KR20230133832A - 항-cd93 구축물 및 그의 용도 - Google Patents

항-cd93 구축물 및 그의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20230133832A
KR20230133832A KR1020237007145A KR20237007145A KR20230133832A KR 20230133832 A KR20230133832 A KR 20230133832A KR 1020237007145 A KR1020237007145 A KR 1020237007145A KR 20237007145 A KR20237007145 A KR 20237007145A KR 20230133832 A KR20230133832 A KR 20230133832A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
amino acid
seq
acid sequence
cdr1
cdr2
Prior art date
Application number
KR1020237007145A
Other languages
English (en)
Inventor
지롱 첸
록산 게레트
그레고리 존스
쉬게루 코마바
지안 리
엔젤라 노튼
리후아 우
지난 시아
Original Assignee
다이내믹큐어 바이오테크놀로지 엘엘씨
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from PCT/US2021/035542 external-priority patent/WO2021247769A1/en
Application filed by 다이내믹큐어 바이오테크놀로지 엘엘씨 filed Critical 다이내믹큐어 바이오테크놀로지 엘엘씨
Publication of KR20230133832A publication Critical patent/KR20230133832A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2851—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the lectin superfamily, e.g. CD23, CD72
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/72—Increased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Abstract

본 출원은 CD93에 결합하는 항-CD93 구축물 (예를 들어, 항-CD93 항체), 항-CD93의 아미노산 서열을 코딩하는 핵산 분자, 핵산 분자를 포함하는 벡터, 벡터를 함유하는 숙주 세포, 항-CD93 구축물을 제조하는 방법, 항-CD93 구축물을 함유하는 제약 조성물, 및 항-CD93 구축물 또는 조성물을 사용하는 방법을 제공한다.

Description

항-CD93 구축물 및 그의 용도
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2020년 7월 29일에 출원된 미국 가출원 63/058,359, 2020년 9월 28일에 출원된 미국 가출원 63/084,474, 및 2021년 6월 2일에 출원된 국제 출원 번호 PCT/US2021/035542에 대한 우선권을 주장하며, 이들의 내용은 모든 목적을 위해 그 전문이 참조로 포함된다.
기술 분야
본 개시내용은 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 항체) 및 그의 용도에 관한 것이다.
ASCII 텍스트 파일의 서열 목록의 제출
ASCII 텍스트 파일의 하기 제출 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다: 서열 목록의 컴퓨터 판독가능 형태 (CRF) (파일명: 193852000243SEQLIST.TXT, 기록된 날짜: 2021년 7월 28일, 크기: 185 KB).
CD93 (분화 클러스터 93)은 인간에서 CD93 유전자에 의해 코딩되는 단백질이다. CD93은 세포-세포 부착 과정뿐만 아니라 숙주 방어에서 소정의 역할을 하는 C-유형 렉틴 막횡단 수용체이다. CD93은 초기에 C1q에 대한 수용체인 것으로 생각되었지만, 현재는 그 대신, 세포간 부착 및 아폽토시스 세포의 클리어런스에 수반되는 것으로 생각된다. 이러한 단백질의 세포내 세포질 꼬리는 CD93 기능에 수반될 수 있는 2개의 고도로 보존된 도메인을 함유한다. 실제로, 고도로 하전된 막근접 도메인은 막횡단 단백질을 세포골격에 연결시키고 세포골격의 리모델링에서 소정의 역할을 하는 것으로 공지된 단백질인 모에신과 상호작용하는 것으로 밝혀졌다. 이러한 과정은 부착, 이동 및 식세포작용에 중요한 것으로 보인다.
본원에 언급된 모든 간행물, 특허, 특허 출원 및 공개된 특허 출원의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
하기 요약은 단지 예시적이며, 어떠한 방식으로도 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 즉, 하기 요약은 신규 분자 및 그의 용도의 강조, 이익 및 이점을 도입하기 위해 제공된다. 따라서, 하기 요약은 청구된 대상의 본질적인 특색을 확인하도록 의도되지도 않고, 청구된 대상의 범주를 결정하는데 사용되도록 의도되지도 않는다.
한 측면에서, 본 출원은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하는 항-CD93 구축물을 제공하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서:
a) VH-2는 서열식별번호(SEQ ID NO): 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
b) VH-2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
c) VH-2는 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
d) VH-2는 서열식별번호: 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
e) VH-2는 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
f) VH-2는 서열식별번호: 81의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 82의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 83의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 84의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
g) VH-2는 서열식별번호: 97의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 98의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 99의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 100의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
h) VH-2는 서열식별번호: 113의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 114의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 116의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
i) VH-2는 서열식별번호: 129의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 130의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 131의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 133의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
j) VH-2는 서열식별번호: 145의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 146의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 147의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 148, 355, 또는 358의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 149 또는 356의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 150, 357 또는 359의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
k) VH-2는 서열식별번호: 161의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 162의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 163의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 164의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 165의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 166의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
l) VH-2는 서열식별번호: 177의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 178의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 179의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 180 또는 353의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 181 또는 354의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
m) VH-2는 서열식별번호: 193의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 194의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 195의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 196의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 197의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 198의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
n) VH-2는 서열식별번호: 209의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 210의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 211의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 212의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 213의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 214의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나; 또는
o) VH-2는 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
p) VH-2는 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL은 i) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL은 i) 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL은 i) 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 81의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 82의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 83의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 84의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 97의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 98의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 99의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 100의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 113의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 114의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 116의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 129의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 130의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 131의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 133의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 145의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 146의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 147의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 148, 355, 또는 358의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 149 또는 356의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 150, 357 또는 359의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 161의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 162의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 163의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 164의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 165의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 166의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 177의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 178의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 179의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 180 또는 353의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 181 또는 354의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 193의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 194의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 195의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 196의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 197의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 198의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 209의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 210의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 211의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 212의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 213의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 214의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
본 출원은 또 다른 측면에서 하기를 포함하는, CD93에 특이적으로 결합하는 항체 모이어티를 포함하는 항-CD93 구축물을 포함한다:
a) 서열식별번호: 13에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 14에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
b) 서열식별번호: 29 및 307-312 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 30, 및 313-318 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
c) 서열식별번호: 45에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 46에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
d) 서열식별번호: 61에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 62에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
e) 서열식별번호: 77에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 78에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
f) 서열식별번호: 93에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 94에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
g) 서열식별번호: 109에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 110에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
h) 서열식별번호: 125에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 126에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
i) 서열식별번호: 141에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 142에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
j) 서열식별번호: 157 및 360-362 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 158, 및 363-365 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
k) 서열식별번호: 173에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 174에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
l) 서열식별번호: 189 및 347-349 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 190, 및 350-352 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
m) 서열식별번호: 205에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 206에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
n) 서열식별번호: 221에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 222에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
o) 서열식별번호: 287 및 319-321 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 288, 및 322-324 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
p) 서열식별번호: 307-312 중 어느 하나에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 313-318 중 어느 하나에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3; 또는
q) 서열식별번호: 319-321 중 어느 하나에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 322-324 중 어느 하나에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3.
상기 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 것에 따른 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 13, 29, 45, 61, 77, 93, 109, 125, 141, 157, 173, 189, 205, 221, 287, 307-312 및 319-321 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고/거나; VL은 서열식별번호: 14, 30, 46, 62, 78, 94, 110, 126, 142, 158, 174, 190, 206, 222, 288, 313-318 및 322-324 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 13의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 14의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 29 및 307-312 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 30, 및 313-318 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 45의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 46의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 61의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 62의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 77의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 78의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 93의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 94의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 109의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 110의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 125의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 126의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 141의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 142의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 157의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 158의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 173의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 174의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 189 및 347-349 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 190 및 350-352 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 205의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 206의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 221의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 222의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 287 및 319-321 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 288 및 322-324 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
상기 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 것에 따른 일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 전장 항체, 이중특이적 항체, 단일-쇄 Fv (scFv) 단편, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2, Fv 단편, 디술피드 안정화된 Fv 단편 (dsFv), (dsFv)2, Fv-Fc 융합체, scFv-Fc 융합체, scFv-Fv 융합체, 디아바디, 트리바디, 및 테트라바디로 이루어진 군으로부터 선택된 항체 또는 그의 항원-결합 단편이다. 일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 전장 항체이다.
상기 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 것에 따른 일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, 및 그의 조합 및 하이브리드로부터의 Fc 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된 Fc 단편을 갖는다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, 및 그의 조합 및 하이브리드로부터의 Fc 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 감소된 이펙터 기능을 갖는다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 증진된 이펙터 기능을 갖는다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 연장된 혈청 반감기를 갖는다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 감소된 혈청 반감기를 갖는다.
상기 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 것에 따른 일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 IGFBP7 (예컨대 인간 IGFBP7)에 대한 CD93의 결합을 차단한다.
상기 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 것에 따른 일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 MMRN2 (예컨대 인간 MMRN2)에 대한 CD93의 결합을 차단한다.
상기 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 것에 따른 일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 a) IGFBP7에 대한 CD93의 결합 및/또는 b) MMRN2에 대한 CD93의 결합을 차단한다.
상기 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 것에 따른 일부 실시양태에서, CD93은 인간 CD93이다.
본 출원은 또 다른 측면에서 상기 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 것 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.
본 출원은 또 다른 측면에서 상기 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 것을 코딩하는 단리된 핵산을 제공한다.
본 출원은 또 다른 측면에서 상기 기재된 단리된 핵산 중 어느 것을 포함하는 벡터를 제공한다.
본 출원은 또 다른 측면에서 상기 기재된 단리된 핵산 또는 벡터 중 어느 것을 포함하는 단리된 숙주 세포를 제공한다.
본 출원은 또 다른 측면에서 치료제 또는 표지에 연결된 상기 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 것을 포함하는 면역접합체를 제공한다.
본 출원은 또 다른 측면에서 a) 제25항의 단리된 숙주 세포를 항-CD93 구축물을 발현하는데 효과적인 조건 하에 배양하는 단계; 및 b) 발현된 항-CD93 구축물을 숙주 세포로부터 수득하는 단계를 포함하는, 항-CD93 구축물을 생산하는 방법을 제공한다.
본 출원은 또 다른 측면에서 개체에게 유효량의 상기 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 것 또는 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 질환 또는 상태를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 비정상적 혈관 구조와 연관된다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 암이다. 일부 실시양태에서, 암은 고형 종양이다. 일부 실시양태에서, 암은 CD93+ 내피 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 암은 IGFBP7+ 혈관을 포함한다. 일부 실시양태에서, 암은 종양 저산소증을 특징으로 한다. 일부 실시양태에서, 암은 국부 진행성 또는 전이성 암이다. 일부 실시양태에서, 암은 림프종, 결장암, 뇌암, 유방암, 난소암, 자궁내막암, 식도암, 전립선암, 자궁경부암, 신암, 방광암, 위암, 비소세포 폐암, 흑색종, 및 췌장암으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 개체에게 비경구로 투여된다. 일부 실시양태에서, 방법은 제2 요법을 투여하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 요법은 수술, 방사선, 유전자 요법, 면역요법, 골수 이식, 줄기 세포 이식, 호르몬 요법, 표적화 요법, 동결요법, 초음파 요법, 광역학 요법, 및 화학요법으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 제2 요법은 면역요법이다. 일부 실시양태에서, 면역요법은 면역조정제를 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 면역조정제는 면역 체크포인트 억제제이다. 일부 실시양태에서, 면역 체크포인트 억제제는 항-PD-L1 항체 또는 항-PD-1 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 개체는 인간이다.
도 1은 인간 또는 시노몰구스 CD93에 대한 16E4 및 MM01의 결합 친화도를 보여준다.
도 2는 CD93-발현 CHO 세포에 대한 다양한 항-CD93 항체의 결합을 보여준다.
도 3a-3d는 다양한 농도에서 mIgG 이소형과 비교하여 16E4 및 MM01에 의한 CD93과 IGFBP7 사이의 상호작용의 억제를 보여준다.
도 4a-4f는 대조군과 비교하여 다양한 항-CD93 항체에 의한 HUVEC 튜브 형성의 억제를 보여준다.
도 5a-5b는 옥텟 경쟁에 의한 다양한 항-CD93 항체의 에피토프 비닝의 결과를 보여준다.
도 6a-6b는 생물층 간섭측정 (BLI) 검정에 의해 측정된 인간 및 시노몰구스 CD93에 대한 다양한 항-CD93 항체의 교차-결합 활성을 보여준다.
도 7a-7b는 카바트 넘버링에 따른 VH 및 VL CDR의 정렬을 보여준다. 위에서 아래로, 도 7a의 서열은 서열식별번호: 393-406이고, 도 7b의 서열은 서열식별번호: 407-420이다.
도 8a-8b는 VBASE2 도구에 의해 결정된 VH 및 VL CDR의 정렬을 보여준다. 위에서 아래로, 도 8a의 서열은 서열식별번호: 393-406이고, 도 8b의 서열은 서열식별번호: 407-420이다.
도 9는 인간 CD93에 대한 10B1 및 7F3의 결합 친화도를 보여준다.
도 10은 인간 CD93-발현 CHO 세포에 대한 16E4, 10B1 및 7F3의 결합 및 CHO-K1 세포에 대한 결합의 결여를 보여준다.
도 11a-11b는 50 μg/mL에서 mIgG 이소형과 비교하여 16E4, 10B1, 및 7F3에 의한 CD93과 MMRN2 사이의 상호작용의 억제를 보여준다.
도 12는 대조군 (IgG2a)과 비교하여 상이한 MMRN2 농도에서 7F3에 의한 CD93과 MMRN2 사이의 상호작용의 억제를 보여준다.
도 13은 대조군 (IgG1)과 비교하여 7F3에 의한 CD93과 MMRN2 사이의 상호작용의 억제를 보여준다.
도 14는 다양한 농도에서 mIgG1 이소형과 비교하여 7F3에 의한 CD93과 IGFBP7 사이의 상호작용의 억제를 보여준다.
도 15a-15b는 대조군과 비교하여 2가지 농도에서 16E4 및 7F3에 의한 HUVEC 튜브 형성의 억제를 보여준다.
도 16은 VEGF를 또한 인식하는 예시적인 다중특이적 항-CD93 구축물을 보여준다.
도 17은 예시적인 항-CD93 구축물로 처리된 마우스에서의 종양 부피를 보여준다.
도 18은 인간화 17B10 항-CD93 항체로 처리된 마우스에서의 종양 부피를 보여준다.
도 19는 유동 세포측정법에 의해 결정된 인간 혈청의 존재 하에서의 1차 HUVEC 세포에 대한 항-CD93 항체의 결합을 보여준다.
도 20은 유동 세포측정법에 의해 결정된 인간 혈청의 부재 하에서의 1차 HUVEC 세포에 대한 항-CD93 항체의 결합을 보여준다.
도 21은 유동 세포측정 검정에 의해 결정된 인간 혈청의 존재 하에서의 hCD93 CHO 세포에 대한 항-CD93 항체의 결합을 보여준다.
도 22는 유동 세포측정 검정에 의해 결정된 U937 세포에 대한 항-CD93 항체의 결합을 보여준다.
도 23-24는 HUVEC 튜브 형성에서 예시적인 인간화 17B10 항체의 억제 효과를 보여준다.
도 25a-25b는 과다발현 인간 CD93 CHO 세포에 대한 예시적인 인간화 17B10 항체의 결합을 보여준다.
도 26a-26b는 KG1a 및 U937 세포에 대한 예시적인 인간화 17B10 항체의 결합을 보여준다.
도 27은 형광 활성화 세포 분류 (FACS) 검정에 의해 결정된 세포 표면 발현 마우스 CD93 CHO 세포에 대한 인간화 항-CD93 항체 17B10의 결합을 보여준다.
도 28은 형광 활성화 세포 분류 (FACS) 검정에 의해 결정된 세포 표면 발현 마우스 CD93 HEK 세포에 대한 예시적인 인간화 17B10 항체의 결합을 보여준다.
도 29는 예시적인 인간화 16E4 항체 및 인간화 7F3 항체의 SDS-PAGE 분석을 보여준다.
도 30은 인간 CD93 (hCD93)에 대한 예시적인 인간화 16E4 및 7F3 항체의 결합의 ELISA 분석을 보여준다.
도 31은 인간 CD93 (hCD93)에 대한 예시적인 h7F3 (인간화 7F3) 항체의 결합의 ELISA 분석을 보여준다.
도 32는 hCD93에 대한 예시적인 하이브리도마 또는 인간화 16E4 항체의 결합의 ELISA 분석을 보여준다.
도 33은 hCD93에 대한 예시적인 하이브리도마 또는 인간화 17B10 항체의 결합의 ELISA 분석을 보여준다.
도 34는 hCD93에 대한 예시적인 인간화 17B10의 결합의 ELISA 분석을 보여준다.
도 35는 CHO-hCD93 세포에 대한 16E4-hIgG1 및 7F3-hIgG1 항체의 결합의 FACS 분석을 보여준다.
도 36은 CHO-hCD93 세포에 대한 인간화 7F3의 결합의 FACS 분석을 보여준다.
도 37은 CHO-hCD93 세포에 대한 h16E4 (인간화 16E4)의 결합의 FACS 분석을 보여준다.
도 38은 HUVEC 세포에 대한 인간화 7F3의 결합의 FACS 분석을 보여준다.
도 39는 KG1a 세포에 대한 인간화 7F3의 결합의 FACS 분석을 보여준다.
도 40은 KG1a 세포에 대한 인간화 16E4의 결합의 FACS 분석을 보여준다.
도 41은 hCD93에 대한 예시적인 16E4 및 7F3 항체의 결합의 동역학적 특징화를 보여준다.
도 42는 hCD93에 대한 예시적인 인간화 16E4 항체의 결합의 동역학적 특징화를 보여준다.
도 43은 옥텟에 의한 인간 CD93, 및 유동 세포측정법에 의해 측정된 인간 CD93 발현 CHO 세포, HUVEC 세포, 또는 KG1a 세포에 대한 예시적인 16E4 및 7F3 항체의 결합 친화도의 요약을 보여준다.
도 44는 CHO-hCD93 세포에 대한 인간 MMRN2의 결합에 대한 인간화 7F3의 차단 효과의 FACS 분석을 보여준다.
도 45는 CHO-hCD93 세포에 대한 MMRN2의 결합에 대한 인간화 16E4 및 7F3 항체의 차단 효과의 FACS 분석을 보여준다.
도 46은 HUVEC 세포에 대한 인간 IGFBP7의 결합에 대한 예시적인 인간화 7F3 항체의 차단 효과의 FACS 분석을 보여준다.
도 47은 인간 CD93에 대한 인간 IGFBP7의 결합에 대한 예시적인 7F3 또는 16E4 항체의 차단 효과의 옥텟 분석을 보여준다.
도 48은 인간 CD93에 대한 인간 IGFBP7의 결합에 대한 예시적인 16E4 항체의 차단 효과의 옥텟 분석을 보여준다.
도 49-50은 HUVEC 튜브 형성에 대한 예시적인 인간화 7F3 및 16E4 항체의 효과를 보여준다.
도 51은 예시적인 항-CD93 항체의 특성의 요약을 보여준다.
본 출원은 CD93에 특이적으로 결합하는 신규 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체), 항-CD93 구축물을 제조하는 방법, 구축물을 사용하는 방법 (예를 들어, 질환 또는 상태를 치료하는 방법)을 제공한다.
항-CD93 항체 (예를 들어, CD93과 IGFBP7 사이의 상호작용을 차단하는 항-CD93 항체)는 효과적으로 종양 또는 암을 치료하고/거나, 비정상적 종양 혈관 혈관신생을 차단하고/거나, 미성숙 및 누출성 종양 혈관을 정상화하고/거나, 종양에서 기능적 혈관망을 촉진하고/거나, 혈관 성숙을 촉진하고/거나, 유리한 종양 미세환경을 촉진하고/거나, 종양에서 면역 세포 침윤을 증가시키고/거나, 종양 관류를 증가시키고/거나, 종양에서 증식증을 감소시키고/거나, 종양을 제2 요법에 대해 감작화시키고/거나, 제2 작용제의 전달을 용이하게 할 수 있다. 예를 들어, WO2021062128A1을 참조하며, 그의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항-CD93 구축물은 종양의 크기를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항-CD93 구축물은 종양에서 면역 세포 침윤을 촉진한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항-CD93 구축물은 종양에서 혈관 성숙을 촉진한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항-CD93 구축물은 종양을 제2 요법에 대해 감작화시키거나 또는 제2 작용제의 전달을 용이하게 한다.
I. 정의
용어 "항체"는 그의 가장 넓은 의미로 사용되고, 목적하는 항원-결합 활성을 나타내는 한, 모노클로날 항체, 폴리클로날 항체, 다중특이적 항체 (예를 들어, 이중특이적 항체), 전장 항체 및 그의 항원-결합 단편을 포함하나 이에 제한되지는 않는 다양한 항체 구조를 포괄한다. 용어 "항체 모이어티"는 전장 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 지칭한다.
전장 항체는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함한다. 경쇄 및 중쇄의 가변 영역은 항원 결합을 담당한다. 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인은 각각 "VH" 및 "VL"로 지칭될 수 있다. 둘 다의 쇄 내의 가변 영역은 일반적으로, 상보성 결정 영역 (CDR) (경쇄 (LC)-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한 LC CDR, 중쇄 (HC)-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3을 포함한 HC CDR)으로 불리는 3개의 고도로 가변성인 루프를 함유한다. 본원에 개시된 항체 및 항원-결합 단편에 대한 CDR 경계는 카바트(Kabat), 코티아(Chothia), 또는 알-라지카니(Al-Lazikani)의 규정에 의해 정의 또는 확인될 수 있다 (Al-Lazikani 1997; Chothia 1985; Chothia 1987; Chothia 1989; Kabat 1987; Kabat 1991). 중쇄 또는 경쇄의 3개의 CDR은 CDR보다 더 고도로 보존되고 초가변 루프를 지지하는 스캐폴드를 형성하는 프레임워크 영역 (FR)으로 공지된 플랭킹 스트레치 사이에 개재된다. 중쇄 및 경쇄의 불변 영역은 항원 결합에 수반되지 않지만, 다양한 이펙터 기능을 나타낸다. 항체는 그의 중쇄의 불변 영역의 아미노산 서열에 기초하여 부류로 배정된다. 항체의 5가지 주요 부류 또는 이소형은 IgA, IgD, IgE, IgG, 및 IgM이며, 이들은 각각 α, δ, ε, γ, 및 μ 중쇄의 존재를 특징으로 한다. 주요 항체 부류 중 몇몇은 하위부류, 예컨대 IgG1 (γ1 중쇄), IgG2 (γ2 중쇄), IgG3 (γ3 중쇄), IgG4 (γ4 중쇄), IgA1 (α1 중쇄), 또는 IgA2 (α2 중쇄)로 나뉜다.
본원에 사용된 용어 "항원-결합 단편"은, 예를 들어 디아바디, Fab, Fab', F(ab')2, Fv 단편, 디술피드 안정화된 Fv 단편 (dsFv), (dsFv)2, 이중특이적 dsFv (dsFv-dsFv'), 디술피드 안정화된 디아바디 (ds 디아바디), 단일-쇄 Fv (scFv), scFv 이량체 (2가 디아바디), 1개 이상의 CDR을 포함하는 항체의 부분으로부터 형성된 다중특이적 항체, 낙타류 단일 도메인 항체, 나노바디, 도메인 항체, 2가 도메인 항체, 또는 항원에 결합하지만 완전한 항체 구조를 포함하지 않는 임의의 다른 항체 단편을 포함한 항체 단편을 지칭한다. 항원-결합 단편은 모 항체 또는 모 항체 단편 (예를 들어, 모 scFv)이 결합하는 동일한 항원에 결합할 수 있다. 일부 실시양태에서, 항원-결합 단편은 1종 이상의 상이한 인간 항체로부터의 프레임워크 영역에 그라프팅된 특정한 인간 항체로부터의 1개 이상의 CDR을 포함할 수 있다.
"Fv"는 완전한 항원-인식 및 -결합 부위를 함유하는 최소 항체 단편이다. 이 단편은 단단하게 비-공유 회합된 1개의 중쇄 및 1개의 경쇄 가변 영역 도메인의 이량체로 이루어진다. 이들 2개의 도메인의 폴딩으로부터 6개의 초가변 루프 (중쇄 및 경쇄로부터 각각 3개의 루프)가 발생하고, 이는 항원 결합을 위한 아미노산 잔기를 제공하고 항체에 항원 결합 특이성을 부여한다. 그러나, 심지어 단일 가변 도메인 (또는 항원에 특이적인 단지 3개의 CDR을 포함하는 Fv의 절반)도, 종종 전체 결합 부위보다 더 낮은 친화도이기는 하지만, 항원을 인식하고 결합하는 능력을 갖는다.
"sFv" 또는 "scFv"로도 약칭되는 "단일-쇄 Fv"는 단일 폴리펩티드 쇄로 연결된 VH 및 VL 항체 도메인을 포함하는 항체 단편이다. 일부 실시양태에서, scFv 폴리펩티드는 scFv가 항원 결합을 위한 목적하는 구조를 형성할 수 있게 하는, VH 및 VL 도메인 사이의 폴리펩티드 링커를 추가로 포함한다. scFv의 검토를 위해, 문헌 [Plueckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, pp. 269-315 (1994)]을 참조한다.
본원에 사용된 용어 "CDR" 또는 "상보성 결정 영역"은 중쇄 및 경쇄 폴리펩티드 둘 다의 가변 영역 내에서 발견되는 비-인접 항원 결합 부위를 의미하는 것으로 의도된다. 이들 특정한 영역은 문헌 [Kabat et al., J. Biol. Chem. 252:6609-6616 (1977); Kabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, "Sequences of proteins of immunological interest" (1991); Chothia et al., J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987); Al-Lazikani B. et al., J. Mol. Biol., 273: 927-948 (1997); MacCallum et al., J. Mol. Biol. 262:732-745 (1996); Abhinandan and Martin, Mol. Immunol., 45: 3832-3839 (2008); Lefranc M.P. et al., Dev. Comp. Immunol., 27: 55-77 (2003); 및 Honegger and Plueckthun, J. Mol. Biol., 309:657-670 (2001)]에 기재되어 있으며, 여기서 정의는 서로 비교하였을 때 아미노산 잔기의 중첩 또는 하위세트를 포함한다. 그럼에도 불구하고, 항체 또는 그라프팅된 항체 또는 그의 변이체의 CDR을 지칭하기 위한 어느 하나의 정의의 적용은 본원에 정의되고 사용된 용어의 범주 내에 있는 것으로 의도된다. 각각의 상기 인용된 참고문헌에 의해 정의된 바와 같은 CDR을 포괄하는 아미노산 잔기가 비교로서 하기 표 1에 제시된다. CDR 예측 알고리즘 및 인터페이스는 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 예를 들어 문헌 [Abhinandan and Martin, Mol. Immunol., 45: 3832-3839 (2008); Ehrenmann F. et al., Nucleic Acids Res., 38: D301-D307 (2010); 및 Adolf-Bryfogle J. et al., Nucleic Acids Res., 43: D432-D438 (2015)]을 포함한다. 이 단락에서 인용된 참고문헌의 내용은 본 출원에서의 사용 및 본원의 1개 이상의 청구범위에서의 가능한 포함을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 CDR 서열은 IMGT 정의에 기초한다. 예를 들어, CDR 서열은 VBASE2 도구에 의해 결정될 수 있다 (http://www.vbase2.org/vbase2.php, 또한 문헌 [Retter I, Althaus HH, Muench R, Mueller W: VBASE2, an integrative V gene database. Nucleic Acids Res. 2005 Jan 1; 33 (Database issue): D671-4] 참조, 이는 그 전문이 본원에 참조로 포함됨).
표 1: CDR 정의
Figure pct00001
1잔기 넘버링은 상기 문헌 [Kabat et al.]의 명명법을 따른다
2잔기 넘버링은 상기 문헌 [Chothia et al.]의 명명법을 따른다
3잔기 넘버링은 상기 문헌 [MacCallum et al.]의 명명법을 따른다
4잔기 넘버링은 상기 문헌 [Lefranc et al.]의 명명법을 따른다
5잔기 넘버링은 상기 문헌 [Honegger and Plueckthun]의 명명법을 따른다
표현 "카바트에서와 같은 가변-도메인 잔기-넘버링" 또는 "카바트에서와 같은 아미노산-위치 넘버링" 및 그의 변형은 상기 문헌 [Kabat et al.]에서 항체 편집의 중쇄 가변 도메인 또는 경쇄 가변 도메인에 사용된 넘버링 시스템을 지칭한다. 이러한 넘버링 시스템을 사용하여, 실제 선형 아미노산 서열은 가변 도메인의 FR 또는 초가변 영역 (HVR)의 단축 또는 그 내로의 삽입에 상응하는 보다 적은 또는 추가의 아미노산을 함유할 수 있다. 예를 들어, 중쇄 가변 도메인은 H2의 잔기 52 다음에 단일 아미노산 삽입 (카바트에 따라 잔기 52a), 및 중쇄 FR 잔기 82 다음에 삽입된 잔기 (예를 들어, 카바트에 따라 잔기 82a, 82b, 및 82c 등)를 포함할 수 있다. 잔기의 카바트 넘버링은 항체 서열의 상동성 영역에서 "표준" 카바트 넘버링된 서열과 정렬함으로써 주어진 항체에 대해 결정될 수 있다.
본원에 달리 나타내지 않는 한, 이뮤노글로불린 중쇄 내의 잔기의 넘버링은 상기 문헌 [Kabat et al.]에서와 같은 EU 인덱스의 넘버링이다. "카바트에서와 같은 EU 인덱스"는 인간 IgG1 EU 항체의 잔기 넘버링을 지칭한다.
"프레임워크" 또는 "FR" 잔기는 본원에 정의된 바와 같은 CDR 잔기 이외의 가변 도메인 잔기이다.
비-인간 (예를 들어, 설치류) 항체의 "인간화" 형태는 비-인간 항체로부터 유래된 최소 서열을 함유하는 키메라 항체이다. 대부분의 경우에, 인간화 항체는 수용자의 초가변 영역 (HVR)으로부터의 잔기가 목적하는 항체 특이성, 친화도, 및 능력을 갖는 비-인간 종 (공여자 항체), 예컨대 마우스, 래트, 토끼 또는 비-인간 영장류의 초가변 영역으로부터의 잔기에 의해 대체된 인간 이뮤노글로불린 (수용자 항체)이다. 일부 경우에, 인간 이뮤노글로불린의 프레임워크 영역 (FR) 잔기는 상응하는 비-인간 잔기에 의해 대체된다. 또한, 인간화 항체는 수용자 항체 또는 공여자 항체에서 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 이들 변형은 항체 성능을 추가로 정밀화하기 위해 이루어진다. 일반적으로, 인간화 항체는 적어도 1개, 전형적으로 2개의 가변 도메인을 실질적으로 모두 포함할 것이며, 여기서 모든 또는 실질적으로 모든 초가변 루프는 비-인간 이뮤노글로불린의 것에 상응하고, 모든 또는 실질적으로 모든 FR은 인간 이뮤노글로불린 서열의 것이다. 인간화 항체는 또한 임의로 이뮤노글로불린 불변 영역 (Fc)의 적어도 한 부분, 전형적으로 인간 이뮤노글로불린의 것을 포함할 것이다. 추가의 세부사항에 대해서는, 문헌 [Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-329 (1988); 및 Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596 (1992)]을 참조한다.
"인간 항체"는 인간에 의해 생산된 항체의 것에 상응하는 아미노산 서열을 보유하고/거나 본원에 개시된 바와 같은 인간 항체를 제조하기 위한 기술 중 어느 것을 사용하여 제조된 항체이다. 인간 항체의 이러한 정의는 구체적으로 비-인간 항원-결합 잔기를 포함하는 인간화 항체를 배제한다. 인간 항체는 파지-디스플레이 라이브러리를 비롯한 관련 기술분야에 공지된 다양한 기술을 사용하여 생산될 수 있다. 문헌 [Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol., 227:381 (1991); Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581 (1991)]. 또한, 문헌 [Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985); Boerner et al., J. Immunol., 147(1):86-95 (1991)]에 기재된 방법이 인간 모노클로날 항체의 제조에 이용가능하다. 또한, 문헌 [van Dijk and van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol., 5: 368-74 (2001)]을 참조한다. 인간 항체는 항원 챌린지에 반응하여 이러한 항체를 생산하도록 변형되었지만 내인성 유전자좌는 무력화된 트랜스제닉 동물, 예를 들어 면역화된 제노마우스에 항원을 투여하는 것에 의해 제조될 수 있다 (예를 들어, 제노마우스(XENOMOUSE)™ 기술에 관한 미국 특허 번호 6,075,181 및 6,150,584 참조). 또한, 예를 들어 인간 B-세포 하이브리도마 기술을 통해 생성된 인간 항체에 관한 문헌 [Li et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103:3557-3562 (2006)]을 참조한다.
본원에서 확인된 폴리펩티드 및 항체 서열에 대한 "퍼센트 (%) 아미노산 서열 동일성" 또는 "상동성"은 서열 동일성의 일부로서 임의의 보존적 치환을 고려하여 서열을 정렬한 후에 비교되는 폴리펩티드 내의 아미노산 잔기와 동일한 후보 서열 내의 아미노산 잔기의 백분율로서 정의된다. 퍼센트 아미노산 서열 동일성을 결정하기 위한 목적의 정렬은 관련 기술분야의 기술 내에 있는 다양한 방식으로, 예를 들어 공중 이용가능한 컴퓨터 소프트웨어, 예컨대 BLAST, BLAST-2, ALIGN, 메갈라인 (DNASTAR), 또는 MUSCLE 소프트웨어를 사용하여 달성될 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 비교되는 서열의 전장에 걸쳐 최대 정렬을 달성하는데 필요한 임의의 알고리즘을 포함하여, 정렬을 측정하기 위한 적절한 파라미터를 결정할 수 있다. 그러나, 본원의 목적을 위해, % 아미노산 서열 동일성 값은 서열 비교 컴퓨터 프로그램 MUSCLE를 사용하여 생성된다 (Edgar, R.C., Nucleic Acids Research 32(5):1792-1797, 2004; Edgar, R.C., BMC Bioinformatics 5(1):113, 2004).
"상동"은 2개의 폴리펩티드 사이 또는 2개의 핵산 분자 사이의 서열 유사성 또는 서열 동일성을 지칭한다. 2개의 비교된 서열 둘 다에서의 위치가 동일한 염기 또는 아미노산 단량체 서브유닛에 의해 점유된 경우에, 예를 들어 2개의 단백질 분자 각각에서의 위치가 리신에 의해 점유된 경우에, 또는 2개의 DNA 분자 각각에서의 위치가 아데닌에 의해 점유된 경우에, 분자는 그 위치에서 상동이다. 2개의 서열 사이의 상동성의 퍼센트는 2개의 서열에 의해 공유되는 매칭 또는 상동 위치의 수를 비교된 위치의 수로 나눈 것 x 100의 함수이다. 예를 들어, 2개의 서열에서 위치 10개 중 6개가 매칭되거나 상동이면, 2개의 서열은 60% 상동이다. 예로서, 단백질 서열 SGTSTD 및 TGTSDA는 50% 상동성을 공유한다. 일반적으로, 비교는 2개의 서열이 최대 상동성을 제공하도록 정렬된 경우에 이루어진다.
용어 "불변 도메인"은 항원-결합 부위를 함유하는 이뮤노글로불린의 다른 부분인 가변 도메인에 비해 보다 보존된 아미노산 서열을 갖는 이뮤노글로불린 분자의 부분을 지칭한다. 불변 도메인은 중쇄의 CH1, CH2 및 CH3 도메인 (집합적으로, CH) 및 경쇄의 CHL (또는 CL) 도메인을 함유한다.
임의의 포유동물 종으로부터의 항체 (이뮤노글로불린)의 "경쇄"는 그의 불변 도메인의 아미노산 서열에 기초하여 카파 ("κ") 및 람다 ("λ")로 불리는 2종의 명확하게 구분되는 유형 중 1종으로 배정될 수 있다.
"CH1 도메인" (또한 "H1" 도메인의 "C1"로도 지칭됨)은 통상적으로 약 아미노산 118에서 약 아미노산 215까지에 이른다 (EU 넘버링 시스템).
"힌지 영역"은 일반적으로 인간 IgG1의 Glu216에서 Pro230에 상응하는 IgG 내의 영역으로 정의된다 (Burton, Molec. Immunol.22:161-206 (1985)). 다른 IgG 이소형의 힌지 영역은 중쇄간 S-S 결합을 형성하는 제1 및 마지막 시스테인 잔기를 동일한 위치에 배치하는 것에 의해 IgG1 서열과 정렬될 수 있다.
인간 IgG Fc 영역의 "CH2 도메인" (또한 "C2" 도메인으로도 지칭됨)은 통상적으로 약 아미노산 231에서 약 아미노산 340까지에 이른다. CH2 도메인은 또 다른 도메인과 밀접하게 쌍형성하지 않는다는 점에서 독특하다. 오히려, 2개의 N-연결된 분지형 탄수화물 쇄가 무손상 천연 IgG 분자의 2개의 CH2 도메인 사이에 개재된다. 탄수화물은 도메인-도메인 쌍형성에 대한 대체물을 제공하고 CH2 도메인의 안정화를 도울 수 있는 것으로 추측되었다. 문헌 [Burton, Molec Immunol. 22:161-206 (1985)].
"CH3 도메인" (또한 "C2" 도메인으로도 지칭됨)은 Fc 영역에서 CH2 도메인에 대해 C-말단인 잔기의 스트레치 (즉, 항체 서열의 약 아미노산 잔기 341에서 C-말단 단부, 전형적으로 IgG의 아미노산 잔기 446 또는 447까지)를 포함한다.
본원에서 용어 "Fc 영역" 또는 "결정화가능 단편 영역"은 천연-서열 Fc 영역 및 변이체 Fc 영역을 포함한 이뮤노글로불린 중쇄의 C-말단 영역을 정의하기 위해 사용된다. 이뮤노글로불린 중쇄의 Fc 영역의 경계는 달라질 수 있지만, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 통상적으로 위치 Cys226에서의 아미노산 잔기로부터 또는 Pro230으로부터 그의 카르복실-말단까지의 스트레치로 정의된다. Fc 영역의 C-말단 리신 (EU 넘버링 시스템에 따라 잔기 447)은, 예를 들어 항체의 생산 또는 정제 동안, 또는 항체의 중쇄를 코딩하는 핵산을 재조합적으로 조작하는 것에 의해 제거될 수 있다. 따라서, 무손상 항체의 조성물은 모든 K447 잔기가 제거된 항체 집단, K447 잔기가 제거되지 않은 항체 집단, 및 K447 잔기를 갖는 항체와 갖지 않는 항체의 혼합물을 갖는 항체 집단을 포함할 수 있다. 본원에 기재된 항체에 사용하기에 적합한 천연-서열 Fc 영역은 인간 IgG1, IgG2 (IgG2A, IgG2B), IgG3 및 IgG4를 포함한다.
"Fc 수용체" 또는 "FcR"은 항체의 Fc 영역에 결합하는 수용체를 기재한다. 바람직한 FcR은 천연 서열 인간 FcR이다. 또한, 바람직한 FcR은 IgG 항체에 결합하는 것 (감마 수용체)이고, FcγRI, FcγRII, FcRN, 및 FcγRIII 하위부류의 수용체 (이들 수용체의 대립유전자 변이체 및 대안적으로 스플라이싱된 형태 포함)를 포함하고, FcγRII 수용체는 FcγRIIA ("활성화 수용체") 및 FcγRIIB ("억제 수용체")를 포함하며, 이들은 주로 그의 세포질 도메인에서 상이한 유사한 아미노산 서열을 갖는다. 활성화 수용체 FcγRIIA는 그의 세포질 도메인에 면역수용체 티로신-기반 활성화 모티프 (ITAM)를 함유한다. 억제 수용체 FcγRIIB는 그의 세포질 도메인에 면역수용체 티로신-기반 억제 모티프 (ITIM)를 함유한다. (문헌 [M. Daeeron, Annu. Rev. Immunol. 15:203-234 (1997)] 참조). FcRN은 항체의 증가된 혈청 반감기를 허용하는 혈액으로의 항체의 재순환에 중요하다. FcR은 문헌 [Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9: 457-92 (1991); Capel et al., Immunomethods 4: 25-34 (1994); 및 de Haas et al., J. Lab. Clin. Med. 126: 330-41 (1995)]에서 검토된다. 향후 확인될 것을 포함한 다른 FcR이 본원의 용어 "FcR"에 포괄된다.
본원에 사용된 용어 "에피토프"는 항체 또는 항체 모이어티가 결합하는 항원 상의 특정 원자단 또는 아미노산을 지칭한다. 2개의 항체 또는 항체 모이어티는 이들이 항원에 대해 경쟁적 결합을 나타내는 경우에 항원 내의 동일한 에피토프에 결합할 수 있다.
본원에 사용된 바와 같이, 제1 항체 또는 그의 단편은, 제1 항체 또는 그의 단편이 제2 항체 또는 그의 단편의 표적 항원 결합을 등몰 농도의 제1 항체 또는 그의 단편의 존재 하에 적어도 약 50% (예컨대 적어도 약 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99% 중 어느 하나) 억제하거나, 또는 그 반대의 경우에, 표적 항원에의 결합에 대해 제2 항체 또는 그의 단편과 "경쟁한다". 교차-경쟁에 기초하여 항체를 "비닝"하는 고처리량 공정은 PCT 공개 번호 WO 03/48731에 기재되어 있다.
본원에 사용된 용어 "특이적으로 결합한다", "특이적으로 인식하는" 및 "에 특이적이다"는 생물학적 분자를 포함하는 분자의 불균질 집단의 존재 하에 표적의 존재를 결정하는, 측정가능하고 재현가능한 상호작용, 예컨대 표적과 항체 또는 항체 모이어티 사이의 결합을 지칭한다. 예를 들어, 표적 (에피토프일 수 있음)을 특이적으로 인식하는 항체 또는 항체 모이어티는 다른 표적에 대한 그의 결합보다 더 큰 친화도, 결합력으로, 더 용이하게, 및/또는 더 큰 지속기간으로 이러한 표적에 결합하는 항체 또는 항체 모이어티이다. 일부 실시양태에서, 비관련 표적에 대한 항체의 결합의 정도는, 예를 들어 방사선면역검정 (RIA)에 의해 측정 시에 표적에 대한 항체의 결합의 약 10% 미만이다. 일부 실시양태에서, 표적에 특이적으로 결합하는 항체는 ≤10-5 M, ≤10-6 M, ≤10-7 M, ≤10-8 M, ≤10-9 M, ≤10-10 M, ≤10-11 M, 또는 ≤10-12 M의 해리 상수 (KD)를 갖는다. 일부 실시양태에서, 항체는 상이한 종으로부터의 단백질 사이에 보존된 단백질 상의 에피토프에 특이적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 특이적 결합은 배타적 결합을 포함할 수 있지만, 이를 필요로 하지 않는다. 항체 또는 항원-결합 도메인의 결합 특이성은 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 실험적으로 결정될 수 있다. 이러한 방법은 웨스턴 블롯, ELISA-, BLI, RIA-, ECL-, IRMA-, EIA-, 비아코어(BIACORE)™-시험 및 펩티드 스캔을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 분자 A (예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 항-CD93 구축물)는 분자 B (예를 들어, CD93) 및 분자 C (예를 들어, IGFBP7 또는 MMRN2)의 결합을 "차단"하고, 이는 직접 차단 및 간접 차단 둘 다를 지칭한다. 예를 들어, IGFBP7 또는 MMRN2 결합을 담당하는 CD93 상의 결합 부위의 적어도 한 부분을 점유함으로써 CD93 및 IGFBP7 또는 MMRN2의 결합을 직접 차단하는 대신에, 본원에 기재된 바와 같은 항-CD93 구축물은 CD93 및 IGFBP7/MMRN2가 결합할 수 없도록 CD93의 구조를 변경시킴으로써 CD93 및 IGFBP7 또는 MMRN2의 결합을 차단할 수 있다.
"단리된" 또는 "정제된" 항체 (또는 구축물)는 그의 생산 환경의 성분 (예를 들어, 천연 또는 재조합)으로부터 확인, 분리 및/또는 회수된 것이다. 바람직하게는, 단리된 폴리펩티드는 그의 생산 환경으로부터의 모든 다른 성분과의 회합이 존재하지 않는다.
본원에 기재된 구축물, 항체, 또는 그의 항원-결합 단편을 코딩하는 "단리된" 핵산 분자는 그것이 생산된 환경에서 그와 통상적으로 회합되는 적어도 1종의 오염 핵산 분자로부터 확인 및 분리된 핵산 분자이다. 바람직하게는, 단리된 핵산은 생산 환경과 연관된 모든 성분과의 회합이 존재하지 않는다. 본원에 기재된 폴리펩티드 및 항체를 코딩하는 단리된 핵산 분자는 자연에서 발견되는 형태 또는 세팅 이외의 형태이다. 따라서, 단리된 핵산 분자는 세포에 자연적으로 존재하는 본원에 기재된 폴리펩티드 및 항체를 코딩하는 핵산과 구별된다. 단리된 핵산은 핵산 분자를 통상적으로 함유하는 세포에 함유된 핵산 분자를 포함하지만, 핵산 분자는 염색체외에 또는 그의 천연 염색체 위치와 상이한 염색체 위치에 존재한다.
용어 "제어 서열"은 특정한 숙주 유기체에서 작동가능하게 연결된 코딩 서열의 발현에 필요한 DNA 서열을 지칭한다. 원핵생물에 적합한 제어 서열은 예를 들어 프로모터, 임의로 오퍼레이터 서열, 및 리보솜 결합 부위를 포함한다. 진핵 세포는 프로모터, 폴리아데닐화 신호, 및 인핸서를 이용하는 것으로 공지되어 있다.
핵산은 또 다른 핵산 서열과 기능적 관계로 배치될 때 "작동가능하게 연결"된다. 예를 들어, 프리서열 또는 분비 리더에 대한 DNA는 폴리펩티드의 분비에 참여하는 프리단백질로서 발현되는 경우에 폴리펩티드에 대한 DNA에 작동가능하게 연결되거나; 프로모터 또는 인핸서는 서열의 전사에 영향을 미치는 경우에 코딩 서열에 작동가능하게 연결되거나; 또는 리보솜 결합 부위는 번역을 용이하게 하도록 위치하는 경우에 코딩 서열에 작동가능하게 연결된다. 일반적으로, "작동가능하게 연결된"은 연결되는 DNA 서열이 인접하고, 분비 리더의 경우에는 인접하고 리딩 프레임 내에 있다는 것을 의미한다. 그러나, 인핸서는 인접해야 하는 것은 아니다. 연결은 편리한 제한 부위에서의 라이게이션에 의해 달성된다. 이러한 부위가 존재하지 않는 경우에, 합성 올리고뉴클레오티드 어댑터 또는 링커가 통상적인 실시에 따라 사용된다.
본원에 사용된 용어 "벡터"는 그에 연결된 또 다른 핵산을 증식시킬 수 있는 핵산 분자를 지칭한다. 용어는 자기-복제 핵산 구조로서의 벡터뿐만 아니라 그것이 도입된 숙주 세포의 게놈 내로 혼입된 벡터를 포함한다. 특정 벡터는 그것이 작동가능하게 연결된 핵산의 발현을 지시할 수 있다. 이러한 벡터는 본원에서 "발현 벡터"로 지칭된다.
본원에 사용된 용어 "형질감염된" 또는 "형질전환된" 또는 "형질도입된"은 외인성 핵산이 숙주 세포 내로 전달 또는 도입된 과정을 지칭한다. "형질감염된" 또는 "형질전환된" 또는 "형질도입된" 세포는 외인성 핵산으로 형질감염, 형질전환 또는 형질도입된 것이다. 세포는 1차 대상체 세포 및 그의 자손을 포함한다.
용어 "숙주 세포", "숙주 세포주" 및 "숙주 세포 배양물"은 상호교환가능하게 사용되고, 외인성 핵산이 도입된 세포 (이러한 세포의 자손 포함)를 지칭한다. 숙주 세포는 "형질전환체" 및 "형질전환된 세포"를 포함하며, 이는 1차 형질전환된 세포 및 계대 횟수와 관계없이 그로부터 유래된 자손을 포함한다. 자손은 모 세포와 핵산 함량이 완전히 동일하지 않을 수 있고, 돌연변이를 함유할 수 있다. 원래 형질전환된 세포에 대해 스크리닝 또는 선택된 것과 동일한 기능 또는 생물학적 활성을 갖는 돌연변이체 자손이 본원에 포함된다.
용어 "면역접합체"는 항체, 예컨대 본원에 기재된 항체 모이어티에 대한 치료제 또는 검출가능한 표지의 공유 연결에 대한 언급을 포함한다. 연결은 직접적일 수 있거나 또는 링커 (예컨대 펩티드 링커)를 통한 간접적일 수 있다.
본원에 사용된 "치료" 또는 "치료하는"은 임상 결과를 포함한 유익하거나 목적하는 결과를 수득하기 위한 접근법이다. 본 출원의 목적상, 유익하거나 목적하는 임상 결과는 하기 중 1종 이상을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다: 질환으로부터 발생하는 1종 이상의 증상을 완화시키는 것, 질환의 정도를 감소시키는 것, 질환을 안정화시키는 것 (예를 들어, 질환의 악화를 방지 또는 지연시키는 것), 질환의 확산 (예를 들어, 전이)을 방지 또는 지연시키는 것, 질환의 재발을 방지 또는 지연시키는 것, 질환의 진행을 지연 또는 둔화시키는 것, 질환 상태를 호전시키는 것, 질환의 (부분 또는 전체) 완화를 제공하는 것, 질환을 치료하는데 요구되는 1종 이상의 다른 의약의 용량을 감소시키는 것, 질환의 진행을 지연시키는 것, 삶의 질을 증가 또는 개선시키는 것, 체중 증가를 증가시키는 것, 및/또는 생존을 연장시키는 것. 암의 병리학적 결과 (예컨대, 예를 들어, 종양 부피)의 감소가 또한 "치료"에 포괄된다. 본 출원의 방법은 이들 치료 측면 중 어느 하나 이상을 고려한다.
암과 관련하여, 용어 "치료하는"은 암 세포의 성장의 억제, 암 세포의 복제의 억제, 전체 종양 부담의 경감 및 질환과 연관된 1종 이상의 증상의 호전 중 어느 것 또는 모두를 포함한다.
용어 "억제" 또는 "억제하다"는 임의의 표현형 특징의 감소 또는 중지, 또는 그러한 특징의 발생, 정도, 또는 가능성의 감소 또는 중지를 지칭한다. "감소시키다" 또는 "억제하다"는 참조와 비교하여 활성, 기능, 및/또는 양을 저감, 감소 또는 정지시키는 것이다. 특정 실시양태에서, "감소시키다" 또는 "억제하다"는 20% 이상의 전체 저감을 유발하는 능력을 의미한다. 또 다른 실시양태에서, "감소시키다" 또는 "억제하다"는 50% 이상의 전체 저감을 유발하는 능력을 의미한다. 또 다른 실시양태에서, "감소시키다" 또는 "억제하다"는 75%, 85%, 90%, 95%, 또는 그 초과의 전체 저감을 유발하는 능력을 의미한다.
본원에 사용된 "참조물"은 비교 목적을 위해 사용되는 임의의 샘플, 표준물, 또는 수준을 지칭한다. 참조물은 건강한 및/또는 비-이환 샘플로부터 수득될 수 있다. 일부 예에서, 참조물은 비치료 샘플로부터 수득될 수 있다. 일부 예에서, 참조물은 개체의 비-이환 또는 비-치료 샘플로부터 수득된다. 일부 예에서, 참조물은 개체 또는 환자가 아닌 하나 이상의 건강한 개체로부터 수득된다.
본원에 사용된 "질환의 발생을 지연시키는"은 질환 (예컨대 암)의 발생을 연기, 저해, 둔화, 지체, 안정화, 억제 및/또는 늦추는 것을 의미한다. 이러한 지연은 치료될 질환 및/또는 개체의 병력에 따라 다양한 시간 길이일 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백한 바와 같이, 충분한 또는 유의한 지연은 사실상 개체에서 질환이 발생하지 않는다는 점에서 예방을 포괄할 수 있다. 예를 들어, 후기 암, 예컨대 전이의 발생이 지연될 수 있다.
본원에 사용된 "예방하는"은 질환에 대한 소인이 있을 수 있지만 아직 질환으로 진단되지 않은 개체에서 질환의 발생 또는 재발과 관련하여 예방을 제공하는 것을 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, 기능 또는 활성을 "억제하는" 것은 관심 조건 또는 파라미터를 제외한 다른 것은 동일한 조건과 비교하였을 때, 또는 대안적으로 또 다른 조건과 비교하여, 기능 또는 활성을 감소시키는 것이다. 예를 들어, 종양 성장을 억제하는 항체는 항체의 부재 하의 종양의 성장 속도와 비교하여 종양의 성장 속도를 감소시킨다.
용어 "대상체", "개체", 및 "환자"는 인간, 소, 말, 고양이, 개, 설치류, 또는 영장류를 포함하나 이에 제한되지는 않는 포유동물을 지칭하는 것으로 본원에서 상호교환가능하게 사용된다. 일부 실시양태에서, 개체는 인간이다.
작용제의 "유효량"은 필요한 투여량에서 필요한 기간 동안 목적하는 치료 또는 예방 결과를 달성하는데 효과적인 양을 지칭한다. 구체적 용량은 선택된 특정한 작용제, 이어질 투여 요법, 다른 화합물과 조합되어 투여되는지 여부, 투여 시기, 영상화될 조직, 및 수행될 물리적 전달 시스템 중 1종 이상에 따라 달라질 수 있다.
본 출원의 물질/분자, 효능제 또는 길항제의 "치료 유효량"은 개체의 질환 상태, 연령, 성별, 및 체중, 및 개체에서 목적하는 반응을 도출하는 물질/분자, 효능제 또는 길항제의 능력과 같은 인자에 따라 달라질 수 있다. 치료 유효량은 또한 물질/분자, 효능제 또는 길항제의 임의의 독성 또는 유해 효과를 치료상 유익한 효과가 능가하는 양이다. 치료 유효량은 1회 이상의 투여로 전달될 수 있다.
"예방 유효량"은 필요한 투여량에서 필요한 기간 동안 목적하는 예방 결과를 달성하는데 효과적인 양을 지칭한다. 반드시는 아니지만 전형적으로, 예방 용량은 질환 전에 또는 질환의 보다 초기 단계에 대상체에서 사용되기 때문에, 예방 유효량은 치료 유효량 미만일 것이다.
용어 "제약 제제" 및 "제약 조성물"은 활성 성분(들)의 생물학적 활성이 효과적이도록 하는 형태로 존재하고, 제제가 투여될 개체에게 허용되지 않는 독성인 추가의 성분을 함유하지 않는 제제를 지칭한다. 이러한 제제는 멸균성일 수 있다.
"제약상 허용되는 담체"는 개체에게 투여하기 위한 "제약 조성물"을 함께 구성하는, 치료제와 함께 사용하기 위한 관련 기술분야에서 통상적인 비-독성 고체, 반고체, 또는 액체 충전제, 희석제, 캡슐화 물질, 제제 보조제, 또는 담체를 지칭한다. 제약상 허용되는 담체는 사용되는 투여량 및 농도에서 수용자에게 비-독성이고, 제제의 다른 성분과 상용성이다. 제약상 허용되는 담체는 사용되는 제제에 적절하다.
"멸균" 제제는 무균성이거나 또는 살아있는 미생물 및 그의 포자가 본질적으로 없다.
1종 이상의 추가의 치료제"와 조합하여" 투여하는 것은 동시 (공동) 투여 및 임의의 순서로의 연속 또는 순차적 투여를 포함한다.
용어 "공동으로"는 투여의 적어도 일부가 시간상 중첩되거나 또는 하나의 치료제의 투여가 다른 치료제의 투여에 비해 단기간 내에 속하는 2종 이상의 치료제의 투여를 지칭하는 것으로 본원에 사용된다. 예를 들어, 2종 이상의 치료제는 약 60분 이하, 예컨대 약 30, 15, 10, 5, 또는 1분 중 어느 것 이하의 시간 간격으로 투여된다.
용어 "순차적으로"는 1종 이상의 작용제(들)의 투여가 1종 이상의 다른 작용제(들)의 투여를 중단한 후에 계속되는 2종 이상의 치료제의 투여를 지칭하는 것으로 본원에 사용된다. 예를 들어, 2종 이상의 치료제의 투여는 약 15분 초과, 예컨대 약 20, 30, 40, 50, 또는 60분, 1일, 2일, 3일, 1주, 2주, 또는 1개월, 또는 그 초과 중 어느 것의 시간 간격으로 투여된다.
본원에 사용된 "와 함께"는 하나의 치료 양식에 더하여 또 다른 치료 양식의 투여를 지칭한다. 따라서, "와 함께"는 하나의 치료 양식을, 개체에게 다른 치료 양식을 투여하기 전에, 그 동안 또는 그 후에 투여하는 것을 지칭한다.
용어 "패키지 삽입물"은 이러한 치료 제품의 사용에 관한 적응증, 용법, 투여량, 투여, 조합 요법, 금기사항 및/또는 경고에 대한 정보를 함유하는, 치료 제품의 상업용 패키지에 통상적으로 포함되는 지침서를 지칭하는데 사용된다.
"제조 물품"은 적어도 1종의 시약, 예를 들어 질환 또는 장애 (예를 들어, 암)의 치료를 위한 의약, 또는 본원에 기재된 바이오마커를 특이적으로 검출하기 위한 프로브를 포함하는 임의의 제조품 (예를 들어, 패키지 또는 용기) 또는 키트이다. 특정 실시양태에서, 제조품 또는 키트는 본원에 기재된 방법을 수행하기 위한 유닛으로서 홍보, 유통, 또는 판매된다.
본원에 기재된 본 출원의 실시양태는 실시양태로 "이루어진 것" 및/또는 "본질적으로 이루어진 것"을 포함하는 것으로 이해된다.
본원에서 "약" 값 또는 파라미터에 대한 언급은 그러한 값 또는 파라미터 그 자체에 대한 변동을 포함 (및 기재)한다. 예를 들어, "약 X"를 언급하는 기재는 "X"의 기재를 포함한다.
본원에 사용된 값 또는 파라미터에 대해 언급된 "않는"은 일반적으로 값 또는 파라미터 "이외의 다른"을 의미하고 기재한다. 예를 들어, 방법이 유형 X의 암을 치료하는데 사용되지 않는다는 것은 방법이 X이외의 다른 유형의 암을 치료하는데 사용된다는 것을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "약 X-Y"는 "약 X 내지 약 Y"와 동일한 의미를 갖는다.
본원 및 첨부된 청구범위에 사용된 단수 형태는 문맥이 달리 명백하게 지시하지 않는 한 복수 지시대상을 포함한다.
II. 항-CD93 구축물
본 출원은 본원에 기재된 바와 같은 CD93에 특이적으로 결합하는 항-CD93 항체 모이어티를 포함하는 항-CD93 구축물을 제공한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 12의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 13에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 14에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 13의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 14의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 23의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 24의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 27의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 28의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 29 및 307-312 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 30, 및 313-318 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 29 및 307-312 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 30, 및 313-318 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 39의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 40의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 41의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 42의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 43의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 44의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 45에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 46에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 45의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 46의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 55의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 56의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 57의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 58의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 59의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 60의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 61에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 62에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 61의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 62의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 71의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 72의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 73의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 74의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 75의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 76의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 77에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 78에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 77의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 78의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 81의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 82의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 83의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 84의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 81의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 82의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 83의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 84의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 87의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 88의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 89의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 90의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 91의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 92의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 81의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 82의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 83의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 84의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 93에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 94에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 93의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 94의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 97의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 98의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 99의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 100의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 97의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 98의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 99의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 100의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 103의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 104의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 105의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 106의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 107의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 108의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 97의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 98의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 99의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 100의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 109에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 110에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 109의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 110의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 113의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 114의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 116의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 113의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 114의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 116의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 119의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 120의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 121의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 122의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 123의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 124의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 113의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 114의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 116의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 125에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 126에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 125의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 126의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 129의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 130의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 131의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 133의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 129의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 130의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 131의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 133의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 135의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 136의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 137의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 138의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 139의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 140의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 129의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 130의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 131의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 133의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 141에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 142에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 141의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 142의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 145의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 146의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 147의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 148, 355, 또는 358의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 149 또는 356의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 150, 357 또는 359의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 145의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 146의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 147의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 148, 355, 또는 358의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 149 또는 356의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 150, 357 또는 359의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 151의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 152의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 153의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 154의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 155의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 156의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 145의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 146의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 147의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 148, 355, 또는 358의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 149 또는 356의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 150, 357, 또는 359의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 157 및 360-362 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 158, 및 363-365 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 157 및 360-362 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 158, 및 363-365 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 157의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 158의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 360의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 363의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 360의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 364의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 360의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 365의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 361의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 363의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 361의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 364의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 361의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 365의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 362의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 363의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 362의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 364의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 362의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 365의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 161의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 162의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 163의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 164의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 165의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 166의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 161의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 162의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 163의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 164의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 165의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 166의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 167의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 168의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 169의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 170의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 171의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 172의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 161의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 162의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 163의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 164의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 165의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 166의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 173에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 174에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 173의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 174의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 177의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 178의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 179의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 180 또는 353의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 181 또는 354의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 177의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 178의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 179의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 180 또는 353의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 181 또는 354의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 177의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 178의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 179의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 180의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 181의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 183의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 184의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 185의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 186의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 187의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 188의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 177의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 178의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 179의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 180 또는 353의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 181 또는 354의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 189 및 347-349 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 190, 및 350-352 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 189 및 347-349 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 190 및 350-352 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 189의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 190의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 347의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 350의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 347의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 351의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 347 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 352 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 348의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 350의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 348의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 351의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 348의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 352의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 349의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 350의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 349의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 351의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 349의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 352의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 193의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 194의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 195의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 196의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 197의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 198의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 193의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 194의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 195의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 196의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 197의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 198의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 199의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 200의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 201의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 202의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 203의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 204의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 193의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 194의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 195의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 196의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 197의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 198의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 205에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 206에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 205의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 206의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 209의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 210의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 211의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 212의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 213의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 214의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 209의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 210의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 211의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 212의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 213의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 214의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 215의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 216의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 217의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 218의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 219의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 220의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 209의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 210의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 211의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 212의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 213의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 214의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 221에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 222에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 221의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 222의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 295의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 296의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 297의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 298의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 299의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 300의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 287 및 319-321 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 288, 및 322-324 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 287 및 319-321 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 288 및 322-324 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 287, 및 319-321 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 288, 및 322-324 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 319-321 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 322-324 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 319의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 322의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 319의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 323의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 319의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 324의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 320의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 322의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 320의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 323의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 320의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 324의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 321의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 322의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 321의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 323의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 321의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 324의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 301의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 302의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 303의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 301의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 302의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 303의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 서열식별번호: 29, 및 307-312 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 30, 및 313-318 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 307-312 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 313-318 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 307의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 313의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 307의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 314의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 307의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 315의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 307의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 316의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 307의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 317의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 307의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 318의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 308의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 313의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 308의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 314의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 308의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 315의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 308의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 316의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 308의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 317의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 308의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 318의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 309의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 313의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 309의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 314의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 309의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 315의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 309의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 316의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 309의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 317의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 309의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 318의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 310의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 313의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 310의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 314의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 310의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 315의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 310의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 316의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 310의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 317의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 310의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 318의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 311의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 313의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 311의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 314의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 311의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 315의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 311의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 316의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 311의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 317의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 311의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 318의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 312의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 313의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 312의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 314의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 312의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 315의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 312의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 316의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 312의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 317의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 312의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 318의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하고, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 아미노산 서열 RIFPGDGDX1X2YX3GKFKG (서열식별번호: 233)를 포함하며, 여기서 X1X2는 AN 또는 TD이고/거나, X3은 N 또는 D인 HC-CDR2, 및 iii) 아미노산 서열 TGAAYX1FDPFPY (서열식별번호: 234)를 포함하며, 여기서 X1은 D 또는 E인 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 아미노산 서열 SSX1KSLLHSX2GX3TYLY (서열식별번호: 235)를 포함하며, 여기서 X1은 S 또는 T이고/거나, X2는 N 또는 S이고/거나, X3은 V 또는 I인 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하고, 여기서 VH는 i) 아미노산 서열 X1YWX2N (서열식별번호: 236)을 포함하며, 여기서 X1은 S 또는 T이고/거나, X2는 L 또는 M인 HC-CDR1, ii) 아미노산 서열 RIX1PGDGDX2X3YX4GKFKG (서열식별번호: 237)를 포함하며, 여기서 X1은 Y 또는 F이고/거나, X2X3은 TD 또는 AN이고/거나, X4는 N 또는 D인 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 35, 163, 및 179로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고; VL은 i) 아미노산 서열 X1X2X3KSLLHSX4GX5TYLY (서열식별번호: 238)를 포함하며, 여기서 X1X2X3은 SSS, SST, 또는 RFS이고/거나, X4는 N 또는 S이고/거나, X5=V 또는 I인 LC-CDR1, ii) 아미노산 서열 X1MSNLAS (서열식별번호: 239)를 포함하며, 여기서 X1은 R 또는 Q인 LC-CDR2, 및 iii) 아미노산 서열 AQX1LEX2PX3T (서열식별번호: 240)를 포함하며, 여기서 X1은 M 또는 N이고/거나, X2는 R 또는 L이고/거나, X3은 F 또는 W인 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, LC-CDR3은 서열식별번호: 38, 166, 및 182로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하고, 여기서 VH는 i) 아미노산 서열 X1YVX2H (서열식별번호: 241)를 포함하며, 여기서 X1은 A 또는 S이고/거나, X2는 M 또는 I인 HC-CDR1, ii) 아미노산 서열 YIX1PYX2DX3TX4YNEKFKG (서열식별번호: 242)를 포함하며, 여기서 X1은 F 또는 N이고/거나, X2는 N 또는 S이고/거나, X3은 G 또는 Y이고/거나, X4는 E 또는 Q인 HC-CDR2, 및 iii) 아미노산 서열 RX1DGNPYX2MDY (서열식별번호: 243)를 포함하며, 여기서 X1은 T 또는 A이고/거나, X2는 T 또는 A인 HC-CDR3을 포함하고; VL은 i) 아미노산 서열 KASQDVSTAVX1 (서열식별번호: 244)을 포함하며, 여기서 X1은 A 또는 V인 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, LC-CDR3은 서열식별번호: 115 또는 221에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하고, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; 여기서 VL은 i) KASQX1VX2TX3VX4 (서열식별번호: 245)의 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 X1은 N 또는 D이고/거나, X2는 G 또는 S이고/거나, X3은 N 또는 A이고/거나, X4는 A 또는 V인 LC-CDR1, ii) SASYRX1X2 (서열식별번호: 246)의 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 a) X1은 F 또는 Y이고, X2는 I 또는 T이거나, 또는 b) X1X2는 FI 또는 YT인 LC-CDR2, 및 iii) 아미노산 서열 QQX1X2X3X4PX5T (서열식별번호: 247)를 포함하며, 여기서 X1X2X3X4는 YNRN 또는 HYST이고/거나, X5는 I 또는 F인 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, LC-CDR3은 서열식별번호: 6, 118, 또는 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, LC-CDR3은 서열식별번호: 6에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하고, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 113의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 114의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; 여기서 VL은 i) KASQX1VX2TX3VX4 (서열식별번호: 245)의 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 X1은 N 또는 D이고/거나, X2는 G 또는 S이고/거나, X3은 N 또는 A이고/거나, X4는 A 또는 V인 LC-CDR1, ii) SASYRX1X2 (서열식별번호: 246)의 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 a) X1은 F 또는 Y이고, X2는 I 또는 T이거나, 또는 b) X1X2는 FI 또는 YT인 LC-CDR2, 및 iii) 아미노산 서열 QQX1X2X3X4PX5T (서열식별번호: 247)를 포함하며, 여기서 X1X2X3X4는 YNRN 또는 HYST이고/거나, X5는 I 또는 F인 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, LC-CDR3은 서열식별번호: 6, 118, 또는 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, LC-CDR3은 서열식별번호: 118에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하고, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 209의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 210의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 211의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; 여기서 VL은 i) KASQX1VX2TX3VX4 (서열식별번호: 245)의 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 X1은 N 또는 D이고/거나, X2는 G 또는 S이고/거나, X3은 N 또는 A이고/거나, X4는 A 또는 V인 LC-CDR1, ii) SASYRX1X2 (서열식별번호: 246)의 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 a) X1은 F 또는 Y이고, X2는 I 또는 T이거나, 또는 b) X1X2는 FI 또는 YT인 LC-CDR2, 및 iii) 아미노산 서열 QQX1X2X3X4PX5T (서열식별번호: 247)를 포함하며, 여기서 X1X2X3X4는 YNRN 또는 HYST이고/거나, X5는 I 또는 F인 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, LC-CDR3은 서열식별번호: 6, 118, 또는 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, LC-CDR3은 서열식별번호: 214에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하고, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; 여기서 VL은 i) X1ASQSVX2X3X4X5X6SYMX7 (서열식별번호: 248)의 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 X1은 K 또는 R이고/거나, X2X3X4X5X6은 DYAGD 또는 STSSY이고/거나, X7은 N 또는 H인 LC-CDR1, ii) X1ASNLES (서열식별번호: 249)의 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 X1은 A 또는 Y인 LC-CDR2, 및 iii) 아미노산 서열 QX1X2X3X4X5PX6T (서열식별번호: 250)를 포함하며, 여기서 X1X2X3X4X5는 QTNED 또는 HSWEI이고/거나, X6은 R 또는 F인 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, LC-CDR3은 서열식별번호: 22 또는 54에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, LC-CDR3은 서열식별번호: 22에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하고, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; 여기서 VL은 i) X1ASQSVX2X3X4X5X6SYMX7 (서열식별번호: 248)의 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 X1은 K 또는 R이고/거나, X2X3X4X5X6은 DYAGD 또는 STSSY이고/거나, X7은 N 또는 H인 LC-CDR1, ii) X1ASNLES (서열식별번호: 249)의 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 X1은 A 또는 Y인 LC-CDR2, 및 iii) 아미노산 서열 QX1X2X3X4X5PX6T (서열식별번호: 250)를 포함하며, 여기서 X1X2X3X4X5는 QTNED 또는 HSWEI이고/거나, X6은 R 또는 F인 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, LC-CDR3은 서열식별번호: 22 또는 54에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, LC-CDR3은 서열식별번호: 54에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 구축물은 전장 항체, 이중특이적 항체, 단일-쇄 Fv (scFv) 단편, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2, Fv 단편, 디술피드 안정화된 Fv 단편 (dsFv), (dsFv)2, VHH, Fv-Fc 융합체, scFv-Fc 융합체, scFv-Fv 융합체, 디아바디, 트리바디, 및 테트라바디로 이루어진 군으로부터 선택된 항체 또는 그의 항원-결합 단편이거나 또는 이를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 전장 항체이다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 scFv이다.
일부 실시양태에서, 상기 기재된 항-CD93 항체 모이어티는 IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, 및 그의 조합 및 하이브리드로 이루어진 군으로부터 선택된 이뮤노글로불린의 Fc 단편을 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 항-CD93 항체 모이어티 또는 전장 항체는 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, 및 그의 조합 및 하이브리드로 이루어진 군으로부터 선택된 이뮤노글로불린의 Fc 단편을 포함한다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 감소된 이펙터 기능을 갖는다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 증진된 이펙터 기능을 갖는다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 증가된 혈청 반감기를 위해 변경되었다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 감소된 혈청 반감기를 위해 변경되었다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 본원에 기재된 항체 모이어티 중 어느 것의 인간화 항체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 항-CD93 융합 단백질이거나 또는 이를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 다중특이적 항-CD93 구축물 (예컨대 이중특이적 항체)이거나 또는 이를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 항-CD93 면역접합체이거나 또는 이를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 CD93 및 IGFBP7의 결합을 차단한다. 일부 실시양태에서, IGFBP7은 인간 IGFBP7이다. 일부 실시양태에서, IGFBP7에 대한 CD93의 결합은 항-CD93 항체와 CD93 또는 CD93-발현 세포의 사전-인큐베이션 후에 적어도 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 그 초과만큼 차단된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 및 CD93의 용량은 약 1:10, 1:6, 1:3, 1:1.5, 1:1, 4:3, 2:1, 또는 5:1의 비이다. 일부 실시양태에서, IGFBP7에 대한 CD93의 결합은 약 50 μg/ml, 25 μg/ml, 10 μg/ml, 5 μg/ml, 2 μg/ml, 1 μg/ml, 0.8 μg/ml, 0.6 μg/ml, 또는 0.4 μg/ml의 농도에서의 항-CD93 항체의 사전-인큐베이션 후에 적어도 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 그 초과만큼 차단된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 CD93 및 MMRN2의 결합을 차단한다. 일부 실시양태에서, MMRN2는 인간 MMRN2이다. 일부 실시양태에서, MMRN2는 MMRN2495-674 단편이다. 일부 실시양태에서, MMRN2에 대한 CD93의 결합은 항-CD93 항체와 CD93 또는 CD93-발현 세포의 사전-인큐베이션 후에 적어도 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 그 초과만큼 차단된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 CD93 및 MMRN2의 결합을 차단하지 않는다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 IGFBP7 및 MMRN2 둘 다에 대한 CD93의 결합을 차단한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 CD93과 IGFBP7 사이의 상호작용을 차단하지 않는다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 CD93과 MMRN2 사이의 상호작용을 차단하지 않는다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 IGFBP7 또는 MMRN2 사이의 상호작용을 차단하지 않는다.
일부 실시양태에서, CD93은 인간 CD93이다.
a) 항체 친화도
항체 모이어티의 결합 특이성은 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 실험적으로 결정될 수 있다. 이러한 방법은 웨스턴 블롯, ELISA-, RIA-, ECL-, IRMA-, EIA-, BLI, 비아코어™-시험, 유동 세포측정법 및 펩티드 스캔을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티와 CD93 사이의 결합의 KD는 약 10-7 M 내지 약 10-12 M, 약 10-7 M 내지 약 10-8 M, 약 10-8 M 내지 약 10-9 M, 약 10-9 M 내지 약 10-10 M, 약 10-10 M 내지 약 10-11 M, 약 10-11 M 내지 약 10-12 M, 약 10-7 M 내지 약 10-12 M, 약 10-8 M 내지 약 10-12 M, 약 10-9 M 내지 약 10-12 M, 약 10-10 M 내지 약 10-12 M, 약 10-7 M 내지 약 10-11 M, 약 10-8 M 내지 약 10-11 M, 약 10-9 M 내지 약 10-11 M, 약 10-7 M 내지 약 10-10 M, 약 10-8 M 내지 약 10-10 M, 또는 약 10-7 M 내지 약 10-9 M이다. 일부 실시양태에서, 항체 모이어티와 CD93 사이의 결합의 KD는 약 10-7 M, 10-8 M, 10-9 M, 10-10 M, 10-11 M, 또는 10-12 M 중 어느 하나보다 더 강하다. 일부 실시양태에서, CD93은 인간 CD93이다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티와 CD93 사이의 결합의 Kon은 약 103 M-1s-1 내지 약 108 M-1s-1, 약 103 M-1s-1 내지 약 104 M-1s-1, 약 104 M-1s-1 내지 약 105 M-1s-1, 약 105 M-1s-1 내지 약 106 M-1s-1, 약 106 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 또는 약 107 M-1s-1 내지 약 108 M-1s-1이다. 일부 실시양태에서, 항체 모이어티와 CD93 사이의 결합의 Kon은 약 103 M-1s-1 내지 약 105 M-1s-1, 약 104 M-1s-1 내지 약 106 M-1s-1, 약 105 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 약 106 M-1s-1 내지 약 108 M-1s-1, 약 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 또는 약 105 M-1s-1 내지 약 108 M-1s-1이다. 일부 실시양태에서, 항체 모이어티와 CD93 사이의 결합의 Kon은 약 103 M-1s-1, 104 M-1s-1, 105 M-1s-1, 106 M-1s-1, 107 M-1s-1 또는 108 M-1s-1 중 어느 하나 이하이다. 일부 실시양태에서, CD93은 인간 CD93이다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티와 CD93 사이의 결합의 Koff는 약 1 s-1 내지 약 10-6 s-1, 약 1 s-1 내지 약 10-2 s-1, 약 10-2 s-1 내지 약 10-3 s-1, 약 10-3 s-1 내지 약 10-4 s-1, 약 10-4 s-1 내지 약 10-5 s-1, 약 10-5 s-1 내지 약 10-6 s-1, 약 1 s-1 내지 약 10-5 s-1, 약 10-2 s-1 내지 약 10-6 s-1, 약 10-3 s-1 내지 약 10-6 s-1, 약 10-4 s-1 내지 약 10-6 s-1, 약 10-2 s-1 내지 약 10-5 s-1, 또는 약 10-3 s-1 내지 약 10-5 s-1이다. 일부 실시양태에서, 항체 모이어티와 CD93 사이의 결합의 Koff는 적어도 약 1 s-1, 10-2 s-1, 10-3 s-1, 10-4 s-1, 10-5 s-1 또는 10-6 s-1 중 어느 하나이다. 일부 실시양태에서, CD93은 인간 CD93이다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티 또는 항-CD93 구축물의 결합 친화도는 기존 항-CD93 항체 (예를 들어, 항-인간 CD93 항체, 예를 들어 MM01)보다 더 높다 (예를 들어, 더 작은 KD 값을 가짐).
b) 키메라 또는 인간화 항체
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 키메라 항체이다. 특정 키메라 항체는 예를 들어 미국 특허 번호 4,816,567; 및 문헌 [Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855 (1984)]에 기재되어 있다. 일부 실시양태에서, 키메라 항체는 비-인간 가변 영역 (예를 들어, 마우스로부터 유래된 가변 영역) 및 인간 불변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 키메라 항체는 부류 또는 하위부류가 모 항체의 것으로부터 변화된 "부류 전환된" 항체이다. 키메라 항체는 그의 항원-결합 단편을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체는 인간화 항체이다. 전형적으로, 비-인간 항체는 모 비-인간 항체의 특이성 및 친화도를 보유하면서 인간에 대한 면역원성을 감소시키기 위해 인간화된다. 일반적으로, 인간화 항체는 HVR에서 예를 들어 CDR (또는 그의 부분)이 비-인간 항체로부터 유래되고 FR (또는 그의 부분)이 인간 항체 서열로부터 유래된 것인 1개 이상의 가변 도메인을 포함한다. 인간화 항체는 임의로 또한 인간 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 것이다. 일부 실시양태에서, 인간화 항체 내의 일부 FR 잔기는, 예를 들어 항체 특이성 또는 친화도를 회복 또는 개선시키기 위해 비-인간 항체 (예를 들어, HVR 잔기가 유래된 항체)로부터의 상응하는 잔기로 치환된다.
인간화 항체 및 그의 제조 방법은 예를 들어 문헌 [Almagro and Fransson, Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008)]에서 검토되고, 예를 들어 문헌 [Riechmann et al., Nature 332:323-329 (1988); Queen et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 86:10029-10033 (1989)]; 미국 특허 번호 5,821,337, 7,527,791, 6,982,321, 및 7,087,409; [Kashmiri et al., Methods 36:25-34 (2005) (SDR (a-CDR) 그라프팅 기재); Padlan, Mol. Immunol. 28:489-498 (1991) ("재표면화" 기재); Dall'Acqua et al., Methods 36:43-60 (2005) ("FR 셔플링" 기재); 및 Osbourn et al., Methods 36:61-68 (2005) and Klimka et al., Br. J. Cancer, 83:252-260 (2000) (FR 셔플링에 대한 "유도 선택" 접근법 기재)]에 추가로 기재되어 있다.
인간화에 사용될 수 있는 인간 프레임워크 영역은 "최적-피트" 방법을 사용하여 선택된 프레임워크 영역 (예를 들어, 문헌 [Sims et al., J. Immunol. 151:2296 (1993)] 참조); 경쇄 또는 중쇄 가변 영역의 특정한 하위군의 인간 항체의 컨센서스 서열로부터 유래된 프레임워크 영역 (예를 들어, 문헌 [Carter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285 (1992); 및 Presta et al., J. Immunol., 151:2623 (1993)] 참조); 인간 성숙 (체세포 성숙) 프레임워크 영역 또는 인간 배선 프레임워크 영역 (예를 들어, 문헌 [Almagro and Fransson, Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008)] 참조); 및 FR 라이브러리 스크리닝으로부터 유래된 프레임워크 영역 (예를 들어, 문헌 [Baca et al., J. Biol. Chem. 272:10678-10684 (1997) 및 Rosok et al., J. Biol. Chem. 271:22611-22618 (1996)] 참조)을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
마우스 유래 항체의 인간화는 통상적이고 상용적으로 사용되는 기술인 것으로 이해된다. 따라서, 서열 표에 개시된 항-CD93 항체 중 어느 것 및 모든 것의 인간화 포맷은 전임상 또는 임상 세팅에 사용될 수 있는 것으로 이해된다. 언급된 항-CD93 항체 또는 그의 항원-결합 영역 중 어느 것의 인간화 포맷이 이러한 전임상 또는 임상 세팅에서 사용되는 경우에, 인간화 포맷은 원래의 비-인간화 포맷과 동일하거나 유사한 생물학적 활성 및 프로파일을 보유할 것으로 예상된다.
c) 인간 항체
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 인간 항체 (인간 도메인 항체 또는 인간 DAb로 공지됨)이다. 인간 항체는 관련 기술분야에 공지된 다양한 기술을 사용하여 생산될 수 있다. 인간 항체는 일반적으로 문헌 [van Dijk and van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol. 5: 368-74 (2001), Lonberg, Curr. Opin. Immunol. 20:450-459 (2008), 및 Chen, Mol. Immunol. 47(4):912-21 (2010)]에 기재되어 있다. 완전 인간 단일-도메인 항체 (또는 DAb)를 생산할 수 있는 트랜스제닉 마우스 또는 래트는 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, US20090307787A1, 미국 특허 번호 8,754,287, US20150289489A1, US20100122358A1, 및 WO2004049794를 참조한다.
인간 항체 (예를 들어, 인간 DAb)는 항원 챌린지에 반응하여 무손상 인간 항체 또는 인간 가변 영역을 갖는 무손상 항체를 생산하도록 변형된 트랜스제닉 동물에게 면역원을 투여하는 것에 의해 제조될 수 있다. 이러한 동물은 전형적으로 내인성 이뮤노글로불린 유전자좌를 대체하거나 또는 염색체외에 존재하거나 또는 동물의 염색체 내로 무작위로 통합된 인간 이뮤노글로불린 유전자좌의 전부 또는 일부를 함유한다. 이러한 트랜스제닉 마우스에서, 내인성 이뮤노글로불린 유전자좌는 일반적으로 불활성화되었다. 트랜스제닉 동물로부터 인간 항체를 수득하는 방법의 검토를 위해, 문헌 [Lonberg, Nat. Biotech. 23:1117-1125 (2005)]을 참조한다. 또한, 예를 들어 제노마우스(XENOMOUSE)™ 기술을 기재한 미국 특허 번호 6,075,181 및 6,150,584; HuMab® 기술을 기재한 미국 특허 번호 5,770,429; K-M 마우스® 기술을 기재한 미국 특허 번호 7,041,870, 및 벨로시마우스(VelociMouse)® 기술을 기재한 미국 특허 출원 공개 번호 US 2007/0061900을 참조한다. 이러한 동물에 의해 생성된 무손상 항체로부터의 인간 가변 영역은, 예를 들어 상이한 인간 불변 영역과의 조합에 의해 추가로 변형될 수 있다.
인간 항체 (예를 들어, 인간 DAb)는 또한 하이브리도마-기반 방법에 의해 제조될 수 있다. 인간 모노클로날 항체의 생산을 위한 인간 골수종 및 마우스-인간 이종골수종 세포주가 기재되어 있다 (예를 들어, 문헌 [Kozbor J. Immunol., 133: 3001 (1984); Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987); 및 Boerner et al., J. Immunol., 147: 86 (1991)] 참조). 인간 B-세포 하이브리도마 기술을 통해 생성된 인간 항체는 또한 문헌 [Li et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103:3557-3562 (2006)]에 기재되어 있다. 추가의 방법은, 예를 들어 미국 특허 번호 7,189,826 (하이브리도마 세포주로부터의 모노클로날 인간 IgM 항체의 생산을 기재함) 및 문헌 [Ni, Xiandai Mianyixue, 26(4):265-268 (2006)] (인간-인간 하이브리도마를 기재함)에 기재된 것을 포함한다. 인간 하이브리도마 기술 (트리오마 기술)은 또한 문헌 [Vollmers and Brandlein, Histology and Histopathology, 20(3):927-937 (2005) 및 Vollmers and Brandlein, Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology, 27(3):185-91 (2005)]에 기재되어 있다.
인간 항체 (예를 들어, 인간 DAb)는 또한 인간-유래 파지 디스플레이 라이브러리로부터 선택된 Fv 클론 가변 도메인 서열을 단리함으로써 생성될 수 있다. 이어서, 이러한 가변 도메인 서열은 목적하는 인간 불변 도메인과 조합될 수 있다. 항체 라이브러리로부터 인간 항체를 선택하는 기술은 하기에 기재된다.
d) 라이브러리-유래 항체
본원에 기재된 항-CD93 항체 모이어티는 목적하는 활성 또는 활성들을 갖는 항체에 대해 조합 라이브러리를 스크리닝함으로써 단리될 수 있다. 예를 들어, 파지 디스플레이 라이브러리를 생성하고 이러한 라이브러리를 목적하는 결합 특징을 보유하는 항체에 대해 스크리닝하는 다양한 방법이 관련 기술분야에 공지되어 있다. 이러한 방법은 예를 들어 문헌 [Hoogenboom et al., in Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, 2001)]에서 검토되고, 예를 들어 문헌 [McCafferty et al., Nature 348:552-554; Clackson et al., Nature 352: 624-628 (1991); Marks et al., J. Mol. Biol. 222: 581-597 (1992); Marks and Bradbury, in Methods in Molecular Biology 248:161-175 (Lo, ed., Human Press, Totowa, NJ, 2003); Sidhu et al., J. Mol. Biol. 338(2): 299-310 (2004); Lee et al., J. Mol. Biol. 340(5): 1073-1093 (2004); Fellouse, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101(34): 12467-12472 (2004); and Lee et al., J. Immunol. Methods 284(1-2): 119-132(2004)]에 추가로 기재되어 있다. 단일-도메인 항체 라이브러리를 구축하는 방법이 기재되어 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 7371849를 참조한다.
특정 파지 디스플레이 방법에서, VH 및 VL 유전자의 레퍼토리는 폴리머라제 연쇄 반응 (PCR)에 의해 개별적으로 클로닝되고, 파지 라이브러리에서 무작위로 재조합되며, 이는 이어서 문헌 [Winter et al., Ann. Rev. Immunol., 12: 433-455 (1994)]에 기재된 바와 같이 항원-결합 파지에 대해 스크리닝될 수 있다. 파지는 전형적으로 항체 단편을 scFv 단편으로서 또는 Fab 단편으로서 디스플레이한다. 면역화된 공급원으로부터의 라이브러리는 하이브리도마를 구축할 필요 없이 면역원에 대한 고친화도 항체를 제공한다. 대안적으로, 나이브 레퍼토리가 문헌 [Griffiths et al., EMBO J, 12: 725-734 (1993)]에 기재된 바와 같이 임의의 면역화 없이 광범위한 비-자기 및 또한 자기-항원에 대한 항체의 단일 공급원을 제공하기 위해 (예를 들어, 인간으로부터) 클로닝될 수 있다. 최종적으로, 나이브 라이브러리는 또한 문헌 [Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol., 227: 381-388 (1992)]에 기재된 바와 같이, 줄기 세포로부터 재배열되지 않은 V-유전자 절편을 클로닝하고, 고도로 가변성인 CDR3 영역을 코딩하고 시험관내 재배열을 달성하기 위해 무작위 서열을 함유하는 PCR 프라이머를 사용하는 것에 의해 합성적으로 제조될 수 있다. 인간 항체 파지 라이브러리를 기재하는 특허 공개는, 예를 들어 미국 특허 번호 5,750,373, 및 미국 특허 공개 번호 2005/0079574, 2005/0119455, 2005/0266000, 2007/0117126, 2007/0160598, 2007/0237764, 2007/0292936, 및 2009/0002360을 포함한다.
인간 항체 라이브러리로부터 단리된 항체 또는 항체 단편은 본원에서 인간 항체 또는 인간 항체 단편으로 간주된다.
e) 치환, 삽입, 결실 및 변이체
일부 실시양태에서, 1개 이상의 아미노산 치환을 갖는 항체 변이체가 제공된다. 치환 돌연변이유발을 위한 관심 부위는 HVR (또는 CDR) 및 FR을 포함한다. 보존적 치환은 표 2에 "바람직한 치환"의 표제 하에 제시된다. 보다 실질적인 변화는 표 2에 "예시적인 치환"의 표제 하에 제공되고, 아미노산 측쇄 부류와 관련하여 하기 추가로 기재된 바와 같다. 아미노산 치환은 관심 항체에 도입될 수 있고, 생성물은 목적하는 활성, 예를 들어 보유/개선된 항원 결합, 감소된 면역원성, 또는 개선된 ADCC 또는 CDC에 대해 스크리닝될 수 있다.
표 2. 아미노산 치환
Figure pct00002
아미노산은 공통적인 측쇄 특성에 따라 그룹화될 수 있다: (1) 소수성: 노르류신, Met, Ala, Val, Leu, Ile; (2) 중성 친수성: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln; (3) 산성: Asp, Glu; (4) 염기성: His, Lys, Arg; (5) 쇄 배향에 영향을 미치는 잔기: Gly, Pro; 및 (6) 방향족: Trp, Tyr, Phe.
비-보존적 치환은 이들 부류 중 하나의 구성원을 또 다른 부류로 교환하는 것을 수반할 것이다.
치환 변이체의 한 유형은 모 항체 (예를 들어, 인간화 또는 인간 항체)의 1개 이상의 초가변 영역 잔기를 치환하는 것을 수반한다. 일반적으로, 추가의 연구를 위해 선택된 생성된 변이체(들)는 모 항체에 비해 특정 생물학적 특성 (예를 들어, 증가된 친화도, 감소된 면역원성)의 변형 (예를 들어, 개선)을 가질 것이고/거나 모 항체의 특정 생물학적 특성을 실질적으로 보유할 것이다. 예시적인 치환 변이체는 예를 들어 본원에 기재된 것과 같은 파지 디스플레이-기반 친화도 성숙 기술을 사용하여 편리하게 생성될 수 있는 친화도 성숙 항체이다. 간략하게, 1개 이상의 HVR 잔기가 돌연변이되고, 변이체 항체가 파지 상에 디스플레이되고, 특정한 생물학적 활성 (예를 들어, 결합 친화도)에 대해 스크리닝된다.
변경 (예를 들어, 치환)은 예를 들어 항체 친화도를 개선시키기 위해 HVR에서 이루어질 수 있다. 이러한 변경은 HVR "핫스팟", 즉 체세포 성숙 과정 동안 높은 빈도로 돌연변이를 겪는 코돈에 의해 코딩된 잔기 (예를 들어, 문헌 [Chowdhury, Methods Mol. Biol. 207:179-196 (2008)] 참조), 및/또는 SDR (a-CDR)에서 이루어질 수 있으며, 생성된 변이체 VH 또는 VL은 결합 친화도에 대해 시험된다. 2차 라이브러리로부터의 구축 및 재선택에 의한 친화도 성숙은 예를 들어 문헌 [Hoogenboom et al., in Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, (2001))]에 기재되어 있다. 친화도 성숙의 일부 실시양태에서, 임의의 다양한 방법 (예를 들어, 오류-유발 PCR, 쇄 셔플링, 또는 올리고뉴클레오티드-지정 돌연변이유발)에 의한 성숙을 위해 선택된 가변 유전자 내로 다양성이 도입된다. 이어서, 2차 라이브러리가 생성된다. 이어서, 라이브러리는 목적하는 친화도 또는 분자 거동을 갖는 임의의 항체 변이체를 확인하기 위해 스크리닝된다. 다양성을 도입하는 또 다른 방법은 HVR-지정 접근법을 수반하며, 여기서 여러 HVR 잔기 (예를 들어, 한 번에 4-6개 잔기)가 무작위화된다. 항원 결합에 수반되는 HVR 잔기는, 예를 들어 알라닌 또는 히스티딘 스캐닝 돌연변이유발 또는 모델링을 사용하여 구체적으로 확인될 수 있다. 특히 HC-CDR3 및 LC-CDR3이 종종 표적화된다.
일부 실시양태에서, 치환, 삽입, 또는 결실은 이러한 변경이 항원에 결합하는 항체의 능력을 실질적으로 감소시키지 않는 한, 1개 이상의 HVR 내에서 이루어질 수 있다. 예를 들어, 결합 친화도를 실질적으로 감소시키지 않는 보존적 변경 (예를 들어, 본원에 제공된 바와 같은 보존적 치환)이 HVR에서 이루어질 수 있다. 이러한 변경은 HVR "핫스팟" 또는 CDR의 외부일 수 있다.
돌연변이유발을 위해 표적화될 수 있는 항체의 잔기 또는 영역의 확인에 유용한 방법은 문헌 [Cunningham and Wells (1989) Science, 244:1081-1085]에 기재된 바와 같이 "알라닌 스캐닝 돌연변이유발"로 불린다. 이러한 방법에서, 잔기 또는 표적 잔기의 군 (예를 들어, 하전된 잔기, 예컨대 Arg, Asp, His, Lys, 및 Glu)을 확인하고, 중성 또는 음으로 하전된 아미노산 (예를 들어, 알라닌 또는 폴리알라닌)으로 대체하여 항체와 항원의 상호작용에 영향을 미치는지 여부를 결정한다. 초기 치환에 대한 기능적 감수성을 입증하는 아미노산 위치에 추가의 치환이 도입될 수 있다. 대안적으로 또는 추가적으로, 항체와 항원 사이의 접촉점을 확인하기 위한 항원-항체 복합체의 결정 구조. 이러한 접촉 잔기 및 이웃 잔기는 치환을 위한 후보로서 표적화되거나 제거될 수 있다. 변이체가 항체에 대한 목적하는 특성을 함유하는지 결정하기 위해 변이체가 스크리닝될 수 있다.
아미노산 서열 삽입은 1개의 잔기 내지 100개 이상의 잔기를 함유하는 폴리펩티드의 길이 범위의 아미노- 및/또는 카르복실-말단 융합, 뿐만 아니라 단일 또는 다중 아미노산 잔기의 서열내 삽입을 포함한다. 말단 삽입의 예는 N-말단 메티오닐 잔기를 갖는 항체를 포함한다. 항체 분자의 다른 삽입 변이체는 효소 (예를 들어, ADEPT의 경우) 또는 항체의 혈청 반감기를 증가시키는 폴리펩티드가 항체의 N- 또는 C-말단에 융합된 것을 포함한다.
f) 글리코실화 변이체
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 구축물이 글리코실화되는 정도를 증가 또는 감소시키도록 변경된다. 항체에 대한 글리코실화 부위의 부가 또는 결실은 1개 이상의 글리코실화 부위가 생성되거나 제거되도록 아미노산 서열을 변경시킴으로써 편리하게 달성될 수 있다.
항체 모이어티가 Fc 영역을 포함하는 경우, 이에 부착된 탄수화물이 변경될 수 있다. 포유동물 세포에 의해 생산된 천연 항체는 전형적으로 Fc 영역의 CH2 도메인의 Asn297에 N-연결에 의해 일반적으로 부착된 분지형, 이중안테나 올리고사카라이드를 포함한다. 예를 들어, 문헌 [Wright et al., TIBTECH 15:26-32 (1997)]을 참조한다. 올리고사카라이드는 다양한 탄수화물, 예를 들어 만노스, N-아세틸 글루코사민 (GlcNAc), 갈락토스, 및 시알산, 뿐만 아니라 이중안테나 올리고사카라이드 구조의 "줄기"에서 GlcNAc에 부착된 푸코스를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 항체 모이어티 내의 올리고사카라이드의 변형은 특정 개선된 특성을 갖는 항체 변이체를 생성하기 위해 이루어질 수 있다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 Fc 영역에 (직접적으로 또는 간접적으로) 부착된 푸코스가 결여된 탄수화물 구조를 갖는다. 예를 들어, 이러한 항체에서 푸코스의 양은 1% 내지 80%, 1% 내지 65%, 5% 내지 65% 또는 20% 내지 40%일 수 있다. 푸코스의 양은, 예를 들어 WO 2008/077546에 기재된 바와 같이 MALDI-TOF 질량 분광측정법에 의해 측정된 바와 같이, Asn 297에 부착된 모든 당구조물 (예를 들어, 복합체, 하이브리드 및 고 만노스 구조물)의 합과 비교하여 Asn297에서 당 쇄 내의 푸코스의 평균 양을 계산함으로써 결정된다. Asn297은 Fc 영역 내의 약 위치 297 (Fc 영역 잔기의 EU 넘버링)에 위치한 아스파라긴 잔기를 지칭하지만; Asn297은 또한 항체에서의 부차적 서열 변이로 인해 위치 297의 약 ± 3개 아미노산 상류 또는 하류, 즉 위치 294와 300 사이에 위치할 수 있다. 이러한 푸코실화 변이체는 개선된 ADCC 기능을 가질 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 공개 번호 US 2003/0157108 (Presta, L.); US 2004/0093621 (교와 핫코 고교 캄파니, 리미티드(Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd))을 참조한다. "탈푸코실화" 또는 "푸코스-결핍" 항체 변이체에 관한 간행물의 예는 US 2003/0157108; WO 2000/61739; WO 2001/29246; US 2003/0115614; US 2002/0164328; US 2004/0093621; US 2004/0132140; US 2004/0110704; US 2004/0110282; US 2004/0109865; WO 2003/085119; WO 2003/084570; WO 2005/035586; WO 2005/035778; WO2005/053742; WO2002/031140; 문헌 [Okazaki et al., J. Mol. Biol. 336:1239-1249 (2004); Yamane-Ohnuki et al., Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004)]을 포함한다. 탈푸코실화 항체를 생산할 수 있는 세포주의 예는 단백질 푸코실화가 결핍된 Lec13 CHO 세포 (Ripka et al., Arch. Biochem. Biophys. 249:533-545 (1986); 미국 특허 출원 번호 US 2003/0157108 A1 (Presta, L); 및 WO 2004/056312 A1 (Adams et al.), 특히 실시예 11), 및 녹아웃 세포주, 예컨대 알파-1,6-푸코실트랜스퍼라제 유전자, FUT8, 녹아웃 CHO 세포 (예를 들어, 문헌 [Yamane-Ohnuki et al., Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004); Kanda, Y. et al., Biotechnol. Bioeng., 94(4):680-688 (2006)]; 및 WO2003/085107 참조)를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 이등분된 올리고사카라이드를 갖고, 예를 들어 여기서 항체의 Fc 영역에 부착된 이중안테나 올리고사카라이드가 GlcNAc에 의해 이등분된다. 이러한 항체 변이체는 감소된 푸코실화 및/또는 개선된 ADCC 기능을 가질 수 있다. 이러한 항체 변이체의 예는, 예를 들어 WO 2003/011878 (Jean-Mairet et al.); 미국 특허 번호 6,602,684 (Umana et al.); 및 US 2005/0123546 (Umana et al.)에 기재되어 있다. Fc 영역에 부착된 올리고사카라이드 내에 적어도 1개의 갈락토스 잔기를 갖는 항체 변이체가 또한 제공된다. 이러한 항체 변이체는 개선된 CDC 기능을 가질 수 있다. 이러한 항체 변이체는, 예를 들어 WO 1997/30087 (Patel et al.); WO 1998/58964 (Raju, S.); 및 WO 1999/22764 (Raju, S.)에 기재되어 있다.
g) Fc 영역 변이체
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 Fc 단편을 포함한다.
용어 "Fc 영역", "Fc 도메인", "Fc 단편" 또는 "Fc"는 불변 영역의 적어도 일부를 함유하는 이뮤노글로불린 중쇄의 C-말단 비-항원 결합 영역을 지칭한다. 상기 용어는 천연 Fc 영역 및 변이체 Fc 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 Cys226으로부터 중쇄의 카르복실-말단으로 연장된다. 그러나, Fc 영역의 C-말단 리신 (Lys447)은 Fc 영역의 구조 또는 안정성에 영향을 미치지 않으면서 존재할 수 있거나 또는 존재하지 않을 수 있다. 본원에서 달리 명시되지 않는 한, IgG 또는 Fc 영역 내의 아미노산 잔기의 넘버링은 문헌 [Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991]에 기재된 바와 같은, EU 인덱스로도 불리는 항체에 대한 EU 넘버링 시스템에 따른다.
일부 실시양태에서, Fc 단편은 IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, 및 그의 조합 및 하이브리드로 이루어진 군으로부터 선택된 이뮤노글로불린으로부터의 것이다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, 및 그의 조합 및 하이브리드로 이루어진 군으로부터 선택된 이뮤노글로불린으로부터의 것이다.
일부 실시양태에서, Fc 단편은 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 감소된 이펙터 기능 (항체-의존성 세포성 세포독성 (ADCC)의 수준에 의해 측정된 바와 같은, 예컨대 적어도 약 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 또는 95% 감소된 이펙터 기능)을 갖는다.
일부 실시양태에서, Fc 단편은 IgG1 Fc 단편이다. 일부 실시양태에서, IgG1 Fc 단편은 L234A 돌연변이 및/또는 L235A 돌연변이를 포함한다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 IgG2 또는 IgG4 Fc 단편이다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 S228P, F234A, 및/또는 L235A 돌연변이를 포함하는 IgG4 Fc 단편이다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 N297A 돌연변이를 포함한다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 N297G 돌연변이를 포함한다.
일부 실시양태에서, 1개 이상의 아미노산 변형이 항체 모이어티의 Fc 영역 내로 도입될 수 있고, 그에 의해 Fc 영역 변이체가 생성될 수 있다. Fc 영역 변이체는 1개 이상의 아미노산 위치에서 아미노산 변형 (예를 들어, 치환)을 포함하는 인간 Fc 영역 서열 (예를 들어, 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 Fc 영역)을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, Fc 단편은 전부는 아니지만 일부 이펙터 기능을 보유하며, 이는 항체 모이어티의 생체내 반감기가 중요하지만 특정 이펙터 기능 (예컨대 보체 및 ADCC)은 불필요하거나 해로운 적용에 대해 바람직한 후보가 되게 한다. 시험관내 및/또는 생체내 세포독성 검정을 수행하여 CDC 및/또는 ADCC 활성의 감소/고갈을 확인할 수 있다. 예를 들어, 항체가 FcγR 결합이 결여되어 있지만 (따라서 ADCC 활성이 결여될 가능성이 있지만), FcRn 결합 능력은 보유한다는 것을 확실하게 하기 위해 Fc 수용체 (FcR) 결합 검정이 수행될 수 있다. ADCC를 매개하는 1차 세포인 NK 세포는 FcγRIII만을 발현하는 반면, 단핵구는 FcγRI, FcγRII 및 FcγRIII을 발현한다. 조혈 세포 상에서의 FcR 발현은 문헌 [Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-492 (1991)]의 페이지 464의 표 2에 요약되어 있다. 관심 분자의 ADCC 활성을 평가하기 위한 시험관내 검정의 비제한적 예는 미국 특허 번호 5,500,362 (예를 들어, 문헌 [Hellstrom, I. et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 83:7059-7063 (1986)] 참조) 및 [Hellstrom, I et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 82:1499-1502 (1985)]; 5,821,337 (문헌 [Bruggemann, M. et al., J. Exp. Med. 166:1351-1361 (1987)] 참조)에 기재되어 있다. 대안적으로, 비-방사성 검정 방법이 이용될 수 있다 (예를 들어, 유동 세포측정법을 위한 ACTI™ 비-방사성 세포독성 검정 (셀테크놀로지, 인크.(CellTechnology, Inc.), 캘리포니아주 마운틴 뷰); 및 시토톡스(CytoTox) 96® 비-방사성 세포독성 검정 (프로메가(Promega), 위스콘신주 매디슨) 참조). 이러한 검정에 유용한 이펙터 세포는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 자연 킬러 (NK) 세포를 포함한다. 대안적으로 또는 추가적으로, 관심 분자의 ADCC 활성은 생체내에서, 예를 들어 문헌 [Clynes et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 95:652-656 (1998)]에 개시된 바와 같은 동물 모델에서 평가될 수 있다. C1q 결합 검정은 또한 항체가 C1q에 결합할 수 없고 따라서 CDC 활성이 결여되어 있음을 확인하기 위해 수행될 수 있다. 예를 들어, WO 2006/029879 및 WO 2005/100402의 C1q 및 C3c 결합 ELISA를 참조한다. 보체 활성화를 평가하기 위해, CDC 검정이 수행될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202:163 (1996); Cragg, M.S. et al., Blood 101:1045-1052 (2003); 및 Cragg, M.S. and M.J. Glennie, Blood 103:2738-2743 (2004)] 참조). FcRn 결합 및 생체내 클리어런스/반감기 결정이 또한 관련 기술분야에 공지된 방법을 사용하여 수행될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Petkova, S.B. et al., Int'l. Immunol. 18(12):1759-1769 (2006)] 참조).
감소된 이펙터 기능을 갖는 항체는 Fc 영역 잔기 238, 265, 269, 270, 297, 327 및 329 중 1개 이상의 치환을 갖는 것을 포함한다 (미국 특허 번호 6,737,056). 이러한 Fc 돌연변이체는 아미노산 위치 265, 269, 270, 297 및 327 중 2개 이상에서 치환을 갖는 Fc 돌연변이체, 예컨대 잔기 265 및 297이 알라닌으로 치환된 소위 "DANA" Fc 돌연변이체를 포함한다 (미국 특허 번호 7,332,581). 일부 실시양태에서, Fc 단편은 N297A 돌연변이를 포함한다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 N297G 돌연변이를 포함한다.
FcR에 대한 결합이 개선되거나 감소된 특정 항체 변이체가 기재된다. (예를 들어, 미국 특허 번호 6,737,056; WO 2004/056312, 및 문헌 [Shields et al., J. Biol. Chem. 9(2): 6591-6604 (2001)] 참조).
일부 실시양태에서, Fc 단편은 IgG1 Fc 단편이다. 일부 실시양태에서, IgG1 Fc 단편은 L234A 돌연변이 및/또는 L235A 돌연변이를 포함한다. 일부 실시양태에서, IgG1 Fc 단편은 L235A 돌연변이 및/또는 G237A 돌연변이를 포함한다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 IgG2 또는 IgG4 Fc 단편이다. 일부 실시양태에서, Fc 단편은 S228P, F234A, 및/또는 L235A 돌연변이를 포함하는 IgG4 Fc 단편이다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 ADCC를 개선시키는 1개 이상의 아미노산 치환, 예를 들어 Fc 영역의 위치 298, 333, 및/또는 334 (잔기의 EU 넘버링)에서 치환을 갖는 Fc 영역을 포함한다.
일부 실시양태에서, 예를 들어 미국 특허 번호 6,194,551, WO 99/51642, 및 문헌 [Idusogie et al., J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000)]에 기재된 바와 같이, 변경된 (즉, 개선된 또는 감소된) C1q 결합 및/또는 보체 의존성 세포독성 (CDC)을 발생시키는 변경이 Fc 영역에서 이루어진다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티 변이체는 반감기를 변경시키고/거나 신생아 Fc 수용체 (FcRn)에 대한 결합을 변화시키는 1개 이상의 아미노산 치환을 포함하는 변이체 Fc 영역을 포함한다. 증가된 반감기 및 모체 IgG의 태아로의 전달을 담당하는 신생아 Fc 수용체 (FcRn)에 대한 개선된 결합을 갖는 항체 (Guyer et al., J. Immunol. 117:587 (1976) 및 Kim et al., J. Immunol. 24:249 (1994))가 US2005/0014934A1 (Hinton et al.)에 기재되어 있다. 그러한 항체는 FcRn에 대한 Fc 영역의 결합을 변경시키는 1개 이상의 치환을 갖는 Fc 영역을 포함한다. 이러한 Fc 변이체는 Fc 영역 잔기 중 1개 이상에서 치환, 예를 들어 Fc 영역 잔기 434의 치환을 갖는 것을 포함한다 (미국 특허 번호 7,371,826).
Fc 영역 변이체의 다른 예에 관해서는 또한 문헌 [Duncan & Winter, Nature 322:738-40 (1988)]; 미국 특허 번호 5,648,260; 미국 특허 번호 5,624,821; 및 WO 94/29351을 참조한다.
h) 시스테인 조작된 항체 변이체
일부 실시양태에서, 항체의 1개 이상의 잔기가 시스테인 잔기로 치환된 시스테인 조작된 항체 모이어티, 예를 들어 "티오MAb"를 생성하는 것이 바람직할 수 있다. 특정한 실시양태에서, 치환된 잔기는 항체의 접근가능한 부위에서 발생한다. 본원에 추가로 기재된 바와 같이, 그러한 잔기를 시스테인으로 치환하는 것에 의해 반응성 티올 기가 항체의 접근가능한 부위에 위치하고, 이를 사용하여 항체를 다른 모이어티, 예컨대 약물 모이어티 또는 링커-약물 모이어티에 접합시켜 면역접합체를 생성할 수 있다. 일부 실시양태에서, 하기 잔기 중 어느 하나 이상이 시스테인으로 치환될 수 있다: 중쇄의 A118 (EU 넘버링); 및 중쇄 Fc 영역의 S400 (EU 넘버링). 시스테인 조작된 항체 모이어티는 예를 들어 미국 특허 번호 7,521,541에 기재된 바와 같이 생성될 수 있다.
i) 항체 유도체
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항체 모이어티는 관련 기술분야에 공지되고 용이하게 입수가능한 추가의 비단백질성 모이어티를 포함하도록 추가로 변형될 수 있다. 항체의 유도체화에 적합한 모이어티는 수용성 중합체를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 수용성 중합체의 비제한적 예는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 에틸렌 글리콜/프로필렌 글리콜의 공중합체, 카르복시메틸셀룰로스, 덱스트란, 폴리비닐 알콜, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리-1,3-디옥솔란, 폴리-1,3,6-트리옥산, 에틸렌/말레산 무수물 공중합체, 폴리아미노산 (단독중합체 또는 랜덤 공중합체), 및 덱스트란 또는 폴리(n-비닐 피롤리돈)폴리에틸렌 글리콜, 프로프로필렌 글리콜 단독중합체, 폴리프로필렌 옥시드/에틸렌 옥시드 공중합체, 폴리옥시에틸화 폴리올 (예를 들어, 글리세롤), 폴리비닐 알콜, 및 그의 혼합물을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 폴리에틸렌 글리콜 프로피온알데히드는 물에서의 그의 안정성으로 인해 제조에서 이점을 가질 수 있다. 중합체는 임의의 분자량을 가질 수 있고, 분지형 또는 비분지형일 수 있다. 항체에 부착된 중합체의 수는 다양할 수 있고, 1개 초과의 중합체가 부착된 경우에, 이들은 동일하거나 상이한 분자일 수 있다. 일반적으로, 유도체화에 사용되는 중합체의 수 및/또는 유형은 개선될 항체의 특정한 특성 또는 기능, 항체 유도체가 규정된 조건 하에 진단에 사용될 것인지 여부 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는 고려사항에 기초하여 결정될 수 있다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 1개 이상의 생물학적 활성 단백질, 폴리펩티드 또는 그의 단편을 포함하도록 추가로 변형될 수 있다. 본원에서 상호교환가능하게 사용되는 "생물활성" 또는 "생물학적 활성"은 구체적 기능을 수행하기 위해 체내에서 생물학적 활성을 나타내는 것을 의미한다. 예를 들어, 이는 특정한 생체분자, 예컨대 단백질, DNA 등과의 조합, 및 이어서 이러한 생체분자의 활성의 촉진 또는 억제를 의미할 수 있다. 일부 실시양태에서, 생물활성 단백질 또는 그의 단편은 질환 또는 상태의 예방 또는 치료를 위한 활성 약물 물질로서 환자에게 투여되는 단백질 및 폴리펩티드, 뿐만 아니라 진단 목적으로 사용되는 단백질 및 폴리펩티드, 예컨대 진단 시험 또는 시험관내 검정에 사용되는 효소, 뿐만 아니라 질환을 예방하기 위해 환자에게 투여되는 단백질 및 폴리펩티드, 예컨대 백신을 포함한다.
다중특이적 항-CD93 구축물
일부 실시양태에서 항-CD93 구축물은 본원에 기재된 항-CD93 항체 모이어티 중 어느 하나에 따른 항-CD93 항체 모이어티, 및 제2 항원을 특이적으로 인식하는 제2 결합 모이어티 (예컨대 제2 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물을 포함한다.
일부 실시양태에서, 다중특이적 항-CD93 분자는 항-CD93 항체 모이어티 및 제2 항원을 특이적으로 인식하는 제2 모이어티 (예컨대 제2 항체 모이어티)를 포함한다.
일부 실시양태에서, 제2 항원은 면역 체크포인트 분자이다. 일부 실시양태에서, 제2 항원은 PD-1 또는 PD-L1이다.
일부 실시양태에서, 제2 모이어티는 PD-1 또는 PD-L1의 세포외 도메인 (ECD)이다. 일부 실시양태에서, 제2 모이어티는 PD-L1 트랩 또는 PD-1 트랩이다. 예를 들어, 문헌 [Nat Commun. 2018 Jun 8;9(1):2237]을 참조한다.
일부 실시양태에서, 제2 항원은 종양 항원이다.
일부 실시양태에서, 제2 항원은 혈관신생제이다. 일부 실시양태에서, 혈관신생제는 VEGF (예를 들어, 인간 VEGF) 항체이다. 일부 실시양태에서, 혈관신생제는 VEGF 수용체이다. 일부 실시양태에서, 혈관신생제는 VEGFR1 (예를 들어, 인간 VEGFR1)이다. 일부 실시양태에서, 혈관신생제는 VEGFR2 (예를 들어, 인간 VEGFR2)이다.
일부 실시양태에서, 제2 모이어티는 VEGF 수용체의 세포외 도메인 (ECD)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 모이어티는 VEGFR1 및/또는 VEGFR2의 ECD를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 모이어티는 VEGF-트랩을 포함한다. 예를 들어, 문헌 [Proc Natl Acad Sci USA. 2002 Aug 20;99(17):11393-8]을 참조한다.
일부 실시양태에서, 제2 항체 모이어티 및 항-CD93 항체 모이어티는 링커, 예컨대 본원에 기재된 링커 중 어느 것을 통해 결합 모이어티의 적절한 기능을 가능하게 하는 임의의 작동가능한 형태로 서로 융합된다. 일부 실시양태에서, 링커는 GS 링커이다. 일부 실시양태에서, 링커는 서열식별번호: 225-232 및 338로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 본원에 기재된 항-CD93 항체 모이어티 중 어느 하나에 따른 항-CD93 항체 모이어티; b) PD-L1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티 (항-PD-L1 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 항-CD93 전장 항체, b) 항-CD93 전장 항체의 중쇄 중 적어도 1개 또는 둘 다에 융합된 항-PD-L1 항체 모이어티 (예컨대 본원에 기재된 항체 모이어티 중 어느 것)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다. 일부 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 모이어티는 둘 다의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 모이어티는 둘 다의 중쇄의 C-말단에 융합된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 전장 항체를 포함하는 항-PD-L1 항체 모이어티, b) 항-PD-L1 전장 항체의 중쇄 중 적어도 1개 또는 둘 다에 융합된 항-CD93 항체 모이어티 (예컨대 본원에 기재된 항-CD93 항체 모이어티 중 어느 것)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 둘 다의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 둘 다의 중쇄의 C-말단에 융합된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 항-CD93 전장 항체, b) 항-CD93 전장 항체의 경쇄 중 적어도 1개 또는 둘 다에 융합된 항-PD-L1 항체 모이어티 (예컨대 본원에 기재된 항체 모이어티 중 어느 것)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다. 일부 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 모이어티는 둘 다의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 모이어티는 둘 다의 경쇄의 C-말단에 융합된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 전장 항체를 포함하는 항-PD-L1 항체 모이어티, b) 항-PD-L1 전장 항체의 경쇄 중 적어도 1개 또는 둘 다에 융합된 항-CD93 항체 모이어티 (예컨대 본원에 기재된 항체 모이어티 중 어느 것)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 둘 다의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 둘 다의 경쇄의 C-말단에 융합된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 본원에 기재된 항-CD93 항체 모이어티 중 어느 하나에 따른 항-CD93 항체 모이어티; b) PD-1을 특이적으로 인식하는 제2 항체 모이어티 (항-PD-1 항체 모이어티)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 항-CD93 전장 항체, b) 항-CD93 전장 항체의 중쇄 중 적어도 1개 또는 둘 다에 융합된 항-PD-1 항체 모이어티 (예컨대 본원에 기재된 항체 모이어티 중 어느 것)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다. 일부 실시양태에서, 항-PD- 항체 모이어티는 둘 다의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, 항-PD-1 항체 모이어티는 둘 다의 중쇄의 C-말단에 융합된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 전장 항체를 포함하는 항-PD-1 항체 모이어티, b) 항-PD-1 전장 항체의 중쇄 중 적어도 1개 또는 둘 다에 융합된 항-CD93 항체 모이어티 (예컨대 본원에 기재된 항-CD93 항체 모이어티 중 어느 것)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 둘 다의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 둘 다의 중쇄의 C-말단에 융합된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 항-CD93 전장 항체, b) 항-CD93 전장 항체의 경쇄 중 적어도 1개 또는 둘 다에 융합된 항-PD-1 항체 모이어티 (예컨대 본원에 기재된 항체 모이어티 중 어느 것)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다. 일부 실시양태에서, 항-PD-1 항체 모이어티는 둘 다의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, 항-PD-1 항체 모이어티는 둘 다의 경쇄의 C-말단에 융합된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 전장 항체를 포함하는 항-PD-1 항체 모이어티, b) 항-PD-1 전장 항체의 경쇄 중 적어도 1개 또는 둘 다에 융합된 항-CD93 항체 모이어티 (예컨대 본원에 기재된 항체 모이어티 중 어느 것)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 둘 다의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 둘 다의 경쇄의 C-말단에 융합된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 본원에 기재된 항-CD93 항체 모이어티 중 어느 하나에 따른 항-CD93 항체 모이어티; b) VEGF를 특이적으로 인식하는 제2 결합 모이어티를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 항-CD93 전장 항체, b) 항-CD93 전장 항체의 중쇄 중 적어도 1개 또는 둘 다에 융합된 VEGF를 특이적으로 인식하는 제2 결합 모이어티를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다. 일부 실시양태에서, 제2 결합 모이어티는 둘 다의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, 제2 결합 모이어티는 둘 다의 중쇄의 C-말단에 융합된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 전장 항체를 포함하는 항-VEGF 항체 모이어티, b) 항-VEGF 전장 항체의 중쇄 중 적어도 1개 또는 둘 다에 융합된 항-CD93 항체 모이어티 (예컨대 본원에 기재된 항-CD93 항체 모이어티 중 어느 것)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 둘 다의 중쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 둘 다의 중쇄의 C-말단에 융합된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 항-CD93 전장 항체, b) 항-CD93 전장 항체의 경쇄 중 적어도 1개 또는 둘 다에 융합된 VEGF를 특이적으로 인식하는 제2 결합 모이어티를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다. 일부 실시양태에서, 제2 결합 모이어티는 둘 다의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, VEGF를 특이적으로 인식하는 제2 결합 모이어티는 둘 다의 경쇄의 C-말단에 융합된다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 2개의 경쇄는 각각 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 전장 항체를 포함하는 항-VEGF 항체 모이어티, b) 항-VEGF 전장 항체의 경쇄 중 적어도 1개 또는 둘 다에 융합된 항-CD93 항체 모이어티 (예컨대 본원에 기재된 항체 모이어티 중 어느 것)를 포함하는 다중특이적 (예를 들어, 이중특이적) 항-CD93 구축물이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 둘 다의 경쇄의 N-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 둘 다의 경쇄의 C-말단에 융합된다.
일부 실시양태에서, a) 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하며, 여기서 2개의 중쇄는 각각 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고, 여기서 2개의 경쇄는 각각 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인, CD93을 특이적으로 인식하는 전장 항체, 및 b) 서열식별번호: 325의 아미노산 서열을 포함하는 VEGF 결합 모이어티를 포함하며, 여기서 VEGF 결합 모이어티는 전장 항체의 중쇄 중 하나 또는 둘 다에 융합된 것인 항-CD93 구축물이 제공된다. 일부 실시양태에서, VEGF 결합 모이어티는 전장 항체의 둘 다의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 일부 실시양태에서, VEGF 결합 모이어티는 링커를 통해 전장 항체에 융합된다. 일부 실시양태에서, 링커는 GS 링커이거나 또는 서열식별번호: 225-232 및 338로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 링커는 서열식별번호: 338의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 서열식별번호: 287, 및 319-321 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 288, 및 322-324 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 전장 항체는 IgG1 이소형 (예컨대 인간 IgG1 이소형)을 갖는다. 일부 실시양태에서, 중쇄는 서열식별번호: 342의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 경쇄는 서열식별번호: 343의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 295의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 296의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 297의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 298의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 299의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 300의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
예시적인 항-PD-L1 항체 모이어티
예시적인 항-PD-L1 항체 모이어티는 WO2019228514A1, WO2019227490A1 및 WO2020019232A1에 기재된 것을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 다중특이적 항-CD93 구축물에 사용된 항-PD-L1 항체 모이어티 (예컨대 scFv)는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 PD-L1의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 251의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 252의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 253의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 254의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 255의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 256의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-PD-L1 모이어티는 서열식별번호: 281, 282, 또는 283에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 284, 285, 또는 286에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 다중특이적 항-CD93 구축물에 사용된 항-PD-L1 항체 모이어티 (예컨대 scFv)는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하며, 여기서: a) VH는 서열식별번호: 251의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 252의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 253의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 총 약 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; b) VL은 서열식별번호: 254의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 255 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 256 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 총 약 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 281, 282, 또는 283의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 284, 285 또는 286의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 281의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 284의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 282의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 285의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 283의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 286의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 제2 항체 모이어티 및 항-CD93 항체 모이어티는 링커, 예컨대 본원에 기재된 링커 중 어느 것을 통해 결합 모이어티의 적절한 기능을 가능하게 하는 임의의 작동가능한 형태로 서로 융합된다.
예시적인 항-PD-1 항체 모이어티
예시적인 항-PD-1 항체 모이어티는 WO2018133842 및 WO2018133837에 기재된 것을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 다중특이적 항-CD93 구축물에 사용된 항-PD-1 항체 모이어티 (예컨대 scFv)는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 PD-1의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 257의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 258의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 259의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 260의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 261의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 262의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-PD-1 모이어티는 서열식별번호: 275에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 276에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 다중특이적 항-CD93 구축물에 사용된 항-PD-1 항체 모이어티 (예컨대 scFv)는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하며, 여기서: a) VH는 서열식별번호: 257의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 258의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 259의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 총 약 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; b) VL은 서열식별번호: 260의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 261 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 262 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 총 약 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 제2 항체 모이어티는 서열식별번호: 275에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 서열식별번호: 276에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 뮤린 항체로부터 유래된 인간화 항체 모이어티를 포함한다.
일부 실시양태에서, 다중특이적 항-CD93 구축물에 사용된 항-PD-1 항체 모이어티 (예컨대 scFv)는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 PD-1의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 263의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 264의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 265의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 266의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 267의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 268의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-PD-1 모이어티는 서열식별번호: 277에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 278에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 다중특이적 항-CD93 구축물에 사용된 항-PD-1 항체 모이어티 (예컨대 scFv)는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하며, 여기서: a) VH는 서열식별번호: 263의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 264의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 265의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 총 약 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; b) VL은 서열식별번호: 266의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 267 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 268 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 총 약 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 항-PD-1 항체 모이어티는 서열식별번호: 277에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 서열식별번호: 278에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 뮤린 항체로부터 유래된 인간화 항체 모이어티를 포함한다.
일부 실시양태에서, 다중특이적 항-CD93 구축물에 사용된 항-PD-1 항체 모이어티 (예컨대 scFv)는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하며, 여기서 항체 모이어티는 PD-1의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 269의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 270의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 271의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 272의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 273의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 274의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-PD-1 모이어티는 서열식별번호: 279에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3; 및 서열식별번호: 280에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 다중특이적 항-CD93 구축물에 사용된 항-PD-1 항체 모이어티 (예컨대 scFv)는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하며, 여기서: a) VH는 서열식별번호: 269의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 270의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 271의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 총 약 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; b) VL은 서열식별번호: 272의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 273 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 274 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 총 약 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 제2 항체 모이어티는 서열식별번호: 279에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 서열식별번호: 280에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 뮤린 항체로부터 유래된 인간화 항체 모이어티를 포함한다.
일부 실시양태에서, 제2 항체 모이어티 및 항-CD93 항체 모이어티는 링커, 예컨대 본원에 기재된 링커 중 어느 것을 통해 결합 모이어티의 적절한 기능을 가능하게 하는 임의의 작동가능한 형태로 서로 융합된다.
VEGF를 특이적으로 인식하는 예시적인 결합 모이어티
VEGF를 특이적으로 인식하는 예시적인 결합 모이어티는 아바스틴, 라무시루맙, 또는 VEGF-트랩 (아플리베르셉트), 또는 그의 변이체 또는 기능적 부분을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 다중특이적 항-CD93 구축물에 사용된 VEGF를 특이적으로 인식하는 결합 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하는 항체 모이어티 (예컨대 scFv)이며, 여기서 VH는 서열식별번호: 326의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 327의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 328의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 서열식별번호: 329의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 330의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 331의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 다중특이적 항-CD93 구축물에 사용된 VEGF를 특이적으로 인식하는 결합 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하는 항체 모이어티 (예컨대 scFv)이며, 여기서 VH는 서열식별번호: 332의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 333의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 334의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 서열식별번호: 335의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 336의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 337의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다.
일부 실시양태에서, 다중특이적 항-CD93 구축물에 사용된 VEGF를 특이적으로 인식하는 결합 모이어티는 서열식별번호: 325의 아미노산 서열을 포함한다.
항-CD93 융합 단백질
일부 실시양태에서 항-CD93 구축물은 항-CD93 항체 모이어티 (예를 들어, 항-CD93 scFv) 및 제2 모이어티를 포함한다.
일부 실시양태에서, 제2 모이어티는 반감기 연장 모이어티를 포함한다. 일부 실시양태에서, 반감기 연장 모이어티는 알부민 결합 모이어티 (예를 들어, 알부민 결합 항체 모이어티)이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티 및 반감기 연장 모이어티는 링커 (예컨대 "링커" 섹션에 기재된 링커 중 어느 것)를 통해 연결된다.
일부 실시양태에서, 제2 모이어티는 수용체의 세포외 도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 모이어티는 PD-1 또는 PD-L1의 세포외 도메인 (ECD)이다. 일부 실시양태에서, 제2 모이어티는 PD-L1 트랩 또는 PD-1 트랩이다. 예를 들어, 문헌 [Nat Commun. 2018 Jun 8;9(1):2237]을 참조한다. 일부 실시양태에서, 제2 모이어티는 VEGF 수용체의 세포외 도메인 (ECD)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 모이어티는 VEGFR1 및/또는 VEGFR2의 ECD를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 모이어티는 VEGF-트랩을 포함한다. 예를 들어, 문헌 [Proc Natl Acad Sci USA. 2002 Aug 20;99(17):11393-8]을 참조한다.
항-CD93 면역접합체
본 출원은 또한 항-CD93 항체 모이어티 (예컨대 본원에 기재된 CD93 항체 모이어티 중 어느 것) 및 제2 작용제를 포함하는 항-CD93 면역접합체를 제공한다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제는 치료제이다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제는 표지이다.
링커
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항-CD93 구축물은 2개의 모이어티 (예를 들어, 상기 기재된 다중특이적 구축물에서 항-CD93 항체 모이어티 및 반감기 연장 모이어티, 항-CD93 항체 모이어티 및 제2 결합 모이어티) 사이에 1개 이상의 링커를 포함한다. 항-CD93 구축물에 사용된 링커(들)의 길이, 가요성의 정도 및/또는 다른 특성은 1종 이상의 특정한 항원 또는 에피토프에 대한 친화도, 특이성 또는 결합력을 포함하나 이에 제한되지는 않는 특성에 일부 영향을 미칠 수 있다. 예를 들어, 보다 긴 링커는 2개의 인접한 도메인이 서로 입체적으로 간섭하지 않는 것을 확실하게 하기 위해 선택될 수 있다. 일부 실시양태에서, 링커 (예컨대 펩티드 링커)는 인접한 도메인이 서로에 대해 자유롭게 이동하도록 가요성 잔기 (예컨대 글리신 및 세린)를 포함한다. 예를 들어, 글리신-세린 이중체가 적합한 펩티드 링커일 수 있다. 일부 실시양태에서, 링커는 비-펩티드 링커이다. 일부 실시양태에서, 링커는 펩티드 링커이다. 일부 실시양태에서, 링커는 비-절단가능한 링커이다. 일부 실시양태에서, 링커는 절단가능한 링커이다.
다른 링커 고려사항은 생성된 화합물의 물리적 또는 약동학적 특성, 예컨대 용해도, 친지성, 친수성, 소수성, 안정성 (다소 안정한 분해뿐만 아니라 계획된 분해), 강성, 가요성, 면역원성, 항체 결합의 조정, 미셀 또는 리포솜 내로 혼입되는 능력 등에 대한 효과를 포함한다.
펩티드 링커
펩티드 링커는 자연 발생 서열, 또는 비-자연 발생 서열을 가질 수 있다. 예를 들어, 중쇄 단독 항체의 힌지 영역으로부터 유래된 서열이 링커로서 사용될 수 있다. 예를 들어, WO1996/34103을 참조한다.
펩티드 링커는 임의의 적합한 길이일 수 있다. 일부 실시양태에서, 펩티드 링커는 적어도 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 50, 75, 100개 중 어느 것 또는 그 초과의 아미노산 길이이다. 일부 실시양태에서, 펩티드 링커는 약 100, 75, 50, 40, 35, 30, 25, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5개 중 어느 것 이하 또는 그 미만의 아미노산 길이이다. 일부 실시양태에서, 펩티드 링커의 길이는 약 1개 아미노산 내지 약 10개 아미노산, 약 1개 아미노산 내지 약 20개 아미노산, 약 1개 아미노산 내지 약 30개 아미노산, 약 5개 아미노산 내지 약 15개 아미노산, 약 10개 아미노산 내지 약 25개 아미노산, 약 5개 아미노산 내지 약 30개 아미노산, 약 10개 아미노산 내지 약 30개 아미노산 길이, 약 30개 아미노산 내지 약 50개 아미노산, 약 50개 아미노산 내지 약 100개 아미노산, 또는 약 1개 아미노산 내지 약 100개 아미노산 중 어느 것이다.
이러한 펩티드 링커의 본질적인 기술적 특색은 상기 펩티드 링커가 임의의 중합 활성을 포함하지 않는다는 것이다. 2차 구조의 촉진의 부재를 포함하는 펩티드 링커의 특징은 관련 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들어 문헌 [Dall'Acqua et al., (Biochem. (1998) 37, 9266-9273), Cheadle et al., (Mol Immunol (1992) 29, 21-30) 및 Raag and Whitlow (FASEB (1995) 9(1), 73-80)]에 기재되어 있다. "펩티드 링커"의 맥락에서 특히 바람직한 아미노산은 Gly이다. 또한, 어떠한 2차 구조도 촉진하지 않는 펩티드 링커가 바람직하다. 도메인의 서로에 대한 연결은 예를 들어 유전 공학에 의해 제공될 수 있다. 융합되고 작동가능하게 연결된 이중특이적 단일 쇄 구축물을 제조하고, 이들을 포유동물 세포 또는 박테리아에서 발현시키는 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다 (예를 들어, WO 99/54440, Ausubel, Current Protocols in Molecular Biology, Green Publishing Associates and Wiley Interscience, N. Y. 1989 and 1994 또는 Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N. Y., 2001).
펩티드 링커는 프로테아제, 특히 매트릭스 메탈로프로테이나제 (MMP)에 의해 절단가능하지 않은 안정한 링커일 수 있다.
링커는 또한 가요성 링커일 수 있다. 예시적인 가요성 링커는 글리신 중합체 (G)n (서열식별번호: 225), 글리신-세린 중합체 (예를 들어, (GS)n (서열식별번호: 226), (GSGGS)n (서열식별번호: 227), (GGGGS)n (서열식별번호: 228), 및 (GGGS)n (서열식별번호: 229) 포함, 여기서 n은 적어도 1의 정수임), 글리신-알라닌 중합체, 알라닌-세린 중합체, 및 관련 기술분야에 공지된 다른 가요성 링커를 포함한다. 글리신 및 글리신-세린 중합체는 상대적으로 비구조화되고, 따라서 성분들 사이의 중성 테더로서의 역할을 할 수 있다. 글리신은 심지어 알라닌보다 유의하게 더 많이 phi-psi 공간에 접근하고, 보다 긴 측쇄를 갖는 잔기보다 훨씬 덜 제한된다 (문헌 [Scheraga, Rev. Computational Chem. 11 173-142 (1992)] 참조). 통상의 기술자는 항체 융합 단백질의 설계가 모두 또는 부분적으로 가요성인 링커를 포함할 수 있으므로, 링커가 가요성 링커 부분뿐만 아니라 덜 가요성인 구조를 부여하는 1개 이상의 부분을 포함하여 목적하는 항체 융합 단백질 구조를 제공할 수 있다는 것을 인식할 것이다.
또한, 예시적인 링커는 예컨대 n이 1 내지 8의 정수인 (GGGGS)n (서열식별번호: 228), 예를 들어 (GGGGS)3 (서열식별번호: 230; 이하 "(G4S)3" 또는 "GS3"으로 지칭됨), 또는 (GGGGS)6 (서열식별번호: 231; 이하 "(G4S)6" 또는 "GS6"으로 지칭됨)의 아미노산 서열을 또한 포함한다. 일부 실시양태에서, 펩티드 링커는 (GSTSGSGKPGSGEGS)n (서열식별번호: 232)의 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 n은 1 내지 3의 정수이다.
비-펩티드 링커
2개의 모이어티의 커플링은 둘 다의 성분이 그의 각각의 활성, 예를 들어 항-CD93 다중특이적 항체에서 각각 CD93 및 제2 작용제에 대한 결합을 보유하는 한, 2개의 분자에 결합할 임의의 화학 반응에 의해 달성될 수 있다. 이러한 연결은 많은 화학적 메카니즘, 예를 들어 공유 결합, 친화도 결합, 삽입, 배위 결합 및 복합체화를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 결합은 공유 결합이다. 공유 결합은 기존 측쇄의 직접 축합에 의해 또는 외부 가교 분자의 혼입에 의해 달성될 수 있다. 많은 2가 또는 다가 연결제가 이러한 맥락에서 단백질 분자를 커플링시키는데 유용할 수 있다. 예를 들어, 대표적인 커플링제는 유기 화합물, 예컨대 티오에스테르, 카르보디이미드, 숙신이미드 에스테르, 디이소시아네이트, 글루타르알데히드, 디아조벤젠 및 헥사메틸렌 디아민을 포함할 수 있다. 이러한 목록은 관련 기술분야에 공지된 다양한 부류의 커플링제를 포괄하는 것으로 의도되지 않으며, 오히려 보다 통상적인 커플링제의 예이다 (문헌 [Killen and Lindstrom, Jour. Immun. 133:1335-2549 (1984); Jansen et al., Immunological Reviews 62:185-216 (1982); 및 Vitetta et al., Science 238:1098 (1987)] 참조).
본 출원에 적용될 수 있는 링커는 문헌에 기재되어 있다 (예를 들어, MBS (M-말레이미도벤조일-N-히드록시숙신이미드 에스테르)의 사용을 기재한 문헌 [Ramakrishnan, S. et al., Cancer Res. 44:201-208 (1984)] 참조). 일부 실시양태에서, 본원에 사용된 비-펩티드 링커는 (i) EDC (1-에틸-3-(3-디메틸아미노-프로필) 카르보디이미드 히드로클로라이드; (ii) SMPT (4-숙신이미딜옥시카르보닐-알파-메틸-알파-(2-피리딜-디티오)-톨루엔 (피어스 켐. 캄파니(Pierce Chem. Co.), Cat. (21558G); (iii) SPDP (숙신이미딜-6 [3-(2-피리딜디티오) 프로피온아미도] 헥사노에이트 (피어스 켐. 캄파니, Cat #21651G); (iv) 술포-LC-SPDP (술포숙신이미딜 6 [3-(2-피리딜디티오)-프로피안아미드] 헥사노에이트 (피어스 켐. 캄파니, Cat. #2165-G); 및 (v) EDC에 접합된 술포-NHS (N-히드록시술포-숙신이미드: 피어스 켐. 캄파니, Cat. #24510)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 링커는 PEG 함유 링커이다.
상기 기재된 링커는 상이한 속성을 갖는 성분을 함유하고, 따라서 상이한 물리화학적 특성을 갖는 이중특이적 항체로 이어질 수 있다. 예를 들어, 알킬 카르복실레이트의 술포-NHS 에스테르는 방향족 카르복실레이트의 술포-NHS 에스테르보다 더 안정하다. NHS-에스테르 함유 링커는 술포-NHS 에스테르보다 덜 가용성이다. 추가로, 링커 SMPT는 입체 장애 디술피드 결합을 함유하고, 증가된 안정성을 갖는 항체 융합 단백질을 형성할 수 있다. 디술피드 연결은 시험관내 절단되기 때문에, 디술피드 연결은 일반적으로 다른 연결보다 덜 안정하여 이용가능한 항체 융합 단백질을 덜 생성한다. 술포-NHS는 특히 카르보디이미드 커플링의 안정성을 증진시킬 수 있다. 카르보디이미드 커플링 (예컨대 EDC)은, 술포-NHS와 함께 사용되는 경우에, 카르보디이미드 커플링 반응 단독보다 가수분해에 대해 더 저항성인 에스테르를 형성한다.
III. 제조 방법
일부 실시양태에서, CD93에 특이적으로 결합하는 항-CD93 구축물 또는 항체 모이어티를 제조하는 방법, 및 항-CD93 구축물 또는 항체 모이어티의 제조 동안 생산되는 조성물, 예컨대 폴리뉴클레오티드, 핵산 구축물, 벡터, 숙주 세포, 또는 배양 배지가 제공된다. 본원에 기재된 항-CD93 구축물 또는 항체 모이어티 또는 조성물은 일반적으로 하기 및 보다 구체적으로 실시예에 기재된 바와 같은 다수의 방법에 의해 제조될 수 있다.
항체 발현 및 생산
본원에 기재된 항체 (항-CD93 모노클로날 항체, 항-CD93 이중특이적 항체, 및 항-CD93 항체 모이어티 포함)는 하기 및 실시예에 기재된 것을 포함한 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
모노클로날 항체
모노클로날 항체는 실질적으로 동종 항체의 집단으로부터 수득되며, 즉 집단을 구성하는 개별 항체는 미량으로 존재할 수 있는 가능한 자연 발생 돌연변이 및/또는 번역후 변형 (예를 들어, 이성질화, 아미드화)을 제외하고는 동일하다. 따라서, 수식어 "모노클로날"은 별개의 항체의 혼합물이 아닌 것으로서 항체의 특징을 나타낸다. 예를 들어, 모노클로날 항체는 문헌 [Kohler et al., Nature, 256:495 (1975)]에 최초로 기재된 하이브리도마 방법을 사용하여 제조될 수 있거나, 또는 재조합 DNA 방법 (미국 특허 번호 4,816,567)에 의해 제조될 수 있다. 하이브리도마 방법에서, 마우스 또는 다른 적절한 숙주 동물, 예컨대 햄스터 또는 라마는 면역화에 사용되는 단백질에 특이적으로 결합할 항체를 생산하거나 생산할 수 있는 림프구를 도출하기 위해 상기 기재된 바와 같이 면역화된다. 대안적으로, 림프구는 시험관내 면역화될 수 있다. 이어서, 림프구를 적합한 융합제, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜을 사용하여 골수종 세포와 융합시켜 하이브리도마 세포를 형성한다 (Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp. 59-103 (Academic Press, 1986). 낙타에서의 면역화에 대해서는 또한 실시예 1을 참조한다.
면역화제는 전형적으로 항원 단백질 또는 그의 융합 변이체를 포함할 것이다. 일반적으로, 인간 기원의 세포를 원하는 경우에는 말초 혈액 림프구 ("PBL")가 사용되거나, 또는 비-인간 포유동물 공급원을 원하는 경우에는 비장 세포 또는 림프절 세포가 사용된다. 이어서, 림프구를 적합한 융합제, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜을 사용하여 불멸화 세포주와 융합시켜 하이브리도마 세포를 형성한다. 문헌 [Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, Academic Press (1986), pp. 59-103].
불멸화 세포주는 통상적으로 형질전환된 포유동물 세포, 특히 설치류, 소 및 인간 기원의 골수종 세포이다. 통상적으로, 래트 또는 마우스 골수종 세포주가 사용된다. 이와 같이 제조된 하이브리도마 세포는, 바람직하게는 융합되지 않은 모 골수종 세포의 성장 또는 생존을 억제하는 1종 이상의 물질을 함유하는 적합한 배양 배지에 시딩되고 성장된다. 예를 들어, 모 골수종 세포에 효소 하이포크산틴 구아닌 포스포리보실 트랜스퍼라제 (HGPRT 또는 HPRT)가 결여된 경우에, 하이브리도마용 배양 배지는 전형적으로 HGPRT-결핍 세포의 성장을 막는 물질인 하이포크산틴, 아미노프테린 및 티미딘 (HAT 배지)을 포함할 것이다.
바람직한 불멸화 골수종 세포는 효율적으로 융합하고, 선택된 항체-생산 세포에 의한 항체의 안정한 높은-수준의 생산을 지지하고, 배지, 예컨대 HAT 배지에 감수성인 것이다. 이들 중에서, 뮤린 골수종 세포주, 예컨대 미국 캘리포니아주 샌디에고 소재의 솔크 인스티튜트 셀 디스트리뷰션 센터(Salk Institute Cell Distribution Center)로부터 입수가능한 MOPC-21 및 MPC-11 마우스 종양으로부터 유래된 것, 및 미국 버지니아주 마나사스 소재의 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션(American Type Culture Collection)으로부터 입수가능한 SP-2 세포 (및 그의 유도체, 예를 들어, X63-Ag8-653)가 바람직하다. 인간 골수종 및 마우스-인간 이종골수종 세포주도 또한 인간 모노클로날 항체의 생산에 대해 기재되었다 (Kozbor, J. Immunol., 133:3001 (1984); Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)).
하이브리도마 세포가 성장하는 배양 배지는 항원에 대해 지시된 모노클로날 항체의 생산에 대해 검정된다. 바람직하게는, 하이브리도마 세포에 의해 생산된 모노클로날 항체의 결합 특이성이 면역침전에 의해 또는 시험관내 결합 검정, 예컨대 유동 세포측정법, 방사선면역검정 (RIA) 또는 효소-연결 면역흡착 검정 (ELISA)에 의해 결정된다.
하이브리도마 세포가 배양되는 배양 배지는 목적하는 항원에 대해 지시된 모노클로날 항체의 존재에 대해 검정될 수 있다. 바람직하게는, 모노클로날 항체의 결합 친화도 및 특이성은 면역침전에 의해 또는 시험관내 결합 검정, 예컨대 방사선면역검정 (RIA), 효소-연결 검정 (ELISA), 또는 BLI에 의해 결정될 수 있다. 이러한 기술 및 검정은 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 결합 친화도는 문헌 [Munson et al., Anal. Biochem., 107:220 (1980)]의 스캐차드 분석에 의해 결정될 수 있다.
목적하는 특이성, 친화도, 및/또는 활성의 항체를 생산하는 하이브리도마 세포를 확인한 후, 클론을 제한 희석 절차에 의해 서브클로닝하고, 표준 방법에 의해 성장시킬 수 있다 (Goding, 상기 문헌). 이러한 목적에 적합한 배양 배지는, 예를 들어 D-MEM 또는 RPMI-1640 배지를 포함한다. 또한, 하이브리도마 세포는 포유동물에서 종양으로서 생체내 성장시킬 수 있다.
서브클론에 의해 분비된 모노클로날 항체는 통상적인 이뮤노글로불린 정제 절차, 예컨대 예를 들어 단백질 A-세파로스, 히드록실아파타이트 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피, 겔 전기영동, 투석 또는 친화성 크로마토그래피에 의해 배양 배지, 복수액, 또는 혈청으로부터 적합하게 분리된다.
모노클로날 항체는 또한 재조합 DNA 방법, 예컨대 미국 특허 번호 4,816,567에 기재된 것에 의해, 상기 기재된 바와 같이 제조될 수 있다. 모노클로날 항체를 코딩하는 mRNA는 통상적인 절차를 사용하여 (예를 들어, 뮤린 항체의 중쇄 및 경쇄를 코딩하는 cDNA에 특이적으로 결합할 수 있는 올리고뉴클레오티드 프로브를 사용함으로써) 용이하게 단리되고 서열분석된다. 하이브리도마 세포는 이러한 mRNA의 바람직한 공급원으로서의 역할을 한다. 일단 단리되면, cDNA를 발현 벡터 내로 넣을 수 있고, 이어서 이를 달리 이뮤노글로불린 단백질을 생산하지 않는 숙주 세포, 예컨대 이. 콜라이(E. coli) 세포, 원숭이 COS 세포, 차이니즈 햄스터 난소 (CHO) 세포, 또는 골수종 세포 내로 형질감염시켜, 이러한 재조합 숙주 세포에서 모노클로날 항체를 합성한다. 항체를 코딩하는 DNA의 박테리아에서의 재조합 발현에 대한 종설 논문은 문헌 [Skerra et al., Curr. Opinion in Immunol., 5:256-262 (1993) 및 Plueckthun, Immunol. Revs. 130:151-188 (1992)]을 포함한다.
추가 실시양태에서, 항체는 문헌 [McCafferty et al., Nature, 348:552-554 (1990)]에 기재된 기술을 사용하여 생성된 항체 파지 라이브러리로부터 단리될 수 있다. 문헌 [Clackson et al., Nature, 352:624-628 (1991) 및 Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581-597 (1991)]은 파지 라이브러리를 사용한 뮤린 및 인간 항체의 단리를 각각 기재한다. 후속 간행물은 쇄 셔플링에 의한 고친화도 (nM 범위) 인간 항체의 생산 (Marks et al., Bio/Technology, 10:779-783 (1992)), 뿐만 아니라 매우 큰 파지 라이브러리를 구축하기 위한 전략으로서 조합 감염 및 생체내 재조합 (Waterhouse et al., Nucl. Acids Res., 21:2265-2266 (1993))을 기재한다. 따라서, 이들 기술은 모노클로날 항체의 단리를 위한 전통적인 모노클로날 항체 하이브리도마 기술에 대한 실행가능한 대안이다.
DNA는 또한, 예를 들어 상동 뮤린 서열 대신 인간 중쇄 및 경쇄 불변 도메인에 대한 코딩 서열을 치환시키거나 (미국 특허 번호 4,816,567; 문헌 [Morrison, et al., Proc. Natl Acad. Sci. USA, 81:6851 (1984)]), 또는 이뮤노글로불린 코딩 서열에 비-이뮤노글로불린 폴리펩티드에 대한 코딩 서열의 전부 또는 일부를 공유 연결시킴으로써 변형시킬 수 있다. 전형적으로, 이러한 비-이뮤노글로불린 폴리펩티드는 항체의 불변 도메인을 치환시키거나, 또는 항체의 하나의 항원-결합 부위의 가변 도메인을 치환시켜 항원에 대한 특이성을 갖는 하나의 항원-결합 부위 및 상이한 항원에 대한 특이성을 갖는 또 다른 항원-결합 부위를 포함하는 키메라 2가 항체를 생성한다.
본원에 기재된 모노클로날 항체는 1가일 수 있으며, 그의 제조는 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 하나의 방법은 이뮤노글로불린 경쇄 및 변형된 중쇄의 재조합 발현을 수반한다. 중쇄는 중쇄 가교를 방지하도록 일반적으로 Fc 영역 내의 임의의 지점에서 말단절단된다. 대안적으로, 관련 시스테인 잔기는 또 다른 아미노산 잔기로 치환될 수 있거나 또는 가교를 방지하도록 결실된다. 시험관내 방법이 또한 1가 항체를 제조하는데 적합하다. 그의 단편, 특히 Fab 단편을 생산하기 위한 항체의 소화는 관련 기술분야에 공지된 상용 기술을 사용하여 달성될 수 있다.
키메라 또는 하이브리드 항체는 또한 가교제를 수반하는 것을 비롯한 합성 단백질 화학에 공지된 방법을 사용하여 시험관내 제조될 수 있다. 예를 들어, 디술피드-교환 반응을 사용하여 또는 티오에테르 결합을 형성하는 것에 의해 면역독소를 구축될 수 있다. 이러한 목적에 적합한 시약의 예는 이미노티올레이트 및 메틸-4-메르캅토부티르이미데이트를 포함한다.
항체 모이어티를 코딩하는 핵산 분자
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항-CD93 구축물 또는 항체 모이어티 중 어느 하나를 코딩하는 폴리뉴클레오티드가 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 방법 중 어느 하나를 사용하여 제조된 폴리뉴클레오티드가 제공된다. 일부 실시양태에서, 핵산 분자는 항체 모이어티 (예를 들어, 항-CD93 항체 모이어티)의 중쇄 또는 경쇄를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 핵산 분자는 항체 모이어티 (예를 들어, 항-CD93 항체 모이어티)의 중쇄를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 경쇄를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 둘 다를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제1 핵산 분자는 중쇄를 코딩하는 제1 폴리뉴클레오티드를 포함하고, 제2 핵산 분자는 경쇄를 코딩하는 제2 폴리뉴클레오티드를 포함한다.
일부 이러한 실시양태에서, 중쇄 및 경쇄는 1개의 핵산 분자로부터, 또는 2개의 별개의 핵산 분자로부터, 2개의 별개의 폴리펩티드로서 발현된다. 일부 실시양태에서, 예컨대 항체가 scFv인 경우에, 단일 폴리뉴클레오티드는 함께 연결된 중쇄 및 경쇄 둘 다를 포함하는 단일 폴리펩티드를 코딩한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티 (예를 들어, 항-CD93 항체 모이어티)의 중쇄 또는 경쇄를 코딩하는 폴리뉴클레오티드는 번역되는 경우에 중쇄 또는 경쇄의 N 말단에 위치하는 리더 서열을 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 상기 논의된 바와 같이, 리더 서열은 천연 중쇄 또는 경쇄 리더 서열일 수 있거나, 또는 또 다른 이종 리더 서열일 수 있다.
일부 실시양태에서, 폴리뉴클레오티드는 DNA이다. 일부 실시양태에서, 폴리뉴클레오티드는 RNA이다. 일부 실시양태에서, RNA는 mRNA이다.
핵산 분자는 관련 기술분야에서 통상적인 재조합 DNA 기술을 사용하여 구축될 수 있다. 일부 실시양태에서, 핵산 분자는 선택된 숙주 세포에서의 발현에 적합한 발현 벡터이다.
핵산 구축물
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나를 포함하는 핵산 구축물이 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 방법을 사용하여 제조된 핵산 구축물이 제공된다.
일부 실시양태에서, 핵산 구축물은 폴리뉴클레오티드에 작동가능하게 연결된 프로모터를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 폴리뉴클레오티드는 유전자에 상응하며, 여기서 프로모터는 유전자에 대한 야생형 프로모터이다.
벡터
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항체 모이어티 (예를 들어, 항-CD93 항체 모이어티) 또는 본원에 기재된 핵산 구축물 중 어느 하나의 중쇄 및/또는 경쇄를 코딩하는 임의의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터가 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 방법을 사용하여 제조된 벡터가 제공된다. 항-CD93 구축물, 예컨대 항체, scFv, 융합 단백질 또는 본원에 기재된 구축물의 다른 형태 (예를 들어, 항-CD93 scFv) 중 어느 것을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터가 또한 제공된다. 이러한 벡터는 DNA 벡터, 파지 벡터, 바이러스 벡터, 레트로바이러스 벡터 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 벡터는 중쇄를 코딩하는 제1 폴리뉴클레오티드 서열 및 경쇄를 코딩하는 제2 폴리뉴클레오티드 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 중쇄 및 경쇄는 벡터로부터 2개의 별개의 폴리펩티드로서 발현된다. 일부 실시양태에서, 중쇄 및 경쇄는, 예컨대 예를 들어 항체가 scFv인 경우에 단일 폴리펩티드의 일부로서 발현된다.
일부 실시양태에서, 제1 벡터는 중쇄를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하고, 제2 벡터는 경쇄를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제1 벡터 및 제2 벡터는 유사한 양 (예컨대 유사한 몰량 또는 유사한 질량)으로 숙주 세포 내로 형질감염된다. 일부 실시양태에서, 5:1 내지 1:5의 몰 비 또는 질량 비의 제1 벡터 및 제2 벡터가 숙주 세포 내로 형질감염된다. 일부 실시양태에서, 중쇄를 코딩하는 벡터 및 경쇄를 코딩하는 벡터에 대해 1:1 내지 1:5의 질량 비가 사용된다. 일부 실시양태에서, 중쇄를 코딩하는 벡터 및 경쇄를 코딩하는 벡터에 대해 1:2의 질량 비가 사용된다.
일부 실시양태에서, CHO 또는 CHO-유래 세포에서, 또는 NSO 세포에서 폴리펩티드의 발현을 위해 최적화된 벡터가 선택된다. 예시적인 이러한 벡터는, 예를 들어 문헌 [Running Deer et al., Biotechnol. Prog. 20:880-889 (2004)]에 기재되어 있다.
숙주 세포
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드, 핵산 구축물 및/또는 벡터를 포함하는 숙주 세포가 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 방법을 사용하여 제조된 숙주 세포가 제공된다. 일부 실시양태에서, 숙주 세포는 발효 조건 하에 본원에 기재된 항체 모이어티 중 어느 것을 생산할 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항체 모이어티 (예를 들어, 항-CD93 항체 모이어티)는 원핵 세포, 예컨대 박테리아 세포에서; 또는 진핵 세포, 예컨대 진균 세포 (예컨대 효모), 식물 세포, 곤충 세포, 및 포유동물 세포에서 발현될 수 있다. 이러한 발현은, 예를 들어 관련 기술분야에 공지된 절차에 따라 수행될 수 있다. 폴리펩티드를 발현하는데 사용될 수 있는 예시적인 진핵 세포는 COS 세포, 예컨대 COS 7 세포; 293 세포, 예컨대 293-6E 세포; CHO 세포, 예컨대 CHO-S, DG44. Lec13 CHO 세포, CHOZN® 및 FUT8 CHO 세포; PER.C6® 세포 (크루셀); 및 NSO 세포를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항체 모이어티 (예를 들어, 항-CD93 항체 모이어티)는 효모에서 발현될 수 있다. 예를 들어, 미국 공개 번호 US 2006/0270045 A1을 참조한다. 일부 실시양태에서, 특정한 진핵 숙주 세포는 항체 모이어티의 중쇄 및/또는 경쇄에 목적하는 번역후 변형을 만드는 그의 능력에 기초하여 선택된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, CHO 세포는 293 세포에서 생산된 동일한 폴리펩티드보다 더 높은 수준의 시알릴화를 갖는 폴리펩티드를 생산한다.
목적하는 숙주 세포 내로의 1개 이상의 핵산의 도입은 인산칼슘 형질감염, DEAE-덱스트란 매개 형질감염, 양이온성 지질-매개 형질감염, 전기천공, 형질도입, 감염 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는 임의의 방법에 의해 달성될 수 있다. 비제한적인 예시적인 방법은 예를 들어 문헌 [Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 3rd ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press (2001)]에 기재되어 있다. 핵산은 임의의 적합한 방법에 따라 목적하는 숙주 세포에서 일시적으로 또는 안정하게 형질감염될 수 있다.
본 출원은 또한 본원에 기재된 폴리뉴클레오티드 또는 벡터 중 어느 것을 포함하는 숙주 세포를 제공한다. 일부 실시양태에서, 본 발명은 항-CD93 항체를 포함하는 숙주 세포를 제공한다. 이종 DNA를 과다발현할 수 있는 임의의 숙주 세포가 관심 항체, 폴리펩티드 또는 단백질을 코딩하는 유전자를 단리하기 위한 목적으로 사용될 수 있다. 포유동물 숙주 세포의 비제한적 예는 COS, HeLa, 및 CHO 세포를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 또한, PCT 공개 번호 WO 87/04462를 참조한다. 적합한 비-포유동물 숙주 세포는 원핵생물 (예컨대 이. 콜라이 또는 비. 서브틸리스(B. subtillis)) 및 효모 (예컨대 에스. 세레비지아에(S. cerevisiae), 에스. 폼베(S. pombe); 또는 케이. 락티스(K. lactis))를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체 모이어티는 무세포 시스템에서 생산된다. 비제한적인 예시적인 무세포 시스템은, 예를 들어 문헌 [Sitaraman et al., Methods Mol. Biol. 498: 229-44 (2009); Spirin, Trends Biotechnol. 22: 538-45 (2004); Endo et al., Biotechnol. Adv. 21: 695-713 (2003)]에 기재되어 있다.
배양 배지
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 항체 모이어티, 폴리뉴클레오티드, 핵산 구축물, 벡터, 및/또는 숙주 세포를 포함하는 배양 배지가 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 방법을 사용하여 제조된 배양 배지가 제공된다.
일부 실시양태에서, 배지는 하이포크산틴, 아미노프테린, 및/또는 티미딘을 포함한다 (예를 들어, HAT 배지). 일부 실시양태에서, 배지는 혈청을 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, 배지는 혈청을 포함한다. 일부 실시양태에서, 배지는 D-MEM 또는 RPMI-1640 배지이다. 일부 실시양태에서, 배지는 화학적으로 규정된 배지이다. 일부 실시양태에서, 화학적으로 규정된 배지는 숙주 세포주에 대해 최적화된다.
항체 모이어티의 정제
항-CD93 구축물 (예를 들어, 항-CD93 모노클로날 항체 또는 다중특이적 항체)은 임의의 적합한 방법에 의해 정제될 수 있다. 이러한 방법은 친화성 매트릭스 또는 소수성 상호작용 크로마토그래피의 사용을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 적합한 친화성 리간드는 ROR1 ECD 및 항체 불변 영역에 결합하는 리간드를 포함한다. 예를 들어, 단백질 A, 단백질 G, 단백질 A/G, 또는 항체 친화성 칼럼은 불변 영역에 결합하고 Fc 단편을 포함하는 항-CD93 구축물을 정제하는데 사용될 수 있다. 소수성 상호작용 크로마토그래피, 예를 들어 부틸 또는 페닐 칼럼이 또한 일부 폴리펩티드, 예컨대 항체를 정제하는데 적합할 수 있다. 이온 교환 크로마토그래피 (예를 들어 음이온 교환 크로마토그래피 및/또는 양이온 교환 크로마토그래피)는 또한 일부 폴리펩티드, 예컨대 항체를 정제하는데 적합할 수 있다. 혼합-모드 크로마토그래피 (예를 들어 역상/음이온 교환, 역상/양이온 교환, 친수성 상호작용/음이온 교환, 친수성 상호작용/양이온 교환 등)도 또한 일부 폴리펩티드, 예컨대 항체를 정제하는데 적합할 수 있다. 폴리펩티드를 정제하는 많은 방법이 관련 기술분야에 공지되어 있다.
V. 치료 방법
또한, 개체에서 질환 또는 상태를 치료하거나 또는 개체에서 면역 반응을 조정하는 방법이 본원에 제공된다. 방법은 본원에 기재된 항-CD93 구축물을 개체 (예를 들어, 포유동물, 예컨대 인간)에게 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 개체에게 유효량의 본원에 기재된 항-CD93 구축물을 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 질환 또는 상태를 치료하거나 또는 면역 반응을 조정하는 방법이 제공된다. 예시적인 질환 또는 상태는 연령-관련 황반 변성 (AMD), 당뇨병성 황반 부종 (DME), 맥락막 신생혈관화 (CNV) 및 암을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 개체에게 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하는 항-CD93 구축물의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 질환 또는 상태 (예컨대 AMD, DME, CNV, 또는 암)를 치료하는 방법이 제공되며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 13의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 14의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 개체에게 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하는 항-CD93 구축물의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 질환 또는 상태 (예컨대 AMD, DME, CNV, 또는 암)를 치료하는 방법이 제공되며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 VH는 i) 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, 항-CD93 VL은 i) 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 29 및 307-312 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 30, 및 313-318 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 개체에게 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하는 항-CD93 구축물의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 질환 또는 상태 (예컨대 AMD, DME, CNV, 또는 암)를 치료하는 방법이 제공되며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 45의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 46의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 개체에게 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하는 항-CD93 구축물의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 질환 또는 상태 (예컨대 AMD, DME, CNV, 또는 암)를 치료하는 방법이 제공되며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 77의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 78의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 개체에게 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하는 항-CD93 구축물의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 질환 또는 상태 (예컨대 AMD, DME, CNV, 또는 암)를 치료하는 방법이 제공되며, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서 VH-2는 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 i) 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 항체 모이어티는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항-CD93 항체로부터 유래된 인간화 항체이며, 여기서 VH는 i) 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL은 i) 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열식별번호: 287 및 319-321 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL은 서열식별번호: 288 및 322-324 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% (예컨대 적어도 약 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 중 어느 하나)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 상기 기재된 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "예시적인 치환"으로 제한된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 치환은 본 출원의 표 2에 제시된 "바람직한 치환"으로 제한된다.
일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 하나를 투여하는 것을 포함하는, 종양을 치료하는 방법이 제공된다. 일부 실시양태에서, 방법은 종양 성장을 항-CD93 구축물의 부재 하에서의 종양 성장과 비교하여 적어도 약 5%, 약 10%, 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80%, 약 90%, 또는 90% 초과만큼 지연시킨다.
일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 하나를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양의 크기를 감소시키는 방법이 제공된다. 일부 실시양태에서, 종양의 크기를 감소시키는 것은 대상체에서 종양 부피를 감소시키는 것을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 종양의 크기를 감소시키는 것은 대상체에서 종양 치수 (예를 들어, 직경)를 감소시키는 것을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 종양 크기는 항-CD93 구축물의 투여가 없는 대상체에서의 대응물 종양의 크기와 비교하여 적어도 약 2%, 약 5%, 약 10%, 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80%, 약 90%, 또는 약 90% 초과만큼 감소된다.
일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 하나를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 1종 이상의 종양을 제거하는 방법이 제공된다. 일부 실시양태에서, 종양 제거는 항-CD93 구축물 후 약 3일, 약 1주, 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 5주, 약 6주, 약 7주, 약 8주, 또는 약 8주 초과 후에 발생한다.
일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 항-CD93 구축물 중 어느 하나를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 내로의 면역 세포 침윤을 촉진하는 방법이 제공된다. 일부 실시양태에서, 방법은 종양 내로의 면역 세포 침투를 항-CD93 구축물의 투여가 없는 대상체에서의 것과 비교하여 적어도 약 2%, 약 5%, 약 10%, 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80%, 약 90%, 또는 약 90% 초과만큼 증가시킨다.
질환 또는 상태
본원에 기재된 방법은 비정상적 혈관 구조와 연관된 임의의 질환 또는 상태에 적용가능하다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 신생혈관화와 연관된다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 피부 건선이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 양성 종양이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 암이다.
신생혈관화와 연관된 질환
일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 신생혈관화와 연관된다. 본원에 기재된 "신생혈관화"는 새로운 혈관계가 기존 혈관계로부터 발생되는 현상을 지칭한다.
일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 눈의 신생혈관화와 연관된다.
일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 습성 AMD로도 공지된 맥락막 신생혈관화 (CNV)이다. 맥락막 신생혈관화는 맥락막에서 기원한 새로운 혈관이 브루크 막의 파괴를 통해 망막 색소 상피-하 (RPE-하) 또는 망막하 공간으로 성장하는 것을 수반할 수 있고, 이는 시각 상실의 주요 원인일 수 있다. CNV는 수주 내에 눈에 띄는 중심 시각의 갑작스러운 저하를 일으킬 수 있다. 발생할 수 있는 다른 증상은 색 장애 및 변시증 (직선이 파상선으로 보이는 왜곡)을 포함한다. 새로운 혈관의 출혈은 CNV의 증상의 개시를 가속화할 수 있다. CNV는 또한 눈 뒤의 압박감을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 바와 같은 방법 및 제약 조성물은 CNV 또는 신생혈관화와 연관된 눈 상태를 치료하는데 사용된다.
진행성 "습성" 형태 (신생혈관성 또는 삼출성)의 AMD는 덜 흔하지만, 빈번하게는 환자에서 중심 시각의 신속하고 종종 실질적인 상실을 유발할 수 있다. 습성 형태의 AMD에서, 맥락막 신생혈관화는 망막 색소 상피 아래에서 및 이를 통해 성장할 수 있는 혈관망을 형성하고 발달한다. 이는 망막하 공간으로의 혈장의 누출 및/또는 출혈을 동반하기 때문에, 이것이 황반에서 발생하는 경우에 중심 시각의 심각한 갑작스런 상실이 있을 수 있다. 용어 "AMD"는, 달리 명시되지 않는 한, 건성 AMD 또는 습성 AMD일 수 있다. 본 출원은 AMD, 습성 AMD 및/또는 건성 AMD의 치료 또는 예방을 고려한다.
일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 망막 정맥 폐쇄 (RVO) 후 황반 부종이다.
일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 당뇨병성 황반 부종 (DME)이다. 당뇨병성 황반 부종 (DME)은 황반 내의 혈관으로부터의 유체의 누출로 인한 당뇨병에서의 망막의 팽윤이다. 황반은 망막의 중심 부분으로, 원추가 풍부한 작은 영역이며, 색을 검출하고 주간 시각이 그에 의존하는 특수화된 신경 말단이다. 황반 부종이 발생함에 따라, 중심 시야의 중간 또는 바로 옆에서 흐려짐이 발생한다. 당뇨병성 황반 부종으로부터의 시각 상실은 수개월의 기간에 걸쳐 진행될 수 있고, 분명하게 초점을 맞추는 것을 불가능하게 한다. DME의 흔한 증상은 흐린 시각, 비문증, 복시, 및 치료되지 않는 경우 최종적으로는 실명이다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 바와 같은 방법 및 제약 조성물은 DME를 치료하는데 사용된다.
일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 망막 정맥 폐쇄이다. 망막 정맥 폐쇄는 망막으로부터 혈액을 운반하는 작은 정맥의 차단이다. 망막은 빛 영상을 신경 신호로 전환시키고 이를 뇌로 보내는 내부 눈 뒤쪽의 조직 층이다. 망막 정맥 폐쇄는 동맥의 경화 (아테롬성동맥경화증) 및 혈병의 형성에 의해 가장 종종 유발된다. 망막에서 보다 작은 정맥 (분지 정맥 또는 BRVO)의 차단은 종종, 아테롬성동맥경화증에 의해 비후되거나 경화된 망막 동맥이 교차하여 망막 정맥에 압력을 가하는 위치에서 발생한다. 망막 정맥 폐쇄의 증상은 한쪽 눈의 전부 또는 일부에서의 갑작스러운 흐려짐 또는 시각 상실을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 바와 같은 방법 및 제약 조성물은 망막 정맥 폐쇄를 치료하는데 사용된다.
일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 DME를 갖는 환자에서의 당뇨병성 망막병증 (DR)이다.
암
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 질환 또는 상태는 암이다. 본원에 기재된 방법 중 어느 것을 사용하여 치료될 수 있는 암은 임의의 유형의 암을 포함한다. 본 출원에 기재된 바와 같은 작용제로 치료될 암의 유형은 암종, 모세포종, 육종, 양성 및 악성 종양, 및 악성종양, 예를 들어 육종, 암종, 및 흑색종을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 성인 종양/암 및 소아 종양/암이 또한 포함된다.
다양한 실시양태에서, 암은 초기 암, 비-전이성 암, 원발성 암, 진행성 암, 국부 진행성 암, 전이성 암, 완화 상태의 암, 재발성 암, 보조 세팅의 암, 신보조 세팅의 암, 또는 요법에 실질적으로 불응성인 암이다.
일부 실시양태에서, 암은 고형 종양이다.
일부 실시양태에서, 암은 CD93+ 종양 내피 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 종양 내 내피 세포의 적어도 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 또는 90%는 CD93 양성이다. 일부 실시양태에서, 암은 대상체에서 정상 조직의 것보다 적어도 20%, 40%, 60%, 80%, 또는 100% 더 많은 CD93+ 내피 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 암은 암을 갖지 않는 대상체 또는 대상체의 군에서 상응하는 기관의 것보다 적어도 20%, 40%, 60%, 80%, 또는 100% 더 많은 CD93+ 내피 세포를 포함한다.
일부 실시양태에서, 암은 IGFBP7+ 혈관을 포함한다. 일부 실시양태에서, 암은 대상체에서 정상 조직의 것보다 적어도 20%, 40%, 60%, 80%, 또는 100% 더 많은 IGFBP7+ 혈관을 포함한다. 일부 실시양태에서, 암은 암을 갖지 않는 대상체 또는 대상체의 군에서 상응하는 기관의 것보다 적어도 20%, 40%, 60%, 80%, 또는 100% 더 많은 IGFBP7+ 혈관을 포함한다.
일부 실시양태에서, 암 (예를 들어, 고형 종양)은 종양 저산소증을 특징으로 한다. 일부 실시양태에서, 암은 적어도 약 1%, 2%, 3%, 4%, 또는 5%의 피모니다졸 양성 백분율 (즉, 피모니다졸 양성 면적을 총 종양 면적으로 나눈 것)을 특징으로 한다.
본 출원의 방법에 의해 치료될 수 있는 암의 예는 항문암, 성상세포종 (예를 들어, 소뇌 및 뇌), 기저 세포 암종, 방광암, 골암, (골육종 및 악성 섬유성 조직구종), 뇌 종양 (예를 들어, 신경교종, 뇌간 신경교종, 소뇌 또는 뇌 성상세포종 (예를 들어, 성상세포종, 악성 신경교종, 수모세포종, 및 교모세포종), 유방암, 자궁경부암, 결장암, 뇌암, 결장직장암, 자궁내막암 (예를 들어, 자궁암), 식도암, 안암 (예를 들어, 안내 흑색종 및 망막모세포종), 위 (위의) 암, 위장 기질 종양 (GIST), 두경부암, 간세포 (간) 암 (예를 들어, 간 암종 및 간세포암), 간암, 폐암 (예를 들어, 소세포 폐암, 비소세포 폐암, 폐의 선암종, 및 폐의 편평세포 암종), 수모세포종, 흑색종, 중피종, 골수이형성 증후군, 비인두암, 신경모세포종, 난소암, 췌장암, 부갑상선암, 복막암, 뇌하수체 종양, 직장암, 신암, 신우 및 요관암 (이행 세포암), 횡문근육종, 피부암 (예를 들어, 비-흑색종 (예를 들어, 편평 세포 암종), 흑색종, 및 메르켈 세포 암종), 소장암, 편평 세포암, 고환암, 갑상선암, 및 결절성 경화증을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 암의 추가의 예는 문헌 [The Merck Manual of Diagnosis and Therapy, 19th Edition, § on Hematology and Oncology, published by Merck Sharp & Dohme Corp., 2011 (ISBN 978-0-911910-19-3); The Merck Manual of Diagnosis and Therapy, 20th Edition, § on Hematology and Oncology, published by Merck Sharp & Dohme Corp., 2018 (ISBN 978-0-911-91042-1) (2018 digital online edition at internet website of Merck Manuals); 및 SEER Program Coding and Staging Manual 2016]에서 찾아볼 수 있으며, 이들 각각은 모든 목적을 위해 그 전문이 참조로 포함된다.
대상체
일부 실시양태에서, 대상체는 포유동물 (예컨대 인간)이다.
일부 실시양태에서, 대상체는 CD93+ 내피 세포를 포함하는 비정상적 혈관을 포함하는 조직을 갖는다. 일부 실시양태에서, 비정상적 혈관을 갖는 조직 내의 내피 세포의 적어도 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 또는 90%은 CD93 양성이다. 일부 실시양태에서, 비정상적 혈관을 갖는 조직은 대상체에서 정상 조직의 것보다 적어도 20%, 40%, 60%, 80%, 또는 100% 더 많은 CD93+ 내피 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 비정상적 혈관을 갖는 조직은 비정상적 혈관을 갖지 않는 대상체 또는 대상체 군에서 상응하는 기관의 것보다 적어도 20%, 40%, 60%, 80%, 또는 100% 더 많은 CD93+ 내피 세포를 포함한다.
일부 실시양태에서, 대상체는 IGFBP7+ 혈관을 포함하는 비정상적 혈관을 포함하는 조직을 갖는다. 일부 실시양태에서, 조직은 대상체에서 정상 조직의 것보다 적어도 20%, 40%, 60%, 80%, 또는 100% 더 많은 IGFBP7+ 혈관을 포함한다. 일부 실시양태에서, 조직은 비정상적 혈관을 갖지 않는 대상체 또는 대상체의 군에서 상응하는 기관의 것보다 적어도 20%, 40%, 60%, 80%, 또는 100% 더 많은 IGFBP7+ 혈관을 포함한다.
일부 실시양태에서, 대상체는 비정상적 혈관 구조에 기초하여 치료를 위해 선택된다. 일부 실시양태에서, 비정상적 혈관 구조는 CD93+ 내피 세포를 특징으로 한다 (예를 들어, CD93+ CD31+ 세포를 측정하는 것에 의함). 일부 실시양태에서, 비정상적 혈관을 갖는 조직 내의 내피 세포의 적어도 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 또는 90%은 CD93 양성이다. 일부 실시양태에서, 비정상적 혈관을 갖는 조직은 대상체에서 정상 조직의 것보다 적어도 20%, 40%, 60%, 80%, 또는 100% 더 많은 CD93+ 내피 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 비정상적 혈관을 갖는 조직은 비정상적 혈관을 갖지 않는 대상체 또는 대상체 군에서 상응하는 기관의 것보다 적어도 20%, 40%, 60%, 80%, 또는 100% 더 많은 CD93+ 내피 세포를 포함한다.
일부 실시양태에서, 비정상적 혈관 구조는 IGFBP7+ 혈관의 비정상적 수준을 특징으로 한다. 일부 실시양태에서, 조직은 대상체에서 정상 조직의 것보다 적어도 20%, 40%, 60%, 80%, 또는 100% 더 많은 IGFBP7+ 혈관을 포함한다. 일부 실시양태에서, 조직은 비정상적 혈관을 갖지 않는 대상체 또는 대상체의 군에서 상응하는 기관의 것보다 적어도 20%, 40%, 60%, 80%, 또는 100% 더 많은 IGFBP7+ 혈관을 포함한다.
일부 실시양태에서, 대상체는 적어도 1종의 선행 요법을 받는다. 일부 실시양태에서, 선행 요법은 방사선 요법, 화학요법 및/또는 면역요법을 포함한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 선행 요법에 대해 저항성, 불응성, 또는 재발성이다.
항-CD93 구축물의 투여 및 투여 방법
개체에게 투여되는 본원에 기재된 바와 같은 질환 또는 장애를 치료하는데 사용되는 항-CD93 구축물의 투여 요법 (예컨대 구체적 투여량 및 빈도)은 특정한 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체, 예컨대 항-CD93 융합 단백질), 투여 방식, 및 치료될 질환 또는 상태의 유형에 따라 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 상태의 유형은 암이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 객관적 반응 (예컨대 부분 반응 또는 완전 반응)을 발생시키는데 효과적인 양이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 개체에서 완전 반응을 발생시키기에 충분한 양이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 개체에서 부분 반응을 발생시키기에 충분한 양이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)로 치료된 개체의 집단 중에서 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 64%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 또는 90% 중 어느 것 초과의 전체 반응률을 생성하기에 충분한 양이다. 본원에 기재된 치료 방법에 대한 개체의 반응은, 예를 들어 RECIST 수준에 기초하여 결정될 수 있다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 개체의 무진행 생존을 연장시키기에 충분한 양이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 개체의 전체 생존을 연장시키기에 충분한 양이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)로 치료된 개체의 집단 중에서 약 50%, 60%, 70%, 80%, 또는 90% 중 어느 것 초과의 임상 이익을 생성하기에 충분한 양이다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체) 단독의 또는 제2, 제3, 및/또는 제4 작용제와 조합된 것의 유효량은 치료 전 동일한 대상체에서의 상응하는 종양 크기, 암 세포의 수, 또는 종양 성장 속도와 비교하여 또는 치료를 받지 않은 (예를 들어, 위약 치료를 받은) 다른 대상체에서의 상응하는 활성과 비교하여 적어도 약 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% 또는 100% 중 어느 것만큼 종양의 크기를 감소시키거나, 암 세포의 수를 감소시키거나, 또는 종양의 성장 속도를 감소시키기에 충분한 양이다. 표준 방법, 예컨대 정제된 효소를 사용한 시험관내 검정, 세포-기반 검정, 동물 모델, 또는 인간 시험이 이러한 효과의 크기를 측정하는데 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 조성물이 개체에게 투여되는 경우에 독성학적 효과 (즉, 임상적으로 허용되는 독성 수준 초과의 효과)를 유도하는 수준 미만이거나 또는 잠재적 부작용이 제어 또는 허용될 수 있는 수준인 양이다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 동일한 투여 요법에 따른 조성물의 최대 허용 용량 (MTD)에 가까운 양이다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 MTD의 약 80%, 90%, 95%, 또는 98% 중 어느 것 초과이다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 치료를 받지 않은 개체의 것과 비교하여 질환 또는 상태의 진행을 (예를 들어, 적어도 약 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 40%, 50%만큼) 둔화시키거나 억제하는 양이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 자가면역 질환이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 상태는 감염이다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 치료를 받지 않은 개체의 것과 비교하여 상태 (예를 들어, 이식)의 부작용 (자가면역 반응)을 (예를 들어, 적어도 약 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 40%, 또는 50%만큼) 감소시키는 양이다.
상기 측면 중 어느 것의 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물 (예컨대 항-CD93 모노클로날 또는 다중특이적 항체)의 유효량은 약 0.001 μg/kg 내지 약 100mg/kg 총 체중의 범위, 예를 들어, 약 0.005 μg/kg 내지 약 50 mg/kg, 약 0.01 μg/kg 내지 약 10 mg/kg, 또는 약 0.01 μg/kg 내지 약 1 mg/kg이다.
일부 실시양태에서, 치료는 항-CD93 구축물의 1회 초과의 투여 (예컨대 항-CD93 구축물의 약 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9회, 또는 10회 투여)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 2회 투여는 약 1주 내에 수행된다. 일부 실시양태에서, 제2 투여는 제1 투여의 완료의 적어도 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7일 후에 수행된다. 일부 실시양태에서, 제2 투여는 제1 투여의 완료의 약 1-14일, 1-10일, 1-7일, 2-6일, 또는 3-5일 후에 수행된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 1주 약 1-3회 (예컨대 1주 약 1회, 1주 약 2회, 또는 1주 약 3회) 투여된다.
항-CD93 구축물은 개체 (예컨대 인간)에게, 예를 들어 정맥내, 동맥내, 복강내, 폐내, 경구, 흡입, 소포내, 근육내, 기관내, 피하, 안내, 척수강내, 경점막, 및 경피를 포함한 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 개체에게 투여되는 동안 제약 조성물에 포함된다. 일부 실시양태에서, 조성물의 지속 연속 방출 제제가 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 복강내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 복강내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 근육내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 경구로 투여된다.
조합 요법
본 출원은 또한 질환 또는 상태 (예컨대 암)를 치료하기 위해 개체에게 항-CD93 구축물을 투여하는 방법을 제공하며, 여기서 방법은 제2 작용제 또는 요법을 투여하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제 또는 요법은 질환 또는 상태를 치료하기 위한 표준 또는 통상적으로 사용되는 작용제 또는 요법이다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제 또는 요법은 화학요법제를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제 또는 요법은 수술을 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제 또는 요법은 방사선 요법을 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제 또는 요법은 면역요법을 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제 또는 요법은 세포 요법 (예컨대 면역 세포 (예를 들어, CAR T 세포)를 포함하는 세포 요법)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제 또는 요법은 혈관신생 억제제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 제2 작용제는 화학요법제이다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제는 항대사물 작용제이다. 일부 실시양태에서, 항대사물 작용제는 5-FU이다.
일부 실시양태에서, 제2 작용제는 면역 체크포인트 조정제이다. 일부 실시양태에서, 면역 체크포인트 조정제는 PD-L1, PD-L2, CTLA4, PD-L2, PD-1, CD47, TIGIT, GITR, TIM3, LAG3, CD27, 4-1BB, 및 B7H4로 이루어진 군으로부터 선택된 면역 체크포인트 단백질의 억제제이다. 일부 실시양태에서, 면역 체크포인트 단백질은 PD-1이다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제는 항-PD-1 항체 또는 그의 단편이다.
일부 실시양태에서, 제2 요법은 면역요법이다. 일부 실시양태에서, 면역요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 면역 세포를 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 면역 세포는 T 세포 (예컨대 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포)이다. 일부 실시양태에서, 키메라 항원 수용체는 종양 항원에 결합한다.
일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 제2 작용제 또는 요법과 동시에 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 제2 작용제 또는 요법과 공동으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 제2 작용제 또는 요법과 순차적으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 제2 작용제 또는 요법 전에 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 제2 작용제 또는 요법 후에 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 제2 작용제 또는 요법과 동일한 단위 투여 형태로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 제2 작용제 또는 요법과 상이한 단위 투여 형태로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 제2 작용제 또는 요법과 동일한 단위 투여 형태로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-CD93 구축물은 제2 작용제 또는 요법과 상이한 단위 투여 형태로 투여된다.
VI. 조성물, 키트 및 제조 물품
또한, 본원에 기재된 항-CD93 구축물 또는 항-CD93 항체 모이어티, 항체 모이어티를 코딩하는 핵산, 항체 모이어티를 코딩하는 핵산을 포함하는 벡터, 또는 핵산 또는 벡터를 포함하는 숙주 세포 중 어느 하나를 포함하는 조성물 (예컨대 제제)이 본원에 제공된다.
본원에 기재된 항-CD93 구축물의 적합한 제제는 목적하는 정도의 순도를 갖는 항-CD93 구축물 또는 항-CD93 항체 모이어티를 임의적인 제약상 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제 (Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980))와 혼합하는 것에 의해 동결건조 제제 또는 수용액의 형태로 수득될 수 있다. 허용되는 담체, 부형제, 또는 안정화제는 사용되는 투여량 및 농도에서 수용자에게 비독성이고, 완충제 예컨대 포스페이트, 시트레이트, 및 다른 유기 산; 아스코르브산 및 메티오닌을 포함한 항산화제; 보존제 (예컨대 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알콜; 알킬 파라벤 예컨대 메틸 또는 프로필파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 시클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량 (약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 이뮤노글로불린; 친수성 중합체 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌, 또는 리신; 모노사카라이드, 디사카라이드, 및 글루코스, 만노스, 또는 덱스트린을 포함한 다른 탄수화물; 킬레이트화제 예컨대 EDTA; 당 예컨대 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨; 염-형성 반대-이온 예컨대 나트륨; 금속 착물 (예를 들어 Zn-단백질 복합체); 및/또는 비-이온성 계면활성제 예컨대 트윈(TWEEN)™, 플루로닉스(PLURONICS)™ 또는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)을 포함한다. 피하 투여에 적합화된 동결건조 제제는 WO97/04801에 기재되어 있다. 이러한 동결건조 제제는 적합한 희석제를 사용하여 높은 단백질 농도로 재구성될 수 있고, 재구성된 제제는 본원에서 영상화, 진단, 또는 치료될 개체에게 피하로 투여될 수 있다.
생체내 투여에 사용되는 제제는 멸균되어야 한다. 이는, 예를 들어 멸균 여과 막을 통한 여과에 의해 용이하게 달성된다.
또한, 본원에 기재된 항-CD93 구축물 또는 항-CD93 항체 모이어티 중 어느 하나를 포함하는 키트가 제공된다. 키트는 본원에 기재된 세포 조성물 또는 치료를 조정하는 방법 중 어느 것에 유용할 수 있다.
일부 실시양태에서, CD93에 특이적으로 결합하는 항-CD93 구축물을 포함하는 키트가 제공된다.
일부 실시양태에서, 키트는 항-CD93 구축물을 개체 내로 전달할 수 있는 장치를 추가로 포함한다. 비경구 전달과 같은 적용을 위한 하나의 유형의 장치는 조성물을 대상체의 신체 내로 주사하는데 사용되는 시린지이다. 흡입 장치가 또한 특정 적용에 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 키트는 질환 또는 상태, 예를 들어 암, 감염성 질환, 자가면역 질환, 또는 이식을 치료하기 위한 치료제를 추가로 포함한다.
본 출원의 키트는 적합한 포장 내에 있다. 적합한 포장은 바이알, 병, 단지, 가요성 포장 (예를 들어, 밀봉된 마일라 또는 플라스틱 백) 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 키트는 임의로 추가의 성분, 예컨대 완충제 및 설명 정보를 제공할 수 있다.
따라서, 본 출원은 또한 제조 물품을 제공한다. 제조 물품은 용기, 및 용기 상에 있거나 용기와 회합된 라벨 또는 패키지 삽입물을 포함할 수 있다. 적합한 용기는 바이알 (예컨대 밀봉된 바이알), 병, 단지, 가요성 포장 등을 포함한다. 일반적으로, 용기는 조성물을 수용하고, 멸균 접근 포트를 가질 수 있다 (예를 들어, 용기는 피하 주사 바늘로 뚫을 수 있는 마개를 갖는 정맥내 용액 백 또는 바이알일 수 있음). 라벨 또는 패키지 삽입물은 조성물이 개체에서 특정한 상태를 영상화, 진단, 또는 치료하는데 사용된다는 것을 나타낸다. 라벨 또는 패키지 삽입물은 개체에게 조성물을 투여하고 개체를 영상화하는 것에 대한 지침서를 추가로 포함할 것이다. 라벨은 재구성 및/또는 사용에 대한 지시를 나타낼 수 있다. 조성물을 수용하는 용기는 재구성된 제제의 반복 투여 (예를 들어, 2-6회 투여)를 가능하게 하는 다중-사용 바이알일 수 있다. 패키지 삽입물은 이러한 진단 제품의 사용에 관한 적응증, 용법, 투여량, 투여, 금기사항 및/또는 경고에 대한 정보를 함유하는, 진단 제품의 상업용 패키지에 통상적으로 포함되는 지침서를 지칭한다. 추가적으로, 제조 물품은 제약상 허용되는 완충제, 예컨대 정박테리아 주사용수 (BWFI), 포스페이트-완충 염수, 링거액 및 덱스트로스 용액을 포함하는 제2 용기를 추가로 포함할 수 있다. 이는 상업적 및 사용자 관점에서 바람직한 다른 물질, 예컨대 다른 완충제, 희석제, 필터, 바늘, 및 시린지를 추가로 포함할 수 있다.
키트 또는 제조 물품은 약국, 예를 들어 병원 약국 및 조제 약국에서 저장 및 사용하기에 충분한 양으로 포장된 다중 단위 용량의 조성물 및 사용에 대한 지침서를 포함할 수 있다.
관련 기술분야의 통상의 기술자는 본 발명의 범주 및 취지 내에서 여러 실시양태가 가능하다는 것을 인식할 것이다. 본 발명은 이제 하기 비제한적 실시예를 참조하여 보다 상세히 기재될 것이다. 하기 실시예는 본 발명을 추가로 예시하지만, 물론 어떠한 방식으로도 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다.
예시적인 실시양태
실시양태 1. 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하는 항-CD93 구축물로서, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서:
a) VH-2는 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
b) VH-2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
c) VH-2는 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
d) VH-2는 서열식별번호: 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
e) VH-2는 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
f) VH-2는 서열식별번호: 81의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 82의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 83의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 84의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
g) VH-2는 서열식별번호: 97의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 98의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 99의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 100의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
h) VH-2는 서열식별번호: 113의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 114의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 116의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
i) VH-2는 서열식별번호: 129의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 130의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 131의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 133의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
j) VH-2는 서열식별번호: 145의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 146의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 147의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 148, 355, 또는 358의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 149 또는 356의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 150, 357 또는 359의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
k) VH-2는 서열식별번호: 161의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 162의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 163의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 164의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 165의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 166의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
l) VH-2는 서열식별번호: 177의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 178의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 179의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 180 또는 353의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 181 또는 354의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
m) VH-2는 서열식별번호: 193의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 194의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 195의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 196의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 197의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 198의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
n) VH-2는 서열식별번호: 209의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 210의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 211의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 212의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 213의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 214의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
o) VH-2는 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나; 또는
p) VH-2는 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는 것인
항-CD93 구축물.
실시양태 2. 실시양태 1에 있어서,
a) VH가 i) 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
b) VH가 i) 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
c) VH가 i) 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
d) VH가 i) 서열식별번호: 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
e) VH가 i) 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
f) VH가 i) 서열식별번호: 81의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 82의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 83의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 84의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
g) VH가 i) 서열식별번호: 97의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 98의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 99의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 100의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
h) VH가 i) 서열식별번호: 113의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 114의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 116의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
i) VH가 i) 서열식별번호: 129의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 130의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 131의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 133의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
j) VH가 i) 서열식별번호: 145의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 146의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 147의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 148, 355, 또는 358의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 149 또는 356의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 150, 357 또는 359의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
k) VH가 i) 서열식별번호: 161의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 162의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 163의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 164의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 165의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 166의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
l) VH가 i) 서열식별번호: 177의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 178의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 179의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 180 또는 353의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 181 또는 354의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
m) VH가 i) 서열식별번호: 193의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 194의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 195의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 196의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 197의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 198의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
n) VH가 i) 서열식별번호: 209의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 210의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 211의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 212의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 213의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 214의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
o) VH가 i) 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나, 또는
p) VH가 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인
항-CD93 구축물.
실시양태 3. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 4. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 5. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 6. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 7. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 8. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 81의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 82의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 83의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 84의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 9. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 97의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 98의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 99의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 100의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 10. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 113의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 114의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 116의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 11. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 129의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 130의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 131의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 133의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 12. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 145의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 146의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 147의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 148, 355, 또는 358의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 149 또는 356의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 150, 357 또는 359의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 13. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 161의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 162의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 163의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 164의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 165의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 166의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 14. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 177의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 178의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 179의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 180 또는 353의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 181 또는 354의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 15. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 193의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 194의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 195의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 196의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 197의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 198의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 16. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 209의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 210의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 211의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 212의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 213의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 214의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 17. 실시양태 2에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 18. 하기를 포함하는, CD93에 특이적으로 결합하는 항체 모이어티를 포함하는 항-CD93 구축물:
a) 서열식별번호: 13에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 14에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
b) 서열식별번호: 29 및 307-312 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 30, 및 313-318 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
c) 서열식별번호: 45에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 46에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
d) 서열식별번호: 61에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 62에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
e) 서열식별번호: 77에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 78에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
f) 서열식별번호: 93에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 94에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
g) 서열식별번호: 109에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 110에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
h) 서열식별번호: 125에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 126에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
i) 서열식별번호: 141에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 142에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
j) 서열식별번호: 157 및 360-362 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 158, 및 363-365 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
k) 서열식별번호: 173에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 174에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
l) 서열식별번호: 189 및 347-349 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 190, 및 350-352 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
m) 서열식별번호: 205에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 206에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
n) 서열식별번호: 221에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 222에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
o) 서열식별번호: 287 및 319-321 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 288, 및 322-324 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
p) 서열식별번호: 307-312 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 313-318 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3; 또는
q) 서열식별번호: 319-321 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 322-324 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3.
실시양태 19. 실시양태 1-18 중 어느 하나에 있어서, VH가 서열식별번호: 13, 29, 45, 61, 77, 93, 109, 125, 141, 157, 173, 189, 205, 221, 287, 307-312 및 319-321 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고/거나; VL이 서열식별번호: 14, 30, 46, 62, 78, 94, 110, 126, 142, 158, 174, 190, 206, 222, 288, 313-318 및 322-324 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 20. 실시양태 19에 있어서,
a) VH가 서열식별번호: 13의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 14의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
b) VH가 서열식별번호: 29 및 307-312 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 30 및 313-318 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
c) VH가 서열식별번호: 45의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 46의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
d) VH가 서열식별번호: 61의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 62의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
e) VH가 서열식별번호: 77의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 78의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
f) VH가 서열식별번호: 93의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 94의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
g) VH가 서열식별번호: 109의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 110의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
h) VH가 서열식별번호: 125의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 126의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
i) VH가 서열식별번호: 141의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 142의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
j) VH가 서열식별번호: 157의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 158의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
k) VH가 서열식별번호: 173의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 174의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
l) VH가 서열식별번호: 189 및 347-349 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 190 및 350-352 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
m) VH가 서열식별번호: 205의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 206의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
n) VH가 서열식별번호: 221의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 222의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
o) VH가 서열식별번호: 287 및 319-321 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 288 및 322-324 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
p) VH가 서열식별번호: 307-312 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 313-318 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나, 또는
q) VH가 서열식별번호: 319-321 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 322-324 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하는 것인
항-CD93 구축물.
실시양태 21. 실시양태 1-20 중 어느 하나에 있어서, 항체 모이어티가 전장 항체, 이중특이적 항체, 단일-쇄 Fv (scFv) 단편, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2, Fv 단편, 디술피드 안정화된 Fv 단편 (dsFv), (dsFv)2, Fv-Fc 융합체, scFv-Fc 융합체, scFv-Fv 융합체, 디아바디, 트리바디, 및 테트라바디로 이루어진 군으로부터 선택된 항체 또는 그의 항원-결합 단편인 항-CD93 구축물.
실시양태 22. 실시양태 21에 있어서, 항체 모이어티가 전장 항체인 항-CD93 구축물.
실시양태 23. 실시양태 1-22 중 어느 하나에 있어서, 항체 모이어티가 IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, 및 그의 조합 및 하이브리드로부터의 Fc 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된 Fc 단편을 갖는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 24. 실시양태 23에 있어서, Fc 단편이 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, 및 그의 조합 및 하이브리드로부터의 Fc 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 25. 실시양태 23 또는 실시양태 24에 있어서, Fc 단편이 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 감소된 이펙터 기능을 갖는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 26. 실시양태 23 또는 실시양태 24에 있어서, Fc 단편이 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 증진된 이펙터 기능을 갖는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 27. 실시양태 1-26 중 어느 하나에 있어서, 항체 모이어티가 IGFBP7에 대한 CD93의 결합을 차단하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 28. 실시양태 1-26 중 어느 하나에 있어서, 항체 모이어티가 MMRN2에 대한 CD93의 결합을 차단하는 것인 항-CD93 구축물.
실시양태 29. 실시양태 1-22 중 어느 하나에 있어서, CD93이 인간 CD93인 항-CD93 구축물.
실시양태 30. 실시양태 1-29 중 어느 하나의 항-CD93 구축물 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
실시양태 31. 실시양태 1-28 중 어느 하나의 항-CD93 구축물을 코딩하는 단리된 핵산.
실시양태 32. 실시양태 31의 단리된 핵산을 포함하는 벡터.
실시양태 33. 실시양태 31의 단리된 핵산 또는 실시양태 32의 벡터를 포함하는 단리된 숙주 세포.
실시양태 34. 치료제 또는 표지에 연결된 실시양태 1-29 중 어느 하나의 항-CD93 구축물을 포함하는 면역접합체.
실시양태 35.
a) 실시양태 33의 단리된 숙주 세포를 항-CD93 구축물을 발현하는데 효과적인 조건 하에 배양하는 단계; 및
b) 발현된 항-CD93 구축물을 숙주 세포로부터 수득하는 단계
를 포함하는, 항-CD93 구축물을 생산하는 방법.
실시양태 36. 개체에게 유효량의 실시양태 1-29 중 어느 하나의 항-CD93 구축물 또는 실시양태 30의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 질환 또는 상태를 치료하는 방법.
실시양태 37. 실시양태 36에 있어서, 질환 또는 상태가 비정상적 혈관 구조와 연관된 것인 방법.
실시양태 38. 실시양태 36 또는 실시양태 37에 있어서, 질환 또는 상태가 암인 방법.
실시양태 39. 실시양태 38에 있어서, 암이 고형 종양인 방법.
실시양태 40. 실시양태 38 또는 실시양태 39에 있어서, 암이 CD93+ 내피 세포를 포함하는 것인 방법.
실시양태 41. 실시양태 38-40 중 어느 하나에 있어서, 암이 IGFBP7+ 혈관을 포함하는 것인 방법.
실시양태 42. 실시양태 38-41 중 어느 하나에 있어서, 암이 MMRN2+ 혈관을 포함하는 것인 방법.
실시양태 43. 실시양태 38-42 중 어느 하나에 있어서, 암이 종양 저산소증을 특징으로 하는 것인 방법.
실시양태 44. 실시양태 38-43 중 어느 하나에 있어서, 암이 국부 진행성 또는 전이성 암인 방법.
실시양태 45. 실시양태 38-44 중 어느 하나에 있어서, 암이 림프종, 결장암, 뇌암, 유방암, 난소암, 자궁내막암, 식도암, 전립선암, 자궁경부암, 신암, 방광암, 위암, 비소세포 폐암, 흑색종, 및 췌장암으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 방법.
실시양태 46. 실시양태 36-45 중 어느 하나에 있어서, 항-CD93 구축물이 개체 내로 비경구로 투여되는 것인 방법.
실시양태 47. 실시양태 36-46 중 어느 하나에 있어서, 제2 요법을 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
실시양태 48. 실시양태 47에 있어서, 제2 요법이 수술, 방사선, 유전자 요법, 면역요법, 골수 이식, 줄기 세포 이식, 호르몬 요법, 표적화 요법, 동결요법, 초음파 요법, 광역학 요법, 및 화학요법으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 방법.
실시양태 49. 실시양태 48에 있어서, 제2 요법이 면역요법인 방법.
실시양태 50. 실시양태 49에 있어서, 면역요법이 면역조정제를 투여하는 것을 포함하는 것인 방법.
실시양태 51. 실시양태 50에 있어서, 면역조정제가 면역 체크포인트 억제제인 방법.
실시양태 52. 실시양태 51에 있어서, 면역 체크포인트 억제제가 항-PD-L1 항체 또는 항-PD-1 항체를 포함하는 것인 방법.
실시양태 53. 실시양태 36-52 중 어느 하나에 있어서, 개체가 인간인 방법.
실시예
하기 실시예는 순수하게 본 출원의 예시인 것으로 의도되며, 따라서 어떠한 방식으로도 본 출원을 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다. 하기 실시예 및 상세한 설명은 예시로서 제한 없이 제공된다.
실시예 1. 마우스 항-인간 CD93 모노클로날 항체의 생성
4마리의 NZBWF1 마우스를 인간 CD93 재조합 단백질 (시노 바이올로지칼스(Sino Biologicals))로 면역화시켰다. 마우스에게 100ug 항원 및 100μL 완전 프로인트 아주반트의 혼합물에 의한 1회 프라임 면역화를 복강내로 제공하고, 이어서 100μL의 불완전 프로인트 아주반트와 혼합된 100ug 항원의 2회 부스트를 복강내로 제공하였다. 혈청 역가를 ELISA 및 FACS 검정에 의해 시험하고 확인하였다. 비장 수거 5일 전에 80ug의 항원으로의 최종 IP 부스트를 마우스에게 전달하였다. 면역화된 마우스로부터의 비장 세포의 단일 세포 현탁액을 마우스 골수종 세포주에 융합시켰다. 융합된 하이브리도마 상청액을 ELISA 검정에 의해 인간 CD93 단백질에 대한 특이적 결합에 대해 스크리닝한 후, CD93 발현 CHO 세포를 사용하여 FACS 스크리닝하였다. 간략하게, FACS 스크리닝의 경우, 하이브리도마 상청액 중 CD93 결합 항체의 존재를 PE로 표지된 염소 항-마우스 폴리클로날 항체에 의해 밝혀내었다. FACS-양성 CD93 특이적 하이브리도마를 서브클로닝하고, ELISA 및 FACS 검정에 의해 추가로 확인하였다. 정제된 모노클로날 항체를 기능적 IGFBP7/CD93 차단 및 HUVEC 튜브 형성 검정에 의해 특징화하였다. 생성된 하이브리도마 16E4, 17B10 및 7F3을 대표적인 항체 클론으로서 확인하였다.
실시예 2. CD93 모노클로날 항체의 클로닝 및 서열분석
샘플 제조
전체 RNA를 하이브리도마 세포주 배양물 (2 x 106개 세포)로부터 단리하였다. RNA를 처리하여 이상 전사체를 제거하고, 올리고 (dT) 프라이머를 사용하여 역전사시켰다. 생성된 cDNA의 샘플을 중쇄 또는 경쇄에 특이적인 프레임워크 1 및 불변 영역 프라이머 쌍을 사용하여 별개의 PCR에서 증폭시켰다. 반응 생성물을 아가로스 겔 상에서 분리하고, 크기-평가하고, 회수하였다. 일부 경우에, 제2 네스티드 PCR을 수행하여 목적하는 단편(들)의 수율을 증가시켰다. TA 클로닝 전략을 사용하여 앰플리콘을 pCR®4-TOPO 벡터 내로 클로닝하였다. 15개의 콜로니를 선택하고, 플라스미드 DNA를 벡터 DNA 서열에 특이적인 프라이머를 사용하여 증폭시켰다. 각각의 클로닝된 삽입물에 대한 PCR 생성물 크기를 겔 전기영동에 의해 평가하였고, PCR 클린 업 키트를 사용하고 형광 염료 종결제 및 모세관-기반 전기영동에 의하는 사이클 서열분석을 사용하는 서열분석을 위해 6개의 반응물을 제조하였다. PCR 생성물 및 TA 클로닝된 다중 플라스미드 DNA 둘 다를 생어 서열분석에 적용하였다.
서열 분석
모든 구축물로부터의 DNA 서열 데이터를 분석하고, 중쇄 및 경쇄에 대한 컨센서스 서열을 결정하였다. 카바트 넘버링에 따른, 또는 VBASE2 도구에 기초하여 결정된 VH 및 VL CDR의 정렬에 대해 도 7a-7b 및 8a-8b를 참조한다. 표 3 및 4는 다양한 항체의 VH 및 VL CDR 및 컨센서스 서열을 열거한다.
표 3. 다양한 항체의 VH CDR 및 컨센서스 서열.
Figure pct00003
Figure pct00004
표 4. 다양한 항체의 VL CDR 및 컨센서스 서열.
Figure pct00005
Figure pct00006
컨센서스 서열을 공지된 가변 영역 서열과 비교하여 인공물 및/또는 공정 오염을 제거한다. 이어서, 컨센서스 서열을 온라인 도구를 사용하여 분석하여 서열이 생산적 이뮤노글로불린을 코딩할 수 있는지 확인한다.
실시예 3. 생물층 간섭측정 (BLI) 검정에 의해 측정된 인간 및 시노몰구스 CD93에 대한 항-CD93 항체의 결합 친화도
항-CD93 항체의 결합 친화도를 옥텟 QKe (포르테바이오(Fortebio))를 사용하여 생물층 간섭측정법으로 결정하였다. 인간 CD93 재조합 단백질 (시노 바이올로지칼 인크, 카탈로그 # 12589-H08H) 또는 시노몰구스 CD93 단백질 (사내 제조됨)을 EZ-링크(EZ-LINK) NHS-PEG4 비오틴 (써모 피셔 사이언티픽(Thermo Fisher Scientific))을 사용하여 비오티닐화하였다. 스트렙타비딘 바이오센서 (포르테바이오)를 사용하여 비오티닐화된 CD93 단백질을 로딩하였다 (5 μg/ml로 300초). 기준선을 1X 동역학 완충제 (포르테바이오) 중에서 60초 동안 안정화시킨 후, 연속 희석된 항-CD93 항체를 포획된 단백질과 300초 동안 회합되도록 하였다. 센서를 1X 동역학 완충제 중에서 600초 동안 해리시켰다. 데이터 분석을 포르테바이오 데이터 분석 HT 11.1 소프트웨어 상에서 수행하였다.
도 1 및 도 9에 제시된 바와 같이, 16E4, 10B1, 7F3, 및 참조 항체 MM01은 모두 인간 CD93에 효과적으로 결합한다. 16E4 및 MM01은 시노몰구스 CD93에도 또한 결합한다 (도 1). 10B1 및 7F3도 또한 시노몰구스 CD93에 결합한다 (데이터는 제시되지 않음).
실시예 4. 형광 활성화 세포 분류 (FACS) 검정에 의해 결정된 세포 표면 발현 인간 CD93 CHO 세포에 대한 항-CD93 항체의 결합
인간 CD93 발현 CHO 세포를 세포 표면 상의 CD93의 완전성을 보존하는 TrypLE 시약 (써모스 피셔(Thermos Fisher))과의 인큐베이션에 의해 탈착시켰다. 이어서, 세포를 항-CD93 항체 및 참조 항체 MM01 (시노 바이올로지칼 인크, 카탈로그 # 12589-MMO1) 10μg/ml와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 세척한 후, 세포를 알렉사 플루오르 488 접합된 항-인간 IgG 또는 항-마우스 IgG 항체 (잭슨 이뮤노리서치(Jackson ImmunoResearch))와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 노보사이트(NovoCyte) 유동 세포측정기에서 획득하고, 노보익스프레스(NovoExpress) 소프트웨어에 의해 분석하였다. 항체 16E4, 10B1, 및 7F3을 CHO-K1 세포에 대한 결합에 대해 유사하게 시험하였다.
도 2 및 도 10에 제시된 바와 같이, 모든 15개의 하이브리도마 클론, 뿐만 아니라 상업적으로 입수가능한 항체 MM01이 hCD93 발현 CHO 세포에 결합하고 (항-CD93 mAb 및 대조군에 상응하는 피크의 분리에 의해 증명된 바와 같음), CHO-K1 세포와 16E4, 10B1, 또는 7F3 사이에는 결합이 존재하지 않는다 (피크의 분리가 없는 것에 의해 증명된 바와 같음).
실시예 5. 항-CD93 항체 처리에 의한 인간 CD93 발현 CHO 세포에서의 IGFBP7/CD93 차단 검정
인간 CD93 발현 CHO 세포 (웰당 1 x 105개)를 항-CD93 항체 또는 이소형 대조군으로 연속 농도로 4℃에서 30분 동안 처리하였다. 이어서, 세포를 HIS 태그부착된 인간 IGFBP7 재조합 단백질 (0.1 μg/ml)과 함께 4℃에서 추가로 30분 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 세포를 FACS 완충제로 세척하고, 토끼 항-IGFBP7 항체 (시노 바이올로지칼 인크, 카탈로그 # 13100-R003) 1 μg/ml와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 세포를 FACS 완충제로 세척하고, PE-접합된 항-토끼 IgG 항체 (바이오레전드)와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 분석하고, 노보사이트 플로우(NovoCyte Flow)에서 데이터를 획득하였다.
도 3a-3d에 제시된 바와 같이, 16E4 mAb는 0.4 μg/ml의 최저 농도를 포함한 다양한 농도에서 CD93과 IGFBP7 사이의 상호작용을 효과적으로 차단한다 (항-CD93 mAb 및 음성 대조군에 상응하는 피크 사이의 분리의 감소에 의해 증명된 바와 같음). 도 14는 7F3이 50 μg/ml에서 CD93과 IGFBP7 사이의 상호작용을 효과적으로 차단한다는 것을 보여준다 (대조군 피크에 대한 "숄더"의 소멸에 의해 증명된 바와 같음).
실시예 6. 항-CD93 항체 처리에 의한 인간 CD93 발현 CHO 세포에서의 MMRN2/CD93 차단 검정
인간 CD93 발현 CHO 세포 (웰당 1 x 105개)를 항-CD93 항체 (16E4, 10B1, 및 7F3) 또는 이소형 대조군으로 50 μg/ml로 4℃에서 30분 동안 처리하였다. 이어서, 세포를 His-태그부착된 MMRN2 재조합 단백질 또는 비오티닐화된 MMRN2 단백질 (0.1~0.5μg/ml)과 함께 4℃에서 추가로 30분 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 세포를 FACS 완충제로 세척하고, 항-His 접합된 APC 또는 스트렙타비딘 접합된 APC와 함께 1:500의 비로 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 분석하고, 노보사이트 플로우에서 데이터를 획득하였다.
도 11a-11b에 제시된 바와 같이, 7F3 mAb는 MMRN2와 CD93 사이의 상호작용을 효과적으로 차단한다 (7F3 mAb 및 대조군에 상응하는 피크 사이의 분리의 감소에 의해 증명된 바와 같음; 도 11a: 0.5 μg/ml의 MMRN2; 도 11b: 0.1 μg/ml). 16E4 및 10B1은 MMRN2와 CD93 사이의 상호작용의 유의한 차단을 나타내지 않는다.
7F3 mIgG1, 5H9 mIgG2a, 및 16E4 mIgG2a에 의한 CD93/MMRN2의 차단을 상기 기재된 바와 같이 0.1 μg/ml MMRN2495-674 및 0.5 μg/ml MMRN2495-674 (사내 생산됨)에서, IgG2a를 음성 대조군으로 사용하여 추가로 시험하였다.
도 12에 제시된 바와 같이, 7F3은 0.1 μg/ml MMRN2495-674 및 0.5 μg/ml만큼 높은 MMRN2495-674에서 CD93/MMRN2 상호작용을 효과적으로 차단한다 (7F3 피크의 좌측으로의 이동에 의해 증명된 바와 같음). 도 13에 제시된 바와 같이, 7F3은 또한 0.1 μg/ml MMRN2에서 CD93/MMRN2 상호작용을 효과적으로 차단한다 (7F3 피크의 좌측으로의 이동에 의해 증명된 바와 같음).
실시예 7. HUVEC 튜브 형성 억제 검정
인간 제대 정맥 내피 세포 (HUVEC, 써모 피셔 사이언티픽, 매사추세츠주 월섬)를 저혈청 성장 보충물 (LSGS, 써모 피셔 사이언티픽, 매사추세츠주 월섬)이 보충된 배지 200에서 5% CO2 하에 37℃에서 배양하였다. 96 웰 플레이트를 50 μl의 겔트렉스(Geltrex) 감소된 성장 인자 기저막 매트릭스 (써모 피셔 사이언티픽)로 코팅하고, 37℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 튜브 형성에 대한 하이브리도마 항체의 효과를 조사하기 위해, 2 x 104개의 HUVEC 세포를 매트릭스-코팅된 플레이트 상에 시딩하고, 정제된 하이브리도마 항체의 존재 또는 부재 하에 5% CO2 하에 37℃에서 18시간 동안 인큐베이션하였다. 아바스틴-IL10 융합 단백질을 대조군으로서 사용하였다. 광학 현미경을 사용하여 영상을 수득하였다.
도 4a-4f 및 도 15a-15b에 제시된 바와 같이, 10B1, 16E4, 5H9, 16G9, 19E12 및 7F3을 포함한 하이브리도마 항체는 4 μg/ml 및/또는 8 μg/ml의 농도에서 튜브 형성을 효과적으로 억제한다. 구체적으로, 10B1 또는 16E4로 처리된 HUVEC의 총 튜브 길이는 음성 대조군의 것과 비교하여 45% 및 61.5%로 감소한다. 8 μg/ml의 7F3으로 처리된 HUVEC의 총 튜브 길이는 음성 대조군의 것과 비교하여 71.7%로 감소하고, 4 μg/ml에서는 73.5%로 감소한다. 10B1은 동일한 용량에서 아바스틴과 대등한 억제 효과를 달성하였다.
실시예 8. 옥텟 경쟁에 의한 항-CD93 항체의 에피토프 비닝 검정
항-CD93 항체 에피토프 빈을 옥텟 QKe (포르테바이오)를 사용하여 결정하였다. 인간 CD93 재조합 단백질 (시노 바이올로지칼 인크, 카탈로그 # 12589-H08H)을 EZ-링크 NHS-PEG4 비오틴 (써모 피셔 사이언티픽)을 사용하여 비오티닐화하였다. 스트렙타비딘 바이오센서 팁 (포르테바이오)을 사용하여 비오티닐화된 인간 CD93 단백질을 포획하였다 (5 μg/ml로 300초). 기준선을 1X 동역학 완충제 (포르테바이오) 중에서 60초 동안 안정화시킨 후, 1차 항-CD93 항체 (10 μg/ml)를 포획된 단백질과 300초 동안 회합되도록 하였다. 이어서, 2차 항-CD93 항체 (10 μg/ml)의 패널을 항원 및 1차 항체 복합체와 추가로 300초 동안 회합되도록 하였다. 신호를 각각의 결합 사건에 대해 기록하고, 데이터 분석을 포르테바이오 데이터 분석 HT 11.1 소프트웨어 상에서 수행하였다.
도 5a-5b에 제시된 바와 같이, 5H9, 10B1, 16E4, 16G9, 19E12, 16B6, 및 MM01은 서로 간에 결합 쌍으로서의 역할을 하며, 이는 이들이 CD93 상의 상이한 에피토프에 결합한다는 것을 나타낸다.
실시예 9. 생물층 간섭측정 (BLI) 검정에 의해 측정된 항-CD93 mAb의 인간 및 시노몰구스 CD93 항원 교차-결합 활성
항-CD93 항체의 결합 친화도를 옥텟 QKe (포르테바이오)를 사용하여 생물층 간섭측정법으로 결정하였다. 인간 CD93 재조합 단백질 (시노 바이올로지칼 인크, 카탈로그 # 12589-H08H) 또는 시노몰구스 CD93 단백질 (사내 제조됨)을 EZ-링크 NHS-PEG4 비오틴 (써모 피셔 사이언티픽)을 사용하여 비오티닐화하였다. 스트렙타비딘 바이오센서 (포르테바이오)를 사용하여 비오티닐화된 CD93 단백질을 로딩하였다 (5 μg/ml로 300초). 기준선을 1X 동역학 완충제 (포르테바이오) 중에서 60초 동안 안정화시킨 후, 항-CD93 항체를 연속 희석물로, 포획된 단백질과 300초 동안 회합되도록 하였다. 이어서, 센서를 1X 동역학 완충제 중에서 600초 동안 해리시켰다. 데이터 분석을 포르테바이오 데이터 분석 HT 11.1 소프트웨어 상에서 수행하였다.
도 6a-6b에 제시된 바와 같이, 5H9, 12H4, 16B6, 16E4, 16G9, 17A7, 17B10, 17E6, 19B5, 19E12, 20C7뿐만 아니라 MM01은 시노몰구스 CD93과 교차-반응한 반면, 7C10, 16A1, 및 17G11은 시노몰구스 CD93과 교차-반응하지 않았다.
표 5는 다양한 항-CD93 항체의 특성의 요약이다.
표 5. 다양한 항-CD93 항체의 특성의 요약.
실시예 10. 항-CD93 항체의 인간화 및 VEGF를 억제하는 항-CD93 구축물의 생성
예시적인 인간화 항-CD93 중쇄 가변 서열 및 경쇄 가변 서열을 생성하였다. 서열 표의 서열식별번호: 307-324 및 347-365를 참조한다. 16E4, 17B10, 16A1 및 7F3 인간화 중쇄 가변 영역 서열 및 경쇄 가변 영역 서열의 CDR 서열을 분석하여, 표 6-7에 제시하였다.
표 6. 항-CD93 항체 및 인간화 서열의 중쇄 CDR.
Figure pct00008
Figure pct00009
표 7. 항-CD93 항체 및 인간화 서열의 경쇄 CDR.
Figure pct00010
Figure pct00011
표 6 및 7에 제시된 인간화 중쇄 가변 영역 서열 중 1개를 인간화 경쇄 가변 영역 서열 중 1개와 쌍형성시켜 다양한 인간화 16E4, 17B10, 16A1 및 7F3을 생성하였다.
인간화 16E4 및 7F3의 SDS-PAGE 안정성 분석을 도 29에 제시한다. SDS-PAGE를 환원 및 비-환원 조건 하에 수행하여 인간화 16E4 및 7F3 항체의 안정성을 평가하였다. 인간화 16E4 및 7F3 항체를 암실에서 40℃에서 2주 및 4주 동안 인큐베이션하였다. 최종 샘플을 SDS-PAGE 상에서 전개시키고, 쿠마시 블루로 염색하여, 인큐베이션 동안 발생할 수 있었던 항체에서의 임의의 시각적 변화를 평가하였다. 모 하이브리도마 16E4를 양성 대조군으로서 전개시켰다. 제0일, 인큐베이션 2주 또는 4주 후에 이러한 SDS-PAGE 분석에 의해 관찰된 재조합 인간화 16E4 및 7F3에서 유의한 변화는 존재하지 않았다.
또한 VEGF를 표적화하는 항-CD93 구축물을 설계하고 생성하였다. 도 16을 참조한다. 예를 들어, VEGF-트랩 (아플리베르셉트, 예를 들어, 서열식별번호: 325)을 링커 GSDKTHT (서열식별번호: 338)를 통해 7F3 및 그의 인간화 서열 (예를 들어, 서열식별번호: 287, 288 및 319-324) 중 어느 것의 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함하는 전장 인간 IgG1 항체의 2개의 중쇄의 C-말단에 융합시켰다. 예시적인 중쇄 및 경쇄 서열에 대해서는 서열식별번호: 342 및 343을 참조한다. 일부 실시양태에서, 중쇄 또는 경쇄는 중쇄 또는 경쇄의 N-말단에 융합된 신호 펩티드 (예컨대 서열식별번호: 344, 345, 또는 346)를 추가로 갖는다.
실시예 11. 17B10 항체를 사용한 동물 연구
1. 동계 B16F10 모델
항-CD93 17B10 항체의 항종양 효과를 바이오시토겐(Biocytogen)에서 B16F10 흑색종의 동계 마우스 모델에서 평가하였다. 17B10 항체는 옥텟 및 FACS 분석에 기초하면 마우스 CD93과 강하게 교차-반응하지 않았지만, 높은 단백질 농도에서 CD93-HEK 세포에 대해 일부 결합을 나타내었다.
동계 마우스 모델을 위해, 암컷 C57BL/6J 마우스에 무혈청 배지 중 B16F10 종양 세포의 뮤린 세포주 (0.2x106개)를 이식하였다. 종양이 40-50 mm3에 도달하였을 때, 마우스 (시험 물품당 n=8)를 무작위로 군으로 배정하였다. 항-CD93 항체 (및 이소형 대조군)를 0.3 mg/마우스로 제0일, 제3일, 제7일, 및 제10일에 복강내로 투여하였다. 효능을 전체 종양 부피에 기초하여 평가하였다. 체중을 측정하여 동물의 전반적 건강이 시험 물품에 의해 영향을 받지 않았음을 확실하게 하였다. 본 연구에 사용된 17B10을 하이브리도마 세포에서 발현시키고, 단백질 G 칼럼 상에서 정제하였다. 16G9 및 16A1을 비교로서 사용하였다. 각각의 군에서의 종양 부피를 도 17에 제시한다. 17B10 및 16G9 군의 마우스는 16A1 군 및 IgG1 대조군의 마우스와 비교하여 보다 작은 종양 부피를 나타내었으며, 이는 보다 우수한 항종양 효과를 시사한다.
2. 루이스 폐 암종
인간화 항-CD93 17B10 항체의 항종양 효과를 루이스 폐 암종 (LLC)의 동계 마우스 모델에서 평가하였다. 마우스 IgG1 Fc를 함유하는 인간화 17B10을 ExpiHEK 세포에서 재조합적으로 생산하였다. 항체를 단백질 G 칼럼을 사용하여 정제한 다음, 농축시키고, 1X PBS로 완충제 교환하였다. 인간화 17B10 항체는 옥텟 및 FACS 분석에 기초하면 마우스 CD93과 강하게 교차-반응하지 않았지만, 높은 단백질 농도에서 결합을 나타내었다.
동계 마우스 모델을 위해, 암컷 C57BL/6J 마우스에 무혈청 배지 중 LLC 종양 세포의 뮤린 세포주 (0.2x106개)를 이식하였다. 종양이 40-50 mm3에 도달하였을 때, 마우스 (시험 물품당 n=7)를 무작위로 군으로 배정하였다. 항-CD93 항체 (및 이소형 대조군)를 0.3 mg/마우스로 제0일, 제3일, 제7일, 및 제10일에 복강내로 투여하였다. 효능을 전체 종양 부피에 기초하여 평가하였다. 체중을 측정하여 동물의 전반적 건강이 시험 물품에 의해 영향을 받지 않았음을 확실하게 하였다.
도 18은 종양 부피 +/- 기준선으로부터의 SEM을 보여준다. 도 18은 17B10 군의 마우스가 이소형 대조군의 마우스와 비교하여 더 낮은 종양 부피를 나타내었음을 입증한다.
3. 녹-인 마우스 모델 개발
녹-인 마우스 모델을 2가지 방법을 사용하여 개발하였다. 녹-인 모델을 마우스 CD93 단백질을 인간 CD93 단백질로 대체하도록 설계하였다.
CRISPR/Cas9를 이용하여 마우스 CD93의 5'UTR에서 ATG 근처를 표적화하는 가이드 RNA #1 및 3'UTR의 시작 근처를 표적화하는 가이드 RNA #2로 2개의 절단부를 만들었다. 상동성 지정 복구는 마우스 5'UTR을 CD93 인간 cDNA와 인-프레임으로 융합시키고 내인성 CD93 프로모터로부터의 발현을 가능하게 하기 위해 공여자를 사용하였다. 정지 코돈 하류의 복구는 CD93 하이브리드 전사체가 마우스 3'UTR을 함유한다는 것을 확실하게 하였다. 순수한 C57BL/6N 마우스를 녹인 모델에 대한 배경으로서 사용하였다. 배아 줄기 세포 클론을 생산하고, 녹-인 인간 CD93 유전자로 확장시켰다. 서열 확인 후, 배반포 주사를 수행하여 키메라 창시자를 확립하였다. 그로부터 육종을 진행시켰고, 유전자형결정하여 이형접합체 및 동형접합체 새끼를 확인하였다.
대안적으로, CRISPR/Cas9를 이용하여 CD93의 세포외 도메인에 상응하는 CD93의 마우스 엑손 1 (S25-N572)을 제거하였다. 상동성 지정 복구에서, 공여자 DNA는 T26-K580으로부터의 CD93의 인간 서열을 함유하였다. 생성된 구축물은 마우스 막횡단 및 세포내 도메인을 갖는 CD93의 인간화 세포외 도메인을 함유하는 단백질을 발현하였다. C57BL/6 마우스 배아 줄기 세포를 서열 확인 후 녹-인 모델에 이용하였다. 오젠(Ozgene)은 키메라 창시자를 확립하기 위해 주사에 그의 독점적인 고-게르밀린(Go-Germiline) 배반포를 사용하였다. 유전자형결정 및 표현형결정을 수행하여 이형접합체 및 동형접합체 마우스를 확실하게 하였다.
실시예 12. 유동 세포측정법에 의해 결정된 CD93 발현 세포에 결합하는 항-CD93 항체
재조합 모 항-CD93 항체를 인간 혈청의 존재 또는 부재 하에 HUVEC 세포에 결합하는 그의 능력에 대해 평가하였다. 하이브리도마 세포로부터 수득된 16E4, 7F3, 16A1, 및 17B10 서열을 인간 CH1 도메인 및 마우스 IgG1 CH2 및 CH3 Fc 도메인과 재조합적으로 발현시켰다. 항체를 단백질 G 세파로스를 사용하여 정제하였다. 생성된 항체를 CD93을 발현하는 다양한 세포에 대한 그의 결합 능력에 대해 시험하였다. HUVEC 세포를 세포 표면 상의 CD93의 완전성을 보존하는 TrypLE 시약 (깁코(Gibco) cat# 12604-013)과의 인큐베이션에 의해 탈착시켰다. 세포를 배지로 켄칭한 다음, 카운팅하였다. 세포를 FACS 완충제 (0.5% BSA를 함유하는 빙냉 PBS) 중에 재현탁시키고, 인간 혈청을 20% (10% 최종 부피)로 첨가하고, 얼음 상에 대략 20분 동안 두었다. 5x104개 세포를 웰당 100μL 배지에 시딩하고, 100μL 중 연속 희석된 항-CD93 항체와 함께 얼음 상에서 2시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 세포를 1200rpm에서 5분 동안 회전시켜 세포를 세척하였다. 배지를 폐기하고, 세포를 200μL 빙냉 FACS 완충제 중에 재현탁시켰다. 세척 단계를 반복하고, 세포를 FACS 완충제 중에 1:500으로 희석된 2차 항체, 알렉사플루오르647 접합된 항-인간 IgG 또는 항-마우스 IgG 항체 (잭슨 이뮤노리서치) 100μL 중에 재현탁시켰다. 플레이트를 빛으로부터 차단하고, 4℃에서 1시간 인큐베이션하였다. 이어서, 세포를 다시 세척한 다음, 200μL 빙냉 FACS 완충제 중에 재현탁시켰다. 세포를 다시 세척하고, 200μL 고정 용액 (1% 포름알데히드를 함유하는 PBS) 중에 재현탁시켰다. 샘플을 호일로 덮어 4℃에서 저장한 후, 노보사이트 유동 세포측정기에서 획득하고, 노보익스프레스 소프트웨어에 의해 분석하였다. 혈청 함유 샘플로 수득된 결과를 도 19에 제시한다. 무혈청 샘플로부터의 결과를 도 20에 제시한다.
도 19 및 20은 16E4, 7F3, 및 17B10이 실험 조건 하에 HUVEC 세포에 성공적으로 결합하였음을 보여준다. 혈청 함유 샘플 (도 19)은 혈청이 존재하지 않는 실행 (도 20)과 유사한 결합 능력을 나타냈고, 이는 HUVEC 세포에 대한 이들 항체에 대한 Fc 결합의 효과가 거의 없었음을 시사한다.
CD93 발현 CHO 세포를 세포 표면 상의 CD93의 완전성을 보존하는 TrypLE 시약 (깁코 cat# 12604-013)과의 인큐베이션에 의해 탈착시켰다. 세포를 배지로 켄칭한 다음, 카운팅하였다. 세포를 FACS 완충제 (0.5% BSA를 함유하는 빙냉 PBS) 중에 재현탁시키고, 인간 혈청을 20% (10% 최종 부피)로 첨가하고, 얼음 상에 대략 20분 동안 두었다. 5 x 104개 세포를 웰당 100μL에 시딩하고, 100μL 중 연속 희석된 항-CD93 항체와 함께 얼음 상에서 2시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 샘플을 1200 rpm에서 5분 동안 회전시켜 샘플을 세척하였다. 배지를 폐기하고, 세포를 200μL 빙냉 FACS 완충제 중에 재현탁시켰다. 세포를 다시 세척하고, FACS 완충제 중에 1:500으로 희석된 2차 항체, 알렉사플루오르647 접합된 항-인간 IgG 또는 항-마우스 IgG 항체 (잭슨 이뮤노리서치) 100μL 중에 재현탁시켰다. 플레이트를 호일로 덮어 빛으로부터 보호하고, 얼음 상에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 세포를 다시 세척하고, 200μL 빙냉 FACS 완충제 중에 재현탁시켰다. 세포를 다시 세척하고, 200μL 고정 용액 (1% 포름알데히드를 함유하는 PBS) 중에 재현탁시켰다. 샘플을 호일로 덮어 4℃에서 저장한 후, 노보사이트 유동 세포측정기에서 획득하고, 노보익스프레스 소프트웨어에 의해 분석하였다. 결과를 도 21에 제시한다.
도 21은 16E4, 7F3, 16A1 및 17B10이 실험 조건 하에 인간 CD93 CHO 세포에 성공적으로 결합하였음을 보여준다. 16E4, 7F3, 및 17B10은 hCD93 CHO 세포에 대해 유사한 결합 친화도를 갖는 반면, 16A1은 다른 항체와 비교하여 인간 CD93에 대해 상대적으로 감소된 친화도를 가졌다.
U937 세포를 세포 표면 상의 CD93의 완전성을 보존하는 TrypLE 시약 (깁코 cat# 12604-013)과의 인큐베이션에 의해 탈착시켰다. 세포를 배지로 켄칭한 다음, 카운팅하였다. 세포를 FACS 완충제 (0.5% BSA를 함유하는 빙냉 PBS) 중에 재현탁시키고, 얼음 상에 ~20분 두었다. 5 x 104개 세포를 웰당 100μL에 시딩하고, 100μL 중 연속 희석된 항-CD93 항체와 함께 얼음 상에서 2시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 샘플을 1200rpm에서 5분 동안 회전시켜 샘플을 세척하였다. 배지를 폐기하고, 세포를 200μL 빙냉 FACS 완충제 중에 재현탁시켰다. 세포를 다시 세척하고, FACS 완충제 중에 1:500으로 희석된 2차 항체, 알렉사플루오르647 접합된 항-인간 IgG 또는 항-마우스 IgG 항체 (잭슨 이뮤노리서치) 100μL 중에 재현탁시켰다. 플레이트를 호일로 덮어 빛으로부터 보호하고, 얼음 상에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 샘플을 다시 세척하고, 200μL 빙냉 FACS 완충제 중에 재현탁시켰다. 세포를 다시 세척하고, 200μL 고정 용액 (1% 포름알데히드를 함유하는 PBS) 중에 재현탁시켰다. 샘플을 호일로 덮어 4℃에서 저장하고, 후속적으로 노보사이트 유동 세포측정기에서 획득하고, 노보익스프레스 소프트웨어에 의해 분석하였다.
도 22는 16E4, 7F3, 및 17B10이 실험 조건 하에 U937 세포에 성공적으로 결합하였음을 보여준다.
실시예 13. 17B10 항체의 세포 기반 검정 분석
1. 과다발현 인간 CD93 CHO 세포에 대한 인간화 17B10의 결합
마우스 IgG1 CH2 및 CH3 도메인 및 인간 CH1 도메인을 함유하는 키메라 Fc를 포함하는 다양한 인간화 17B10 항체를 ExpiHEK에서 3개의 인간화 중쇄 중 1개를 3개의 인간화 경쇄 중 1개와 조합함으로써 제조하였다 (실시예 10, 표 6-7 참조). 생성된 항체를 FACS 분석을 사용하여 인간 CD93을 과다발현하는 CHO 세포에 대한 결합에 대해 시험하였다. 결과를 도 25a-25b에 제시한다. 제시된 바와 같이, 모든 시험된 항체 (즉, H1L1, H1L2, H1L3, H2L1, H2L2, H2L3, H3L1, H3L2, H3L3)는 인간 CD93을 과다발현하는 CHO 세포에 효과적으로 결합한다.
2. KG1a 및 U937 세포에 대한 인간화 17B10의 결합
KG1a 및 U937 세포에 대한 인간화 17B10 (VH3VL3, 즉, H3L3)의 결합을 실시예 12에 기재된 바와 같이 시험하였다. 17B10 항체의 2개의 배치를 사용하여 실험을 반복하였다. 도 26a-26b는 17B10이 KG1a 및 U937 둘 다에 높은 친화도로 결합하였음을 보여준다.
3. 마우스 CHO 세포에 대한 인간화 17B10 (VH3VL3)의 결합
모 17B10 항체, 및 서열식별번호: 349의 VH 서열 및 서열식별번호: 352의 VL 서열, 및 마우스 IgG1 CH2 및 CH3 도메인 및 인간 CH1 도메인을 함유하는 키메라 Fc를 갖는 인간화 17B10을 ExpiHEK에서 제조하였다. 마우스 CD93 발현 CHO 세포를 세포 표면 상의 CD93의 완전성을 보존하는 TrypLE 시약 (써모 피셔)과의 인큐베이션에 의해 탈착시켰다. 이어서, 세포를 모 17B10 항체 또는 인간화 17B10 항-CD93 항체 (50 μg/mL)와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 세척한 후, 세포를 알렉사 플루오르 488 접합된 항-인간 IgG 또는 항-마우스 IgG 항체 (잭슨 이뮤노리서치)와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 노보사이트 유동 세포측정기에서 획득하고, 노보익스프레스 소프트웨어에 의해 분석하였다.
도 27은 인간화 17B10이 50 μg/mL에서 마우스 CD93 발현 세포에 결합하였음을 보여준다.
4. mCD93 HEK에 대한 인간화 17B10 (VH3VL3)의 결합
마우스 CD93 발현 HEK 세포를 세포 표면 상의 CD93의 완전성을 보존하는 TrypLE 시약 (써모 피셔)과의 인큐베이션에 의해 탈착시켰다. 이어서, 세포를 연속 희석된 모 17B10 및 인간화 17B10 ((H3L3) 항-CD93 항체와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 세척한 후, 세포를 알렉사 플루오르 488 접합된 항-인간 IgG 또는 항-마우스 IgG 항체 (잭슨 이뮤노리서치)와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 노보사이트 유동 세포측정기에서 획득하고, 노보익스프레스 소프트웨어에 의해 분석하였다.
도 28은 모 17B10 및 인간화 17B10 (H3L3) 둘 다가 50 μg/mL에서 마우스 CD93 발현 HEK 세포에 결합하였음을 보여준다.
4. HUVEC 튜브 형성 검정
인간화 17B10 항-CD93 항체 (H3L3)에 의한 혈관신생의 억제를 HUVEC 튜브 형성 검정에서 시험하였다. 인간 제대 정맥 내피 세포 (HUVEC, 써모 피셔 사이언티픽, 매사추세츠주 월섬)를 저혈청 성장 보충물 (LSGS, 써모 피셔 사이언티픽, 매사추세츠주 월섬)이 보충된 배지 200에서 5% CO2 하에 37℃에서 배양하였다. 96 웰 플레이트를 50 μl의 겔트렉스 감소된 성장 인자 기저막 매트릭스 (써모 피셔 사이언티픽)로 코팅하고, 37℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 튜브 형성에 대한 인간화 17B10 항체의 효과를 조사하기 위해, 1 x 104개의 HUVEC 세포를 매트릭스-코팅된 플레이트 상에 시딩하고, 다양한 농도의 정제된 항체의 존재 또는 부재 하에 5% CO2 하에 37℃에서 18시간 동안 인큐베이션하였다. 세포를 칼세인 AM으로 염색하고, 영상을 수집하였다. 도 23-24는 인간화 17B10이 대조군과 비교하여 특정 농도에서 튜브 형성을 억제하였음을 보여준다.
4. 17B10 항체의 차단 능력
17B10 항체 (모 및 인간화)를 세포 기반 검정에서 시험하였다.
모 및 인간화 17B10 항체는 CD93에 대한 IGFBP7 결합 또는 CD93에 대한 MMRN2 결합을 유의하게 차단하지 않았다 (데이터는 제시되지 않음).
실시예 14. 항-CD93 항체의 ELISA 결합 분석
하이브리도마 생산된 모 16E4 및 7F3을 항체의 재조합 키메라 버전과 비교하였다. His-태그부착된 인간 CD93을 96 웰 플레이트 상에 1X PBS 중 1 μg/mL로 4℃에서 밤새 코팅하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제 (보스톤 바이오프로덕트, 인크.(Boston BioProduct, Inc.))로 세척하고, 웰을 ELISA 차단 완충제로 37℃에서 1시간 동안 차단하였다. 정제된 항체를 ELISA 차단 완충제 (보스톤 바이오프로덕트, 인크.) 중에 연속 희석하고, 수용체 상에서 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제로 세척하였다. HRP 접합된 항-마우스 Fc를 ELISA 차단 완충제 중에 희석하고, 하이브리도마 생산된 16E4 및 7F3 (도 30에서 16E4-Hyb 및 7F3-Hyb)을 함유하는 웰에 첨가하였다. HRP 접합된 항-인간 Fc를 인간화 16E4 및 7F3 항체 (도 30에서 16E4-hIgG1 및 7F3-hIgG1)를 함유하는 웰에 37℃에서 1시간 동안 첨가하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제로 세척하였다. CD93에 결합하는 항체의 간접적 검출을 위해 HRP 기질을 첨가하였다. 도 30은 재조합 키메라 항체가 본 방법 하에서 모 항체보다 CD93에 대해 더 강한 친화도를 갖는다는 것을 보여준다.
인간화 7F3 항체를 암실에서 40℃에서 2 또는 4주 동안 저장하였다. His-태그부착된 인간 CD93을 96 웰 플레이트 상에 1XPBS 중 1 μg/mL로 4℃에서 밤새 코팅하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제 (보스톤 바이오프로덕트, 인크.)로 세척하고, 웰을 ELISA 차단 완충제로 37℃에서 1시간 동안 차단하였다. 정제된 7F3 항체를 ELISA 차단 완충제 (보스톤 바이오프로덕트, 인크.) 중에 연속 희석하고, 수용체 상에서 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제로 세척하였다. HRP-접합된 항-인간 Fc 항체를 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제로 세척하였다. CD93에 대한 항체 결합의 간접적 검출을 위해 HRP 기질을 첨가하였다. 도 31은 처리 또는 비처리 샘플 중 어떠한 것에 대해서도 ELISA에 의해 차이가 관찰되지 않았음을 보여준다.
인간화 16E4 항체를 암실에서 40℃에서 2 또는 4주 동안 저장하였다. His-태그부착된 인간 CD93을 96 웰 플레이트 상에 1XPBS 중 1 μg/mL로 4℃에서 밤새 코팅하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제 (보스톤 바이오프로덕트, 인크.)로 세척하고, 웰을 ELISA 차단 완충제로 37℃에서 1시간 동안 차단하였다. 정제된 16E4 항체를 ELISA 차단 완충제 (보스톤 바이오프로덕트, 인크.) 중에 연속 희석하고, 수용체 상에서 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제로 세척하였다. HRP-접합된 항-인간 Fc 항체를 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제로 세척하였다. CD93에 대한 항체 결합의 간접적 검출을 위해 HRP 기질을 첨가하였다. 도 32는 처리 또는 비처리 샘플 중 어떠한 것에 대해서도 ELISA에 의해 차이가 관찰되지 않았음을 보여준다.
하이브리도마에 의해 생산된 17B10 항체 (도 33에서 17B10-Hyb)를 재조합 모 17B10-hFc (도 33에서 17B10-hIgG1) 및 인간화 17B10-mFc (도 33에서 h17B10-H3L3)와 비교하여 인간 CD93에 대한 결합을 결정하였다. His-태그부착된 인간 CD93을 96 웰 플레이트 상에 1XPBS 중 1 μg/mL로 4℃에서 밤새 코팅하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제 (보스톤 바이오프로덕트, 인크.)로 세척하고, 웰을 ELISA 차단 완충제로 37℃에서 1시간 동안 차단하였다. 정제된 17B10 항체를 ELISA 차단 완충제 (보스톤 바이오프로덕트, 인크.) 중에 연속 희석하고, 수용체 상에서 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제로 세척하였다. HRP 접합된 항-마우스 Fc를 ELISA 차단 완충제 중에 희석하고, 하이브리도마 생산된 17B10을 함유하는 웰에 첨가하였다. HRP 접합된 항-인간 Fc를 재조합 17B10 항체를 함유하는 웰에 37℃에서 1시간 동안 첨가하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제로 세척하였다. CD93에 결합하는 항체의 간접적 검출을 위해 HRP 기질을 첨가하였다. 도 33은 마우스 Fc 함유 분자가 인간 Fc를 갖는 재조합 모 17B10보다 인간 CD93에 대해 더 약한 결합을 갖는다는 것을 보여준다.
인간화 CDR 및 인간 CH1 도메인을 갖지만 마우스 IgG1 CH2 및 CH3 도메인을 갖는 키메라 17B10 분자를 제조하였다. 이러한 분자를 마우스 MMRN2-mFc와 인간 CD93에 결합하는 그의 능력에 대해 비교하였다. His-태그부착된 인간 CD93을 96 웰 플레이트 상에 1XPBS 중 1 μg/mL로 4℃에서 밤새 코팅하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제 (트윈을 함유하는 PBS; 보스톤 바이오프로덕트 cat# BB-171)로 3회 세척한 다음, 웰을 200μL ELISA 차단 완충제 (PBS 중 5% BSA (VWR cat# 0332))로 실온에서 1시간 동안 차단하였다. 이어서, 플레이트를 ELISA 세척 완충제로 3회 세척한 다음, 정제된 17B10 항체 및 마우스 MMRN2-mFc를 ELISA 차단 완충제 (PBS 중 BSA 5%) 중에 연속 희석하고, 100rpm의 오비탈 진탕기 상에서 실온에서 2시간 동안 수용체 상에서 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제로 3회 세척한 다음, HRP-접합된 항-마우스 Fc 항체 (잭슨 이뮤노리서치 cat# 115-035-164)를 100rpm의 오비탈 진탕기 상에서 실온에서 1시간 동안 17B10 및 마우스 MMRN2-mFc에 첨가하였다. HRP-접합된 항-마우스 Fc 항체 (잭슨 이뮤노리서치 cat# 115-035-164)를 100rpm의 오비탈 진탕기 상에서 실온에서 1시간 동안 웰에 첨가하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충제로 3회 세척한 다음, 웰당 100μL TMB (세라케어(SeraCare) cat# 5120-0077)를 첨가하고, 1-5분 혼합되도록 한 다음, 100μL 황산 1.0N (VWR cat# BDH7232-1)을 첨가하여 정지시켰다. 흡광도를 450nm에서 측정하였다. 2차 HRP Ab만을 함유하는 대조군 웰로부터 평균 배경 신호를 차감하여 흡광도 신호를 보정하였다. 도 34는 17B10이 ELISA에 의하면 마우스 MMRN2-mFc보다 더 우수하게 인간 CD93-his에 결합하였음을 보여준다.
실시예 15. 항-CD93 항체의 FACS 세포-기반 결합 분석
세포 표면 발현 인간 CD93 CHO 세포에 대한 항-CD93 항체 7F3 및 16E4의 결합을 형광 활성화 세포 분류 (FACS) 검정에 의해 결정하였다. 인간 CD93 발현 CHO 세포를 세포 표면 상의 CD93의 완전성을 보존하는 TrypLE 시약 (써모 피셔)과의 인큐베이션에 의해 탈착시켰다. 이어서, 세포를 연속 희석된 항-CD93 항체와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 세척한 후, 세포를 알렉사 플루오르 647 접합된 항-인간 IgG (잭슨 이뮤노리서치)와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 노보사이트 유동 세포측정기에서 획득하고, 노보익스프레스 소프트웨어에 의해 분석하였다. 재조합 16E4는 0.24 nM의 EC50으로 세포에 결합한 반면, 재조합 7F3 항체는 0.4 nM의 EC50으로 결합하였다 (도 35).
세포 표면 발현 인간 CD93 CHO 세포에 대한 인간화 7F3 항-CD93 항체의 결합을 형광 활성화 세포 분류 (FACS) 검정에 의해 결정하였다. 인간화 7F3 항체를 암실에서 40℃에서 2 또는 4주 동안 저장하였다. 인간 CD93 발현 CHO 세포를 세포 표면 상의 CD93의 완전성을 보존하는 TrypLE 시약 (써모 피셔)과의 인큐베이션에 의해 탈착시켰다. 이어서, 세포를 연속 희석된 항-CD93 항체와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 세척한 후, 세포를 알렉사 플루오르 647 접합된 항-인간 IgG (잭슨 이뮤노리서치)와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 노보사이트 유동 세포측정기에서 획득하고, 노보익스프레스 소프트웨어에 의해 분석하였다. 고온 처리로 인한 CD93에 대한 7F3 항체의 친화도에는 변화가 없었다 (도 36).
인간화 16E4 항체를 암실에서 40℃에서 2 또는 4주 동안 저장하였다. 인간 CD93 발현 CHO 세포를 세포 표면 상의 CD93의 완전성을 보존하는 TrypLE 시약 (써모 피셔)과의 인큐베이션에 의해 탈착시켰다. 이어서, 세포를 연속 희석된 항-CD93 항체와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 세척한 후, 세포를 알렉사 플루오르 647 접합된 항-인간 IgG (잭슨 이뮤노리서치)와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 노보사이트 유동 세포측정기에서 획득하고, 노보익스프레스 소프트웨어에 의해 분석하였다. 40℃에서의 인간화 16E4의 인큐베이션은 CD93 발현 세포에 대한 항체의 결합을 감소시키지 않았다 (도 37).
인간화 7F3 항체를 암실에서 40℃에서 2 또는 4주 동안 저장하였다. HUVEC 세포를 세포 표면 상의 CD93의 완전성을 보존하는 TrypLE 시약 (써모 피셔)과의 인큐베이션에 의해 탈착시켰다. 이어서, 세포를 연속 희석된 항-CD93 항체와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 세척한 후, 세포를 알렉사 플루오르 647 접합된 항-인간 IgG (잭슨 이뮤노리서치)와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 노보사이트 유동 세포측정기에서 획득하고, 노보익스프레스 소프트웨어에 의해 분석하였다. 40℃에서 인간화 7F3의 인큐베이션은 HUVEC 세포에 대한 항체의 결합을 감소시키지 않았다 (도 38).
KG1a 세포에 대한 7F3 항-CD93 항체의 결합을 형광 활성화 세포 분류 (FACS) 검정에 의해 결정하였다. 인간화 7F3 항체를 암실에서 40℃에서 2 또는 4주 동안 저장하였다. KG1a 세포를 세포 표면 상의 CD93의 완전성을 보존하는 TrypLE 시약 (써모 피셔)과의 인큐베이션에 의해 탈착시켰다. 이어서, 세포를 연속 희석된 항-CD93 항체와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 세척한 후, 세포를 알렉사 플루오르 647 접합된 항-인간 IgG (잭슨 이뮤노리서치)와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 노보사이트 유동 세포측정기에서 획득하고, 노보익스프레스 소프트웨어에 의해 분석하였다. 40℃에서 7F3의 인큐베이션은 KG1a 세포에 대한 항체의 결합을 감소시키지 않았다 (도 39).
인간화 16E4 항체를 암실에서 40℃에서 2 또는 4주 동안 저장하였다. KG1a 세포를 세포 표면 상의 CD93의 완전성을 보존하는 TrypLE 시약 (써모 피셔)과의 인큐베이션에 의해 탈착시켰다. 이어서, 세포를 연속 희석된 항-CD93 항체와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 세척한 후, 세포를 알렉사 플루오르 647 접합된 항-인간 IgG (잭슨 이뮤노리서치)와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 노보사이트 유동 세포측정기에서 획득하고, 노보익스프레스 소프트웨어에 의해 분석하였다. 40℃에서 16E4의 인큐베이션은 KG1a 세포에 대한 항체의 결합을 감소시키지 않았다 (도 40).
실시예 16. 항-CD93 항체 옥텟 결합 분석
항-CD93 항체의 결합 친화도를 옥텟 QKe (포르테바이오)를 사용하여 생물층 간섭측정법으로 결정하였다. 인간화 7F3 항체를 암실에서 40℃에서 2 또는 4주 동안 저장하였다. 인간 CD93 재조합 단백질 (시노 바이올로지칼 인크, 카탈로그 # 12589-H08H)을 EZ-링크 NHS-PEG4 비오틴 (써모 피셔 사이언티픽)을 사용하여 비오티닐화하였다. 스트렙타비딘 바이오센서 (포르테바이오)를 사용하여 비오티닐화된 CD93 단백질을 로딩하였다 (5 μg/ml로 300초). 기준선을 1X 동역학 완충제 (포르테바이오) 중에서 60초 동안 안정화시킨 후, 항-CD93 항체를 연속 희석물로, 포획된 단백질과 300초 동안 회합되도록 하였다. 이어서, 센서를 1X 동역학 완충제 중에서 600초 동안 해리시켰다. 데이터 분석을 포르테바이오 데이터 분석 HT 11.1 소프트웨어 상에서 수행하였다. CD93에 대한 인간화 7F3 항체의 결합 친화도는 40℃에서의 인큐베이션에 의해 영향을 받지 않았다 (도 41).
항-CD93 항체의 결합 친화도를 옥텟 QKe (포르테바이오)를 사용하여 생물층 간섭측정법으로 결정하였다. 인간화 16E4 항체를 암실에서 40℃에서 2 또는 4주 동안 저장하였다. 인간 CD93 재조합 단백질 (시노 바이올로지칼 인크, 카탈로그 # 12589-H08H)을 EZ-링크 NHS-PEG4 비오틴 (써모 피셔 사이언티픽)을 사용하여 비오티닐화하였다. 스트렙타비딘 바이오센서 (포르테바이오)를 사용하여 비오티닐화된 CD93 단백질을 로딩하였다 (5 μg/ml로 300초). 기준선을 1X 동역학 완충제 (포르테바이오) 중에서 60초 동안 안정화시킨 후, 항-CD93 항체를 연속 희석물로, 포획된 단백질과 300초 동안 회합되도록 하였다. 이어서, 센서를 1X 동역학 완충제 중에서 600초 동안 해리시켰다. 데이터 분석을 포르테바이오 데이터 분석 HT 11.1 소프트웨어 상에서 수행하였다. CD93에 대한 인간화 16E4 항체의 결합 친화도는 40℃에서의 인큐베이션에 의해 영향을 받지 않았다 (도 42).
16E4 및 7F3의 결합 친화도의 요약을 도 43에 제시한다.
실시예 17. 항-CD93 항체 차단 기능 분석
7F3 항-CD93 항체에 의한 세포 표면 발현된 인간 CD93 CHO 세포에 대한 MMRN2 결합의 차단을 형광 활성화 세포 분류 (FACS) 검정에 의해 결정하였다. 인간화 7F3 항체를 암실에서 40℃에서 2 또는 4주 동안 저장하였다. 인간 CD93 발현 CHO 세포 (웰당 1x 105개)를 연속 희석된 항-CD93 7F3 항체 또는 이소형 대조군으로 4℃에서 30분 동안 처리하였다. 이어서, 세포를 hMMRN2495-674 0.1 μg/ml와 함께 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 세포를 FACS 완충제로 세척하고, APC-접합된 항-His 태그 (바이오레전드)와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하여 MMRN2 결합을 검출하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 분석하고, 노보사이트 플로우에서 데이터를 획득하였다. 재조합 his 태그부착된 hMMRN2495-674를 이. 콜라이에서 상용 절차에 따라 내부적으로 생산하였다. 40℃에서의 7F3의 인큐베이션은 인간 CD93 발현 CHO 세포에 대한 MMRN2 결합을 차단하는 7F3의 능력에 영향을 미치지 않았다 (도 44).
인간화 7F3 및 16E4 항-CD93 항체에 의한 세포 표면 발현된 인간 CD93 CHO 세포에 대한 MMRN2 결합의 차단을 또한 형광 활성화 세포 분류 (FACS) 검정에 의해 결정하였다. 인간 CD93 발현 CHO 세포 (웰당 1x 105개)를 연속 희석된 항-CD93 7F3 또는 16E4 항체 또는 이소형 대조군으로 4℃에서 30분 동안 처리하였다. 이어서, 세포를 hMMRN2495-674 0.1 μg/ml와 함께 인큐베이션하였다. APC-접합된 항-His 태그 (바이오레전드)를 사용하여 MMRN2 결합을 검출하였다. 이어서, 세포를 FACS 완충제로 세척하고, APC-접합된 항-His 태그 항체 1 μg/ml와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 분석하고, 노보사이트 플로우에서 데이터를 획득하였다. 재조합 his 태그부착된 hMMRN2495-674를 Expi_HEK에서 상용 절차에 따라 내부적으로 생산하였다. 인간화 7F3은 인간 CD93 발현 CHO 세포에 대한 MMRN2 결합을 차단할 수 있었지만, 인간화 16E4는 그렇지 않았다 (도 45).
인간화 7F3 항-CD93 항체에 의한 HUVEC 세포의 세포 표면에 대한 IGFBP7 결합의 차단을 FACS에 의해 결정하였다. HUVEC 세포 (웰당 1x 105개)를 연속 희석된 인간화 항-CD93 7F3 항체 또는 이소형 대조군으로 4℃에서 30분 동안 처리하였다. 이어서, 세포를 His-태그부착된 인간 IGFBP7 재조합 단백질 (0.1 μg/ml)과 함께 4℃에서 추가로 30분 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 세포를 FACS 완충제로 세척하고, APC-접합된 항-His 태그 (바이오레전드)와 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하여 IGFBP7 결합을 검출하였다. FACS 완충제로 2회 세척한 후, 샘플을 분석하고, 노보사이트 플로우에서 데이터를 획득하였다. 도 46에 제시된 바와 같이, 7F3 항체는 HUVEC 세포에 대한 IGFBP7의 결합을 차단하였다.
7F3 및 16E4에 의한 CD93에 대한 IGFBP7 결합의 차단을 생물층 간섭측정법 (BLI)을 사용하여 결정하였다. 항-CD93 항체 7F3 및 16E4에 의한 hCD93에 대한 IGFBP7 결합의 차단을 옥텟 QKe (포르테바이오)를 사용하여 생물층 간섭측정법으로 결정하였다. 인간 CD93 재조합 단백질 (시노 바이올로지칼 인크, 카탈로그 # 12589-H08H)을 EZ-링크 NHS-PEG4 비오틴 (써모 피셔 사이언티픽)을 사용하여 비오티닐화하였다. 스트렙타비딘 바이오센서 (포르테바이오)를 사용하여 비오티닐화된 CD93 단백질을 로딩하였다 (5 μg/ml로 300초). 기준선을 1X 동역학 완충제 (포르테바이오) 중에서 60초 동안 안정화시킨 후, 항-CD93 항체 및 음성 대조군 항체 (9F9) (90 μg/mL)를 포획된 단백질과 300초 동안 회합되도록 하였다. IGFBP7을 첨가하여 300초 동안 회합시켰다. 이어서, 센서를 1X 동역학 완충제 중에서 600초 동안 해리시켰다. 데이터 분석을 포르테바이오 데이터 분석 HT 11.1 소프트웨어 상에서 수행하였다. 하이브리도마 및 인간화 7F3 및 16E4 항체는 인간 CD93에 대한 IGFBP7 회합을 차단할 수 있었다 (도 47 및 48).
실시예 18. 항-CD93 항체 튜브 형성 분석
인간화 7F3 및 16E4 항-CD93 항체에 의한 혈관신생의 억제를 HUVEC 튜브 형성 검정에서 시험하였다. 인간 제대 정맥 내피 세포 (HUVEC, 써모 피셔 사이언티픽, 매사추세츠주 월섬)를 저혈청 성장 보충물 (LSGS, 써모 피셔 사이언티픽, 매사추세츠주 월섬)이 보충된 배지 200에서 5% CO2 하에 37℃에서 배양하였다. 96 웰 플레이트를 50 μl의 겔트렉스 감소된 성장 인자 기저막 매트릭스 (써모 피셔 사이언티픽)로 코팅하고, 37℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 튜브 형성에 대한 인간화 7F3 및 16E4 항체의 효과를 조사하기 위해, 2 x 104개의 HUVEC 세포를 매트릭스-코팅된 플레이트 상에 시딩하고, 정제된 항체 (40 μg/mL)의 존재 또는 부재 하에 5% CO2 하에 37℃에서 18시간 동안 인큐베이션하였다. 세포를 칼세인 AM으로 염색하고, 영상을 수집하였다. 도 49 및 50은 인간화 16E4가 92.5% 튜브 형성을 나타낸 반면, 인간화 7F3은 대조군과 비교하여 72.5% 튜브 형성을 나타냈음을 나타낸다.
실시예 19. KI 마우스 모델에서의 CD93 항체의 항종양 효과
항-CD93 항체의 항종양 효과를 B16F10 흑색종 동계 hCD93 KI 마우스 모델에서 관련 기술분야에서의 통상적인 기술을 사용하여 평가하였다. 연구에 사용된 마우스는 마우스에서의 뮤린 CD93의 절반이 인간 CD93에 의해 완전히 대체된 이형접합 인간 CD93 녹-인을 갖는 것이다.
동계 마우스 모델을 위해, 이형접합 인간 CD93 KI-C57BL/6J 마우스에 무혈청 배지 중 B16F10 종양 세포의 뮤린 세포주 (0.2x106개)를 이식하였다. 종양이 40-50 mm3에 도달하였을 때, 마우스 (시험 물품당 n=8)를 무작위로 군으로 배정하였다. h16E4 (인간화 16E4, VH4+VL6), h7F3 (인간화 7F3, VH3+VL3), 17B10 키메라 (m17B10-hIgG1), 및 이소형 대조군 항체를 포함한 항-CD93 항체를 15 mg/kg 마우스로 4주 동안 격주로 복강내로 투여하였다. 종양 부피 및 체중을 각각의 마우스에 대해 측정하였다. 연구 완료 시, 종양을 외과적으로 떼어내고, 칭량하고, 측정하고, 세포 분석을 위해 순간 동결시켰다. 항-CD93 항체의 항종양 효능을 전체 종양 부피에 기초하여 평가하였고, 동물의 전반적 건강을 확실하게 하기 위해 연구 전반에 걸쳐 체중을 측정하였다.
표 8: 주사후 제5일의 인간화 CD93 녹-인 마우스 모델에서의 CD93 항체의 항-B16 종양 효과
Figure pct00012
표 8로부터 알 수 있는 바와 같이, 모든 시험된 CD93 항체는 주사후 5일만큼 조기에 종양 성장을 유의하게 차단하여, 종양 성장의 2.6~2.8-배 감소를 발생시켰다. 3종의 시험된 CD93 항체의 항종양 효과에서 유의한 차이는 발견되지 않았다.
본 연구는 본 개시내용의 CD93 항체가 생체내에서 종양을 억제할 수 있다는 것을 확인시켜 준다.
16E4, 7F3, 16A1 및 17B10의 특성의 요약에 대해서는 도 51을 참조한다.
서열 표
Figure pct00013
Figure pct00014
Figure pct00015
Figure pct00016
Figure pct00017
Figure pct00018
Figure pct00019
Figure pct00020
Figure pct00021
Figure pct00022
Figure pct00023
Figure pct00024
Figure pct00025
Figure pct00026
Figure pct00027
Figure pct00028
Figure pct00029
Figure pct00030
Figure pct00031
Figure pct00032
Figure pct00033
Figure pct00034
Figure pct00035
Figure pct00036
Figure pct00037
Figure pct00038
Figure pct00039
Figure pct00040
Figure pct00041
Figure pct00042
SEQUENCE LISTING <110> DYNAMICURE BIOTECHNOLOGY LLC <120> ANTI-CD93 CONSTRUCTS AND USES THEREOF <130> 19385-20002.43 <140> Not Yet Assigned <141> Concurrently Herewith <150> US 63/084,474 <151> 2020-09-28 <150> US 63/058,359 <151> 2020-07-29 <150> PCT/US2021/035542 <151> 2021-06-02 <160> 420 <170> FastSEQ for Windows Version 4.0 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 1 Ser Phe Gly Val Asn 1 5 <210> 2 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 2 Val Ile Trp Ser Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Val Ala Phe Ile Ser 1 5 10 15 <210> 3 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 3 Asn Trp Arg Tyr Asp Gly Tyr Phe Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 4 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 4 Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn Val Ala 1 5 10 <210> 5 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 5 Ser Ala Ser Tyr Arg Phe Ile 1 5 <210> 6 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 6 Gln Gln Tyr Asn Arg Asn Pro Ile Thr 1 5 <210> 7 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 7 Asp Phe Ser Leu Ser Ser Phe Gly 1 5 <210> 8 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 8 Ile Trp Ser Gly Gly Ser Thr 1 5 <210> 9 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 9 Ala Arg Asn Trp Arg Tyr Asp Gly Tyr Phe Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 10 15 <210> 10 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 10 Gln Asn Val Gly Thr Asn 1 5 <210> 11 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 11 Ser Ala Ser 1 <210> 12 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 12 Gln Gln Tyr Asn Arg Asn Pro Ile Thr 1 5 <210> 13 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 13 Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln 1 5 10 15 Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Asp Phe Ser Leu Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Val Asn Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Val Ala Phe Ile 50 55 60 Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe 65 70 75 80 Lys Met Asn Asn Leu Gln Ala Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Asn Trp Arg Tyr Asp Gly Tyr Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 14 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 14 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Thr Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Phe Ile Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Asn Val Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Arg Asn Pro Ile 85 90 95 Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 15 <211> 364 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 15 caggtgcagc tgaagcagtc aggacctggc ctagtgcagc cctcacagag cctgtccatc 60 acctgcacag tctctgattt ctcattatct agctttggtg taaactgggt tcgccagcct 120 ccaggaaagg gtctggagtg gctgggggtg atatggagtg gtggaagtac agactataat 180 gtagctttca tatccagact gagcatcagc aaggacaact ccaagagcca agttttcttt 240 aaaatgaaca atctgcaagc tgatgacaca gccatatact actgtgccag aaattggagg 300 tatgatggtt acttctatgc tatggactac tggggtcaag gaacctcagt caccgtctcc 360 tcag 364 <210> 16 <211> 322 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 16 gacattgtga tgacccagtc tcaaaaattc atgtccacat caacaggaga cagggtcagc 60 gtcacctgca aggccagtca gaatgtgggt actaatgtag cctggtatca acagaaacca 120 ggacagtctc ctaaagcact gatttactcg gcatcatacc gattcattgg agtccctgat 180 cgcttcacag gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcaccaa tgtgcagtct 240 gaagacttgg cagagtattt ctgtcagcaa tataacagaa atcctatcac gttcggctcg 300 gggacaaagt tggaaataaa ac 322 <210> 17 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 17 Ser Tyr Trp Met His 1 5 <210> 18 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 18 Glu Ile Asp Pro Ser Ala Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 19 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 19 Ser Val Tyr Tyr Gly Asn Lys Tyr Phe Asp Val 1 5 10 <210> 20 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 20 Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala Gly Asp Ser Tyr Met Asn 1 5 10 15 <210> 21 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 21 Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 22 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 22 Gln Gln Thr Asn Glu Asp Pro Arg Thr 1 5 <210> 23 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 23 Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp 1 5 <210> 24 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 24 Ile Asp Pro Ser Ala Ser Tyr Thr 1 5 <210> 25 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 25 Ala Arg Ser Val Tyr Tyr Gly Asn Lys Tyr Phe Asp Val 1 5 10 <210> 26 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 26 Gln Ser Val Asp Tyr Ala Gly Asp Ser Tyr 1 5 10 <210> 27 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 27 Ala Ala Ser 1 <210> 28 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 28 Gln Gln Thr Asn Glu Asp Pro Arg Thr 1 5 <210> 29 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 29 Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Asp Pro Ser Ala Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Val Tyr Tyr Gly Asn Lys Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 30 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 30 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 31 <211> 360 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 31 caggtccagc ttcagcagcc tggggctgaa ctggtgaagc ctggggcttc agtgaagctg 60 tcctgcaagg cttctggata caccttcact agctactgga tgcactgggt gaagcagagg 120 cctggacaag gccttgagtg gatcggagag attgatcctt ctgctagtta tacttactac 180 aatcaaaagt tcaagggcaa ggccacattg actgtagaca aatcctccag cacagcctac 240 atgcaactca gcagcctgac atctgaggac tctgcggtct attactgtgc aagatcggtc 300 tactatggta acaagtattt cgatgtctgg ggcgcaggga ccacggtcac cgtctcctca 360 <210> 32 <211> 334 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 32 gacattgtgc tgacccaatc tccagcttct ttggctgtgt ctctagggca gagggccacc 60 atctcctgca aggccagcca aagtgttgat tatgccggtg atagttatat gaactggtac 120 caacagaaac caggacagcc acccaaactc ctcatctatg ctgcatccaa tctagaatct 180 gggatcccag ccaggtttag tggcagtggg tctgggacag acttcaccct caacatccat 240 cctgtggagg aggaggatgc tgcaacctat tactgtcagc aaactaatga ggatcctcgg 300 acgttcggtg gaggcaccaa gctggaaatc aaac 334 <210> 33 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 33 Thr Tyr Trp Met Asn 1 5 <210> 34 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 34 Arg Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asp Ala Asn Tyr Asn Gly Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 35 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 35 Thr Gly Ala Ala Tyr Asp Phe Asp Pro Phe Pro Tyr 1 5 10 <210> 36 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 36 Ser Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Val Thr Tyr Leu Tyr 1 5 10 15 <210> 37 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 37 Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser 1 5 <210> 38 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 38 Ala Gln Met Leu Glu Arg Pro Phe Thr 1 5 <210> 39 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 39 Gly Tyr Ala Phe Ser Thr Tyr Trp 1 5 <210> 40 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 40 Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asp Ala 1 5 <210> 41 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 41 Thr Arg Thr Gly Ala Ala Tyr Asp Phe Asp Pro Phe Pro Tyr 1 5 10 <210> 42 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 42 Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Val Thr Tyr 1 5 10 <210> 43 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 43 Arg Met Ser 1 <210> 44 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 44 Ala Gln Met Leu Glu Arg Pro Phe Thr 1 5 <210> 45 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 45 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Asp Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asp Ala Asn Tyr Asn Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Arg Thr Gly Ala Ala Tyr Asp Phe Asp Pro Phe Pro Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 120 <210> 46 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 46 Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Ser Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asn Gly Val Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr Cys Ala Gln Met 85 90 95 Leu Glu Arg Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 47 <211> 364 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 47 caggttcagc tgcagcagtc tggacctgac ctggtgaagc ctggggcctc agtgaagatt 60 tcctgcaaag cttctggcta cgcattcagt acctactgga tgaactgggt gaagcagagg 120 cctggaaagg gtcttgagtg gattggacgg atttttcctg gagatggaga tgctaactac 180 aatgggaagt tcaagggcaa ggccacactg actgcagaca aatcctccag cacagcctac 240 atgcaactca gcagcctgac atctgaggac tctgcggtct acttctgtac aagaactggg 300 gccgcctatg atttcgaccc ttttccttac tggggccaag ggactctggt cactgtctct 360 gcag 364 <210> 48 <211> 337 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 48 gatattgtga tgacgcaggc tgcattctcc aatccagtca ctcttggaac atcagcttcc 60 atctcttgca gttctagtaa gagtctccta catagtaatg gcgtcactta tttgtattgg 120 tatctgcaga ggccaggcca gtctcctcag ctcctgatat atcggatgtc caaccttgcc 180 tcaggagtcc cagacaggtt cagtggcagt gggtcaggaa ctgatttcac actgagaatc 240 agcagagtgg aggctgagga tgtgggtatt tattactgtg ctcaaatgct agaacgccca 300 ttcacgttcg gctcggggac aaagttggaa ataaaac 337 <210> 49 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 49 Asp Tyr Tyr Met Asn 1 5 <210> 50 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 50 Arg Val Asn Pro Asn Asn Gly Gly Lys Thr Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 51 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 51 Trp Arg Leu Arg Pro Val Asp Tyr Gly Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 52 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 52 Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Thr Ser Ser Tyr Ser Tyr Met His 1 5 10 15 <210> 53 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 53 Tyr Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 54 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 54 Gln His Ser Trp Glu Ile Pro Phe Thr 1 5 <210> 55 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 55 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr 1 5 <210> 56 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 56 Val Asn Pro Asn Asn Gly Gly Lys 1 5 <210> 57 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 57 Ala Arg Trp Arg Leu Arg Pro Val Asp Tyr Gly Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 58 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 58 Gln Ser Val Ser Thr Ser Ser Tyr Ser Tyr 1 5 10 <210> 59 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 59 Tyr Ala Ser 1 <210> 60 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 60 Gln His Ser Trp Glu Ile Pro Phe Thr 1 5 <210> 61 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 61 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Val Asn Pro Asn Asn Gly Gly Lys Thr Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Leu Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Arg Leu Arg Pro Val Asp Tyr Gly Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 62 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 62 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Thr Ser 20 25 30 Ser Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp 85 90 95 Glu Ile Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 63 <211> 364 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 63 gaggtccagc tgcaacagtc tggacctgag ctggtgaagc ctggggcttc agtgaagatg 60 tcctgtaagg cttctggata cacattcact gactactaca tgaactgggt gaagcagagt 120 catggaaaga gtcttgagtg gattggacgt gttaatccta acaatggtgg taaaacctac 180 aaccagaagt tcaagggcaa ggccacattg acagtagaca aatccctcag cacagcctac 240 atgcagctca acagcctgac atctgaggac tctgcggtct attactgtgc aagatggagg 300 ctacggcccg ttgactatgg tatggactac tggggtcaag gaacctcagt caccgtctcc 360 tcag 364 <210> 64 <211> 334 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 64 gacattgtgc tgacacagtc tcctgcttcc ttggctgtat ctctggggca gagggccacc 60 atctcatgca gggccagcca aagtgtcagt acatctagct atagttatat gcactggtac 120 caacagaaac caggacagcc acccaaactc ctcatcaagt atgcatccaa cctagaatct 180 ggggtccctg ccaggttcag tggcagtggg tctgggacag acttcaccct caacatccat 240 cctgtggagg aggaggatac tgcaacatat tactgtcagc acagttggga gattccattc 300 acgttcggct cggggacaaa gttggaaata aaac 334 <210> 65 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 65 Asp Tyr Glu Met His 1 5 <210> 66 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 66 Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 67 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 67 Gly Ala Trp Phe Ala Tyr 1 5 <210> 68 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 68 Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser Asn Ser Ala Asn 1 5 10 <210> 69 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 69 Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro 1 5 <210> 70 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 70 Ala Leu Trp Tyr Asn Asn His Phe Val 1 5 <210> 71 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 71 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu 1 5 <210> 72 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 72 Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr 1 5 <210> 73 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 73 Thr Arg Gly Ala Trp Phe Ala Tyr 1 5 <210> 74 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 74 Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser Asn Ser 1 5 <210> 75 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 75 Gly Thr Asn 1 <210> 76 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 76 Ala Leu Trp Tyr Asn Asn His Phe Val 1 5 <210> 77 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 77 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Met His Trp Val Arg Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Gly Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala 115 <210> 78 <211> 109 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 78 Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser 20 25 30 Asn Ser Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly 35 40 45 Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala 65 70 75 80 Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Asn Asn 85 90 95 His Phe Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 79 <211> 346 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 79 caggttcaat tgcagcagtc tggggctgag ctggtgaggc ctggggcttc agtgaagctg 60 tcctgcaagg cttcgggcta tacatttact gactatgaaa tgcactgggt gaggcagaca 120 cctgtgcatg gcctggaatg gattggaggt attgatcctg aaactggtgg tactgcctac 180 aatcagaagt tcaagggcaa ggccacactg actgcagaca aatcctccag cacagcctac 240 atggagctcc gcagcctgac atctgaggac tctgccgtct attactgtac acgaggggcc 300 tggtttgctt actggggcca agggactctg gtcactgtct ctgcag 346 <210> 80 <211> 328 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 80 caggctgttg tgactcagga atctgcactc accacatcac ctggtgaaac agtcacactc 60 acttgtcgct caagtactgg ggctgttaca actagtaact ctgccaactg ggtccaagaa 120 aaaccagatc atttattcac tggtctaatc ggtggtacca acaaccgagc tccaggtgtt 180 cctgccagat tctcaggctc cctgattgga gacaaggctg ccctcaccat cacaggggca 240 cagactgagg atgaggcaat atatttctgt gctctatggt acaacaacca tttcgtgttc 300 ggtggaggca ccaaactgac tgtcctag 328 <210> 81 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 81 Ser Tyr Trp Met His 1 5 <210> 82 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 82 Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Ser Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 83 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 83 Gly Gly Phe Asp Tyr Ser Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr 1 5 10 <210> 84 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 84 Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp Val Ala 1 5 10 <210> 85 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 85 Tyr Ala Ser Asn Arg Tyr Thr 1 5 <210> 86 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 86 Gln Gln Asp Tyr Ser Ser Tyr Thr 1 5 <210> 87 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 87 Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp 1 5 <210> 88 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 88 Ile Tyr Pro Gly Asn Ser Asp Thr 1 5 <210> 89 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 89 Thr Arg Gly Gly Phe Asp Tyr Ser Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr 1 5 10 <210> 90 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 90 Gln Ser Val Ser Asn Asp 1 5 <210> 91 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 91 Tyr Ala Ser 1 <210> 92 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 92 Gln Gln Asp Tyr Ser Ser Tyr Thr 1 5 <210> 93 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 93 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Thr Val Leu Ala Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Ser Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Lys Leu Thr Ala Val Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Asn Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Gly Gly Phe Asp Tyr Ser Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 120 <210> 94 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 94 Ser Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Lys Phe Leu Leu Val Ser Ala Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Thr Val Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Tyr Ser Ser Tyr Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 95 <211> 363 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 95 gaggttcagc tccagcagtc tgggactgtg ctggcaaggc ctggggcttc agtgaagatg 60 tcctgcaagg cttctggcta cacctttacc agctactgga tgcactgggt aaaacagagg 120 cctggacagg gtctggaatg gattggcgct atttatcctg gaaatagtga tactagctac 180 aaccagaagt tcaagggcaa ggccaaactg actgcagtca catctgccag cactgcctac 240 atggagctca gcagcctgac aaatgaggac tctgcggtct attactgtac aagaggagga 300 tttgactata gtaactactg gtttgcttac tggggccaag ggactctggt cactgtctct 360 gca 363 <210> 96 <211> 319 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 96 agtattgtga tgacccagac tcccaaattc ctgcttgtat cagcaggaga cagggttacc 60 ataacctgca aggccagtca gagtgtgagt aatgatgtag cttggtacca acagaagcca 120 gggcagtctc ctaaactgct gatatactat gcatccaatc gctacactgg agtccctgat 180 cgcttcactg gcagtggata tgggacggat ttcactttca ccatcagcac tgtgcaggct 240 gaagacctgg cagtttattt ctgtcagcag gattatagct cgtacacgtt cggagggggg 300 accaagctgg aaataaaac 319 <210> 97 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 97 Arg Ser Trp Met Asn 1 5 <210> 98 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 98 Trp Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 99 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 99 Ser Ala Thr Leu Pro Tyr Trp Tyr Phe Asp Val 1 5 10 <210> 100 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 100 Lys Ala Ser Gln Asp Ile Lys Ser Tyr Leu Ser 1 5 10 <210> 101 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 101 Tyr Ala Thr Asn Leu Ala Asp 1 5 <210> 102 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 102 Leu Gln His Val Glu Ser Pro Trp Thr 1 5 <210> 103 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 103 Gly Tyr Ala Phe Ser Arg Ser Trp 1 5 <210> 104 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 104 Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr 1 5 <210> 105 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 105 Ala Arg Ser Ala Thr Leu Pro Tyr Trp Tyr Phe Asp Val 1 5 10 <210> 106 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 106 Gln Asp Ile Lys Ser Tyr 1 5 <210> 107 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 107 Tyr Ala Thr 1 <210> 108 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 108 Leu Gln His Val Glu Ser Pro Trp Thr 1 5 <210> 109 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 109 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Arg Ser 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Ala Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Ala Thr Leu Pro Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 110 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 110 Asp Ile Lys Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Tyr Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Lys Ser Tyr 20 25 30 Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Trp Lys Ser Pro Lys Thr Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Thr Asn Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Gln Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gly Ser 65 70 75 80 Asp Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Val Glu Ser Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 111 <211> 361 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 111 caggtccagc tgcagcagtc tggacctgag ctggtgaagc ctggggcctc agtgaagatt 60 tcctgcaaag cttctggcta tgcattcagt cgctcctgga tgaactgggt aaagcagagg 120 cctggaaagg gtcttgagtg gattggatgg atttatcctg gagatggtga tactaactac 180 aatggaaagt tcaagggcaa ggccacactg actgcagaca aatcctcaag cacagcctac 240 atgcagctca gcagcctgac atctgaggac tctgcggcct atttctgtgc aaggtcggct 300 accctacctt actggtactt cgatgtctgg ggcgcaggga ccacggtcac cgtctcctca 360 g 361 <210> 112 <211> 322 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 112 gacatcaaga tgacccagtc tccatcctcc atgtatgcat cgctgggaga gagagtcact 60 atcacttgca aggcgagtca ggacattaaa agctatttaa gttggtacca gcagaaacca 120 tggaaatctc ctaagaccct gatctattat gcaacaaact tggcagatgg ggtcccatca 180 agattcagtg gcagtggatc tgggcaggat tattctctaa ccatcagcag cctggggtct 240 gacgatacag caacttatta ctgtctacag catgttgaga gcccgtggac gttcggtgga 300 ggcaccaagc tggaaatcaa ac 322 <210> 113 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 113 Ala Tyr Val Met His 1 5 <210> 114 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 114 Tyr Ile Phe Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Glu Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 115 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 115 Arg Thr Asp Gly Asn Pro Tyr Thr Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 116 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 116 Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala Val Ala 1 5 10 <210> 117 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 117 Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr 1 5 <210> 118 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 118 Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Phe Thr 1 5 <210> 119 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 119 Gly Tyr Thr Phe Thr Ala Tyr Val 1 5 <210> 120 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 120 Ile Phe Pro Tyr Asn Asp Gly Thr 1 5 <210> 121 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 121 Ala Arg Arg Thr Asp Gly Asn Pro Tyr Thr Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 122 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 122 Gln Asp Val Ser Thr Ala 1 5 <210> 123 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 123 Ser Ala Ser 1 <210> 124 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 124 Gln Gln His Tyr Ser Ser Pro Phe Thr 1 5 <210> 125 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 125 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Asn Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ala Tyr 20 25 30 Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Phe Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Glu Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Thr Asp Gly Asn Pro Tyr Thr Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 126 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 126 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 His Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Arg Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 127 <211> 361 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 127 gaggtccagc tgcagcagtc tggacctgag ttggtaaatc ctggggcttc agtgaagatg 60 tcctgcaagg cttctggata cacattcact gcctatgtta tgcactgggt gaaacagaag 120 cctgggcagg gccttgagtg gattggatat atttttcctt acaatgatgg tactgagtac 180 aatgagaagt tcaaaggcaa ggccacactg acttcagaca aatcctccag cacagcctac 240 atggagctca gcagcctgac ctctgaggac tctgcggtct attactgtgc aaggaggaca 300 gatggtaacc cctatactat ggactattgg ggtcaaggaa cctcagtcac cgtctcctca 360 g 361 <210> 128 <211> 322 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 128 gacattgtga tgacccagtc tcacaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcagc 60 atcacctgca aggccagtca ggatgtgagt actgctgtag cctggtatca acagaaacca 120 ggacaatctc ctaaactact gattcattcg gcatcctacc ggtacactgg agtccctgat 180 cgcttcactg gcagaggatc tgggacggat ttcactttca ccatcagcag tgtgcaggct 240 gaagacctgg cagtttatta ctgtcagcaa cattatagta ctccattcac gttcggctcg 300 gggacaaagt tggaaataaa ac 322 <210> 129 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 129 Asp Tyr Tyr Ile His 1 5 <210> 130 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 130 Glu Ile Tyr Pro Gly Ser Asp Asp Ala Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 131 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 131 Glu Thr Thr Ala Thr Ala Tyr 1 5 <210> 132 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 132 Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Leu Ile Tyr 1 5 10 <210> 133 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 133 Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser 1 5 <210> 134 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 134 Gln Gln Arg Ser Gly Tyr Pro Pro Thr 1 5 <210> 135 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 135 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr 1 5 <210> 136 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 136 Ile Tyr Pro Gly Ser Asp Asp Ala 1 5 <210> 137 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 137 Thr Arg Glu Thr Thr Ala Thr Ala Tyr 1 5 <210> 138 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 138 Ser Ser Val Ser Leu 1 5 <210> 139 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 139 Ser Thr Ser 1 <210> 140 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 140 Gln Gln Arg Ser Gly Tyr Pro Pro Thr 1 5 <210> 141 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 141 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Tyr Pro Gly Ser Asp Asp Ala Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Arg Glu Thr Thr Ala Thr Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ala 115 <210> 142 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 142 Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Leu Ile 20 25 30 Tyr Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Thr Ser Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Met Glu Ala Glu 65 70 75 80 Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Gly Tyr Pro Pro Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 143 <211> 351 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 143 ctgaggtcca gctgcagcag tctggacctg agctggttaa gcctggggct tcagtgaagg 60 tatcctgcaa ggcctctgga tacacattca ctgactacta tatacactgg gtgaagcaga 120 ggcctgggca gggccttgag tggattggag agatttatcc tggaagtgat gatgcttact 180 acaatgagaa attcaagggc aaggccacac tgactgcaga caaatcctcc agcacagcct 240 acatgcagct cagcagcctg acatctgagg actctgcagt ctatttctgt acaagagaga 300 ctacggctac ggcttactgg ggccaaggga ctctggtcac tgtctctgca g 351 <210> 144 <211> 319 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 144 caaattgttc tcacccagtc tccagcaatc atgtctgcat ctccagggga gaaggtcacc 60 ataacctgca gtgccagctc aagtgtaagt ctcatttact ggttccagca gaagccaggc 120 acttctccca aactctggat ttatagcaca tccaacctgg cttctggagt ccctgctcgc 180 ttcagtggca gtggatctgg gacctcttac tctctcacaa tcagccgaat ggaggctgaa 240 gatgctgcca cttattactg ccagcaaagg agtggttacc cacccacgtt cggagggggg 300 accaagctgg aaataaaac 319 <210> 145 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 145 Asp His Gly Ile His 1 5 <210> 146 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 146 Asn Ile Ser Pro Gly Asn Gly Asp Ile Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 147 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 147 Tyr Phe Val Asp 1 <210> 148 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 148 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Asn Asn Gln Lys Asn Cys Leu 1 5 10 15 Ala <210> 149 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 149 Phe Ala Cys Thr Arg Glu Ser 1 5 <210> 150 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 150 Gln Gln His Cys Asn Thr Pro Leu Thr 1 5 <210> 151 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 151 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp His Gly 1 5 <210> 152 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 152 Ile Ser Pro Gly Asn Gly Asp Ile 1 5 <210> 153 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 153 Thr Thr Tyr Phe Val Asp 1 5 <210> 154 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 154 Gln Ser Leu Leu Asn Ser Asn Asn Gln Lys Asn Cys 1 5 10 <210> 155 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 155 Phe Ala Cys 1 <210> 156 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 156 Gln Gln His Cys Asn Thr Pro Leu Thr 1 5 <210> 157 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 157 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Asp Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Thr 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp His 20 25 30 Gly Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Arg Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Asn Ile Ser Pro Gly Asn Gly Asp Ile Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Gln Val Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Thr Tyr Phe Val Asp Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110 Ala <210> 158 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 158 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Met Ser Ile Gly 1 5 10 15 Gln Arg Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Asn Asn Gln Lys Asn Cys Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Ser Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Phe Ala Cys Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ile Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Tyr Tyr Phe Cys Gln Gln 85 90 95 His Cys Asn Thr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu 100 105 110 Lys <210> 159 <211> 340 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 159 caggttcagc tgcaacagtc tgacgctgag ttggtgaaac ctgggacttc agtgaagata 60 tcctgcaagg cttctggcta caccttcact gaccatggta ttcactgggt gaaacagagg 120 cctgaacggg gcctggaatg gattggaaat atttctcccg gaaatggtga tattaagtat 180 aatgagaagt tcaagggcaa ggccacgctg actgcagaca aatcctccag cactgtctac 240 atgcaggtca acagcctgac atctgaggat tctgcagtgt atttctgtac aacctatttt 300 gttgactggg gccgggggac tctggtcact gtctctgcag 340 <210> 160 <211> 340 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 160 gacattgtga tgacacagtc tccatcctcc ctggctatgt caattggaca gagggtcact 60 atgagctgca agtccagtca gagcctttta aatagtaaca atcaaaagaa ctgtttggcc 120 tggtaccagc agaaaccagg acagtctcct agacttctga tttactttgc atgtactagg 180 gaatcggggg tccctgatcg cttcattggc agtggatctg ggacagattt cacccttacc 240 atcagcagtg tgcaggctga agacctggca tattacttct gtcagcaaca ttgtaacact 300 ccgctcacgt tcggtgctgg gaccaagctg gagctgaaac 340 <210> 161 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 161 Thr Tyr Trp Met Asn 1 5 <210> 162 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 162 Arg Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asp Tyr Asp Gly Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 163 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 163 Thr Gly Ala Ala Tyr Glu Phe Asp Pro Phe Pro Tyr 1 5 10 <210> 164 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 164 Ser Ser Thr Lys Ser Leu Leu His Ser Ser Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr 1 5 10 15 <210> 165 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 165 Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser 1 5 <210> 166 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 166 Ala Gln Met Leu Glu Arg Pro Phe Thr 1 5 <210> 167 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 167 Gly Tyr Ala Phe Ser Thr Tyr Trp 1 5 <210> 168 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 168 Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asp Thr 1 5 <210> 169 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 169 Ala Arg Thr Gly Ala Ala Tyr Glu Phe Asp Pro Phe Pro Tyr 1 5 10 <210> 170 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 170 Lys Ser Leu Leu His Ser Ser Gly Ile Thr Tyr 1 5 10 <210> 171 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 171 Arg Met Ser 1 <210> 172 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 172 Ala Gln Met Leu Glu Arg Pro Phe Thr 1 5 <210> 173 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 173 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asp Tyr Asp Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Gly Ala Ala Tyr Glu Phe Asp Pro Phe Pro Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 120 <210> 174 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 174 Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Ser Ser Thr Lys Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Ser Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Met 85 90 95 Leu Glu Arg Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 175 <211> 364 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 175 caggttcagc tgcagcagtc tggacctgag ctggtgaagc ctggggcctc agtgaagatt 60 tcctgcaaag gttctggcta cgcattcagt acctactgga tgaactgggt gaagcagagg 120 cctggaaagg gtcttgagtg gattggacgg atttttcctg gagatggaga tacagattac 180 gatgggaagt tcaagggcaa ggccacactg actgcagaca aatcctccaa cacagcctac 240 atgcaactca gcagcctgac atctgaagac tctgcggtct acttctgtgc aagaactggg 300 gccgcctatg aattcgaccc ttttccttac tggggccaag ggactctggt cactgtctct 360 gcag 364 <210> 176 <211> 337 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 176 gatattgtga tgacgcaggc tgcattctcc aatccagtca ctcttggaac atcagcttcc 60 atctcttgca gttctactaa gagtctccta catagtagcg gcatcactta tctgtattgg 120 tatctgcaga ggccaggcca gtctcctcag ctcctgatat atcggatgtc caaccttgcc 180 tcaggagtcc cagacaggtt cagtggcagt gggtcaggaa ctgatttcac actgagaatc 240 agcagagtgg aggctgagga tgtgggtgtt tattactgtg ctcaaatgct agaacgccca 300 ttcacgttcg gctcggggac aaagttggaa ataaaac 337 <210> 177 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 177 Ser Tyr Trp Leu Asn 1 5 <210> 178 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 178 Arg Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Gly Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 179 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 179 Gly Asp Gly Tyr Trp Ala Met Asp Tyr 1 5 <210> 180 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 180 Arg Phe Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr 1 5 10 15 <210> 181 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 181 Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser 1 5 <210> 182 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 182 Ala Gln Asn Leu Glu Leu Pro Trp Thr 1 5 <210> 183 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 183 Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr Trp 1 5 <210> 184 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 184 Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr 1 5 <210> 185 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 185 Val Arg Gly Asp Gly Tyr Trp Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 186 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 186 Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Ile Thr Tyr 1 5 10 <210> 187 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 187 Gln Met Ser 1 <210> 188 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 188 Ala Gln Asn Leu Glu Leu Pro Trp Thr 1 5 <210> 189 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 189 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Trp Leu Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Phe 35 40 45 Gly Arg Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Val Arg Gly Asp Gly Tyr Trp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Ser Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 190 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 190 Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Phe Ser Lys Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Ser Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn 85 90 95 Leu Glu Leu Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 191 <211> 355 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 191 caggttcagc tgcagcagtc tggacctgag ctggtgaagc ctggggcctc ggtgaagatt 60 tcctgcaaag cttctggcta cgcattcagt agctactggc tgaactgggt gaagcagagg 120 cctggaaagg gtcttgagtg gtttggacgg atttatcctg gagatggaga tactgactac 180 aatgggaagt tcaagggcaa ggccacactg actgcagaca aatcctccag cacagcctac 240 atgcaactca gaagcctgac atctgaggac tctgcggtct acttctgtgt aagaggtgat 300 ggttactggg ctatggacta ctggggtcaa ggaacctcag tcaccgtctc ctcag 355 <210> 192 <211> 337 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 192 gatattgtga tgacgcaggc tgcattctcc aatccagtca ctcttggaac atcagcttcc 60 atctcctgca ggtttagtaa gagtctccta catagtaatg gcatcactta tttgtattgg 120 tatctgcaga agccaggcca gtctcctcag ctcctgattt atcagatgtc caaccttgcc 180 tcaggagtcc cagacaggtt cagtagcagt gggtcaggaa ctgatttcac actgagaatc 240 agcagagtgg aggctgagga tgtgggtgtt tattactgtg ctcaaaatct agaacttccg 300 tggacgttcg gtggaggcac caagctggaa atcaaac 337 <210> 193 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 193 Asn Tyr Tyr Met Ser 1 5 <210> 194 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 194 Thr Ile Ser Asn Asn Gly Asp Ser Thr Tyr Tyr Leu Asp Thr Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 195 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 195 Val Gly Thr Gly Phe Thr Tyr 1 5 <210> 196 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 196 Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Asn Tyr Leu His 1 5 10 <210> 197 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 197 Phe Ala Ser Gln Ser Ile Ser 1 5 <210> 198 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 198 Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Leu Thr 1 5 <210> 199 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 199 Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Tyr 1 5 <210> 200 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 200 Ile Ser Asn Asn Gly Asp Ser Thr 1 5 <210> 201 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 201 Thr Arg Val Gly Thr Gly Phe Thr Tyr 1 5 <210> 202 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 202 Gln Ser Ile Asn Asn Tyr 1 5 <210> 203 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 203 Phe Ala Ser 1 <210> 204 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 204 Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Leu Thr 1 5 <210> 205 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 205 Asp Val Asn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Leu Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Tyr Met Ser Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Asn Asn Gly Asp Ser Thr Tyr Tyr Leu Asp Thr Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ser Ala Glu Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Ile Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Val Gly Thr Gly Phe Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ala 115 <210> 206 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 206 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Asp Ser Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Arg Ser His Glu Ser Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Phe Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asp Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Ile Glu Thr 65 70 75 80 Glu Asp Phe Gly Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 <210> 207 <211> 349 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 207 gacgtgaacc tcgtggagtc tgggggaggc ttagtgaagc ttggagggtc cctgaaactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt aactactaca tgtcttgggt tcgccagagt 120 ccggagaaga ggctggagtg ggtcgcaacc attagtaata atggtgatag cacctactat 180 ctagacactg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca gtgccgagaa caccctgtac 240 ctgcaaatga gcagtctgat ttctgaggac acagccgtgt attactgtac aagagttggg 300 acggggttta cttactgggg ccaagggact ctggtcactg tctctgcag 349 <210> 208 <211> 322 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 208 gatattgtgc taactcagtc tccagccacc ctgtctgtga ctccaggaga tagcgtcagt 60 ctttcctgca gggccagcca aagtattaac aactacctac actggtatca acaaagatca 120 catgagtctc caaggcttct catcaagttt gcttcccagt ccatctctga catcccctcc 180 aggttcagtg gcagtggatc agggacagat ttcactctca gtatcaacag tatagagact 240 gaagattttg gaatgtattt ctgtcaacag agtaacagct ggccgctcac gttcggtgct 300 gggaccaagc tggagctgaa ac 322 <210> 209 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 209 Ser Tyr Val Ile His 1 5 <210> 210 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 210 Tyr Ile Asn Pro Tyr Ser Asp Tyr Thr Gln Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 211 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 211 Arg Ala Asp Gly Asn Pro Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 212 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 212 Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala Val Val 1 5 10 <210> 213 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 213 Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr 1 5 <210> 214 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 214 Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Phe Thr 1 5 <210> 215 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 215 Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Val 1 5 <210> 216 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 216 Ile Asn Pro Tyr Ser Asp Tyr Thr 1 5 <210> 217 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 217 Ala Arg Arg Ala Asp Gly Asn Pro Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 218 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 218 Gln Asp Val Ser Thr Ala 1 5 <210> 219 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 219 Ser Ala Ser 1 <210> 220 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 220 Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Phe Thr 1 5 <210> 221 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 221 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Val Ile His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Tyr Ser Asp Tyr Thr Gln Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Ser Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ala Asp Gly Asn Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 222 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 222 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Thr Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala 20 25 30 Val Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Thr Ser Val Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 223 <211> 361 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 223 gaggtccagc tacagcagtc tggacctgag ctggtaaagc ctggggcttc agtgaagatg 60 tcctgcaagg cttctggata cacattcact agctatgtta ttcactgggt aaagcagaag 120 cctgggcagg gccttgagtg gattggatat attaatcctt acagtgatta tactcagtac 180 aatgagaagt tcaaaggcaa ggccacactg acttcagaca aatcctccag cacagcctac 240 atggagctca gcagcctgac ctctgaggac tctgcggtct attcctgtgc aaggagggca 300 gatggtaacc cctatgctat ggactactgg ggtcaaggaa cctcagtcac cgtctcctca 360 g 361 <210> 224 <211> 322 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 224 gacattgtga tgacccagtc tcacaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcagc 60 accacctgca aggccagtca ggatgtgagt actgctgtag tctggtatca acagaaacca 120 ggacaatctc ctaaactact gatttactcg gcatcctacc ggtacactgg agtccctgat 180 cgcttcactg gcagtggatc tgggacggat ttcactttca ccatcaccag tgtgcaggct 240 gaagacctgg cagtttatta ctgtcagcaa cattatagta ctccattcac gttcggctcg 300 gggacaaagt tggaaataaa ac 322 <210> 225 <211> 1 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 1 <223> Can be present in repeats of any integer <400> 225 Gly 1 <210> 226 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> (3)..(16) <223> Can be present or absent <400> 226 Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser 1 5 10 15 <210> 227 <211> 40 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> (6)..(40) <223> Can be present or absent <400> 227 Gly Ser Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 Ser Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser Gly Ser 20 25 30 Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser 35 40 <210> 228 <211> 40 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> (6)..(40) <223> Can be present or absent <400> 228 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 20 25 30 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 35 40 <210> 229 <211> 32 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> (5)..(32) <223> Can be present or absent <400> 229 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser 1 5 10 15 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser 20 25 30 <210> 230 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 230 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10 15 <210> 231 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 231 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 20 25 30 <210> 232 <211> 60 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> (16)..(60) <223> Can be present or absent <400> 232 Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Gly 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Gly Ser 20 25 30 Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Gly Ser Thr 35 40 45 Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser 50 55 60 <210> 233 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 9, 10 <223> Xaa = AN or TD <220> <221> VARIANT <222> 12 <223> Xaa = N or D <400> 233 Arg Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asp Xaa Xaa Tyr Xaa Gly Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 234 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 6 <223> Xaa = D or E <400> 234 Thr Gly Ala Ala Tyr Xaa Phe Asp Pro Phe Pro Tyr 1 5 10 <210> 235 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 3 <223> Xaa = S or T <220> <221> VARIANT <222> 10 <223> Xaa = N or S <220> <221> VARIANT <222> 12 <223> Xaa = V or I <400> 235 Ser Ser Xaa Lys Ser Leu Leu His Ser Xaa Gly Xaa Thr Tyr Leu Tyr 1 5 10 15 <210> 236 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 1 <223> Xaa = S or T <220> <221> VARIANT <222> 4 <223> Xaa = L or M <400> 236 Xaa Tyr Trp Xaa Asn 1 5 <210> 237 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 3 <223> Xaa = Y or F <220> <221> VARIANT <222> 9, 10 <223> Xaa = AN or TD <220> <221> VARIANT <222> 12 <223> Xaa = N or D <400> 237 Arg Ile Xaa Pro Gly Asp Gly Asp Xaa Xaa Tyr Xaa Gly Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 238 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 1, 2, 3 <223> Xaa = SSS, SST, or RFS <220> <221> VARIANT <222> 10 <223> Xaa = N or S <220> <221> VARIANT <222> 12 <223> Xaa = V or I <400> 238 Xaa Xaa Xaa Lys Ser Leu Leu His Ser Xaa Gly Xaa Thr Tyr Leu Tyr 1 5 10 15 <210> 239 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 1 <223> Xaa = R or Q <400> 239 Xaa Met Ser Asn Leu Ala Ser 1 5 <210> 240 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 3 <223> Xaa = M or N <220> <221> VARIANT <222> 6 <223> Xaa = R or L <220> <221> VARIANT <222> 8 <223> Xaa = F or W <400> 240 Ala Gln Xaa Leu Glu Xaa Pro Xaa Thr 1 5 <210> 241 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 1 <223> Xaa = A or S <220> <221> VARIANT <222> 4 <223> Xaa = M or I <400> 241 Xaa Tyr Val Xaa His 1 5 <210> 242 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 3 <223> Xaa = F or N <220> <221> VARIANT <222> 6 <223> Xaa = N or S <220> <221> VARIANT <222> 8 <223> Xaa = G or Y <220> <221> VARIANT <222> 10 <223> Xaa = E or Q <400> 242 Tyr Ile Xaa Pro Tyr Xaa Asp Xaa Thr Xaa Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 243 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 2, 8 <223> Xaa = T or A <400> 243 Arg Xaa Asp Gly Asn Pro Tyr Xaa Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 244 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 11 <223> Xaa = A or V <400> 244 Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala Val Xaa 1 5 10 <210> 245 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 5 <223> Xaa = N or D <220> <221> VARIANT <222> 7 <223> Xaa = G or S <220> <221> VARIANT <222> 9 <223> Xaa = N or A <220> <221> VARIANT <222> 11 <223> Xaa = A or V <400> 245 Lys Ala Ser Gln Xaa Val Xaa Thr Xaa Val Xaa 1 5 10 <210> 246 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 6, 7 <223> Xaa = FI or YT <400> 246 Ser Ala Ser Tyr Arg Xaa Xaa 1 5 <210> 247 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 3, 4, 5, 6 <223> Xaa = YNRN or HYST <220> <221> VARIANT <222> 8 <223> Xaa = I or F <400> 247 Gln Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Thr 1 5 <210> 248 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 1 <223> Xaa = K or R <220> <221> VARIANT <222> 7, 8, 9, 10, 11 <223> Xaa = DYAGD or STSSY <220> <221> VARIANT <222> 15 <223> Xaa = N or H <400> 248 Xaa Ala Ser Gln Ser Val Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Tyr Met Xaa 1 5 10 15 <210> 249 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 1 <223> Xaa = A or Y <400> 249 Xaa Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 250 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <220> <221> VARIANT <222> 2, 3, 4, 5, 6 <223> Xaa = QTNED or HSWEI <220> <221> VARIANT <222> 8 <223> Xaa = R or F <400> 250 Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Thr 1 5 <210> 251 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 251 Asp Thr Tyr Met Tyr 1 5 <210> 252 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 252 Arg Ile Asp Pro Ala Asn Asp Asn Thr Lys Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 253 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 253 Ala Lys Asn Leu Leu Asn Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 254 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 254 Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr Leu Ser 1 5 10 <210> 255 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 255 Ala Thr Ser Thr Leu Gln Ser 1 5 <210> 256 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 256 Leu Gln Tyr Ala Ile Tyr Pro Leu Thr 1 5 <210> 257 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 257 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Thr 1 5 <210> 258 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 258 Ile Ser His Gly Gly Gly Asp Thr 1 5 <210> 259 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 259 Ala Arg His Ser Gly Tyr Glu Arg Gly Tyr Tyr Tyr Val Met Asp Tyr 1 5 10 15 <210> 260 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 260 Glu Ser Val Asp Tyr Tyr Gly Phe Ser Phe 1 5 10 <210> 261 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 261 Ala Ala Ser 1 <210> 262 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 262 Gln Gln Ser Lys Glu Val Pro Trp 1 5 <210> 263 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 263 Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Thr 1 5 <210> 264 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 264 Ile Asn Pro Thr Thr Gly Tyr Thr 1 5 <210> 265 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 265 Ala Arg Asp Asp Ala Tyr Tyr Ser Gly Tyr 1 5 10 <210> 266 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 266 Glu Asn Ile Tyr Ser Asn Leu 1 5 <210> 267 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 267 Ala Ala Lys 1 <210> 268 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 268 Gln His Phe Trp Gly Thr Pro Trp Thr 1 5 <210> 269 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 269 Gly Phe Ala Phe Ser Ser Tyr Asp 1 5 <210> 270 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 270 Ile Thr Ile Gly Gly Gly Thr Thr 1 5 <210> 271 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 271 Ala Arg His Arg Tyr Asp Tyr Phe Ala Met Asp Asn 1 5 10 <210> 272 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 272 Glu Asn Val Asp Asn Tyr Gly Ile Asn Phe 1 5 10 <210> 273 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 273 Val Ser Ser 1 <210> 274 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 274 Gln Gln Ser Lys Asp Val Pro Trp 1 5 <210> 275 <211> 135 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 275 Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser 20 25 30 Tyr Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Thr Thr Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys 50 55 60 Phe Lys Asp Lys Ala Asn Pro Thr Thr Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln 65 70 75 80 Lys Phe Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr 85 90 95 Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr 100 105 110 Tyr Cys Ala Arg Asp Asp Ala Tyr Tyr Ser Gly Tyr Trp Gly Gln Gly 115 120 125 Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser 130 135 <210> 276 <211> 108 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 276 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Val Ser Val Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Arg Gln Lys Gln Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Lys Asn Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Gly Ser Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Gly Thr Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 277 <211> 140 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 277 Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly Ser 1 5 10 15 Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ala Phe Ser Ser Tyr Asp 20 25 30 Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Val Trp Val Ala 35 40 45 Tyr Ile Thr Ile Gly Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Ser Asp Thr Val Lys 50 55 60 Arg Leu Val Trp Val Ala Tyr Ile Thr Ile Gly Gly Gly Thr Thr Tyr 65 70 75 80 Tyr Ser Asp Thr Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala 85 90 95 Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr 100 105 110 Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg His Arg Tyr Asp Tyr Phe Ala Met Asp 115 120 125 Asn Trp Gly His Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 130 135 140 <210> 278 <211> 112 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 278 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Glu 1 5 10 15 His Arg Ala Thr Ile Ser Cys Gln Ala Ser Glu Asn Val Asp Asn Tyr 20 25 30 Gly Ile Asn Phe Met Asn Trp Phe Gln His Lys Pro Ala Gln Pro Pro 35 40 45 Gln Leu Leu Ile Tyr Val Ser Ser Asn Leu Gly Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Lys Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Met Glu Glu Asp Asp Thr Ala Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Lys 85 90 95 Asp Val Pro Trp Thr Phe Ser Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 110 <210> 279 <211> 123 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 279 Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Thr Met Ser Trp Ile Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Tyr Ile Ser His Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg His Ser Gly Tyr Glu Arg Gly Tyr Tyr Tyr Val Met Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 280 <211> 111 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 280 Asp Ile Val Leu Thr Gln Phe Pro Thr Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Tyr Tyr 20 25 30 Gly Phe Ser Phe Ile Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Gly Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Met Glu Glu Asp Asp Thr Ala Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Lys 85 90 95 Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 281 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 281 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 20 25 30 Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Asp Asn Thr Lys Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ala Lys Asn Leu Leu Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 282 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 282 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 20 25 30 Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Asp Asn Thr Lys Tyr Ala Pro Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ala Lys Asn Leu Leu Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 283 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 283 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 20 25 30 Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Asp Asn Thr Lys Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ala Lys Asn Leu Leu Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 284 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 284 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr 20 25 30 Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Thr Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ile Tyr Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 285 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 285 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr 20 25 30 Leu Ser Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Thr Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ile Tyr Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 286 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 286 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Ser Gly Tyr 20 25 30 Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Thr Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Ser Gly Ser Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Ala Ile Tyr Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 287 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 287 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Asp Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val Tyr Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asp Thr Ala Tyr Asn Gln Asn Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Ala Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Asn Tyr Gly Asn Leu Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 288 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 288 Glu Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30 Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Ala Ser Pro Lys Leu Trp 35 40 45 Ile Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala Phe Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Val Glu 65 70 75 80 Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Gly Tyr Pro 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 289 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 289 Asp Tyr Glu Met His 1 5 <210> 290 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 290 Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asp Thr Ala Tyr Asn Gln Asn Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 291 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 291 Tyr Gly Asn Leu Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 292 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 292 Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu His 1 5 10 <210> 293 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 293 Ser Thr Ser Asn Leu Ala Phe 1 5 <210> 294 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 294 Gln Gln Tyr Ser Gly Tyr Pro Leu Thr 1 5 <210> 295 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 295 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Glu 1 5 <210> 296 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 296 Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asp Thr 1 5 <210> 297 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 297 Thr Asn Tyr Gly Asn Leu Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 298 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 298 Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr 1 5 <210> 299 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 299 Ser Thr Ser 1 <210> 300 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 300 Gln Gln Tyr Ser Gly Tyr Pro Leu Thr 1 5 <210> 301 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 301 Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala Gly Asp Ser Tyr Leu Asn 1 5 10 15 <210> 302 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 302 Arg Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala Gly Asp Ser Tyr Met Asn 1 5 10 15 <210> 303 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 303 Arg Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala Gly Asp Ser Tyr Leu Ala 1 5 10 15 <210> 304 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 304 Ser Tyr Trp Ile His 1 5 <210> 305 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 305 Glu Ile Glu Pro Ser Ala Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 306 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 306 Arg Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala Gly Asp Ser Tyr Leu Asn 1 5 10 15 <210> 307 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 307 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Glu Ile Asp Pro Ser Ala Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Val Asp Lys Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Val Tyr Tyr Gly Asn Lys Tyr Phe Asp Val Trp Gly Pro 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 308 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 308 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Glu Ile Asp Pro Ser Ala Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Asn Ser Leu Thr Ser Asp Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Val Tyr Tyr Gly Asn Lys Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 309 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 309 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Glu Ile Asp Pro Ser Ala Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Asp Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Val Tyr Tyr Gly Asn Lys Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 310 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 310 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Glu Ile Asp Pro Ser Ala Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Lys Ser Ser Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Val Tyr Tyr Gly Asn Lys Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 311 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 311 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Arg Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Glu Pro Ser Ala Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Lys Ser Ser Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Val Tyr Tyr Gly Asn Lys Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 312 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 312 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Asp Pro Ser Ala Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Val Tyr Tyr Gly Asn Lys Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 313 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 313 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Asp 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 314 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 314 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Gln Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Val Ser 65 70 75 80 Ser Leu Glu Asp Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 315 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 315 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 35 40 45 Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Arg 65 70 75 80 Pro Leu Glu Glu Glu Asp Ala Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 316 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 316 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Glu Asp Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 317 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 317 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Gln Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ser 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Glu Asp Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 318 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 318 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Pro Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 319 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 319 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Met Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Met His Trp Val Arg Gln Thr Pro Val Tyr Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asp Thr Ala Tyr Asn Gln Asn Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Arg Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Asn Tyr Gly Asn Leu Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 320 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 320 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Met His Trp Val Arg Gln Thr Pro Val Tyr Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asp Thr Ala Tyr Asn Gln Asn Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Asn Tyr Gly Asn Leu Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 321 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 321 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asp Thr Ala Tyr Asn Gln Asn Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Asn Tyr Gly Asn Leu Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 322 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 322 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30 Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Ala Ser Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala Phe Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu 65 70 75 80 Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Gly Tyr Pro 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 323 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 323 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30 Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Ala Ser Pro Arg Leu Trp 35 40 45 Ile Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala Phe Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln 65 70 75 80 Ser Glu Asp Phe Ala Ala Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Gly Tyr Pro 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 324 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 324 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30 Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala Phe Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln 65 70 75 80 Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Gly Tyr Pro 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 325 <211> 203 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 325 Ser Asp Thr Gly Arg Pro Phe Val Glu Met Tyr Ser Glu Ile Pro Glu 1 5 10 15 Ile Ile His Met Thr Glu Gly Arg Glu Leu Val Ile Pro Cys Arg Val 20 25 30 Thr Ser Pro Asn Ile Thr Val Thr Leu Lys Lys Phe Pro Leu Asp Thr 35 40 45 Leu Ile Pro Asp Gly Lys Arg Ile Ile Trp Asp Ser Arg Lys Gly Phe 50 55 60 Ile Ile Ser Asn Ala Thr Tyr Lys Glu Ile Gly Leu Leu Thr Cys Glu 65 70 75 80 Ala Thr Val Asn Gly His Leu Tyr Lys Thr Asn Tyr Leu Thr His Arg 85 90 95 Gln Thr Asn Thr Ile Ile Asp Val Val Leu Ser Pro Ser His Gly Ile 100 105 110 Glu Leu Ser Val Gly Glu Lys Leu Val Leu Asn Cys Thr Ala Arg Thr 115 120 125 Glu Leu Asn Val Gly Ile Asp Phe Asn Trp Glu Tyr Pro Ser Ser Lys 130 135 140 His Gln His Lys Lys Leu Val Asn Arg Asp Leu Lys Thr Gln Ser Gly 145 150 155 160 Ser Glu Met Lys Lys Phe Leu Ser Thr Leu Thr Ile Asp Gly Val Thr 165 170 175 Arg Ser Asp Gln Gly Leu Tyr Thr Cys Ala Ala Ser Ser Gly Leu Met 180 185 190 Thr Lys Lys Asn Ser Thr Phe Val Arg Val His 195 200 <210> 326 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 326 Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Met Asn 1 5 10 <210> 327 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 327 Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Ala Asp Phe Lys 1 5 10 15 Arg <210> 328 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 328 Tyr Pro His Tyr Tyr Gly Ser Ser His Trp Tyr Phe Asp Val 1 5 10 <210> 329 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 329 Ser Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn 1 5 10 <210> 330 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 330 Phe Thr Ser Ser Leu His Ser 1 5 <210> 331 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 331 Gln Gln Tyr Ser Thr Val Pro Trp Thr 1 5 <210> 332 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 332 Ser Tyr Ser Met Asn 1 5 <210> 333 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 333 Ser Ile Ser Ser Ser Ser Ser Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 334 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 334 Val Thr Asp Ala Phe Asp Ile 1 5 <210> 335 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 335 Arg Ala Ser Gln Gly Ile Asp Asn Trp Leu Gly 1 5 10 <210> 336 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 336 Asp Ala Ser Asn Leu Asp Thr 1 5 <210> 337 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 337 Gln Gln Ala Lys Ala Phe Pro Pro Thr 1 5 <210> 338 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 338 Gly Ser Asp Lys Thr His Thr 1 5 <210> 339 <211> 98 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 339 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Lys Val <210> 340 <211> 232 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 340 Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 1 5 10 15 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 20 25 30 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 35 40 45 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 50 55 60 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 65 70 75 80 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 85 90 95 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 100 105 110 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 115 120 125 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 130 135 140 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 145 150 155 160 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 165 170 175 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 180 185 190 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 195 200 205 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 210 215 220 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 225 230 <210> 341 <211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 341 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 1 5 10 15 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 20 25 30 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 35 40 45 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 50 55 60 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 65 70 75 80 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 85 90 95 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 100 105 <210> 342 <211> 660 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 342 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Asp Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val Tyr Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asp Thr Ala Tyr Asn Gln Asn Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Ala Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Asn Tyr Gly Asn Leu Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly Lys Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Ser Asp Thr Gly Arg Pro Phe 450 455 460 Val Glu Met Tyr Ser Glu Ile Pro Glu Ile Ile His Met Thr Glu Gly 465 470 475 480 Arg Glu Leu Val Ile Pro Cys Arg Val Thr Ser Pro Asn Ile Thr Val 485 490 495 Thr Leu Lys Lys Phe Pro Leu Asp Thr Leu Ile Pro Asp Gly Lys Arg 500 505 510 Ile Ile Trp Asp Ser Arg Lys Gly Phe Ile Ile Ser Asn Ala Thr Tyr 515 520 525 Lys Glu Ile Gly Leu Leu Thr Cys Glu Ala Thr Val Asn Gly His Leu 530 535 540 Tyr Lys Thr Asn Tyr Leu Thr His Arg Gln Thr Asn Thr Ile Ile Asp 545 550 555 560 Val Val Leu Ser Pro Ser His Gly Ile Glu Leu Ser Val Gly Glu Lys 565 570 575 Leu Val Leu Asn Cys Thr Ala Arg Thr Glu Leu Asn Val Gly Ile Asp 580 585 590 Phe Asn Trp Glu Tyr Pro Ser Ser Lys His Gln His Lys Lys Leu Val 595 600 605 Asn Arg Asp Leu Lys Thr Gln Ser Gly Ser Glu Met Lys Lys Phe Leu 610 615 620 Ser Thr Leu Thr Ile Asp Gly Val Thr Arg Ser Asp Gln Gly Leu Tyr 625 630 635 640 Thr Cys Ala Ala Ser Ser Gly Leu Met Thr Lys Lys Asn Ser Thr Phe 645 650 655 Val Arg Val His 660 <210> 343 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 343 Glu Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30 Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Ala Ser Pro Lys Leu Trp 35 40 45 Ile Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala Phe Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Val Glu 65 70 75 80 Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Gly Tyr Pro 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 344 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 344 Met Gly Trp Thr Leu Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly 1 5 10 15 Val His Ser <210> 345 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 345 Met Val Ser Ser Ala Gln Phe Leu Gly Leu Leu Leu Leu Cys Phe Gln 1 5 10 15 Gly Thr Arg Cys 20 <210> 346 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 346 Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val His Ser <210> 347 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 347 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Trp Leu Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Phe 35 40 45 Gly Arg Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Val Arg Gly Asp Gly Tyr Trp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 348 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 348 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Ser Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Trp Leu Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Phe 35 40 45 Gly Arg Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Leu Ile Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Thr Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg Gly Asp Gly Tyr Trp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 349 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 349 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Trp Leu Asn Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ser Gly Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Leu Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Val Arg Gly Asp Gly Tyr Trp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 350 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 350 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Phe Ser Gln Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn 85 90 95 Leu Glu Leu Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 351 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 351 Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Phe Ser Gln Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn 85 90 95 Leu Glu Leu Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 352 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 352 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Phe Ser Lys Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro 35 40 45 Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 65 70 75 80 Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn 85 90 95 Leu Glu Leu Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 353 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 353 Arg Phe Ser Gln Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr 1 5 10 15 <210> 354 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 354 Thr Met Ser Asn Leu Ala Ser 1 5 <210> 355 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 355 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Asn Asn Gln Lys Asn Tyr Leu 1 5 10 15 Ala <210> 356 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 356 Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser 1 5 <210> 357 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 357 Gln Gln His Tyr Asn Thr Pro Leu Thr 1 5 <210> 358 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 358 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Asn Asn Gln Lys Asn Ser Leu 1 5 10 15 Ala <210> 359 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 359 Gln Gln His Ser Asn Thr Pro Leu Thr 1 5 <210> 360 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 360 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Thr 1 5 10 15 Thr Val Lys Ile Ala Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp His 20 25 30 Gly Ile His Trp Val Gln Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asn Ile Ser Pro Gly Asn Gly Asp Ile Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Asn Thr Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Thr Tyr Phe Val Asp Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 361 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 361 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp His 20 25 30 Gly Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Asn Ile Ser Pro Gly Asn Gly Asp Ile Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Thr Tyr Phe Val Asp Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 362 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 362 Gln Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Ala Glu Ala Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp His 20 25 30 Gly Ile His Trp Val His Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Asn Ile Ser Pro Gly Asn Gly Asp Ile Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Val Asp Lys Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Val Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Thr Tyr Phe Val Asp Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 363 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 363 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Asn Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Val Ala Tyr Tyr Phe Cys Gln Gln 85 90 95 His Tyr Asn Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 364 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 364 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Asn Asn Gln Lys Asn Ser Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Tyr Tyr Phe Cys Gln Gln 85 90 95 His Ser Asn Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 365 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 365 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Asn Asn Gln Lys Asn Cys Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Ile 50 55 60 Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Tyr Tyr Phe Cys Gln Gln 85 90 95 His Cys Asn Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 366 <400> 366 000 <210> 367 <400> 367 000 <210> 368 <400> 368 000 <210> 369 <400> 369 000 <210> 370 <400> 370 000 <210> 371 <400> 371 000 <210> 372 <400> 372 000 <210> 373 <400> 373 000 <210> 374 <400> 374 000 <210> 375 <400> 375 000 <210> 376 <400> 376 000 <210> 377 <400> 377 000 <210> 378 <400> 378 000 <210> 379 <400> 379 000 <210> 380 <400> 380 000 <210> 381 <400> 381 000 <210> 382 <400> 382 000 <210> 383 <400> 383 000 <210> 384 <400> 384 000 <210> 385 <400> 385 000 <210> 386 <400> 386 000 <210> 387 <400> 387 000 <210> 388 <400> 388 000 <210> 389 <400> 389 000 <210> 390 <400> 390 000 <210> 391 <400> 391 000 <210> 392 <400> 392 000 <210> 393 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 393 Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln 1 5 10 15 Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Asp Phe Ser Leu Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Val Asn Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Val Ala Phe Ile 50 55 60 Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe 65 70 75 80 Lys Met Asn Asn Leu Gln Ala Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Asn Trp Arg Tyr Asp Gly Tyr Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 394 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 394 Asp Val Asn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Leu Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Tyr Met Ser Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Asn Asn Gly Asp Ser Thr Tyr Tyr Leu Asp Thr Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ser Ala Glu Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Ile Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Val Gly Thr Gly Phe Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ala 115 <210> 395 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 395 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Val Asn Pro Asn Asn Gly Gly Lys Thr Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Leu Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Arg Leu Arg Pro Val Asp Tyr Gly Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 396 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 396 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Asp Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Thr 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp His 20 25 30 Gly Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Arg Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Asn Ile Ser Pro Gly Asn Gly Asp Ile Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Gln Val Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Thr Tyr Phe Val Asp Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110 Ala <210> 397 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 397 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Asn Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ala Tyr 20 25 30 Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Phe Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Glu Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Thr Asp Gly Asn Pro Tyr Thr Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 398 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 398 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Val Ile His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Tyr Ser Asp Tyr Thr Gln Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Ser Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ala Asp Gly Asn Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 399 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 399 Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Asp Pro Ser Ala Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Val Tyr Tyr Gly Asn Lys Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 400 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 400 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Tyr Pro Gly Ser Asp Asp Ala Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Arg Glu Thr Thr Ala Thr Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ala 115 <210> 401 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 401 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Asp Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asp Ala Asn Tyr Asn Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Arg Thr Gly Ala Ala Tyr Asp Phe Asp Pro Phe Pro Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 120 <210> 402 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 402 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asp Tyr Asp Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Gly Ala Ala Tyr Glu Phe Asp Pro Phe Pro Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 120 <210> 403 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 403 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Arg Ser 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Ala Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Ala Thr Leu Pro Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 404 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 404 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Trp Leu Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Phe 35 40 45 Gly Arg Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Val Arg Gly Asp Gly Tyr Trp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Ser Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 405 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 405 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Met His Trp Val Arg Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Gly Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ala 115 <210> 406 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 406 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Thr Val Leu Ala Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Ser Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Lys Leu Thr Ala Val Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Asn Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Gly Gly Phe Asp Tyr Ser Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 120 <210> 407 <211> 109 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 407 Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser 20 25 30 Asn Ser Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly 35 40 45 Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala 65 70 75 80 Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Asn Asn 85 90 95 His Phe Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 408 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 408 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Asp Ser Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Arg Ser His Glu Ser Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Phe Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asp Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Ile Glu Thr 65 70 75 80 Glu Asp Phe Gly Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 <210> 409 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 409 Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Ser Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asn Gly Val Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr Cys Ala Gln Met 85 90 95 Leu Glu Arg Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 410 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 410 Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Ser Ser Thr Lys Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Ser Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Met 85 90 95 Leu Glu Arg Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 411 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 411 Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Phe Ser Lys Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Ser Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn 85 90 95 Leu Glu Leu Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 412 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 412 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Met Ser Ile Gly 1 5 10 15 Gln Arg Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Asn Asn Gln Lys Asn Cys Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Ser Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Phe Ala Cys Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ile Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Tyr Tyr Phe Cys Gln Gln 85 90 95 His Cys Asn Thr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu 100 105 110 Lys <210> 413 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 413 Ser Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Lys Phe Leu Leu Val Ser Ala Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Thr Val Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Tyr Ser Ser Tyr Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 414 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 414 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Thr Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Phe Ile Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Asn Val Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Arg Asn Pro Ile 85 90 95 Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 415 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 415 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 His Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Arg Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 416 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 416 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Thr Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala 20 25 30 Val Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Thr Ser Val Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 417 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 417 Asp Ile Lys Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Tyr Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Lys Ser Tyr 20 25 30 Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Trp Lys Ser Pro Lys Thr Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Thr Asn Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Gln Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gly Ser 65 70 75 80 Asp Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Val Glu Ser Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 418 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 418 Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Leu Ile 20 25 30 Tyr Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Thr Ser Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Met Glu Ala Glu 65 70 75 80 Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Gly Tyr Pro Pro Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 419 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 419 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 420 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 420 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Thr Ser 20 25 30 Ser Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp 85 90 95 Glu Ile Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Claims (53)

  1. 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 모이어티를 포함하는 항-CD93 구축물로서, 여기서 항체 모이어티는 CD93의 결합 에피토프에 대해 제2 중쇄 가변 영역 (VH-2) 및 제2 경쇄 가변 영역 (VL-2)을 포함하는 항체 또는 항체 단편과 경쟁하고, 여기서:
    a) VH-2는 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    b) VH-2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    c) VH-2는 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    d) VH-2는 서열식별번호: 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    e) VH-2는 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    f) VH-2는 서열식별번호: 81의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 82의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 83의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 84의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    g) VH-2는 서열식별번호: 97의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 98의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 99의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 100의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    h) VH-2는 서열식별번호: 113의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 114의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 116의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    i) VH-2는 서열식별번호: 129의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 130의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 131의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 133의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    j) VH-2는 서열식별번호: 145의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 146의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 147의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 148, 355, 또는 358의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 149 또는 356의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 150, 357 또는 359의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    k) VH-2는 서열식별번호: 161의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 162의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 163의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 164의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 165의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 166의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    l) VH-2는 서열식별번호: 177의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 178의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 179의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 180 또는 353의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 181 또는 354의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    m) VH-2는 서열식별번호: 193의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 194의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 195의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 196의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 197의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 198의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    n) VH-2는 서열식별번호: 209의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 210의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 211의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 212의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 213의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 214의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나;
    o) VH-2는 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하거나; 또는
    p) VH-2는 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL-2는 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는 것인
    항-CD93 구축물.
  2. 제1항에 있어서,
    a) VH가 i) 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    b) VH가 i) 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    c) VH가 i) 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    d) VH가 i) 서열식별번호: 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    e) VH가 i) 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    f) VH가 i) 서열식별번호: 81의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 82의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 83의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 84의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    g) VH가 i) 서열식별번호: 97의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 98의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 99의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 100의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    h) VH가 i) 서열식별번호: 113의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 114의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 116의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    i) VH가 i) 서열식별번호: 129의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 130의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 131의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 133의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    j) VH가 i) 서열식별번호: 145의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 146의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 147의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 148, 355, 또는 358의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 149 또는 356의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 150, 357 또는 359의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    k) VH가 i) 서열식별번호: 161의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 162의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 163의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 164의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 165의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 166의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    l) VH가 i) 서열식별번호: 177의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 178의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 179의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 180 또는 353의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 181 또는 354의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    m) VH가 i) 서열식별번호: 193의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 194의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 195의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 196의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 197의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 198의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나, 또는
    n) VH가 i) 서열식별번호: 209의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 210의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 211의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 212의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 213의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 214의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나,
    o) VH가 i) 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하거나, 또는
    p) VH가 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3을 포함하고, VL이 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3을 포함하는 것인
    항-CD93 구축물.
  3. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  4. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 17 또는 304의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 18 또는 305의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 20, 301, 302, 303, 또는 306의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  5. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 33의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 34의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 35의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고; VL이 i) 서열식별번호: 36의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 38의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  6. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 49의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 52의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 54의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  7. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 65의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 66의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 67의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 68의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 70의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  8. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 81의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 82의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 83의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 84의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 86의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  9. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 97의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 98의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 99의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 100의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 102의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  10. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 113의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 114의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 116의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 118의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  11. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 129의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 130의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 131의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 133의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 134의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  12. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 145의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 146의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 147의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 148, 355, 또는 358의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 149 또는 356의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 150, 357 또는 359의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  13. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 161의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 162의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 163의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 164의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 165의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 166의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  14. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 177의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 178의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 179의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 180 또는 353의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 181 또는 354의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 182의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  15. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 193의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 194의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 195의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 196의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 197의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 198의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  16. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 209의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 210의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 211의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 212의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 213의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 214의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  17. 제2항에 있어서, VH가 i) 서열식별번호: 289의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR1, ii) 서열식별번호: 290의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 291의 아미노산 서열을 포함하는 HC-CDR3, 또는 HC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하고, VL이 i) 서열식별번호: 292의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR1, ii) 서열식별번호: 293의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR2, 및 iii) 서열식별번호: 294의 아미노산 서열을 포함하는 LC-CDR3, 또는 LC-CDR에서 최대 5, 4, 3, 2, 또는 1개의 아미노산 치환을 포함하는 그의 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  18. 하기를 포함하는, CD93에 특이적으로 결합하는 항체 모이어티를 포함하는 항-CD93 구축물:
    a) 서열식별번호: 13에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 14에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    b) 서열식별번호: 29 및 307-312 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 30, 및 313-318 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    c) 서열식별번호: 45에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 46에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    d) 서열식별번호: 61에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 62에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    e) 서열식별번호: 77에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 78에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    f) 서열식별번호: 93에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 94에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    g) 서열식별번호: 109에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 110에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    h) 서열식별번호: 125에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 126에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    i) 서열식별번호: 141에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 142에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    j) 서열식별번호: 157 및 360-362 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 158, 및 363-365 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    k) 서열식별번호: 173에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 174에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    l) 서열식별번호: 189 및 347-349 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 190, 및 350-352 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    m) 서열식별번호: 205에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 206에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    n) 서열식별번호: 221에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 222에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    o) 서열식별번호: 287 및 319-321 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 288, 및 322-324 중 어느 것에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3;
    p) 서열식별번호: 307-312 중 어느 하나에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 313-318 중 어느 하나에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3; 또는
    q) 서열식별번호: 319-321 중 어느 하나에 제시된 서열을 갖는 VH 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 HC-CDR1, HC-CDR2, 및 HC-CDR3, 및 서열식별번호: 322-324 중 어느 하나에 제시된 서열을 갖는 VL 쇄 영역 내의 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 각각 포함하는 LC-CDR1, LC-CDR2, 및 LC-CDR3.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, VH가 서열식별번호: 13, 29, 45, 61, 77, 93, 109, 125, 141, 157, 173, 189, 205, 221, 287, 307-312 및 319-321 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고/거나; VL이 서열식별번호: 14, 30, 46, 62, 78, 94, 110, 126, 142, 158, 174, 190, 206, 222, 288, 313-318 및 322-324 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하는 것인 항-CD93 구축물.
  20. 제19항에 있어서,
    a) VH가 서열식별번호: 13의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 14의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    b) VH가 서열식별번호: 29 및 307-312 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 30 및 313-318 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    c) VH가 서열식별번호: 45의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 46의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    d) VH가 서열식별번호: 61의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 62의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    e) VH가 서열식별번호: 77의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 78의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    f) VH가 서열식별번호: 93의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 94의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    g) VH가 서열식별번호: 109의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 110의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    h) VH가 서열식별번호: 125의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 126의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    i) VH가 서열식별번호: 141의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 142의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    j) VH가 서열식별번호: 157의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 158의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    k) VH가 서열식별번호: 173의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 174의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    l) VH가 서열식별번호: 189 및 347-349 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 190 및 350-352 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    m) VH가 서열식별번호: 205의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 206의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    n) VH가 서열식별번호: 221의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 222의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    o) VH가 서열식별번호: 287 및 319-321 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 288 및 322-324 중 어느 것의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나,
    p) VH가 서열식별번호: 307-312 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 313-318 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하거나, 또는
    q) VH가 서열식별번호: 319-321 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하고; VL이 서열식별번호: 322-324 중 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 적어도 약 80% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 변이체를 포함하는 것인
    항-CD93 구축물.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 모이어티가 전장 항체, 이중특이적 항체, 단일-쇄 Fv (scFv) 단편, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2, Fv 단편, 디술피드 안정화된 Fv 단편 (dsFv), (dsFv)2, Fv-Fc 융합체, scFv-Fc 융합체, scFv-Fv 융합체, 디아바디, 트리바디, 및 테트라바디로 이루어진 군으로부터 선택된 항체 또는 그의 항원-결합 단편인 항-CD93 구축물.
  22. 제21항에 있어서, 항체 모이어티가 전장 항체인 항-CD93 구축물.
  23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 모이어티가 IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, 및 그의 조합 및 하이브리드로부터의 Fc 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된 Fc 단편을 갖는 것인 항-CD93 구축물.
  24. 제23항에 있어서, Fc 단편이 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, 및 그의 조합 및 하이브리드로부터의 Fc 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 항-CD93 구축물.
  25. 제23항 또는 제24항에 있어서, Fc 단편이 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 감소된 이펙터 기능을 갖는 것인 항-CD93 구축물.
  26. 제23항 또는 제24항에 있어서, Fc 단편이 상응하는 야생형 Fc 단편과 비교하여 증진된 이펙터 기능을 갖는 것인 항-CD93 구축물.
  27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 모이어티가 IGFBP7에 대한 CD93의 결합을 차단하는 것인 항-CD93 구축물.
  28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 모이어티가 MMRN2에 대한 CD93의 결합을 차단하는 것인 항-CD93 구축물.
  29. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, CD93이 인간 CD93인 항-CD93 구축물.
  30. 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항의 항-CD93 구축물 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
  31. 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항의 항-CD93 구축물 또는 그의 부분을 코딩하는 단리된 핵산.
  32. 제31항의 단리된 핵산을 포함하는 벡터.
  33. 제31항의 단리된 핵산 또는 제30항의 벡터를 포함하는 단리된 숙주 세포.
  34. 치료제 또는 표지에 연결된 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항의 항-CD93 구축물을 포함하는 면역접합체.
  35. a) 제33항의 단리된 숙주 세포를 항-CD93 구축물을 발현하는데 효과적인 조건 하에 배양하는 단계; 및
    b) 발현된 항-CD93 구축물을 숙주 세포로부터 수득하는 단계
    를 포함하는, 항-CD93 구축물을 생산하는 방법.
  36. 개체에게 유효량의 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항의 항-CD93 구축물 또는 제30항의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 질환 또는 상태를 치료하는 방법.
  37. 제36항에 있어서, 질환 또는 상태가 비정상적 혈관 구조와 연관된 것인 방법.
  38. 제36항 또는 제37항에 있어서, 질환 또는 상태가 암인 방법.
  39. 제38항에 있어서, 암이 고형 종양인 방법.
  40. 제38항 또는 제39항에 있어서, 암이 CD93+ 내피 세포를 포함하는 것인 방법.
  41. 제38항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 IGFBP7+ 혈관을 포함하는 것인 방법.
  42. 제38항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 MMRN2+ 혈관을 포함하는 것인 방법.
  43. 제38항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 종양 저산소증을 특징으로 하는 것인 방법.
  44. 제38항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 국부 진행성 또는 전이성 암인 방법.
  45. 제38항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 림프종, 결장암, 뇌암, 유방암, 난소암, 자궁내막암, 식도암, 전립선암, 자궁경부암, 신암, 방광암, 위암, 비소세포 폐암, 흑색종, 및 췌장암으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 방법.
  46. 제36항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 항-CD93 구축물이 개체 내로 비경구로 투여되는 것인 방법.
  47. 제36항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 요법을 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
  48. 제47항에 있어서, 제2 요법이 수술, 방사선, 유전자 요법, 면역요법, 골수 이식, 줄기 세포 이식, 호르몬 요법, 표적화 요법, 동결요법, 초음파 요법, 광역학 요법, 및 화학요법으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 방법.
  49. 제48항에 있어서, 제2 요법이 면역요법인 방법.
  50. 제49항에 있어서, 면역요법이 면역조정제를 투여하는 것을 포함하는 것인 방법.
  51. 제50항에 있어서, 면역조정제가 면역 체크포인트 억제제인 방법.
  52. 제51항에 있어서, 면역 체크포인트 억제제가 항-PD-L1 항체 또는 항-PD-1 항체를 포함하는 것인 방법.
  53. 제36항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 인간인 방법.
KR1020237007145A 2020-07-29 2021-07-29 항-cd93 구축물 및 그의 용도 KR20230133832A (ko)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063058359P 2020-07-29 2020-07-29
US63/058,359 2020-07-29
US202063084474P 2020-09-28 2020-09-28
US63/084,474 2020-09-28
USPCT/US2021/035542 2021-06-02
PCT/US2021/035542 WO2021247769A1 (en) 2020-06-02 2021-06-02 Anti-cd93 constructs and uses thereof
PCT/US2021/043784 WO2022026763A1 (en) 2020-07-29 2021-07-29 Anti-cd93 constructs and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20230133832A true KR20230133832A (ko) 2023-09-19

Family

ID=80036794

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020237007145A KR20230133832A (ko) 2020-07-29 2021-07-29 항-cd93 구축물 및 그의 용도

Country Status (12)

Country Link
US (1) US20230322935A1 (ko)
EP (1) EP4188550A1 (ko)
JP (1) JP2023536461A (ko)
KR (1) KR20230133832A (ko)
CN (1) CN116783215A (ko)
AU (1) AU2021315665A1 (ko)
CA (1) CA3190328A1 (ko)
CO (1) CO2023001767A2 (ko)
IL (1) IL300121A (ko)
MX (1) MX2023001083A (ko)
TW (1) TW202221029A (ko)
WO (1) WO2022026763A1 (ko)

Family Cites Families (74)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
GB8601597D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Wilson R H Nucleotide sequences
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
EP0307434B2 (en) 1987-03-18 1998-07-29 Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. Altered antibodies
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
ES2113940T3 (es) 1990-12-03 1998-05-16 Genentech Inc Metodo de enriquecimiento para variantes de proteinas con propiedades de union alteradas.
ES2206447T3 (es) 1991-06-14 2004-05-16 Genentech, Inc. Anticuerpo humanizado para heregulina.
JPH08511420A (ja) 1993-06-16 1996-12-03 セルテック・セラピューテイクス・リミテッド 抗 体
EP0739981A1 (en) 1995-04-25 1996-10-30 Vrije Universiteit Brussel Variable fragments of immunoglobulins - use for therapeutic or veterinary purposes
JPH11510170A (ja) 1995-07-27 1999-09-07 ジェネンテック インコーポレーテッド タンパク質の処方
GB9603256D0 (en) 1996-02-16 1996-04-17 Wellcome Found Antibodies
DE69830315T2 (de) 1997-06-24 2006-02-02 Genentech Inc., San Francisco Galactosylierte glykoproteine enthaltende zusammensetzungen und verfahren zur deren herstellung
ATE419009T1 (de) 1997-10-31 2009-01-15 Genentech Inc Methoden und zusammensetzungen bestehend aus glykoprotein-glykoformen
US6610833B1 (en) 1997-11-24 2003-08-26 The Institute For Human Genetics And Biochemistry Monoclonal human natural antibodies
ATE531812T1 (de) 1997-12-05 2011-11-15 Scripps Research Inst Humanisierung von nager-antikörpern
ATE375365T1 (de) 1998-04-02 2007-10-15 Genentech Inc Antikörper varianten und fragmente davon
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
AU3657899A (en) 1998-04-20 1999-11-08 James E. Bailey Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
PT1071752E (pt) 1998-04-21 2003-11-28 Micromet Ag Polipeptidos especificos para cd19xcd3 e suas utilizacoes
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
HUP0104865A3 (en) 1999-01-15 2004-07-28 Genentech Inc Polypeptide variants with altered effector function
EP2275540B1 (en) 1999-04-09 2016-03-23 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
EP1229125A4 (en) 1999-10-19 2005-06-01 Kyowa Hakko Kogyo Kk PROCESS FOR PRODUCING A POLYPEPTIDE
AU784983B2 (en) 1999-12-15 2006-08-17 Genentech Inc. Shotgun scanning, a combinatorial method for mapping functional protein epitopes
US7064191B2 (en) 2000-10-06 2006-06-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for purifying antibody
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
CA2424602C (en) 2000-10-06 2012-09-18 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Antibody composition-producing cell
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
JP3523245B1 (ja) 2000-11-30 2004-04-26 メダレックス，インコーポレーテッド ヒト抗体作製用トランスジェニック染色体導入齧歯動物
NZ592087A (en) 2001-08-03 2012-11-30 Roche Glycart Ag Antibody glycosylation variants having increased antibody-dependent cellular cytotoxicity
WO2003025020A1 (fr) 2001-09-13 2003-03-27 Institute For Antibodies Co., Ltd. Procede pour creer une banque d'anticorps de chameaux
ES2326964T3 (es) 2001-10-25 2009-10-22 Genentech, Inc. Composiciones de glicoproteina.
US7771951B2 (en) 2001-12-03 2010-08-10 Amgen Fremont Inc. Antibody categorization based on binding characteristics
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
AU2003236019A1 (en) 2002-04-09 2003-10-20 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Drug containing antibody composition appropriate for patient suffering from Fc Gamma RIIIa polymorphism
US20040110704A1 (en) 2002-04-09 2004-06-10 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells of which genome is modified
AU2003236018A1 (en) 2002-04-09 2003-10-20 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. METHOD OF ENHANCING ACTIVITY OF ANTIBODY COMPOSITION OF BINDING TO FcGamma RECEPTOR IIIa
ATE503829T1 (de) 2002-04-09 2011-04-15 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Zelle mit erniedrigter oder deletierter aktivität eines am gdp-fucosetransport beteiligten proteins
CA2481837A1 (en) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Production process for antibody composition
US7691568B2 (en) 2002-04-09 2010-04-06 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Antibody composition-containing medicament
EP1513879B1 (en) 2002-06-03 2018-08-22 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
US7361740B2 (en) 2002-10-15 2008-04-22 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
GB0228210D0 (en) 2002-12-03 2003-01-08 Babraham Inst Single chain antibodies
DE60332957D1 (de) 2002-12-16 2010-07-22 Genentech Inc Immunoglobulinvarianten und deren verwendungen
AU2004205631A1 (en) 2003-01-16 2004-08-05 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
US20080241884A1 (en) 2003-10-08 2008-10-02 Kenya Shitara Fused Protein Composition
AU2004280065A1 (en) 2003-10-09 2005-04-21 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Process for producing antibody composition by using RNA inhibiting the function of alpha1,6-fucosyltransferase
SI1678314T1 (sl) 2003-10-22 2013-01-31 Keck Graduate Institute Metode za sintetiziranje heteromultimernih polipeptidov pri kvasovkah s strategijo razmnoĺ˝evanja haploidnih celic
EA036531B1 (ru) 2003-11-05 2020-11-19 Роше Гликарт Аг Гуманизированное антитело типа ii к cd20 (варианты), фармацевтическая композиция, содержащая эти варианты антитела, и их применение
JPWO2005053742A1 (ja) 2003-12-04 2007-06-28 協和醗酵工業株式会社 抗体組成物を含有する医薬
MXPA06011199A (es) 2004-03-31 2007-04-16 Genentech Inc Anticuerpos anti-tgf-beta humanizados.
US7785903B2 (en) 2004-04-09 2010-08-31 Genentech, Inc. Variable domain library and uses
CA2885854C (en) 2004-04-13 2017-02-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-p-selectin antibodies
TWI380996B (zh) 2004-09-17 2013-01-01 Hoffmann La Roche 抗ｏｘ４０ｌ抗體
EP1791565B1 (en) 2004-09-23 2016-04-20 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
ES2577292T3 (es) 2005-11-07 2016-07-14 Genentech, Inc. Polipéptidos de unión con secuencias hipervariables de VH/VL diversificadas y consenso
US20070237764A1 (en) 2005-12-02 2007-10-11 Genentech, Inc. Binding polypeptides with restricted diversity sequences
JP5184374B2 (ja) 2006-01-25 2013-04-17 エラスムス・ユニヴァーシティ・メディカル・センター・ロッテルダム 対立遺伝子排除
CA2651567A1 (en) 2006-05-09 2007-11-22 Genentech, Inc. Binding polypeptides with optimized scaffolds
WO2008100328A2 (en) * 2006-07-13 2008-08-21 Burnham Institute For Medical Research METHODS AND COMPOSITIONS FOR TARGETING gC1qR/p32
US20080226635A1 (en) 2006-12-22 2008-09-18 Hans Koll Antibodies against insulin-like growth factor I receptor and uses thereof
CN100592373C (zh) 2007-05-25 2010-02-24 群康科技(深圳)有限公司 液晶显示面板驱动装置及其驱动方法
US20100122358A1 (en) 2008-06-06 2010-05-13 Crescendo Biologics Limited H-Chain-only antibodies
PT2954779T (pt) 2009-12-10 2019-05-29 Regeneron Pharma Ratinhos que produzem anticorpos de cadeia pesada
SG11201607203XA (en) 2014-03-21 2016-09-29 Regeneron Pharma Non-human animals that make single domain binding proteins
BR112019013238A2 (pt) 2017-01-20 2020-02-11 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Anticorpos anti-pd-1 e usos dos mesmos
WO2019227490A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and methods for imaging
CN117442717A (zh) 2018-06-01 2024-01-26 大有华夏生物医药集团有限公司 治疗疾病或病况的组合物及其用途
US20190389960A1 (en) * 2018-06-25 2019-12-26 The Research Foundation For The State University Of New York Compositions and methods for c1q targeted therapy
CN112638415A (zh) 2018-07-26 2021-04-09 大有华夏生物医药集团有限公司 用于成像的组合物和方法
MX2022003689A (es) 2019-09-26 2022-06-14 Univ Yale Metodos y composiciones para el tratamiento contra una enfermedad o trastorno.

Also Published As

Publication number Publication date
WO2022026763A1 (en) 2022-02-03
TW202221029A (zh) 2022-06-01
MX2023001083A (es) 2023-04-10
JP2023536461A (ja) 2023-08-25
US20230322935A1 (en) 2023-10-12
EP4188550A1 (en) 2023-06-07
CO2023001767A2 (es) 2023-06-09
CN116783215A (zh) 2023-09-19
AU2021315665A1 (en) 2023-03-16
IL300121A (en) 2023-03-01
CA3190328A1 (en) 2022-02-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20230112085A1 (en) Anti-b7-h4 constructs and uses thereof
US20230067770A1 (en) Anti-cd137 constructs, multispecific antibody and uses thereof
US20220403040A1 (en) Anti-cd137 constructs, multispecific antibody and uses thereof
US20240076395A1 (en) Anti-cd137 constructs and uses thereof
US20230093512A1 (en) Fusion proteins and uses thereof
TW202302646A (zh) 抗vista構築體及其用途
US20230235075A1 (en) Anti-cd93 constructs and uses thereof
US20230365705A1 (en) Anti-cd93 constructs and uses thereof
US20230322935A1 (en) Anti-cd93 constructs and uses thereof
US20230125301A1 (en) Multispecific anti-claudin-18.2 constructs and uses thereof
TW202300648A (zh) 抗-igfbp7構築體及其用途