RU2569456C1 - Питательная среда для выявления возбудителя некробактериоза - Google Patents
Питательная среда для выявления возбудителя некробактериоза Download PDFInfo
- Publication number
- RU2569456C1 RU2569456C1 RU2015103615/10A RU2015103615A RU2569456C1 RU 2569456 C1 RU2569456 C1 RU 2569456C1 RU 2015103615/10 A RU2015103615/10 A RU 2015103615/10A RU 2015103615 A RU2015103615 A RU 2015103615A RU 2569456 C1 RU2569456 C1 RU 2569456C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- nutrient medium
- pathogen
- necrobacillosis
- medium
- necrobacteriosis
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к ветеринаринарной микробиологии. Питательная среда для выявления возбудителя некробактериоза содержит среду 199, сыворотку крови крупного рогатого скота и 40%-ный раствор глюкозы в заданных соотношениях компонентов. Изобретение позволяет повысить чувствительность питательной среды к возбудителю некробактериоза и сократить сроки культивирования посевного материала. 6 ил, 2 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к области ветеринаринарной микробиологии, в частности к выделению возбудителя некробактериоза бактериологическим методом.
Некробактериоз дистальных частей конечностей - одна из инфекционных болезней крупного рогатого скота, встречающаяся довольно часто в специализированных хозяйствах, в результате нарушения ветеринарно-санитарных и технологических нормативов: отсутствие активного моциона, нарушения параметров микроклимата, неполноценность рационов, решетчатые полы. По этой причине к заболеваниям конечностей практические ветеринарные специалисты подходят с неинфекционной позиции, т.е. как раневая хромота механического происхождения.
В производственных условиях возникновению и распространению некробактериоза способствует ассоциация на раневой поверхности вирулентного возбудителя некробактериоза с другими условно-патогенными микроорганизмами. В результате несвоевременного установления диагноза обычные лечебные процедуры не дают желаемых результатов, и болезнь начинает приобретать злокачественный характер, поражая одновременно 2-3 конечности.
В ветеринарной практике для бактериологического исследования используют различные питательные среды.
Известно применение печеночного бульона, мозговой среды, свернутой сыворотки крови, мясопептонного агара с кровью, полужидкого агара с добавлением 2%-ного сахара (Балабанов В.А. Некробактериоз животных. - М., 1971; Лабораторные исследования в ветеринарии./Под ред. Б.И. Антонова. - М., 1986, с. 351).
Недостатком данных питательных сред является низкая чувствительность сред для выявления некробактериоза, приводящая к увеличению срока культивирования посевного материала до 3-8 суток.
Известна среда Китта-Тароцци, состоящая из мясопептонного бульона, 0,5%-ной глюкозы и кусочков печени или мясного фарша для поглощения кислорода из среды («Анаэробные организмы», материал из Википедии - свободной энциклопедии - ru.m.wikipedia.org).
Однако применение этой среды позволяет инкубировать посевы от трех до пяти суток, просматривая их ежедневно.
Задачей изобретения является создание такой питательной среды, которая обладала бы повышенной чувствительностью и эффективностью диагностики некробактериоза с сокращением срока культивирования посевного материала.
Поставленная задача решается тем, что питательная среда для выделения возбудителя некробактериоза содержит питательную среду 199, сыворотку крови крупного рогатого скота и 40%-ную глюкозу при следующем соотношении компонентов, мас.%: питательная среда 199 - 85,0, сыворотка крови крупного рогатого скота - 10,0, 40%-ный раствор глюкозы - 5,0.
Входящая в состав питательной среды сыворотка крови крупного рогатого скота, 40%-ный раствор глюкозы являются источниками белка и углеводов, а также среда 199, имеющая широкий спектр питательных веществ с относительно невысокой их концентрацией (Пинаев Г.П. Методы культивирования клеток. Сборник научных трудов. - Л.: Наука, 1988, с. 56), что способствует быстрому размножению F. necrophorum и приводит к повышению чувствительности и эффективности диагностики некробактериоза, а также к сокращению сроков культивирования пасевного материала.
Питательную среду готовили следующим образом. К 85 мл основной среды 199 добавляют 10 мл сыворотки крупного рогатого скота и 5 мл 40%-ного раствора глюкозы, все тщательно перемешивают и по 10 мл разливают в стерильные пробирки.
Предлагаемая среда была испытана в лаборатории биотехнологии (ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ г. Казани) с использованием для культивирования хранящихся в лаборатории культур F. necrophorum штаммов «8TS630501», «12TSK630501», а также на посевах из патологического материала, полученного от убоя больных коров с поражением дистальных частей конечностей (некробактериозом).
Пример 1. Бактериальные суспензии F.necrophorum из штаммов «8TS630501» и «12TSK630501» с содержанием 500000 микробных тел по стандарту мутности готовят на физиологическом растворе и высевают в три пробирки с содержанием предлагаемой питательной среды с наслоением вазелинового масла и в три пробирки без масла. Дале пробирки помещают в термостат при температуре 37°C с установлением визуального наблюдения через каждый час до 16 ч, а затем через 36 ч после высева культур. Результаты исследования представлены в табл. 1 и рис. 1-а, б, 2-а, б, 3-а, б и 4а, б.
Как видно из табл. 1 первичный рост музейных штаммов F. necrophorum начинает появляться в первые же часы после посева (рис. 1а, 3а) с последующем усилением роста в виде помутнения среды (рис. 1б, 3б).
В аэробных условиях рост возбудителя значительно выше (рис. 2а, б, 4а, б).
В отличие от музейных штаммов патологический материал обладает более высокой вирулентностью и медленным ростом на питательных средах, поэтому были проведены испытания с выделением возбудителя из патологического материала, полученного от больных коров с поражением дистальных частей конечностей из животноводческих хозяйств ООО АФ «Южная» Нурлатского, ООО АФ «Татарстан» Высокогорского районов Республики Татарстан.
Пример 2. Посевной материал после соответствующей обработки высевают в три пробирки с предлагаемой в качестве изобретения питательной средой с наслоением вазелинового масла и в три пробирки без масла. Помещают в термостат при температуре 37°С и устанавливают наблюдение в тех же параметрах, что описано в примере 1. Результаты исследования представлены в табл. 2 и рис. 5а, б; 6а, б.
На день проведения испытаний в ООО АФ «Татарстан» Высокогорского района РТ было всего 1452 голов крупного рогатого скота голштино-фризской породы, завезенных в 2012 г. из Республики Беларусь. Из всего поголовья - 600 голов коров, 85 - нетели, остальное поголовье молодняк разного возраста. При клиническом осмотре из всего поголовья 254 (42,3%) коровы и 15 (18,5%) нетелей имели поражения дистальных частей конечностей в виде хромоты различной степени. Больных коров в количестве пяти голов фиксировали в станке Исляева-Кутлукаева, отбирали материал (витальные соскобы) на границе здоровой и пораженной ткани. В лаборатории биотехнологии из соскобов делали мазки-отпечатки и окрашивали по Грамму. В мазках при микроскопии просматривались грамотрицательные нити разной длины и палочки. Затем материал помещали в ступку, тщательно растирали, добавляя небольшое количество среды 199. Высевы делали в шести пробирках с содержанием предлагаемой питательной среды. В три пробирки для создания анаэробных условий вносили вазелиновое масло, затем все пробирки помещали в термостат с температурой 37°С и устанавливали наблюдения через каждый час до 16 ч, а затем через 36 ч.
Результаты представлены в табл. 2 и рис. 5а, б и 6а, б.
Как видно из табл. 2 появление первичного роста возбудителя из патологического материала в анаэробных условиях происходит через 4 ч после посева (рис. 5а, б), а в аэробных условиях через 2 ч (рис. 6а, б).
Таким образом, предлагаемая питательная среда значительно повышает чувствительность бактериологического исследования (приблизительно в 15-20 раз), направленного на выявление возбудителя некробактериоза у больных животных, и может быть использована в ветеринарных лабораториях как экспресс-метод диагностика возбудителя некробактериоза.
Claims (1)
- Питательная среда для выделения возбудителя некробактериоза, содержащая питательную среду 199, сыворотку крови крупного рогатого скота и 40%-ный раствор глюкозы при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Питательная среда 199 85,0 Сыворотка крови крупного рогатого скота 10,0 40%-ный раствор глюкозы 5,0
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2015103615/10A RU2569456C1 (ru) | 2015-02-03 | 2015-02-03 | Питательная среда для выявления возбудителя некробактериоза |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2015103615/10A RU2569456C1 (ru) | 2015-02-03 | 2015-02-03 | Питательная среда для выявления возбудителя некробактериоза |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2569456C1 true RU2569456C1 (ru) | 2015-11-27 |
Family
ID=54753489
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2015103615/10A RU2569456C1 (ru) | 2015-02-03 | 2015-02-03 | Питательная среда для выявления возбудителя некробактериоза |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2569456C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2631795C1 (ru) * | 2016-06-06 | 2017-09-26 | Тимур Рафкатович Гайнутдинов | Способ получения питательной среды для выявления возбудителя некробактериоза животных |
RU2640251C2 (ru) * | 2016-06-06 | 2017-12-27 | Тимур Рафкатович Гайнутдинов | Способ получения питательной среды для транспортировки патологического материала, содержащего возбудитель некробактериоза животных |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2347806C2 (ru) * | 2007-01-18 | 2009-02-27 | Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО РАСХН (ГНУ ИЭВСиДВ СО РАСХН), | Штамм бактерий fusobacterium necrophorum subspecies necrophorum для изготовления диагностических и профилактических препаратов против некробактериоза животных |
-
2015
- 2015-02-03 RU RU2015103615/10A patent/RU2569456C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2347806C2 (ru) * | 2007-01-18 | 2009-02-27 | Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО РАСХН (ГНУ ИЭВСиДВ СО РАСХН), | Штамм бактерий fusobacterium necrophorum subspecies necrophorum для изготовления диагностических и профилактических препаратов против некробактериоза животных |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ШЕВЧЕНКО А.А. и др., Диагностика некробактериоза и копытной гнили животных. Учебное пособие., Краснодар, 2013, стр. 7-9. ШЕВЧЕНКО А.А. и др., Диагностика некробактериоза и копытной гнили животных. Учебное пособие., Краснодар, 2013, стр. 17-20. САМОЛОВОВ А.А., Некробактериоз крупного рогатого скота (эпизоотология, диагностика и меры борьбы). Автореф. дисс. на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук, Новосибирск, 1991, стр. 13-15. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2631795C1 (ru) * | 2016-06-06 | 2017-09-26 | Тимур Рафкатович Гайнутдинов | Способ получения питательной среды для выявления возбудителя некробактериоза животных |
RU2640251C2 (ru) * | 2016-06-06 | 2017-12-27 | Тимур Рафкатович Гайнутдинов | Способ получения питательной среды для транспортировки патологического материала, содержащего возбудитель некробактериоза животных |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Regassa et al. | Bovine tuberculosis is more prevalent in cattle owned by farmers with active tuberculosis in central Ethiopia | |
Mgode et al. | Prevalence of leptospirosis and toxoplasmosis: A study of rodents and shrews in cultivated and fallow land, Morogoro rural district, Tanzania | |
RU2569456C1 (ru) | Питательная среда для выявления возбудителя некробактериоза | |
RU2607006C1 (ru) | Тест-штамм Leptospira interrogans серогруппы Icterohaemorrhagiae серовара copenhageni для детекции антител к L. icterohaemorrhagiae | |
Roziboev et al. | Microbes And Their Sensitivity To Antibiotics In Samples From The Joints Of Horses With Purulous Inflammation Processes | |
CN107743519A (zh) | 用于分离包括传统培养基中无法培养的如支原体的物种的临床样本的培养基 | |
Adah et al. | Prevalence and Risk Factors Associated with Aeromonas hydrophila infection in Clarias gariepinus and Pond Water from Fish Farms in Kaduna State, Nigeria. | |
CN104471054A (zh) | 原生动物火鸡组织滴虫(h.meleagridis)培养物的生产和应用 | |
Kassa et al. | Bacterial flora of Nile tilapia of pond fish and their relationship with predisposing factors | |
JP7274704B2 (ja) | ノトバイオートカイコの作製方法 | |
Chaudhary et al. | Prevalence of pododermatitis caused by Staphylococcus aureus in poultry birds of Jammu | |
Indhu et al. | STUDIES ON MICROFLORA AND THEIR ROLE ON EGG SHELL CONTAMINATION AND INFECTION. | |
Amies et al. | An easily prepared selective medium for the cultivation of Neisseria gonorrhoeae. | |
RU2631795C1 (ru) | Способ получения питательной среды для выявления возбудителя некробактериоза животных | |
Bani Ismail et al. | Synovial fluid analysis and bacterial findings in arthritic joints of juvenile male camel (Camelus dromedarius) calves | |
RU2344169C1 (ru) | Среда для сохранения жизнеспособности клинических изолятов патогенной treponema pallidum | |
RU2640251C2 (ru) | Способ получения питательной среды для транспортировки патологического материала, содержащего возбудитель некробактериоза животных | |
Ibrahim et al. | Aerobic bacteria and fungi from skin lesions of fish in Khartoum state | |
Antychowicz et al. | Infection of African catfish (Clarias gariepinus) in an intensive culture facility Mycobacterium marinum | |
Sapkota et al. | Prevelance and associated risk factor of escherichia coli from the cases of Poultry at Regional Veterinary Laboratory (RVL) Surkhet, Nepal | |
Dashe et al. | Isolation of Aeromonas hydrophila from commercial chickens in Jos Metropolis, Nigeria | |
Setyaningrum et al. | Life cycle Sarcoptes scabiei and pathogenicity mite in boarding school Malang, Indonesian | |
Abdelazim et al. | New Enriched Culture Media for Culturing Streptococcus pyogenes by using Spirulina Powder | |
RU2249206C2 (ru) | Способ бактериологического исследования рыб | |
RU2738858C1 (ru) | Способ выделения некультивируемых форм стафилококков |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170204 |