NO326377B1 - Fremgangsmate for fremstilling av forbindelser - Google Patents
Fremgangsmate for fremstilling av forbindelser Download PDFInfo
- Publication number
- NO326377B1 NO326377B1 NO20023445A NO20023445A NO326377B1 NO 326377 B1 NO326377 B1 NO 326377B1 NO 20023445 A NO20023445 A NO 20023445A NO 20023445 A NO20023445 A NO 20023445A NO 326377 B1 NO326377 B1 NO 326377B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- amine
- anion
- protecting group
- groups
- cleaning agent
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 40
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 31
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 24
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 22
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 20
- 239000012459 cleaning agent Substances 0.000 claims description 16
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims description 14
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 14
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 13
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 claims description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N (n-propan-2-yloxycarbonylanilino) acetate Chemical compound CC(C)OC(=O)N(OC(C)=O)C1=CC=CC=C1 ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000010933 acylation Effects 0.000 claims description 3
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 claims description 3
- 150000003141 primary amines Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 claims description 3
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 claims description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 40
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 20
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 13
- -1 (substituted) benzyl Chemical group 0.000 description 12
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 12
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 11
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 11
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 11
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 5
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 5
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 4
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 4
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 4
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- XYXYXSKSTZAEJW-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)butanedioic acid Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 XYXYXSKSTZAEJW-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxy-7-azabenzotriazole Chemical compound C1=CN=C2N(O)N=NC2=C1 FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HJBLUNHMOKFZQX-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxy-1,2,3-benzotriazin-4-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)N(O)N=NC2=C1 HJBLUNHMOKFZQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical group NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L sodium carbonate Substances [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RRONHWAVOYADJL-HNNXBMFYSA-N (2s)-3-phenyl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RRONHWAVOYADJL-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- TZCYLJGNWDVJRA-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-1-hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=C(Cl)C=C2N(O)N=NC2=C1 TZCYLJGNWDVJRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USPFMEKVPDBMCG-LBPRGKRZSA-N N-benzyloxycarbonyl-L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 USPFMEKVPDBMCG-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 125000000266 alpha-aminoacyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000004391 aryl sulfonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 description 1
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 description 1
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 1
- 125000006267 biphenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000852 hydrogen donor Substances 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- IOQPZZOEVPZRBK-UHFFFAOYSA-N octan-1-amine Chemical compound CCCCCCCCN IOQPZZOEVPZRBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000538 pentafluorophenyl group Chemical group FC1=C(F)C(F)=C(*)C(F)=C1F 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-M phenolate Chemical compound [O-]C1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940031826 phenolate Drugs 0.000 description 1
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N phenylbenzene Natural products C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M phosphonate Chemical compound [O-]P(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000004714 phosphonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000013014 purified material Substances 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000005500 uronium group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/04—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length on carriers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
- C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/06—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents
- C07K1/08—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using activating agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
- C07K5/06043—Leu-amino acid
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
Description
Oppfinnelsen angår en ny og allsidig fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser inneholdende én eller flere amidbindinger, spesielt peptider, spesielt prosesser utført i løsning.
Peptider blir syntetisert enten i løsning eller på en fast bærer. Ved begge metoder alternerer koblings- og avbeskyttelses-trinn repeterende og kan separeres ved periodiske rensninger. Et overskudd av en aktivert karboksylkomponent blir fortrinnsvis anvendt i hvert koblingstrinn for å sikre kvantitativ kobling til en amino-komponent; slik at forekomst av delesjonssekvenser i sluttproduktet kan unngås. Ved fastfase-peptidsyntese blir gjenværende aktivert karboksylkomponent vanligvis fjernet ved filtrering ved slutten av hvert koblingstrinn. Ved løsningsfase-syntese er det vanligvis antatt at den gjenværende aktiverte karboksylkomponent blir ødelagt og fjernet under den periodiske vandige opparbeidelsen. Insersjons-peptidsekvenser blir imidlertid ofte funnet ved løsningsfase-syntese som urenheter i det endelige peptid på grunn av ufullstendig fjerning av gjenværende (aktivert) karboksylkomponent etter et koblingstrinn, som har tilkoblet etter avbeskyttelse. For å unngå forekomst av nevnte bireaksjoner kan et rensetrinn innføres direkte etter koblingstrinnet for å rense (inaktivere) de gjenværende aktiverte karboksylfunksjoner. Aminer blir vanligvis anvendt som rensemidler. Anvendelse av polyaminer som rensemidler fører til rensede forbindelser som aktivt kan ekstraheres inn i en - fortrinnsvis sur - vandig fase, avhengig av deres polaritet [ f. eks. Kisfaludy, L. et al. (1974) Tetrahedron Lett. 19, 1785-1786]. Denne ekstraksjon blir vanligvis utført før avbeskyttelsestrinnet for å unngå tap av det voksende peptid i den vandige fasen. Imidlertid har denne prosedyren i en rekke tilfeller vært funnet å resultere i ufullstendig periodisk rensning på grunn av hydrofobisiteten til den rensede forbindelse; den naturlige hydrofobisitet av aminoacyl-delen av karboksylkomponenten blir forsterket av fortsatt tilstedeværelse av amino-beskyttelsesgruppen. Vandig ekstraksjon er således ikke fullstendig effektiv.
Nylig rapporterte Carpino, L.A. et al. [(1999) J. Org. Chem. 64, 4324-4338] en forbedring av rensemetoden. I tillegg til anvendelse av et polyamin som rensemiddel ble amino-beskyttelsesgruppen 1,1-dioksobenzo[d]tiofen-2-ylmetoksykarbonyl (Bsmoc) anvendt ved fremgangsmåten. Bsmoc-funksjonen har meget høy labilitet mot base. Som et resultat derav blir gjenværende aktiverte karboksylfunksjoner oppfanget og Bsmoc-funksjoner fjernet i ett og samme trinn ved anvendelse av et polyamin.
Foreliggende oppfinnelse vedrører fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser inneholdende én eller flere amidbindinger, kjennetegnet ved at det anvendes et overskudd av en aktivert karboksyl-komponent for å acylere en aminokomponent, hvor etter acyleringen et amin omfattende et latent anion, det vil si aniondannelse ved avbeskyttelse, blir anvendt som et rensemiddel for gjenværende aktiverte karboksyl-funksjoner idet det latente anionet bærer en temporær beskyttelsesgruppe som kan bli selektivt fjernet, etterfulgt av et avbeskyttelsestrinn som resulterer i hydrofilt rensede forbindelser som kan aktivt ekstraheres inn i en basisk vandig fase.
En ny fremgangsmåte er nå følgelig funnet for fremstilling av forbindelser, hvor et overskudd av en aktivert karboksylkomponent blir anvendt for å acylere en aminokomponent og hvor acyleringen av et amin omfattende et latent anion ( dvs. aniondannelse etter avbeskyttelse) blir anvendt som et rensemiddel for gjenværende aktiverte karboksylfunksjoner. Denne nye prosess tillater et i det vesentlige vilkårlig valg av beskyttelsesgruppe ved N-terminus av den aktiverte karboksylkomponent, siden - i motsetning til Carpino-prosessen - avbeskyttelse derav ikke nødvendigvis finner sted under samme reaksjonsbetingelser som rensingen av overskudd av aktiverte karboksylfunksjoner. Videre tillater fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse meget effektiv fjerning av gjenværende aktiverte karboksylkomponent uten å møte hydrofobisitetsproblemene ved andre tidligere kjente prosesser hvor polyaminer blir anvendt som rensemidler. Fortrinnsvis utføres fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse i løsning. Imidlertid kan fremgangsmåten også anvendes ved fastfase peptidsyntese. Fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse er også egnet for fremstilling av andre forbindelser inneholdende én eller flere amidbindinger.
I en foretrukket utførelsesform blir et amin omfattende et latent anion anvendt som rensemiddel. Fortrinnsvis bærer det latente anion i det oppfangende amin en temporær beskyttelsesgruppe som selektivt kan fjernes i nærvær av hvilken som helst permanent beskyttelsesgruppe bundet til det voksende peptid. I en spesielt foretrukket utførelsesform har beskyttelsesgruppen av det latente anion i det oppfangende amin en labilitet lignende den til den temporære beskyttelsesgruppen til stede ved N-terminus av det voksende peptid. Dette tillater at avbeskyttelse av rensemidlet som gir anionet og den N-terminale avbeskyttelse av det voksende peptid finner sted i et enkelt prosesstrinn. Spesielt foretrukket er fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse hvor de temporære beskyttelsesgrupper, til stede ved N-terminus i det voksende peptid og eventuelt til stede i rensemidlet, er hydrogenolytisk fjernbare grupper mens de permanente beskyttelsesgrupper er acidolytisk fjernbare beskyttelsesgrupper. Fortrinnsvis er nevnte temporære beskyttelsesgrupper av benzyl-type, teks. (substituert) benzyl og benzyloksykarbonylgrupper. Et foretrukket rensemiddel er et primært amin omfattende et fritt anion eller et latent anion og spesielt et C-terminalt beskyttet aminosyrederivat. I tillegg til karboksylat, kan det rensende amin omfatte andre anioniske funksjoner så som - men ikke begrenset til - sulfonat, sulfat, fosfonat, fosfat eller fenolat. En meget foretrukket aminosyre for anvendelse som et rensemiddel er p-alanin eller et derivat derav [ f. eks. et ester- eller silylester-derivat). Det mest foretrukne rensemiddel er benzyl-B-alaninat eller et salt derav.
En tiol omfattende et latent anion kan også anvendes som et rensemiddel istedenfor et amin omfattende et fritt eller et latent anion i henhold til fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse.
Rensemidlet blir fortrinnsvis anvendt i et to til seks ganger molart overskudd med hensyn til den gjenværende aktive komponent som trenger å rensés.
Anvendelse av rensemidlet fører til hydrofile rensede forbindelser som aktivt kan ekstraheres inn i en basisk vandig fase etter avbeskyttelsestrinnet; etter
avbeskyttelse (hvis aktuelt), blir hydrofilitet forsterket ved tilstedeværelse av både en fri aminofunksjon og en fri karboksylfunksjon i de rensede materialer. Således resulterer fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse i en meget effektiv periodisk rensning på grunn av muligheten for aktiv ekstraksjon av en hydrofil renset forbindelse. I tillegg blir et eventuelt tilstedeværende overskudd av karboksylkomponent som ikke var aktivert og hvis temporære beskyttelsesgruppe også ble fjernet under avbes kytte Isen, ekstrahert fra reaksjonsblandingen samtidig.
Den nye prosess ifølge foreliggende oppfinnelse kan hensiktsmessig anvendes for fremstilling av oligo- og polypeptider og, mer generelt, for fremstilling av forbindelser inneholdende én eller flere amidbindinger.
En egnet prosess ifølge foreliggende oppfinnelse er kobling av et overskudd av en karboksylkomponent til en amino-komponent, hvor karboksylfunksjonen er preaktivert eller blir aktivert in situ ved anvendelse av et koblingsreagens og, om ønsket, et additiv. Etter koblingstrinnet blir gjenværende aktiverte karboksylfunksjoner renset ved tilsetning av rensemidlet til reaksjonsblandingen. Deretter fjernes temporære beskyttelsesgrupper ved anvendelse av egnede metoder kjent på området, fulgt av fjerning av den oppfangede forbindelse ved basisk vandig ekstraksjon. Samtidig blir et eventuelt tilstedeværende overskudd av karboksylkomponent som ikke var aktivert og hvis temporære beskyttelsesgruppe også ble fjernet under avbeskyttelse, ekstrahert fra reaksjonsblandingen.
Betegnelsen aminokomponent angir et molekyl omfattende en fri aminofunksjon. Spesielt kan amino-komponenten være hvilket som helst amin, aminosyre eller oligopeptid som bærer en fri aminofunksjon og hvis andre funksjonelle grupper er beskyttet på en slik måte at de ikke griper inn i de ønskede koblingsreaksjon. Den C-terminale funksjon av den anvendte aminosyre eller oligopeptid kan beskyttes som et substituert eller usubstituert amid eller som en ester; idet eksempler på sistnevnte omfatter - men er ikke begrenset til - metyl-, etyl-, f-butyl-, benzyl-, fenacyl-, 3-(3-metyl)pentyl- (Mpe), 2-(2-fenyl)propyl- (Pp), 2-klortrityl- (Clt), difenyl(4-pyridyl)metyl-(PyBzh), dicyklopropylmetyl- (Dcpm), 9-fluorenylmetyl- (Fm), allyl- (All), 2-(trimetylsilyl)etyl- (Tmse), 4-{N-[1 -(4,4-dimetyl-2,6-dioksocykloheksyliden)-3-metylbutyl]-amino}benzyl- (Dmab) estere og enzymatisk spaltbare estere [Roeske, R.W. (1981) i: ' The Peptides', vol. 3 (Gross, E. og Meienhofer, J., ed.) Academic Press, New York, s. 101-136; for Mpe: Karlstråm, A. og Undén, A. (1996) Tetrahedron Lett. 37, 4343-4246; for Pp: Yue, C. et ai. (1993) Tetrahedron Lett. 34, 323-326; for Clt: Athanassopoulos, P. et al. (1995) Tetrahedron Lett. 36, 5645-5648; for PyBzh: Mergler, M. et al. (2001) P154, 2n<d> International Peptide Symposium & 17th American Peptide Symposium; for Dcpm: Carpino, LA. et al. (1995) J. Org. Chem. 60, 7718-7719; for Fm: Al-Obeidi, F. et al. (1990) Int. J. Peptide Protein Res. 35, 215-218; for All: Kunz, H. et al. (1985) Int. J. Peptide Protein Res. 26, 493-497; for Tmse: Sieber, P. (1977) Heiv. Chim. Acta 60, 2711-2716; for Dmab: Chan, W.C. et al. (1995) J. Chem. Soc, Chem. Commun., 2209-2210]. Funksjoner av f-butyl-type eller funksjoner med lignende labilitet er foretrukket for permanent beskyttelse av andre funksjonelle grupper i aminokomponenten; disse omfatter - men er ikke begrenset til - f-butyl ('Bu) for beskyttelse av Asp-, Glu-, Ser-, Thr- og Tyr-sidekjedene, f-butoksykarbonyl (Boe) for beskyttelse av Lys- og Trp-sidekjedene, trityl- (Trt) for beskyttelse av Asn-, Gin- og His-sidekjeder og 2,2,5,7,8-pentametylkroman-6-sulfonyl (Pmc) eller 2,2,4,6,7-pentametyldihydrobenzofuran-5-sulfonyl (Pbf) for beskyttelse av Arg-sidekjeden [Barany, G. og Merrifield, R.B. (1980) i: ' The Peptides', vol. 2 (Gross, E. og Meienhofer, J., ed.) Academic Press, New York, s. 1-284; forTrp(Boc): Franzén, H. er al. (1984) J. Chem. Soc, Chem. Commun., 1699-1700; for Asn(Trt) og Gln(Trt): Sieber, P. og Riniker, B. (1991) Tetrahedron Lett. 32, 739-742; for His(Trt): Sieber, P. og Riniker, B. (1987) Tetrahedron Lett. 28, 6031-6034; for Pmc: Ramage, R. og Green, J. (1987) Tetrahedron Lett. 28, 2287-2290; for Pbf: Carpino, L.A. et al. (1993) Tetrahedron Lett. 34, 7829-7832].
Betegnelsen karboksylkomponent angir et molekyl omfattende en fri karboksylfunksjon. Spesielt kan karboksylkomponenten være hvilken som helst karboksylsyre, aminosyre eller oligopeptid som bærer en fri karboksyl-funksjon og hvis andre funksjonelle grupper er beskyttet på en slik måte at de ikke griper inn i den ønskede koblingsreaksjon. I en foretrukket utførelsesform blir aminogruppen i den anvendte aminosyre eller oligopeptid midlertidig beskyttet med en benzyloksykarbonyl-(Z) funksjon; andre eksempler omfatter - men er ikke begrenset til - Boe-, Trt-, fluoren-9-ylmetoksykarbonyl- (Fmoc), 2-(metylsulfonyl)etoksykarbonyl- (Msc), allyloksykarbonyl- (Alloc) funksjoner, funksjoner av arylsulfonyl-type, så som orto-nitrobenzensulfonyl (o-NBS) og enzymatisk spaltbare funksjoner [Geiger, R. og Konig, W. (1981) i: ' The Peptides', vol. 3 (Gross, E. og Meienhofer, J., ed.) Academic Press, New York, s. 1-99; for Alloc: Kunz, H. og Unverzagt, C. (1984) Angew. Chem. 96, 426-427; for arylsulfonyl: Fukuyama, T. et al. (1997) Tetrahedron Lett. 38, 5831-5834]. Funksjoner av f-butyl-typen eller funksjoner med lignende labilitet er foretrukket for permanent beskyttelse av andre funksjonelle grupper i karboksylkomponenten som beskrevet ovenfor for aminokomponenten. Karboksylkomponenten kan være preaktivert som en aktiv ester, fortrinnsvis en AV-hydroksysuccinimid-, benzotriazol-1-yl-, pentafluorfenyl- eller 4-nitrofenyl-ester, et halogenid, et A/-karboksyanhydrid eller som et symmetrisk anhydrid. Alternativt kan karboksylkomponenten aktiveres in situ som et blandet anhydrid eller ved anvendelse av et koblingsreagens, så som et karbodiimid, fortrinnsvis A/,/V'-dicykloheksylkarbodiimid (DCC) eller 1-(3'-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid-hydroklorid (EDC), et uronium- eller et fosfoniumsalt eventuelt i nærvær av et koblingsadditiv, fortrinnsvis N-hydroksysuccinimid (HONSu), 1-hydroksybenzotriazol (HOBt), 3-hydroksy-4-okso-3,4-dihydro-1,2,3-benzotriazin (HOOBt), 1-hydroksy-7-azabenzotriazol (HOAt) eller 6-klor-1-hydroksybenzotriazol (CI-HOBt) og hvis nødvendig i nærvær av et tertiært amin [ The Peptides', vol. 1 (1979) (Gross, E. og Meienhofer, J., ed.) Academic Press, New York; Li, P. og Xu, J.-C. (2000) Chin. J. Chem. 18, 456-466].
Den temporære beskyttelsesgruppen kan fjernes i henhold til metoder kjent på området (se ovenfor). Z-funksjonen kan fjernes ved hydrogenolyse ved anvendelse av (standard) prosedyrer som gjelder, f. eks. hydrogengass eller formiat som hydrogen-donor. Under denne prosessen fjernes alle benzyl-type beskyttelsesgrupper bg beskyttelsesgrupper av f-butyl-type eller funksjoner med lignende labilitet blir beholdt. De sistnevnte kan fjernes ved acidolyse i henhold til metodene kjent på området.
Fagfolk på området vil forstå hva som menes med betegnelsen basisk vandig ekstraksjon. Imidlertid blir basiske vandige ekstraksjoner fortrinnsvis utført ved anvendelse av vandige løsninger av natriumhydrogenkarbonat eller natrium karbonat, om ønsket i nærvær av natriumklorid eller kaliumnitrat. Betegnelsen aktiv vandig ekstraksjon angir en ekstraksjon hvor enten en aminokomponent blir ekstrahert under sure betingelser i protonen form (ammonium) eller en karboksylkomponent blir ekstrahert under basiske betingelser i deprotonert form (karboksylat).
Oppfinnelsen blir videre illustrert ved de følgende eksempler.
EKSEMPEL 1
H-Asp^BuJ-Phe-O^u
Til en omrørt suspensjon av 5,52 g H-Phe-0'Bu.HCI i en blanding av etylacetat og diklormetan ved 20°C, ble satt 7,76 g Z-Asp(O<l>Bu)-OH, 3,24 g 1-hydroksybenzotriazol, 4,20 g 1-(3'-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid-hydroklorid og 4,62 ml 4-metylmorfolin. Etter omrøring av den resulterende løsning inntil fullføring av reaksjonen, ble 1,21 ml 4-metylmorfolin og 3,51 g benzyl-B-alaninat-p-toluensulfonatsalt tilsatt. Blandingen ble omrørt i ytterligere 30 minutter og ble ekstrahert med 5% Na2C03/10% NaCI, 5% KHS04/10% NaCI og 5% Na2C03/10% NaCI.
Det organiske laget inneholdende det beskyttede dipeptid Z-Asp(O<t>Bu)-Phe-O<l>Bu ble underkastet katalytisk hydrogenolyse i nærvær av palladium på trekull. Etter fullføring av reaksjonen, ble 5% Na2C03/10% NaCI tilsatt og den resulterende suspensjonen ble filtrert. Residuet ble vasket med en blanding av etylacetat og diklormetan og de samlede organiske filtrater ble ekstrahert med 5% Na2C03/10% NaCI, 30% NaCI og vann. Det organiske laget ble inndampet til tørrhet, hvilket ga det ønskede dipeptid i kvantitativt utbytte.
Renhet: 98,4% ved revers fase HPLC (24 til 68% acetonitril i 0,1% trifluoreddiksyre i 29 minutter ved 220 nm, 2,0 ml/min, 5 mikron Ci8 kolonne). Identitet: m/ z 393,4 [M+H]<+> ved elektrospray MS; <1>H NMR (CDCI3) 5 1,41 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,63 (bs, 2H), 2,39 (dd, 1H), 2,79 (dd, 1H), 3,39 (d, 2H), 3,65 (m, 1H), 4,72 (m, 1H), 7,17-7,32 (m, 5H), 7,81 (d, 1H).
EKSEMPEL 2
H-Leu-Phe-NH-(CH2)rCH3
Til en omrørt løsning av 2,12 ml n-oktylamin i etylacetat ved 20°C, ble satt 4,61 g Z-Phe-OH, 2,08 g 1-hydroksybenzotriazol, 2,71 g 1-(3'-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid-hydroklorid og 1,55 ml 4-metylmorfolin. Etter omrøring av den resulterende suspensjonen inntil fullføring av reaksjonen ble 0,78 ml 4-metylmorfolin og 2,26 g benzyl-B-alaninat-p-toluensulfonatsalt tilsatt. Blandingen ble omrørt i ytterligere 30 minutter og ble ekstrahert med 5% Na2C03/10% NaCI, 5% KHS04/ 10% NaCI og 5% Na2C03/10% NaCI.
Det organiske laget inneholdende Z-Phe-NH-(CH2)7-CH3 ble fortynnet med 1-metyl-2-pyrrolidinon og underkastet katalytisk hydrogenolyse i nærvær av palladium på trekull. Etter fullføring av reaksjonen ble 30% NaCI tilsatt og den resulterende suspensjonen ble filtrert. Residuet ble vasket med etylacetat og de samlede organiske filtrater ble ekstrahert med 5% Na2C03/10% NaCI og 30 %NaCI.
Til det organiske laget inneholdende H-Phe-NH-(CH2)7-CH3 ved 20 °C ble satt 4,09 g Z-Leu-OH, 2,08 g 1-hydroksybenzotriazol, 2,71 g 1-(3'-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid-hydroklorid, 1,55 ml 4-metylmorfolin og 1-metyl-2-pyrrolidinon. Etter omrøring av den resulterende suspensjonen inntil fullføring av reaksjonen, ble 0,78 ml 4-metylmorfolin og 2,26 g benzyl-B-alaninat-p-toluensulfonatsalt tilsatt. Blandingen ble omrørt i ytterligere 30 minutter og ble ekstrahert med 30% NaCI, 5% Na2C03/10% NaCI, 5% KHS04/10% NaCI og 5% Na2C03/10% NaCI.
Det organiske laget inneholdende Z-Leu-Phe-NH-(CH2)7-CH3 ble fortynnet med 1-metyl-2-pyrrolidinon og underkastet katalytisk hydrogenolyse i nærvær av palladium på trekull. Etter fullføring av reaksjonen ble 5% Na2C03/10% NaCI tilsatt og den resulterende suspensjonen ble filtrert ved 45°C. Residuet ble vasket med etylacetat og de samlede organiske filtrater ble ekstrahert med 5% Na2C03/ 10% NaCI, 30% NaCI og vann. Det organiske laget ble inndampet til tørrhet, hvilket ga det ønskede produkt i 85% utbytte.
Renhet: 99,3 % ved revers fase HPLC (24 til 68 % acetonitril i 0,1% trifluoreddiksyre i 29 minutter ved 220 nm, 2,0 ml/min, 5 mikron Ci8 kolonne). Identitet: m/ z 390,4 [M+H]<+>, 412,4 [M+Na]<+>, 388,2 [M-H]", 434,2 [M+HCOO]" ved elektrospray MS; <1>H NMR (CDCI3) 6 0,89 (m, 9H), 1,12-1,39 (m, 14H), 1,50-1,60 (m, 3H), 3,01-3,22 (m, 4H), 3,35 (dd, 1H), 4,53 (dd, 1H), 5,90 (t, 1H), 7,19-7,32 (m, 5H), 7,83 (d, 1H).
Konklusjon: Renhet og identifikasjon av de oppnådd produkter demonstrerer at overskudd av (aktivert) karboksylkomponent var fjernet fullstendig og ingen insersjons-peptidsekvenser var dannet ved anvendelse av fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse.
Claims (12)
1. Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser inneholdende én eller flere amidbindinger, karakterisert ved at det anvendes et overskudd av en aktivert karboksyl-komponent for å acylere en aminokomponent, hvor etter acyleringen et amin omfattende et latent anion, det vil si aniondannelse ved avbeskyttelse, blir anvendt som et rensemiddel for gjenværende aktiverte karboksyl-funksjoner idet det latente anionet bærer en temporær beskyttelsesgruppe som kan bli selektivt fjernet, etterfulgt av et avbeskyttelsestrinn som resulterer i hydrofilt rensede forbindelser som kan aktivt ekstraheres inn i en basisk vandig fase.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1,karakterisert ved at det latente anion i det rensende amin bærer en temporær beskyttelsesgruppe som selektivt kan fjernes i nærvær av hvilke som helst permanente beskyttelsesgrupper bundet til det voksende peptid.
3. Fremgangsmåte ifølge kravene 1 eller 2, karakterisert ved at det latente anion i det rensende amin bærer en temporær beskyttelsesgruppe som har en labilitet lignende den til den temporære beskyttelsesgruppe til stede ved N-terminus av det voksende peptid.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 2 eller 3, karakterisert ved at de temporære beskyttelsesgrupper er hydrogenolytisk fjernbare grupper mens de permanente beskyttelsesgrupper er acidolytisk fjernbare grupper.
5. Fremgangsmåte ifølge krav 4, karakterisert ved at de temporære beskyttelsesgrupper er av benzyl-type.
6. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 1-5, karakterisert ved at rensemidlet er et primært amin.
7. Fremgangsmåte ifølge krav 6, karakterisert ved at det primære aminet er et C-terminalt beskyttet aminosyrederivat.
8. Fremgangsmåte ifølge krav 7, karakterisert ved at aminosyren er B-alanin eller et derivat derav.
9. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 1-8, karakterisert ved at rensemidlet er benzyl-B-alaninat eller et salt derav.
10. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 1 -5, karakterisert
ved at en tiol omfattende et fritt eller et latent anion blir anvendt som et rensemiddel istedenfor et amin omfattende et latent anion.
11. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 1-10, karakterisert ved at fremgangsmåten blir utført i løsning.
12. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 1-11,karakterisert ved at et peptid blir fremstilt.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP01202751 | 2001-07-19 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO20023445D0 NO20023445D0 (no) | 2002-07-18 |
| NO20023445L NO20023445L (no) | 2003-01-20 |
| NO326377B1 true NO326377B1 (no) | 2008-11-17 |
Family
ID=8180655
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO20023445A NO326377B1 (no) | 2001-07-19 | 2002-07-18 | Fremgangsmate for fremstilling av forbindelser |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6864357B2 (no) |
| EP (1) | EP1277761B1 (no) |
| JP (1) | JP3579038B2 (no) |
| KR (1) | KR100869520B1 (no) |
| CN (1) | CN1254482C (no) |
| AR (1) | AR035258A1 (no) |
| AT (1) | ATE531724T1 (no) |
| AU (1) | AU2002300166C1 (no) |
| BR (1) | BRPI0202779B1 (no) |
| CA (1) | CA2394216C (no) |
| DK (1) | DK1277761T3 (no) |
| EC (1) | ECSP024292A (no) |
| ES (1) | ES2374389T3 (no) |
| HK (1) | HK1050905A1 (no) |
| HR (1) | HRP20020608A2 (no) |
| HU (1) | HUP0202370A2 (no) |
| IL (1) | IL150600A (no) |
| MX (1) | MXPA02006997A (no) |
| NO (1) | NO326377B1 (no) |
| PE (1) | PE20030215A1 (no) |
| PL (1) | PL355126A1 (no) |
| RU (1) | RU2242457C2 (no) |
| SG (1) | SG120874A1 (no) |
| TW (1) | TWI243826B (no) |
| ZA (1) | ZA200205408B (no) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TWI247012B (en) * | 2001-07-19 | 2006-01-11 | Akzo Nobel Nv | Process for rapid solution synthesis of peptides |
| US7393277B2 (en) * | 2003-08-25 | 2008-07-01 | Igt | Horseshoe payline system and games using that system |
| EP1790656A1 (en) * | 2005-11-25 | 2007-05-30 | Nanokem S.A. | Solution-phase synthesis of leuprolide |
| DE602007005349D1 (de) * | 2006-01-17 | 2010-04-29 | Organon Nv | SELEKTIVE ENZYMATISCHE HYDROLYSE VON C-TERMINALEN tert-BUTYL-PEPTIDESTERN |
| JP4684124B2 (ja) * | 2006-02-16 | 2011-05-18 | 富士通株式会社 | 移動局装置及び同装置における送信電力制御方法 |
| US8716439B2 (en) | 2006-03-01 | 2014-05-06 | Kaneka Corporation | Method of producing peptide |
| US7601062B2 (en) * | 2006-11-06 | 2009-10-13 | Igt | Gaming device and method including moving paylines |
| US8124372B2 (en) * | 2007-06-25 | 2012-02-28 | N.V. Organon | Selective enzymatic amidation of C-terminal esters or acids of peptides |
| EP2755690B1 (en) | 2011-08-04 | 2020-04-01 | Merck Sharp & Dohme B.V. | Kisspeptide-pentasaccharide conjugates |
| US9177447B2 (en) | 2012-09-25 | 2015-11-03 | Igt | Gaming system and method for providing a symbol matrix with a moveable symbol display window |
| ES2700973T3 (es) * | 2014-02-14 | 2019-02-20 | Corden Pharma Int Gmbh | Proceso sin base para la preparación de compuestos intermedios de cetona que se pueden usar para fabricar nebivolol |
| WO2021192488A1 (ja) * | 2020-03-27 | 2021-09-30 | 株式会社カネカ | アミド結合含有化合物の製造方法 |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5221754A (en) * | 1989-06-09 | 1993-06-22 | Research Corporation Technologies, Inc. | Reagents for rapid peptide synthesis |
| US5101059A (en) * | 1989-12-05 | 1992-03-31 | Research Corporation Technologies, Inc. | Amino acid protecting groups |
| US5516892A (en) * | 1992-12-28 | 1996-05-14 | Indiana University Foundation | Polymer-bound mixed carboxylic anhdrides as a stable form of activated carboxylic acids |
| US6310180B1 (en) * | 1993-06-21 | 2001-10-30 | Vanderbilt University | Method for synthesis of proteins |
| US5516639A (en) * | 1993-07-22 | 1996-05-14 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Antibodies specific for human prostate glandular kallkrein |
| US5849954A (en) * | 1996-01-18 | 1998-12-15 | Research Corporation Technologies, Inc. | Method of peptide synthesis |
| CA2251700A1 (en) * | 1996-05-03 | 1997-11-13 | Warner-Lambert Company | Rapid purification by polymer supported quench |
| US6121488A (en) * | 1997-09-24 | 2000-09-19 | Warner-Lambert Company | Quenching reagents for solution phase synthesis |
| JPH11217397A (ja) * | 1997-11-27 | 1999-08-10 | Saburo Aimoto | ペプチドチオールエステルの製造方法 |
| FR2780061B1 (fr) * | 1998-06-22 | 2001-09-07 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Nouveau procede de preparation de derives de cyclosporine |
| WO2000071567A2 (en) * | 1999-05-06 | 2000-11-30 | Human Genome Sciences, Inc. | Fibroblast growth factor 13 |
| WO2000071569A1 (en) * | 1999-05-26 | 2000-11-30 | Abbott Laboratories | Minimal isolation peptide synthesis process using ion-exchange resins as scavenging agents |
| US20020127219A1 (en) * | 1999-12-30 | 2002-09-12 | Okkels Jens Sigurd | Lysosomal enzymes and lysosomal enzyme activators |
| WO2002006306A2 (en) * | 2000-07-19 | 2002-01-24 | Pharmacia & Upjohn Company | SUBSTRATES AND ASSAYS FOR β-SECRETASE ACTIVITY |
-
2002
- 2002-07-04 IL IL15060002A patent/IL150600A/xx unknown
- 2002-07-04 TW TW091114833A patent/TWI243826B/zh active
- 2002-07-05 JP JP2002197549A patent/JP3579038B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2002-07-05 ZA ZA200205408A patent/ZA200205408B/xx unknown
- 2002-07-15 EP EP02077875A patent/EP1277761B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-07-15 SG SG200204299A patent/SG120874A1/en unknown
- 2002-07-15 AT AT02077875T patent/ATE531724T1/de active
- 2002-07-15 DK DK02077875.9T patent/DK1277761T3/da active
- 2002-07-15 ES ES02077875T patent/ES2374389T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-07-17 MX MXPA02006997A patent/MXPA02006997A/es active IP Right Grant
- 2002-07-18 HU HU0202370A patent/HUP0202370A2/hu unknown
- 2002-07-18 CN CNB021261903A patent/CN1254482C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2002-07-18 RU RU2002119631/04A patent/RU2242457C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2002-07-18 PE PE2002000640A patent/PE20030215A1/es not_active Application Discontinuation
- 2002-07-18 AR ARP020102686A patent/AR035258A1/es active IP Right Grant
- 2002-07-18 CA CA002394216A patent/CA2394216C/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-07-18 BR BRPI0202779A patent/BRPI0202779B1/pt active IP Right Grant
- 2002-07-18 NO NO20023445A patent/NO326377B1/no not_active IP Right Cessation
- 2002-07-18 KR KR1020020041897A patent/KR100869520B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2002-07-18 AU AU2002300166A patent/AU2002300166C1/en not_active Expired
- 2002-07-19 EC EC2002004292A patent/ECSP024292A/es unknown
- 2002-07-19 PL PL02355126A patent/PL355126A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2002-07-19 US US10/199,785 patent/US6864357B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-07-19 HR HR20020608A patent/HRP20020608A2/hr not_active Application Discontinuation
-
2003
- 2003-04-29 HK HK03103038.5A patent/HK1050905A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2004
- 2004-12-14 US US11/012,439 patent/US20050101764A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4142907B2 (ja) | ペプチドの高速溶液合成方法 | |
| NO326377B1 (no) | Fremgangsmate for fremstilling av forbindelser | |
| CA1188297A (en) | Methods and compositions for preparation of h-arg-x-z- y-tyr-r | |
| NZ520268A (en) | Process for the preparation of peptides | |
| AU2002300066B2 (en) | Process for Rapid Solution Synthesis of Peptides | |
| NO177100B (no) | Peptider |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM1K | Lapsed by not paying the annual fees |