KR970003127B1

KR970003127B1 - Bu-3608 유도체

Info

Publication number: KR970003127B1
Application number: KR1019890010190A
Authority: KR
Inventors: 니시오 마끼; 가꾸시마 마사또시; 고니시 마사따까; 오끼 도시까즈
Original assignee: 브리스틀-마이어즈 스퀴브 컴페니; 아이삭 자아코브스키
Priority date: 1988-07-19
Filing date: 1989-07-18
Publication date: 1997-03-14
Also published as: HU205131B; CS440889A2; RU2026302C1; PT91203B; DE68912438T2; DD296081A5; IE62586B1; DE68912438D1; AU622197B2; HU203112B; ZA895455B; FI893426A0; IL91001A0; ATE100459T1; CA1337907C; FI893426A; IE892325L; IL91001A; FI92206B; MY105128A

Abstract

내용없음

Description

BU-3608 유도체

본 발명은 항생제 BU-3608 복합체의 N-알킬 유도체에 관한 것이다.

이들 화합물은 항진균제로써 활성을 갖고 있다.

항생제 BU-3608, BU-3608B, 및 BU-3608C에 대한 발효와 분리 및 정제방법은 1987년 11월 2일에 출원되어 계류중인 미국특허출원 제115,273호에 상세히 기재되어 있으며, 항생제 BU-3608D 및 BU-3608E에 대한 분리 및 정제방법은 1988년 6월 7일에 출원되어 계류중인 미국특허출원 제203,776호에 기재되어 있다. 이들 출원은 본 발명의 참고자료로써 본 명세서에 포함시킨다. 상기에 언급된 항생제의 구조는 다음의 일반식(Ia-Ie)으로 나타낸다.

Ia : BU-3608; R¹=CH₃; R²=D-크실로실; R³=CH₂

Ib : 3608B; R¹=CH₃; R²=H; R³=CH₃

Ic : 3608C; R¹=CH₃; R²=D-크실로실; R³=H

Id : 3608D; R¹=H; R²=D-크실로실; R³=CH₃

Ie : 3608E; R¹=H; R²=D-크실로실; R³=H

그러나, BU-3608은 물에 매우 한정적인 용해도를 가지고 있다. 그러므로 본 발명의 목적은 BU-3608 항생제 착물의 다양한 성분에 대한 수용성 유도체를 제공하는데 있다.

본 발명은 다음의 일반식(Ⅱ)을 가진 화합물 또는 약리적으로 허용되는 그의 염을 제공한다.

상기의 일반식에서, R¹이 H, 또는 R¹이 그 결과로 얻은 알라닐이 D-알라닌인 메틸이며; R²는 H 또는 β-D-크로실로실이며; Y는 NR³R⁴또는 N⁺R³R⁴R⁵X^-로서, R³, R⁴및 R⁵는 같거나 서로 다른 C_1-5알킬이고 X^-는 음이온이다.

β-D-크실로실은 다음의 단편으로 표시된다.

본 발명의 또다른 형태로서 BU-3608C(Ⅲa), BU-3608D(Ⅲb) 및 BU-3608E(Ⅲc)의 데스크실로실 유도체 또는 약리적으로 허용되는 그의 염을 제공하는 것이다.

Ⅲa : R¹=CH₃; R³=H

Ⅲb : R¹=H; R³=CH₃

Ⅲc : R¹=H; R³=H

항생제 BU-3608, BU-3608B, BU-3608C, BU-3608D 및 BU-3608E는 본 발명의 화합물을 위한 출발물질로 사용되며, 악티노마두라 히비스카(Actinomadura hibisca) sp. nov.의 항생제 생성 균주를 배양시켜 제조할 수 있다. 악티노마두라히비스카 균주 P157-2와 Q278-4는 American Type Culture Collection(메릴랜드주, 록빌시)에 기탁되어 각각 기탁번호 ATCC 53557 및 ATC 53646을 부여받았다. N-메틸-N'-니트로-N니트로소 구아니딘(NTG)으로써 처리하여 균주 P157-2로부터 유발된 변이 균주는 P157-2 또는 Q278-4균주보다 많은 양으로 D 및 E성분을 생산한다. A2660으로 표시된 이와 같은 변이균주를 또한 ATCC에 기탁하여 기탁번호 ATCC 53762를 부여받았다.

BU-3608B는 BU-3608의 데스크실로실 유도체이다. 크실로스기가 분해되기에 충분한 기간 동안 염산 속에서 BU-3608, BU-3608C, D 및 E를 가열시키고, 필요로 한 생성물이 침전되도록 용액의 pH를 조절함으로써 BU-3608B, 데스크실로실 BU-3608C, D 및 E를 제조할 수 있다.

항생제 출발물질을 알데히드 또는 케톤과 반응시킨 뒤, 이어서 이와 같이 생성된 이민을 환원시키는 것으로 이루어진 환원 알킬화 반응에 의하여 BU-3608, BU-3608C, D, E 또는 이에 상응하는 데스크실로실 유도체의 아미노기를 알킬화시킬 수 있다. 축합 및 환원반응은 동일한 반응관에서 한단계 공정, 또는 두가지 분리 공정으로 수행될 수 있다. 항생제에 카르보닐 화합물을 항생제에 대해 적어도 2당량으로 처리하고 환원시켜 BU-3608C, E 또는 그 데스크실로실 유도체의 일차아민을 두개의 동일한 알킬을 가진 삼차 아민으로 전환시키거나; 또는 조절된 양의 제일 카르보닐 반응물을 사용하여 일차 아민을 이차 아민으로 전환시키고 이어서 제2의 다른 카르보닐 화합물과 반응시켜 삼차 아민 제품으로 전환시킴으로써 두개의 서로 다른 알킬 치환체를 가진 삼차아민을 얻을 수 있다.

카르보닐 반응물질은 탄소원자수 1-5개를 가진, 예를 들어, 포름알데히드, 아세트알데히드, 프로피온알데히드 및 아세톤등의 알데히드 또는 케톤일 수 있다. 수소화금속, 예를 들어 보로수소화 나트륨, 시아노보로 수소화 나트륨, 알루미늄 수소화 리듐과 같은 환원제를 사용하여 이민의 환원반응을 성취할 수 있다. 상기의 반응은 물, 아세토니트릴, 저급알칸올 및 술폭시디메틸과 같은 극성유기용매 또는 그 혼합물 속에서 반응시킨다. 반응온도는 구체적으로 한정되어 있지 않으나 상온에서 약 100℃일 수 있다. 경험에 의하여, 상오에서 수행된 알킬화 반응은 24시간 이내에 완료된다. 최적반응 조건은 물론 사용된 특정 반응물질의 특성 및 반응성에 기인할 것이다.

아미노기는 또한 할로겐화 알킬과 반응시켜 알킬화 될 수 있으며 사차 암모늄 화합물은 일반식(I), 일반식(Ⅲ), 또는 Y가 NR³R⁴인 일반식(Ⅱ)을 완전히 알킬화시킨 화합물에 의하여 얻어질 수 있다.

다양한 항생제의 용해도는 인산염-완충식염수(PBS) 용액에서 측정되었고 얻어진 데이타를 다음에 제시한다. PBS(-)는 1리터에 대하여 KCI 0.2g, CH₂PO₄0.2g, NaCl 8g 및 Na₂HPO₄1.15g을 함유한 용액을 뜻하며; PBS(+)는 추가로 MgCl₂·6H₂O 100㎎ 및 CaCl₂100㎎을 함유한다.

비교하여 보면, BU-3608의 용해도는 PBS(-) 및 PBS(+) 용액에서 각각 16-18㎍/㎖ 및 9-23㎍/㎖이다. 따라서, 일반식(Ⅱ)의 화합물은 BU-3608과 비교하여 물에 대한 용해도가 높다는 사실을 나타낸다.

생물학적 특성

본 발명의 대표적인 화합물에 대한 항진균 활성을 시험관내 및 생체내의 두가지 모두에서 평가하였다. 여러 가지 종류의 진균에 대한 최소억제농도(MIC)를 사부로(Sabouraud) 덱스트로스 한천을 이용한 연속 한천 희석법에 의하여 측정하였다. 따라서, 10⁶cell/㎖를 함유한 진균 현탁액 약 0.003㎖를 시험 항생제를 함유한 한천 플레이트의 표면에 도포 하였다.

배양체를 28℃에서 44시간 항온유지 시킨 후 기록된 MIC 수치를 다음의 표 1에 나타낸다.

시험관내 항진균 활성

[표 1]

본 발명의 화합물에 대한 체내활성에 있어서, 쥐의 Candida albicans A9540 감염에 대하여 검사하였다.

시험미생물을 YGP 배치(효모 추출물, 글루코스, 펩톤, K₂HPO₄, MgSO₄)에서 28℃로 18시간 동안 배양시킨 다음 식염수에 현탁시켰다. 체중 20-24g의 수컷 ICR쥐를 시험 진균의 중간 치사량의 약 10배로 정맥내 감염시켰다. 다양한 투여량 수주에서 항생제를 진균감염 직후에 각각의 정맥내로 5마리의 쥐를 일개군으로하여 각 군별로 투여하였다. 감염으로부터 동물에 대한 50% 보호투여량(PD₅₀, ㎎/㎏)을 진균 공격 후 20일에 기록된 생존율로부터 계산하였다. 감염후 7-15일내에 모든 대조구 동물들은 죽었다. 실시예 5, 7 및 8의 화합물에 대한 PD₅₀은 각각 14㎎/㎏(독성), 11㎎/㎏ 및 3.5㎎/㎏이다.

따라서, 본 발명의 또다른 형태는 감염성 진균으로 감염된 숙주에게 본 발명의 화합물의 항진균적 유효량을 투여하는 것으로 이루어진 진균감염을 치료하는 방법을 제공한다. 동물 및 인간의 진균감염에 대한 치료에 대하여 본 발명의 항생제는 모든 가능한 투여경로에 의하여 항진균적 유효량으로 제공되며, 이들은 정맥내, 근육내, 경구, 비강내 및 표재성 감염에 대하여 국소투여 방법등이 있으나, 이들 방법에 국한되지는 않는다. 비경구적 투여에 대한 제제로는 무균 수용액 또는 비수용성 용액, 현탁액 또는 에멀젼 등이 있다. 그들은 또한 무균수, 생리적 식염수, 또는 사용전 즉시 주입가능한 몇 가지 다른 무균배지속에 용해될 수 있는 무균 고상 조성물의 형태로 제조할 수 있다. 경구제제는 정제, 젤라틴 캡슐, 분제, 당의정, 시럽 및 그 유사한 것의 형태일 수 있다. 국소투여용으로, 화합물의 로션, 연고, 겔, 크림, 고약, 팅크제 및 그 유사한 것에 혼합시킬 수 있다. 단위 투여형태는 약제배합 기술분야에 숙련된 자들에게 일반적으로 알려진 방법을 이용하여 제조할 수 있다.

본 발명의 항생제에 민감한 진균에 감염된 숙주를 치료할 때 사용되는 실제 바람직한 투여경로 및 사용량은 진균 또는 비루스 감염의 치료에 숙련된 진료 임상의의 판단에 의하며, 원인이 되는 미생물, 항생제에 대한 그 과민성, 감염의 심각성 및 부위, 나이, 체중, 분비율, 동시에 이루어지는 약물치료 및 일반적인 신체조건과 같은 환자의 특성에 따라 변화할 것이라는 것을 인식할 수 있을 것이다.

본 발명의 실시예를 들면 다음과 같으며 본 실시예로서 본 발명의 청구범위를 한정시키는 것이 아니다.

실시예 1

악티노마두라 히비스카 균주 P157-2의 발효

(a) 한천 사면 배양

악티노마두라 히비스카 균주 P157-2를 0.5% 가용성 전분(Nichiden Kagaku 사); 0.35% 글루코스; 0.1% 어분추출물(Mikuni Kagaku); 0.1% 효모추출물(Oriental Yeast 사); 0.2% NZ카제(Case)(Sheffield); 0.1% CaCO3; 0.2% NaCl; 1.6% 한천으로 구성된 한천 경사면 위에 성장시켰다. 상기의 배양체를 28℃에서 7일간 배양시켰다.

(b) 종자 배양

경사면 배양체로부터 미생물 성장부분을 다음의 조성인 영상 배지 100㎖가 들어있는 500㎖ 삼각 플라스크에 옮겼다.

0.1% 글루코스; 2.0% 가용성 전분(Nichiden Kagaku 사); 0.5% NZ 아민A(Sheffield); 0.5% 효모 추출물(Oriental Yeast 사); 0.1% CaCO₃.

멸균전에 배지의 pH를 7.2로 조절하였다. 종자 배양체를 200rev/min에 맞춘 회전 진동기 위에서 28℃에서 4일간 배양시켰다.

(c) 플라스크 발효

미생물 성장체 5㎖를 종자배양기로부터 다음의 조성의 무균 생성배지 100㎖가 들어있는 500㎖ 삼각 플라스크에 옮겼다. 3.0% 글루코스; 3.0% 콩가루(Nikko Seiyu 사); 0.5% Pharma 배지(Traders Protein); 0.1% 효모 추출물(Oriental Yeast 사); 및 0.3% CaCO₃.

회전 진동기 위에서 28℃에서 5-6일간 발효시켰다. 사부로 덱스트로스 액체 배지중의 Candida albicans A9540을 지시 유기체로 이용한 액체 배지 희석법에 의하여 발효액내 항생제 생성을 검사하였고, 또한 0.01N NaOH-MeOH(1 : 1) 용액속, 500㎚에서 UV로 분석하였다. 항생제 생성은 5일째 650㎍/㎖에서 최대치에 도달하였다.

(d) 종자 배양

종자배양체 3L로 200L 탱크 발효기에 들어있는 멸균 생성배지 120L를 접종시켰다. 생성배지의 조성은 플라스크 발효에 사용된 것과 동일하다. 상기의 탱크를 28℃에서 교반속도 150rev/min, 기포공급 속도 120L/min로써 작동시켰다. 발효 96시간 후에, 500㎍/㎖의 항생제 효력을 얻었고 발효액의 pH는 7.9이었다.

실시예 2

항생제의 분리 및 정제

항생제 BU-3608, BU-3608B, 및 BU-3608C이 분리 및 정제에 대한 방법은 1987년 11월 2일에 출원되어 계류중인 미국특허출원 제115,273호에 상세히 기재되어 있다. D 및 E성분의 분리 및 정제방법은 1988년 6월 7일에 출원되어 계류중인 제203,776호에 기재되어 있다. 이들 출원은 본 발명의 참고문헌으로 포함시켰다. 항생제 복합체의 여러 성분을 분리하고 정제하는 방법은 이하 기재된다.

배지(pH 7.8)를 모아 원심분리하여 상징액을 6N HCI로써 pH 2.0으로 산성화하여 생-비활성 고체를 침전시켰다. 침전물을 제거한 후, 여과액을 6N NaOH로써 pH 5.0으로 조절하여 상온에서 30분간 그 용액을 천천히 교반하였다. 이와 같이 얻어진 진한 적색 고체를 여과시켜 진공상태에서 건조시켰다. 이와 같은 고체를 n-부탄올-메탄올-1% NaCl의 3 : 1 : 4 혼합물에 용해시키고 그 혼합물을 30분간 교반하였다. 하부의 수성층을 분리시켜, 신선한 상부의 층으로써 다시 세척하고 6N HCI로써 pH 2.0으로 산성화시킨 다음 n-부탄올로 추출하였다. n-부탄올 추출물을 물로 세척하고, 진공상태에서 농축시키고 냉동건조하여 어느정도 순수한 BU-3608 염화수소를 얻었다. 고체의 n-부탄올 용액을 알칼리수(pH 9.0)와 혼합하였다. 수성층을 pH 2.0으로 산성화하고 초산에틸로 세척하였다.

n-부탄올로 추출하여 용매를 증발시켜 보다 순수한 BU-3608 HCI시료를 얻었다. 그후 물질을 역상 실리카 겔 크로마토그래피(ODS-60, 350/250 메쉬, Yamamura Chemical Lab., 컬럼 4.5×90㎝)시켰다. 시료를 물에 용해시켜 아세토니트릴-0.15% KH₂PO₄(pH 3.5)=17 : 83(v/v)의 혼합물로 평형시킨 컬럼위에 부었다. 컬럼을 다음의 비율(17 : 83,18 : 82,19 : 81,20 : 80)의 아세토니트릴-0.15% KH₂PO₄혼합물 각 5L로 연속 세척시킨 다음 22 : 78 비율의 동일한 용매 혼합물로 전개시켰다.

용출액을 100㎖씩 모아 C.albicans A9540를 이용한 마이크로 플레이트 분석법 및 얇은 막 크로마토그래피(SiO2, 초산메틸-프로판올-28% 수산화암모늄=45 : 105 : 60 v/v)에 의하여 검사하였다. 주요 균일 화합물을 함유한 분획(fraction)을 모아서 더욱 정제시켜 BU-3608을 얻었다.

상기에 기재된 역상 실라카겔 크로마토그래피 방법에 있어서, 주요 균일 BU-3608 용출의 전, 후의 분획을 모았다. HP-20 수지를 이용하여, 모은 용출액을 탈염시켜 BU-3608B를 함유하는 고체 및 BU-3608C를 함유하는 고체를 얻었다. BU-3608B를 함유하는 고체를 물에 용해시키고 아세토니트릴-0.15% KH₂PO₄(pH 3.5)=22 : 78(v/v) 혼합물로써 완전히 세척한 ODS-60컬럼(Yamamura Chemical Lab., 8.0×90㎝)위에 부었다.

충전된 컬럼을 용축시키는데 동일한 용매 혼합물을 사용하였고 분획들을 모아 HPLC에 의하여 시험하였다.

BU-3608B를 함유한 분획들을 섞고, 진공상태에서 농축시킨 다음 HP-20 수지 크로마토그래피에 의하여 탈염시켜 불순한 BU-3608, 순수 BU-3608 및 BU-3608B를 얻었다. Microsorb Short One C₁₈컬럼(4.6㎜ I.D.×100㎜,3㎛,Rainin Instrument 사)을 이용한 예비 HPLC에 의하여 BU-3608B를 더욱 정제시키고 아세토니트릴-0.15% KH₂PO₄(pH 3.5)=39 : 71(v/v) 혼합물을 사용하여 용출시켰다.

아세토니트릴-0.15% KH₂PO₄(pH 3.5)=21 : 79(v/v) 혼합물을 용출용매로 하여 ODS컬럼을 이용하여 유사한 방법으로 BU-3608C를 함유한 고체를 정제하였다. HPLC를 이용하여 용출액을 모니터하였고 BU-3608C를 함유한 분획을 섞어 진공상태에서 농축시켰다. 이와 같이 얻은 수용액을 HP-20 크로마토그래피에 의하여 탈염시켜 거의 순수한 BU-3608C, 및 거의 순수한 BU-3608을 얻었다.

상기에 기재된 역상 실리카겔 크로마토그래피 방법에 있어서, BU-3608C전에 용출한 유분을 분리수집하여 섞었다. Diaion HP-20 크로마토그래피법을 이용하여 혼합된 엷은 오렌지 색상의 분획을 탈염시켰다. 이와 같이 얻어진 고체는 D 및 E 성분이 상대적으로 풍부하지만 아직 많은 양의 C성분을 함유하고 있었다. 혼합된 고체를 경상 실리카겔 컬럼(ODS-60, Yamamura Chemical Lab., ψ8.0×90㎝) 위에 충전시켜 아세토니트릴-0.15% KH₂PO₄(pH 3.5)=21 : 79(v/v) 혼합물로써 용출시켰다. Microsorb Short One C₁₈컬럼(Rainin Instrument사., 4.6㎜ I.D.×100㎜,3㎛), 유속 1.2㎖/min에서 유동상으로 아세토니트릴-0.15% KH₂PO₄(pH 3.5)=7 : 17(v/v) 혼합물을 이용한 HPLC, 및 검출을 위한 254㎚에서의 UV흡수에 의하여 용출액을 검사하였다.

먼저 BU-3608E를 용출시키고 이어서 BU-3608D를 용출시켰다. BU-3608E 함유 부회들을 섞고, 진공상태에서 농축시킨 다음 HP-20 크로마토그래피에 의하여 탈염시켜 거의 균일한 BU-3608E HCI을 얻었다. BU-3608E HCI의 수용액을 0.1N NaOH로써 pH 5.0으로 조절하여 쯔비터 이온으로서 순수 BU-3608E를 침전시켰다. 유사한 형태로, 쯔비터 이온으로서 BU-3608D를 얻었다.

실시예 3

데스크실로실 BU-3608E(Ⅲc)의 제조

BU-3608E 염화수소(97㎎)의 2N HCI용액(12㎖)을 밀봉된 관속에서 115℃로 70분간 가열시켰다. 이와 같이 얻은 용액에 1N NaOH을 첨가시켜 pH 5.5로 조절한 다음 원심 분리시켰다. 이와 같이 얻어진 고체를 이소프로판올 및 아세톤으로 세척하여 데스크실로실 BU-3608E 87㎎을 얻었다.

M.P. : 205-209℃(분해),

실시예 4

데스크실로실 BU-3608C(Ⅲa)의 제조

BU-3608C HCI를 사용하여 실시예 3에 기재된 방법을 반복 실시하여 표제의 화합물을 수득하였다. M.P. 208-215℃(분해).

실시예 5

N-메틸 BU-3608B(Ⅱ; R²=H; R¹=R³=R⁴=CH₃)의 제조

BU-3608(540㎎)과 2N HCI(60㎖) 화합물을 밀봉관 속에서 115℃로 70분간 가열시킨 다음 냉각시켰다. 이와 같이 얻은 고체물질을 원심분리(3000rpm)에 의하여 수집하고 H₂O에 현탁시킨 다음 6N NaOH를 첨가하여 pH를 11.7로 조절하였다. 상기의 용액(60㎖)을 아세톤(300㎖)에 첨가하여 고체로써 얻은 BU-3608B를 수집하였다. 고체를 H₂O(20㎖)에 용해시키고 1N HCI을 첨가하여 pH을 8.3으로 조절한 다음 CH₃CN 20㎖로써 희석하였다. 수성 HCHO(37%, 0.8㎖) 및 NaBH₃CN(120㎎)을 상온에서 상기의 용액에 연속 첨가하였고 그 용액을 상온에서 15시간 교반하였다. 용매를 진공상태에서 제거시키고 수성 잔류물을 교반된 아세톤에 적가하였다. 아와 같이 얻은 고체를 아세톤으로 세척하고 건조시켜 N-메틸 BU-3608B 나트륨염 440㎎을 얻었다. 이와 같은 염 50㎎을 H₂O에 용해시켜 그 용액을 1NHCI로써 pH 6.0으로 조절하였다. 이와 같이 얻은 고체를 H₂O로 세척하고 냉동건조하여 쯔비터 이온 형태의 표제의 화합물 33㎎을 얻었다.

M.P. 211-215℃(분해),

실시예 6

N,N-디메틸 데스크실로실 BU-3608E (Ⅱ; R¹=R²=H=R³=R⁴=CH₃)의 제조

데스크실로실 BU-3608E(52.9㎎)의 H₂O 용액(5㎖, pH 8.4)을 CH₃CN(5㎖)로써 희석하였다. 수성 HCHO(0.2㎖) 및 NaBH₃CN(30㎎)을 상온에서 상기의 용액에 계속해서 첨가시켜 얻은 용액을 상온에서 14시간동안 교반하였다. 용매를 진공상태에서 제거하고 수성 잔류물(pH 11.3으로 조절)을 아세톤에 교반하면서 적가하였다. 수집된 침전물을 H₂O에 용해시켜 pH 5.5/로 조절하여 고체를 얻었고 H₂O, 이소프로판올 및 아세톤으로 연속 세척하고 건조시켜 N,N-디메틸 데스크실로실 BU-3608E 28.7㎎을 얻었다.

M.P : 205-208℃(분해),

실시예 7

N,N-디메틸 BU-3608E (Ⅱ; R¹=H; R²=D-크실로실; R³=R⁴=CH₃)의 제조

pH 8.0에서 H₂O(40㎖) 및 CH₃CN(40㎖)의 혼합물내의 BU-3608E(485㎎) 용액에 상온에서 HCHO(37%, 1.6㎖) 및 NaBH₃CN(240㎎)H을 연속 첨가하였다. 상기의 용액을 상온에서 15시간 교반하고 그 용매를 진공 상태에서 제거하였다. 잔류물을 H₂O(50㎖)에 용해시키고 pH 11.0으로 조절하여 아세톤(300㎎)에 교반하면서 적가하였다. 이와 같이 얻은 침전물을 수집하여 H₂O에 용해시킨 다음 6N HCI로 pH 2.0으로 조절하였다. HP-20을 통과시켜 상기의 용액을 탈염하였다. 생성물 함유 용액을 pH 5.5로 조절하여 수집될 고체를 침전시키고 H₂O 및 아세톤으로 세척시키고 건조하여 N,N-디메틸 BU-3608E 364㎎을 얻었다.

M.P : 214-218℃(분해),

C₄₀H₄₄N₂O₁₈·1.5H₂O에 대한 분석.

계산치 : C; 55.36, H; 5.46, N; 3.23

실측치 : C; 55.26, H; 5.45, N; 3.19

실시예 8

N-디메틸 BU-3608 (Ⅱ; R¹=R³=R⁴=CH₃; R²=D-크실로실)의 제조

BU-3608 나트륨염(550㎎)의 50% 수용액, CH₃CN(55㎖)의 용액에 교반하면서 HCHO(37%, 0.75㎖) 및 NaBH₃CN(150㎎)을 첨가하였고 그 혼합물을 상오에서 18시간 동안 교반하였다. 농축후에, 수성 농축물을 희석시키고(200㎖) pH 3.0으로 산성화한 다음 HP-20(300㎖)위에 컬럼 크로마토그래피시켰다. 물로 세척하고 이어서 60% 아세톤(pH 3.0) 수용액으로 용출시키고, 적색 용출액을 진공 상태에서 농축시키고 pH 5.5로 조절하여 침전 여과시켜 수집한 결과 N-메틸-BU-3608(425㎎)이 얻어졌다.

M.P. : 190-195℃(분해);

IR(KBr)㎝^-13400, 1605, 1450, 1295;

SI-MS m/z 855(M+H)⁺.

실시예 9

N-프로필 BU-3608 (Ⅱ; R¹=R³=CH₃; R²=D-크실로실; R⁴=(CH₂)₂CH₃)의 제조

BU-3608 나트륨염(200㎎), 프로피온알데히드(1㎖) 및 NaBH₃CN(200㎎)을 사용하여 실시예 8의 일반적인 방법에 딸 N-프로필 BU-3608(127㎎)을 얻었다.

M.P. : 187-192℃(분해);

IR(KBr)㎝^-13380, 1605, 1450, 1295, 1255;

SI-MS m/z 883(M+H)⁺.

실시예 10

BU-3608의 사차 암모늄 유도체(Ⅱ; Y=N(CH₃)₃Cl)의 제조

BU-3608 나트륨염(140㎎)을 술폭시디메틸(5㎖) 및 메탄올(20㎖)에 첨가하고, 상온에서 요오드화메틸(1.5㎖) 및 중탄산 칼륨(200㎎)으로 43시간 동안 처리하였다.

상기의 혼합물을 농축시켜, 0.5N NaOH(20㎖)로써 희석시킨 다음 70℃에서 30분간 방치하였다. 상기의 용액을 pH 3.0으로 조절하고 탈염을 위해 HP-20컬럼(150㎖)을 통과시켰다.

표제화합물을 함유하는 용출액을 증발시켜 조제의 BU-3608 사차 암모늄 유도체의 고체(144㎎)을 얻었다. 조제의 고상체를 CH₃CN-0.15%, KH₂PO₄, pH 3.0(20 : 80)로 용출시켜 역상 실리카겔 크로마토그래피(ψ2.0×45㎝)에 의하여 정제하였다. 용출액을 HPLC에 의하여 시험하였고 순수한 사차 유도체 함유 분획을 모아 HP-20 크로마토그래피(150㎖)에 의하여 탈염시켜 순수한 표제화합물(71㎎)을 얻었다.

M.P. : 205-210℃(분해);

IR(KBr)㎝^-13400, 1620, 1600, 1440, 1225;

SI-MS m/z 869(M⁺);

분자구조식 C₄₂H₄₉N₂O₁₈Cl.

실시예 11

데스크실 BU-3608D(Ⅲb)의 제조

BU-3608D 염화수소를 사용하여 실시예 3에 기재된 방법을 반복 실시한 결과 표제의 화합물이 얻어졌다.

M.P. : 205-211℃(분해).

Claims

다음의 일반식(Ⅱ)을 가진 화합물 또는 약리적으로 허용되는 그의 염.

상기의 일반식에서, R¹은 H이거나, R¹이 메틸이고 생성되는 알라닐이 D-알라닐이며, R²가 H 또는 β-D-크실로실이고, Y가 NR³R⁴또는⁺NR|³R⁴R⁵X^-이며, 이때 R³, R⁴및 R⁵가 동일하거나 서로 다른 C_1-5알킬이고 X^-는 음이온임.
제1항에 있어서, 다음의 구조식을 가진 화합물 또는 약리적으로 허용되는 그의 염.
제1항에 있어서, 다음의 구조식을 가진 화합물 또는 약리적으로 허용되는 그의 염.
제1항에 있어서, 다음의 구조식을 가진 화합물 또는 약리적으로 허용되는 그의 염.
제1항에 있어서, 다음의 구조식을 가진 화합물 또는 약리적으로 허용되는 그의 염.
제1항에 있어서, 다음의 구조식을 가진 화합물 또는 약리적으로 허용되는 그의 염.
제1항에 있어서, 다음의 구조식을 가진 화합물 또는 약리적으로 허용되는 그의 염.
다음의 일반식을 가진 화합물 또는 약리적으로 허용되는 그의 염.

상기의 일반식에서, R¹은 H이며 R³은 H 또는 메틸이거나, 또는 R¹이 CH₃이며 생성되는 알라닐이 D-알라닐이고 R³가 H임.
제8항에 있어서, R¹및 R³가 둘다 H인 화합물 또는 약리적으로 허용되는 그의 염.
제8항에 있어서, R¹이 H이고, R³가 메틸인 화합물 또는 약리적으로 허용되는 그의 염.
제8항에 있어서, R¹이 메틸이며, R³가 H인 화합물 또는 약리적으로 허용되는 그의 염.
제1항 또는 제7항의 화합물의 항진균 유효량으로 된 약제조성물.
다음의 일반식의 화합물 또는 그의 염을 탄소원자수가 1-5개인 알데히드 또는 케론과 반응시켜 이민을 형성한 다음, 그 이민을 환원제로 처리하는 것을 특징으로 하는 Y가 NR³R⁴인 제1항의 화합물의 제조방법.

상기의 일반식에서, R¹및 R²는 제1항에서 정의한 것과 동일하며, R⁶는 H 또는 메틸임.
다음의 일반식의 화합물 또는 그의 염을 사차암모늄 생성물을 제조하기에 충분한 양의 C_1-5인 할로겐화 알킬과 반응시키는 것을 특징으로 하는 Y가⁺NR³R|⁴R⁵X^-인 제1항의 화합물의 제조방법.

상기의 일반식에서, R¹및 R²는 제1항에서 정의한 것과 동일하며, R⁷및 R⁸은 각각 H 또는 C_1-5알킬임.
다음의 일반식의 화합물 또는 그의 염을 무기질산(mineral acid) 존재하에 β-D-크실로실 성분이 분해되기에 충분한 온도 및 기간동안 가열시키는 것을 특징으로 하는 제8항의 화합물의 제조방법.

상기의 일반식에서, R¹및 R³는 제8항에서 정의한 것과 동일함.