NO320952B1 - Fremgangsmate for virusfiltrering av en losning inneholdende minst ett makromolekyl - Google Patents
Fremgangsmate for virusfiltrering av en losning inneholdende minst ett makromolekyl Download PDFInfo
- Publication number
- NO320952B1 NO320952B1 NO19965523A NO965523A NO320952B1 NO 320952 B1 NO320952 B1 NO 320952B1 NO 19965523 A NO19965523 A NO 19965523A NO 965523 A NO965523 A NO 965523A NO 320952 B1 NO320952 B1 NO 320952B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- virus
- solution
- macromolecule
- protein
- filtration
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 68
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 title claims abstract description 46
- 238000011100 viral filtration Methods 0.000 title claims description 31
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 17
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 claims abstract description 76
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 55
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 51
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 42
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims abstract description 10
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 10
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 6
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 5
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims abstract description 5
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims abstract description 3
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 79
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 66
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 66
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 claims description 21
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 claims description 20
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 claims description 20
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 claims description 11
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 7
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 7
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 7
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 7
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 7
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 claims description 6
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 claims description 6
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 claims description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 6
- 102000004411 Antithrombin III Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 claims description 4
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 claims description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 claims description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 claims description 2
- 235000011083 sodium citrates Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 abstract description 4
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 abstract description 4
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 abstract description 4
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 abstract description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 65
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 60
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 25
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 20
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 19
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 18
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 18
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 14
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 13
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 11
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 11
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 10
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 10
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 9
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 9
- 239000013621 viresolve pro solution Substances 0.000 description 9
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 5
- 239000004019 antithrombin Substances 0.000 description 5
- 210000004779 membrane envelope Anatomy 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 4
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 4
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 4
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 4
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 4
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 description 3
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 description 3
- 241000991587 Enterovirus C Species 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 3
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 3
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 3
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 238000011210 chromatographic step Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000011017 operating method Methods 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 108010025139 recombinant factor VIII SQ Proteins 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 108010059886 Apolipoprotein A-I Proteins 0.000 description 1
- 102000005666 Apolipoprotein A-I Human genes 0.000 description 1
- 102100029470 Apolipoprotein E Human genes 0.000 description 1
- 101710095339 Apolipoprotein E Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 229920002971 Heparan sulfate Polymers 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical class OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000709721 Hepatovirus A Species 0.000 description 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- -1 antithrombin III Proteins 0.000 description 1
- 108010073614 apolipoprotein A-IV Proteins 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- WDIHJSXYQDMJHN-UHFFFAOYSA-L barium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ba+2] WDIHJSXYQDMJHN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910001626 barium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 150000003278 haem Chemical class 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 239000002628 heparin derivative Substances 0.000 description 1
- 239000002634 heparin fragment Substances 0.000 description 1
- 229960004336 human antithrombin iii Drugs 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940127215 low-molecular weight heparin Drugs 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000309711 non-enveloped viruses Species 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 238000013386 optimize process Methods 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010048348 zinc hemoglobin Proteins 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/644—Coagulation factor IXa (3.4.21.22)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- A61K38/37—Factors VIII
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/38—Albumins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/39—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/34—Extraction; Separation; Purification by filtration, ultrafiltration or reverse osmosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4717—Plasma globulins, lactoglobulin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/76—Albumins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/81—Protease inhibitors
- C07K14/8107—Endopeptidase (E.C. 3.4.21-99) inhibitors
- C07K14/811—Serine protease (E.C. 3.4.21) inhibitors
- C07K14/8121—Serpins
- C07K14/8128—Antithrombin III
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
- C12N7/02—Recovery or purification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21022—Coagulation factor IXa (3.4.21.22)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Hematology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Virology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
- Glass Compositions (AREA)
- Devices For Conveying Motion By Means Of Endless Flexible Members (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Description
Teknisk område
Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte for virusfiltrering av en løsning som inneholder minst ett makromolekyl, i kraft av det totale saltinnhold av løsningen som ligger i området fra ca. 0,6 M og opp til metning av løsningen med det aktuelle salt. Fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse reduserer oppholdstiden og i hvilken grad løsningen behøver å fortynnes, og optimaliserer utbyttet ved virus-filtrering av primært proteiner, polysakkarider og polypeptider. Reduksjonen av virusinnhold er minst like god som med konvensjonelle teknikker hvor det totale saltinnhold er lavt. Foreliggende oppfinnelse letter virusfiltrering ved hjelp av den såkalte "dead-end"-teknikk, som gir flere prosess- og økonomiske fordeler sammenlignet med den vanlig anvendte tangential-virusfiltreringsteknikk. Ved virusfiltrering av plasmaproteinfaktor IX øker utbyttet erholdt i virusfiltreringstrinnet fra ca. 70 % til over 95 %, ved å øke saltinnholdet av løsningen i overensstemmelse med foreliggende oppfinnelse.
Oppfinnelsens bakgrunn
Problemet med viruskontaminering av forskjellige proteinpreparater ment for medisinering av mennesker er blitt gjenstand for økt oppmerksomhet i de senere år. Leilighetsvise rapporter er f.eks. fremlagt som angår f.eks. blodproteiner som er blitt kontaminert med hepatittvirus A, hepatittvirus B, hepatittvirus C og/eller human immunsviktvirus (HIV). I tråd med disse rapporter har myndighetene i flere land skjerpet kravene med hensyn til rensing av proteinpreparater for deres mulige viruskontaminanter.
Ved de foreliggende konvensjonelle teknikker blir viruser inaktivert ved hjelp av kjemiske additiver, primært løsningsmidler og detergenter, og/eller ved utsettelse av virusene for forhøyede temperaturer. Den førstnevnte metode har ulempen ved at den kun virker på virus med lipidkapper, f.eks. hepatittvirus B og HIV. Den sistnevnte teknikk har den ulempe at mange proteiner er termisk ustabile ved de temperaturer som fordres for effektivt å redusere det kontaminerende virus.
US-A-4 473 494 beskriver en metode for fremstilling av stromafritt, ikke-hemproteinfritt hemoglobin, ved anvendelse av sinkioner for å fremme utfelling av et sinkionebundet uløselig hemoglobinkompleks, etterfulgt av membranultra-filtrering av sink-hemoglobinkomplekset fra filtratfluid-mediet. I det eneste trinn hvor det anføres at viruser fjernes fra hemoglobinet, er det totale saltinnhold lavere enn 0,05 M, dvs. at det totale innhold av salt er konvensjonelt.
EP-A-0307373 angår fjerning av viruser og/eller andre kontaminanter fra biologiske materialer i flytende form ved anvendelse av ultrafiltreringsmembraner med en 100 000 Da ute-lukkelse. Et foretrukket biologisk materiale er humant vekst-hormon. I eksemplene i EP-A-0307373 ligger det totale innhold av salt i virusfiltreringstrinnet i området fra 0,01 opp til 0,10 M (NH4CO3) , dvs. at det totale innhold av salt er konvensjonelt .
Det foreligger således et behov for en effektiv virusreduserende metode som kan anvendes på forskjellige typer makromolekyler, primært proteiner, og på forskjellige typer viruser.
Beskrivelse av oppfinnelsen
Ett mål for foreliggende oppfinnelse er å markert redusere oppholdstiden ved virusfiltrering av løsninger som inneholder makromolekyler.
Et annet mål for foreliggende oppfinnelse er å markert redusere væskevolumene ved virusfiltrering av løsninger som inneholder makromolekyler.
Et ytterligere må for foreliggende oppfinnelse er å redusere det nødvendige filterareal for effektiv virus-filtrering av løsninger som inneholder makromolekyler.
Et ytterligere mål for foreliggende oppfinnelse er å redusere det nødvendige filterareal for effektiv virus-filtrering av løsningen som inneholder makromolekyler.
Et ytterligere mål for foreliggende oppfinnelse er å oppnå et makromolekylutbytte høyere enn ca. 90 % i virus-
filtreringstrinnet.
Et ytterligere mål for foreliggende oppfinnelse er å redusere polymeriseringen erholdt på virusfilteroverflaten, slik at gjennomstrømningshastigheten økes og prosesstiden reduseres.
Disse og andre mål er oppnådd ved foreliggende oppfinnelse som angår en fremgangsmåte for virusfiltrering av en løsning inneholdende minst ett makromolekyl, hvori det totale saltinnhold av løsningen er i området fra ca. 0,6 M og opp til metning av løsningen med det aktuelle salt.
Oppfinneren av foreliggende oppfinnelse har således funnet at virusfiltrering kan utføres mye mer effektivt enn tidligere kjent, ved å øke saltinnholdet i løsningen. Denne oppdagelse er overraskende fordi det hittil ved virusfiltrering av proteiner er blitt antatt at kun proteinkonsentrasjonen, gjennomstrømningshastigheten og pH har hatt noen inn-flytelse på prosessen.
Det er antatt at den økte filtreringseffekt oppnådd ved høyere saltkonsentrasjoner er på grunn av at proteinene trekker seg sammen og derved kan passere lettere gjennom filterporene. Det er også tenkelig at interaksjonen reduseres mellom selve makromolekylene og/eller mellom makromolekylene og materialet i filtermembranen. Det er også tenkelig at proteiner med et stort antall hydrofobe grupper blir påvirket i en høyere grad ved en økt saltkonsentrasjon.
Jo nærmere molekylvekten, eller den relative molekylmasse, av makromolekylet ligger i forhold til filtermembranens porestørrelse, jo mer effektiv er foreliggende oppfinnelse. Effektiviteten av foreliggende oppfinnelse forhøyes også når forskjellen mellom størrelsen og/eller molekylvekten av kontaminanten og produktet øker, dvs. med økende konsentra-sjoner av høymolekylære kontaminanter i produktet.
Foreliggende oppfinnelse gjør det også lettere å separere spesifikke fraksjoner fra et ønsket produkt, f.eks. muliggjør foreliggende oppfinnelse at uønskede proteiner kan separeres fra proteinet som utgjør produktet.
Anvendelse av et høyt saltinnhold ifølge foreliggende oppfinnelse muliggjør også anvendelse av den såkalte "dead-end"-filtreringsteknikk. Denne foretrukne utførelsesform har mange fordeler i forhold til konvensjonelle, vanlig anvendte tangentielle filtreringsprosesser, spesielt med en pore-størrelse fra ca. 5 til 30 nm. Det nødvendige utstyr og driftsprosedyrer er f.eks. mye enklere og derved mindre kostbare. Anvendelse av "dead-end"-filtrering reduserer også tapet av makromolekyl, reduserer bearbeidelsestiden, øker perme-abiliteten av makromolekylet gjennom filteret og muliggjør også oppnåelse av en generelt konstant konsentrasjon av makromolekylet gjennom filteret, så vel som et konstant membran-trykk. En annen fordel med "dead-end"-filtreringsteknikken er det faktum at utvidelse av virusfiltreringsprosesser fra laboratorieskala til industriell skala blir betydelig lettere.
Ved utøvelse av foreliggende oppfinnelse ligger det totale saltinnhold i løsningen passende innen området fra 0,3 til 3,0 M, fortrinnsvis innen området 0,4-2,5 M, og mer foretrukket innen området fra 0,6 til 2,0 M. Det er spesielt foretrukket at det totale saltinnhold i løsningen ligger innen området fra 0,8 til 1,5 M.
Når nødvendig kan det totale saltinnhold i løsningen justeres ved å tilsette et akseptabelt salt. Det er f.eks. mulig å anvende løselige uorganiske salter, løselige organiske salter eller kombinasjoner av slike salter. Det antas at det oppnås viktige prosessfordeler når det anvendes salter som oppviser en høy utsaltningseffekt i overensstemmelse med den såkalte Hofmeister-serie. Det refereres her til S. Glasstone, Textbook of Physical Chemistry, van Nostrand Co., Toronto,
2. utgave, april 1946, s. 1254-1259. De viktigste eksempler på anioner med en slik høy utsaltningseffekt er sitrat, tartrat, sulfat, acetat og fosfat. Kationer som fordelaktig kan anvendes ved utøvelse av foreliggende oppfinnelse er mono-valente kationer, slik som natrium, kalium og ammonium, så vel som divalente kationer, slik som kalsium. Natriumklorid, kaliumklorid, natriumacetat og natriumsitrat eller kombinasjoner derav, er spesielt foretrukne salter i overensstemmelse med foreliggende oppfinnelse, i betraktning av fordelene som tilveiebringes av farmasøytisk akseptable additiver. Det er også mulig å tilsette ett eller flere salter i rekkefølge, når
filtreringsprosessen utføres i to eller flere trinn.
En proteinkonsentrasjon innen området fra ca. 5 til 10 mg/ml løsning er ofte anbefalt for virusfiltrering. Ved utøvelse av foreliggende oppfinnelse ble det overraskende funnet at løsninger med en høyere proteinkonsentrasjon, fra ca. 10 til 20 mg/ml, fordelaktig kunne bearbeides gjennom virusfiltret.
Løsningen bør ha en temperatur innen området fra 0 °C og opp til temperaturen ved hvilken det aktuelle protein denatureres. Temperaturen i løsningen ligger passende i området fra 10 °C til 50 °C, fortrinnsvis fra 20 °C til 35 °C.
Ved utøvelse av foreliggende oppfinnelse bør løsningen ha en pH i området fra ca. 3 til 9, fortrinnsvis fra 4 til 8. pH i proteinløsningen bør ikke ligge nært opp til det isoelektriske punkt for det aktuelle protein. I tilfellet med f.eks. gammaglobulin, oppnås et bedre resultat med en pH på 5,5 enn med en pH på 6,8.
Ved foreliggende oppfinnelse refererer løsning til en løsning som inneholder minst 50 vekt% vann, eventuelt inkludert ett eller flere løsningsmidler, slik som metanol, etanol, aceton eller acetonitril.
Foreliggende oppfinnelse kan anvendes for å optimalisere prosessprosedyrer ved virusfiltrering av løsninger som inneholder et stort antall forskjellige typer makromolekyler. Eksempler på slike molekyler er proteiner, polysakkarider og polypeptider, eller kombinasjoner derav. Makromolekylenes opprinnelse er irrelevant for anvendelsen av foreliggende oppfinnelse. Makromolekylene kan således være avledet fra plante-riket eller dyreriket, eller kan opprinnelig være produsert ved hjelp av industrielle prosesser. Makromolekylene er imidlertid fortrinnsvis av human eller animalsk opprinnelse, eller fremstilt ved hjelp av genteknologi (rekombinanter).
Spesielt egnede proteiner ved foreliggende oppfinnelse er faktor VIII, faktor IX, antitrombin III, gammaglobulin, albumin, streptokinase, apolipoproteiner og veksthormoner.
Et spesielt foretrukket faktor IX-produkt er "Nanotiv" som leveres av Pharmacia AB, Stockholm, Sverige. Fordelen med dette produkt er at dets spesifikke aktivitet før filtrering er tilstrekkelig høy til å muliggjøre anvendelse av et filter med meget fin struktur. Dette muliggjør at viruskonsentrasjonen kan senkes til et ekstremt lavt nivå, samtidig som selve filtreringsprosessen er meget hurtig og gir et høyt utbytte.
Foretrukne typer av faktor VIII er delesjonsderivater av rekombinant produserte faktor Vlll-produkter. Et spesielt foretrukket faktor Vlll-produkt er r-VIII SQ, levert av Pharmacia AB, Stockholm, Sverige. Én fordel med dette produkt er at det rekombinant produserte produktmolekyl mangler den inaktive intermediærdel av det naturlige faktor Vlll-molekyl. Dette gir molekylet en gjennomsnittlig molekylvekt på ca.
170 000. Et molekyl av denne størrelse er spesielt egnet for filtrering med slike filtere som de som muliggjør oppnåelse av betydelig virusreduksjon.
Foretrukne apolipoproteiner inkluderer apolipoprotein AI (Apo AI), apolipoprotein All (Apo All), apolipoprotein AIV (Apo AIV), apolipoprotein E {Apo E) og varianter eller bland-inger derav. Varianter inkluderer forløperformer, fragmenter og avkuttede, utvidede eller muterte former av Apo AI, Apo II, Apo IV og Apo E. Muterte former hvori minst én arginingruppe er blitt erstattet med en cysteingruppe er spesielt foretrukne. En slik mutert form er Apo A-IMilano (Apo A-IM), som også produseres med rekombinant DNA-teknikk av Pharmacia AB, Stockholm, Sverige.
Polysakkarider som er spesielt foretrukne i overensstemmelse med foreliggende oppfinnelse er glykosaminglykaner og bakteriepolysakkarider. Eksempler på glykosaminglykaner er hepariner, heparinfragmenter, heparinderivater, heparansulfat og hyaluronsyre. En spesielt foretrukket gruppe av glykosaminglykaner består av lavmolekylære hepariner med en gjennomsnittlig molekylvekt opp til ca. 10 000, fortrinnsvis fra 2 000 til 8 000.
Ifølge foreliggende oppfinnelse er spesielt egnede polypeptider bioaktive polypeptider, slik som rekombinante humane veksthormoner produsert i pattedyrceller.
Foreliggende oppfinnelse kan således anvendes for å optimalisere prosessen med virusfiltrering av løsninger som f.eks. inneholder proteiner, polysakkarider og polypeptider. Foreliggende oppfinnelse er imidlertid beskrevet i det etter-følgende med referanse til løsninger som inneholder proteiner, nærmere bestemt proteiner som forekommer naturlig i den menneskelige organisme.
Virusene som kan være til stede i proteinløsninger vil vanligvis være mye større enn selve proteinene. Det er således trolig at virus kan fjernes fra proteiner i overensstemmelse med størrelse, f.eks. ved filtrering.
Viruser som kan fjernes effektivt ifølge foreliggende oppfinnelse kan ha en størrelse mindre enn ca. 350 nm. Størrelsen av virusene som kan fjernes er passende mindre enn 200 nm, fortrinnsvis mindre enn 150 nm. Vanligvis er virusene som kan fjernes større enn ca. 20 nm, dvs. den tilnærmede størrelse av parvoviruset.
Foreliggende oppfinnelse er primært ment for fjerning av viruser fra makromolekyler, hvor makromolekylene er produktet av interesse. Det er imidlertid innen rammen for oppfinnelsen å anvende den foreliggende fremgangsmåte for atskillelse av viruser fra makromolekyler, hvor virusene er produktet av interesse. Et eksempel er rensing av parvovirus for anvendelse som et testmiddel, og poliovirus for anvendelse som en vaksine, hvori f.eks. proteiner og polysakkarider kan fjernes ved hjelp av en foreliggende fremgangsmåte.
Virusfiltrering utføres vanligvis ved en tangentiell filtreringsprosess, eller ved en såkalt "dead-end"-filtreringsprosess. Ved tangentiell virusfiltrering pumpes protein-løsningen rundt ved en konstant strømningshastighet på retensjonssiden, mens en annen pumpe trekker proteinløsningen gjennom filteret ved suging. Når det er oppnådd et gitt volum på retensjonssiden tilsettes en buffer til retensjonssiden. Denne prosedyre gjentas et antall ganger, som nødvendig, idet hovedmengden av det resterende protein passerer gjennom filteret under bibeholdelse av viruset på retensjonssiden. En slik prosess betegnes som diafiltrering. Filteret kastes vanligvis etter hver gjennomkjøring for å unngå overføring av viruset.
I tilfellet med den såkalte "dead-end"-virusfiltrering kan det anvendes det samme virusfilter som ved den tangentielle virusfiltrering, selv om det perifere utstyr og driftsprosedyrer er mye enklere og mindre kostbare enn i tilfellet med tangentiell virusfiltrering. I prinsipp involverer således "dead-end"-filtrering at den makromolekylinneholdende løsning plasseres i en trykkbeholder før filtrering, og at løsningen presses gjennom virusfiltret med hjelp av en egnet trykkilde, f.eks. nitrogen (gass).
Finhetsgraden av filtere gis generelt som pore-størrelse eller den tilnærmede molekylvekt (relativ molekylmasse) ved hvilken molekylet stoppes av filteret, den såkalte utelukkelsesgrense. Ved foreliggende oppfinnelse kan virusfiltrene ha en utelukkelsesgrense på ca. 1 000 000, passende 500 000. For å fjerne små viruser bør virusfiltrene ha en utelukkelsesgrense på 200 000, fortrinnsvis 100 000. For å nå en maksimal virusreduksjon bør virusfiltret ha en utelukkelsesgrense som er ubetydelig høyere enn makromolekylet som virus-filtreres.
Virusfiltre er kjent i teknikken og leveres blant annet av Millipore fra Massachusetts, USA og Asahi Chemical Industry Co., Ltd. fra Japan. Millipore leverer filtere med to forskjellige membrantyper, avhengig av størrelsen av det aktuelle protein. Millipore leverer blant annet f.eks. "Viresolve"/70 for proteiner med en molekylvekt, eller en relativ molekylmasse, opp til ca. 70 000, og "Viresolve"/180 for proteiner med en molekylvekt opp til ca. 180 000. Dette sistnevnte filter kan f.eks. anvendes for monoklonale anti-stoffer. Asahi Chemical Industry leverer blant andre ting "Planova" 35- og "Planova" 15-filtere, det sistnevnte filter anvendes for å fjerne mindre viruser, slik som poliovirus.
Som nevnt ovenfor vil valget av filter blant annet avhenge av størrelsen av det aktuelle protein. Faktor IX, antitrombin III, humant serumalbumin (HSA) og Apo A-IM (dimeren) har alle en molekylvekt på grovt regnet 60 000-70 000, hvori "Viresolve"/70, f.eks. er et egnet alternativ. Gammaglobulin har en molekylvekt på ca. 180 000, hvori "Viresolve"/180, f.eks. er et egnet alternativ. Det sistnevnte filter er også egnet for anvendelse med det rekombinant produserte faktor Vlll-produkt, r-VIII SQ, som har en molekylvekt på ca. 170 000, som nevnt ovenfor.
Muligheten for å velge et filter med fin struktur går også ut fra at proteinløsningen har en høy renhetsgrad før filtrering. Anvendelse av et filter med fin struktur er i sin tur en forutsetning for evnen til å produsere proteinløsninger som har et meget lavt virusinnhold i sluttproduktet. For å være i stand til å redusere viruskonsentrasjonen til et meget lavt nivå fordres det således et filter med meget fin struktur, f.eks. "Viresolve"/70. Viruskonsentrasjonen kan ikke reduseres til et så lavt nivå ved anvendelse av "Viresolve"/180.
Effektiviteten, eller virkningsfullheten, av filtreringstrinnet påvirkes av renheten av proteinløsningen applisert på filteret. I denne henseende gir en høyere spesifikk aktivitet før filtrering et høyere utbytte i filtreringstrinnet. I tilfellet med foretrukne utførelsesformer anvendt ved f.eks. filtrering av løsninger som inneholder faktor IX, er det funnet at proteinutbyttet i filtreringstrinnet kan økes fra ca. 70 % til høyere en 95 %. Ved utøvelse av foreliggende oppfinnelse er det imidlertid mulig å oppnå proteinutbytter høyere enn 90 %, selv når det arbeides med løsninger med lav spesifikk aktivitet.
Ved foreliggende oppfinnelse er det mulig å redusere innholdet av meget små ikke-kappeomsluttede viruser, slik som parvovirus, med minst 3 log, passende minst 4 log og fortrinnsvis minst 5 log. Reduksjonen er meget god med den tangentielle teknikk, men enda bedre med "dead-end"-teknikken når den anvendes i overensstemmelse med foreliggende oppfinnelse.
Ifølge foreliggende oppfinnelse utføres virusfiltrering fortrinnsvis ved slutten av en proteinfremstillings-sekvens, fordi en høy spesifikk aktivitet før filtrering vil føre til et høyere proteinutbytte i filtreringstrinnet. Foreliggende oppfinnelse anvendes fortrinnsvis som et siste rens-ingstrinn, eventuelt etterfulgt av et trinn for justering av f.eks. proteinkonsentrasjon, saltinnhold eller pH, i sluttproduktet. Et etterfølgende diafiltreringstrinn ved anvendelse av en UF-membran, kan også anvendes for å fjerne salter som, selv om de er fordelaktige under virusfiltreringen ut fra et prosessaspekt eller et økonomisk aspekt, ikke bør inkluderes i sluttproduktet. Proteinløsninger som er klare for administrer-ing vil vanligvis inneholde en fysiologisk løsning, f.eks. 0,15 M natriumklorid ved pH 7, i kombinasjon med én eller flere stabilisatorer, slik som sakkarose eller aminosyrer. Virusfiltreringsprosessen kan også utføres i to eller flere trinn, med eller uten mellomliggende prosesstrinn.
Foreliggende oppfinnelse reduserer effektivt innholdet av virus med lipidkapper og viruser uten lipidkapper. Eksempler på viruser uten en lipidkappe er hepatittvirus A, poliovirus og parvovirus, som er relativt små viruser. Eksempler på viruser med en lipidkappe er hepatittvirus B, hepatittvirus C og human immunsviktvirus (HIV).
Eksperimentell del
Det ble utført eksperimenter hvori silingskoeffisienten for proteiner, eller proteinpermeabilitetsfaktor, først ble bestemt ved forskjellige filtratgjennomstrømningshastig-heter. Silingskoeffisienten, eller proteinpermeabilitets-faktoren, er gitt som P/R, hvor P er konsentrasjonen av protein på permeatsiden (filtratsiden) målt ved absorpsjon ved 280 nm (A28o) r og R er konsentrasjonen av protein på retensjonssiden (R) målt ved absorpsjon ved 280 nm (A2bo) • Filtrat-gjennomstrømningshastigheten som ga den høyeste silingskoeffisient i fravær av polymerisering på filteret, ble deretter valgt. Det ble også utført en utbytteoptimalisering med noen makromolekyler.
Eksempel 1
Eksperimenter ble utført med faktor IX som makromolekyl, for å illustrere virkningen av to saltinnhold på proteinsilingskarakteristika, diafiltreringsvolum og utbytte. En kommersiell løsning inneholdende faktor IX, "Nanotiv", ble levert av Pharmacia AB, Stockholm, Sverige. Løsningen inneholdende faktor IX ble erholdt fra humant blodplasma, og før filtrering var den blitt behandlet i en rekkefølge som involverte anioneutbytting, kjemisk virusinaktivering, affini-tetskromatografi og kationutbytting. Løsningen ble ultra-filtrert mellom hvert trinn, unntatt mellom det kjemiske virusinaktiveringstrinn og affinitetskromatografitrinnet.
Eksperimentelle betingelser
Renhetsgrad for den inngående proteinløsning: høy
Buffer: 0,144 M NaCl+0,0055 M natriumsitrat.
Totalt saltinnhold: ca. 0,15 M.
Proteinkonsentrasjon: 0,5-1,0 A28o_enheter.
Proteinløsning pH: 7
Eksperimenttemperatur: romtemperatur (ca. 23 °C) .
Virusseparasjonsfiltere: "Viresolve"/70
Filtreringsteknikk: tangentiell
Filterareale: 310 cm<2>
Retensjonsgjennomstrømningshastighet: 41 l/time
Pumpe: Watson-Marlow 504.
Transmembrantrykk: 0,2-0,3 bar.
En optimal filtratgjennomstrømningshastighet på 20,8 ml/min ble erholdt ved bestemmelse av proteinsilingskoeffisienten.
Diafiltrering med en fortynning på ca. 1 volumenhet pr. volumenhet inngående proteinløsning (1+1) ga et utbytte på ca. 90 %.
Eksempel 2
Det ble anvendt de samme betingelser som i eksempel 1, med det unntak av i dette tilfelle bestod bufferen av 1,0 M NaCl + 0,01 M natriumsitrat, hvilket ga et totalt saltinnhold på ca. 1,0 M.
Denne bestemmelse av proteinsilingskoeffisient ga en optimal filtratgjennomstrømningshastighet på 24,3 ml/minutt.
Diafiltrering med en fortynning på ca. 0,3 volumenhet pr. volumenhet inngående løsning (1 + 0,3) ga et utbytte på
> 95 %.
Eksempel 3
Den virusfjernende virkning oppnådd med eksperimentene beskrevet i eksempler 1 og 2 ble bestemt ved hjelp av en virusundersøkelse. Undersøkelsen ble utført på parvovirus som er ikke-lipidinnkapslede viruser, og som har en størrelse på 20-25 nm. I prinsipp faller eksperimenter med slike viruser innenfor kategorien "verste tilfelle", fordi de er noen av de minste viruser som er kjent.
Parvovirus ble tilsatt til løsninger inneholdende faktor IX, med et saltinnhold på hhv. 0,144 M NaCl+0,0055 M natriumsitrat (eksperiment 1) og 1,0 M NaCl+0,01 M natriumsitrat (eksperiment 2). Løsningen ble deretter virusfiltret i overensstemmelse med eksempler 1 og 2. Løsningene ble analysert med hensyn til parvovirus både før og etter virus-filtrering.
Resultatene viser at virusfiltrering i overensstemmelse med eksempler 1 og 2 tilfredsstiller kravene fra myndighetene vedrørende virusreduksjon i et prosesstrinn. .Anvendelse av et høyt saltinnhold i overensstemmelse med foreliggende oppfinnelse gir dessuten like effektiv fjerning av virus som tidligere kjente teknikker.
Eksempel 4
Det ble anvendt de samme betingelser som i eksempel 1, med det unntak at den inngående proteinløsning ikke var så ren.
Diafiltrering med fortynning på ca. 3 volumenheter pr. volumenhet inngående proteinløsning (1+3) ga et utbytte på ca. 65 %.
Eksempel 5
Det ble anvendt de samme betingelser som i eksempel 2, med det unntak at den inngående proteinløsning ikke var så ren.
Diafiltrering med fortynninger på ca. 3 volumenheter pr. volumenhet inngående proteinløsning (1+3) ga et utbytte på ca. 89 %. Utbyttet av faktor IX:C var 87 %.
Eksempel 6
Det ble utført eksperimenter med faktor IX som makromolekyl for å vise virkningen av fire saltinnhold på proteinsilingskoeffisienten, diafiltreringsvolumet og utbyttet, idet andre eksperimentbetingelser var konstant. Den anvendte "Nanotiv"-løsning var lignende den anvendt i eksempel 1. De anvendte eksperimentbetingelser var de samme som i eksempel 1.
Det fremgår fra tabellene 5 til 8 at foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en markert forbedring av prosess-betingelsene ved virusfiltrering av faktor IX-løsninger, sammenlignet med tidligere kjente teknikker hvor det er anvendt lave saltinnhold.
Eksempel 7
Eksperimentet ble utført med faktor IX som makromolekyl for å vise virkningen av tre forskjellige salter på proteinsilingskoeffisienten, diafiltreringsvolumet og utbyttet, idet andre eksperimentbetingelser ble holdt konstant. Den anvendte "Nanotiv"-løsning var lignende den anvendt i eksempel 1. De anvendte betingelser var de samme som i eksempel 1.
Det fremgår fra tabellene 5 til 8 at foreliggende oppfinnelse kan utføres fordelaktig med et antall forskjellige salter. Det fremgår også at proteinsilingskoeffisienten øker når det anvendes salter med en høy utsaltningseffekt i overensstemmelse med Hofmeister-serien (kaliumdihydrogenfosfat) , sammenlignet med et salt som har en lav utsaltningseffekt (bariumklorid).
Eksempel 8
Det ble utført eksperimenter med gammaglobulin som makromolekyl for å vise virkningen av saltinnhold på protein-silingskoef f isient, diafiltreringsvolum og utbytte. Løsningen inneholdende gammaglobulin var et kommersielt produkt erholdt fra blodplasma, "Gammonativ", levert av Pharmacia AB, Stockholm, Sverige. Før filtrering var gammaglobulinløsningen renset ved en innledende Cohn-fraksjonering etterfulgt av et kromatografisk trinn.
De anvendte eksperimentbetingelser var de samme som i eksempel 1, med unntak av at virusfjerningfiltret var et "Viresolve"/180-filter, pH i løsning var 6,8 og proteinkonsentrasjonen var 2,5-5,0 A28o_enheter. Bufferen bestod av 2,2 % albumin+0,15 M NaCl+0,02 M NaAc+0,075 M glysin. Totalt saltinnhold: 0,17 M.
Bestemmelse av proteinsilingskoeffisienten ga en optimal filtratgjennomstrømningshastighet på 20,8 ml/minutt.
Eksempel 9
Det ble anvendt de samme betingelser som i eksempel 8, med unntak av at i dette tilfelle bestod bufferen av 2,2 % albumin+1,0 M NaCl+0,02 M NaAc+0,075 M glysin. Totalt saltinnhold: ca. 1,0 M.
Bestemmelse av proteinsilingskoeffisienten ga en optimal filtratgjennomstrømningshastighet på 20,8 ml/minutt.
Optimalisering av utbyttet ved en filtratgjennom-strømningshastighet på 20,8 ml/minutt, og en oppholdstid på opp til 10 minutter, ga en P/R-kvotient på mellom 60 og 68 %.
Diafiltrering med en fortynningsgrad på ca. 1 volumenhet pr. volumenhet inngående proteinløsning (1+1) ga et utbytte på 90 %.
Eksempel 10
Det ble anvendt de samme betingelser som i eksempel 8, med unntak av at i dette tilfelle var pH i løsningen 5,5.
Eksempel 11
Det ble anvendt de samme betingelser som i eksempel 10, med unntak av at i dette tilfelle bestod bufferen av 2,2 % albumin+1,0 M NaCl+0,02 M NaAc+0,075 M glysin. Totalt saltinnhold: ca. 1,0 M.
Eksempel 12
Det ble utført eksperimenter med albumin som makromolekyl for å vise virkningen av saltinnhold på proteinsilingskoeffisient, diafiltreringsvolum og utbytte. 4 %-løsningen inneholdende humant serumalbumin (HSA) erholdt fra blodplasma, ble levert av Pharmacia AB, Stockholm, Sverige. Før filtrering var den albumininneholdende løsning renset ved kombinert Cohn-fraksjonering og et kromatografisk trinn.
De anvendte eksperimentbetingelser var de samme som i eksempel 1, med unntak av at proteinkonsentrasjonen var ca. 10 A28o-enheter. Bufferen bestod av 0,15 M NaCl+0,02 M NaAc, hvilket ga et totalt saltinnhold på 0,17 M.
Bestemmelse av proteinsilingskoeffisienten ga en optimal filtratgjennomstrømningshastighet på 20,8 ml/minutt.
Eksempel 13
Det ble anvendt de samme betingelser som i eksempel 12, med unntak av at i dette tilfelle bestod bufferen av 1,0 M NaCl+0,02 M NaAc, hvilket ga et totalt saltinnhold på ca.
1,0 M.
Diafiltrering med en fortynningsgrad på 1 volumenhet pr. volumenhet inngående proteinløsning (1+1) ga et utbytte på 85 %.
Eksempel 14
Det ble utført eksperimenter med faktor IX som makromolekyl for å vise virkningen av retensjonsgjennomstrømnings-hastigheten på proteinsilingskoeffisienten, idet andre betingelser ble holdt konstant. Den anvendte kommersielle "Nanotiv"-løsning var lignende løsningen anvendt i eksempel 1. De anvendte betingelser var de samme som i eksempel 1, med unntak av at i dette tilfelle bestod bufferen 1 M NaCl+6,4 itiM natriumsitrat, med en pH på 7,0.
Lavere retensjonsgjennomstrømningshastigheter førte til høyere proteinpermeabilitet gjennom filteret.
Eksempel 15
Eksperimenter ble utført med faktor IX som makromolekyl i en løsning med høyt saltinnhold, for å vise virkningen av typen av virusfiltreringsteknikk på fortynning, utbytte, proteinsilingskoeffisient og bearbeidelsestid, idet andre eksperimentbetingelser i alt vesentlig ble holdt konstant. De anvendte eksperimentbetingelser, inkludert "Nanotiv"-løsningen, var de samme som anvendt i eksempel 1, med unntak av de følgende forskjeller:
Virusfiltrering av faktor IX ved anvendelse av "dead-end"-teknikken betyr mindre fortynning, kortere bearbeidelsestider og fører til et høyere utbytte og en høyere proteinpermeabilitet .
Eksempel 16
Eksperimenter ble utført med faktor IX som makromolekyl, for å vise virkningen av saltinnhold på utbytte og proteinsilingskoeffisient ved virusfiltrering i overensstemmelse med "dead-end"-teknikken, idet de resterende eksperimentbetingelser ble holdt konstant. I tillegg til NaCl, inneholdt bufferen også i begge tilfeller 6,4 mM natriumsitrat (pH 7,0). De anvendte betingelser, inkludert "Nanotiv"-løsningen, var de samme som anvendt i eksempel 1, med unntak av de følg-ende forskjeller:
Et totalt utbytte på 83 % ble oppnådd gjennom virus-filtrering, med en fortynningsgrad på 1+0,07. Bearbeidelsestid 264 klU faktor IX/time.
Et totalt utbytte på 63 % ble oppnådd med virusfiltret, med en fortynningsgrad på 1+0,07. Bearbeidelsestid 194 klU faktor IX/time.
Eksempel 17
Eksperimenter ble utført med antitrombin (AT III) som makromolekyl i en løsning med lavt saltinnhold, for å vise virkningen av denne type virusfiltreringsteknikk på fortynning, utbytte, proteinsilingskoeffisient og bearbeidelsestid, idet andre betingelser i det alt vesentlige ble holdt konstant. Den anvendte kommersielle løsning "ATenativ" ble levert av Pharmacia AB, Stockholm, Sverige. Bufferen inneholdt 0,12 M Nacl+1 mM natriumfosfat (pH 7,4) i begge tilfeller. De anvendte betingelser var de samme som i eksempel 1, med unntak av de følgende forskjeller:
Virusfiltrering av AT III ved anvendelse av "dead-end"-teknikken, betyr mindre fortynning, gir høyere proteinpermeabilitet og kortere bearbeidelsestider.
Eksempel 18
Eksperimenter ble utført med antitrombin (AT III) som makromolekyl, for å vise virkningen av saltinnholdet på utbytte og proteinpermeabilitet (silingskoeffisient) ved virus-filtrering i overensstemmelse med den tangentielle teknikk, idet resterende eksperimentbetingelser ble holdt konstant. I tillegg til NaCl inneholdt bufferen 1 mM natriumfosfat (pH 7/4) i alle eksperimenter. De anvendte betingelser, inkludert "ATenativ"-løsningen, var de samme som i eksempel 17, med unntak av at retensjonsgjennomstrømningshastigheten var 20 l/time i alle eksperimenter.
Høyt saltinnhold resulterte i forbedret proteinpermeabilitet med hensyn til AT III.
Eksempel 19
Eksperimenter ble utført med humant serumalbumin (HSA) som makromolekyl i en løsning med høyt saltinnhold, for å vise virkningen av typen av virusfiltreringsteknikk på fortynning, utbytte, proteinpermeabilitet og bearbeidelsestid, idet andre eksperimentbetingelser i alt vesentlig ble holdt konstant. Den anvendte HSA-løsning var lik løsningen anvendt i eksempel 12. Bufferen inneholdt 1,0 M NaCl+20 mM natriumacetat (pH =7,4) i alle eksperimenter. De anvendte betingelser var de samme som i eksempel 1, med unntak av de følgende forskjeller :
Et totalt utbytte på 85 % ble oppnådd gjennom virusfiltret med en fortynning på 1+0,72. Bearbeidelsestid 4 650 mg HSA/time.
Virusfiltrering av HSA ved anvendelse av "dead-end"-teknikken, betyr mindre fortynning og resulterer i et høyere utbytte og høyere proteinpermeabilitet og kortere bearbeidelsestider.
Eksempel 20
Eksperimenter ble utført med gammaglobulin som makromolekyl i en løsning med høyt saltinnhold for å vise virkningen av denne type av virusfiltreringsteknikk på fortynning, utbytte, proteinsilingskoeffisient og bearbeidelsestid, idet de resterende eksperimentbetingelser i alt vesentlig ble holdt konstant. Den anvendte gammaglobulinløsning var lik løsningen anvendt i eksempel 8. Bufferen inneholdt 1,0 M NaCl+20 mM natriumacetat + 0,075 M glysin (pH =5,5) i alle eksperimenter. De anvendte betingelser var de samme som i eksempel 1, med unntak av de følgende forskjeller:
Et totalt utbytte på 94 % ble oppnådd gjennom virusfiltret, med en fortynningsgrad på 1+0,12. Bearbeidelsestid 2 790 mg gammaglobulin/time.
Virusfiltrering av gammaglobulin med "dead-end"-teknikken, involverer mindre fortynning og resulterer i et høyere utbytte og proteinpermeabilitet og kortere bearbeidelsestider.
Eksempel 21
Eksperimenter ble utført med antitrombin som makromolekyl for å illustrere at foreliggende oppfinnelse er anvendelig i en industriell skala ved anvendelse av et vesentlig større filterareale (9 290 cm<2>) enn i de tidligere eksempler (310 cm2) . En kommersiell løsning inneholdende antitrombin (AT III), "ATenative", ble levert av Pharmacia AB, Stockholm, Sverige.
Eksperimentbetingelser
Buffer: 1 M NaCl+1 mM natriumfosfat
Totalt saltinnhold: ca. 1,0 M.
Proteinkonsentrasjon: 9,2 A28o-enheter.
Proteinløsning pH: 7,4
Mengde proteinløsning før virusfiltrering: 20,8 kg Virussepareringsfiltre: "Viresolve"/70
Filtreringsteknikk: "dead-end"
Filterareale: 9 290 cm<2>
Retensjonsgjennomstrømningshastighet: 0 l/time Filtratgjennomstrømningshastighet buffer: 20 l/time Transmembrantrykk: 0,3 bar.
Det fremgår fra dette eksempel at virusfiltrering av antitrombin i overensstemmelse med foreliggende oppfinnelse kan utføres i industriell skala med utmerkede resultater.
Eksempel 22
Den virusfjernende effekt oppnådd med eksperimentene beskrevet i eksempel 15 ble bestemt ved hjelp av en virus-undersøkelse, men ved et høyere saltinnhold. Virusfiltrerings-teknikken var "dead-end"-teknikken. Undersøkelsen ble utført på parvovirus som i eksempel 3. Parvoviruset ble tilsatt til løsningene inneholdende faktor IX, 1,0 M NaCl+0,01 M natriumsitrat (eksperiment 1). Løsningene ble analysert med hensyn til parvovirus både før og etter virusfiltrering.
Resultatene viser at virusfiltrering i overensstemmelse med eksempel 15 ved anvendelse av "dead-end"-teknikken, tilfredsstiller kravene fra myndighetene vedrørende virusreduksjon i et prosesstrinn. Anvendelse av et høyt saltinnhold i overensstemmelse med foreliggende oppfinnelse er dessuten minst like effektiv ved fjerning av virus som tidligere kjente teknikker.
Claims (12)
1. Fremgangsmåte for virusfiltrering av en løsning inneholdende minst ett makromolekyl,
karakterisert ved at det totale saltinnhold i løsningen ligger innen området fra 0,6 M og opp til metning av løsningen med det aktuelle salt.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at det totale saltinnhold i løsningen ligger i området 0,6-2,5 M.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved at det totale saltinnhold i løsningen ligger innen området 0,6-2,0 M.
4. Fremgangsmåte ifølge ethvert av de foregående krav, karakterisert ved at saltet er utvalgt fra natriumklorid, kaliumklorid, natriumacetat, natriumsitrat og kombinasjoner derav.
5. Fremgangsmåte ifølge ethvert av de foregående krav, karakterisert ved at makromolekylet er utvalgt fra proteiner, polysakkarider og polypeptider og kombinasjoner derav.
6. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at makromolekylet er faktor IX.
7. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at makromolekylet er gammaglobulin.
8. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at makromolekylet er albumin.
9. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at makromolekylet er antitrombin III.
10. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at makromolekylet er et delesjonsderivat av rekombinant faktor VIII.
11. Fremgangsmåte ifølge ethvert av de foregående krav, karakterisert ved at virusfiltreringsprosessen utføres i overensstemmelse med "dead-end"-filtrer-ingsteknikken.
12. Fremgangsmåte ifølge ethvert av de foregående krav, karakterisert ved at virusfiltreringsprosessen reduserer innholdet av ikke-innkapslede viruser med minst 4 log.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SE9402254A SE502820C2 (sv) | 1994-06-23 | 1994-06-23 | Filtrering |
SE9500724A SE9500724D0 (sv) | 1994-06-23 | 1995-02-24 | Filtrering |
PCT/SE1995/000777 WO1996000237A1 (en) | 1994-06-23 | 1995-06-22 | Filtration |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO965523L NO965523L (no) | 1996-12-20 |
NO965523D0 NO965523D0 (no) | 1996-12-20 |
NO320952B1 true NO320952B1 (no) | 2006-02-20 |
Family
ID=26662085
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO19965523A NO320952B1 (no) | 1994-06-23 | 1996-12-20 | Fremgangsmate for virusfiltrering av en losning inneholdende minst ett makromolekyl |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US6486306B1 (no) |
EP (1) | EP0796269B1 (no) |
JP (1) | JP3676370B2 (no) |
AT (1) | ATE212354T1 (no) |
CA (1) | CA2192683C (no) |
DE (2) | DE69525176T2 (no) |
DK (1) | DK0796269T3 (no) |
ES (1) | ES2105992T3 (no) |
FI (1) | FI965145A0 (no) |
GR (1) | GR970300038T1 (no) |
MX (1) | MX9606639A (no) |
NO (1) | NO320952B1 (no) |
NZ (1) | NZ288789A (no) |
PT (1) | PT796269E (no) |
SE (1) | SE9500724D0 (no) |
WO (1) | WO1996000237A1 (no) |
Families Citing this family (38)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SE9500724D0 (sv) * | 1994-06-23 | 1995-02-24 | Pharmacia Ab | Filtrering |
SE9500778D0 (sv) * | 1995-03-03 | 1995-03-03 | Pharmacia Ab | Process for producing a protein |
SE9603068D0 (sv) * | 1996-08-23 | 1996-08-23 | Pharmacia & Upjohn Ab | Process for purifying a protein |
SE9603303D0 (sv) | 1996-09-11 | 1996-09-11 | Pharmacia & Upjohn Ab | Process for purifying a protein |
EP0860444A1 (en) * | 1997-02-24 | 1998-08-26 | Stichting Centraal Laboratorium van de Bloedtransfusiedienst van het Nederlandse Rode Kruis (CLB) | Method for removing viruses from a protein solution |
US6045588A (en) | 1997-04-29 | 2000-04-04 | Whirlpool Corporation | Non-aqueous washing apparatus and method |
US6096872A (en) * | 1997-10-14 | 2000-08-01 | Ortho Diagnostic Systems, Inc. | Viral clearance process |
FR2772381B1 (fr) * | 1997-12-15 | 2001-06-08 | Lab Francais Du Fractionnement | Procede de preparation par filtration d'une solution de facteur viii securisee viralement |
US6861001B2 (en) * | 1999-12-02 | 2005-03-01 | The General Hospital Corporation | Methods for removal, purification, and concentration of viruses, and methods of therapy based thereupon |
ATE555666T1 (de) | 2002-05-23 | 2012-05-15 | Ortho Clinical Diagnostics Inc | Einfang, konzentration und quantifizierung eines abnormalen prionproteins aus biologischen flüssigkeiten mittels tiefenfiltration |
PT1534404E (pt) | 2002-06-14 | 2007-03-30 | Centocor Inc | Utilização de um modificador de clatratos para promover a passagem de proteínas durante a nanofiltração |
JP2004099506A (ja) * | 2002-09-09 | 2004-04-02 | Mitsubishi Rayon Co Ltd | アミノ酸アミドの製造方法 |
ES2543978T3 (es) * | 2003-04-09 | 2015-08-26 | The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute | Proceso para la producción de una preparación de albúmina |
CN100398642C (zh) * | 2003-06-20 | 2008-07-02 | 迈克必斯生物***公司 | 病毒生产的改进 |
JP4558652B2 (ja) * | 2003-06-20 | 2010-10-06 | マイクロビクス・バイオシステムズ・インコーポレイテツド | ウイルス生産の改善 |
FR2861395B1 (fr) | 2003-10-23 | 2006-02-17 | Lab Francais Du Fractionnement | Facteur viii viralement securise a faible teneur en multimeres superieurs |
US7739891B2 (en) | 2003-10-31 | 2010-06-22 | Whirlpool Corporation | Fabric laundering apparatus adapted for using a select rinse fluid |
US7695524B2 (en) | 2003-10-31 | 2010-04-13 | Whirlpool Corporation | Non-aqueous washing machine and methods |
ES2926359T3 (es) | 2003-12-01 | 2022-10-25 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Filtración de virus de composiciones líquidas del Factor VII |
CA2555412C (en) | 2004-02-23 | 2013-06-25 | Crucell Holland B.V. | Virus purification methods |
FR2866890B1 (fr) * | 2004-02-27 | 2008-04-04 | Lab Francais Du Fractionnement | Procede de purification d'albumine comprenant une etape de nanofiltration, solution et composition a usage therapeutique la contenant |
US7837741B2 (en) | 2004-04-29 | 2010-11-23 | Whirlpool Corporation | Dry cleaning method |
US7141171B2 (en) * | 2004-05-21 | 2006-11-28 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Membrane cascade-based separation |
AU2005229674B2 (en) | 2004-11-18 | 2010-11-04 | Kedrion Melville Inc. | Low concentration solvent/detergent process of immuneglobulin with pre-treatment |
CA2602944C (en) | 2005-04-11 | 2015-08-11 | Crucell Holland B.V. | Virus purification using ultrafiltration |
US7966684B2 (en) | 2005-05-23 | 2011-06-28 | Whirlpool Corporation | Methods and apparatus to accelerate the drying of aqueous working fluids |
RU2468032C2 (ru) * | 2006-06-26 | 2012-11-27 | Омрикс Биофармасьютикалс Инк. | Способ очистки раствора тромбина от инфекционных частиц |
JP5579599B2 (ja) * | 2007-06-15 | 2014-08-27 | アムジエン・インコーポレーテツド | バイオリアクターにおいて使用する細胞培養培地の処理方法 |
KR100870423B1 (ko) * | 2007-06-27 | 2008-11-26 | 주식회사 하이닉스반도체 | 반도체메모리소자 |
US7989593B1 (en) | 2010-05-27 | 2011-08-02 | Bing Lou Wong | Method for the preparation of a high-temperature stable oxygen-carrier-containing pharmaceutical composition and the use thereof |
US7932356B1 (en) | 2010-06-23 | 2011-04-26 | Bing Lou Wong | Method for the preparation of a heat stable oxygen carrier-containing pharmaceutical composition |
US8048856B1 (en) | 2010-06-23 | 2011-11-01 | Billion King, Ltd. | Treatment methods using a heat stable oxygen carrier-containing pharmaceutical composition |
US8084581B1 (en) | 2011-04-29 | 2011-12-27 | Bing Lou Wong | Method for removing unmodified hemoglobin from cross-linked hemoglobin solutions including polymeric hemoglobin with a high temperature short time heat treatment apparatus |
US9359397B2 (en) | 2011-06-24 | 2016-06-07 | Asahi Kasei Medical Co., Ltd. | Method for manufacturing protein drug |
US20130052232A1 (en) | 2011-08-31 | 2013-02-28 | Bing Lou Wong | Method for the preparation of a heat stable oxygen carrier-containing composition facilating beta-beta cross-linking |
US9294158B2 (en) | 2012-08-07 | 2016-03-22 | Broadcom Corporation | Broadcast audio service |
NZ631126A (en) * | 2013-08-08 | 2018-06-29 | Csl Ltd | Contaminant removal method |
US10053296B2 (en) | 2016-09-19 | 2018-08-21 | Asgco Manufacturing, Inc. | Return idler trainer |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3870801A (en) | 1968-08-09 | 1975-03-11 | Lever Brothers Ltd | Fluid aqueous protein compositions and food products prepared therefrom |
US3919044A (en) | 1973-03-28 | 1975-11-11 | Armour Pharma | Processes for concentrating and purifying viruses and viral antigens |
US3874999A (en) | 1973-10-31 | 1975-04-01 | American Cyanamid Co | Process for the purification of virus vaccine |
CA1099576A (en) | 1978-03-23 | 1981-04-21 | Chester D. Myers | Improved process for isolation of proteins |
US4473494A (en) | 1983-05-04 | 1984-09-25 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Preparation of stroma-free, non-heme protein-free hemoglobin |
US4684723A (en) * | 1985-09-11 | 1987-08-04 | Miles Laboratories, Inc. | Method of separating proteins from aqueous solutions |
JPH0720986B2 (ja) | 1985-10-07 | 1995-03-08 | 日本ケミカルリサ−チ株式会社 | 生理活性物質の製造法 |
AU605901B2 (en) | 1987-09-11 | 1991-01-24 | Ares Trading S.A. | Purification process |
RU1781355C (ru) * | 1990-04-23 | 1992-12-15 | В.П.Широбоков, Л.Я.Палиенко, А.И.Евтушенко, Л.А Коптюх, Ю.В.Загороднюк и К.Д Стеценко | Фильтрующий материал |
US5017292A (en) | 1990-05-10 | 1991-05-21 | Millipore Corporation | Membrane, process and system for isolating virus from solution |
US5076933A (en) | 1990-06-29 | 1991-12-31 | Coulter Corporation | Process and apparatus for removal of dna and viruses |
US5221483A (en) * | 1990-06-29 | 1993-06-22 | Coulter Corporation | Process and apparatus for removal of DNA, viruses and endotoxins |
SE9301582D0 (sv) | 1993-05-07 | 1993-05-07 | Kabi Pharmacia Ab | Purification of plasma proteins |
SE9500724D0 (sv) * | 1994-06-23 | 1995-02-24 | Pharmacia Ab | Filtrering |
-
1995
- 1995-02-24 SE SE9500724A patent/SE9500724D0/xx unknown
- 1995-06-22 WO PCT/SE1995/000777 patent/WO1996000237A1/en active IP Right Grant
- 1995-06-22 JP JP50306296A patent/JP3676370B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-22 PT PT95923651T patent/PT796269E/pt unknown
- 1995-06-22 US US08/750,664 patent/US6486306B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-22 ES ES95923651T patent/ES2105992T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-22 NZ NZ288789A patent/NZ288789A/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-22 MX MX9606639A patent/MX9606639A/es not_active IP Right Cessation
- 1995-06-22 DK DK95923651T patent/DK0796269T3/da active
- 1995-06-22 CA CA002192683A patent/CA2192683C/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-22 AT AT95923651T patent/ATE212354T1/de not_active IP Right Cessation
- 1995-06-22 DE DE69525176T patent/DE69525176T2/de not_active Revoked
- 1995-06-22 DE DE0796269T patent/DE796269T1/de active Pending
- 1995-06-22 EP EP95923651A patent/EP0796269B1/en not_active Revoked
-
1996
- 1996-12-20 NO NO19965523A patent/NO320952B1/no not_active IP Right Cessation
- 1996-12-20 FI FI965145A patent/FI965145A0/fi not_active Application Discontinuation
-
1997
- 1997-11-28 GR GR970300038T patent/GR970300038T1/el unknown
-
2000
- 2000-02-23 US US09/511,953 patent/US6399357B1/en not_active Expired - Fee Related
-
2002
- 2002-11-26 US US10/304,902 patent/US20030191292A1/en not_active Abandoned
-
2005
- 2005-02-23 US US11/064,770 patent/US20050203285A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ES2105992T2 (es) | 1997-11-01 |
DK0796269T3 (da) | 2002-05-06 |
NZ288789A (en) | 1997-12-19 |
ES2105992T3 (es) | 2002-09-16 |
AU682274B2 (en) | 1997-09-25 |
DE69525176D1 (de) | 2002-03-14 |
ES2105992T1 (es) | 1997-11-01 |
DE69525176T2 (de) | 2002-06-27 |
MX9606639A (es) | 1997-03-29 |
NO965523L (no) | 1996-12-20 |
SE9500724D0 (sv) | 1995-02-24 |
DE796269T1 (de) | 1998-01-02 |
FI965145A (fi) | 1996-12-20 |
US20030191292A1 (en) | 2003-10-09 |
CA2192683A1 (en) | 1996-01-04 |
GR970300038T1 (en) | 1997-11-28 |
EP0796269B1 (en) | 2002-01-23 |
US6399357B1 (en) | 2002-06-04 |
WO1996000237A1 (en) | 1996-01-04 |
JPH10502074A (ja) | 1998-02-24 |
FI965145A0 (fi) | 1996-12-20 |
US6486306B1 (en) | 2002-11-26 |
PT796269E (pt) | 2002-06-28 |
US20050203285A1 (en) | 2005-09-15 |
CA2192683C (en) | 2005-07-05 |
ATE212354T1 (de) | 2002-02-15 |
NO965523D0 (no) | 1996-12-20 |
EP0796269A1 (en) | 1997-09-24 |
JP3676370B2 (ja) | 2005-07-27 |
AU2813295A (en) | 1996-01-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
NO320952B1 (no) | Fremgangsmate for virusfiltrering av en losning inneholdende minst ett makromolekyl | |
JP3094167B2 (ja) | 免疫血清グロブリンの精製方法 | |
US4877866A (en) | Method of producing a virus safe, storage-stable, and intravenously tolerable immunoglobulin-G preparation | |
CA2254871C (en) | Purification of biologically active peptides from milk | |
RU2000113224A (ru) | Способ продуцирования в высокой степени вирусобезопасных компонентов для получения фибринового клея из пула плазмы человека | |
AU709584B2 (en) | Industrial production process for a vaccine against Japanese encephalitis, and vaccine obtained | |
US4386068A (en) | Antihemophilic factor concentrate and method for preparation | |
NO863424L (no) | Fremgangsmaate for rensing av et interferon. | |
EP0176926B1 (en) | Process for producing a high purity antihemophilic factor concentrate | |
NO323460B1 (no) | Fremgangsmate til fremstilling i stor skala av en lagringsstabil trombinsammensetning med terapeutisk kvalitet som hovedsakelig er fri for virus | |
US4199450A (en) | Process of separating from an aqueous medium a protein or a morphologically organized unit by liquid exclusion chromatography | |
IL177286A (en) | Albumin purification method comprising a nanofiltration step and solution and composition for therapeutic use containing same | |
JP4312381B2 (ja) | 濾過によるウイルス的に安全な因子viii溶液の調製方法 | |
US8293242B2 (en) | Ultra-high yield of alpha-1-anti-trypsin | |
CN110678481B (zh) | 用于纯化白蛋白的方法 | |
RU2617960C2 (ru) | Очистка ингибитора альфа1 протеиназы, полученного из культуры клеток | |
AU682274C (en) | Filtration | |
US10800820B2 (en) | Preparation methods for a novel generation of biological safe KLH products used for cancer treatment, for the development of conjugated therapeutic vaccines and as challenging agents | |
JPH08787B2 (ja) | ガンマグロブリン含有組成物の製造法 | |
RU2066188C1 (ru) | Способ получения человеческого лейкоцитарного интерферона | |
EP0126789B1 (en) | Antihemophilic factor concentrate and process for its preparation | |
JP2678193B2 (ja) | ヒト血漿由来血液凝固第x▲iii▼因子の製造方法 | |
SE502820C2 (sv) | Filtrering | |
JP2000212097A (ja) | 伝達性海綿状脳症病原因子を除去する方法 | |
NO149610B (no) | Fremgangsmaate for rensing av den antihemofile faktor, faktor viii |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM1K | Lapsed by not paying the annual fees |