PL150268B1 - Method of obtaining derivatives of peptides - Google Patents

Method of obtaining derivatives of peptides

Info

Publication number
PL150268B1
PL150268B1 PL1986257573A PL25757386A PL150268B1 PL 150268 B1 PL150268 B1 PL 150268B1 PL 1986257573 A PL1986257573 A PL 1986257573A PL 25757386 A PL25757386 A PL 25757386A PL 150268 B1 PL150268 B1 PL 150268B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
formula
trifluoro
prolinamide
product
mmol
Prior art date
Application number
PL1986257573A
Other languages
English (en)
Other versions
PL257573A1 (en
Original Assignee
Ici America Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GB858501523A external-priority patent/GB8501523D0/en
Priority claimed from GB858501522A external-priority patent/GB8501522D0/en
Priority claimed from GB858501524A external-priority patent/GB8501524D0/en
Application filed by Ici America Inc filed Critical Ici America Inc
Publication of PL257573A1 publication Critical patent/PL257573A1/xx
Publication of PL150268B1 publication Critical patent/PL150268B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C205/00—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton
    • C07C205/13—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by hydroxy groups
    • C07C205/26—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by hydroxy groups and being further substituted by halogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C205/00—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton
    • C07C205/01—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton having nitro groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C205/02—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton having nitro groups bound to acyclic carbon atoms of a saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C205/00—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton
    • C07C205/39—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by esterified hydroxy groups
    • C07C205/42—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by esterified hydroxy groups having nitro groups or esterified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton
    • C07C205/43—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by esterified hydroxy groups having nitro groups or esterified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring or to carbon atoms of six-membered aromatic rings being part of the same condensed ring system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0827—Tripeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

RZECZPOSPOLITA OPIS PATENTOWY 150 268 POLSKA
URZĄD
PATENTOWY
RP
Patent dodatkowy do patentu nr---Zgłoszono: 86 01 21 (P. 257573)
Pierwszeństwo 85 01 22 Wielka Brytania
Zgłoszenie ogłoszono: 87 03 23
Opis patentowy opublikowano: 1990 08 31
Int. Cl.5 C07K 5/04
C 2 i E i. i a
Twórca wynalazku: —
Uprawniony z patentu: ICI AMERICAS INC.,
Wilmington (Stany Zjednoczone Ameryki)
Sposób wytwarzania nowych pochodnych peptydów
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych pochodnych peptydów podstawionych grupą ketonu trifluorometylowego stanowiących inhibitory elastazy leukocytów ludzkich /HLE/ użytecznych, gdy takie hamowanie jest pożądane dla sprzętu badawczego w farmakologii, dignostyce i badaniach pokrewnych i w leczeniu chorób degeneratywnych tkanek takich jak rozedma pęcherzykowa płuc, miażdżyca, reumatyczne zapalenie stawów i zapalenie kostnostawowe, patologiczne u zwierząt ciepłokrwistych. Opisano również związki pośrednie stosowane do syntezy tych pochodnych peptydów i sposoby ich wytwarzania, kompozycje farmaceutyczne zawierające takie pochodne peptydów i sposoby ich stosowania.
Sposobem według wynalazku wytwarza się podstawione peptydy o wzorze ogólnym 1, w którym R1 oznacza grupę /l-4C/-alkilową, A oznacza grupę iminową, oksy lub bezpośrednie wiązanie, B oznacza bezpośrednie wiązanie albo grupę o wzorze -NH-CHR2-CO lub -NH-CHR4CO-NH-CHR2-CO-, w których R2 oznacza grupę fenylową, benzylową albo /l-4C/-alkilową ewentualnie podstawioną grupę benzyloksykarbonylową, benzyloksykarbonyloaminową, fenylosulfonyloaminową lub /fenylosulfonyloamino/karbonylową, a R4 oznacza grupę /1-4C/alkilową ewentualnie podstawioną grupę benzyloksykarbonylową lub benzyloksykarbonyloaminową, R3 oznacza: 1/ grupę /l-6C/-alkilową ewentualnie podstawioną grupą: /l-4C/-alkoksykarbonylową,[/l-4C/alkoksy-karbonylo]-aminową, karboksylową, 2-[/l-4C/alkoksy]etoksylową, adamantylową, morfolinylową, pirydylową, tienylową, oksopirolidynylową, fenylową, [/1-4C/alkoksy-karbonylojfenylową, karboksyfenylową, fenoksylową, [/l-4C/alkoksy-karbonylo]fenoksylową, karbamoilofenoksylową, /karbamoilometylo/fenoksylową, benzenosulfonyloaminową, /metanosułfonyloamino/karbonylową,/benzenosu]fonyloamino/karbonylową,/naftalenosulfonyloamino/karbc>nylową, adamantanosulfonyloamino/karbonylową lub /chlorobenzenosulfonyloaminokarbonylo/fenylową, 2/ grupę naftylową, aminochlorofenylową, fenylową ewentualnie podstawioną grupą hydroksylową, grupą /l-4C/alkoksylową, /l-4C/alkoksy-karbonylową, karboksylową,
1-2 atomami chlorowca, grupę /metanosulfonyloamino/karbonylową, /naftalenosulfonyloamino/karbonylową lub [N-bentylo-/4-bromobenzenosulfonylo/amino]karbonylową, 3/ grupę o
150 268 wzorze W-SO2-NH-CO-fenyl, w którym W oznacza grupę fenylową ewentualnie podstawioną chlorowcem lub grupą nitrową, 4/grupę o wzorze Y-CO-NH/CH2/m, w którym m jest równe 2-5, Y oznacza grupę fenylową, benzylową, difenylometylową, fenoksymetylową, benzyloksylową, /1 -4C/alkoksylową, [/l-4C/alkoksy-karbonylo]fenyloaminową, /2-pirydylo/etoksylową lub karboksyfenyloaminową, 5/ grupę cyklopentylową lub undecylową ewentualnie podstawione grupą /l-4C/alkoksy-karbonylową lub karboksylową, 6/ grupę 2-fenylowinylową ewentualnie podstawioną w pierścieniu fenylowym grupą /l-4G/alkoksy-karbonylową, karboksylową lub /chlorobenzenosulfonyloamino/karbonylową, 7/ grupę 2-/ureidokarbonylo/winylową, di/benzyloksymetylo/metylową lub di/2-fenoksyetylo/metylową oraz ich sole addycyjne z kwasami i zasadami. Związki o wzorze 1, w zależności od znaczenia podstawnika B, oznaczają dipeptydy, tripeptydy i tetrapeptydy, a więc związki o wzorach la, lb i lc.
Sposób według wynalazku wytwarzania związków o wzorze 1, w którym podstawniki mają wyżej podane znaczenie, polega na tym, że utlenia się związek o wzorze ogólnym 7, w którym podstawniki mają wyżej podane znaczenie, a następnie otrzymany związek o wzorze 1, w którym R3 zawiera grupę estru kwasu karboksylowego ewentualnie hydrolizuje się za pomocą wodoro tlenku metalu alkalicznego w temperaturze otoczenia do związku o wzorze 1, w którym R3 zawiera grupę karboksylową oraz otrzymany związek o wzorze 1, w którym R2 lub R3 zawiera grupę karboksylową ewentualnie poddaje się sprzęganiu z grupą aminową sulfonamidu w obecności karbodiimidu w temperaturze otoczenia do związku o wzorze 1, w którym R2 lub R3 zawiera grupę sulfonyloaminokarbonylową, po czym otrzymany związek o wzorze 1 ewentualnie przeprowadza się w farmaceutycznie dopuszczalną sól.
Jako środek utleniający stosuje się dimetylosulfotlenek w obecności chlorku oksalilu lub bezwodnika octowego, kompleks trójtlenku chromu i pirydyny albo perjodynan Dess-Martina, a reakcję utleniania prowadzi się w odpowiednim rozpuszczalniku lub rozcieńczalniku, takim jak chlorek metylenu.
Ewentualny etap sprzęgania z grupą aminową sulfonamidu prowadzi się stosując jako karbodiimid chlorowodorek l-etylo-3-/3-dimetyloaminopropylo/karbodiimid lub 1,3-dicykloheksylokarbodiimid w chlorku metylenu jako rozpuszczalniku.
Szczególnie cennymi związkami są związki o wzorze 1, w którym R1 oznacza grupę izopropylową, B oznacza grupę o wzorze -NH-CHR2-CO-, w którym R2 oznacza grupę izopropylową, a grupa R3-A- oznacza grupę 4-chlorofenylo-SO2-NH-CO-fenylową, 4-bromofenylo-SO2-NH-COfenylową lub l-naftylo-SO2-NH-CO-fenylo-NH-.
Sole związków o wzorze ogólnym 1 obejmują farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne z kwasami lub zasadami, otrzymane z kwasami mineralnymi takimi jak kwas solny lub z kwasami organicznymi takimi jak kwas cytrynowy, maleinowy, fumarowy lub octowy. Sole addycyjne z zasadami obejmują sole otrzymane z wodorotlenkami metali alkalicznych takimi jak wodorotlenek sodu, węglanami i wodorowęglanami metali alkalicznych, wodorotlenkami metali ziem alkalicznych i solami amin organicznych. Takie sole można wytwarzać przez rozpuszczanie pochodnej peptydu w mieszaninie wody i rozpuszczalnika organicznego mieszającego się z wodą, dodanie wodnego roztworu zasady i wydzielenie soli z wodnego roztworu.
Korzystne związki wytwarzane sposobem według wynalazku mają konfigurację S /to jest naturalnie występują jako L-aminokwasy/ z centrami chiralnymi oznaczonymi gwiazdką we wzorach 2a, 2b i 2c. Opisane poniżej sposoby syntezy w Metodzie A i B dostarczają mieszaninę diastereomerów jako wynik obecności produktów w konfiguracji R i S o centrach chiralnych oznaczonych trójkątem. Sposoby rozdzielania i syntezy opisane w Metodzie C i D dostarczają związki, które są zasadniczo czystymi enancjomerami i diastereomerami. Korzystnymi związkami są związki o konfiguracji S, których centra określono trójkątem.
Jest zrozumiałe dla fachowca, że aktywność pojedyńczych izomerów nie jest taka sama i korzystne jest wykorzystanie izomeru bardziej aktywnego. Wynalazek obejmuje swym zakresem obie mieszaniny diastereoizomerów i aktywne izomery S i R.
Również zrozumiałe jest, że ketony trifluorometylowe mogą występować jako solwaty, zwłaszcza hydraty o wzorze 3 i wchodzą także w zakres wynalazku.
150 268
Korzystne jest wytwarzanie pochodnych peptydów sposobem według wynalazku z dostępnych w handlu alfa-aminokwasów, to jest tych, w których grupa NH2 jest przyłączona do atomu węgla następnego od grupy -COOH. W następstwie korzystnych podstawników R2 i R3 w powyższych wzorach dla pochodnych tri- i tetrapeptydów, otrzymuje się je z następujących aminokwasów: alanina, walina, norwalina, leucyna, izoleucyna, norleucyna, fenyloalanina, tryptofan, tyrozyna, asparagina, glutamina, kwas asparaginowy, kwas glutaminowy, lizyna, treonina, seryna, kwas σ-aminomasłowy i fenyloglicyna.
Korzystnymi grupami związków są związki wymienione jako główne w tytułach przykładów VI, XI, XV-XVIII, XX-XVIII, LI-LVI, LVIII, LIX, LXII, LXIII, LXIV, LXVII, LXX, LXXII, LXXIII, LXXV-LXXVII, LXXX-LXXXVI, LXXXVIII-CV, CVII, CIX, CXI, CXIII i CXV-CXX. Z tych związków szczególnie korzystne są związki z przykładów XVI, XXIV, XXVII, LII, LVIII, LXX, LXXV-LXXVII, LXXXI, LXXXV, LXXXVIII-XCI, XCIII, XCV, XCIX-CII, CIV, CVIII, CIX, CXIII i CXVII-CXIX, a najbardziej korzystne są związki z przykładów LXXV, XC, XCIX, CVIII i CIX.
Poniżej podano sposoby wytwarzania związków wyjściowych o wzorze 7, obejmującym wzory 7a, 7b i 7c oraz ich przekształcania w związki końcowe o wzorze 1.
Metoda A
W Etapie 1 wytwarza się aminoalkohol o wzorze ogólnym 5, dogodnie wyodrębniany w postaci chlorowodorku. Kondensacja Henrego opisana przez E.T. Mc Bee i in. w J. Amer. Chem. Soc., 78: 4053 (1956) odpowiedniego nitroalkanu o wzorze R1CHaNO2, wytwarzanego standardową metodą jeśli nie podano inaczej /z hemiacetalem etylotrifluoroacetaldehydu o wzorze CF3CH/OH/OCH2CH3 prowadzi do otrzymania nitroalkoholu o wzorze ogólnym 6, który otrzymuje się jako mieszaninę dwóch racemicznych diastereomerów [/2/RS/, 3/RS/] i [2/RS/, 3/SR/], patrz na przykład Przykład Ib. Redukcja grupy nitrowej w związku o wzorze 6 za pomocą odpowiedniego środka redukującego dostarcza związek o wzorze 5 jako mieszaninę dwóch racemicznych diastereomerów [2/RS/, 3/RS/] i [2/RS/, 3/SR/], patrz na przykład przykład Ic.Sól aminowa jest stosowana bezpośrednio do dalszej syntezy.
Etap 2 stanowi konwersja związku o wzorze 5 do kluczowych związków pośrednich o wzorze 4, obejmującym wzory 4a, 4b i 4c prowadzona znanymi metodami takimi jak opisana przez M. Bodanszky, Principles of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Berlin (1984) i The Peptides, Analysis, Synthesis and Biology (ed. E. Gross of J. Meienhofer), Vols. 1-5, Academic Press, New York, 1979-1983. Użycie odpowiednio N-zabezpieczonych cyklicznych aminokwasów, takich jak CBZprolina, z następującym za tym procesem sprzęgania peptydu i usunięcia grup zabezpieczających grupy aminowe prowadzi do wytworzenia związków o wzorze ogólnym 4a. Podobnie sprzęganie odpowiednich N-zabezpieczonych kwasów dipeptydów i kwasów tripeptydów i usuwanie grup zabezpieczających prowadzi do wytworzenia związków o wzorze ogólnym 4b i 4c. Ponadto związki o wzorze ogólnym 4a można przekształcać w związki o wzorze ogólnym 4b lub 4c wykorzystując taką samą metodologię peptydów. Otrzymane produkty stanowią mieszaninę 2/RS/, 3/RS/ i 2/RS/, 3/RS/, jeśli nie przeprowadzano rozdzielania.
Etap 3 stanowi konwersja związków pośrednich o wzorze ogólnym 4 do związków pośrednich o wzorze ogólnym 7, przez reakcję z odpowiednimi reagentami dla utworzenia amidów, moczników, uretanów i sulfonamidów włączając chlorki kwasowe, bezwodniki, mieszane bezwodniki, izocyjaniany, węglany takie jak węglany 4-nitrofenylowe (wytwarzane sposobem opisanym w H. Kunz i in., Angew. Chem. Int. Ed. /ENG/, 22, 783-784 (1983)), chloromrówczany, chlorki sulfonylowe i chlorki sulfinylowe, a następnie utlenianie znanymi metodami. Otrzymane produkty stanowią mieszaniny 2/RS/, 3/RS/ i 2/RS/, 3/RS/, jeśli nie przeprowadzono rozdzielania.
Jest zrozumiałe, że kolejność czynności w Etapie 2 i 3 można zmieniać, jeżeli występują odpowiednie okoliczności odnośnie metody sprzęgania, recemizacji, usuwania grup ochronnych itp. Tak więc w odpowiednich warunkach związki pośrednie o wzorze ogólnym 7a można również wytwarzać bezpośrednio ze związków o wzorze ogólnym 5; związki pośrednie o wzorze ogólnym 7b można również wytwarzać bezpośrednio ze związków o wzorze ogólnym 5 lub 4a; i związki pośrednie o wzorze ogólnym 7a można również wytwarzać bezpośrednio ze związków o wzorze ogólnym 5, 4a lub 4b.
150 268
Etap 4 to utlenianie związków pośrednich o wzorze 7, które prowadzi do wytworzenia produktów o wzorze 1. Metody, które tu się stosuje obejmują stosowanie chlorku szczawiowego, DMSO i trzeciorzędowej aminy, co opisano w M. Marx i in., J.Org. Chem., 49,788-793 (1984), przy czym najlepsze wyniki uzyskano stosując 10-20 równoważników środka utleniającego, stosowanie bezwodnika octowego i DMSO, stosowanie kompleksu pirydyny z trójtlenkiem chromu w chlorku metylenu i stosowanie perjodinanu Dess-Martina (l,l,l-triacetoksy-2,l-benzoksyjodo-3/3H/-on) w metodzie D. B. Dess. i in., J. Org. Chem., 48, 4155-56 (1983). Korzystne jest stosowanie perjodinanu Dess-Martina. Jeśli nie prowadzi się rozdzielania, produkty o wzorze 1 otrzymane tą metodą obejmują mieszaninę 3/RS/, która składa się zasadniczo z dwóch diastereomerów, jeżeli centra odpowiadające oznaczonym gwiazdką we wzorach 2a, 2b i 2c są zasadniczo enancjomerycznie czyste.
W etapie 5 następuje konwersja produktów o wzorze 1 do innych produktów o wzorze 1 i obejmuje reakcje zmydlania, sprzęgania i usuwania grup ochronnych. Stereochemia mieszaniny produktów jest taka sama jak w Etapie 4.
Metoda B. Jest to metoda korzystna w porównaniu z Metodą A.
Etap 1 obejmuje rozdzielanie mieszaniny racemicznych diastereomerów o wzorze 6 otrzymanych jak produkt Etapu 1 w Metodzie A przez destylację frakcyjną i krystalizację prowadzącą do wytworzenia nitroalkoholu o wzorze 6 w postaci zasadniczo czystego racemicznego diastereomeru [2/RS/, 3/SR/], który zasadniczo nie zawiera innego racemicznego diastereomeru [2/RS/, 3/RS/]. Redukcja grupy nitrowej korzystną metodą przez uwodornienie przy użyciu 10% palladu na węglu jako katalizatora prowadzi do otrzymania związku o wzorze ogólnym 5 w postaci jednego racemicznego diastereomeru [2/RS/, 3/SR/] zasadniczo nie zawierającego innego racemicznego diastereomeru. Jest zrozumiale dla fachowca, że alternatywnie diastereomer [2/RS/, 3/RS/] może również być stosowany do wytwarzania związków według wynalazku.
Etap 2 jest taki sam jak w Metodzie A, lecz stosuje się aminę o wzorze 5 otrzymaną jak opisano w Etapie 1 w Metodzie B. Produkty otrzymane tą metodą są zasadniczo czystymi mieszaninami [2/RS/, 3/SR/].
Etap 3 jest taki sam jak w Metodzie A lecz stosuje się produkt otrzymany według Etapu 2 w Metodzie B. Otrzymane produkty są zasadniczo czystymi mieszaninami [2/RS/, 3/SR/].
Jak w Metodzie A kolejność czynności w Etapie 2 i w Etapie 3 może być zmieniana w odpowiednich warunkach.
Etap 4 jest taki sam jak w Metodzie A. Otrzymana mieszanina produktów jest taka sama jak mieszanina produktów otrzymana w Etapie 4 Metody A.
Etap 5 jest taki sam jak Etap 5 w Metodzie A.
Metoda C. Jest to sposób bezpośredniej syntezy pojedynczych („rozdzielonych) izomerów o wzorze 1, które zasadniczo nie zawierają innych diastereomerów, na przykład produktów odpowiadających związkom o wzorze 2a, 2b i 2c, w których centra oznaczone gwiazdką i trójkątem są wszystkie S.
Etap 1 polega na rozdzieleniu racematu o wzorze ogólnym 5 otrzymanego według Etapu 1 Metody B. Po wydzieleniu wolnej zasady o wzorze 5 rozdzielanie prowadzi się przez utworzenie diastereomerycznej soli z kwasem D-winowym i rozdzielenie tych soli przez krystalizację frakcyjną. Żądaną aminę otrzymuje się następnie z rozdzielonych soli przez uwolnienie zasady, na przykład wolnej zasady odpowiadającej 2/R/3/S/ w związku o wzorze 5. Tak otrzymany produkt jest zasadniczo czystym enancjomerem i diastereomerem.
Etapy 2 i 3 są zasadniczo takie same jak Etapy 2 i 3 w Metodach A i B, lecz ograniczone do metody, która pozwoli na uniknięcie racemizacji center odpowiadających oznaczonym gwiazdką we wzorach 2a, 2b i 2c. Otrzymane produkty są zasadniczo czyste enancjomerycznie i diastereomerycznie.
Etap 4 jest ograniczony do metody, która pozwoli uniknąć racemizacji center znaczonych gwiazdką i trójkątem we wzorach 2a, 2b i 2c. Korzystne jest użycie perjodinanu Dess-Martina. Tak otrzymane produkty o wzorze 1 są zasadniczo enancjomerycznie i diastereomerycznie czyste.
Etap 5 jest ograniczony do metody, która pozwala uniknąć racemizacji center oznaczonych gwiazdką i trójkątem we wzorach 2a, 2b i 2c.
150 268
Metoda D. Etap 1 obejmuje rozdzielanie związków o wzorze 1 otrzymanych Metodą A lub B, które są diastereomerycznymi mieszaninami (w następstwie centrum 3/RS/) do ich pojedyńczych izomerów, które są zasadniczo diastereomerycznie i enancjomerycznie czyste. W celu zakończenia rozdzielania korzystne jest stosowanie chromatografii preparatywnej, na przykład MPLC i HPLC.
Etap 5 jest taki sam jak Etap 5 w Metodzie C.
Pomiar hamowania. Siła działania związków wytwarzanych sposobem według wynalazku jako inhibitorów elastazy była początkowo oznaczana przez zdolność związku według wynalazku do hamowania działania elastazy leukocytów ludzkich (HLE) na niskocząsteczkowe podłoże peptydowe. Siłę działania inhibitora ocenia się przez kinetyczne oznaczenie stałej dysocjacji Ki kompleksu utworzonego przez wzajemne oddziaływanie inhibitora i HLE. Jako podłoże stosowano anilid-metoksysukcynylo-alanylo-alanylo-prolilo-walino-p-nitroanilid jak opisano przez K. Nakajima i in. w J. Biol. Chem., 254: 4027-4032 (1979) i przez T. Teshima i in. w J. Biol. Chem., 257: Nr 9, 5085-5091 (1982). Enzym HLE stosowany w tych badaniach można otrzymać z Elastin Products of St. Louis, Missouri lub można oczyszczać według B. R. Viscarello i in. w Preparative Biochemistry, Vol. 13, str. 57-67 (1983), w następujący sposób, wykonując wszystkie prace w pomieszczeniu zimnym w temperaturze 4°C.
Ekstrakcja solą - traktowanie DNase: Materiał wyjściowy 193 g ropnej plwociny homogenizowano z 200 ml zimnej wody destylowanej i odwirowano z szybkością 30 000 X siła ciężkości przez 20 minut w temperaturze 4°C. Nadsącz odrzucono i grudki ekstrahowano solą i traktowano DNase jak w metodzie D. Y. Twumasi i in. J. Biol. Chem. 252: 1917-1926 (1977). Chromatografia na Elastin Agarose: Osad z ekstrahowania DNase umieszczono w dwóch 40 ml porcjach 50 mM Tris, 1,0 M NaCl o pH 8; zawiesinę wirowano i uzyskany nadsącz podawano bezpośrednio na kolumnę przenoszącą elastynę-Sepharose 4B (2,5 X 20 cm). Kolumnę przemyto równoważącym buforem (50 mM Tris, 50 mM NaCl, pH 8,0) aż do gęstości optycznej przy 280 nm (OD280) eluatu zawracanego do linii podstawowej. Dodatkowe zanieczyszczające proteiny eluowano dwiema objętościami kolumny 50 mM octanu, 1,0 M NaCl, pH 5,0. Elastaza i cathepsina G (HCL-G) były na końcu eluowane za pomocą 50 mM octanu, 1,0 M NaCl, 20% DMSO, pH 5,0. Kolumnę rozwijano z szybkością 6 ml/min. zbierając frakcje 10 ml. Frakcje aktywne połączone, dializowano dwa razy 61 50 mM octanu, 0,1 M NaCl, pH 5,5 i zatężono do 40 ml na ultrafiltrze Amicon (membrana YM-10). Chromatografia CM: zatężoną frakcję aktywną podawano na kolumnę CM-Sephadex C-50 (2,2 X 10 cm) zrównoważoną wcześniej 50 mM octanu, 0,1 M NaCl, pH 5,5 i kolumnę przemyto tym buforem, aby usunąć zanieczyszczające proteiny.
Eluowanie kontynuowano za pomocą 50 mM octanu, 0,2 M NaCl, pH 5,5 i uzyskany w przesunięciu pik aktywności oznaczono w porównaniu z Bz-Phe-Val-Arg-pNa. Następnie HLE eluowano buforem octanowym zawierającym 0,45 M NaCl, podczas gdy eluowanie HLC-G wymagało obecności 1,0 M NaCl w buforze, jak opisano R. Martodam i in. w Preparative Biochemistry, Vol. 9, str. 15-31 (1979). Kolumnę rozwijano z szybkością 30 ml/h zbierając 5,5 ml frakcje. Z tak oczyszczonego HLE mierzono standardową szybkość tworzenia się p-nitroaniliny w temperaturze 25°C spektrofotometrycznie w widmie widzialnym przy 410 nm z automatycznym zbieraniem danych w spektrofotometrze Cary 210 otrzymanym z Varian Associates. Reakcję zapoczątkowano przez iniekcję 10 mikrolitrów roztworu HLE do 3 ml kuwety zawierającej 2,89 ml buforu (10 mM fosforanu sodu, 500 mM NaCl, pH 7,6), 50 mikrolitrów roztworu podłoża w DMSO i 50 mikrolitrów DMSO. Początkowo szybkości reakcji stanu ustalonego produkcji pnitroaniliny obliczano z odpowiednich danych eksperymentalnych do liniowej zależności w czasie. Tę szybkość oznaczaną bez obecności inhibitora stosowano jako standardową w obliczaniu wartości K, inhibitora.
Wszystkie pochodne peptydów wytwarzane sposobem według wynalazku należą do inhibitorów „słabo-wiążących“ HLE i tym samym wymagają specjalnych metod analizy do dokładnego oznaczania wartości K, dla ich hamowania HLE (patrz J.W. Williams i J.F. Morrison, Meth. Enz. 63, 437 (1979). gdzie opisane są te metody). W typowych eksperymentach do 3 ml kuwety dodawano 2,89 ml buforu (10 mM fosforanu sodu, 500 mM chlorku sodu, pH 7,6), 50 mikrolitrów roztworu inhibitora w DMSO i 50 mikrolitrów roztworu podłoża w DMSO. Kuwetę zamykano,
150 268 odwracano kilka razy do wymieszania jej zawartości i utrzymywano w temperaturze 25°C w spektrofotometrze. Po upływie 5 minut podczas których roztwór osiągał równowagę termiczną, dodano do kuwety 10 mikrolitrów roztworu enzymu do zapoczątkowania reakcji. Dwie lub trzy próby przeprowadzono dla zerowego stężenia inhibitora i co najmniej trzy próby dla niezerowych stężeń inhibitora. Wartości K, obliczono według metod przedstawionych w powyższej publikacji przez Williamsa i Morrisona. Wartości K, dla wybranych związków były mniejsze niż 10 7'.
Modele zwierzęce. Modele zwierzęce rozedmy obejmują dotchawicze (i.t)podawanie elastolitycznej proteazy w celu wywołania wolno postępującego destrukcyjnego uszkodzenia płuc. Te uszkodzenia zwykle ocenia się w czasie kilku tygodni do kilku miesięcy od początkowego urazu. Jednakże te proteazy indukują również uszkodzenie, które jest widoczne w pierwszych kilku godzinach. To wczesne uszkodzenie jest pierwszym krwotocznym postępującym do zapalnego uszkodzenia pod koniec pierwszych 24 godzin i ustępuje w pierwszym tygodniu po urazie. Aby wykorzystać wczesne uszkodzenie stosowano następujący model.
Chomiki słabo znieczulono za pomocą Brevitalu. Następnie bezpośrednio do tchawicy podawano solankę buforowaną fosforanem (PBS) o pH 7,4 samą lub z dodatkiem 400 pg elastazy leukocytów ludzkich (HLE). Dwadzieścia cztery godziny później zwierzęta uśmiercono, usunięto płuca i ostrożnie usunięto zewnętrzną tkankę. Oznaczono wagę obrzękniętego płuca, płuca przepłukano PBS i całkowitą ilość czerwonych i białych krwinek wypłukanych zebrano i oznaczono. Wartości dla wagi obrzękniętego płuca, całkowitych wypłukanych czerwonych krwinek i całkowitych wypłukanych białych krwinek są podwyższone w dawce zależnej od podawania HLE. Związki, które są skutecznymi inhibitorami elastazy mogą zapobiegać lub zmniejszać surowość uszkodzeń wywołanych przez enzym dając w wyniku mniejszą wagę obrzękniętego płuca i zmniejszone wartości całkowitych wypłukanych krwinek zarówno czerwonych jak i białych, w stosunku do podawania samego HLE. Związki można oceniać przez podawanie ich razem z HLE lub w różnych czasach przed podaniem HLE określając ich użyteczność w zapobieganiu uszkodzeniom HLE. Związki otrzymane sposobem według wynalazku pozwalają uzyskać statystycznie znaczące zmniejszenie wagi obrzękniętego płuca i całkowitych wypłukanych krwinek w stosunku do samego HLE.
Związki otrzymane sposobem według wynalazku wykazały aktywność w co najmniej jednej z prób opisanych powyżej w Pomiarze hamowania lub Modelu zwierzęcym. Należy zauważyć, że nie zawsze występuje prosta korelacja między aktywnością związków mierzoną jako wartości K, w próbie pomiaru hamowania i zredukowanymi wartościami całkowitych wypłukanych komórek i wagi obrzękniętego płuca w stosunku do podawania samego HLE uzyskanymi w próbie modelu zwierzęcego. Wydaje się, że próba modelu zwierzęcego lepiej przewiduje aktywność takich związków w leczeniu rozedmy.
Formakokinetyka. Samcom chomików syryjskich o wadze 80-120 g wstrzyknięto dożylnie badany związek. Przed wstrzyknięciem i w różnych okresach czasu po wstrzyknięciu chomiki słabo znieczulono eterem i pobierano próbki krwi po około 0,2 ml każda przez nakłuwanie serca. Krew wyciśnięto do 2 ml probówek wirówki i pozostawiono do skrzepnięcia na godzinę. Następnie próbkę wirowano i usuwano surowicę.
Poziom leku oznacza się najpierw przez inaktywowanie endogennych inhibitorów elastazy przez inkubowanie przez 5 minut 50 mikrolitrów surowicy z równą objętością buforu zawierającego 5 mg/ml trypsyny z trzustki wołowej. Następnie 10 mikrolitrów surowicy inaktywowanej trypsyną dodaje się do 0,52 ml kuwety zawierającej bufor sporządzony 20 nM odnośnie HLE. Po dodatkowych 30 minutach inkubowania rozpoczyna się reakcję przez dodanie podłoża w ilości 350 mikrolitrów (MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-pNA, 1,6 mm) i reakcję kontroluje się spektrofotometrycznie przy długości fali 410 nm. Dla celów porównawczych oznacza się trwałość surowicy badanych związków w następujący sposób:
Procentowe hamowanie próbki surowicy obliczono następująco:
V0-Vi procentowe hamowanie —-X 100
Vo gdzie Vo oznacza szybkość uzyskaną w obecności kontrolnej surowicy, a V, oznacza szybkość
150 208 hamowanej reakcji. Dane wyraża się jako log procentowe hamowania względem czasu po podaniu inhibitora. Przybliżony półokres życia surowicy (t 1/2) oblicza się z otrzymanej krzywej.
Związki wytwarzane sposobem według wynalazku mogą być podawane zwierzętom ciepłokrwistym, zwłaszcza ludziom w warunkach leczenia rozedmy płuc, miażdżycy, reumatycznego zapalenia stawów i zapalenia kostno-stawowego, a w szczególności rozedmy. Związki można podawać doustnie, pozajelitowo, włącznie z podskórnym osadzaniem za pomocą pompy osmotycznej lub poprzez proszkowe lub ciekłe aerozole. Mogą być one sporządzane dogodnie w postaci doustnych lub pozajelitowych dawek przez łączenie około 10-250 mg związku aktywnego na jednostkę dawki z konwencjonalnym wehiculum, zaróbką, środkiem wiążącym, środkiem konserwującym, stabilizatorem, środkiem aromatyzującym lub podobnymi stosowanymi w praktyce farmaceutycznej, na przykład jak opisano w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr3755340. . . . .
Do podawania pozajelitowego należy stosować 1-10 ml iniekcje dożylne, domięśniowe lub podskórne zawierające około 0,02 do 10 mg/kg wagi ciała związku według wynalazku 3 lub 4 razy dziennie. Iniekcje powinny zawierać związek według wynalazku w postaci wodnego, izotonicznego, sterylnego roztworu lub zawiesiny ewentualnie ze środkiem konserwującym takim jak fenol lub środkiem rozpuszczającym takim jak kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA).
W aerozolu proszkowym związki wytwarzane sposobem według wynalazku mogą być podawane w taki sam sposób jak cromolyn sodu przez turbo-inhalator Spinhaler pochodzący z Fisons Corp. of Bedford, Massachusetts, w ilości około 0,1 do 50 mg na kapsułkę, podając średniemu człowiekowi 1-8 kapsułek dziennie. Każda kapsułka do stosowania w Spinhalerze zawiera żądaną ilość związku według wynalazku i 20 mg farmaceutycznie dopuszczalnego nośnika takiego jak laktoza. W ciekłym aerozolu związki według wynalazku podaje się w ilości około 100 do 1000^g na jeden wdech lub aktywne uwalnianie standardowej objętoście propelentu. Ciekły aerozol należy podawać w ilości 1-8 dawek dziennie ze zmieniającą się dawką w zależności od stanu pacjenta, wagi pacjenta i rozkładu wielkości cząstek aerozolu, ponieważ mniejsze cząstki będą powodowały większą penetrację płuc. Propelenty, na przykład fluorowane węglowodory lub izobutan, pojemniki, zawory i mechanizmy uruchamiające dla ciekłych aerozoli są opisane przez L. Lachmana i in. w „Theory and Practice of Industrial Pharmacy, Lea and Febiger, Philadelphia (1976).
W następujących przykładach wykonania i w całym opisie stosowano następujące skróty i oznaczenia: atm (atmosfery), bp (temperatura wrzenia), °C (stopnie Celsjusza), wszystkie temperatury podane są w stopniach Celsjusza o ile nie podano inaczej, g (gramy), hr (godziny), mg (miligramy), min. (minuty), ml (mililitry), 1 (litry), mol (mole), nmol (milimole), mp (temperatura topnienia), bp (temperaturze wrzenia), N (normalny), nm (nanometry), nM (nanomolowy), satd lub sat'd (nasycony), aq (wodny), conc (stężony), x (czasy, temperatura pokojowa (20-23°), DDC (1,3-dicykloheksylokarbodiimid), DMF (dimetyloformamid), DMSO (dimetylosulfotlenek), Et20 (eter etylowy), EtOAc (octan etylu), HOAc (kwas octowy), HOBT (hydroksybenzotriazol), MeOH (alkohol metylowy), EtOH (alkohol etylowy), Pd/C (katalizator palladowy na węglu aktywnym), pNA (paranitroanilid), THF (tetrahydrofuran), CBZ (benzyloksykarbonyl), t-BOC (trzeciorzędowy butyloksykarbonyl), DMF (dimetyloformamid), DCC (1,3-dicykloheksylokarbodiimid), AcOH (kwas octowy), S.M. (materiał wyjściowy), NMM (N-metylomorfolina),^ (mniej niż lub równo z), TEA (trietyloamina), TFA (kwas trifluorooctowy), Ac2O (bezwodnik octowy), CDI (karbonylodiimidazol), WSCDI (rozpuszczalny w wodzie karbodiimid: l-etylo-3-/3-dimetyloamino-propylo/karbodiimidochlorowodorek), DMAP (4-dimetyloaminopirydyna), perjodinan Dess-Martina (l,l,l-triacetoksy-2,l-benzoksyjodol-3/3H/-on), HCl gas (gazowy HCl) - inaczej HCl w roztworze wodnym, Rh/C (katalizator rodowy na węglu aktywnym), 0 (grupa fenylowa), TLC (chromatografia cienkowarstwowa na żelu krzemionkowym jeśli nie określono inaczej), Rf (względna ruchliwość w TLC), MPLC (średniociśnieniową chromatografia cieczowa),HPLC (wysokociśnieniowa chromatografia cieczowa), tR (czas retencji HPLC w minutach), FR (szybkość przepływu HPLC w ml/min), Col A (kolumna do analizy Zorbax ODS, 4,6 mmX25 cm), Col B (kolumna do analizy Phenomenex Zorbax C-8,4,6 mm X 35 cm), Col C (kolumna preparatywna i analityczna Altex Ultrasphere), Octyl 10 mm I.D. Χ25 cm 5 mikronów), flash chromatography (kolumnowa chromatografia równowagowa na żelu krzemionkowym jeśli nie podano inaczej), suction chromatography (chromatografia ssąca kolumnowa na żelu krzemionkowym). Ponadto
150 268
Ο stosuje się konwencjonalne symbole dla pierwiastków C, Η, N itd, 1H NMR (jądrowy rezonans magnetyczny) widma otrzymano stosując aparat 80 MHz lub 250 MHz i tetrametylosilan (TMS) jako wzorzec wewnętrzny (rozpuszczalniki dla poszczególnych przykładów podano w przykładach), δ (części na milion z TMS), s (singlet), d (dublet), dd (dublet dubletów), m (multiplet).
Nomenklatura: Dla jednorodności i jasności wszędzie gdzie to możliwe stosuje się nazwę „typ sekwencji aminokwasu. Ponadto aminy o wzorze 5 i N-podstawniki końcowych atomów węgla amidów o wzorze 1,2,3,4 i 7, które formalnie pochodzą ze związków o wzorze 5 są ponumerowane jak pokazano we wzorach 8 i 9.
Przykład I. Sposób wytwarzania chlorowodorku 2/RS/, 3/SR/-3-amino-4-metylo-1,1,1 t rifluoro-2-pentanolu.
a/ Sposób wytwarzania 2-metylo-l-nitropropanu. 94,0 g (0,51 mola) l-Jodo-2-metylopropanu wkraplano do wstępnie ochłodzonej do 0°C zawiesiny 100,0 g (0,65 mola) AgNO2 w 180 ml Et2O. Mieszaninę reakcyjną chroniono przed dostępem światła i mieszano przez noc, a następnie pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej. Mieszaninę reakcyjną filtrowano przez Celite. Przesącz zatężono pod próżnią i pozostałość destylowano pod próżnią (ostrożnie ze względu na możliwość wybuchu) otrzymując 37,7 g (0,366 mola) produktu o temperaturze wrzenia 61-65°C pod ciśnieniem 6913,6 Pa.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/, 3/SR/-4-metylo-3-nitro-l,l,l-trifluoro-2-pentanolu. 37,7 g (0,366 mola) l-Nitro-2-metylopropanu z przykładu la, 58,5 g (0,366 mola) hemiacetalu trifluoroacetaldehydu etylu (90% czystości) i 3,4 g (0,025 mola) K2CO3 zmieszano i mieszano w temperaturze 60°C przez 3 godziny, a następnie w temperaturze pokojowej przez 3 dni. Dodano 75 ml solanki i 50 ml IN wodnego roztworu HCl i oddzielono dolną warstwę organiczną. Warstwę wodną ekstrahowano dwa razy po 250 ml Et2O i połączone warstwy organiczne przemyto solanką, wysuszono nad Na2SC>4, przesączono i zatężono pod próżnią. Pozostałość oczyszczano metodą chromatografii równowagowej na żelu krzemionkowym wymywając kolumnę CH2CI2: heksan (50:50), CH2CI2: heksan (75:25), CH2C12 (100%) i MeOH:CH2Cl2 (5:95). Otrzymano 44,9 g produktu. TLC Rf = 0,65, żel krzemionkowy, EtOAc: CHCI3 (5 5 95).
c/ Sposób wytwarzania chlorowodorku 2/RS/, 3/SR/-3-amino-4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2pentanolu. Roztwór 37,0 g (0,184 mola) produktu z przykładu Ib w 200 ml Et2O wkraplano do zawiesiny 22,0 g (0,58 mola) glinowodorku litu w 800 ml Et2O. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 45 minut i ostrożnie dodawano 110 ml nasyconego wodnego roztworu Na2SC>4. Otrzymaną zawiesinę przesączono, przesącz traktowano eterowym roztworem HCl i zatężono pod próżnią otrzymując 37,6 g produktu, który stosowano bez dalszego oczyszczania. Widmo 1H NMR (CD3COCD3) (250 MHz): 1,2 <5, m, 6H; 2,3 <5, m, 1H; 3,58 δ, m, 1 H; 4,98 <5, m, 2 H; 7,78 δ, m, (NH2).
Przykład II. Sposób wytwarzania 2/RS/, 3/SR/-N-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-hydroksypentylo) /-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/, 3/SR/-l-/(fenylometoksy) karbonylo/-N-/3-(4-metylo-l,l ,1trifluoro-2-hydroksypentylo)/-prolinamidu. Roztwór 11,01 g (0,08 mola) chloromrówczanu izobutylu w 30 ml suchego THF wkraplano przez 5 minut do wcześniej ochłodzonego do temperatury -15°C roztworu 19,21 g (0,077 mola) CBZ-L-proliny i 8,18 g (0,081 mola) N-metylomorfoliny w 300 ml THF w atmosferze azotu. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze -15°C przez 15 minut. Następnie temperaturę obniżono do -40°C i dodano roztwór 16,00 g (0,077 mola) produktu z przykładu Ic i 8,18 g (0,081 mola) N-metylomorfoliny w 200 ml THF kroplami. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze -40°C przez godzinę, a następnie pozostawiono do stopniowego ogrzania do temperatury pokojowej i w tej temperaturze mieszano przez dodatkową godzinę. Mieszaninę reakcyjną przesączono i zatężono pod próżnią. Otrzymany syrop rozpuszczono w CHCI3 i przemyto 20% wodnym roztworem kwasu cytrynowego dwukrotnie stosując każdorazowo 75 ml kwasu. Warstwę organiczną zatężono pod próżnią otrzymując surowy produkt w postaci białego, mętnego syropu. Surowy produkt roztarto z mieszaniną eteru: heksanu (1:2) otrzymując trzy rzuty produktu w postaci białego proszku (17,11 g). TLC, Rf = 0,46, żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3 (3:97), temperatura topnienia 152-154°C, HPLC, tR = 14,06,16,63,18,23, 19,00, kolumna analityczna Zorbax ODS, H2O: CH3CN (70:30), szybkość przepływu 3 ml/min.
150 268 b/ Sposób wytwarzania 2/RS/, 3/SR/-N-/3-(4-metylo-l,l,l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/L-prolinamidu. 2,00 g (4,97 mmola) produktu z przykładu Ha rozpuszczono w 50 ml absolutnego etanolu, dodano 0,5 g 10% Pd/C i mieszaninę reakcyjną uwodorniano (310 388 Pa wodoru) przez 3 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną przesączono przez Celite i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią otrzymując 1,36 g produktu, który stosowano bez dalszego oczyszczania.
Przykład III. Sposób wytwarzania 2/RS/, 3/SR/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-l, 1,1-trifluoro2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania estru metylowego N-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-walilo-L-proliny. 163,3 g (1,2 mola) 1-Hydroksybenzotriazolu dodano do ochłodzonego do 0°C roztworu 151,8 g (0,6 mola) N-benzyloksykarbonylo-L-waliny w 1,3 1 DMF i mieszano przez 15 minut. Dodano zawiesinę 100,0 g (0,6 mola) chlorowodorku estru metylowego L-proliny i 64,2 g (0,63 mola) TEA w 0,71 DMF, a następnie 137,1 g (0,66 mola) DCC. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 3 godziny w temperaturze 0°C, a następnie 3 dni w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną przesączono i przesącz zatężono pod próżnią. Pozostałość zmieszano z 0,75 1 EtOAc i przesączono. Przesącz przemywano kolejno 0,75 1 20% roztworu kwasu cytrynowego, nasyconym wodnym roztworem NaHCCh i solanką. Fazę organiczną wysuszono nad MgSC>4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 271,3 g surowego produktu. Produkt oczyszczano metodą chromatografii równowagowej na żelu krzemionkowym rozpoczynając eluowanie kolumny CH2CI2 i kończąc MeOH CH2CI2 (4:96). Otrzymano 218,1 gproduktu. TLC, Rf = 0,48, żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3 (5:95).
b/ Sposób wytwarzania N-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-walilo-L-proliny. Do roztworu 158,8 g (0,438 mola) produktu z przykładu Ilia w 1,61 MeOH dodano 500 ml IN wodnego roztworu NaOH i roztwór mieszano w temperaturze pokojowej przez 17 godzin. Dodano 100 ml IN roztworu NaOH i mieszanie kontynuowano przez 5 godzin. Dodano dodatkowe 50 ml IN wodnego roztworu NaOH i mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc. Mieszaninę zatężono pod próżnią any usunąć MeOH. Dodano 1,0 1 H2O i wodny roztwór ekstrahowano Et2O. Wodny roztwór zakwaszano 700 ml IN wodnego roztworu HCI i ekstrahowano EtOAc. Ekstrakty octanowe przemyto solanką, wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 159,2 g produktu TLC, Rf = 0,34, żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3: AcOH (5:94:1).
c/ Sposób wytwarzania 2/RS/, 3/SR/-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-l,l,l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu. 77,3 g (0,566 mola) Chloromrówczanu izobutylu dodano do ochłodzonego do temperatury -15°C roztworu 59,25 g (0,566 mola) Nmetylomorfoliny i 197,2 g (0,566 mola) produktu z przykładu Illb w 2,5 1 THF i mieszaninę mieszano przez 10 minut. Temperaturę obniżono do -40°C i dodano 59,25 g (0,566 mola) Nmetylomorfoliny, a następnie wkroplono 117,5 g (0,566 mola) produktu z przykładu Ic w 2,5 1 THF. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez trzy dni. Mieszaninę reakcyjną przesączono i przesącz zatężono pod próżnią. Pozostałość rozpuszczono w EtOAc i przemywano kolejno H2O, IN roztworem wodnym HCI i solanką. Warstwę organiczną wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono otrzymując 267,8 g surowego produktu. Produkt oczyszczano przez chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym eluując kolumnę mieszaniną ^HF: toluenu (5:95) do THF: toluenu (25:75). Otrzymano 183,8 g produktu. TLC, Rf = 0,4, żel krzemionkowy, THF: toluenu (20:80).
d/ Sposób wytwarzania 2/RS/, 3/SR/-L-walilo-N-(4-metylo-l,l,l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu. Mieszaninę 36,7 g (0,073 mola) produktu z przykładu IIIc i 10% Pd/C (10%, 50% wody) w 0,61 EtOH uwodorniono w aparacie Parra (303 975 Pa H2). Po upływie godziny naczynie reakcyjne opróżniono i ponownie zwiększono ciśnienie wodoru. Po dodatkowej 0,5 godzinie mieszaninę reakcyjną przesączono przez Celite i zatężono pod próżnią otrzymując 26,0 g produktu. TLC, Rf = 0,16, żel krzemionkowy, MeOH:CHCl3 (5:95).
Przykład IV. Sposób wytwarzania chlorowodorku 2/RS/, 3/SR/- 3-amino-4-metylo-1,1,1 trifluoro-2-pentanolu.
a/ Sposób wytwarzania 2-metylo-l-nitropropanu. Alternatywny sposób wytwarzania związku z przykładu la jest następujący: 5 1 Okrągłodenną kolbę trójszyjną wyposażono w mechaniczne mieszadło, termometr, dodatkowy lejek i wlot N2. W kolbie umieszczono 100,8 g
150 268 (6,54 mola) AgNC>2 w 2,5 1 Et2O, a 927,2 g (5,03 mola) jodku izobutylu umieszczono w dodatkowym lejku. Kolbę i lejek owinięto folią aluminiową aby zabezpieczyć mieszaninę reakcyjną przed dostępem światła. Po ochłodzeniu mieszanej zawiesiny do około 5°C w łaźni lodowej rozpoczęto wkraplanie dodatkowej porcji jodku przez 2 godziny. Temperaturę reakcji utrzymywano 5°C lub poniżej tej temperatury podczas dodawania. Po zakończeniu dodawania naczynie reakcyjne zapakowano w lód i pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej przez noc. Analiza NMR podwielokrotności próbki pobranej z mieszaniny reakcyjnej po 48 godzinach mieszania wykazała, że cały jodek izobutylu został zużyty. Mieszaninę reakcyjną przesączono przez Celite aby usunąć sole srebra i placek filtracyjny przemyto Et2O (3 X 500 ml). Połączone przesącze wysuszono MgSO., przesączono i zatężono na wyparce rotacyjnej (temperatura łaźni 35°C) do około 600 ml. Po destylacji frakcyjnej pod ciśnieniem atmosferycznym (możliwość wybuchu) otrzymano oczyszczony nitrozwiązek w ilości 350,4 g, z wydajnością 68%. Temperatura wrzenia związku wynosiła 135-142°C.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/, 3/SR/-4-metylo-3-nitro-l,l,l-trifluoro-2-pentanolu. W 3litrowej trójszyjnej kolbie okrągłodennej wyposażonej w mieszadło mechaniczne i wlot N2 umieszczono 470,0 g (3,4 mola) K2CO3,350,0 g (3,4 mola) produktu z przykładu IVa i na końcu 708,0 g (4,4 mola) hemiacetalu trifluoroacetaldehydu etylu. Mieszaninę energicznie mieszano w temperaturze pokojowej przez 76 godzin, po którym to czasie analiza 1H-NMR wykazała prawie całkowite zużycie nitroalkanu. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono CH2C12 i przesączono. Przesącz traktowano wodnym roztworem HCl aż do pH 3. Warstwy rozdzielono i warstwę wodną przemyto 500 ml CH2C12. Połączone porcje CH2C12 przemyto 11H2O i 11 solanki. Po wysuszeniu MgSO4 i zatężeniu otrzymano 854,6 g surowego produktu w postaci żółtego oleju. Analiza 1H-NMR wykazała dwa diastereomeryczne nitroalkohole obecne w stosunku około 3:1 jak określono ilościowo przez integrację protonów alkoholu, które zgo’dnie występują w zakresie δ 6,0-6,5, gdy przebiega w de-acetonie zanieczyszczonym przez rozpuszczalniki i małe ilości materiałów wyjściowych. Po destylacji pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano następujące frakcje:
waga temperatura wrzenia °C
A 191,7 g 42-50°C/atm. (substraty + rozpuszczalniki)
B 34,8 g 35Ύ133 Pa-45°/665 Pa
C 213,6 g 45°/665 Pa-95°/199,5 Pa D 337,8 g 95°/199,5 Pa-105°/266 Pa E 114,0 g substancje lotne
Dla ułatwienia oczyszczania w następnych etapach wysiłki skoncentrowano na otrzymaniu głównej pary diastereomerów w stanie zasadniczo czystym. Główna para diastereomerów krystalizuje z mieszaniny diastereomerów jak również z zimnego pentanu, tworząc bezbarwne igły. Tak więc frakcję C z powyższej destylacji pozostawiono do wykrystalizowania przez noc w lodówce. Produkt zebrano, przemyto zimnym pentanem i suszono przez kilka godzin w piecu próżniowym (Uwaga! Materiał jest w pewnym stopniu lotny i znaczące ilości mogą być stracone w wydłużonym traktowaniu próżniowym) otrzymując 52,0 g zasadniczo czystego materiału. Frakcje, o których wiadomo! było, że zawierają znaczące ilości żądanego izomeru (przez analizę NMR) ponownie traktowana w ten sam sposób (i ponownie destylowano dostarczając nowe frakcje dalej wzbogacone wżądany diastereomer) otrzymując ewentualnie całkowitą ilość 197,7 g zasadniczo czystego nitroalkoholu. Ilość reprezentuje rodzaj działania lecz nie odzwierciedla górnej granicy wydajności· ć/ Sposób wytwarzania chlorowodorku 2/RS/, 3/SR/-3-amino-4-metylo-1,1,1-trifluoro-2pentanolu. 232 ml Bezwodnego EtOH dodano do 2,30 g 10% Pd/C w atmosferze N2*. Dodano 22,93 g (0,144 mola) produktu z przykładu I Vb i otrzymaną mieszaninę umieszczono w aparacie do uwodornienia (około 380 000 Pa H2) przez noc. Katalizator usunięto przez odsączenie na Celicie. Placekjiltracyjny przemyto EtOH. Gazowy HCl przepuszczano przez połączone przesącze aż do zaabsorbowania około 8 g (około 0,22 mola). Roztwór zatężono na wyparce rotacyjnej i uzyskaną pozostałość zatężono kilkakrotnie z Et2O do otrzymania białej stałej substancji. Stałą substancję przemyto Et2O i wysuszono przez noc w piecu próżniowym otrzymując 20,79 g (88)) chlorowodorku aminy. Powoli ogrzewany materiał mięknie w temperaturze 90° i topi się w temperaturze 118-120°C. Gdy próbkę zanurza się w łaźni ogrzanej do temperatury 110°C, wówczas topi się natychmiast.
*Mniej aktywny katalizator (na przykład 10% Pd/BaSC>4, mokry 10% Pd/C) lub niedostateczne czasy reakcji mogą prowadzić do produkcji jednego lub więcej produktów ubocznych.
158 268 11
Przykład V. Sposób wytwarzania 2/RS/, 3/SR/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-l,l,l-trifluoro2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania estru metylowego N-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-walilo-Lproliny. Roztwór 100,0 g (0,40 mola) CBZ-L-waliny w 11 DMF (wysuszonego nad sitami molekularnymi) umieszczono w 3 litrowej okrągłodennej kolbie trójszyjnej wyposażonej w mechaniczne mieszadło, wlot N2 i termometr. Kolbę ochłodzono do 0°C i dodano 108,1 g (0,80 mola) hydratu HOBT. Mieszaninę mieszano przez około 15 minut i dodano zawiesinę 66,2 g (0,40 mola) chlorowodorku estru metylowego L-proliny w 500 ml DMF i 41,8 g (0,42 mole) TEA w jednej porcji. Dodatkowe 500 ml DMF stosowano w celu zakończenia przeniesienia zawiesiny. Do mieszaniny reakcyjnej dodano 90,8 g (0,44 mola) DCC i przemyto 100 ml DMF. Mieszaninę mieszano przez 3 godziny w temperaturze 0°C, po czym pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez 3 dni. Następnie mieszaninę reakcyjną przesączono i przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Placek filtracyjny przemyto ETOAc (3 X 1 1) i po zatężeniu uzyskany przesącz dał materiał, który połączono z pozostałością z zatężenia roztworu DMF. Połączoną mieszaninę produktu (około 2,5 1) rozcieńczono 21 EtzO i przechowywano w lodówce przez noc. Osad usunięto przez filtrację. Gdy przesącz przemyto IN HCl w ilości 11, dodatkowo utworzony osad usunięto przez filtrację.
Następnie przesącz przemyto 11 IN HCl, 0,51H20,2X11 nasyconego roztworu NaHCC>3 i 0,5 1 solanki. Po wysuszeniu MgSC>4 i zatężeniu otrzymano 587,2 g surowego produktu. Materiał poddano chromatografii równowagowej na 3,5 kg żelu krzemionkowego. Kolumnę eluowano CH2CI2 do 5% MeOH: CH2CI2 (5:95). Zmieszane frakcje poddano powtórnej chromatografii w celu usunięcia zanieczyszczeń. Po połączeniu frakcji zawierających żądany produkt otrzymano 500,7 g (87%) materiału zanieczyszczonego małą ilością zanieczyszczeń o niskim Rf. TLC, Rf = 0,37, żel krzemionkowy, Et2O: heksan (3:1), Rf = 0,53, żel krzemionkowy, MeOHiCHCb (5:95).
b/ Sposób wytwarzania N-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-walilo-L-proliny.
Metanolowego roztworu produktu z przykładu Va (500,7 g, 1,38 mola) umieszczono w 121 okrągłodennej kolbie trójszyjnej wyposażonej w mechaniczne mieszadło i wlot N2. Do mieszanego roztworu dodano 1,41 IN NaOH podnosząc pH do około 13. Po reakcji mieszano przez 3 godziny, pH spadło do 11. Użyto dodatkowy 01,11N NaOH aby podnieść pH do 12 i mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Usunięto MeOH z mieszaniny reakcyjnej przez zatężenie na wyparce rotacyjnej. Podczas usuwania rozpuszczalnika dodano 11 wody aby zmniejszyć stężenie zasady. Wodny roztwór przemyto Et2O przed zakwaszeniem 1,5 1 IN HCl do pH około 3,5. Warstawy oddzielono i warstwę wodną ekstrahowano EtOAc (3X1 1). Połączone warstwy organiczne przemyto 11 solanki, wysuszono MgSOi i zatężono otrzymując 493,0 g (100%) produktu w postaci białej stałej substancji. TLC, Rf = 0,51, żel krzemionkowy, MeOH:CHCl3 (5 :95) z dodatkiem AcOH.
c/ Sposób wytwarzania 2/RS/, 3/SR/-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
105,3 g (0,302 mola) produktu z przykładu Vb rozpuszczono w 1,51 suchego THF w atmosferze azotu w 3 1 okrągłodennej kolbie trójszyjnej wyposażonej w mieszadło mechaniczne, termometr, wlot azotu i dodatkowy wkraplacz. Roztwór ochłodzono do temperatury -35°C i traktowano 1 równoważnikiem (34 ml, 0,309 mola) NMM. Przez 20 minut wkraplano 39 ml (0,307 mola) chloromrówczanu izobutylu utrzymując temperaturę ^-35°C. Po zakończeniu dodawania mieszaninę reakcyjną mieszano przez godzinę w temperaturze -35°C. Dodano drugi równoważnik (34 ml) NMM. Następnie dodano produkt z przykładu IVc w ilości 62,8 g (0,302 mola) w 300 ml THF z taką szybkością, aby utrzymać temperaturę ^-35°C. Po zakończeniu dodawania utrzymywano temperaturę ^-35°C przez godzinę i mieszaninę pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej mieszając ją przez noc. Mieszaninę reakcyjną przesączono i placek filtracyjny przemyto 11 THF. Połączone przesącze zatężono otrzymując 189 g surowego produktu.
150 268
Materiał poddano chromatografii równowagowej na 5000 ml żelu krzemionkowego i kolumnę eluowano mieszaniną THF: toluenu (1:9). Gdy produkt zaczynał eluować polarność rozpuszczalnika zmieniano w gradiencie: THF:toluenu (15:85), THF:toluenu (20:80) i na końcuMeOH: THF: toluenu (2,5: 30:70). MeOH dodawano w minimalnej ilości aby zapobiec eluowaniu zanieczyszczeń o niskiej wartości Rf. Po zatężeniu frajtcji przez wysuszenie pod próżnią przez noc otrzymano 12,0 g (8%) słabo zanieczyszczonego produktu i 131,6 g (87%) zasadniczo czystego materiału.
/Uwaga: roztwory materiału po zakończeniu suszenia dały pianę, którą ewentualnie zestalano przy rozszerzonym działaniu próżniowym. Operację należy przeprowadzić ostrożnie w dostatecznie dużej kolbie aby pomieścić rozprężającą się pianę/.
TLC, Rf = 0,25, żel krzemionkowy, MeOH : CHCI3 (5 :95); Rf — 0,37, żel krzemionkowy, THF: toluenu (20:80). Gdy materiał jest lekko plamisty dwa izomery rozdzielone dają plamy przy Rf = 0,37 i Rf = 0,46, żel krzemionkowy, THF: toluenu (20:80).
Uwaga: Utrzymanie wewnętrznej temperatury podanej w procesie jest decydujące dla otrzymania zasadniczo czystego produktu.
d/ Sposób wytwarzania 2/RS/, 3/SR/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-l,l,l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
131,6 g (0,262 mola) produktu z przykładu Vc rozpuszczono w 750 ml EtOH i połączono z 13,0 g (50% H2O) 10% Pd/C w atmosferze azotu w dużym aparacie Parra do uwodornienia. Mieszaninę reakcyjną wytrząsano pod ciśnieniem 380 000 Pa, H2. Ciśnienie wodoru utrzymywano aż do zaniku wchłaniania. Badanie reakcji metodą TLC wykazało całkowite zużycie materiału wyjściowego. Mieszaninę reakcyjną przesączono przez Celite i zatężono do piany. Materiał roztarto z Et2O, przesączono i wysuszono otrzymując 81,4 g (84%) jasnoszarej stałej substancji, TLC, Rf = 0,41, żel krzemionkowy, CHCI3: MeOH (10:1/.
Przykład VI. Sposób wytwarzania 3S/lub R/-fenylometoksykarbonylo-L-walilo-N-/3(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 | = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R2 = OCHz, A = -O.
a/ Sposób wytwarzania 2R,3S-3-amino-1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-pentanolu w postaci soli z kwasem D-winowym.
g Chlorowodorku aminy otrzymanego jak w przykładzie IVe rozpuszczono w wodzie i zobojętniono stałym NaHCOe. Wodny roztwór ekstrahowano kilka razy CH2CI2. Połączone ekstrakty wysuszono Na2SC>4 i zatężono otrzymując 14,04 g wolnej aminy w postaci białej stałej substancji. Materiał połączono z 12,31 g kwasu D-winowego w 100 ml wrzącego bezwodnego EtOH i otrzymany mętny roztwór przesączono na gorąco przez bibułę filtracyjną. Roztwór najpierw chłodzono powoli do temperatury pokojowej przez noc, a następnie umieszczono w lodówce na kilka godzin. Osad zebrano w ceramicznym lejku, przemyto zimnym EtOH i suszono przez noc w piecu próżniowym w temperaturze 40°C. Próbka wysuszonej białej stałej substancji (4,56 g) topiła siąę w temperaturze 127-130°C. Większość tego materiału (4,05 g) rozpuszczono w 20 ml wrzącego EtOH i roztwór powoli chłodzono do temperatury pokojowej. Białą stałą substancję podobną do żelu, która osadziła się zebrano w lejku ze spiekanego szkła i przemyto kilka razy porcjami EtOH. Po wysuszeniu w piecu próżniowym w temperaturze 40°C przez kilka godzin otrzymano białą stałą substancję o temperaturze topnienia 132-134°C.
b/ Sposób wytwarzania 2S,3S-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 — CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2, A = -0. 1,00 g (2,87 mola) kwasu otrzymanego według przykładu Vb rozpuszczono w 16 ml suchego THF w atmosferze azotu w okrągłodennej trójszyjnej kolbie wyposażonej w termometr, wlot azotu, przegrodę i magnetyczne mieszadło. Dodano 0,34 ml (3,09 mola) NMM i otrzymany mieszany roztwór ochłodzono do wewnętrznej temperatury -35°C. Przez 2 minuty dodawano 0,37 ml (2,85 mola) chloromrówczanu izobutylu, nie pozwalając wzrosnąć temperaturze powyżej -35°C. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez godzinę w temperaturze -45° do-35°. 0,92 g (2,86 mola) soli kwasu D-winowego z przykładu VIa w mieszaninie 5 ml THF i 2 ml DMSO traktowano 0,68 ml NMM i mętny roztwór dodano do mieszaniny reakcyjnej z taką szybkością, aby temperaturę utrzymać poniżej -40°C. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze -45° do -25° przez godzinę, a następnie pozostawiono ją do ogrzania do temperatury
150 268 pokojowej przez noc. Mieszaninę rozcieńczono CHCI3, a następnie przemyto wodą i nasyconym wodnym roztworem NaHCOe, wysuszono Na2SC>4 i zatężono otrzymując 1,15 g (80%) związku tytułowego w postaci białej stałej substancji. Widmo1H-NMR tej substancji w DMSO-d6 wykazało dublet przy <5 6,43, który odpowiada przesunięciu chemicznemu protonu alkoholu w substancji o ustalonej konfiguracji względnej.
c/ Sposób wytwarzania 3S/lubR/-fenylometoksykarbonylo-L-walilo-N-/3-1,1,1-trifluoro-4metylo-2-oksopentylo /-L-prolinamidu /związek o wzorze lb, R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3W /CH3, R3 = OCH2, A = -0.
Porcję 0,25 g (0,5 mmola) alkoholu otrzymanego w przykładzie VIb rozpuszczono w CH2CI2 i traktowano 0,42 g (0,99 mmola) perjodinanu Dess-Martina w jednej porcji. Dodano 0,08 ml (1,04 mmola) TFA i słabo mętną mieszaninę pozostawiono do mieszania przez noc. W mieszaninie utworzyła się biała zawiesina. Materiał wyjściowy był nieobecny, co stwierdzono za pomocą analizy TLC. Dodano wodę zawierającą 0,78 g Na2S2C>3 i 0,42 g NaHCOe i mieszano z mieszaniną reakcyjną. Gdy warstwa organiczna ewentualnie była sklarowana nad białą stałą zawiesiną, oddzielono ją od fazy wodnej. Warstwę organiczną przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCC>3, wysuszono Na2SC>4 i zatężono do oleju. Materiał ponownie rozpuszczono i zatężono z mieszaniny Et2O i heksanu otrzymując 0,21 g (84% wydajności) białej stałej substancji. Po krystalizacji z gorącej mieszaniny Et2O/heksan otrzymano zasadniczo czystą próbkę związku tytułowego jako zasadniczo czysty izomer, który wykazał pojedyńczy pik w HPLC z czasem retencji identycznym z autentyczną próbką związku tytułowego otrzymanego jak opisano w przykładzie CXI. HPLC, tR = 5,65, Col A, H2O: CH3CH (55:45), FR = 2,0.
Przykład VII. Sposób wytwarzania l-/2-(tricyklo[3.3.1.13,7]-dec-l-ylo)etoksykarbonylo/N-/3/RS/-3-(4-metylo-1,1,1 ,-trifluoro-2-oksopentylo)/- L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania węglanu 4-nitrofenylo-2-/tricyklo-[3.3.1.13,7]dec-l-ylo/etylu.
Do roztworu 1,17g /5,82 mmola/ chloromrówczanu p-nitrofenylu w 25 ml Et2O w temperaturze O°C dodano 5 ml pirydyny, a następnie 1,00 g /5,54 mmola/ 2-/l-adamantylo/etanolu w 20 ml Et2O wkraplano przez godzinę. Otrzymaną mieszaninę mieszano przez 12 godzin i rozdzielono między H2O i Et2O. Warstwę eterową przemyto 5% wodnym roztworem HCl, buforem fosforanowym pH 7,0, wysuszono nad MgSO4, przesączono i rozpuszczalniki usunięto pod próżnią. Surowy produkt oczyszczano przez chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym. Kolumnę eluowano EtOAc:heksan /5:95/ otrzymując 1,0 g produktu w postaci białego proszku. TLC, Rf = 0,29, żel krzemionkowy, EtOAc:heksan /5:95/.
b/ Sposób wytwarzania l-/2-(tricyklo[3.3.1.13'7]dec-l-ylo)etoksykarbonylo/-N-/2/RS/,3/SR/-3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 731,0 mg /2,98 mmola/ produktu z przykładu VIIa, 500 mg /1,80 mmola/ produktu z przykładu Ilb i 2,57 g /18,6 mmola/ K2CO3 w 50 ml DMF mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, przesączono i usunięto rozpuszczalnik pod próżnią. Pozostałość umieszczono w EtOAc, przemyto 3 porcjami 10% wodnego roztworu NaOH, wysuszono nad stałym K2CO3: :Na2SO4 /10:90/ przesączono i usunięto rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt poddano chromatografii na żelu krzemionkowym eluując kolumnę mieszaniną MeOH:CHCl3 /1:99/. Otrzymaną stałą substancję przemyto heksanem otrzymując 340 mg produktu w postaci białej stałej substancji; HPLC, tR = 5,86,6,38, kolumna analityczna Zorbax ODS, szybkość przepływu 2 ml/min., CH3CN:H2O:TFA /70:30:0,1/.
c/ Sposób wytwarzania l-/2-(tricyklo[3.3.1.13,7]dec-l-ylo)etoksykarbonylo/-N-3/RS/-/3(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Do roztworu 1,09 g /8,60 mmola/ chlorku szczawiowego w 15 ml suchego CH2CI2 ochłodzonego do temperatury -43°C dodano 1,37 g /17,3 mmola/ DMSO w 10 ml suchego CH2CI2 wkraplając roztwór przez 15 minut. Roztwór mieszano przez 10 minut i w taki sam sposób dodawano 340 mg /0,72 mmola/ produktu z przykładu VIIb przez 30 minut. Po mieszaniu roztworu w temperaturze -43°C przez dodatkową godzinę powoli dodano 4,80 ml /34,5 mmola/ TEA i roztwór pozostawiono do ogrzania powoli do temperatury pokojowej i mieszano przez 2 godziny. Roztwór rozcieńczono CH2CI2, przemyto 10% wodnym roztworem HCl, 5% wodnym roztworem NaOCl, wysuszono nad stałym K2CO3:Na2SC>4 /10:90/, przesączono i rozpuszczalnik
150 268 usunięto pod próżnią. Surowy produkt oczyszczano przez dwie kolejne chromatografie równowagowe na żelu krzemionkowym eluując kolejno mieszaninę MeOHiCHCb /0,1:99,9/ i EtOAc:heksan /1:5/. Otrzymano 130 mg produktu w postaci białej stałej substancji; TLC, Rf = 0,50, żel krzemionkowy, MeOH:CHCl3 /6:95/; HPLC, tR= 5,31, kolumna analityczna Zorbax ODS, szybkość przepływu = 2 ml/min., CH3CN:H2O:TFA/70:30:0,1/.
Analiza elementarna dla wzoru C24H35N2F3O4'0,25H2 : obliczono: C 60,43, H 7,50 N 5,87 znaleziono: C 60,50, H 7,45, N 5,74
Przykład VIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/4-fenylobutylokarbonylo/-N-/3-(4-metylo1,1,1 -trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/, 3/SR/-l-/4-fenylobutylokarbonylo/-N-/3-(4-metylo-1,1,1trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 0,330 g (1,86 mmola) kwasu 5-fenylowalerianowego i 0,280 g (2,79 mmola) Nmetylomorfoliny w 100 ml THF ochłodzono do temperatury -15°C i wkroplono do niego roztwór 0,280 g (2,05 mmola) chloromrówczanu izobutylu w 5 ml THF. Mieszaninę mieszano w temperaturze -15°C przez 10 minut, po czym temperaturę obniżono do -40°C i wkroplono roztwór 0,500 g (1,86 mmola) produktu z przykładu IIb w 25 ml THF. Mieszaninę mieszano w temperaturze -40°C przez godzinę i w temperaturze pokojowej przez noc. Mieszaninę przesączono i przesącz zatężono pod próżnią. Surowy produkt oczyszczano przez chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym eluując kolumnę mieszaniną MeOH: CHCI3 (3:97). Otrzymano 0,60 g produktu w postaci białej stałej substancji; TLC, Rf = 0,50 - 0,51, żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3 (3:97).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/- l-/4-fenylobutylokarbonylu/-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 4,22 g (54,0 mmola) DMSO w 80 ml suchego CH2CI2 wkraplano przez 10 minut do ochłodzonego wcześniej do temperatury -60°C mieszanego roztworu 3,43 g (27,0 mmola) chlorku szczawiowego w 10 ml CH2CI2 w atmosferze azotu. Temperatura podczas dodawania nie przekraczała -55°C. Mieszaninę mieszano w temperaturze -60°C przez 15 minut i w tej temperaturze wkraplano roztwór 0,580 g (1,35 mmola) produktu z przykładu VIIIa w 100 ml CH2CI2 przez 10 minut. Mieszanie kontynuowano w tej samej temperaturze jeszcze przez godzinę. Następnie przez 10 minut wkraplano w temperaturze -60°C 6,98 g (54,0 mmoli) diizopropyloetyloaminy. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez godzinę, podczas której ogrzała się do temperatury otoczenia. Mieszaninę przemyto kolejno dwiema porcjami IN wodnego roztworu HCl i solanką i zatężono pod próżnią otrzymując 0,85 g surowego produktu w postaci pomarańczowego syropu. Surowy produkt oczyszczano przez trzykrotną chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym eluując kolumnę kolejno 1/ MeOH: CHCI3 (3:97), 2/ MeOH: CHC13 (3:97) i 3/ Et2O: heksan (90:10). Otrzymano 319 mg produktu w postaci białej piany; TLC, Rf = 0,33 - 0,40, żel krzemionkowy, Et2O: heksan (90:10); HPLC, tR = 17,93, 18,55, kolumna analityczna Zorbax ODS, H2O: CH3CN (55:45), szybkość przepływu = 2 ml/min.
Analiza elementarna dla wzoru C22H29N2O3F3· 1,25 H2O: obliczono: C 58,85, H 7,07, N 6,24 znaleziono: C 58,91, H 6,83, N 6,13
Przykład IX. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-(fenylometoksy)-karbonylo/-N-/3-(4-metylo1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 0,890 g (11,4 mmoli) dimetylosulfotlenku i 5 ml suchego chlorku metylenu wkraplano do mieszanego roztworu 0,75 g (5,9 mmola) chlorku szczawiowego i 5 ml suchego chlorku metylenu w temperaturze -60°C w atmosferze azotu. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury -25°C, następnie dodano roztwór 0,200 g (0,497 mmola) produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie Ha i 5 ml suchego chlorku metylenu. Otrzymaną mieszaninę mieszano w temperaturze -25°C przez 0,5 godziny, dodano 1,94 g (19,2 mmoli) trietyloaminy i mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej. Mieszaninę przesączono, przesącz odparowano, a pozostałość rozpuszczono w chloroformie. Roztwór chloroformowy przemyto kolejno IN roztworem wodnym HCl i solanką, a następnie wysuszono nad Na2SO4 i przesączono. Rozpuszczalnik usunięto pod próżnią otrzymując 0,147 g surowego produktu. Surowy produkt oczyszczano przez chromatografię równowagową na żelu krzemion150 268 15 kowym eluując kolumnę mieszaniną CHCI3 : MeOH (97:3). Otrzymano 0,11 g produktu; TLC, Rf = 0,25, CHCL3: EtOAc (90:10).
Analiza elementarna dla wzoru Ci9H23F3N2O4l,5H2O: obliczono: C 53,39, H6,13, N 6,55 znaleziono: C 53,55, H 5,78, N 6,56
Przykład X. Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania estru metylowego N-/(fenylometoksy)karbonylo/L-walilo-Lproliny.
Powtórzono sposób opisany w przykładzie Ilia.
b/ Sposób wytwarzania N-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-walilo-L-proliny.
Powtórzono sposób opisany w przykładzie Illb stosując materiał z przykładu Xa. c/ Sposób wytwarzania 2-metylo-l-nitropropanu.
Powtórzono sposób opisany w przykładzie la.
d/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-4-metylo-3-nitro-l,l,l-trifluoro-2-pentanolu..
Powtórzono sposób opisany w przykładzie Ib stosując materiał z przykładu Xc. e/ Sposób wytwarzania chlorowodorku 2/RS/,3/SR/-3-amino-4-metylo-l,l,l-trifluoro-2pentanolu.
Powtórzono sposób opisany w przykładzie Ic stosując materiał z przykładu Xd.
f/ Sposób wytwarzania 2/RS^3/SR/-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(4-metylo1,1,1 -trifluoro-2-hydroksypentylo)/- L-prolinamidu.
Powtórzono sposób opisany w przykładzie IIIc stosując związki z przykładu Xb i Xe. g/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
Powtórzono sposób opisany w przykładzie Illd stosując związek z przykładu Xf.
Przykład XI. Sposób wytwarzania 3/RS/-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(4metylo-1,1,1 -trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
a-f/ Etapy a-f powtórzono w sposób opisany w przykładzie Xa-Xf.
g/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-l,l,ltrifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 12,46 g (159,50 mmoli) DMSO w 12 ml suchego CH2CI2 wkraplano przez 10 minut do wcześniej ochłodzonego do temperatury -60°C, mieszanego roztworu 10,12 g (79,75 mmoli) chlorku szczawiowego w 160 ml suchego CH2CI2 w atmosferze azotu. Podczas dodawania temperatura reakcji nie przekraczała -50°C. Następnie przez 10 minut wkraplano roztwór 2,00 g (3,99 mmoli) alkoholu z przykładu XIf w 160 ml CH2CI2 w temperaturze -60°C. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze -60°C przez godzinę. Przez 10 minut wkraplano 20,62 g (159,50 mmoli) diizopropyloetyloaminy w temperaturze -60°C. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez godzinę, podczas której ogrzewała się ona do temperatury pokojowej. Mieszaninę przemyto IN wodnym roztworem HCl, solanką, a następnie zatężono pod próżnią otrzymując 2,76 g surowego produktu w postaci pomarańczowego syropu. Surowy produkt oczyszczano przez trzykrotną chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym eluując kolumnę kolejno: 1/ eter: heksan (80:20), 2/ MeOH : CHC13 (2,5:97,5), 3/ MeOH: CHC13 (2,5:97,5). Otrzymano 0,88 g produktu w postaci białej piany; TLC, Rf = 0,45, żel krzemionkowy, MeOH:CHCl3 (3:97); HPLC, tR = 6,45, 11,10, kolumna analityczna Zorbax ODS, H2O:CH3CN (55:45) z 0,1% kwasem trifluorooctowym, szybkość przepływu 2 ml/min.
Analiza elementarna dla wzoru C24H32N3OsF3O,5 H2O: obliczono: C 56,68 H 6,54, N 8,26 znaleziono: C 56,58 H 6,52, N 8,21
Przykład XII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(oksopirolidynylo)etoksykarbonylo/-Lwalilo-N-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-oksypentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania węglanu 4-nitrofenylo-2-/2-oksopirolidynylo/etylu.
3,00 g (23,2 mmola) N-/2-hydroksyetylo/-2-pirolidonu rozpuszczono w 20 ml eteru etylowego w atmosferze azotu i mieszano w temperaturze pokojowej. Do mieszaniny wkraplano przez 2
150 268 godziny roztwór 4,68 g (23,2 mmola) chloromrówczanu p-nitrofenylu w 25 ml eteru etylowego. Mieszaninę mieszano przez dodatkowe 2 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszaninę zatężono pod próżnią otrzymując 7,90 g surowego produktu. Surowy produkt oczyszczano przez chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym stosując MeOH: CHCI3 (5:95). Otrzymano 4,62 g produktu w postaci białego proszku; TLC, Rf = 0,51, żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3 (3:97). b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/2-(2-oksopirolidynylo)etoksykarbonylo/-L-walilo-N-/3(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
2,820 g (40,80 mmola) Węglanu potasu dodano do roztworu 1,20 g (4,08 mmola) węglanu etylo-2-pirolidono-p-nitrofenylu i 1,50 g (4,08 mmola) produktu otrzymanego w sposób opisany w przykładzie Illd w 100 ml DMF, w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc, po czym rozcieńczono EtOAc i odsączono nadmiar K2CO3. Przesącz zatężono pod próżnią otrzymując pozostałość, którą rozpuszczono w EtOAc i przemyto kolejno 10% wodnym roztworem NaHCOe, wodą, 5% wodnym roztworem kwasu cytrynowego i solanką. Fazę organiczną wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując surowy alkohol. Alkohol oczyszczano przez chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym stosując MeOH: CHCI3 (5:95). Otrzymano 0,72 g produktu; TLC, Rf = 0,46, żel krzemionkowy, MeOH: CHC13 (7:93).
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(2-oksopirolidynylo)etoksykarbonylo/-L-walilo-N-/3-(4metylo-1,1,1 -trifluoro-2-oksypentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 4,310 g (55,20 mmoli) DMSO w 6 ml suchego CH2C12 wkraplano przez 10 minut do wcześniej ochłodzonego do temperatury -60°C, mieszanego roztworu 3,500 g (26,60 mmola) chlorku szczawiowego w 80 ml CH2C12 w atmosferze azotu. Podczas dodawania temperatura reakcji nie przekraczała -50°C. Roztwór 0,720 g (1,38 mmola) alkoholu z przykładu XIIb w 80 ml CH2C12 wkraplano przez 10 minut w temperaturze -60°C. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze -60°C przez godzinę. Roztwór 7,13 g (55,2 mmola) diizopropyloetyloaminy w 50 ml CH2C12 wkraplano przez 10 minut w temperaturze -60°C. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez godzinę, podczas której ogrzewała się ona do temperatury pokojowej. Mieszaninę reakcyjną przemyto IN wodnym roztworem HCl i solanką, a następnie zatężono pod próżnią otrzymując surowy produkt w postaci pomarańczowego syropu. Surowy produkt oczyszczano przez chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym stosując jako eluent MeOH: CHCI3 (5:95). Otrzymano 0,43 g produktu w postaci białej piany; TLC, Rf = 0,33, żel krzemionkowy, MeOH: CHCl3(5:95); HPLC, tR = 3,50, 4,63, kolumna analityczna Zorbax ODS, H2O:CH3 (55 :45), szybkość przepływu = 1 ml/min.
Analiza elementarna dla wzoru ΟβΗββ^ΟβΡβΉ^ obliczono: C 51,29, H 6,92, N 10,40 znaleziono: C 51,20, H 6,86, N 10,03
Przykład XIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-metoksykarbonylo-etylokarbonylo/-Lwalilo-N-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluorometylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania estru t-butylowego N-benzyloksykarbonylo-L-walilo-L-proliny.
Roztwór 56,25 g (0,244 mola) N-benzyloksykarbonylo-L-waliny i 60,67 g (0,45 mola) HOBT w 565 ml DMF ochłodzono do temperatury 5°C. W jednej porcji dodano do niego 50,89 g (0,247 mola) DCC i mieszaninę mieszano dalsze 15 minut w temperaturze 5°C, a następnie dodano 38,36 g (0,224 mola) estru t-butylowego L-proliny. Mieszaninę mieszano przez dalsze 2 godziny w temperaturze 5°C, a następnie przez 48 godzin w temperaturze pokojowej. Mieszaninę przesączono i zatężono pod próżnią. Oleistą pozostałość rozpuszczono w 1 1 EtOAc i przemyto kolejno 20% wodnym roztworem kwasu cytrynowego, nasyconym wodnym roztworem NaHCOe i solanką. Fazę organiczną wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 92,0 g produktu w postaci białej piany; TLC, Rf = 0,9, żel krzemionkowy, CHCI3: EtOAc (85:15).
b/ Sposób wytwarzania estru t-butylowego L-walilo-L-proliny.
Mieszaninę 92,0 g (0,227 mola) produktu z przykładu XIIIa i 10 g 10% Pd/C w 1 1 EtOH uwodorniono w aparacie Parra przez 6 godzin pod ciśnieniem 413 850 Pa w temperaturze pokojowej. Mieszaninę przesączono przez Celite i zatężono pod próżnią otrzymując 62 g produktu w postaci lepkiego żółtego oleju; TLC, Rf = 0,3, żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3 (10:90).
150 268 17 c/ Sposób wytwarzania estru 1,1-dimetyloetylowego N-/2-(metoksykarbonylo)etylokarbonylo/ -L-walilo-L-proliny.
8,0 ml IN Wodnego roztworu NaOH dodano do ochłodzonego do 0°C roztworu 2,1 g (7,8 mmola) produktu z przykładu XIIIb w 60 ml CH2CI2. Mieszaninę mieszano i dodano 0,96 ml (7,8 mmola) chlorku 3-karbometoksypropionylu. Mieszaninę reakcyjną energicznie mieszano przez 15 minut w temperaturze 0°C. Roztwór wyjęto z łaźni lodowej, rozcieńczono 30 ml wody i zakwaszono IN wodnym roztworem HCI. Warstwę organiczną oddzielono i warstwę wodną ekstrahowano CH2CI2. Warstwy organiczne połączono, wysuszono nad Na2SC>4, przesączono i zatężono pod próżnią. Otrzymaną pozostałość oczyszczano przez chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym eluując kolumnę Et2O, a następnie EtOAc. Otrzymano 2,68 g produktu; TLC, Rf = 0,28, żel krzemionkowy, Et2O.
d/ Sposób wytwarzania N-/2-(metoksykarbonylo)etylokarbonylo/-L-walilo-L-proliny.
11,0 ml (143 mmoli) Kwasu trifluorooctowego dodano do roztworu 2,68 g /6,98 mmola) produktu z przykładu XIIIc w 11 ml CH2CI2. Mieszaninę mieszano przez 4 godziny i zatężono pod próżnią otrzymując 2,13 g produktu, który stosowano bez dalszego oczyszczania.
e/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/2-(2-metoksykarbonylo)etoksykarbonylo/-L-waliloN-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
0,85 ml (6,5 mmola) Chloromrówczanu izobutylu dodano do ochłodzonego wcześniej do temperatury -15°C roztworu 0,71 ml (6,5 mmola) N-metylomorfoliny i 2,13 g (6,5 mmola) produktu z przykładu XIIId w 50 ml THF. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 10 minut i temperaturę obniżono do -50°C. W jednej porcji dodano zawiesinę 0,71 ml (6,5 mmola) N-metylomorfoliny i 1,39 g (6,5 mmola) produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie Ic w 50 ml THF i mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc, podczas której ogrzała się do temperatury pokojowej. Mieszaninę reakcyjną przesączono i przesącz zatężono pod próżnią. Pozostałość umieszczono w EtOAc i przemyto kolejno IN wodnym roztworem HCI i solanką. Warstwę organiczną wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono pod próżnią. Otrzymaną pozostałość oczyszczano przez chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym eluując kolumnę mieszaniną MeOH : CHCI3 (5 :95). Otrzymano 1,92 g produktu; TLC, Rf = 0,24, żel krzemionkowy, MeOH : CHCI3 (5:95).
f/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(metoksykarbonylo)etylokarbonylo-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 11,2 ml (0,158 mola) DMSO w 12 ml CH2CI2 dodawano powoli do wcześniej ochłodzonego do temperatury -60°C roztworu 6,9 ml (0,079 mola) chlorku szczawiowego w 160 ml CH2CI2. Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór 1,90 g (3,95 mmola) produktu z przykładu XIIIe w 160 ml CH2CI2 i mieszano przez godzinę w temperaturze -60°C. Powoli dodawano 28,0 ml (0,158 mola) diizopropyloetyloaminy i mieszaninę pozostawiono do ogrzania do temperatury otoczenia. Roztwór przemyto IN wodnym roztworem HCI (2 X 80 ml) i solanką. Warstwę organiczną wysuszono nad Na2SC>4, przesączono i zatężono otrzymując 3,5 g surowego produktu. Produkt oczyszczano przez filtrację przez żel krzemionkowy z EtOAc, a następnie przez chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym eluując kolumnę mieszaniną MeOH: CHCI3 (5:95). Otrzymano 1,49 g produktu; TLC, Rf = 0,31, żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3 (5:95); diagnostyczne przesunięcie1H NMR (CD3SOCD3,250 MHz): 0,9 (m, 12 H); 3,54, (s, 3H); 3,54-3,68, (m, 2H); 4,34, (m, IH); 4,40, (m, IH); 4,48, (dd, 1/2H); 4,58, (dd, 1/2H); 8,1, (d, IH); 8,58, (dd, IH).
Przykład XIV. Sposób wytwarzania 3/RS/-/(2-karboksyetylo)-karbonylo/-L-waliloN-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
0,92 ml IN Wodnego roztworu NaOH dodano 0,20 g (0,42 mmola) produktu z przykładu XIIIf w 10 ml MeOH i mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze otoczenia. Dodano 1 ml IN wodnego roztworu HCI i mieszaninę reakcyjną zatężono pod próżnią w celu usunięcia MeOH. Pozostały wodny roztwór ekstrahowano EtOAc i warstwę organiczną przemyto solanką, wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 0,18 gproduktu; TLC, Rf = 0,2, żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3: TFA (5:94:1); HPLC, tn = 2,9, 5,86, stosowany Science Absorbosphere C8, 4,6 mmX 10 cm, CH3CN :H2O:TFA (20:80:0,1), szybkość przepływu = 1,6 ml/min.
150 268
Przykład XV. Sposób wytwarzania 3/RS/-/(4-[etoksykarbonylo]-fenylo)aminokarbonylo/-L-walilo-N-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/(4-etoksykarbonylofenylo)aminokarbonylo/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 0,86 g (4,5 mmola) 4-izocyjanianobenzoesanu etylu w 2 ml CHCU wkraplano do roztworu 1,65 g (4,5 mmola) produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie Illd w 20 ml CHCI3 i mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze otoczenia. Mieszaninę zatężono pod próżnią otrzymując surowy produkt, który oczyszczano przez chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym stosując jako eluenty mieszaniny: MeOH: CHCI3 (2,5:97,5) i MeOH : CHCI3 (5 : 95). Otrzymano 1,76 g produktu; TLC, Rf = 0,34, żel krzemionkowy, MeOH : CHCb (5 :95).
b) Sposób wytwarzania 3/RS/-/(4-etoksykarbonylofenylo)aminokarbonylo/-L-walilo-N-/3(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 4,5 ml (63 mmole) DMSO w 5 ml CH2CI2 dodawano powoli do wcześniej ochłodzonego do temperatury -60°C roztworu 2,75 ml (31,5 mmole) chlorku szczawiowego w 60 ml CH2CI2. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 15 minut w temperaturze -60°C. Do mieszaniny dodano roztwór 1,76 g (3,15 mmola) produktu z przykładu XVa w 60 ml CH2CI2 i mieszanie w temperaturze -60°C kontynuowano przez godzinę. Powoli dodano 11 ml (63 mmola) diizopropyloetyloaminy i mieszaninę pozostawiono do ogrzania do temperatury otoczenia. Roztwór przemyto IN wodnym roztworem HCl (2 X 60 ml) i solanką. Warstwę organiczną wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 2,3 g surowego produktu. Produkt oczyszczano przez chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym stosując gradient eluentów CHCI3, MeOH: CHCI3 (2,5:97,5) i MeOH: CHCI3 (5:95). Otrzymano 0,91 g produktu; TLC, Rf = 0,42, żel krzemionkowy, MeOHiCHCb (5:95); HPLC, tR = 6,77, 11,27, kolumna analityczna Zorbax ODS, CH3CN: H2O (45:55), szybkość przepływu = 2 ml/min.
Przykład XVI. Sposób wytwarzania 3/RS/-/(4-karboksyfenylo)-aminokarbonylo/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
ml IN Wodnego roztworu NaOH dodano do 0,48 g (0,86 mmola) produktu z przykładu XVb w mieszaninie MeOH : H2O (8 ml: 7 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 3 godziny, dodano dodatkowo 1 ml IN wodnego roztworu NaOH i mieszaninę mieszano przez noc w temperaturze otoczenia. Dodano 2,5 ml IN roztworu wodnego HCl i metanol usunięto pod próżnią. Dodano 10 ml wody do pozostałości i ekstrahowano EtOAc (2X50 ml). Połączone warstwy organiczne przemyto solanką, wysuszono nad Na2So4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 0,42 g produktu; TLC, Rf = 0,17, żel krzemionkowy, MeOH: CHC13: AcOH (5:94:1); HPLC, tR = 2,38, 2,78, kolumna analityczna Zorbax ODS, CH3CN: H2O (30:70), szybkość przepływu 1 ml/min.
Przykład XVII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/(4-fenylobutylo)-karbonylo/-L-walilo-N-/3(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/(4-fenylobutylo)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(4-metylo1,1, l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
0,906 g (4,4 mmola) DCC dodano do roztworu 0,728 g (4,08 mmola) kwasu 5-fenylowalerianowego, 1,5 g (4,08 mmola) produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie IHd i 1,19 g (8,8 mmola) HOBT w 75 ml THF w temperaturze 0°C. Mieszaninę mieszano i pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej przez noc. Mieszaninę zatężono pod próżnią i pozostałość umieszczono w 60 ml CHCI3 i przemywano kolejno 30 ml 20% wodnego roztworu kwasu cytrynowego, 30 ml wody, 30 ml 5% wodnego roztworu NaHCOe i 30 ml solanki. Fazę organiczną zebrano, wysuszono nad Na4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 2,0 g surowego produktu. Oczyszczanie przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym przy użyciu jako eluenta mieszaniny MeOH: CHCI3 (5 :95) dało 1,0 g produktu w postaci białej piany; TLC, Rf = (0,5-0,55), żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3 (5:95).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/(4-fenylobutylo)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-l,l,ltrifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 3,4 ml (48 mmoli) DMSO w 4 ml CH2CI2 wkroplono do mieszanego roztworu 2,10 ml (24 mmoli) chlorku szczawiowego w 50 ml suchego CH2CI2 ochłodzonego do temperatury -60°C w atmosferze azotu. Roztwór mieszano w temperaturze -60°C przez 15 minut. Powoli dodano
150 268 roztwór 1,00 g (1,89 mmola) produktu z przykładu XVIIa w 30 ml suchego CH2CI2 utrzymując temperaturę roztworu poniżej -50°C. Mieszaninę mieszano w tej temperaturze przez godzinę, wkroplono 8,48 ml (48 mmoli) diizopropyloetyloaminy i mieszaninę reakcyjną pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej. Następnie mieszaninę reakcyjną przemyto kolejno IN roztworem wodnym HCl i solanką. Fazę organiczną zebrano, wysuszono Na2SC>4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując surowy keton. Keton oczyszczano przez 3 szybkie chromatografie równowagowe na żelu krzemionkowym stosując jako eluenty MeOH: CHCI3 (5:95), CHCh (100%) - MeOH : CHC13 (3 :97) i Et2O (100%) - MeOH: Et20 (10:90). Otrzymano 0,2 g końcowego produktu w postaci woskowatej stałej substancji; HPLC, tR = 6,80,8,90, kolumna Zorbax ODS, H2O: CH3CN: TFA (40:60:0,1), szybkość przepływu 0,75 ml/min.
Analiza elementarna dla wzoru: C27N3O4F3H38'0,5 H2O: obliczono: C 60,65, H 7,35, N 7,85 znaleziono: C 60,68, H 7,30, N 7,67
Przykład XVIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-2/2-(tricyklo-[3.3.1.13, 7]dec-l-ylo)etoksykarbonylo/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-l,l,l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania węglanu 4-nitrofenylo-2-/tricyklo[3.3.1.13, ]-dec-l-ylo/etylu.
Produkt otrzymano stosując sposób opisany w przykładzie VIIa.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/2-(tricyklo[3,3,l,l3’ 7]dec-l-ylo)etoksykarbonylo/-Lwalilo-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 0,758 g (2,19 mmola) produktu z przykładu XVIIIa, 0,768 g (2,09 mmola) produktu otrzymanego w sposób opisany w przykładzie Illd i 2,89 g (20,9 mmola) K2CO3 w 75 ml DMF mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, przesączono i rozpuszczalniki usunięto pod próżnią. Pozostałość rozcieńczono octanem etylu, przemyto trzema porcjami 10% wodnego roztworu NaOH i solanką, wysuszono nad stałym K2CO3:Na2SO4 (10:90), przesączono i rozpuszczalniki usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym stosując jako eluent MeOH: CHCI3 (2:98). Otrzymano 0,965 g produktu w postaci białej piany; TLC, Rf = 0,14 i 0,18, żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3 (2:98).
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(tricyklo[3.3.1.13,7]dec-l-ylo)-etoksykarbonylo/-L-waliloN-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Do roztworu 2,14 g (16,8 mmola) chlorku szczawiowego w 30 ml suchego CH2CI2 ochłodzonego do temperatury -43°C dodano 2,66 g (33,6 mmola) DMSO w 20 ml CH2CI2 wkraplając przez godzinę. Następnie dodano w taki sam sposób 0,965 g (1,68 mmola) produktu z przykładu XVIIIb przez 30 minut. Roztwór mieszano w temperaturze -43°C przez dalszą godzinę, dodano 8,50 g (84,0 mmola) trietyloaminy i roztwór pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej. Roztwór rozcieńczono CH2CI2, przemyto 5% wodnym roztworem HCl, 5% wodnym roztworem NaOCl, wysuszono nad MgSCF, przesączono i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią. Surowy produkt oczyszczano przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym eluując kolumnę CHCI3 po wcześniejszym traktowaniu żelu krzemionkowego MeOH: CHCI3 (1:99). Otrzymano 410 mg produktu w postaci białej piany; TLC, Rf = 0,39, żel krzemionkowy, MeOH:CHCl3 (2:98); HPLC, tR = 8,12 i 10,75, kolumna Zorbax ODS, szybkość przepływu 1,5 ml/min., CH3CN :H2O:TFA (70:30:0,1).
Analiza elementarna dla wzoru C29H44N3F3O5‘0,75H2O: obliczono: C 59,52, H 7,83, N 7,18 znaleziono: C 59,48, H 7,70, N 7,17
Przykład XIX.Sposóbwytwarzania3/RS/-/2-(2-metoksyetoksy)-etoksykarbonylo/-L-walilo-N-(3-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania węglanu 2-/2-metoksyetoksy/etylo-4-nitrofenylu.
Do roztworu 2,00 g (9,92 mmola) chloromrówczanu p-nitrofenylu w 50 ml Et2O w temperaturze 0°C dodano 8 ml pirydyny, a następnie 1,14 g (9,45 mmola) 2-/2-metoksyetoksy/etanolu w 25 ml Et2O wkraplano przez godzinę. Otrzymaną mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 12 godzin i rozdzielono między wodę i Et2O. Warstawę eterową przemyto 5% wodnym roztworem HCl, buforem fosforanowym pH 7,0, wysuszono nad MgSO4, przesączono i rozpuszczalniki
150 268 usunięto pod próżnią. Surowy produkt oczyszczono przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym stosując jako eluent EtOAc: heksan (30:70). Otrzymano 1,30 g produktu w postaci jasnego bezbarwnego oleju; TLC, Rf = 0,11, żel krzemionkowy, EtOAc: heksan (30:70).
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-(2-metoksyetoksyetoksy)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(4metylo-1,1,1 -trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 1,11 g (3,90 mmola) produktu z przykładu XIX, 1,37 (3,72 mmola) produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie Illd i 5,14 g (37,2 mmola) K2CO3 w 100 ml DMF mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, przesączono i rozpuszczalniki usunięto pod próżnią. Pozostałość umieszczono w octanie etylu, przemyto trzema porcjami 10% wodnego roztworu NaOH i solanką, wysuszono nad stałym K2CO3: Na2SO4 (10:90), przesączono i rozpuszczalniki usunięto pod próżnią. Surowy produkt oczyszczano przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym eluując kolumnę EtOAc po uprzednim traktowaniu żelu krzemionkowego TEA:heksan (1:9). Otrzymano 1,13 g produktu w postaci jasnego bezbarwnego szkła; TLC, Rf = 0,43 i 0,48, żel krzemionkowy, MeOH : CHCI3 (1:9).
Analiza elementarna dla wzoru C22H38N3O7F3: obliczono: C 51,45, H 7,45, N 8,18 znaleziono: C 51,48, H 7,35, N 8,01 c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(metoksyetoksy)etoksykarbonylo/-L-walilo-N-/3-(4-metylo1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Do roztworu 3,26 g /2,57 mmola) chlorku szczawiowego w 70 ml suchego CH2CI2 ochłodzonego do temperatury -43°C wkraplano przez godzinę 4,07 g (51,4 mmoli) DMSO w 20 ml CH2CI2, a następnie w taki sam sposób przez 30 minut wkraplano 1,10 g (2,14 mmoli) produktu z przykładu XIXb w 25 ml CH2CI2. Po mieszaniu roztworu przez dodatkową godzinę w temperaturze -43°C dodano 10,80 g (107,0 mmoli) TEA i roztwór pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej. Roztwór rozcieńczono CH2CI2, przemyto 5% wodnym roztworem HCl, 5% wodnym roztworem NaOCl, wysuszono nad MgSO4, przesączono i rozpuszczalniki usunięto pod próżnią. Surowy produkt oczyszczano przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym eluując kolumnę MeOH: CHCI3 (2:98). Otrzymano 420 mg produktu w postaci przezroczystego, jasnożołtego syropu; TLC, Rf = 0,32 i 0,37, żel krzemionkowy, MeOHiCHCU (5:95); HPLC, tR = 7,38 i 9,55, kolumna analityczna Zorbax ODS, szybkość przepływu 0,5 ml/min., CH3CN: H2O:TFA (50:50:0,1).
Analiza elementarna dla wzoru C22H36N3O7F3-0,75 H2O: obliczono: C 50,33, H 7,20, N 8,00 znaleziono: C 50,34, H 7,21, N 7,58
Przykład XX. Sposób wytwarzania3/RS/-/(4-metoksyfenylo)karbonylo/-L-walilo-N-/3(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/(4-metoksyfenylo)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-hydroksyfenylo)/-L-prolinamidu.
Do roztworu 1,50 g (4,08 mmola) produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie Illd i 2,06 g (20,4 mmola) TEA w 50 ml CHCI3 ochłodzonego do temperatury 0°C wkraplano przez godzinę 0,766 g (4,49 mmola) chlorku 4-metoksybenzoilu w 40 ml CHCI3 i roztwór mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Rozpuszczalniki usunięto pod próżnią i pozostałość umieszczono w ETOAc, przemyto 5% roztworem HCl, 20% wodnym roztworem NaOH, wysuszono nad stałym K2CO3: Na2SO4 (10:90), przesączono i rozpuszczalniki usunięto pod próżnią. Surowy produkt oczyszczano przez szybką chromatografię równowagową na żelu krzemionkowym eluując kolumnę MeOH: CHCI3 (5:95). Otrzymano 1,84 g produktu w postaci białej piany; TLC, Rt = 0,33, żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3 (5:95).
Analiza elementarna dla wzoru C24H34O5N3F3 · 0,3 H2O: obliczono: C 56,86, H 6,88, N 8,29 znaleziono: C 56,80, N 6,88, N 8,07 b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/(4-metoksyfenylo)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(4-metylo1,1,1 -trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Do roztworu 3,79 g (29,9 mmoli) chlorku szczawiowego w 50 ml suchego CH2CI2 ochłodzonego do temperatury -43°C dodano kroplami przez 40 minut 4,73 g (59,8 mmoli) DMSO w 20 ml
150 268
CH2CI2, a następnie w taki sam sposób dodawano przez 30 minut 1,50 g (2,99 mmoli) produktu z przykładu XXa w 20 ml CH2CI2. Po mieszaniu roztworu w temperaturze -43°C przez dalszą godzinę dodano 15,10 g (149,5 mmoli) TEA i roztwór pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej. Roztwór rozcieńczono CH2CI2, przemyto 5% wodnym roztworem NaOCl, wysuszono nad MgSO4, przesączono i rozpuszczalniki usunięto pod próżnią. Surowy produkt oczyszczono przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym eluując kolumnę EtOAc:heksan (1:1) po uprzednim traktowaniu żelu krzemionkowego TEA:heksan (10:90). Otrzymano 489 mg produktu w postaci białej piany; TLC, Rf = 0,15 i 0,19, żel krzemionkowy, MeOHiCHCh (2:98); HPLC, tR = 6,62 i 9,72, kolumna Zorbax ODS, szybkość przepływu 1 ml/min., CH3CN: H2O: TFA (50: 50:0,1).
Analiza elementarna dla wzoru: C24H32O5N3F3: obliczono: C 57,71, H 6,46, N 8,41 znaleziono: C 57,39, H 6,67, N 8,18
Przykład XXI. Sposób wytwarzania 3/RS/-N2,N6-di/(fenylometoksy)karbonylo/-L-lizyloN-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-oksypentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/-Lprolinamidu.
Produkt otrzymano sposobem opisanym w przykładzie Ilb.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-N2,N6-di/(fenylometoksy)karbonylo/-L-lizylo-N-/3(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
0,84 g (4,09 mmole) DCC dodano do mieszanego roztworu 1,54 g (3,72 mmole) /N^N6dibenzyloksykarbonylo/-L-lizyny, 1,0 g (3,72 mmole) produktu z przykładu XXIa, 1,01 g (7,44 mmola) 1-hydroksybenzotriazolu i 70 ml suchego THF w temperaturze 0°C w atmosferze azotu. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0°C przez godzinę i pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej przez noc. Mieszaninę reakcyjną przesączono, rozpuszczalnik usunięto pod próżnią i pozostałość rozpuszczono w CHCI3. Roztwór chloroformowy przemyto 20% wodnym roztworem kwasu cytrynowego, warstwę organiczną wysuszono nad Na2SO4 i przesączono. Rozpuszczalnik usunięto pod próżnią otrzymując 3,14 g surowego produktu. Produkt oczyszczano przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym stosując jako eluent CHCI3: MeOH (97:3). Otrzymano 1,50 g końcowego produktu, Rf = 0,33-0,45, CHCI3: MeOH (95 :5), żel krzemionkowy.
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/N2,Ne-di/(fenylometoksy)karbonylo/-L-lizylo-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 3,59 g (46 mmoli) DMSO i 30 ml suchego CH2CI2 dodano do mieszanego roztworu 3,04 g (24 mmoli) chlorku szczawiowego i 50 ml suchego CH2CI2 w temperaturze -60°C w atmosferze azotu. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze -60°C przez 5 minut i pozostawiono do ogrzania do -30°C. Następnie wkroplono roztwór 1,32 g (2,0 mmola) produktu z przykładu XXIb i 30 ml suchego CH2CI2. Otrzymaną mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze -25°C przez godzinę, dodano 7,8 g (77,4 mmola) TEA i mieszaninę reakcyjną pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej. Mieszaninę reakcyjną przemyto IN wodnym roztworem HCl i solanką. Warstwę organiczną wysuszono nad Na2SC>4, przesączono i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią otrzymując 2,6 g produktu. Produkt oczyszczano przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym stosując jako eluent CHCI3: MeOH (97:3). Otrzymano 0,99 g produktu; TLC, Rf = 0,4-0,52, CHCI3: MeOH (95:5), żel krzemionkowy.
Przykład XXII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-fenyloalanylo-N-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-fenyloalanylo-N-/3-(4metylo-1,1, l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/- L-prolinamidu.
1,01 g (4,92 mmoli) DCC dodano do mieszanego roztworu 1,41 g (4,47 mmoli) produktu z przykładu XXIa, 1,20 g (4,47 mmoli) / N-/benzyloksykarbonylo/-L-fenyloalaniny, 1,21 g (8,94 mmoli) 1-hydroksybenzotriazolu i 75 ml suchego THF w temperaturze 0°C w atmosferze azotu. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze o°C przez godzinę i pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez noc. Mieszaninę reakcyjną przesączono i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią otrzymując surową pozostałość, którą rozpuszczono w CHCI3. Roztwór
150 268 chloroformowy przemyto 20% wodnym roztworem kwasu cytrynowego i solanką i wysuszono nad Na2SC>4. Roztwór chloroformowy przesączono i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią otrzymując 3,57 g surowego produktu. Produkt oczyszczano przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym stosując jako eluent CHCI3: MeOH (97:3). Otrzymano 1,45 g produktu w postaci białej piany; TLC, Rf = 0,38-0,60, CHCI3: MeOH (95:5), żel krzemionkowy; HPLC: kolumna analityczna Zorbax ODS, CH3CN: H2O (50: 50), szybkość przepływu 2,5 ml/min., tR = 6,47 i 7,63.
b/Sposóbwytwarzania3/RS/-/(fenylometoksy)karbonylo/-LTenyk)a]anylo-N-/3-(4-metylo-l,l,l-trifluoro-2oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 2,33 g (29,9 mmola) DMSO i 40 ml CH2CI2 wkroplono do mieszanego roztworu 1,89 g (14,9 mmola) chlorku szczawiowego i 40 ml suchego CH2CI2 w temperaturze -60°C w atmosferze azotu. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze -60°C przez 0,5 godziny. Następnie dodano w temperaturze -50°C roztwór 1,43 g (2,49 mmola) produktu z przykładu XXIIa i 40 ml suchego CH2CI2. Otrzymaną mieszaninę mieszano w temperaturze -60°C przez godzinę. Dodano 7,70 g (59,7 mmola) diizopropyloetyloaminy i mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej. Mieszaninę przemyto dwukrotnie IN roztworem wodnym HCl, a następnie solanką. Warstawę organiczną wysuszono nad Na2SO4, przesączono i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią otrzymując 1,87 g surowego produktu. Produkt oczyszczano przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym stosując jako eluent CHCI3: MeOH (98:2). Otrzymano 0,771 g produktu w postaci białej piany; TLC, Rf = 0,62-0,69, CHCI3: MeOH (95:5), żel krzemionkowy; HPLC: kolumna analityczna Zorbax ODS, CHsCN:H2O (50:50), szybkość przepływu 2,5 ml/min., tR = 6,11 i 6,21.
Analiza elementarna dla wzoru: C2eH32F3N30s: obliczono: C 61,41 H 5,84, N 7,67 znaleziono: C 61,53, H 5,82, N 7,67
Przykład XXIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(metoksykarbonylo)etylokarbonylo/-Lnorleucylo-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania N-/2-(metokarbonylo)etylokarbonylo/-L-norleucyny.
Roztwór 100 ml (100 mmoli) IN roztworu wodorotlenku sodu wkroplono do energicznie mieszanej mieszaniny 6,55 g (50 mmoli) L-norleucyny i 250 ml chlorku metylenu w temperaturze 0°C w atmosferze azotu. Następnie wkroplono 7,52 g (50 mmoli) chlorku 3-karbometoksypropionylu. Otrzymaną mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0°C przez 15 minut. Usunięto łaźnię chłodzącą i dodano 100 ml wody. Wartość pH doprowadzono do 1 za pomocą 3N wodnego roztworu HCl. Dodano 200 ml octanu etylu i oddzielono warstwę organiczną. Warstwę wodną ekstrahowano octanem etylu i warstwy organiczne połączono, przemyto solanką i wysuszono nad Na2SO4. Roztwór przesączono i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią otrzymując 10,73 g surowego produktu. Porcję 6,47 g (26,4 mmoli) surowego produktu oczyszczano przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym stosując jako eluent CHCla: MeOH (97:3). Otrzymano 5,31 g produktu; TLC, Rf = 0,45, żel krzemionkowy, CHCI3: MeOH: AcOH (95:4,75:0,25).
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/2-(metoksykarbonylo)etylokarbonylo/-L-norleucyloL-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
3,46 g (16,8 mmoli) Dicykloheksylokarbodiimidu dodano do ochłodzonego wcześniej do temperatury 0°C roztworu 5,60 g (15,4 mmoli) produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie Illd, 3,75 (15,5 mmoli) produktu z przykładu XXIIIa i 4,13 g (30,6 mmoli) 1hydroksybenzotriazolu w 70 ml THF. Otrzymany roztwór pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez noc. Mieszaninę reakcyjną przesączono i zatężono pod próżnią. Pozostałość rozcieńczono EtOAc i otrzymany roztwór przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCOe i solanką, wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując surowy produkt. Produkt oczyszczano przez szybką chromatografię równowagową na kolumnie wypełnionej żelem krzemionkowym stosując jako eluent gradient Et2O (100%), Et2O: EtOAc (90:10). Et2O: EtOAc (75:25), Et2O: EtOAc (50:50). Otrzymano 5,6 g produktu; TLC, Rf = 0,45, żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3 (1:9).
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(metoksykarbonylo)etylokarbonylo/-L-norleucylo-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
150 268 23
Roztwór 27,0 ml (0,378 mola) DMSO 27 ml CH2C12 dodawano powoli do wcześniej ochłodzonego do temperatury -65°C roztworu 16,5 ml (0,189 mola) chlorku szczawiowego w 350 ml CH2C12. Otrzymany roztwór mieszano przez 15 minut i dodano roztwór 5,60 g (0,00943 mola) produktu z przykładu XXIIIb w 250 ml CH2C12. Mieszaninę mieszano przez godzinę w temperaturze -65°C i dodano kroplami 67,0 ml (0,378 mola) diizopropyloetyloaminy. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej, a następnie przemyto IN wodnym roztworem HCI i solanką, wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując surowy produkt. Surowy produkt oczyszczano przez szybką chromatografię na kolumnie wypełnionej żelem krzemionkowym eluując kolumnę ze stopniowym gradientem Et2O (100%), Et2O: EtOAc (50(5)50), EtOAc (100%). Otrzymano częściowo oczyszczony produkt, który oczyszczano dalej przez chromatografię na żelu krzemionkowym eluując kolumnę ze stopniowym gradientem CHCla (100%), MeOH: CHC13 (2,5 :97,5) i MeOH: CHC13 (5:95). Otrzymano 3,24 g końcowego produktu; HPLC, tR = 6,80 i 12,98, kolumna analityczna Zorbax ODS, H2O: CH3CN (65:35), szybkość przepływu 2 ml/min.
Przykład XXIV. Sposób wytwarzania 3/RS/-/(2-karboksyetylo)-karbonylo/-L-norleucylo-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
9,5 ml IN Wodnego roztworu NaOH dodano do roztworu 2,60 g (4,39 mmola) produktu z przykładu XXIIIc w 95 ml MeOH. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze pokojowej i dodano 10,5 ml IN wodnego roztworu HCI. Mieszaninę zatężono pod próżnią i dodano 35 ml wody. Zawiesinę ekstrahowano EtOAc i warstwę organiczną przemyto solanką, wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 2,1 g produktu. HPLC, tR = 12,63 i 19,05, kolumna analityczna Zorbax ODS, H2O: CH3CN (65:35), szybkość przepływu 0,5 ml/min.
Przykład XXV. Sposób wytwarzania estru fenylometylowego 3/RS/-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-alfa-glutamylo-L-walilo-N-/3-(4-metylo-l,l,l-trifluoro-2-oksypentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania estru fenylometylowego 2/RS/,3/SR/-/(fenylometoksy)karbonylo/L-alfa-glutamylo-L-waIiIo-N-/3-(4-metylo-l,l,l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
0,53 ml (4,1 mmola) Chloromrówczanu izobutylu dodano do uprzednio ochłodzonego do -15°C roztworu 1,52 g (4,1 mmola) estru α-benzylowego kwasu N-benzyloksykarbonylo-Lglutamowego i 0,45 ml (4,1 mmola) N-metylomorfoliny w 30 ml THF. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 10 minut, a następnie ochłodzono do temperatury -40°C. Wkroplono roztwór 1,5 g (4,1 mmola) produktu z przykładu Illd w 30 ml THF i mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc i pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej. Mieszaninę przesączono i zatężono pod próżnią. Pozostałość umieszczono w EtOAc, przemyto IN wodnym roztworem HCI i solanką, wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono otrzymując surowy produkt. Produkt oczyszczano przez chromatografię na żelu krzemionkowym stosując jako eluent gradient CHCI3 (100%), MeOH: CHCI3 (2,5 :97,5) i MeOH: CHCI3 (5:95). Otrzymano 2,13 g produktu; TLC, Rł = 0,43, żel krzemionkowy, MeOH: CHCI3 (5 :95).
b/ Sposób wytwarzania estru fenylometylowego 3/RS/-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-alfa~ glutamylo-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 8,40 ml (0,118 mola) DMSO w 8 ml CH2C12 dodano ostrożnie do uprzednio ochłodzonego do temperatury -65°C roztworu 5,2 ml (0,059 mola) chlorku szczawiowego w 100 ml CH2C12. Roztwór mieszano przez 15 minut i wkroplono roztwór 2,13 g (2,96 mmola) produktu z przykładu XXVa w 100 ml CH2C12. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez godzinę w temperaturze -60°C i wkroplono 20,9 ml (0,118 mola) Ν,Ν-diizopropyloetyloaminy. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej, przemyto IN wodnym roztworem HCI i solanką, wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono otrzymując surowy produkt. Produkt częściowo oczyszczono przez chromatografię na kolumnie wypełnionej żelem krzemionkowym stosując jako eluent stopniowy gradient Et2O (100%), Et2O: EtOAc (50:50) i EtOAc (100%). Produkt oczyszczano ostatecznie przez chromatografię na kolumnie wypełnionej żelem krzemionkowym stosując jako eluent stopniowy gradient CHC13 (100%), MeOH:CHCl3 (1:99),
150 268
MeOH : CHC13 (2:98). MeOH: CHC13 (3:97) i MeOH: CHC13 (5 :95). Otrzymano 1,35 g produktu; HPLC, tR = 7,2 i 11,5, kolumna analityczna Zorbax ODS, H2O : CH3CN (50:50), szybkość przepływu 2 ml/min.
Przykład XXVI. Sposób wytwarzania 3/RS/-N2-/2-(metoksykarbonylo)etylokarbonylo/N6-(fenylometoksy)karbonylo/-L-lizylo-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-pro!inamidu.
a/ Sposób wytwarzania N2-/(2-metoksykarbonylo)etylokarbonylo/-N6-fenylometoksykarbonylolizyny.
ml IN wodnego roztworu NaOH dodano do ochłodzonego uprzednio do temperatury 0°C roztworu 6,06 g (0,0216 mola) N-benzyloksykarbonylo-L-lizyny w 160 ml CH2C12. Mieszaninę reakcyjną mieszano energicznie i dodano 2,66 ml (0,0216 mola) chlorku 3-karbometoksypropionylu. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 15 minut w temperaturze 0°C. Kolejno dodawano 25 ml IN wodnego roztworu HCl, 100 ml wody i 500 ml EtOAc i rozdzielono warstawy. Warstawę organiczną przemyto solanką, wysuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono otrzymując 6,78 g produktu. Produkt stosowano bez dalszego oczyszczania.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-N2-/2-(metoksykarbonylo)etylokarbonylo/-Ne-fenylometoksykarbonylo-L-lizylo-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
Dodano 2,85 g (13,9 mmola) DCC do mieszaniny 4,63 g (12,6 mmola) produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie Illd, 5,00 g (12,6 mmola) produktu z przykładu XXVIa i 3,76 g (27,8 mmola) HOBT w 65 ml THF ochłodzonej uprzednio do temperatury 0°C. Mieszaninę mieszano w temperaturze 0°C przez godzinę, ogrzano do temperatury pokojowej i mieszano przez noc. Rozpuszczalnik usunięto pod próżnią, pozostałość rozcieńczono EtOAc i przemyto kolejno nasyconym roztworem NaHCO3 i solanką. Fazę organiczną wysuszono nad stałym ? K2CO3 : Na2SO4 (10 : 90), przesączono i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią otrzymując surowy produkt. Oczyszczanie przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym z eluentem MeOH: CHC13 (1:99) dało 6,22 g produktu w postaci białej piany; TLC, Rf = 0,40, żel krzemionkowy, MeOH : CHC13 (5:95).
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-N2-/2-(metoksykarbonylo)etylokarbonylo/-N6-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-lizylo-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1,1-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 15,9 g (100 mmoli) DMSO w 50 ml suchego CH2C12 wkroplono do mieszanego roztworu 8,8 ml (200 mmoli) chlorku szczawiowego w 150 ml suchego CH2C12 ochłodzonego do temperatury -43°C w atmosferze azotu. W taki sam sposób dodano roztwór 6,22 g (8,37 mmola) produktu z przykładu XXVIb w 60 ml CH2C12. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze -20°C przez godzinę i wkroplono 70 ml (400 mmoli) TE A. Mieszaninę pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej, mieszano przez dodatkową godzinę, a następnie rozcieńczono CH2C12, przemyto 5% wodnym roztworem NaOCl, wysuszono nad stałym K2CO3:Na2SO4 (10:90), przesączono i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią otrzymując surowy produkt. Oczyszczanie przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym z eluentem MeOH: CHC13 (1:99) dało 4,5 g produktu w postaci jasnożółtej piany; TLC, Rf = 0,51, żel krzemionkowy,MeOH : CHC13 (1:9); HPLC, tR = 6,99 i 12,01, szybkość przepływu 1 ml/min., kolumna analityczna Zorbax ODS, H2O: CH3CN: TFA (50:50:0,1).
Przykład XXVII. Sposób wytwarzania 3/RS/-N2-/(2-karboksyetylo)karbonylo/-Ne-/(fenylometoksy)karbonylo/-L-lizylo-N-/3-(4-metylo-1,1,1-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 2,0 g (2,7 mmola) produktu z przykładu XXVIc w 60 ml MeOH i 5,4 ml (5,4 mmola) IN NaOH mieszano w temperaturze pokojowej przez 12 godzin, następnie doprowadzono do pH 7 za pomocą 6,0 ml (6,0 mmoli) IN wodnego roztworu HCl. Metanol usunięto pod próżnią, uzyskaną pozostałość rozpuszczono w EtOAc, przemyto solanką, wysuszono nad MgSO4, przesączono i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią otrzymując surowy produkt. Oczyszczanie przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym (pH 5,5, Baker) stosując jako eluent chloroform dało 1,7 g produktu w postaci białej piany; HPLC, tR = 4,06 i 5,56, szybkość przepływu 1 ml/min., kolumna analityczna Zorbax ODS, H2O: CH3CN: TFA (50:50:0,1).
150 268
Analiza elementarna dla wzoru: Cs-łLUeNsOgFa-lJS H2O: obliczono: C 53,78, H 6,83, N 9,22 znaleziono: C 53,46, H 6,39, N 9,03
Przykład XXVIII. Sposób wytwarzania 3S/lub R/-N2,N6-di/(fenylometoksy)karbonylo/L-lizylo-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1, l-trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-N2,N6-di/(fenylometoksy)karbonylo/-L-lizylo-L-walilo-N-/3-(4-metylo-l,l,l-trifluoro-2-hydroksypentylo)/-L-prolinamidu.
0,93 g (4,49 mmola) DCC dodano do mieszanego roztworu 1,69 g (4,08 mmola) N2,N6benzyloksykarbonylo-L-lizyny, 1,50 g (4,08 mmola) produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie Illd, 1,10 g (8,16 mmola) 1-hydroksybenzotriazolu i 75 ml suchego THF w temperaturze 0°C w atmosferze azotu. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0°C przez godzinę, następnie pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez noc. Mieszaninę reakcyjną przesączono, przesącz odparowano pod próżnią. Pozostałość rozpuszczono w CHCI3 i roztwór przemyto IN wodnym roztworem HCl i solanką i wysuszono nad Na2SC>4. Odsączono Na2SO4 i przesącz zatężono pod próżnią otrzymując 3,94 g surowego produktu, który oczyszczano przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym stosując jako eluent CHCI3: MeOH (95 :5). Otrzymano 2,48 g produktu; TLC, Rf = 0,36-0,56, CHCU. MeOH (95:5), żel krzemionkowy; HPLC, kolumna analityczna Zorbax ODS, szybkość przepływu 1,5 ml/min., CH3CN: H2O (50:50), tR= 18,33, 14,99.
Analiza elementarna dla wzoru: C33H41F3N4O7: obliczono: C 59,01, H 6,24, N 8,45 znaleziono: C 58,89, H 6,33, N 7,89 b/ Sposób wytwarzania 3S/lub R/-N2,N6-di/(fenylometoksy)karbonylo/-L-lizylo-L-walilo-N-/3-(4-metylo-1,1,1 -trifluoro-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu.
Roztwór 2,8 g (36,13 mmoli) DMSO i 40 ml suchego CH2CI2 dodano do mieszanego roztworu chlorku szczawiowego i 40 ml suchego CH2CI2 w temperaturze -60°C w atmosferze azotu. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór 2,30 g (3,01 mmola) produktu z przykładu XXVIIIa i 40 ml suchego CH2CI2 w temperaturze -50°C. Otrzymaną mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze -60°C przez godzinę. Dodano 7,290 g (72,26 mmoli) trietyloaminy i mieszaninę pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej. Mieszaninę przemyto dwukrotnie IN wodnym roztworem HCl, następnie solanką i wysuszono nad Na2SO4. Odsączono Na2SO4 i przesącz zatężono pod próżnią otrzymując 2,67 g surowego produktu. Produkt oczyszczano przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym stosując jako eluent CHCI3: MeOH (97: 3) i otrzymano po oczyszczeniu 64 mg produktu; TLC, Rf = 0,6, CHChiMeOH (95:5); HPLC, kolumna analityczna Zorbax ODS, CH3CN:H2O (60:40), szybkość przepływu 1,5 ml/min., tR = 5,29.
Analiza elementarna dla wzoru: CseHsoFsNsOe^^O: obliczono: C 58,53, H 6,72, N 8,98 znaleziono: C 58,95, H 6,59, N 8,74
Przykład XXIX. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/12-metoksy-12-oksododecyloksy/karbonylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = CH3OCO/CH2/11, A = -0).
a/ Sposób wytwarzania estru metylowego kwasu 12-hydroksyundecylokarboksylowego.
Mieszaninę 4,0 g (18,5 mmoli) kwasu 1-hydroksyundecylokarboksylowego, 450 ml MeOH, 2,5 ml stężonego kwasu siarkowego i 3 ml sit molekularnych 3A mieszano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 16 godzin. Mieszaninę zobojętniono nasyconym wodnym roztworem NaHCOe, zatężono pod próżnią i rozdzielono między eter etylowy i wodę. Roztwór eterowy przemyto wodą, nasyconym wodnym roztworem NaHCCh i solanką, wysuszono nad Na2SC>4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 3,94 g produktu w postaci białej stałej substancji; NMR (DMSO-de) δ 83,65 (3H, s); 1,7-1,0 (22H, m).
, b/ Sposób wytwarzania węglanu 1 l-metoksykarbonyloundecylo-4-nitrofenylu.
Postępując w sposób opisany w przykładzie VIIa, produkt z przykładu XXIXa przekształcono w związek tytułowy i oczyszczano przez szybką chromatografię stosując jako eluent EtOAc : heksan 1 (1:9). Otrzymano związek tytułowy z wydajnością 59%; TLC, Rf = 0,20, EtOAc:heksan (1:9).
150 268 c/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-1-/12-metoksy-12-oksododecyIoksy/karbonylo-M-/3(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7a, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R3 = CH3OCO/CH2/h, A = —0).
Postępując w sposób opisany w przykładzie VIIb, produkt z przykładu XXIXb pozostawiono do przereagowania z substancją otrzymaną sposobem opisanym w przykładzie Ilb. Po oczyszczeniu przez szybką chromatografię przy użyciu acetonu: heksanu (3:7) jako eluenta otrzymano związek tytułowy ż wydajnością 45%; HPLC, Col. A, CH3CN: H2O (35:65), FR = 2,0.
d/ Sposób wytwarzania 3/RS/-1 -/12-metoksy-12-oksododecyloksy/-karbonylo-N-/3-( 1,1,1trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = CH3OCO/CH2/h, A = -O ).
Do 1,1 mmola produktu z przykładu XXIXc dodano 65 ml DMSO i 50 ml Ac2O. Otrzymany roztwór mieszano przez 18 godzin w temperaturze pokojowej i rozcieńczono eterem etylowym. Roztwór organiczny przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCO3 trzykrotnie, wodą i solanką, wysuszono Na2SO<ł, przesączono, zatężono pod próżnią i oczyszczano przez szybką chromatografię stosując Et20: heksan (1: l)jako eluent. Otrzymano związek tytułowy z wydajnością 100%; HPLC, tR = 12,73, Col. A, CH3CN: H2O (60:40), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru: C22H28F3N3O5· 0,4 H2O: obliczono: C 55,91, H 8,00, N 5,21 znaleziono: C 56,05 H 8,00, N 5,19
Przykład XXX. Sposób wytwarzania 3/RS/-1-/12-hydroksy-12-oksododecyloksy/karbonylo-N-/3-/l ,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 1 a, w którym R1 = CH/CH3, R3 = HOCO/CH2/i 1, A = -0).
Postępując w sposób opisany w przykładzie XIV, produkt z przykładu XXIXd przekształcono w związek tytułowy, który oczyszczano przez szybką chromatografię stosując jako eluent EtOAc : heksan (1:1) i otrzymano z wydajnością 10%; HPLC, tR = 4,55, Col. A, CH3CN: H2O (60:40), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru: C24H39F3N2O6'· 0,1 H2O: obliczono: C 56,48, H 7,74, N 5,49 znaleziono: C 56,48, H 7,96, N 5,23
Przykład XXXI. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/l-okso-5-(fenylometoksykarbonyloamino)pentylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = CH2OCONH/CH2/4, A = —).
a/ Sposób wytwarzania kwasu 5-/fenylometoksykarbonyloamino/walerianowego.
Do mieszanego i ochłodzonego do temperatury 0°C roztworu 5,00 g (42,68 mmoli) kwasu
5-aminowalerianowego i 32,0 ml (32,0 mmoli) 2N NaOH dodawano równocześnie 7,65 g (6,40 ml, 44,81 mmoli) chloromrówczanu benzylu i 32,0 ml (32,0 mmoli) 2N NaOH. Po mieszaniu w temperaturze 0°C przez 0,5 godziny, roztwór przemyto eterem etylowym. Warstwę eterową zakwaszono do pH 2,0 za pomocą 6N HCl, co spowodowało wytrącenie osadu. Związek tytułowy odsączono, przemyto wodą i wysuszono w piecu próżniowym. Otrzymano 8,55 g (80%) czystego produktu w postaci białej stałej substancji o temperaturze topnienia 104-105°C; TLC, Rf = 0,48, MeOH: CHC13: AcOH (3:97:0,1).
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/l-okso-5-(fenylometoksykarbonyloamino)pentylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7a, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2CONH/CH2/4, A = —).
Do mieszanego, schłodzonego do temperatury 0°C roztworu 0,47 g (1,86 mmoli) produktu z przykładu XXXIa, 0,50 g (3,72 mmoli) HOBT i 0,40 g (1,95 mmoli) DCC w 50 ml CHC13 dodano 0,50 g (1,86 mmoli) produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie Ilb. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze pokojowej, przesączono i zatężono otrzymując syrop, który częściowo rozpuszczono w EtOAc. Nierozpuszczalne substancje odsączono od roztworu, po czym roztwór przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCO3,5% wodnym roztworem kwasu cytrynowego i solanką, wysuszono nad Na2So4 i zatężono do mieszaniny, którą oczyszczano przez szybką chromatografię (MeOH: CHC13) (4:96) otrzymując związek tytułowy w
150 268 27 postaci białej piany w ilości 0,78 g, co stanowi 84% wydajności; TLC, Rf = 0,4, MeOH : CHCI3 (4:94).
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/l-okso-5-(fenylometoksykarbonyloamino)pentylo/-N-/3(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /OCH2OCONH/CH2/4, A = —).
Do 1 mmola produktu z przykładu XXXIb dodano 85 mmoli DMSO i 64 mmole Ac2O. Otrzymany roztwór mieszano przez 18 godzin w temperaturze pokojowej, wylano do 50 ml mieszaniny wody z lodem i mieszano przez 1 do 4 godzin. Surowy produkt ekstrahowano do EtOAc. Roztwór octanowy przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCO3 i solanką, wysuszono Na2SO4, przesączono i zatężono pod próżnią, a następnie produkt oczyszczano przez szybką chromatografię stosując jako eluent CHCL3: MeOH (97:3). Otrzymano produkt z wydajnością 58%; HPLC, tR = 6,56 i 7,79, Col. A, H2O: CH3CN (60:40), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru: C24H32F3N3Os’ 1,5 H2O: obliczono: C 54,74, H 6,69, N 7,98 znaleziono: C 54,87, H 6,20, N 8,02
Przykład XXXII. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/2-okso-4-fenoksybutylo/-N-/3-(l,l,ltrifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /O/CH2/3, A = —).
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/l-okso-4-fenoksybutylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7a, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /O/CH2/3, A = —).
Do 0,25 M roztworu kwasu 4-fenoksypropanokarboksylowego w THF dodano w jednej porcji równoważną molowo ilość CDI. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez godzinę w temperaturze pokojowej i dodano w jednej porcji równoważną molowo ilość produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie Ilb. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc i dodano nadmiar nasyconego wodnego roztworu NaHCO3. Mieszaninę ekstrahowano EtOAc. Ekstrakty octanowe przemyto HCl i solanką, wysuszono nad MgSO4, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując związek tytułowy z wydajnością 88%; TLC, Rf = 0,53 i 0,61, MeOH: CH2C12 (1:9).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-1-/1 -okso-4-fenoksybutylo/-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R3 = OO/CH2/3, A = —).
Sposobem opisanym w przykładzie XXXI produkt z przykładu XXXIIc przekształcono w związek tytułowy z wydajnością 39% po krystalizacji z wody; TLC, Rf = 0,68 i 0,64, CH2C12:MeOH (9:1).
Analiza elementarna dla wzoru:C2iH27F3N2O4 · 1,25 H2O: obliczono: C 55,93, H 6,59, N 6,21 znaleziono: C 55,88, H 6,67, N 6,15
Przykład XXXIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/2-(4-morfolinylo)etoksykarbonylo/-N/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = 4-morfolinylo-/CH2/2, A = O/.
a/ Sposób wytwarzania chlorowodorku węglanu 2-/4-morfolinylo/-etylo-4-nitrofenylu.
Postępując w sposób opisany w przykładzie VIIa z pominięciem pirydyny i przemywania kwasem, 2-/4-morfolinylo/etanol traktowano chloromrówczanem 4-nitrofenylu. Surowy produkt przesączono, przemyto eterem etylowym i wysuszono pod próżnią. Produkt otrzymany z wydajnością 91% stosowano do następnej reakcji bez dalszego oczyszczania.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-1-/2-(4-morfolinylo)karbonylo/-N-/3-( 1,1,1-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7a , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = 4-morfolinylo-/CH2/2, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie VIIb, produkt z przykładu XXXIIIa poddano reakcji z produktem otrzymanym sposobem opisanym w przykładzie Ilb otrzymując po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z użyciem MeOH: CHCI3 (1:99) jako eluenta związek tytułowy z wydajnością 68%; TLC, Rt = 0,34, MeOH: CHC13 (5:95), FR = 2,0.
150 268 c/ Sposób wytwarzania 3/RS/- l-/2-(4-morfolinylo)etoksykarbonylo/-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = morfolinylo-/CH2/2, A = 0).
Do 1,1 mmola produktu z przykładu XXXIIIb dodano 65 mmoli DMSO i 50 mmoli Ac2O. Otrzymany roztwór mieszano przez 18 godzin w temperaturze pokojowej i rozcieńczono CH2C12. Roztwór organiczny przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCO3 trzykrotnie, wodą i solanką, wysuszono siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod próżnią, a następnie oczyszczano przez szybką chromatografię stosując jako eluent MeOH: CHCI3 (2:98). Otrzymano związek tytułowy z wydajnością 37%; HPLC, tR = 8,44 i 9,88, Col. A, CH3CN:H2O (60:40), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru: CieH^FsNsOs · 1,0Ή2Ο: obliczono: C 48,97, H 6,85, N9,51 znaleziono: C 48,97, H 6,61, N 9,73
Przykład XXXIV. Sposób wytwarzania 3/RS/-1-/1-okso-6-[2-(2-pirydylo)etoksy]karbonyloaminoheksylo/-N-/3-(1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /2-pirydylo/-/CH2/2OCONH-/CH2/5, A = —).
a/ Sposób wytwarzania węglanu 2-/2-pirydylo/etylu.
Roztwór 1,38 g (11 mmoli) 2-pirydynoetanolu w 20 ml Et2O dodawano przez godzinę do mieszanego roztworu 2,26 g (11 mmoli) chloromrówczanu p-nitrofenylu w temperaturze 0°C w atmosferze azotu. Otrzymaną mieszaninę mieszano przez godzinę w temperaturze 0°C i wytrącony osad zebrano w osłonie azotu i krystalizowano z absolutnego etanolu otrzymując 1,53 g (58%) związku tytułowego w postaci białawych kryształów o temperaturze topnienia 125-137°C.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/l-okso-6-[2-(2-pirydylo)-etoksy]karbonyloaminoheksylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7a, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /2-pirydylo/ /CH2/2OCONH/CH2/5, A = —/.
Roztwór 0,75 g (1,8 mmolia) aminy z przykładu Lb, 0,675 g (1,8 mmoli) produktu z przykładu XXXIVa, 0,52 ml (3,6 mmola) TEA, 25 ml CH3CN i 25 ml wody mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 dni, a następnie usunięto rozpuszczalnik pod próżnią otrzymując surowy produkt, który oczyszczano przez szybką chromatografię stosując jako eluent CH3OH : CHCI3 (2,5 :97,5). Otrzymano 1,13 mmoli (60%) produktu w postaci jasnożółtej stałej substancji; TLC, Rf = 0,5, CH3OH: CHCU (5:95).
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/l-okso-6-[2-(2-pirydylo)etoksy]-karbonyloaminoheksylo/N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /2-pirydylo/-/CH2/2OCONH/CH2/5, A = —).
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIc, produkt z przykładu XXXIVc przekształcono w związek tytułowy. Po oczyszczeniu przez szybką chromatografię przy użyciu jako eluenta MeOH : CH2C12 (3:97) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 10%; HPLC, tR = 1,84, Col. A, H2O: CH3CN (60:40), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru: C25H35F3N4O5O,5 H2O: obliczono: C 55,85, H 6,75, N 10,40 znaleziono: C 56,08, H 6,82, N 10,43
Przykład XXXV. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/2-fenylometoksy-l-(fenylometoksymetylo)etoksykarbonylo/-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R3 = /OCH2OCH2/2CH, A = 0).
a/ Sposób wytwarzania węglanu 4-nitrofenylo-2-fenylometoksy-l-/fenylometoksymetylo/etylu.
0,74 g (7,34 mmola) TEA wkraplano do mieszanego roztworu 1,48 g (7,34 mmola) chloromrówczanu p-nitrofenylu i 30 ml Et2O w temperaturze między 0°C i 5°. Do tej mieszaniny dodano roztwór 2,0 g (7,34 mmola) 1,3-dibenzylogliceryny i 20 ml Et2O w temperaturze między 0°C i 5°C i mieszaninę mieszano przez 2 godziny w zakresie temperatur 0°-5°C i pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez noc. Mieszaninę reakcyjną przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 3,6 g żółtego oleju, który oczyszczano przez szybką chromatografię stosując heksan: Et2O (8 :2) jako eluent. Otrzymano 2,19 g (68%) związku tytułowego w postaci jasnego oleju; TLC, Rf = 0,33, heksan: eter (7:3).
150 268 b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/2-fenylometoksy-l-(fenylometoksynietylo)etoksy karbonylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy--4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7a, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /OCH2OCH2/CH, A = 0).
Postępując w sposób opisany w przykładzie VIIb, produkt z przykładu XXXVa poddano reakcji z produktem otrzymanym sposobem opisanym w przykładzie Ilb otrzymując po oczyszczaniu przez chromatografię przy użyciu CHC12: EtOAc (95:5) jako eluenta, związek tytułowy z wydajnością 62%; HPLC, tR = 5,81 i 6,29, Col. A, H2O: CH3CN (40:60), FR = 2,0.
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/2-fenylometoksy-l-(fenylometoksymetylo)etoksykarbonylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /OCH2OCH2/2, A = 0).
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIc, produkt z przykładu XXXVb utleniono otrzymując po oczyszczeniu przez chromatografię z użyciem CHC13: EtOAc (98:2) jako eluenta, związek tytułowy z wydajnością 13%; HPLC, tR = 5,62, Col. A, H2O: CH3CN (40:60), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru: C29H35F3N2O6*0,25 H2O: obliczono: C 61,20, H 6,28, N 4,92 znaleziono: C 61,28, H 6,34, N 5,15
Przykład XXXVI. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/l-okso-4-(l-okso-2-fenoksyetyloamino)butylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3=OOCH2CONH/CH2/3, A = —).
a/ Sposób wytwarzania estru etylowego kwasu 4-/l-okso-2-fenoksyetyloamino/propanokarboksylowego.
Do mieszanej mieszaniny 3,4 g chlorowodorku estru etylowego kwasu 4-aminopropanokarboksylowego i 2,76 ml chlorku fenoksyacetylu w 50 ml eteru etylowego i 50 ml wody dodano w jednej porcji 4,2 g NaHCO3. Po upływie 2 godzin warstwy rozdzielono i fazę organiczną przemyto IN HCl i solanką, wysuszono nad MgSCF i przesączono. Po odparowaniu rozpuszczalnika pod próżnią otrzymano 3,1 g (53%) związku tytułowego w postaci oleju.
b/ Sposób wytwarzania kwasu 4-/l-okso-2-fenoksyetyloamino/propanokarboksylowego.
Mieszaninę 3,1 g produktu z przykładu XXXVIa w 15 ml IN NaOH mieszano przez 6 godzin w temperaturze pokojowej. Otrzymany roztwór zakwaszono 2N HCl. Wytrącony osad zebrano, przemyto wodą i wysuszono w wysokiej próżni. Otrzymano 2,5 g (95%) związku tytułowego w postaci białej stałej substancji o temperaturze topnienia 91-94°C.
c/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/l-okso-4-(l-okso-2-fenoksyetyloamino)butylo/-N/3-(1,l,l-trifluoro-2hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7a, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OOCH2CONH/CH2/3, A = —).
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIa, produkt z przykładu XXXVIb poddano reakcji z produktem wytworzonym sposobem opisanym w przykładzie Ilb.Po oczyszczeniu przez przemycie kwasem i zasadą otrzymano związek tytułowy z wydajnością 92%; TLC, Rf = 0,43 i 0,48, MeOH :CH2C12 (1:9).
d/ Sposób wytwarzania 3/RS/-1 -/1 -okso-4-( 1 -okso-2-fenoksyetyloamino)butylo-N-/3-( 1,1,1trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OOCH2CONH/CH2/3, A = —).
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XXXVId utleniono i po oczyszczeniu przez chromatografię z użyciem MeOH : CH2Cl2 (3:97) jako eluenta otrzymano związek tytułowy z wydajnością 75%; HPLC, tR = 4,62 i 6,02, Col. A, CH3CN:H2O (65:35), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru C23H30F3N3O5: obliczono: C 56,26, H 6,28, N 8,56 znaleziono: C 56,28, H 6,40, N 8,30
Przykład XXXVII. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/4-metoksy-l,4-dioksobutylo/-N-/3(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = CH3OCO/CH2/2, A = —).
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-1-/4-metoksy-1,4-dioksobutylo/-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7a, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = CH3OCO/CH2/2, A = —).
150 268
Do mieszanej zawiesiny 1,34 g produktu wytworzonego sposobem opisanym w przykładzie Ilb w 50 ml CH2CI2 i 6 ml 1N NaOH chłodzonej w łaźni wodno-lodowej wkroplono 0,75 g chlorku
3-karbometoksypropionylu. Po upływie godziny warstwy rozdzielono i fazę organiczną wysuszono siarczanem sodu, przesączono i odparowano otrzymując 1,1 g (50%) związku tytułowego w postaci białego proszku; TLC, Rf = 0,57, MeOH : CH2C12 (1:9).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/4-metoksy-l,4-dioksobutylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/ -L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = CH3OCO/CH2/2, A = —).
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XXXVIIa utleniono i po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z użyciem jako eluenta MeOH: CH2CI2 (2:98) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 71%; TLC, Rf = 0,58,MeOH: CH2CI2 (1:9).
Analiza elementarna dla wzoru: Ci6H23F3N2O5’0,75 H2O: obliczono: C 48,79, H 6,27, N7,ll znaleziono: C 49,04, H 6,12, N 6,83
Przykład XXXVIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-1 -/3-( 1,1 -dimetyloetoksykarbonylo)amino-l-oksopropylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = CH3/3COCONH/CH2/2, A = —).
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/3-(l,l-dimetyloetoksykarbonylo)amino-l-oksopropylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7a, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /CH3/3COCONH/CH2/2, A = —).
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIa, kwas 3-/BOC-amino/etanokarboksylowy poddano reakcji z produktem wytworzonym sposobem opisanym w przykładzie Ilb otrzymując związek tytułowy z wydajnością 80%; TLC, Rf = 0,35, MeOH: CH2CI2 (1:9).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-1-/3-( 1,1 -dimetyloetoksykarbonylo)-amino- 1-oksopropylo/N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /CH3/3COCONH/CH2/2, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XXXVIIIa utleniono i po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z użyciem MeOH : CH2CI2 (2:98) jako eluenta otrzymano produkt z wydajnością 61%; TLC, Rf = 0,46, MeOH: CH2CI2 (1:9).
Analiza elementarna dla wzoru: CigH3oF3N305-0,75 H2O: obliczono: C 50,83, H 6,62, N 9,39 znaleziono: C 51,18, H 7,00, N 9,28
Przykład XXXIX. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/3-benzoiloamino-l-oksopropylo/-N/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OCONH/CH2/2, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/- l-/3-benzoiloamino-1 -oksopropylo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7a , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OCONH/CH2/2, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIa, kwas 3-/benzoiloamino/etanokarboksylowy poddano reakcji z produktem wytworzonym sposobem opisanym w przykładzie Ilb otrzymując związek tytułowy z wydajnością 83%; TLC, Rf = 0,39 i 0,42, MeOH: CH2CI2 (1:9).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/3-benzoiloamino-l-oksopropylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 =CH/CH3/CH3, R3 = OCONH/CH2/2, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XXXIXa utleniono i po oczyszczeniu przez chromatografię z zastosowaniem MeOH: CH2CI2 (2:98) jako eluenta, otrzymano związek tytułowy z wydajnością 48%; TLC, Rf = 0,54, MeOH: CH2CI2 (1:9).
Analiza elementarna dla wzoru: C21H26F3N3O4: obliczono: C 57,14 H 5,95, N 9,52 znaleziono: C 57,12, H 6,59, N 9,45
Przykład XL. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/3-(l-okso-2,2-difenyloetylo)amino/-l-oksobutylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = O2CHCONH/CH2/3, A = —).
150 268 31 a/ Sposób wytwarzania estru etylowego kwasu 3-/l-okso-2,2-difenyloetylo/aminopropanokarboksylowego.
Do mieszanego roztworu 2,51 g chlorowodorku 4-aminomaślanu etylu i 3,46 g chlorku difenyloacetylu w 50 ml CH2CI2 dodano 50 ml wody, a następnie 3,4 g NaHCO3 w jednej porcji. Po upływie 2 godzin warstwy rozdzielono i fazę organiczną wysuszono siarczanem sodu, przesączono i odparowano. Otrzymano 3,5 g (72%) związku tytułowego w postaci białej stałej substancji; TLC, R, = 0,71, MeOH:CH2CI2 (5:95).
b/ Sposób wytwarzania kwasu 3-/l-okso-2,2-difenyloetylo/amino-propanokarboksylowego.
Mieszaninę 3,5 g produktu z przykładu XLa w 30 ml IN NaOH i 10 ml EtOH mieszano przez 10 godzin. Następnie roztwór ekstrahowano eterem etylowym. Fazę wodną zakwaszono 2N HCl i wytrącony osad zebrano, przemyto wodą i wysuszono w wysokiej próżni. Otrzymano 2,9 g (93%) związku tytułowego w postaci białego proszku.
c/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/3-(l-okso-2,2difenyloetylo)amino-l-oksobutylo-N/3-(1,1,1 -trifluoro-2-hydroksy-4 metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7a, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = O2CHCONH/CH2/3, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIa, produkt z przykładu XLb poddano reakcji z produktem wytworzonym sposobem opisanym w przykładzie llb otrzymując związek tytułowy z wydajnością 81%; TLC, Rf = 0,13, MeOH: CH2C12 (5 :95).
d/ Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/3-(l-okso-2,2-difenyloetylo)amino-l-oksobutylo-N-/3(l,l,l-trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = O2CHCONH/CH2/3, A = CO, n = 1/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XLc utleniono i po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z zastosowaniem MeOH: CH2C12 (2:98) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 27%; TLC, Rf = 0,24, MeOH: CH2C12 (5:95).
Analiza elementarna dla wzoru: C29H34F3N3O4*l,0 H2O: obliczono: C 61,31, H 6,48, N 7,39 znaleziono: C 61,58, H 6,77, N 7,43
Przykład XLI. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/2-(2-metoksyetoksy)etoksykarbonylo/-N/3-(l,l,l-trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = CH3O/CH2/2O/CH2/2, A = O/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-1 -/2-(2-metoksyetoksy)etoksykarbonylo/-N-/3-( 1,1,1trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7a , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = CH3O/CH2/2O/CH2/2, A = O).
Postępując w sposób opisany w przykładzie VIIb, produkt z przykładu XIXa poddano reakcji z produktem wytworzonym sposobem opisanym w przykładzie llb i po oczyszczeniu przez suchą, szybką chromatografię kolumnową na żelu krzemionkowym eluując kolumnę z gradientem aceton :heksan od (10:90) do (50: 50), otrzymano związek tytułowy z wydajnością 75%; TLC, Rf = 0,30 i 0,35, aceton: heksan (40:60).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/2-(2-metoksyetoksy)etoksykarbonylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = CH3O/CH2/2O/CH2/2, A=O/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XLIa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem jako eluentu acetonu: CHC13 (1: 3), Col. A, H2O: CH3CN (75 :25), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru: Ci7H27F3N2O6: obliczono: C 49,39, H 6,83, N 6,78 znaleziono: C 49,27, H 6,80, N 6,48
Przykład XLII. Sposób wytwarzania 3/RS/-1-/1,4-diokso-4-(fenylometyloamino)butylo/N-/3-(l,l,l-trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2NHCO/CH2/2, A = —).
a/ Sposób wytwarzania kwasu 4-okso-4-/fenylometyloamino/propanokarboksylowego.
Mieszaninę 10,7 g benzyloaminy i 10 g bezwodnika bursztynowego mieszano w 11 THF przez 2 dni. Stałą substancję odsączono i rozpuszczono w 110 ml IN NaOH. Fazę wodną przemyto eterem etylowym i zakwaszono stężonym HCl podczas chłodzenia w łaźni wodno-lodowej. Stałą substan150 268 cję zebrano, przemyto wodą i wysuszono w wysokiej próżni. Otrzymano 10,9 g (53%) związku tytułowego w postaci białego proszku o temperaturze topnienia 137,5-138°C.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/l,4-diokso-4-(fenylometyloamino)butylo/-N-/3(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4 metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7a , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2NHCO/CH2/2, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIa, produkt z przykładu XLIIa poddano reakcji z produktem wytworzonym sposobem opisanym w przykładzie Ilb i otrzymano związek tytułowy z wydajnością 74%; TLC, Rf = 0,48, MeOH : CH2CI2 (1:9).
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-1-/1,4-diokso-4-/fenylometyloamino)-butylo/-N-/3-( 1,1,1trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2NHCO/CH2/2, A = —).
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XLIIb utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem jako eluentu MeOH: CH2CI2 (2:98), otrzymano związek tytułowy z wydajnością 40%; TLC, Rf = 0,56, MeOH : CH2CI2 (1:9).
Analiza elementarna dla wzoru: C22H28F3N3O4: obliczono: C 58,10, H 6,20, N 9,23 znaleziono: C 57,90, H 6,36, N 9,27
Przykład XLIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-1-/1 -okso-3-(fenylometoksykarbonyloamino)propylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2OCONH/CH2/2, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/l-okso-3-(fenylometoksykarbonyloamino)propylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4 metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7a , w którym R1 = CH/CH3CH3, R3 = OCH2OCONH/CH2/2, A = —).
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIa, CBZ-/ł-alaninę poddano reakcji z produktem wytworzonym sposobem opisanym w przykładzie Ilb otrzymując związek tytułowy z wydajnością 82%; TLC, Rf = 0,59, MeOH : CH2C12 (1:9).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/l-okso-3-(fenylometoksykarbonyloamino)propylo/-N-/3(1,1,1-trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2OCONH/CH2/2, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XLIIIa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem MeOH: CH2CI2 (2:98) jako eluenta otrzymano związek tytułowy z wydajnością 35%; TLC, Rf = 0,23, MeOH: CH2CI2 (5 :95).
Analiza elementarna dla wzoru: C22H28F3N3O5‘0,4 H2O: obliczono: C 55,20, H 6,06, N 8,77 znaleziono: C 55,28, H 6,25, N 8,55
Przykład XLIV. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/l-okso-4-(fenylometoksykarbonyloamino)butylo/-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 1 a, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2OCONH/CH2/3, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/l-okso-4-(fenylometoksykarbonyloamino)butylo/N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4 metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7a , w którym R1 =CH/CH3/CH3, R3 = OCH2OCONH/CH2/2, A = — /.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIa, kwas CBZ-4-aminopropanokarboksylowy poddano reakcji z produktem wytworzonym sposobem opisanym w przykładzie Ilb otrzymując związek tytułowy z wydajnością 72%; TLC, Rf = 0,47, Et2O: EtOAc (1:1).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-1-/1-okso-(fenylometoksykarbonyloamino)butylo/-N-/3l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2OCONH/CH2/3, A = —).
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XLIVa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii cienkowarstwowej MeOH: CHC13 (2,5:97,5), otrzymano związek tytułowy z wydajnością 32%; TLC, Rf = 0,65 i 0,68, MeOH: CHC13 (1:9).
Przykład XLV. Sposób wytwarzania 3R/lub S/-l-/l-okso-4-fenoksy-2-(2-fenoksyetylo) butylo/-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /OO/CH2/2/2CH, A = —).
150 268 a/ Sposób wytwarzania 2,2-di/2-fenoksyetylo/malonianu dietylu.
Do mieszanego roztworu 2,3 g sodu w 50 ml absolutnego etanolu dodano 15,2 ml malonianu dietylu, a następnie 15,7 g chlorku 2-fenoksyetylu. Następnie mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 12 godzin. Etanol odparowano pod próżnią i mieszaninę rozcieńczono 40 ml wody. Fazę wodną ekstrahowano eterem etylowym. Połączone ekstrakty eterowe przemyto solanką, wysuszono MgSo4, przesączono i odparowano. Po destylacji z parą wodną otrzymano 12,2 g (27%) tytułowego dwuestru w postaci jasnej cieczy o temperaturze wrzenia 155-175°C (106 Pa); TLC, R, = 0,34, CHzClz.
b/ Sposób wytwarzania kwasu 4-fenoksy-2-/2-fenoksyetylo/propanokarboksylowego.
Mieszaninę 10,0 g produktu z przykładu XLVa i 17,7 g wodorotlenku potasu w 22 ml wody ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 4 godziny. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono i zakwaszono stężonym HCl. Wytrącony osad zebrano, przemyto wodą i wysuszono na powietrzu. Otrzymano 8,44 g stałej substancji, którą ogrzewano w temperaturze 170°C przez 2 godziny, a następnie ochłodzono. Po krystalizacji z cykloheksanu otrzymano 4,1 g (93%) związku tytułowego w postaci drobnych, białych igiełek o temperaturze topnienia 85-86°C.
Analiza elementarna dla wzoru: C18H20O4: obliczono: C 71,98, H 6,71 znaleziono: C 71,92, H 6,71 c/Sposób wytwarzania chlorku 4-fenoksy-2-/2-fenoksyetylo/butanoilu.
Mieszaninę 1,5 g produktu z przykładu XLVb i 0,73 g chlorku tionylu ogrzewano na łaźni parowej przez godzinę, a następnie odpędzono rozpuszczalnik. Tytułowy chlorek kwasowy otrzymano w postaci jasnego oleju z ilościową wydajnością i stosowano bezpośrednio do dalszej reakcji, d/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/l-okso-4-fenoksy-2-(2-fenoksyetylo)butylo/-N-/3(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4 metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7a , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /OO(CH2)2/2CH, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXVIIa, produkt z przykładu XLVc poddano reakcji z produktem wytworzonym sposobem opisanym w przykładzie Ilb otrzymując związek tytułowy z wydajnością 95%; TLC, Rf = 0,47 i 0,54, Et2O.
e/ Sposób wytwarzania 3R/lub S/-/1 -okso-4-fenoksy-2-(2-fenoksyetylo)butylo/-N-/3-( 1,1,1trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = /OO(CH2)2/2CH, A = —).
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XLVd utleniono otrzymując surowy produkt w postaci mieszaniny diastereomerów, które rozdzielano metodą szybkiej chromatografii stosując jako eluent Et2O: heksanu z gradientem 60:40 do 75 :25. Szybciej eluujący diastereomer był związkiem tytułowym i otrzymano go z wydajnością 27,7%; HPLC, tR = 6,94, Col A, CH3CN: H2O (65: 35), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru: C29H35F3N2O5: obliczono: C 63,49, H 6,43, N5,ll znaleziono: C 63,39, H 6,47, N 5,07
Przykład XLVI. Sposób wytwarzania 3S/lub R/-/l-okso-4-fenoksy-2-(2-fenoksyetylo)butylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 =/OO(CH2)2/2CH, A = —/.
W trakcie rozdzielania diastereomerów z surowego produktu opisanego w przykładzie XLVe, wolniej eluujący diastereomer stanowa powyższy związek tytułowy, który otrzymano z wydajnością 28,3%; HPLC, tR = 5,04, Col A, CH3CH : H2O (65 :35), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru: C29H35F3N2O5: obliczono: C 63,49, H 6,43, N5,ll znaleziono: C 63,50, H 6,45, N 5,26
Przykład XLVII. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/6-[(4-etoksykarbonylofenylo)aminokarbonyloamino]- l-okso/heksylo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = 4-/CH3CH2OCO/ONHCONH/ CH2/5, A = CO, n=l/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS,3/SR/-l-/6-[(4-etoksykarbonylofenylo)aminokarbonyloamino]-l-okso/heksylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4 metylopentylo)/-L-prolinamidu/związek
150 268 o wzorze 7a , w którym R1 =CH/CH3/CH3, R3 = 4-/CH3CH2OCO/ONHCONH/CH2/5, A = —).
2,288 g (1,5 mmola) p-Izocyjanianobenzoesanu etylu dodano do mieszanego roztworu 0,6 g (1,5 mmola) produktu z przykładu Lb, 0,15 g (1,5 mmola) TEA i 20 ml DMF w atmosferze azotu w temperaturze pokojowej. Otrzymaną mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, a następnie zatężono pod próżnią otrzymując bursztynową pozostałość, którą rozpuszczono w EtOAc. Roztwór octanowy przemyto IN HCl, wysuszono MgSO4, przesączono i zatężono pod próżnią do otrzymania 1,15 g oleistej pozostałości. Pozostałość oczyszczano metodą szybkiej chromatografii stosując jako eluent CHC13: CH3OH (97:3) i otrzymano 0,62 g (70%) związku tytułowego w postaci białej stałej substancji; TLC, Rf = 0,28 i 0,35, CHC13: CH3OH (95:5).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/6-[(4-etoksykarbonylofenylo)aminokarbonyloamino]-lokso/heksylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = 4-/CH3CH2OCO/ONHCONH/CH2/5, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XLVIIa utleniono i po oczyszczeniu przez szybką chromatografię stosując jako eluent CHCI3: MeOH (97: 3) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 43%; HPLC, tR = 12,39 i 15,79, Col A, H2O: CH3CN (65 :35), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru: C27H37F3N4O6T,0 H2O: obliczono; C 55,09, H 6,68, N 9,51 znaleziono: C 54,75, H 6,63, N 9,29
Przy kład XLVIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/6-(fenylometoksykarbonyloamino)-loksoheksylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2OCONH/CH2/5, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIc, produkt z przykładu La utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii stosując jako eluent CHC13: MeOH (97: 3), otrzymano związek tytułowy z wydajnością 31%; HPLC, tR = 4,06, Col A, CH3CN:H2O (1:1), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru: C25H34F3N3O5-0,5 H2O: obliczono: C 57,46, H 6,75, N 8,04 znaleziono: C 57,87, H 6,24, N 7,86
Przykład XLIX. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/6-[(4-hydroksykarbonylofenylo)aminokarbonyloamino]-1 -okso/heksylo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu / związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = 4-/HOCO/ONHCONH/CH2/5, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XIV, produkt z przykładu XLVIIb przekształcono w związek tytułowy z wydajnością 38%; HPLC, tR = 6,24 i 8,0, Col. A, H2O: CH3CN (75 :25), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru: C25H33F3N4O6,2,5 H2O: obliczono: C51,l H 6,50 N 9,50 znaleziono C 51,34 H 5,93 N 8,95
Przykład L. Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/6-sulfonyloamino-l-oksoheksylo/-N-/3(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OS/O2/NH/CH2/5, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/6-(fenylometoksykarbonyloamino)-l-oksoheksylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4 metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7a , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2OCONH/CH2/5, A = —/.
Dodano 6,35 g (30,8 mmoli) DCC do mieszanego roztworu 6,84 g (25,7 mmola) kwasu N-CBZ-aminokapronowego, 6,89 g (25,7 mmola) substancji wytworzonej sposobem opisanym w przykładzie Ilb, 6,94 g (51,4 mmola) HOBT i 250 ml suchego THF w temperaturze 0°C w atmosferze azotu. Otrzymaną mieszaninę mieszano w temperaturze 0°C przez godzinę, pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez noc przed odsączeniem. Przesącz zatężono pod próżnią do brązowej pozostałości, którą rozpuszczono w CHC13 i roztwór chloroformowy przemyto 20% roztworem kwasu cytrynowego, wysuszono nad siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod próżnią. Pozostałość oczyszczano przez szybką chromatografię stosując jako
150 268 eluent CHCI3: MeOH (97: 3) i otrzymano 8,0 g (61%) związku tytułowego w postaci woskowatej substancji; TLC, Rf = 0,35, CHC13: MeOH (95 :5).
b/ Sposób wytwarzania 2/RS,3/SR/-l-/6-amino-l-oksoheksylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7a , w którym R1=CH/CH3/CH3, R3 = H2N/CH2/5, A = —/.
Mieszaninę 2,06 g (3,99 mmola) produktu z przykładu La, 100 ml etanolu i 0,3 g 10% Pd/C umieszczono w aparacie Parra pod ciśnieniem 310 388 Pa H2 na 3 godziny. Mieszaninę przesączono przez Celite i placek Celite przemyto etanolem. Przemywki etanolowe i przesącz połączono i zatężono pod próżnią otrzymując 1,36 g (86%) związku tytułowego w postaci jasnozielonego woskowatego oleju; TLC, Rf = 0,2, CHCI3: MeOH (85:15).
c/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-/6-fenylosulfonyloamino-l-oksoheksylo/-N-/3-( 1,1,1trifluoro-2-hvdroksy-4-metvlopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7a, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OS/O2/NH/CH2/5, A = — /.
0,6 g (1,5 mmola) Chlorku benzenosulfonylu dodano do mieszanego roztworu 0,26 g (1,5 mmola) produktu z przykładu Lb, 0,3 g (3,0 mmole) TEA i 20 ml suchego DMF w atmosferze azotu w temperaturze pokojowej i otrzymaną mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Usunięto DMF pod próżnią otrzymując brązowawą pozostałość, którą rozpuszczono w EtOAc. Roztwór octanowy przemyto IN HCl, wysuszono nad siarczanem magnezu i przesączono. Przesącz zatężono pod próżnią do pozostałości, którą oczyszczano przez szybką chromatografię stosując jako eluent CHCI3: MeOH (97: 3). Otrzymano 0,48 g (60%) związku tytułowego w postaci białego proszku; TLC, Rf = 0,30 i 0,40, CHCbiMeOH (95:5).
d/ Sposób wytwarzania 3/RS/-l-/6-fenylosulfonyloamino-l-oksoheksylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze la , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R3 = OS/O2/NH/CH2/5, A = — /.
Postępując w sposób opisany w przykładzie VIIIb, produkt z przykładu Lc utleniono i po oczyszczeniu przez szybką chromatografię stosując jako eluent Et2O: heksan (3:1), a w drugiej kolumnie CHCI3: MeOH (97:3) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 36%; HPLC, tR = 8,48 i 10,33, CH3CN: H2O (35 :65), FR = 2,0.
Przykład LI. Sposób wytwarzania 3/RS/-/l-naftylokarbonylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze lb , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 1-naftyl, A = —/.
a/Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/1 -naftylokarbonylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro2-hydroksy-4 metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7b , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 1-naftyl, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXa, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie Illd poddano reakcji z chlorkiem 1-naftylokarbonylu otrzymując związek tytułowy z wydajnością 38% po oczyszczeniu metodą chromatografii cienkowarstwowej (heksan : Et2O 4:6); TLC, Rf = 0,46 i 0,41, MeOH: CHC13 (5 :95).
Analiza elementarna dla wzoru: C27H32F3N3O4: obliczono: C 60,32, H 6,37, N 7,82 znaleziono: C 60,89, H 6,21, N 7,68 b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/l-naftylokarbonylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4 metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze lb , w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH2/2, R3 = 1-naftyl, A = —/.
Roztwór 29,7 g (380 mmoli) DMSO w 81 ml CH2C12 dodawano powoli do wcześniej ochłodzonego do temperatury -43°C roztworu 24,0 g (190 mmoli) chlorku szczawiowego w 350 ml CH2C12 i otrzymany roztwór mieszano przez 15 minut, po czym dodano roztwór 9,4 mmola produktu z przykładu Lid w 83 ml CH2C12. Po reakcji mieszaninę mieszano w temperaturze -30°C przez godzinę i wkroplono 48,9 g (380 mmoli) diizopropyloetyloaminy. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej, a następnie przemyto 1N HCl, 5% wodnym roztworem NaOCl i solanką, wysuszono siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod próżnią. Pozostałość oczyszczono metodą chromatografii cienkowarstwowej stosując jako eluent heksan
150 268 : Et2O (40:60) i otrzymano związek tytułowy z wydajnością 38%; HPLC, tR —5,21 i 7,31, Col. A, CH3CN: H2O: TFA (50:50:0,1), FR = 1,5.
Analiza elementarna dla wzoru: 027Η32Ε3Ν304·0,75 H2O: obliczono C 60,32 H 6,37 N 7,82 znaleziono: C 60,69 H 6,21 N 7,68
Przykład LII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-(metylosulfonyloaminokarbonylo)fenyloaminokarbonylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze lb , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 4-/CH3S(O2)NHCO/O, A = NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXXIX, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie XVI poddano reakcji z metanosulfonamidem otrzymując po oczyszczeniu przez chromatografię na żelu krzemionkowym Baker pH 5,0 (gradient eluenta CHCI3: MeOH) (97:3) do (90:19)) związek tytułowy z wydajnością 59%; HPLC, tR = 2,60 i 3,33, Col. C, H2O: CH3CN (60:40), FR = 6,0.
Analiza elementarna dla wzoru: C^5H34F3N5O7S‘0,5 H2O: obliczono: C 48,85 H 5,74 N 11,39 znaleziono: C 49,03 H 5,74 N 10,86
Przykład LIII.Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(4-morfolinylo)etoksykarbonylo/-L-walilo· N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze lb , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 4-morfolinylo-CH2CH2, A = 0/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/2-(4-morfolinylo) etoksykarbonylo/-L-walilo-N-/3(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7b , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH/3/2, R3 = 4-morfolinylo-CH2CH2, A = O/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie VIIb, substancję otrzymaną sposobem opisanym w przykładzie Illd poddano reakcji z substancją otrzymaną sposobem opisanym w przykładzie XXXIIIa otrzymując z wydajnością 55% produkt po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z zastosowaniem jako eluenta MeOH:CHCl3 (2,5:97,5); HPLC, tR = 4,62 i 5,85, Col. A, CH3CN:H2O(1:), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C23H39F3N4O6’H2O: obliczono: C 50,91 H 7,61 N 10,32 znaleziono: C 50,95 H 7,20 N 10,02 b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(4-morfolinylo)etoksykarbonylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,ltrifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze lb , w którym R1 — CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 4-morfolinylo-CH2CH2, A = 0/.
Roztwór 29,7 g (380 mmoli) DMSO w 135 ml CH2Cl2 dodano do uprzednio ochłodzonego do temperatury -43°C roztworu 24,0 g (190 mmoli) chlorku szczawiowego w 350 ml CH2CL2 i otrzymany roztwór mieszano przez 15 minut, po czym dodano roztwór 9,4 mmoli produktu z przykładu Lilia w 125 ml CH2Cl2. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania od temperatury -43°C do temperatury -20°C mieszając ją przez godzinę, a następnie wkroplono 48,9 g (380 mmoli) diizopropyloetyloaminy i mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej. Następnie mieszaninę rozcieńczono CH2Cl2, przemyto wodnym roztworem NaOH o pH 10, wysuszono nad K2CO3/Na2SO4 i zatężono pod próżnią. Pozostałość oczyszczano metodą chromatografii stosując jako eluent MeOH: CHCI3 (2:98) otrzymując związek tytułowy z wydajnością 18%; HPLC, tR = 2,00 i 2,60, Col. A, H2O: CH3CN (1:1), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C23H37F3N4O6-l,5H2O: obliczono: C 50,26 H 7,34 N 10,19 znaleziono: C 50,49 H 6,96 N 9,96
Przykład LIV. Sposób wytwarzania 3/RS/-/2,4-dichlorofenylo)karbonylo/-L-walilo-N— /3-(1,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze lb , w którym
150 268
R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 2,4-dichloro, A = 0/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/(2,4-dichlorofenylo)karbonylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1trifluoro-2-hydroksy-4 metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7b, w którym R = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 2,4-dichloro, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXa,substancję otrzymaną sposobem opisanym w przykładzie Illd poddano reakcji z chlorkiem 2,4-dichlorobenzoilu otrzymując związek tytułowy z wydajnością 98%; TLC, Rt =0,54, MeOH : CHCI3 (5 : 95).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/(2,4-dichlorofenylo)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek δ wzorze lb , w którym R =CH/CH3/ CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 2,4-dichloro, A = —/.
Roztwór 29,7 g (380 mmoli) DMSO w 27 ml CH2C12 dodawano powoli do uprzednio ochłodzonego do temperatury -65°C roztworu 24,0 g (190 mmoli) chlorku szczawiowego w 350 ml CH2C12 i otrzymany roztwór mieszano przez 15 minut, po czym dodano roztwór 9,4 mmoli produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie LIVa w 250 ml CH2C12. Następnie mieszaninę reakcyjną mieszano przez godzinę w temperaturze -65°C i wkroplono 48,9 g (380 mmoli) diizopropyloetyloaminy. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej, a następnie przemyto IN HCl i solanką, wysuszono siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod próżnią. Pozostałość oczyszczano przez szybką chromatografię stosując MeOH: CHCI3 (3:97) jako eluent i otrzymano związek tytułowy z wydajnością 15%; HPLC, tR = 17,93 i 18,55, Col. A, H2O: CH3CN (55 :45), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C23H2eCl2F3N3O4,H2O: obliczono: C 49,65 H 5,43 N 7,55 znaleziono: C 49,95 H 5,31 N 7,35
Przykład LV. Sposób wytwarzania 3/RS/-fenoksykarbonylo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze lb , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 0, A= 0/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/fenoksykarbonylo-L-walilo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-2hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7b , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 0, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXa, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie Illd poddano reakcji z chloromrówczanem fenylu otrzymując związek tytułowy z wydajnością 61% po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z użyciem MeOH:CHCl3 (5:95); TLC, Rf = 0,31 i 0,36, MeOH: CHC13 (3:97).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-fenoksykarbonylo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze lb , w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 0, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LIVb, produkt z przykładu LVa utleniono otrzymując po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z użyciem heksanu :Et2O (15:85), związek tytułowy z wydajnością 37%; HPLC, tR = 2,72 i 3,55, Col. A, H2O:CH3CN (1:1), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzormC^HsoFsNsOsOjó^O: obliczono: C 55,86 H 6,32 N 8,50 znaleziono: C 56,07 H 6,30 N 8,48
Przykład LVI. Sposób wytwarzania 3/RS/-2/-(2-pirydylo)etoksykarbonylo/-L-walilo-N3- (l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/3, R3 = 2-pirydylo-CH2CH2, A = 0/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/2-(2-pirydylo)etoksykarbonylo/-L-walilo-N-/3-(l,1,1trifluoro-2-hydroksy-4-metoksypentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze 7b , w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 2-pirydylo-CH2CH2, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIVb, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie Illd poddano reakcji z substancją wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie XXXIVa otrzymując produkt z wydajnością 50% po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z zastosowaniem MeOH:CHCl3 (4:96); TLC, Rf = 0,30 i 0,34, CHCl3:MeOH (95:5).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-2/-(2-pirydylo)etoksykarbonylo/-L-walilo-N-3-( 1,1,1 -trifluoro4- metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/z, R3 = 2-pirydylo-CH2CH2, A = 0/.
150 268
Postępując w sposób opisany w przykładzie LIVb z pominięciem przemywania kwasem,produkt z przykładu LVIa utleniono, otrzymując po oczyszczeniu przez szybką chromatografię prowadzoną dwukrotnie (heksan: Et2O (1:1), następnie MeOH : CHC13(5:95) związek tytułowy z wydajnością 19%; HPLC, tR = 9,52 i 14,58, Col. A, H2O:CH3CN (60:40), FR= 1,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C24H33F3N4O5*0,75H2O: obliczono: C 54,59 H 6,58 N 10,61 znaleziono: C 54,63 H 6,47 N 10,55
Przykład LVII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/(4-fluorofenylo)-aminokarbonylo/-L-waliloN-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 =- CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 4-FO, A = NH/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/(4-fluorofenylo)aminokarbonylo/-L-walilo-N-/3(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH/3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 4-FO, A = NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XVa, substancję otrzymaną sposobem opisanym w przykładzie Illd poddano reakcji z izocyjanianem 4-fluorofenylu otrzymując związek tytułowy z wydajnością 84% po oczyszczeniu przez szybką chromatografię (gradient MeOH: CHC13 (2,5:97,5) do (5 :95); TLC, Rf = 0,37, MeOH: CHC13 (5 :95).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/(4-fluorofenylo)-aminokarbonylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 4-FO, A = NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LIVb, produkt z przykładu LVIIa utleniono otrzymując po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii (MeOH: CHC13) (3:97) związek tytułowy z wydajnością 42%; HPLC, tR = 8,87 i 12,10, Col.A, H2O: CH3CN (60:40), FR= 1,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C23H3oF4N404: obliczono: C 54,97 H 6,02 N 11,15 znaleziono: C 55,18 H 6,15 N 11,08
Przykład LVIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-(fenylosulfonyloaminokarbonylo)fenyloaminokarbonylo-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 4-/OS(O2)NHCO/O, A = NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXXIX, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie XVI poddano reakcji z benzenosulfonamidem otrzymując po oczyszczeniu przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym Baker pH 5,0 (CHC13: MeOH) (97:3) związek tytułowy z wydajnością 42%; HPLC, tR = 4,05 i 5,93, Col. C, H2O:CH3CN (60:40), FR = 6,0/.
Analiza elementarna dla wzoru:C3oH36F3N507*0,5H20: obliczono: C 53,25 H 5,51 N 10,34 znaleziono: C 53,38 H 5,61 N 10,02
Przykład LIX.Sposóbwytwarzania3/RS/-/2-(3-tiofenylo)-etoksykarbonylo/-L-walilo-N/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 3-tiofenylo-CH2CH2, A = 0/.
a/ Sposób wytwarzania węglanu 4-nitrofenylo-2-/3-tiofenylo/-etylu.
Postępując w sposób opisany w przykładzie VIIa, 3-tiofenoetanol traktowano chloromrówczanem 4-nitrofenylu i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii (EtOAc: heksan /(1:9)), związek tytułowy otrzymano z wydajnością 56%; TLC, Rf = 0,25, EtOAc:heksan (1:9).
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/2-(3-tiofenylo)etoksykarbonylo/-L-walilo-N-/3-(l, 1,1trifiuoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH/3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 3-tiofenylo-CH2CH2, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie VIIb, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie Illd poddano reakcji z produktem z przykładu LIXa otrzymując związek tytułowy z wydajnością 58% po oczyszczeniu przez szybką chromatografię (aceton: heksan) (3:7);TLC, Rf = 0,23 i 0,27, MeOH: CHC13 (5:95).
Analiza elementarna dla wzoru:C24H34F3N3OsS: obliczono: C 52,96 H 6,57 N 8,06 znaleziono: C 53,28 H 6,46 N 7,77
150 268 c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(3-tiofenylo)etoksykarbonylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 3-tiofenylo-CH2CH2, A = O/.
Roztwór 29,7 g (380 mmoli) DMSO w 135 ml CH2CI2 dodawano powoli do uprzednio ochłodzonego do temperatury -43°C roztworu 24,0 g (190 mmoli) chlorku szczawiowego w 350 ml CH2CI2. Otrzymany roztwór mieszano przez 15 minut, a następnie dodano substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LIXb (9,4 mmoli) w 125 ml CH2CI2 i mieszaninę mieszano przez dalszą godzinę w temperaturze -43°C. Następnie wkroplono 48,9 g (380 mmoli) diizopropyloetyloaminy i mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej, po czym przemyto ją IN HCl, 5% wodnym roztworem NaOCl i solanką, wysuszono nad siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod próżnią. Po oczyszczeniu pozostałości metodą szybkiej chromatografii przy użyciu acetonu: heksanu (1:4) jako eluenta otrzymano związek tytułowy z wydajnością 23%; HPLC, tR = 5,09 i 7,61, Col. A, H2O: CH3CN (1:1), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C24H32F3N3O5S: obliczono: C 53,17 H 6,21 N 8,09 znaleziono: C 52,92 H 6,26 N 8,09
Przykład LX. Sposób wytwarzania 3/RS/-/1, l-dimetyloetoksykarbonylo/-L-a-aminobutyrylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH2CH3, R3 = CH3C/CH3/2, A = 0/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/l,l-dimetyloetoksykarbonylo/-L-a-aminobutyryloN-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH/3/CH3, R2 = CH2CH3, R3 = CH3C/CH3/2, A = 0/.
5,90 g (28,7 mmola) DCC dodano do mieszanego roztworu 7,76 g (57,4 mmoli) HOBT, 5,60 g (27,4 mmoli) kwasu BOC-a-aminopropanokarboksylowego i 7,00 g (26,1 mmola) substancji wytworzonej sposobem opisanym w przykładzie IIb w 130 ml suchego THF w temperaturze 0°C w atmosferze azotu. Otrzymaną mieszaninę mieszano w tempeaturze 0°C przez godzinę i pozostawiono ją do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez noc. Mieszaninę przesączono i przesącz zatężono pod próżnią do pozostałości, którą rozpuszczono w EtOAc. Roztwór przemyto nasyconym roztworem NaHCO3 i solanką, wysuszono siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod próżnią do pozostałości, którą oczyszczono przez szybką chromatografię z użyciem EtOAc :CH2Cl2 (1:3). Otrzymano związek tytułowy z wydajnością 95%; TLC, Rf = 0,29, EtOAc: CH2CI2 (3:7).
b/Sposób wytwarzania 3/RS/-/1, l-dimetyloetoksykarbonylo/-L-ar-aminobutyrylo-N-/3-( 1, 1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/ CH3/ CH3, R2 = CH2CH3, R3 = CH3C/CH3/2, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu LXa utleniono i po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z użyciem MeOH : CHCI3 (1,5:98,5) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 47%, HPLC, tR= 10,21 i 14,54, Col. A, H2O:CH3CN ( 65:35), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C2oH32F3N30s: obliczono: C 53,21 H 7,14 N9,31 znaleziono: C 53,65 H 7,21 N 9,51
Przykład LXI. Sposób wytwarzania 3/RS/-/l-okso-2-(2-tiofenylo)etylo/-L-a-aminobutyrylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH2CH3, R3 = /2-tiofenylo/CH2, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-L-cr-aminobutyrylo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-2-hydroksy4-metylopentylo)/-L-prolinamidu w postaci soli z kwasem trifluorooctowym (związek o wzorze 4b, w którym R1 = CH/CH/3/CH3, R2 = CH2CH3).
Roztwór 4,0 g (8,84 mmoli) substancji wytworzonej sposobem opisanym w przykładzie LXa i 32 ml (415 mmoli) TFA w 32 ml CH2CI2 mieszano w temperaturze pokojowej przez 22 godziny, a następnie rozpuszczalniki usunięto po zmniejszonym ciśnieniem otrzymując surowy produkt (5 g, >100%) w postaci bezbarwnego szkła, które stosowano bez dalszego oczyszczania lub charakteryzacji.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 — CH/CH/3/CH3, R2 = CH2CH3, R3 = /2tiofenylo/CH2, A = —/.
150 268
0,315 g (1,53 mmola) DCC dodano do mieszanego roztworu 0,413 g (3,06 mmola) HOBT, 0,222 g (1,53 mmola) kwasu 2-tiofenooctowego, 0,154 g (1,53 mmola) NMM i substancji wytworzonej sposobem opisanym w przykładzie LXIa (0,650 g, 1,39 mmola) w 20 ml suchego THF w temperaturze 0°C w atmosferze azotu. Otrzymaną mieszaninę mieszano w temperaturze 0°C przez godzinę, pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez noc. Mieszaninę przesączono i przesącz zatężono pod próżnią do pozostałości, którą rozpuszczono w EtOAc. Uzyskany roztwór przemyto solanką, wysuszono siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod próżnią do pozostałości, którą oczyszczano metodą szybkiej chromatografii stosując aceton: heksan (1:1). Otrzymano 33% związku tytułowego; TLC, Rf = 0,40 i 0,44, MeOH iCHCb (1:9).
Analiza elementarna dla wzoru:C2iH3oF3N304S: obliczono: C 52,82 H 6,33 N 8,80 znaleziono: C 52,43 H 6,53 N 8,08 c/Sposób wytwarzania 3/RS/-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH2CH3, R3 = /2-tiofenylo/CH2, A = — /.
Do zawiesiny 0,84 g (8,4 mmola) CrOe w 50 ml suchego CH2CI2 dodano 1,36 ml (17 mmoli) suchej pirydyny i mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 30 minut. Do otrzymanej zawiesiny o barwie czerwonego wina dodano 1 g Celite, a następnie 0,20 g (0,42 mmola) produktu z przykładu LXIb w 5 ml CH2CI2. Mieszaninę mieszano aż TLC wykazała, że wszystek alkohol został zużyty. Następnie mieszaninę przesączono przez wkładkę z żelu krzemionkowego z metanolem : chloroformem (1:9) i rozpuszczalniki usunięto z przesączu pod próżnią. Surowy produkt oczyszczano przez preparatywną chromatografię cienkowarstwową stosując MeOHrCHCh (5 :95). Otrzymano 150 mg produktu w postaci białej substancji; HPLC, tR = 4,18 i 5,65, Col. A, H2O: CH3CN (60:40), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C2iH28F3N3O4S*0,5H2O: obliczono: C 52,06 H 6,03 N 8,67 znaleziono: C 52,03 H 6,19 N 8,38
Przykład LXII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/fenylometoksykarbonylo/-L-a-aminobutyrylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH2CH3, R3 = OCH2, A = 0/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/fenylometoksykarbonylo/-L-cr-aminobutyrylo-N-/3(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH/3/CH3, R2 = CH2CH3, R3 = OCH2, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXa, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXIa poddano reakcji z 1,5 równoważnika chloromrówczanu benzylu w jednej czwartej ilości CHCI3 stosowanego w przykładzie XXa otrzymując związek tytułowy z wydajnością 51 % po oczyszczaniu przez szybką chromatografię z zastosowaniem acetonu: heksanu (1:4); TLC, Rf = 0,38 i 0,43, aceton: heksan (40:60).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/fenylometoksykarbonylo/-L-cr-aminobutyrylo-N-/3-( 1,1,1trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 =CH/ CH3/CH3, R2 = CH2/CH3, R3 = OCH2, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu LXIIa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z użyciem acetonu: heksanu (30:70) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 64%, HPLC, tR = 5,69 i 7,75, Col. A, H2O:CH3CN (55:45), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C23H3oF3N305O,8H20: obliczono: C 55,26 H 6,37 N 8,40 znaleziono: C 55,10 H 6,19 N 8,77
Przykład LXIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/fenoksykarbonylo/-L-cr-aminobutyrylo-N/3-(1,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH2CH3, R3 = O, A = 0/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/fenoksykarbonylo/-L-a-aminobutyrylo-N-/3-( 1,1,1trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH2CH3, R3 = O, A = 0/.
150 268
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXa lecz stosując NMM zamiast TEA, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXIa poddano reakcji z 1,5 równoważników chloromrówczanu fenylu otrzymując związek tytułowy z wydajnością 18% po oczyszczeniu metodą preparatywnej chromatografii cienkowarstwowej z użyciem acetonu: heksanu (3 :7); TLC, Rf = 0,32, 0,37, aceton: heksan (3:7).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/(fenoksykarbonylo/-L-a-aminobutyrylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1=CH/CH3/CH3, R2 = CH2CH3, R3 = O, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu LXIIIa utleniono otrzymując po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii przy użyciu EtOAc:heksan (1:9), związek tytułowy z wydajnością 60%; HPLC, tRi = 4,57 i 6,51, Col. A, H2O: CH3CN (55 :45).
Analiza elementarna dla wzoru:C22H2eF3N3O5: obliczono: C 56,04 H 5,98 N 8,90 znaleziono: C 56,04 H 6,18 N 8,85
Przykład LXIV. Sposób wytwarzania 3/RS/ -Ν2-/1,1 -dimetyloetoksykarbonylo/-N6-fenylometoksykarbonylo-L-lizylo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = OCH2OCONH/CH2/4, R3= /CH3/3C, A = 0/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-N2-/1,1 -dimetyloetoksykarbonylo/-N6-fenylometoksykarbonylo-L-lizylo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = OCH2OCONH/CH2/4, R3 = /CH3/3C, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXXb, N2-BOC-N6-CBZ-L-lizynę poddano reakcji z substancją wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie Ilb i po oczyszczeniu metodą chromatografii stosując eluent z gradientem MeOH : CHC13 (2,5 :97,5) do (5 :95) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 73%; TLC, Rf = 0,57, MeOH: CHC13 (5 :95).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-N2-/l,l-dimetyloetoksykarbonylo/-N6-fenylometoksykarbonylo-L-lizylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = OCH2OCONH/CH2/4, R3 =/CH3/3C, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIc, produkt z przykładu LXVa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii stosując gradient eluentu MeOH: CHC13 (2,5 :97,5) do (5:95) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 65% ; HPLC, tR = 4,15 i 5,14, Col. A, H2O: CH3CN (45 :55), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C3oH43F3N407-0,5H20: obliczono: C 55,51 H 6,95 N 8,79 znaleziono: C 56,45 H 6,58 N 8,42
Przykład LXV. Sposób wytwarzania 3/RS/-/(2-amino-5-chlorofenylo)karbonylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 2-NH-5-C1-O, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/(2-amino-5-chlorofenylo)karbonylo/-L-walilo-N-/3(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 2-NH2-5-Cl-O, A = —/.
Roztwór 1,0 g (2,7 mmola) substancji wytworzonej sposobem opisanym w przykładzie Illd w 50 ml CH2C12 traktowano 0,54 g (2,7 mmola) bezwodnika 5-chloroizotowego w temperaturze pokojowej i mieszaninę mieszano przez noc, a następnie przemyto 5% wodnym roztworem NaHCO3 i solanką, wysuszono siarczanem magnezu, zatężono pod próżnią i oczyszczano metodą szybkiej chromatografii stosując MeOH: CHC13 (3:97). Otrzymano l,4g (78%) związku tytułowego w postaci białej piany; TLC, Rf = 0,30 i 0,25, MeOH: CHC13 (5 :95).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/(2-amino-5-chlorofenylo)karbonylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 =CH/ CH3/CH3, R2 = CH/CH3/2, R3 = 2-NH2-5-Cl-O, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIc, produkt z przykładu LXVa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem MeOH: CHC13 (3:97) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 76%; HPLC, tR = 3,41 i 4,62, Col. A,H2O:CH3CN (50:50) FR = 2,0.
150 268
Analiza elementarna dla wzoru:C23H3oF3N404'H20: obliczono: C 51,45 H 6,01 N 10,43 znaleziono: C 51,65 H 5,74 N 9,68
Przykład LXVI. Sposób wytwarzania 3/RS/-/(4-metoksyfenylo-karbonylo/-L-a-aminobutyrylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH2CH3, R3 = 4-/CH3O/-O, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/(4-metoksyfenylo-karbonylo/-L-cr-aminobutyryloN-/3-(l, 1, l-trifluoro-2-hydroksy-4~metylo-pentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH/3/CH3, R2 = CH3CH2, R3 = 4-/CH3O/-O, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXa, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXIa poddano reakcji z chlorkiem 4-metoksybenzoilowym otrzymując związek tytułowy z wydajnością 34%, po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem EtOAc: heksanu (60:40), TLC, Rf = 0,71 i 0,73, MeOH: CHCI3 (1:9).
Analiza elementarna dla wzoru:C23H32F3N3OsO,3H2O: obliczono: C 56,04 H 6,67 N 8,52 znaleziono: C 56,06 H 6,60 N 8,14 b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/(4-metoksyfenylokarbonylo/-L-a-aminobutyrylo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2, R3 = 4-/CH3O/-O, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, z tą różnicą, że alkohol rozpuszczono w pięciokrotnej ilości rozpuszczalnika, produkt z przykładu LXVIa utleniono i po oczyszczeniu metodą preparatywnej TLC z zastosowaniem MeOH: CHCI3 (1:9), otrzymano związek tytułowy z wydajnością 40%; HPLC, tR = 8,89 i 11,75, Col. A, H2O: CH3CN (70:30), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C23H3oF3N305’H20: obliczono: C 54,86 H 6,41 N 8,35 znaleziono: C 54,89 H 6,38 N 7,48
Przykład LXVII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(tricyklo-[3.3.1.1.3,7]-dec-l-ylo)etoksykarbonylo/-L-a-aminobutyrylo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2 , R3 = /l-adamantylo/CH2CH2, A = 0/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/2-(tricyklo[3.3.1.13,7]-dec-l-ylo)etoksykarbonylo/-La-aminobutyrylo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2, R3 = /l-adamantylo/-CH2CH2, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIVb, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXIa poddano reakcji z substancją wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie VIIa otrzymując związek tytułowy z wydajnością 42% po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem EtOAc: heksanu (20:80), a następnie (50:50);TLC, Rf — 0,33 i 0,4, MeOH: CHC13 (5 :95).
b/Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(tricyklo[3.3.1.13’7]-dec-l-ylo)etoksykarbonylo/-L-cr-aminobutyrylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2, R3 = /l-adamantylo/-CH2CH2, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu LXVIIa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem Et2O: heksanu (50:50), a następnie (90:10), otrzymano związek tytułowy z wydajnością 66%; HPLC, tR = 4,64 i 5,63, Col. A, H2O : CH3CN (25:75), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C28H42F3N3O5’0,15H2O: obliczono: C 60,01 H 7,60 znaleziono: C 59,76 H 7,65
Przykład LXVIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-N2-/l,l-dimetyloetoksykarbonylo/-N6fenylosulfonylo-L-lizylo-N-/3-(1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = OS/O2/NH/CH2/4, R3 =/CH3/3C, A = 0/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-N2-/l, l-dimetyloetoksykarbonylo/-L-lizylo-N-/3-(l, 1,1trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH/3/CH3eR2 = H2N/CH2/4, R3 = /CH3/3C, A = 0/.
150 268
Do roztworu 3,0 g (4,8 mmola) substancji wytworzonej sposobem opisanym w przykładzie LXIVa w 60 ml absolutnego etanolu dodano 0,6 g 10% Pd/C. Otrzymaną zawiesinę mieszano przez noc pod ciśnieniem 101325 Pa wodoru. Dodano dodatkowe 0,3 g 10% Pd/C i mieszanie kontynuowano przez kilka godzin. Mieszaninę reakcyjną przesączono przez Celite i zatężono pod próżnią otrzymując 2,48 g produktu, który stosowano bezpośrednio do dalszej reakcji.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-N2-/1, l-dimetyloetoksykarbonylo/-N6-fenylosulfonylo-L-lizylo-N-/3-(1,1,1 -trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = OS/O2/NH/CH2/4, R3 = /CH3/3C, A = 0/.
Produkt z przykładu LXVIIIa traktowano chlorkiem benzenosulfonylu i po oczyszczeniu przez szybką chromatografię CHC13: MeOH (95 : 5) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 69%; TLC =, Rt = 0,29, MeOH: CHC13 (95 :5).
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-N2-/l,l-dimetyloetoksykarbonylo/-N6-fenylosulfonylo-Llizylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = OS/O2/NH/CH2/4, R3 = /CH3/3C, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIc, produkt z przykładu LXVIIIb utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii eluując kolumnę z gradientem MeOH: CHC13 (0:100) do (2,5 :97,5) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 57%; HPLC, tR = 7,48 i 9,11, Col. A, CH3CN: H2O (1:1),FR= 1,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C2eHi6F3N4O7S*H2O: obliczono: C 51,52 H 6,64 N 8,58 znaleziono: C 51,47 H 6,46 N 7,80
Przykład LXIX. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-etoksykarbonylo-fenylo/aminokarbonylo-L-cr-aminobutanoilo-N-/3-( 1,1,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/O, A = NH/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/4-etoksykarbonylofenylo/-aminokarbonylo-L-aaminobutyroilo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/O, A = NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XVa, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXIc poddano reakcji z 4-izocyjanianobenzoesanem etylu otrzymując związek tytułowy z wydajnością 46%; TLC, Rf = 0,53, MeOH: CHC13 (5:95).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-etoksykarbonylofenylo/aminokarbonylo-L-a-aminobutyrylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/O, A = NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu LXIXa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem CHC13: MeOH (97:3) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 68%; HPLC, tR = 6,35 i 8,70, Col. A, H2O:CH3CN (60:40), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C25H33F3N4O6,0,5H2O: obliczono: C 54,44 H 6,21 N 10,15 znaleziono: C 54,76 H 6,13 N 10,27
Przykład LXX. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-hydroksykarbonylofenylo/aminokarbonylo-L-cr-aminobutyrylo-N-/3-( 1,1,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2, R3 = 4/HOC(O)/O, A = NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XIVsubstancję otrzymaną sposobem opisanym w przykładzie LXIXb przekształcono w związek tytułowy, który wyodrębniono z wydajnością 61 % po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii na żelu krzemionkowym Baker pH 5,0 stostując CHC13: MeOH (97:3);HPLC, tR = 3,68 i 4,69, Col. A, H2O: CH3CN (3:1), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C23H29F3N4O6,H2O: obliczono: C 51,88 H 5,86 N 10,52 znaleziono: C 51,98 H 5,69 N 10,19
Przykład LXXI. Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(2-metoksyetoksy)etoksykarbonylo/-Lff-aminobutyrylo-N-/3-(l, 1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2-, R3 = CH3O/CH2/2O/CH2/2, A =-0/.
150 268 a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/2-(2-metoksyetoksy)etoksykarbonylo/-L-a-aminobutyrylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2-, R3 = CH3O/CH2/2O/CH2, R4 = H, A = -OCO-, n=l/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIVb , produkt wytworzony sposobem opisanym w przykładzie LXIa poddano reakcji z produktem wytworzonym sposobem opisanym w przykładzie XIXa, otrzymując po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z gradientem eluenta aceton: heksan (1:9) do (7:3), związek tytułowy z wydajnością 75%; TLC, Rf = 0,30 i 0,35, aceton : heksan (40:60).
Analiza elementarna dla wzoru:Ci7H29F3N2Oe*0,5H2O: obliczono: C 48,22 H 7,14 N 6,61 znaleziono: C 48,13 H 6,90 N 6,07 b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(2-metoksyetoksy)etoksykarbonylo/-L-a-aminobutyrylo-N/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2= CH3CH2, R3 = CH3O/CH2/2O/CH2/2, A = -0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu LXXIa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z gradientem eluenta EtOAc:heksan (1:1) do EtOAc do aceton: EtOAc (1:9), otrzymano związek tytułowy z wydajnością 40%; HPLC, tR = 5,70 i 8,95, Col. A, H2O: CH3CN (75:25), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C2iH34F3N3O7: obliczono: C 48,77 H 7,14 N 6,61 znaleziono: C 48,13 H 6,90 N 6,09
Przykład LXXII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/Z-(4-aminokarbonyloamino-l ,4-diokso-2butenylo)/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2/CH-, R3 = Z-H2NC/O/NHC/O/CH = CH-, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/Z-(4-aminokarbonyloamino-l,4-diokso-2-butenylo)/L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentyIo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = Z-H2NC/O/NHC/O/CH = CH-, A = — /.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXIb, produkt wytworzony sposobem opisanym w przykładzie Illd poddano reakcji z kwasem Z-4-aminokarbonyloamino-4-oksopropenokarboksylowym i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem MeOH: CHCI3 (5 :95) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 26%; TLC, Rf = 0,17 i 0,25, MeOH: CHCI3 (5:95). .
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/Z-(4-aminokarbonyloamino-l,4-diokso-2-butenylo)/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = Z-H2NC/O/NHC/O/CH = CH-, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIc, produkt z przykładu LXXII utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem MeOH: CHCI3 (4:96) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 29%; HPLC, tR = 1,78 i 2,45, Col. A, H2O: CH3CN (65:35), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C2iH3oF3N506’l,5H20: obliczono: C 47,37 H 6,25 N 13,15 znaleziono: C 47,29 H 5,77 N 13,02
Przykład LXXIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-fenyloaminokarbonylo-L-walilo-N-/3(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = O, A = NH/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-fenyloaminokarbonylo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 =CH/CH/3/ CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = O, A = -NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XVa, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie Illd poddano reakcji z fenyloizocyjanianem i po oczyszczeniu metodą szybkiej
150 268 chromatografii z zastosowaniem MeOH: CHC13 (2:98) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 62%; TLC, Rf = 0,24 i 0,32, MeOH : CHC13 (2:98).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-fenyloaminokarbonylo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = O, A = -NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIc, produkt z przykładu LXXIIIa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem MeOH: CHC13 (2:98) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 75%; HPLC, tR = 5,70 i 8,77, Col. A, H2O: CH3CN (60:40), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C23H3iF3N4O4,0,75H2O: obliczono: C 55,47 H 6,58 N 11,25 znaleziono: C 55,46 H 6,50 N 10,72
Przykład LXXIV. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-etoksykarbonylofenylo/aminokarbonylo-L-fenyloalanylo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = OCH2-, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/O, A = NH/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-l-fenylometoksykarbonylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7a, w którym R1 = CH/CH/3/ CH3, R3 = OCH2-, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie Ha, produkt wytworzony sposobem opisanym w przykładzie IV poddano reakcji z CBZ-L-proliną otrzymując związek tytułowy z wydajnością 100%; TLC, Rf = 0,37 i 0,45, MeOH: CH2C12 (5 :95).
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/L-prolinamidu (związek o wzorze 4a, w którym R1 = CH/CH3/CH3.
Postępując w sposób opisany w przykładzie Ilb, produkt z przykładu LXXIVa przekształcono w związek tytułowy z wydajnością 100%; TLC, Rf = 0,73 i 0,81, MeOH:CH2Cl2 nasyconego NH4OH (15:85).
c/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-fenylometoksykarbonylo-L-fenyloalanylo-N-/3-( 1,1,1trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = ch/ch3/ch3, r2 = ch2o, r3= och2-, a = 0/.
Po dodaniu 2,27g (11,0 mmoli) DCC do mieszanego roztworu 2,29 (10,0 mmoli) CBZ-Lfenyloalaniny, 2,70 g (17,6 mmoli) HOBT i substancji wytworzonej sposobem opisanym w przykładzie LXXIVb w ilości 2,68 g (10,0 mmoli) w 45 ml suchego THF ochłodzonego do temperatury -17°C, mieszaninę pozostawiono w temperaturze pokojowej przez noc, przesączono i zatężono aby usunąć THF, po czym umieszczono w Et2O i EtOAc. Otrzymany roztwór przemyto dwukrotnie nasyconym roztworem NaHCO3, IN HCl i solanką, wysuszono nad siarczanem magnezu, przesączono, zatężono i umieszczono w minimalnej ilości CH2C12. Po odsączeniu N,N'-dicykloheksylomocznika roztwór zatężono pod próżnią i wysuszono pod próżnią otrzymując związek tytułowy z wydajnością ilościową w postaci białej piany; TLC, Rf = 0,37 i 0,45, MeOH: CH2C12 (5 :95).
d/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-L-fenyloalanylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 4b, w którym R =CH/CH3/CH3, R = CH2O.
Mieszaninę produktu z przykładu LXXIVc w ilości 501,3 mg (0,898 mmoli) i 50 mg 10% Pd/C (50% wody) w 17 ml absolutnego etanolu mieszano pod ciśnieniem wodoru 101325 Pa przez noc, przesączono, zatężono i wysuszono pod próżnią otrzymując związek tytułowy z wydajnością ilościową; TLC, Rf = 0,14, MeOH: CH2C12 (5 :96); Rf = 0,43 i 0,48, MeOH: NH4OH nas. CH2C12 (5:95).
e/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/4-etoksykarbonylofenylo/-aminokarbonylo-L-fenyloalanylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = OCH2-, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/O-, A = -NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XVa, substancję otrzymaną sposobem opisanym w przykładzie LXXIVd poddano reakcji z 4-izocyjanianobenzoesanem etylu i otrzymano związek tytułowy z wydajnością 95%; TLC, Rf = 0,21 i 0,26, MeOH: CH2CI2 (5 :95).
150 268 f/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-etoksykarbonylofenylo/aminokarbonylo-L-fenyloalanyloN-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = OCH2-, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/O-, A = -NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu LXXIVe utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem gradientu eluenta Et2O: pentanu (11:1) do Et2O otrzymano związek tytułowy z wydajnością 94%; HPLC, tR= 10,26 i 13,52, Col. A, CH3CN: H2O (45 : 55), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C3oH35F3N406*l,24H20: obliczono: C 57,47 H 6,03 N 8,94 znaleziono: C 57,43 H 6,02 N 8,97
Przykład LXXV. Sposób wytwarzania 3/RS/-/[4-/(l-naftylosulfonylo)aminokarbonylo/fenylo]-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = 4-/l-naftylo-S(O2/NHC(O)/O, R4 = H, A = -NHCO, n = 1/.
a/ Sposób wytwarzania 1-naftalenosulfonamidu.
Amoniak przepuszczono przez 5 minut przez mieszany roztwór 5,0 g (22 mmole) chlorku 1-naftalenosulfonylu i 400 ml Et2O w temperaturze -78°C. Otrzymaną mieszaninę mieszano w tempeaturze -78°C przez godzinę, pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez noc. Eter usunięto pod próżnią otrzymując proszek, który przemyto wodą i wysuszono pod próżnią otrzymując 3,2g (70%) związku tytułowego w postaci białego proszku o temperaturze topnienia 152-153°C.
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/[4-/(l-naftylosulfonylo)aminokarbonylo/fenylo]aminokarbonylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = 4-/l-naftylo-S(O2)NHC(O)/O, A = NH/.
0,64 g (3,09 mmola) 1-Naftalenosulfonamidu otrzymanego w przykładzie LXXVa dodano do
1,5 g (2,84 mmola) substancji wytworzonej sposobem opisanym w przykładzie XVI, 0,38 g (3,1 mmola) DMAP, 0,59 g (3,08 mmola) WSCDI i 40 ml CH2C12 w atmosferze azotu w temperaturze pokojowej. Otrzymaną mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, a następnie przemyto IN HCl, wysuszono nad siarczanem magnezu i przesączono. Przesącz zatężono pod próżnią do gumowatej pozostałości, którą oczyszczano metodą szybkiej chromatografii stosując CH2C12, a następnie CH2C12: MeOH : AcOH (98:1,9:0,1). Otrzymano 0,76g (36%) związku tytułowego w postaci białego proszku; HPLC, tR= 10,08 i 16,38, Col. A, CH3CN: H2O (30:70), FR = 2,5.
Analiza elementarna dla wzoru:C34H38F3N5O7S-CH2O: obliczono: C 54,25 H 5,49 N 9,30 znaleziono: C 54,56 H 5,68 N 8,85
Przykład LXXVI. Sposób wytwarzania 3/RS/-N2-/4-hydroksykarbonylofenylo/aminokarbonylo-N6-fenylometoksykarbonylo-L-lizylo-N-/3-(l, 1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH2/4NHC/O/O CH2O, R3 = 4-/HOC/O//O, A = -NH-.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-N2-/4-etoksykarbonylofenylo/-aminokarbonylo-N6fenylometoksykarbonylo-L-lizylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH2/4NHC/O/OCH2O, R3 = 4-/EtOC/O//O, A = -NH-/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XVa, 2/RS/,3/SR/-Ne-fenylometoksykarbonyloL-lizylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamid poddano reakcji z 4-izocyjanianobenzoesanem etylu otrzymując związek tytułowy wyodrębniony z wydajnością 95% po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z gradientem eluenta CHCI3 do MeOH: CHCI3 (2:98), następnie (5:95); TLC, Rf = 0,41, MeOH: CHC13 (2,5:97,5).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-N2-/4-etoksykarbonylofenylo/aminokarbonylo-N6-fenylometoksykarbonylo-L-lizylo-N-/3-(l, 1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH2/4NHC/O/OCH2O, R3 = 4-/Et OC/O//O, A = -NH-.
150 268
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIc, produkt z przykładu LXXVIa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem gradientu eluenta CHCI3 do MeOH : CHCI3 (2,5:97,5) do (5:95) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 77%; TLC, Rt = 0,48, MeOH: CHC13 (2,5 :97,5).
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-N2-/4-hydroksykarbonylofenylo/aminokarbonylo-N6-fenylometoksykarbonylo-L-lizylo-N-/3-( 1,1 ,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH2/4NHC/O/OCH2O, R3 = 4-/ HOC(O) O, A = -NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XIV, produkt wytworzony sposobem opisanym w przykładzie LXXVIb przekształcono w związek tytułowy, który wyodrębniono z wydajnością 85%; HPLC, tR = 4,71 i 6,76, Col. A, CH3CN: H2O (40:60), FR = 2,5.
Analiza elementarna dla wzoru:C33H4oF3N508T,5H20: obliczono: C 55,15 H 6,03 N 9,74 znaleziono: C 54,90 H 5,92 N 9,29
Przykład LXXVII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-hydroksykarbonylofenylo/karbonyloL-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 = /CH2/4CH-, R3 = 4-/HOC(O)/O, A = — /.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XIV, produkt otrzymany sposobem opisanym w przykładzie LXXXc przekształcono w związek tytułowy i wyodrębniono z wydajnością 72%; HPLC, tR = 3,48 i 5,31, Col. A, H2O: CH3CN (3:1), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C24H3oF3N306T,OH20: obliczono: C 54,23 H 6,07 N 7,91 znaleziono: C 54,46 H 6,05 N 7,69
Przykład LXVIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-(l-etoksykarbonylo)cyklopent-l-ylo/karbonylo-L-cr-aminobutyrylo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH3-, R3= 1-/CH3CH2OC(O) cyklopent-l-yl-, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania kwasu l-/etoksykarbonylo/cyklopentanokarboksylowego.
Do roztworu 2,5g (11,68mmoli) 1,1-cyklopentynodikarboksylanu dietylu w lOml EtOH wkraplano przez 0,5 godziny roztwór 654 mg (11,68 mmola) KOH w 10 ml EtOH. Otrzymaną mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 96 godzin, zatężono pod próżnią i rozdzielono między wodę i EtOAc. Warstwą wodną zakwaszono stężonym HCl i ekstrahowano EtOAc. Ekstrakty octanowe przemyto solanką, wysuszono siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 1,73 g produktu w postaci jasnego oleju.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/l-etoksykarbonylo(cyklopent-l-ylo)/karbonylo-L-aaminobutyrylo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek owzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2-, R3 = l-/CH3CH2OC(O)/-cyklopent-lyi, A=— /.
Postępując w sposób opisany w przykładzie La i stosując następujące ilości reagentów na jeden równoważnik produktu wytworzonego sposobem opisanym w przykładzie LXXVIIIa: 3,3 równoważników HOBT, 1,65 równoważników DCC, 1,5 równoważnika TEA i 1,0 równoważnik produktu wytworzonego sposobem opisanym w przykładzie LXIa i pomijając przemywanie kwasem cytrynowym, otrzymano związek tytułowy z wydajnością 46% po wyodrębnieniu go metodą chromatografii ssącej stosując gradient eluenta Et2O: heksanu (1:1) do Et2O; TLC, Rf = 0,47, MeOH: CHC13 (5:95).
Analiza elementarna dla wzoru:C24H3eF3N3O6: obliczono: C 55,27 H 7,34 N 8,06 znaleziono: C 54,74 H 5,93 N 7,88 c/ 3/RS/-/1 -etoksykarbonylo)cyklopent-1 -ylo)/karbonylo-L-cr-aminobutyrylo-N-/3-( 1,1,1trifluoro-4-metvlo-2-oksopentvlo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2, R3 = l-/CH3CH2OC(O)/cyklopent-l-yl, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIIć, produkt z przykładu LXXVIIIc utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem acetonu: heksanu (1:4) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 37%; HPLC, tR = 6,68 i 8,31, Col. A, H2O:CH3CN (70:30), FR = 2,0.
150 268
Analiza elementarna dla wzoru:C24H36F3N3O6l,lH2O: obliczono: C 53,44 H 7,13 N 7,80 znaleziono: C 53,48 H 6,97 N 7,60
Przykład LXXIX. Sposób wytwarzania 3/RS/-/l-(hydroksykarbonylo)cyklopent-l-ylo/karbonylo-L-a-aminobutyrylo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3CH2-, R3= l-/HOC(O)/cyklopent-l-yl, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XIV, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXXVIIIIc przekształcono w związek tytułowy, który wyodrębniono z wydajnością 79%; HPLC, tH = 3,74 i 4,92, Col. A, H2O: CH3CN (3:1), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C22H32F3N3O6’0,35H2O: obliczono: C 53,08 H 6,62 N 8,44 znaleziono: C 53,04 H 6,58 N 8,16
Przykład LXXX. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-metoksykarbonylofenylo/karbonylo-Lwalilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH3/CH2-, R3 = 4-/CH3OC(O)O, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania kwasu 4-metoksykarbonylobenzenokarboksylowego.
2,77,5 ml (5,2 mola) stężonego kwasu siarkowego wkraplano przez 0,5 godziny do mieszanego roztworu 299,25 g (2,99 mola) tlenku chromu (VI) i 925 ml wody w temperaturze 0°C. Otrzymany roztwór wkraplano przez godzinę do mieszanego roztworu 92,5 g (0,564 mola) 4-/hydroksymetylo/benzoesanu metylu i 4,61 acetonu w temperaturze 0°C. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez noc. Nadsącz zdekantowano, a czarną smołowatą pozostałość ekstrahowano acetonem. Zdekantowaną ciecz i ekstrakty ocetonowe połączono i zatężono pod próżnią otrzymując ciemnobrązową pozostałość, którą roztarto z zimną wodą (4:1). Zebrano utworzony osad, przemyto trzykrotnie wodą (11) i wysuszono otrzymując 94,6 g (94%) związku tytułowego w postaci białych kryształów o temperaturze topnienia 218-221°C.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/4-metoksykarbonylofenylo/karbonylo-L-walilo-N/3-(1,1, l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3 R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/CH3OC(O)/O, A = —/.
10,27 g (53,6 mmoli) WSCDI dodano do mieszanego roztworu 17,54 g (47,8 mmola) związku wytworzonego sposobem opisanym w przykładzie Illd, 8,6 g (47,8 mmoli) produktu z przykładu LXXXa, 12,86 g (95,3 mmoli) HOBT i 400 ml suchego THF w temperaturze 0°C w atmosferze azotu. Otrzymaną mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0°C przez godzinę, następnie pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez noc. THF usunięto pod próżnią otrzymując oleistą pozostałość, którą rozpuszczono w EtOAc. Roztwór octanowy przemyto IN HCl, nasyconym wodnym roztworem NaHCOe i solanką, wysuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 24,45 g surowego produktu w postaci białej piany. Po oczyszczeniu produktu przez szybką chromatografię z zastosowaniem CHCI3W : MeOH (97:3) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 79%; HPLC, tR = 4,62 i 5,80, Col. A, H2O: CH3CN (55:45), FR = 3,0.
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-metoksykarbonylofenylo/karbonylo-L-walilo-N-/3-( 1,1,1trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/CH3OC(O)/O, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIc, produkt z przykładu LXXXb utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem CHCI3: MeOH (98:2) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 69%; HPLC, tR = 4,51 i 6,82, Col. A, H2O: CH3CN (55:45), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C25H32F3N3OeO,5H2O: obliczono: C 55,96 H 6,19 N 7,83 znaleziono: C 55,90 H 6,30 N 7,93
150 268 d/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-metoksykarbonylofenylo/karbonylo-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = 4-/CH3OCO/O, A = —/.
Korzystny sposób utleniania opisany w D.B. Dess i J.C. Martin, J.Org.Chem., 48,4155-4156 (1983) do wytwarzania związku tytułowego jest następujący: Do mieszanego roztworu 6,76 g (15,96 mmoli) perjodinanu Dess-Martina i 6,49 g (12,25 mmola) produktu wytwarzanego sposobem opisanym w przykładzie LXXXb w 80 ml suchego CH2CI2 w atmosferze azotu dodano 1,82 g (1,23 ml, 15,96 mmoli) TFA. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze pokojowej, dodano 30 ml Et2O i mieszaninę wylano do nasyconego wodnego roztworu NaHCO3 i 17,63 g (111,51 mmoli) Na2S2O3. Po 15 minutach mieszania warstwę organiczną oddzielono, przemyto nasyconym roztworem NaHCO3 i solanką, wysuszono siarczanem sodu, przesączono i zatężono otrzymując związek tytułowy w postaci białej piany w ilości 6,42 g (99,4%); TLC, Rf = 0,67 i 0,76, MeOH : CHC13 (3:97); HPLC, tR = 4,64 i 6,84, Col. A, H2O: CH3CN (60:40), FR = 2,0.
Przykład LXXXI. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-hydroksykarbonylofenylo/aminokarbonylo-L-fenyloalanylo-N-/3-( 1,1,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = OCH2, R3 = 4-/HOC(O)/O.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XIV, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXXIVf przekształcono w związek tytułowy i wyodrębniono przez szybką chromatografię z gradientem MeOH: CH2C12 (4:96) do (10:90) z wydajnością 48%; HPLC, tR = 5,52 i 8,12, Col. A, CH3CN:H2O (35:65), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C28H3iF3N4O6’H2O: obliczono: C 56,56 H 5,59 N 9,42 znaleziono: C 56,58 H 5,59 N 9,22
Przykład LXXXII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-metoksykarbonylofenylo/metoksykarbonylo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/CH3OC(O)/OCH2-, A = -0/.
a/ Sposób wytwarzania węglanu (4-metoksykarbonylofenylo/metylo-4-nitrofenylu.
Postępując w sposób opisany w przykładzie VIIa lecz pomijając przemywanie przy pH7,0,
4-hydroksymetylobenzoesan metylu przekształcono w związek tytułowy, który wyodrębniano przez roztarcie z heksanem, przemycie mieszaniną heksanów: EtOAc (1:1) i wysuszenie pod próżnią. Związek tytułowy otrzymano z wydajnością 50%; TLC, Rf = 0,75, EtOAc: heksanu (1:1).
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/4-metoksykarbonylofenylo/-metoksykarbonylo-Lwalilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = 4-/CH3OC(O)/OCH2, A =-0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie VIIb, substancję otrzymaną sposobem opisanym w przykładzie Illd poddano reakcji z produktem z przykładu LXXXIIa otrzymując związek tytułowy, który wyodrębniono z wydajnością 48% po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z zastosowaniem acetonu: heksanów (2:3),TLC, Rf = 0,63 i 0,68, MeOH: CHC13 (1:9).
Analiza elementarna dla wzoru:C26H36F3N3O7: obliczono: C 55,81 H 6,48 N 7,51 znaleziono: C 55,54 H 6,39 N 7,29 c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-metoksykarbonylofenylo/metoksykarbonylo-L-walilo-N/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2/CH-, R3 = 4-/CH3OC(O)/OCH2, A = -0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIIc, produkt z przykładu LXXXIIb utleniono i po oczyszczeniu metodą preparatywnej TLC z zastosowaniem EtOAc: Et2O (3:2) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 10%; HPLC, tR = 4,32 i 6,44, H2O: CH3CN (1:1), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C26H34F3N3O7,0,65H2O: obliczono: C 54,86 H 6,25 N 7,38 znaleziono: C 54,87 H 6,25 N 7,05
Przykład LXXXIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/E-3-(4-etoksykarbonylofenylo)-l-oksoprop-2-enylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2//CH-, R3 = E-4-/CH3CH2O-C/O/ OCH=CH, A = —/.
150 268 a/ Sposób wytwarzania 4-formylobenzoesanu etylu.
Mieszaninę 25 g kwasu 4-formylobenzoesowego, 2 ml stężonego kwasu siarkowego i 19,5 ml EtOH ogrzewano łagodnie pod chłodnicą zwrotną przez 5 dni w 100 ml 1,2-dichloroetanu. Rozpuszczalnik odpędzono i do pozostałości dodano Et2O. Eterowy roztwór przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCO3, wysuszono siarczanem sodu, przesączono i odparowano. Po destylacji z parą wodną otrzymano 20,1 g (68%) tytułowego estru w postaci jasnej cieczy o temperaturze wrzenia 145-150°C (2900 Pa).
b/ Sposób wytwarzania kwasu E-/4-etoksykarbonylo/benzenoetenokarboksylowego.
Mieszaninę 8,9 g produktu z przykładu LXXXIIIa, 10,4 g kwasu malonowego i 1 ml piperydyny w 25 ml pirydyny ogrzewano na łaźni parowej przez 3 godziny. Po odparowaniu rozpuszczalnika pozostałość zawieszono w 200 ml wody, pH doprowadzono do wartości 6 za pomocą kwasu octowego. Osad zebrano i wysuszono na powietrzu. Po krystalizacji z etanolu otrzymano 10,1 g związku tytułowego (92%) w postaci błyszczących białych kryształów o temperaturze topnienia
220,5-221°C.
c/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/E-3-(4-etoksykarbonylofenylo)-l-oksoprop-2-enylo/L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = E-/4-CH3CH2O-C(O)/OCH = CH, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIa, produkt wytworzony sposobem opisanym w przykładzie Illd poddano reakcji z produktem z przykładu LXXXIIIb otrzymując związek tytułowy z wydajnością 88%; TLC, Rf = 0,14 i 0,18, MeOH :CH2Cl2 (5 :95).
d/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/E-3-(4-etoksykarbonylofenylo)-l-oksoprop-2-enylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = E-/4-CH3CH2OC(O)/OHC = CH, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXI, produkt z przykładu LXXXVIIc utleniono i po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z zastosowaniem MeOH: CH2CI2 (2:98) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 65%; TLC, Rf = 0,23, MeOH: CH2CI2 (5 :95).
Analiza elementarna dla wzoru:C28H36F3N3O6: obliczono: C 59,25 H 6,39 N 7,40 znaleziono: C 59,14 H 6,75 N 7,21
Przykład LXXXIV. Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-etoksykarbonylofenylo/aminokarbonylo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = 2-/CH3CH2OC(O)/O, R4 = H, A = NHCO, n = 1/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/2-etoksykarbonylofenylo/-aminokarbonylo-L-waliloN-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 2-/CH3CH2OC(O)/O, A = NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XVa, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie Illd poddano reakcji z 2-izocyjanianobenzoesanem etylu otrzymując związek tytułowy, który wyodrębniono z wydajnością 66% po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem EtOAc: heksanu (60:40);TLC, Rf = 0,48 i 0,57, MeOH: CH2CI3 (5:95).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-etoksykarbonylofenylo/aminokarbonylo-L-walilo-N-/3(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/ CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = 2-/CH3CH2OCO/O, A = NH/.
Przeprowadzono modyfikację sposobu opisanego w przykładzie LIVb stosując podane ilości produktu z przykładu LXXXIVa (1 równoważnik), 2 równoważniki chlorku szczawiowego, 4 równoważniki DMSO chłodząc mieszaninę reakcyjną do temperatury -45°C dla dodania tych składników i ogrzewając ją do temperatury -20° dla dodania TEA zamiast diizopropyloetyloaminy. Mieszaninę przemywano IN HCl, nasyconym wodnym roztworem NaHCOs, 10% wodnym roztworem NaOCl i solanką. Związek tytułowy otrzymano z wydajnością 74% po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem Et2O: heksanu (4:1); HPLC, tR = 6,95 i 10,46, Col. A, CH3CN: H2O (35 :65), FR = 2,0.
150 268
Analiza elementarna dla wzoru:C26H35F3N4O6‘0,75H2O: obliczono: C 54,78 H 6,45 N 9,83 znaleziono: C 54,73 H 6,34 N 9,51
Przykład LXXXV. Sposób wytwarzania 3/RS/-4-/(4-nitrofenylo)sulfonyloaminokarbonylo/fenylokarbonylo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/(4-NO2O)S (O2)NHCO/O, A = — /.
0,196 g (0,97 mmoli) 4-nitrobenzenosulfonamidu dodano do mieszanego roztworu 0,5 g (0,97 mmoli) produktu z przykładu LXXVII, 0,12 g (0,97 mmola) DMAP, 0,22 g (0,97 mmola) DCC i 30 ml suchego CH2C12 w atmosferze azotu w temperaturze pokojowej. Otrzymaną mieszaninę mieszano przez noc w temperaturze pokojowej i przesączono. Przesącz przemyto IN HCI, wysuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod próżnią do żółtej pozostałości, którą oczyszczano metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem CHCI3: MeOH: AcOH (90:9,8:0,2). Otrzymano 0,29 g (43%) związku tytułowego w postaci białego proszku; HPLC, tR = 4,26 i 8,42, Col. A, H2O: CH3CN (4:1), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C3oH34F3N509’H20: obliczono: C 50,34 H 5,06 N 9,78 znaleziono: C 50,03 H 4,92 N 9,43
Przykład LXXXVI. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-fenylometoksykarbonylo-L-glutamylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu w postaci estru fenylometylowego (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = -/CH2/2C(O)OCH2O, R3 = OCH2-, A = -0/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-fenylometoksykarbonylo/-L-glutamylo-N-/3-(l, 1,1trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH/3/CH3, R2 = /CH2/2C/O/OCH2O, R3 = OCH2-, A = -OCO-/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXXb, ester gamma-benzylowy kwasu CBZglutamowego poddano reakcji z produktem wytworzonym sposobem opisanym w przykładzie Ilb otrzymując związek tytułowy wyodrębniony z wydajnością 64% po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem gradientu eluenta heksanu: Et2O (1: 3) do Et2O; TLC, Rt = 0,61, Et2O.
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-fenylometoksykarbonylo-L-glutamylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu w postaci estru fenylometylowego (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH2/2C/O/OCH2O, R3 = OCH2-, A = 0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LIVb, produkt z przykładu LXXXVIa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z gradientem heksan: Et2O (2:8) do (1:9) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 30%; HPLC, tR = 6,12 i 8,48, Col. A, CH3CN: H2O (1:1), FR = 3,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C3iH36F3N3O7‘2H2O: obliczono: C 56,78 H 6,15 N 6,41 znaleziono: C 56,98 H 5,74 N 6,12
Przykład LXXXVII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-etoksykarbonylo-fenylo/aminokarbonylo-L-fenyloglicylo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = O, R3 = 4-/CH3CH2O-C(O)/O, A = -NH/.
a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/fenylometoksykarbonylo-L-fenyloglicylo-N-/3-( 1,1,1trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = 0, R3 = OCH2-, A = -O/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie La, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXXIVb poddano reakcji z CBZ-L-fenyloglicyną otrzymując po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z zastosowaniem MeOH: CH2C12 (5 :95) związek tytułowy z wydajnością 95%; TLC, Rf = 0,13 i 0,19, MeOH: CH2C12 (5:95).
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-L-fenyloglicylo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-2-hydroksy-4metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 4b, w którym R1 = CH/CH/3/CH3, R2 = O/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie Ilb, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXXXVIIa przekształcono w związek tytułowy z 100% wydajnością.
150 268 c/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/4-etoksykarbonylofenylo/-aminoksykarbonylo-Lfenyloglicylo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3,R2 = 0, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/O, A =-NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XVa, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXXXVIIb poddano reakcji z 4-izocyjanianobenzoesanem etylu otrzymując związek tytułowy z wydajnością 86%; TLC, Rf = 0,24 i 0,27, MeOH : Et2O (1:99).
d/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-etoksykarbonylofenylo/aminokarbonylo-L-fenyloglicyloN-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = O, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/O, A = -NH/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIc, produkt z przykładu LXXXVIIc utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z gradientem Et2O do CH3CN: Et2O (1:99) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 82%; HPLC, tR = 8,88 i 10,82, Col. A, CH3CN: H2O (45 :66), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C29H33F3N4O6,0,64H2O: obliczono: C 56,77 H 5,80 N 8,75 znaleziono: C 56,62 H 5,78 N 8,78
Przykład LXXXVIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/fenylometoksykarbonylo-L-/5-(fenylosulfonyloamino)glutamylo/-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = OS/O2/NHC/O/CH2/2, R3 = OCH2, A = -0/.
a/ Sposób wytwarzania 3/RS/-fenylometoksykarbonylo-L-glutamylo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 = HOCO/CH2/2, R3 = OCH2, A = -O/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XIV, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXXXVIb przekształcono w związek tytułowy; TLC, Rf = 0,27, MeOH: CHC13: AcOH (2,5:95:0,1).
b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-fenylometoksykarbonylo-L-/5-(fenylosulfonyloamino)glutamylo/-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = OS/O2NHC/O/CH2/2, R3 = OCH2-, A = -O/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXVb, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXXXVIIIa poddano reakcji z benzenosulfonamidem i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z gradientem MeOH: Et2O (2,5:97,5) do (5:95), otrzymano związek tytułowy z wydajnością 40%; HPLC, tR = 7,38 i 10,35, Col. A, H2O:CH3CN (65:35), FR = 2,5.
Analiza elementarna dla wzoru:C3oH35F3N40eST,5H20: obliczono: C 51,79 H 5,51 N 8,19 znaleziono: C 51,70 H 5,24 N 7,89
Przykład LXXXIX. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-(fenylosulfonyloaminokarbonylo)fenylokarbonylo/-L-walilo-N-/3-(1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = 4-/OS(O2)NH-C(O)/O, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXXV, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXXVII poddano reakcji z benzenosulfonamidem i po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z zastosowaniem EtOAc: Et2O: AcOH (25 :74,9:0,1) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 33%; HPLC, tR = 3,71 i 5,65, Col. A, H2O : CH3CN (3:1), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C3oH35F3N407ST,25H20: obliczono: C 53,36 H 5,59 N 8,29 znaleziono: C 53,75 H 5,64 N 7,72
Przykład XC. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-[(4-bromofenylo)sulfonyloaminokarbonylo]/fenylokarbonylo-L-walilo-N-/3-(l, 1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/- L-prolinamidu związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = 4-/(4-BrO)S(O2)NHC(O)/O, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania 4-bromobenzenosulfonamidu.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXVa, 10,0 g (39,6 mmoli) chlorku 4bromobenzenosulfonylu przekształcono w związek tytułowy, otrzymany w postaci kryształów w ilości 8,45 g (92%); temperatura topnienia 163-165°C.
150 268 b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-[(4-bromofenylo)sulfonyloamino-karbonylo]fenylokarbonylo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/(4-Br-O)S(O2/-NHC(O)/O, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXXV, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXXVII poddano reakcji z produktem z przykładu XCa i po oczyszczeniu przez krystalizację z mieszaniny heksanu i Et2O otrzymano związek tytułowy z wydajnością 50%; HPLC, tR = 5,25 i 7,84, Col. A, H2O: CH3CN (77,5 :22,5), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C3oH34BrF3N407SO,75H20: obliczono: C 48,36 H 4,80 N 7,52 znaleziono: C 48,61 H 4,89 N 7,18
Przykład XCI. Sposób wytwarzania 3/RS/-4-/l-naftylosulfonyloamino/-l,4-dioksobutylo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3= l-naftylo-S/O2/-NHC/O//CH2/2,
A = — /.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXXV, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie XIV poddano reakcji z 1-naftalenosulfonamidem i po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z zastosowaniem MeOH : CHC13 (5:95) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 46%; HPLC, tR = 4,09 i 6,57, Col. A, H2O: CH3CN (60:40), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C3oH37F3N407SO,5H20: obliczono: C 54,29 H 5,77 N 8,44 znaleziono: C 54,33 H 6,01 N 8,09
Przykład XCII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(4-aminokarbonylofenoksy)-l-oksoetylo/L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/H2NC(O)/OOCH2, A = — /.
a/ Sposób wytwarzania estru metylowego kwasu 4-aminokarbonylofenoksyoctowego.
Mieszaninę 3,43 g p-hydroksybenzamidu, 2,37 ml bromooctanu metylu i 3,45 g K2CO3 mieszano przez 12 godzin w 25 ml DMF. Mieszaninę rozcieńczono 150 ml wody, stałą substancję odsączono, przemyto wodą i wysuszono na powietrzu. Po krystalizacji z etanolu otrzymano 3,3 g (63%) związku tytułowego w postaci białych kryształów.
b/ Sposób wytwarzania kwasu 4-aminokarbonylofenoksyoctowego.
Mieszaninę 3,3 g produktu z przykładu XCIIa w 30 ml 0,5 N NaOH mieszano przez 3 godziny. Roztwór przesączono i przesącz zakwaszono do pH 1 za pomocą 1 N HCl. Stałą substancję odsączono i wysuszono na powietrzu otrzymując 3,0 g (97%) tytułowego kwasu w postaci białego proszku o temperaturze topnienia 255-256°C.
c/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/2-(4-aminokarbonylofenoksy)-l-oksoetylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = 4-/H2NC(O)/OOCH2, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIa, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie Vd poddano reakcji z substancją wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie XCIIb otrzymując związek tytułowy wyodrębniony z wydajnością 33%; TLC, Rt = 0,27 i 0,31, MeOH: CH2C12 (1:9).
d/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(4-aminokarbonylofenoksy)-l-oksoetylo/-L-walilo-N-/3(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/H2NC(O)/OOCH2, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XCIIc utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem MeOH: CH2C12 (4:96) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 35%; TLC, Rf = 0,37, MeOH: CHC13 (1:9).
Analiza elementarna dla wzoru:C25H33F3N4O6'l,5H2O: obliczono: C 52,72 H 6,37 N 9,83 znaleziono: C 52,78 H 6,03 N 9,65
Przykład XCIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-hydroksykarbonylofenylo/metoksykarbonylo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/HOC(O)/OCH2, A = O/.
150 268
Postępując w sposób opisany w przykładzie XIV, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXXXIIc przekształcono w związek tytułowy i wyodrębniono metodą preparatywnej TLC z zastosowaniem MeOH : CHCl3(15: 85) z wydajnością 45%; HPLC, tR = 2,27 i 3,02, Col. A, H2O: CH3CN (60:40), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C25H32F3N3O7‘2H2O: obliczono: C 51,81 H 6,26 N 7,25 znaleziono: C 51,75 H 5,63 N 7,15
Przykład XCIV. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-[4-(2-amino-2-oksoetylo)fenoksy]-l-oksobutylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-triiluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH, R3 = 4-/H2NC(O)CH2/-OO/CH2/3, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania estru etylowego kwasu 4-/4-aminokarbonylofenoksy/propanokarboksylowego.
Mieszaninę 3,8 g p-hydroksyfenyloacetamidu, 3,6 ml 4-bromomaślanu etylu i 3,45 g K2CO3 mieszano przez 12 godzin w 30 ml DMF. Mieszaninę rozcieńczono 100 ml wody, odsączono stałą substancję i wysuszono na powietrzu. Po krystalizacji z etanolu otrzymano 4g (60%) związku tytułowego w postaci białych kryształów o temperaturze topnienia 144,5-145,5°C.
b/ Sposób wytwarzania kwasu 4-/4-aminokarbonylofenoksy/propanokarboksylowego.
Mieszaninę produktu z przykładu XCIVa (3,97 g) w 20 ml IN NaOH mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Roztwór przesączono i zakwaszono 1 N HCl. Stałą substancję odsączono i wysuszono w wysokiej próżni otrzymując 3 g (82%) związku tytułowego w postaci białego proszku o temperaturze topnienia 162,5-164°C.
c/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/4-[4-(2-amino-2-oksoetylo)-fenoksy]-l-oksobutylo/L-walilo-N-/3-(1,1,1 -trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH/3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = 4-/H2NC(O)CH2/OO/CH2/3, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIa, substancję wytwarzaną sposobem opisanym w przykładzie Vd poddano reakcji z produktem z przykładu XCIVb otrzymując związek tytułowy wyodrębniony z wydajnością 71%; TLC, Rf = 0,28 i 0,31, MeOH: CHCI3 (1:9).
d/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-(2-amino-2-oksoetylo)fenoksy/-l-oksobutylo/-L-waliloN/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze lb, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/H2NC(O)CH2/OO/CH2/3, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XCIVc utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem MeOH: CH2CI2 (4:96), otrzymano związek tytułowy z wydajnością 32%; HPLC, tR = 2,ll i 3,01, Col. B, H2O: CH3CN: THF: TFA (55 :35:15 :0,1), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C28H39F3N4O6,5H2O: obliczono: C 56,65 H 6,79 N 9,43 znaleziono: C 56,83 H 6,98 N 9,24
Przykład XCV. Sposób wytwarzania 3/RS/-E-/3-(4-hydroksykarbonylofenylo)- 1-oksoprop-2-enylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = E-4-/HOC(O)/-OCH = CH-, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XIV, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXXXIIId przekształcono w związek tytułowy z wydajnością 88%; HPLC, tR = 2,6 i 3,4, Col. 3, H2O: CH3CN: THF: TFA (55:35:15:0,1), FR= 1,5.
Analiza elementarna dla wzoru:C26H32F3N3O6‘0,35H2O: obliczono: C 57,21 H 6,03 N 7,96 znaleziono: C 57,40 H 6,40 N 7,38
Przy kład XCVI. Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(4-etoksykarbonylofenoksy)-l-oksoetylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2/CH-, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/OOCH2, A = —/.
150 268 a/ Sposób wytwarzania 4-/2-okso-2-(fenylometoksy)etoksy/benzoesanu etylu.
Mieszaninę 4,98 g p-hydroksybenzoesanu etylu, 4,75 ml bromooctanu benzylu i 4,14 g K2CO3 mieszano przez 15 godzin w 30 ml DMF. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono 200 ml wody i ekstrahowano mieszaniną eteru i heksanu (1:1). Połączone ekstrakty organiczne przemyto wodą i solanką, wysuszono siarczanem sodu, przesączono i odparowano otrzymując 9,3 g związku tytułowego w postaci tłustego oleju; TLC, Rf = 0,71, Et2O: heksan (1:1).
b/ Sposób wytwarzania 4-/2-hydroksy-2-oksoetoksy/benzoesanu etylu.
Roztwór 2,0 g produktu z przykładu XCVIa w 50 ml EtOH uwodorniono pod ciśnieniem 70000 Pa wodoru stosując 200 mg 10% Pd/C. Po 20 min. reakcja była zakończona i mieszaninę reakcyjną przesączono przez wkładkę z Celite i zatężono pod próżnią. Pozostałość krystalizowano z mieszaniny eteru metylowo-t-butylowego i heksanu otrzymując 900 mg (63%) związku tytułowego w postaci drobnych białych igiełek o temperaturze topnienia 129-130°C.
c/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/2-(4-etoksykarbonylofenoksy)-l-oksoetylo/-L-waliloN-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/OOCH2, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIa, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie Vd poddano reakcji z produktem z przykładu XCVIb otrzymując związek tytułowy wyodrębniony z wydajnością 92%; TLC, Rf = 0,47 i 0,53, MeOH: CH2C12 (1:9).
d/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/2-(4-etoksykarbonylofenoksy)-l-oksoetylo/-L-walilo-N-/3(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/OOCH2, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXIc, produkt z przykładu XCVIc utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem MeOH: CH2C12 (2:98) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 41%; TLC, Rf = 0,37, MeOH: CHC13 (1:9).
Analiza elementarna dla wzoru:C27H36F3N3O7: obliczono: C 56,74 H 6,35 N 7,35 znaleziono: C 56,40 H 6,50 N 7,12
Przy kład XCVII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/3-(4-etoksykarbonylofenylo)-l-oksopropylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/0/CH2/2, A =
Sposób wytwarzania kwasu 4-etoksykarbonylobenzenoetanokarboksylowego.
Roztwór 4,9 g kwasu 4-karboetoksycynamonowego w 120 ml EtOH uwodorniono nad 485 mg 5% Rh/C pod ciśnieniem atmosferycznym przez 21 godzin. Roztwór przesączono i odpędzono. Pozostałość krystalizowano z cykloheksanu i otrzymano 2,23 g (46%) związku tytułowego w postaci białych kryształów o temperaturze topnienia 108,5-110,5°C.
b/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-(4-etoksykarbonylofenylo)l-oksopropylo/-L-waliloN-/3-(l,l,l-trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 =CH/CH3/CH3 R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)/O/CH2/2-, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XXXIIa, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie Vd poddano reakcji z produktem z przykładu XCVIIa otrzymując związek tytułowy wyodrębniony z wydajnością 83% po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem MeOH: CH2C12 (4:96),TLC, Rf = 0,33 i 0,38, MeOH: CH2C12 (5:95).
c/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/3-(4-etoksykarbonylofenylo)-l-oksopropylo/-L-walilo-N/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/CH3CH2OC(O)O/CH2/2, A = — /.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXXIVd, produkt z przykładu XCVIIb utleniono otrzymując związek tytułowy z wydajnością 97%.
Analiza elementarna dla wzoru:C2eH38F3N3O6'0,65H2O: obliczono: C 57,85 H 6,81 N 7,23 znaleziono: C 57,89 H 6,83 N 6,98
Przykład XCVIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-4-hydroksybenzoilo-L-walilo-N-/3-( 1,1,1trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/HO/O, A = —/.
150 268 a/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-4-hydroksybenzoilo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-2hydroksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/ CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/HO/O, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXXb, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie Vd poddano reakcji z kwasem 4-hydroksybenzoesowym otrzymując związek tytułowy, który wyodrębniono z wydajnością 65% po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem EtOAc: Et2O (15 : 85);TLC, Rf = 0,43, EtOAc: Et2O (15 :85).
Analiza elementarna dla wzoru:C23H32F3N3O5O,6H2O: obliczono: C 55,43 H6,71 N 8,43 znaleziono: C 55,76 H 6,62 N 8,03 b/ Sposób wytwarzania 3/RS/-4-hydroksybenzoilo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/OH/O, A = —/.
Produkt z przykładu XCVIIIa utleniono sposobem opisanym w przykładzie XXXIIIc zmodyfikowanym następująco: Surową pozostałość rozpuszczono w MeOH i mieszano z 5 ml K2CO3 w temperaturze pokojowej przez 16 godzin. Następnie mieszaninę rozdzielono i częściowo zatężono pod próżnią, zakwaszono stężonym HCl i ekstrahowano EtOAc. Roztwór octanowy przemyto solanką, wysuszono siarczanem sodu, przesączono i zatężono do pozostałości, którą oczyszczano przez szybką chromatografię stosując EtOAc: Et2O (1:9). Otrzymano związek tytułowy z wydajnością 38%; HPLC, tR = 3,54 i 4,92, Col. A, CH3CN: H2O (35 :65), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C23H3oF3N305‘l,2H20: obliczono: C 54,47 H 6,44 N 6,29 znaleziono: C 54,83 H 6,49 N 7,89
Przykład XCIX. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-[(4-chlorofenylo)-sulfonyloaminokarbonylojfenylokarbonylo/ -L-walilo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH, R3 = 4-/(4-00) S(O2)NHC/O-, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXVb, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie LXXVII poddano reakcji z 4-chlorobenzenosulfonamidem i po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z zastosowaniem MeOH: CH2C12 (3:97) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 66%; HPLC, tR = 4,26 i 6,07, Col. A, H2O: CH3CN: THF: TFA (55:35:15:0,1).
Analiza elementarna dla wzoru:C3oH34ClF3N407SO,9H20: obliczono: C 51,23 H 5,13 N 7,60 znaleziono: C 51,23 H5,ll N 7,96
Przykład C. Sposób wytwarzania 3/RS/-/3-(4-hydroksykarbonylofenylo)-l-oksopropylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = 4-/HOC(O)/O/CH2/2, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie XIV, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie XCVIIc przekształcono w związek tytułowy z wydajnością 81%; HPLC, tR = 2,6 i 3,4, Col. B, H2O: CH3CN: THF: TFA (55 :35:15:0,1).
Analiza elementarna dla wzoru:C26H34F3N3C>6: obliczono: C 57,66 H 6,33 N 7,76 znaleziono: C 56,98 H 6,49 N 7,35
Przykład CI. Sposób wytwarzania 3/RS/-/3-(4-[(4-chlorofenylo)sulfonyloaminokarbonylo]fenylo)-1 -oksopropylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/(4C10)S(02)NHC(0)/0-/CH2/2, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXVb, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie C poddano reakcji z 4-chlorobenzenosulfonamidem i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem MeOH: CH2C12 (5:95) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 90%;HPLC, tR = 3,96 i 5,73, Col. B, H2O: CH3CN: THF: TFA (55:35:15 : 0,1), FR = 3,0.
150 268
Analiza elementarna dla wzoru:C32H3eClF3N4O7S,l,7H2O: obliczono: C 51,53 H 5,59 N 7,51 znaleziono: C 51,72 H 5,40 N 7,24
Przykład CII. Sposób wytwarzania 3/RS/-E-/3-(4-[(4-chlorofenylo)sulfonyloaminokarbonylojfenylo)- l-oksoprop-2-enylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = E-/4-[(4C1O)S(O2)NHC(O)]/O-CH-CH-, A = —/.
Postępując w sposób opisany w przykładzie LXXVb, substancję wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie C poddano reakcji z 4-chlorobenzenosulfonamidem i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem MeOH: CH2CI2 (5:95), otrzymano związek tytułowy z wydajnością 97%; HPLC, tR = 4,73 i 6,68, Col. B, H2O: CH3CN: THF: TFA (55:35:15:0,1),FR = 3,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C32H36ClF3N4O7S*l,7H2O: obliczono: C 51,67 H 5,33 N 7,53 znaleziono: C 51,72 H 5,40 N 7,24
Przykład CIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/l-[4-/[(4-bromofenylo)sulfonylo][fenylometylojaminokarbonylo/fenylo]-1 -oksometylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-(4-BrO)S(O2)N(CH2O)C(O)/O-, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania 4-bromo-N-/fenylometylo/benzosulfonamidu.
14,05 g (55 mmoli) chlorku 4-bromobenzenosulfonylu dodano do mieszanego roztworu 5,36 g (50 mmoli) benzyloaminy i 400 ml pirydyny w atmosferze azotu w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez godzinę, a następnie wylano do 800 ml mieszaniny wody z lodem. Utworzył się żółty osad, który odsączono i krystalizowano z mieszaniny etanolu i wody otrzymując 9,44 g (53%) związku tytułowego w postaci białawych igiełek o temperaturze topnienia 116-117°C.
Analiza elementarna dla wzoru:Ci3Hi2BrNO2S: obliczono: C 47,87 H 3,71 N 4,29 znaleziono: C 48,02 H 3,78 N 4,25 b/ Sposób wytwarzania 4-/[(4-bromofenylo)sulfonylo][fenylometylo]aminokarbonylo/benzoesanu 1,1-dimetyloetylu.
1,81 g (14,84mmoli) DMAP dodano do mieszanego roztworu 4,4g (13,49mmoli) produktu z przykładu Cliła i 150 ml CH2CI2 w temperaturze pokojowej. Do otrzymanego roztworu dodano 2,84 g (14,84 mmoli) WSCDI, a następnie 3,0 g (13,49 mmoli) monoestru t-butylowego kwasu tereftalowego. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc i zatężono pod próżnią do pozostałości, którą rozpuszczono w EtOAc. Roztwór octanowy przemyto 20% wodnym roztworem kwasu cytrynowego, solanką i wodą, wysuszono siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując oleistą pozostałość. Pozostałość rozpuszczono w ciepłym etanolu i pozostawiono do ochłodzenia. Utworzone białe kryształy odsączono, przemyto zimnym etanolem i wysuszono w wysokiej próżni otrzymując 5,72 g (80%) związku tytułowego w postaci białych kryształów o temperaturze topnienia 120-122°C.
Analiza elementarna dla wzoru:C25H24BrNOsS: obliczono: C 56,61 H 4,56 N 2,64 znaleziono: C 56,84 H 4,68 N 2,60 c/ Sposób wytwarzania kwasu 4-/[(4-bromofenylo)sulfonylo][fenylometylo]aminokarbonylo/benzoesowego.
5,30 g (10 mmoli) produktu z przykładu CHIb dodano do 50 ml TFA w temperaturze 0°C i rozpuszczono bezpośrednio po dodaniu. Po około 10 minutach utworzył się biały osad; mieszaninę mieszano przez 0,5 godziny, a następnie przesączono. Zebraną stałą substancję przemyto wodą i krystalizowano z gorącego absolutnego etanolu otrzymując 4,0 g (84%) związku tytułowego w postaci białego proszku o temperaturze topnienia 193-194°C.
d/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/l-[4-/[(4-bromofenylo)sulfonylo][fenylometylo]aminokarbonylo/fenylo]-1 -oksometylo/-L-walilo-N-/3-(1,1,1 -trifluoro-2-hydroksy-4-metylopentylo)/L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3CH3, R3 = 4/[(4-BrO)S(O)2)/-/OCH2/NCO/O, A = —/.
150 268
0,44 g (2,3 mmola) WSCDI dodano do mieszanego roztworu produktu z przykładu CIIIc (1,0 g, 2,1 mmola), 0,85 g (2,3 mmola) substancji wytworzonej sposobem opisanym w przykładzie Vd, 0,28 g (2,1 mmola) HOBT i suchego THF w atmosferze azotu w temperaturze 0°C. Otrzymaną mieszaninę reakcyjną w temperaturze 0°C mieszano przez 15 minut, a następnie pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez 4 godziny. THF usunięto pod próżnią otrzymując brązowawą pozostałość, którą rozpuszczono w EtOAc. Roztwór octanowy przemyto IN HCI, nasyconym roztworem NaHCOe i solanką i wysuszono siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując 1,6 g pozostałości. Porcję 1,27 g tej pozostałości krystalizowano z mieszaniny eteru metylowo-t-butylowego i otrzymano 0,64 g (49% całkowitej wydajności) związku tytułowego w postaci białego proszku; TLC, Rf = 0,59 i 0,64, CHCU: CH3OH (95:5); HPLC, tR = 14,34 i 15,26, Col. B, H2O: CH3CN: THF: TFA (55:35:15:0,1), FR = 3,0.
e/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/l-[4-/bromofenylo)sulfonylo]-[fenylometylo]aminokarbonylo/fenylo]-1 -oksometylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/- L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CHs/2CH-, R3 = 4-/((4BrO)S(O2)]N(CH2O)C(O)/O, A = —/.
Roztwór 300 mg (0,364 mmola) produktu z przykładu CHId w 2 ml CH2C12 dodano do mieszanej mieszaniny l,54g (3,63mmoli) perjodinanu Dess-Martina i 10ml suchego CH2C12 w atmosferze azotu w temperaturze pokojowej. Do otrzymanej mieszaniny dodano 0,41 g (3,63 mmole) TFA, po czym mieszanina bezpośrednio stała się klarowna, a następnie po 10 minutach zmętniała. Mieszanie kontynuowano przez noc i dodano 50 ml EtOAąpo czym mieszaninę reakcyjną wylano do nasyconego wodnego roztworu NaHCC>3 (100 ml) zawierającego 4g Na2S2O3. Dwufazową mieszaninę mieszano energicznie przez 10 minut. Warstwę organiczną oddzielono, przemyto nasyconym roztworem NaHCO3 (100 ml), solanką 100 ml, wysuszono siarczanem magnezu, przesączono, zatężono pod próżnią i wysuszono w wysokiej próżni otrzymując 0,24 g (80%) związku tytułowego w postaci białego proszku; TLC, Rf = 0,62 i 0,75, CHCI3: MeOH (95:5); HPLC, tR = 14,88 i 21,56, Col. B, H2O: CH3CN: THF: TFA (55:35:15:0,1), FR = 3,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C37H4oBrF3N40?SO,25H20: obliczono: C 53,78 H 4,94 N 6,78 znaleziono: C 53,84 H 4,98 N 6,45
Przykład CIV. Sposób wytwarzania 3S/lub R/-/4-(fenylosulfonyloaminokarbonylo)fenyloaminokarbonylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/- L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = 4-/OS(O2) NHC(O)/O, A = -NH/.
Dwa diastereomery z przykładu LVIII rozdzielono przez MPLC na kolumnie LiChroprep RP-8 /Merck, size B 40-63 μτη/ stosującMeOH: H2O (50:50) jako eluent. Zebrane frakcje poddano analizie metodą HPLC i odpowiednie frakcje połączono i liofilizowano otrzymując związek tytułowy; HPLC, tR = 4,5, Col. B, H2O: CH3CN: THF: TFA (55:35:15:0,1), FR = 2,0.
Przykład CV. Sposób wytwarzania 3S/lub R/-/-fenylometoksykarbonylo-L-fenyloglicylo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = O, R3 = OCH2-, A = -O/.
Postępując w sposób opisany w przykładzieLXIc, produkt wytworzony sposobem opisanym w przykładzie LXXXVIIa utleniono i po oczyszczeniu metodą szybkiej chromatografii z zastosowaniem MeOH: CH2C12 (1,5 :98,5) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 80% jako jeden zasadniczo czysty izomer; TLC, Rf = 0,26, pentan: MeOH: Et2O (25:1:99).
Analiza elementarna dla wzoru:C27H3oF3N30s: obliczono: C 60,78 H 5,67 N 7,88 znaleziono: C 60,64 H 5,85 N 7,96
Przykład CVI. Sposób wytwarzania 3R/lub S/-fenylometoksykarbonylo-L-fenyloglicyloN-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = O, R3 = OCH2-, A = -0/.
Po szybkiej chromatografii równowagowej opisanej w przykładzie CV otrzymano związek tytułowy z wydajnością 83% jako jeden zasadniczo czysty izomer; TLC, Rf = 0,30, pentan: MeOH : Et2O (25:1:99).
150 268
Analiza elementarna dla wzoru:C27H30F3N3O5: obliczono: C 60,78 H 5,67 N 7,88 znaleziono: C 59,43 H 5,65 N 7,48
Przykład CVII. Sposób wytwarzania 3R/lub S/-/4-[(4-bromofenylo)sulfonyloaminokarbonylo]fenylokarbonylo/ -L-walilo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/- L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/4-(BrO)S(O2)NHC(O)/O, A = —/.
Produkt z przykładu XCb (0,5 g, 0,7 mmola) poddano chromatografii metodą MPLC na kolumnie LiChroprep RP-8 (Merck, size B 40-63 μπι) stosując MeOH : H2O (60:40) jako eluent. Zebrane frakcje poddano analizie metodą HPLC, połączono i liofilizowano otrzymując dwa produkty. Otrzymano 0,147g związku tytułowego jako zasadniczo czysty izomer; HPLC, tR = 12,38, Col. B, H2O : CH3CN: THF: TFA (55:35:15:0,1), FR = 3,0.
Przykład CVIII. Sposób wytwarzania 2S/lub R/-/4-[(4-bromofenylo)sulfonyloaminokarbonylo]fenylokarbonylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/- L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = 4-/(4-BrO)S (O2)NHC(O)/O, A = —/.
Innym produktem otrzymanym przy rozdzielaniu opisanym w przykładzie CVII był związek tytułowy (0,065 g) otrzymany jako zasadniczo czysty izomer; HPLC, tR = 8,44, Col. B, H2O: CH3CN : THF: TFA (55 :35:15:0,1), FR = 3,0.
Przykład CIX. Sposób wytwarzania 3S/lub R/-/4-[(4-chlorofenylo)sulfonyloaminokarbonylo]fenylokarbonylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 =/CH3/2CH-, R3 = 4-/(4-ClO)S (O2)NHC(O)/O, A = —/.
544.8 mg Substancji wytworzonej sposobem opisanym w przykładzie XCIX rozpuszczono w mieszaninie H2O: CH3CN: THF (2,2 ml: 3,3 ml: 0,5 ml) i rozdzielono przez MPLC na kolumnie Lobar size B LiChroprep RP-8 stosując H2O: CH3CN: THF: TFA (55 :32,5 :12,5:0,1). Po analizie HPLC odpowiednie frakcje połączono, zatężono pod próżnią i wysuszono w wysokiej próżni w temperaturze 43°C. Otrzymano 255 mg związku tytułowego w postaci bezpostaciowej stałej substancji; HPLC, tR = 5,76, Col. B, H2O: CH3CN: THF: TFA (55:32,5 :12,5 :0,1), FR = 3,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C3oH34ClF3N407ST,3H20: obliczono: C 50,71 H 5,19 N 7,89 znaleziono: C 50,88 H 4,87 N 7,70
Przykład CX. Sposób wytwarzania 3R/lub S/-/4-[(4-chlorofenylo)sulfonyloaminokarbonylo]fenylo/karbonylo-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/- L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = /CH3/2CH-, R3 = 4-/(4-C10)S (O2)NHC(O)/O, A = —/.
573.8 mg produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie XCIX rozpuszczono w mieszaninie H2O: THF (2 ml: 3 ml) i rozdzielono przez MPLC na kolumnie Lobar size B LiChroprep RP-8 stosując THF: H2O: TFA (41:59:0,1) jako eluent. Po analizie metodą HPLC, odpowiednie frakcje połączono i liofilizowano otrzymując 51,8 mg związku tytułowego zasadniczo czystego izomeru (99:1 przez HPLC); HPLC, tR = 8,8, Col. B, H2O: CH3CN: THF :TFA (55:32,5:12,5:0,1), FR = 3,0.
Przykład CXI. Sposób wytwarzania 3S/lub S/-/fenylometoksykarbonylo-L-walilo-N-/3(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2, A = -0/.
g (0,02 mola) produktu wytworzonego sposobem opisanym w przykładzie XI rozdzielono na pojedyńcze zasadniczo czyste izomery przez szybką chromatografię stosując 1 kg żelu krzemionkowego, Et2O: heksanu (80:20). Z połączenia odpowiednich frakcji otrzymano 3,17 g związku tytułowego jako zasadniczo czysty izomer; HPLC, tR = 5,65, Col. A, H2O:CH3CN (55:45), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C23H32F3N3O5'H2O: obliczono: C 55,47 H 6,46 N 8,08 znaleziono: C 55,50 H 6,77 N 7,99
150 268
Przykład CXII. Sposób wytwarzania 3R/lub S/-fenylometoksykarbonylo-L-walilo-N-/3(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH /CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2, A = 0/.
Z rozdzielenia opisanego w przykładzie CXI, po połączeniu odpowiednich frakcji otrzymano
3,67 g związku tytułowego jako jeden zasadniczo czysty izomer.
Analiza elementarna dla wzoru:C24H32F3N3O5: obliczono: C 57,71 H 6,46 N 8,41 znaleziono: C 57,61 H 6,34 N 7,96
Przykład CXIII. Sposób wytwarzania 3S/lub R/-/(4-karboksyfenylo)aminokarbonylo/L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = 4-/HOOC/O, A = -NH/.
500 mg produktu otrzymanego sposobem opisanym w przykładzie XVI rozdzielono metodą MPLC stosując kolumnę Lobar size B LiChroprep RP-8 i MeOH: H2O jako eluent. Po analizie przez HPLC i połączeniu odpowiednich frakcji otrzymano 150 mg związku tytułowego jako zasadniczo czysty izomer; HPLC, tR = 6,58, Col. A, CH3CN: H2O (25:75), FR — 2,0.
Przykład CXIV. Sposób wytwarzania 3R/lub S/-/(4-karboksyfenylo)aminokarbonylo/L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = 4-/HOOC/O, A = -NH/.
Przez połączenie odpowiednich frakcji z rozdzielania przeprowadzonego sposobem opisanym w przykładzie CXIII otrzymano 220 mg związku tytułowego jako wzbogacony izomer w stosunku 90,4:9,5 z izomerem opisanym w przykładzie CXIII; HPLC, tR= 11,09, Col. A, CH3CN :H2O (25:75), FR = 2,0.
Przykład CXV. Sposób wytwarzania 3RS/-/4-[(4-chlorofenylo)sulfonyloaminokarbonylo]/fenylokarbonylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = 4-/(4-C10)S (O2)NHCO/O, A,= —/.
Korzystny sposób konwersji produktu wytworzonego sposobem opisanym w przykładzie Vd w związek tytułowy jest następujący:
a/ Sposób wytwarzania 4-/(4-chlorofenylo)sulfonyloaminokarbonylo/benzoesanu 1,1-dimetyloetylu.
Pięciolitrową okrągłodenną kolbę trójszyjną wyposażono w mechaniczne mieszadło i wlot azotu. 2 litry CH2C12 umieszczono w kolbie i kolejno dodawano 127,5 g (0,574 mola) mono-estru-tbutylowego kwasu tereftalowego, 70,06 g (0,574 mola) DMAP i 110,04 g (0,574 mola) 4-chlorobenzenosulfonamidu stosując 400 ml CH2C12 do przemywania substancji stałych. Przez 10 minut dodawano porcjami 110,10 g (0,574 mola) CH2C12 stosując do przemywania 100 ml CH2C12. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze pokojowej i zatężono pod próżnią do sucha. Pozostałość rozdzielono między EtOAc i wodę. Roztwór octanowy przemyto 20% wodnym roztworem kwasu cytrynowego, nasyconym roztworem NaHCO3, solanką, wysuszono siarczanem sodu i zatężono pod próżnią do białej substancji. Po wysuszeniu w piecu próżniowym w temperaturze 50°C otrzymano 227 g (100%) w zasadniczo czystym stanie związku tytułowego, do bezpośredniego stosowania w następnym etapie; TLC, Rf = 0,43, MeOH: CHC13 (15 :85). Dalsze oczyszczanie było możliwe przez krystalizację z mieszaniny EtOH: H2O; temperatura topnienia powyżej 300°C/.
b/ Sposób wytwarzania kwasu 4-/(4-chlorofenylo)sulfonyloaminokarbonylo/benzenokarbóksylowego.
Trzylitrową okrągłodenną kolbę trójszyjną wyposażono w mieszadło mechaniczne i rurkę suszącą z CaCl2. Dodano 1300 g TFA i ochłodzono do 0°, a następnie dodano 79,5 g (0,20 mola) produktu z przykładu XXXIa. Początkowo substancja stała rozpuściła się dając klarowny roztwór a po 10-15 minutach utworzył się obfity osad, który utrudnił mieszanie mieszaniny reakcyjnej. Energiczne mieszanie za pomocą mechanicznego mieszadła doprowadziło do zakończenia reakcji. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0-5° przez godzinę, a następnie wylano ją do 1500 ml wody i lodu i mieszano przez 2 godziny. Odsączono stałą substancję i wysuszono. Otrzymano 61,5 g (91 %) białej substancji, którą krystalizowano z 1600 ml (absolutnego etanolu) 1600 ml H2O. Otrzymano 54 g (80%) związku tytułowego w postaci białych igiełek o temperaturze topnienia 286-288°C; TLC, Rf = 0,7, MeOH: CHC13: AcOH (10:90:1).
150 268 c/ Sposób wytwarzania 2/RS/,3/SR/-/4-[(4-chlorofenylo)sulfonyloaminokarbonylo]/fenylokarbonylo/-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-2-hy droksy-4-metylopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze 7b, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R — 4-/(4ClO)S(O2) NHCO/O, A = —/.
250 ml Okrągłodenną kolbę trójszyjną wyposażono w mieszadło magnetyczne i wlot azotu. Do 125 ml CH2CI2 umieszczonego w kolbie dodano 5,45 g (16,07 mmoli) produktu z przykładu CXVb, 1,96 g (16,07 mmoli) DMAP i 6,20 g (16,87 mmoli) produktu wytworzonego sposobem opisanym w przykładzie Vd stosując 20 ml CH2CI2 do przemywania substancji stałych. Następnie dodano 3,24 g (16,87 mmoli) WSCDI stosując 5 ml CH2CI2 do przemywania substancji stałych. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 5 godzin, przemyto IN HCl, nasyconym wodnym roztworem NaHCOs, solanką, wysuszono siarczanem sodu i zatężono pod próżnią otrzymując 11,0 g (100%) surowego produktu w postaci białej stałej substancji. 3,39 g Surowego produktu rozpuszczono w 40 ml MeOH i rozcieńczono 9 ml wody. Otrzymany roztwór nasycono K2CO3 i mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Po usunięciu większości MeOH pod próżnią, pozostałość rozdzielono między EtOAc i wodę. Roztwór octanowy przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCO3 i solanką, wysuszono siarczanem sodu i zatężono otrzymując zasadniczo czysty związek tytułowy (3,133 g, 92%); TLC, R, = 0,38 i 0,46, MeOH: CHC13: AcOH (5:95:1); HPLC, tR = 6,20 i 6,25, Col. A,H2O: CHaCN: THF: TFA (55:35:15:0,1), FR = 3,0.
d/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-[(4-chlorofenylo)sulfonyloamino-karbonylo]fenylokarbonylo/-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-proiinamidu (związek o wzorze lb, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = 4-/(4-ClO)S(O2)-NHCO/O, A = —/.
Do mieszanego roztworu 636 g (1,50 mola) perjodinanu Dess-Martina w 51 CH2CI2 dodano produkt wytworzony sposobem opisanym w przykładzie CXVc (351 g, 0,50 mola) w 500 ml THF i uzyskaną mieszaninę rozcieńczono 21CH2CI2, a następnie dodano 171 g (1,50 mola) TFA. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze pokojowej, CH2CI2 usunięto pod próżnią, pozostałość rozcieńczono EtOAc i traktowano mieszaniną nasyconego wodnego roztworu NaHCO3 i nasyconego wodnego roztworu Na2S2O3 (1:1). Po zupełnym rozpuszczeniu stałej substancji, warstwę wodną oddzielono i warstwę octanową przemyto mieszaniną nasyconego wodnego roztworu NaHCCh: nasyconego wodnego roztworu Na2SO4 (1:1),nasyconym wodnym roztworem NaHCCh, solanką, wysuszono siarczanem sodu i zatężono pod próżnią. Pozostałość rozpuszczono w 1,51 MeOH i traktowano 1,51 IN HCl i metanol usunięto pod próżnią. Pozostałą wodną zawiesinę ekstrahowano CH2CI2 i połączone ekstrakty CH2CI2 przemyto solanką, wysuszono siarczanem sodu i zatężono pod próżnią. Po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z gradientem Et2O do Et2O: MeOH (95 :5) otrzymano związek tytułowy z wydajnością 37%; HPLC, tR = 6,68 i 9,27, Col. B, H2O: CH3CN: THF: TFA (55:35:15:0,1), FR = 2,0.
Przykład CXVI. Sposób wytwarzania 3/RS/-N2,N6-di/fenylometoksykarbonylo/-L-lizylo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lc, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = OCH2, R4 = OCH2OCONH/CH2/4, A = -0/.
Postępując w sposób opisany w przykładzieLIVb, produkt z przykładu XXVIIIa utleniono i po oczyszczeniu przez szybką chromatografię z zastosowaniem heksanu :Εί2Ο (1:1), następnie Et2O, następnie Et2O : EtOAc (3:1), otrzymano związek tytułowy z wydajnością 56%; HPLC, tR = 4,19 i 6,02, Col. A, CH3CN: H2O (60:40), FR= 1,5.
Analiza elementarna dla wzoru:C38H5oF3N508-0,5H20: obliczono: C 59,21 H 6,67 N 9,03 znaleziono: C 58,93 H 6,62 N 8,75
Przykład CXVII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/l,4-diokso-4-(fenylosulfonyloamino)butylo/-L-leucylo-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lc, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = OS/O2/NHCO/CH2/2, R4 = /CH2/3CH3, A = —/.
Roztwór 0,5 g (0,87 mmola) produktu z przykładu XXIV, 0,14 g (0,87 mmola) benzenosulfonamidu, 0,11 g (0,87 mmola) DMAP i 0,18 g (0,87 mmola) DCC w 20 ml CH2CI2 mieszano przez dwa dni w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną przesączono i zatężono pod próżnią
150 268 otrzymując surowy produkt. Produkt oczyszczano przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym Baker pH 5 z gradientem CHCI3 do MeOH: CH2C13 (2:98) otrzymując 0,37 g związku tytułowego; HPLC, tR = 3,84 i 5,03, Col. A, H2O: CH3CN (65 : 35), FR = 1,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C32H46F3N5O8S: obliczono: C 52,23 H 6,57 N 9,52 znaleziono: C 51,94 H 6,29 N 9,37
Przykład CXVIII. Sposób wytwarzania 3/RS/-/4-(metylosulfonyloamino)-l,4-dioksobutylo/-L-leucylo-L-walilo-N-/3-(l,l,l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lc, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = CH3S/O2/NH CO/CH2/2, R4 = /CH2/3CH2, A = — /.
Roztwór 0,5 g (0,87 mmola) produktu z przykładu XXIV, 0,082 g (0,87 mmola) metanosulfonamidu, 0,11 g (0,87 mmola) DMAP i 0,18 g (0,87 mmola) DCC w 20 ml CH2C12 mieszano przez 4 dni w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną przesączono i zatężono pod próżnią otrzymując surowy produkt, który częściowo oczyszczono przez szybką chromatografię na żelu krzemionkowym Baker pH 5,5 z gradientem CHC13, MeOH: CHC13 (1:99) do (2,5 :97,5). Częściowo oczyszczony produkt rozdzielono między EtOAc i mieszaninę wodną IN HCl i solanki. Fazę organiczną wysuszono siarczanem sodu, przesączono i zatężono otrzymując 0,28 g związku tytułowego; HPLC, tR = 5,99 i 8,95, Col. A, H2O: CH3CN (65 :35), FR = 1,0.
Analiza elementarna dla wzoru: C27H44F3N5O8S: obliczono: C 49,46 H 6,76 N 10,68 znaleziono: C 49,07 H 6,79 N 10,43
Przykład CXIX. Sposób wytwarzania 3/RS/-N2-/l,4-diokso-4-(fenylosulfonyloamino) butylo/-N6-fenoksymetoksykarbonylo-L-lizylo-L-walilo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu /związek o wzorze lc, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 = CH/ CH3/CH3, r3 = os/o2/nhco/ch2/2, R4 = OCH2OCO-NH/CH2/4, A=—/.
Roztwór 493 mg (0,670 mmola) produktu z przykładu XXVII, 117 mg (0,745 mmola) benzenosulfonamidu, 91 mg (0,745 mmola) DMAP i 153 mg (0,745 mmola) DCC w 20 ml CH2C12 mieszano w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Roztwór rozcieńczono EtOAc, przemyto wodą, wysuszono siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod próżnią. Surowy produkt oczyszczano przez chromatografię na żelu krzemionkowym Baker pH 5,5 z zastosowaniem CH3OH: CHCI3 (2,5 :97,5) otrzymując 243 mg związku tytułowego w postaci białego proszku; TLC, Rf = 0,50, CH3OH: CHC13: AcOH(5 :94:1).
Analiza elementarna dla wzoru:C4oH53F3N60ioS,0,75H20: obliczono: C 54,56 H 6,24 N 9,54 znaleziono: C 54,52 H 6,23 N 9,48
Przykład CXX. Sposób wytwarzania 3/RS-l/l,4-diokso-4-[/tricyklo[3.3.1.13’7]-dec-lylo/ ulfonyloamini]butylo/-L-leucylo-L-walilo-N-/3-( 1,1,1 -trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lc, w którym R1 = CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = /ladamantylo/-S/O2/NHCO/CH2/2, R4 =/CH2/3CH3, A = —/.
a/ Sposób wytwarzania chlorku 1-adamantanosulfmylu.
g (3 mole) Trichlorku glinu dodawano powoli do 200 ml (2,7 mola) chlorku tionylu i mieszaninę chłodzono do temperatury -20°C. Przez 2,5 godziny dodawano adamantan porcjami i otrzymaną mieszaninę mieszano przez godzinę i pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej. Po usunięciu chlorku tionylu pod próżnią, pozostałość rozcieńczono CC14 i rozłożono trichlorek glinu za pomocą lodu i wody. Warstwy rozdzielono i warstwę organiczną przemyto solanką, wysuszono siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod próżnią. Pozostałość przedestylowano pod próżnią (133,3 Pa) otrzymując 28,8 g produktu o temperaturze wrzenia 118-128°C w postaci woskowatej substancji; TLC, Rf = 0,6-0,4, EtOAc: heksan (15 :85).
b/Sposób wytwarzania 1-adamantylosulfinamidu.
Do 10,0 g (45,7 mmola) produktu z przykładu LXXXIIa powoli dodawano 300 ml stężonego wodorotlenku amonu i mieszaninę ogrzewano do wrzenia przez godzinę. Po oddestylowaniu wodorotlenku amonu pozostałość umieszczono w wodzie i ekstrahowano Et2O. Warstwę eterową przemyto solanką, wysuszono siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod próżnią. Surowy
150 268 produkt oczyszczano przez ssącą chromatografię na żelu krzemionkowym (Et2O do EtOAc) otrzymując 4,2 g produktu w postaci białej stałej substancji o temperaturze topnienia 139-141°C(w literaturze 141-142°C).
c/ Sposób wytwarzania 1-adamantylosulfonamidu.
Do 4,0 g (20,0 mmoli) produktu z przykładu CXXa w 150 ml acetonu w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną dodano nasycony acetonowy roztwór KMnO4 aż do utrzymywania się blado fioletowego zabarwienia. Roztwór ochłodzono, przesączono przez Celite i zatężono pod próżnią otrzymując 3,2 g stałego produktu o temperaturze topnienia 191-193°C (literatura 197-198°C); TLC, R = 0,80, EtOAc.
d/ Sposób wytwarzania 3/RS/-/l,4-diokso-4-[/tricyklo-[3.3.1.13,7]-dec-l-ylo/sulfonyloamino]butylo/-L-leucylo-L-walilo-N-/3-( 1,1, l-trifluoro-4-metylo-2-oksopentylo)/-L-prolinamidu (związek o wzorze lc, w którym R1 =CH/CH3/CH3, R2 = CH/CH3/CH3, R3 = /l-adamantylo/S/O2/NHCO/CH2/2, R4 = /CH2/3., A = —/.
Roztwór 300 mg (0,51 mmola) produktu z przykładu XXIV, 62 mg (0,51 mmola) DMAP, 99 mg (0,51 mmola) WSCDI i 110 mg (0,51 mmola) produktu z przykładu CXXc w 30 ml CH2C12 mieszano w temperaturze pokojowej przez 16 godzin. Roztwór CH2C12 przemyto IN HCl i solanką, wysuszono siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod próżnią. Surowy produkt oczyszczano przez preparatywną TLC z zastosowaniem MeOH: CHCI3 (1:9) otrzymując związek tytułowy w postaci stałej; TLC, Rf = 0,56, MeOH: CHCl3(5:95); HPLC, tR = 4,23 i 7,05, Col. A, H2O: CH3CN (1:1), FR = 2,0.
Analiza elementarna dla wzoru:C36H56F3N5OeS*l,2H2O: obliczono: C 54,22 H 7,38 N 7,78 znaleziono: C 54,28 H 7,84 N 7,71

Claims (4)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Sposób wytwarzania nowych pochodnych peptydów o wzorze ogólnym 1, w którym R1 oznacza grupę /l-4C/alkilową, A oznacza grupę iminową, oksy lub bezpośrednie wiązanie, B oznacza bezpośrednie wiązanie albo grupę o wzorze -NH-CHR2-CO- lub -NH-CHR4-CO-NHCHR2-CO-, w których R2 oznacza grupę fenylową, benzylową albo /l-4C/alkilową ewentualnie podstawioną grupą benzyloksykarbonylową, benzyloksykarbonyloaminową, fenylosulfonyloaminową lub /fenylosulfonyloamino/karbonylową, a R4 oznacza grupę /l-4C/alkilową, ewentualnie podstawioną grupą benzyloksykarbonylową lub benzyloksykarbonyloaminową, R3 oznacza: 1/ grupę /l-6C/alkilową, ewentualnie podstawioną grupą /l-4C/alkoksy-karbonylową, [/14C/alkoksy-karbonylo]aminową, karboksylową, 2-[/l-4C/alkoksy]etoksylową, adamantylową, morfolinylową, pirydylową, tienylową, oksopirolidynylową, fenylową, [/l-4C/alkoksy-karbonylo]fenylową, karboksyfenylową,fenoksylową,[/l-4C/alkoksy-karbonylo]fenoksylową, karbamoilofenoksylową, /karbamoilometylo/fenoksylową, benzenosulfonyloaminową, /metanosulfonyloamino/karbonylową, /benzenosulfonyloamino/karbonylową, /naftalenosulfonyloamino/karbonylową, adamantanosulfonyloamino/karbonylową lub /chlorobenzenosulfonyloaminokarbonylo/fenylową, 2/ grupę naftylową, aminochlorofenylową, fenylową, ewentualnie podstawioną grupą hydroksylową, /l-4C/alkoksylową, /l-4C/alkoksy-karbonylową, karboksylową, 1-2 atomami chlorowca, grupą /metanosulfonyloamino/karbonylową, /naftalenosulfonyloamino/karbonylową lub [N-benzylo-/4-bromobenzenosulfonylo/amino]karbonylową, 3/ grupę o wzorze W-SO2-NH-CO-fenyl, w którym W oznacza grupę fenylową ewentualnie podstawioną chlorowcem lub grupą nitrową, 4/ grupę o wzorze Y-CO-NH/CH2/m, w którym m jest równe 2-5, Y oznacza grupę fenylową, benzylową, difenylometylową, fenoksymetylową, benzyloksylową, /14C/alkoksylową, [/l-4C/-alkoksy-karbonylo]fenyloaminową, /2-pirydylo/etoksylową lub karboksyfenyloaminową, 5/ grupę cyklopentylową lub undecylową, ewentualnie podstawione grupą /l-4C/alkoksy-karbonylową lub karboksylową, 6/ grupę 2-fenylowinylową ewentualnie podstawioną w pierścieniu fenylowym grupą /l-4C/alkoksy-karbonylową, karboksylową lub /chloro64
    150 268 benzenosulfonyloamino/karbonylową, 7/ grupę 2-/ureidokarbonylo/winylową, di/benzyloksymetylo/-metylową lub di/2-fenoksyetylo/metylową, albo ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli, znamienny tym, że utlenia się związek o wzorze ogólnym 7, w którym podstawniki mają wyżej podane znaczenie, a następnie otrzymany związek o wzorze 1, w którym R3 zawiera grupę estru kwasu karboksylowego ewentualnie hydrolizuje się za pomocą wodorotlenku metalu alkalicznego w temperaturze otoczenia do związku o wzorze 1, w którym R3 zawiera grupę karboksylową oraz otrzymany związek o wzorze 1, w którym R lub R zawiera grupę karboksylową ewentualnie poddaje się sprzęganiu z grupą aminową sulfonamidu w obecności karbodiimidu w temperaturze otoczenia do związku o wzorze 1, w którym R2 lub R3 zawiera grupę sulfonyloaminokarbonylową, po czym otrzymany związek o wzorze 1 ewentualnie przeprowadza się w farmaceutycznie dopuszczalną sól.
  2. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że utlenianie prowadzi się stosując jako środek utleniający dimetylosulfotlenek w obecności chlorku oksalilu lub bezwodnika octowego, kompleks trójtlenku chromu i pirydyny albo perjodynam Dess-Martina, przy czym reakcję prowadzi się w odpowiednim rozpuszczalniku lub rozcieńczalniku, takim jak chlorek metylenu.
  3. 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że ewentualny etap sprzęgania prowadzi się stosując jako karbodiimid chlorowodorek l-etylo-3-/3-dimetyloaminopropylo/karbodiimidu lub 1,3-dicykloheksylokarbodiimid w chlorku metylenu jako rozpuszczalniku.
  4. 4. Sposób według zastrz. 1 albo 2 albo 3, znamienny tym, że utlenia się alkohol o wzorze 7, w którym R1 oznacza grupę izopropylową, B oznacza grupę o wzorze -NH-CHR2-CO-, w którym R2 oznacza grupę izopropylową, a grupa R3-A- oznacza grupę 4-chlorofenylo-SO2-NH-CO-fenylową, 4-bromofenylo-SC>2-NH-CO-fenylową lub 1 -naftylo-SO2-NH-CO-fenylo-NH-.
    N ch2
    Wzór 1 ch2
    Wzór
    1a
    F*
    - A-CO-h
    Wzór
    Ib r3-a-co-nh
    CO.NH.CH.CO.CF3
    R1 r3-a-co
    CO.NH.CH.CO.CFo
    Wzór 2 a
    R2 O J-A-CO-NH N
    R1
    I co.nh.ch.co.cf3
    U' r3-a-co-nh
    R1
    R3-A-CO-B ^CO.NH.CH.C(OH)0.CR ff ch2
    Wzór 3
    H-B-N
    CH2
    Wzór 4
    R1 OH
    CO.NH.CH.CH.CF~ 3 2 1e
    CO.NH.CH.CH.CF, 3 2 1 J
    Wzór A a f ?H
    CO.NH.CH.CH.CFo 3 2 1 3
    Wzór 4 c
    R1 OH I I
    H9N.CH.CH.CF0 2 3 2 1 J
    Wzór 5
    O9N.CH.CH 3 2
    Wzór 6 r3-a-co-b.
    NL
    CO.NH. CH.CH.CFą 3 2 1
    Wzór 7 ch2 r3-a-co-nh r3-a-co
    150 268
    OH
    CH.CFo
    2 1 J
    R3-
    R1 OH I I
    CO.NH.CH.CH.CFo 3 2 1
    O
    Wzór 7c
    R1 OH I I
    CO.NH.CH.CH.CFo 3 2 1
    R1 OH h~NH.CH.CH.CFo 3 2 1 3
    Wzór 8
    R1
    FNH CH. CO. CF, 3 2 1 3
    Wzór 9
PL1986257573A 1985-01-22 1986-01-21 Method of obtaining derivatives of peptides PL150268B1 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB858501523A GB8501523D0 (en) 1985-01-22 1985-01-22 Tripeptide derivatives
GB858501522A GB8501522D0 (en) 1985-01-22 1985-01-22 Dipeptide derivatives
GB858501524A GB8501524D0 (en) 1985-01-22 1985-01-22 Tetrapeptide derivatives

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL257573A1 PL257573A1 (en) 1987-03-23
PL150268B1 true PL150268B1 (en) 1990-05-31

Family

ID=27262565

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL1986257573A PL150268B1 (en) 1985-01-22 1986-01-21 Method of obtaining derivatives of peptides

Country Status (25)

Country Link
US (2) US4910190A (pl)
EP (1) EP0189305B1 (pl)
JP (2) JPH0759591B2 (pl)
KR (1) KR910002689B1 (pl)
CN (1) CN1027640C (pl)
AU (1) AU594658B2 (pl)
CA (1) CA1341023C (pl)
CZ (1) CZ278063B6 (pl)
DE (1) DE3686172T2 (pl)
DK (1) DK172736B1 (pl)
ES (3) ES8706169A1 (pl)
FI (1) FI84171C (pl)
GB (1) GB8600263D0 (pl)
GR (1) GR860169B (pl)
HK (1) HK18097A (pl)
HU (1) HU206370B (pl)
IE (1) IE58957B1 (pl)
IL (1) IL77680A (pl)
NO (1) NO169493C (pl)
PH (1) PH26575A (pl)
PL (1) PL150268B1 (pl)
PT (1) PT81887B (pl)
SK (1) SK278095B6 (pl)
UA (1) UA39093C2 (pl)
ZW (1) ZW1486A1 (pl)

Families Citing this family (62)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8600263D0 (en) * 1985-01-22 1986-02-12 Ici America Inc Peptide derivatives
US5055450A (en) * 1985-01-22 1991-10-08 Ici Americas Inc. Peptide derivatives
US5496927A (en) * 1985-02-04 1996-03-05 Merrell Pharmaceuticals Inc. Peptidase inhibitors
AU600226B2 (en) * 1985-02-04 1990-08-09 Merrell Pharmaceuticals Inc. Novel peptidase inhibitors
EP0204571B1 (en) * 1985-06-07 1992-01-22 Ici Americas Inc. Selected difluoro derivatives
EP0276101A3 (en) * 1987-01-19 1989-11-23 Ici Americas Inc. Substituted peptide derivatives
GB8809316D0 (en) * 1987-05-11 1988-05-25 Ici America Inc Heterocyclic ketones
US5182263A (en) * 1988-04-25 1993-01-26 Hoffmann-La Roche Inc. Analogs of tyrosine sulfate or tyrosine phosphate containing peptides
US5296608A (en) * 1988-04-25 1994-03-22 Hoffman-La Roche Inc. Intermediates for analogs of tyrosine sulfate or tyrosine phosphate containing peptides
IL90872A0 (en) * 1988-07-08 1990-02-09 Smithkline Beckman Corp Retroviral protease binding peptides
EP0369391A3 (en) * 1988-11-15 1991-09-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. N-substituted amides
GB8910547D0 (en) * 1989-05-08 1989-06-21 Ici America Inc Substituted ketones
GB8910550D0 (en) * 1989-05-08 1989-06-21 Ici America Inc Substituted amides
US5221665A (en) * 1989-10-27 1993-06-22 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. N-substituted amides
DK0458536T3 (da) * 1990-05-24 1998-10-19 Zeneca Ltd Terapeutisk middel til behandling og forebyggelse af åndedrætsbesværsyndrom hos voksne
ES2129401T3 (es) * 1990-05-24 1999-06-16 Zeneca Ltd Uso de un compuesto terapeutico para el tratamiento de bronquitis.
US5162348A (en) * 1990-05-24 1992-11-10 Imperial Chemical Industries Plc Treatment of cystic fibrosis
GB9014132D0 (en) * 1990-06-25 1990-08-15 Ici Plc Agent for therapy
US5296591A (en) * 1990-12-31 1994-03-22 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Trifluoromethylketone derivatives, processes for preparation thereof and use thereof
GB9207145D0 (en) * 1991-04-18 1992-05-13 Ici Plc Heterocyclic amides
US5521179A (en) * 1991-04-18 1996-05-28 Zeneca Limited Heterocyclic amides
US5340801A (en) * 1991-05-08 1994-08-23 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Compounds having cholecystokinin and gastrin antagonistic properties
DK0587799T3 (da) * 1991-05-23 1999-11-22 Merrell Pharma Inc Inhibitorer af cathepsin G og elastase til forebyggelse af bindevævsnedbrydning
GB9113164D0 (en) * 1991-06-18 1991-08-07 Ici Plc Pharmaceutical agent
WO1993003011A1 (en) * 1991-08-08 1993-02-18 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Urea derivative
GB9216272D0 (en) * 1991-08-15 1992-09-09 Ici Plc Substituted heterocycles
AU658426B2 (en) * 1991-08-15 1995-04-13 Zeneca Limited Substituted heterocycles
US5714470A (en) 1991-08-22 1998-02-03 Merrell Pharmaceuticals, Inc. Orally-active elastase inhibitors
US5478811A (en) * 1991-08-22 1995-12-26 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Orally-active elastase inhibitors
CA2133657A1 (en) * 1992-04-16 1993-10-28 Peter R. Bernstein Substituted derivatives
US5486529A (en) * 1992-04-16 1996-01-23 Zeneca Limited Certain pyridyl ketones for treating diseases involving leukocyte elastase
GB9211783D0 (en) * 1992-06-04 1992-07-15 Ici Plc Amide derivatives
GB9214053D0 (en) * 1992-07-02 1992-08-12 Ici Plc Heterocyclic amides
FR2694295B1 (fr) * 1992-07-28 1994-09-02 Adir Nouveaux peptides dérivés de trifluoromethylcetones, leur procéde de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
US5780590A (en) * 1993-10-15 1998-07-14 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Antithrombotic azacycloalkylalkanoyl peptides and pseudopeptides
GB9402680D0 (en) * 1994-02-11 1994-04-06 Zeneca Ltd Pyrrolidine derivatives
FR2719589B1 (fr) * 1994-05-05 1996-06-14 Adir Nouveaux peptides dérivés de trifluorométhylcétones, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
KR100347285B1 (ko) * 1994-06-02 2003-01-15 아벤티스 파마슈티칼스 인크. 신규의엘라스타제저해제
DE69513167T2 (de) * 1994-06-02 2000-06-15 Merrell Pharmaceuticals Inc., Cincinnati Perfluoroalkyll ketone, inhibitoren von elastase und prozess zur deren herstellung
US6693072B2 (en) * 1994-06-02 2004-02-17 Aventis Pharmaceuticals Inc. Elastase inhibitors
ATE206055T1 (de) * 1994-06-02 2001-10-15 Merrell Pharma Inc Acylierte enolderivate als vorläufdrogen von elastaseinhibitoren
GB9502152D0 (en) * 1995-02-03 1995-03-29 Zeneca Ltd Proline derivatives
US6172044B1 (en) 1995-12-01 2001-01-09 Aventis Pharmaceuticals Inc. Acylated enol derivative of α-ketoesters and α-ketoamides
US5948886A (en) * 1996-11-20 1999-09-07 Hoechst Marion Roussel, Inc. Acylated enol derivatives of α-ketoesters and α-ketoamides
US6559127B1 (en) 1997-07-31 2003-05-06 Athena Neurosciences, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6362341B1 (en) 1997-07-31 2002-03-26 Athena Neurosciences, Inc. Benzyl compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6583139B1 (en) * 1997-07-31 2003-06-24 Eugene D. Thorsett Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6939855B2 (en) * 1997-07-31 2005-09-06 Elan Pharmaceuticals, Inc. Anti-inflammatory compositions and method
US6492421B1 (en) 1997-07-31 2002-12-10 Athena Neurosciences, Inc. Substituted phenylalanine type compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US7030114B1 (en) 1997-07-31 2006-04-18 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6423688B1 (en) 1997-07-31 2002-07-23 Athena Neurosciences, Inc. Dipeptide and related compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6682554B2 (en) * 1998-09-05 2004-01-27 Jomed Gmbh Methods and apparatus for a stent having an expandable web structure
JP2000256396A (ja) 1999-03-03 2000-09-19 Dainippon Pharmaceut Co Ltd 複素環式化合物およびその中間体ならびにエラスターゼ阻害剤
GB9928882D0 (en) * 1999-12-08 2000-02-02 Zeneca Ltd Assay method
US6403612B2 (en) * 2000-01-31 2002-06-11 Merck & Co., Inc. Thrombin receptor antagonists
US20040006093A1 (en) * 2000-10-17 2004-01-08 Thorsett Eugene D. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
EP2290098A1 (en) 2002-01-28 2011-03-02 Ambion, Inc. Preparing crude biological extracts using protease, suitable for preparing cDNA
PL371539A1 (pl) * 2002-02-05 2005-06-27 Dainippon Pharmaceutical Co, Ltd. Związki heterocykliczne wykazujące aktywność hamującą względem elastazy oraz ich związki pośrednie
US7964350B1 (en) 2007-05-18 2011-06-21 Applied Biosystems, Llc Sample preparation for in situ nucleic acid analysis
EP2955233A1 (en) 2008-12-19 2015-12-16 Life Technologies Corporation Proteinase K inhibitors, methods and compositions therefor
US10710957B2 (en) 2017-01-09 2020-07-14 University Of Central Florida Research Foundation, Inc. Motuporamine derivatives as antimicrobial agents and antibiotic enhancers against resistant gram-negative bacteria
US11548893B2 (en) 2017-07-15 2023-01-10 Arisan Therapeutics Inc. Enantiomerically pure adamantane carboxamides for the treatment of filovirus infection

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB195212A (en) * 1922-01-30 1923-03-29 Edward Crawshaw Improvements in expansion joints between steam boilers and their settings or flue walls
US4277395A (en) * 1980-06-16 1981-07-07 Richardson-Merrell Inc. Novel enzyme inhibitors
EP0124317B1 (en) * 1983-04-27 1990-04-11 Ici Americas Inc. Proline derivatives
US4518528A (en) * 1983-05-19 1985-05-21 Rasnick David W α Amino fluoro ketones
GB8600263D0 (en) * 1985-01-22 1986-02-12 Ici America Inc Peptide derivatives
AU600226B2 (en) * 1985-02-04 1990-08-09 Merrell Pharmaceuticals Inc. Novel peptidase inhibitors
CH672792A5 (pl) * 1985-02-19 1989-12-29 Sandoz Ag
EP0204571B1 (en) * 1985-06-07 1992-01-22 Ici Americas Inc. Selected difluoro derivatives
DE3782191T2 (de) * 1986-06-05 1993-02-25 Ici America Inc Difluorketoverbindungen.

Also Published As

Publication number Publication date
ES8706169A1 (es) 1987-05-16
CS39586A3 (en) 1992-01-15
CZ278063B6 (en) 1993-08-11
JPH05246984A (ja) 1993-09-24
HK18097A (en) 1997-02-13
PT81887B (pt) 1988-05-27
EP0189305A2 (en) 1986-07-30
KR860005835A (ko) 1986-08-13
DK30886A (da) 1986-07-23
GB8600263D0 (en) 1986-02-12
FI84171C (fi) 1991-10-25
FI860281A0 (fi) 1986-01-21
EP0189305A3 (en) 1988-10-05
IE860180L (en) 1986-07-22
JPS61218518A (ja) 1986-09-29
ES551113A0 (es) 1987-05-16
DE3686172T2 (de) 1993-01-14
CN86101066A (zh) 1986-11-05
PH26575A (en) 1992-08-19
SK278095B6 (en) 1995-12-06
DK172736B1 (da) 1999-06-21
EP0189305B1 (en) 1992-07-29
DK30886D0 (da) 1986-01-21
US4910190A (en) 1990-03-20
FI84171B (fi) 1991-07-15
ZW1486A1 (en) 1987-09-30
AU594658B2 (en) 1990-03-15
UA39093C2 (uk) 2001-06-15
PT81887A (en) 1986-02-01
ES557363A0 (es) 1988-07-01
US5726158A (en) 1998-03-10
ES8707551A1 (es) 1987-08-01
JPH0759591B2 (ja) 1995-06-28
KR910002689B1 (ko) 1991-05-03
CN1027640C (zh) 1995-02-15
NO169493B (no) 1992-03-23
ES8802526A1 (es) 1988-07-01
AU5262386A (en) 1986-07-31
CA1341023C (en) 2000-06-13
NO169493C (no) 1992-07-01
ES557048A0 (es) 1987-08-01
PL257573A1 (en) 1987-03-23
IE58957B1 (en) 1993-12-01
GR860169B (en) 1986-05-15
HUT39464A (en) 1986-09-29
NO860190L (no) 1986-07-23
HU206370B (en) 1992-10-28
FI860281A (fi) 1986-07-23
DE3686172D1 (de) 1992-09-03
IL77680A (en) 1990-12-23
JPH0680039B2 (ja) 1994-10-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL150268B1 (en) Method of obtaining derivatives of peptides
KR100362338B1 (ko) 단백질:파르네실트랜스퍼라아제의치환디-및트리펩티드억제제
US4880780A (en) Selected difluoro derivatives
DE69131317T2 (de) HIV-Proteaseinhibitoren
US5470833A (en) Endothelin antagonistic peptide derivatives
EP0462884B1 (fr) Dérivés de TRH, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
US5055450A (en) Peptide derivatives
US20040132809A1 (en) Cell adhesion inhibitors
JPH0662672B2 (ja) グリシン誘導体
JPS61263998A (ja) 新規なｎ−（アシルジペプチジル）−アミノグリコ−ル化合物
EP0517589A2 (fr) Dérivés de tachykinines, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
EP0416373A2 (de) Aminosäurederivate
EP0192554A1 (fr) Dérivés peptidiques inhibiteurs de la rénine et des protéases acides
JPS6253952A (ja) レニン阻害剤製造用中間体の立体選択的製法
IE64509B1 (en) Novel derivatives of l-proline their preparation and their biological uses
FR2585708A1 (fr) Derives aminoalcools peptidiques inhibiteurs de la resine et des proteases acides, leur procede de preparation et leur application en therapeutique
US5414132A (en) 1-alkyl-2-hydroxy-2-trifluoromethyl ethylamines
AU605212B2 (en) Renin-inhibitors III
Tran et al. Fluorinated peptides incorporating a 4-fluoroproline residue as potential inhibitors of HIV protease
EP0762887A1 (en) Acylated enol derivatives as prodrugs of elastase inhibitors
FR2577931A1 (fr) Derives aminodiols peptidiques inhibiteurs de la renine et des proteases acides, leur procede de preparation et leur application en therapeutique
AU651557B2 (en) Thioacylating reagents and intermediates, thiopeptides, and methods for preparing and using same
FR2577225A1 (fr) Derives peptidiques inhibiteurs de la renine et des proteases acides
FR2577226A1 (fr) Analogues de pepstatine inhibiteurs de la renine et des proteases acides
JPH0587060B2 (pl)