 1993-08-24 | 1995-04-19 | Kanegafuchi Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Septicemia suppressing substitution fluid preparation |
| RU2470652C2 (ru) * | 2007-05-18 | 2012-12-27 | Нестек С.А. | Пробиотики в пред- и/или послеоперационный период |
| RU2472858C2 (ru) * | 2011-06-27 | 2013-01-20 | Учреждение Российской академии наук "Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения Российской академии наук" | Способ прогнозирования транслокации бактерий в кровь при генерализованном хроническом пародонтите |
| RU2521364C2 (ru) * | 2007-03-01 | 2014-06-27 | Проби Аб | Применение lactobacillus plantarum для повышения бактериального разнообразия |
-
2016
- 2016-10-06 RU RU2016139330A patent/RU2642327C1/ru active IP Right Revival
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0648490A2 (en) * | 1993-08-24 | 1995-04-19 | Kanegafuchi Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Septicemia suppressing substitution fluid preparation |
| RU2521364C2 (ru) * | 2007-03-01 | 2014-06-27 | Проби Аб | Применение lactobacillus plantarum для повышения бактериального разнообразия |
| RU2470652C2 (ru) * | 2007-05-18 | 2012-12-27 | Нестек С.А. | Пробиотики в пред- и/или послеоперационный период |
| RU2472858C2 (ru) * | 2011-06-27 | 2013-01-20 | Учреждение Российской академии наук "Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения Российской академии наук" | Способ прогнозирования транслокации бактерий в кровь при генерализованном хроническом пародонтите |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| VAN DER HEIJDEN KM et al. Intestinal translocation of clinical isolates of vancomycin-resistant Enterococcus faecalis and ESBL-producing Escherichia coli in a rat model of bacterial colonization and liver ischemia/reperfusion injury. PLoS One. 2014 Sep 25;9(9):e108453. * |
| САХАРОВ С.П. и др. Система диагностики инфекционных осложнений и прогнозирование исходов ожоговой болезни у детей (клинико-экспериментальные исследования): монография, Екатеринбург, 2014. 252. * |
| СОКОЛЕНКО А.В. Некультивируемые формы бактерий: распространение в природе, индукторы некультивируемого состояния и реверсии. Современные наукоемкие технологии, 2006, N 2, С. 11-15. * |
| СОКОЛЕНКО А.В. Некультивируемые формы бактерий: распространение в природе, индукторы некультивируемого состояния и реверсии. Современные наукоемкие технологии, 2006, N 2, С. 11-15. САХАРОВ С.П. и др. Система диагностики инфекционных осложнений и прогнозирование исходов ожоговой болезни у детей (клинико-экспериментальные исследования): монография, Екатеринбург, 2014. 252. VAN DER HEIJDEN KM et al. Intestinal translocation of clinical isolates of vancomycin-resistant Enterococcus faecalis and ESBL-producing Escherichia coli in a rat model of bacterial colonization and liver ischemia/reperfusion injury. PLoS One. 2014 Sep 25;9(9):e108453. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2817665C1 (ru) * | 2023-07-14 | 2024-04-17 | Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Тюменский Государственный Медицинский Университет" Министерства Здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования инфекционного процесса, вызванного культивируемыми и некультивируемыми бактериями Pseudomonas aeruginosa, в эксперименте |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Selden et al. | Central nervous system stem cell transplantation for children with neuronal ceroid lipofuscinosis | |
| Pedersen et al. | Biofilm research in bovine mastitis | |
| VATNIKOV et al. | Research on the antibacterial and antimycotic effect of the phytopreparation Farnesol on biofilm-forming microorganisms in veterinary medicine. | |
| Pradhan et al. | Tissue responses to Shiga toxin in human intestinal organoids | |
| Amores et al. | Presence of contagious agalactia causing mycoplasmas in Spanish goat artificial insemination centres | |
| Kutlu et al. | The first report of Brucella suis biovar 1 isolation in human in Turkey | |
| Ezeigbo et al. | Incidence of urinary tract infection (UTI) among pregnant women attending antenatal clinics at some selected hospitals in Aba, southeastern Nigeria | |
| RU2642327C1 (ru) | Способ прогноза развития патогенетического процесса по некультивируемому или культивируемому типу в эксперименте | |
| Erdogan et al. | Brucella melitensis infection in total knee arthroplasty: a case report | |
| Castellani et al. | Fate of pathogenic bacteria in microcosms mimicking human body sites | |
| RU2569456C1 (ru) | Питательная среда для выявления возбудителя некробактериоза | |
| RU2653631C2 (ru) | Способ прогноза летальности при гнойно-септических инфекциях в эксперименте | |
| Li et al. | Increased calcium deposits and decreased Ca2+-ATPase in erythrocytes of ascitic broiler chickens | |
| RU2628063C1 (ru) | Способ прогнозирования транслокации E.coli из кишечника при некультивируемом типе инфекционного процесса в эксперименте на кроликах | |
| RU2657430C2 (ru) | Способ прижизненной диагностики микобактериозов крупного рогатого скота | |
| Peters | Heterophile reactive antigen in infectious mononucleosis | |
| RU2265656C1 (ru) | Питательная среда для выявления ureaplasma urealyticum и способ диагностики урогенитальных уреаплазмозов | |
| Sanchez et al. | Age-dependent roles of cardiac remodeling in sepsis defense and pathogenesis | |
| Ikeda et al. | Disseminated nocardiosis complicated by multiple abscesses of the brain and lower limbs diagnosed by the melting temperature mapping method: A case report | |
| Corper | A tissue substrate microculture for tubercle bacilli | |
| RU2705385C1 (ru) | Способ диагностики стрептококковой абдоминальной хирургической инфекции | |
| Mathiesen et al. | Mink (Neovison vison) kits with pre-weaning diarrhea have elevated serum amyloid A levels and intestinal pathomorphological similarities with New Neonatal Porcine Diarrhea Syndrome | |
| US20220127657A1 (en) | A method for detecting dormant or cell wall deficient mycobacterium species and a method and medium for the growth promotion of dormant or cell wall deficient forms of mycobacterium species | |
| RU2705384C1 (ru) | Способ диагностики грамотрицательной абдоминальной хирургической инфекции | |
| Vasileiou et al. | Anti-staphylococcal biofilm antibodies in ewes and association with subclinical mastitis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20181007 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20211109 |