KR20220119191A

KR20220119191A - 급성 림프아구성 백혈병을 치료하기 위한 항-cd38 항체

Info

Publication number: KR20220119191A
Application number: KR1020227028429A
Authority: KR
Inventors: 파울 도시
Original assignee: 얀센 바이오테크 인코포레이티드
Priority date: 2014-02-28
Filing date: 2015-02-25
Publication date: 2022-08-26
Also published as: EP4272738A3; US9732154B2; US10556961B2; KR102588587B1; EP3110440A4; EA201691748A1; AU2015223209A1; US20150246975A1; CA2940865A1; EP3110440B1; ZA201708448B; EA037597B1; HRP20231021T1; AU2024202215A1; GT201600171A; EP3110440B9; JP6543262B2; PE20161389A1; EP3110440A2; SG11201607029QA

Abstract

본 발명은 항-CD38 항체를 사용하는 병용 요법에 관한 것이다. 구체적으로는, 본 발명은 항-CD38 항체를 사용하여 급성 림프아구성 백혈병(ALL)을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하며, 본 방법에서 항-CD38 항체는 항체-의존성 세포-매개성 세포독성(ADCC), 항체-의존성 세포 식작용(ADCP), 보체 의존성 세포독성(CDC), 세포자멸, 또는 CD38 효소 활성의 시험관내 조절에 의해 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도한다.

Description

급성 림프아구성 백혈병을 치료하기 위한 항-CD38 항체{ANTI-CD38 ANTIBODIES FOR TREATMENT OF ACUTE LYMPHOBLASTIC LEUKEMIA}

본 발명은 항-CD38 항체에 의한 급성 림프아구성 백혈병의 치료 방법에 관한 것이다.

CD38은, 수용체-매개 접착 및 신호전달에서 기능을 가질 뿐만 아니라 엑토-효소 활성(ecto-enzymatic activity)을 통해 칼슘 동원을 매개하여, 고리형 ADP-리보스(cADPR) 및 ADPR의 형성을 촉매하는 다기능성 단백질이다. CD38은 사이토카인 분비와 림프구의 활성화 및 증식을 매개한다(문헌[Funaro et al., J Immunol 145:2390-6, 1990]; 문헌[Terhorst et al., Cell 771-80, 1981]; 문헌[Guse et al., Nature 398:70-3, 1999]). CD38은 그의 NAD 글리코하이드롤라제 활성을 통해 또한 세포외 NAD⁺ 수준을 조절하는데, 이러한 세포외 NAD⁺ 수준은 조절성 T-세포 구획을 조절하는 데 관여해 왔다(문헌[Adriouch et al., 14:1284-92, 2012]; 문헌[Chiarugi et al., Nature Reviews 12:741-52, 2012]). Ca²⁺를 통한 신호전달에 더하여, CD38 신호전달은 T- 및 B-세포 상의 항원-수용체 복합체 또는 다른 유형의 수용체 복합체, 예를 들어 MHC 분자와의 크로스-토크(cross-talk)를 통해 일어나서, CD38을 여러 세포 반응에뿐만 아니라 IgG1의 전환(switching) 및 분비에도 관여시킨다.

CD38은 수질 흉선세포, 활성화 T- 및 B-세포, 정지 NK 세포 및 단핵구, 림프절 배중심 림프아구, 형질 B 세포, 여포내 세포 및 수지상 세포와 같은 조혈성 세포 상에서 발현되는 II형 막횡단 당단백질이다. 정상 골수 세포의 일부분, 특히 전구 세포뿐만 아니라 제대 세포는 CD38-양성이다. 림프구양 전구 세포에 더하여, CD38은 적혈구 상에서 그리고 혈소판 상에서 발현되고, 발현은 또한 일부 고형 조직, 예컨대 장, 뇌, 전립선, 골, 및 췌장에서 발견된다. 성숙 정지 T- 및 B-세포는 표면 CD38을 제한적으로 발현하거나 전혀 발현하지 않는다.

CD38은 또한 다양한 악성 혈액학적 질병에서 발현되는데, 이러한 질병에는 다발성 골수종, 백혈병 및 림프종, 예컨대 B-세포 만성 림프구성 백혈병, T- 및 B-세포 급성 림프구성 백혈병, 발덴스트롬(Waldenstrom) 거대글로불린혈증, 원발성 전신성 아밀로이드증, 외투-세포 림프종, 전림프구성/골수구성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 여포성 림프종, 버킷(Burkitt) 림프종, 대과립 림프구성(LGL) 백혈병, NK-세포 백혈병 및 형질-세포 백혈병이 포함된다. 전립선에서의 선상피(glandular epithelium), 췌장에서의 췌도 세포, 이하선을 포함한 선에서의 도관 상피, 기관지 상피 세포, 고환 및 난소에서의 세포 및 결직장 선암종에서의 종양 상피를 포함한 상이한 기원의 상피/내피 세포 상에서의 CD38의 발현이 기재되어 있다. CD38 발현이 관여할 수 있는 다른 질병은, 예를 들어 폐의 기관지-상피 암종, 유방암(유방의 도관 및 소엽 안을 덮고 있는 상피의 악성 증식으로부터 발달됨), β-세포로부터 발달된 췌장 종양(인슐린종), 장에서의 상피로부터 발달된 종양(예를 들어, 선암종 및 편평 세포 암종), 전립선에서의 암종, 및 고환에서의 고환종 및 난소암을 포함한다. 중추 신경계에서는, 신경아세포종이 CD38을 발현한다.

급성 림프아구성 백혈병(ALL)은 손상된 초기 림프구 발생을 특징으로 하고 B-세포 또는 T-세포 ALL로 분류된다. 버킷(Buriktt) 림프종("성숙 B 세포 림프종")이 또한 ALL로 분류된다. ALL의 발생수는 연간 약 6000건의 새로운 사례가 발생되고 있거나, 또는 50,000명 중 대략 1명이다. 유전적 및 환경적 인자 둘 모두가 ALL에 기여하며, 이와 함께 몇몇 염색체 재배열 및 초현미경적 유전자 변경이 확인되었다(문헌[Inaba et al., Lancet 381:1943-55, 2013]). ALL을 갖는 어린이에서 요법에 대한 전체 반응률은 약 80%이고, ALL을 갖는 성인에서는 약 45% 내지 60%이다. 불행하게도, 재발성 ALL에서의 예후는 좋지 못하다.

따라서, ALL에 대한 효과적인 치료에 대한 필요성이 남아 있다.

본 발명의 일 실시 형태는, CD38에 결합하기 위하여, 서열 번호 4의 중쇄 가변 영역(VH) 및 서열 번호 5의 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체와 경쟁하는 항-CD38 항체를 급성 림프아구성 백혈병(ALL)의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하며, 항-CD38 항체는 항체-의존성 세포-매개성 세포독성(ADCC), 항체-의존성 세포 식작용(ADCP), 보체 의존성 세포독성(CDC), 세포자멸, 또는 CD38 효소 활성의 시험관내(in vitro) 조절에 의해 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도하는, 급성 림프아구성 백혈병(ALL)을 갖는 대상체를 치료하는 방법이다.

도 1은 ALL 환자 종양 질병 모델(ALL 7015 모델)에서의 다라투무맙의 효능을 나타낸다. 평균 ± SEM으로 그래프를 작성하였으며; 평균 ± SEM은 이 연구에서 각각의 시점에 대해(초기에는 각각의 코호트당 10 마리의 마우스가 있었음) 80% 이상의 동물(각각의 코호트당 적어도 8 마리의 동물)이 있을 경우에만 도표로 나타내었다. Y축은 인간 CD45⁺ 세포수를 살아 있는 세포수로 나눈 값의 %로서 측정된 종양 부하의 백분율을 나타낸다.
도 2는 ALL 환자 종양 질병 모델(ALL 7043 모델)에서의 다라투무맙의 효능을 나타낸다. 평균 ± SEM으로 그래프를 작성하였으며; 평균 ± SEM은 이 연구에서 각각의 시점에 대해(초기에는 각각의 코호트당 10 마리의 마우스가 있었음) 80% 이상의 동물(각각의 코호트당 적어도 8 마리의 동물)이 있을 경우에만 도표로 나타내었다.
도 3은 ALL 세포주 종양 이종이식편 모델(NALM-6 모델)에서의 다라투무맙 및 빈크리스틴과 병용한 다라투무맙의 효능을 나타낸다. 동물들을 4개의 처리군으로 나누고, 10 mg/㎏의 다라투무맙, 0.5 mg/㎏의 빈크리스틴, 또는 빈크리스틴과 병용한 다라투무맙을 투여하였다. 중위 생존 시간을 종양 접종 후 일수에 대해 도표로 나타내었다.

"CD38"은 인간 CD38 단백질(동의어: ADP-리보실 사이클라제 1, cADPr 하이드롤라제 1, 고리형 ADP-리보스 하이드롤라제 1)을 지칭한다. 인간 CD38은 서열 번호 1에 나타낸 아미노산 서열을 갖는다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "항체"는 넓은 의미로 의미되며, 다중클론 항체, 뮤린, 인간, 인간-적응화(human-adapted), 인간화 및 키메라 단일클론 항체를 포함하는 단일클론 항체, 항체 단편, 이중특이성 또는 다중특이성 항체, 이량체성, 사량체성, 또는 다량체성 항체, 및 단일쇄 항체를 포함하는 면역글로불린 분자를 포함한다.

면역글로불린은 중쇄 불변 도메인 아미노산 서열에 따라, 5개의 주요 분류, 즉 IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM으로 정해질 수 있다. IgA 및 IgG는 동종형 IgA₁, IgA₂, IgG₁, IgG₂, IgG₃ 및 IgG₄로 추가로 하위분류화된다. 임의의 척추동물 종의 항체 경쇄는 그들의 불변 도메인의 아미노산 서열에 기초하여, 명확하게 별개의 2개의 유형, 즉 카파(κ) 및 람다(λ) 중 하나로 정해질 수 있다.

용어 "항체 단편"은 중쇄 및/또는 경쇄 항원 결합 부위, 예컨대 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR) 1, 2 및 3, 경쇄 상보성 결정 영역(LCDR) 1, 2 및 3, 중쇄 가변 영역(VH), 또는 경쇄 가변 영역(VL)을 보유하는 면역글로불린 분자의 일부분을 지칭한다. 항체 단편은 VL, VH, CL 및 CHI 도메인으로 이루어진 1가 단편인 Fab 단편; 힌지(hinge) 영역에서 이황화물 가교에 의해 연결된 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab)₂ 단편; VH 및 CHI 도메인으로 이루어진 Fd 단편; 항체의 단일 아암(arm)의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편; 도메인 항체(dAb) 단편(문헌[Ward et al (1989) Nature 341:544- 546]) - 이는 VH 도메인으로 이루어짐 - 을 포함한다. VH 및 VL 도메인은 조작되고(engineered) 합성 링커를 통해 함께 연결되어 다양한 유형의 단일쇄 항체 설계를 형성할 수 있으며, 여기서 VH/VL 도메인은 VH 및 VL 도메인이 별도의 단일쇄 항체 작제물에 의해 발현되는 경우에 분자내에서, 또는 분자간에 쌍을 이루어서 1가 항원 결합 부위, 예컨대 단일쇄 Fv(scFv) 또는 이중항체(diabody)를 형성하며, 이는, 예를 들어 국제 특허 출원 공개 WO1998/44001호, WO1988/01649호, WO1994/13804호, 및 WO1992/01047호에 기재되어 있다. 이들 항체 단편은 당업자에게 잘 알려진 기법을 사용하여 얻어지며, 이들 단편은 전 길이 항체와 동일한 방식으로 유용성을 위해 스크리닝된다.

어구 "단리된 항체"는 상이한 항원 특이성을 갖는 다른 항체들이 사실상 없는 항체 또는 항체 단편을 지칭한다(예를 들어, CD38에 특이적으로 결합하는 단리된 항체에는 인간 CD38 이외의 항원에 특이적으로 결합하는 항체가 사실상 없다). 그러나, CD38에 특이적으로 결합하는 단리된 항체는 다른 항원들, 예컨대 인간 CD38의 오르토상동체(ortholog), 예컨대 마카카 파시큘라리스(Macaca fascicularis)(원숭이(cynomolgus)) CD38과의 교차-반응성을 가질 수 있다. 게다가, 단리된 항체에는 다른 세포 물질 및/또는 화학물질이 사실상 없을 수 있다.

항체 가변 영역은 3개의 "항원 결합 부위"가 개재된 "프레임워크" 영역으로 이루어진다. 항원 결합 부위는 상보성 결정 영역(CDR) 또는 "초가변 영역", "HVR", 또는 "HV"와 같은 다양한 용어를 사용하여 정의되는데, 상보성 결정 영역(CDR)은 VH에 3개(HCDR1, HCDR2, HCDR3), 그리고 VL에 3개(LCDR1, LCDR2, LCDR3) 존재하며 서열 가변성에 기초하고(문헌[Wu and Kabat J Exp Med 132:211-50, 1970]; 문헌[Kabat et al Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1991]), "초가변 영역", "HVR", 또는 "HV"는 VH에 3개(H1, H2, H3), 그리고 VL에 3개(L1, L2, L3) 존재하며, 초티아 및 레스크(Chothia and Lesk)에 의해 정의된 바와 같이 구조에서 초가변성인 항체 가변 도메인의 영역을 지칭한다(문헌[Chothia and Lesk Mol Biol 196:901-17, 1987]). 다른 용어는 "IMGT-CDR"(문헌[Lefranc et al., Dev Comparat Immunol 27:55-77, 2003]) 및 "특이성 결정 잔기 용법(Specificity Determining Residue Usage)"(SDRU)(문헌[Almagro, Mol Recognit 17:132-43, 2004])을 포함한다. 인터내셔널 이뮤노진틱스(International ImMunoGeneTics, IMGT) 데이터베이스(http://www_imgt_org)는 항원-결합 부위의 표준화된 넘버링과 정의를 제공한다. CDR, HV, 및 IMGT 도해 사이의 관련성은 문헌[Lefranc et al., Dev Comparat Immunol 27:55-77, 2003]에 기재되어 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "초티아 잔기"는 알-라지카니(Al-Lazikani)에 따라 넘버링된 항체 VL 및 VH 잔기이다(문헌[Al-Lazikani et al., J Mol Biol 273:927-48, 1997]).

"프레임워크" 또는 "프레임워크 서열"은 항원-결합 부위인 것으로 결정된 것 이외의 가변 영역의 나머지 서열이다. 항원 결합 부위가 전술된 바와 같은 다양한 용어에 의해 정의될 수 있기 때문에, 프레임워크의 정확한 아미노산 서열은 항원 결합 부위가 어떻게 정의되는지에 따라 달라진다.

"인간화 항체"는 항원 결합 부위가 인간 이외의 종으로부터 유래되고 가변 영역 프레임워크가 인간 면역글로불린 서열로부터 유래되는 항체를 지칭한다. 인간화 항체는 프레임워크 영역 내에 치환을 포함할 수 있으므로, 프레임워크는 발현된 인간 면역글로불린 또는 생식세포계열 유전자 서열의 정확한 카피가 아닐 수 있다.

"인간-적응화" 항체 또는 "인간 프레임워크 적응화(human framework adapted, HFA)" 항체는 미국 특허 출원 공개 제2009/0118127호에 기재된 방법에 따라 적응된 인간화 항체를 지칭한다. 인간-적응화 항체는 최대 CDR 및 FR 유사성, 길이 적합성(length compatibility), 및 CDR1 및 CDR2 루프와 경쇄 CDR3 루프의 일부분의 서열 유사성에 기초하여 억셉터 인간 프레임워크를 선택함으로써 인간화된다.

"인간 항체"는 프레임워크 및 항원 결합 부위 둘 모두가 인간 기원의 서열로부터 유래되는, 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 갖는 항체를 지칭한다. 이 항체가 불변 영역을 포함하는 경우, 불변 영역 또한 인간 기원의 서열로부터 유래된다.

인간 항체는, 항체의 가변 영역이 인간 생식세포계열 면역글로불린 또는 재배열된 면역글로불린 유전자를 사용하는 시스템으로부터 얻어지는 경우, 인간 기원의 서열"로부터 유래되는" 중쇄 또는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 그러한 시스템은, 본 명세서에 기재된 바와 같이, 파지 상에 디스플레이된 인간 면역글로불린 유전자 라이브러리, 및 인간 면역글로불린 유전자자리를 담지하는 유전자도입 인간 이외의 동물, 예컨대 마우스를 포함한다. "인간 항체"는 인간 생식세포계열 또는 재배열된 면역글로불린 서열과 비교할 때 아미노산 차이를 포함할 수 있는데, 이는 예를 들어 천연 발생 체세포 돌연변이 또는 프레임워크 또는 항원 결합 부위 내의 치환의 의도적 도입에 기인한다. 전형적으로, 인간 항체는 인간 생식세포계열 또는 재배열된 면역글로불린 유전자에 의해 암호화된 아미노산 서열과 아미노산 서열이 적어도 약 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 동일하다. 일부 경우에, "인간 항체"는, 예를 들어 문헌[Knappik et al., J Mol Biol 296:57-86, 2000]에 기재된 바와 같이 인간 프레임워크 서열 분석으로부터 유래되는 공통 프레임워크 서열을 함유하거나, 또는, 예를 들어 문헌[Shi et al., J Mol Biol 397:385-96, 2010] 및 국제 특허 출원 공개 WO2009/085462호에 기재된 바와 같이 파지 상에 디스플레이된 인간 면역글로불린 유전자 라이브러리 내로 도입된 합성 HCDR3을 함유할 수 있다. 항원 결합 부위가 인간 이외의 종으로부터 유래되는 항체는 인간 항체의 정의에 포함되지 않는다.

단리된 인간화 항체는 합성 항체일 수 있다. 인간 면역글로불린 서열로부터 유래되는 인간 항체는, 합성 CDR 및/또는 합성 프레임워크를 도입시킨 파지 디스플레이와 같은 시스템을 사용하여 생성될 수 있거나, 또는 시험관내 돌연변이생성(mutagenesis)을 거쳐서 항체 특성을 개선하여, 그 결과 생체내(in vivo)에서 인간 항체 생식세포계열 레퍼토리 내에는 천연적으로 존재하지 않는 항체를 생성할 수 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "재조합 항체"는 재조합 수단에 의해 제조, 발현, 생성 또는 단리된 모든 항체를 포함하는데, 이러한 항체는, 예컨대 인간 면역글로불린 유전자를 위해 유전자도입 또는 염색체도입된(transchromosomal) 동물(예를 들어, 마우스)로부터 단리된 항체 또는 그로부터 제조된 하이브리도마(hybridoma)(하기에 추가로 기술됨), 항체를 발현하도록 형질전환된 숙주 세포로부터 단리된 항체, 재조합된 조합 항체 라이브러리(recombinant, combinatorial antibody library)로부터 단리된 항체, 및 다른 DNA 서열에 대해 인간 면역글로불린 유전자 서열의 스플라이싱을 포함하는 임의의 다른 수단에 의해 제조, 발현, 생성 또는 단리된 항체, 또는 Fab 아암 교환을 사용하여 시험관내에서 생성되는 항체, 예컨대 이중특이성 항체이다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "단일클론 항체"는 단일 분자 조성의 항체 분자의 제조를 지칭한다. 단일클론 항체 조성물은 특정 에피토프(epitope)에 대해 단일 결합 특이성 및 친화성을 나타내거나, 또는 이중특이성 단일클론 항체의 경우에는, 2개의 별개의 에피토프에 대해 이중 결합 특이성을 나타낸다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "에피토프"는 항체가 특이적으로 결합하는 항원의 부분을 의미한다. 에피토프는 통상 아미노산 또는 다당류 측쇄와 같은 모이어티(moiety)의 화학적으로 활성(이를 테면, 극성, 비극성 또는 소수성)인 표면 그룹화(grouping)로 이루어지며, 특이적인 3차원 구조 특징뿐만 아니라 특이적인 전하 특징을 가질 수 있다. 에피토프는 입체구조 공간 단위(conformational spatial unit)를 형성하는 연속 및/또는 불연속 아미노산으로 구성될 수 있다. 불연속 에피토프의 경우, 항원의 선형 서열의 상이한 부분으로부터의 아미노산이 단백질 분자의 접힘을 통해 3차원 공간에서 아주 근접하게 된다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "변이체"는 하나 이상의 변형(modification), 예를 들어 치환, 삽입, 또는 결실에 의해 기준 폴리펩티드 또는 기준 폴리뉴클레오티드와 상이한 폴리펩티드 또는 폴리뉴클레오티드를 지칭한다.

"상승효과", "상승작용" 또는 "상승적"은 병용물의 예측된 부가적 효과보다 더 높은 것을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "와 병용하여"는 둘 이상의 치료제가 대상체에게 혼합물 상태로 함께 투여되거나, 단제(single agent)로서 동시에 투여되거나, 또는 단제로서 임의의 순서로 순차적으로 투여될 수 있음을 의미한다.

용어 "치료하다" 또는 "치료"는 치료적 치료 및 예방학적 또는 예방적 조치 둘 모두를 지칭하며, 여기서 목적은 원치 않는 생리적 변화 또는 장애, 예컨대 종양 또는 종양 세포의 발생 또는 확산을 예방 또는 둔화(감퇴)시키는 것이다. 유익하거나 원하는 임상 결과는, 검출가능하든 검출 불가능하든 어느 것이든 간에, 증상의 경감, 질병 정도의 저하, 안정화된(즉, 악화되지 않는) 질병 상태, 질병 진행의 지연 또는 감속, 질병 상태의 개선 또는 고식, 및 관해(부분 또는 전체 어느 것이든)를 포함한다. "치료"는 또한 대상체가 치료를 받지 않고 있을 경우에 예측되는 생존과 비교할 때 연장되는 생존을 의미할 수 있다. 치료가 필요한 자들은 이미 질환 또는 장애를 가진 자들뿐만 아니라 질환 또는 장애를 갖기 쉬운 자들 또는 질환 또는 장애가 예방되어야 하는 자들을 포함한다.

(예를 들어, 세포, 예컨대 종양 세포와 관련하여) "성장을 억제한다"는, 치료제 또는 치료제들 또는 약물의 병용물과 접촉될 때 시험관내 또는 생체내 세포 성장에 있어서, 당업자에게 잘 알려진 적절한 제어 조건에서 성장된 동일한 세포의 성장과 대비할 때, 측정가능한 감소를 지칭한다. 시험관내 또는 생체내 세포 성장의 억제는 적어도 약 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 99%, 또는 100%일 수 있다. 세포 성장의 억제는 다양한 기전에 의해, 예를 들어 항체-의존성 세포-매개성 세포독성(ADCC), 항체 의존성 세포 식작용(ADCP), 보체 의존성 세포독성(CDC), 세포자멸, 괴사에 의해, 또는 세포 증식의 억제에 의해 일어날 수 있다.

"치료적 유효량"은 필요한 투여량에서 그리고 필요한 시간 동안 원하는 치료 결과를 달성하는 데 유효한 양을 지칭한다. 치료적 유효량은 개체의 질병 상태, 연령, 성별, 및 체중, 그리고 치료제 또는 치료제들의 병용물이 개체에서 원하는 반응을 유도하는 능력과 같은 인자들에 따라 변동될 수 있다. 유효한 치료제 또는 치료제들의 병용물의 예시적인 지표는, 예를 들어 환자의 개선된 웰빙(well-being), 종양 부하(tumor burden)의 감소, 종양의 정지성 또는 지연성 성장, 및/또는 체내의 다른 위치로의 암 세포의 전이의 부재를 포함한다.

본 명세서에 기재되고, 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서의 본 발명의 일 실시 형태는, CD38에 결합하기 위하여, 서열 번호 4의 중쇄 가변 영역(VH) 및 서열 번호 5의 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체와 경쟁하는 항-CD38 항체를 급성 림프아구성 백혈병(ALL)의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하며, 항-CD38 항체는 항체-의존성 세포-매개성 세포독성(ADCC), 항체-의존성 세포 식작용(ADCP), 보체 의존성 세포독성(CDC), 세포자멸, 또는 CD38 효소 활성의 시험관내 조절에 의해 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도하는, 급성 림프아구성 백혈병(ALL)을 갖는 대상체를 치료하는 방법이다.

본 명세서에 기재되고, 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서의 본 발명의 다른 실시 형태는 인간 CD38(서열 번호 1)의 영역 SKRNIQFSCKNIYR(서열 번호 2) 및 영역 EKVQTLEAWVIHGG(서열 번호 3)에 결합하는 항-CD38 항체를 급성 림프아구성 백혈병(ALL)의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하며, 항-CD38 항체는 항체-의존성 세포-매개성 세포독성(ADCC), 항체-의존성 세포 식작용(ADCP), 보체 의존성 세포독성(CDC), 세포자멸, 또는 CD38 효소 활성의 시험관내 조절에 의해 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도하는, 급성 림프아구성 백혈병(ALL)을 갖는 대상체를 치료하는 방법이다. 항체의 에피토프는 서열 번호 2 또는 서열 번호 3에 나타낸 서열을 갖는 잔기들 중 일부 또는 모두를 포함한다. 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들을 포함하여 본 명세서에 개시된 일부 실시 형태에서, 항체 에피토프는 인간 CD38(서열 번호 1)의 영역 SKRNIQFSCKNIYR(서열 번호 2) 내의 적어도 하나의 아미노산 및 영역 EKVQTLEAWVIHGG(서열 번호 3) 내의 적어도 하나의 아미노산을 포함한다. 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들을 포함하여 본 명세서에 개시된 일부 실시 형태에서, 항체 에피토프는 인간 CD38(서열 번호 1)의 영역 SKRNIQFSCKNIYR(서열 번호 2) 내의 적어도 2개의 아미노산 및 영역 EKVQTLEAWVIHGG(서열 번호 3) 내의 적어도 2개의 아미노산을 포함한다. 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들을 포함하여 본 명세서에 개시된 일부 실시 형태에서, 항체 에피토프는 인간 CD38(서열 번호 1)의 영역 SKRNIQFSCKNIYR(서열 번호 2) 내의 적어도 3개의 아미노산 및 영역 EKVQTLEAWVIHGG(서열 번호 3) 내의 적어도 3개의 아미노산을 포함한다. 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들을 포함하여 본 명세서에 개시된 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 인간 CD38(서열 번호 1)의 영역 SKRNIQFSCKNIYR(서열 번호 2)에서 적어도 KRN을 포함하고 영역 EKVQTLEAWVIHGG(서열 번호 3)에서 적어도 VQLT(서열 번호 14)을 포함하는 에피토프에 결합한다.

인간 CD38(서열 번호 1)의 영역 SKRNIQFSCKNIYR(서열 번호 2) 및 영역 EKVQTLEAWVIHGG(서열 번호 3)에 또는 최소한으로 상기에 나타낸 바와 같은 잔기 KRN 및 VQLT(서열 번호 14)에 결합하는 예시적인 항체는 다라투무맙(국제 특허 출원 공개 WO2006/0998647호 참조)이다. 다라투무맙은, 각각 서열 번호 4 및 5에 나타낸 VH 및 VL 아미노산 서열; 서열 번호 6, 7 및 8의 중쇄 CDR HCDR1, HCDR2 및 HCDR3; 및 각각 서열 번호 9, 10 및 11의 경쇄 CDR LCDR1, LCDR2 및 LCDR3을 포함하고, IgG1/κ 아형을 갖는다. 다라투무맙의 중쇄 아미노산 서열은 서열 번호 12에 나타나 있고, 경쇄 아미노산 서열은 서열 번호 13에 나타나 있다.

서열 번호 1

서열 번호 2

서열 번호 3

서열 번호 4

서열 번호 5

서열 번호 6

서열 번호 7

서열 번호 8

서열 번호 9

서열 번호 10

서열 번호 11

서열 번호 12

서열 번호 13

서열 번호 14

항체는 잘 알려진 시험관내 방법을 사용하여 CD38에 결합하기 위한 서열 번호 4의 VH 및 서열 번호 5의 VL을 갖는 다라투무맙과의 그들의 경쟁에 대해 평가될 수 있다. 예시적인 방법에서는, CD38을 재조합적으로 발현하는 CHO 세포를 비표지된 다라투무맙과 4℃에서 15분 동안 인큐베이션한 후, 과량의 형광 표지된 시험 항체와 4℃에서 45분 동안 인큐베이션할 수 있다. PBS/BSA 중에서 세척한 후에, 표준 방법을 사용하여 유세포측정에 의해 형광을 측정할 수 있다. 다른 예시적인 방법에서는, 인간 CD38의 세포외 부분을 ELISA 플레이트의 표면 상에 코팅할 수 있다. 과량의 비표지된 다라투무맙을 약 15분 동안 첨가하고, 이어서 비오티닐화 시험 항체를 첨가할 수 있다. PBS/트윈(Tween) 중에서 세척한 후에, 고추냉이 퍼옥시다제(HRP)-접합된 스트렙타비딘 및 표준 방법을 사용하여 검출된 신호를 사용하여 비오티닐화 시험 항체의 결합을 검출할 수 있다. 경쟁 검정에서, 다라투무맙이 표지화되고 시험 항체가 비표지화될 수 있음이 용이하게 명백하다. 시험 항체는, 다라투무맙이 시험 항체의 결합을 억제할 때, 또는 시험 항체가 다라투무맙의 결합을 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 100%로 억제할 때 다라투무맙과 경쟁한다. 시험 항체의 에피토프는, 예를 들어 알려진 방법을 사용하여 펩티드 맵핑 또는 수소/중수소 보호 검정에 의해, 또는 결정 구조의 결정에 의해 추가로 규정될 수 있다.

CD38 상에서 다라투무맙과 동일한 영역에 결합하는 항체는, 예를 들어 표준 방법을 사용하여 그리고 본 명세서에 기재된 바와 같이 서열 번호 2 및 3에 나타낸 아미노산 서열을 갖는 펩티드로 마우스를 면역화함으로써 생성될 수 있다. 항체는, 예를 들어, 전술된 바와 같이 그리고 잘 알려진 방법을 사용하여 시험관내에서 CD38에 결합하기 위한 다라투무맙과 시험 항체 사이의 경쟁을 검정함으로써 추가로 평가될 수 있다.

항체의 Fc 부분은 항체-의존성 세포-매개성 세포독성(ADCC), 항체-의존성 세포 식작용(ADCP) 또는 보체 의존성 세포독성(CDC)과 같은 항체 효과기 기능을 매개할 수 있다. 그러한 기능은 식작용 또는 용해 활성을 갖는 면역 세포 상의 Fc 수용체에 대한 Fc 효과기 도메인(들)의 결합에 의해 또는 보체 시스템의 성분에 대한 Fc 효과기 도메인(들)의 결합에 의해 매개될 수 있다. 전형적으로, Fc-결합 세포 또는 보체 성분에 의해 매개된 효과(들)는 표적 세포, 예를 들어 CD38-발현 세포의 억제 및/또는 고갈을 가져온다. 인간 IgG 동종형 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4는 효과기 기능에 대해 차별적인 능력을 나타낸다. ADCC는 IgG1 및 IgG3에 의해 매개될 수 있고, ADCP는 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4에 의해 매개될 수 있고, CDC는 IgG1 및 IgG3에 의해 매개될 수 있다.

본 명세서에 기재된 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 동종형을 갖는다.

본 명세서에 기재된 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38은 ADCC에 의해 CD38을 발현하는 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도한다.

본 명세서에 기재된 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38은 CDC에 의해 CD38을 발현하는 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도한다.

본 명세서에 기재된 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 ADCP에 의해 CD38을 발현하는 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도한다.

본 명세서에 기재된 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 세포자멸에 의해 CD38을 발현하는 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도한다.

본 명세서에 기재된 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 ADCC 및 CDC에 의해 CD38을 발현하는 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도한다.

작용 기전에 대해 어떠한 특정 이론으로 구애되고자 하지 않지만, 본 발명의 항-CD38 항체는 ADCC, CDC, ADCP, 세포자멸 또는 CD38 효소 활성의 생체내 조절에 의해 CD38을 발현하는 ALL 세포의 생체내 사멸을 유도할 것으로 예측된다.

"항체-의존성 세포성 세포독성", "항체-의존성 세포-매개성 세포독성" 또는 "ADCC"는, 효과기 세포 상에서 발현되는 Fc 감마 수용체(FcγR)를 통한, 항체-코팅된 표적 세포와 용해 활성을 갖는 효과기 세포, 예컨대 자연 살해 세포, 단핵구, 대식세포 및 호중구의 상호작용에 의존하는 세포사를 유도하기 위한 기전이다. 예를 들어, NK 세포는 FcγRIIIa를 발현하며, 한편 단핵구는 FcγRI, FcγRII 및 FcvRIIIa를 발현한다. 항체-코팅된 표적 세포, 예컨대 CD38-발현 세포의 죽음은 막 세공-형성 단백질 및 프로테아제의 분비를 통한 효과기 세포 활성의 결과로서 일어난다. 항-CD38 항체의 ADCC 활성을 평가하기 위하여, 항체는 면역 효과기 세포와 조합된 CD38-발현 세포에 첨가될 수 있으며, 이는 항원 항체 복합체에 의해 활성화되어 표적 세포를 세포용해시킬 수 있다. 일반적으로 세포용해는 용해된 세포로부터의 표지(예를 들어, 방사능 기질, 형광 염료 또는 천연 세포내 단백질)의 방출에 의해 탐지된다. 그러한 검정을 위한 예시적인 효과기 세포는 말초 혈액 단핵 세포(PBMC) 및 NK 세포를 포함한다. 예시적인 표적 세포는 다우디(Daudi) 세포(ATCC^® CCL-213^™) 또는 CD38을 발현하는 B 세포 백혈병 또는 림프종 종양 세포를 포함한다. 예시적인 검정에서는, 표적 세포를 2시간 동안 20 μCi의 ⁵¹Cr로 표지화하고 광범위하게 세척한다. 표적 세포의 세포 농도는 1×10⁶개 세포/ml로 조정될 수 있고, 다양한 농도의 항-CD38 항체가 첨가된다. 다우디 세포를 40:1의 효과기:표적 세포 비로 첨가함으로써 검정이 시작된다. 37℃에서 3시간 동안 인큐베이션 후에, 원심분리에 의해 검정을 정지하고, 용해된 세포로부터의⁵¹Cr 방출을 신틸레이션 카운터에서 측정한다. 세포성 세포독성의 백분율은 % 최대 용해율로 계산될 수 있는데, 용해는 3% 과염소산을 표적 세포에 첨가함으로써 유도될 수 있다. 본 발명의 방법에 사용되는 항-CD38 항체는 대조군의 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 100%로 ADCC를 유도할 수 있다(세포 용해는 3% 과염소산으로 유도됨).

"항체-의존성 세포 식작용" ("ADCP")은 식세포, 예컨대 대식세포 또는 수지상 세포에 의한 내재화에 의한 항체-코팅된 표적 세포의 제거의 기전을 지칭한다. ADCP는, 효과기 세포로서 단핵구-유래 대식세포를, 그리고 GFP 또는 다른 표지된 분자를 발현하도록 조작된 표적 세포로서 다우디 세포(ATCC^® CCL-213^™) 또는 CD38을 발현하는 B 세포 백혈병 또는 림프종 종양 세포를 사용함으로써 평가될 수 있다. 효과기:표적 세포 비는, 예를 들어 4:1일 수 있다. 효과기 세포는 항-CD38 항체와 함께 또는 이것 없이 4시간 동안 표적 세포와 인큐베이션될 수 있다. 인큐베이션 후에, 세포는 아큐타제를 사용하여 탈착될 수 있다. 대식세포는 형광 표지에 커플링된 항-CD11b 및 항-CD14 항체로 확인될 수 있으며, % 식작용은 표준 방법을 사용하여 CD11⁺CD14⁺ 대식세포에서의 % GFP 형광에 기초하여 결정될 수 있다. 본 발명의 방법에 사용되는 항-CD38 항체는 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 100%로 ADCP를 유도할 수 있다.

"보체-의존성 세포독성" 또는 "CDC"는, 표적-결합된 항체의 Fc 효과기 도메인이 보체 성분 C1q에 결합하여 이를 활성화하고, 이는 다시 보체 캐스케이드를 활성화하여 표적 세포사를 초래하는 세포사 유도 기전을 지칭한다. 보체의 활성화는 또한 표적 세포 표면 상에의 보체 성분의 침착을 가져올 수 있는데, 이는 백혈구 상의 보체 수용체(예를 들어, CR3)에 결합함으로써 ADCC를 용이하게 한다. CD38-발현 세포의 CDC는, 예를 들어 RPMI-B(1% BSA로 보충된 RPMI) 중에서 1×10⁵개 세포/웰(50 μl/웰)로 다우디 세포를 플레이팅하고, 0 내지 100 ㎍/ml의 최종 농도로 웰에 50 μl의 항-CD38 항체를 첨가하고, 실온에서 15분 동안 반응물을 인큐베이션하고, 11 μl의 혼주된 인간 혈청을 웰에 첨가하고, 37℃에서 45분 동안 반응물을 인큐베이션함으로써 측정될 수 있다. 용해된 세포의 백분율(%)은 표준 방법을 사용하여 FACS 검정에서 % 프로피듐 요오다이드 염색된 세포로서 검출될 수 있다. 본 발명의 방법에 사용되는 항-CD38 항체는 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 100%로 CDC를 유도할 수 있다.

ADCC를 유도하는 단일클론 항체의 능력은 그의 올리고당 성분을 조작함으로써 향상될 수 있다. 인간 IgG1 또는 IgG3는 잘 알려진 바이안테나리(biantennary) G0, G0F, G1, G1F, G2 또는 G2F 형태의 글리칸의 대부분에 의해 Asn297에서 N-글리코실화된다. 비조작된 CHO 세포에 의해 생성된 항체는 전형적으로 약 85% 이상의 글리칸 푸코스 함량을 갖는다. Fc 영역에 부착된 바이안테나리 복합형(complex-type) 올리고당으로부터의 코어(core) 푸코스의 제거는, 항원 결합 또는 CDC 활성을 변경시키지 않고서, 개선된 FcγRIIIa 결합을 통해 항체의 ADCC를 향상시킨다. 그러한 mAb는 바이안테나리 복합형의 Fc 올리고당을 담지하는 비교적 고도로 탈푸코실화된 항체의 성공적인 발현으로 이어지는 것으로 보고된 상이한 방법들을 사용하여 달성될 수 있는데, 이러한 방법에는, 예컨대 다음과 같은 것이 있다: 배양물 오스몰랄 농도(osmolality)의 제어(문헌[Konno et al., Cytotechnology 64:249-65, 2012]), 숙주 세포주로서의 변이체 CHO 세포주 Lec13의 적용(문헌[Shields et al., J Biol Chem 277:26733-26740, 2002]), 숙주 세포주로서의 변이체 CHO 세포주 EB66의 적용(문헌[Olivier et al., MAbs; 2(4), 2010; Epub ahead of print; PMID:20562582]), 숙주 세포주로서의 래트 하이브리도마 세포주 YB2/0의 적용(문헌[Shinkawa et al., J Biol Chem 278:3466-3473, 2003]), 특이적으로 α 1,6-푸코실트랜스퍼라제(FUT8) 유전자에 대한 짧은 간섭(small interfering) RNA의 도입(문헌[Mori et al., Biotechnol Bioeng88:901-908, 2004]), 또는 β-1,4-N-아세틸글루코사미닐트랜스퍼라제 III과 골지(Golgi) α-만노시다제 II 또는 강력한 알파-만노시다제 I 억제제인 키푸넨신(kifunensine)의 공발현(문헌[Ferrara et al., J Biol Chem281:5032-5036, 2006], 문헌[Ferrara et al., Biotechnol Bioeng 93:851-861, 2006]; 문헌[Xhou et al., Biotechnol Bioeng 99:652-65, 2008]). 본 발명의 방법에, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에 사용되는 항-CD38 항체에 의해 유도된 ADCC는 또한 항체 Fc에서의 소정 치환에 의해 향상될 수 있다. 예시적인 치환은, 예를 들어 미국 특허 제6,737,056호에 기재된 바와 같은 아미노산 위치 256, 290, 298, 312, 356, 330, 333, 334, 360, 378 또는 430(잔기 넘버링은 EU 인덱스에 따름)에서의 치환이다.

본 명세서에 기재된 일부 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 항체 Fc에서의 치환을 포함한다.

본 명세서에 기재된 일부 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 항체 Fc 내의 아미노산 위치 256, 290, 298, 312, 356, 330, 333, 334, 360, 378 또는 430(잔기 넘버링은 EU 인덱스에 따름)에서의 치환을 포함한다.

본 명세서에 기재된 일부 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 푸코스 함량이 약 0% 내지 약 15%, 예를 들어 15%, 14%, 13%, 12%, 11% 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% 또는 0%인 바이안테나리 글리칸 구조를 갖는다.

본 명세서에 기재된 일부 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 푸코스 함량이 약 50%, 40%, 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11% 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% 또는 0%인 바이안테나리 글리칸 구조를 갖는다.

Fc에서의 치환 및 감소된 푸코스 함량은 항-CD38 항체의 ADCC 활성을 향상시킬 수 있다.

"푸코스 함량"은 Asn297에서의 당 사슬 내의 푸코스 단당의 양을 의미한다. 푸코스의 상대량은 모든 당구조(glycostructure)에 대한 푸코스-함유 구조의 백분율이다. 이들은, 예를 들어 하기와 같은 다수의 방법에 의해 특성화 및 정량화될 수 있다: 1) 국제 특허 출원 공개 WO2008/077546호에 기재된 바와 같이 N-글리코시다제 F 처리된 샘플(예를 들어, 복합, 혼성, 및 올리고- 및 고-만노스 구조)의 MALDI-TOF를 사용하는 방법; 2) Asn297 글리칸의 효소적 방출을 행하고, 이어서, 유도체화하고, 형광 검출을 사용하는 HPLC(UPLC) 및/또는 HPLC-MS(UPLC-MS)에 의해 검출/정량화함에 의한 방법; 3) 엔도(Endo) S, 또는 제1 GlcNAc 단당과 제2 GlcNAc 단당 사이를 절단하여 푸코스가 제1 GlcNAc에 부착된 상태로 남겨 두는 다른 효소로 Asn297 글리칸을 처리하거나 처리하지 않고서, 천연 또는 환원된 mAb의 온전한 단백질을 분석하는 방법; 4) 효소적 분해(예를 들어, 트립신 또는 엔도펩티다제 Lys-C)에 의해 mAb를 구성 펩티드들로 효소분해하고, 이어서 HPLC-MS(UPLC-MS)에 의해 분리, 검출 및 정량화하는 방법; 또는 5) Asn297에서의 PNGase F에 의한 특이적인 효소적 탈글리코실화에 의해 mAb 단백질로부터 mAb 올리고당을 분리하는 방법. 방출된 올리고당은 형광단으로 표지되고, 하기를 가능하게 하는 다양한 상보적 기법에 의해 분리 및 확인될 수 있다: 실험 질량과 이론 질량의 비교에 의한 매트릭스-보조 레이저 탈착 이온화(matrix-assisted laser desorption ionization, MALDI) 질량 분석에 의한 글리칸 구조의 미세한 특성화, 이온 교환 HPLC(글리코셉(GlycoSep) C)에 의한 시알릴화도(degree of sialylation)의 결정, 순상 HPLC(글리코셉 N)에 의한 친수성 기준에 따른 올리고당 형태의 분리 및 정량화, 및 고성능 모세관 전기영동-레이저 유도 형광(high performance capillary electrophoresis-laser induced fluorescence, HPCE-LIF)에 의한 올리고당의 분리 및 정량화.

본 출원에 사용되는 바와 같이, "저 푸코스" 또는 "저 푸코스 함량"은 푸코스 함량이 약 0% 내지 15%인 항체를 지칭한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "정상 푸코스" 또는 "정상 푸코스 함량"은 푸코스 함량이 약 50% 초과, 전형적으로 약 60%, 70%, 80% 초과 또는 85% 초과인 항체를 지칭한다.

본 명세서에 기재된 방법에, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에 사용되는 항-CD38 항체는 세포자멸에 의해 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도할 수 있다. 세포자멸을 평가하기 위한 방법은 잘 알려져 있으며, 예를 들어 표준 방법을 사용하는 아넥신 IV 염색을 포함한다. 본 발명의 방법에 사용되는 항-CD38 항체는 세포의 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 100%로 세포자멸을 유도할 수 있다.

본 명세서에 기재된 방법에, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에 사용되는 항-CD38 항체는 CD38 효소 활성의 조절에 의해 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도할 수 있다. CD38은 NAD⁺로부터의 고리형 ADP-리보스(cADPR) 및 ADPR의 형성을 촉매하는 ADP-리보실 사이클라제 1 활성을 갖는 다기능성 엑토효소이고, 또한 NAD⁺ 및 cADPR을 ADPR로 가수분해하도록 기능한다. CD38은 또한 산성 조건 하에서 NADP⁺의 니코틴아미드 기를 니코틴산과 교환하는 것을 촉매하여 NAADP⁺(니코틴산-아데닌 디뉴클레오티드 포스페이트)를 생성한다. 본 발명의 방법에 사용되는 항-CD38 항체에 의한 인간 CD38의 효소 활성의 조절은 문헌[Graeff et al., J. Biol. Chem. 269, 30260-30267, (1994)]에 기재된 검정에서 측정될 수 있다. 예를 들어, 기질 NGD⁺를 CD38과 인큐베이션할 수 있고, 고리형 GDP-리보스(cGDPR)의 생산의 조절을 다양한 농도의 항체의 첨가 후 상이한 시점에서 340 nM에서의 여기(excitation) 및 410 nM에서의 방출에서 분광광도계에 의해 모니터링할 수 있다. cADPR의 합성의 억제는 문헌[Munshi et al., J. Biol. Chem. 275, 21566-21571, (2000)]에 기재된 HPLC 방법에 따라 결정될 수 있다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 방법에, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에 사용되는 항-CD38 항체는 적어도 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 100%로 CD38 효소 활성을 억제할 수 있다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 일부 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는, 각각 서열 번호 6, 7 및 8의 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR) 1(HCDR1), 2(HCDR2) 및 3(HCDR3) 서열을 포함한다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 일부 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는, 각각 서열 번호 9, 10 및 11의 경쇄 상보성 결정 영역(LCDR) 1(LCDR1), 2(LCDR2) 및 3(LCDR3) 서열을 포함한다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 일부 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 서열 번호 4의 중쇄 가변 영역(VH) 및 서열 번호 5의 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 일부 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 서열 번호 12의 중쇄 및 서열 번호 13의 경쇄를 포함한다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 일부 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 서열 번호 12의 아미노산 서열과 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열 번호 13의 아미노산 서열과 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.

서열 번호 12의 중쇄 및 서열 번호 13의 경쇄를 포함하는 항체와 사실상 동일한 항체가 본 발명의 방법에 사용될 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "사실상 동일한"은 비교되는 2개의 항체 중쇄 또는 경쇄 아미노산 서열이 동일하거나 또는 "미미한(insubstantial) 차이"를 갖는 것을 의미한다. 미미한 차이는, 항체 특성에 불리한 영향을 주지 않는, 항체 중쇄 또는 경쇄 내의 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 또는 15개의 아미노산의 치환이다. 퍼센트 동일성은, 예를 들어 벡터(Vector) NTI v.9.0.0의 얼라인엑스(AlignX) 모듈(미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로젠(Invitrogen))의 기본 설정을 사용하여 쌍별 정렬(pairwise alignment)에 의해 결정될 수 있다. 본 발명의 단백질 서열을 질의 서열(query sequence)로 사용하여, 예를 들어 관련 서열을 확인하기 위해 공개 데이터베이스 또는 특허 데이터베이스에 대한 검색을 수행할 수 있다. 그러한 검색을 수행하기 위해 사용되는 예시적인 프로그램은, 기본 설정을 사용하는 XBLAST 또는 BLASTP 프로그램(http_//www_ncbi_nlm/nih_gov), 또는 게놈퀘스트(GenomeQuest)™(미국 매사추세츠주 웨스트보로우 소재의 게놈퀘스트) 스위트(suite)이다. 본 발명의 방법에 사용되는 항-CD38 항체에 대해 이루어질 수 있는 예시적인 치환은, 예를 들어 유사한 전하, 소수성, 또는 입체화학 특성을 갖는 아미노산으로의 보존적 치환이다. 보존적 치환은 항체 특성, 예를 들어 안정성 또는 친화성을 개선하도록, 또는 항체 효과기 기능을 개선하도록 이루어질 수 있다. 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 또는 15개의 아미노산 치환이, 예를 들어 항-CD38 항체의 중쇄 또는 경쇄에 대해 이루어질 수 있다. 더욱이, 중쇄 또는 경쇄 내의 임의의 천연 잔기는 또한 알라닌으로 치환될 수 있는데, 이는 알라닌 스캐닝 돌연변이생성(alanine scanning mutagenesis)에 대해 이전에 기재된 바와 같다(문헌[MacLennan et al., Acta Physiol Scand Suppl 643:55-67, 1998]; 문헌[Sasaki et al., Adv Biophys 35:1-24, 1998]). 원하는 아미노산 치환은 그러한 치환이 요구되는 때에 당업자에 의해 결정될 수 있다. 아미노산 치환은, 예를 들어 PCR 돌연변이생성에 의해 행해질 수 있다(미국 특허 제4,683,195호). 변이체의 라이브러리를 잘 알려진 방법을 사용하여 생성할 수 있는데, 예를 들어, 무작위(NNK) 또는 비무작위 코돈, 예를 들어 DVK 코돈 - 이는 11개의 아미노산(Ala, Cys, Asp, Glu, Gly, Lys, Asn, Arg, Ser, Tyr, Trp)을 암호화함 - 을 사용하고, 원하는 특성을 갖는 변이체에 대한 라이브러리를 스크리닝하여 생성할 수 있다. 생성된 변이체들은 CD38에 대한 그들의 결합, 본 명세서에 기재된 방법을 사용하여 시험관내에서 ADCC, ADCP 또는 세포자멸을 유도하거나, 또는 CD38 효소 활성을 조절하는 그들의 능력에 대해 시험될 수 있다.

본 명세서에 기재된 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 다양한 친화도(K_D)로 인간 CD38에 결합할 수 있다. 본 발명에 따른 일 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 고친화도로, 예를 들어 당업자에 의해 실시되는 바와 같이, 표면 플라즈몬 공명 또는 키넥사(Kinexa) 방법에 의해 결정될 때, 약 10^-7 M 이하, 예컨대 제한 없이, 1 내지 9.9(또는 그 안의 임의의 범위 또는 값, 예컨대 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 또는 9) × 10^-8, 10^-9, 10^-10, 10^-11, 10^-12, 10^-13, 10^-14, 10^-15 또는 그 안의 임의의 범위 또는 값의 K_D로 CD38에 결합한다. 일 예시적인 친화도는 1×10^-8 M 이하이다. 다른 예시적인 친화도는 1×10^-9 M 이하이다.

일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 이중특이성 항체이다. 기존의 항-CD38 항체의 VL 및/또는 VH 영역 또는 전술된 바와 같은 데 노보로 확인된 VL 및 VH 영역은 이중특이성 전 길이 항체 내로 조작될 수 있다. 그러한 이중특이성 항체는 미국 특허 제7,695,936호; 국제 특허 출원 공개 WO04/111233호; 미국 특허 출원 공개 제2010/0015133호; 미국 특허 출원 공개 제2007/0287170호, 국제 특허 출원 공개 WO2008/119353호; 미국 특허 출원 공개 제2009/0182127호; 미국 특허 출원 공개 제2010/0286374호; 미국 특허 출원 공개 제2011/0123532호, 국제 특허 출원 공개 WO2011/131746호, 국제 특허 출원 공개 WO2011/143545호; 또는 미국 특허 출원 공개 제2012/0149876호에 기재된 것과 같은 기술을 사용하여 단일특이성 항체 중쇄들 사이의 CH3 상호작용을 조절하여 이중특이성 항체를 형성함으로써 제조될 수 있다. 본 발명의 항체의 VL 및/또는 VH 영역이 도입될 수 있는 추가의 이중특이성 구조는, 예를 들어 이중 가변 도메인 면역글로불린(국제 특허 출원 공개 WO2009/134776호), 또는 상이한 특이성을 갖는 2개의 항체 아암을 연결시키기 위한 다양한 이량화 도메인, 예컨대 류신 지퍼 또는 콜라겐 이량화 도메인을 포함하는 구조(국제 특허 출원 공개 WO2012/022811호, 미국 특허 제5,932,448호; 미국 특허 제6,833,441호)이다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 독소에 접합된다. 접합 방법 및 적합한 독소는 잘 알려져 있다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, ALL은 B-세포 계통 ALL이다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, ALL은 T-세포 계통 ALL이다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, ALL은 성인 ALL이다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, ALL은 소아 ALL이다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 관해 유도(remission induction)로서 또는 유도 후 요법(postinduction therapy)으로서 투여된다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, ALL은 불응성 또는 재발성 ALL이다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 대상체는 적어도 약 1 × 10⁹/L의 백혈구 카운트를 갖는다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, ALL 세포는 필라델피아 염색체를 갖는다.

"필라델피아 염색체" 또는 "Ph"는 잘 알려진 염색체 9와 22 사이의 염색체 전좌를 지칭하는데, 그 결과 구성적으로 활성인 티로신 키나제 활성을 갖는 발암성 BCR-ABL 유전자 융합이 일어난다. 전좌는 염색체 22q11로부터의 BCR 유전자의 일부분이 염색체 9q34로부터의 ABL 유전자의 일부분과 융합되게 하고, 인간 세포유전학적 명명법에 관한 국제 규약(International System for Human Cytogenetic Nomenclature, ISCN) 하에서 t(9;22)(q34;q11)로서 지정된다. 융합의 정확한 위치에 따라, 생성된 융합 단백질의 분자량은 185 내지 210 kDa의 범위일 수 있다. "필라델피아 염색체"는 (9;22)(q34;q11) 전좌로 인해 형성된 모든 BCR-ABL 융합 단백질을 지칭한다.

Ph 염색체는 ALL을 갖는 성인의 약 20%에 그리고 ALL을 갖는 소아의 작은 백분율에 존재하고, 좋지 못한 예후와 관련된다. 재발 시에, Ph+ 양성 ALL을 갖는 환자는 티로신 키나제 억제제(TKI) 계획 상에 있을 수 있고, 이에 따라 TKI에 대해 내성을 나타내게 되었을 수 있다. 이에 따라, 항-CD38 항체는 선택적이거나 부분적으로 선택적인 BCR-ABL 억제제에 대해 내성을 나타내게 된 대상체에 투여될 수 있다. 예시적인 BCR-ABL 억제제는, 예를 들어 이마티닙, 다사티닙, 닐로티닙, 보수티닙, 포나티닙, 바페티닙, 사라카티닙, 토자세르팁, 다누세르팁 또는 이브루티닙이다.

B-계통 ALL 환자에서 확인된 다른 염색체 재배열은 t(v;11q23) (MLL이 재배열됨), t(1;19)(q23;p13.3); TCF3-PBX1 (E2A-PBX1), t(12;21)(p13;q22); ETV6-RUNX1 (TEL-AML1) 및 t(5;14)(q31;q32); IL3-IGH이다.

일부 실시 형태에서, 대상체는 t(v;11q23) (MLL이 재배열됨), t(1;19)(q23;p13.3); TCF3-PBX1 (E2A-PBX1), t(12;21)(p13;q22); ETV6-RUNX1 (TEL-AML1) 또는 t(5;14)(q31;q32); IL3-IGH 염색체 재배열을 갖는 ALL을 갖는다.

염색체 재배열은 잘 알려진 방법, 예를 들어 형광 계내 혼성화(fluorescent in situ hybridization), 핵형 분석(karyotyping), 펄스 필드 겔 전기영동, 또는 서열분석을 사용하여 확인될 수 있다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 대상체는 적어도 하나의 BCR-ABL 키나제 억제제에 의한 치료에 대해 내성을 나타내거나 획득 내성을 갖는다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 BCR-ABL 키나제 억제제는 이마티닙, 다사티닙, 닐로티닙, 보수티닙, 포나티닙, 바페티닙, 사라카티닙, 토자세르팁, 다누세르팁 또는 이브루티닙이다.

대상체는 적어도 하나의 BCR-ABL 키나제 억제제에 의한 치료에 대해 내성을 나타내거나, 내성이 발생되었거나, 또는 내성 발생에 취약한지를 결정하기 위해 다양한 정성적 및/또는 정량적 방법이 사용될 수 있다. 내성과 관련될 수 있는 증상은, 예를 들어 환자의 웰빙의 감소 또는 정체, 종양 크기의 증가, 암 세포 수의 증가, 종양 또는 종양 세포의 성장의 정지성 또는 지연성 감소, 및/또는 체내에서 한 위치로부터 다른 기관, 조직 또는 세포로의 암성 세포의 확산을 포함한다. 종양과 관련된 다양한 증상의 재확립 또는 악화는 또한 대상체가 적어도 하나의 BCR-ABL 키나제 억제제에 대해 내성이 발생되었거나 내성 발생에 취약하다는 표시일 수 있다. 암과 관련된 증상은 암의 유형에 따라 다양할 수 있다. 예를 들어, ALL과 관련된 증상은 목, 서혜부 또는 겨드랑이에서의 종창된 림프절, 열, 야간 발한, 기침, 가슴 통증, 설명되지 않는 체중 손실, 복부 종창 또는 통증, 또는 팽만감(feeling of fullness)을 포함할 수 있다. 대상체가 적어도 하나의 BCR-ABL 키나제 억제제에 대해 내성이 발생되었는지를 결정하기 위한 다른 수단은 ALL을 갖는 환자에서의 종양 부하의 분석을 포함한다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 빈크리스틴과 병용하여 투여된다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 대상체는 방사선 요법을 받았거나 받을 것이다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 대상체는 골수 이식을 받았거나 받을 것이다.

본 명세서에 기재된 일부 실시 형태에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, ALL을 갖는 대상체는 CD16의 위치 158에서 페닐알라닌에 대해 동형접합성(FcγRIIIa-158F/F 유전자형)이거나, 또는 CD16의 위치 158에서 발린 및 페닐알라닌에 대해 이형접합성(FcγRIIIa-158F/V 유전자형)이다. CD16은 또한 Fc 감마 수용체 IIIa(FcγRIIIa) 또는 저친화도 면역글로불린 감마 Fc 영역 수용체 III-A 동형(isoform)으로 알려져 있다. FcγRIIIa 단백질 잔기 위치 158에서의 발린/페닐알라닌(V/F) 다형성(polymorphism)은 인간 IgG에 대한 FcγRIIIa 친화도에 영향을 주는 것으로 밝혀져 있다. FcγRIIIa-158F/F 또는 FcγRIIIa-158F/V 다형성을 갖는 수용체는 FcγRIIIa-158V/V와 비교할 때 감소된 Fc 관여 및 이에 따른 감소된 ADCC를 보여준다. 인간 N-연결된 올리고당 상의 결여된 또는 낮은 양의 푸코스는 인간 FcγRIIIa(CD16)에 대한 항체의 개선된 결합으로 인해 ADCC를 유도하는 항체의 능력을 개선한다(문헌[Shields et al., J Biol Chem 277:26733-40, 2002]). 환자는 일상적인 방법을 사용하여 그의 FcγRIIIa 다형성에 대해 분석될 수 있다.

본 발명은 또한 인간 CD38(서열 번호 1)의 영역 SKRNIQFSCKNIYR(서열 번호 2) 및 영역 EKVQTLEAWVIHGG(서열 번호 3)에 결합하는 항-CD38 항체를 ALL의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하며, 항-CD38 항체는 항체-의존성 세포-매개성 세포독성(ADCC), 항체-의존성 세포 식작용(ADCP), 보체 의존성 세포독성(CDC), 세포자멸, 또는 CD38 효소 활성의 시험관내 조절에 의해 CD38-발현 세포의 시험관내 사멸을 유도하며, 대상체는 CD16의 위치 158에서 페닐알라닌에 대해 동형접합성이거나, 또는 CD16의 위치 158에서 발린 및 페닐알라닌에 대해 이형접합성인, ALL을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한, CD38에 결합하기 위하여, 서열 번호 4의 중쇄 가변 영역(VH) 및 서열 번호 5의 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체와 경쟁하는 항-CD38 항체를 ALL의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하며, 항-CD38 항체는 항체-의존성 세포-매개성 세포독성(ADCC), 항체-의존성 세포 식작용(ADCP), 보체 의존성 세포독성(CDC), 세포자멸, 또는 CD38 효소 활성의 시험관내 조절에 의해 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도하며, 대상체는 CD16의 위치 158에서 페닐알라닌에 대해 동형접합성이거나, 또는 CD16의 위치 158에서 발린 및 페닐알라닌에 대해 이형접합성인, ALL을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공한다.

투여/약제학적 조성물

본 명세서에 기재된 본 발명의 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체는 항-CD38 항체 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 적합한 약제학적 조성물로 제공될 수 있다. 담체는 항-CD38 항체와 함께 투여되는 희석제, 애쥬번트(adjuvant), 부형제, 또는 비히클일 수 있다. 이러한 비히클은 석유, 동물, 식물, 또는 합성 기원의 것들, 예컨대 낙화생유, 대두유, 광유, 참기름 등을 포함하는, 물 및 오일과 같은 액체일 수 있다. 예를 들어, 0.4% 염수 및 0.3% 글리신이 사용될 수 있다. 이들 용액은 무균성이고 일반적으로 미립자 물질이 없다. 이들은 종래의 잘 알려진 멸균 기법(예를 들어, 여과)에 의해 멸균될 수 있다. 조성물은 pH 조정제 및 완충제, 안정제, 증점제, 윤활제 및 착색제 등과 같은 생리적 조건에 근접시키기 위하여 필요한, 약제학적으로 허용되는 보조 물질을 함유할 수 있다. 그러한 약제학적 제형에서 본 발명의 분자 또는 항체의 농도는 광범위하게, 즉 약 0.5 중량% 미만부터, 통상 약 1 중량% 이상까지, 많게는 15 또는 20 중량%까지 변동될 수 있으며, 선택된 특정 투여 방식에 따라, 필요 용량, 유체 부피, 점도 등에 기초하여 주로 선택될 것이다. 다른 인간 단백질, 예를 들어 인간 혈청 알부민을 포함하는 적합한 비히클 및 제형이, 예를 들어 문헌[Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21^st Edition, Troy, D.B. ed., Lipincott Williams and Wilkins, Philadelphia, PA 2006, Part 5, Pharmaceutical Manufacturing pp 691-1092(특히 pp. 958-989 참조)]에 기재되어 있다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 방법에서의, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서의 항-CD38 항체의 투여 방식은 비경구 투여, 예를 들어 진피내, 근육내, 복막내, 정맥내 또는 피하, 폐, 경점막(구강, 비강내, 질내, 직장) 또는 당업자에 의해 이해되는 다른 수단과 같은 임의의 적합한 경로일 수 있으며, 이는 당업계에 잘 알려진 바와 같다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 방법에서의, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서의 항-CD38 항체는 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어 정맥내(i.v.) 주입 또는 볼루스 주사에 의해 비경구로, 근육내로 또는 피하로 또는 복막내로 환자에게 투여될 수 있다. i.v. 주입은, 예를 들어 15, 30, 60, 90, 120, 180, 또는 240분, 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12시간에 걸쳐 제공될 수 있다.

ALL을 갖는 환자에게 제공되는 용량은 치료되는 질병을 경감시키거나 또는 적어도 부분적으로 정지시키기에 충분하고("치료적 유효량"), 때때로 0.005 mg 내지 약 100 mg/㎏, 예를 들어 약 0.05 mg 내지 약 30 mg/㎏ 또는 약 5 mg 내지 약 25 mg/㎏, 또는 약 4 mg/㎏, 약 8 mg/㎏, 약 16 mg/㎏ 또는 약 24 mg/㎏, 또는, 예를 들어 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10 mg/㎏일 수 있지만, 더욱 더 높을 수 있으며, 예를 들어 약 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100 mg/㎏일 수 있다.

고정 단위 용량, 예를 들어 50, 100, 200, 500 또는 1000 mg이 또한 제공될 수 있거나, 또는 이러한 용량은 환자의 표면적에 기초해서, 예를 들어 500, 400, 300, 250, 200, 또는 100 mg/m²일 수 있다. ALL을 치료하기 위해 통상 1 내지 8회(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8회)의 용량이 투여될 수 있지만, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20회 또는 그 이상 횟수의 용량이 제공될 수 있다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 방법에서의, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서의 항-CD38 항체의 투여는 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 1주, 2주, 3주, 1개월, 5주, 6주, 7주, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 또는 그 이상 후에 반복될 수 있다. 만성 투여인 바와 같이, 반복된 치료 과정이 또한 가능하다. 반복 투여는 동일한 용량으로 또는 상이한 용량으로 행해질 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 방법에서의 항-CD38 항체는 정맥내 주입에 의해 8주 동안 매주 간격으로 8 mg/㎏으로 또는 16 mg/㎏으로 투여된 후, 추가 16주 동안 2주마다 8 mg/㎏으로 또는 16 mg/㎏으로 투여된 후, 4주마다 8 mg/㎏으로 또는 16 mg/㎏으로 투여될 수 있다.

항-CD38 항체는 본 명세서에 기재된 본 발명의 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 유지 요법에 의해, 예컨대 6개월 이상의 기간 동안 주 1회 투여될 수 있다.

예를 들어, 본 명세서에 기재된 본 발명의 방법에서의, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서의 항-CD38 항체는 일일 투여량으로서, 치료 개시 후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 또는 40일 중 적어도 하나에 대해, 또는 대안적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20주 중 적어도 하나에 대해, 매 24, 12, 8, 6, 4, 또는 2시간마다의 단회 또는 분할 용량, 또는 이들의 임의의 조합을 사용하여, 1일당 약 0.1 내지 100 mg/㎏, 예컨대 0.5, 0.9, 1.0, 1.1, 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100 mg/㎏의 양으로, 또는 이들의 임의의 조합으로 제공될 수 있다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 방법에서의, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서의 항-CD38 항체는 또한 암 발생 위험을 감소시키고/시키거나, 암 진행에서의 사건의 발생의 개시를 지연시키고/시키거나, 암이 관해기에 있을 때 재발 위험을 감소시키기 위하여 예방적으로 투여될 수 있다. 이는 다른 생물학적 인자들로 인해 존재하는 것으로 알려진 종양의 위치를 찾는 것이 어려운 환자에서 특히 유용할 수 있다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 방법에서의, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서의 항-CD38 항체는 저장 동안 동결건조되고 사용 전에 적합한 담체 중에 재구성될 수 있다. 이 기법은 종래의 단백질 제제에 유효한 것으로 밝혀져 있으며, 잘 알려진 동결건조 및 재구성 기법이 사용될 수 있다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 방법에서의, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서의 항-CD38 항체는 빈크리스틴과 병용하여 투여될 수 있다.

빈크리스틴은, 예를 들어 약 0.1 내지 2 mg/㎏ 단회 용량 i.p., 예를 들어 0.1 내지 0.5 mg/㎏ 단회 용량 i.p, 예를 들어 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9 또는 2.0 mg/㎏으로 투여될 수 있다. 빈크리스틴은 i.v. 주입으로 제공될 수 있다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 방법에서, 그리고 하기에 열거된 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나의 일부 실시 형태에서, 항-CD38 항체와 빈크리스틴의 병용물은 임의의 편리한 시간프레임에 걸쳐 투여될 수 있다. 예를 들어, 항-CD38 항체 및 빈크리스틴은 동일한 날에, 그리고 심지어는 동일한 정맥내 주입으로 환자에게 투여될 수 있다. 그러나, 항-CD38 항체 및 빈크리스틴은 또한 하루씩 교대로, 또는 1주씩 또는 1개월씩 교대로, 기타 등등으로 투여될 수 있다. 일부 방법에서, 항-CD38 항체 및 빈크리스틴은 치료되고 있는 환자에서 이들이 검출가능한 수준으로 (예를 들어, 혈청 중에) 동시에 존재하기에 충분한 시간 근접성을 두고서 투여될 수 있다. 일부 방법에서, 일정 기간에 걸쳐 다회의 용량들로 이루어진 항-CD38 항체에 의한 전체 치료 과정 이후에 또는 이전에는 다회의 용량들로 이루어진 빈크리스틴에 의한 치료 과정이 행해진다. 1일, 2일 또는 수 일 또는 1주 2주 또는 수 주의 회복 기간이 항-CD38 항체와 빈크리스틴의 투여 사이에 사용될 수 있다.

항-CD38 항체 또는 항-CD38 항체와 빈크리스틴의 병용물은 외부 빔 방사, 세기 조절 방사선 요법(intensity modulated radiation therapy, IMRT) 및 임의의 형태의 방사선 수술 - 감마 나이프(Gamma Knife), 사이버나이프(Cyberknife), 리낙(Linac), 및 조직내 방사(interstitial radiation)(예를 들어, 이식된 방사성 시드, 글리아사이트 벌룬(GliaSite balloon))를 포함함 - 을 포함하는 임의의 형태의 방사선 요법과 함께 그리고/또는 수술과 함께 투여될 수 있다.

본 발명을 일반적인 개념으로 설명하였지만, 본 발명의 실시 형태는 하기 실시예에서 추가로 개시될 것이며, 이때 실시예는 청구범위의 범주를 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다.

본 발명의 추가의 실시 형태

본 명세서의 어딘가 다른 곳에 있는 본 개시내용에 따른 본 발명의 소정의 추가 실시 형태들이 하기에 열거되어 있다. 본 명세서에 개시된 본 발명과 관련된 것으로서 기재된 상기에 열거된 본 발명의 실시 형태들로부터의 특징은 또한 이들 추가의 넘버링된 실시 형태들 각각 하나하나와 관련된다.

1. 급성 림프아구성 백혈병(ALL)을 갖는 대상체를 치료하는 데 사용하기 위한, 항-CD38 항체.

2. 빈크리스틴과 병용하여, ALL을 갖는 대상체를 치료하는 데 사용하기 위한, 항-CD38 항체.

3. 항-CD38 항체와 병용하여, ALL을 갖는 대상체를 치료하는 데 사용하기 위한, 빈크리스틴.

4. 3. ALL을 갖는 대상체를 치료하는 데 사용하기 위한, 항-CD38 항체와 빈크리스틴의 병용물.

5. 항-CD38 항체는, CD38에 결합하기 위하여, 서열 번호 4의 중쇄 가변 영역(VH) 및 서열 번호 5의 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 항체와 경쟁하는, 실시 형태 1 또는 실시 형태 2에 따라 사용하기 위한 항-CD38 항체, 실시 형태 3에 따라 사용하기 위한 빈크리스틴, 또는 실시 형태 4에 따른 병용물.

6. 항-CD38 항체는 항체-의존성 세포-매개성 세포독성(ADCC), 항체-의존성 세포 식작용(ADCP), 보체 의존성 세포독성(CDC), 세포자멸, 또는 CD38 효소 활성의 시험관내 조절에 의해 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도하며, 바람직하게는 항-CD38 항체는 ADCC 또는 CDC에 의해 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도하는, 실시 형태 1, 실시 형태 2 또는 실시 형태 5에 따라 사용하기 위한 항-CD38 항체, 실시 형태 3 또는 실시 형태 5에 따라 사용하기 위한 빈크리스틴, 또는 실시 형태 4 또는 실시 형태 5에 따른 병용물.

7. 항-CD38 항체는 인간 CD38(서열 번호 1)의 영역 SKRNIQFSCKNIYR(서열 번호 2) 및 영역 EKVQTLEAWVIHGG(서열 번호 3)에 결합하는, 실시 형태 1, 실시 형태 2, 실시 형태 5 또는 실시 형태 6에 따라 사용하기 위한 항-CD38 항체, 실시 형태 3, 실시 형태 5 또는 실시 형태 6에 따라 사용하기 위한 빈크리스틴, 또는 실시 형태 4 내지 실시 형태 6에 따른 병용물.

8. 항-CD38 항체는

a. IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 동종형을 갖거나;

b. 푸코스 함량이 약 50%, 40%, 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11% 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% 또는 0%인 바이안테나리 글리칸 구조를 갖거나; 또는

c. 항체 Fc 내의 아미노산 위치 256, 290, 298, 312, 356, 330, 333, 334, 360, 378 또는 430 - 이때, 잔기 넘버링은 EU 인덱스에 따름 - 에서의 치환을 포함하는, 실시 형태 1, 실시 형태 2, 실시 형태 5 내지 실시 형태 7에 따라 사용하기 위한 항-CD38 항체, 실시 형태 3, 실시 형태 5 내지 실시 형태 7에 따라 사용하기 위한 빈크리스틴, 또는 실시 형태 4 내지 실시 형태 7에 따른 병용물.

9. 항-CD38 항체는

a. 각각 서열 번호 6, 7 및 8의 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR) 1(HCDR1), 2(HCDR2) 및 3(HCDR3) 서열;

b. 각각 서열 번호 9, 10 및 11의 경쇄 상보성 결정 영역(LCDR) 1(LCDR1), 2(LCDR2) 및 3(LCDR3) 서열;

c. 서열 번호 4의 중쇄 가변 영역(VH) 및 서열 번호 5의 경쇄 가변 영역(VL);

d. 서열 번호 12의 아미노산 서열과 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열 번호 13의 아미노산 서열과 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄; 또는

e. 서열 번호 12의 중쇄 및 서열 번호 13의 경쇄를 포함하는, 실시 형태 1, 실시 형태 2, 실시 형태 5 내지 실시 형태 8에 따라 사용하기 위한 항-CD38 항체, 실시 형태 3, 실시 형태 5 내지 실시 형태 8에 따라 사용하기 위한 빈크리스틴, 또는 실시 형태 4 내지 실시 형태 8에 따른 병용물.

10. ALL은 B-세포 계통 ALL, T-세포 계통 ALL, 성인 ALL, 소아 ALL, 불응성 ALL 또는 재발성 ALL인, 실시 형태 1, 실시 형태 2, 실시 형태 5 내지 실시 형태 9에 따라 사용하기 위한 항-CD38 항체, 실시 형태 3, 실시 형태 5 내지 실시 형태 9에 따라 사용하기 위한 빈크리스틴, 또는 실시 형태 4 내지 실시 형태 9에 따른 병용물.

11. 항-CD38 항체는 관해 유도로서 또는 유도 후 요법으로서 투여되는, 실시 형태 1, 실시 형태 2, 실시 형태 5 내지 실시 형태 10에 따라 사용하기 위한 항-CD38 항체, 실시 형태 3, 실시 형태 5 내지 실시 형태 10에 따라 사용하기 위한 빈크리스틴, 또는 실시 형태 4 내지 실시 형태 10에 따른 병용물.

12. 대상체는

a. 적어도 약 1 × 10⁹/L의 백혈구 카운트를 갖거나; 또는

b. 필라델피아 염색체를 갖는 ALL 세포를 갖는, 실시 형태 1, 실시 형태 2, 실시 형태 5 내지 실시 형태 11에 따라 사용하기 위한 항-CD38 항체, 실시 형태 3, 실시 형태 5 내지 실시 형태 11에 따라 사용하기 위한 빈크리스틴, 또는 실시 형태 4 내지 실시 형태 11에 따른 병용물.

13. BCR-ABL 키나제 억제제는 이마티닙, 다사티닙, 닐로티닙, 보수티닙, 포나티닙, 바페티닙, 사라카티닙, 토자세르팁, 다누세르팁 또는 이브루티닙인, 실시 형태 1, 실시 형태 2, 실시 형태 5 내지 실시 형태 12에 따라 사용하기 위한 항-CD38 항체, 실시 형태 3, 실시 형태 5 내지 실시 형태 12에 따라 사용하기 위한 빈크리스틴, 또는 실시 형태 4 내지 실시 형태 12에 따른 병용물.

14. 항-CD38 항체와 빈크리스틴이 동시에, 순차적으로 또는 개별적으로 투여되는, 실시 형태 1, 실시 형태 2, 실시 형태 5 내지 실시 형태 13에 따라 사용하기 위한 항-CD38 항체, 실시 형태 3, 실시 형태 5 내지 실시 형태 13에 따라 사용하기 위한 빈크리스틴, 또는 실시 형태 4 내지 실시 형태 13에 따른 병용물.

15.

a. 대상체는 방사선 요법으로 추가로 치료되거나 그로 치료되었거나; 또는

b. 대상체는 조혈 줄기 세포 이식을 받은, 실시 형태 1, 실시 형태 2, 실시 형태 5 내지 실시 형태 14에 따라 사용하기 위한 항-CD38 항체, 실시 형태 3, 실시 형태 5 내지 실시 형태 14에 따라 사용하기 위한 빈크리스틴, 또는 실시 형태 4 내지 실시 형태 14에 따른 병용물.

실시예 1. 환자-유래 ALL 모델에서의 다라투무맙의 효능

방법

환자 종양 모델 ALL 7015 및 ALL 7473을 이 연구에 사용하였다.

ALL 7015 모델: B 세포 계통 ALL을 갖는 17세 여성으로부터 종양을 절제하였다. 백혈구 카운트(WBC)는 98 × 10⁹/L이고, 헤모글로빈(HB)은 101 g/L이고, 혈소판 카운트(plt)는 24 × 10⁹/L였다. 필라델피아 염색체가 재배열 BCR/ABL-P210 (t9;22)(q34:q11)을 갖는 종양 세포에서 분명히 나타났다. 종양 세포는 다음 재배열에 대해 음성이었다: TEL/AML1, E2A/PBX1, MLL 관련 유전자, SIL/TAL1, IgH. 윌름(Wilm) 종양 1 유전자(WT1) 대 ABL 유전자의 발현비(WT1/ABL)는 1.2%였다. 95%의 원시 림프구를 갖는 등급 1 과형성이 골수에서 분명히 나타났다. 비정상 골수 세포의 92.8%가 CD38을 발현하였다.

ALL 7473 모델: T 세포 계통 ALL을 갖는 35세 남성으로부터 종양을 절제하였다. WBC는 7.4 × 10⁹/L이고, HB는 112 g/L이고, plt는 73 × 10⁹/L였다. 종양 세포는 다음 염색체 재배열에 대해 음성이었다: BCR/ABL. SIL/TAL, MLL 관련 유전자, TCRδ. WT1/ABL은 2.0%였다. 86%의 원시 림프구를 갖는 등급 I-II 과형성이 골수에서 분명히 나타났다. 비정상 세포의 78%가 CD38을 발현하였다.

NOD/SCID(암컷, 3 내지 4주됨)에 2 × 10⁶개의 ALL-7015 또는 ALL-7473 냉동 세포를 접종하였다.동물들을 말초 혈액에서의 종양 세포의 출현에 대하여 매 3 내지 4일마다 평가하였다. 혈액 중의 종양 부하가 지정된 수준(ALL 7015: 약 4.2% 및 ALL 7473: 약 0.5%)에 도달했을 때 처리를 개시하였다. 유세포측정(flow cytometry)에 의해 종양 부하(TB)를 주 1회 측정하였으며, 후완와 출혈(retro-orbital bleed)로부터 얻어진 말초 혈액 중의 CD45⁺CD38⁺ 세포의 백분율로서 측정하였다. 동물들을 또한 이환율 및 사망률에 대해 매일 모니터링하였다. 사망 및 관찰된 임상 징후를 각각의 하위세트 내의 동물들의 마리수에 기초하여 기록하였다.

처리들 사이의 잠재적인 치료적 효과의 통계학적 분석을 이원분산분석(two-way ANOVA)에 의해 분석하였다. p 값 < 0.05인 모든 데이터를 통계학적으로 유의한 것으로 고려하였다.

도 1은 ALL 7015 모델에서의 다라투무맙의 효능을 나타내고, 도 2는 ALL 7473 모델에서의 다라투무맙의 효능을 나타낸다. 표 1은 ALL 7015 모델에서의 상이한 시점에서의 종양 부하를 나타낸다.10 mg/㎏의 다라투무맙에 의한 처리는 동종형 대조군으로 처리된 마우스와 비교하여 일수 29, 일수 36 및 일수 43에서 유의한 종양 성장 억제를 가져왔다.

[표 1]

표 2는 ALL 7015 모델에서의 상이한 시점에서의 종양 부하를 나타낸다. 다라투무맙에 의한 마우스의 처리는 대조군 항체로 처리된 마우스와 비교하여 유의한 종양 성장 억제를 보여주었다.

[표 2]

실시예 2. 세포주-유래 전(pre)-B 세포 ALL 모델에서의 다라투무맙의 효능

종양 발생을 위하여 100 μL의 PBS 중 1×10⁵개의 세포주 NALM-6 종양 세포를 CB17 SCID 마우스에 꼬리 정맥을 통해 정맥내 접종하였다. 종양 세포 접종 일자는 일수 0으로 표기한다. 동물들을 4개의 처리군으로 나누고, 표 3에 기재된 바와 같은 투여량으로 다라투무맙, 빈크리스틴, 또는 빈크리스틴과 병용한 다라투무맙을 투여하였다. ALL이 재발된 10세 남아의 말초 혈액으로부터 NALM-6 세포주(ACC128, DZMZ)를 확립한다. 세포주의 핵형은 46(43-47)<2n>XY, t(5;12)(q33.2;p13.2)이다.

[표 3]

종점: 주요 종점은 동물 생존이었다. 각각의 마우스를 매일 평가하였으며, 악화 및 빈사 상태를 보여준 마우스(유의한 체중 손실을 가진 동물들: 체중 손실 > 20%) 및 적절한 먹이 또는 물에 접근할 수 없던 동물들은 CO₂로 안락사시켰다. 모든 동물들의 생존을 추적하였으며, 각각의 집단에 대해 중위 생존 시간(MST)을 계산하였다. 주당 2회 체중을 측정하였다. 비히클군의 중위 생존의 최대 2배 후에 생존한 마우스를 희생시켰다. 게다가, 종료 시에 부검을 수행하여 종양 진행을 확인하였다.

결과 단독으로의(단제요법으로서의) 또는 표준 치료(빈크리스틴)와 병용한 상태로의 다라투무맙에 의한 마우스의 처리는 대조군 또는 빈크리스틴 단독으로 처리된 마우스와 비교하여 생존의 유의한 연장을 보여주었다(도 3).

SEQUENCE LISTING <110> Doshi, Parul <120> Anti-CD38 antibodies for the treatment of acute lymphoblastic leukemia <130> JBI5044WOPCT <150> 61946008 <151> 2014-02-28 <150> 62004540 <151> 2014-05-29 <160> 14 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 300 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Ala Asn Cys Glu Phe Ser Pro Val Ser Gly Asp Lys Pro Cys Cys 1 5 10 15 Arg Leu Ser Arg Arg Ala Gln Leu Cys Leu Gly Val Ser Ile Leu Val 20 25 30 Leu Ile Leu Val Val Val Leu Ala Val Val Val Pro Arg Trp Arg Gln 35 40 45 Gln Trp Ser Gly Pro Gly Thr Thr Lys Arg Phe Pro Glu Thr Val Leu 50 55 60 Ala Arg Cys Val Lys Tyr Thr Glu Ile His Pro Glu Met Arg His Val 65 70 75 80 Asp Cys Gln Ser Val Trp Asp Ala Phe Lys Gly Ala Phe Ile Ser Lys 85 90 95 His Pro Cys Asn Ile Thr Glu Glu Asp Tyr Gln Pro Leu Met Lys Leu 100 105 110 Gly Thr Gln Thr Val Pro Cys Asn Lys Ile Leu Leu Trp Ser Arg Ile 115 120 125 Lys Asp Leu Ala His Gln Phe Thr Gln Val Gln Arg Asp Met Phe Thr 130 135 140 Leu Glu Asp Thr Leu Leu Gly Tyr Leu Ala Asp Asp Leu Thr Trp Cys 145 150 155 160 Gly Glu Phe Asn Thr Ser Lys Ile Asn Tyr Gln Ser Cys Pro Asp Trp 165 170 175 Arg Lys Asp Cys Ser Asn Asn Pro Val Ser Val Phe Trp Lys Thr Val 180 185 190 Ser Arg Arg Phe Ala Glu Ala Ala Cys Asp Val Val His Val Met Leu 195 200 205 Asn Gly Ser Arg Ser Lys Ile Phe Asp Lys Asn Ser Thr Phe Gly Ser 210 215 220 Val Glu Val His Asn Leu Gln Pro Glu Lys Val Gln Thr Leu Glu Ala 225 230 235 240 Trp Val Ile His Gly Gly Arg Glu Asp Ser Arg Asp Leu Cys Gln Asp 245 250 255 Pro Thr Ile Lys Glu Leu Glu Ser Ile Ile Ser Lys Arg Asn Ile Gln 260 265 270 Phe Ser Cys Lys Asn Ile Tyr Arg Pro Asp Lys Phe Leu Gln Cys Val 275 280 285 Lys Asn Pro Glu Asp Ser Ser Cys Thr Ser Glu Ile 290 295 300 <210> 2 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Ser Lys Arg Asn Ile Gln Phe Ser Cys Lys Asn Ile Tyr Arg 1 5 10 <210> 3 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3 Glu Lys Val Gln Thr Leu Glu Ala Trp Val Ile His Gly Gly 1 5 10 <210> 4 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 005 mAb VH <400> 4 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Asn Ser Phe 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Lys Ile Leu Trp Phe Gly Glu Pro Val Phe Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 5 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 005 mAb VL <400> 5 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 6 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 005 mAb HCDR1 <400> 6 Ser Phe Ala Met Ser 1 5 <210> 7 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 005 mAb HCDR2 <400> 7 Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 8 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 005 mAb HCDR3 <400> 8 Asp Lys Ile Leu Trp Phe Gly Glu Pro Val Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 9 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 005 mAb LCDR1 <400> 9 Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 10 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 005 mAb LCDR2 <400> 10 Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr 1 5 <210> 11 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 005 mAb LCDR3 <400> 11 Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Pro Thr Phe 1 5 10 <210> 12 <211> 452 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 005 mAb heavy chain <400> 12 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Asn Ser Phe 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Lys Ile Leu Trp Phe Gly Glu Pro Val Phe Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser 210 215 220 Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 225 230 235 240 Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 245 250 255 Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 260 265 270 His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 275 280 285 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 290 295 300 Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 305 310 315 320 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 325 330 335 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 340 345 350 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val 355 360 365 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 370 375 380 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 385 390 395 400 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 405 410 415 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 420 425 430 Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 435 440 445 Ser Pro Gly Lys 450 <210> 13 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 005 mAb light chain <400> 13 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 14 <211> 4 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 14 Val Gln Leu Thr 1

Claims

항-CD38 항체를 포함하는, 불응성 또는 재발성 급성 림프아구성 백혈병(ALL)의 치료를 위한 약제학적 조성물로서, 여기서 상기 조성물은 항-CD38 항체를 필요로 하는 환자에게 빈크리스틴(vincristine)과 병용하여 투여되고,
여기서, 상기 항-CD38 항체는, 각각 서열 번호 6, 7 및 8의 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR) 1(HCDR1), 2(HCDR2) 및 3(HCDR3) 서열을 포함하고,
여기서, 상기 항-CD38 항체는, 각각 서열 번호 9, 10 및 11의 경쇄 상보성 결정 영역(LCDR) 1(LCDR1), 2(LCDR2) 및 3(LCDR3) 서열을 포함하고,
여기서 상기 항-CD38 항체는 항체-의존성 세포-매개성 세포독성(ADCC), 항체-의존성 세포 식작용(ADCP), 보체 의존성 세포독성(CDC), 세포자멸, 또는 CD38 효소 활성의 시험관내(in vitro) 조절에 의해 ALL 세포의 시험관내 사멸을 유도하는 것인, 약제학적 조성물