RU2473133C2 - Method for prevention of systemic amyloidosis and its nephropathic form in experimental animals - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: said pathology is simulated by a single subcutaneous introduction of native human plasma mixed with Freund adjuvant in equal proportions into Syrian hamsters. Plasma is injected both in symmetrical axillary and inguinal regions, and intraperitoneally 0.1 ml in each point. An amyloidprotector is presented by galavit 0.28 mg/kg introduced every second day subcutaneously for 60 days into the animals.

EFFECT: method is easily reproducible, provides effective correction of a nephropathic form of generalised amyloidosis promoting amyloidoclasia.

3 tbl, 3 dwg

Description

Данное изобретение относится к медицине, экспериментальной биологии и может быть использовано для моделирования экспериментального амилоидоза у животных с целью получения возможности изучения патогенеза, профилактики и лечения амилоидоза, особенно при исследовании функционального состояния системы почек, кровообращения, минерального обмена и других показателей.This invention relates to medicine, experimental biology and can be used to model experimental amyloidosis in animals with the aim of studying the pathogenesis, prevention and treatment of amyloidosis, especially when studying the functional state of the kidney system, blood circulation, mineral metabolism and other indicators.

Амилоидоз - системное заболевание с поражением многих органов и различных тканевых структур, характеризующееся нарушением белкового обмена и внеклеточным отложением в них сложного белково-полисахаридного комплекса. (Серов В.В. // Клин. герант. - 1995. №1. - С.3-8). Амилоид представляет собой гликопротеид, основным компонентом которого являются фибриллярные белки. Установлено, что амилоид содержит альбумины, глобулины, фибриноген, фибрин; среди плазменных белков преобладает γ-глобулин (Dammacco F. Amyloidosis: clinical picture, immunological and biomolecular features, treatment prospects. // Ann. Ital. Med. Int. - 1991. - Jan-Mar. - 6 (1 Pt 2). P. - 107-116). Амилоид накапливается в органах и тканях в больших количествах, что приводит к атрофии, склерозу и функциональной недостаточности органов.Amyloidosis is a systemic disease with damage to many organs and various tissue structures, characterized by impaired protein metabolism and extracellular deposition of a complex protein-polysaccharide complex in them. (Serov V.V. // Klin. Gerant. - 1995. No. 1. - S.3-8). Amyloid is a glycoprotein, the main component of which are fibrillar proteins. It has been established that amyloid contains albumin, globulin, fibrinogen, fibrin; γ-globulin predominates among plasma proteins (Dammacco F. Amyloidosis: clinical picture, immunological and biomolecular features, treatment prospects. // Ann. Ital. Med. Int. - 1991. - Jan-Mar. - 6 (1 Pt 2). P. - 107-116). Amyloid accumulates in organs and tissues in large quantities, which leads to atrophy, sclerosis, and functional organ failure.

Одним из проявлений генерализованного амилоидоза является амилоидоз почек с яркой клинико-морфологической и нозологической спецификой. Микроскопически в почках амилоид обнаруживается по ходу прямых сосудов и собирательных трубок. В интермедиальной зоне и пирамидах строма пропитывается белками плазмы. Амилоид откладывается не только в пирамидах, но и в клубочках.One of the manifestations of generalized amyloidosis is renal amyloidosis with a vivid clinical, morphological and nosological specificity. Microscopically in the kidneys, amyloid is detected along the direct vessels and collecting tubes. In the intermedial zone and pyramids, the stroma is impregnated with plasma proteins. Amyloid is deposited not only in the pyramids, but also in the glomeruli.

Специфическое лечение амилоидоза не разработано, что связано с отсутствием окончательных представлений об этиологии и патогенезе этого заболевания. В связи с этим возникла необходимость разработки и создания способов профилактики амилоидоза и его нефропатической формы.Specific treatment of amyloidosis has not been developed, which is associated with the lack of definitive ideas about the etiology and pathogenesis of this disease. In this regard, it became necessary to develop and create methods for the prevention of amyloidosis and its nephropathic form.

Известен способ профилактики и лечения системного амилоидоза и его нефропатической формы у экпериментальных животных (патент РФ на изобретение №2386415, Пухова И.У., Брин В.Б., Козырев К.М., Бабаниязов Х.Х., Пронина Н.В., зарегистрированный 20.04.2010, заявка №2008144050/13 от 05.11.2008 МПК A61D 99/00, А61К 35/16 А61К 31/15), заключающийся в введении белкового препарата и амилоидопротектора. В качестве белкового препарата сирийским хомякам вводили нативную свиную плазму подкожно из расчета 0,025 мл/г массы тела, а в качестве амилоидопротектора одновременно вводили ацизол ежедневно через зонд в дозе 30 мг/кг в течение 60 дней, который был взят нами за прототип как наиболее близкий способ.A known method for the prevention and treatment of systemic amyloidosis and its nephropathic form in experimental animals (RF patent for the invention No. 2386415, Pukhova I.U., Brin V.B., Kozyrev K.M., Babaniyazov Kh.Kh., Pronina N.V. registered on 04/20/2010, application No. 2008144050/13 dated 11/05/2008 IPC A61D 99/00, A61K 35/16 A61K 31/15), which consists in the introduction of a protein preparation and amyloidoprotector. As a protein preparation, native pork plasma was injected into the Syrian hamsters subcutaneously at the rate of 0.025 ml / g of body weight, and as an amyloid protector, acizole was simultaneously administered daily through a probe at a dose of 30 mg / kg for 60 days, which we took as the closest prototype way.

Недостатком указанного прототипа является то, что для получения экспериментального амилоидоза требуется многократное введение нативной свиной плазмы, а с адъювантом Фрейнда достаточно однократного введения в пять точек биообъекта. Антигенная стимуляция, приводящая к амилоидозу, нативной человеческой плазмой у сирийских хомяков дает возможность изучения механизмов развития данного процесса у человека. Недостатком лекарственного препарата является то, что его надо вводить ежедневно через зонд, что приводит к частой травматизации и гибели животных в эксперименте.The disadvantage of this prototype is that to obtain experimental amyloidosis, multiple administration of native pork plasma is required, and with Freund's adjuvant, a single injection at five points of the bioobject is sufficient. Antigenic stimulation leading to amyloidosis, native human plasma in Syrian hamsters makes it possible to study the mechanisms of development of this process in humans. The disadvantage of the drug is that it must be administered daily through a probe, which leads to frequent trauma and death of animals in the experiment.

Галавит является достаточно простым веществом и в химическом отношении - производным фтальгидразида. Химическое название 5-амино-1,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-2-ид натрия, дигидрат. Ближайшим аналогом его являются люминол, известный в биологии своей способностью к энергопереносу и люминесценции, участию в окислительных и восстановительных реакциях ввиду наличия двойных связей в двух циклах его молекулы.Galavit is a fairly simple substance and chemically a derivative of phthalhydrazide. The chemical name is 5-amino-1,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahydrophthalazin-2-id sodium, dihydrate. Its closest analogue is luminol, known in biology for its ability to transfer energy and luminescence, to participate in oxidative and reduction reactions due to the presence of double bonds in two cycles of its molecule.

Важнейшим механизмом галавита считают его эффекты на неспецифическую иммунную защиту - фагоцитоз макрофагов и продукцию ими активных форм кислорода. Галавит оказался способен выраженно влиять на продукцию макрофагами регуляторных цитокинов, а также на другие клетки иммунной системы (Рябчиков и др., 1999, Калюжин, Абидов, 1999).The most important mechanism of galavit is considered its effects on non-specific immune defense - macrophage phagocytosis and their production of reactive oxygen species. Galavit was able to significantly affect macrophage production of regulatory cytokines, as well as other cells of the immune system (Ryabchikov et al., 1999, Kalyuzhin, Abidov, 1999).

Таким образом, в настоящее время появился отечественный, доступный и безопасный, новый иммунорегулятор с противовоспалительным и регенерирующим эффектом, показавший свою эффективность на многих экспериментальных системах и при многих клинических патологиях.Thus, at present, a domestic, affordable and safe, new immunoregulator with anti-inflammatory and regenerating effect has appeared, which has shown its effectiveness in many experimental systems and in many clinical pathologies.

Первым эффектом препарата является, видимо, обратимое мягкое иммунокорегирующее влияние на начальное макрофагальное звено иммунитета, по-видимому, связанное с влиянием на антиоксидантную систему этого типа клеток, выражено генерирующих активные формы кислорода в процессе своей естественной функции.The first effect of the drug is, apparently, a reversible mild immunocorrecting effect on the initial macrophage immunity, apparently related to the effect on the antioxidant system of this type of cells, which express active oxygen forms in the process of their natural function.

Исследование токсических свойств галавита сразу же вывели его в ряд ведущих препаратов, так как до настоящего времени у него практически не выявлено ни токсических, ни побочных свойств (обзор - Абидов, 1999). (В.И.Донцов, А.А.Подколзин, В.Н. Крутько, Б.М.Мрикаев. Клинические и экспериментальные эффекты Галавита. Национальный Геронтологический Центр. Московский государственный медико-стоматологический университет).The study of the toxic properties of galavit immediately brought him to a number of leading drugs, since so far he has practically no toxic or side effects (review - Abidov, 1999). (V.I. Dontsov, A.A. Podkolzin, V.N. Krutko, B.M. Mrikaev. Clinical and experimental effects of Galavita. National Gerontological Center. Moscow State Medical and Dental University).

Заявляемое изобретение направлено на решение задачи, заключающейся в разработке способа профилактики системного амилоидоза и его нефропатической формы.The invention is aimed at solving the problem of developing a method for the prevention of systemic amyloidosis and its nephropathic form.

Решение этой задачи обеспечивает расширение возможностей профилактики системного амилоидоза и его нефропатической формы у экспериментальных животных, особенно при исследовании функционального состояния системы почек, динамики показателей ПОЛ при экспериментальном генерализованном амилоидозе и других показателей экспериментальных животных.The solution to this problem provides an extension of the possibilities for the prevention of systemic amyloidosis and its nephropathic form in experimental animals, especially when studying the functional state of the kidney system, the dynamics of LPO parameters in experimental generalized amyloidosis, and other indicators of experimental animals.

Предлагаемый способ отличается от прототипа тем, что в качестве белкового препарата сирийским хомякам вводят нативную человеческую плазму, смешанную с адъювантом Фрейнда в равных пропорциях, инъекции осуществляют в симметричные подмышечные и паховые области, внутрибрюшинно из расчета 0,1 мл в каждую точку, однократно, а в качестве амилоидопротектора используют галавит, вводимый им через день, одновременно с вышеописанной смесью, подкожно в дозе 0,28 мг/кг в течение 60 дней.The proposed method differs from the prototype in that as a protein preparation, native human plasma is introduced into Syrian hamsters mixed with Freund's adjuvant in equal proportions, injections are performed in symmetrical axillary and inguinal areas, intraperitoneally at the rate of 0.1 ml at each point, once, and as an amyloidoprotector, galavit is used, administered every other day, simultaneously with the above mixture, subcutaneously at a dose of 0.28 mg / kg for 60 days.

Между признаками заявляемого способа и результатом существует следующая причина - можно предположить, что через механизм действия галавит может способствовать в некоторой степени амилоидоклазии и торможению отдельных звеньев амилоидогенеза, в частности снижению плазматического пропитывания и деполимеризации гликозаминогликанов (компонентов, составляющих амилоид), тем самым ограничивая процесс дальнейшего накопления субстрата.Between the features of the proposed method and the result, there is the following reason - it can be assumed that, through the mechanism of action, galavit can contribute to some extent to amyloidoclasia and inhibition of individual links of amyloidogenesis, in particular, to reduce plasma impregnation and depolymerization of glycosaminoglycans (components that make up the amyloid), thereby limiting the process of further substrate accumulation.

Заявленный способ является эффективным, экономически выгодным и легко воспроизводимым.The claimed method is effective, cost-effective and easily reproducible.

По имеющимся у автора сведениям совокупность существенных признаков, характеризующих сущность заявляемого изобретения, не известна, что позволяет сделать вывод о соответствии изобретения критерию «новизна».According to the information available to the author, the set of essential features characterizing the essence of the claimed invention is not known, which allows us to conclude that the invention meets the criterion of "novelty."

По мнению автора, сущность заявляемого изобретения не следует для специалистов явным образом из известного уровня медицины, так как из него не выявляетсяAccording to the author, the essence of the claimed invention should not be obvious for specialists from a known level of medicine, since it is not detected from it

вышеуказанная возможность получения способа профилактики системного амилоидоза и его нефропатической формы у экспериментальных животных, включающего введение амилоидопротектора подкожно, отличающегося тем, что в качестве амилоидопротектора вводят сирийским хомякам галавит через день из расчета 0,28 мг/кг массы тела в течение 60 дней эксперимента, что обеспечивает расширение возможностей профилактики системного амилоидоза и его нефропатической формы у экспериментальных животных, особенно при исследовании функционального состояния системы кровообращения, почек, минерального обмена и других показателей экспериментальных животных, что позволяет сделать вывод о соответствии критерию «изобретательский уровень».the above possibility of obtaining a method for the prevention of systemic amyloidosis and its nephropathic form in experimental animals, including the administration of an amyloidoprotector subcutaneously, characterized in that Galavit is administered to Syrian hamsters as amyloidoprotector every other day at a rate of 0.28 mg / kg body weight for 60 days of the experiment, which provides an extension of the possibilities for the prevention of systemic amyloidosis and its nephropathic form in experimental animals, especially when studying a functional state with circulatory system, kidney, mineral metabolism and other indicators of experimental animals, which allows us to conclude that the criterion of "inventive step".

Совокупность существенных признаков, характеризующих сущность изобретения, в принципе может быть многократно использована в медицине с получением результата, заключающегося в эффективном и легко воспроизводимом способе профилактики системного амилоидоза и его нефропатической формы у экспериментальных животных, что позволяет сделать вывод о соответствии изобретения критерию «промышленная применимость».The set of essential features characterizing the essence of the invention, in principle, can be repeatedly used in medicine to obtain a result consisting in an effective and easily reproducible method for the prevention of systemic amyloidosis and its nephropathic form in experimental animals, which allows us to conclude that the invention meets the criterion of "industrial applicability" .

Данный способ осуществлялся следующим образом.This method was carried out as follows.

Для получения системного амилоидоза и его нефропатической формы животным вводили нативную человеческую плазму смешанной с адъювантом Фрейнда в равных пропорциях, инъекции осуществляют в симметричные подмышечные и паховые области, и внутрибрюшинно из расчета 0,1 мл в каждую точку, однократно. Путем растворения 100 мг галавита в 2 мл 0,9% натрия хлорида, который вводим подкожно из расчета 0,056 мг/200 г массы тела, что не является чрезмерной водной нагрузкой на организм экспериментального животного.To obtain systemic amyloidosis and its nephropathic form, animals were injected with native human plasma mixed with Freund's adjuvant in equal proportions, injections were performed in symmetrical axillary and inguinal regions, and intraperitoneally at the rate of 0.1 ml at each point, once. By dissolving 100 mg of galavit in 2 ml of 0.9% sodium chloride, which is administered subcutaneously at the rate of 0.056 mg / 200 g of body weight, which is not an excessive water load on the body of the experimental animal.

В конце первого и второго месяца эксперимента определяли показатели: электролитоводовыделительной функции почек, ПОЛ.At the end of the first and second months of the experiment, the following indicators were determined: electrolyte excretory function of the kidneys, LP.

Для гистологических исследований образцы тканей (печень, почка, сердце, селезенка) фиксировали в 10% нейтральном формалине, после чего подвергали заливке в парафин с последующим приготовлением срезов толщиной 5-6 микрон. Срезы окрашивались гемотоксилином и эозином и Конго красным. Изучение срезов проводилось в проходящем свете при помощи микроскопа МИКМЕД-1 под увеличением 80×200×400.For histological studies, tissue samples (liver, kidney, heart, spleen) were fixed in 10% neutral formalin, and then subjected to paraffin embedding followed by preparation of sections 5–6 microns thick. Sections were stained with hemotoxylin and eosin and Congo red. The sections were studied in transmitted light using a MIKMED-1 microscope under a magnification of 80 × 200 × 400.

Пример 1. Двум группам золотистых сирийских хомяков-самцов (№1 - контроль, №2 - опыт) массой 90-150 г вводили нативную человеческую плазму, смешанную с адъювантом Фрейнда в равных пропорциях, инъекции осуществляют в симметричные подмышечные и паховые области, и внутрибрюшинно из расчета 0,1 мл в каждую точку, однократно.Example 1. Two groups of golden Syrian male hamsters (No. 1 - control, No. 2 - experiment) weighing 90-150 g were injected with native human plasma mixed with Freund's adjuvant in equal proportions, injections were performed in symmetrical axillary and inguinal regions, and intraperitoneally at the rate of 0.1 ml at each point, once.

Галавит вводили ежедневно, подкожно в дозе 0,28 мг/кг в группе №2. Через 1 и 2 месяца определяли некоторые показатели водоэлектролитовыделительной функции почек при спонтанном шестичасовом диурезе: уровень диуреза, клубочковой фильтрации, канальцевой реабсорбции, уровень экскреции натрия, калия, кальция, также определяли концентрацию белка в моче, в крови показатели ПОЛ (МДА, гидроперекисей, каталаза).Galavit was administered daily, subcutaneously at a dose of 0.28 mg / kg in group No. 2. After 1 and 2 months, some indicators of water-electrolyte excretory function of the kidneys were determined with spontaneous six-hour diuresis: the level of diuresis, glomerular filtration, tubular reabsorption, the level of excretion of sodium, potassium, calcium, the concentration of protein in the urine was also determined, and the levels of lipid peroxidation (MDA, hydroperoxides, catalase) in the blood )

Анализ данных показал (табл.1, 2), что в условиях спонтанного диуреза на фоне введения вышеописанного амилоидогена отмечалось увеличение диуреза через 1 месяц и его восстановление через 2 месяца. Уменьшение диуреза было обусловлено снижением скорости клубочковой фильтрации. В течение второго месяца спонтанный диурез восстанавливался до контрольных цифр, при этом канальцевая реабсорбция воды продолжала снижаться. Экскреция натрия, калия и кальция в условиях спонтанного диуреза была резко сниженной на протяжении всего эксперимента, особенно по истечении 2 месяца. Отмечалось прогрессивное увеличение протеинурии почти в 3 раза на протяжении 2 месяцев.An analysis of the data showed (Tables 1, 2) that, under the conditions of spontaneous diuresis against the background of the introduction of the above amyloidogen, an increase in diuresis was observed after 1 month and its recovery after 2 months. A decrease in diuresis was due to a decrease in glomerular filtration rate. During the second month, spontaneous diuresis was restored to control figures, while tubular reabsorption of water continued to decline. The excretion of sodium, potassium and calcium under conditions of spontaneous diuresis was sharply reduced throughout the experiment, especially after 2 months. There was a progressive increase in proteinuria by almost 3 times over 2 months.

В группе №2, получавших подкожно галавит через день в течение двух месяцев на фоне введения нативной человеческой плазмы, смешанной с адъювантом Фрейнда в равных пропорциях, через 1 и 2 месяца эксперимента наблюдалось уменьшение объема спонтанного диуреза. Снижение диуреза было обусловлено увеличением канальцевой реабсорбции воды через 1 и 2 месяца, при этом скорость клубочковой фильтрации воды во все сроки эксперимента увеличивалась.In group No. 2, who received subcutaneous galavit every other day for two months against the background of the introduction of native human plasma mixed with Freund's adjuvant in equal proportions, after 1 and 2 months of the experiment, a decrease in the volume of spontaneous diuresis was observed. The decrease in urine output was due to an increase in tubular reabsorption of water after 1 and 2 months, while the rate of glomerular filtration of water in all periods of the experiment increased.

Профилактическое применение галавита выявило тенденцию к постепенному увеличению экскреции натрия, калия и кальция на протяжении двух месяцев, по сравнению с группой №1. Применение галавита выявило через 2 месяца снижение содержания белка в моче до фонового уровня.The prophylactic use of galavit revealed a tendency to a gradual increase in the excretion of sodium, potassium and calcium over two months, compared with group No. 1. The use of galavit revealed after 2 months a decrease in the protein content in the urine to the background level.

Таблица 1Table 1 Изменения объема спонтанного диуреза и основных процессов мочеобразования при формировании амилоидной нефропатии и влиянии галавитаChanges in the volume of spontaneous diuresis and the main processes of urination during the formation of amyloid nephropathy and the influence of galavit Условия опытаExperience Conditions Статистич. показательStatistical indicator Процессы мочеобразованияUrination processes Содержание белка, мг/млThe protein content, mg / ml Диурез мл/ч/100Diuresis ml / h / 100 СКФ м/ч/100GFR m / h / 100 Реабсорбция, %Reabsorption,% ФонBackground M±mM ± m 0,13±0,0040.13 ± 0.004 21,00±0,22021.00 ± 0.220 99,39±0,01699.39 ± 0.016 0,98±0,0300.98 ± 0.030 Фон Галавит 1 мес.Von Galavit 1 month M±mM ± m 0,14±0,0040.14 ± 0.004 21,79±0,43621.79 ± 0.436 99,35±0,01099.35 ± 0.010 0,97±0,0720.97 ± 0.072 Фон Галавит 2 мес.Von Galavit 2 months M±mM ± m 0,15±0,0030.15 ± 0.003 23,04±0,29423.04 ± 0.294 99,34±0,00599.34 ± 0.005 0,89±0,0860.89 ± 0.086 Плазма, ад. Фрейнда 1 мес.Plasma, hell. Freinda 1 month Группа №1
M±mGroup No. 1
M ± m 0,16±0,0040.16 ± 0.004 22,06±0,30422.06 ± 0.304 99,28±0,01399.28 ± 0.013 1,71±0,0791.71 ± 0.079 Плазма, ад. Фрейнда 2 мес.Plasma, hell. Freinda 2 months. 0,12±0,0030.12 ± 0.003 12,48±0,38912.48 ± 0.389 99,07±0,01399.07 ± 0.013 2,62±0,0432.62 ± 0.043 Галавит + плазма, ад. Фрейнда 1 мес.Galavit + plasma, hell. Freinda 1 month Группа №2
M±mGroup No. 2
M ± m 0,12±0,0020.12 ± 0.002 21,22±0,29821.22 ± 0.298 99,44±0,00899.44 ± 0.008 1,59±0,0861.59 ± 0.086 Галавит + Плазма, ад. Фрейнда 2 мес.Galavit + Plasma, hell. Freinda 2 months. 0,14±0,0060.14 ± 0.006 21,21±0,93921.21 ± 0.939 99,32±0,01799.32 ± 0.017 0,73±0,0980.73 ± 0.098

Таблица 2table 2 Изменения экскреции электролитов с мочой при формировании амилоидной нефропатии и влиянии галавитаChanges in urinary electrolyte excretion during the formation of amyloid nephropathy and the effect of galavit Условия опытаExperience Conditions Статистич. показательStatistical indicator Электролитовыделительная функцияElectrolyte excretory function Экскреция NaExcretion Na Экскреция КExcretion K Экскреция СаExcretion Sa ФонBackground М±mM ± m 10,68±0,36710.68 ± 0.367 7,54±0,3817.54 ± 0.381 0,26±0,0140.26 ± 0.014 Фон Галавит 1 мес.Von Galavit 1 month М±mM ± m 10,07±0,23310.07 ± 0.233 7,84±0,2117.84 ± 0.211 0,25±0,0050.25 ± 0.005 Фон Галавит 2 мес.Von Galavit 2 months М±mM ± m 9,63±0,2499.63 ± 0.249 7,58±0,2767.58 ± 0.276 0,24±0,0040.24 ± 0.004 Плазма, ад. Фрейнда 1 мес.Plasma, hell. Freinda 1 month Группа №1
М±mGroup No. 1
M ± m 8,61±0,1868.61 ± 0.186 8,59±0,2798.59 ± 0.279 0,32±0,0120.32 ± 0.012

Плазма, ад. Фрейнда 2 мес.Plasma, hell. Freinda 2 months.   6,54±0,2686.54 ± 0.268 5,21±0,2265.21 ± 0.226 0,20±0,0100.20 ± 0.010 Галавит + плазма, ад. Фрейнда 1 мес.Galavit + plasma, hell. Freinda 1 month Группа №2
M±mGroup No. 2
M ± m 8,61±0,1868.61 ± 0.186 8,59±0,2798.59 ± 0.279 0,32±0,0120.32 ± 0.012 Галавит + Плазма, ад. Фрейнда 2 мес.Galavit + Plasma, hell. Freinda 2 months. 10,76±0,53110.76 ± 0.531 10,02±0,50510.02 ± 0.505 0,34±0,0210.34 ± 0.021

В группе №1 (табл.3) на фоне однократного введения нативной человеческой плазмы, смешанной с адъювантом Фрейнда в равных пропорциях, статистически увеличились показатели гидроперекисей и МДА, что отражает степень интенсивности процессов ПОЛ, а активность каталазы эритроцитов достоверно снижается, что свидетельствует об угнетении ферментативного звена антиоксидантной системы.In group No. 1 (Table 3), against the background of a single administration of native human plasma mixed with Freund's adjuvant in equal proportions, the indicators of hydroperoxides and MDA statistically increased, which reflects the degree of intensity of LPO processes, and the activity of erythrocyte catalase significantly decreases, which indicates inhibition enzymatic link of the antioxidant system.

В группе №2, получавших подкожно галавит в дозе 0,28 мг/кг через день в течение двух месяцев, одновременно с введением нативной человеческой плазмы, смешанной с адъювантом Фрейнда в равных пропорциях, отмечалось статистически достоверное увеличение каталазы эритроцитов, что свидетельствовало об активации ферментативного звена антиоксидантной системы на фоне статистически достоверного снижения уровня гидроперекисей, малонового диальдегида, отражающего степень интенсивности процессов ПОЛ.In group No. 2, who received subcutaneous galavit at a dose of 0.28 mg / kg every other day for two months, simultaneously with the introduction of native human plasma mixed with Freund's adjuvant in equal proportions, a statistically significant increase in erythrocyte catalase was observed, which indicated the activation of enzymatic link of the antioxidant system against the background of a statistically significant decrease in the level of hydroperoxides, malondialdehyde, reflecting the degree of intensity of LPO processes.

Таблица 3Table 3 Динамика параметров свободнорадикальных процессов и состояния антиоксидантной защиты при формировании амилоидной нефропатии и влияние галавитаDynamics of parameters of free radical processes and the state of antioxidant protection during the formation of amyloid nephropathy and the effect of galavit Условия опытаExperience Conditions Статистич. показательStatistical indicator Показатели ПОЛFLOOR indicators Гидроперекисей (мкмоль/л)Hydroperoxides (μmol / L) МДА (мкмоль/л)MDA (μmol / L) Каталаза (*10*4 ME/rHb)Catalase (* 10 * 4 ME / rHb) ФонBackground М±mM ± m 1,12±0,0581.12 ± 0.058 48,48±0,49948.48 ± 0.499 8,47±0,1778.47 ± 0.177 Фон ГалавитVon Galavit М±mM ± m 1,18±0,2331.18 ± 0.233 46,10±0,61246.10 ± 0.612 7,86±0,3197.86 ± 0.319 Плазма, ад. ФрейндаPlasma, hell. Freinda Группа №1
М±nGroup No. 1
M ± n 3,40±0,1303.40 ± 0.130 69,16±1,44869.16 ± 1.488 6,03±0,1046.03 ± 0.104 Галавит + плазма, ад. ФрейндаGalavit + plasma, hell. Freinda Группа №2
M±mGroup No. 2
M ± m 1,23±0,1481.23 ± 0.148 52,83±2,28852.83 ± 2.288 8,05±0,1438.05 ± 0.143

Сущность заявляемого способа подтверждается морфологически.The essence of the proposed method is confirmed morphologically.

Фиг.1. Пролиферация эндотелия капилляров и мезангиоцитов клубочка (а). Уменьшение плазматического пропитывания стенок капилляров клубочка и интеркапиллярного отека. Уменьшение гиперемии плазматического пропитывания и отека межуточного вещества. Снижение признаков конгофилии кортикальных и медуллярных сосудов (б). Очаговая периваскулярная пролиферация лимфогистиоцитарных элементов коркового и мозгового вещества почки.Figure 1. Proliferation of the endothelium of capillaries and glomerular mesangiocytes (a). Decrease in plasma impregnation of the walls of the glomerular capillaries and intercapillary edema. Reduction of hyperemia of plasma impregnation and edema of the interstitial substance. Decreased signs of congophilia of cortical and medullary vessels (b). Focal perivascular proliferation of lymphohistiocytic elements of the cortical and medulla of the kidney.

Фиг.2. Снижение конгофилии межуточного вещества и сосудистых стенок печени (а). Гиперемия центральных дольковых вен. Очаговая периваскулярная гистиоцитарная реакция.Figure 2. Decreased congophilia of the intermediate substance and vascular walls of the liver (a). Hyperemia of the central lobular veins. Focal perivascular histiocytic reaction.

Фиг.3. Уменьшение признаков гиперемии, плазматического пропитывания стенок сосудов системы микроциркулляции (прекапилляров, капилляров) селезенки (а). Снижение количества фибриллярного белка амилоида в виде рассеянных очаговых скоплений (б).Figure 3. Reduction of signs of hyperemia, plasma impregnation of the walls of blood vessels of the microcirculation system (precapillaries, capillaries) of the spleen (a). A decrease in the amount of amyloid fibrillar protein in the form of open focal clusters (b).

Для наглядности изменений в органах микрофотографии повторяются в цветном виде в приложении.For clarity, changes in organs, microphotographs are repeated in color in the application.

Из вышеизложенного видно, что профилактическое введение галавита является эффективным способом коррекции проявлений нефропатической формы генерализованного амилоидоза.It can be seen from the foregoing that the prophylactic administration of galavit is an effective way of correcting the manifestations of the nephropathic form of generalized amyloidosis.

Claims (1)

Способ профилактики системного амилоидоза и его нефропатической формы у экспериментальных животных, включающий введение сирийским хомякам белкового препарата подкожно и амилоидопротекторного препарата, отличающийся тем, что в качестве белкового препарата вводят нативную человеческую плазму, смешанную с адъювантом Фрейнда в равных пропорциях, инъекции осуществляют в симметричные подмышечные и паховые области и внутрибрюшинно из расчета 0,1 мл в каждую точку однократно, а в качестве амилоидопротектора используют галавит, вводимый им одновременно через день подкожно в дозе 0,28 мг/кг в течение 60 дней. A method for the prevention of systemic amyloidosis and its nephropathic form in experimental animals, comprising administering to the Syrian hamsters a protein preparation subcutaneously and an amyloidoprotective drug, characterized in that native human plasma is introduced as a protein preparation, mixed with Freund's adjuvant in equal proportions, injections are performed in symmetric axillary and inguinal and intraperitoneal at the rate of 0.1 ml at each point once, and as an amyloidoprotector, galavit is used, which is introduced by him dnovremenno subcutaneously every other day at a dose of 0.28 mg / kg for 60 days.

Images