DK172736B1 - 3,N-disubstituerede prolinamidderivater, fremgangsmåde og mellemprodukter til fremstilling heraf samt farmaceutiske midler - Google Patents

3,N-disubstituerede prolinamidderivater, fremgangsmåde og mellemprodukter til fremstilling heraf samt farmaceutiske midler Download PDF

Info

Publication number
DK172736B1
DK172736B1 DK198600308A DK30886A DK172736B1 DK 172736 B1 DK172736 B1 DK 172736B1 DK 198600308 A DK198600308 A DK 198600308A DK 30886 A DK30886 A DK 30886A DK 172736 B1 DK172736 B1 DK 172736B1
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
trifluoro
methyl
prolinamide
oxopentyl
valyl
Prior art date
Application number
DK198600308A
Other languages
English (en)
Other versions
DK30886A (da
DK30886D0 (da
Inventor
Andrew Shaw
Donald John Wolanin
Scott Haven Bergeson
Philip Duke Edwards
John Anthony Schwartz
Mark Morris Stein
Diane Amy Trainor
Richard Alan Wildonger
Original Assignee
Zeneca Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GB858501523A external-priority patent/GB8501523D0/en
Priority claimed from GB858501522A external-priority patent/GB8501522D0/en
Priority claimed from GB858501524A external-priority patent/GB8501524D0/en
Application filed by Zeneca Inc filed Critical Zeneca Inc
Publication of DK30886D0 publication Critical patent/DK30886D0/da
Publication of DK30886A publication Critical patent/DK30886A/da
Application granted granted Critical
Publication of DK172736B1 publication Critical patent/DK172736B1/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C205/00—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton
    • C07C205/13—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by hydroxy groups
    • C07C205/26—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by hydroxy groups and being further substituted by halogen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C205/00—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton
    • C07C205/01—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton having nitro groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C205/02—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton having nitro groups bound to acyclic carbon atoms of a saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C205/00—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton
    • C07C205/39—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by esterified hydroxy groups
    • C07C205/42—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by esterified hydroxy groups having nitro groups or esterified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton
    • C07C205/43—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by esterified hydroxy groups having nitro groups or esterified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring or to carbon atoms of six-membered aromatic rings being part of the same condensed ring system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0827—Tripeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

i DK 172736 B1
Den foreliggende opfindelse angår visse 3,N-disubstituerede prolinamidderivater, som er human leukocytelastase (HLE)-inhibitorer, hvilket gør dem nyttige i situationer, hvor en sådan hæmning er ønsket, f.eks. som forskningsredskaber ved farmakologiske, diagnostiske og beslægtede undersøgelser, og til behandling af degenerative vævssygdomme, såsom 5 lungeemfysem, aterosklerose, reumatoid artritis og osteo-artritis i varmblodede dyr. Opfindelsen angår også mellemprodukter, der er nyttige til syntese af disse prolinamidderivater, fremgangsmåder til fremstilling af dem samt farmaceutiske midler indeholdende disse prolinamidderivater.
Fra DK 2097/84 kendes forbindelser, som er strukturelt beslægtede med forbindelserne 10 ifølge den foreliggende opfindelse. De kendte forbindelser har virkning som human leukocyt-elastaseinhibitorer, men denne virkning er typisk en faktor 10 svagere end virkningen af de foreliggende forbindelser.
De substituerede prolinamidderivater ifølge opfindelsen repræsenteres ved følgende formler la, Ib og Ic: O R1 H ° π ? DK 172736 B1 2 hvori R1 er (l-5C)alkyl; A er en gruppe valgt blandt -NH.CO-, -O.CO-, -S02- og -CO-; R: er phenyl, benzyl eller er (l-4C)alkyl, som eventuelt bærer en benzyloxycarbonyl-, 5 benzyloxycarbonylamino-, phenylsulfonylamino- eller (phenylsulfonylamino)carbonyl- gruppe; R5 er (l-4C)alkyl, som eventuelt bærer en benzyloxycarbonyl- eller benzyloxycarbonylami- nogruppe; og 10 R5 er valgt blandt en af følgende: (1) (l-6C)alkyl, som eventuelt bærer en (l-4C)alkoxycarbonyl-, [(l-4C)al-koxycarbonyl]amino-, carboxy-, 2-[(l-4C)alkoxy]ethoxy-, adamantyl-, morfolinyl-, pyridyl-, thienyl-, oxopyrrolidinyl-, phenyl-, [(l-4C)alkoxycarbonyllphenyl-, (carboxy)phenyl-, phenoxy-, [(l-4C)alkoxycarbonyllphenoxy-, (carbamoyl)phe- 15 noxy-, (carbamoylmethyl)phenoxy-, benzensulfonylamino-, (methanosulfonylami- no)carbonyl-, (benzensulfonylamino)carbonyl-, (naphthaIensuIfonylamino)carbo-yl-, (adamantansulfonylamino)carbonyl-, (chlorbenzensulfonylaminocarbonyl)phe-nyl- eller thiophenylgruppe; (2) naphthyl, aminochlorphertyl, phenyl, som eventuelt er substitueret med hydroxy, 20 (l-4C)alkoxy, (l-4C)a!koxycarbonyl, carboxy, halogen, dihalogen, (methansulfo- nylamino)carbonyl, (naphthalensulfonylamino)carbony! eller (N-benzyl-(4-brom-benzensulfonyl)amino]carbonyl; (3) en gruppe med formlen W.S02.NH.CO.phenyl-, hvori W er phenyl, som eventuelt bærer halogen eller nitro; 25 (4) en gruppe med formlen Y.CO.NH.(CH2)m-, hvor m er 2-5, og Y er phenyl, benzyl, diphenylmethyl, phenoxymethyl, benzyloxy, (l-4C)alkoxy, [(MC)alkoxycarbo-nyl]phenylamino, (2-pyridyl)ethoxy eller carboxyphenylamino; (5) cyclopentyl eller undecyl, eventuelt substitueret med (l-4C)alkoxycarbonyl eller carboxy; 30 (6) 2-phenylvinyl eventuelt substitueret i phenylringen med (l-4C)alkoxycarbonyl, carboxy eller (chlorbenzensulfonylamino)carbonyl og 3 DK 172736 B1 (7) 2-(ureidocarbonyl)vinyl, di(benzyloxymethyl)methy! eller di(2-phenoxyethyl)-methyl; eller et farmaceutisk acceptabelt syre- eller baseadditionssalt deraf.
Særlige værdier for forbindelserne ifølge opfindelsen indbefatter følgende repræsentanter 5 for de ovenfor definerede grupper: R, er fortrinsvis en alkylgruppe indeholdende 3 carbonatomer.
Når R3 er en (l-6C)alkyl substitueret med: - (l-4C)alkoxycarbonyl, indeholder alkoxygruppen fortrinsvis fra l til 3 carbonatomer; - (l-4C)alkoxycarbonylphenyl, indeholder alkoxycarbonylgruppen fortrinsvis fra 2 til 4 10 carbonatomer.
Når R3 er naphthyl, aminochlorphenyl eller phenyl substitueret med (l-4C)alkoxycarbonyl eller halogen, er disse fortrinsvis alkoxycarbonyl indeholdende fra 2 til 4 carbonatomer, fluor, chlor, brom eller jod.
Når Rj er phenylvinyl substitueret med (l-4C)alkoxycarbonyl, indeholder alkoxycarbonyl-15 gruppen fortrinsvis fra 2 til 4 carbonatomer.
Mere specielle værdier indbefatter: R, er mere foretrukket isopropyl.
Foretrukne værdier for R2 omfatter: - (2-3C)alkyl; DK 172736 B1 4 - ethyl substitueret med benzyloxycarbonyl; - butyl substitueret med (phenylsulfonylamino)carbonyl; - ethyl substitueret med (phenylsulfonylamino)carbonyl (f.eks. 2-(phenylsulfonylamino-carbonyl)ethyl); 5 - butyl substitueret med benzyloxycarbonylamino; foretrukne værdier for Rj omfatter: - isobutyl; - carboxybutyl; - (phenylcarbonylamino)ethyl; 10 - [(diphenylmethyl)carbonylamino]ethyl; - carboxyethyl; - 2-(methylsulfonylaminocarbonyl)ethyl, 2-[(l-adamantyl)sulfonylaminocarbonyI]ethyl og 2-[( 1 -naphthyl)sulfonylaminocarbonyl]ethyl; - (methoxycarbonyl)ethyl; 15 - butoxycarbonylaminoethyi, (2-pyridylethoxy)carbonylaminopentyl; -carboxyphenylmethyl, carboxyphenylethyl, methoxycarbonylphenylmethylogethoxycarbo-nylphenylethyl; i 5 DK 172736 B1 - adamantylethyl (f.eks. l-adamantylethyl); - morpholinylethyl (f.eks. 2-(4-morphoIinyl)echyl); - thiophenylmethyl og thiophenylethyl (f.eks. (2-thiophenyl)methyl eller 2-(3-thiophe-nyl)ethyl); og pyridylethyl; 5 - phenoxypropyl; - phenyl substitueret med fluor, methoxy, ethoxy, methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, methylsulfonylaminocarbonyl (f.eks. 4-(methylsulfonaminocarbonyl)phenyl) eller naphthyl-sulfonylaminocarbonyl (f.eks. 4-(l-naphthyIsulfonylaminocarbonyl)phenyI); - ethoxycarbonylcyclopentyl; 10 - ethenyl substitueret med carboxyphenyl (f.eks. E-4-carboxyphenyl), ureidocarbonyl (f.eks.
Z-(3-aminocarbonylamino-3-oxo-l-propenyl)), acylsulfonamido (f.eks. 4-[(4-chlor-phe-nyl)sulfonylaminocarbonyl]phenyl) eller 4-carboxyphenyl (f.eks. E-2-(4-carboxyphe-nyl)ethenyl); foretrukne værdier for Rs omfatter: 15 - n-butyl; - benzyloxycarbonylethyl; - benzyloxycarbonylaminobutyl.
Saltene af forbindelserne med formlerne la, Ib og Ic er farmaceutisk acceptable base- eller syreadditionssalte såsom de, der fremstilles med en uorganisk syre, f.eks. saltsyre, eller en 20 organisk syre såsom citronsyre, maleinsyre, fumarsyre eller eddikesyre. Baseadditionsssalte DK 172736 B1 6 indbefatter dem, der fremstilles med alkalimetalhydroxider, såsom natriumhydroxid, alka-limetalcarbonater og -bicarbonater, jordalkalimetalhydroxider og organiske aminsalte.
Sådanne salte kan fremstilles ved at opløse prolinamidderivatet i en blanding af vand og et med vand blandbart, organisk opløsningsmiddel, tilsætte en vandig opløsning af basen og 5 udvinde saltet af den vandige opløsning.
De foretrukne forbindelser ifølge opfindelsen har S-konfiguration (dvs. konfigurationen af de naturligt forekommende L-aminosyrer) ved chirale centre identificeret ved * i formlerne Ila, Ilb og Ile nedenfor. Fremgangsmåder til syntese beskrevet nedenfor i metode A og B giver en diastereomer blanding som følge af tilstedeværelsen af produkterne med både R-10 og S-konfigurationerne ved det chirale centrum, der er identificeret ved symbolet Δ. Fremgangsmåderne til adskillelse og syntese beskrevet nedenfor i metode C og D giver forbindelser, som i hovedsagen er enantiomert og diastereomert rene. De foretrukne forbindelser er de forbindelser, der har S-konfigurationen ved det centrum, der er identificeret med symbolet Δ.
j Rl *'A II» ** o ^ „3 „ >rA .CO.NH.CW.Co.CPL Ilb
Tt - A — h' n—(* Δ 3 « o H o Rz o R* - A — N /ONH^ch.c°.cp3
Λ O
V Ile i DK 172736 B1 7
Som det vil forstås af fagfolk, er den (HLE)-inhiberende aktivitet af de enkelte isomerer ikke den samme, og det foretrækkes derfor at anvende den mere aktive isomer. Den foreliggende opfindelse indbefatter både den diastereomere blanding og de aktive S- og R-iso-merer.
5 Som det vil forstås af fagfolk, kan trifluormethylketonerne eksistere som solvater, især hydrater, repræsenteret ved formlerne Ilia, 111b og Illcj, 5 R1 o 3 V—k CO.NH.cn .c(oh\.cr IHb H o RZ o ^ R1 _ A - N . Λ y—f CO.NH. CH. c(4h\.CJ5
χν M
K? H < > IIIc
Det foretrækkes at fremstille prolinamidderivaterne ifølge opfindelsen ud fra industrielt tilgængelige ot-aminosyrer (dvs. de syrer, hvori NT^-gruppen er bundet til carbonatomet ved 10 siden af -COOH-gruppen). På grund af dette er de foretrukne R3- og R3-substituenter i ovenstående formler for tri- og tetraprolinamidderivaterne dem, der opnås fra én af de følgende aminosyrer: alanin, valin, norvalin, leucin, isoleucin, norleucin, phenylalanin, tryptophan, tyrosin, asparagin, glutamin, asparaginsyre, glutaminsyre, lysin, threonin, serin, cc-aminosmørsyre og phenylglycin.
DK 172736 B1 8
Foretrukne grupper af forbindelser indbefatter dem, der er nævnt i hovedoverskriften i hvert af eksemplerne 6, 11, 15-18, 20-28, 51-56, 58, 59, 62, 63, 65, 68, 71, 72, 74, 75, 77-79, 82, 84-91, 93-111, 114, 115, 117, 119 og 121-126. Af disse er de i eksemplerne 16, 24, 27,52,58,71,74,77-79, 85,89,93-96, 98, 100, 104-107, 110, 114, 115, 119og 123-125 5 mere foretrukne og de i eksemplerne 77, 95, 104, 114 og 115 de mest foretrukne.
Opfindelsen angår endvidere farmaceutiske midler omfattende en forbindelse med formlen la, Ib eller Ic sammen med et ugiftigt, farmaceutisk anvendeligt fortyndingsmiddel eller bærestof.
Forbindelserne med formlerne la, Ib og Ic kan fremstilles på følgende måde: 10 Metode A:
Trin 1 er fremstillingen af aminoalkoholen V
RL OH
, » ·
HnN.CH .CH.CF, V
3 i 1 3 (bekvemt isoleret som hydrochloridsaltet). Henry-kondensation (E: T. McBee m.fl., J.
Amer. Chem. Soc. 78: 4053 (1056)) af en passende nitroalkan med formlen R'CHjNOj (fremstillet ved standardmetoder, hvis den ikke på anden måde står til rådighed) med 15 trifluoracetaldehyd-ethylhemiacetal med formlen [CF3CH(OH)OCHjCH3] giveren nitroalko-hol med formlen VI
OH
O^N.CH .<Lh ,CF3 VI
3 z i i 9 DK 172736 B1 der fås som en blanding af to racemiske diastereomerer ([2(RS), 3(RS)] og [2(RS), 3(SR)]).
(Se f.eks. eksempel lb). Reduktion af nitrogruppen i forbindelse VI med et passende reduktionsmiddel giver forbindelse V som en blanding af to racemiske diastereomerer ([2(RS), 3(RS)] og [2(RS), 3(SR)]). (Se f.eks. eksempel lc). Dette aminsalt anvendes direkte til 5 yderligere syntese.
Trin 2 er omdannelsen af forbindelse V til nøglemellemprodukterne med formlerne IVa, IVb og IVc
o R1 CH
)-^ _OD.NK.CJM. CH. CF
Hti / \ 321 IVb 0^0
«•i O
ίο DK 172736 B1 under anvendelse af metoder, der er almindeligt kendte for fagfolk, f.eks. de metoder, der er beskrevet i M. Bodanszky, Principles of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Berlin (1984) og The Peptides. Analysis, Synthesis and Biology (red. E. Gross & J. Meienhofer), bind 1-5 (Academic Press, New York) 1979-1983. Brug af passende N-beskyttede cykliske 5 aminosyrer (såsom CBZ-prolin), efterfulgt af peptidkoblingsmetoder og passende fjernelse af aminobeskyttelsen giver forbindelser med formlen IVa. Lignende koblinger med passende N-beskyttede dipeptidsyrer og tripeptidsyrer og fjernelse af beskyttelsen giver forbindelser med formlerne Γ/b og IVc. Desuden kan forbindelser med formlen IVa omdannes til forbindelser med formlen IVb eller IVc ved anvendelse af samme peptidmetoder. Produkterne, 10 der fås som her beskrevet, er blandinger ([2(RS), 3(RS)] og [2(RS), 3(SR)]), med mindre der udføres en adskillelse.
Trin 3 er omdannelsen af mellemprodukterne af forbindelsen IVa, IVb eller FVc til mellemprodukter Vila, Vllb og VIIc: DK 172736 B1 11
#} OH
T? a .CO.l4H.CH.CH.CF_ h \ _y 3 2 1 3 o
R2- 0 ?l OH
* )-ί .CO.NH.CH.CH.CF
*-A-/V/ 3 2
, *1 O R·4 O 111 OH
*R - A—»>. A >—V CO.NH.CH.CH.CF, X r M 3 1 1
R H \/ VIIC
ved deres reaktion med passende reagenser til dannelse af amider, urinstoffer, urethaner og sulfonamider, herunder syre-chlorider, anhydrider, blandede anhydrider, isocyanater, carbonater såsom 4-nitrophenylcarbonater (fremstillet som be-5 skrevet i H.Kunz m.fl., Angew.Chem.Int. Ed.(Eng) 22, 783-784 (1983)), chlorformiater, sulfonylchlorider og sulfinylchlorider, DK 172736 B1 12 efterfulgt af oxidation på måder velkendt fra litteraturen. Produkterne, der fås som her beskrevet, er blandinger ( [2(RS),3 (SR) ] og [2 (RS) , 3 (RS) ] ), med mindre der udføres en adskillelse.
5 Som det vil være klart for fagfolk, kan rækkefølgen af trinene i trin 2 og 3 ændres, hvis der tages passende hensyn til koblingsmetoder, racemisering, metoder til fjernelse af beskyttelse etc.
Under passende betingelser kan mellemprodukter med formlen Vila således også fremstilles direkte af forbindelser med formlen V, 10 mellemprodukter med formlen Vllb kan også fremstilles direkte af forbindelser med formlen V eller IVa, og mellemprodukter med formlen VIIc kan også fremstilles direkte af forbindelser med formlen V, IVa eller iVb.
Trin 4 er oxidationen af mellemprodukter med formlen Vila, Vllb 15 eller VIIc til dannelse af produkter la, Ib eller Ic. Fremgangsmåder, der er nyttige, indbefatter brugen af oxalylchlorid, DMSO og en tertiær amin (se M.Marx m.fl., j.Org.Chem. 49, 788-793 (1984), idet de bedste resultater fås med 10-20 ækvivalenter oxideringsmiddel), brugen af eddikesyreanhydrid og 20 DMSO, brugen af chromtrioxidpyridin-kompleks i methylenchlorid og brugen af Dess-Martin perjodinan-(1,1,l-triacetoxy-2,1-benzoxiodol-3 (3H)-on] (fremgangsmåde ifølge D.B.Dess m.fl., J.Org.Chem. 48, 4155-56 (1983)). Den foretrukne metode er brugen af Dess-Martin perjodinan. Med mindre de er blevet adskilt, 25 vil produkterne la, Ib og Ic,fremkommet ved denne fremgangsmåde, indeholde en blanding [3(RS)], som vil bestå i hovedsagen af to diastereomerer, hvis centrene svarende til dem, der er vist med en *· i formlerne Ila, Ilb og Ile, er i hovedsagen enantio-mert rene.
30 Trin 5 er omdannelsen af produkter med formlen la, Ib eller Ic, til andre produkter med formlen la, Ib eller Ic og indbefatter forsæbning, kobling og reaktioner til fjernelse af beskyttelse.
i DK 172736 B1 13
Stereokemien af produktblandingen er den samme som den i trin 4.
Metode B
er en foretrukket metode sammenlignet med metode A.
Trin 1 indebærer adskillelse af blandingen af racemiske dia-5 stereomerer med formlen VI, fremkommet som produkt fra metode A, trin 1, ved fraktioneret destillation og krystallisation til dannelse af nitroalkohol VI som en i hovedsagen ren racemisk diastereomer [2(RS),3(SR)], der i hovedsagen er fri for den anden racemiske diastereomer [2(RS),3(RS)]. Reduktion af 10 nitrogruppen ved den foretrukne metode til hydrogenering over en 10% palladium-på-carbon-katalysator giver V som én racemisk diastereomer [2(RS),3(SR)), der i hovedsagen er fri for den anden racemiske diastereomer. (Det vil forstås af fagfolk, at alternativt kan diastereomeren [2(RS),3(RS)] også anvendes til 15 fremstilling af forbindelser ifølge opfindelsen).
Trin 2 er det samme som i metode A, men anvender aminen V, fremstillet som beskrevet i metode B, trin 1. De på denne måde fremkomne produkter er i hovedsagen rene [2(RS),3(SR)1-blandin-ger.
20 Trin 3 er det samme som i metode A, men anvender produktet, fremstillet ifølge metode B, trin 2. De ved denne metode fremkomne produkter er i hovedsagen rene [2(RS),3(SR)]-blandinger.
Som i metode A kan rækkefølgen af trinene i trin 2 og 3 ændres under passende betingelser.
25 Trin 4 er det samme som trin 4 i metode A. Den fremkomne produktblanding er den samme som den ved metode A, trin 4, fremkomne produktblanding.
Trin 5 er det samme som i metode A, trin 5.
DK 172736 B1 14
Metode C
er en fremgangsmåde til direkte syntese af individuelle ("op-spaltede") isomerer af formlerne la, Ib og Ic, som er i hovedsagen fri for den anden diastereomer, f.eks. produkter svarende 5 til Ila, Ilb og Ile, hvori centrene svarende til jfc- og Δ alle er S.
Trin 1 indebærer opspaltning af racematet V, der er fremstillet ifølge metode B, trin 1. Efter at den frie base svarende til V er frigjort, udføres opspaltning ved dannelse af diastereo-10 merernes salte med D-vinsyre og adskillelse af saltene ved fraktioneret krystallisation. Den ønskede amin fås så af de adskilte salte ved frigørelse af basen til dannelse af f.eks. den frie base svarende til 2(R)3(S) i en forbindelse af formlen V. Det således fremkomne produkt er i hovedsagen enantio-15 mert og diastereomert rent.
Trinene 2 og 3 er i hovedsagen de samme som trin 2 og 3 i metoderne A og B, men begrænset til metoder, som undgår racemisering af centre, som svarer til de med χ mærkede i formlerne Ila, Ilb og Ile. De således fremkomne produkter er i det væsentlige 20 enantiomert og diastereomert rene.
Trin 4 er begrænset til metoder, som undgår racemisering ved centrene mærket * og Δ i formlerne Ila, Ilb og Ile. Den foretrukne metode er anvendelse af Dess-Martin-perjodinan. De således fremkomne produkter la, Ib og Ic er i det væsentlige 25 enantiomert og diastereomert rene.
Trin 5 er begrænset til metoder, som undgår racemisering ved centrene mærket * og Δ i formlerne Ila, Ilb og Ile.
Metode D:
Trin 1 er en adskillelse af forbindelser med formlerne la, Ib og DK 172736 B1 15
Ic, fremstillet ved metode A eller B, som er diastereomere blandinger (på grund af 3(RS)-centret) i deres enkelte isomerer, der er i det væsentlige diastereomert og enantiomert rene. Den foretrukne metode til fuldendelse af denne adskillelse er an-5 vendelse af præparativ kromatografi, f.eks. MPLC og HPLC.
Trin 2 er det samme som trin 5 i metode C.
Hæmningsmå1inger:
Styrken af forbindelser ifølge opfindelsen til at virke som elastaseinhibitorer blev først bestemt ved evnen hos en for-10 bindelse ifølge opfindelsen til at hæmme virkningen af human leukocytelastase (HLE) på et lavmolekylært peptidsubstrat.
Styrken af en inhibitor bedømmes ved at skaffe en kinetisk bestemmelse af dissociationskonstanten K. af komplekset, der er dannet ved reaktion af inhibitoren med HLE. Det anvendte sub-15 strat var anilidet methoxysuccinyl-alanyl-alanyl-prolyl-valin- p-nitroanilid som beskrevet af K.Nakajima m.fl. i J.Biol.Chem.
254: 4027-4032 (1979) og af T.Teshima m.fl. i J.Biol.Chem. 257: nr. 9, 5085-5091 (1982). HLE-enzymet anvendt til disse undersøgelser kan fremskaffes fra Elastin Products i St.Louis, 20 Missouri, eller kan renses i henhold til B.R.Viscarello m.fl.,
Preparative Biochemistry, bind 13, side 57-67 (1983) som følger, idet alt arbejde er blevet udført i et koldt værelse ved 4°C.
Saltekstraktion-DNase-behandling: Udgangsmaterialet, 193 g purulent spyt, blev homogeniseret med 200 ml koldt destilleret 25 vand og centrifugeret ved 30.000 x tyngdekraft i 20 minutter ved 4°C. Den overliggende væske blev kasseret, og pillen blev ekstraheret med salt og behandlet med DNase som ved metoden ifølge D.Y.Twumasi m.fl. i J.Biol.Chem. 252: 1917-1926 (1977). Kromatografi på Elastin agarose: Bundfaldet fra DNase-fordøjel- 30 sen blev optaget i to 40 ml portioner af 50 mM Tris, 1,0 M NaCl, pH 8. Suspensionnen blev centrifugeret, og den fremkomne over- DK 172736 B1 16 liggende væske blev påført direkte på en søjle af opløselig Elastin-Sepharose 4B (2,5 x 20 cm). Søjlen blev vasket med balancerende stødpude (50 mM Tris, 50 mM NaCl, pH 8,0), indtil den optiske tæthed ved 280 nm (C^qq) af eluatet vendte tilbage 5 til grundlinien. Yderligere forurenende protein blev elueret med to søjlerumfang 50 mM acetat, 1,0 M NaCl, pH 5,0. Elastase og cathepsin G(HLC-G) blev til slut elueret med 50 mM acetat, 1,0 M NaCl, 20% DMSO, pH 5,0. Søjlen blev udviklet ved 6 ml/min. med opsamling af 10 ml fraktioner. De aktive fraktioner blev 10 opsamlet, dialyseret over for to 6 liter udskiftninger af 50 mM acetat, 0,1 M NaCl, pH 5,5, og koncentreret til 40 ml på et Amicon ® ultrafiltreringsaggregat (YM-10 membran). CM-kromato-grafi: Den koncentrerede aktive fraktion blev påført på en søj le af CM-Sephadex ® C-50 (2,2 x 10 cm), der forud var blevet bragt 15 i ligevægt med 50 mM acetat, 0,1 M NaCl, pH 5,5, og søjlen blev så vasket med denne stødpude for at fjerne forurenende protein. Eluering blev fortsat med 50 mM acetat, 0,2 M NaCl, pH 5,5, og resulterede i fortrængning af en aktivitetstop, som blev målt over for Bz-Phe-Val-Arg-pNA. HLE blev derefter elueret med 20 acetatstødpuden indeholdende 0,45 M NaCl, medens eluering af HLC-G krævede tilstedeværelse af 1,0 M NaCl i stødpuden, som beskrevet af R.Martodam m.fl. i Preparative Biochemistry, bind 9, side 15-31 (1979). Denne søjle blev udviklet ved 30 ml/time under opsamling af 5,5 ml fraktioner. Af det således rensede 25 HLE blev en standard-produktionshastighed af p-nitroanilin målt ved 25°C spektrofotometrisk i det synlige spektrum ved 410 nm med automatisk gengivelse af data fra et Cary 210 spektrofoto-meter fra Varian Associates. Reaktioner blev igangsat ved injektion af 10 mikroliter af HLE-opløsningen i en 3 ml cuvette 30 indeholdende 2,89 ml stødpude (10 millimolær natriumphosphat, 500 millimolær NaCl, pH 7,6), 50 mikroliter substratopløsning i DMSO og 50 mikroliter DMSO. Først blev ligevægtsreaktionshastigheder af p-nitroanilinproduktion beregnet ved en tilpasning af forsøgsdata til en lineær afhængighed af tiden ved lineære 1 i DK 172736 B1 17 mindste kvadrater. Denne hastighed, bestemt uden tilstedeværelse af inhibitor, blev anvendt som standard ved beregningen af inhibitor K^-værdier.
Uden undtagelse fandtes alle prolinamidderivaterne ifølge opfindel-5 sen at være "langsomt bindende" inhibitorer af HLE og krævede derfor særlige analysemetoder til nøjagtigt at bestemme nuværdier for deres hæmning af HLE (se J.W.Williams & J.F.Morrison, Meth.Enz. 63, 437 (1979) for en beskrivelse af disse metoder). Ved et typisk forsøg blev 2,89 ml stødpude (10 milli-10 molær natriumphosphat, 500 millimolær natriumchlorid, pH 7,6), 50 mikroliter inhibitoropløsning i DMSO og 50 mikroliter substratopløsning i DMSO sat til en 3 milliliter cuvette. Cuvetten blev forsynet med prop, omvendt flere gange for at blande dens indhold og blev holdt ved 25°C i spektrofotometeret. Efter en 15 periode på 5 minutter, for at lade reaktionsopløsningen komme i varmeligevægt, blev 10 mikroliter stamenzymopløsning sat til cuvetten for at igangsætte reaktionen. To eller tre forsøg blev udført med en koncentration af inhibitor på 0 og med mindst tre koncentrationer af inhibitor, der ikke var 0. Ki~værdier 20 blev beregnet ved fremgangsmåderne, der er skitseret i ovennævnte reference, af Williams 4 Morrison. K -værdierne for -7 1 udvalgte forbindelser var mindre end 10 Dyremodeller:
Dyremodeller af emfysem indbefatter intratracheal (i.t.) ad-25 ministration af en elastolytisk protease for at bevirke en langsomt fremadskridende, ødelæggende læsion af lungen. Disse læsioner bedømmes normalt nogle få uger til nogle få måneder efter det første angreb. Disse proteaser inducerer imidlertid også en læsion, der er tydelig inden for de første få timer.
30 Den tidlige læsion er først blødende og forløber til en inflammatorisk læsion inden for de første 24 timer og opløses i den første uge efter angrebet. For at drage fordel af denne tidlige læsion blev anvendt følgende model.
DK 172736 B1 18
Hamstere anæstetiseres først let med Brevital. Saltvand med phosphatstødpude (PBS), pH 7,4, enten alene eller indeholdende 400 ,ug human leukocytelastase (HLE) administreres så direkte i trachea. 24 timer senere dræbes dyrene, og lungerne fjernes 5 og befris omhyggeligt for fremmed væv. Efter bestemmelse af den våde lungevægt udskylles lungerne med BPS, og de totale udskyllelige røde og hvide celler, der udvindes, bliver bestemt. Værdierne for våd lungevægt, totale udskyllelige røde celler og totale udskyllelige hvide celler udvikles på den dosisafhængige 10 måde efter administrering af HLE. Forbindelser, der er effektive elastaseinhibitorer, kan forhindre eller formindske alvoren af den enzyminducerede læsion, som resulterer i lavere våd lungevægt, og reducerede værdier for totale udskyllelige celler, både røde og hvide, i forhold til administration af HLE alene.
15 Forbindelser kan bedømmes ved at administrere dem enten med eller på forskellige tidspunkter før administration af HLE for at bestemme deres anvendelighed til forhindring af en HLE— læsion. Forbindelser ifølge opfindelsen frembringer statistisk signifikante reduktioner i våd lungevægt og totale udskyllelige 20 celler i forhold til HLE alene.
Forbindelser ifølge opfindelsen udviste aktivitet i mindst én af de ovenfor beskrevne prøver under"hæmningsmåling"eller"dyre-model”. Det skal bemærkes, at der ikke altid var en direkte korrelation mellem aktiviteterne af forbindelserne målt som K^-værdier 25 ved hæmningsmålingsprøven og de reducerede værdier for totale udskyllelige celler og våd lungevægt i forhold til administration af HLE alene, fremkommet ved dyremodelprøven. Det menes, at dyremodelprøven bedre kan forudsige aktiviteten af sådanne forbindelser til behandling af emfysem.
30 Farmakokinetik: Syriske hanhamstere (80 - 120 g) får intravenøst injiceret forsøgsforbindelsen. Før injektionen og på forskellige tidspunkter derefter anæstetiseres de let med ether, og der udtages blodprøver på ca. 0,2 ml hver ved hjertepunktur. Blodet i DK 172736 B1 19 udtrykkes i 2 ml centrifugeglas og får lov at størkne i en time. Prøven centrifugeres så, og serumet fjernes.
Lægemiddelniveauer bestemmes ved først at inaktivere endogene elastaseinhibitorer ved inkubation af 50 mikroliter serum med 5 et lige så stort rumfang stødpude indeholdende 5 mg/ml okse- pankreatisk trypsin i 5 minutter. Det trypsininaktiverede serum (10 mikroliter) sættes så til en 0,52 ml cuvette indeholdende stødpude fremstillet med 20 nM med hensyn til HLE. Efter yderligere 30 minutters inkubation startes reaktionen ved tilsætning 10 af substrat (350 mikroliter) (MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-pNA, 1,6 mm), og reaktionen overvåges spektrofotometrisk ved en bølgelængde på 410 nM. Til sammenligningsformål bestemmes serumpersis tensen af forsøgsforbindelserne på følgende måde: Hæmningsprocenten af serumprøver blev beregnet som følger: 15 Procent hæmning = Vo x 100,
Vo hvor Vo er den hastighed, der fås i nærværelse af kontrolserum, og Vi er hastigheden af den hæmmede reaktion. Data udtrykkes som logaritmeprocent hæmning som funktion af tiden efter administration af inhibitor. En omtrentlig serumhalveringstid 20 (t 1/2) beregnes ud fra den fremkomne kurve.
Forbindelserne ifølge opfindelsen kan administreres til et varmblodet dyr, som har behov derfor, især et menneske, til behandling af tilstande af lungeemfysem, aterosklerose, reumatoid artritis og osteoartritis, især til emfysem. Administrations-25 måden kan være oral, parenteral, herunder subkutan aflejring ved hjælp af en osmotisk punrøe, eller via en pulveriseret eller flydende aerosol. Disse kan bekvemt sammensættes til en oral eller parenteral doseringsform ved at sammensætte ca. 10 -250 mg pr. enhedsdosis med sædvanlige bærere, hjælpestoffer, DK 172736 B1 20 bindemidler, konserveringsmidler, stabiliseringsmidler, aroma og lignende i overensstemmelse med accepteret farmaceutisk praksis, f.eks. som beskrevet i US-patent nr. 3.755.340.
Til parenteral administration vil blive givet en 1 - 10 ml 5 intravenøs, intramuskulær eller subkutan injektion indeholdende ca. 0,02 - 10 mg/kg legemsvægt af en forbindelse ifølge opfindelsen 3 eller 4 gange om dagen. Injektionen vil indeholde en forbindelse ifølge opfindelsen i en vandig isotonisk steril opløsning eller suspension, eventuelt sammen med et konserve-10 ringsmiddel såsom phenol, eller et opløseliggørende middel såsom ethylendiamintetraeddikesyre (EDTA). I en pulveriseret aerosol kan forbindelserne ifølge opfindelsen administreres på samme måde som cromolynnatrium via et Spinhaler® turbo-inhalationsapparat fra Fisons Corp. i Bedford, Massachusetts, 15 med en hastighed på ca. 0,1 - 50 mg pr. kapsel, idet 1-8 kapsler administreres dagligt til et gennemsnitsmenneske.
Hver kapsel, der skal anvendes i"Spinhaleren", indeholder den nødvendige mængde af en forbindelse ifølge opfindelsen, idet resten af den 20 mg kapsel er et farmaceutisk acceptabelt 20 bærerstof såsom lactose. I en flydende aerosol administreres forbindelserne ifølge opfindelsen med en hastighed af ca.
100 - 1000 mikrogram pr. "indsnusning" eller aktiveret frigørelse af et standardrumfang drivmiddel. Den flydende aerosol vil blive givet i en mængde af 1 - 8 "indsnusninger" pr. dag med 25 variation i doseringer afhængigt af alvoren af den tilstand, der behandles, patientens vægt og partikelstørrelsesfordelingen af aerosolen, idet mindre partikler opnår større lungegennemtrængning. Drivmidler, f.eks. en fluoreret hydrocarbon eller isobutan, beholdere, ventiler og aktivatorer til væskeaerosoler 30 er beskrevet af L.Lachman m.fl·., i "The Theory and Practice of Industrial Pharmacy", Lea & Febiger, Philadelphia (1976). 1 i de følgende eksempler og i beskrivelsen anvendes følgende forkortelser og konventioner: DK 172736 B1 21 atm.(atmosfærer), kp (kogepunkt), °C (grader Celsius) (alle temperaturer er i °C, med mindre andet er angivet), g (gram), hr (timer), mg (milligram), min. (minutter), ml (milliliter), 1 (liter), mol, mmol (millimol), smp. (smeltepunkt), N (normal), 5 nm (nanometer), nM (nanomolær), mæt. (mættet), aq (vandig), kone. (koncentreret), x (gange), stuetemperatur (20-23°C), DCC (1,3-dicyklohexylcarbodiimid), DMF (dimethylformamid), DMSO (dimethylsulfoxid), Et20 (diethylether), EtOAc (ethyl-acetat), HOAc (eddikesyre), HOBT (hydroxybenzotriazol), MeOH 10 (methylalkohol) , EtOH (ethylalkohol) ,Pd/C (palladium-på-trakul-katalysa-tor), pNA (paranitrbanilid) ,THF(tetrahydrofuran), CBZ (benzyloxy-carbonyl), t-BOC (tertiær butyloxyearbonyl), DMF (dimethylformamid), TEA (triethylamin), DCC (1,3-dicyklohexylcarbodiimid),
AcOH (eddikesyre), S.M. (udgangsmateriale), NMM (N-methyl-15 morpholin), -{mindre end eller lig med), TEA (triethylamin), TFA (trifluoreddikesyre), Ac20 (eddikesyreanhydrid), CDI (carbonyldiimidazol), WSCDI (vandopløseligt carbodiimid: l-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl)carbodiimid-hydrochlorid), DMAP (4-dimethylaminopyridin), Dess-Martin perjodinan (1,1,1-20 triacetoxy-2,l-benzoxiodol-3(3H)-on), HCl-gas (luftformig HC1) (iøvrigt HCl i en vandig opløsning), Rh/C (rhodium-på-trækul-katalysator), 0 (phenylgruppe), TLC (tyndtlagskromatografi på silieagel (med mindre andet er anført)), (relativ mobilitet i TLC), MPLC (middeltryksvæskekromatografi), HPLC (højtryks-25 væskekromatografi), tR (HPLC-tilbageholdelsestid i minutter), FR (HPLC-strømningshastighed i ml pr. minut), Col A (Zorbax^ ODS analytisk søjle, 4,6 mm x 25 cm), Col B (Phenomenex^
Zorbax ® C-8 analytisk søjle, 4,6 mm x 35 cm), Col C (Altex Ultrasphere ® /Octyl 10 mm I.D. x 25 cm, 5 mikron-analytisk og 30 præparativ søjle), lynkromatografi (lyn-søjlekromatografi på silieagel) (medmindre andet er anført) >sugningskromatografi (sugningssøjle-kromatografi på silieagel). Desuden anvendes C, Η, N etc.
(de sædvanlige symboler for grundstofferne). 133,3 Pascal = 1 Torr som omsætningsfaktor med 760 Torr = 14,7 pund pr. kvadrat-35 tomme (psi). 1H NMR (kernemagnetisk resonans)-spektre blev til- DK 172736 B1 22 vejebragt ved anvendelse af enten et 80 MHz eller 250 HMz instrument og tetramethylsilan (TMS) som indre standard (opløsningsmidlet til det givne eksempel er noteret i eksemplet), 5 (dele pr. million neden for TMS) med s (singlet), d (dublet), 5 dd (dublet af dubletter) , m (multiplet).
Nomenklatur: Af hensyn til ensartethed og klarhed anvendes "aminosyresekvenstype"-navne, hvor det er muligt. Endvidere er aminer med formlen V og N-substituenterne af C-terminale amider med formlerne I, II, III, IV og VII, der er formelt afledt af 10 V, nummereret som vist: Λ1 OM "R1 OH . R1
HjN. CH .CH . CF- L, MW.CH.CH . CF, i« NM.CH . CO CF, 321J i 32iJ > Z Z 1
V IV, VII I, II
(del) (del) Når det er nødvendigt, eller hvor det er nævnt, gentages forskellige eksempler, hvis der kræves mere materiale.
EKSEMPEL 1.
2(RS),3(SR)-3-amino-4-methyl-l,1,1-trifluor-2-pentanol-15 hydrochloridsalt.
a. 2-methyl-l-nitropropan.
1-jod-2-methylpropan (94,0 g, 0,51 mol) blev sat dråbevis til en forud afkølet (0°C) suspension af AgNC>2 (100,0 g, 0,65 mol) i Et20 (180 ml). Reaktionen blev beskyttet mod lys og omrørt natten over, medens den fik lov at opvarme til stuetemperatur.
20 Reaktionsblandingen blev filtreret gennem Celite^. Filtratet DK 172736 B1 23 blev koncentreret i vakuum, og remanensen blev destilleret i vakuum (forsigtighed: potentielt eksplosivt) til dannelse af produktet (37,7 g, 0,366 mol), kogepunkt 61 - 65°C ved 6913,6 Pascal (52 mm Hg).
5 b. 2(RS),3(SR)-4-methyl-3-nitro-l,1,1-trifluor-2-pentanol.
l-nitro-2-methylpropan (37,7 g, 0,366 mol) fra eksempel la., trifluoracetaldehyd-ethylhemiacetal (58,5 g, 0,366 mol, 90% renhed) og K2CC>3 (3,4 g, 0,025 mol) blev blandet og omrørt ved 60°C i 3 timer og derefter ved stuetemperatur i 3 dage. Saltvand 10 (75 ml) og 1 N vandig HCl (50 ml) blev tilsat, og det nedre or ganiske lag blev fraskilt. Det vandige lag blev ekstraheret med Et20 (to gange med 250 ml hver) , og de forenede organiske lag blev vasket med saltvand, tørret over Ν32εο^, filtreret og koncentreret i vakuum. Remanensen blev renset ved lynkromatografi 15 på silicagel med en gradient-eluering af CH2Cl2:hexan (50:50), CH2Cl2:hexan (75:25), CH2Cl2 (100%) og MeOH:CH2Cl2 (5:95) til dannelse af produktet (44,9 g). TLC, R^ = 0,65, silicagel,
EtOAC:CHCl3 (5:95).
c. 2(RS),3(SR)-3-amino-4-methyl-l,1,1-trifluor-2-pentanol-20 hydrochloridsalt.
En opløsning af en del af produktet fra eksempel lb (37,0 g, 0,184 mol) i Et20 (200 ml) blev dråbevis sat til en suspension af lithiumaluminiumhydrid (22,0 g, 0,58 mol) i Et20 (800 ml). Reaktionsblandingen blev omrørt i 45 minutter, og en måttet 25 vandig opløsning af Na2SO^ (110 ml) blev forsigtigt tilsat.
Den fremkomne suspension blev filtretet, filtratet blev behandlet med etherisk HCl og koncentreret i vakuum til dannelse af produktet (37,6 g), der blev anvendt uden yderligere rensning. 1 H NMR-data (CD3COCD3)(250 MHz): l,26,m,6H, 2,36,m,lH, 30 3,586,m,IH, 4,986,m,2H, 7,786, m, (NH2) · DK 172736 B1 24 EKSEMPEL 2.
2(RS),3(SR)-N-[3-(4-methyl-l,lf1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
a. 2(RS),3(SR)-1-[(phenylmethoxy) carbonyl]-N-[3-(4-methyl- 1,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
5 En opløsning af isobutylchlorformiat (11,01 g, 0,08 mol) i tør THF (30 ml) blev sat dråbevis i løbet af 5 minutter til en forud afkølet opløsning (~15°C) af CBZ-L-prolin (19,21 g, 0,077 mol) og N-methylmorpholin (8,18 g, 0,081 mol) i THF (300 ml) under en nitrogenatmosfære. Reaktionsblandingen blev omrørt ved -15°C 10 i 15 minutter. Reaktionstemperaturen blev så reduceret til -40°C, og en opløsning af en del af produktet fra eksempel lc. (16,00 g, 0,077 mol) og N-methylmorpholin(8,18 g, 0,081 mol) i THF (200 ml) blev sat dråbevis til reaktionen. Reaktionsblandingen blev omrørt ved -40°C i en time og fik så lov gradvis at opvarme til 15 stuetemperatur og blev omrørt i yderligere en time. Reaktionen blev filtreret og koncentreret i vakuum. Den fremkomne sirup blev opløst i CHCl^ og vasket med vandig 20% citronsyre (to gange med 75 ml hver). Det organiske lag blev koncentreret under vakuum til dannelse af det rå produkt som en hvid skyet sirup.
20 Det rå produkt blev tritureret med ether:hexan (1:2) til dannelse af tre portioner af produktet som et hvidt pulver (17,11 g).
TLC, R^ = 0,47, silicagel, MeOHiCHCl^ (3:97), smeltepunkt 152 -154°C, HPLC, tR = 14,06, 16,63, 18,23, 19,00, Zorbax ® ODS analytisk søjle, H20:CH^CN (70:30), strømningshastighed = 25 3 ml/min.
b. 2(RS),3(SR)-N-[3-(4-methyl - 1,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl))-L-prolinamid.
Produktet fra eksempel 2a (2,00 g, 4,97 mmol) blev opløst i abso- i DK 172736 B1 25 lut ethanol (50 ml), 10% Pd/C (0,5 g) blev tilsat, og reaktionsblandingen blev hydrogenolyseret (310.126,53 Pascal, 45 psi hydrogen) i 3 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev filtreret gennem Celite ®, og opløsningsmidlet blev 5 fjernet under vakuum til dannelse af produktet (1,36 g), der blev anvendt uden yderligere rensning.
EKSEMPEL 3.
2(RS),3(SR) -L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,l,l-trifluor-2-hydroxy-pentyl)]-L-prolinamid.
10 a. N—[(phenylmethoxy)carbonyl]—L—valyl—L—prolinmethylester.
1-hydroxybenzotriazol (163,3 g, 1,2 mol) blev sat til en forud afkølet (0°C) opløsning af N-benzyloxycarbonyl-L-valin (151,8 g, 0,6 mol) i DMF (1,3 liter) og omrørt i 15 minutter. En suspension af L-prolinmethylester-hydrochlorid (100,0 g, 0,6 mol) og 15 TEA (64,2 g, 0,63 mol) i DMF (0,7 liter) blev tilsat, efterfulgt af DCC (137,1 g, 0,66 mol). Reaktionsblandingen blev omrørt i 3 timer ved 0°C og derefter ved stuetemperatur i 3 dage. Reaktionsblandingen blev filtreret, og filtratet blev koncentreret i vakuum. Remanensen blev blandet med EtOAc (0,75 liter) og 20 filtreret. Filtratet blev vasket i rækkefølge med 20% vandig citronsyre (0,75 liter), mættet vandig NaHCO^ og saltvand.
Den organiske fase blev tørret over MgSO^, filtreret og koncentreret under vakuum til dannelse af det rå produkt (271,3 g). Produktet blev renset ved lynkromatografi på silicagel under 2 5 anvendelse af en gradient-eluering,begyndende med Ct^C^ og afsluttende med MeOHiCI^C^ (4:96) til dannelse af produktet (218,1 g). TLC, Rf = 0,48, silicagel, MeOH:CHCl3 (5:95).
b. N-[ (phenylmethoxy)carbonyl]-L-valyl-L-prolin.
Til en opløsning af en del af produktet fra eksempel 3a (158,8 g, DK 172736 B1 26 0,438 mol) i MeOH (1,6 liter) blev sat 1 N vandig NaOH (500 ml), og opløsningen blev omrørt ved stuetemperatur i 17 timer. 1 N vandig NaOH (100 ml) blev tilsat, og omrøringen blev fortsat i 5 timer. Yderligere 1 N vandig NaOH (50 ml) blev tilsat, og 5 reaktionsblandingen blev omrørt natten over. Reaktionsblandingen blev koncentreret under vakuum til fjernelse af MeOH. H^O (1,0 liter) blev tilsat, og den vandige opløsning blev ekstraheret med Et20. Den vandige opløsning blev syrnet med 1 N vandig HCl (700 ml) og ekstraheret med EtOAc. EtOAc-ekstrakterne blev 10 vasket med saltvand, tørret over Na^SO^, filtreret og koncentreret i vakuum til dannelse af produktet (159,2 g). TLC,
Rf = 0,34, silicagel, MeOH:CHCl3:AcOH (5:94:1).
c. 2(RS),3 (SR)- [ (phenylmethoxy)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl- 1,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
15 Isobutylchlorformiat (77,3 g, 0,566 mol) blev sat til en forud afkølet (-15°C) opløsning af N-methylmorpholin (59,25 g, 0,566 mol) og produktet fra eksempel 3b (197,2 g, 0,566 mol) i tør THF (2,5 liter), og reaktionen blev omrørt i 10 minutter. Temperaturen blev reduceret til -40°C, og N-methylmorpholin 20 (59,25 g, 0,566 mol) blev tilsat, efterfulgt af dråbevis tilsæt ning af en opløsning af produktet fra eksempel lc (117,5 g, 0,566 mol) i THF (2,5 liter). Reaktionen fik lov at opvarme til stuetemperatur og blev omrørt i 3 dage. Reaktionsblandingen blev filtreret og filtratet koncentreret under vakuum. Remanen-25 sen blev opløst i EtOAc og vasket i rækkefølge med H2O, 1 N vandig HCl og saltvand. Det organiske lag blev tørret over Na2SO(j, filtreret og koncentreret til dannelse af det rå produkt (267,8 g). Produktet blev renset ved lynkromatografi på silicagel under anvendelse af en gradient-eluering af THF:toluen (5:95) 30 til THF:toluen (25:75) til dannelse af produktet (183,8 g).
TLC, = 0,4, silicagel, THF:toluen (20:80).
i DK 172736 B1 27 d. 2(RS),3(SR)-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
En blanding af en del af produktet fra eksempel 3c (36,7 g, 0,073 mol) og 10% Pd/C (10%, 50%, vådt af vand) i EtOH (0,6 li-5 ter) blev hydrogeneret på et Parr rysteapparat (303.924 Pascal, 3 atm., H2). Efter en time blev reaktionsbeholderen evakueret og igen sat under tryk med Efter yderligere 0,5 time blev reaktionsblandingen filtreret gennem Celite ^ og koncentreret i vakuum til dannelse af produktet (26,0 g). TLC, R^ = 0,16, 10 silicagel, MeOH:CHCl3 (5:95).
EKSEMPEL 4.
2(RS),3(SR)-3-amino-4-methyl-l,l,1-trifluor-2-pentanol-hydrochloridsalt.
a. 2-methyl-l-nitropropan.
15 En alternativ metode til fremstilling af forbindelsen fra eksempel la er følgende:
En 5-liters,3-halset, rundbundet kolbe blev udstyret med mekanisk omrører, termometer, skilletragt og N2~indgangsrør. Kolben blev fyldt med AgN02 (1006,8, 6,54 mol) i Et20 (2,5 liter), 20 og isobutyljodid (927,2, 5,03)mol blev anbragt i skilletragten.
Både kolben og skilletragten blev indhyllet i aluminiumfolie for at beskytte reaktionen mod lys. Efter at den omrørte suspension var afkølet til ca. 5°C (isbad), blev påbegyndt dråbevis tilsætning af jodidet i løbet af 2 timer. Reaktionstempera-25 turen blev holdt på 5°C eller derunder under hele tilsætningen.
Efter endt tilsætning blev reaktionsbeholderen pakket i is og fik lov at opvarme langsomt til stuetemperatur natten over. NMR-analyse af en portion taget af reaktionsblandingen efter 48 timers omrøring viste, at al isobutyljodidet var forbrugt.
DK 172736 B1 28
Reaktionsblandingen blev filtreret gennem Celite® for at fjerne sølvsalte, og filterkagen blev vasket med Et20 (3 x 500 ml). De forenede filtrater blev tørret over MgS04, filtreret og koncentreret på en roterende fordamper (badtemperatur = 5 35°C) til ca. 600 ml. Fraktioneret destillation (atmosfæretryk) (forsigtighed: potentielt eksplosivt) gav den rensede nitroforbindelse (350,4 g, 68% udbytte), kogepunkt 135 - 142°C.
b. 2(RS),3(SR)-4-methyl-3-nitro-l,1,1-trifluor-2-pentanol.
En 3-liters, 3-halset, rundbundet kolbe, udstyret med mekanisk 10 omrører og N2~indgangsrør, blev fyldt med ^CO-j (470,0 g,
3,4 mol), produktet fra eksempel 4a (350,0 g, 3,4 mol) og til slut trifluoracetaldehyd-ethylhemiacetal (708,0 g, 4,4 mol). Blandingen blev omrørt kraftigt ved stuetemperatur i 76 timer, på hvilket tidspunkt ^"H-NMR viste næsten fuldstændig forbrug af 15 nitroalkanen. Reaktionsblandingen blev fortyndet med CH^Cl og filtreret. Filtratet blev behandlet med vandig HCl til pH = 3. Lagene blev adskilt, og det vandige lag blev vasket med CH2C12 (500 ml). De forenede CH2Cl2-portioner blev vasket med H20 (1 liter) og saltvand (1 liter). Tørring (MgSO^) og 20 koncentration gav 854,6 g råt produkt som en gul olie. *H-NMR
viste de to diastereomere nitroalkoholer (der findes i forholdet ca. 3:1, kvantificeret ved integration af alkoholprotonerne), som konsekvent forekommer i intervallet 56,0 - 6,5, når målingen udføres i acetone-d^, forurenet med opløsningsmidler og små 25 mængder af udgangsmaterialer.
Destillation ved reduceret tryk gav følgende fraktioner: DK 172736 B1 29 vægt kp. (°c) - A 191,7 g 42° - 50°C/atm. S.M. + opløsnings- B 34,8 g 35°/l Torr - 45°/0,5 Torr midler C 213,6 g 45°/0,5 Torr - 95°/l,5 Torr D 337,8 g 95°/l,5 Torr - 105°/2 Torr 5 E 114,0 g - opfangede flygtige stoffer.
For at forenkle rensning i følgende syntetiske trin blev det tilstræbt på dette punkt at få det vigtigste diastereomere par i en i hovedsagen ren tilstand og at sende kun dette materiale gennem de følgende trin. Det vigtigste diastereomere par kry-10 stalliserer af blandingen af diastereomerer og af kold pentan og giver farveløse nåle. Fraktion C fra ovenstående destillation fik lov at krystallisere natten over i køleskab.
Produktet blev opsamlet, vasket med kold pentan og tørret i flere timer i vakuumovn (forsigtighed! Dette materiale er noget 15 flygtigt,og betydelige mængder kan gå tabt under længere tids vakuumbehandling) til dannelse af 52,0 g i hovedsagen rent materiale. Fraktioner, der (ifølge NMR) vides at indeholde betydelige mængder af den ønskede isomer, blev gentagne gange behandlet på denne måde (og redestilleret til at give nye frak-20 tioner, der var yderligere beriget på den ønskede diastereomer) for til at slut at få ialt 197,7 g af i hovedsagen ren nitro-alkohol. Denne mængde repræsenterer den udførte arbejdstype, men afspejler ikke den øvre grænse for udbyttet.
c. 2(RS),3(SR)-3-amino-4-methyl-l,l,l-trifluor-2-pentanol-25 hydrochloridsalt.
Vandfri EtOH (232 ml) blev sat til 10% Pd/C-katalysator (2,30 g) under N2*· Produktet fra eksempel 4b (22,93 g, 0,144 mol) blev tilsat, og den fremkomne blanding blev anbragt i et Parr hydrogeneringsapparat (ca. 480.000 Pascal, 55 psi H2) natten over.
30 Katalysator blev fjernet ved filtrering gennem Celite ®. Filterkagen blev så vasket med EtOH. HCl-gas blev boblet gennem de DK 172736 B1 30 forenede filtrater, indtil der var absorberet ca. 8 g (ca.
0,22 mol). Opløsningen blev koncentreret på en roterende fordamper, og den fremkomne remanens blev koncentreret flere gange af Et20 til dannelse af et hvidt fast stof. Det faste stof 5 blev vasket med Et2<0 og tørret natten over i vakuumovn til dannelse af 20,79 g (88%) amin-hydrochlorid. Med hensyn til smeltepunkt, da blødgøres materialet ved langsom opvarmning ved 90°C og smelter ved 118 - 120°C. Når en prøve neddyppes i et bad, der er forvarmet til 110°C, smelter den øjeblikkeligt.
10 ( *Mindre aktive katalysatorer (f.eks. 10% Pd/BaS04, våd 10%
Pd/C) eller utilstrækkelige reaktionstider kan føre til produktion af et eller flere biprodukter).
EKSEMPEL 5.
2(RS),3(SR)-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,l-trifluor-2-hydroxy-15 penty1)]-L-prolinamid.
a. N-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-valyl-L-prolinmethylester.
En opløsning af CBZ-L-valin (100,0 g, 0,40 mol) i DMF (1 liter, tørret over sigter) blev sat til en 3-liters, 3-halset, rundbundet kolbe, udstyret med mekanisk omrører, ^-indgangsrør og termo-20 meter. Reaktionsblandingen blev afkølet til 0°C, og HOBT-
hydrat (108,1 g, 0,80 mol) blev tilsat. Ca. 15 minutters omrøring blev tilladt før tilsætning af en DMF (500 ml)-opslæmning af L-prolinmethylester-hydrochlorid (66,2 g, 0,40 mol) og TEA (41,8 g, 0,42 mol) i én portion. Yderligere DMF (500 ml) blev 25 anvendt til at fuldende overførslen af opslæmningen. DCC
(90,8 g, 0,44 mol) blev sat til reaktionen og blev vasket med DMF (100 ml). Reaktionen blev omrørt i 3 timer ved 0°C, før den fik lov at opvarme til stuetemperatur og blev omrørt i 3 dage. Reaktionsblandingen blev så filtreret og filtratet kon- i DK 172736 B1 31 centreret ved reduceret tryk. Filterkagen blev vasket med EtOAc 83x1 liter), og koncentration af det fremkomne filtrat gav materiale, som blev forenet med remanensen fra koncentrationen af DMF-opløsningen. Den forenede produktblanding (ca. 2,5 li-5 ter) blev fortyndet med Et20 (2 liter) og lagret i køleskab natten over. Bundfaldet blev fjernet ved filtrering. Når filtratet blev vasket med 1 N HC1 (1 liter), dannedes yderligere bundfald, som blev fjernet ved filtrering. Filtratet blev så vasket med 1 N HC1 (1 liter), H20 (0,5 liter), mættet NaHCO^ 10 (2x1 liter) og saltvand (0,5 liter). Tørring over MgSC>4 og koncentration gav 587,2 g råt produkt. Dette materiale blev lynkromatograferet på silicagel (3,5 kg) med gradienteluering (CH2CI2 til 5% MeOH:CH2Cl2 (5:95)). Blandede fraktioner blev underkastet gentagen kromatografi for at fjerne urenheder.
15 Forening af fraktionerne indeholdende det ønskede produkt gav 500,7 g (87%) materiale forurenet med en lille mængde urenhed med lav Rf. TLC, = 0,37, silicagel, Et20:hexan (3:1),
Rf = 0,53, silicagel, MeOH:CHCl3 (5:95).
b. N-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-valyl-L-prolin.
20 En methanolisk (4 liter) opløsning af produktet fra eksempel 5a (500,7 g, 1,38 mol) blev fyldt i en 12-liters, 3-halset, rund-bundet kolbe, udstyret med en mekanisk omrører og et ^-indgangs-rør. Til den omrørte opløsning blev sat 1 N NaOH (1,4 liter), der bragte pH-værdien op på ca. 13. Efter omrøring af reaktionen 25 i 3 timer faldt pH-værdien til 11. Yderligere 1 N NaOH (0,1 liter) blev anvendt til at bringe pH-værdien op på 12, og reaktionen blev omrørt natten over ved stuetemperatur. MeOH blev fjernet fra reaktionsblandingen ved koncentration på en roterende fordamper. Under fjernelsen af opløsningsmidlet blev der 30 tilsat 1 liter Η20 for at reducere koncentrationen af basen.
Den vandige opløsning blev vasket med Et20 før syrning med 1 N HCl (1,5 liter) til en pH-værdi på ca. 3,5. Lagene blev adskilt, og det vandige lag blev ekstraheret med EtOAc (3x1 li- 32 DK 172736 B1 ter) · De forenede organiske faser blev vasket med saltvand (1 liter), tørret (MgSO^) og koncentreret til dannelse af 493,0 g (100%) produkt som et hvidt fast stof. TLC, = 0,51, silicagel, MeOH:CHCl3 (5:95) med tilsat AcOH.
5 c. 2(RS),3(SR)-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-1,1,l-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
Produktet fra eksempel 5b (105,3 g, 0,302 mol) blev opløst i tør THF (1,5 liter) under N^ i en 3-liters, 3-halset, rundbun-det kolbe, udstyret med mekanisk omrører, termometer, N2~ind~ 10 gangsrør og skilletragt. Opløsningen blev afkølet til -35°C og behandlet med 1 ækvivalent (34 ml), 0,309 mol) NMM. Iso-butylchlorformiat (39 ml, 0,307 mol) blev tilsat dråbevis i løbet af 20 minutter, medens temperaturen blev holdt på -35°C eller derunder. Efter endt tilsætning blev reaktionen omrørt 15 i en time ved -35°C. Et andet ækvivalent NMM (34 ml) blev tilsat. Produktet fra eksempel 4c (62,8 g, 0,302 mol) i THF (300 ml) blev derefter tilsat med en sådan hastighed, at temperaturen blev holdt på -35°C eller derunder. Efter endt tilsætning blev temperaturen holdt på -35°C eller derunder i en 20 time, før blandingen fik lov at opvarme til stuetemperatur under omrøring natten over. Reaktionsblandingen blev filtreret, og filterkagen blev vasket med THF (1 liter). De forenede filtrater blev koncentreret til dannelse af 189 g råt produkt.
Dette materiale blev lynkromatograferet på silicagel (5000 ml) 25 og elueret med THF:toluen (1:9). Da først produktet begyndte at eluere, blev opløsningsmidlets polaritet ændret på gradient måde: THF:toluen (15:85), THF:toluen (20:80) og til sidst
MeOH:THF:toluen (2,5:30:70) (anvendelse af MeOH blev minimeret for at forhindre eluering af urenheder med lav R^). Koncentra-30 tion af søjlefraktionerne, efterfulgt af tørring i vakuum natten over gav 12,0 g (8%) svagt urent produkt og 131,6 g (87%) i hovedsagen rent materiale. (Note: Når opløsninger af dette materiale blev bragt til fuldstændig tørhed, gav de et skum, DK 172736 B1 33 som til slut størknede under længere tids vakuumbehandling.
Der må udvises forsigtighed ved udførelse af denne operation i en tilstrækkelig stor kolbe til at kunne optage skummets udvidelse) . TLC, Rf = 0,25, silicagel, MeOH:CHCl3 (5:95), 5 Rf = 0,37, silicagel, THF:toluen (20:80). Ved let udpletning af materialet opspaltedes de to isomerer til dannelse af pletter ved Rf = 0,37 og Rf = 0,46, silicagel, THF:toluen (20:80).
(Note: Opretholdelse af de indre temperaturer, der er nævnt ved denne fremgangsmåde, synes at være af afgørende betydning 10 for at opnå i hovedsagen rent produkt).
d. 2(RS),3(SR)-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
Produktet fra eksempel 5c (131,6 g, 0,262 mol) blev opløst i EtOH (750 ml) og forenet med 10% Pd/C-katalysator (50% H20, 15 13,0 g) under N2 i en stor Parr hydrogeneringsflaske. Reak tionsblandingen blev rystet under 480.000 Pascal, 55 psi atmosfære af H2 på et Parr apparat. Tryk under H2 blev fortsat, indtil der ikke blev iagttaget yderligere optagelsé. Undersøgelse af reaktionen ved TLC viste fuldstændigt forbrug af udgangs-20 materialet. Reaktionsblandingen blev filtreret gennem Celite® og koncentreret til et skum. Dette materialet blev tritureret med Et20, filtreret og tørret til dannelse af 81,4 g (84%) af et lysegråt fast stof. TLC, Rf = 0,41, silicagel, CHCl3:MeOH (10:1) .
25 EKSEMPEL 6.
3S(eller R)phenylmethoxycarbonyl-L-valyl-N- [3-(1,1,1-trifluor- 4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R*=CH(CH^)CH^, r2=ch (ch3)ch3, r3=øch2, , A=OCO).
DK 172736 B1 34 a. 2R,3S-3-amino-l,1,1-trifluor-4-methy1-2-pentanol-D-vinsyre- salt.
Amin-hydrochlorid (20 g) , udviklet som i eksempel 4e, blev opløst i H20 og neutraliseret med fast NaHCO^. Den vandige opløsning blev ekstraheret flere gange med CH2C12· De forenede 5 ekstrakter blev tørret (Na2SO^) og koncentreret til dannelse af den frie aminbase (14,04 g) som et hvidt fast stof. Dette materiale blev forenet med D-vinsyre (12,31 g) i kogende vandfri EtOH (100 ml), og den fremkomne skyede opløsning blev filtreret varm gennem filtrérpapir. Opløsningen blev først af-10 kølet langsomt til stuetemperatur natten over og derefter anbragt flere timer i køleskab. Bundfaldet blev opsamlet på porcelænsfiltertragt, vasket med kold EtOH og tørret natten over i vakuumovn ved 40°C. En prøve af det tørrede hvide faste stof (4,56 g) smeltede ved 127 - 130°C. Det meste af dette materiale 15 (4,05 g) blev opløst i kogende EtOH (20 ml), og opløsningen blev langsomt afkølet til stuetemperatur. Det hvide gelagtige faste stof, som aflejredes, blev opsamlet i en sintret glastragt og vasket med flere portioner EtOH. Tørring i vakuumovn ved 40°C i flere timer gav et hvidt fast stof, smeltepunkt 132 - 134°C.
20 b. 2S,3S-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor- 2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH(CH3)CH3, R2 =CH(CH2)CH3, R3=ØCH2, A=OCO).
Syre fremstillet ifølge eksempel 5b (1,00 g, 2,87 mmol) blev opløst i tør THF (16 ml)under N2 i en 50 ml, 3-halset, rundbundet 25 kolbe, udstyret med termometer, N2~indgangsrør, skillevæg og magnetisk omrøringsstang. NMM (0,34 ml, 3,09 ml) blev tilsat, og den fremkomne omrørte opløsning blev afkølet til en indre temperatur på -35°C. Isobutylchlorformiat (0,37 ml, 2,85 mmol) blev tilsat i løbet af 2 minutter, idet den indre temperatur al-30 drig fik lov at stige over -35°C. Reaktionen blev omrørt i en time ved -45 til -35°C. D-vinsyresaltet fra eksempel 6a (0,92 g, j DK 172736 B1 35 2,86 mmol) i en blanding af THF (5 ml) og DMSO (2 ml) blev behandlet med NMM (0,68 ml), og den skyede opløsning blev sat til reaktionsblandingen med en sådan hastighed, at temperaturen blev holdt under -40°C. Reaktionen blev omrørt ved -45 til 5 -15°C i en time, før den fik lov at opvarme til stuetemperatur natten over. Blandingen blev fortyndet med CHCl^ og derpå vasket (H20, mættet aq NaHCO^), tørret (Na2S04) og koncentreret til dannelse af titelproduktet (1,15 g, 80%) som et hvidt fast stof. 1H-NMR-spektret af dette materiale i DMSO-dg viste en 10 dublet ved <5 6,43, som er den rigtige kemiske forskydning af alkoholprotonen i materialet med den tillagte relative konfiguration.
c. 3S(eller R)phenylmethoxycarbonyl-L-valyl-N-[3—(1,1,1— trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, 15 r1=ch(ch3)ch3, r2=ch(ch3)ch3, r3=øch2, A=OCO).
En del af alkoholen, udviklet i eksempel 6b (0,25 g, 0,5 mmol), blev opløst i CH2C12 og behandlet med Dess-Martin perjodinan (0,42 g, 0,99 mmol) i en enkelt portion. TFA (0,08 ml, 1,04 mmol) blev tilsat, og den svagt uklare blanding fik lov at blive 20 omrørt natten over. Der dannedes en hvid suspension i reaktionsblandingen. Udgangsmateriale var i hovedsagen fraværende som påvist ved TLC. Vand indeholdende Na2S203 (0,78 g) og NaHC03 (0,42 g) blev tilsat og omrørt med reaktionsblandingen. Når det organiske lag eventuelt var fri for den hvide faste suspen-25 sion, blev det skilt fra den vandige fase. Det organiske lag blev vasket (mættet aq NaHCO^), tørret (Na2S04) og koncentreret til dannelse af en olie. Dette materiale blev genopløst og koncentreret af Et20/hexan til dannelse af et hvidt fast stof (0,21 g, 84% udbytte). Omkrystallisation af varm Et20/hexan 30 gav en i hovedsagen ren prøve af titelforbindelsen som en i hovedsagen ren isomer, der udviste en enkelt top på HPLC med en tilbageholdelsestid identisk med den af en autentisk prøve af titelproduktet, fremstillet som beskrevet i eksempel 117. HPLC, tR = 5,65, Col A, H20:CH3CH (55:45), FR =2,0.
36 DK 172736 B1 EKSEMPEL 7.
1-[2-(tricyklo[3.3.1.dec-l-yl)ethoxycarbonyl]-N-[3-(RS)- 3-(4-methyl-l,1,l-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
a. 4-nitrophenyl-2-(tricyklo[3.3.1.1 3' ^ ]dec-l-yl)ethylcarbonat.
Til en opløsning af p-nitrophenylchlorformiat (1,17 g, 5,82 mmol) 5 i Et20 (25 ml) ved 0°C blev sat pyridin (5 ml), efterfulgt af tilsætning af 2-(1-adamantyl) ethanol (1,00 g, 5,54 mmol) i EtjO (20 ml) dråbevis i løbet af en time. Den fremkomne blanding blev omrørt ved stuetemperatur i 12 timer og skilt mellem HjO og Et20. Det etheriske lag blev vasket med 5% vandig HCl, pH 7,0 10 phosphatstødpude, tørret over MgSO^, filtreret, og opløsningsmidlerne blev fjernet i vakuum. Det rå produkt blev renset ved lynkromatografi på silicagel og eluering med EtOAcrhexan (5:95) til dannelse af produktet (1,10 g) som et hvidt pulver. TLC, R^ = 0,29, silicagel, EtOAc:hexan (5:95).
15 b. 1-[2- (tricyklo[3.3.1.I3'^]dec-l-yl)ethoxycarbonyl]-N-[2(RS), 3(SR)-3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)1-L-prolinamid.
En opløsning af produktet fra eksempel 7a (731,0 mg, 2,98 mmol), et produkt fra fremgangsmåden i eksempel 2b (500 mg, 1,80 mmol) og ^CO-j (2,57 g, 18,6 mmol) i DMF (50 ml) blev omrørt ved stue-20 temperatur i 18 timer, filtreret, og opløsningsmidlet blev fjernet under vakuum. Remanensen blev optaget i EtOAc, vasket med 3 portioner 10% vandig NaOH, tørret over fast ^003:^2804 (10:90), filtreret, og opløsningsmidlet blev fjernet ved reduceret tryk. Det rå produkt blev kromatograferet på silicagel og 25 eluering med MeOH^HCl^ (1:99). Det fremkomne faste stof blev vasket med hexan til dannelse af produktet (340 mg) som et hvidt fast stof. HPLC, tD = 5,86, 6,38, Zorbax ®ODS analytisk søjle, strømningshastighed = 2 ml/min., CH-jCNi^C^TFA (70:30:0,1).
DK 172736 B1 37 c. 1-[2-(tricyklo[3.3.1.13,7]dec-l-yl)ethoxycarbonyl]-N-3 (RS) -[3-(4-methyl-l,1,l-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
Til en opløsning af oxalylchlorid (1,09 g, 8,60 mmol) i tør CH2CI2 (15 ml), afkølet til -43°C, blev sat DMSO (1,37 g, 5 17,3 mmol) i tør CHjClj (10 ml) dråbevis i løbet af 15 minutter.
Opløsningen blev omrørt i 10 minutter, og produktet fra eksempel 7b (340 mg, 0,72 mmol) blev tilsat på samme måde i løbet af 30 minutter. Efter omrøring af opløsningen ved -4 3°C i yderligere en time blev TEA (4,80 ml, 34,5 mmol) tilsat langsomt, 10 og opløsningen fik lov at opvarme langsomt til stuetemperatur i løbet af 2 timer. Opløsningen blev fortyndet med CHjC^f vasket med 10% vandig HC1, 5% vandig NaOCl, tørret over fast K2C02*Na2S04 (10:90), filtreret, og opløsningsmidlet blev fjernet under vakuum. Det rå produkt blev renset ved to på hinan-15 den følgende lynkromatografier på silicagel og eluering med
MeOHjCHCl^ (0,1:99,9) og EtOAc:hexan (1:5) til dannelse af produktet (130 mg) som et hvidt fast stof. TLC, R == 0,50, silicagel, MeOH:CHClj (5:95), HPLC, tR = 5,31, Zorbax^®ODS analytisk søjle, strømningshastighed = 2 ml/min. , CH^CNiI^OiTFA (70:30: 20 0,01).
Analyse beregnet for C24H35N2F3°4'0,25H2O: C 60'43' h 7'50' n 5*87-Fundet: C 60,50, H 7,45, N 5,74.
EKSEMPEL 8.
25 3(RS)-1-(4-phenylbutylcarbonyl)-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor- 2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
a. 2(RS),3 (SR)-1-(4-phenylbutylcarbonyl)-N-(3-(4-methyl-l,1,1-tri fluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
En opløsning af 5-phenylvalerianesyre (0,330 g, 1,86 mmol) og DK 172736 B1 38 N-methylmorpholin (0,280 g, 2,79 mmol) i THF (100 ml) blev afkølet til -15°C. En opløsning af isobutylchlorformiat (0,280 g, 2,05 nunol) i THF (5 ml) blev dråbevis tilsat, og blandingen blev omrørt ved -15°C i 10 minutter, hvorefter tempe-5 raturen blev sænket til -40°C, og en opløsning af et produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 2b (0,500 g, 1,86 mmol) i THF (25 ml) blev dråbevis tilsat. Blandingen blev omrørt i en time ved -40°C og natten over ved stuetemperatur. Blandingen blev filtreret, og filtratet blev kon-10 centreret i vakuum. Det rå produkt blev renset ved lynkromatografi på silicagel og eluering med MeOH:CHCl3 (3:97) til dannelse af produktet (0,60 g) som et hvidt fast stof. TLC, = 0,40- 0,51, silicagel, MeOH:CHCl3 (3:97).
b. 3(RS)-1-(4-phenylbutylcarbonyl)-N-(3-(4-methyl-l,1,1-15 trifluor-3-oxopentyl))-L-prolinamid.
En opløsning af DMSO (4,22 g, 54,0 nunol) i tør CH2C12 (80 ml) blev sat dråbevis i løbet af 10 minutter til en forud afkølet (-60°C) omrørt opløsning af oxalylchlorid (3,43 mg, 27,0 mmol) i CH2C12 (10 ml) under en nitrogenatmosfære. Temperaturen over-20 steg aldrig -55°C under tilsætningen. Blandingen blev omrørt ved -60°C i 15 minutter, og en opløsning af produktet fra eksempel 8a (0,580 g, 1,35 mmol) i CH2C12 (100 ml) blev tilsat dråbevis i løbet af 10 minutter ved -60°C. Reaktionsblandingen blev omrørt ved -60°C i en time. Diisopropylethylamin (6,98 g, 25 54,0 mmol) blev tilsat dråbevis i løbet af 10 minutter ved -60°C. Reaktionsblandingen blev omrørt i en time, medens den opvarmedes til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev vasket i rækkefølge med to portioner 1 N vandig HCl og saltvand og koncentreret under vakuum til dannelse af det rå produkt (0,85 g) 30 son en orange sirup. Det rå produkt blev renset ved tre på hinanden følgende lynkromatografier på silicagel og eluering med henholdsvis 1) MeOH:CHCl3 (3:97), 2) MeOH:CHCl3 (3:97) og 3) Et20:hexan (90:10) til dannelse af produktet (319 mg) som et i DK 172736 B1 39 hvidt skum. TLC, R{ ~ O,33-0,40, silicagel, Et20:hexan (90:10), HPLC, tR = 17,93, 18,55, Zorbax® ODS analytisk søjle, H20: CH^CN (55:45), strømningshastighed = 2 ml/min.
Analyse beregnet for 5 C22H29N2°3F3,1,25H20: C 58'85' H 7»07, N 6,24.
Fundet: C 58,91, H 6,83, N 6,13.
EKSEMPEL 9.
3 (RS)-l-[(phenylmethoxy)carbonyl]-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
10 En opløsning af dimethylsulfoxid (0,890 g, 11,4 mmol) og tør methylenchlorid(5 ml) blev dråbevis sat til en omrørt opløsning af oxalylchlorid (0,75 g, 5,9 mmol) og tør methylenchlorid (5 ml) ved -60°C under nitrogen. Reaktionsblandingen fik lov at opvarme til -25°C, og derefter blev en opløsning af et produkt frem-15 stillet ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 2a (0,200 g, 0,497 mmol) og tør methylenchlorid (5 ml) tilsat.
Den fremkomne blanding blev omrørt ved -25°C i 1/2 time. Tri-ethylamin (1,94 g, 19,2 mmol) blev tilsat, og reaktionsblandingen fik lov at opvarme til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev 20 filtreret. Filtratet blev inddampet. Remanensen blev opløst i chloroform. Chloroformopløsningen blev vasket i rækkefølqe med 1 N vandig HCl, derpå saltvand og tørret over Na2S04.
Opløsningen blev filtreret. Opløsningemidlet blev fjernet under vakuum til dannelse af det rå produkt (0,147 g). Det rå produkt 25 blev renset ved lynkromatografi på silicagel med en eluent af CHCl^rMeOH (97:3) til dannelse af produktet (0,11 g). TLC,
Rf = 0,25, CHC13:EtOAc (90:10).
Analyse beregnet for C19H23F3N2°4,1,5H20: C 53'39' H 6'13' N 6,55.
30 Fundet: C 53,55, H 5,78, N 6,56.
40 DK 172736 B1 EKSEMPEL 10.
2 (RS),3(SR)-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,l-trifluor-2-hydroxy-pentyl)]-L-prolinamid.
a. N-[(phenylmethoxy) carbonyl]-L-valyl-L-prolinmethylester.
5 Fremgangsmåden i eksempel 3a blev gentaget.
b. N-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-valyl-L-prolin.
Fremgangsmåden i eksempel 3b blev gentaget under anvendelse af materialet fra eksempel 10a.
c. 2-methyl-l-nitropropan.
10 Fremgangsmåden i eksempel la blev gentaget.
d. 2(RS),3(SR)-4-methyl-3-nitro-l,1,1-trifluor-2-pentanol.
Fremgangsmåden i eksempel lb blev gentaget under anvendelse af materialet fra eksempel 10c.
e. 2(RS),3(SR)-3-amino-4-methyl-l,1,1-trifluor-2-pentanol- 15 hydrochloridsalt.
Fremgangsmåden i eksempel lc blev gentaget under anvendelse af materialet fra eksempel lOd.
f. 2(RS),3(SR)-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-1, 1,1-trifluor-2-hydroxypentyl-L-prolinamid.
20 Fremgangsmåden i eksempel 3c blev gentaget under anvendelse af forbindelserne fra eksemplerne 10b og lOe.
DK 172736 B1 41 g. 2(RS),3(SR)-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,l-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
Fremgangsmåden fra eksempel 3d blev gentaget under anvendelse af forbindelsen fra eksempel lOf.
5 EKSEMPEL 11.
3(RS)-[(phenylmethoxy) carbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
a.-f. Trin a-f blev gentaget som forklaret i eksemplerne lOa-f.
g. 3(RS)-[(phenylmethoxy) carbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyΙ-ΙΟ 1, l,l-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
En opløsning af DMSO (12,46 g, 159,50 mmol) i tør CH2C12 (12 ml) blev dråbevis i løbet af 10 minutter sat til en forud afkølet (-60°C) omrørt opløsning af oxalylchlorid (10,12 g, 79,75 mmol) i CH2C12 (160 ml) under en nitrogenatmosfære. Tem-15 peraturen af reaktionen oversteg aldrig -50°C under tilsætnin gen. En opløsning af alkoholen i eksempel llf (2,00 g, 3,99 mmol) i CH2Cl2 (160 ml) blev tilsat dråbevis i løbet af 10 minutter ved -60°C. Reaktionsblandingen blev omrørt ved -60°C i en time. Diisopropylethylamin (20,62 g, 159,50 mmol) blev 20 tilsat dråbevis i løbet af 10 minutter ved -60°C. Reaktionsblandingen blev omrørt i en time, medens den opvarmedes til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev vasket med 1 N vandig HCl, derpå med saltvand og så koncentreret i vakuvun til dannelse af det rå produkt som en orange sirup (2,76 g). Det rå produkt 25 blev renset med tre på hinanden følgende lynkromatografier på silicagel og eluering henholdsvis med 1) ether:hexan (80:20), 2) MeOH:CHCl3 (2,5:97,5) og 3) MeOH:CHCl3 (2,5:97,5) til dannelse af produktet som et hvidt skum (0,88 g). TLC, R^ = 0,45, DK 172736 B1 42 silicagel, MeOH:CHCl3 (3:97), HPLC, tR = 6,45, 11,10,
Zorbax ® ODS analytisk søjle, ^OiCH^CN (55:45) med 0,1% trifluoreddikesyre, strømningshastighed = 2 ml/min.
Analyse beregnet for 5 C24H32N3O5F3,0,5H20: C 56,68, H 6,54, N 8,26.
Fundet: C 56,58, H 6,52, N 8,21.
EKSEMPEL 12.
3(RS)-[2-(2-oxopyrrolidinyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-1,1,1-trifluor-2-oxypentyl)]-L-prolinamid.
10 a. 4-nitrophenyl-2-(2-oxopyrrolidinyl)ethylcarbonat.
N-(2-hydroxyethyl)pyrrolidon (3,00 g, 23,2 mmol) blev opløst i diethylether (20 ml) under en nitrogenatmosfære og omrørt ved stuetemperatur. En opløsning af p-nitrophenylchlorformiat (4,68 g, 23,2 mmol) i diethylether (25 ml) blev sat dråbevis 15 til blandingen i løbet af 2 timer. Blandingen blev omrørt i yderligere 2 timer ved stuetemperatur. Blandingen blev koncentreret i vakuum til dannelse af det rå produkt (7,90 g). Det rå produkt blev renset ved lynkromatografi på silicagel med MeOH:CHCl3 (5:95) til dannelse af produktet som et hvidt pulver 20 (4,62 g). TLC, Rf = 0,51, silicagel, MeOH:CHCl3 (3:97).
b. 2(RS),3(SR)-[2-(2-oxopyrrolidinyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-1,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
Kaliumcarbonat (2,820 g, 40,80 mmol) blev sat til en opløsning af ethyl-2-pyrrolidon-p-nitrophenylcarbonat (1,20 g, 4,08 mmol) 25 og et produkt fremstillet under anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 3d (1,50 g, 4,08 mmol) i DMF (100 ml) ved stuetemperatur under en nitrogenatmosfære. Reaktionen blev omrørt natten over. Reaktionsblandingen blev fortyndet med EtOAc,og overskud i DK 172736 B1 43 af K^CO^ blev filtreret. Filtratet blev koncentreret i vakuum til dannelse af en remanens, som blev opløst i EtOAc og vasket i rækkefølge med vandig 10% NaHCO^f vand, vandig 5% citronsyre og saltvand. Den organiske fase blev tørret over Na2S04, 5 filtreret og koncentreret i vakuum til dannelse af den rå alkohol .Alkoholen blev renset ved anvendelse af lynkromatografi på silicagel med MeOHrCHCl^ (5:95) til dannelse af produktet (0,72 g). TLC, Rf = 0,46, silicagel, MeOH:CHCl3 (7:93).
c. 3(RS)-[2- (2-oxopyrrolidinyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-10 [3-(4-methyl-l,1,l-trifluor-2-oxypentyl)]-L-prolinamid.
En opløsning af DMSO (4,310 g, 55,20 mmol) i tør CH2Cl2 (6 ml) blev dråbevis i løbet af 10 minutter sat til en forud afkølet (-60°C) omrørt opløsning af oxalylchlorid (3,500 g, 27,60 mmol) i CH2C12 (80 ml) under en nitrogenatmosfære. Temperaturen af 15 reaktionen oversteg aldrig -50°C under tilsætningen. En opløsning af alkoholen fra eksempel 12b (0,720 g, 1,38 mmol) i CH^C^ (80 ml) blev i løbet af 10 minutter tilsat dråbevis ved -60°C. Reaktionsblandingen blev omrørt ved -60°C i en time.
En opløsning af diisopropylethylamin (7,13 g, 55,2 mmol) i 20 CH Cl, (50 ml) blev tilsat dråbevis i løbet af 10 minutter ved -60 C. Reaktionsblandingen blev omrørt i en time, medens den opvarmedes til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev vasket med 1 N vandig HC1 og saltvand og derpå koncentreret i vakuum til dannelse af det rå produkt som en orange sirup. Det rå 25 produkt blev renset ved lynkromatografi på silicagel med
MeOH:CHCl^ (5:95) til dannelse af produktet som et hvidt skum (0,43 g). TLC, Rf = 0,33, silicagel, MeOH:CHCl3 (5:95), HPLC, tR = 3,50, 4,63, Zorbax^ ODS analytisk søjle, H20:CH3CN (55:45), strømningshastighed * 1 ml/min.
30 Analyse beregnet for C23H35N40gF3,H20: C 51,29, H 6,92, N 10,40.
Fundet: C 51,20, H 6,86, N 10,03.
44 DK 172736 B1 EKSEMPEL 13.
3(RS)-[(2-methoxycarbonyl)ethylcarbonyl]-L-valyl-N-[3—(4— methyl-1,1,1-trifluormethyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
a. N-benzyloxycarbonyl-L-valyl-L-prolin-t-butylester.
En opløsning af N-benzyloxycarbonyl-L-valin (56,25 g, 0,244 mol) 5 og HOBT (60,67 g, 0,45 mol) i DMF (565 ml) blev afkølet til 5°C. DCC (50,89 g, 0,247 mol) blev tilsat i én portion. Blandingen blev omrørt i yderligere 15 minutter ved 5°C, og derefter blev tilsat L-prolin-t-butylester (38,36 g, 0,224 mol). Blandingen blev omrørt i yderligere 2 timer ved 5°C og derefter i 10 48 timer ved stuetemperatur. Blandingen blev filtreret og kon centreret i vakuum. Den olieagtige remanens blev opløst i EtOAc (1 liter) og vasket i rækkefølge med 20% vandig citronsyre, mættet vandig NaHCO^ og saltvand. Den organiske fase blev tørret over Na2S04, filtreret og koncentreret i vakuum 15 til dannelse af produktet (92,0 g) som et hvidt skum. TLC,
Rf = 0,9, silicagel, CHCl3:EtOAc (85:15).
b. L-valyl-L-prolin-t-butylester.
En blanding af produktet fra eksempel 13a (92,0 g, 0,227 mol) og 10% Pd/C (10 g) i EtOH (1 liter) blev hydrogeneret på et 20 Parr rysteapparat i 6 timer ved 60 psi ved stuetemperatur.
Blandingen blev filtreret gennem Celite ® og koncentreret i vakuum til dannelse af produktet (62 g) som en viskos gul olie.
TLC, Rf = 0,3, silicagel, MeOH:CHCl3 (10:90).
c. N-[2-(methoxycarbonylethylcarbonyl]-L-valyl-L-prolin-l,l-dimethylethylester.
25 1 N vandig NaOH (8,0 ml) blev sat til en forud afkølet (0°C) op løsning af produktet fra eksempel 13b (2,1 g, 7,8 mmol) i CH2C12 DK 172736 B1 45 (60 ml). Blandingen blev omrørt, og 3-carbomethoxypropionyl-chlorid (0,96 ml, 7,8 mmol) blev tilsat. Reaktionen blev omrørt kraftigt i 15 minutter ved 0°C. Opløsningen blev fjernet fra isbadet, fortyndet med H20 (30 ml) og syrnet med 1 N vandig 5 HCl. Det organiske lag blev fraskilt, og det vandige lag blev ekstraheret med CH2C12. De organiske lag blev forenet, tørret over Na2SO^, filtreret og koncentreret i vakuum. Den fremkomne rest blev renset ved lynkromatografi på en søjle af silicagel og eluering med Et20, efterfulgt af EtOAc til dannelse af pro-10 duktet (2,68 g). TLC, = 0,28, silicagel, Et20.
d. N-[2- (methoxycarbonyl)ethylcarbonyl]-L-valyl-L-prolin.
Trifluoreddikesyre (11,0 ml, 143 mmol) blev sat til en opløsning af produktet fra eksempel 13c (2,68 g, 6,98 mmol) i CH2C12 (11 ml). Blandingen blev omrørt i 4 timer og koncentreret i 15 vakuum til dannelse af produktet (2,13 g), som blev anvendt uden yderligere rensning.
e. 2(RS),3(SR)-[2-(methoxycarbonyl)ethylcarbonyl]- L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,l-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
Isobutylchlorformiat (0,85 ml, 6,5 mmol) blev sat til en forud 20 afkølet (-15°C) opløsning af N-methylmorpholin (0,71 ml, 6,5 mmol) og produktet fra eksempel 13d (2,13 g, 6,5 mmol) i THF (50 ml). Reaktionen blev omrørt i 10 minutter, og temperaturen blev reduceret til -50°C. En suspension af N-methylmorpholin (0,71 ml, 6,5 mmol) og et produkt fremstillet ved anvendelse af 25 fremgangsmåden i eksempel lc (1,39 g, 6,5 mmol) i THF (50 ml) blev tilsat i én portion, og reaktionen blev omrørt natten over, medens den opvarmede til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev filtreret og filtratet koncentreret i vakuum. Remanensen blev optaget i EtOAc og vasket i rækkefølge med 1 N vandig 30 HCl og saltvand. Det organiske lag blev tørret over Na^O^, filtreret og koncentreret i vakuum. Den fremkomne remanens blev renset ved lynkromatografi på silicagel og eluering med DK 172736 B1 '46
MeOH:CHCl^ (5:95) til dannelse af produktet (1,92 g). TLC,
Rf = 0,24, silicagel, MeOH:CHCl3 (5:95).
f. 3(RS)-[2-(methoxycarbonyl)ethylcarbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-1,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
5 En opløsning ad DMSO (11,2 ml, 0,158 mol) i CH Cl (12 ml) o * · blev langsomt sat til en forud afkølet (-60 C) opløsning af oxalylchlorid (6,9 ml, 0,079 mol) i CI^Clj (160 ml). En opløsning af produktet fra eksempel 13e (1,90 g, 3,95 mmol) i Ci^C^ (160 ml) blev sat til reaktionsblandingen og omrørt i 10 en time ved -60°C. Diisopropylethylamin (28,0 ml, 0,158 mol) blev langsomt tilsat, og reaktionen fik lov at opvarme til omgivelsernes temperatur. Opløsningen blev vasket med 1 N vandig HCl (2 x 80 ml) og saltvand. Det organiske lag blev tørret over Na2S04, filtreret og koncentreret til dannelse af det rå produkt 15 (3,5 g). Produktet blev renset ved filtrering gennem silica gel med EtOAc, efterfulgt af lynkromatografi på silicagel under anvendelse af MeOH:CHCl3 (5:95) til dannelse af produktet (1,49 g). TLC, = 0,31, silicagel, MeOH:CHCl3 (5:95), diagnostiske 1H-NMR-forskydninger (CD^SOCD^, 250 MHz): 20 0,9,m,12H, 3,54,s,3H, 3,54-3,68,m,2H, 4,34,m,lH, 4,40,m,IH, 4,48,dd,1/2H, 4,58,dd,1/2H, 8,l,d,lH, 8,58,dd,lH.
EKSEMPEL 14.
3 (RS)-[(2-carboxyethyl)carbonyl]-L-valyl-N- [3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-oxopentyl))-L-prolinamid.
25 IN vandig NaOH (0,92 ml) blev sat til en opløsning af produktet fra eksempel 13f (0,20 g, 0,42 mmol) i MeOH (10 ml), og reaktionen blev omrørt natten over ved omgivelsernes temperatur.
1 N vandig HCl (1 ml) blev tilsat, og reaktionsblandingen blev koncentreret i vakuum for at fjerne MeOH. Den vandige opløs- DK 172736 B1 47 ning, som blev tilbage, blev ekstraheret med EtOAc, og det organiske lag blev vasket med saltvand, tørret over Na2S04, filtreret og koncentreret i vakuum til dannelse af produktet (0,18 g). TLC, Rf = 0,2, silicagel, MeOH:CHCl3:TFA (5:94:1), 5 HPLC, t_ = 2,9, 5,86, "Applied Science Absorbosphere"® C8,
R
4.6 mm x 10 cm, CH3CN:H20:TFA (20:80:0,1), strømningshastighed = 1.6 ml/min.
EKSEMPEL 15.
3 (RS) — [(4—(ethoxycarbonyl)phenyl)aminocarbonyl]-L-valyl-N-10 (3-(4-methyl-l,l,l - trifluor-2-oxopentyl))-L-prolinamid.
a. 2(RS),3(SR)-[(4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-hydroxypenty1)]-L-prolin-amid.
En opløsning af ethyl-4-isocyanatobenzoat (0,86 g, 4,5 mmol) 15 i CHCl^ (2 ml) blev sat dråbevis til en opløsning af et produkt fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 3d (1,65 g, 4,5 mmol) i CHCl^ (20 ml), og reaktionen blev omrørt natten over ved omgivelsernes temperatur. Reaktionen blev koncentreret under vakuum til dannelse af det rå produkt. Produktet 20 blev renset ved lynkromatografi på silicagel under anvendelse af MeOH:CHCl3 (2,5:97,5) og MeOH:CHCl3 (5:95) som eluenter til dannelse af produktet (1,76 g). TLC, R^ = 0,34, silicagel,
MeOH: CHC13 (5:95).
b. 3(RS)-[(4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl]-L-valyl-N-[3- (4-methyl-l,1,1-trifluor-2-oxopentyl)J-L-prolinamid.
25 En opløsning af DMSO (4,5 ml, 63 mmol) i CH2C12 (5 ml) blev DK 172736 B1 48 sat langsomt til en forud afkølet (-60°C) opløsning af oxalyl- chlorid (2,75 ml, 31,5 mmol) i CH Cl (60 ml). Reaktionen blev O i £ omrørt i 15 minutter ved -60 C. En opløsning af produktet fra eksempel 15a (1,76 g, 3,15 mmol) i CH2C12 (60 ml) blev sat til 5 reaktionsblandingen og omrørt i en time ved -60°C. Diisopropyl- ethylamin (11 ml, 63 mmol) blev tilsat langsomt, og reaktionen fik lov at opvarme til omgivelsernes temperatur. Opløsningen blev vasket med 1 N vandig HCl (2 x 60 ml) og saltvand. Det organiske lag blev tørret over Na^SO^, filtreret og koncentre-10 ret i vakuum til dannelse af det rå produkt (2,3 g). Produktet blev renset ved lynkromatografi på silicagel under anvendelse af en tringradient af CHCl^, MeOHiCHCl^ (2,5:97,5) og MeOHrCHCl^ (5:95) til dannelse af produktet (0,91 g). TLC, Rf = 0,42, silicagel, MeOH:CHCl3 (5:95), HPLC, tR = 6,77, 11,27, Zorbax® 15 ODS analytisk søjle, CH3CN:H20 (45:55), strømningshastighed = 2 ml/min.
EKSEMPEL 16.
3(RS)-[(4-carboxyphenyl)aminocarboriyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl- 1,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
20 1 N vandig NaOH (1 ml) blev sat til en opløsning af produktet fra eksempel 15b (0,48 g, 0,86 mmol) i Me0H:H2O (8 ml:7 ml). Reaktionen blev omrørt i 3 timer, yderligere 1 N vandig NaOH blev tilsat (1 ml), og reaktionen blev omrørt natten over ved omgivelsernes temperatur. 1 N vandig HCl (2,5 ml) blev tilsat, 25 og methanolen blev fjernet under vakuum. H20 (10 ml) blev tilsat til remanensen og ekstraheret med EtOAc (2 x 50 ml). De forenede organiske lag blev vasket med saltvand, tørret over Na^O^, filtreret og koncentreret under vakuum til dannelse af produktet (0,42 g). TLC, Rf = 0,17, silicagel, MeOH:CHCl3:AcOH 30 (5:94:1), HPLC, t = 2,38, 2,78, Zorbax ® ODS analytisk søjle, CH3CN:H20 (30:70), strømningshastighed = 1 ml/min.
i DK 172736 B1 49 EKSEMPEL 17.
3(RS)-[(4-phenylbutyl)carbonyl]-L-valyl-N-[3- (4-methyl-l,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
a. 2 (RS) ,3 (SR) - [ (-4-phenylbutyl)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-1,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
5 DCC (0,906 g, 4,4 mmol) blev sat til en opløsning af 5-phenyl- valerianesyre (0,728 g, 4,08 mmol), et produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 3d (1,5 g, 4,08 mmol) og HOBT (1,19 g, 8,8 mmol) i THF (75 ml) ved 0°C.Blandingen blev omrørt og fik lov at opvarme langsomt til stuetemperatur natten 10 over. Blandingen blev koncentreret under vakuum, og den fremkomne remanens blev optaget i CHCl^ (60 ml) og vasket i rækkefølge med 20% vandig citronsyre (30 ml), HjO (30 ml), 5% vandig NaHCOj (30 ml) og saltvand (30 ml). Den organiske fase blev opsamlet, tørret over Na2S0^, filtreret og koncentreret i vakuum 15 til dannelse af det rå produkt (2,0 g). Rensning ved lynkromatografi på silicagel og eluering med MeOH:CHCl3 (5:95) gav produktet (1,0 g) som et hvidt skum. TLC, Rf = 0,5-0,55, silicagel, MeOHrCHCl^ (5:95).
b. 3(RS)-[(4-phenylbutyl)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl- 20 1,1,1-trifluor-2-oxopentyl) ]-L-prolinamid.
En opløsning af DMSO (3,4 ml, 48 mmol) i tør CH^C^ (4 ml) blev sat dråbevis til en omrørt opløsning af oxalylchlorid (2,10 ml, 24 mmol) i tør CI^C^ (50 ml), afkølet til -60°C under en ^-atmosfære. Opløsningen blev omrørt ved -60°C 25 i 15 minutter. En opløsning af produktet fra eksempel 17a (1,00 g, 1,89 mmol) i tør CH.C1_ (30 ml) blev langsomt tilsat,
^ ^ O
idet opløsningens temperatur blev holdt under -50 C. Blandingen blev omrørt ved -50°C i en time. Diisopropylethylamin (8,48 ml, 48 mmol) blev tilsat dråbevis, og reaktionsblandingen 50 DK 172736 B1 fik lov at opvarme langsomt til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev vasket i rækkefølge med 1 N vandig HCl og saltvand. Den organiske fase blev samlet, tørret med Na2SO^, filtreret og koncentreret i vakuum til dannelse af den rå keton.
5 Ketonen blev renset ved tre på hinanden følgende lynkromatogra- fier med silicagel og eluenter af MeOH.-CHCl^ (5:95) og CHCl^ (100%) - MeOH:CHCl3 (3:97) og Et20 (100%) - MeOH:Et20 (10:90) til dannelse af slutproduktet (0,2 g) som et hvidt voksagtigt fast stof. HPLC, t^ = 6,80, 8,90, Zorbax ® ODS søjle, H20: 10 CH3CN:TFA (40:60:0,1), strømningshastighed = 0,75 ml/min.
Analyse beregnet for C27N3°4F3H38'0'5 H20: C 60'65' h 7'35' N 7,85.
Fundet: C 60,68, H 7,30, N 7,67.
EKSEMPEL 18.
15 3(RS)-2[2-(tricyklo[3.3 .l.l3,^]dec-l-yl)ethoxycarbonyl]-L-valyl- N-[3-(4-methyl-1,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
3 7 a. 4-nitrophenyl-2-(tricyklo[3.3.1.1 ' ]dec-l-yl)ethylcarbonat.
Der blev fremstillet et produkt ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 7a.
20 b. 2(RS),3 (SR)- 12-(tricyklo[3.3.1.11'7]dec-l-yl)ethoxycarbonylΙΕ- valy1-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
En opløsning af produktet fra eksempel 18a (0,758 g, 2,19 mmol), et produkt fremstillet ved at anvende fremgangsmåden fra eksem-25 pel 3d (0,768 g, 2,09 mmol) og K2C03 (2,89 g, 20,9 mmol) i DMF (75 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 18 timer, filtreret, og opløsningsmidlerne blev fjernet i vakuum. Remanensen blev fortyndet med ethylacetat, vasket med 3 portioner 10% vandig DK 172736 B1 51
NaOH og saltvand, tørret over fast K2C03:Na2S04 (10:90), filtreret, og opløsningsmidlerne blev fjernet ved reduceret tryk.
Det rå produkt blev renset ved lynkromatografi på silicagel og eluering med MeOHiCHCl^ (2:98) til dannelse af produktet 5 (0,965 g) som et hvidt skum. TLC, R^ = 0,14, 0,18, silicagel,
MeOH:CHCl3 (2:98).
c. 3 (RS)-[2-(tricyklo[3.3.1.1^'^]dec-l-yl)ethoxycarbonyl]-L- valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
Til en opløsning af oxalylchlorid (2,14 g, 16,8 mmol) i tør 10 CH2Cl2 (30 ml), afkølet til -43°C, blev sat DMSO (2,66 g, 33,6 mmol) i CH2Cl2 (20 ml) dråbevis i løbet af en time, efterfulgt af tilsætning af produktet fra eksempel 18b (0,065 g, 1,68 mmol) på samme måde i løbet af 30 minutter. Efter omrøring af opløsningen ved -43°C i yderligere en time blev triethyl-15 amin (8,50 g, 84,0 mmol) tilsat, og opløsningen fik lov at opvarme langsomt til stuetemperatur. Opløsningen blev fortyndet med CH2C12, vasket med 5% vandig HCl, 5% vandig NaOCl, tørret over MgSO^, filtreret, og opløsningsmidlet blev fjernet i vakuum. Det rå produkt blev renset ved lynkromatografi på silica-20 gel og eluering med CHCl3 efter forbehandling af silicagel med MeOH:CHCl2 (1:99) til dannelse af produktet (410 mg) som et hvidt skum. TLC, R^ = 0,39, silicagel, MeOH:CHCl^ (2:98), HPLC, t^ = 8,12 og 10,75, Zorbax ® ODS søjle, strømningshastighed =1,5 ml/min. CH3CN:H20:TFA (70:30:0,1).
25 Analyse beregnet for C29H44N3F3°5,°,75 H20: C 59'52' H 7'83' N 7,18.
Fundet: C 59,48, H 7,70, N 7,17.
EKSEMPEL 19. 1 (RS)- ((2-methoxyethoxy)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-30 1,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
52 DK 172736 B1 a. 2- (2-methoxyethoxy)ethyl-4-nitrophenylcarbonat.
Til en opløsning af p-nitrophenylchlorformiat (2,00 g, 9,92 mmol) i Et20 (50 ml) ved 0°C blev sat pyridin (8 ml), efterfulgt af tilsætning af 2-(2-methoxyethoxy)ethanol (1,14 g, 9,45 mmol) i 5 Et20 (25 ml) dråbevis i løbet af en time. Den fremkomne blanding blev omrørt ved stuetemperatur i 12 timer og skilt mellem H20 og Et2<0. Det etheriske lag blev vasket med 5% vandig HC1, pH 7,0 phosphatstødpude, tørret over MgSO^, filtreret, og opløsningsmidlerne blev fjernet i vakuum. Det rå produkt blev renset 10 ved lynkromatografi på silicagel og eluering med EtOAc:hexan (30:70) til dannelse af produktet (1,30 g) som en klar farveløs olie. TLC, = 0,11, silicagel, EtOAc:hexan (30:70).
b. 2(RS),3(SR)-[(2-methoxyethoxyethoxy)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
15 En opløsning af produktet fra eksempel 19a (1,11 g, 3,90 mmol), et produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 3d (1,37 g, 3,72 mmol) og K2C03 (5,14 g, 37,2 mmol) i DMF (100 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 18 timer, filtreret, og opløsningsmidlerne blev fjernet under vakuum. Rema-20 nensen blev optaget i ethylacetat, vasket med tre portioner 10% vandig NaOH og saltvand, tørret over fast K2C02:Na2S0^ (10:90), filtreret, og opløsningsmidlerne blev fjernet i vakuum. Det rå produkt blev renset ved lynkromatografi på silicagel, eluering med EtOAc efter forbehandling af silicagelen med TEA:hexan 25 (1:9) til dannelse af produktet (1,13 g) som et klart farveløst glas. TLC, Rf = 0,43, 0,48, silicagel, MeOH:CHCl3 (1:9).
Analyse beregnet for C22H38N3°7F3: C 51'45' H 7'45' N 8,18.
Fundet: C 51,48, H 7,35, N 8,01.
DK 172736 B1 53 c. 3(RS)-[ (2-methoxyethoxy)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[ 3- (4-methyl-1,1,I-trifluor-2-oxopenty1)]-L-prolinamid.
Til en opløsning af oxalylchlorid (3,26 g, 2,57 mmol) i tør CH2C12 (70 ml), afkølet til -43°C, blev sat DMSO (4,07 g, 5 51,4 mmol) i CH2C12 (20 ml) dråbevis i løbet af en time, efter fulgt af tilsætning af produktet fra eksempel 19b (1,10 g, 2,14 mmol) i CH2C12 (25 ml) på samme måde i løbet af 30 minutter. Efter omrøring af opløsningen ved -43°C i yderligere en time blev TEA (10,80 g, 107,0 mmol) tilsat, og opløsningen fik 10 lov at opvarme langsomt til stuetemperatur. Opløsningen blev fortyndet med CH2C12, vasket med 5% vandig HCl, 5% vandig NaOCl, tørret over MgSO^, filtreret, og opløsningsmidlerne blev fjernet i vakuum. Det rå produkt blev renset ved lynkromatografi på silicagel og eluering med MeOHrCHCl^ (2:98) til dannel-15 se af produktet (420 mg) som en klar lysegul sirup. TLC, R-. = 0,32, 0,37, silicagel, MeOH:CHCl, (5:95), HPLC, t0 = 7,38, 9,55, Zorbax^ ODS analytisk søjle, strømningshastighed = 0,5 ml/min., CH3CN:H20:TFA (50:50:0,1).
Analyse beregnet for 20 C22H3gN3O7F3,0,75 H20: C 50,33, H 7,20, N 8,00.
Fundet: C 50,34, H 7,21, N 7,58.
EKSEMPEL 20.
3(RS)-[(4-methoxyphenyl)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
25 a. 2(RS),3(SR)-[(4-methoxyphenyl)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methy1-1,1,1-trifluor-2-hydroxypenty1)1-L-prolinamid.
Til en opløsning af et produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 3d (1,50 g, 4,08 mmol) og TEA
DK 172736 B1 54 (2,06 g, 20,4 mmol) i CHCl^ (50 ml), afkølet til 0°C, blev dråbevis i løbet af en time sat 4-methoxybenzoylchlorid (0,766 g, 4,49 mmol) i CHCl^ (40 ml), og opløsningen blev omrørt ved stuetemperatur natten over. Opløsningsmidlerne blev 5 fjernet i vakuum og remanensen optaget i EtOAc, vasket med 5% vandig HC1, 2 0% vandig NaOH, tørret over fast KjCO^
Na2S04 (10:90), filtreret, og opløsningsmidlerne blev fjernet i vakuum. Det rå produkt blev renset ved lynkromatografi på silicagel og eluering med MeOH:CHCl3 (5:95) til dannelse af 10 produktet (1,84 g) som et hvidt skum. TLC, R^ = 0,33, silicagel, MeOH:CHCl3 (5:95).
Analyse beregnet for C24H34°5N3F3'0,3 H2°: C 56'86' H 6/88/ N 8,29.
Fundet: C 56,80, H 6,88, N 8,07.
b. 3(RS)-[ (4-methoxyphenyl)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-15 1,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
Til en opløsning af oxalylchlorid (3,79 g, 29,9 mmol) i tør (50 ml), afkølet til -43°C, blev sat DMSO (4,73 g, 59,8 mmol) i Cf^Clj (20 ml) dråbevis i løbet af 40 minutter, efterfulgt af tilsætning af produktet fra eksempel 20a (1,50 g, 20 2,99 mmol) i CHjClj (20 ml) på samme måde i løbet af 30 minut ter. Efter omrøring af opløsningen ved -43°C i yderligere en time blev TEA (15,10 g, 149,5 mmol) tilsat, og opløsningen fik lov at opvarme langsomt til stuetemperatur. Opløsningen blev fortyndet med CU^Cl^, vasket med 5% vandig HC1, 5% vandig NaOCl, 25 tørret over MgSO^, filtreret, og opløsningsmidlerne blev fjernet i vakuum.. Det rå produkt blev renset ved lynkromatografi på silicagel og eluering med EtOAc:hexan (1:1) efter forbehandling af silicagelen med TEA:hexan (10:90) til dannelse af produktet (489 mg) som et hvidt skum. TLC, R^ = 0,15, 0,19, silicagel, 30 MeOH:CHCl3 (2:98), HPLC, tR = 6,62, 9,72, Zorbax® ODS søjle, strømningshastighed = 1 ml/min., CH-jCN :H20:TFA (50:50:0,1).
DK 172736 B1 55
Analyse beregnet for C24H32°5N3F3: C 57'71' H 6'46' N 8'4i··
Fundet: C 57,39, H 6,67, N 8,18.
EKSEMPEL 21.
5 3(RS)-N ,N -di[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-lysyl-N-[3-(4-methyl- 1,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
a. 2(RS),3(SR)-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
Der blev fremstillet et produkt ved anvendelse af fremgangsmåden 10 fra eksempel 2b.
2 6 b. 2(RS),3(SR)-N ,N -di[(phenylmethoxy) carbonyl)-L-lysyl-N-[ 3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
DCC (0,84 g, 4,09 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af 2 6 (N ,N -dibenzyloxycarbonyl)-L-lysin (1,54 g, 3,72 mmol), produktet fra 15 eksempel 21a (1,0 g, 3,72 mmol), 1-hydroxybenzotriazol (1,01 g, 7,44 mmol) og tør THF (70 ml) ved 0°C under nitrogen. Reaktionsblandingen blev omrørt ved 0°C i en time og fik lov at opvarme langsomt til stuetemperatur natten over. Reaktionsblandingen blev filtreret, opløsningsmidlet fjernet i vakuum og remanensen 20 opløst i CHCl^· CHCl3~opløsningen blev vasket med 20% vandig citronsyre, det organiske lag blev tørret over Na2S04 og filtreret. Opløsningsmidlet blev fjernet i vakuum til dannelse af det rå produkt (3,14 g). Produktet blev renset ved lynkromatografi på silicagel og eluering med CHCl3:MeOH (97:3) til dannel-25 se af 1,50 g af slutproduktet. Rf = 0,33-0,45, CHCl3:MeOH (95:5), silicagel.
DK 172736 B1 56 2 g c. 3(RS)-N ,N -di[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-lysyl-N-[3-(4-methyl-1,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
En opløsning af DMSO (3,59 g, 46 mmol) og tør CH2C12 (30 ml) blev sat til en omrørt opløsning af oxalylchlorid (3,04 g, 5 24 mmol) og tør CH2C12 (50 ml) ved -60°C under nitrogen. Reak tionsblandingen blev omrørt ved -60°C i 5 minutter og fik lov at opvarme til -30°C. En opløsning af produktet fra eksempel 21b (1,32 g, 2,0 mmol) og tør CH2C12 (30 ml) blev tilsat dråbevis. Den fremkomne reaktionsblanding blev omrørt ved -25°C 10 i en time. TEA (7,8 g, 77,4 mmol) blev tilsat, og reaktionsblandingen fik lov at opvarme langsomt til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev vasket med 1 N vandig HCl og saltvand.
Det organiske lag blev tørret over Na2S04, filtreret, og opløsningsmidlet blev fjernet i vakuum til dannelse af produktet 15 (2,6 g). Produktet blev renset ved lynkromatografi på silica- gel, CHClj sMeOH (97:3) til dannelse af produktet (0,99 g).
TLC, Rf = 0,4-0,52, CHCl-jiMeOH (95:5), silicagel.
EKSEMPEL 22.
3(RS)-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-phenylalanyl-N-[3-(4-methyl-20 1,1,1-trifluor-2-oxopentyl))-L-prolinamid.
a. 2(RS),3(SR)-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-phenylalanyl-N-[3 -(4-methyl - 1,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
DCC (1,01 g, 4,92 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af en del af produktet fra eksempel 21a (1,41 g, 4,47 mmol), N-25 (benzyloxycarbonyl)-L-phenylalanin (1,20 g, 4,47 mmol), 1- hydroxybenzotriazol (1,21 g, 8,94 mmol) og tør THF (75 ml) ved 0°C under nitrogen. Reaktionsblandingen blev omrørt ved 0°C i en time og fik lov at opvarme til stuetemperatur og blev omrørt natten over. Reaktionsblandingen blev filtreret og opløsnings- i DK 172736 B1 57 midlet fjernet under vakuum til dannelse af den rå remanens, der blev opløst i CHCl^. CHCl^-opløsningen blev vasket med 20% vandig citronsyre og saltvand og tørret over Na2S04< CHC^-opiøsningen blev filtreret og opløsningsmidlet fjernet i 5 vakuum til dannelse af det rå produkt (3,57 g). Produktet blev renset ved lynkromatografi på silicagel og eluering med CHCl^:
MeOH (97:3) til dannelse af produktet (1,45 g) som et hvidt skum. TLC,!^ = 0, 39-0,60, CHCl3:MeOH (95:5), silicagel, HPLC, Zor-bax^ODS analytisk søjle, (50:50), strømningshastig- 10 hed =2,5 ml/min., t = 6,47, 7,63.
b. 3(RS)- ((phenylmethoxy) carbonyl]-L-phenylalanyl-N-[3-(4-methyl- 1,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
En opløsning af DMSO (2,33 g, 29,9 mmol) og tør CH2C12 (40 ml) blev sat dråbevis til en omrørt opløsning af oxalylchlorid 15 (1,89 g, 14,9 mmol) og tør CH2Cl2 (40 ml) ved -60°C under nitro gen. Reaktionen blev omrørt ved -60°C i 1/2 time. En opløsning af produktet fra eksempel 22a (1,43 g, 2,49 mmol) og tør CH2Cl2 (40 ml) blev tilsat ved -50°C. Den fremkomne blanding blev omrørt ved -60°C i en time. Diisopropylethylamin (7,70 g, 59,7 20 mmol) blev tilsat, og reaktionsblandingen fik lov at opvarme til stuetemperatur. Blandingen blev vasket to gange med 1 N vandig HCl og derefter med saltvand. Det organiske lag blev tørret over Na2SO^, filtreret, og opløsningsmidlet blev fjernet i vakuum til dannelse af det rå produkt (1,87 g). Produktet 25 blev renset ved lynkromatografi på silicagel, CHCl3:MeOH (98:2) til dannelse af produktet (0,771 g) som et hvidt skum. TLC,
Rf = 0,62-0,69, CHCl3:MeOH (95:5), silicagel, HPLC, Zorbax® ODS analytisk søjle, CH3CN:H20 (50:50), strømningshastighed = 2,5 ml/min., t = 6,11, 6,21.
30 Analyse beregnet for C28H32F3N3°5: C 61'41' H 5'84' N 7'67'
Fundet: C 61,53, H 5,82, N 7,67.
EKSEMPEL 23.
DK 172736 B1 58 3(RS)-[2-(methoxycarbonyl)ethylcarbonyl]-L-norleucyl-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,l,l-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
a. N-[2-(methoxycarbonyl) ethylcarbonyl]-L-norleucin.
En opløsning af 1 N natriumhydroxid (100 ral, 100 mmol) blev 5 sat dråbevis til en kraftigt omrørt blanding af L-norleucin (6,55 g, 50 mmol) og methylenchlorid (250 ml) ved 0°C under nitrogen. 3-carbomethoxypropionylchlorid (7,52 g, 50 mmol) blev tilsat dråbevis. Den fremkomne reaktionsblanding blev omrørt ved 0°C i 15 minutter. Kølebadet blev fjernet, og vand 10 (100 ml) blev tilsat. pH-værdien blev indstillet til 1 med 3 N
vandig HC1. Ethylacetat (200 ml) blev tilsat, og det organiske lag blev fraskilt. Det vandige lag blev ekstraheret med ethylacetat, og de organiske lag blev forenet, vasket med saltvand og tørret over Na2S04· Opløsningen blev filtreret. Opløsnings-15 midlet blev fjernet i vakuum til dannelse af det rå produkt (10,73 g). En del af det rå produkt (6,47 g, 26,4 mmol) blev renset ved lynkromatografi på silicagel, CHCl^tMeOH (97:3), til dannelse af produktet (5,31 g). TLC, = 0,45, silicagel, CHCl3:MeOH:AcOH (95:4,75:0,25).
20 b. 2(RS),3(SR)- 12-(methoxycarbonyl)ethylcarbonylJ-L-norleucyl-L-valyl-N-[3- (4-methyl-l,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
Dicyklohexylcarbodiimid (3,46 g, 16,8 mmol) blev sat til en forud afkølet (0°C) opløsning af et produkt fremstillet ved an-25 vendelse af fremgangsmåden fra eksempel 3d (5,60 g, 15,3 mmol), produktet fra eksempel 23a (3,75 g, 15,3 mmol) og 1-hydroxy-benzotriazol (4,13 g, 30,6 mmol) i THF (70 ml). Den fremkomne opløsning fik lov at opvarme til stuetemperatur og blev omrørt DK 172736 B1 59 natten over. Reaktionen blev filtreret og koncentreret i vakuum. Remanensen blev fortyndet med EtOAc, og den fremkomne opløsning blev vasket med mættet vandig NaHCO^ og saltvand, tørret over Na2S04, filtreret og koncentreret under vakuum til 5 dannelse af det rå produkt. Produktet blev renset ved lynkromatografi på en søjle af silicagel under anvendelse som eluent af en gradient af Et^O (100%), Et20:EtOAc (90:10), Et20:Et0Ac (75:25), Et20:EtOAc (50:50) til dannelse af produktet (5,6 g).
TLC, Rf 0/45, silicagel, MeOH:CHCl3 (1:9).
10 c. 3(RS)-[2-(methoxycarbonyl)ethylcarbonyl]-L-norleucyl-L- valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
En opløsning af DMSO (27,0 ml, 0,378 mol) i CHjClj (27 ml) blev langsomt sat til en forud afkølet (-65°C) opløsning af oxalylchlorid (16,5 ml, 0,189 mol) i (350 ml). Den 15 fremkomne opløsning blev omrørt i 15 minutter, og en opløsning af produktet fra eksempel 23b (5,60 g, 0,00943 mol) i CI^C^ (250 ml) blev tilsat. Reaktionen blev omrørt i en time ved -65 C, og diisopropylethylamin (67,0 ml, 0,378 mol) blev dråbevis tilsat. Reaktionen fik lov at opvarme til stuetemperatur og 20 blev derpå vasket med 1 N vandig HCl og saltvand, tørret over Na2S04, filtreret og koncentreret-under vakuum til dannelse af det rå produkt. Det rå produkt blev renset ved lynkromatografi på en søjle af silicagel og eluering med en trinvis gradient af Et20 (100%), Et2O:Et0Ac (50:50), EtOAc (100%) til dannelse af 25 et delvis renset produkt, som blev yderligere renset ved lyn-kromatografi på silicagel og eluering med en trinvis gradient af CHC13 (100%), MeOH:CHCl3 (2,5:97,5) ogMeOH:CHCl3 (5:95) til dannelse af slutproduktet (3,24 g). HPLC, tR = 6,80, 12,98,
Zorbax ® ODS analytisk søjle, H20:CH3CN (65:35), strømnings-30 hastighed = 2 ml/min.
EKSEMPEL 24.
DK 172736 B1 60 3 (RS)- [ (2-carboxyethyl)carbonyl]-L-norleucyl-L-valyl-N-[3- (4-methyl-1,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
1 N vandig NaOH (9,5 ml) blev sat til en opløsning af produktet fra eksempel 23c (2,60 g, 4,39 mmol) i MeOH (95 ml). Reaktionen 5 blev omrørt natten over ved stuetemperatur, og 1 N vandig HC1 (10,5 ml) blev tilsat. Reaktionen blev koncentreret i vakuum, og Η2<3 (35 ml) blev tilsat. Suspensionen blev ekstraheret med EtOAc, og det organiske lag blev vasket med saltvand, tørret over Na2S04, filtreret og koncentreret i vakuum til dannelse af 10 produktet (2,1 g). HPLC, t = 12,63, 19,05, Zorbax R ODS ana-lytisk søjle, I^OrCH^CN (65:35), strømningshastighed = 0,5 ml/min.
EKSEMPEL 25.
3(RS)-[(phenylmethoxy)carbonyl)-L-a-glutamyl-L-valyl-N-(3-(4-15 methyl-1,1,1-trifluor-2-oxopentyl))-L-prolinamid-phenylmethyl- ester.
a. 2(RS),3(SR)-[(phenylmethoxy) carbonyl]-L-a-glutamyl-L-valy1-N-[3-(4-methyl-l,l,l-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid-phenylmethylester.
20 Isobutylchlorformiat (0,53 ml, 4,1 mmol) blev sat til en forud afkølet (-15°C) opløsning af N-benzyloxycarbonyl-L-glutamin-syre-a-benzylester (1,52 g, 4,1 mmol) og N-methylmorpholin (0,45 ml, 4,1 mmol) i THF (30 ml). Reaktionsblandingen blev omrørt i 10 minutter og derpå afkølet til -40°C. En opløsning 25 af produktet fra eksempel 3d (1,5 g, 4,1 mmol) i THF (30 ml) blev dråbevis tilsat, og reaktionen blev omrørt natten over og fik lov at opvarme langsomt til stuetemperatur. Reaktionen ! DK 172736 B1 61 blev filtreret og koncentreret i vakuum. Remanensen blev optaget i EtOAc, vasket med 1 N vandig HC1 og saltvand, tørret over Na2S04# filtreret og koncentreret til dannelse af det rå produkt. Produktet blev renset ved lynkromatografi på en søjle af silica-5 gel under anvendelse som eluent af en gradient af CHCl^ (100%), MeOH:CHCl3 (2,5:97,5) og MeOH:CHCl3 (5:95) til dannelse af produktet (2,13 g). TLC, Rf = 0,43, silicagel, MeOH:CHCl3 (5:95).
b. 3 (RS)- [ (phenylmethoxy)carbonyl]-L-a-glutamyl-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,l-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid-phenylmethyΙ-ΙΟ ester.
En opløsning af DMSO (8,40 ml, 0,118 mol) i CH^C^ (8 ml) blev forsigtigt sat til en forud afkølet (-65°C) opløsning af oxalyl-chlorid (5,2 ml, 0,059 mol) i CH2C12 (100 ml). Opløsningen blev omrørt i 15 minutter, og en opløsning af produktet fra 15 eksempel 25a (2,13 g, 2,96 mmol) i CH2Cl2 (100 ml) blev tilsat dråbevis. Reaktionen blev omrørt i en time ved -60°C, og N,N-diisopropylethylamin (20,9 ml, 0,118 mol) blev tilsat dråbevis. Reaktionen fik lov at opvarme til stuetemperatur, blev vasket med 1 N vandig HC1 og saltvand, tørret over Na2S04, filtreret 20 og koncentreret til dannelse af det rå produkt. Produktet blev delvis renset ved lynkromatografi på silicagelsøjle under anvendelse som eluent af en trinvis gradient af Et20 (100%) ,
Et20:EtOAc (50:50)og EtOAc (100%). Produktet blev til sidst renset ved lynkromatografi på en søjle af silicagel under an-25 vendelse som eluent af en trinvis gradient af CHC13 (100%),
MeOH:CHC13 (1:99), MeOH:CHCl3 (2:98), MeOH:CHCl3 (3:97) og MeOH:CHCl, (5:95) til dannelse af produktet (1,35 g). HPLC, tR = 7,2, 11,5, Zorbax^ ODS analytisk søjle, H20:CH3CN (50:50), strømningshastighed - 2 ml/min.
EKSEMPEL 26.
DK 172736 B1 62 2 g 3(RS)-N -[2-(methoxycarbonyl)ethylcarbonyl]-N-[(phenylmethoxy)-carbonyl]-L-lysy1-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-oxo-pentyl)]-L-prolinamid.
2 6 a. N -[(2-methoxycarbony1)ethylcarbonyl]-N -phenylmethoxy- 5 carbonyllysin.
1 N vandig NaOH (43 ml) blev sat til en forud afkølet (0°C) opløsning af N-benzyloxycarbonyl-L-lysin (6,06 g, 0,0216 mol) i CH2CI (160 ml). Reaktionen blev kraftigt omrørt, og 3-carbomethoxypropionylchlorid (2,66 ml, 0,0216 mol) blev tilsat.
10 Reaktionen blev kraftigt omrørt i 15 minutter ved 0°C. Vand (100 ml), 1 N vandig HCl (25 ml) og EtOAc (500 ml) blev tilsat i rækkefølge, og lagene blev adskilt. Det organiske lag blev vasket med saltvand, tørret over Na2S04' filtreret og koncentreret til dannelse af produktet (6,78 g). Produktet blev an-15 vendt uden yderligere rensning.
b. 2(RS),3(SR)-N^-[2-(methoxycarbonyl)ethylcarbonyl)-N phenylmethoxycarbonyl-L-lysyl-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-hydroxypentyl)]-L-prolinamid.
DCC (2,85 g, 13,9 mmol) blev sat til en blanding af et produkt 20 fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 3d (4,63 g, 12,6 mmol), produktet fra eksempel 26a (5,00 g, 12,6 mmol) og HOBT (3,76 g, 27,8 mmol) i THF (65 ml), der var forud afkølet til 0°C. Blandingen blev omrørt ved 0°C i en time, opvarmet til stuetemperatur og omrørt natten over. Opløsnings-25 midlet blev fjernet i vakuum, remanensen fortyndet med EtOAc og vasket i rækkefølge med mættet NaHCO^ og saltvand. Den organiske fase blev tørret over fast K2C03:Na^O^ (10:90), filtre- i DK 172736 B1 63 ret, og opløsningsmidlet blev fjernet i vakuum til dannelse af det rå produkt. Rensning ved lynkromatografi på silicagel med en eluent af MeOHiCHCl^ (1:99) gav produktet (6,22 g) som et hvidt skum. TLC, Rf = 0,40, silicagel, MeOH:CHCl3 (5:95).
2 6 5 c. 3{rs)-N -[2-(methoxycarbonyl)ethylcarbonyl]-N -((phenyl- methoxy)carbonyl]-L-lysyl-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,1- trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
En opløsning af DMSO (15,9 g, 100 mmol) i tør CH2C12 (50 ml) blev dråbevis sat til en omrørt opløsning af oxalylchlorid 10 (8,8 ml, 200 mmol) i tør CH2C12 (150 ml), afkølet til -43°C un der nitrogen. En opløsning af produktet fra eksempel 26b (6,22 g, 8,37 mmol) i CH2C12 (60 ml) blev tilsat på samme måde. Reaktionsblandingen blev omrørt ved -20°C i en time, og TEA (70 ml, 400 mmol) blev tilsat dråbevis. Blandingen fik lov 15 at opvarme langsomt til stuetemperatur, blev omrørt i yderligere en time og blev derpå fortyndet med CH2Cl2, vasket med 5% vandig NaOCl, tørret over fast ^CO^Na^O^ (10:90), filtreret, og opløsningsmidlet blev fjernet i vakuum til dannelse af det rå produkt. Rensning ved lynkromatografi på silicagel med en 20 eluent af MeOH:CHCl3 (1:99) gav produktet (4,5 g) som et lysegult skum. TLC, Rf = 0,51, silicagel, MeOH:CHCl3 (1:9), HPLC, tR = 6,99, 12,01, strømningshastighed = 1 ml/min., Zorbax® ODS analytisk søjle, H20:CH3CN:TFA (50:50:0,1).
EKSEMPEL 27.
2 6 25 3(RS)-N -[(2-carboxyethyl)carbonyl]-N -[(phenylmethoxy)carbonyl]- L-lysyl-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,l-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
En opløsning af produktet fra eksempel 26c (2,0 g, 2,7 mmol) i MeOH (60 ml) og 1 N NaOH (5,4 ml, 5,4 mmol) blev omrørt ved DK 172736 B1 64 stuetemperatur i 12 timer og derefter bragt til pH 7 med 1 N vandig HCl (6,0 ml, 6,0 mmol). MeOH blev fjernet i vakuum.
Den fremkomne remanens blev opløst i EtOAc, vasket med saltvand, tørret over MgSO^, filtreret, og opløsningsmidlet blev fjernet 5 i vakuum til dannelse af det rå produkt. Rensning ved lynkromatografi på silicagel (pH 5,5, Baker®) med chloroform gav produktet (1,7 g) som et hvidt skum. HPLC, tn = 4,06, 5,56, (r) strømningshastighed = 1 ml/min., Zorbax ^ ODS analytisk søjle, H20:CH3CN:TFA (50:50:0,1).
10 Analyse beregnet for 034Η48Ν5Ο9Γ3'1,75 H2°: C 53'78' H 6,83, N 9,22.
Fundet: C 53,46, H 6,39, N 9,03.
EKSEMPEL 28.
2 6 3S(eller R)-N ,N -di[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-lysyl-L-valyl-15 N-[3-(4-methyl-l,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
2 6 . a. 2(RS),3(SR)-N ,N -di[(phenylmethoxy)carbonyl)-L-lysyl-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l, 1,1-trifluor-2-hydroxypenty1)]-L-prolin-amid.
DCC (0,93 g, 449 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af 2 6 20 n ,N -benzyloxycarbonyl-L-lysin (1,69 g, 4,08 mmol), et produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 3d (1,50 g, 4,08 mmol), 1-hydroxybenzotriazol (1,10 g, 8,16 mmol) og tør THF (75 ml) ved 0°C under nitrogen. Reaktionsblandingen blev omrørt ved 0°C i en time og fik så lov at opvarme til stue-25 temperatur og blev omrørt natten over. Reaktionsblandingen blev filtreret. Filtratet blev inddampet i vakuum. Remanensen blev opløst i CHCl^, og opløsningen blev vasket med 1 N vandig HCl og saltvand og blev tørret over NajSO^. Na2SO^ blev frafiltreret, og filtratet blev koncentreret i vakuum til dannelse • i DK 172736 B1 65 af det rå produkt (3,94 g), som blev renset ved lynkromatografi på silicagel, CHCl3:MeOH (95:5), til dannelse af 2,48 g produkt.
TLC, Rf = 0,36-0,56, CHClj'.MeOH (95:5), silicagel, HPLC, Zor-bax ®ODS analytisk søjle, strømningshastighed = 1,5 ml/min., 5 CH3CN:H20 (50:50), tR = 18,33, 14,99.
Analyse beregnet for C33H41F3N4°7: C 59'01' H 6'24' N 8'45*
Fundet: C 58,89, H 6,33, N 7,89.
2 g b. 3S(eller R)-N ,N -di[(phenylmethoxy)carbonylJ-L-lysyl-L-10 valyl-N-[3-(4-methyl-l,1,l-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
En opløsning af DMSO (2,8 g, 36,13 mmol) og tør CH2Cl2 (40 ml) blev sat til en omrørt opløsning af oxalylchlorid og tør CH2C12 (40 ml) ved -60°C under nitrogen. Derefter blev en opløsning af produktet fra eksempel 28a (2,30 g, 3,01 mmol) og tør CH2C12 15 (40 ml) sat til reaktionsblandingen ved -50°C. Den fremkomne reaktionsblanding blev omrørt ved -60°C i en time. Triethylamin (7,290 g, 72,26 mmol) blev tilsat, og reaktionen fik lov at opvarme til stuetemperatur. Blandingen blev vasket to gange med 1 N vandig HCl, derpå med saltvand og blev tørret over 20 Na^SO^. NajSO^ blev frafiltreret, og filtratet blev koncentreret i vakuum til dannelse af det rå produkt (2,67 g). Produktet blev renset ved lynkromatografi på silicagel med en eluent af CHCl3:MeOH (97:3) til dannelse af 64 mg produkt. TLC, R^ = 0,6, CHCl3:MeOH (95:5), HPLC, Zorbax® ODS analytisk søjle, 25 CHjCN:H20 (60:40), strømningshastighed =1,5 ml/min., tR = 5,29.
Analyse beregnet for C38H50F3N5°8'H2O: C 58'53' H 6'72' N 8'98·
Fundet: C 58,95, H 6,59, N 8,74.
DK 172736 B1 66 EKSEMPEL 29.
3 (RS)-l-(12-methoxy-12-oxododecyloxy)carbonyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, r1=ch(ch3)ch3, r3=ch3oco(ch2)1]l, A=OCO).
a. Methyl-12-hydroxydodecanoat.
5 En blanding af 1-hydroxydodecansyre (4,0 g, 18,5 nunol) , MeOH (450 ml), koncentreret H2S04 (2,5 ml) og 3A molekularsigter (3 ml) blev omrørt ved tilbagesvalingstemperatur i 16 timer. Blandingen blev neutraliseret med mættet vandig NaHC03, koncentreret i vakuum og skilt mellem Et2<D og vand. Den etheriske 10 opløsning blev vasket (vand, mættet vandig NaHCC>3, saltvand) , tørret (Na2S04), filtreret og koncentreret i vakuum til dannelse af produktet (3,94 g) som et hvidt fast stof.
NMR (DMSO-dJ: é83,65,3H,s, 1,7-1,0,22H,m.
b b. ll-methoxycarbonylundecyl-4-nitrophenylcarbonat.
15 Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 7a blev produktet fra eksempel 29a omdannet til titelforbindelsen og renset ved lynkromatografi (EtOAcrhexan (1:9)) til dannelse af titelforbindelsen i et udbytte på 59%. TLC, R^ = 0,20, EtOAc:hexan (1:9).
c. 2(RS),3(SR)-1-(12-methoxy-12-oxododecyloxy)carbonyl-N- 20 [3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl))-L-prolinamid (formel Vila, R1=CH(CH3)CH3, R3=CH3OCO(CH2), A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 7b fik produktet fra eksempel 29b lov at reagere med materialet fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 2b til dannelse, efter 25 rensning ved lynkromatografi (acetone:hexan (3:7)), af titelproduktet (45%). HPLC, tR = 4,43, Col A, CH3CN:H20 (35:65), FR = 2,0.
DK 172736 B1 67 d. 3 (RS)-1- (12-methoxy-12-oxododecyloxy)carbonyl-N-[3-(1,1,1-trif luor-4-methyl-2-oxopentyl) ] -L-prolinamid (formel la, R^CH (CH3)CH3, R3=CH3OCO(CH2)i;l, A=OCO).
Til produktet fra eksempel 29c (1,1 mmol) blev sat DMSO (65 ml) 5 og Ac2<0 (50 mmol). Den fremkomne opløsning blev omrørt i 18 timer ved stuetemperatur og fortyndet med Et20. Den organiske opløsning blev vasket (mættet vandig NaHCC>3 (3 x) , vand og saltvand), tørret (Na2S04), filtreret, koncentreret i vakuum og renset ved lynkromatografi (Et20:hexan (1:1)) til dannelse af 10 titelproduktet (100%). HPLC, tR = 12,73, Col A, CH3CN:H20 (60:40), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C22H28F3N305'0,4 H20: C 55'91' H 8'°°r N 5,21.
Fundet: C 56,05, H 8,00, N 5,19.
EKSEMPEL 30.
15 3(RS)-1- (12-hydroxy-12-oxododecyloxy)carbonyl-N-[3-(1,1,1- . trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3) CH3 , R3=HOCO(CH2)1:L, A=0C01.
Ved at anvende fremgangsmåden fra eksempel 14 blev produktet fra eksempel 29d omdannet til titelproduktet, renset ved lynkromato-20 grafi (EtOAc:hexan (1:1)) og opnået i et udbytte på 10%. HPLC, tR = 4,55, Col A, CH3CN:H20 (60:40), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C24H39F3N2°6'0,1 H2°: C 56'48' H 7/74' N 5,49.
Fundet: C 56,48, H 7,96, N 5,23.
m EKSEMPEL 31.
DK 172736 B1 68 3(RS)-1- [1-oxo-5- (phenylmethoxycarbonylamino) pentyl ]-N- [ 3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3)CH3, R3=ØCH2OCONH(CH2) 4, A=COi.
a. 5-(phenylmethoxycarbonylamino)valerianesyre.
5 Til en omrørt, afkølet opløsning (0°C) af 5-aminovalerianesyre (5,00 g, 42,68 mmol) og 2 N NaOH (32,0 ml, 32,0 mmol} blev samtidig sat benzylchlorformiat (7,65 g, 6,40 ml, 44,81 mmol) og 2 N NaOH (32,0 ml, 32,0 mmol). Efter omrøring ved 0°C i 1/2 time blev opløsningen vasket med Et2<0. Et20-laget blev syrnet 10 til pH 2,0 med 6 N HC1, hvilket bevirkede, at produktet udfældede af opløsningen. Titelforbindelsen blev filtreret, vasket (H20) og tørret (vakuumovn) til dannelse af det rene produkt som et hvidt fast stof (8,55 g, 80,0%), smeltepunkt 104 - 105°C.
TLC, Rf = 0,48, MeOH:CHCl3:AcOH (3:97:0,1).
15 b. 2 (RS),3 (SR)-1-[l-oxo-5-(phenylmethoxycarbonylamino)pentyl]-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl) ]-L prolinamid (formel Vila, R1=CH (CH 3) CH3 , R3=ØCH2OCONH (CH2) 4 , A=CO).
Til en omrørt, afkølet opløsning (0°C) af produktet fra eksempel 31a (0,47 g, 1,86 mmol), HOBT (0,50 g, 3,72 mmol) og 20 DCC (0,40 g, 1,95 mmol) i CHC13 (50 ml) blev sat produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 2b (0,50 g, 1,86 mmol). Efter at reaktionsblandingen var blevet omrørt natten over ved stuetemperatur, blev den filtreret og koncentreret til dannelse af en sirup, som blev delvis opløst i EtOAc. Det 25 uopløselige materiale blev filtreret fra EtOAc-opløsningen, før det blev vasket (mættet vandig NaHC03, 5% vandig citronsyre og saltvand), tørret (Na2S04) og koncentreret til en blanding, der blev renset ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (4:96)) til dannelse af titelproduktet som et hvidt skum i DK 172736 B1 69 (0,78 g, 84%). TLC, Rf = 0,4, MeOH:CHCl3 (4:94).
c. 3(RS)-1-[l-oxo-5-(phenylmethoxycarbonylamino)pentyl]-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH(CH3)CH3, R3=ØCH2OCONH (CH2)4, A=CO).
5 Til produktet fra eksempel 31b (1 mmol) blev sat DMSO (85 mmol) og Ac20 (64 mmol). Den fremkomne opløsning blev omrørt i 18 timer ved stuetemperatur, hældt i isvand (50 ml) og omrørt i 1- 4 timer. Det rå produkt blev ekstraheret i EtOAc, og EtOAc-opløsningen blev vasket (mættet vandig NaHC03, saltvand), 10 tørret (Na2S04), filtreret og koncentreret i vakuum, før produktet blev renset ved lynkromatografi (CHC13:MeOH(97:3)) til dannelse af produktet (58%). HPLC, t^ = 6,56, 7,79, Col A, H20:CH3CN (60:40), FR = 2,0.
Analyse beregnet for 15 C24H32F3N305,1,5 H2<D: C 54,74, H 6,69, N 7,98.
Fundet: C 54,87, H 6,20, N 8,02.
EKSEMPEL 32.
3(RS)-1-(1-oxo-4-phenoxybutyl)-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl- 2- oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH(CH3)CH3, R3=00(CH2)3, 20 A=CO).
a. 2(RS),3(SR)-1-(l-oxo-4—phenoxybutyl)-N-[3-(1,1,1-trifluor- 2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vila, R1-CH (CH3)CH3, R3=øO(CH2)3, A=CO).
Til en 0,25 M opløsning af 4-phenoxybutansyre i THF blev sat et 25 molært ækvivalent CDI i én portion. Efter at reaktionsblandingen var blevet omrørt i en time ved stuetemperatur, blev en molær ækvivalent mængde af produktet,fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 2b, tilsat i én portion. Efter at DK 172736 B1 70 reaktionen var blevet omrørt natten over, blev der tilsat overskud af mættet vandig NaHCO^, og blandingen blev ekstraheret med EtOAc. EtOAc-ekstrakterne blev vasket (i HCl, saltvand), tørret (MgSO^), filtreret og koncentreret i vakuum til dannelse af titel-5 produktet (88%). TLC, Rf = 0,53, 0,61, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
b. 3(RS)-1-(1-oxo-4-phenoxybutyl)-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-methyl- 2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R^=CH(CH^)CH^, r3=øo(ch2)3, A=C0).
Ved fremgangsmåden fra eksempel 31c blev produktet fra eksem-10 pel 32a omdannet til titelforbindelsen i et udbytte på 39% efter krystallisation af vand. TLC, R^ = 0,68, 0,64, CH2CL2:
MeOH (9:1).
Analyse beregnet for C21H27F3N2°4'1,25 H20: C 55'93' H 6'59' N 6,21.
15 Fundet: C 55,88, H 6,67, N 6,15.
EKSEMPEL 33.
3(RS)-1-[2-(4-morpholinyl)ethoxycarbonyl)-N-(3-(1,1,1-trifluor- 4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH(CH3)CH3, R3=4-morpholinyl-(CH2)2, A=OCO).
a. 2-(4-morpholinyl)ethyl-4-nitrophenylcarbonat-hydrochlorid.
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 7a, men med udelukkelse af pyridinet (og af syrevasken) blev 2-(4-morpholinyl)-ethanol behandlet med 4-nitrophenylchlorformiat. Det rå produkt blev filtreret, vasket med Et2<D og tørret i vakuum. Det frem-25 komne produkt (91%) blev anvendt til den følgende reaktion uden yderligere karakterisering.
DK 172736 B1 71 b. 2 (RS), 3 (SR) -1- [2- (4-morpholinyl) ethoxycarbonyl]-N- [3-(1,1,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vila, R1=CH (CH3)CH3, R3=4-morpholinyl-(CH2) 2, A=OCO).
5 Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 7b fik produktet fra eksempel 33a lov til at reagere med produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 2b til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (1:99)), af titelproduktet (68%). TLC, Rf = 0,34, MeOH:CHCl3 (5:95), FR = 10 2,0.
c. 3(RS)-1-[2-(4-morpholinyl)ethoxycarbonyl]-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R^CH (CH3)CH3, R3 [4-morpholinyl-(CH2)2, A=OCOJ.
Til produktet (1,1 mmol) fra eksempel 33b blev sat DMSO (65 mmol) 15 og Ac20 (50 mmol). Den fremkomne opløsning blev omrørt i 18 timer ved stuetemperatur og fortyndet med CH2C12· Den organiske opløsning blev vasket (mættet vandig NaHC03 (3 x ), vand og saltvand), tørret (Na2S04), filtreret og koncentreret i vakuum før rensning ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (2:98)) til dannelse 20 af titelproduktet (37%). HPLC, tR = 8,44, 9,88, Col A, CH3CN:H20 (60:40) , FR = 2,0.
Analyse beregnet for C18H28F3N3°5'1,0 H20: C 48'97' H 6'85' N 9/51.
Fundet: C 48,97, H 6,61, N 9,73.
25 EKSEMPEL 34.
3(RS)-1-[l-oxo-6-(2-(2-pyridyl) ethoxy)carbonylaminohexyl]-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH(CH3)CH3, R3=(2-pyridyl)-(CH2)2OCONH-(CH2)5, A=CO).
DK 172736 B1 72 a. 4-nitrophenyl-2-(2-pyridyl)ethylcarbonat.
En opløsning af 2-pyridinethanol (1,38 g, 11 mraol) i Et^O (20 mol) blev i løbet af en time sat til en omrørt opløsning af p-nitrophenylchlorformiat (2,26 g, 11 mmol) ved 0°C under 5 nitrogen. Den fremkomne blanding blev omrørt i en time ved 0°C, før det bundfald, som havde dannet sig, blev opsamlet under et tæppe af nitrogen og omkrystalliseret af absolut EtOH til dannelse af 1,53 g (58%) af titelforbindelsen som urent hvide krystaller, smeltepunkt 125 - 127°C.
10 b. 2(RS),3(SR)-1-[l-oxo-6-(2-(2-pyridyl)ethoxy) carbonylamino-hexyl]-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vila, R^=CH(CH^)CH^, R^=(2-pyridyl)(CH2) oconh(ch2)5, A=CO).
En opløsning af aminproduktet fra eksempel 50b (0,75 g, 1,8 mmol), 15 produktet fra eksempel 34a (0,675 g, 1,8 mmol), TEA (0,52 ml, 3,6 mmol), CH^CN (25 ml) og vand (25 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 2 dage, før opløsningsmidlet blev fjernet i vakuum til dannelse af det rå produkt, der blev renset ved lynkromatografi (CH30H:CHCl2 (2,5:97,5)) til dannelse af produktet 20 (1,13 mmol, 60%) som et bleggult fast stof. TLC, R^ = 0,5, CH30H:CHC13 (5:95).
c. 3(RS)-1-[l-oxo-6-[2-(2-pyridyl)ethoxy]-carbonylaminohexyl]- N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]1-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3)CH3, R3=(2-pyridyl)-(CH2)20C0NH(CH2)5, 2 5 A=C0).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 31c blev produktet fra eksempel 34c omdannet til titelproduktet, således at det, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CH2Cl (3:97)), gav titelproduktet i et udbytte på 10%. HPLC, tR = 1,84, Col A, 30 H20:CH3CN (60:40), FR = 2,0.
DK 172736 B1 73
Analyse beregnet for C25H35F3N4°5'0'5 H20: C 55'85' H 6,75, N 10,40.
Fundet: C 56,08, H 6,82, N 10,43.
EKSEMPEL 35.
5 3(RS)-1- [2-phenylmethoxy-l-(phenylmethoxymethyl)ethoxycarbonyl)- N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH(CH3>CH3, R3=(ØCH2OCH2)2CH, A=OCO).
a. 4-nitrophenyl-2-phenylmethoxy-l-(phenylmethoxymethyl)ethyl-carbonat.
10 TEA (0,74 g, 7,34 mmol) blev sat dråbevis til en omrørt opløsning af p-nitrophenylchlorformiat (1,48 g, 7,34 mmol) og Et20 (30 ml) ved 0 - 5°C. Til ovennævnte reaktionsblanding blev sat en opløsning af 1,3-dibenzylglycerin (2,0 g, 7,34 mmol) og Et2<D (20 ml) ved 0 - 5°C, og den fremkomne blanding blev omrørt i 15 2 timer ved 0 - 5°C, før den fik lov at opvarme til stuetempera tur og blev omrørt natten over. Reaktionsblandingen blev filtreret og koncentreret i vakuum til dannelse af 3,6 g af en gul olie, der blev renset ved lynkromatografi (hexan:Et20 (8:2)) til dannelse af 2,19 g (68%) af titelforbindelsen som en klar 20 olie. TLC, Rf = 0,33, hexan:ether (7:3).
b. 2 (RS) , 3 (SR) -1-[2-phenylmethoxy-l-(phenylmethoxymethyl)-ethoxycarbonyl]-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpenty1)]-L-prolinamid (formel Vila, R1=CH(CH3)CH3, R3=(ØCH2OCH2)CH, A=0C0), 25 Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 7b fik produktet fra eksempel 35a lov til at reagere med produktet fremstillet ifølge fremgangsmåden fra eksempel 2b til dannelse, efter rensning DK 172736 B1 74 ved lynkromatografi (CHCl^:EtOAc (95:5)), af titelproduktet (62%). HPLC, t = 5,81, 6,29, Col A, H20:CH3CN (40:60), FR = 2,0.
c. 3(RS)-1-[2-phenylmethoxy-l-(phenylmethoxymethyl)ethoxy-5 carbonyl]-N-[3-(1,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L- prolinamid (formel la, R1=CH(CH3)CH3, R1=(ØCH2OCH2)2CH, A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 31c blev produktet fra eksempel 35b oxideret til dannelse, efter rensning ved 10 lynkromatografi (CHCl3:EtOAc (98:2)), af titelproduktet (13%).
HPLC, tR = 5,62, Col A, H2<0:CH3CN (40:60) , FR = 2,0.
Analyse beregnet for C29H35F3N2°6'0'25 H20: C 61,20, H 6,28, N 4,92.
Fundet: C 61,28, H 6,34, N 5,15.
15 EKSEMPEL 36.
(RS) -1- [l-oxo-4- (l-oxo-2-phenoxyethylarrino)butyl]-N-[3-(1,1,1-trifluor- 4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH(CH3)CH3, R1=ØOCH2CONH(CH2)3, A=CO>.
a. Ethyl-4-(l-oxo-2-phenoxyethylamino)butanoat.
20 Til en omrørt blanding af ethyl-4-aminobutanoat-hydrochlorid (3,4 g) og phenoxyacetylchlorid (2,76 ml) i 50 ml Et20 og 50 ml vand blev i én portion sat NaHC03 (4,2 g) . Efter 2 timer blev lagene skilt, og den organiske fase blev vasket (1 N HC1, saltvand), tørret (MgS04) og filtreret. Inddampning af opløs-25 ningsmidlet i vakuum gav 3,1 g (53%) af titelforbindelsen som en olie.
DK 172736 B1 75 b. 4- (l-oxo-2-phenoxyethylamino)butansyre.
En blanding af produktet fra eksempel 36a (3,1 g) i 1 N NaOH (15 ml) blev omrørt i 6 timer ved stuetemperatur. Den fremkomne opløsning blev gjort sur med 2 N HC1. Det faste stof, 5 som udfældedes, blev opsamlet, vasket med vand og tørret i højvakuum. Der fremkom 2,5 g (95%) af titelforbindelsen som et hvidt fast stof, smeltepunkt 91 - 94°C.
c. 2(RS),3 (SR) -1-[l-oxo-4-(l-oxo-2-phenoxyethylamino)butylJ-N-[3- (1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid 10 (formel Vila, R1=CH (CH3)CH3, R3=ØOCH2CONH (CH2) 3, A=C0).
Ved at anvende fremgangsmåden fra eksempel 32a fik produktet fra eksempel 36b lov til at reagere med produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 2b til dannelse, efter rensning ved en oparbejdning med syre og base, af titel-15 produktet (92%). TLC, Rf = 0,43, 0,48, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
d. 3(RS)-1-[l-oxo-4-(l-oxo-2-phenoxyethylamino)butyl]-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl) ]-L-prolinamid (formel la, R^CH (CHj) CH3, R3=ØOCH2CONH (CH2) 3, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet 20 fra eksempel 36d oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CH2Cl2 (3:97)), af titelproduktet (75%).
HPLC, tR = 4,62, 6,02, Col A, CH3CN:H20 (65:35), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C23H30F3N3°5: C 56'26' H 6'28' N 8/56.
25 Fundet: C 56,28, H 6,40, N 8,30.
EKSEMPEL 37.
DK 172736 B1 76 3(RS)-l-(4-methoxy-l, 4-dioxobutyl)-n-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl- 2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R^=CH(CH^) r3=ch3oco(ch2)2, A=CO).
a. 2(RS),3(SR)-1-(4-methoxy-l,4-dioxobutyl)-N-[3-(1,1,1- 5 trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vila, R1=CH (CH3)CH3 , R3=CH3OCO (CH2)2, A=CO).
Til en omrørt blanding af produktet fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 2b (1,34 g) i CH2C12 (50 ml) og 1 N NaOH (6 ml), afkølet i et bad af is og vand, blev dråbevis 10 sat 3-carbomethoxypropionylchlorid (0,75 g). Efter en time blev lagene adskilt, og den organiske fase blev tørret (Na2SC>4) , filtreret og inddampet til dannelse af 1,1 g (58%) af titelforbindelsen som et hvidt pulver. TLC, Rf = 0,57, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
b. 3(RS)-1-(4-methoxy-l,4-dioxybutyl)-N- [ 3- (1,1,1-trifluor- 15 4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3)CH3, R3=CH3OCO(CH2)2, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 61c blev produktet fra eksempel 37a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CH2Cl2 (2:98)), af titelproduktet (71%).
20 TLC, Rf = 0,58, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
Analyse beregnet for C16H23F3N2°5'0775 H2°: C 48'79' H 6,27, N 7,11.
Fundet: C 49,04, H 6,12, N 6,83.
i EKSEMPEL 38.
DK 172736 B1 77 3 (RS)-l- [3-(1,1-dimethylethoxycarbonyl)amino-1-oxopropyl]-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R^CH (CH-j) CH3, R3= (CH3> 3COCONH (CH2> 2 , A=CO).
a. 2(RS,3(SR)-l-[3-(1,1-dimethylethoxycarbonyl) amino-1-oxo-5 propyl]-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L- prolinamid (formel Vila, R1=CH(CH3)CH3, R3=(CH3>jCOCONH(CH2>2, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 32 a fik 3-(BOC-amino)propansyre lov at reagere med produkt fremstillet ved 10 anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 2b til dannelse af titelproduktet (80%). TLC, Rf = 0,35, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
b. 3(RS)-l-[3-(1,1-dimethylethoxycarbonyl)amino-l-oxopropyl]-N- [3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3) CH3, R3= (CH3) 3COCONH (CH2) 2, A=CO).
15 Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 61c blev produktet fra eksempel 38a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CH2Cl2 (2:98)), af det nævnte produkt (61%).
TLC, Rf = 0,46, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
Analyse beregnet for 20 C19H30F3N3°5'°'75 H20: C 50'83' H 6'62' N 9»39.
Fundet: C 51,18, H 7,00, N 9,28.
EKSEMPEL 39.
3(RS)-1-(3-benzoylamino-l-oxopropyl)-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH(CH3)CH3, 25 R3=ØCONH(CH2)2, A=C0).
DK 172736 B1 78 a. 2 (RS),3 (SR) -1-(3-benzoylamino-1-oxopropyl)-N-[3- (1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpenty1)]-L-prolinamid (formel Vila, R1=CH (CH3) CH3, R3=0CONH(CH2)2, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 32a fik 3-(benzoyl-5 amino)propansyre lov at reagere med produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 2b til dannelse af titelproduktet (83%). TLC, Rf = 0,39, 0,42, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
b. 3(RS)-1-(3-benzoylamino-l-oxopropyl)-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, 10 R1=CH (CH3)CH3, R3=ØCONH (CH2) 2, A=CO).
Ved at anvende fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet fra eksempel 39a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CH2Cl2 (2:98)), af titelproduktet (48%).
TLC, Rf = 0,54, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
15 Analyse beregnet for C21H26F3N3°4: C 57'14' H 5'94' N 9,52.
Fundet: C 57,12, H 6,59, N 9,45.
EKSEMPEL 40.
3(RS)-1-[3-(l-oxo-2,2-diphenylethyl) amino]-1-oxobutyl-N-[3-20 (1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3) CH3 , R3=02CHCONH (CH2) , A=CO).
a. Ethyl-3-(l-oxo-2,2-diphenylethyl)aminobutanoat.
Til en omrørt opløsning af ethyl-4-aminobutyfat-hydrochlorid (2,51 g) og diphenylacetylchlorid (3,46 g) i 50 ml CH2C12 blev 25 sat 50 ml vand, efterfulgt af tilsætning af en portion NaHC03 (3,4 g). Efter 2 timer blev lagene adskilt og den organiske DK 172736 B1 79 fase tørret (Na2SC>4) , filtreret og inddampet. Der fremkom 3,5 g (72%) af titelforbindelsen som et hvidt fast stof.
TLC, Rf = 0,71, MeOH:CH2Cl2 (5:95).
b. 3-(l-oxo-2,2-diphenylethyl)aminobutansyre.
5 En blanding af produktet fra eksempel 40a (3,5 g) i 1 N NaOH (30 ml) og EtOH (10 ml) blev omrørt i 10 timer. Opløsningen blev så ekstraheret med Et20. Den vandige fase blev gjort sur med 2 N HC1, og det udfældede faste stof blev opsamlet, vasket og tørret i højvakuum. Der fremkom 2,9 g (93%) af titelforbin-10 delsen som et hvidt pulver.
c. 2(RS),3(SR)-l-[3-(l-oxo-2,2-diphenylethyl)amino-l-oxobutyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-pro linamid (formel Vila, R1=CH (CH3) CH3, R3=02CHCONH (CH2) 3, A=C0).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 32a fik produktet 15 fra eksempel 40b lov at reagere med produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 2b til dannelse af titelproduktet (81%). TLC, Rf = 0,13, MeOH:CH2Cl2 (5:95).
d. 3(RS)-1-[3- (l-oxo-2,2-diphenylethyl)amino-l-oxobutyl-N-[3-(1,1,1-tri fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid 20 (formel la, R1=CH (CH3) CH3, R3= 02CHCONH (CH2) 3 , A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61a blev produktet fra eksempel 40c oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CH2Cl2 (2:98)), af titelproduktet (27%).
TLC, Rf = 0,24, MeOH:CH2Cl2 (5:95).
25 Analyse beregnet for C29H34F3N3°4,1,° H20: C 61'31' H 6/48' N 7/39·
Fundet: C 61,58, H 6,77, N 7,43.
3 (RS)-1- [2- (2-methoxyethoxy)ethoxycarbonyl]-N-[3-(1,1,1- trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3)CH3, R3=CH30(CH2)20(CH2)2, A=OCO).
EKSEMPEL 41.
DK 172736 B1 80 a. 2(RS),3(SR)-1-[2-(2-methoxyethoxy)ethoxycarbonyl]-N-[3- 5 (1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vila, RL=CH (CH-j) CH3, R3=CH30 (CH2) 20 (CHj) 2 , A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 7b fik produktet fra eksempel 19a lov til at reagere med produkt fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 2b til dannelse af titel-10 produktet (75%) efter rensning ved tør søjlekromatografi over silicagel under anvendelse af gradient-eluering med acetone: hexan (10:90) til (50:50). TLC, R^ = 0,30, 0,35, acetone:hexan (40:60).
b. 3(RS)-1-(2-(2-methoxyethoxy)ethoxycarbonyl]-N-[3-(1,1,1- 15 trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3)CH3, R3=CH30(CH2)20(CH2)2, A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet fra eksempel 41a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (acetone:CHC13 (1:3)), af titelproduktet (42%).
20 HPLC, tR = 5,69, Col A, H20:CH3CN (75:25), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C17H27F3N2Og: C 49,39, H 6,83, N 6,78.
Fundet: C 49,27, H 6,80, N 6,48.
i 3(RS)-1-t1/4-dioxo-4-(phenylmethylamino)butyl]-N-[3-(1,1,1- trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R^CH (CH3)CH3, R3=ØCH2NHCO(CH2) 2, A=CO).
EKSEMPEL 42.
DK 172736 B1 81 a. 4-OXO-4-(phenylmethylamino)butansyre.
5 En blanding af benzylamin (10,7 g) og ravsyreanhydrid (10 g) blev omrørt i THF (1 liter) i 2 dage. Det faste stof blev frafiltreret og opløst i 1 N NaOH (110 ml). Den vandige fase blev vasket med Et20 og derefter gjort sur med koncentreret HC1 under afkøling i et bad af is og vand. Det faste stof blev op-10 samlet, vasket med vand og tørret i højvakuum. Der fremkom 10,9 g (53%) af titelforbindelsen som et hvidt pulver, smeltepunkt 137,5 - 138°C.
b. 2(RS), 3(SR)-1-[1,4-dioxo-4-(phenylmethylamino)butyl]-N-[3- (l,l,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid 15 (formel Vila, R^CH (CH3)CH3,R3=ØCH2NHCO (CH2) 2, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 32a fik produktet fra eksempel 42a lov at reagere med produkt fremstillet under anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 2b til dannelse af titelforbindelsen (74%). TLC, Rf = 0,48, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
20 c. 3 (RS)-l-[l,4-dioxo-4-(phenylmethylamino)butyl]-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, r1=ch(ch3)ch3, r3=øch2nhco(ch2) 2, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet fra eksempel 42b oxideret til dannelse, efter rensning ved lyn-25 kromatografi (MeOH:CH2Cl2 (2:98)), af titelproduktet (40%).
TLC, Rf = 0,56, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
DK 172736 B1 82
Analyse beregnet for C22H28F3N3°4: C 58'10' H 6'20' N 9'23*
Fundet: C 57,90, H 6,36, N 9,27.
EKSEMPEL 43.
5 3(RS)-1-[l-oxo-3-(phenylmethoxycarbonylamino)propyl]-N-[3-(1,1,1- trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, rl=ch(ch3)ch3, r3=øch2oconh(ch2)2, A=CO).
a. 2(RS),3(SR)-1-[l-oxo-3-(phenylmethoxycarbonylamino)propyl]-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-me thylpentyl)]-L-prolinamid 10 (formel Vila, R1=CH (CH3)CH3, R3=ØCH2OCONH (CH2) 2, A=CO).
Ved at anvende fremgangsmåden i eksempel 32a, fik CBZ-(3-alanin lov til at reagere med et produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 2b til dannelse af titelproduktet (82%). TLC, Rf = 0,59, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
15 b. 3(RS)-1-[l-oxo-3-phenylmethoxycarbonylamino)propyl]-N-[3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3)CH3 , R3=ØCH2OCONH (CH2) 2, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet fra eksempel 43a oxideret til dannelse, efter rensning ved lyn-20 kromatografi (MeOH:CH2Cl2 (2:98)), at titelproduktet (35%).
TLC, Rf = 0,23, MeOH:CH2Cl2 (5:95).
Analyse beregnet for C22H28P3N3°5'0'4 H20: C 55'20' H 6,06, N 8,77.
Fundet: C 55,28, H 6,25, N 8,55.
3(RS)-1-[l-oxo-4-(phenylmethoxycarbonylamino)butyl]-N-(3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R^CHtCH^CHj, R3=ØCH2OCONH(CH2)3, A=CO).
EKSEMPEL 44.
DK 172736 B1 83 a. 2 (RS) ,3(SR)-l-[l-oxo-4-(phenylmethoxycarbonylamino)butyl]-N- 5 [3- (1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vila, R1=CH (CH3) CH3 , R3=ØCH2OCONH (CH2) 3 , A=CO).
Ved at anvende fremgangsmåden i eksempel 32a fik CBZ-4-amino-butansyre lov at reagere med et produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 2b til dannelse af titel-10 produktet (72%). TLC, Rf = 0,47, Et20:Et0Ac (1:1).
b. 3(RS)-1-[l-oxo-4-(phenylmethoxycarbonylamino)butyl]-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3) CH3, R3=ØCH2OCONH(CH2) 3, A=CO).
Ved at anvende fremgangsmåden fra eksempel 61c blev produktet 15 fra eksempel 44a oxideret til dannelse, efter rensning ved præparativ TLC (MeOH:CHCl3 (2,5: 97,5)),af titelproduktet (32%).
TLC, Rf = 0,65, 0,68, MeOH:CHCl3 (1:9).
EKSEMPEL 45.
3R(eller S)-1-[l-oxo-4-phenoxy-2-(2-phenoxyethyl)butyl)-N-[3-20 (l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, r1=ch(ch3)ch3, r3=[øo(ch2)2j2ch, A=CO). a. Diethyl-2,2-di(2-phenoxyethyl)malonat.
Til en omrørt opløsning af natrium (2,3 g) i absolut EtOH (50 ml) blev sat diethylmalonat (15,2 ml), efterfulgt af 2-phenoxyethyl- DK 172736 B1 84 chlorid (15,7 g). Reaktionsblandingen blev så tilbagesvalet i 12 timer. EtOH blev afdampet i vakuum, og blandingen blev fortyndet med vand (40 ml). Den vandige fase blev ekstraheret med Et20. De forenede Et20-ekstrakter blev vasket (saltvand), 5 tørret (MgSO^), filtreret og inddampet. Kolbe-til-kolbe- destillation gav 12,2 g (27%) af titel-diesteren som en klar væske, kogepunkt 155 - 175°C (100 Pascal, 0,8 Torr). TLC,
Rf = 0,34, CH2C12.
b. 4-phenoxy-2-(2-phenoxyethyl)butansyre.
10 En blanding af produktet fra eksempel 45a (10,0 g) og kaliumhydroxid (17,7 g) i vand (22 ml) blev opvarmet under tilbagesvaling i 4 timer. Reaktionsblandingen blev afkølet og syrnet med koncentreret HC1. Det udfældede faste stof blev opsamlet, vasket med vand og lufttørret. Det fremkomne faste stof (8,44 g) 15 blev opvarmet til 170°C i 2 timer og derefter afkølet. Omkrystallisation af det faste stof af cyklohexan gav 4,1 g (93%) af titelforbindelsen som fine hvide nåle, smeltepunkt 85 - 86°C.
Analyse beregnet for C18H20°4: C 71'90' h 6'71· 20 Fundet: C 71,92, H 6,71.
c. 4-phenoxy-2-(2-phenoxyethyl)butanoylchlorid.
En blanding af produktet fra eksempel 45b (1,5 g) og thionyl-chlorid (0,73 ml) blev opvarmet på dampbad i en time. Reaktionsblandingen blev så destilleret. Titelproduktet, syrechloridet, 25 fremkom som en klar olie i et kvantitativt udbytte og blev anvendt direkte.
d. 2(RS),3(SR)-1-[l-oxo-4-phenoxy-2-(2-phenoxyethyl)butyl]-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vila, R1=CH(CH3)CH3, R3=[00(CH2)212CH' A-CO).
i DK 172736 B1 85
Ved at anvende fremgangsmåden fra eksempel 37a fik produktet fra eksempel 45c lov at reagere med et produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 2b til dannelse af titelproduktet (95%). TLC, Rf = 0,47, 0,54, Et20.
5 e. 3R(eller S)-[l-oxo-4-phenoxy-2-(2-phenoxyethyl)butyl]-Ν-Γ 3- (1,1, 1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3) CH3 , R3= [00 (CH2) 2) 2CH, A=C0).
Ved anvendelse af fremgangsnåden fra eksempel 61c blev produktet fra eksempel 45d oxideret til dannelse af det rå produkt som 10 en blanding af diastereomerer, der blev adskilt ved lynkromatogra-fi (Et20:hexan (gradient-eluering, 60:40 til 75:25)). Den hurtigt eluerende diastereomer var titelforbindelsen, der fremkom i et udbytte på 27,7%. HPLC, tR = 6,94, Col A, CH3CN:H20 (65:35), FR « 2,0.
15 Analyse beregnet for C29H35F3N2°5: C 63'49' H 6'43' N 5,11.
Fundet: C 63,39, H 6,47, N 5,07.
EKSEMPEL 46.
3S(eller R)-[l-oxo-4-phenoxy-2-(2-phenoxyethyl)butyl]-N-[3-20 (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3)CH3, R3=[00(CH2)2]2CH, A=CO).
Fra adskillelsen af diastereomererne af det rå produkt beskrevet i eksempel 45e var den langsomt eluerende diastereomer titelforbindelsen hér, der fremkom i et udbytte på 28,3%.
25 HPLC, t = 5,04, Col A, CH3CH:H20 (65:35), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C29H35F3N205: C 63,49, H 6,43, N 5,11.
Fundet: C 63,50, H 6,45, N 5,26.
EKSEMPEL 47.
DK 172736 B1 86 3(RS)-l-[6 -(4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonylamino]-l-oxo-hexyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH(CH^)CH3, R3=4-(CH3CH2OCO)ØNHCONH(CHj)g, A=CO).
5 a. 2(RS),3(SR)-1-[6- {4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl- amino]-l-oxohexyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vila, R^CH (CH3>CH3, R3=4 (CH3CH2OCO) -ØNHCONH (CH2)5> A=CO).
Ethyl-p-isocyanatobenzoat (0,288 g, 1,5 mmol) blev sat til en 10 omrørt opløsning af produktet fra eksempel 50b (0,6 g, 1,5 mmol) og TEA (0,15 g, 1,5 mmol) og DMF (20 ml) under nitrogen ved stuetemperatur. Den fremkomne blanding blev omrørt ved stuetemperatur natten over, før den blev koncentreret i vakuum og efterlod en ravfarvet rest, der blev opløst i EtOAc. EtOAc-15 opløsningen blev vasket (1 n HCl), tørret (MgSO^), filtreret og koncentreret i vakuum og efterlod 1,15 g olieagtig remanens.
Denne remanens blev renset ved lynkromatografi (CHC13:CH30H (97:3)) til dannelse af 0,62 g (70%) af titelforbindelsen som et hvidt fast stof. TLC, Rf = 0,28, 0,35. CHCl3:CH3OH (95:5).
20 b. 3(RS)-l-[6- (4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonylamino]-l-oxo-hexyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH(CH3)CH3, R3=4(CH3CH2OCO)ØNHCONH(CHj)5, A=C0).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet 25 fra eksempel 47a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (CHCl3:MeOH (97:3)), af titelproduktet (43%).
HPLC, tR = 12,39, 15,79, Col A, H20:CH3CN (65:35), FR = 2,0.
DK 172736 B1 87
Analyse beregnet for C27H37F3N4°6,;L'0 H2° : C 55,09, H 6,68, N 9,51.
Fundet: C 54,75, H 6,63, N 9,29.
EKSEMPEL 48.
5 3 (RS)-1- [6- (phenylmethoxycarbonylamino)-1-oxohexyl]-N-[3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, r1=ch(ch3)ch3, r3=øch2oconh(ch2)5, A=CO).
Ved at anvende fremgangsmåden fra eksempel 31c blev produktet fra eksempel 50a oxideret til dannelse, efter rensning ved lyn-10 kromatografi (CHCl3:MeOH (97:3)), af titelproduktet (31%).
HPLC, tR = 4,06, Col A, CH3CN:H20 (1:1), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C25H34F3N3°5'0'5 H20: C 57'46' H 6»75» N 8*04.
Fundet: C 57,87, H 6,24, N 7,86.
15 EKSEMPEL 49.
3 (RS)-1- [6- (4-hydroxycarbonylpheny1)aminocarbonylamino]-1-oxo-hexyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3) CH3, R3=4-(H0C0) ØNHC0NH (CH2) 5 , A=C0).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 14 blev produktet 20 fra eksempel 47b omdannet til titelproduktet i et udbytte på 38%. HPLC, tR = 6,24, 8,0, Col A, H20:CH3CN (75:25), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C25H33F3N406,2,5 H20: C 51,1, H 6,50, N 9,50.
Fundet: C 51,34, H 5,93, N 8,95.
3(RS)-1- (6-phenylsulfonylamino-l-oxohexyl)-N-[3-(1,1,1-trifluor- 4-methyl-2-oxopentyl)J-L-prolinamid (formel la, R1=CH (CH3)CH3, R3=ØS (02)NH (CH2) 5, A=CO).
EKSEMPEL 50.
DK 172736 B1 88 a. 2 (RS) , 3 (SR)-l- [6- (phenylmethoxycarbonylami.no) -1-oxohexyl ] -5 N-[3- (l,l,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vila, R1=CH(CH3)CH3, R3=ØCH2OCONH(CH2)5, A=CO).
DCC (6,35 g, 30,8 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af N-CBZ-aminocapronsyre (6,84 g, 25,7 mmol), materialet fremstillet ved fremgangsmåden ifølge eksempel 2b (6,89 g, 25,7 mmol), 10 HOBT (6,94 g, 51,4 mmol) og tør THF (250 ml) ved 0°C under nitrogen. Den fremkomne reaktionsblanding blev omrørt ved 0°C i en time, fik lov at opvarme til stuetemperatur og blev omrørt natten over, før den blev filtreret. Filtratet blev koncentreret i vakuum til en brun remanens, som blev opløst i CHC13, 15 og CHCl3~opløsningen blev vasket (20% citronsyreopløsning), tørret (Na2S0^), filtreret og koncentreret i vakuum. Remanensen blev renset ved lynkromatografi (CHCl3:Me0H (97:3)) til dannelse af 8,0 g (61%) af titelforbindelsen som et voksagtigt fast stof.
TLC, Rf = 0,35, CHC13:MeOH (95:5).
20 b. 2(RS),3(SR)-1-(6-amino-l-oxohexyl)-N-[3-(1,1,1-trifluor- 2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vila, R1=CH (CH3)CH3, R3=H2N(CH2) 57A=CO).
En blanding af produktet fra eksempel 50a (2,06 g, 3,99 mmol) ,
EtOH (100 ml) og 10% Pd/C (0,3 g) blev anbragt på en Parr® 25 ryster under 45 psi H. i 3 timer. Blandingen blev filtreret gennem Celite og Celite-kagen blev vasket med EtOH. EtOH-vaskevæskerne og ovenstående filtrat blev forenet og koncentreret i vakuum til dannelse af 1,36 g (86%) af titelforbindelsen i DK 172736 B1 89 som en bleggrøn voksagtig olie. TLC, = 0,2, CHCl,:MeOH (85:15).
c. 2(RS),3(SR)-1-(6-phenylsulfonylamino-l-oxohexyl)-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vila, r1=ch(ch3)ch3, r3=øs(o2)nh(ch2)5, A=CO).
5 Benzensulfonylchlorid (0,6 g, 1,5 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af produktet fra eksempel 50b (0,26 g, 1,5 mmol), TEA (0,3 g, 3,0 mmol) og tør DMF (20 ml) under nitrogen ved stuetemperatur, og den fremkomne blanding blev omrørt ved stuetemperatur natten over. DMF blev fjernet i vakuum, således at 10 der blev efterladt en brunlig remanens, der blev opløst i EtOAc. EtOAc-opløsningen blev vasket (1 N HC1), tørret (MgSO^) og filtreret. Filtratet blev koncentreret i vakuum til en remanens, som blev renset ved lynkromatografi (CHCl3:MeOH (97:3)) til dannelse af 0,48 g (60%) af titelforbindelsen som et hvidt 15 puljer. TLC, Rf = 0,30, 0,40, CHCl-^MeOH (95:5).
d. 3(RS)-1-(6-phenylsulfonylamino-l-oxohexyl)-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl))-L-prolinamid (formel la, r1=ch(ch3)ch3, r3=øs(o2)nh(ch2)5, a=co).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 8b blev produktet 20 fra eksempel 50c oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (Et20:hexan (3:1)), efterfulgt af en anden søjle under anvendelse af CHCl3:MeOH (97:3) , af titelproduktet (36%). HPLC, tR = 8,48, 10,33, CH3CN:H20 (35:65), FR = 2,0.
EKSEMPEL 51.
25 3(RS)-(l-naphthylcarbonyl)-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4- raethyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=l-naphthy1, A=CO).
DK 172736 B1 90 a. 2(RS),3(SR)-(1-naphthylcarbonyl)-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=l-naphthyl, A=C0).
Efter fremgangsmåden ifølge eksempel 20a fik materialet frem-5 stillet ved fremgangsmåden fra eksempel 3d lov at reagere med 1-naphthalencarbonylchlorid til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 38% , efter rensning ved præparativ TLC (hexan:Et20(4:6)). TLC, Rf = 0,46, 0,41, MeOH:CHCl3 (5:95).
Analyse beregnet for 10 C27H32F3N304: C 60,32, H 6,37, N 7,82.
Fundet: C 60,89, H 6,21, N 7,68.
b. 3(RS)-(1-naphthylcarbonyl)-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=l-naphthyl, a=CO).
15 En opløsning af DMSO (29,7 g, 380 mmol) i CH2C12 (81 ml) blev langsomt sat til en forud afkølet opløsning (-43°C) af oxalyl-chlorid (24,0 g, 190 mmol) i CH2C12 (350 ml), og den fremkomne opløsning blev omrørt i 15 minutter, før en opløsning af produktet fra eksempel 51a (9,4 mmol) i CH2C12 (83 ml) blev tilsat.
20 Efter at reaktionen var blevet omrørt i en time ved -30°C,blev diisopropylethylamin (48,9 g, 380 mmol) tilsat dråbevis, og reaktionsblandingen fik lov at opvarme til stuetemperatur, før den blev vasket (1 N HC1, 5% vandig NaOCl, saltvand), tørret (Na2S04), filtreret og koncentreret i vakuum. Remanensen blev 25 renset ved præparativ TLC (hexan:Et20 (40:60)) til dannelse af titelproduktet (38%). HPLC, tR = 5,21, 7,31, Col A, CH3CN: H20:TFA (50:50:0,1), FR = 1,5.
Analyse beregnet for C27H32F3N3O4,0,75 H20: C 60,32, H 6,37, N 7,82.
30 Fundet: C 60,69, H 6,21, N 7,68.
i EKSEMPEL 52.
DK 172736 B1 91 3(RS)-[4- (methylsulfonylaminocarbonyl)phenylaminocarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=4-[CH3S(C>2)NHCO]0, A=NHCO).
5 Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 89 fik materialet fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 16 lov til at reagere med methansulfonamid til dannelse af titelproduktet (59%) efter rensning ved lynkromatografi over Baker® , pH 5,0, silicagel (gradient, CHCl3:MeOH (97:3) til (90:10)). HPLC, tR = 2,60, 10 3,33, Col C, H20:CH3CN (60:40), FR = 6,0.
Analyse beregnet for C25H34F3N5°7S'0,5 H20: C 48'85' H 5,74, N 11,39.
Fundet: C 49,03, H 5,74, N 10,86.
EKSEMPEL 53.
15 3(RS)-[2-(4-morpholinyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1- trifluor-4-methyl-2-dxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=4-morpholinyl-CH2CH2, A=OCO).
a. 2(RS),3(SR)-[2-(4-morpholinyl) ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-20 [3-(l,l,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=4-morpholinyl-ch2ch2, a=OCO).
Ved at anvende fremgangsmåden fra eksempel 7b fik materialet fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 3d lov til at DK 172736 B1 92 reagere med materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 33a til dannelse af den nævnte forbindelse, isoleret i et udbytte på 55%, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CHCl (2,5:97,5)). HPLC, tR = 4,62, 5,85, Col A, CH3CN:H20 (1:1), 5 FR = 2,0.
Analyse beregnet for C23H39F3N4°6'H20: C 50'91' H 7'61' N 10,32.
Fundet: C 50,95, H 7,20, N 10,02.
b. 3(RS)-{2-(4-morpholinyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-(3-(1,1,Ι-ΙΟ trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=4-morpholinyl-CH2CH2, A=OCO).
En opløsning af DMSO (29,7 g, 380 mmol) i CH2C12 (135 ml) blev sat til en forud afkølet (-43°C) opløsning af oxalylchlorid 15 (24,0 g, 190 mmol) i CH2C12 (350 ml), og den fremkomne opløsning blev omrørt i 15 minutter, før en opløsning af produktet fra eksempel 53a (9,4 mmol) i CH2C12 (125 ml) blev tilsat. Reaktionsblandingen fik lov at opvarme fra -43°C til - 20°C, medens den blev omrørt i en time. Derefter blev diisopropylethylamin 20 (48,9 g, 380 mmol) tilsat dråbevis, og reaktionsblandingen fik lov at opvarme til stuetemperatur, før den blev yderligere fortyndet med CH^Cl^ vasket (vandig NaOH med pH = 10), tørret (K2C03/Na2S0^) og koncentreret i vakuum. Remanensen blev renset ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (2:98)) til dannelse af 25 titelproduktet (18%). HPLC, t =2,00, 2,60, Col A, H20:CH3CN (1:1) , FR = 2,0.
Analyse beregnet for C23H37F3N4°6,;L'5 H20: C 50'26' H 7'34' N 10,19.
Fundet: C 50,49, H 6,96, N 9,96.
i EKSEMPEL 54.
DK 172736 B1 93 3(RS)-[(2,4-dichlorphenyl)carbonyl)]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1—CH (CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=2,4-dichlor-Ø, a=CO).
a. 2(RS),3(SR)-[(2,4-dichlorphényl)carbonyl]-L-valyl-N-[3- 5 (1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel VIIb, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=2,4-dichlor-Ø, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 20a fik materialet fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 3d lov at reagere 10 med 2,4-dichlorbenzoylchlorid til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 98%. TLC, Rf = 0,54, MeOH:CHCl3 (5:95).
b. 3(RS)-[(2,4-dichlorphenyl)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=2,4-dichlor-Ø, A=C0).
15 En opløsning af DMSO (29,7 g, 380 mmol) i CH2C12 (27 ml) blev sat langsomt til en forud afkølet (-65°C) opløsning af oxalyl-chlorid (24,0 g, 190 mmol) i CH^C12 (350 ml), og den fremkomne opløsning blev omrørt i 15 minutter, før der blev tilsat en opløsning af produktet fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 20 54a (9,4 mmol) i CH2C12 (250 ml). Efter at reaktionen var blevet omrørt i en time ved -65°C,blev diisopropylethylamin (48,9 g, 380 mmol) tilsat dråbevis, og reaktionsblandingen fik lov at opvarme til stuetemperatur, før den blev vasket (1 N HCl, saltvand) , tørret (Na2SO^), filtreret og koncentreret i vakuum.
25 Remanensen blev renset ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (3:97)) til dannelse af titelproduktet (15%). HPLC, tR = 17,93, 18,55,
Col A, H20:CH3CN (55:45), FR » 2,0.
DK 172736 B1 94
Analyse beregnet for C23H28C12F3N3°4'H20: C 49'65' H 5'43» N 7,55.
Fundet: C 49,95, H 5,31, N 7,35.
EKSEMPEL 55.
5 3(RS)-phenoxycarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2- oxopentyl) !-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH^iCH^, R2=CH(CH3)2, R3=0, a=OCO).
a. 2(RS),3(SR)-phenoxycarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor- 2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, 10 R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=0, A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 20a fik materialet fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 3d lov at reagere med phenylchlorformiat til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 61% efter rensning ved lynkromatografi 15 (MeOH:CHCl3 (5:95)). TLC, Rf = 0,31, 0,36, MeOH:CHCl3 (3:97).
b. 3(RS)-phenoxycarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl- 2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R3=CH (CH3)CH3, r2=ch(ch3)2, R3=0, a=0C0).
Ved at anvende fremgangsmåden fra eksempel 54b blev produktet 20 fra eksempel 55a oxideret til dannelse, efter rensning ved lyn kromatografi (hexan:Et20 (15:85)), af titelproduktet (37%).
HPLC, tR = 2,72, 3,55, Col A, H20:CH3CN (1:1), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C2 3H30F3N3°5'0'5 H20: C 55'86' H 6'32' N 8'513· 25 Fundet: C 56,07, H 6,30, N 8,48.
EKSEMPEL 56.
DK 172736 B1 95 3(RS)-[2-(2-pyridyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH-j) CH3, R2=CH(CH3)2, R3=2-pyridyl-CH2CH2, A=OCO).
5 a. 2(RS),3(SR)-(2-(2-pyridyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1~tri fluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R^=CH (CH3> CH3, R2=CH(CH3)2, R3=2-pyridyl-CH2CH2 , A=0) .
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 34b fik materialet 10 fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 3d lov at reagere med materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 34a til dannelse af den nævnte forbindelse, isoleret i et udbytte på 50%, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (4:96)).
TLC, Rf = 0,30, 0,34, CHCl3:MeOH (95:5).
15 b. 3(RS)-[2-(2-pyridyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-l3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3,R2=CH(CH3)2,R3= 2-pyridyl-CH2CH2, A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 54b, med udeladelse 20 af syrevasken, blev produktet fra eksempel 56a oxideret til dannelse af titelproduktet (19%) efter rensning ved lynkromatografi to gange (hexan:Et20 (1:1) og derefter MeOH:CHCl3 (5:95)).
HPLC, tR = 9,52, 14,58, Col A, H20:CH3CN (60:40), FR = 1,0.
Analyse beregnet for 25 C24H33F3N4O5,0,75 HjO: C 54,59, H 6,58, N 10,61.
Fundet: C 54,63, H 6,47, N 10.55.
EKSEMPEL 57.
DK 172736 B1 96 3(RS)-[(4-fluorphenyl)aminocarbonyl ] -L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CHlCHjiCH , R2=CH(CH3)2, R3=4-F0, A=NHCO).
a. 2(RS),3(SR)-[(4-fluorphenyl)aminocarbonyl]-L-valyl-N-[3- 5 (1,1,1-tri fluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R^CH R2=CH(CH3)2, R3=4-F0, A=NHCO).
Under anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 15a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 3d lov at reagere 10 med 4-fluorphenylisocyanat til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 84%, efter rensning ved lynkromatografi (gradient, MeOH:CHCl3 (2,5:97,5) til (5:95)). TLC (Rf = 0,37, MeOH:CHCl3 (5:95).
b. 3(RS)-[(4-fluorphenyl)aminocarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-15 trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3, r2=ch(ch3)2, R3=4-F0, A=NHCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 54b blev produktet fra eksempel 57a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (3:97)), af titelproduktet (42%). HPLC, 20 tR = 8,87, 12,10, Col A, H20:CH3CN (60:40), FR = 1,0.
Analyse beregnet for C23H30F4N4°4: C 54'97' H 6'02' N 11/15.
Fundet: C 55,18, H 6,15, N 11,08.
EKSEMPEL 58.
DK 172736 B1 97 3 (RS)-[4- (pheny]sulfonylaminocarbonyl)phenylaminocarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH3) CH3, R2=CH(CH3)2, R3=4-[ØS (02)NHC0]0, A=NHCO) .
5 Ved at anvende fremgangsmåden i eksempel 89 fik materialet fremstillet ifølge fremgangsmåden i eksempel 16 lov at reagere med benzensulfonamid til dannelse af titelproduktet (42%) efter rens- (5) ning ved lynkromatografi på Baker ,pH 5,0, silicagel (CHCl^rMeOH (97:3)). HPLC, t = 4,05, 5,93, Col C, H-0:CH^CN (60:40), 10 PR- 6,0.
Analyse beregnet for C30H36F3N507,0,5 H20: C 53,25, H 5,51, N 10,34.
Fundet: C 53,38, H 5,61, N 10,02.
EKSEMPEL 59.
15 3(RS)-[2-(3-thiophenyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1- trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=3-thiophenyl-CH2CH2, A=OCO) .
a. 4-nitrophenyl-2-(3-thiophenyl)ethylcarbonat.
20 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 7a blev 3-thiophen-ethanol behandlet med 4-nitrophenylchlorformiat til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (EtOAc:hexan (1:9)), af titelproduktet (56%). TLC, R^ = 0,25, EtOAc:hexan (1:9).
DK 172736 B1 98 b. 2(RS),3 (SR)-[2-(3-thiophenyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=3-thiophenyl-CH2CH2, A=0).
5 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 7b fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 3d lov at reagere med produktet fra eksempel 59a til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 58% efter rensning ved lynkromatografi (acetone:hexan (3:7)). TLC, Rf = 0,23, 0,27, MeOH:CHCl3 (5:95).
10 Analyse beregnet for C24H34F3N3°5S: C 52'96' H 6'57' N 8/06.
Fundet: C 53,28, H 6,46, N 7,77.
c. 3(RS)-[2- (3-thiophenyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, 15 R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=3-thiophenyl-CH2CH2, A=OCO).
En opløsning af DMSO (29,7 g, 380 mmol) i (135 ml) blev sat langsomt til en forud afkølet (~43°C) opløsning af oxalyl-chlorid (24,0 g, 190 mmol) i CH2C12 (350 ml). Den fremkomne 20 opløsning blev omrørt i 15 minutter, før en opløsning af materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 59b (9,4 mmol) i CH2C12 (125 ml) blev tilsat, og reaktionen blev omrørt ved -430C i yderligere en time. Diisopropylethylamin (48,9 g, 380 mmol) blev tilsat dråbevis, og reaktionsblandingen fik lov at opvarme 25 til stuetemperatur, før den blev vasket (1 N vandig HC1, 5% vandig NaOCl, saltvand), tørret (Na2S04), filtreret og koncentreret i vakuum. Rensning af remanensen ved lynkromatografi (acetone: hexan (1:4)) gav titelproduktet (23%). HPLC, tR = 5,09, 7,61,
Col A, H20:CH3CN (1:1), FR = 2,0.
30 Analyse beregnet for C24H32F3N3°5S: C 53'17' H 6'21' N 8/°9·
Fundet: C 52,92, H 6,26, N 8,09.
i EKSEMPEL 60.
DK 172736 B1 99 3(RS)-(1,1-dimethylethoxycarbonyl)-L-a-aminobutyryl-N-[3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3, r2=ch2ch3, r3=ch3c(ch3)2, A=OCO).
a. 2(RS),3(SR)-(1,1-dimethylethoxycarbonyl)-L-a-aminobutyryl- 5 N—[3- (1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, RX= CH(CH3)CH3, R2=CH2CH3, R3=CH3C(CH3)2, A=OCO).
DCC (5,90 g, 28,7 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af HOBT (7,76 g, 57,4 mmol), BOC-a-aminobutansyre (5,60 g, 27,4 mmol) 10 og materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 2b (7,00 g, 26,1 mmol) i tør THF (130 ml) ved 0°C under nitrogen.
Efter at den fremkomne blanding var blevet omrørt ved 0°C i en time, fik den lov at opvarme til stuetemperatur og blev omrørt natten over. Reaktionsblandingen blev filtreret, og filtratet ' 15 blev koncentreret i vakuum til en remanens, som blev genopløst i EtOAc. Den fremkomne opløsning blev vasket med mættet NaHCOj og saltvand, tørret (Na2S04), filtreret og koncentreret i vakuum til en remanens, der blev renset ved lynkromatografi (EtOAc: CH2C12 (1:3)) til dannelse af titelforbindelsen (95%). TLC, 20 Rf = 0,29, EtOAc:CH2Cl2 (3:7).
b. 3(RS)-(1,1-dimethylethoxycarbonyl)-L-a-aminobutyryl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3, r2=ch2ch3, r3=ch3c(ch3)2, a=0C0).
Ved at anvende fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet i 25 eksempel 60a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (1,5:98,5)),af titelproduktet (47%).
HPLC, tR = 10,21, 14,54, Col A, H20:CH3CN (65:35), FR = 2,0.
DK 172736 B1 100
Analyse beregnet for C20H32F3N3°5: C 53'21' H 7'14' N 9'31’
Fundet: C 53,65, H 7,21, N 9,51.
EKSEMPEL 61.
5 3 (RS) - ll-oxo-2- (2-thiophenyl)ethyl]-L-a-aminobutyryl-N-[3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH2CH3, R3=(2-thiophenyl)CH2, a=CO).
a. 2(RS),3(SR)-L-a-aminobutyryl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy- 10 4-methylpentyl)]-L-prolinamid-trifluoreddikesurt salt (formel IVb, R1=CH (CH3) CH3, R2=CH2CH3).
En opløsning af materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 60a (4,0 g, 8,84 mmol) og TFA (32 ml, 415 mmol) i CH2C12 (32 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 22 timer, før op-15 løsningsmidleme blev fjernet under reduceret tryk, til dannelse af det rå produkt (5 g, mere end 100%) som et farveløst glas, der blev anvendt uden yderligere rensning eller karakterisering.
b. 2(RS),3(SR)-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R^CH (CH3)CH3, R2=CH2CH3, R3=(2- 20 thiophenyl)CH2, a=C0).
DCC (0,315 g, 1,53 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af HOBT (0,413 g, 3,06 mmol), 2-thiopheneddikesyre (0,222 g, 1,53 mmol), NMM (0,154 g, 1,53 mmol) og materiale fremstillet ifølge eksempel 61a (0,650 g, 1,39 mmol) i tør THF (20 ml) ved 25 0°C under nitrogen. Efter at den fremkomne reaktionsblanding var blevet omrørt ved 0°C i en time, fik den lov at opvarme til stuetemperatur og blev omrørt natten over. Reaktionsblandingen DK 172736 B1 101 blev filtreret, og filtratet blev koncentreret i vakuum til en remanens, der blev opløst i EtOAc. Den fremkomne opløsning blev vasket (saltvand), tørret (Na2S04), filtreret og koncentreret i vakuum til en remanens, der blev renset ved lynkromatografi 5 (acetoneshexan (1:1)) til dannelse af titelforbindelsen (33%).
TLC, Rf = 0,40, 0,44, MeOHrCHCl-j (1:9).
Analyse beregnet for C21H30F3N3°4S: C 52'82' H 6'33' N 8,80.
Fundet: C 52,43, H 6,53, N 8,08.
10 C. 3 (RS)-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH-j) CH3, R2=CH2CH3, R3= (2-thiopheny 1) CH2, A=CO).
Til en suspension af CrO^ (0,84 g, 8,4 mmol) i tør CH2C12 (50 ml) blev sat pyridin (1,36 ml, 17 mmol), og blandingen blev omrørt 15 ved stuetemperatur i 30 minutter. Til den fremkomne bourgognefarvede suspension blev sat 1 g Celite ® , efterfulgt af produktet fra eksempel 61b (0,20 g, 0,42 mmol) i CH2C12 (5 ml). Blandingen blev omrørt, indtil TLC viste, at al alkoholen var forbrugt. Blandingen blev så filtreret gennem en pude af silicagel med 20 methanol:chloroform (1:9), og opløsningsmidlerne blev fjernet fra filtratet under vakuum. Det rå produkt blev renset ved præparativ TLC (MeOH:CHCl3 (5:95)) til dannelse af produktet (150 mg) som et hvidt fast stof. HPLC, tR = 4,18, 5,65, Col A, H20:CH3CN (60:40), FR = 2,0.
25 Analyse beregnet for C21H28F3N3°4S'0,5 H2°: C 52'06' H 6'03' N 8/67.
Fundet: C 52,03, H 6,19, N 8,38.
EKSEMPEL 62.
DK 172736 B1 102 3 (RS) - (phenylmethoxycarbonyl) -L-a-aminobutyryl-N- [3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prollnamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3, r2=ch2ch3, r3=øch2, A-OCO).
a. 2(RS),3(SR)-(phenylmethoxycarbonyl)-L-a-aminobutyryl-N-[3- 5 (1,1,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH(CH3)CHj, R2=CH2CH3, R3=ØCH2, A=OCO).
Ved at anvende fremgangsmåden i eksempel 20a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 61a lov at reagere med 1,5 ækvivalenter benzylchlorformiat i 1/4 af den mængde CHClj, 10 der blev anvendt til fremgangsmåden i eksenpel 20a, til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 51%, efter rensning ved lynkromatografi (acetone:hexan (1:4)). TLC, R^ = 0,38, 0,43, acetone:hexan (40:60).
b. 3'(RS) - (phenylmethoxycarbonyl) -L-a-aminobutyryl-N- [3- (1,1,1- 15 trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3, r2=ch2ch3, r3»øch2, A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet fra eksempel 62a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (acetone:hexan (30:70)), af titelproduktet (64%).
20 HPLC, tR = 5,69, 7,75, Col A, H20:CH3CN (55:45), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C23H30F3N3°5,0,8° H20: C 55»26' H 6'37' N 8»40.
Fundet: C 55,10, H 6,19, N 8,77.
EKSEMPEL 63.
DK 172736 B1 103 3(RS)-(phenoxycarbonyl)-L-a-aminobutyryl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CHtCH^CH^ R2=CH2CH3, R3=0, A=0C0).
a. 2(RS),3(SR)-(phenoxycarbonyl)-L-a-aminobutyryl-N-[3-(1,1,1- 5 trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, r1=ch(ch3)ch3, r2=ch2ch3, R3=0, a=OCO).
Ved at anvende fremgangsmåden i eksempel 20a, men ved at anvende NMM i stedet for TEA, fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 61a lov at reagere med 1,5 ækvivalenter phenyΙ-ΙΟ chlorformiat til fremstilling af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 18%, efter rensning ved præparativ TLC (acetone: hexan (3:7)). TLC, R^ = 0,32, 0,37, acetone:hexan (3:7).
b. 3(RS)-(phenoxycarbonyl)-L-a-aminobutyryl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, 15 r1=ch(ch3)ch3, r2=ch2ch3, R3=0, a=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet fra eksempel 63a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (EtOAc:hexan (1:9)), af titelproduktet (60%).
HPLC, tR = 4,57, 6,51, Col A, H20:CH3CN (55:45).
20 Analyse beregnet for C22H28F3N3°5: C 56'04' H 5,98, ** 8,90.
Fundet: C 56,04, H 6,18, N 8,85.
EKSEMPEL 64.
DK 172736 B1 104 3(RS)-14-(1-oxoethylamino)phenylsulfonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trif luor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH^)CH ^, R2=CH(CH3)CH3, R3=4-(CH3CONH)0, A=S(02>).
5 a. 2(RS),3(SR)-[4-(1-oxoethylamino)phenylsulfonyl]-L-valyl-N- [3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel VIIb, R^CH (CH3)CH3 , R2=CH (CH3) CH3, R3=4- (CH3CONH)0, A=S (02)J.
Til en omrørt opløsning af materiale fremstillet ifølge eksempel 10 3d (1,00 g, 2,72 mmol) og NMM (0,28 g, 0,30 ml, 2,80 itnol) i CH2C12 (50 ml) under N2 blev sat 4-acetamidobenzensulfonylchlorid (0,64 g, 2,72 mmol). Efter omrøring af reaktionsblandingen natten over ved stuetemperatur blev opløsningen vasket (5% vandig citronsyre, saltvand), tørret (Na2S04), filtreret og koncentre-15 ret til en orange sirup, der blev lynkromatograferet over silica-gel (350 g) (MeOH:CHCl3 (7:93)) til dannelse af titelproduktet (810 mg, 52,60%). TLC, Rf = 0,34, 0,45, MeOH:CHCl3 (7:93).
b. 3(RS)-[4-(1-oxoethylamino)phenylsulfonyl]-L-valyl-N-[3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, 20 R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)CH3, R3=4-(CH-jCONHJØ, A=S (C>2 ) ) .
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 31c blev produktet fra eksempel 64a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CHC13 (5:95)), af titelproduktet (84%).
25 HPLC, tR = 3,22, 4,58, Col A, CH3CN:H20 (40:60), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C24H33F3N4°6S' H20: C 49'65' H 6'08' N 9,65.
Fundet: C 49,73, H 5,86, N 9,53.
! EKSEMPEL 65.
DK 172736 B1 105 2 6 3(RS)-N - (1,1-dimethylethoxycarbonyl)-N -phenylmethoxycarbonyl- L-lysyl-N-13-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH3>CH3, R2=ØCH2OCONH (CH2) 4, R3=(CH3)3G, 5 A=OCO) .
2 6 a. 2(RS),3(SR)-N -(1,1-dimethylethoxycarbonyl)-N -phenyl- methoxycarbonyl-L-lysyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]- L-prolinamid (formel Vllb, R^=CH(CH^)CHj, r2=øch2oconh(ch2)4, r3=(ch3)3c, . A=OCO).
2 6 10 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 84b fik N -BOC-N -CBZ-L-lysin lov til at reagere med materiale fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 2b til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (gradient-eluering, MeOH:CHCl3 (2,5:97,5) til (5:95)), af titelproduktet (73%). TLC, Rf = 0,57, MeOH:CHCl3 15 (5:95).
2 6 b. 3(RS)-N -(1,1-dimethylethoxycarbonyl)-N -phenylmethoxy- carbonyl-L-lysyl-N-[3-(1,1,1- trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=ØCH2OCONH(CH2)4, r3=(ch3)3c, A=0C0).
20 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 31c blev produktet fra eksempel 65a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (gradient-eluering, MeOH:CHCl3 (2,5:97,5) til (5:95)), af titelproduktet (65%). HPLC, tR = 4,15, 5,14, Col A, H20:CH3CN (45:55), FR = 2,0.
25 Analyse beregnet for C30H43F3N4°7'0'5 H20: C 56'51' H 6'95' N 8'79*
Fundet: C 56,45, H 6,58, N 8,42.
EKSEMPEL 66.
DK 172736 B1 106 3(RS)-t(2-amino-5-chlorphenyl)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2, R3=2-NH2-5-Cl-0, A=CO).
a. 2(RS),3 (SR)-[(2-amino-5-chlorphenyl) carbonyl]-L-valyl-N- 5 [3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)2> R3=2-NH2-5-Cl-0, A=CO).
En opløsning af materiale fremstillet ifølge eksempel 3d (1 g, 2,7 mmol) i CH2C12 (50 ml) blev behandlet med 5-chlorisotonsyre-10 anhydrid (0,54 g, 2,7 mmol) ved stuetemperatur, og blandingen blev omrørt natten over, før den blev vasket (5% vandig NaHC03, saltvand), tørret (Na2SO^), koncentreret i vakuum og renset ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (3:97)) til dannelse af titelproduktet (1,4 g, 78%) som et hvidt skum. TLC, Rf = 0,30,. 0,25, 15 MeOH:CHCl3 (5:95).
b. 3(RS)-[(2-amino-5-chlorphenyl)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3, r2=ch(ch3)2, r3=2-nh2-5-ci-ø, a=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 31c blev produktet 20 fra eksempel 66a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (3:97)), af titelproduktet (76%).
HPLC, tR = 3,41, 4,62, Col A, H2<3:CH3CN (50:50), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C23H30F3N4°4' H20: C 51'45' h 6'01' N 10/43· 25 Fundet: C 51,65, H 5,74, N 9,68.
EKSEMPEL 67.
DK 172736 B1 107 3 (RS)- (4-methoxyphenylcarbonyl> -L-a-aminobutyryl-N- [3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH2CH3, R3=4-(CH30)-0, A=CO).
a. 2(RS),3(SR)~(4-methoxyphenylcarbonyl)-L-a-aminobutyryl-N- 5 [3- (1,1,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)1-L-prolinamid (formel VIIb, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH3CH2, R3=4-(CH30)-0, a=co\
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 20a fik materiale fremstillet ifølge fremgangsmåden i eksempel 61a lov til at 10 reagere med 4-methoxybenzoylchlorid til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 34%, efter rensning ved lynkromatografi (EtOAc:hexan (60:40)). TLC, R^ = 0,71, 0,73, MeOH:CHCl3 (1:9).
Analyse beregnet for 15 C23H32F3N3O5,0,3 H20: C 56,04, H 6,67, N 8,52.
Fundet: C 56,06, H 6,60, N 8,14.
b. 3 (RS)-(4-methoxyphenylcarbonyl)-L-a-aminobutyryl-N-[3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH3CH2, R3»4-(CH30)-0, A=C0).
20 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c, med undtagelse af at alkoholen blev opløst i 5 gange opløsningsmidlet, blev produktet fra eksempel 67a oxideret til dannelse, efter rensning ved præparativ TLC (MeOH:CHCl3 (1:9)), af titelproduktet (40%).
HPLC, tR = 8,89, 11,75, Col A, H20:CH3CN (70:30), FR = 2,0.
25 Analyse beregnet for C23H30F3N3°5/ H20: C 54'86' H 6'41' N 8'35*
Fundet: C 54,89, H 6,38, N 7,48.
EKSEMPEL 68.
DK 172736 B1 108 3(RS)- [2-(tricyklo[3.3.1.1^'^]-dec-l-yl)ethoxycarbonyl]-L-a-aminobutyryl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^=CH(CH^)CH^, R2=CH3CH2~, R3=(1-adamantyl)- CH2CH2' A=OCO).
5 a. 2(RS),3(SR)-[2-(tricyklo[3.3.1.13'7]-dec-l-yl)ethoxy- carbonyl]-L-a-aminobutyryl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl) ]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH(CH;})CH3,R2=CH3CH2, R3=(l-adamantyl)-CH2CH2, a=0C0).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 34b fik materiale 10 fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 61a lov til at reagere med materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 7a til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 42%, efter rensning ved lynkromatografi (EtOAc:hexan (20:80), derefter (50:50)). TLC, Rf = 0,33, 0,44, MeOH:CHCl3 (5:95).
15 b. 3(RS)-[2-(tricyklo[3.3.1.1^'7]-dec-l-yl)ethoxycarbonyl]-L- α-aminobutyryl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L- 1 2 3 prolinamid (formel Ib, R =CH(CH3)CH3, R =CH3CH2> R =(1-adamantyl)-ch2ch2, a=0C0).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet 20 fra eksempel 68a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (Et20:hexan (50:50), derefter (90:10)), af titelproduktet (66%). HPLC, tR = 4,64, 5,63, Col A, H20:CH3CN (25:75), FR = 2,0.
Analyse beregnet for 25 C28H42F3N3°5'0'15 H20: C 60'01' h 7'60*
Fundet: C 59,76, H 7,65.
EKSEMPEL 69.
DK 172736 B1 109 2 6 3(RS)-N -(1,1-dimethylethoxycarbonyl)-N-phenylsulfonyl-L-lysyl- N-[3-(1,1,1-tri fluor-4-methy1-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH3> CH3, R2=ØS (02) NH (CH2) , R3=(CH3>3C, A=OCO).
5 a. 2(RS),3(SR)-N2-(1,1-dimethylethoxycarbonyl)-L-lysyl-N-[3- (1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel VIIb, R1=CH (CHj) CH3 , R2=H2N (CH2) 4 , R3=(CH3)3C, A=OCO),
Til en opløsning af materiale fremstillet ifølge eksempel 65a 10 (3,0 g, 4,8 mmol) i absolut EtOH (60 ml) blev sat 10% Pd/C
(0,6 g). Den fremkomne suspension blev omrørt natten over under en atmosfære af H2> Yderligere 10% Pd/C (0,3 g) blev tilsat, og omrøring blev fortsat i flere timer. Reaktionen blev filtreret gennem Celite® og koncentreret i vakuum til dannelse af 15 produktet (2,48 g), der blev anvendt direkte.
b. 2(RS),3(SR)-N2-(1,1-dimethylethoxycarbonyl)-N^-phenyl-sulfonyl-L-lysyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R^CHiCH^CH^ R2=ØS (02)NH (CH2) 4 , R3=(CH3)3C, A=OCO).
20 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 72b, med undtagelse af at der blev anvendt NMM i stedet for TEA, blev produktet fra eksempel 69a behandlet med benzensulfonylchlorid til fremstilling af titelproduktet, der blev renset ved lynkromatografi (CHC13:
MeOH (95: 5)), i et udbytte på 69%. TLC, Rf = 0,29, MeOH:CHCl3 25 (95:5).
DK 172736 B1 110 c. 3(RS)-N2-(1,1-dimethylethoxycarbonyl)-N6-phenylsulfonyl-L-lysyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH^ CH-j, R2=ØS (02)NH (CH2> , R3=(CH3)3C, A=0C0).
5 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 31c blev produktet fra eksempel 59b oxideret til dannelse af titelproduktet (57%) efter rensning ved lynkromatografi (gradient-eluering, MeOH:CHCl3 (0:100) til (2,5:97,5)). HPLC, tR = 7,48, 9,11, Col A, CH-jCN: H20 (1:1), FR = 1,0.
10 Analyse beregnet for C28H16F3N4°7S' H20: C 51'52' H 6'64' N 8'58·
Fundet: C 51,47, H 6,46, N 7,80.
EKSEMPEL 70.
3(RS)- (4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-a-aminobutanoyl-15 N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R =CH3CH2, R3=4-[CH3CH2OC(O)]0, A=NHCO), a. 2(RS),3(SR)-(4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-a-aminobutyroyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-20 L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH3CH2, r3=4-[ch3ch2oc(o)]0, a=NHC0).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 15a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 61a lov til at reagere med ethyl-4-isocyanatobenzoat til dannelse af titelforbindelsen, 25 isoleret i et udbytte på 46%. TLC, R^ = 0,53, MeOH:CHCl3 (5:95).
i DK 172736 B1 111 b. 3 (RS) - (4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-a-aminobutyryl-N-[3- (1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH3) CH3 , R2=CH3CH2, R3=4- [CH3CH2OC (O) ]0, A=NHCO).
5 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet fra eksempel 70a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (CHCl3:MeOH (97:3)), af titelproduktet (68%).
HPLC, tR = 6,35, 8,70, Col A, H20:CH3CN (60:40), FR = 2,0.
Analyse beregnet for 10 C25H33F3N4°6,0'5 H20: C 54'44' H 6»21, N 10,15.
Fundet: C 54,76, H 6,13, N 10,27.
EKSEMPEL 71.
3(RS)-(4-hydroxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-a-aminobutyryl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid 15 (formel Ib, R1=CH(CH.)CH,, R2=CH-.CH_, R3=4[HOC(O)]0, A=NHCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 14 blev materialet fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 70b omdannet til titelproduktet og isoleret ved lynkromatografi på Baker 20 pH 5,0, silicagel (CHCljJMeOH (97:3)) i et udbytte på 61%.
HPLC, tR= 3,68, 4,69, Col A, H20:CH3CN (3:1), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C23H29F3N4°6' H2°: C 51'88' H 5*86, N 10,52.
Fundet: C 51,98, H 5,69, N 10,19.
EKSEMPEL 72.
DK 172736 B1 112 6 2 3(RS)-N -phenylmethoxycarbonyl-N -phenylsulfonyl-L-lysyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH3)CH3, R2= (CH2) 4NHCOOCH20 , R3=0, A=S (02)).
5 a. 2(RS)-3(SR)-N^-phenylmethoxycarbonyl-L-lysyl-N-[3-(1,1,1- trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid-trifluoreddikesurt salt (formel IVb, R^CH (CH3) CH.j, R2=ØCH2OCONH (CH2> 4~).
Til en opløsning af produkt fremstillet ved fremgangsmåden 10 i eksempel 65a (2,75 g, 4,4 mmol) i CH2C12 (7 ml) blev sat TFA (10,4 g, 90 mmol), og opløsningen blev omrørt ved stuetemperatur i en time. Toluen (10 ml) blev tilsat, og reaktionsblandingen blev koncentreret i vakuum til dannelse af titelproduktet (3,4 g), som blev anvendt uden yderligere rensning.
6 2 15 b. 2(RS),3(SR)-N -phenylmethoxycarbonyl-N -phenylsulfonyl-L-lysyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R =CH(CH3)CH3, R2= (CH2)4NHC(O)OCH20, R =0, A=S(02)).
Til en opløsning af produktet i eksempel 72a (0,83 g, 1,3 mmol) 20 i CHjClj (6,5 ml) blev sat TEA (0,39 g, 3,9 mmol) og benzen- sulfonylchlorid (0,25 g, 1,4 mmol), og reaktionsblandingen blev omrørt natten over ved stuetemperatur. Efter at reaktionsblandingen var blevet koncentreret i vakuum, blev remanensen opløst i EtOAc. EtOAc-opløsningen blev filtreret og koncentreret i 25 vakuum til en remanens, der blev renset ved lynkromatografi (gradient-eluering, MeOH:CHCl3 (2,5:97,5) til (5:95)) til dannelse af titelproduktet (81%). TLC, R^. = 0,52, MeOH:CHCl3 (5:95) .
DK 172736 B1 113 6 2 c. 3(RS)-N -phenylmethoxycarbonyl-N -phenylsulfonyl-L-lysyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH.^) CH3, R2= (CH2) ^NHC (0) OCH20, R3=0, A=S (02)).
5 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 31c blev produktet fra eksempel 72b oxideret til dannelse af titelproduktet (63%) efter rensning ved lynkromatografi (gradient-eluering, CHCl^ til CHCl3:MeOH (97,5:2,5). HPLC, tR = 5,0, 6,3, Col A, CH3CN:H20 (3:2), FR = 1,0.
10 Analyse beregnet for C31H39F3N4°7S' H20: C 54'22' H 6»02* N 8,16.
Fundet: C 54,17, H 5,80, N 7,86.
EKSEMPEL 73.
3 (RS)- [2- (2-methoxyethoxy)ethoxycarbonyl]-L-a-aminobutyryl-N-15 [3-(1,1,1-trifluor-4-methy1-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH3CH2-, R3=CH30(CH2)20(CH2)2, A=0C0).
a. 2(RS),3(SR)-[2-(2-methoxyethoxy)ethoxycarbonyl]-L-a-amino-butyryl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-20 prolinamid (formel Vllb, R^CH (CH3) CH3, R2=CH3CH2-, r3=ch3o(ch2)2o(ch2)2, A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 34b fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 61a lov til at reagere med materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 19a til 25 dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 75%, efter rensning ved lynkromatografi (gradient, acetone:hexan (1:9) til (7:3)). TLC, = 0,30, 0,35, acetone:hexan (40:60).
DK 172736 B1 114
Analyse beregnet for C17H29F3N2°6'0,5 H20: C 48'22' H 7'14' N 6'61·
Fundet: C 48,13 H 6;9G, N 6,07.
b. 3 (RS)- [2- (2-methoxyethoxy)ethoxycarbonyll-L-a-aminobutyryl-N- [3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid 5 (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH3CH2, R3=CH30(CH2>20(CH2)2, -A=OCO) .
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet fra eksempel 73a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (gradient-eluering, EtOAc:hexan (1:1) til EtOAc 10 til acetone:EtOAc (1:9)),af titelproduktet (40%). HPLC, tR = 5,70, 8,95, Col A, H20:CH3CN (75:25), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C21H34F3N3°7: C 48'77' H 7'14' N 6,61.
Fundet: C 48,13, H 6,90, N 6,09.
15 EKSEMPEL 74.
3(RS)-(Z-(4-aminocarbonylamino-l,4-dioxo-2-butenyl)]-L-valyl-N-[3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH-j) CH3, R2= (CH3) 2CH- , R3=Z-H2NC (O)NHC (O) CH=CH-, A=C0).
20 a. 2 (RS),3(SR)-[Z-(4-aminocarbonylamino-l,4-dioxo-2-butenyl)]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R*=CH (CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=Z-H2NC(0)HHC(0)CK=CH-, ,A=CO).__
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 21b fik materiale 25 fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 3d lov til at reagere med Z-4-aminocarbonylamino-4-oxo-2-butensyre til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 26%, efter rensning ! ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (5:95)). TLC, Rf = 0,17, 0,25,
MeOH:CHCl3 (5:95).
DK 172736 B1 115 b. 3(RS)-[Z-(4-aminocarbonylamino-l,4-dioxo-2-butenyl)]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid 5 (formel Ib, R^CH (CH3)CH3, R2= (CH3) 2CH-, R3=Z-H2NC (O)NHC (O) CH=CH-, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 31c blev produktet fra eksempel 74a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (4:96)), af titelproduktet (29%).
10 HPLC, t = 1,78, 2,45, Col A, H20:CH3CN (65:35), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C21H30F3^5°6'1'5 H20: C 47»37/ H 6,25, N 13,15.
Fundet: C 47,29, H 5,77, N 13,02.
EKSEMPEL 75.
15 3(RS)-phenylaminocarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl- 2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^=CH(CH3)CH3, r2=ch3)2ch-, r3=ø, a=NHC0).
a. 2(RS),3(SR)-phenylaminocarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor- 2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, 20 R1=CH(CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=0, A=NHCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 15a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 3d lov til at reagere med phenylisocyanat til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 62%, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH: 25 CHC13 (2:98)). TLC, Rf - 0,24,.0,32, MeOH:CHCl3 (2:98).
b. 3 (RS)-phenylaminocarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor- 4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3,r2=(ch3)2ch-, R3=0, a=NHCO).
DK 172736 B1 116
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 31c blev produktet 5 fra eksempel 75a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (2:98)), af titelproduktet (75%).
HPLC, tR = 5,70, 8,77, Col A, H20:CH3CN (60:40), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C23H31F3N4°4'0'75 H20: C 55'47' H 6'58' N 11*25.
10 Fundet: C 55,46, H 6,50, N 10,72.
EKSEMPEL 76.
3(RS)-(4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-phenylalanyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=ØCH2-, R3=4-[CH3CH2OC(O)]0, 15 A=NHCO).
a. 2 (RS) ,3(SR) -1-phenylmethoxycarbonyl-N- [3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vila, R1=CH (CH3)CH3, R3=ØCH2~, A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 2a fik materiale 20 fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 4 lov til at reagere med CBZ-L-prolin til dannelse af titelforbindelsen (100%).
TLC, Rf = 0,37, 0,45, MeOH:CH2Cl2 (5:95).
b. 2(RS),3(SR) -N- [3- (1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel IVa, R^CH (CH3) CH3 ).
25 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 2b blev produktet fra eksempel 76a omdannet til titelproduktet (100%). TLC, 2 i DK 172736 B1 117
Rf = 0,73, 0,81, MeOH:CH2Cl2 mættet med NH^OH (15:85).
c. 2(RS),3(SR)-phenylmethoxycarbonyl-L-phenylalanyl-N-(3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R^CH (CH-jJCH-j, R2=CH20, R3=ØCH2~, A=OCO).
5
Efter at DCC (2,27 g, 11,0 mmol) var sat til en omrørt opløsning af CBZ-L-phenylalanin (2,29 g, 10,0 mmol), HOBT (2,70 g, 17,6 mmol) og materiale fremstillet ifølge eksempel 76b (2,68 g, 10,0 mmol) i tør THP (45 ml), afkølet til -17°C, 10 fik blandingen lov at henstå ved stuetemperatur natten over, blev filtreret og koncentreret for at fjerne THF, før den blev optaget i Et20 og EtOAc. Den fremkomne opløsning blev vasket (mættet NaHC03 (2 x ), 1 N HC1, saltvand), tørret (MgSO^), filtreret, koncentreret og optaget i en minimal mængde CH2C12· 15 Efter at Ν,Ν'-dicyklohexylurinstof var filtreret, blev opløsningen koncentreret i vakuum og tørret i vakuum til dannelse af titelforbindelsen i kvantitativt udbytte som et hvidt skum.
. TLC, Rf = 0,37, 0,45, MeOH:CH2Cl2 (5:95).
d. 2(RS),3(SR)-L-phenylalanyl-N-(3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-20 4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel IVb, R1=CH(CH3)CH,, r2=CH2ø).
En blanding af produktet fra eksempel 76c (501,3 mg, 0,898 mmol) og 50% vandvåd 10% Pd/C (50 mg) i absolut EtOH (17 ml) blev omrørt under hydrogen (1 atmosfære, 101,325 Pascal) natten over, 25 filtreret, koncentreret og tørret i vakuum til dannelse af titelforbindelsen i kvantitativt udbytte. TLC, Rf = 0,14,
MeOH:CH2Cl2 (5:95), Rf = 0,43, 0,48, ΜθΟΗ:ΝΗ^ΟΗ mættet med CH2Cl2 (5:95).
DK 172736 B1 118 e. 2(RS),3(SR)-(4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-phenyl-alanyl-N-[3- (1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolin-amid (formel Vllb, R^=CH(CH^)CH^f R2=ØCH2~,A=NHCO).
R3=4- [CH3CH20C(0)]0-, 5 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 15a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 76d lov til at reagere med ethyl-4-isocyanatobenzoat til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 95%. TLC, R^ = 0,21, 0,26, MeOH:CH2Cl2 (5:95).
10 f. 3(RS)-(4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-phenylalanyl- N-[3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=ØCH2-, R3=4-[CH3CH20C(O)]0-, A=NHCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet 15 fra eksempel 76e oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (gradient-eluering, Et20:pentan (11:1) til Et20), af titelproduktet (94%). HPLC, tR = 10,26, 13,52, Col A, CH3CN:H20 (45:55), FR = 2,00.
Analyse beregnet for 20 C30H35F3N4°6/1'24 H20: C 57'47' H 6'03' N 8'94·
Fundet: C 57,43, H 6,02, N 8,97.
EKSEMPEL 77.
3(RS)-[(4--[(1-naphthylsulfonyl)aminocarbonyl]phenyl)amino-carbonyl ] -L-valyl-N- [ 3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-25 L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=4-[1-naphthyl-S(02)NHC(0)]0, a=NHC0).
a. 1-naphthalensulfonamid.
Ammoniak blev (i 5 minutter) ført ind i en omrørt opløsning af DK 172736 B1 119 1-naphthalensulfonylchlorid (5,0 g, 22 mmol) og vandfri Et2<3 (400 ml) ved -78°C. Den fremkomne blanding blev omrørt ved -78°C i en time, fik lov at opvarme til stuetemperatur og blev omrørt natten over. EtjO blev fjernet i vakuum og efterlod et 5 hvidt pulver, der blev vasket med vand og tørret i vakuum til dannelse af 3,2 g (70%) af titelforbindelsen som et hvidt pulver, smeltepunkt 152 - 153°C.
b. 3(RS)-[(4-[(1-naphthylsulfonyl)aminocarbonyl]phenyl)amino- carbonyl] -L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]- 1 2 lo L-prolinamid (formel Ib, R =CH(CH^)CH3, R = (CH3)2CH-, R3=4-[1-naphthyl-S(02)NHC(O)]0, a=NHCO).
1-naphthalensulfonamid, fremstillet ifølge eksempel 77a (0,64 g, 3,09 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af materiale fremstillet ifølge eksempel 16 (1,5 g, 2,84 mmol), DMPA (0,38 g, 15 3,1 mmol), WSCDI (0,59 g, 3,08 mmol) og tør CH2C12 (40 ml) under nitrogen ved stuetemperatur. Den fremkomne reaktionsblanding blev omrørt ved stuetemperatur, før den blev vasket (1 N HCl), tørret (MgSO^) og filtreret. Filtratet blev koncentreret i vakuum til en gummiagtig remanens, der blev renset ved lyn-20 kromatografi (CH2C12, derefter CH2C12:MeOH:AcOH (98:1,9:0,1), til dannelse af 0,76 g (36%) af titelforbindelsen som et hvidt pulver. HPLC, tR = 10,08, 16,38, Col A, CH3CN:H20 (30:70), FR = 2,5.
Analyse beregnet for 25 C34H38F3N507S,0H20: C 54,25, H 5,49, N 9,30.
Fundet: C 54,56, H 5,68, N 8,85.
EKSEMPEL 78.
2 6 3(RS)-N -(4-hydroxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-N -phenylmethoxy- carbonyl-L-lysyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)J- 1 2 30 L-prolinamid (formel Ib, R =CH(CH3)CH3, R = (CH2)4NHC(O)OCH20, R3=4[H0C(0)]0, A=NHCO).
DK 172736 B1 120 a. 2(RS),3(SR)-N2-[4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-N®-phenylmethoxycarbony1-L-lysyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel VXIb, R^=CH(CH^JCH^, R2=(CH2)4NHC(0)0CH20, R3=4-[EtOC(O)]0, A=NHCO).
5 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 15a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 72a lov til at reagere med ethyl-4-isocyanatobenzoat til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 95%, efter rensning ved lynkromatografi (gradient-eluering, CHC1.J til MeOHiCHCl^ (2:98), derefter 10 (5:95)). TLC, Rf = 0,41, MeOH:CHCl3 (2,5:97,5).
2 £ b. 3(RS)-N -(4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-N -phenyl- methoxycarbonyl-L-lysyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxo-pentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^=CH(CH^)CH^, R2=(CH2)4NHC(0)0CH2<3, R3=4- [EtOC (O) ]0, a=NHCO).
15 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 31c blev produktet fra eksempel 78a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (gradient-eluering, CHCl^ til MeOH:CHCl3 (2,5:97,5) til (5:95)),af titelproduktet (77%). TLC, R^ = 0,48, MeOH:CHCl3 (2,5:97,5).
2 6 20 c. 3(rs)-N -(4-hydroxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-N -phenyl- methoxycarbonyl-L-lysyl-N-[3- (1,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxo- pentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^=CH(CH^)CH^, R2=(CH2)4NHC(0)0CH20, R3=4-[HOC(O)]0, A=NHCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 14 blev materiale 25 fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 78b omdannet til titelproduktet og isoleret i et udbytte på 85%. HPLC, tD = 4,71, 6,76, Col A, CH3CN:H20 (40:60), FR = 2,5.
Analyse beregnet for C33H40F3N5°8,:L'5 H20: C 55'15' H 6'03' N 9'74* 30 Fundet: C 54,90, H 5,92, N 9,29.
EKSEMPEL 79.
DK 172736 B1 121 3(RS)-(4-hydroxycarbonylphenyl)carbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=4-[HOC(0) ]0, A=CO) .
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 14 blev materiale 5 fremstillet ifølge fremgangsmåden i eksempel 84c omdannet til titelproduktet og isoleret i et udbytte på 72%. HPLC, tR = 3,48, 5,31, Col A, H20:CH3CN (3:1), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C24H30F3N 3Og,l,0 H20: C 54,23, H 6,07, N 7,91.
10 Fundet: C 54,46, H 6,05, N 7,69.
EKSEMPEL 80.
3(RS)-phenylsulfonyl-L-a-aminobutyryl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R*=CH(CH3>CH3 , r2=ch3ch2-, r3=ø, A=S(02)).
15 a. 2(RS),3(SR)-phenylsulfonyl-L-a-aminobutyryl-N-[3-(1,1,1- trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH(CH3)CH3, r2=ch3ch2-, r3=ø, a=S(02)>.
NMM (0,24 g, 2,4 mmol) og benzensulfonylchlorid (0,21 g, 1,2 mmol) blev sat til en opløsning af materiale fremstillet ifølge ek-20 sempel 61a (0,5 g, 1,1 ininol) i CH2C12 (5 ml), og reaktionen blev omrørt natten over ved stuetemperatur. Reaktionen blev koncentreret i vakuum, remanensen blev optaget i EtOAc og filtreret, og filtratet blev koncentreret i vakuum til dannelse af det rå produkt. Produktet blev delvis renset ved lynkromato-25 grafi (gradient, MeOH:CHCl3 (2,5:97,5) til (5:95)) og til slut DK 172736 B1 122 renset ved lynkromatografi (gradient, Et20:hexan (80:20) til Et20:hexan (90:10) til Et20) til dannelse af titelproduktet (0,118 g). TLC, Rf = 0,33, Et20.
b. 3(RS)-phenylsulfonyl-L-a-aminobutyryl-N-[3-(1,1,1-trifluor-5 4-methyl-2-oxopentyl))-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH3)CH3, R2=CH3CH2-, R1=0, a=S(02)).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 31c blev produktet fra eksempel 80a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (gradient, MeOH:CHCl3 (0:100) til (2:98) til 10 (5:95)), af titelproduktet (42%). HPLC, tR = 4,97, 6,17, Col A, H20:CH3CN (1:1), FR = 1,0.
Analyse beregnet for C21H28F3N3°5S,H20: C 49'50' H 5'93' N 8,25.
Fundet: C 49,70, H 6,24, N 7,67.
15 EKSEMPEL 81.
(RS) - [1- (ethoxycarbonyl) cyklopent-l-y 1]-carbonyl-L-cx-amino-butyryl-N- [3-(1,1,l7trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH-j, R2=CH3CH2-, R1=l-[CH3CH2OC(O)]-cyklopent-l-y1-, A=CO).
20 a. 1-(ethoxycarbonyl)cyklopentancarboxylsyre.
Til en opløsning af diethyl-1,1-cyklopentandicarboxylat (2,5 g, 11,68 mol) i EtOH (10 ml) blev dråbevis sat en opløsning af KOH (654 mg, 11,68 mmol) i EtOH (10 ml) i løbet af 1/2 time.
Den fremkomne blanding blev omrørt ved stuetemperatur i 96 timer, 25 koncentreret i vakuum og skilt mellem H20 og EtOAc. Det vandige lag blev syrnet med koncentreret HCl og ekstraheret med EtOAc. EtOAc-ekstrakterne blev vasket (saltvand), tørret (Na2S0^), fil- DK 172736 B1 123 treret og koncentreret i vakuum til dannelse af produktet (1,73 g) som en klar olie.
b. 2 (RS) , 3 (SR) -[1-ethoxycarbony1)cyklopent-l-yl)]carbonyl-L-a- aminobutyryl-N-[3-(1,l,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]- 1 2 5 L-prolinamid (formel Vllb, R =CH(CH3)CH3, R =CH3CH2~, R^=l-[CH3CH2OC(O)]-cyklopent-l-yl, a=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 50a med følgende forhold mellem regenser til en ækvivalent af produktet fremstillet ifølge eksempel 81a: HOBT (3,3 ækvivalenter), DCC (1,65 ækviva lenter), TEA (1,5 ækvivalenter) og materiale fremstillet ved 10 fremgangsmåden i eksempel 61a (1,0 ækvivalenter) og ved udeladelse af citronsyrevasken blev titelproduktet fremstillet, isoleret ved sugningskromatografi (gradient-eluering, Et20: hexan (1:1) til Et20), i et udbytte på 46%. TLC, R^ = 0,47, MeOH:CHCl3 (5:95).
15 Analyse beregnet for C24H38F3N3°6: C 55'27' H 7'34' N 8*06.
Fundet: C 54,74, H 5,93, N 7,88.
c. 3(RS)-[1-(ethoxycarbonyl)cyklopent-l-yl))carbonyl-L-o-aminobutyryl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L- 20 prolinamid (formel Ib, R*SCH(CH3>CH3, R^=CH3CH2, R3=l-[CH3CH2OC(O)]-cyklopent-l-yl, a=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 33c blev produktet fra eksempel 81b oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (acetone:hexan (1:4)), af titelproduktet (37%), 25 HPLC, tR = 6,68, 8,31, Col A, H20:CH3CN (70:30), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C24H36F3N3°6,1':L H20: C 53'44' H 7'13' N 7,80.
Fundet: C 53,48, H 6,97, N 7,60.
EKSEMPEL 82.
DK 172736 B1 124 3(RS)-(tricyklo[3.3.1.12'^ ]dec-l-yl)sulfonyl-L-a-aminobutyryl- N-[3-(1,1,1- trifluor-4-methyl-2-oxopentyl) ]-L-prolinamid 1 2 3 (formel Ib, R =CH(CH3)CH3, R =CH3CH2~, R =l-adamantyl, 5 A=S{02)).
a. 1-adamantansulfinylchlorid.
Aluminiumtrichlorid (40 g, 3 mol) blev sat langsomt til thionyl-chlorid (200 ml, 2,7 mol), og blandingen blev afkølet til -20°C. Adamantan blev tilsat portionsvis i løbet af 2 1/2 time, og den 10 fremkomne blanding blev omrørt i en time og fik lov at opvarme til stuetemperatur. Efter at thionylchloridet var fjernet i vakuum, blev remanensen fortyndet med CCl4, og aluminiumtrichlo-ridet blev dekomponeret med is og vand. Lagene blev adskilt, og det organiske lag blev vasket (saltvand), tørret (Na2S04), fil-15 treret og koncentreret i vakuum. Remanensen blev destilleret i vakuum (1 Torr, 133,3 Pascal) med en Vigreaux-søjle til dannelse af produktet (28,8 g, kogepunkt 118 - 128°C) som et voksagtigt fast stof. TLC, Rj = 0,6 - 0,4, EtOAc:hexan (15:85).
b. 2 (RS),3(SR)~ (tricyklo [3.3.1.13' ^)dec-l-yl) sulfonyl-L-a-amino-20 butyryl-N-(3-(l,l,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L- prolinamid (formel Vllb, R^=CH(CH3)CH3, R2=CH3CH2-, R3=l-adamantyl, a(S(C>2)).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 20a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 61a lov til at rea-25 gere med materialet fremstillet ifølge eksempel 82a til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 61%, efter rensning ved sugnings-lynkromatografi (gradient, Et20:Et0Ac (1:1) til EtOAc). TLC, Rf = 0,53, MeOH:CHCl3 (5:95).
DK 172736 B1 125
Analyse beregnet for C25H40F3N3°4S'0'45 H20: C 55'22' H 7'58·
Fundet: C 55,05, H 7,57.
c. 2(RS),3(SR)-(tricyklo[3.3.1.13,7]dec-l-yl)sulfonyl-L-a- 5 aminobutyryl-N-[3-(l,l,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH3CH2~, R3=l-adamantyl, a=S(02>).
Til en opløsning af produktet fra eksempel· 82b (277 mg, 0,515 mmol) i acetone (25 ml) under tilbagesvaling blev sat en mættet 10 acetoneopløsning af KMnO^ (60 ml) dråbevis i løbet af en time.
Den blev omrørt i 15 minutter ved tilbagesvalingstemperatur, afkølet, filtreret gennem Celite ® og koncentreret i vakuum.
Det rå produkt blev renset ved lynkromatografi (Et0Ac:Et20 (4:6)) til dannelse af titelproduktet (180 mg) som et fast stof.
15 TLC, Rf = 0,67, 0,70, MeOH:CHCl3 (1:9).
Analyse beregnet for C25H40F3N3°5S: C 54'43' N 7'31' N 7'62·
Fundet: C 54,49, N 7,33, N 7,39.
d. 3(RS)-(tricyklo[3.3.1.13'7]dec-l-yl)sulfonyl-L-a-amino- 20 butyryl-N-[ 3- (1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl) ]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH3CH2~, R3=l-adamantyl, A=S (02)}.
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 33c blev produktet fra eksempel 82c oxideret til dannelse, efter rensning ved lyn-25 kromatografi (acetone:hexan (15:85)), af titelproduktet (40%).
HPLC, t = 6,27, 8,29, Col A, H20:CH3CN (1:1), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C25H38F3N3°5S'0'5 H20: C 53'75' H 7f04r N 7,32.
Fundet: C 53,91, H 7,11, N 6,97.
EKSEMPEL 83.
DK 172736 B1 126 3 (RS)-[1-(hydroxycarbonyl)cyklopent-l-yl]carbonyl-L-a-amino-butyryl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH3) CH3, R2=CH3CH2-, R3=l- [HOC (0) Jcyklopent-1-yl, A=C0}.
5 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 14 blev materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 81c omdannet til titelproduktet og isoleret i et udbytte på 79%. HPLC, tR = 3,74, 4,92, Col A, H20:CH3CN (3:1), FR = 2,0.
Analyse beregnet for 10 C22H32F3N3°6'35 H20: C 53,08, H 6,62, N 8,44.
Fundet: C 53,04, H 6,58, N 8,16.
EKSEMPEL 84.
3(RS)-(4-methoxycarbonylphenyl)carbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, 15 r1=ch(ch3)ch3, r2=(ch3)2ch-, R3=4-[CH30C(0)]0, A=CO).
a. 4-methoxycarbonylbenzencarboxylsyre.
Koncentreret svovlsyre (277,5 ml, 5,2 mol) blev sat dråbevis i løbet af 1/2 time til en omrørt opløsning af chrom(VI)oxid 20 (299,25 g, 2,99 mol) og vand (925 ml) ved 0°C. Den fremkomne opløsning blev sat dråbevis i løbet af en time til en omrørt opløsning af methy1-4-(hydroxymethyl)benzoat (92,5 g, 0,564 mol) og acetone (4,6 liter) ved 0°C. Reaktionsblandingen fik lov at opvarme til stuetemperatur og blev omrørt natten over. Den 25 overliggende væske blev dekanteret, før den sorte, tjæreagtige DK 172736 B1 127 remanens blev ekstraheret med acetone. Den dekanterede overliggende væske og acetoneekstrakterne blev forenet og koncentreret i vakuum, således at der blev efterladt en mørkebrun remanens, der blev tritureret med koldt vand (4 liter). Bund-5 faldet, som dannedes, blev opsamlet, vasket tre gange med vand (1 liter) og tørret til dannelse af 94,6 g (94%) af titelforbindelsen som hvide krystaller,smeltepunkt 218 - 221°C.
b. 2(RS),3(SR)-(4-methoxycarbonylphenyl)carbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid 10 (formel Vllb, R^CH (CH3) CH3, R2= (CH3) 2CH-, R3=4-[CH3OC (O) ]0, A=CO).
WSCDI (10,27 g, 53,6 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af en forbindelse fremstillet ifølge eksempel 3d (17,54 g, 47,8 mmol), produktet fra eksempel 84a (8,6 g, 47,8 mmol), 15 HOBT (12,86 g, 95,3 mmol) og tør THF (400 ml) ved 0°C under nitrogen. Den fremkomne reaktionsblanding blev omrørt ved 0°C i en time. Den fik så lov at komme op på stuetemperatur og blev omrørt natten over. THF blev fjernet i vakuum og efterlod en olieagtig remanens, der blev opløst i EtOAc. EtOAc-opløsnin-20 gen blev vasket (1 N HCl, mættet, vandig NaHC03 og saltvand), tørret (MgS04), filtreret og koncentreret i vakuum til dannelse af 24,45 g af det rå produkt som et tørt hvidt skum. Rensning ved lynkromatografi (CHCl3:MeOH (97:3)) gav titelforbindelsen (79%). HPLC, tR = 4,62, 5,80, Col A, H20:CH3CN (55:45), FR = 25 3,0.
c. 3(RS)-(4-methoxycarbonylphenyl)carbonyl-L-valyl-N- [3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3, r2=(ch3)2ch-, r3=4-[ch3oc(o)]0, A-CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 31c blev produktet 30 fra eksempel 84b oxideret til dannelse, efter rensning ved lyn- DK 172736 B1 128 kromatografi (CHCl3:MeOH (98:2)), af titelproduktet (69%).
HPLC, t = 4,51, 6,82, Col A, H20:CH3CN (55:45), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C25H32F3N3°6,°'5 H20: C 55'96' H 6'19' N 7,83.
5 Fundet: C 55,90, H 6,30, N 7,93.
d. 3(RS)-(4-methoxycarbonylphenyl)carbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3, r2=ch(ch3)ch3, R3=4-(CH3OCO)0, a=CO).
En foretrukken fremgangsmåde, der anvender oxidationen beskrevet 10 i D.B.Dess ft J.C.Martin, J.Org.Chem. 48, 4155-4156 (1983) til fremstilling af titelforbindelsen er følgende: Til en omrørt op løsning af Dess-Martin-perjodinan (6,76 g, 15,96 mmol) og et produkt fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 84b (6,49 g, 12,25 mmol) i tør CH2C12 (80 ml) under nitrogen 15 blev sat TFA (1,82 g, 1,23 ml, 15,96 mmol). Efter at reaktionsblandingen var blevet omrørt natten over ved stuetemperatur, blev Et20 (30 ml) tilsat, og blandingen blev hældt i en vandig opløsning af mættet NaHC03 og Na2S203 (17,63 g,' 111,51 mmol).
Efter 15 minutters omrøring blev det organiske lag fraskilt, 20 vasket (mættet NaHC03, saltvand), tørret (Na^O^), filtreret og koncentreret til dannelse af titelproduktet som et hvidt skum (6,42 g, 99,4%). TLC, Rf = 0,67, 0,76, MeOH:CHCl3 (3:97).
HPLC, t = 4,64, 6,84, Col A, H20:CH3CN (60:40), FR = 2,0.
EKSEMPEL 85.
25 3(RS)-(4-hydroxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-phenylalanyl-N- [3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CHj)CH3, R2=ØCH2, R3=4-[HOC(O)]0, .
A=NHCO),
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 14 blev materiale i DK 172736 B1 129 fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 76f omdannet til titelproduktet, og isoleret ved lynkromatografi (gradient,
MeOH:CH2Cl2 (4:96) til (10:90)) i et udbytte på 48%. HPLC, tR = 5,52, 8,12, Col A, CH3CN:H20 (35:65), FR =2,0.
5 Analyse beregnet for C28H31F3N4°6,H20: C 56'56' H 5'59' N 9,42.
Fundet: C 56,58, H 5,59, N 9,22.
EKSEMPEL 86.
3(RS)-(4-methoxycarbonylphenyl)methoxycarbonyl-L-valyl-N-[3-10 (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=4-[CH3OC(O) ]ØCH2~, A=OCO).
a. (4-methoxycarbonylphenyl)methyl-4-nitrophenylcarbonat.
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 7a, men under ude-15 ladelse af pH 7,O-vasken, blev methyi-4-hydroxymethylbenzoat omdannet til titelforbindelsen, som blev isoleret ved triture-ring med hexaner, vasket med hexaner:EtOAc (1:1) og tørret i vakuum til dannelse af et udbytte på 50%. TLC, = 0,75, EtOAc:hexan (1:1).
20 b. 2(RS),3(SR)-(4-methoxycarbonylphenyl)methoxycarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R^CH (CHj) CH3 , R2=(CH3)2CH, R3=4-[CH30C(0)]ØCH2, A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 7b fik materiale 25 fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 3d lov til at reagere med produktet fra eksempel 86a til dannelse af titelforbindelsen, der blev isoleret i et udbytte på 48% efter rensning ved DK 172736 B1 130 lynkromatografi (acetone:hexaner (2:3)). TLC, Rf = 0,63, 0,68, MeOH:CHCl3 (1:9).
Analyse beregnet for C26H3gF3N307: C 55,81, H 6,48, N 7,51.
5 Fundet: C 55,54, H 6,39, N 7,29.
c. 3(RS)-(4-methoxycarbonylphenyl)methoxycarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopenyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, R1=4-[CH-jOC (O) ]ØCH2, A=OCO).
10 Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 33c blev produktet fra eksempel 86b oxideret til dannelse, efter rensning ved præparativ TLC (Et0Ac:Et20 (3:2)), af titelproduktet (10%). HPLC, tR = 4,32, 6,44, H20:CH3CH (1:1), FR * 2,0.
Analyse beregnet for 15 C26H34F3N3O?0,65 H20: C 54,86, H 6,25, N 7,38.
Fundet: C 54,87, H 6,25, N 7,05.
EKSEMPEL 87.
(RS) - [E-3- (4-ethoxy carbonylphenyl) -l-oxoprop-2-enyl ] -L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid 20 (formel Ib, R1;=CH (CH3) CH3, R2= (CH^) 2CH-, R1=E-4-[CH3CH20C(0)]ØCH=CH, A=C0).
a. Ethyl-4-formylbenzoat.
En blanding af 4-formylbenzoesyre (25 g), koncentreret svovlsyre (2 ml) og EtOH (19,5 ml) blev forsigtigt opvarmet under til-25 bagesvaling i 5 dage i 100 ml 1,2-dichlorethan. Opløsningsmidlet blev så afdestilleret, og EtjO blev sat til remanensen. Et20-opløsningen blev vasket (mættet vandig NaHC03), tørret (Na2S04), DK 172736 B1 131 filtreret og inddampet. Kolbe-til-kolbe-destillation gav 20,1 g (68%) af titelesteren som en klar væske, kogepunkt 145 - 150 C (2.900 Pascal, 22 Torr) .
b. E-(4-ethoxycarbonyl)benzenpropensyre.
5 En blanding af produktet fra eksempel 87a (8,9 g), malonsyre (10,4 g) og piperidin (1 ml) i 25 ml pyridin blev opvarmet på dampbad i 3 timer. Efter at opløsningsmidlet var afdampet, og remanensen var opslæmmet i 200 ml vand, blev pH-værdien indstillet til 6 med eddikesyre. Bundfaldet blev opsamlet og luft-10 tørret. Krystallisation af materialet af EtOH gav 10,1 g (92%) af titelsyren som funklende hvide krystaller, smeltepunkt 220,5 -221°C.
c. 2(RS),3(SR)-[E-3-(4-ethoxycarbonylphenyl)-l-oxoprop-2-enyl]-L-valyl-N-(3-(1,1,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L- 15 prolinamid (formel Vllb, R^CH (CF. ) CH-,, R2= (CH-) _CH-, R =E- [4-CH3CH2OC(O)]ØCH=CH, a=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 32a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 3d lov til at reagere med produktet fra eksempel 87b til dannelse af titelforbin-20 delsen, isoleret i et udbytte på 88%. TLC, R^ = 0,14, 0,18, MeOH:CH2Cl2 (5:95).
d. 3(RS)-[E-3-(4-ethoxycarbonylphenyl)-l-oxoprop-2-enyll-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, 25 R3=E-[4-CH3CH20C(0)]ØHC=CH, A=C0).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet fra eksempel 87c oxideret til dannelse, efter rensning ved lyn- DK 172736 B1 132 kromatografi (MeOH:CH2Cl2(2:98)), af titelproduktet (65%).
TLC, R = 0,23, MeOH:CH2Cl2 (5:95).
Analyse beregnet for C28H36F3N3°6: C 59'1' H 6'39' N 7,40.
5 Fundet: C 59,14, H 6,75, N 7,21.
EKSEMPEL 88.
3(RS)-(2- ethoxy carbonylphenyl)aminocarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1-1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH^)CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=2-[CH^CI^OC (O)]0, A=NHCO).
10 a. 2(RS),3(SR)-(2-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-valyl- N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl))-L-prolinamid (formel VIIb, R1=CH(CH3)CH3, R2= (CH3)2CH-, R3=2[CH3CH2OC(O)]0, A=NHCO).
15 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 15a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 3d lov til at reagere med ethyl-2-isocyanatobenzoat tildannelse af titelforbindelsen, som blev isoleret i et udbytte på 66% efter rensning ved lynkromatografi (EtOAC:hexan (60:40)). TLC, R^ = 0,48, 0,57, 20 MeOH:CHCl3 (5:95).
b. 3(RS)-(2-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methy1-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH (CH3)CH3, R3=2-(CH3CH2OCO)0, A=NHCO).
i
En modifikation af fremgangsmåden fra eksempel 54b blev udført under anvendelse af de viste forhold mellem produkt fra eksempel 88a (1 ækvivalent), oxalylchlorid (2 ækvivalenter), DMSO (4 ækvi- DK 172736 B1 133 valenter) med reaktionsblandingen afkølet til -45°C for disse ovennævnte tilsætninger og opvarmet til -20°C med henblik på tilsætning af TEA (i stedet for diisopropylethylamin). Oparbejdningen indbefattede vask (1 N HC1, mættet vandig NaHC03, 5 10% vandig NaOCl, saltvand). Titelproduktet fremkom efter rens ning ved lynkromatografi (Et20:hexan (4:1)) i et udbytte på 74%.
HPLC, tR = 6,95, 10,46, Col A, CH3CN:H20 (35:65), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C26H35F3N4Og,0,75 H20: C 54,78, H 6,45, N 9,83.
10 Fundet: C 54,73, H 6,34, N 9,15.
EKSEMPEL 89.
3(RS)-4-[ (4-nitrophenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH3> CH3, R2= (CH-j) 2CH- , R3=4 [ (4-NC>20) S (02)NHC0]0, 15 A=CO).
4-nitrobenzensulfonamid (0,196 g, 0,97 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af produktet fra eksempel 79 (0,5 g, 0,97 mmol), DMAP (0,12 g, 0,97 mmol), DCC (0,22 g, 0,97 mmol) og tør CH2C12 (30 ml) under nitrogen ved stuetemperatur. Den fremkomne blan-20 ding blev omrørt natten over ved stuetemperatur og filtreret. Filtratet blev vasket (1 N HC1), tørret (MgS04), filtreret og koncentreret i vakuum til en gul remanens, der blev renset ved lynkromatografi (CHCl3:MeOH:AcOH (90:9,8:0,2)) til dannelse af 0,29 g (43%) af titelforbindelsen som et hvidt pulver. HPLC, 25 tR = 4,26, 8,42, Col A, H20:CH3CN (4:1), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C30H34F3N5°9,H2O: C 50'34' h 5,06, N 9#?8.
Fundet: C 50,03, H 4,92, N 9,43.
EKSEMPEL 90.
DK 172736 B1 134 3(RS)-phenylmethoxycarbonyl-L-glutamyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid- phenylmethylester (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=-(CH2)2C(0)0CH20, r3=øch2-, a=oco).
a. 2(RS),3(SR)-phenylmethoxycarbonyl-L-glutamyl-N-[3-(1,1,1-5 trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R^=CH(CH3)CH3, R2=(CH2)2C(0)0CH20, R3=ØCH2-, . A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 84b fik CBZ-glutamin-syre-y-benzylester lov at reagere med materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 2b til dannelse af titelforbindel-10 sen, isoleret i et udbytte på 64%,efter rensning ved lynkromatografi (gradient-eluering, hexan:Et2<0 (1:3) til Et20) . TLC,
Rf = 0,61, Et20.
b. 3(RS)-p)enylmethoxycarbonyl-L-glutamyl-N-(3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid-phenylmethylester (formel Ib, 15 R1=CH(CH3)CH3, R2=(CH2)2C(0)0CH20, R3=ØCH2-, A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 54b blev produktet fra eksempel 90a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (gradient, hexan:Et20 (2:8) til (1:9)), af titelproduktet (30%). HPLC, tR = 6,12, 8,48, Col A, CH3CN:H20 (1:1), 20 FR = 3,0.
Analyse beregnet for C31H36F3N3°7'2 H20: C 56'78' H 6,15, N 6,41.
Fundet: C 56,98, H 5,74, N 6,12.
EKSEMPEL 91.
DK 172736 B1 135 3S(eller R)-(tricyklo(3.3.1.I3'7]dec-l-yl)sulfonyl-L-valyl-N- [3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid 12 3 (formel Ib, R =CH(CH3)CH3, R =(CH3)2CH-, R =l-adamantyl, a=s(o2)).
a. 2(RS),3 (SR)-(tricyklo(3.3.1.13'7]dec-l-yl)-sulfinyl-L-valyl-5 N-(3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R^CH (CH-j) CH3, R2=(CH3)2CH, R3=l-adamantyl, A=S (0)).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 20a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 3d lov til at reagere 10 med produkt fra eksempel 82a til dannelse af titelforbindelsen, der blev isoleret ved lynkromatografi (Et0Ac:Et2O (2:3)). TLC,
Rf = 0,75, MeOH:CHCl3 (1:9).
b. 2(RS),3(SR)-(tricyklo[3.3.1.13'7]dec-l-yl)sulfonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid 15 (formel Vllb, R1=CH(CH3)CH3, R2=(CHj)2CH-, R3=l-adamantyl, A=S (02)).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 82c blev produktet fra eksempel 91a omdannet til titelproduktet, isoleret i et udbytte på 60%, efter rensning ved lynkromatografi (EtOAc:hexan 20 (2:3)). TLC, Rf = 0,29, 0,35. EtOAc:hexan (1:1).
Analyse beregnet for C26H42F3N3°5'S'2'5 H20: C 51'13' H Ί>15' N 6,88.
Fundet: C 51,12, H 7,03, N 6,40.
DK 172736 B1 136 3 7 c. 3S(eller R)-tricyklo[3.3.1 ' Jdec-l-yi)suif0nyi_L_vaiyi-N_ [3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH3)CH3, R2= (CH3) 2CH-, R3=l-adamantyl, A=S(02)).
5 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 33c blev produktet fra eksempel 91b oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (EtOAcrhexan (1:1)), af titelproduktet (57%) som en i hovedsagen ren isomer. HPLC, tR = 3,01, Col A, H20:CH3CN (45:55). FR = 2,0.
10 Analyse beregnet for C26H40F3N3°5S'0'4 H20: C 54'70' H 7/20.
Fundet: C 54,89, H 7,17.
EKSEMPEL 92.
3(RS)-(4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-phenylglycyl-N-[3-15 (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl))-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=0, R3=4-[CH3CH2OC(0)]0, A=NHCO).
a. 2(RS),3(SR)-phenylmethoxycarbonyl-L-phenylglycyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH (CH3)CH3, R2=0, R3=ØCH2-, A=OCO).
20 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 50a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 76b lov til at reagere med CBZ-L-phenylglycin til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CH2Cl2 (5:95)), af titelproduktet (95%). TLC,
Rf = 0,13, 0,19, MeOH:CH2Cl2 (5:95).
25 b. 2(RS),3(SR)-L-phenylglycyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy- 1 2 4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel IVb, R =CH(CH3)CH3, R =0).
i DK 172736 B1 137
Ved anvendelse af fremgangsmåden 1 eksempel 2b blev materialet fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 92a omdannet til titelproduktet i et udbytte på 100%.
c. 2(RS), 3(SR)-(4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-phenyl- 5 glycyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L- prolinamid (formel Vllb, R^CH (CH3) CH3, R2=0, R3=4-[CH3CH2OC(O)]0, A=NHCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 15a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 92b lov til at reagere 10 med ethyl-4-isocyanatobenzoat til dannelse af titelproduktet (86%). TLC, Rf = 0,24, 0,27, MeOH:Et20 (1:99).
d. 3(RS)-(4-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-phenylglycyl-N-(3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl))-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=0, R3=4-[CH3CH2OC(O))0, .
15 A=NHCO),
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 31c blev produktet fra eksempel 92c oxideret til dannelse, efter rensning véd lynkromatografi (gradient, Et20 til CH3CN:Et20 (1:99)),af titelproduktet (82%). HPLC, tR * 8,88, 10,82, Col A, CH3CN:H20 20 (45:55), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C29H33F3N4°6'0,64 H20: C 56'77' H 5'80' N 8,75.
Fundet: C 56,62, H 5,78, N 8,78.
EKSEMPEL 93.
25 3 (RS)-phenylmethoxycarbonyl-L-[5-(phenylsulfonylamino)glutamyl]- N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH^)CHj, R2=ØS(02)NHC(O)(CHj)2, R3*ØCH2, A=OCO).
DK 172736 B1 138 a. 3(RS)-phenylmethoxycarbonyl-L-glutamyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3,r2=hoco(ch2)2, r3=øch2, A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden 1 eksempel 14 blev materiale 5 fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 90b omdannet til titelproduktet. TLC, Rf = 0,27, MeOH:CHCl3:AcOH (2,5:95:0,1).
b. 3(RS)-phenylmethoxycarbonyl-L-[5-(phenylsulfonylamino)glutamyl]-N- [3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=ØS(02)NHC(O)(CH2)2, R3=ØCH2~, 10 A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 77b fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 93a lov til at reagere med benzensulfonamid til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (gradient, Me0H:Et20 (2,5:97,5) til (5:95)), af titel-15 produktet (40%). HPLC, tR = 7,38, 10,35, Col A, H20:CH3CN (65:35), FR = 2,5.
Analyse beregnet for C30H35F3^4°8S,1'5 «20: C 51,79, H 5,51, N 8,19.
Fundet: C 51,70, H 5,24, N 7,89.
20 EKSEMPEL 94.
3 (RS)-[4- (phenylsulfonylaminocarbonyl)phenylcarbonyl]-L-valyl-N-[3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2= (CH-j) 2<3Η-, R3=4-[ØS (02)NHC(O)]0, A=CO), 25 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 89 fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 79 lov til at reagere med benzensulfonamid til dannelse, efter rensning ved lynkromato- DK 172736 B1 139 qrafi (EtOAc:Et20:AcOH (25:74,9:0,1)), af titelproduktet (33%).
HPLC, t = 3,71, 5,65, Col A, H20:CH3CN (3:1), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C30H35F3N4O7S,l,25 H20: C 53,36, H 5,59, N 8,29.
5 Fundet: C 53,75, H 5,64, N 7,72.
EKSEMPEL 95.
3 (RS)- [4- [ (4- brorphenyl) sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH3) CH-j, R2= (CH-j) 2CH-, R3=4-[ (4-BrØ) S (C>2) -10 NHC (O) ] 0, A=CO).
a. 4-brombenzensulfonamid.
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 77a blev 4-brombenzen-sulfonylchlorid (10,0 g, 39,6 mmol) omdannet til titelproduktet, der fremkom som hvide krystaller (8,45 g, 92%), smeltepunkt 15 163 - 165°C.' b. 3(RS)-[4-[(4-bromphenyl)sulfonylaminocarbononyl]phenylcarbo- nyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L- 1 2 prolinamid (formel Ib, R =CH(CH3> CH3, R =(CH3)2CH-, R3=4- l (4-BrØ) S (02)NHC(0) ]0, A=CO).
20 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 89 fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 79 lov til at reagere med produktet fra eksempel 95a til dannelse, efter rensning ved omkrystallisation af hexan/Et20, af titelproduktet (50%). HPLC, t = 5,25, 7,84, Col A, H20:CH3CN (77,5:22,5), FR = 2,0.
25 Analyse beregnet for C30H34BrF3N4°7S'0,75 H20: C 48'36' H 4'80' N 7/52.
Fundet: C 48,61, H 4,89, N 7,18.
EKSEMPEL 96.
DK 172736 B1 140 3(RS)-4-(1-naphthylsulfonylamino)-1,4-dioxobutyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CHj, R2=(CH3>2CH-, R3=l-naphthyl-S(O2)NHC(0) (CH2) 2, · A=CO).
5 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 89 fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 14 lov til at reagere med 1-naphthalensulfonamid til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CHCl3 (5:95)), af titelproduktet (46%). HPLC, tR = 4,09, 6,57, Col A, H20:CH3CN (60:40), FR = 2,0.
10 Analyse beregnet for C30H37F3N4O7,S,0,5 H20: C 54,29, H 5,77, N 8,44.
Fundet: C 54,33, H 6,01, N 8,09.
EKSEMPEL 97.
3(RS)-[2-(4-aminocarbonylphenoxy)-l-oxoethyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-15 trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=4- l^NC (O) ]ØOCH2 , A=CO).
a. 4-aminocarbonylphenoxyeddikesyremethylester.
En blanding af p-hydroxybenzamid (3,43 g), methylbromacetat 20 (2,37 ml) og K2C03 (3,45 g) blev omrørt i 12 timer i 25 ml DMF.
Reaktionsblandingen blev fortyndet med vand (150 ml). Det faste stof blev filtreret, vasket med vand og lufttørret. Krystallisation af ethanol gav 3,3 g (63%) af titelforbindelsen som hvide krystaller.
! DK 172736 B1 141 b. 4-aminocarbonylphenoxyeddikesyre.
En blanding af produktet fra eksempel 97a (3,3 g) i 0,5 N NaOH (30 ml) blev omrørt i 3 timer. Opløsningen blev filtreret og filtratet gjort surt (pH 1) med 1 N HC1. Det faste stof blev 5 filtreret og lufttørret til dannelse af 3,0 g (97%) af titelsyren som et hvidt pulver, smeltepunkt 255 - 256°C.
c. 2(RS), 3 (SR)-(2- (4-aminocarbonylphenoxy)-l-oxoethyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R^CH (CH3) CHj, R= (CH3) 2CH-, R3=4-[H^C (O) ]ØOCH2, 10 A=CO),
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 32a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 5d lov til at reagere med materiale fremstillet ifølge eksempel 97b til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 33%. TLC, Rf = 0,27, 15 0,31, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
d. 3(RS)-[2-(4-aminocarbonylphenoxy)-l-oxoethyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH3) CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=4-[H2NC(O)]ØOCH2, A=CO').
20 Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 61c blev produktet fra eksempel 97c oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CH2Cl2 (4:96)), af titelproduktet (35%).
TLC, Rf = 0,37, MeOH:CHCl3 (1:9).
Analyse beregnet for 25 C25H33F3N4°6'1,5 H20: C 52'72' H 6'37' N 9/83.
Fundet: C 52,78, H 6,03, N 9,65.
DK 172736 B1 142 EKSEMPEL 98.
3 (RS) -(4-hydroxycarbonylphenyl)methoxycarbony1-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r-^ch (ch3)ch3, r2= (ch3) 2ch-,r3=4-[HOC(O) ]øch2, a=oco).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 14 blev materiale 5 fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 86c omdannet til titelproduktet og isoleret ved praparativ TLC (MeOH:CHCl3 (15:85)) i et udbytte på 45%. HPLC, tR = 2,27, 3,02, Col A, H20:CH3CN (60:40), FR = 2,0.
Analyse beregnet for 10 C25H32F3N307,2 H20: C 51,81, H 6,26, N 7,25.
Fundet: C 51,75, H 5,63, N 7,15.
EKSEMPEL 99.
3(RS)-[4-[4-(2-amino-2-oxoethyl)phenoxy]-l-oxobutyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, 15 R^CH (CH3)CH3, R2=(CH3)2CH, R3=4-[H2NC(O)CH2]ØO(CH2)3, A=CO). .
a. 4-(4-aminocarbonylphenoxy)butansyre-ethylester.
En blanding af p-hydroxyphenylacetamid (3,8 g), ethyl-4-brom-butyrat (3,6 ml) og K2CC>3 (3,45 g) blev omrørt i 12 timer i DMF (30 ml). Blandingen blev fortyndet med vand (100 ml). Det 20 faste stof blev filtreret og lufttørret. Krystallisation af det faste stof af ethanol gav 4 g (60%) af titelforbindelsen som hvide krystaller, smeltepunkt 144,5 - 145,5°C.
b. 4-(4-aminocarbonylphenoxy)butansyre.
En blanding af produktet fra eksempel 99a (3,97 g) i IN NaOH
DK 172736 B1 143 (20 ml) blev omrørt natten over ved stuetemperatur. Opløsningen blev filtreret og gjort sur med 1 N HC1. Det faste stof blev filtreret og tørret i højvakuum til dannelse af 3 g (82%) af titelforbindelsen som et hvidt pulver, smeltepunkt 162,5 - 164°C.
5 c. 2(RS),3(SR)-[4-[4-(2-amino-2-oxoethyl)phenoxy]-1-oxobutyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH(CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=4-[H2NC(0)CH2]00(CH2) 3, A=C0).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 32a fik materiale 10 fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 5d lov til at reagere med produktet fra eksempel 99b til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 71%. TLC, Rf = 0,28, 0,31, MeOH:CHCl3 (1:9) .
d. 3 (RS)- [4 - (2-amino-2-oxoethyl)phenoxy]-1-oxobutyl)-L-valyl-15 N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)J-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CHj)CH3, R2=(CH3)2CH-rR3=4- [H2NC(O)CH2]00(CHj)3, A=CO).
Ved at anvende fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet fra eksempel 99c oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkroma-20 tografi (MeOH:CH2Cl2 (4:96)), af titelproduktet (32%). HPLC, tR = 2,11, 3,01, Col B,H20:CH3CN:THF:TFA (55:35:15:0,1), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C28H39F3N4°6'5 H20: C 56'65' H 6'79/ N 9/43.
25 Fundet: C 56,83, H 6,98, N 9,24.
EKSEMPEL 100.
DK 172736 B1 144 3(RS)-E-[3-(4-hydroxycarbonylphenyl)-l-oxoprop-2-enyl]-L-valyl- N-[3-(1,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid 1 2 3 (formel Ib, R =CH (CH-j) CHj, R = (CH.^) 2CH-, R =E-4-[HOC (O) ]ØCH=CH-, A=CO).
5 Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 14 blev materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 87d omdannet til titelproduktet i et udbytte på 88%. HPLC, t = 2,6, 3,4, Col B,
K
H20:CH3CN:THF:TFA (55:35:15:0,1), FR = 1,5.
Analyse beregnet for 10 C26H32F3N3O6,0,35 H20: C 57,21, H 6,03, N 7,96.
Fundet: C 57,40, H 6,40, N 7,38.
EKSEMPEL 101.
3(RS) -[2-(4-ethoxycarbonylphenoxy)-1-oxoethyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, 15 R1=CH (CH3) CH3, R2= (CH3) 2CH-, R3=4-[CH3CH2OC(O)]ØOCH2, A=CO).
a. Ethyl-4-[2-oxo-2- (phenylmethoxy)ethoxy]benzoat.
En blanding af ethyl-p-hydroxybenzoat (4,98 g), benzylbromacetat (4,75 ml) og K2C03 (4,14 g) blev omrørt i 15 timer i 30 ml DMF. Reaktionsblandingen blev fortyndet med vand (200 ml) og ekstra-20 heret med en 1:1 ether:hexan-blanding. De forenede organiske ekstrakter blev vasket (vand, saltvand), tørret (Na^O^), filtreret og inddampet og gav 9,3 g (99%) af titelforbindelsen som en tung olie. TLC, R^ = 0,71, Et20:hexan (1:1).
! DK 172736 B1 145 b. Ethyl-4-(2-hydroxy-2-oxoethoxy)benzoat.
En opløsning af produktet fra eksempel 101a (2,0 g) i EtOH (50 ml) blev hydrogeneret ved 170.000 Pascal (10 psi) under anvendelse af 10% Pd/C (200 mg). Efter 20 minutter var reaktionen 5 afsluttet, og reaktionsblandingen blev filtreret gennem en pude af Celite ® og koncentreret i vakuum. Remanensen blev krystalliseret af methyl-tert.-butylether/hexan og gav 900 mg (63%) af titelforbindelsen som fine hvide nåle, smeltepunkt 129 - 130°C.
c. 2(RS),3(SR)-[2- (4-ethoxycarbonylphenoxy)-l-oxoethvl]-L-valyΙ- ΙΟ N-[3-(l,l,l-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl))-L-prolinamid (formel Vllb, R^CH (CH3)CH3, R2= (CH3) 2CH-, R3=4-[CH-jCi^OC(O) )ØOCH2, A=CO).
Ved at anvende fremgangsmåden i eksempel 32a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 5d lov til at reagere 15 med produktet fra eksempel 101b til dannelse af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 92%. TLC, Rf = 0,47, 0,53, MeOH:CH2Cl2 (1:9).
d. 3(RS)-[2-(4-ethoxycarbonylphenoxy)-l-oxoethyl)-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl) J-L'-prolinamid 20 (formel Ib, R^CH (CH3) CH3, R2=(CH3)2CH, r3=4-[ch3ch2oc (O) ]øoch2, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 61c blev produktet fra eksempel 101c oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CH2Cl2 (2:98)), af titelproduktet (41%).
25 TLC, Rf = 0,37, MeOH:CHCl3 (1:9).
Analyse beregnet for C27H36F3N3°7: C 56'74' H 6'35' N 7'35*
Fundet: C 56,40, H 6,50, N 7,12.
DK 172736 B1 146 EKSEMPEL 102.
3 (RS) - [3- (4-ethoxycarbonylphenyl)-1-oxopropyl]-L-valyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R-^CH (CH3)CH3, R2=(CH3)2CH, R3=4- [CH3CH2OC (O) ]0 (CH2) 2~, A=CO).
5 a. 4-ethoxycarbonylbenzenpropansyre.
En opløsning af 4-carbethoxykanelsyre (4,9 g) i EtOH (120 ml) blev hydrogeneret over 5% Rh/C (485 mg) ved atmosfæretryk i 21 timer. Opløsningen blev filtreret og destilleret. Remanensen blev krystalliseret af cyklohexan til dannelse af 2,23 g (46%) 10 af titelforbindelsen som hvide krystaller, smeltepunkt 108,5 -110,5°C.
b. 2(RS),3(SR)-[3-(4-ethoxycarbonylphenyl)-1-oxopropyl]-L-valyl-N- [3- (l,l,l-trifluor-2-hydro.xy-4-methylpentyl) ]-L-prolinamid (formel Vllb, R^CH (CH3) CH3, R2= (CH3) 2CH-, R3=4-[CH3CH2OC (O) ]0- 15 (CH2)2-, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 32a fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 5d lov til at reagere med produktet fra eksempel 102a til fremstilling af titelforbindelsen, isoleret i et udbytte på 83%, efter rensning ved lyn-20 kromatografi (MeOHiCI^C^ (4:96)). TLC, R^ = 0,33, 0,38,
MeOH:CH2Cl2 (5:95).
c. 3(RS)-[3- (4-ethoxycarbonylphenyl)-1-oxopropyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopenty1)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=(CHj)2CH-, 25 R3=4-[CH3CH20C(0) )0(CH2)2-, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 84d blev produktet fra eksempel 102b oxideret til dannelse af titelproduktet (97%).
DK 172736 B1 147
Analyse beregnet for C28H38F3N3°6'0'65 H20: C 57'85' H 6'81' N 7/23.
Fundet: C 57,89, H 6,83, N 6,98.
EKSEMPEL 103.
5 3(RS)-4-hydroxybenzoyl-L-valyl-N-(3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2- oxopentyl) ]-L-prolinamid (formel Ib, R3=CH (CH^) CH^, R2= (CH^) 2CH-, R3=4-(HO)0, . A=CO).
a. 2(RS),3(SR)-4-hydroxybenzoyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor- 2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, 10 RX=CH (CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=4-(HO)0, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 84b fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 5d lov til at reagere med 4-hydroxybenzoesyre til dannelse af titelforbindelsen, der blev isoleret i et udbytte på 65%, efter rensning ved lynkromato- 15- grafi (Et0Ac:Et20 (15:85)). TLC, Rf = 0,43, Et0Ac:Et20 (15:85).
Analyse beregnet for C23H32F3N3°5'0/6 H20: C 55'43' H 6'71' N 8,43.
Fundet: C 55,76, H 6,62, N 8,03.
b. 3(RS)-4-hydroxybenzoyl-L-valyl-N-[3-(1,l,l-trifluor-4-methyl-20 2-oxopentyl) ]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH^CH^, r2=(ch3)2ch-, R3=4-(HO)0, A=CO).
Produktet fra eksempel 103a blev oxideret ved fremgangsmåden fra eksempel 33c med følgende modificerede oparbejding: Den rå remanens blev opløst i MeOH og omrørt med vandig K^CO^ (5 ml) ved 25 stuetemperatur i 16 timer. Efter at blandingen var delvis kon centreret i vakuum, blev den syrnet med koncentreret HC1 og ekstraheret med EtOAc. EtOAc-opløsningen blev vasket (saltvand) og tørret (Na2S04), filtreret og koncentreret til en remanens, der DK 172736 B1 148 blev renset ved lynkromatografi (EtOAc:Et20 (1:9) til dannelse af titelforbindelsen i et udbytte på 38%. HPLC, tR = 3,54, 4,92,
Col A, CH3CN:H20 (35:65), FR = 2,0.
Analyse beregnet for 5 C23H30F3N3°5'1'2 H20: C 54'47' H 6'44' N 6'29’
Fundet: C 54,83, H 6,49, N 7,89.
EKSEMPEL 104.
3(RS)-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid 10 (formel Ib, R1=CH(CH-)CH , R2=(CH ) CH, R3=4-[(4-ClØ)S(0_)NHC-(0)]0, ' - A-CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 77b fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 79 lov til at reagere med 4-chlorbenzensulfonamid til dannelse, efter rensning ved lyn-15 kromatografi (MeOH:CH2Cl2 (3:97)), af titelproduktet (66%).
HPLC, tR = 4,26, 6,07, Col A, H 20:CH 3CN:THF:TFA (55:35:15:0,1).
Analyse beregnet for C30H34ClF3N4O7S,0,9 H20: C 51,23, H 5,13, N 7,60.
Fundet: C 51,23, H 5,11, N 7,96.
20 EKSEMPEL 105.
3(RS)-[3-(4-hydroxycarbonylphenyl)-1-oxopropyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl))-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3, r2=(ch3)2ch-, r3=4-[hoc(o) ]ø(ch2)2, A=C0).
25 Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 14 blev materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 102c omdannet til titel- produktet i et udbytte på 81%. HPLC, tR= 2,6, 3,4, Col B, H20:CH3CN:THF:TFA (55:35:15:0,1).
DK 172736 B1 149
Analyse beregnet for C26H34F3N306: C 57,66, H 6,33, N 7,76.
5 Fundet: C 56,98, H 6,49, N 7,35.
EKSEMPEL 106.
3 (RS)-[3-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenyl]-1-oxopropyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, 10 R3=4-[ (4-ClØ)S(02)NHC(0) ]0(CH2)2, A=CO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 77b fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 105 lov til at reagere med 4-chlorbenzensulfonamid til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CH^Clj (5:95)), af titelproduktet (90%).
15 HPLC, tR = 3,96, 5,73, Col B, H20:CH3CN:THF:TFA (55:35:15:0,1), FR = 3,0.
Analyse beregnet for C32H38C1F3N4°7'S'1'7 H20: C 51'53' H 5'59' N 7,51.
Fundet: C 51,72, H 5,40, N 7,24.
20 EKSEMPEL 107.
3 (RS)-E-[3-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenyl]-l-oxoprop-2-enyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxo-pentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^=CH(CH3>CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=E- [4 - (4-C10) S (O^JNHC (O) ]0-CH=CH-, A=CO).
25 Under anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 77b fik materiale fremstillet ved fremgangsmåden fra eksempel 100 lov til at rea- DK 172736 B1 150 gere med 4-chlorbenzensulfonamid til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CH2Cl2 (5:95)), af titelproduktet (97%). HPLC, tR = 4,73, 6,68, Col B, H20:CH3CN:THF:TFA (55:35: 15:0,1), FR = 3,0.
5 Analyse beregnet for C32H36C1F3N407S,1,7 H20: C 51,67, H 5,33, N 7,53.
Fundet: C 51,72, H 5,40, N 7,24.
EKSEMPEL 108.
3 (RS)-[1-[4-[ [ (4 -bromphenyl )sulfonyl ] [ phenylmethyl ] aminocarbony 1 ] -10 phenyl]-1-oxomethyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2- oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^=CH(CH^)CH^, R2=(CH3)2CH-, R3=4-( (4-BrØ)S (02)N(CH20)C(0) ]0-, A=CO).
a. 4-brom-N- (phenylmethyl)benzensulfonamid.
15 4-brombenzensulfonylchlorid (14,05 g, 55 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af benzylamin (5,36 g, 50 mmol) og pyridin (400 ml) under nitrogen ved stuetemperatur. Den fremkomne reaktionsblanding blev omrørt i en time. Den blev så hældt på is/vand (800 ml) til dannelse af et gult bundfald, som blev filtreret og 20 omkrystalliseret af EtOH/vand til dannelse af 9,44 g (53%) af titelforbindelsen som urent hvide nåle, smeltepunkt 116 - 117°C.
Analyse beregnet for C13H12BrN02S: C 47'87' H 3'71' N 4,29.
Fundet: C 48,02, H 3,78, N 4,25.
25 b. 1,l-dimethylethyl-4-[[(4-bromphenyl) sulfonyl] [phenylmethyl] -aminocarbony1]benzoat.
DMAP (1,81 g, 14,84 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af DK 172736 B1 151 produktet fra eksempel 108a {4,4 g, 13,49 mmol) og CH2C12 (150 ml) ved stuetemperatur. Til den fremkomne opløsning blev i rækkefølge sat WSCDI (2,84 g, 14,84 mmol) og terephthalsyre-mono-t-butylester (3,0 g, 13,49 mmol). Reaktionsblandingen blev omrørt 5 ved stuetemperatur natten over og koncentreret i vakuum og efterlod en remanens, der blev opløst i EtOAc. EtOAc-opløsningen blev vasket (20% vandig citronsyre, saltvand, vand), tørret (MgS04), filtreret og koncentreret i vakuum og efterlod en olieagtig remanens. Denne remanens blev opløst i varm EtOH og fik 10 lov at afkøle. De hvide krystaller, som dannedes, blev filtreret, vasket med kold EtOH og tørret i højvakuum til dannelse af 5,72 g (80%) af titelforbindelsen som hvide krystaller, smeltepunkt 120 - 122°C.
Analyse beregnet for 15 C25H24BrN05S: C 56,61, H 4,56, N 2,64.
Fundet: C 56,84, H 4,68, N 2,60.
c. 4-[[(4-bromphenyl)sulfonyl][phenylmethyl]aminocarbonyl]-benzoesyre.
Produktet fra eksempel 108b (5,30 g, 10 mmol) blev sat til TFA 20 (50 ml) ved 0°C og opløstes straks ved tilsætningen. Efter ca.
10 minutter dannedes et hvidt bundfald. Omrøring blev fortsat i 1/2 time, og blandingen blev filtreret. Det opsamlede faste stof blev vasket med vand og omkrystalliseret af varm absolut EtOH til dannelse af 4,0 g(84%) af titelforbindelsen som et hvidt 25 pulver, smeltepunkt 193 - 194°C.
d. 2(RS),3(RS) [1-[4-[[ (4-bromphenyl)sulfonyl][phenylmethyl]-aminocarbony1]phenyl]-1-oxomethyl]-L-valyl-N-(3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)CH3, R3=4-(((4-BrØ)S(0)2)]((ØCH2)NCO]0, 30 , A=CO), WSCDI (0,44 g, 2,3 mmol) blev sat til en omrørt opløsning af DK 172736 B1 152 produktet fra eksempel 108c (1,0 g, 2,1 mmol), materiale fremstillet ifølge eksempel 5d (0,85 g, 2,3 mmol), HOBT (0,28 g, 2,1 mmol) og tør THF under nitrogen ved 0°C. Den fremkomne reaktionsblanding blev omrørt ved 0°C i 15 minutter, og den fik så 5 lov at opvarme til stuetemperatur og blev omrørt i 4 timer.
THF blev fjernet i vakuum og efterlod en brunlig remanens, der blev opløst i EtOAc. EtOAc-opløsningen blev vasket (1 N HC1, mættet NaHCO^r saltvand) og tørret (MgSO^), filtreret og koncentreret i vakuum og efterlod en remanens (1,6 g). En portion 10 (1,27 g) af denne remanens blev omkrystalliseret af methyl-t-butyl- ether/hexan til dannelse af 0,64 g (samlet udbytte 49%) af titelforbindelsen som et hvidt pulver. TLC, = 0,59, 0,64, CHC13:CH30H (95:5), HPLC, tR = 14,34, 15,26, Col B, H20:CH3CN: THF:TFA (55:35:15:0,1), FR = 3,0.
15 e. 3(RS)-[1-[4-[[(4-bromphenyl)sulfonyl][phenylmethyl]amino-carbonyl]phenyl]-1-oxomethyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl) ]-L-prolinamid (formel Ib, R3=CH (CH3)CH3, R2=(CH3) 2CH-, R3=4-[ [ (4-BrØ)S(02) ]N(CH20)C(0) ]0, A=CO).
20 En opløsning af produktet fra eksempel 108d (300 mg, 0,364 mmol) i CH2C12 (2 ml) blev sat til en omrørt blanding af en Dess-Martin-perjodinan (1,54 g, 3,63 mmol) og tør CH2Cl2 (10 ml) under nitrogen ved stuetemperatur. Til den fremkomne blanding blev sat TFA (0,41 g, 3,63 mmol), hvorefter blandingen straks blev klar.
25 Derpå, efter 10 minutter, blev den uklar. Omrøring blev fortsat natten over, før der blev tilsat EtOAc (50 ml), og den fremkomne blanding blev hældt i mættet vandig NaHC03 (100 ml) indeholdende 4 g Na2S203· Den tofasede blanding blev omrørt kraftigt i 10 minutter. Det organiske lag blev fraskilt, vasket 30 (mættet NaHC03 (100 ml), saltvand (100 ml)), tørret (MgSO^), filtreret, koncentreret i vakuum og tørret i højvakuum til dannelse af 0,24 g (80%) af titelforbindelsen som et hvidt pulver. TLC,
Rf = 0,62, 0,75, CHCl3:MeOH (95:5), HPLC, tR = 14,88, 21,56,
Col B, H20:CH3CN:THF:TFA (55:35:15:0,1), FR = 3,0.
DK 172736 B1 153
Analyse beregnet for C37H40BrF3N4O7S,0,25 H20: C 53,78, H 4,94, N 6,78.
Fundet: C 53,84, H 4,98, N 6,45.
5 EKSEMPEL 109.
3R(eller S)- (tricyklo[3.3.1.13'7]dec-l-yl)sulfonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH3) CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=l-adamantyl, A=S (02)).
10 Af lynkromatografien beskrevet i eksempel 91c fremkom titelforbindelsen som den anden i hovedsagen rene isomer (84%) .
HPLC, tR = 3,89, Col A, H20:CH3CN (45:55), FR = 2,0.
Analyse beregnet for C26H40F3N3°5S'°'5 H20: C 54'57' H η·22> N 7,34.
15 Fundet: C 54,52, H 7,15, N 7,33.
EKSEMPEL 110.
3(S eller R)-[4-(phenylsulfonylaminocarbonyl)phenylaminocarbonyl]-L-valyl-N-(3- (1,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R1=CHCCH3)CH3, R2= (CH3) 2CH-, 20 R3=4-[ØS(02)NHC(0) ]0, A=NHCO).
De to diastereomerer fra eksempel 58 blev adskilt ved MPLC på en LiChroprep® RP-8-søjle (Merck, størrelse B 40-63 /am) under anvendelse af Me0H:H20 (50:50) som eluent. De opsamlede fraktioner blev analyseret ved HPLC, og de rigtige fraktioner blev 25 forenet og lyofiliseret til dannelse af titelproduktet. HPLC, tR = 4,5, Col B, H20:CH3CN:THF:TFA (55:35:15:0,1), FR = 2,0.
DK 172736 B1 154 EKSEMPEL 111.
3 (S (eller R)-phenylmethoxycarbonyl-L-phenylglycyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, 5 r1=ch(ch3)ch3, r2=ø, r3=øch2-, A=OCO).
Ved anvendelse af fremgangsmåden fra eksempel 61c blev produktet fremstillet ved fremgangsmåden i eksempel 92a oxideret til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (MeOH:CH2Cl2 (1,5:98,5), af titelproduktet (80%) som en i hovedsagen ren iso-10 mer. TLC, Rf = 0,26, pentan:MeOH:Et20 (25:1:99).
Analyse beregnet for C27H30F3N3°5: C 60'78' h 5,67, N 7,88.
Fundet: C 60,64, H 5,85, N 7,96.
EKSEMPEL 112.
15 3R(eller S)-phenylmethoxycarbonyl-L-phenylglycyl-N-[3-(1,1,1- trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3, r2=ø, r3=øch2-, . a=oco).
Af den i eksempel 111 beskrevne lynkromatografi fremkom titelproduktet (83%) som den anden i hovedsagen rene isomer. TLC, 20 Rf = 0,30, pentan:MeOH:Et20 (25:1:99).
Analyse beregnet for C27H30F3N3°5: C 60'78' H 5»67» N 7,88.
Fundet: C 59,43, H 5,65, N 7,48.
EKSEMPEL 113.
DK 172736 B1 155 3R(eller S)-[4-[(4-bromphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenyl--carbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2- oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH3) CH3, R2= (CH3) 2CH-, R3 = 4- [4- (BrØ) S (02)NHC (0) ]0, A=C0).
5 Produktet fra eksempel 95b (0,5 g, 0,7 mmol) blev kromatograferet ved MPLC på en LiChroprep® RP-8-søjle (Merck, størrelse B 40-63 yum) under anvendelse af Me0H:H2O (60:40) som eluent. De op-samlede fraktioner blev bedømt ved HPLC, forenet og lyofiliseret til dannelse af to produkter. Titelproduktet (0,147 g) fremkom 10 som en i hovedsagen ren isomer. HPLC, tR = 12,38, Col B, H20:CH3CN:THF:TFA (55:35:15:0,1), FR = 3,0.
EKSEMPEL 114.
3S(eller R)—[4—[(4-bromphenyl)sulfonylaminocarbonyllphenyl-carbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-15 L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=4-[ (4-BrØ) S (02) NHC (O) ]0, A=CO).
Det andet produkt, der fremkom ved adskillelsen.beskrevet i eksempel 113 var titelproduktet (0,065 g), der fremkom som en i hovedsagen ren isomer. HPLC, tR = 8,44, Col B, H20:CH3CN: 20 THF-.TFA (55:35:15:0,1), FR = 3,0.
EKSEMPEL 115.
3S(eller R) — 14—[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyljphenyl-carbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)1-L-prolinamid (formel Ib, R1=CH(CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, 25 R3=4-[ (4-C10)S (02)NHC(0) ]ø, A=C0).
DK 172736 B1 156
En del af materialet fremstillet som beskrevet i eksempel 104 (544,8 mg) blev opløst i H_0:CHoCN:THF (2,2 ml:3,3 ml:0,5 ml) * -1 (j5) og blev adskilt ved MPLC på en Lobar^ , størrelse B, LiChro-prep ® RP-8-søjle under anvendelse af H^O:CH^CN:THF:TFA 5 (55:32,5:12,5:0,1). Efter analyse ved HPLC blev de rigtige frak tioner forenet, koncentreret i vakuum og tørret i høj vakuum ved 4 3°C til dannelse af titelforbindelsen (255 mg) som et hvidt amorft fast stof. HPLC, tR = 5,76, Col B, H20:CH^CN:THF:TFA (55:32,5:12,5:0,1), FR = 3,0.
10 Analyse beregnet for C30H34ClF3N4O7S'1,3 H20: C 50'71' h 5'19/ N 7,89.
Fundet: C 50,88, H 4,87, N 7,70.
EKSEMPEL 116.
3R(eller S)-[4-[ (4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenyl — 15 carbonyl-L-valyl-N- [3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl))- L-prolinamid (formel Ib, R1=CH (CH3)CH3, R2=(CH3)2CH-, R3=4-[ (4-ClØ)S (02)NHC(0) ]0, A=CO).
En del af materialet fremstillet som beskrevet i eksempel 104 (573,8 mg) blev opløst i H20:THF (2 ml:3 ml) og blev adskilt 20 ved MPLC på en Lobar®, størrelse B, LiChroprep ® RP-8-sØjle under anvendelse af THF:H20:TFA (41:59:0,1) som eluent. Efter analyse ved HPLC blev de rigtige fraktioner forenet og lyofili-seret til dannelse af titelforbindelsen (51,8 mg) som en i hovedsagen ren isomer (99:1 ifølge HPLC). HPLC, t = 8,8, Col B, 25 H20:CH3CN:THF:TFA (55:32,5:12,5:0,1), FR = 3,0.
ί EKSEMPEL 117.
DK 172736 B1 157 3S (eller R)-phenylmethoxycarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3, r2=ch(ch3)ch3, r3=øch2, A=OCO).
En del af materialet fremstillet ifølge fremgangsmåden i eksem-5 pel 11 (10 g, 0,02 mol) blev adskilt i dets enkelte i hovedsagen optisk rene isomerer ved lynkromatografi (1 kg silicagel, Et20:hexan (80:20)). Forening af de rigtige fraktioner gav titelforbindelsen (3,17 g) som en i hovedsagen ren isomer.
HPLC, t = 5,65, Col A, HjOrCHjCN (55:45), FR = 2,0.
10 Analyse beregnet for C24H32F3N3°5,H20: C 55'47' H 6'46' N 8,08.
Fundet: C 55,50, H 6,77, N 7,99.
EKSEMPEL 118.
3R( eller S)-phenylmethoxycarbonyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-15 4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, r1=ch(ch3)ch3, r2=ch(ch3)ch3, r3=øch2, a=oco).
Fra den i eksempel 117 beskrevne adskillelse gav forening af de rigtige fraktioner titelforbindelsen (3,67 g) som den anden i det væsentlige rene isomer.
20 Analyse beregnet for C24H32F3N3°5: C 57'71' H 6'46' N 8'41'
Fundet: C 57,61, H 6,34, N 7,96.
EKSEMPEL 119.
DK 172736 B1 158 3S (eller R)-[ (4-carboxyphenyl)aminocarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH3) CH3, R2=CH (CHj) CH3, R3=4-(HOOC) 0, . A=NHCO).
5 En del af et produkt fremstillet som beskrevet i eksempel 16 (500 mg) blev adskilt ved MPLC på en Lobar® ,størrelse B, LiChroprep ® RP-8-søjle under anvendelse af MeOHti^O (1:1) som eluent. Efter analyse ved HPLC blev de rigtige fraktioner forenet til dannelse af titelforbindelsen (150 mg) som en i 10 hovedsagen ren isomer. HPLC, tR = 6,58, Col A, CH^CNii^O (25:75), FR = 2,0.
EKSEMPEL 120.
3R(eller S)-[ (4-carboxyphenyl)aminocarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid 15 (formel Ib, R1=CH(CHj)CH3, R2=CH(CH3)CH3, R3=4-(HOOC)Ø, A=NHCO],
Ved forening af de rigtige fraktioner fra adskillelsen beskrevet i eksempel 119 fremkom titelforbindelsen som en højt beriget isomer (220 mg) i et forhold på 90,4:9,5 til isomeren 20 beskrevet i eksempel 119. HPLC, tR = 11,09, Col A, CH-jCN^jO (25:75), FR = 2,0.
EKSEMPEL 121.
DK 172736 B1 159 3(RS)-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-valyl-N-[3- (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ib, R^CH (CH3)CH3, R2=CH (CHj) C«3, R3=4-[ (4-ClØ) S (02) -NHCO ] 0 , A=CO).
5 En foretrukken metode til omdannelse af materialet fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 5d til titelforbindelsen er som følger: a. 1,l-dimethylethyl-4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]-benzoat.
10 En 5-liters, 3-halset, rundbundet kolbe blev udstyret med mekanisk omrører og nitrogen-indgangsrør. CH2C12 (2 liter) blev anbragt i reaktionskolben, og terephthalsyre-mono-t-butylester (127,5 g, 0,574 mol), DMAP (70,06 g, 0,574 mol) og 4-chlor-benzensulfonamid (110,04 g, 0,574 mol) blev tilsat i den nævnte 15 rækkefølge under anvendelse af CH2C12 (400 ml) til at vaske de faste stoffer ned. WSCDI (110,10 g, 0,574 mol) blev tilsat portionsvis i løbet af 10 minutter under anvendelse af CH2Cl2 (100 ml) til at vaske det faste stof ned. Efter at reaktionsblandingen var blevet omrørt natten over ved stuetemperatur, 20 blev den koncentreret i vakuum til tørhed. Remanensen blev skilt mellem EtOAc og vand. EtOAc-opløsningen blev vasket (20% vandig citronsyre, mættet vandig NaHCC>3, saltvand) , tørret (Na2S04) og koncentreret i vakuum til et hvidt fast stof. Efter tørring i en vakuumovn ved 50°C fremkom titelproduktet (227 g, 25 100%) i tilstrækkeligt ren tilstand til at blive anvendt direk te til næste trin. TLC, = 0,43, MeOH:CHCl3 (15:85). (Yderligere rensning var mulig ved omkrystallisation af EtOHivand, smeltepunkt over 300°C).
DK 172736 B1 160 b. 4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]benzencarboxylsyre.
En 3-liters, 3-halset, rundbundet kolbe blev udstyret med mekanisk omrører og et CaCl2-tørrerør. TFA (1300 g) blev tilsat og afkølet til 0°C. Produktet fra eksempel 121a (79,5 g, 5 0,20 mol) blev tilsat. Til at begynde med opløstes det faste stof og gav en klar opløsning. Efter 10 - 15 minutter dannedes et tungt bundfald af produkt, og det var vanskeligt at omrøre reaktionsblandingen. Kraftig omrøring med den mekaniske omrører var væsentligt for at drive reaktionen til fuldendelse. Reak-10 tionsblandingen blev omrørt ved 0 - 5°C i en time, før den blev hældt på 1500 ml is/vand og omrørt i 2 timer. Det fremkomne faste stof blev filtreret og tørret. Det hvide faste stof (61,5 g, 91%), der fremkom, blev omkrystalliseret af 1600 ml absolut EtOH/1600 ml H20 til dannelse af titelproduktet (54 g, 80%) som 15 hvide nåle, smeltepunkt 286 - 288°C. TLC, = 0,7, MeOHiCHCl^s
AcOH (10:90:1).
c. 2(RS) ,3(SR)-[4-[ (4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyllphenyl-carbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-2-hydroxy-4-methylpentyl)]-L-prolinamid (formel Vllb, R1=CH (CH-j) CH3> R2=CH (CH3) CH3, 20 R3=4-[ (4C10)S (O2)NHC0]0, A=CO>.
En 250 ml, 3-halset, rundbundet kolbe blev udstyret med magnetisk omrører og nitrogen-indgangs rør. Til CH2C12 (125 ml) i reaktionskolben blev sat produktet fra eksempel 121b (5,45 q, 15,07 mmol), DMAP (1,96 g, 16,07 mmol) og materiale fremstillet 25 ifølge eksempel 5d (6,20 g, 16,87 mmol) under anvendelse af CH^C^ (20 ml) til at vaske de faste stoffer ned. Derefter blev WSCDI (3,24 g, 16,87 mmol) tilsat under anvendelse af CH2Cl2 (5 ml) til at vaske det faste stof ned. Efter at reaktionsblandingen var blevet omrørt i 5 timer, blev den vasket (1 N HCl, 30 mættet vandig NaHCO^, saltvand), tørret (Na2S04) og koncentreret i vakuum til dannelse af et råt produkt (11,0 g, 100%) som et hvidt fast stof. En del (3,39 g) af dette rå produkt blev opløst DK 172736 B1 161 i MeOH (40 ml) og fortyndet med vand (9 ml). Den fremkomne opløsning blev mættet med K2C03 °9 omr^rt natten over ved stuetemperatur. Efter at det meste af MeOH var blevet fjernet i vakuum, blev remanensen skilt mellem EtOAc og vand. EtOAc-5 opløsningen blev vasket (mættet vandig NaHCO^f saltvand), tørret (Na^O^) og koncentreret til dannelse af et i det væsentlige rent titelprodukt (3,13 g, 92%). TLC, Rf = 0,38, 0,46,
MeOH:CHC13:AcOH (5:95:1), HPLC, tR = 6,20, 6,25, Col A, H20:CH3CN:THF:TFA (55:35:15:0,1), FR = 3,0.
10 d. 3 (RS)-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenyl- carbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl))-L-prolinamid, (formel Ib, R^=CH(CH3)CH3, R2=CH(CHj)CH3, R3=4-[(4-C10)S (02)NHC0]0, A=CO).
Til en omrørt opløsning af Dess-Martin-perjodinan (636 g, 15 1,50 mol) i CH2C12 (5 liter) blev sat produktet fremstillet ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 121c (351 g, 0,50 mol) i THF (500 ml), og den fremkomne suspension blev fortyndet med CH2C12 (2 liter), efterfulgt af tilsætning af TFA (171 g, 1,50 mol). Efter at reaktionsblandingen var blevet omrørt nat-20 ten over ved stuetemperatur, blev CH2C12 fjernet i vakuum, remanensen blev fortyndet med EtOAc og behandlet med en 1:1 blanding af mættet vandig NaHCOj og mættet vandig Na2S203· Når alt det faste stof var opløst, blev det vandige lag fraskilt, og EtOAc-laget blev vasket (en blanding af mættet vandig NaHC03 og 25 mættet vandig Na2S03 (1:1), mættet vandig NaHC03, saltvand), tørret (Na2S04) og koncentreret i vakuum. Remanensen blev opløst i MeOH (1,5 liter) og behandlet med 1 N HCl (1,5 liter), og MeOH blev fjernet i vakuum. Den vandige suspension, der blev tilbage, blev ekstraheret med CH2C12, og de forenede CH2Cl2-30 ekstrakter blev vasket (saltvand), tørret (NajSO^) og koncentreret i vakuum til dannelse, efter rensning ved lynkromatografi (gradient, Et20 til Et20:Me0H (95:5)), af titelproduktet (37%).
DK 172736 B1 162 HPLC, t = 6,68, 9,27, Col B, H20:CH^CN:THF:TFA (55:35:15:0,1), FR = 2,0.
EKSEMPEL 122.
3(RS)-N2-N^-di(phenylmethoxycarbonyl)-L-lysy1-L-valyl-N-[3- 5 (1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ic, R^CH (CH3)CH3, R2 = CH (CH3)CH3, R3=ØCH2, R5=ØCH_OCONH (CH.) . , - A=OCO), l 2 4
Ved anvendelse af fremgangsmåden i eksempel 54b blev produktet fra eksempel 28a oxideret til dannelse, efter rensning ved lyn-10 kromatografi (hexan:Et^O(1:1), derefter EtjO, derefter EtjO:
EtOAc (3:1)),af titelproduktet (56%). HPLC, t^ = 4,19, 6,02,
Col A, CH3CN:H20 (60:40), FR = 1,5.
Analyse beregnet for C3gH50F3N508,0,5 H20: C 59,21, H 6,67, N 9,03.
15 Fundet: C 58,93, H 6,62, N 8,75.
EKSEMPEL 123.
3(RS)-[1,4-dioxo-4-(phenylsulfonylamino)butyl]-L-leucyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ic, R1=CH(CH-j)CH3, R2=CH(CH3)CH3, R3=ØS(02)NHCO(CH2)2, 2 0 R5= (CH2) 3CH3, A=CO).
En opløsning af produktet fra eksempel 24 (0,5 g, 0,87 mmol), benzensulfonamid (0,14 g, 0,87 mmol), DMAP (0,11 g, 0,87 mmol) og DCC (0,18 g, 0,87 mmol) i CH2C12 (20 ml) blev omrørt i 4 dage ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev filtreret og kon-25 centreret i vakuum til dannelse af et råt produkt. Dette produkt blev renset ved lynkromatografi på Baker^ , pH 5,0, silicagel DK 172736 B1 163 (gradient, CHCl3 til MeOH:CHCl3 (2:98) til MeOH:CHCl3 (5:95)) til dannelse af titelproduktet (0,37 g). HPLC, tR = 3,84, 5,03,
Col A, H20:CH3CN (65:35), FR = 1,0.
Analyse beregnet for 5 C32H46F3N5OgS: C 52,23, H 6,57, N 9,52.
Fundet: C 51,94, H 6,29, N 9,37.
EKSEMPEL 124.
3(RS)-[4-(methylsulfonylamino)-1,4-dioxobutyl]-L-leucyl-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid 10 (formel Ic, R^CH (CHg) CHg, R2=CH(CH3)CHg, R3=CH3S (O^NHCO (CH2) 2 , R5= (CH2) 3CH3, , A=CO).
En opløsning af produktet fra eksempel 24 (0,5 g, 0,87 mmol), methansulfonamid (0,082 g, 0,87 mmol), DMAP (0,11 g, 0,87 mmol) og DCC (0,18 g, 0,87 mmol) i CH2C12 (20 ml) blev omrørt i 4 dage 15 ved stuetemperatur. Reaktionen blev filtreret og koncentreret i vakuum til dannelse af et råt produkt, som blev delvis renset (3) ved lynkromatografi på Baker^ , pH 5,5, silicagel (gradient, CHC13, MeOH:CHCl3 (1:99) til (2,5:97,5)). Det delvis rensede produkt blev skilt mellem EtOAc og en blanding af vandig 3. N 20 HCl og saltvand. Den organiske fase blev tørret (Na2S04), filtreret og koncentreret til dannelse af titelproduktet (0,28 g).
HPLC, tR = 5,99, 8,95, Col A, H20:CH3CN (65:35), FR = 1,0.
Analyse beregnet for C27H44F3N5OgS: C 49,46, H 6,76, N 10,68.
25 Fundet: C 49,07, H 6,79, N 10,43.
EKSEMPEL 125.
DK 172736 B1 164 2 g 3(RS)-N -[1,4-dioxo-4- (phenylsulfonylamino)butyl]-N -phenyl-methoxycarbonyl-L-lysyl-L-valyl-N-[3-(1,1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ic, R^=CH(CH^)CH^» r2=ch(ch3)ch3, r3=øs(o2)nhco(ch2)2, 5 r5=øch2oconh(ch2)4, A=CO).
En opløsning af produktet fra eksempel 27 (493 mg, 0,670 mmol), benzensulfonamid (117 mg, 0,745 mmol), DMAP (91 mg, 0,745 mmol) og DCC (153 mg, 0,745 mmol) i CH2C12 (20 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 24 timer. Opløsningen blev fortyndet med EtOAc, 10 vasket (vand), tørret (MgS04), filtreret og koncentreret i vakuum. Det rå produkt blev renset ved lynkromatografi på Baker® , pH 5,5, silicagel (CH3OH:CHCl3 (2,5:97,5)) til dannelse af titelproduktet (243 mg) som et hvidt pulver. TLC, R^ = 0,50, CH3OH:CHC13:AcOH (5:94:1).
15 Analyse beregnet for C40H53F3N6°10S'0'75 H20: C 54'56' H 6*24, N 9,54.
Fundet: C 54,52, H 6,23, N 9,48.
EKSEMPEL 126.
3(RS)-(1,4-dioxo-4-[(tricyklo[3.3.1.13'7Jdec-l-yl)sulfonylamino]-20 butyl]-L-leucyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxo- pentyl)]-L-prolinamid (formel Ic, R =CH(CH3)CH3, R2=CH(CH3)CH3, R3=(1-adamantyl)S(02)NHC0(CH2)2> r5=(ch2) 3ch3, A= CO), a. 1-adamantansulfinamid.
25 Til produktet fra eksempel 82a (10,0 g, 45,7 mmol) blev langsomt sat koncentreret ammoniumhydroxid (300 ml), og blandingen blev DK 172736 B1 165 opvarmet til tilbagesvaling i 3 timer. Efter destillation af ammoniumhydroxidet blev remanensen optaget i vand og ekstraheret med Et^O- Et20-laget blev vasket (saltvand), tørret (Na2S04), filtreret og koncentreret i vakuum. Det rå produkt blev renset 5 ved sugnings-kromatografi på silicagel (Et20 til EtOAc) til dannelse af produktet (4,2 g) som et hvidt fast stof, smeltepunkt 139 - 141°C (litteratur: 141 - 142°C).
b. 1-adamantansulfonamid.
Til en opløsning af produktet fra eksempel 126a (4,0 g, 20,0 mmol) 10 i acetone (150 ml) ved tilbagesvaling blev sat en mættet acetoneopløsning af KMn04, indtil en svag violet farve blev stående. Opløsningen blev afkølet, filtreret gennem Celite^ og koncentreret i vakuum til dannelse af produktet (3,2 g) som et fast stof, smeltepunkt 191 - 193°C (litteratur: 197 - 198°C). TLC, 15 Rf = 0,80, EtOAc.
c. 3(RS)-[1,4-dioxo-4-[(tricyklo[3.3.1.I3'^)dec-l-yl)sulfonyl-amino]butyl]-L-leucyl-L-valyl-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methy1-2-oxopentyl)]-L-prolinamid (formel Ic, R1=CH(CH3)CH3, R2=CH (CH3)CH3, R3=(l-adamantyl)S(02)NHC0(CH2>2» 20 r5= (ch2) 3ch3, a=co).
En opløsning af produktet fra eksempel 24 (300 mg, 0,51 mmol), DMAP (62 mg, 0,51 mmol), WSCDI (99 mg, 0,51 mmol) og produktet fra eksempel 126b (110 mg, 0,51 mmol) i CH2cl2 (30 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 16 timer. Cl^Cl^opløsningen blev 25 vasket (1 N HC1, saltvand), tørret (MgSC>4) , filtreret og koncentreret i vakuum. Det rå produkt blev renset ved præparativ TLC (MeOHiCHCl^ (1:9))til dannelse af titelproduktet som et fast stof. TLC, Rf = 0,56, MeOH:CHCl3 (5:95), HPLC, tR = 4,23, 7,05, Col A, H20:CH3CN (1:1), FR = 2,0.

Claims (9)

10 R3 er phenyl, benzyl eller er (l-4C)alkyl, som eventuelt bærer en benzyloxycarbonyl-, benzyloxycarbonylamino-, phenylsulfonylamino- eller (phenylsulfonylamino)carbonyl-gruppe; R5 er (l-4C)alkyl, som eventuelt bærer en benzyloxycarbonyl- eller benzyloxycarbonylami-nogruppe; 15 og R3 er valgt blandt en af følgende: DK 172736 B1 (1) (l-6C)a!kyl, som eventuelt bærer en (MC)alkoxycarbony!-, [(1-4Q-alkoxycarbonyl]amino-, carboxy-, 2-[(L-4C)alkoxy]ethoxy-, adamantyl-, morfolinyl-, pyridyl-, thienyl-, oxopyrrolidinyl-, phenyl-, [(1-4C)-alkoxycarbonyl]phenyl-, (carboxy)phenyl-, phenoxy-, [(l-4C)a!koxycarbonyl]- 5 phenoxy-, (carbamoyl)phenoxy-, (carbamoylmethyl)phenoxy-, benzensulfonylami- no-, (methansulfonylamino)carbonyl-, (benzensulfonylamino)carbonyl-, (naphthalensulfonylamino)carbonyl-, (adamantansulfonylamino)carbonyl-, (chlorbenzensulfonylaminocarbonyl)phenyl- eller thiophenylgruppe; (2) naphthyl, aminochlorphenyl, phenyl, som eventuelt er substitueret med hydroxy, 10 (l-4C)alkoxy, (1 -4C)alkoxycarbonyl, carboxy, halogen, dihalogen, (methansul- fonylamino)carbonyl, (naphthalensulfonylamino)carbonyl eller [N-benzyI-(4-brombenzensulfonyl)amino]carbonyl; (3) en gruppe med formlen W.S02.NH.CO.phenyI-, hvori W er phenyl, som eventuelt bærer halogen eller nitro; 15 (4) en gruppe med formlen Y.CO.NHXCHJ,,-, hvor mer 2-5, og Yer phenyl, benzyl, diphenylmethyl, phenoxymethyl, benzyloxy, (l-4C)alkoxy, [(l-4C)alkoxycarbo-nyl]pheny!amino, (2-pyridyl)ethoxy eller carboxyphenylamino; (5) cyclopentyl eller undecyl, eventuelt substitueret med (l-4C)alkoxycarbonyl eller carboxy; 20 (6) 2-phenylvinyl eventuelt substitueret i phenylringen med (MC)alkoxycarbonyl, carboxy eller (chlorbenzensulfonylamino)carbonyl og (7) 2-(ureidocarbonyl)vinyI, di(benzyloxymethyl)methyl eller di(2-phenoxyethyl)-methyl; eller et farmaceutisk acceptabelt syre- eller baseadditionssalt deraf.
2. Forbindelse ifølge krav 1,kendetegnet ved, at den er valgt blandt 1) 3S(eller R)-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(l, 1, l-trifluor-4-methyl-2-oxopen- tyl)]-L-prolinamid, 2) 3(RS)-[(phenylmethoxy)carbony!]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-1,1, l-trifluor-2-oxopen-tyl)]-L- DK 172736 B1 prolinamid, 3) 3(RS)-[(4-(ethoxycarbony!)phenyl)aminocarbonyl]-L-vaIyI-N-[3-(4-methyI-l, 1,1-tri-fl uor-2 -oxo-pe nty I)]- L-prol i namid, 4) 3(RS)-[(4-carboxyphenyI)aminocarbonyl]-L-valyl-N-{3-(4-mechyl-1,1, l-trifluor-2-oxo-5 pentyl)]-L-prolinamid, 5) 3(RS)-[(4-phenylbutyl)carbonyl]-L-valyI-N-[3-(4-methyl-l, 1,l-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 6) 3(RS)-2-[2-(tricyklo[3.3.1. l3,7]dec-l-yl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-1,1,1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinarnid, 10 7) 3(RS)-[(4-metlioxyphenyi)carbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-mechyl-I,l, l-trifluor-2-oxopen- ty l)]-L-prol inam id, 8) 3(RS)-N'(N‘-di[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-lysyi-N-[3-(4-methyl-l,l,l-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 9) 3(RS)-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-phenylalanyl-N-(3-(4-methyl-l,l,l-trifluor-2-oxo-15 pentyl)]-L-prolinamid, 10) 3(RS)-[2-(methoxycarbonyl)ethylcarbonyl]-L-norleucyl-L-valyI-N-[3-(4-methyl-l, l, 1-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 11) 3(RS)-[(2-carboxyethyl)carbonyl]-L-norleucyl-L-valyl-N-[3-(4-methyl-1,1,1 -trifluor-2Oxopentyl)]-L-prolinamid, 20 12) 3(RS)-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-a-glutamyl-L-vaIyl-N-[3-(4-methyl-l, 1,1-trifluor- 2-oxopentyl)]-L-prolinamidphenylmethylester, DK 172736 B1 13) 3(RS)-N2-[2-(methoxycarbonyl)ethylcarbonyIJ-Nli-[(phenylmethoxy)carbonyI]-L-lysyl· L-valyl-N-[3-(4-methyl-l, 1,l-trifluor-2-oxopentyl)l-L-prolinamid,
14. SfRSJ-N^tiZ-carboxyethylJcarbonyn-N^KphenylmethoxyJcarbonyn-L-Iysyl-L-vaJyl-N-[3-(4-methyl-1,1, l-trifluor-2- oxopentyl)]-L-prolinamid, 5 15) 3S(eller R)-N2,N6-di[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-lysy]-L-valyl-N-[3-(4-rnethyl-l ,1,1- trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 16) 3(RS)-(l-naphthylcarbonyl)-L-valyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-pro-linamid, 17) 3(RS)-[4-(methylsulfonylaminocarbonyI)phenylaminocarbonyl]-L-valyl-N-[3-( 1,1,1 -tri-10 fluor-4-methy[-2-oxopentyI)]-L- prolinamid, 18) 3(RS)-[2-(4-morpholinyl)ethoxycarbonyl]-L-vaIyl-N-[3-(l ,1,1 -trifluor-4-methyl-2-oxo-pentyl)]-L-prolinamid, 19) 3(RS)-[(2,4-dichlorphenyl)carbonyl]-L-valyI-N-[3-(l, I, l-trifluor-4-methyl-2-oxopen-tyl)]-L-prolinamid, 15 20) 3(RS)-phenoxycarbonyl-L-valyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolin- amid, 21) 3(RS)-(2-(2-pyridyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[3-(l,l,l-tnfluor-4-methyl-2-oxopen-tyl)]-L-prolinamid, 22) 3(RS)-[4-(phenylsulfonylaminocarbonyl)phenylaminocarbonyl]-L-valyl-N-[3-(l, l, 1-tri-20 fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, DK 172736 B1 23) 3(RSM2-(3-thiophenyl)ethoxycarbonyl]-L-valyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxo- penty l))-L-prol inam id, 24) 3(RS)-(phenylmethoxycarbonyl)-L-a-aminobutyryl-N-[3-(l, 1, l-trifluor-4-methyl-2-oxo-pentyl)]-L-pro!inamid, 5 25) 3(RS)-(phenoxycarbonyl)-L-a-aminobutyryl-N-[3-(l, 1, l-trifluor-4-methyl-2-oxopen- tyl)]-L-prolinamid, 26) 3(RS)-N2-(l,l-dimethylethoxycarbonyl)-N6-pheny]methoxycarbonyI-L-Iysyl-N-[3-(1,1, l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 27) 3(RS)-f2-(tricyklo(3.3.1. lJ,7)dec-l-yl)ethoxycarbonyl]-L-a-arninobutyryl-N-[3-(l,l,l-10 trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-pro!inamid, 28) 3(RS)-(4-hydroxycarbonylphenyl)aminocarbonyI-L-a-aminobutyryl-N-[3-(l,l,l-tri-fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 29) 3(RS)-N<i-pheny!methoxycarbonyl-N:!-phenylsuIfonyI-L-lysyl-N-[3-(l,lIl-trifluor-4-me-thyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 15 30) 3(RS)-[Z-(4-aminocarbonylamino-l,4-dioxo-2-butenyl)]-L-valyl-N-[3-(l, l ,1-tri- fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 31) 3(RS)-phenylaminocarbonyl-L-valyl-N-[3-(l, 1, l-trifluor-4-methyl-2-oxopen-ty l)]-L-prol inamid, 32) 3(RS)-[[4-[(l-naphthylsulfonyl)aminocarbonyl]phenyl]aminocarbonyl]-L-va- 20 lyl-N-[3-( 1,1,1 -trifluor-4-methy l-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 33) 3(RS)-N2-(4-hydroxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-N6-phenylmethoxycarbo- i DK 172736 B1 ny 1-L-lysy l-N-[3-( 1,1,1 -tr ifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 34) 3(RS)-(4-hydroxycarbonylphenyl)carbonyl-L-valyl-N-[3-(l,l, l-trifluor-4-methyl-2-oxo-pentyl)]-L-prol inamid, 35) 3(RS)-(tricyklo[3.3.1. l3,7]dec-l-yl)sulfonyl-L-a-aminobutyryl-N-[3-(l, 1, l-trifluor-4-me-5 thyl-2-oxopentyiyi-L-prolinamid, 36) 3(RS)-(4-methoxycarbonylphenyl)carbonyl-L-valyl-N-[3-(l,l,l-trif]uor-4-rnethyl-2-oxo-pentyl)]-L-prol inamid, 37) 3(RS)-(4-hydroxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-phenylalanyl-N-[3-(l, 1,1-tri-fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 10 38) 3(RS)-(4-methoxycarbonylphenyl)methoxycarbonyl-L-valyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-me- thyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 39) 3(RS)-[E-3-(4-ethoxycarbonylphenyl)-1 -oxoprop-2-eny l]-L-valyl-N-[3-( 1,1,1 -tri-fluor-4-methyl-2-oxopentyl)l-L-prolinamid, 40) 3(RS)-(2-ethoxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-vaIyl-N-[3-(l, 1, l-trifluor-4-me-15 thyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 41) 3(RS)-4-[(4-nitrophenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenyIcarbonyI-L-valyl-N-[3-(l, 1,1-tri-nuor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L- prolinamid, 42) 3(RS)-phenylmethoxycarbonyl-L-glutamyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopen-tyl)]-L-proIinamid-phenylmethylester, 20 43) 3S(eller R)-(tricyklo[3.3.1.1JJ]dec-l-yl)sulfonyl-L-valyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-me- thyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, DK 172736 B1 44) 3(RS)-phenylmethoxycarbonyl-L-[5-(phenylsu!fbnylarnmo)gIutarnyl]-N-[3-(l, 1,1-tri-fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-proIinamid, 45) 3(RS)-[4-(phenylsuIfonylaminocarbonyl)pheriylcarbonyI]-L-valyl-N-[3-(l,l,l-tri-fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 5 46) 3(RS)-[4-[(4-bromphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-valyl- N-[3-(l, I, l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 47) 3(RS)-4-( 1 -naphthyls ul fonylamino)-1,4-dioxobutyl-L-valyl-N-[3-( 1,1,1 -trifluor-4-me-thyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 48) 3(RS)-[2-(4-aminocarbonylphenoxy)- l-oxoethyl]-L-valyl-N-[3-( 1,1,1 -trifluor-4-me-10 thyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 49) 3(RS)-(4-hydroxycarbonyIphenyl)methoxycarbonyl-L-vaIyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-me-thyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 50) 3(RS)-[4-[4-(2-amino-2-oxoethyl)phenoxy)-l-oxobutyn-L-valyl-N-[3-(l,l.l-tri-fluor-4-methyl-2-oxopentyl))-L-prolinamid, 15 51) 3(RS)-E-[3-(4-hydro*ycarbonylphenyl)-l-oxoprop-2-enyl]-L-valyl-N-[3-(l,l,l-tri- fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 52) 3CRS)-[2-(4-ethoxycarbonylphenoxy)-l-oxoethyl]-L-valyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-me-thyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 53) 3(RS)-[3-(4-ethoxycarbonyIphenyl)-l-oxopropyl]-L-valyl-N-[3-(l,l,l-tri-fluor-4-me-20 thy!-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 54) 3(RS)-4-hydroxybenzoyl-L-valyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolin- DK 172736 B1 amid, 55) 3(RS)-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonyIarainocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-va-ly l-N-[3-( 1,1,1 -tr ifluor-4-methy 1-2-oxopenty l)]-L-pro! inamid, 56) 3(RS)-[3-(4-hydroxycarbonylphenyl)- l-oxopropyl]-L-valyl-N-[3-( 1,1,1 -trifluor-4-me-5 thyl-2-oxopentyl)]-L-prol inamid, 57) 3(RS)-[3-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyllphenyl]- l-oxopropyl]-L-va-lyl-N-[3-(l, 1,1 -trifluor-4-methy 1-2-oxopenty l)]-L-prol inamid, 58) 3(RS)-E-[3-[4-[(chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyi]phenyl]-1 -oxoprop-2-enyl]-L-valyl-N-[3-( 1,1,1 -trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 10 59) 3(SR)-[l-[4-[[(4-bromphenyl)sulfonyl][phenyImethyl]aminocarbonyl]phe- ny I]-1 -oxomethyl)-L-valyl-N-[3-(l, 1,1 -trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 60) 3R (eller S)-(tricyklo[3.3.l.l3-7]dec-l-yl)sulfonyl-L-valyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-me-thyl-2-oxopentyl)]-L-prol inamid, 61) 3S(eIler R)-[4-(phenylsulfonylamincx:arbonyl)phenyIaminocarbonyl]-L-valyl-N-[3-(l,- 15 1, l-lrifluor-4-mechyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 62) 3S(eller R)-phenylmethoxycarbonyI-L-phenylglycyl-N-[3-(l, 1,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 63) 3S(eller R)-[4-[(4-bromphenyl)sulfonyIaminocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1, l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 20 64) 3S(eller R)-([4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-va-lyl-N- [3-( 1,1,1 -trifluor*4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, DK 172736 B1 65) 3S(elIer R)-phenylmethoxycarbonyl-L-valyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopen-tyI)]-L-prolinamid, 66) 3S(eller R)-[(4-carboxyphenyI)aminocarbonyl]-L-valyl-N-[3(l, 1, l-trifluor-4-mechyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 5 67) 3(RS)-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-valyl-N-[3- (1,1, l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-proIinamid, 68) 3(RS)-NJ,N6-di(phenylmethoxycarbonyl)-L-lysyl-L-valyl-N-[3-(l, 1, l-trifluor-4-me-thyl-2-oxopentyl)]-L-proIinamid, 69) 3(RS)-[ l ,4-dioxo-4-(phenylsuIfonylamino)bmyl]-L-leucyl-L-valyl-N-[3-(l, 1,1-tri-10 fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 70) 3(RS)-[4-(methylsulfonylamino)-l,4-dioxobutyl]-L-leucyl-L-valyl-N-[3-(l , 1,1-tri-fluor-4-methyl-2-oxopentyl)l-L-prolinamid, 71) 3(RS)-N2-[1,4-dioxo-4-(phenylsulfonylamino)butyl]-N*-phenyImethoxycarbo-nyl-L-lysyl-L-valyl-N-[3-(l ,1, l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid og 15 72) 3(RS)-[1,4-dioxo-4-[(tricyklo[3.3.1. l37]dec-l-yl)sulfonylamino]butyl]-L-leucyl-L-va- lyl-N-[3-( 1,1,1 -trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
3. Forbindelse ifølge krav 2, kendetegnet ved, at den er valgt blandt 1) 3(RS)-[(4-carboxyphenyl)aminocarbonyl]-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l, 1, l-trifluor-2-oxo-pentyl)]-L-prolinamid, 20 2) 3(RS)-[(2-carboxyethyl)carbonyl]-L-norleucyl-L-valyl-N-[3-(4-methyl-l,l,l-trifluor-2- oxopentyl)]-L-prolinamid, DK 172736 B1 3) 3(RS)-NJ-[(2-carboxyethyl)carbonyl]-N6-[(phenyl-methoxy)carbonyl]-L-lysyl-L-valyl-N-[3-(4-methyI-l, 1, l-trifluor-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 4) 3(RS)-[4-(methylsulfonylaminocarbonyl)phenylaminocarbonyl]-L-va!yl-N-[3-( 1,1,1 -tri-fluor-4-methyI-2-oxopentyI)]-L-proIinamid, 5 5) 3(RS)-[4-(phenylsulfonylammocarbonyl)phenylaminocarbonyl]-L-valyl-N-[3-(l, 1, l-tri- fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 6) 3(RS)-(4-hydroxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-L-c£-aminobutyryl-N-[3-( 1,1,1-tri-fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 7) 3(RS)-[Z-(4-aminocarbonylamino-l,4-dioxo-2-butenyl)]-L-valyl-N-[3-(l ,1,1-tri-10 fluor-4-methy I -2-oxopenty l)]-L-prol inamid, 8) 3(RS)-[[4-[(l-naphthylsulfonyl)aminocarbonyllphenyllaminocarbonyl]-L-va- Iy]-N-[3-(l, 1, l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 9) 3(RS)-N:-(4-hydroxycarbonylphenyl)aminocarbonyl-N6-phenylmethoxycarbonyl-L-ly-syl-N-[3-(l, 1, l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 15 10) 3(RS)-(4-hydroxycarbonyIphenyl)carbonyl-L-valyl-N-[3-( 1,1,1 -trifluor-4-πleώyl-2-oxo- pentyl)]-L-proI inamid, 11) 3(RS)-(4-hydroxycarbonylphenyl)aminocarbonyI-L-phenylalanyl-N-[3-(l, 1,1-tri-fluor-4-methyI-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 12) 3(RS)-4-[(4-nitrophenyI)sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyl-L-valyl-N-[3-(l, l, 1-tri-20 fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 13) 3(RS)-phenylmethoxycarbonyI*L-[5-(phenylsuIfonylamino)glutamyl]-N-[3-(l,l,l-tri- DK 172736 B1 fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 14) 3(RS)-[4-(phenylsulfonylaminocarbonyl)phenylcarbonyl]-L-valyI-N-[3(l, 1,1-tri-fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prormamid, 15) 3(RS)-[4-[(4-bromphenyl)sulfonylaniinocarbonyl]phenylcarbonyl)-L-valyl-N-[3- 5 (1,1, l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 16) 3(RS)-4-(l-naphthyIsuIfonylamino)-l,4-dioxobutyl-L-valyI-N-[3-(l, 1,1-trifluor- 4-methyI-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 17) 3(RS)-(4-hydroxycarbonylpheny!)methoxycarbonyl-L-vaIyl-N-(3-(l, 1, l-trifluor-4-me-thyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 10 18) 3(RS)-E-[3-(4-hydroxycarbonylphenyl)- l-oxoprop-2-enyl]-L-va!yI-N-[3-(l ,1,1 -tri- fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 19) 3(RS)-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarboayl]-phenylcarbonyl]-L-valyl-N-[3-(1,1, l-trifluor-4-rnechyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 20) 3(RS)-[3-(4-hydroxycarbonylphenyl)- l-oxopropyI]-L-valyl-N-[3-(l,l ,l-trifluor-4-me-15 thyl-2-oxoperuyl)]-L-prolinamid, 21) 3(RS)-[3-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenyl]-l-oxopropyl]-L-valyl-N-[3-(1,1 ,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 22) 3(RS)-E-[3-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenyl]-l-oxoprop-2-enyl]-L-va-lyl-N-[3-(l, 1,1 -trifluor-4-meihyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 20 23) 3(S eller R)-[4-(phenylsulfonylaminocarbonyl)phenylaminocarbonyl]-L-valyl-N-[3- (1,1,1 -trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, DK 172736 B1 24) 3S(eller R)-[4-[(4-bromphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-vaIyl-N-(3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 25) 3S(eller R)-[4-[(4-chlorphenyI)sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-valyI-N-[3-(1,1,1-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 5 26) 3S(eller R)-[(4-carboxyphenyl)aminocarbonyl]-L-valyl-N-[3-(l, 1, l-trifluor-4-methyl- 2-oxopenty l)]-L-prol inamid, 27) 3(RS)-[1,4-dioxo-4-(phenylsulfonyIamino)butyl]-L-leucyl-L-va!yl-N-[3-(l, 1,1-tri-fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-pro] inamid, 28) 3(RS)-[4-(methylsulfonylamino)-l,4-dioxobutyn-L-leucyl-L-valyl-N-[3-(l,l,l-tri-10 fluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, og 29) 3(RS)-N3-[l,4-dioxo-4-(phenylsulfonylamino)butyn-N5-phenylmethoxycarbonyl-L-ly-syl-L-valyl-N-[3-(l,l,l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)l-L-prolinamid.
4. Forbindelse ifølge krav 3, kendetegnet ved, at den er valgt blandt 15 1) 3(RS)-[[4-[(l-naphthylsulfonyl)aminocarbonyl]phenyI]aminocarbonyl]-L-valyl-N-[3- (1,1,1 -trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 2) 3(RS)-(4-[(4-bromphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyI]-L-vaJyl-N-[3-(l ,1,1-trinuor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid, 3) 3(RS)-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-valyl-N-[3-(l, 1,1-tri-20 fluor-4-methyI-2-oxopentyl)]-L- prolinamid, 4) 3(S eller R)-[4-[(4-bromphenyl)sulfonylaminocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-valyl-N-[3- DK 172736 B1 (1,1, l'trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)l-L-prolinamid og 5) 3S(eller R)-[4-[(4-chlorphenyl)sulfonyIaminocarbonyl]phenylcarbonyl]-L-valyl-N-[3-(l ,-l, l-trifluor-4-methyl-2-oxopentyl)]-L-prolinamid.
5. Forbindelse ifølge krav l.kendetegnet ved, at syreadditionssaltet er et salt dan-5 net med saltsyre, brombrintesyre, svovlsyre, salpetersyre, citronsyre, maleinsyre, fumarsyre eller eddikesyre.
6. Forbindelse ifølge krav l.kendetegnet ved, at baseadditionssaltet er et salt dannet med et alkalimetalhydroxid, alkalimetalcarbonat, alkalimetalbicarbonat, jordalkalimetal-hydroxid eller et organisk aminsalt.
7. Fremgangsmåde til fremstilling af et prolinamidderivat ifølge krav 1-6, kende tegnet ved, at man oxiderer en forbindelse med formlen Vila, Vllb eller VIIc R, f ?H R an co.nh.ch.ch.cf, N-( 3 / \ Vila Rt o f ?" „3 / \ CO.NH.CH.CH.CF, RA^~N N-/ 3 H ) Λ vnb DK 172736 B1 , H j? »W f?H R Λ-N^l /—\ CO.NH.CH.CH.QFj hvor A, R‘, R2, R3 og R5 har de i krav 1 angivne betydninger, fortrinsvis under anvendelse af enten (a) oxalylchlorid, dimethylsulfoxid og en tertiær amin i methylenchlorid, eller (b) eddikesyreanhydrid og dimethylsulfoxid, eller 5 (c) chromtrioxid-pyridin-kompleks i methylenchlorid eller (d) Dess-Martin perjodinan i methylenchlorid, især under anvendelse af Dess-Mar-tin-perjodinan i. methylenchlorid, hvorpå man om ønsket omdanner en eventuel car-boxylsyreestergruppe i R3 til den tilsvarende carboxygruppe, fortrinsvis ved hydrolyse, og/eller omdanner en carboxygruppe i R3 til en sulfonylaminocarbonylgruppe ved kobling 10 af carboxygruppen med aminogruppen i et sulfonamid, fortrinsvis under anvendelse af enten (a) 1 -ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimid-hydrochlorid og 4-dimethylaminopyridin i methylenchlorid eller (b) 1,3-dicyklohexylcarbodiimid og 4-dimethylaminopyridin i methylenchlorid.
8. Farmaceutisk middel omfattende en forbindelse ifølge krav 1 sammen med et ugiftigt, 15 farmaceutisk anvendeligt fortyndingsmiddel eller bærerstof. DK 172736 B1
9. Prolinamidderivat med formlen IVa, IVb eller Wc jfra i R. CH m^co.nh.ch.ch.cf3 IVt -oZ R1 OM K O il Wc Hz\ j? ^ O CH TK* H 0 5 hvori R1, R2 og RJ har de i krav 1 angivne betydninger. i
DK198600308A 1985-01-22 1986-01-21 3,N-disubstituerede prolinamidderivater, fremgangsmåde og mellemprodukter til fremstilling heraf samt farmaceutiske midler DK172736B1 (da)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB858501523A GB8501523D0 (en) 1985-01-22 1985-01-22 Tripeptide derivatives
GB8501524 1985-01-22
GB8501522 1985-01-22
GB858501522A GB8501522D0 (en) 1985-01-22 1985-01-22 Dipeptide derivatives
GB858501524A GB8501524D0 (en) 1985-01-22 1985-01-22 Tetrapeptide derivatives
GB8501523 1985-01-22

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK30886D0 DK30886D0 (da) 1986-01-21
DK30886A DK30886A (da) 1986-07-23
DK172736B1 true DK172736B1 (da) 1999-06-21

Family

ID=27262565

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK198600308A DK172736B1 (da) 1985-01-22 1986-01-21 3,N-disubstituerede prolinamidderivater, fremgangsmåde og mellemprodukter til fremstilling heraf samt farmaceutiske midler

Country Status (25)

Country Link
US (2) US4910190A (da)
EP (1) EP0189305B1 (da)
JP (2) JPH0759591B2 (da)
KR (1) KR910002689B1 (da)
CN (1) CN1027640C (da)
AU (1) AU594658B2 (da)
CA (1) CA1341023C (da)
CZ (1) CZ278063B6 (da)
DE (1) DE3686172T2 (da)
DK (1) DK172736B1 (da)
ES (3) ES8706169A1 (da)
FI (1) FI84171C (da)
GB (1) GB8600263D0 (da)
GR (1) GR860169B (da)
HK (1) HK18097A (da)
HU (1) HU206370B (da)
IE (1) IE58957B1 (da)
IL (1) IL77680A (da)
NO (1) NO169493C (da)
PH (1) PH26575A (da)
PL (1) PL150268B1 (da)
PT (1) PT81887B (da)
SK (1) SK278095B6 (da)
UA (1) UA39093C2 (da)
ZW (1) ZW1486A1 (da)

Families Citing this family (62)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8600263D0 (en) * 1985-01-22 1986-02-12 Ici America Inc Peptide derivatives
US5055450A (en) * 1985-01-22 1991-10-08 Ici Americas Inc. Peptide derivatives
US5496927A (en) * 1985-02-04 1996-03-05 Merrell Pharmaceuticals Inc. Peptidase inhibitors
AU600226B2 (en) * 1985-02-04 1990-08-09 Merrell Pharmaceuticals Inc. Novel peptidase inhibitors
EP0204571B1 (en) * 1985-06-07 1992-01-22 Ici Americas Inc. Selected difluoro derivatives
EP0276101A3 (en) * 1987-01-19 1989-11-23 Ici Americas Inc. Substituted peptide derivatives
GB8809316D0 (en) * 1987-05-11 1988-05-25 Ici America Inc Heterocyclic ketones
US5182263A (en) * 1988-04-25 1993-01-26 Hoffmann-La Roche Inc. Analogs of tyrosine sulfate or tyrosine phosphate containing peptides
US5296608A (en) * 1988-04-25 1994-03-22 Hoffman-La Roche Inc. Intermediates for analogs of tyrosine sulfate or tyrosine phosphate containing peptides
IL90872A0 (en) * 1988-07-08 1990-02-09 Smithkline Beckman Corp Retroviral protease binding peptides
EP0369391A3 (en) * 1988-11-15 1991-09-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. N-substituted amides
GB8910547D0 (en) * 1989-05-08 1989-06-21 Ici America Inc Substituted ketones
GB8910550D0 (en) * 1989-05-08 1989-06-21 Ici America Inc Substituted amides
US5221665A (en) * 1989-10-27 1993-06-22 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. N-substituted amides
DK0458536T3 (da) * 1990-05-24 1998-10-19 Zeneca Ltd Terapeutisk middel til behandling og forebyggelse af åndedrætsbesværsyndrom hos voksne
ES2129401T3 (es) * 1990-05-24 1999-06-16 Zeneca Ltd Uso de un compuesto terapeutico para el tratamiento de bronquitis.
US5162348A (en) * 1990-05-24 1992-11-10 Imperial Chemical Industries Plc Treatment of cystic fibrosis
GB9014132D0 (en) * 1990-06-25 1990-08-15 Ici Plc Agent for therapy
US5296591A (en) * 1990-12-31 1994-03-22 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Trifluoromethylketone derivatives, processes for preparation thereof and use thereof
GB9207145D0 (en) * 1991-04-18 1992-05-13 Ici Plc Heterocyclic amides
US5521179A (en) * 1991-04-18 1996-05-28 Zeneca Limited Heterocyclic amides
US5340801A (en) * 1991-05-08 1994-08-23 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Compounds having cholecystokinin and gastrin antagonistic properties
DK0587799T3 (da) * 1991-05-23 1999-11-22 Merrell Pharma Inc Inhibitorer af cathepsin G og elastase til forebyggelse af bindevævsnedbrydning
GB9113164D0 (en) * 1991-06-18 1991-08-07 Ici Plc Pharmaceutical agent
WO1993003011A1 (en) * 1991-08-08 1993-02-18 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Urea derivative
GB9216272D0 (en) * 1991-08-15 1992-09-09 Ici Plc Substituted heterocycles
AU658426B2 (en) * 1991-08-15 1995-04-13 Zeneca Limited Substituted heterocycles
US5714470A (en) 1991-08-22 1998-02-03 Merrell Pharmaceuticals, Inc. Orally-active elastase inhibitors
US5478811A (en) * 1991-08-22 1995-12-26 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Orally-active elastase inhibitors
CA2133657A1 (en) * 1992-04-16 1993-10-28 Peter R. Bernstein Substituted derivatives
US5486529A (en) * 1992-04-16 1996-01-23 Zeneca Limited Certain pyridyl ketones for treating diseases involving leukocyte elastase
GB9211783D0 (en) * 1992-06-04 1992-07-15 Ici Plc Amide derivatives
GB9214053D0 (en) * 1992-07-02 1992-08-12 Ici Plc Heterocyclic amides
FR2694295B1 (fr) * 1992-07-28 1994-09-02 Adir Nouveaux peptides dérivés de trifluoromethylcetones, leur procéde de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
US5780590A (en) * 1993-10-15 1998-07-14 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Antithrombotic azacycloalkylalkanoyl peptides and pseudopeptides
GB9402680D0 (en) * 1994-02-11 1994-04-06 Zeneca Ltd Pyrrolidine derivatives
FR2719589B1 (fr) * 1994-05-05 1996-06-14 Adir Nouveaux peptides dérivés de trifluorométhylcétones, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
KR100347285B1 (ko) * 1994-06-02 2003-01-15 아벤티스 파마슈티칼스 인크. 신규의엘라스타제저해제
DE69513167T2 (de) * 1994-06-02 2000-06-15 Merrell Pharmaceuticals Inc., Cincinnati Perfluoroalkyll ketone, inhibitoren von elastase und prozess zur deren herstellung
US6693072B2 (en) * 1994-06-02 2004-02-17 Aventis Pharmaceuticals Inc. Elastase inhibitors
ATE206055T1 (de) * 1994-06-02 2001-10-15 Merrell Pharma Inc Acylierte enolderivate als vorläufdrogen von elastaseinhibitoren
GB9502152D0 (en) * 1995-02-03 1995-03-29 Zeneca Ltd Proline derivatives
US6172044B1 (en) 1995-12-01 2001-01-09 Aventis Pharmaceuticals Inc. Acylated enol derivative of α-ketoesters and α-ketoamides
US5948886A (en) * 1996-11-20 1999-09-07 Hoechst Marion Roussel, Inc. Acylated enol derivatives of α-ketoesters and α-ketoamides
US6559127B1 (en) 1997-07-31 2003-05-06 Athena Neurosciences, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6362341B1 (en) 1997-07-31 2002-03-26 Athena Neurosciences, Inc. Benzyl compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6583139B1 (en) * 1997-07-31 2003-06-24 Eugene D. Thorsett Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6939855B2 (en) * 1997-07-31 2005-09-06 Elan Pharmaceuticals, Inc. Anti-inflammatory compositions and method
US6492421B1 (en) 1997-07-31 2002-12-10 Athena Neurosciences, Inc. Substituted phenylalanine type compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US7030114B1 (en) 1997-07-31 2006-04-18 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6423688B1 (en) 1997-07-31 2002-07-23 Athena Neurosciences, Inc. Dipeptide and related compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6682554B2 (en) * 1998-09-05 2004-01-27 Jomed Gmbh Methods and apparatus for a stent having an expandable web structure
JP2000256396A (ja) 1999-03-03 2000-09-19 Dainippon Pharmaceut Co Ltd 複素環式化合物およびその中間体ならびにエラスターゼ阻害剤
GB9928882D0 (en) * 1999-12-08 2000-02-02 Zeneca Ltd Assay method
US6403612B2 (en) * 2000-01-31 2002-06-11 Merck & Co., Inc. Thrombin receptor antagonists
US20040006093A1 (en) * 2000-10-17 2004-01-08 Thorsett Eugene D. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
EP2290098A1 (en) 2002-01-28 2011-03-02 Ambion, Inc. Preparing crude biological extracts using protease, suitable for preparing cDNA
PL371539A1 (en) * 2002-02-05 2005-06-27 Dainippon Pharmaceutical Co, Ltd. Heterocyclic compounds having elastase-inhibiting activity and intermediates thereof
US7964350B1 (en) 2007-05-18 2011-06-21 Applied Biosystems, Llc Sample preparation for in situ nucleic acid analysis
EP2955233A1 (en) 2008-12-19 2015-12-16 Life Technologies Corporation Proteinase K inhibitors, methods and compositions therefor
US10710957B2 (en) 2017-01-09 2020-07-14 University Of Central Florida Research Foundation, Inc. Motuporamine derivatives as antimicrobial agents and antibiotic enhancers against resistant gram-negative bacteria
US11548893B2 (en) 2017-07-15 2023-01-10 Arisan Therapeutics Inc. Enantiomerically pure adamantane carboxamides for the treatment of filovirus infection

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB195212A (en) * 1922-01-30 1923-03-29 Edward Crawshaw Improvements in expansion joints between steam boilers and their settings or flue walls
US4277395A (en) * 1980-06-16 1981-07-07 Richardson-Merrell Inc. Novel enzyme inhibitors
EP0124317B1 (en) * 1983-04-27 1990-04-11 Ici Americas Inc. Proline derivatives
US4518528A (en) * 1983-05-19 1985-05-21 Rasnick David W α Amino fluoro ketones
GB8600263D0 (en) * 1985-01-22 1986-02-12 Ici America Inc Peptide derivatives
AU600226B2 (en) * 1985-02-04 1990-08-09 Merrell Pharmaceuticals Inc. Novel peptidase inhibitors
CH672792A5 (da) * 1985-02-19 1989-12-29 Sandoz Ag
EP0204571B1 (en) * 1985-06-07 1992-01-22 Ici Americas Inc. Selected difluoro derivatives
DE3782191T2 (de) * 1986-06-05 1993-02-25 Ici America Inc Difluorketoverbindungen.

Also Published As

Publication number Publication date
ES8706169A1 (es) 1987-05-16
CS39586A3 (en) 1992-01-15
CZ278063B6 (en) 1993-08-11
JPH05246984A (ja) 1993-09-24
HK18097A (en) 1997-02-13
PT81887B (pt) 1988-05-27
EP0189305A2 (en) 1986-07-30
KR860005835A (ko) 1986-08-13
DK30886A (da) 1986-07-23
GB8600263D0 (en) 1986-02-12
FI84171C (fi) 1991-10-25
FI860281A0 (fi) 1986-01-21
EP0189305A3 (en) 1988-10-05
IE860180L (en) 1986-07-22
JPS61218518A (ja) 1986-09-29
ES551113A0 (es) 1987-05-16
DE3686172T2 (de) 1993-01-14
CN86101066A (zh) 1986-11-05
PH26575A (en) 1992-08-19
SK278095B6 (en) 1995-12-06
EP0189305B1 (en) 1992-07-29
DK30886D0 (da) 1986-01-21
US4910190A (en) 1990-03-20
FI84171B (fi) 1991-07-15
ZW1486A1 (en) 1987-09-30
AU594658B2 (en) 1990-03-15
UA39093C2 (uk) 2001-06-15
PT81887A (en) 1986-02-01
ES557363A0 (es) 1988-07-01
US5726158A (en) 1998-03-10
ES8707551A1 (es) 1987-08-01
JPH0759591B2 (ja) 1995-06-28
KR910002689B1 (ko) 1991-05-03
CN1027640C (zh) 1995-02-15
NO169493B (no) 1992-03-23
ES8802526A1 (es) 1988-07-01
PL150268B1 (en) 1990-05-31
AU5262386A (en) 1986-07-31
CA1341023C (en) 2000-06-13
NO169493C (no) 1992-07-01
ES557048A0 (es) 1987-08-01
PL257573A1 (en) 1987-03-23
IE58957B1 (en) 1993-12-01
GR860169B (en) 1986-05-15
HUT39464A (en) 1986-09-29
NO860190L (no) 1986-07-23
HU206370B (en) 1992-10-28
FI860281A (fi) 1986-07-23
DE3686172D1 (de) 1992-09-03
IL77680A (en) 1990-12-23
JPH0680039B2 (ja) 1994-10-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK172736B1 (da) 3,N-disubstituerede prolinamidderivater, fremgangsmåde og mellemprodukter til fremstilling heraf samt farmaceutiske midler
US5055450A (en) Peptide derivatives
AU765417B2 (en) Thrombin inhibitors
EP0204571A2 (en) Selected difluoro derivatives
CA2024661A1 (en) Peptidase and isomerase inhibitors
JPH05230095A (ja) 治療薬としての新規５−アミノ−４−ヒドロキシヘキサン酸誘導体
US5414132A (en) 1-alkyl-2-hydroxy-2-trifluoromethyl ethylamines
AU689589B2 (en) Novel elastase inhibitors
EP0276101A2 (en) Substituted peptide derivatives
US5714470A (en) Orally-active elastase inhibitors
EP0762887B1 (en) Acylated enol derivatives as prodrugs of elastase inhibitors
DD247683A5 (de) Verfahren zur herstellung von peptidderivaten
EP0248562A2 (en) Difluoro peptide compounds
MXPA96006031A (en) Inhibitors of elastase perfluoroalquilic cetone and processes to manufacture
MXPA96006030A (en) Novedous elast inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
B1 Patent granted (law 1993)
PBP Patent lapsed

Country of ref document: DK