KR960015140B1

KR960015140B1 - 정제(錠劑) 우황청심원의 제조 방법

Info

Publication number: KR960015140B1
Application number: KR1019930001908A
Authority: KR
Inventors: 최수부; 박덕현; 신상덕
Original assignee: 최수부
Priority date: 1992-02-10
Filing date: 1993-02-10
Publication date: 1996-11-01
Also published as: KR930017573A

Abstract

내용없음.

Description

정제(錠劑) 우황청심원의 제조 방법

제1도와 제2도는 본 발명의 정제 우황청심원의 용출 특성 곡선.

제3a도 및 제3b도는 본 발명의 정제 우황청심원의 동물에 대한 혈압 및 호흡에 미치는 영향을 나타낸 카이모그래프.

본 발명은 정제(錠劑) 우황청심원의 제조 방법에 관한 것으로서, 더욱 구체적으로는 우황청심원 생약재를 분말화한 추출 엑스와 포접 처리한 용뇌, 사향 및 우황 분말을 주약으로 하여 약학적으로 허용되는 기타 담체들과 더불어 조성한 조성물을 타정(打錠)하여 제피(製皮)하여 된 정제 우황청심원 및 그 제조 방법에 관한 것이다.

우황청심원의 액제화에 관해서는 특허 제39,536호와 특허 공고 제92-10247호 내지 제92-10253호 등이 공지되어 있으나, 이들 선행기술은 산약, 감초, 인삼 등의 우황청심원의 여러가지 주생약재를 물 또는 유기 용매 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 액에 용뇌, 사향 및 우황을 액상으로 한 것과, 약학적으로 허용되는 기타 부형제, 안정제, 방부제 등을 첨가하여 액상으로 제품화하여 용기에 충전하기 때문에 장기간의 제제의 안정성을 유지하기가 어렵고, 복용시 생약재 고유의 악미, 취미로 인하여 비위가 약한 사람이 복용하기에는 부적합한 경우가 많으며, 또한 용기가 주로 유리병으로 되어 있기 때문에 파손될 우려도 많고 휴대하기가 불편하였다.

한편, 특허 출원 제1992-1909호(1992년 2월 10일 출원)(이하, "선출원"이라 함)에 의하면, 즉 생약재의 추출 수단으로서 Tween 80(polyethylene oxide sorbitan mono-oleate)에 의한 초음파 추출법을 이용함으로써 종래의 단순한 환류 추출법 보다 우수한 추출 효율로 생약재를 추출할 수 있었고, 생약 추출액을 펙티나아제(pectinase), 셀룰라아제(cellulase) 또는 이들의 혼합물 등의 효소와 반응시킴으로써 생약중의 유효 성분의 손실없이 그대로 유지하면서 높은 청정도와 안정성을 가진 생약 추출액을 제조할 수 있었으며, 휘발성 또는 승화성이 강하거나 광변색성이고 물에 난용성 또는 불용성인 저항, 용뇌 또는 우황을 β-시클로덱스트린으로 포접 처리하여 포접 화합물(inclusion complex)을 제조함으로써 종래 제조공정 도중 단순 첨가로 인하여 사향, 용뇌 또는 우황에서 나타나는 휘발성 또는 승화성 및 광변색성을 방지함과 아울러 두배 이상의 용출특성을 얻을 수 있었음과 아울러 선출원 발명에 의하여 위와 같이 처리된 각 생약재로 제조된 액제 우황청심원은 그 성상과 약효성분에 변화가 없이 장기간 안정성을 유지할 수 있었다. 그러나, 이 액제 제형을 강제로 제형변경을 할 경우 선출원에 따른 장점 즉, Tween 80에 의한 초음파 추출법에 따른 생약재 추출공정으로 인한 우수한 생약재 추출효과와 포접 화합물 생성으로 사양, 용뇌 또는 우황의 휘발성 또는 승화성 및 광변색성을 방지하는 효과와 더불어, 복용 및 휴대가 편리하고 복용시 붕해가 신속 용이하며, 정확한 용량으로 약효가 신속하고 생약 고유의 이취를 감지할 수 없다는 정제 제형상의 일반적인 장점을 갖춘 정제 우황청심원을 제공할 수 있다.

본 발명의 다른 목적은 우황청심원 생약재의 추출용매에 의한 초음파 추출공정과, 이 방법으로 얻은 추출액의 효소 처리공정 및 이 효소 처리액을 일반적인 방법으로 동결건조 또는 분무건조 처리하여 얻은 추출 엑스분말과, β-시클로덱스트린으로 포접 처리한 우황, 사향, 용뇌의 포접 화합물 용액을 얻고, 이를 일반적인 방법으로 처리하여 얻은 분말을 주약으로하여 약학적으로 허용되는 각종 담체와 더불어 조성한 조성물을 타정한 후 제피함을 특징으로 하는 정제 우황청심원 및 그 제조방법을 제공함에 있다.

이하, 본 발명의 바람직한 실시태양에 대하여 설명한다.

본 발명의 한가지 특징에 의하면, 생약재의 추출 수단에 있어서 추출 용매로는 Tween 80, NaHCO₃, 지방산 에스테르 등의 용액 또는 이들의 혼합액을 사용할 수 있고, 특히 바람직한 용매는 Tween 80이며, 추출 방법은 초음파 추출법을 이용한다.

추출 용매의 사용량은 정제수 1ℓ에 대하여 0.05~0.3w/v%, 보다 바람직하게는 0.1~0.3w/v%이다.

초음파 추출시의 초음파 주파수를 20~50KHz로 하는데, 바람직하게는 25~35KHz, 더욱 바람직하게는 28~30KHz로 한다.

위와 같은 추출 수단을 사용하여 2~3시간 추출한다.

본 발명의 다른 한가지 특징에 의하면, 생약재를 펙티나아제 등과 같은 효소와 더불어 30~60℃에서 2~10시간 진탕 또는 방치한 다음 실온에서 냉침한 후 Tween 80 등과 같은 추출 용매로 초음파 추출하거나, 생약재를 먼저 Tween 80 등과 같은 추출 용매로 초음파 추출한 후 효소와 반응시켜 처리하거나, 또는 생약재를 펙티나아제 등의 효소 및 Tween 80 등의 추출 용매와 함께 30~60℃에서 2~10 시간 진탕 또는 방치한 다음 실온에서 냉침한 후 초음파 추출하고, 이렇게 하여 수득한 효소 처리된 추출액을 먼저 가열하여 비활성화 한 후 멤브레인 여과하고 농축한 다음 분무 건조 또는 동결 건조 처리하거나, 혹은 멤브레인 여과하고 비활성화 한 다음 농축하여 분무 건조 또는 동결 건조 처리하여도 좋다.

동결 건조시에는 시료를 먼저 -30~-50℃로 급속히 동결시키고, 이 동결물을 진공도 1~0.1mmHg 정도의 진공으로 유지하면서 48~72 시간 처리하여 얻은 동결 건조물을 200 메쉬로 분쇄한다. 분무 건조시에는 상온형분무 건조기에서 공지의 방법으로 처리한다.

그리고, 본 발명에 의한 효소 처리 공정에 사용되는 효소로는 펙티나아제[예 : 폴리갈락투로나아제(polygalacturonase), 펙틴 에스테라아제(pectinesterase), 프로토펙티나아제(protopectinase)등]와 셀룰라아제 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있고, 바람직한 것은 펙티나아제, 특히 바람직한 것은 폴리갈락투로나아제이다.

효소의 사용량은 생약재 추출액 1ℓ에 대하여 0.1~0.5w/v%, 바람직하게는 0.1~0.3w/v%이고, 적용 pH 범위는 효소에 따라 약간 차이가 있으나 통상적으로 3.0~7.5, 바람직하게는 3.5~5.5이다.

생약재를 먼저 효소로 처리할 경우 또는 생약재를 먼저 효소 및 Tween 80 등의 추출 용매와 더불어 처리할 경우에는 30~40℃에서 1~10시간 진탕 또는 방치한 다음 실온에서 2일~2주간 냉침한다.

생약재를 먼저 초음파 추출한 다음 효소로 처리할 경우에는 30~60℃, 바람직하게는 40~50℃에서 1시간~10시간 진탕한 다음 여과 또는 원심 분리하거나 추가로 실온에서 1~2시간 방치한 후 여과 또는 원심 분리한다.

위의 경우에 있어서 생약재를 효소 및 Tween 80 등의 추출 용매와 한꺼번에 처리하는 방법은 생약재 효소처리 공정과 생약재 추출 공정을 단시간내에 실시할 수 있는 신속한 추출 및 효소 처리 공정이다. 이 방법 역시 본 발명의 한가지 특징에 속한다.

효소 처리가 끝난 생약 추출액을 80~90℃로 가열하여 잔존하는 효소를 비활성화한다. 위에서 생약재를 먼저 효소와 더불어 냉침한 후 초음파 추출할 경우에는 효소 비활성화 공정을 생략하여도 좋다.

그리고, 효소 비활성화 처리한 액을 위에 나온 바와 마찬가지로 하여 분무 건조 또는 동결 건조하여 분말화한다.

본 발명의 또 다른 한가지 특징에 의하면, 휘발성 또는 승화성이 강한 용뇌나 사향이나 용해성이 불량한 우황을 β-시클로덱스트린을 사용하여 포접 화합물을 형성함으로써 휘발성 또는 승화성을 방지하여 안정성을 증대시키고 용출 특성을 개선하고 있다. 즉, 용뇌, 사향 또는 우황에 대하여 β-시클로덱스트린을 중량비로 1 : 3~1 : 15, 보다 바람직하게는 1 : 5~1 : 9, 더욱 바람직하게는 1 : 5~1 : 7의 비율로 사용하여 포접 화합물을 제조한다.

더욱 구체적으로는, 정제수 1ℓ에 대하여 β-시클로덱스트린을 40~60w/v%로 가하여 70~90℃에서 용해한 다음 30~50℃로 냉각하여 β-시클로덱스트린 용액을 제조한다. 한편, 용뇌의 에탄올 용액[용뇌 : 에탄올=1 : 3~1 : 6(w/v%)], 또는 사향을 디에틸에테르[사향 : 디에틸 에테르=1 : 40~1 : 80(w/v%)]로 추출한 후 에탄올(약전)에 용해한 에탄올 용액, 또는 우황을 클로로포름[우황 : 클로로포름=1 : 20~1 : 40(w/v%)]과 염산을 가해 추출, 농축한 클로로포름 용액을 각각 제조한 다음, 위의 β-시클로덱스트린 용액에 가하고 밀폐된 용기(우황의 경우는 차광도 필요함)중에서 실온~40℃로 유지하면서 2~5시간 균질화한 후 실온에서 10시간~1주간 방치하여 석출한 포접 화합물을 감압 여과하고 위에 나온 바와 마찬가지로 하여 동결 건조 또는 분무 건조하여 분말상의 포접 화합물을 각각 제조한다.

마지막으로, 위의 각 공정에서 제조된 생약재 초음파 추출물의 효소 처리액을 분무 건조 혹은 동결 건조하여 얻은 분말 30~58중량부와 사향 포접 화합물 2~10중량부, 용뇌 포접 화합물 30~40중량부 및 우황 포접 화합물 10~20중량부로 된 혼합물 A를 주약으로 하고, 그리고 약학적으로 허용되는 각종 단체, 즉 점결제, 감미제, 방향제, 부형제, 활택제, 방부제 등을 위의 주약 70~80부에 대하여 20~30부 첨가하고 혼합하여 타정기에서 타정한 후(제피 처리하여) 본 발명의 정제 우황청심원을 제조한다.

또 다른 방법으로서는, 앞서 나온 바 있는 효소 처리된 생약 추출물의 분말, 용뇌, 사향 및 우황의 각 포접 화합물 분말 및 임의의 공지의 감미제, 방향제, 보존제, 부형제, 활택제, 결합제 등을 균일히 혼합하여 제조한 액상의 혼합물을 농축한 다음 분무 건조 또는 동결 건조하거나 또는 그대로 위에 나온 바와 마찬가지로 분무건조 또는 동결 건조하여 분말화하여 정제, 산제, 과립제, 캡슐제 등의 제형으로 함으로써 본 발명이 가지는 특징중 하나인 제제의 용출 특성을 활용할 수도 있다.

즉, 본 발명의 주약을 사용함에 있어서 통상의 담체와 더불어 투여 경로에 따른 제제로 할 수가 있다.

예를 들자면, 경구 투여에서는 정제, 캡슐제, 과립제, 산제 등의 형태로 조제할 수 있는데, 경구 투여용 고형 제제로 조제함에 있어서 관용되고 있는 부형제, 결합제, 활택제, 기타 착색제, 봉해제 등을 사용할 수 있다.

부형제로서는 예컨대 젖당(lactose), 전분, 탈크, 스테아르산 마그네슘, 결정 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 글리세린, 아르긴산 나트륨, 아라비아 고무 등을 들 수 있고, 결합제로서는 폴리비닐 알코올, 폴리비닐에테르, 에틸셀룰로오스, 아라비아 고무, 쉘락, 백당(白糖)등이 있으며, 활택제로서는 스테아르산 마그네슘, 탈크 등이 있다. 기타 착색제, 붕해제도 통상 공지의 것을 사용할 수도 있다. 그리고, 정제는 공지의 방법으로 코우팅하여도 좋다. 붕해제로서는 폴 리비닐피롤리돈이 바람직하다.

이하, 본 발명을 각 실시예에 따라 설명하는데, 본 발명은 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

[제조예]

[실시예 1]

(가) 생약재의 추출 : 0.2% Tween 80에 의한 초음파 추출

정선된 생약 원료 산약 282g, 감초 202g, 백산 97g, 포황 100g, 대두황권 70g, 계피 70g, 작약 60g, 맥문동 60g, 황금 60g, 당귀 60g, 방풍 60g, 백출 60g, 시호 50g, 길경 50g, 행인 50g, 복령 50g, 천궁 50g, 영양각 35g, 백렴 30g, 건강 30g 및 아교 70g을 100 메쉬로 분쇄한 후 초음파 추출기에 넣고, 여기에 정제수(약전)(생약 1kg에 대하여 정제수 10배 양의 비율)를 가하고 Tween 80(polyethylene oxide sorbitan mono-oleate)(정제수 1ℓ에 대하여 2.0g의 비율)을 가한다. 주파수를 28KHz로 조정하여 2시간 추출한 다음 여과하여 여과액을 얻는다.

(나) 생약재의 추출 : 효소 처리 후 Tween 80에 의한 초음파 추출

실시예 1의 (가)에서 사용한 생약 원료(100메쉬 분말)에 정제수(악전)(생약 1kg에 대하여 정제수 10배 양의 비율)를 가하고 효소 폴리갈락투로나아제[2000u/g]를 0.3w/v%(정제수 1ℓ에 대하여 효소 3g의 비율)을 가한 다음 염산을 가하여 pH 4.5로 조정한 후 40℃에서 8시간 진탕한 다음 실온에서 1주간 냉침한다.

이어서, 이 효소 처리물을 초음파 추출기에 넣고 Tween 80(첨가한 정제수 1ℓ에 대하여 2.0g의 비율)을 가한다. 주파수를 28KHz로 조정하여 2시간 추출한 다음 30분 동안 원심 분리(1500r.p.m)하여 그 상징액(上澄液)을 취해 멤브레인 여과하여 여액을 얻는다.

[실시예 2]

생약재 추출액의 효소 처리 및 효소 비활성화

실시예 1의 (가)에서 얻은 생약재의 초음파 추출 여과액에 실시예 1의 (나)에서 사용한 효소를 0.3w/v%(여과액 1ℓ에 대하여 효소 3.0g의 비율)을 가하고 염산을 가하여 pH4.5로 조정한 후 40℃에서 1시간 진탕하면서 효소 반응시킨 다음 30분 동안 원심 분리(1500r.p.m)하여 그 상징액(上澄液)을 취해 95℃에서 10분간 가열 교반하여 잔존하는 효소를 비활성화 한 후 멤브레인 여과하여 여액을 얻는다.

[실시예 3]

분말상 생약재 추출물 분말 제조

실시예 1의 (나)에서 얻은 여과액 또는 실시예 2에서 얻은 상징액을 40℃에서 5시간 감압 농축한 다음, 잔류물을 먼저 -40℃로 급속 동결하고 진공도 0.1mmHg에서 72시간 동안 동결 건조하여 분말상 생약재 추출물을 제조한다.

[실시예 4]

포접 화합물 제조

(가) 용뇌 포접 화합물의 제조

β-시클로덱스트린(이하, "β-CD"라 한다)(특급) 287g에 정제수(약전) 500㎖를 가하고, 80℃에서 용해시킨 다음 40℃로 냉각하여 β-CD 용액을 제조한다.

한편, 용뇌(Borneolum; 생규) 41g을 에탄올(약전) 200㎖에 용해시킨 것을 위의 β-CD 용액에 교반하면서 서서히 첨가한 다음 밀폐된 플라스크 중에서 40℃로 유지하면서 3시간 동안 균질화 한 후, 실온에서 2일간 방치한 다음 실시예 3에서와 마찬가지 방법으로 감압 농축 및 동결 건조시켜 백색 분말의 용뇌 포접 화합물을 제조한다. 이어서, 이 포접 화합물을 드라이 볼 밀에서 3시간 동안 미분쇄하여 200메쉬의 분말을 얻는다.

(나) 사향 포접 화합물의 제조

β-CD(특급) 35g에 정제수(약전) 60㎖를 가하고 80℃에서 용해시킨 다음 40℃로 냉각하여 β-CD 용액을 제조한다.

한편, 사향(Moschus; 약전) 5g을 디에틸에테르(약전) 300㎖을 가하여 추출한 다음 30℃에서 농축한 후 에탄올 (약전) 10㎖에 용해시킨 것을 위의 β-CD 용액에 교반하면서 서서히 첨가한 다음 밀폐된 플라스크 중에서 40℃로 유지하면서 3시간 균질화 한 후, 실온에서 2일간 방치한 다음 실시예 3에서와 마찬가지 방법으로 감압농축 및 동결 건조시켜 사향 포접 화합물을 제조한다. 이어서, 이 포접 화합물을 위의 (가)와 마찬가지 방법으로 미분쇄하여 200 메쉬의 분말을 얻는다.

(다) 우황 포접 화합물의 제조

β-CD(특급) 98g에 정제수(약전) 170㎖를 가하고 80℃에서 용해시킨 다음 40℃로 냉각하여 β-CD 용액을 제조한다.

한편, 차광하에서 우황(Bezoar; 약전) 14g을 미세 분말(100메쉬)로 하고, 여기에 CHCl₃400㎖와 7.5% HCl 50㎖을 가하여 추출한 다음 탈수 여과 및 농축하여 40㎖로 한 것을 위의 β-CD 용액에 교반하면서 서서히 첨가한 다음, 밀폐된 플라스크중에서 40℃로 유지하면서 3시간 균질화 한 후, 실온에서 2일간 방치한 다음 실시예 3에서와 마찬가지 방법으로 감압 농축 및 동결 건조시켜 우황 포접 화합물을 제조한다. 이어서, 이 포접 화합물을 위의 (가)와 마찬가지 방법으로 미분쇄하여 200메쉬의 분말을 얻는다.

[실시예 5]

용뇌, 사향 및 우황 각각에 대하여 β-CD를 중량비로 1 : 3, 1 : 5, 1 : 9, 1 : 11 및 1 : 15로 각각 변화시킨것 외에는 실시예 4의 (가), (나) 및 (다)의 방법에 따라 각각의 포접 화합물을 제조한다.

[실시예 6]

정제 우황청심원 제조

아래의 조제 처방에 따라 실시예 3에서 제조한 생약재 추출물 분말과 실시예 4에서 제조한 용뇌, 사향 및 우황 포접 화합물 분말을 주약으로 하고, 여기에 부형제 각각 일정량을 첨가하여 본 발명의 정제를 제조한다.

(가) 주약 배합 생약 추출물 분말과 용뇌, 사향 및 우황의 포집 화합물을 각각 소요량 만큼 무게를 달아 블렌더에 넣고 30분간 균일히 주약을 제조한다. (나) 부형제 배합 옥수수 전분 및/또는 락토오스를 혼합한 후 메틸셀룰로오스 및/또는 미세 경정질 셀룰로오스 및/또는 카르복시메틸셀룰로오스 및/또는 에어로졸 OT를 가하여 혼합한 다음 폴리비닐피롤리돈을 용해한 이소프로판올액을 가해 충분히 혼합하고, 여기에 스테아르산 및/ 또는 스테아르산 마그네슘을 가하여 혼합한다. (다) 최종 배합 : 위의 (가)의 주약과 (나)의 혼합물을 충분히 혼합한다. (라) 나정(裸錠)제조 및 코우팅, 위의 (가), (나) 및 (다)의 배합물을 균일히 혼합하여 체질[16호체 (節) : 1190㎛]한 다음 V형 혼합기에서 충분히 혼합하여 타정기(打錠機)에서 12㎜ 다이 펀치(die punch)로 2250 ㎏/㎠의 압력으로 타정하여 하나당 550㎎되는 정제를 제조한다. 이 정제를 공지의 방법으로 코우팅한다.

이 정제를 성인의 경우에는 1일 1회 내지 2회로 나누어 1회당 2정씩을 복용한다.

[실험예]

[실험예 1]

실시예 6에서 제조한 본 발명의 정제 우황 청심원에 대하여 용출 시험과 동물에 있어서의 독성 시험, 혈압 및 호흡에 미치는 효과를 시험하였다.

(가) 용출 시험

미합중국 약전 XX I에 준한 용출 시험기를 사용하여 용출 시험 제2법에 따라서 pH5.8 인산 완충액 900㎖를 시험액 용기내에 넣고 37±0.5℃에서 디스크내에 정제 1정을 넣은 후 회전 속도 100r.p.m으로 하여 5분에서 시작하여 5분 간격으로 35분후 까지의 용출액 각각 5㎖ 씩을 탈지면을 끝에 붙인 피펫을 사용하여 정확하에 채취하고 즉시 5㎖의 완충액을 보충하여 용출하였다. 이렇게 용출한 액을 millipore fillter로 여과하고, 이 여액을 검액으로 하여 아래 분석 조건에서 액체 크로마토그라프법에 따라 시험하여 페오니플로닌의 용출율을 계산하였다.

따로 페오니플로닌 표준품 10㎎을 취하여 무수 메탄올 100㎖에 녹여 표준액으로 하였다. 이 시험 결과는 제1도와 제2도에 각각 나와 있다.

[분석 조건] 기기 : Shimadzu LC-6A, 칼럼 : Shimpack CLC-ODS, 검출기 : 자외부 흡광 광도계(측정파장 230nm), 이동상 : 20mM NaH₂PO₄(pH2.6) : CH₃CN (80 : 20), 유속 : 1.2㎖/min, 감도 : 0.16AUFS 주입 체적 2㎕ 제1도와 제2도에서 알 수 있는 바와 같이, 표 1에 있는 배합 처방에 있어서 10분 경과후에는 용출율이 거의 60% 이상을 나타내고 있고, 20분후에는 모두 70% 이상의 용출율을 나타내고 있다. 이것은 종래의 일반 정제와 비교하여 절대적인 경향이라고는 할수 없겠으나 비교의 편의상 종래의 정제에 있어서 20분 경과후의 용해율이 대략 40∼60%인 점을 감안하면(藥硏, 제14호, pp. 3-10, 1983, 숙명여자대학교 약학대학 참조) 본 발명의 정제의 용출 특성이 우수함을 알수 있다.

(나) 동물 시험

현재 중풍, 고혈압, 심장질환 등에 널리 활용되고 있는 우황청심원 환제와 새로운 제형인 정제와의 효력을 실험 동물을 사용하여 급성 독성 및 혈압 및 호흡에 미치는 영향에 관한 실험을 하였다.

[실험 방법]

(1) 실험 동물 :

실험 동물로 체중 18∼25g의 ddy계 수컷 및 암컷 마우스 및 실험 동물로 150∼200g의 Sprague-Dawley계 수컷 및 암컷 래드(rat)를 사용하였고, 집토끼는 체중 1.8∼2.5kg을 사용하였다. 삼양유지 사료(주)의 고형 사료로 사육하였고, 물은 충분히 공급하면서 동일 조건에서 2주간 실험실 환경에 순응시킨 후에 사용하였다.

(2) 급성 독성 시험

마우스와 래트를 각각 암수의 실험군으로 나누고 그것을 3군으로 나누어 각 군 5마리를 사용하여 실험 정제(배향 처방 1)를 유발을 사용하여 미세하게 분쇄한 후, 0.5% CMC-Na 용액에 현탁한 후 투약직전에 표 2에 나와 있는 소정 농도로 조제하여 1일 1회씩 14일간 경구 토여하고, 투여후 동물의 거동 및 사망 여부를 관찰하였다. 또한, 실험 마지막날에 동물을 희생시킨 후 각종 장기의 이상 여부를 관찰하였다.

(3) 혈압 및 호흡에 미치는 영향

집토끼에 우레탄 1.5g/kg을 복강내에 주사하여 마취시킨 후, 통상의 방법에 따라 경동맥에 수은 마노미터가 연결된 캐뉼라를 삽입 결찰하고, 기관에는 기관 tambour가 연결된 캐뉼라를 삽입 결찰하여 협합과 호흡 운동을 동시에 카이모그래프(kymograph) 매연지(煤煙紙) 위에 묘기(描記)하였다.

혈압과 호흡 곡선이 일정하게 되었을 때, 검액을 귀정맥에 주사하여 혈압과 호흡운동의 변화를 관찰하였고, 양쪽 미주(迷走) 신경 절단(Vagotomy) 후의 변화도 관찰하였다. 대조 약물로 아세틸콜린 클로라이드를 사용하였다.

[실험 결과]

(1) 급성 독성 시험

급성 독성을 측정한 결과를 표 2에 표시하였다. 경구로 1kg당, 5,000mg, 8,000mg 및 12,000mg을 투여하여도 동물 모두가 사망하지 않았다. 12,000mg 이상에서는 급성 독성 시험의 필요성이 없었다.

또한, 실험 최종일에 동물들을 치사시키고, 각종 장기를 적출 관찰한 결과 전혀 이상을 발견할 수 없었다.

(2) 혈압 및 호흡에 미치는 영향

제3도에 나타낸 바와 같이, 대조 약물인 아세틸콜린 클로라이드에 대한 검액 100mg/kg 및 50mg/kg을 집토끼의 귀정맥에 주사한 결과, 현저한 혈압 강하 효과가 나타났으며, 호흡에는 별다른 영향을 주지 못하였다.

또한, 양쪽 미주 신경 절단후의 검액 투여에 의해서는 절단전의 검액 동일량 투여에 비하여 혈압 강하 효과는 별다른 차이가 인정되지 않았다.

이상의 실험 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 정제는 그 용출 특성이 양호하고 동물 시험에서는 급성 독성을 12,000mg의 최대한의 투여량에서도 사망예가 없었고, 장기에 이상이 발생하지 않았으며, 혈압 강하 효과가 있었고, 호흡에 대해서는 별다른 영향을 미친 바가 없었으므로 본 발명의 정제는 우황청심원 환제와 그 약리작용에 있어서 별다른 특이한 차이를 발견할 수 없음을 알 수 있다.

Claims

제1공정 : 생약 원료인 산약, 감초, 백삼, 포황, 신곡, 대두황권, 계피, 작약, 맥문동, 황금, 당귀, 방풍, 백출, 시호, 길경, 행인, 복령, 천궁, 영양각, 백렴, 건강 및 아교를 분쇄한 후, 생약원료 1kg에 대하여 정제수 10배 양의 비율로 정제수를 가하고, 생약 원료에 가한 정제수 1ℓ에 대하여 추출용매를 0.05~0.3w/v% 가하여 초음파 추출기에서 주파수를 20∼50kHz로 조정하여 2시간 초음파 추출한 다음 여과하고, 제2공정 : 제1공정에서 얻은 생약재의 초음파 추출 여과액 1ℓ에 대하여 효소를 0.1∼0.5w/v% 가하고 pH3.0~7.5로 조정한 후 3~60℃에서 1~10시간 진탕한 다음 실온에서 1~2주간 냉침한 후 여과 또는 원심 분리한 다음 감압 농축하고, 잔류물을 동결건조 또는 분무건조 처리후 분쇄하여 생약재 추출분말을 제조하고, 제3공정 : 용뇌, 사향 및 우황 각각에 대하여 β-시클로덱스트린을 중량비로 1 : 3~1 : 15 사용하고, 정제수 1ℓ에 대하여 β-시클로덱스트린을 제조하며. 용뇌의 경우는 용뇌 : 에탄올=1 : 3~1 : 6(w/v%)로 된 용액, 사향의 경우는 사향; 디에틸 에테르 =1 : 40~1 : 80(w/v%)의 조건으로 추출한 다음 에탄올에 용해한 용액, 그리고 우황의 경우는 우황; 클로로포름=1 : 20~1 : 40(w/v%)의 조건으로 염산과 함께 추출, 농축한 용액을 각각 위에서 제조한 β-시클로덱스트린 용액에 가하여 실온~40℃에서 2~5시간 균질화하고, 실온에서 10시간~1주간 방치한 후 감압 농축하고, 잔류물을 동결 건조 또는 분무 건조 처리후 분쇄하여 용뇌, 사향 및 우황 각각의 포접 화합물의 분말을 제조하며, 제4공정 : 제2공정의 생약재 추출물의 분말 30∼58중량부와 제3공정의 사향 포접 화합물 2∼10중량부, 우황 포접 화합물 10∼20 중량부 및 용뇌 포접 화합물 30∼40중량부를 혼합하여 주약으로 하고, 이 주약 70∼80 중량부와 약학상 허용되는 담체 혼합물을 20∼30중량부를 혼합하여 타정하여서 되는 정제 우황청심원의 제조방법.
제1항에 있어서, 동결 건조는 -30~-50℃로 진공도 1℃ 0.1mmHg에서 실시하는 제조방법.
제1항에 있어서, 담체 혼합물은 붕해제, 결합제, 활택제, 감미제, 부형제의 혼합물인 제조방법.
생약 원료인 산약, 감초, 백삼, 포황, 신곡, 대두황권, 계피, 작약, 맥문동, 황금, 당귀, 방풍, 백출, 시호, 길경, 행인 복령, 천궁, 영양각, 백렴, 건강 및 아교를 분쇄한 후, 생약 원료 1kg에 대하여 정제수 10배 양의 비율로 정제수를 가하고, 생약 원료에 가한 정제수 1ℓ에 대하여 추출용매를 0.05∼0.3w/v%가 하여 초음파 추출기에서 주파수를 20∼50kHz로 조정하여 2시간 초음파 추출한 다음 여과하는 것을 특징으로 하는 생약재의 추출방법.
제4항에 있어서, 생약 원료인 산약, 감초, 백삼, 포황, 신곡, 대두황권, 계피, 작약, 맥문동, 황금, 당귀, 방풍, 백출, 시호, 길경, 행인 복령, 천궁, 영양각, 백렴, 건강 및 아교를 효소와 더불어 30∼60℃에서 2∼10시간 진탕 처치한 후 초음파 추출하는 것을 특징으로 하는 생약재의 추출방법.
생약 원료인 산약, 감초, 백삼, 포황, 신곡, 대두황권, 계피, 작약, 맥문동, 황금, 당귀, 방풍, 백출, 시호, 길경, 행인, 복령, 천궁, 영양각, 백렴, 건강 및 아교를 분쇄한 후 효소 및 추출용매와 함께 30∼60℃에서 2∼10시간 진탕한 다음 실온에서 냉침한 후 초음파 추출하고 추출액을 가열하고 여과하는 것을 특징으로 하는 생약재의 제조방법.
생약원료인 산약, 감초, 백삼, 포황, 신곡, 대두황권, 계피, 작약, 맥문동, 황금, 당귀, 방풍, 백출, 시호, 길경, 행인, 복령, 천궁, 영양각, 백렴, 건강 및 아교를 분쇄한 후, 생약원료 1kg에 대하여 10배양의 비율로 정제수를 가하고, 생약 원료에 가한 정제수 1ℓ에 대하여 추출용매를 0.05~0.3w/v% 가하여 초음파 추출기에서 20∼50kHz로 조정하여 2시간 초음파 추출한 다음 여과하고, 초음파 추출 여과액 1ℓ에 대하여 효소를 0.1∼0.5w/v% 가하고 pH3.0~7.5로 조정한 후 30~60℃에서 1~10시간 진탕한 다음 실온에서 1~2주간 냉침한 후 여과 또는 원심 분리하는 것을 특징으로 하는 생약재의 추출방법.
용뇌, 사향 및 우황 각각에 대하여 β-시클로덱스트린을 중량비로 1 : 3~1 : 15 사용하고, 정제수 1ℓ에 대하여 β-시클로덱스트린을 40~60w/v%로 가하여 β-시클로덱스트린 용액을 제조하며, 용뇌의 경우는 용뇌 : 에탄올=1 : 3~1 : 6(w/v%)로 된 용액, 사향의 경우는 사향 : 디에틸 에테르 =1 : 40~1 : 80(w/v%)의 조건으로 추출한 다음 에탄올에 용해한 용액, 그리고 우황의 경우는 우황 : 클로로포름=1 : 20~1 : 40(w/v%)의 조건으로 염산과 함께 추출, 농축한 용액을 각각 위에서 제조한 β-시클로덱스트린 용액에 가하여 실온~40℃에서 2~5시간 균질화하고, 실온에서 10시간~1주간 방치하는 것을 특징으로 하는 용뇌, 사향 및 우황의 β-시클로덱스트린 포집체의 제조방법.