PT100848A

PT100848A - 1,4-di-hidropiridinas com actividade antagonista do factor agregador das plaquetas (paf)

Info

Publication number: PT100848A
Application number: PT100848A
Authority: PT
Inventors: Carlos Sunkel; Miguel Fau De Casa-Juana; Pilar Ortega; Jaime Priego; Luis Santos
Original assignee: Alter Sa
Priority date: 1988-01-21
Filing date: 1992-09-08
Publication date: 1993-10-29
Also published as: ZA89519B; EP0531598A1; CA1332838C; JPH0742271B2; DE3801717C1; GR3006934T3; NO923489L; IE922412A1; KR910008348B1; ES2052783T3; CZ278692A3; PT89494B; ZA925692B; EP0325187A1; FI924018A0; JPH01233273A; IE890136L; PT89494A; JPH05208958A; MX9204642A

Description

"1,4-DI-HIDROPIRIDINAS COM ACTIVIDADE ANTAGONISTA DO

MOTOR AGREGADOR DAS PLAQUETAS (PAP)M

Campo Técnico da Presente Invenção A presente invenção diz respeito a uma série de compostos farmacêuticos que contêm 1,4-di-hidropiridinas com um grupo alquilo na posição 4 do anel, as quais possuem actividade antagonista do Pactor Agregador das Plaquetas (PAP-acêter) assim como aos processos para a sua preparação·

Antecedentes da Presente Invenção

Algumas 1,4-dihidropiridinas que possuem um grupo alifático na posição 4 do anel, demonstraram uma forte actividade PAP-antagonista não descrita até agora (Patente de invenção Alemã DE 3,801,717, de 24 de Maio de 1989).

Surpreendentemente, a modulação da cadeia lateral na posição "3" do dito anel levou a novas moléculas com actividade antagonista do receptor do PAP que possuem uma maior especificidade, potência e uma maior duração do efeito, que os compostos descritos na patente de invenção anterior. A estrutura química do PAP-aeêter foi identificada como l-0-hexadecil/octadecÍl-2-acetil-sn-glioero-3--fosfocolina. Este composto é um autocoide fosfolipidico e um mediador das reacções inflamatórias extremamente potente que I libertado por vários tipos de células, tecidos humanos — 2 — e animais de experiência. Estas células são principalmente granulôcitos basófilos, eosinôfolos e neutrôfilos, macrôfa-gos tecidulares e monócitos do sangue periférico, plaquetas, células de epitêlios glandulares, células endoteliais e tecido neuronal. 0 PAP-acéter ê um potente indutor da agregação sistémica e da hipotensão. Este efeito deve-se â sua capacidade para promover a vasodilatação periférica, porém influencia também as suas acções sobre a circulação pulmonar e o coração, já que produz diminuição da contractilidade miocárdiaca e diminuição do fluxo coronário. Outro efeito do PAF-aeéter é o de induzir broncoconstrição em dos© 100 vezes mais baixas que a histamina. Além disso, descreveu-se que o PAP-acéter e, portanto, os antagonistas do PAP-acéter regulam as funções dos linfôcitos directa e indirectamente.

Devido a todos estes efeitos, definiu-se o PAP como um mediador principal da doença inflamatória e imu-nolôgica. Bíeste aspecto, os inibidores específicos da biossíntese e/ou dos efeitos do PAP-acéter poderiam representar uma nova classe de agentes terapêuticos, especialmente em doenças pulmonares como a asma bronquial, neumonites alérgicas e distress respiratório do adulto, - nas quais alguns antagonistas do PAP-acéter reduziram ou aboliram reae-ções anafilâcticas e de hipersensibilidade, choque endotòxico e ulcerações gástricas. Sambêm se demonstrou a participação do PAP-acéter em toda uma série de estados patológicos de base imunoalérgica como processos inflamatórios, psoriases, glomerulonefrites e rejeição de transplantes.

Alguns antagonistas do Ca++ também apresentam propriedades antagonistas do PAF, tal como o Biltiazem e o Gallopamil, contudo, nem todos os bloqueadores dos canais do Ca++ possuem esta actividade. Assim, as 1,4-dihidro-piri-dinas, tais como a Uifedipina, sô demonstraram uma actividade muito fraca, já que as concentrações necessárias para obter um efeito são 1,000.000 vezes mais elevadas que as que inibem os fluxos do cálcio noutras células e, pelo menos, 1,000 vezes superiores ás dos antagonistas específicos do PAP-acêter,

Descrição da Presente Invenção A presente invenção diz portanto respeito a uma série de novas 1,4-dihidropiridinas correspondentes á fórmula geral I, com actividade antagonista do PAF-acêter, a composições farmacêuticas que as contêm e ao processo para a sua preparação:

na qual R representa uma cadeia alquilica saturada de

Ci-C2 tal como o metilo e o etllo; R* representa uma cadeia alquílica saturada ou insa-turada Cj-C^g, linear ou ramificada ou cíclica, tal como o metilo, etilo, isopropilo, butilo--terc., n-hexilo, n-hexadecilo, alilo, 1-undece-nilo e cinamilo. Podendo também estar interrompida por um átomo de oxigénio, como o 2-metoxi-etilo ou o tetrahidrofurfurilo e representar o radical 2-(R-morfolino)-etilo* n representa um número que pode ser 2 ou 3; X representa um átomo de oxigénio (0), ou de enxofre (S) ou então um grupo S02*

Ar representa um anel aromático tal como fenílico excepto nos compostos em que X representa um átomo de enxofre e n representa o número 2* Representa também um grupo fenilico substituído tal como o 4-nitrofenilo, 4-acetalamino-fenilo, 4-clorofenilo, 3,4-diclorofenilo, 4-metilfenilo, 4-metoxifenilo, 3-dimetil-aminofenilo, 4-bifenilo 4-fenoxifenilo, 4-benzilfenilo, 4-benziloxifenilo Podendo também representar os grupos 1-naftilo e 2-naftilo. A actividade farmacológica dos compostos de fórmula geral I foi estabelecida tal como se descreve adiante Os compostos podem preparar-se de acordo com métodos conhecidos já descritos na literatura. - 5

Assim, Método Ai Faz-se reagir um composto de fórmula geral

HoC-C=CH-C00-R‘ 3 I (II) HH2 na qual R' tem os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral H3C-CO-CH2-GOO-(CH2)n-X-Ar (III) na qual η, X, e Ar têm os significados definidos antes, e com um aldeído de fórmula geral R-CHO (IY) na qual R tem os significados definidos antes, para se obter um composto de fórmula geral I; ou Método B: Faz-se reagir um composto de fórmula geral H^C -CO-CHg-COO-R* (V) na qual R* tem os significados definidos antes 6 -

com um composto de fórmula geral (VI) H3C-C=CH-COO-(CH2)n-X-Ar

na qual η, X e Ar têm os significados definidos antes. e com um aldeído de fórmula geral IV, na qual o símbolo H tem os significados definidos antes, para se obter um composto de fórmula geral I; ou Método C: Faz-se reagir tua composto de fórmula geral (VII)

H3C-C0-C=CH-R COO-R* na qual R e R1 têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral VI, na qual os símbolos η, X e Ar têm os significados definidos antes, para se obter um composto de fórmula geral I. A presente invenção diz igualmente respeito ás formas de realização do processo segundo as quais se parte de um composto obtido como intermediário em qualquer etapa do processo e se realizam as etapas do processo que faltam, ou se interrompe o processo em qualquer etapa, ou em que se forma um produto inicial sob as condições da reac- - 7 - - 7 -

ção ou em que um componente da reacção se apresenta sob a forma dos seus sais.

As misturas de diasteroisômeros ou de enantiô-meros obtidos, podem separar-se graças âs diferentes propriedades flsico-qulmicas dos componentes, por meio de métodos conhecidos, como por exemplo recristalização fraecionada e/ou cromatografia, mediante reacções de indução assimétrica ou mediante utilização de microrganismos.

Os compostos iniciais são conhecidos, ou, no caso de serem novos, podem preparar-se de acordo com métodos conhecidos.

Os novos compostos podem utilizar-se como medicamentos para administração oral, parenteral ou rectal sob a forma de uma preparação farmaeeutica, contendo um dos compostos de fórmula geral I em associação com um excipiente aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. As preparações farmacêuticas podem apresentar-se, por exemplo, como tabletes, drageias, cápsulas, infectáveis, supositórios ou sob a forma líquida como xarope. Usualmente a quantidade de ingrediente activo está compreendida entre 0,1 e 99% em peso da preparação, preferentemente entre 2 e 50% em peso em preparações orais. A dose diária de ingrediente activo depende do tipo de administração. Em geral, a administração oral está compreendida entre 50 e 100 mg/dia. - 8 - τ:

MODOS PARA A REALIZAÇÃO DA PRESENTE INVENÇÃO

Os exemplos seguintes ilustram a presente invenção sem contudo a limitarem de modo algum.

Exemplo 1 (Método A)

Preparação do 5-Metoxicarbonil-2,4»6-trime-til-1,4-dihidropiridina-3-carboxilato de 3-(4-clorofeniltio)--propilo.

Aquece-se a refluxo uma solução constituída por 9 g (0,03 mole) de acetilacetato de 3-(4-clorofenil-tio)--propilo, 3,56 g (0,03 mole) de 3-amino-crotonato de metilo e 1,9 ml (1,49 g; 0,034 mole) de acetaldeido em 40 ml de etanol absoluto, com agitação durante 7 horas. Terminado esse tempo, evapora-se o dissolvente a pressão reduzida e dissolve-se o resíduo obtido em 15 ml de acetato de etilo em ebulição. Hantèm-se a solução resultante primeiro com agitação â temperatura ambiente e arrefece-se depois, a -10°C. Obtêm-se deste modo um composto sólido que se reeristaliza em metanol para se obter finalmente um composto sólido amarelo de ponto de fusão: 99-101°C. Sendo o rendimento da reac-ção de 68$.

Exemplo 2: (Método A)

Preparação do 5-metoxicarbonil-2,4,6-trime-til-l,4-dihidropiridina-3-carboxilato de 2-(4-metilfenilsul-fonil)-etilo.

Aqueceu-se a refluxo, uma solução constituída

por· 8,5 g £θ,03 mole) de acetilacetato de 2-(4-metilfenil-sulfonil)-etilo, 3»45 g (0,03 mole) de 3-aminocrotonato de metilo e 1,67 ml (0,03 mole) de acetaldeldo em 30 ml de etanol absoluto, com agitação durante 8 horaa. Uma vez terminado este tempo, evapora-se o dissolvente a pressão reduzida e dissolve-se o resíduo obtido em 10 ml de metanol em ebulição. Finalmente mantêm-se a solução resultante sob agitação a 0°C e recristaliza-se o composto s6lido assim obtido, em metanol, para se obter um composto sólido branco de ponto de fusão: 96-100°C. Sendo o rendimento da reacção de 45%.

Exemplo 3: (Método A)

Preparação do 5-metoxicarbonil-2,4,6-trÍme-til-l,4-dihidropiridina-3-carboxilato de 3-(4-fenilfenoxÍ)--propilo.

Aquece-se a refluxo, uma solução constituída por 10,9 g (0,035 mole) de acetilacetato de 3-(4-fenilfeno-xi)-propilo, 4 g (0,035 mole) de 3-aminoorotonato de metilo e 1,95 ml (0,035 mole) de acetaldeldo em 35 ml de etanol absoluto, sob agitação durante 8 horas. Uma vez terminado este tempo, evapora-se a pressão reduzida 20 ml de dissolvente e arrefece-se a solução resultante à temperatura ambiente. Obtêm-se deste modo um composto sólido que se re-cristaliza em acetonitrilo, para se obter finalmente um composto sólido branco de ponto de fusão: 133-135°C. Sendo o rendimento da reacção de 74%. 10 -

Exemplo 4: (Método A)

Preparação do 5-metoxicarbonil-2,4,6-trime-til-l,4-dihidropiridina-3-carboxilato de 3-( 4-metil-fenil-tio)-propilo.

Aquece-se a refluxo, uma solução constituída por 9 g (0,034 mole) de acetilacetato de 3-(4-metilfeniltÍo)--propilo, 3,91 g (0,034 mole) de 3-aminocrotonato de metilo e 2,26 ml (1,76 g; 0,040 mole) de acetaldeido em 45 ml de etanol absoluto, sob agitação durante 7 horas. Uma vez terminado esse tempo, evapora-se o dissolvente a pressão reduzida e dissolve-se o residuo obtido em 10 ml de isopropil--êter em ebulição. Mantêm-se, depois, a solução resultante sob agitação â temperatura ambiente até â solidificação completa do composto. Finalmente recristaliza-se este composto sólido em isopropil-êter, para se obter um composto sólido de ponto de fusão: 80-82°C. Sendo o rendimento da reaeção de 49%·

Exemplo 5: (Método A)

Preparação do 5-metoxiearbonil-2,4,6-trime-til-l,4-dihidropiridina-3-carboxilato de 2-(íenilsulfonil)--etilo.

Aquece-se a refluxo, uma mistura constituída por 30 g (0,11 mole) de acetilacetato de 2-(fenil-sulfonil)--etilo, 12,78 g (0,11 mole) de 3-amino-crotonato de metilo e 6,5 ml (5,07 g; 0,12 mole) de acetaldeido em 110 ml de metanol absoluto, sob agitação durante 8 horas. Uma vez termi- - 11 - - 11 - ν .% nado este tempo, evapora-se o dissolvente a pressão reduzida e dissolve-se o resíduo obtido em 25 ml de diisopropilêter em ebulição· Arrefece-se, depois, a solução resultante a -10°C durante toda a noite. Obtém-se deste modo um composto sólido amarelo que se recristaliza em n-hexano/acetato de etilo (1:1) para finalmente se obter um composto de ponto de fusão; 118-120°G com um rendimento de 75%·

Exemplos 65-151 (Método A)

Os compostos representados no quadro 1 foram preparados de acordo com os processos descritos nos exemplos 1-5 anteriores.

Quadro 1

Exemplo NS R Ex n X Ar P.fua.8 (°0) Rto.D (%) 6 ch3 CH3 3 0 Ph 97-100° 45 7 ch3 CH3-CH2 3 0 Ph 11-3° 76 8 ch3 (OH3)2-CH 3 0 Ph 120-2d 65 9 ch3 (ch3)3-c 3 0 Ph 101-2® 30 10 ch3 (CH3)2-CH 3 s Ph 77-9f 35 11 ch3 CH2=CH-GH2 3 0 Ph 69-72f 40 12 ch3 GH2=CH-CH2, 3 s Ph aceite 69 13 ch3 GH3 3 S02 Ph 114-7d 30 14 CH3 GH3-CH2 3 S02 Ph 89-92® 40 15 0H3 CH3 3 0 4-R02-Ph 153-4d 69 16 CH3 CH3-CH2 3 0 4-E02-Ph 133-5d 70 17 CH3 (CH3)2CH 3 0 4-E02-Ph 113-5d 64 18 CH3 CH3-(CH2)5 3 0 4-N02-Ph 84-5° 35 19 ch3 ffi-(CH2)2h 3 0 4-N02-Ph 125-30® 57 20 CH3 CH3-(CH2)15 3 0 4-N02-Ph 104-6® 38 21 CH3 (OH3)30 3 0 4-EOg-Ph 106~gf 25 22 CH3 ch2=ch-ch2 3 0 4-N02-Ph 102-5d 33 23 GH3 CH3 3 0 4-AcHH-Ph 103-5g 65 24 ch3 CH3-CH2 3 0 4-AcNH-Ph 142-5° 40 - 13 -

Quadro 1 (cont.)

Exemplo NS R R1 n X Ar P.fus.a (°G) 25 ch3 (GH3)2-GH 3 0 4-AcRH-Ph 118-21° 26 ch3 M-(CH2)2 3 0 4-AcNH-Ph. 135-8 V 27 ch3 ch3-(ch2)5 3 0 4-AcNH-Ph 55-9° 28 ch3 (0H3)3C 3 0 4-AeNH-Ph 101-4° 29 ch3 GH30-(GH2)2 3 0 4-AcNH-Ph 75-80Λ G 30 ch3 CH3 3 s 4-AcNH-Ph 72-4° 31 ch3 ch3-(ch2)15 3 s 4-AcM-Ph 85-7f 32 ch3 CH3-CH2 3 s 4-AcRH-Ph 63-51 33 ch3 ch2*ch-ch2 3 s 4-AcNH-Ph 140-2° 34 ch3 CH2SCH-GH2 3 0 4-AcNH-Ph 98-G03d 35 ch3 CH3 3 0 4-Cl-Ph. 129-31° 36 CH3 CH3-CH2 3 0 4-Cl-Ph 135-8° 37 CH3 (CH3)2CH 3 0 4-Cl-PJd 108-11° 38 CH3 (ch3)3c 3 0 4-Cl-Ph 91-3f 39 CH3 ch2=gh-ch2 3 0 4-Cl-Ph 105-gf 40 ch3 CH3-CH2 3 0 3,4012-Pii 134-6° 41 CH3 CH3 3 0 3,4C12-Ph 82-4d 42 CH3 (ch3)2ch 3 0 3,4C12-Ph 130-3d 43 0H3 (ch3)3g 3 0 3,4012-Ph 110-21 20 60 31 55

Rto.b (*) 45 35 24 49 24 26 60 24 35 23 66 46 65 39 - 14

Quadro 1 (cont.)

Exemplo N2 R K1 n X Ar P.fus.® (°0) Rto t%) 44 ch3 GHi^CH-CHg 3 0 3,4C12-Ph 99-101° 60 45 ch3 ch3 3 S 3,4012-Ph 104-6° 35 46 ch3 ch3-ch2 3 S 3,4C12-Ph 63-6f 24 47 CH3 CH3-CH2 3 0 4-CH3-Pà 109-11° 45 48 GH3 CH3 3 0 4-CH3-PJi 117-9d 50 49 GH3 (CH3)2GH 3 0 4-CH3-Ph 121-3° 60 50 CH3 (GH3)2CH 3 0 4-CH3-PJi 109-llf 44 51 CH3 CH2=CH-CH2 3 0 4-CH3-Ph 80-3f 22 52 CHo 3 GH3 3 S02 4-CH3-Ph 137-9° 40 53 CH3 CH3-CH2 3 S02 4-CH3-Ph 139-41d 18 54 GH3 CH3-CH2 2 so2 4-CH3-Ph 85-8d 38 55 ch3 ch3 3 0 2-Iaftilo 118-21° 33 56 GH3 CH3-CH2 3 0 2-Haftilo 98-100° 30 57 CH3 CGH3)2CH 3 0 2-Raftilo 100-3d 25 58 ch3 (CH3)3C 3 0 2-Raftilo 87-9f 22 59 gh3 ch2*ch-ch2 3 0 2-Naftilo 88-90d 20 60 CH3 CH3-CH2 2 0 4-GH30-Ph 125-7d 70 61 CH3 CH3 3 0 4-CH30-Ph 80-3° 31 62 ch3 GH3 2 0 4-GH30-Ph !07-9d 60 - 15 -

Quadro 1 (cont.)

Exemplo NS R *1 n 63 ch3 CH3-CH2 3 64 0H3 CH3 2 65 ch3 CH3-CH2 2 66 CH3 CH3-CH2 3 67 CH3 CH3 3 68 oh3 oh3ch2 3 69 GH3 CH3-CH2, 2 70 CH3 0H3-CH2 3 71 CH3 CH3 2 72 CH3 GH3 3 73 CH3 CH3-^H2 2 74 CH3 CH3-CH2 2 75 CH3 (CH3)2CH 2 76 oh3 0H3 3 77 CH3 CH3-GH2 3 78 ch3 (ch3)3c 3 79 CH3 CH30-(CH2)2 3 80 oh3 oh3-oh2 2 81 ch3 (CH3)2CH 2 82 CH3 GH3-CH2 3 x Ar P.fus.a Rto.b (°C) (%) 0 4-CH30-Ph 64-6f 32 0 4-Ph-Ph 84-6á 40 0 4-Ph-Ph 115-7d 25 0 4-Ph-Ph 135-7d 81 0 4-(Ph-CH^-Ph 93-6° 15 0 4-(Ph-Cíy-Bi 93-5e 15 0 4-(Bi-CH2>^h 111-4° 30 0 4-0^h"OH|.p)·®!. Ί3 f—t 00 1 00 c- 22 0 4-(^3^0)^1 121-3k 15 0 4-(01-0^(5-1¾ 107-9d 40 0 4-(Eb.-Ciy))-Ph 109-llf 20 S02 Ph 90-3 88 SOg Ph 86-9 46 S 4-N02-Ph 118-20° 76 S 4-N02-Ph 84-8° 47 S 4-R02-Ph 104-6f 39 S 4-^0 2-Ph 65-8 89 S 4-(AcHH)-Ph 135-71 29 S ^clííO-PhllO-a1 37 S 4-Cl-Ph 115-7d 86

Quadro 1 (cont.)

Exemplo M R R1 n X Ar P.fus.® (°C) Rto.b <*) 83 ch3 (ch3)2-oh 3 S 4-Cl-Ph 79-81*- 29 84 ch3 CH3-CH2 2 0 3,4C12-Ph 137-9C 90 85 ch3 (CH^gCH 2 0 3,4C12-Ph 134-6° 78 86 ch3 0H3 2 0 3,4012-®h 145-7° 82 87 0H3 CH30-(CH2)2 2 0 3,4C12-Ph 110-2d 70 88 CH3 CH3-(GH2)5 2 0 3,4C12-Ph 106-8° 65 89 ch3 (CH3)3C 2 0 3,4012-Ph 157-9° 90 90 CH3 M-(CH2)h2h 2 0 3,4C12-Ph 106-9° 75 91 oh3 fHP-GHg 2 0 3,4C12-Ph 134-6d 47 92 CH3 0Η3-(0Η2,)15 2 0 3,4C12-Ph 89-90d 45 93 CH3 ch2=ch-ch2 2 0 3,4C12,-Ph 120-2° 81 94 CH3 CH2=0H-(0H2)^ 2 0 3,4012-Ph 86-7d 70 95 CH3 CH3-CH2 3 s 40H3-Ph 68-71 57 96 CH3 m-(ch2)2 3 s 4CH3-Ph 175-9deae1;L (Mdrocloruro) 32 97 CI3 CH3 2 0 2-Iaftilo 115-7° 63 98 CH3 CH3-GH2 2 0 2-Naftilo 141-3° 67 99 CH3 (CH3)2GM 2 0 2-Haftilo 130-2d 43 100 ch3 CH30-(CH2)2 2 0 2-Naftilo 103-5° 53 - 17 -

Quadro 1 (cont.)

Exemplo R E1 n X Ar P.fus.® Rto.b NS (°C) (#) 101 ch3 GH3-(GH2)5^ 2 0 2-Naftilo 87-9° 70 102: ch3 thp-ch2 2 0 2-Naftilo 102-4 47 103 ch3 CH2!=CH2-CH2 2 0 2-Uaftilo 141-3d 78 104 ch3 M-(CH2)2h 2 0 2-Raftilo 96-9 77 105 ch3 CH3-CH2 2 0 Ph 91-3,5d 26 106 ch3 CH3 3 s 4-CH30-Ph 83-4f 25 107 CH3 GH3 2 0 Ph 103-5d 68 108 gh3 (GH3)2GH 2 0 Ph 95-7m 78 109 oh3 ch3 2 0 4-CPh-GE^)- Ph 132-3® 25 110 ch3 CH3 2 0 4-N02-Ph 185-7d 66 111 ch3 (oh3)3o 2 0 4-SO2-Pii 170-3d 80 112 CH3 (oh3)3o 2 0 2-Naftilo 101-3f 24 113 ch3 CH3 2 0 l-Raftilo 134-7° 75 114 ch3 GH3-CH2 2 0 1-Raftilo 125-7° 64 115 CH3 (ch3)2ch 2 0 1-Iaftilo 129-31^ 51 116 CH3 CH30-(CH2)2 2 0 1-Naftilo 105-7n 26 117 CH3 oh3-(oh2)5 2 0 1-Eaftilo 106-8° 55 118 CH3 M-(CH2)2h 2 0 l-Raftilo 133-5° 77 119 ch3 CH30-(GH2)2 2 0 4-N02-Ph 130-2d 68

Quadro 1 (cont.)

Exemplo R U2 n

Ar P.fus.a Rto.b (°C) {%) 120 gh3 GH3-CH2 2 0 4-NOg-Ph l62-3d 69 121 ch3 (CH3)2GH 2 0 4-N02-Ph 150-2d 82 122 ch3 CH3-CH2 2 0 4-Cl-Ph 137-9° 70 123 ch3 (CH3)2CH 2 0 4-Cl-Ph 139-42d 75 124 CH3 CH2=CH-CH2 2 0 4-Cl-Ph 118-2011 24 125 CH- 3 GH30-(CH2)2 2 0 4-Cl-Ph 91-4C 26 126 ch3 (CH3)3C 2 0 4-Cl-Ph lll-4d 50 127 CH3 CH3 2 0 4-Cl-Ph 142-5d 74 128 ch3 CH3-CH2 2 0 4-CH3-Ph 115-7C 59 129 CH3 (CH3)2CH 2 0 4-Cl-Ph. 83-5f 68 130 CH3 CH30-(CH2)2 2 0 4-Cl-Ph 69-71f 59 131 GH3 CH3 2 0 4-Cl-Ph 49-51f 40 132 CH3 CH3-(CH2)15 2 0 2-Haftilo 80-3 d 30 133 CH- 3 ch3-gh2 3 0 3-1(0^^96-91 55 134 gh3 CH3-CH2 2 0 3-WCGH^h 130-2d 50 135 ch3 CH3 2 0 3-3J(CH^2-Pk 98-101d 15 136 ch3 CH30-(GH2)2 2 0 3-lí(GH^ 2~Ph 112-4d 44 137 GH3 (CH3)3C 2 0 100-4d 25 15 - 19 - .%

Quadro 1 (cont,)

Exemplo m R R1 n x Ar P.fus.® (°0) Rto.b (%) 139 gh3 CH3 3 0 4-Pho-Ph 113-6° 70 140 ch3 CH3 2 0 4-Piio-Ph 75-8* 35 141 ch3 CH3-CH2 3 0 4-Pho-Ph. 98-101° 80 142 ch3 (0H3)30 3 0 4-Ph.o-Ph 89-91 55 143 ch3 CH3-CH2 2 0 4-Pho-Ph 96-8d 77 144 ch3 (CH3)2CH 2 0 4-Ph.o-Ph 93-6d 75 145 CH3 GH30-(CH2)2 2 0 4-Pho-Ph 88-91° 30 146 CH3 (CH3)2CH 3 0 4-Pho-Ph 121-4° 61 147 CH3 CH3 3 S02 4-N02-Ph 191-3° 25 148 CH3 ch3 3 S02 4-Jí02-PJi 144-6d 46 149 CH3 CH3 3 S02 3,4-Cl2-Ph l69-71d 50 150 CH3 CH3 3 S02 4-0H30-Ph 140-1° 25 151 ch3 ch3 3 0 4-Pb-Pii 144-6° 30 fi λ Λ

Dissolvente de Recristalização: ° metanol; etanol; e f 2 isopropanol; diisopropileter; 6 acetato de etilo; d acetonitrilo; ^ n-hexano/acetato de etilo (1:1); 1 acetato de etilo/etanol (1:1); m etanol/água (2,5:1); n n-hexano/ace- tato de etilo (2:1). - 20 -

Purificado mediante MPLG. ° Referente ao composto recristalizado K CLAVES: M, N-Morfolino; THF, 2-Tetrahidrofurfurilo.

Exemplo 152 (método B)

Preparação do 5-Etoxicarbonil~2,4,6-trimetil-l,4--dihidropiridina-3-earboxilato de 3-(2-naftiloxi)-propilo.

Aquece-se a refluxo, uma solução constituída por 8,5 g (0,03 mole) de 3-aminoerotonato de 3-(2-naftilo-xi)-propilo, 3,82 ml (0,03 mole) de acetilacetato de etilo e 1,67 ml (0,03 mole) de acetaldeído em 30 ml de etanol absoluto, sob agitação durante 8 horas. Uma vez terminado este tempo, evapora-se 15 ml de dissolvente a pressão reduzida e mantêm-se a mistura resultante sob agitação a 0°C, para se obter um composto sâlido branco de ponto de fusão: 94 - 97°0 (recristalizado em etanol). Sendo o rendimento da reacção de 40%.

Exemplo 153 (método B)

Preparação do 5-isopropoxicarbonil-2,4,6-trimetil--l,4-dihidropiridina-3-carboxilato de 3-(4-nitro-fenil-tio)--propilo.

Aquece-se a refluxo, uma solução constituída por 9 g (0,03 mole) de 3-aminocrotonato de 3-(4-nitrofenil-tio)-propilo, 5,04 g (0,03 mole) de acetilacetato de isopro-pilo e 2,1 ml (1,58 g; 0,036 mole) de acetaldeído em 45 ml de etanol absoluto, com agitação durante 7 horas. Uma vez terminado esse tempo, evapora-se o dissolvente a pressão reduzida e dissolve-se o resíduo em 16 ml de acetato de etilo/n-hexano (1:1) em ebulição. Por fim arrefece-se a mistura reaccional a -10°C, para se obter um composto sólido de ponto de fusão: 80 - 82°C. Sendo o rendimento de 42%.

Exemplos 154 a 162 (Método B)

Os compostos representados no quadro 2 foram preparados de forma análoga â descrita nos exemplos 152 e 153.

Quadro 2

Exemplo Rfi R E1 n X Ár P.fus.8 (°0) Rto.13 (*> 154 ch3 CH3 3 0 1-Raftilo 40-3d 50 155 ch3 ch2=ch-ch2 3 0 l-Naftilo 96-101° 19 156 ch3 (ch3)3c 3 S Ph aceite 74 157 ch3 ch3-(ch2)5 3 s 4-R02-Ph 74-7^ 76 158 CH3 CH2sCH-CH2 3 s 4-Cl-Ph 55-7 68 159 CH3 Ph-CHeCH-CHg 3 s 4-Gl-Ph 117-20c 87 160 CH3 ch2*ch-ch2 3 s 4-CH3-Ph 58-60 64 161 CH3 Ph-CHsCH-CHgj 3 s 4-GH3-Ph 84-7° 85 162 _5!a. Ph-GE=CH-CH0 2 0 2-Naftilo 122-4° 68 aDissolvente de Recristalização; ^Referente ao composto recristalizado; cmetanol; detanol; 3n-hexano/acetato de etilo (1:1). - 22

Exemplo 163 (Método C)

Preparação do 5-metoxicarbonil-2,4,6-trimetil-l,4--dthidropiridina-3-carboxilato de 3-(fenil-tio)-propilo·

Aquece-se a refluxo, uma mistura constituída por 5 g (0,035 mole) de 2-acetil-2-butenoato de metilo e 8,8 g (0,035 mole) de 3-aminocrotonato de 3-(fanil-tio)--propilo em 35 ml de etanol absoluto, com agitação durante 10 horas. Uma vez terminado esse tempo, evapora-se o dissolvente a pressão reduzida e dissolve-se o residuo obtido em 10 ml de n-hexano/acetato de etilo (1:1) em ebulição. Por fim, arrefece-se a solução resultante a -10°C, para se obter um composto sólido de ponto de fusão: 81 - 82°C /re-eristalizado em n-hexano/acetato de etilo (1:1)7, com um rendimento de 45$.

Exemplo 164 (método G)

Preparação do 2,6-Dimetil-4-etil-5-metoxi-carbo-nil-l,4-dihidropirid±na-3-carboxilato de 3-(4-cloro£enil--tio)-propilo.

Aquece-se a refluxo, uma mistura constituída por 9 g (0,03 mole) de 3-aminocrotonato de 3-(4-clorofenil-tio)-propilo e 4,95 g (0,031 mole) de 2-acetil-2-pentenoato de metilo em 45 ml de etanol absoluto, com agitação durante 7 horas. Uma vez terminado esse tempo, arrefece-se a mistura reaccional a -10°G, cristalizando um composto sólido de ponto de fusão: 102 - 104°C (recristaliza-se com etanol). Sendo o rendimento da reacção de 50$.

Exemplo 165 (Método C)

Preparação do 2,6-Dimetil-4-etil-5-etoxÍcarbonil--l,4-dihidropiridina-3-carboxilato de 3-(4-clorofenil-tio)--propilo.

Aquece-se a refluxo, uma mistura constituída por 9 g (0,031 mole) de 3-aminocrotonato de 3-(4-eloro£enil--tio)-propilo e 5,40 g (0,031 mole) de ^-acetil^-pentenoato de etilo em 45 ml de etanol absoluto, com agitação durante 7 horas. Uma vez terminado esse tempo, evapora-se o dissolvente a pressão reduzida e dissolve-se o resíduo obtido em 10 ml de diisopropilêter em ebulição. Mantém-se, depois, a solução assim obtida sob agitação â temperatura ambiente até â completa solidificação do composto. Obtêm-se deste modo um composto sólido de ponto de fusão; 83 - 86°C (recris-talizado em diisopropilêter) com um rendimento de 69%.

Exemplos 166-172: (método C)

Os compostos representados no quadro 3 foram preparados de forma anêloga à descrita nos exemplos 163-165. - 24 -

Quadro 3

Exemplo Kô R EI n X Ar P.Pus.® (°C) Rto, (*) 166 CH3 CH3-CH2 3 S Ph 84-5f 36 167 CH3 GH3 3 S 2-Naftilo 82-6^ 50 168 ch3 CH3-CH2 3 S 2-Uaftilo 62-5f 35 169 CH3 (ch3)3c 3 S 4-Cl-Ph aceite 35 170 CH3 (CH3)3C 3 s 4-CH3-Ph aceite 35 171 CH3-Cí^CH3-CH2 3 s 4-CH3-Ph 78-81f 73 172 CH3-C^GH3 3 s 4-GH3-Ph 86-8f 52 a Dissolvente de Recristalização: ^ Referente ao composto recristalizado; * diisopropiléter; ^ n-hexano/acetato de etilo (1:1). ESTUDOS ffARMACOIiOGrlCOS ESTUDOS EM PLAQUETAS LAVADAS : Agregação

As suspensões de plaquetas lavadas foram obtidas a partir de sangue de coelho (machos, albinos, Uew Zealand) anti-eoagulado com uma solução de ácido eítrico/citrato sôdico -dextrose na proporção 1:6 (v:v). 0 plasma rico em plaquetas (PRP) obtêm-se mediante centrifugação de amostras de sangue a 100 xg durante 10 minutos e as plaquetas por centrifugação do PRP a 1.800 xg - 25 - / durante 15 minutos a 4°C. 0 sedimento assim obtido á lavado duas vezes com tampão lyrode contendo ácido cítrico, PGE^ e apirasa, pH 6,5* As plaquetas assim lavadas são finalmente resuspensas em tampão Hepes-Tyrode, pH 7,35 suplementado com albumina sêrica bovina a 0,35%; Ca++ 2 mlí.

Ajusta-se a concentração final de plaquetas a 300.000 plaq./jil. Determina-se a agregação turbidimetrica-mente utilizando um lumiagregômetro (Chrono-Log Co., Haven-ton, PA, USA) a 37°C sob agitação a 1.100 r.p.m.. 0 estudo realiza-se em aliquotas de PRP prê-incubadas com os compostos em estudo a 37°C durante 5 minutos, A concentração dos antagonistas, esteve, em todos os casos, compreendida entre 10 pM e 0,1 pM, A agregação induz-se por adição de L-PAP diluído em 5 pl de tampão Hepes/albumina, concentração final 1,9 x 10”9 M. As CI^0 para cada composto foram calculadas graficamente a partir das curvas dose-resposta. - 26 - 26 Quadro 1. - Bfeito sobre a agregação induzida pelo 1-PA3? em plaquetas de coelho

Composto do exemplo

IC 50 (jaM) 1 0,34 2 1,1 3 0,24 4 0,85 5 1,3 6 3,0 13 2,3 30 3,1 41 2,7 45 0,15 46 1,40 48 4,0 52 2,7 61 2,0 62 10,0 64 2,8 66 2,4 - 27

Composto do exemplo IC5Q ()M) 74 2,8 76 2,8 82 2,8 110 4,3 113 3,0 131 10,0 133 2,4 133 2,8 139 0,70 140 2,0 152 3,0 154 1,1 163 0,41 164 0,32 165 2,5 166 2,6 167 0,40 172 0,19

Os dados são a média de três experiências, realizadas em duplicado. Concentração de 1-PA3? = 1,92 mlí.

As concentrações dos compostos estão, em todos os casos, compreendidas entre 10 e 0,1 jdt.

Claims

REIVINDICAÇÕES 1.- 4-Alquil-l,4-di-hidropiridinas com actividade antagonista do PAF-aceter (PAF = factor agregador das plaquetas), caracterizadas pelo facto de terem a formula geral

R representa uma cadeia alquílica saturada com 1 ou 2 átomos de carbono tal como metilo e etilo; R' representa uma cadeia alquílica saturada ou in-saturada em , linear, ramificada ou cícli ca, tal como metilo, etilo, isopropilo, butilo terc., n-hexilo, n-tiexadecilo, alilo, 1-unde-cenilo e cinamilo, que pode estar interrompida por um átomo de oxigénio, como o 2-metoxietilo ou o tetra-hidrofurfurilo, podendo também representar o radical 2-(N-morfolino)-etilo; n representa um número que pode ser igual a 2 ou 3; representa um átomo de oxigénio (0), ou de enxo·· X Μ fre (S), ou então um grupo SO2 ; Ar representa um anel aromático tal como 0 fenilo excepto nos compostos em que X representa um átomo de enxofre e n=2; também representa um grupo fenilo substituído tal como 4-nitro-fenilo, 4-acetilaminofenilo, 4-clorofenilo, 3,4-diclorofenilo, 4-metilfenilo, 4-metoxi-fenilo, 3-dimetilaminofenilo, 4-bifenilo, 4--fenoxifenilo, 4-benzilfenilo, 4-benziloxi-fenilo, e representa também, os grupos 1--naftilo e 2-naftilo.
2.- Processo para a preparação de 4-alquil-l,4--di-hidropiridinas de formula geral I, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de: a) se fazer reagir um composto de fórmula geral (II) (II) h3c-c=ch-coo-r* nh2 na qual R’ tem os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral (III) H3C-CO-CH2-COO-(CH2)n-X-Ar (III) na qual η, X e Ar têm os significados definidos antes, e com um aldeído de fórmula geral (IV) R-CHO (IV) na qual Pv. tem os significados definidos antes,

para se obter um composto de fórmula geral (I) ; ou b) se fazer reagir um composto de fórmula geral (V) (V) h3c-co-ch2-coo-r' na qual R1 tem os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral (VI) H3C-C=CH-COO-(CH2)n-X-Ar (VI) nh2 na qual η, X e Ar têm os significados definidos antes, e com um aldeído de fórmula geral (IV), na qual o símbolo R tem os significados definidos antes, para se obter um composto de fórmula geral (I); ou c) se fazer reagir um composto de fórmula geral (VII) (VII) h3c-co-c=ch-r COO-R' na qual R e R1 têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral (VI), na qual os símbolos η, X e Ar têm os significados definidos antes, para se obter um composto de fórmula geral (I).
3.- Utilização das 4-alquil-l,4-di-hidropiridinas de fórmula geral (I), de acordo com a reivindicação 1, como antagonistas do PAF-aceter. 4.-
4. - Utilização de acordo com as reivindicações 1 e 3, dos compostos de formula geral (I) para o tratamento de estados patológicos e transtornos em que o PAF-aceter participa.
5. - Utilização de acordo com as reivindicações 1, 3 e 4, dos compostos de fórmula geral (I) para o tratamento de processos inflamatórios, psoríase, glomerulOnefrite, rejeição de transplantes, bronquite aguda e crónica, asma brônquiaca, estados de choque, alergias.
6. - Utilização das 4-alquil-l,4-di-hidropiridinas de fórmula geral (I), de acordo com a reivindicação 1, para o tratamento de estados patológicos e transtornos em que á necessário estimular a imunidade celular.
7. - Utilização de acordo com as reivindicações 1 e 6, dos compostos de fórmula geral (I) para o tratamento de sindromas imunodeficitários e outras situações em que esteja reduzida a capacidade de defesa.
8. - Utilização de acordo com as reivindicações 1, 3, 4, 5, 6 e 7 de medicamentos que contenham os compostos de fórmula geral (I) em associação com excipientes aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico. Lisboa, 7 de Setembro de 1992 O Agente Oficial da Propriedade Industrial

V