KR20210102373A - 피리미딘 화합물 또는 그 염 - Google Patents

Abstract

HER2 활성을 저해하고, 뇌이행성을 나타내는 신규 피리미딘 화합물 또는 그 염, 및 이것을 함유하는 의약 조성물을 제공한다. 하기 일반식 (Ⅰ) 로 나타내는 화합물 또는 그 염.

(식 중, R₁ 은, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 가져도 되는 C1 - C4 알킬기, 또는 C3 - C4 시클로알킬기를 나타내고 ; R₂ 는, 수소 원자, 할로겐 원자, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기 혹은 불소 원자를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기, 또는 C1 - C6 알콕시기를 나타내며 ; R₃ 은, 수소 원자, 또는 치환기로서 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기를 나타내고 ; R₄ 는, 수소 원자, 또는 C1 - C4 알킬기를 나타내고 ; R₅ 는, 불소 원자 및 염소 원자에서 선택되는 치환기를 1 내지 3 개 가져도 되는 페닐기를 나타낸다.)

Description

피리미딘 화합물 또는 그 염

본 발명은 HER2 저해 활성을 갖는 신규 피리미딘 화합물 또는 그 염, 및 이것을 유효 성분으로서 함유하는 의약 조성물에 관한 것이다.

HER2 (ErbB2 라고도 불린다) 는, ErbB 패밀리에 속하는 수용체형 티로신 키나아제이다.

HER2 는, 암 원인 유전자로 생각되고, HER2 의 유전자 증폭이나 과잉 발현, 변이 등이 다양한 암으로 보고되어 있다. 비임상·임상 연구 데이터로부터, 이들 HER2 의 유전자 이상·과잉 발현 등을 수반하는 암 세포에 있어서, HER2 및 하류 시그널의 활성화가, 암세포의 생존·증식 등에 있어서 중요한 역할을 담당하고 있다고 생각되고 있다 (비특허문헌 1).

따라서, HER2 의 키나아제 활성을 제어할 수 있는 저해제는, HER2 의 유전자 증폭이나 과잉 발현, 변이를 갖는 암세포에 있어서, HER2 및 하류 시그널 전달을 저해함으로써 항종양 효과를 발휘하는 것이 상정되기 때문에, 암환자의 치료, 연명이나 QOL 향상에 유용하다고 생각된다.

폐암에서는 약 25 ∼ 40 ％, 유방암에서는 약 15 ∼ 30 ％, 그 밖에 복수의 암에 있어서도 일정한 비율로 뇌전이를 일으킨다는 보고가 있다 (비특허문헌 2, 3). 실제로, HER2 양성의 유방암에서는, 약 20 ∼ 30 ％ 가 뇌전이를 일으킨다는 보고가 있다 (비특허문헌 4).

HER2 저해 활성을 갖는 화합물로는, 라파티닙 (Lapatinib), 네라티닙 (Neratinib) 등이 HER2 양성 유방암에 대한 치료제로서 승인되어 있다. 그러나, 어느 것이나 p-gp, Bcrp 의 기질인 점에서, 비임상 시험에서는 뇌이행성은 한정적이라는 보고가 있다 (비특허문헌 5). 실제로, 라파티닙나 네라티닙의 임상 시험에 있어서, 뇌전이암에 대한 충분한 효과는 얻어지고 있지 않다 (비특허문헌 6, 7, 8, 9).

뇌전이소(巢) 도 포함한 병태의 컨트롤이라는 관점에서, HER2 에 대해서 저해 활성을 가지며, 또한, 뇌이행성도 갖는 HER2 저해제가 요망되고 있다.

HER2 변이의 하나인 HER2ex20ins 변이는, 폐암 등에서 활성화 변이로서 보고 되어 있고 (비특허문헌 10), 복수의 치험이 실시되고 있지만, 여전히 치료법은 확립되어 있지 않은 상황이다. 따라서, HER2ex20ins 변이에 대해서 저해 활성을 갖는 HER2 저해제가 요구되고 있다.

국제 공개 제2017/146116호 국제 공개 제2017/038838호

Cancer Treatment Reviews, 40, p.770-780 (2014) Current Oncology, 25, p.S103-S114 (2018) Breast Cancer Reseach, 18 (1), 8, p.1-9 (2016) Journal of Clinical Oncology, 28, p3271-3277 (2010) Journal of Medicinal Chemistry, 59, p10030-10066 (2016) Journal of Medicinal Chemistry, 26, p2999-3005 (2008) Journal of Clinical Oncology, 26, p1993-1999 (2008) Journal of Clinical Oncology, 28, p1301-1307 (2010) Journal of Clinical Oncology, 34, p945-952 (2016) Proc Natl Acad Sci USA., 106, p474-479 (2009)

본 발명의 과제는, HER2 활성을 저해하고, 뇌이행성을 나타내는 신규 피리미딘 화합물 또는 그 염, 및 이것을 함유하는 의약 조성물을 제공하는 것에 있다.

본 발명자들은, 예의 탐색한 결과, 피리미딘을 기본 골격으로 하는 하기 식 (Ⅰ) 로 나타내는 신규 화합물을 알아내었다. 이들 화합물은, 피롤로[2,3-d]피리미딘을 기본 골격으로 하고, 그 5 위치가 카르복사미드로 치환되고, 그리고 6 위치가 알킨으로 치환되며, 또한 7 위치에는 아크릴아미드로 치환된 피롤리딘기를 갖는 구조를 특징으로 하는 신규 화합물이다.

즉, 본 발명의 일 형태는, 다음의 [1] ∼ [25] 를 제공한다.

[1] 하기 일반식 (Ⅰ)

[화학식 1]

(식 중, R₁ 은, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 가져도 되는 C1 - C4 알킬기, 또는 C3 - C4 시클로알킬기를 나타내고 ;

R₂ 는, 수소 원자, 할로겐 원자, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기 혹은 불소 원자를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기, 또는 C1 - C6 알콕시기를 나타내며 ;

R₃ 은, 수소 원자, 또는 치환기로서 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기를 나타내고 ;

R₄ 는, 수소 원자, 또는 C1 - C4 알킬기를 나타내고 ;

R₅ 는, 불소 원자 및 염소 원자에서 선택되는 치환기를 1 내지 3 개 가져도 되는 페닐기를 나타낸다.)

로 나타내는 화합물 또는 그 염.

[2] 하기 일반식 (Ⅱ)

[화학식 2]

(식 중, R₁ 은, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 가져도 되는 C1 - C4 알킬기, 또는 C3 - C4 시클로알킬기를 나타내고 ;

R₂ 는, 수소 원자, 할로겐 원자, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기 혹은 불소 원자를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기, 또는 C1 - C6 알콕시기를 나타내며 ;

R₃ 은, 수소 원자, 또는 치환기로서 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기를 나타내고 ;

R₄ 는, 수소 원자, 또는 C1 - C4 알킬기를 나타내고 ;

R₅ 는, 불소 원자 및 염소 원자로 이루어지는 군에서 선택되는 치환기를 1 내지 3 개 가져도 되는 페닐기를 나타낸다.)

로 나타내는, [1] 에 기재된 화합물 또는 그 염.

[3] R₂ 가, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기인, [1] 또는 [2] 에 기재된 화합물 또는 그 염.

[4] R₃ 이, 치환기로서 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기인, [1] ∼ [3] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[5] R₅ 가, 불소 원자 및 염소 원자로 이루어지는 군에서 선택되는 치환기를 1 또는 2 개 가져도 되는 페닐기인, [1] ∼ [4] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[6] R₁ 이, 메틸기, tert-부틸기, 또는 시클로프로필기인, [1] ∼ [5] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[7] R₂ 가, 메틸기, 에틸기, 메톡시메틸기, 또는 에톡시메틸기인, [1] ∼ [6] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[8] R₃ 이, 메틸기인, [1] ∼ [7] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[9] R₄ 가, 수소 원자인, [1] ∼ [8] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[10] R₅ 가, 페닐기인, [1] ∼ [9] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[11] 화합물이, 이하의 (1) ∼ (3) 에서 선택되는 화합물인, [1] ∼ [10] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

(1) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-페닐에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(2) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(3) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(3,3-디메틸부티-1-인-1-일)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

[12] [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염을 함유하는 의약 조성물.

[13] [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염을 유효 성분으로 하는 항종양제.

[14] [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염을 유효 성분으로 하는 경구 투여용의 항종양제.

[15] 의약 조성물을 제조하기 위한 [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염의 사용.

[16] 항종양제를 제조하기 위한 [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염의 사용.

[17] 경구 투여용의 항종양제를 제조하기 위한 [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염의 사용.

[18] 의약으로서 사용하기 위한 [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[19] 종양의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[20] 경구 투여하여 종양의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[21] 종양의 예방 및/또는 치료 방법으로서, 그것을 필요로 하는 대상에, [1] ∼ [12] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 방법.

[22] 원발성 뇌종양 또는 전이성 뇌종양 (예를 들어, 폐암, 유방암, 위암, 결장 직장암, 방광암, 담도암, 자궁암, 식도암, 두경부암 등의 뇌전이) 의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[23] 원발성 뇌종양 또는 전이성 뇌종양 (예를 들어, 폐암, 유방암, 위암, 결장 직장암, 방광암, 담도암, 자궁암, 식도암, 두경부암 등의 뇌전이) 의 예방 및/또는 치료에 사용하는 의약 조성물을 제조하기 위한 [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염의 사용.

[24] 원발성 뇌종양 또는 전이성 뇌종양 (예를 들어, 폐암, 유방암, 위암, 결장 직장암, 방광암, 담도암, 자궁암, 식도암, 두경부암 등의 뇌전이) 의 예방 또는 치료에 사용하는 의약으로서 사용하기 위한 [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[25] 원발성 뇌종양 또는 전이성 뇌종양 (예를 들어, 폐암, 유방암, 위암, 결장 직장암, 방광암, 담도암, 자궁암, 식도암, 두경부암 등의 뇌전이) 의 예방 및/또는 치료 방법으로서, 그것을 필요로 하는 대상에, [1] ∼ [11] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 방법.

본 발명은 이하의 1 이상의 효과를 갖는다.

(1) 본 발명에 의하면, 뇌이행성을 갖는 HER2 저해제로서 유용한 상기 일반식 (Ⅰ) 로 나타내는 신규 화합물, 그 염, 의약 조성물, 항종양제, 또는 경구 투여용의 항종양제가 제공된다.

(2) 본 발명의 화합물 또는 그 염은, 우수한 HER2 선택적 저해 활성을 가지며, 또한 암세포주에 대한 증식 억제 효과를 나타낸다.

(3) 본 발명의 화합물 또는 그 염은, 뇌이행성을 기대할 수 있다.

(4) 본 발명의 화합물 또는 그 염은, 위중한 부작용이 없으며, 또한 약효를 기대할 수 있다.

(5) 본 발명의 화합물 또는 그 염은, 변이형 HER2 (예를 들어 엑슨 20 의 YVMA 삽입 변이를 갖는 HER2) 에 대해서 우수한 저해 활성을 나타낸다.

(6) 본 발명의 화합물 또는 그 염은, 종양의 예방 및/또는 치료제로서 유용하다.

(7) 본 발명의 화합물 또는 그 염은, 암환자를 치료하기 위해서 유용한 상기 일반식 (Ⅰ) 로 나타내는 신규 화합물, 그 염, 의약 조성물, 항종양제, 또는 경구 투여용의 항종양제가 제공된다.

도 1 은, 실시예 2 의 화합물의 Lusiferase 유전자 도입 HER2 발현 세포주 (NCI-N87-luc) 의 뇌 직접 이식 모델에 대한 항종양 효과를 나타낸다.
도 2 는, 실시예 11 의 화합물의 Lusiferase 유전자 도입 HER2 발현 세포주 (NCI-N87-luc) 의 뇌 직접 이식 모델에 대한 항종양 효과를 나타낸다.
도 3 은, 실시예 12 의 화합물의 Lusiferase 유전자 도입 HER2 발현 세포주 (NCI-N87-luc) 의 뇌 직접 이식 모델에 대한 항종양 효과를 나타낸다.
도 4 는, 실시예 2 의 화합물의 Lusiferase 유전자 도입 HER2 발현 세포주 (NCI-N87-luc) 의 뇌 직접 이식 모델에 대한 체중 증감률을 나타낸다.
도 5 는, 실시예 11 의 화합물의 Lusiferase 유전자 도입 HER2 발현 세포주 (NCI-N87-luc) 의 뇌 직접 이식 모델에 대한 체중 증감률을 나타낸다.
도 6 은, 실시예 12 의 화합물의 Lusiferase 유전자 도입 HER2 발현 세포주 (NCI-N87-luc) 의 뇌 직접 이식 모델에 대한 체중 증감률을 나타낸다.

본 발명의 일 형태는, 하기 일반식 (Ⅰ)

[화학식 3]

로 나타내는 화합물 또는 그 염에 관한 것이다.

본 발명의 바람직한 일 형태는, 하기 일반식 (Ⅱ)

[화학식 4]

로 나타내는 화합물 또는 그 염에 관한 것이다.

본 발명의 상기 일반식 (Ⅰ) 또는 일반식 (Ⅱ) 로 나타내는 화합물은, 피롤로[2,3-d]피리미딘을 기본 구조로 하는 화합물로서, 상기한 어느 선행 기술 문헌 등에도 기재되어 있지 않은 신규 화합물이다.

본 명세서에 있어서,「할로겐 원자」로는, 구체적으로는 염소 원자, 브롬 원자, 불소 원자, 요오드원자를 들 수 있고, 바람직하게는 염소 원자, 불소 원자이며, 보다 바람직하게는 불소 원자이다.

본 명세서에 있어서,「알킬기」란, 직사슬형 혹은 분지형의 포화 탄화수소기를 나타내고, 구체적으로는 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, n-부틸기, 이소부틸기, sec-부틸기, tert-부틸기, 펜틸기, 헥실기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 탄소수 1 ∼ 4 의 직사슬형 혹은 분지형의 알킬기이며, 보다 바람직하게는 메틸기, tert-부틸기이다.

본 명세서에 있어서,「할로알킬기」란, 직사슬형 혹은 분지형의 포화 탄화수소기 중, 1 개 ∼ 모든 수소 원자가 상기한 할로겐 원자로 치환된 기를 나타내고, 구체적으로는 모노플루오로메틸기, 디플루오로메틸기, 트리플루오로메틸기, 1-플루오로에틸기, 2-플루오로에틸기, 1,1-디플루오로에틸기, 1,2-디플루오로에틸기, 2,2-디플루오로에틸기, 2,2,2-트리플루오로에틸기, 모노클로로메틸기, 디클로로메틸기, 트리클로로메틸기, 1-클로로에틸기, 2-클로로에틸기, 1,1-디클로로에틸기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 탄소수 1 ∼ 6 의 직사슬형 혹은 분지형의 포화 탄화수소기 중, 1 개 ∼ 3 개의 수소 원자가 상기한 할로겐 원자로 치환된 기이며, 보다 바람직하게는 모노플루오로메틸기이다.

본 명세서에 있어서,「시클로알킬기」란, 탄소수 3 ∼ 7 의 단고리형 혹은 다고리형의 포화 탄화수소기를 나타내고, 구체적으로는 시클로프로필기, 시클로부틸기, 시클로펜틸기, 시클로헥실기, 시클로헵틸기 등을 들 수 있으며, 바람직하게는 시클로프로필기, 시클로부틸기이다.

본 명세서에 있어서,「방향족 탄화수소기」란, 불포화 결합을 갖는 탄소 및 수소로 이루어지는 고리형의 치환기로서, 고리형의 π 전자계에 4e＋2 개 (e 는 1 이상의 정수 (整數)) 의 전자가 포함되는 치환기를 나타낸다.

본 명세서에 있어서,「C6 - C14 방향족 탄화수소기」란, 탄소수 6 ∼ 14 의 단고리형 혹은 다고리형의 방향족 탄화수소기를 나타내고, 구체적으로는 페닐기, 나프틸기, 테트라하이드로나프틸기, 안트라세닐기 등을 들 수 있으며, 바람직하게는 페닐기이다.

본 명세서에 있어서,「아르알킬기」란, 상기 방향족 탄화수소기로 치환된 상기 알킬기를 나타내고, 구체적으로는 벤질기, 페닐에틸기, 페닐프로필기, 나프틸메틸기, 나프틸에틸기 등의 C7 - C16 아르알킬기를 들 수 있으며, 바람직하게는 벤질기이다.

본 명세서에 있어서,「불포화 탄화수소기」란, 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합 혹은 삼중 결합을 포함하는 탄소수 2 ∼ 6 의 직사슬형 혹은 분지형의 탄화수소기를 나타내고, 구체적으로는 비닐기, 알릴기, 메틸비닐기, 프로페닐기, 부테닐기, 펜테닐기, 헥세닐기, 에티닐기, 2-프로피닐기 등을 들 수 있으며, 바람직하게는 비닐기, 알릴기, 1-프로페닐기이다.

본 명세서에 있어서,「알케닐기」란, 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 포함하는 탄소수 2 ∼ 6 의 직사슬형 혹은 분지형의 탄화수소기를 나타내고, 구체적으로는 비닐기, 알릴기, 2-메틸-2-프로페닐기, 이소프로페닐기, 1-, 2- 혹은 3-부테닐기, 2-, 3- 혹은 4-펜테닐기, 2-메틸-2-부테닐기, 3-메틸-2-부테닐기, 5-헥세닐기 등의 C2 - C6 알케닐기를 들 수 있으며, 바람직하게는 비닐기, 알릴기, 1-프로페닐기, 2-메틸-2-프로페닐기이다.

본 명세서에 있어서「알키닐기」로는, 삼중 결합을 적어도 1 개 (예를 들어, 1 ∼ 2 개, 바람직하게는 1 개) 갖는, 직사슬형 또는 분지 사슬형의 불포화 탄화수소기를 나타내고, 구체적으로는 에티닐기, 1- 혹은 2-프로피닐기, 1-, 2- 혹은 3-부티닐기, 1-메틸-2-프로피닐기 등의 C2 - C6 알키닐기를 들 수 있으며, 바람직하게는 에티닐기, 2-프로피닐기이다.

본 명세서에 있어서,「C3 - C10 고리형 불포화 탄화수소기」란, 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 포함하는 탄소수 3 ∼ 10 의 단고리형 혹은 다고리형의 탄화수소기를 나타내고, 구체적으로는 시클로프로페닐기, 시클로부테닐기, 시클로펜테닐기, 시클로헥세닐기, 시클로헵테닐기, 시클로옥테닐기, 시클로노닐기 등을 들 수 있으며, 바람직하게는 적어도 1 개의 탄소-탄소 이중 결합을 포함하는 탄소수 3 ∼ 7 의 단고리형 혹은 다고리형의 탄화수소기이고, 보다 바람직하게는 시클로프로페닐기이다.

본 명세서에 있어서,「알콕시기」란, 상기 알킬기를 갖는 옥시기를 나타내고, 구체적으로는 메톡시기, 에톡시기, n-프로폭시기, 이소프로폭시기, n-부톡시기, 이소부톡시기, sec-부톡시기, tert-부톡시기, 펜틸옥시기, 이소펜틸옥시기 및 헥실옥시기 등의 C1 - C6 알콕시기를 들 수 있으며, 바람직하게는 메톡시기, 에톡시기이고, 보다 바람직하게는 메톡시기이다.

본 명세서에 있어서「할로알콕시기」로는, 할로겐 원자를 적어도 1 개 (바람직하게는 1 ∼ 13 개, 보다 바람직하게는 1 ∼ 3 개) 갖는 상기 알콕시기를 나타내고, 구체적으로는 플루오로메톡시기, 디플루오로메톡시기, 트리플루오로메톡시기, 트리클로로메톡시기, 플루오로에톡시기, 1,1,1-트리플루오로에톡시기, 모노플루오로-n-프로폭시기, 퍼플루오로-n-프로폭시기, 퍼플루오로-이소프로폭시기 등의 C1 - C6 할로알콕시기를 들 수 있다.

본 명세서에 있어서「시클로알콕시기」로는, 상기 시클로알킬기를 갖는 옥시기를 나타내고, 구체적으로는 시클로프로폭시기, 시클로부톡시기, 시클로펜틸옥시기, 시클로헥실옥시기 및 시클로헵틸옥시기 등의 C3 - C7 시클로알콕시기를 들 수 있으며, 바람직하게는 시클로부톡시기, 시클로펜틸옥시기, 시클로헥실옥시기이다.

본 명세서에 있어서「아르알킬옥시기」로는, 상기 아르알킬기를 갖는 옥시기를 나타내고, 구체적으로는 벤질옥시기, 페네틸옥시기, 나프틸메틸옥시기, 플루오레닐메틸옥시기 등의 C7 - C20 아르알킬옥시기를 들 수 있으며, 바람직하게는 벤질옥시기이다.

본 명세서에 있어서「알킬티오기」로는, 상기 알킬기를 갖는 티옥시기를 나타내고, 구체적으로는 메틸티오기, 에틸티오기, n-프로필티오기, 이소프로필티오기, n-부틸티오기, 이소부틸티오기, tert-부틸티오기, n-펜틸티오기, 이소펜틸티오기, 헥실티오기 등의 C1 - C6 알킬티오기를 들 수 있으며, 바람직하게는 메틸티오기, 에틸티오기, n-프로필티오기이다.

본 명세서에 있어서「알콕시알킬기」로는, 상기 알콕시기를 적어도 1 개 갖는 알킬기를 나타내고, 구체적으로는 메톡시메틸기, 에톡시에틸기, 메톡시에틸기, 메톡시프로필기 등의 C1 - C6 알콕시-C1 - C6 알킬기를 들 수 있다.

본 명세서에 있어서,「알킬아미노기」란, 1 개 또는 2 개의 수소 원자 대신에 탄소수 1 ∼ 6 의 직사슬형 혹은 분지형의 탄화수소기로 치환된 아미노기를 나타내고, 구체적으로는 메틸아미노기, 에틸아미노기, 디메틸아미노기, 디에틸아미노기, 에틸메틸아미노기 등을 들 수 있으며, 바람직하게는 1 개 또는 2 개의 수소 원자 대신에 탄소수 1 ∼ 3 의 직사슬형 혹은 분지형의 탄화수소기로 치환된 아미노기이다.

본 명세서에 있어서,「모노알킬아미노기」란, 1 개의 수소 원자 대신에 직사슬형 혹은 분지형의 탄화수소기로 치환된 아미노기를 나타내고, 구체적으로는 메틸아미노기, 에틸아미노기, n-프로필아미노기, 이소프로필아미노기, n-부틸아미노기, 이소부틸아미노기, sec-부틸아미노기, tert-부틸아미노기, 펜틸아미노기, 헥실아미노기 등을 들 수 있으며, 바람직하게는 1 개의 수소 원자 대신에 탄소수 1 ∼ 3 의 직사슬형 혹은 분지형의 탄화수소기로 치환된 아미노기이다.

본 명세서에 있어서,「디알킬아미노기」란, 2 개의 수소 원자 대신에 탄소수 1 ∼ 6 의 직사슬형 혹은 분지형의 탄화수소기로 치환한 아미노기를 나타내고, 구체적으로는 디메틸아미노기, 디에틸아미노기, 에틸메틸아미노기 등을 들 수 있으며, 바람직하게는 2 개의 수소 원자 대신에 탄소수 1 ∼ 3 의 직사슬형 혹은 분지형의 탄화수소기로 치환된 아미노기이고, 보다 바람직하게는 디메틸아미노기이다.

본 명세서에 있어서,「아실기」란, 수소 원자 대신에 직사슬형 혹은 분지형의 탄화수소기로 치환된 포르밀기를 나타내고, 구체적으로는 아세틸기, n-프로파노일기, 이소프로파노일기, n-부티로일기, tert-부티로일기 등을 들 수 있으며, 바람직하게는 포르밀기의 수소 원자 대신에 탄소수 1 ∼ 3 의 직사슬형 혹은 분지형의 탄화수소기로 치환된 기이고, 보다 바람직하게는 아세틸기이다.

본 명세서에 있어서「아실옥시기」는, 상기 아실기를 갖는 옥시기를 나타내고, 구체적으로는 알킬카르보닐옥시기 또는 아릴카르보닐옥시기를 들 수 있으며, 바람직하게는 포르밀기의 수소 원자 대신에 탄소수 1 ∼ 3 의 직사슬형 혹은 분지형의 탄화수소기로 치환된 옥시기이고, 바람직하게는 알킬카르보닐옥시기이다.

본 명세서에 있어서「알콕시카르보닐기」로는, 상기 알콕시기를 갖는 카르보닐기를 나타내고, 구체적으로는 메톡시카르보닐기, 에톡시카르보닐기, 프로폭시카르보닐기, 이소프로폭시카르보닐기, 부톡시카르보닐기, 이소부톡시카르보닐기, tert-부톡시카르보닐기, 펜틸옥시카르보닐기, 이소펜틸옥시카르보닐기 및 헥실옥시카르보닐기 등의 (C1 - C6 알콕시)카르보닐기를 들 수 있으며, 바람직하게는 tert-부톡시카르보닐기이다.

본 명세서에 있어서「아르알킬옥시카르보닐기」로는, 상기 아르알킬옥시를 갖는 카르보닐기를 나타내고, 구체적으로는 벤질옥시카르보닐기, 페네틸옥시카르보닐기, 나프틸메틸옥시카르보닐기, 플루오레닐메틸옥시카르보닐기 등의 (C6 - C20 아르알킬)옥시카르보닐기를 들 수 있으며, 바람직하게는 벤질옥시카르보닐기이다.

본 명세서에 있어서「포화 복소 고리기」로는, 질소 원자, 산소 원자 및 황 원자에서 선택되는 헤테로 원자를 적어도 1 개 (바람직하게는 1 ∼ 5 개, 보다 바람직하게는 1 ∼ 3 개) 갖는 단고리형 혹은 다고리형의 포화의 복소 고리기를 나타내고, 구체적으로는 아지리디닐기, 아제티디닐기, 이미다졸리디닐기, 모르폴리노기, 피롤리디닐기, 피페리디닐기, 피페라지닐기, 테트라하이드로푸라닐기, 테트라하이드로피라닐기, 테트라하이드로티오페닐기, 티아졸리디닐기, 옥사졸리디닐기 등을 들 수 있으며, 바람직하게는 아제티디닐기, 피롤리디닐기, 피페리디닐기이고, 보다 바람직하게는 아제티디닐기, 피롤리디닐기이다.

본 명세서에 있어서「불포화 복소 고리기」로는, 질소 원자, 산소 원자 및 황 원자에서 선택되는 헤테로 원자를 적어도 1 개 (바람직하게는 1 ∼ 5 개, 보다 바람직하게는 1 ∼ 3 개) 갖는 단고리형 혹은 다고리형의 완전 불포화 또는 부분 불포화의 복소 고리기를 나타내고, 구체적으로는 이미다졸릴기, 티에닐기, 피롤릴기, 옥사졸릴기, 이소옥사졸릴기, 티아졸릴기, 이소티아졸릴기, 티아디아졸릴기, 옥사디아졸릴기, 피라졸릴기, 트리아졸릴기, 테트라졸릴기, 피리딜기, 피라질기, 피리미디닐기, 피리다지닐기, 인돌릴기, 이소인돌릴기, 인다졸릴기, 트리아조피리딜기, 벤조이미다졸릴기, 벤조옥사졸릴기, 벤조티아졸릴기, 벤조티에닐기, 푸라닐기, 벤조푸라닐기, 프리닐기, 퀴놀릴기, 이소퀴놀릴기, 퀴나졸리닐기, 퀴녹살릴기, 메틸렌디옥시페닐기, 에틸렌디옥시페닐기, 디하이드로벤조푸라닐기 등을 들 수 있으며, 바람직하게는 이미다졸릴기, 피라졸릴기, 티아졸릴기, 이소옥사졸릴기, 푸라닐기이고, 보다 바람직하게는 이미다졸릴기, 피라졸릴기, 티아졸릴기이고, 가장 바람직하게는 이미다졸릴기이다.

본 명세서에 있어서「포화 복소 고리 옥시기」로는, 상기 포화 복소 고리기를 갖는 옥시기를 나타내고, 구체적으로는 모르폴리닐옥시기, 1-피롤리디닐옥시기, 피페리디노옥시기, 피페라지닐옥시기, 4-메틸-1-피페라지닐옥시기, 테트라하이드로푸라닐옥시기, 테트라하이드로피라닐옥시기, 테트라하이드로티오페닐옥시기, 티아졸리디닐옥시기, 옥사졸리디닐옥시기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 1-피롤리디닐옥시기, 피페리디노옥시기, 피페라지닐옥시기이다.

본 발명의 일반식 (Ⅰ) 또는 일반식 (Ⅱ) 로 나타내는 화합물에 있어서, R₁ 은, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 가져도 되는 C1 - C4 알킬기, 또는 C3 - C4 시클로알킬기이다.

R₁ 로 나타내어지는「치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 가져도 되는 C1 - C4 알킬기」에 있어서의「C1 - C4 알콕시기」로는, 바람직하게는 메톡시기, 또는 에톡시기이고, 가장 바람직하게는 메톡시기이다. 여기서 치환기의 개수는, 바람직하게는 1 내지 3 개이고, 가장 바람직하게는 1 개이다. 치환기가 2 개 이상인 경우, 치환기는 동일 또는 상이해도 된다.

R₁ 로 나타내어지는「치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 가져도 되는 C1 - C4 알킬기」에 있어서의「C1 - C4 알킬기」로는, 바람직하게는 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, 또는 tert-부틸기이고, 보다 바람직하게는 메틸기, 에틸기, 이소프로필기, 또는 tert-부틸기이며, 가장 바람직하게는 메틸기, 또는 tert-부틸기이다.

R₁ 로 나타내어지는「치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 가져도 되는 C1 - C4 알킬기」로는, 바람직하게는 치환기로서 메톡시기를 1 내지 3 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기이고, 보다 바람직하게는 메틸기, 에틸기, 이소프로필기, tert-부틸기, 또는 1-메틸-1-메톡시에틸기이며, 가장 바람직하게는 메틸기, 또는 tert-부틸기이다.

R₁ 로 나타내어지는「C3 - C4 시클로알킬기」로는, 바람직하게는 시클로프로필기, 또는 시클로부틸기이고, 가장 바람직하게는 시클로프로필기이다.

R₁ 은, 바람직하게는, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 1 내지 3 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기, 또는 C3 - C4 시클로알킬기이다.

R₁ 은, 보다 바람직하게는, 치환기로서 메톡시기를 1 내지 3 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기, 또는 C3 - C4 시클로알킬기이다.

R₁ 은, 보다 바람직하게는, 메틸기, 에틸기, 이소프로필기, tert-부틸기, 1-메틸-1-메톡시에틸기, 또는 시클로프로필기이다.

R₁ 은, 가장 바람직하게는, 메틸기, tert-부틸기, 또는 시클로프로필기이다.

본 발명의 일반식 (Ⅰ) 또는 일반식 (Ⅱ) 로 나타내는 화합물에 있어서, R₂ 는, 수소 원자, 할로겐 원자, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기 혹은 불소 원자를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기, 또는 C1 - C6 알콕시기이다.

R₂ 로 나타내어지는「할로겐 원자」로는, 바람직하게는 불소 원자 또는 염소 원자이다.

R₂ 로 나타내어지는「치환기로서 C1 - C4 알콕시기 혹은 불소 원자를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기」의「C1 - C4 알콕시기」로는, 바람직하게는 메톡시기, 에톡시기이고, 가장 바람직하게는 메톡시기이다.

R₂ 로 나타내어지는「치환기로서 C1 - C4 알콕시기 혹은 불소 원자를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기」의「C1 - C6 알킬기」로는, 바람직하게는 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, 또는 tert-부틸기이고, 가장 바람직하게는 메틸기이다.

R₂ 로 나타내어지는「치환기로서 C1 - C4 알콕시기 혹은 불소 원자를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기」로는, 바람직하게는 치환기로서 메톡시기, 에톡시기 또는 불소 원자를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기 (구체적으로는, 메틸기, 메톡시메틸기, 에톡시메틸기, 메톡시에틸기, 에톡시에틸기, 플루오로메틸기, 디플루오로메틸기, 트리플루오로메틸기 등) 이고, 보다 바람직하게는 C1 - C6 알킬기이며, 보다 바람직하게는 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, 또는 tert-부틸기이고, 가장 바람직하게는 메틸기이다.

R₂ 로 나타내어지는「C1 - C6 알콕시기」로는, 바람직하게는 메톡시기, 또는 에톡시기이고, 가장 바람직하게는 메톡시기이다.

R₂ 는, 바람직하게는 치환기로서 C1 - C4 알콕시기 혹은 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기이다. 일 실시형태에 있어서, R₂ 는, 치환기로서 메톡시기, 에톡시기 또는 불소 원자를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기이다. 추가적인 실시형태에 있어서, R₂ 는, 치환기로서 메톡시기, 에톡시기 또는 불소 원자를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, 또는 tert-부틸기 (바람직하게는, 메틸기 또는 에틸기, 보다 바람직하게는 메틸기) 이다.

R₂ 는, 보다 바람직하게는 치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기이다. 일 실시형태에 있어서, R₂ 는, 치환기로서 메톡시기, 에톡시기를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기이다. 추가적인 실시형태에 있어서, R₂ 는, 치환기로서 메톡시기 또는 에톡시기를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, 또는 tert-부틸기 (바람직하게는, 메틸기 또는 에틸기, 보다 바람직하게는 메틸기) 이다. 추가적인 실시형태에 있어서, R₂ 는, 메틸기, 에틸기, 메톡시메틸기, 또는 에톡시메틸기이다.

R₂ 는, 보다 더 바람직하게는 C1 - C6 알킬기이다.

R₂ 는, 더욱 바람직하게는 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, 또는 tert-부틸기이다.

R₂ 는, 특히 바람직하게는 메틸기 또는 에틸기이다.

R₂ 는, 가장 바람직하게는 메틸기이다.

본 발명의 일반식 (Ⅰ) 또는 일반식 (Ⅱ) 로 나타내는 화합물에 있어서, R₃ 은, 수소 원자, 치환기로서 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기이다.

R₃ 으로 나타내어지는「치환기로서 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기」의「C1 - C4 알킬기」로는, 바람직하게는 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, 또는 tert-부틸기이고, 보다 바람직하게는 메틸기, 또는 에틸기이며, 가장 바람직하게는 메틸기이다.

R₃ 으로 나타내어지는「치환기로서 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기」로는, 바람직하게는 메틸기, 플루오로메틸기, 디플루오로메틸기, 트리플루오로메틸기, 또는 에틸기이고, 보다 바람직하게는 메틸기, 트리플루오로메틸기, 또는 에틸기이며, 가장 바람직하게는 메틸기이다.

R₃ 은, 바람직하게는, 치환기로서 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기이다.

R₃ 은, 보다 바람직하게는, 메틸기, 플루오로메틸기, 디플루오로메틸기, 트리플루오로메틸기, 에틸기, 플루오로에틸기, 디플루오로에틸기, 트리플루오로에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, 또는 tert-부틸기이다.

R₃ 은, 보다 바람직하게는, 메틸기, 플루오로메틸기, 디플루오로메틸기, 트리플루오로메틸기, 또는 에틸기이다.

R₃ 은, 더욱 바람직하게는, 메틸기, 트리플루오로메틸기, 또는 에틸기이다.

R₃ 은, 특히 바람직하게는, 메틸기, 또는 에틸기이다.

R₃ 은, 가장 바람직하게는, 메틸기이다.

본 발명의 일반식 (Ⅰ) 또는 일반식 (Ⅱ) 로 나타내는 화합물에 있어서, R₄ 는 수소 원자, 또는 C1 - C4 알킬기이다.

R₄ 로 나타내어지는「C1 - C4 알킬기」로는, 바람직하게는 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, 또는 tert-부틸기이고, 보다 바람직하게는 메틸기, 또는 에틸기이며, 가장 바람직하게는 메틸기이다.

R₄ 는, 바람직하게는 수소 원자, 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, 또는 tert-부틸기이다.

R₄ 는, 보다 바람직하게는 수소 원자, 메틸기, 또는 에틸기이다.

R₄ 는, 더욱 바람직하게는 수소 원자, 또는 메틸기이다.

R₄ 는, 가장 바람직하게는 수소 원자이다.

본 발명의 일반식 (Ⅰ) 또는 일반식 (Ⅱ) 로 나타내는 화합물에 있어서, R₅ 는, 불소 원자 및 염소 원자로 이루어지는 군에서 선택되는 치환기를 1 내지 3 개 가져도 되는 페닐기이다.

R₅ 는, 바람직하게는, 불소 원자 및 염소 원자로 이루어지는 군에서 선택되는 치환기를 1 또는 2 개 가져도 되는 페닐기이다.

R₅ 는, 더욱 바람직하게는 페닐기, 2-플루오로페닐기, 3-클로로페닐기, 2,3-디플루오로페닐기, 2,4-디플루오로페닐기, 또는 3,5-디플루오로페닐기이다.

R₅ 는, 가장 바람직하게는 페닐기이다.

본 발명의 화합물은, 일반식 (Ⅰ) 또는 일반식 (Ⅱ) 중, R₁ 은, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 가져도 되는 C1 - C4 알킬기, 또는 C3 - C4 시클로알킬기이고,

R₂ 는, C1 - C6 알킬기이며,

R₃ 은, 치환기로서 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기이고,

R₄ 는, 수소 원자, 또는 C1 - C4 알킬기이고,

R₅ 는, 불소 원자 및 염소 원자로 이루어지는 군에서 선택되는 치환기를 1 또는 2 개 가져도 되는 페닐기인, 화합물 또는 그 염이 바람직하다.

보다 바람직하게는, 일반식 (Ⅰ) 또는 일반식 (Ⅱ) 중, R₁ 은, 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, tert-부틸기, 1-메틸-1-메톡시에틸기, 시클로프로필기, 또는 시클로부틸기이고,

R₂ 는, 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 또는 tert-부틸기이며,

R₃ 은, 메틸기, 플루오로메틸기, 디플루오로메틸기, 트리플루오로메틸기, 에틸기, 플루오로에틸기, 디플루오로에틸기, 트리플루오로에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, 또는 tert-부틸기이고,

R₄ 는, 수소 원자, 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, tert-부틸기이고,

R₅ 는, 페닐기, 2-플루오로페닐기, 3-플루오로페닐기, 2,4-디플루오로페닐기, 2,3-디플루오로페닐기, 3,5-디플루오로페닐기, 2-클로로페닐기, 3-클로로페닐기, 2,4-디클로로페닐기, 또는 3,5-디클로로페닐기인, 화합물 또는 그 염이다.

보다 바람직하게는, 일반식 (Ⅱ) 중, R₁ 은, 메틸기, 에틸기, 이소프로필기, tert-부틸기, 1-메틸-1-메톡시에틸기, 또는 시클로프로필기이고,

R₂ 는, 메틸기이며,

R₃ 은, 메틸기, 플루오로메틸기, 디플루오로메틸기, 트리플루오로메틸기, 또는 에틸기이고,

R₄ 는, 수소 원자, 메틸기, 또는 에틸기이고,

R₅ 는, 페닐기, 2-플루오로페닐기, 3-클로로페닐기, 2,3-디플루오로페닐기, 2,4-디플루오로페닐기, 또는 3,5-디플루오로페닐기인, 화합물 또는 그 염이다.

더욱 바람직하게는, 일반식 (Ⅱ) 중, R₁ 은, 메틸기, tert-부틸기, 또는 시클로프로필기이고,

R₂ 는, 메틸기이며,

R₃ 은, 메틸기, 트리플루오로메틸기, 또는 에틸기이고,

R₄ 는, 수소 원자, 또는 메틸기이고,

R₅ 는, 페닐기인, 화합물 또는 그 염이다.

특히 바람직하게는, 일반식 (Ⅱ) 중, R₁ 은, 메틸기, tert-부틸기, 또는 시클로프로필기이고,

R₂ 는, 메틸기이며,

R₃ 은, 메틸기이고,

R₄ 는, 수소 원자이고,

R₅ 는, 페닐기인, 화합물 또는 그 염이다.

구체적인 본 발명의 화합물로는, 이하의 실시예에서 제조되는 화합물을 예시할 수 있지만, 이것들에는 한정되지 않는다.

본 발명의 일 실시형태는, 이하의 (1) ∼ (18) 에서 선택되는 화합물, 또는 그 염이다. 본 발명의 일 실시형태는, 하기의 (1) ∼ (15) 에서 선택되는 화합물, 또는 그 염이다.

(1) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-페닐에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(2) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(3) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(3,3-디메틸부티-1-인-1-일)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(4) 7-(R)-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(5) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-(2-페닐프로판-2-일)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(6) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-페닐프로필)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(7) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-(2-(2-플루오로페닐)프로판-2-일)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(8) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(9) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-(2,4-디플루오로페닐)에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(10) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(프로프-1-인-1-일)-N-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(11) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-(2-페닐프로판-2-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(12) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-(2,3-디플루오로페닐)에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(13) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(3-메톡시-3-메틸부티-1-인-1-일)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(14) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(부티-1-인-1-일)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(15) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-(2-(2-플루오로페닐)프로판-2-일)-6-(3-메틸부티-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(16) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-에틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-페닐에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(17) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-에틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(18) 7-((3R,5R)-1-아크릴로일-5-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(19) 7-((3R,5R)-1-아크릴로일-5-(에톡시메틸)피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

바람직한 본 발명의 화합물로는 이하의 (1) ∼ (3) 에서 선택되는 화합물, 또는 그 염을 예시할 수 있다.

(1) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-페닐에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(2) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

(3) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(3,3-디메틸부티-1-인-1-일)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

＜식 (Ⅰ) 로 나타내는 화합물의 제조 방법＞

본 발명에 관련된 화합물은, 예를 들어 하기의 제조 방법 또는 실시예에 나타내는 방법에 의해서 제조할 수 있다. 단, 본 발명에 관련된 화합물의 제조 방법은 이 예들에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 화합물 (Ⅰ) 은, 예를 들어 하기 제조 방법을 이용하여 제조할 수 있다.

＜제조 방법＞

[화학식 5]

[식 중, L₁, L₂, L₃ 은, 동일 또는 상이하게 탈리기를 나타내고, P₁, P₂ 는 동일 또는 상이하게 보호기를 나타내고, 그 밖의 기호는 상기와 동일한 의미이다]

＜제 1 공정＞

본 공정은, 식 1 로 나타내는 화합물과, 시판 또는 공지된 방법에 의해서 제조할 수 있는 식 2 로 나타내는 화합물의 미츠노부 반응에 의해서, 식 3 으로 나타내는 화합물을 얻는 방법이다. 미츠노부 반응은, 통상적으로 미츠노부 시약 및 포스핀 시약의 존재 하에서 행해진다.

식 2 로 나타내는 화합물 (식 2 중 P₁ 은 아미노기의 보호기를 나타낸다) 의 사용량은, 식 1 로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 1 ∼ 10 당량 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 ∼ 3 당량이다.

「아미노기의 보호기」로는, 그 기능을 갖는 것이면 특별히 한정되지 않는데, 예를 들어 벤질기, p-메톡시벤질기, 3,4-디메톡시벤질기, o-니트로벤질기, p-니트로벤질기, 벤즈하이드릴기, 트리틸기, 쿠밀기 등의 아르알킬기 ; 예를 들어 포르밀기, 아세틸기, 프로피오닐기, 부티릴기, 피발로일기, 트리플루오로아세틸기, 트리클로로아세틸기 등의 저급 알카노일기 ; 예를 들어 벤조일기 ; 예를 들어 페닐아세틸기, 페녹시아세틸기 등의 아릴알카노일기 ; 예를 들어 메톡시카르보닐기, 에톡시카르보닐기, 프로필옥시카르보닐기, tert-부톡시카르보닐기 등의 저급 알콕시카르보닐기 ; 예를 들어 p-니트로벤질옥시카르보닐기, 페네틸옥시카르보닐기 등의 아르알킬옥시카르보닐기 ; 예를 들어 트리메틸실릴기, tert-부틸디메틸실릴기 등의 저급 알킬실릴기 ; 예를 들어 테트라하이드로피라닐기 ; 예를 들어 트리메틸실릴에톡시메틸기 ; 예를 들어 메틸술포닐기, 에틸술포닐기, tert-부틸술포닐기 등의 저급 알킬술포닐기 등 ; 예를 들어 tert-부틸술피닐기 등의 저급 알킬술피닐기 등 ; 예를 들어 벤젠술포닐기, 톨루엔술포닐기 등의 아릴술포닐기 등, 예를 들어 프탈이미드기 등의 이미드기를 들 수 있고, 특히 트리플루오로아세틸기, 아세틸기, tert-부톡시카르보닐기, 벤질옥시카르보닐기, 트리메틸실릴에톡시메틸기, 또는 쿠밀기가 바람직하다.

미츠노부 시약으로는, 디에틸아조디카르복실레이트, 디이소프로필아조디카르복실레이트 등이 사용된다. 미츠노부 시약의 사용량은, 식 1 로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 통상적으로 약 1 ∼ 100 몰, 바람직하게는 약 1 ∼ 10 몰 정도이다.

포스핀 시약으로는, 트리페닐포스핀, 트리부틸포스핀, 트리푸릴포스핀 등이 사용된다. 포스핀 시약의 사용량은, 식 1 로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 통상적으로 약 1 ∼ 100 몰, 바람직하게는 약 1 ∼ 10 몰 정도이다.

용매로는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, 예를 들어, 탄화수소류 (예, 벤젠, 톨루엔, 자일렌 등), 할로겐화탄화수소류 (예, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류 (예, 아세토니트릴 등), 에테르류 (예, 디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란 등), 알코올류 (예, 메탄올, 에탄올 등), 비프로톤성 극성 용매 (예, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포르아미드 등), 물 혹은 그것들의 혼합물 등을 들 수 있다. 반응 시간은 0.1 ∼ 100 시간이고, 바람직하게는 0.5 ∼ 24 시간이다. 반응 온도로는 0 ℃ ∼ 용매가 비등하는 온도이고, 바람직하게는 0 ℃ ∼ 100 ℃ 이다.

이와 같이 하여 얻어지는 식 3 으로 나타내는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단에 의해서 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고 다음 공정에 제공할 수 있다.

＜제 2 공정＞

본 공정은, 식 3 으로 나타내는 화합물을, 암모니아 또는 그 염과 반응시킴으로써, 식 4 로 나타내는 화합물을 얻는 방법이다.

암모니아 또는 그 염으로는, 그 사용량은, 식 3 으로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 1 ∼ 1000 당량 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 ∼ 100 당량이다.

용매로는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, 예를 들어, 탄화수소류 (예, 벤젠, 톨루엔, 자일렌 등), 할로겐화탄화수소류 (예, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류 (예, 아세토니트릴 등), 에테르류 (예, 디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란 등), 알코올류 (예, 메탄올, 에탄올 등), 비프로톤성 극성 용매 (예, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포르아미드 등), 물 혹은 그것들의 혼합물 등을 들 수 있다. 반응 시간은 0.1 ∼ 100 시간이고, 바람직하게는 0.5 ∼ 24 시간이다. 반응 온도로는 0 ℃ ∼ 용매가 비등하는 온도이고, 바람직하게는 0 ℃ ∼ 150 ℃ 이다.

이와 같이 하여 얻어지는 식 4 로 나타내는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단에 의해서 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고 다음 공정에 제공할 수 있다.

＜제 3 공정＞

본 공정은, 식 4 로 나타내는 화합물을 일산화탄소 분위기 하, 예를 들어, 천이 금속 촉매, 염기 및 알코올 존재 하에서, 식 5 로 나타내는 화합물을 얻는 방법이다.

본 공정에 있어서, 일산화탄소의 압력은, 통상적으로 1 기압 내지 20 기압이고, 바람직하게는 1 기압 내지 10 기압이다.

알코올로는, 예를 들어, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 디에틸아미노에탄올, 이소부탄올, 4-(2-하이드록시에틸)모르폴린, 3-모르폴리노프로판올, 디에틸아미노프로판올 등을 들 수 있다.

알코올의 사용량은, 식 4 로 나타내는 화합물 (1 몰) 대해서, 통상적으로 1 ∼ 100 몰, 바람직하게는 약 1 ∼ 50 몰 정도이다.

천이 금속 촉매로는, 예를 들어, 팔라듐 촉매 (예, 아세트산팔라듐, 염화팔라듐, 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐, 팔라듐탄소 등) 등이 사용되고, 필요에 따라서, 리간드 (예, 트리페닐포스핀, 트리-tert-부틸포스핀 등) 를 첨가하여 사용해도 된다. 천이 금속 촉매의 사용량은, 촉매의 종류에 따라서 상이한데, 화합물 4 (1 몰) 에 대해서, 통상적으로 약 0.0001 ∼ 1 몰, 바람직하게는 약 0.01 ∼ 0.5 몰 정도, 리간드의 사용량은, 식 4 로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 통상적으로 약 0.0001 ∼ 4 몰, 바람직하게는 약 0.01 ∼ 2 몰 정도이다.

염기로는, 예를 들어, 유기 아민류 (예, 트리메틸아민, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, 1,8-디아자비시클로[5,4,0]운데카-7-엔, 피리딘, N,N-디메틸아닐린 등), 알칼리 금속 염 (예, 탄산수소나트륨, 탄산수소칼륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산세슘, 인산나트륨, 인산칼륨, 수산화나트륨, 수산화칼륨 등), 금속 수소화물 (예, 수소화칼륨, 수소화나트륨 등), 알칼리 금속 알콕시드 (예, 나트륨메톡시드, 나트륨에톡시드, 나트륨-tert-부톡시드, 칼륨-tert-부톡시드 등), 알칼리 금속 디실라지드 (예 ; 리튬디실라지드, 나트륨디실라지드, 칼륨디실라지드 등) 등을 들 수 있다. 그 중에서도, 탄산칼륨, 탄산세슘, 인산나트륨, 인산칼륨 등의 알칼리 금속 염, 나트륨-tert-부톡시드, 칼륨-tert-부톡시드 등의 알칼리 금속 알콕시드, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민 등의 유기 아민류 등이 바람직하다. 염기의 사용량은, 식 4 로 나타내는 화합물 (1 몰) 대해서, 통상적으로 0.1 ∼ 50 몰, 바람직하게는 약 1 ∼ 20 몰 정도이다.

용매로는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, 예를 들어, 탄화수소류 (예, 벤젠, 톨루엔, 자일렌 등), 할로겐화탄화수소류 (예, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류 (예, 아세토니트릴 등), 에테르류 (예, 디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란 등), 알코올류 (예, 메탄올, 에탄올 등), 비프로톤성 극성 용매 (예, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포르아미드, N-메틸피롤리돈 등), 물 혹은 그것들의 혼합물 등을 들 수 있다. 반응 시간은 0.1 ∼ 100 시간이고, 바람직하게는 0.5 ∼ 24 시간이다. 반응 온도로는 0 ℃ ∼ 용매가 비등하는 온도이고, 바람직하게는 0 ℃ ∼ 150 ℃ 이다.

이 반응 후에, 사용한 알코올에 대응한 에스테르체, 또는, 에스테르체와 식 5 로 나타내는 화합물의 혼합물에 대해서 가수 분해 반응을 행함으로써 식 5 로 나타내는 화합물로 변환 처리를 행할 수 있다.

염기로는, 탄산수소나트륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산세슘, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화리튬 등을 사용하는 것이 바람직하고, 사용량은, 식 4 로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 통상적으로 0.5 ∼ 100 몰, 바람직하게는 약 1 ∼ 10 몰 정도이다.

용매로는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, 예를 들어 물, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, N,N-디메틸포름아미드 등을 단일 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 반응 시간은 0.1 ∼ 100 시간이고, 바람직하게는 0.5 ∼ 24 시간이다. 반응 온도로는 0 ℃ ∼ 용매가 비등하는 온도이고, 바람직하게는 0 ℃ ∼ 100 ℃ 이다.

이와 같이 하여 얻어지는 식 5 로 나타내는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단에 의해서 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고 다음 공정에 제공할 수 있다.

＜제 4 공정＞

본 공정은, 식 5 로 나타내는 화합물의 카르복실기에 보호기를 도입하고, 식 6 으로 나타내는 화합물 (식 6 중 P₂ 가 카르복실기의 보호기를 나타낸다) 을 얻는 방법이다. 보호 방법으로는, 통상적으로 공지된 방법, 예를 들어 Protective Groups in Organic Synthesis third edition, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, John Wiley ＆ Sons (1999년) 에 기재된 방법, 또는 그에 준하는 방법에 의해서 행할 수 있다.

「카르복실기의 보호기」로는, 그 기능을 갖는 것이면 특별히 한정되지 않는데, 예를 들어 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, tert-부틸기 등의 저급 알킬기 ; 예를 들어 2,2,2-트리클로로에틸기 등의 할로 저급 알킬기 ; 예를 들어 알릴기 등의 저급 알케닐기 ; 예를 들어 트리메틸실릴에톡시메틸기 ; 예를 들어 벤질기, p-메톡시벤질기, p-니트로벤질기, 벤즈하이드릴기, 트리틸기 등의 아르알킬기 등을 들 수 있고, 특히 메틸기, 에틸기, tert-부틸기, 알릴기, 벤질기, p-메톡시벤질기, 또는 트리메틸실릴에톡시메틸기가 바람직하다.

본 반응에 있어서는, 예를 들어 tert-부틸에스테르기, 메틸에스테르기, 에틸에스테르기 등의 보호기를 도입하는 것이 바람직하다.

본 반응의 보호기화제는, 예를 들어, 2-tert-부틸-1,3-디이소프로필이소우레아 등을 들 수 있다. 이들 보호기화제의 사용량은, 식 5 로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 통상적으로 1 ∼ 50 몰, 바람직하게는 약 1 ∼ 10 몰 정도이다.

용매로는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, 예를 들어, 탄화수소류 (예, 벤젠, 톨루엔, 자일렌 등), 할로겐화탄화수소류 (예, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류 (예, 아세토니트릴 등), 에테르류 (예, 디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, tert-부틸메틸에테르 등), 알코올류 (예, 메탄올, 에탄올 등), 비프로톤성 극성 용매 (예, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포르아미드 등), 물 혹은 그것들의 혼합물 등을 들 수 있다. 반응 시간은 0.1 ∼ 100 시간이고, 바람직하게는 0.5 ∼ 24 시간이다. 반응 온도로는 0 ℃ ∼ 용매가 비등하는 온도이고, 바람직하게는 0 ℃ ∼ 100 ℃ 이다.

이와 같이 하여 얻어지는 식 6 으로 나타내는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단에 의해서 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고 다음 공정에 제공할 수 있다.

＜제 5 공정＞

본 공정은, 식 6 으로 나타내는 화합물을 할로겐화하고, 식 7 로 나타내는 화합물 (식 7 중 L₃ 이 할로겐 원자를 나타낸다) 을 얻는 방법이다. 할로겐화는, 예를 들어, 불소, 염소, 브롬, 요오드 등을 사용하는 방법, N-클로로숙신이미드, N-브로모숙신이미드, N-요오드숙신이미드 등을 사용하는 방법에 의해서 행할 수 있다. 본 반응에 있어서는, N-클로로숙신이미드, N-브로모숙신이미드, N-요오드숙신이미드 등을 사용하는 방법이 바람직하다.

N-클로로숙신이미드, N-브로모숙신이미드, N-요오드숙신이미드 등은 식 6 으로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서 1 ∼ 10 당량 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 ∼ 3 당량이다.

용매로는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, 예를 들어, 탄화수소류 (예, 벤젠, 톨루엔, 자일렌 등), 할로겐화탄화수소류 (예, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류 (예, 아세토니트릴 등), 에테르류 (예, 디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란 등), 알코올류 (예, 메탄올, 에탄올 등), 비프로톤성 극성 용매 (예, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포르아미드 등), 물 혹은 그것들의 혼합물 등을 들 수 있다. 반응 시간은 0.1 ∼ 100 시간이고, 바람직하게는 0.5 ∼ 24 시간이다. 반응 온도로는 0 ℃ ∼ 용매가 비등하는 온도이고, 바람직하게는 0 ℃ ∼ 100 ℃ 이다.

이와 같이 하여 얻어지는 식 7 로 나타내는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단에 의해서 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고 다음 공정에 제공할 수 있다.

＜제 6 공정＞

본 공정은, 식 7 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기 (식 7 중의 P₁) 를 탈보호하여 식 8 로 나타내는 화합물을 얻는 방법이다. 탈보호의 방법으로는, 통상적으로 공지된 방법, 예를 들어 Protective Groups in Organic Synthesis third edition, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, John Wiley ＆ Sons (1999년) 에 기재된 방법, 또는 그에 준하는 방법에 의해서 행할 수 있다.

보호기로는 tert-부틸옥시카르보닐 등이 예시된다. 예를 들어, 보호기로서 tert-부틸옥시카르보닐기를 사용한 경우, 산성 조건 하에서의 탈보호가 바람직하고, 산으로는 염산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 황산, 토실산 등을 들 수 있다.

산의 사용량은, 식 7 로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 바람직하게는 약 1 ∼ 100 당량이다.

반응에 사용하는 용매로는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, 예를 들어, 알코올류 (예, 메탄올 등), 탄화수소류 (예를 들어, 벤젠, 톨루엔, 자일렌 등), 할로겐화탄화수소류 (예를 들어, 염화메틸렌, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류 (예를 들어, 아세토니트릴 등), 에테르류 (예를 들어, 디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란 등), 비프로톤성 극성 용매 (예를 들어, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포르아미드 등), 혹은 그것들의 혼합물이 사용된다. 반응 시간은 0.1 ∼ 100 시간이고, 바람직하게는 0.5 ∼ 24 시간이다. 반응 온도로는 0 ∼ 100 ℃ 이고, 바람직하게는 0 ∼ 50 ℃ 이다.

이와 같이 하여 얻어지는 식 8 로 나타내는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단에 의해서 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고 다음 공정에 제공할 수 있다.

＜제 7 공정＞

본 공정은, 식 8 로 나타내는 화합물의 아미노기와 아크릴산할라이드, 또는 아크릴산 무수물의 아미드화 반응에 의해서, 식 9 로 나타내는 화합물을 얻는 방법이다.

아크릴산할라이드 또는 아크릴산 무수물을 사용하는 경우, 식 8 로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 아크릴산할라이드 또는 아크릴산 무수물을 통상적으로 0.5 ∼ 10 몰, 바람직하게는 약 1 ∼ 5 몰 정도이다. 또한, 당해 아크릴산할라이드 또는 아크릴산 무수물은, 시판품, 또는 공지된 방법에 준하여 제조할 수 있다.

또, 필요에 따라서 염기를 첨가할 수 있다. 염기로는, 예를 들어, 유기 아민류 (예, 트리메틸아민, 트리에틸아민, 이로프로필에틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, 1,8-디아자비시클로[5,4,0]운데카-7-엔, 피리딘, N,N-디메틸아닐린 등), 알칼리 금속 염 (예, 탄산수소나트륨, 탄산수소칼륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산세슘, 인산나트륨, 인산칼륨, 수산화나트륨, 수산화칼륨 등), 금속 수소화물 (예, 수소화칼륨, 수소화나트륨 등), 알칼리 금속 알콕시드 (예, 나트륨메톡시드, 나트륨에톡시드, 나트륨-tert-부톡시드, 칼륨-tert-부톡시드 등) 등을 들 수 있다. 염기의 사용량은, 식 8 로 나타내는 화합물 (1 몰) 대해서, 통상적으로 1 ∼ 100 몰, 바람직하게는 약 1 ∼ 10 몰 정도이다.

반응에 사용하는 용매로는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, 예를 들어, 알코올류 (예, 메탄올 등) 탄화수소류 (예를 들어, 벤젠, 톨루엔, 자일렌 등), 할로겐화탄화수소류 (예를 들어, 염화메틸렌, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류 (예를 들어, 아세토니트릴 등), 에테르류 (예를 들어, 디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란 등), 비프로톤성 극성 용매 (예를 들어, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포르아미드, 등) 혹은 그것들의 혼합물이 사용된다. 반응 시간은 0.1 ∼ 100 시간이고, 바람직하게는 0.5 ∼ 24 시간이다. 반응 온도로는 0 ℃ ∼ 용매가 비등하는 온도이고, 바람직하게는 0 ℃ ∼ 100 ℃ 이다.

이와 같이 하여 얻어지는 식 9 로 나타내는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단에 의해서 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고 다음 공정에 제공할 수 있다.

＜제 8 공정＞

본 공정은, 식 9 로 나타내는 화합물을, 시판품, 또는 공지된 방법에 의해서 제조할 수 있는 아세틸렌 유도체와 소노가시라 반응시킴으로써, 식 10 으로 나타내는 화합물을 얻는 방법이다.

아세틸렌 유도체로는, 그 사용량은, 식 9 로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 1 ∼ 50 당량 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 ∼ 10 당량이다.

천이 금속 촉매로는, 예를 들어, 팔라듐 촉매 (예, 아세트산팔라듐, 염화팔라듐, 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐, 디클로로비스(트리페닐포스핀)팔라듐, 디클로로비스(트리페닐포스핀)디팔라듐 등), 니켈 촉매 (예, 염화니켈 등) 등이 사용되고, 필요에 따라서, 리간드 (예, 트리페닐포스핀, 트리-tert-부틸포스핀 등) 를 첨가하며, 구리 촉매 (예, 요오드화구리, 브롬화구리, 염화구리) 등을 공촉매로서 사용해도 된다. 천이 금속 촉매의 사용량은, 촉매의 종류에 따라서 상이한데, 식 9 로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 통상적으로 약 0.0001 ∼ 1 몰, 바람직하게는 약 0.01 ∼ 0.5 몰 정도, 리간드의 사용량은, 식 9 로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 통상적으로 약 0.0001 ∼ 4 몰, 바람직하게는 약 0.01 ∼ 2 몰 정도, 구리 촉매의 사용량은, 식 9 로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 통상적으로 약 0.0001 ∼ 4 몰, 바람직하게는 약 0.010 ∼ 2 몰 정도이다.

염기로는, 예를 들어, 유기 아민류 (예, 트리메틸아민, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, 1,8-디아자비시클로[5,4,0]운데카-7-엔, 피리딘, N,N-디메틸아닐린 등), 알칼리 금속 염 (예, 탄산수소나트륨, 탄산수소칼륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산세슘, 인산나트륨, 인산칼륨, 수산화나트륨, 수산화칼륨 등), 금속 수소화물 (예, 수소화칼륨, 수소화나트륨 등), 알칼리 금속 알콕시드, (예, 나트륨메톡시드, 나트륨에톡시드, 나트륨-tert-부톡시드, 칼륨-tert-부톡시드 등), 알칼리 금속디실라지드 (예, 리튬디실라지드, 나트륨디실라지드, 칼륨디실라지드 등) 등을 들 수 있다. 그 중에서도, 탄산칼륨, 탄산세슘, 인산나트륨, 인산칼륨 등의 알칼리 금속 염, 나트륨-tert-부톡시드, 칼륨-tert-부톡시드 등의 알칼리 금속 알콕시드, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민 등의 유기 아민류 등이 바람직하다. 염기의 사용량은, 식 9 로 나타내는 화합물 (1 몰) 대해서, 통상적으로 0.1 ∼ 10 몰, 바람직하게는 약 1 ∼ 5 몰 정도이다.

용매로는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, 예를 들어, 탄화수소류 (예, 벤젠, 톨루엔, 자일렌 등), 할로겐화탄화수소류 (예, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류 (예, 아세토니트릴 등), 에테르류 (예, 디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란 등), 알코올류 (예, 메탄올, 에탄올 등), 비프로톤성 극성 용매 (예, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포르아미드 등), 물 혹은 그것들의 혼합물 등을 들 수 있다. 반응 시간은 0.1 ∼ 100 시간이고, 바람직하게는 0.5 ∼ 24 시간이다. 반응 온도로는 0 ℃ ∼ 용매가 비등하는 온도이고, 바람직하게는 0 ℃ ∼ 150 ℃ 이다.

이와 같이 하여 얻어지는 식 10 으로 나타내는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단에 의해서 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고 다음 공정에 제공할 수 있다.

＜제 9 공정＞

본 공정은, 식 10 으로 나타내는 화합물의 카르복실기의 보호기 (식 10 중의 P₂) 를 탈보호하여 식 11 로 나타내는 화합물을 얻는 방법이다. 탈보호의 방법으로는, 통상적으로 공지된 방법, 예를 들어 Protective Groups in Organic Synthesis, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, John Wiley ＆ Sons (1981년) 에 기재된 방법, 또는 그에 준하는 방법에 의해서 행할 수 있다.

보호기로는 tert-부틸에스테르 등이 예시된다. 예를 들어, 보호기로서 tert-부틸에스테르기를 사용한 경우, 산성 조건 하에서의 탈보호가 바람직하고, 산으로는 염산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 황산, 토실산 등을 들 수 있다.

산의 사용량은, 식 10 으로 나타내는 화합물 (1 몰) 에 대해서, 바람직하게는 약 1 ∼ 100 당량이다.

반응에 사용하는 용매로는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, 예를 들어, 알코올류 (예, 메탄올 등), 탄화수소류 (예를 들어, 벤젠, 톨루엔, 자일렌 등), 할로겐화탄화수소류 (예를 들어, 염화메틸렌, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류 (예를 들어, 아세토니트릴 등), 에테르류 (예를 들어, 디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란 등), 비프로톤성 극성 용매 (예를 들어, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포르아미드, 등) 혹은 그것들의 혼합물이 사용된다. 반응 시간은 0.1 ∼ 100 시간이고, 바람직하게는 0.5 ∼ 24 시간이다. 반응 온도로는 0 ∼ 100 ℃ 이고, 바람직하게는 0 ∼ 50 ℃ 이다.

이와 같이 하여 얻어지는 식 11 로 나타내는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단에 의해서 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고 다음 공정에 제공할 수 있다.

＜제 10 공정＞

본 공정은, 식 11 로 나타내는 화합물의 카르복실기와, 시판품, 또는 공지된 방법에 의해서 제조할 수 있는 아민의 아미드화 반응에 의해서, 식 (Ⅰ) 로 나타내는 화합물을 얻는 방법이다.

아미드화의 방법은, 종래 공지된 방법에 의해서 행하는 것이 가능하고, 축합제의 존재 하에서 반응시키는 방법, 또 카르복실산 부분을 종래 공지된 방법에 의해서 활성화시켜 반응성 유도체로 하고, 이어서 그 유도체와 아민을 아미드화하는 방법이 예시된다 (어느 방법이나,「펩티드 합성의 기초와 실험」(이즈미야 노부오 외, 마루젠 주식회사, 1983년) 을 참조).

축합제로는, N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 (DCC), N,N'-디이소프로필카르보디이미드 (DIC), 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 염산염 (WSC), 디페닐포스포릴아지드 (DPPA), 벤조트리아졸-1-일-옥시트리스디메틸아미노포스포늄헥사플루오로포스페이트 (BOP), 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄헥사플루오로포스페이트 (PyBOP), 7-아자벤조트리아졸-1-일-옥시트리스피롤리디노포스포늄포스페이트 (PyAOP), 브로모트리스피롤리디노포스포늄헥사플루오로포스페이트 (BroP), 클로로트리스(피롤리딘-1-일)포스포늄헥사플루오로포스페이트 (PyCroP), 3-(디에독시포스포릴옥시)-1,2,3-벤조트리아진-4(3H)-온 (DEPBT), O-(아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄헥사플루오로포스파이트 (HATU), 4-(5,6-디메톡시-1,3,5-트리아진-2-일)-4-메틸모르폴린 염산염 (DMTMM) 등을 들 수 있고, 그 때의 첨가제로서 1-하이드록시벤조트리아졸 (HOBt), 1-하이드록시-7-아자벤조트리아졸 (HOAt), N-하이드록시숙신이미드 (HOSu) 등을 들 수 있다. 이것들의 사용량은, 식 11 로 나타내는 화합물 (1 몰) 대해서, 통상적으로 1 ∼ 100 몰, 바람직하게는 약 1 ∼ 10 몰 정도이다.

또, 필요에 따라서 염기를 첨가할 수 있다. 염기로는, 예를 들어, 유기 아민류 (예, 트리메틸아민, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, 1,8-디아자비시클로[5,4,0]운데카-7-엔, 피리딘, N,N-디메틸아닐린 등), 알칼리 금속 염 (예, 탄산수소나트륨, 탄산수소칼륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산세슘, 인산나트륨, 인산칼륨, 수산화나트륨, 수산화칼륨 등), 금속 수소화물 (예, 수소화칼륨, 수소화나트륨 등), 알칼리 금속 알콕시드 (예, 나트륨메톡시드, 나트륨에톡시드, 나트륨-tert-부톡시드, 칼륨-tert-부톡시드 등) 등을 들 수 있다. 염기의 사용량은, 식 11 로 나타내는 화합물 (1 몰) 대해서, 통상적으로 1 ∼ 100 몰, 바람직하게는 약 1 ∼ 10 몰 정도이다.

반응에 사용하는 용매로는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, 예를 들어, 알코올류 (예, 메탄올 등) 탄화수소류 (예를 들어, 벤젠, 톨루엔, 자일렌 등), 할로겐화탄화수소류 (예를 들어, 염화메틸렌, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류 (예를 들어, 아세토니트릴 등), 에테르류 (예를 들어, 디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란 등), 비프로톤성 극성 용매 (예를 들어, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포르아미드, 등) 혹은 그것들의 혼합물이 사용된다. 반응 시간은 0.1 ∼ 100 시간이고, 바람직하게는 0.5 ∼ 24 시간이다. 반응 온도로는 0 ℃ ∼ 용매가 비등하는 온도이고, 바람직하게는 0 ℃ ∼ 100 ℃ 이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화합물 (Ⅰ) 은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어, 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해서 단리 정제할 수 있다.

상기 제조 방법에서는,「식 5 로 나타내는 화합물의 카르복실기에 보호기를 도입」(제 4 공정) 부터「식 11 로 나타내는 화합물의 카르복실기와 시판품, 또는 공지된 방법에 의해서 제조할 수 있는 아민의 아미드화 반응」(제 10 공정) 을 순서대로 행하고 있지만, 이 순서를 바꿀 수도 있다. 또,「식 5 로 나타내는 화합물의 카르복실기에 보호기를 도입」(제 4 공정) 및「식 10 으로 나타내는 화합물의 카르복실기의 보호기의 탈보호」(제 9 공정) 를 생략할 수 있다.

구체적으로는,「식 11 로 나타내는 화합물의 카르복실기와 시판품, 또는 공지된 방법에 의해서 제조할 수 있는 아민의 아미드화 반응」(제 10 공정),「식 6 으로 나타내는 화합물을 할로겐화」(제 5 공정),「식 7 로 나타내는 화합물의 아미노기의 보호기의 탈보호」(제 6 공정),「식 8 로 나타내는 화합물의 아미노기와 아크릴산할라이드, 또는 아크릴산 무수물의 아미드화 반응」(제 7 공정),「식 9 로 나타내는 화합물의 L₃ 이 할로겐 등의 탈리기를 갖는 경우, 시판품, 또는 공지된 방법에 의해서 제조할 수 있는 아세틸렌 유도체와의 소노가시라 반응」(제 8 공정) 의 순서로 각 공정을 거쳐서, 식 (Ⅰ) 로 나타내는 화합물로 유도할 수 있다. 각 공정의 조건은 상기한 조건과 동일하다.

본 발명의 화합물이, 광학 이성체, 입체 이성체, 회전 이성체, 호변 이성체 등의 이성체를 갖는 경우에는, 특히 명기하지 않는 한, 어느 이성체도 혼합물도 본 발명의 화합물에 포함된다. 예를 들어, 본 발명의 화합물에 광학 이성체가 존재하는 경우에는, 특별히 명기하지 않는 한, 라세미체 및 라세미체로부터 분할된 광학 이성체도 본 발명의 화합물에 포함된다.

본 발명의 화합물의 염이란, 약학적으로 허용되는 염을 의미하고, 염기 부가 염 또는 산 부가 염을 들 수 있다.

본 발명의 화합물 또는 그 염에는, 그 프로드러그도 포함된다. 프로드러그는, 생체 내에 있어서의 생리 조건 하에서 효소나 위산 등에 의한 반응에 의해서 본 발명의 화합물 또는 그 염으로 변환되는 화합물, 즉 효소적으로 산화, 환원, 가수 분해 등을 일으켜 본 발명의 화합물 또는 그 염으로 변화되는 화합물, 위산 등에 의해서 가수 분해 등을 일으켜 본 발명의 화합물 또는 그 염으로 변화되는 화합물을 말한다. 또, 히로카와 서점 1990년 간행「의약품의 개발」제 7 권 분자 설계 163 페이지 내지 198 페이지에 기재되어 있는 생리적 조건에서 본 발명의 화합물 또는 그 염으로 변화되는 것이어도 된다.

본 발명의 화합물 또는 그 염은, 아모르퍼스여도 되고 결정이어도 되며, 결정형이 단일이든 다형 혼합물이든 본 발명의 화합물 또는 그 염에 포함된다. 결정은, 공지된 결정화법을 적용하여 결정화함으로써 제조할 수 있다. 본 발명의 화합물 또는 그 염은, 용매화물 (예를 들어, 수화물 등) 이어도 되고, 무용매화물이어도 되며, 어느 것이나 본 발명의 화합물 또는 그 염에 포함된다. 동위 원소 (예를 들어, ³H, ¹⁴C, ³⁵S, ¹²⁵I 등) 등으로 표지된 화합물도, 본 발명의 화합물 또는 그 염에 포함된다.

본 발명의 화합물 또는 그 염은, 우수한 HER2 저해 활성을 갖는다. 또, HER2 에 대한 우수한 선택성을 갖는다. 따라서, 본 발명의 화합물 또는 그 염은, HER2 과잉 발현, HER2 유전자 증폭, 또는 HER2 변이 등을 갖는 악성 종양에 대해서, 항종양제로서 유용하고, 또 마우스의 현저한 체중 감소가 보이지 않은 점에서 부작용이 적다는 이점을 갖는다.

본 명세서에 있어서「HER2」란, 인간 또는 비인간 포유 동물의 HER2 를 포함하고, 바람직하게는 인간 HER2 이다. 또,「HER2」이란 용어에는 아이소폼이 포함된다.

본 발명의 화합물 또는 그 염은, 그 우수한 HER2 저해 활성에 의해서, HER2 가 관여하는 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약으로서 유용하다.

「HER2 가 관여하는 질환」이란, HER2 의 기능을 결실, 억제 및/또는 저해 함으로써, 발증률의 저하, 증상의 관해 (寬解), 완화 및/또는 완치시키는 질환을 들 수 있다. 이와 같은 질환으로서, 예를 들어, 악성 종양 등을 들 수 있지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 바람직하게는, HER2 과잉 발현, HER2 유전자 증폭, 또는 HER2 변이를 갖는 악성 종양이다.

본 발명의 일 실시형태는, 본 발명의 화합물 또는 그 염을 포함하는 HER2 에 대한 저해제를 제공한다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, HER2 에 대한 저해 방법으로서, 그것을 필요로 하는 대상에, 본 발명의 화합물 또는 그 염의 유효량을 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, HER2 에 대한 저해제를 제조하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그 염의 사용이 제공된다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, HER2 에 대한 저해제로서 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그 염이 제공된다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, HER2 를 저해하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그 염의 사용이 제공된다. 본 발명의 다른 실시형태에 있어서, 본 발명은, HER2 가 관여하는 질환을 예방 또는 치료하기 위한, 본 발명의 화합물 또는 그 염의 사용을 제공한다.

본 발명의 다른 실시형태는, 본 발명의 화합물 또는 그 염을 포함하는 항종양제를 제공한다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, 종양의 예방 및/또는 치료 방법으로서, 그것을 필요로 하는 대상에, 본 발명의 화합물 또는 그 염의 유효량을 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명의 일 실시형태는, 항종양제를 제조하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그 염의 사용이 제공된다.

또, 본 발명의 일 실시형태는, 종양의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그 염이 제공된다.

본 발명의 일 형태의 화합물 또는 그 염은, 야생형 HER2, 및 엑슨 20 삽입 변이 등의 HER2 도메인 내에 1 개 이상의 삽입 변이, 점 변이, 또는 결실 변이 등을 갖는 변이형 HER2 를 선택적으로 저해한다. 본 발명의 일 실시형태는, 야생형 HER2, 및 엑슨 20 삽입 변이의 하나인 YVMA 삽입 변이를 갖는 HER2 등을 포함하는 변이형 HER2 에 대한 저해 활성을 갖는 화합물 또는 그 염, 또는 이것을 포함하는 의약 혹은 의약 조성물을 제공한다. 본 발명의 일 실시형태는, 본 발명의 화합물 또는 그 염을 포함하는, 야생형 HER2, 및 YVMA 삽입 변이를 갖는 HER2 등을 포함하는 변이형 HER2 에 대한 저해제를 제공한다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, 야생형 HER2, 및 YVMA 삽입 변이를 갖는 HER2 등을 포함하는 변이형 HER2 에 대한 저해 방법으로서, 그것을 필요로 하는 대상에, 본 발명의 화합물 또는 그 염의 유효량을 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, 야생형 HER2, 및 YVMA 삽입 변이를 갖는 HER2 등을 포함하는 변이형 HER2 에 대한 저해제를 제조하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그 염의 사용이 제공된다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, 야생형 HER2, 및 YVMA 삽입 변이를 갖는 HER2 등을 포함하는 변이형 HER2 에 대한 저해제로서 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그 염이 제공된다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, 야생형 HER2, 및 YVMA 삽입 변이를 갖는 HER2 등을 포함하는 변이형 HER2 를 저해하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그 염의 사용이 제공된다. 본 발명의 다른 실시형태에 있어서, 본 발명은, 야생형 HER2, 및 YVMA 삽입 변이를 갖는 HER2 등을 포함하는 변이형 HER2 가 관여하는 질환을 예방 또는 치료하기 위한, 본 발명의 화합물 또는 그 염의 사용을 제공한다.

인간 HER2 유전자는, 예를 들어 서열 번호 1, 서열 번호 3, 또는 서열 번호 5 에 나타내는 것이고, 야생형 HER2 단백질은, 예를 들어 서열 번호 2, 서열 번호 4, 또는 서열 번호 6 에 나타내어지는 아미노산 서열로 이루어진다. 인간 HER2 유전자의 염기 서열 정보 및 야생형 HER2 단백질의 아미노산 서열 정보는, 예를 들어 액세션 번호 NM_004448, 또는 NM_001289936, 또는 NM_001005862 등에 의해서 얻을 수 있다.

몇몇 실시형태에 있어서, 본 발명의 일 형태의 화합물 또는 그 염은, 서열 번호 2 에 나타내어지는 아미노산 서열을 기준으로 하여, G309A, S310F, R678Q, L755S, L755_T759del, D769H, A775_G776insYVMA, V777L, V842I, R896C 중 1 개 이상의 변이를 포함하는 변이형 HER2 에 대한 저해 활성을 나타낸다. 다른 실시형태에서는, 본 발명의 일 형태의 화합물 또는 그 염은, 서열 번호 2 에 나타내어지는 아미노산 서열을 기준으로 하여, A775_G776insYVMA 를 포함하는 변이형 HER2 에 대한 저해 활성을 나타낸다.

몇몇 실시형태에 있어서, 본 발명의 일 형태의 화합물 또는 그 염은, 서열 번호 4 에 나타내어지는 아미노산 서열을 기준으로 하여, G294A, S295F, R663Q, L740S, L740_T744del, D754H, A760_G761insYVMA, V762L, V827I, R881C 중 1 개 이상의 변이를 포함하는 변이형 HER2 에 대한 저해 활성을 나타낸다. 다른 실시형태에서는, 본 발명의 일 형태의 화합물 또는 그 염은, 서열 번호 4 에 나타내어지는 아미노산 서열을 기준으로 하여, A760_G761insYVMA 를 포함하는 변이형 HER2 에 대한 저해 활성을 나타낸다.

몇몇 실시형태에 있어서, 본 발명의 일 형태의 화합물 또는 그 염은, 서열 번호 6 에 나타내어지는 아미노산 서열을 기준으로 하여, G279A, S280F, R648Q, L725S, L725_T729del, D739H, A745_G746insYVMA, V747L, V812I, R866C 중 1 개 이상의 변이를 포함하는 변이형 HER2 에 대한 저해 활성을 나타낸다. 다른 실시형태에서는, 본 발명의 일 형태의 화합물 또는 그 염은, 서열 번호 6 에 나타내어지는 아미노산 서열을 기준으로 하여, A745_G746insYVMA 를 포함하는 변이형 HER2 에 대한 저해 활성을 나타낸다.

또, 몇몇 실시형태에 있어서, 어느 HER2 아이소폼에 있어서의 변이에 있어서, 아미노산의 결실이나 삽입에 의해서, 서열 번호 2 에서 나타내어지는 아미노산의 위치와는 상이한 경우여도 서열 번호 2 에서 나타내어지는 아미노산의 위치에 상당하는 위치의 변이와 동일하다고 이해된다. 그 때문에, 예를 들어, 서열 번호 2 에서 나타내는 HER2 에 있어서의 309 번째의 글리신은, 서열 번호 4 에서 나타내어지는 아미노산 서열로 이루어지는 HER2 에 있어서는, 294 번째의 글리신에 상당한다. 그 때문에, 예를 들어,「G309A」는, 서열 번호 2 에서 나타내는 HER2 의 309 번째의 글리신이 알라닌으로 변이되어 있는 것을 의미하지만, 서열 번호 4 에서 나타내어지는 아미노산 서열로 이루어지는 HER2 에 있어서는, 294 번째의 아미노산에 상당하는 위치이기 때문에, 서열 번호 4 에서 나타내어지는 아미노산 서열로 이루어지는 HER2 에 있어서의「G294A」는 서열 번호 2 에서 나타내는 HER2 에 있어서의「G309A」에 상당한다. 또한, 어느 HER2 아이소폼이 있는 아미노산이, 서열 번호 2 에서 나타내어지는 아미노산의 어느 위치에 상당하는 아미노산인지의 여부는, 예를 들어, BLAST 의 Multiple Alig㎚ent 에 의해서 확인할 수 있다.

서열 리스트

[표 A-1]

[표 A-2]

[표 A-3]

[표 A-4]

[표 A-5]

[표 A-6]

[표 A-7]

[표 A-8]

[표 A-9]

[표 A-10]

[표 A-11]

본 명세서에 있어서, 본 발명의 화합물의「유효량」이라는 용어는, 대상의 생물학적 또는 의학적 응답, 예를 들어, 효소나 단백질 활성의 감소 혹은 저해를 일으키거나, 또는 증상을 개선하고, 상태를 완화시켜, 질환의 진행을 느리게 혹은 지연시키거나, 또는 질환을 예방하는 등의, 본 발명의 화합물의 양 (치료 유효량) 을 가리킨다.

본 명세서에 있어서,「대상」이라는 용어는, 포유 동물 및 비포유 동물을 포함한다. 포유 동물의 예로는, 한정되지 않지만, 인간, 침팬지, 유인원, 원숭이, 소, 말, 양, 염소, 돼지, 토끼, 개, 고양이, 래트, 마우스, 모르모트, 고슴도치, 캥거루, 두더지, 멧돼지, 곰, 호랑이, 사자 등을 들 수 있다. 비포유 동물의 예로는, 한정되지 않지만, 조류, 어류, 파충류 등을 들 수 있다. 일 실시형태에 있어서, 대상은 인간이고, 본 명세서에서 개시되는 증상, 상태, 또는 질환을 위한 처치를 필요로 한다고 진단된 인간이어도 된다.

본 발명의 화합물 또는 그 염은 의약으로서 사용하는 데에 있어서는, 필요에 따라서 약학적으로 허용되는 담체를 배합하고, 예방 또는 치료 목적에 따라서 각종 투여 형태를 채용할 수 있으며, 그 형태로는, 예를 들어, 경구제, 주사제, 좌제, 연고제, 첩부제들 중 어느 것이어도 되고, 바람직하게는 경구제가 채용된다. 이들 투여 형태는, 각각 당업자에게 공지 관용의 제제 방법에 의해서 제조할 수 있다.

본 발명의 일 실시형태는, 본 발명의 화합물 또는 그 염을 유효 성분으로 하는 경구 투여용의 항종양제를 제공한다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, 종양의 예방 및/또는 치료 방법으로서, 그것을 필요로 하는 대상에, 본 발명의 화합물 또는 그 염의 유효량을 경구 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, 경구 투여용의 항종양제를 제조하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그 염의 사용이 제공된다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, 경구 투여하여 종양의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그 염이 제공된다.

본 발명의 일 형태는, 본 발명의 화합물 또는 그 염을 포함하는 의약 조성물이 제공된다. 본 발명의 일 실시형태의 의약 조성물은, 본 발명의 화합물 또는 그 염, 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 또, 본 발명의 일 실시형태는, 의약 조성물을 제조하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그 염의 사용이 제공된다. 본 발명의 다른 일 실시형태는, 의약으로서 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그 염이 제공된다.

약학적으로 허용되는 담체로는, 제제 소재로서 관용의 각종 유기 혹은 무기 담체 물질이 사용되고, 고형 제제에 있어서의 부형제, 결합제, 붕괴제, 활택제, 코팅제, 착색제, 액상 제제에 있어서의 용제, 용해 보조제, 현탁화제, 등장화제, 완충제, 무통화제 등으로서 배합된다. 또, 필요에 따라서, 방부제, 항산화제, 감미제, 안정화제 등의 제제 첨가물을 사용할 수도 있다.

경구용 고형 제제를 조제하는 경우에는, 본 발명의 화합물에 부형제, 필요에 따라서, 결합제, 붕괴제, 활택제, 착색제, 교미·교취제 등을 첨가한 후, 통상적인 방법에 따라서 정제, 피복 정제, 과립제, 산제, 캡슐제 등을 제조할 수 있다.

주사제를 조제하는 경우에는, 본 발명의 화합물에 pH 조절제, 완충제, 안정화제, 등장화제, 국소 마취제 등을 첨가하고, 통상적인 방법에 따라서 피하, 근육내 및 정맥내용 주사제를 제조할 수 있다.

상기한 각 투여 단위 형태 중에 배합되어야 할 본 발명의 화합물의 양은, 이것을 적용해야 할 대상의 증상, 그 제형 등에 따라서 일정하지는 않지만, 일반적으로 투여 단위 형태당, 경구제의 경우에는 0.05 ∼ 1000 ㎎, 주사제의 경우에는 0.01 ∼ 500 ㎎, 좌제의 경우에는 1 ∼ 1000 ㎎ 으로 하는 것이 바람직하다.

또, 상기 투여 형태를 갖는 약제의 1 일당 투여량은, 대상의 증상, 체중, 연령, 성별 등에 따라서 상이하여 일률적으로 결정할 수 없지만, 본 발명의 화합물로서 통상적으로 성인 (체중 50 ㎏) 1 일당 0.05 ∼ 5000 ㎎, 바람직하게는 0.1 ∼ 1000 ㎎ 으로 하면 된다.

본 발명의 대상이 되는 종양은 특별히 제한은 되지 않는데, 예를 들어, 뇌종양, 두경부암, 소화기암 (식도암, 위암, 십이지장암, 간장암, 담도암 (담낭·담관암 등), 췌장암, 결장 직장암 (결장암, 직장암 등) 등), 폐암 (비소세포 폐암, 소세포 폐암, 중피종 등), 유방암, 생식기암 (난소암, 자궁암 (자궁경암, 자궁체암 등) 등), 비뇨기암 (신장암, 방광암, 전립선암, 정소 종양 등), 조혈기 종양 (백혈병, 악성 림프종, 다발성 골수종 등), 골·연부 종양, 피부암 등을 들 수 있고, 바람직하게는 폐암, 유방암, 위암, 결장 직장암, 방광암, 담도암, 또는 자궁암이고, 보다 바람직하게는 폐암, 유방암, 위암, 방광암, 또는 담도암이다.

일 실시양태에 있어서, 종양은 뇌종양이다. 본 발명의 화합물은, 혈액 뇌 관문의 통과를 필요로 하는 뇌의 증상의 치료에 유용할 수 있다. 일 실시양태의 화합물은, 뇌에 대한 송달을 위한 혈액 뇌 관문의 바람직한 통과성, 즉 우수한 뇌이행성을 갖는다. 화합물의 뇌에 대한 이행성의 지표로는, 뇌 내의 화합물 농도, Kp 치 (뇌에 대한 혈장 중 약물 농도비) 가 있다.

본 발명의 화합물로 치료되는 뇌종양은, 전이성 뇌종양 및 원발성 뇌종양을 포함한다.

뇌종양은 특별히 제한은 없지만, 예를 들어, 전이성 뇌종양 (예를 들어, 폐암, 유방암, 위암, 결장 직장암, 방광암, 담도암, 자궁암 등 (바람직하게는 폐암, 유방암 또는 위암) 의 뇌전이), 모양 세포성 성상 세포종, 비만성 성세포종, 핍돌기 교종·핍돌기 성세포종, 역형성 (退形成) 성세포종·역형성 성핍돌기 교종, 역형성 성핍돌기 성세포종, 교아종, 상의종, 역형성성 상의종, 신경절 교종, 중추성 신경 세포종, 골수아종, 배종 (germinoma), 중추 신경계 악성 림프종, 수막종, 신경초종, GH 산생 하수체 선종, PRL 산생 하수체 선종, ACTH 산생 하수체 선종, 비기능성 하수체 선종, 두엽 인두종, 척삭종, 혈관아종, 유상피종 등을 들 수 있다.

실시예

이하에 실시예를 들어 본 발명을 상세하게 설명하지만, 본 발명은 실시예에 한정되는 것은 아니다.

본 명세서에 있어서,「실온」은 통상적으로 약 10 ℃ 내지 약 35 ℃ 를 나타낸다. 또 이하의 화합물의 실시예에 있어서, ％ 는 특기하지 않는 한 중량 퍼센트를 나타낸다.

실시예에서 사용한 각종 시약은, 특별히 기재하지 않는 한 시판품을 사용하였다. 실리카 겔 크로마토그래피에는, 바이오타지사 제조 바이오타지 SNAP 카트리지 Ultra 또는 염기성 실리카 겔 크로마토그래피에는 바이오타지사 제조 바이오타지 SNAP 카트리지 Isolute Flash-NH2 를 사용하였다.

분취용 박층 크로마토그래피에는 머크사 제조 Kieselgel TM60F254, Art. 5744 또는 와코사 제조 NH2 실리카 겔 60F254 플레이트 와코를 사용하였다.

¹H-NMR 은 JEOL 사 제조 AL400 (400 ㎒), Varian 사 제조 Mercury (400 ㎒) 또는 Varian 사 제조 Inova (400 ㎒) 를 사용하고, 테트라메틸실란을 표준 물질로서 측정하였다. 또 매스 스펙트럼은, Waters 사 제조 MicromassZQ 또는 SQD 를 사용하고, 일렉트로 스프레이 이온화법 (ESI) 혹은 대기압 화학 이온화법 (APCI) 으로 측정하였다. 마이크로 웨이브 반응은, 바이오타지사 제조 Initiator 를 사용하여 행하였다.

약호의 의미를 이하에 나타낸다.

s : 싱글렛

d : 더블렛

t : 트리플렛

q : 쿼텟

dd : 더블 더블렛

dt : 더블 트리플렛

td : 트리플 더블렛

tt : 트리플 트리플렛

ddd : 더블 더블 더블렛

ddt : 더블 더블 트리플렛

dtd : 더블 트리플 더블렛

tdd : 트리플 더블 더블렛

m : 멀티플렛

br : 브로드

ATP : 아데노신삼인산

DMSO-d6 : 중디메틸술폭시드

CDCl₃ : 중클로로포름

EDTA : 에틸렌디아민사아세트산

THF : 테트라하이드로푸란

DMF : N,N-디메틸포름아미드

DMSO : 디메틸술폭시드

NMP : N-메틸피롤리돈

HATU : O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄헥사플루오로포스파이트

HPMC : 하이프로멜로스

PdCl₂(PPh₃)₂ : 디클로로비스(트리페닐포스핀)팔라듐 (Ⅱ)

참고예 1

참고예 1(1) tert-부틸(2S,4R)-4-(4-아미노-5-요오드-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-메틸피롤리딘-1-카르복실레이트

tert-부틸(2S,4S)-4-하이드록시-2-메틸피롤리딘-1-카르복실레이트 (19.0 g) 와 4-클로로-5-요오드-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (13.1 g) 을 THF (190 ㎖) 에 용해시켜, 0 ℃ 로 냉각 후, 트리페닐포스핀 (37.2 g) 과 디이소프로필아조디카르복실레이트 (28.1 ㎖) 을 첨가하고, 실온으로 승온하여 1 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 농축한 후, 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세트산에틸) 로 정제하여, 대응하는 커플링체를 얻었다. 얻어진 화합물은 추가로 정제하지 않고 다음 반응에 사용하였다.

내압관 중에, 얻어진 커플링체와 THF (114 ㎖) 와 암모니아수 (114 ㎖) 를 첨가하고, 100 ℃ 에서 14 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 물 (285 ㎖) 에 붓고, 실온에서 5 시간 교반하였다. 석출된 고체를 여과 채취하여, 물로 세정하고, 건조시킴으로써 목적물 (34.5 g) 을 얻었다.

참고예 1(2) 4-아미노-7-((3R,5S)-1-(tert-부톡시카르보닐)-5-메틸피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복실산

내압관에, 참고예 1(1) 의 화합물 (28.0 g), 10 ％ 팔라듐탄소 촉매 (720 ㎎), NMP (84 ㎖), 메탄올 (26 ㎖), 트리에틸아민 (17.6 ㎖) 을 첨가한 후, 일산화탄소 치환하여, 100 ℃ 에서 2 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 2 M 수산화나트륨 수용액 (79 ㎖) 을 첨가하여, 80 ℃ 에서 2 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트 여과하고, 메탄올로 세정하여, 여과액의 메탄올을 감압 농축하였다. 다시 물을 첨가한 후, 수층을 tert-부틸메틸에테르로 세정하였다. 수층에 1 M 황산수소칼륨 수용액을 첨가하여 pH 를 약 3 으로 조정하고, 석출된 고체를 여과 채취하여, 물로 세정하고, 건조시킴으로써 목적물 (23.4 g) 을 얻었다.

실시예

실시예 1(1) tert-부틸-4-아미노-6-브로모-7-((3R,5S)-1-(tert-부톡시카르보닐)-5-메틸피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복실레이트

질소 분위기 하, 참고예 1(2) 의 화합물 (15.0 g) 을 클로로포름 (150 ㎖) 에 용해시키고, 2-tert-부틸-1,3-디이소프로필이소우레아 (25 ㎖) 를 첨가하여 60 ℃ 로 승온하여 2 시간 교반하였다. 다시, 2-tert-부틸-1,3-디이소프로필이소우레아 (25 ㎖) 를 첨가하여 2 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사에 tert-부틸메틸에테르를 첨가하고, 석출된 고체를 여과 채취하여, tert-부틸메틸에테르로 세정하였다. 다시, 여과액을 감압 농축하고, 얻어진 잔사에 tert-부틸메틸에테르를 첨가하고, 석출된 고체를 여과 채취하여, tert-부틸메틸에테르로 세정하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세트산에틸) 로 정제하여, tert-부틸에스테르체를 얻었다. 얻어진 화합물은 추가로 정제하지 않고 다음의 할로겐화 반응에 사용하였다.

얻어진 tert-부틸에스테르체를 클로로포름 (140 ㎖) 에 용해시키고, N-브로모숙신이미드 (11.8 g) 를 첨가하여, 실온에서 24 시간 교반하였다. 반응 혼합물에 순차적으로 클로로포름, 10 ％ 아황산수소나트륨 수용액을 첨가한 후, 클로로포름으로 추출하였다. 합친 유기층을 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세트산에틸) 로 정제하여, 목적물 (13.8 g) 을 얻었다.

실시예 1(2) tert-부틸-7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-브로모-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복실레이트

실시예 1(1) 의 화합물 (11.4 g) 을 THF (57 ㎖) 에 용해시키고, 0 ℃ 로 냉각시킨 후, 4 M 염화수소의 1,4-디옥산 용액 (114 ㎖) 을 첨가하여 0 ℃ 에서 10 시간 교반하였다. 반응 혼합물에 5 M 수산화나트륨 수용액 (92 ㎖), 아세토니트릴 (57 ㎖), 디이소프로필에틸아민 (20 ㎖), 염화아크릴 (2.0 ㎖) 을 첨가하여 30 분간 교반하였다. 반응 혼합물을 아세트산에틸로 추출하고, 합친 유기층을 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세톤) 로 정제하여, 목적물 (7.72 g) 을 얻었다.

실시예 1(3) tert-부틸-7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복실레이트

실시예 1(2) 의 화합물 (7.72 g), 아세토니트릴 (154 ㎖), 트리에틸아민 (7.2 ㎖), PdCl₂(PPh₃)₂ (1.2 g), 요오드화구리(Ⅰ) (330 ㎎) 에 1.0 M 프로핀의 DMF 용액 (85.7 ㎖) 을 첨가하여, 질소 치환한 후, 70 ℃ 에서 4 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 아세트산에틸과 포화 탄산수소나트륨 수용액을 첨가한 후, 아세트산에틸로 추출하고, 합친 유기층을 물, 이어서 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세톤) 로 정제하여, 목적물 (4.06 g) 을 얻었다.

실시예 1(4) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복실산

실시예 1(3) 의 화합물 (1.52 g) 을 클로로포름 (5 ㎖) 에 용해시킨 후, 트리플루오로아세트산 (5 ㎖) 을 첨가하고, 실온에서 2 시간 교반하여, 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 잔사에 클로로포름을 첨가하고, 다시 감압 농축하였다. 잔사를 감압 건조시킴으로써 목적물 (1.25 g) 을 얻었다.

실시예 1(5) 7-(R)-(3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(4) 의 화합물 (100 ㎎) 의 DMF (1.0 ㎖) 용액에, (R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 (89.0 ㎎), 디이소프로필에틸아민 (0.25 ㎖), HATU (215 ㎎) 를 첨가하고, 실온에서 2 시간 교반하였다. 반응 혼합물에 포화 탄산수소나트륨 수용액을 첨가한 후, 아세트산에틸로 추출하였다. 합친 유기층을 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세톤) 로 정제하여, 표제 화합물 (60 ㎎) 을 얻었다.

실시예 2 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-페닐에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(5) 에 있어서, (R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 대신에, (R)-1-페닐에탄-1-아민을 사용한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 3 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-(2-페닐프로판-2-일)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(5) 에 있어서, (R)-1-(3.5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 대신에, 2-페닐프로판-2-아민을 사용한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 4 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-페닐프로필)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(5) 에 있어서, (R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 대신에, (R)-1-페닐프로판-1-아민을 사용한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 5 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-(2-(2-플루오로페닐)프로판-2-일)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(5) 에 있어서, (R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 대신에, 2-(2-플루오로페닐)프로판-2-아민을 사용한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 6 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(5) 에 있어서, (R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 대신에, (R)-(＋)-1-(3-클로로페닐)에틸아민 염산염을 사용한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 7 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-(2,4-디플루오로페닐)에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(5) 에 있어서, (R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 대신에, (R)-(＋)-1-(2,4-디플루오로페닐)에틸아민 염산염을 사용한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 8 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(프로프-1-인-1-일)-N-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(5) 에 있어서, (R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 대신에, (S)-2,2,2-트리플루오로-1-페닐에탄-1-아민을 사용한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 9 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-(2-페닐프로판-2-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(3) 에 있어서, 1.0 M 프로핀의 DMF 용액 대신에, 시클로프로필아세틸렌을 사용하여, 실시예 1(5) 에 있어서, (R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 대신에, 2-페닐프로판-2-아민을 사용한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 10 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-(2,3-디플루오로페닐)에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(3) 에 있어서, 1.0 M 프로핀의 DMF 용액 대신에, 시클로프로필아세틸렌을 사용하여, 실시예 1(5) 에 있어서, (R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 대신에, (R)-(＋)-1-(2,3-디플루오로페닐)에틸아민을 사용한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 11

실시예 11(1) tert-부틸(2S,4R)-4-(4-아미노-6-브로모-5-(((R)-1-페닐에틸)카르바모일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-메틸피롤리딘-1-카르복실레이트

참고예 1(2) 의 화합물 (1.00 g), (R)-(＋)-1-페닐에틸아민 (0.503 g), 디이소프로필에틸아민 (1.79 g), N,N-디메틸포름아미드 (10 ㎖) 를 첨가하고, 계속해서 HATU (1.58 g) 를 첨가하여, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물에 아세트산에틸, 포화 탄산수소나트륨 수용액을 첨가하고, 아세트산에틸로 추출하고, 합친 유기층을 물, 이어서 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세톤) 로 정제하여, 아미드체 (1.53 g) 를 얻었다. 얻어진 화합물은 추가로 정제하지 않고 다음 반응에 사용하였다.

아미드체 (1.53 g) 에 클로로포름 (15 ㎖) 을 첨가하여 0 ℃ 로 냉각시킨 후, N-브로모숙신이미드 (0.88 g) 를 첨가하여 0 ℃ 에서 1 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하고, 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세트산에틸) 로 정제하여, 목적물 (1.39 g) 을 얻었다.

실시예 11(2) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-브로모-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 11(1) 의 화합물 (600 ㎎) 에 클로로포름 (3 ㎖) 을 첨가하여 0 ℃ 로 냉각시킨 후, 트리플루오로아세트산 (4.44 g) 을 첨가하여, 실온에서 1 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하고, 잔사에 아세토니트릴 (5 ㎖) 을 첨가하고 다시 감압 농축하여, 아민체를 얻었다. 얻어진 화합물은 추가로 정제하지 않고 다음 반응에 사용하였다.

얻어진 아민체에 아세토니트릴 (3 ㎖) 을 첨가하여 0 ℃ 로 냉각시킨 후, 염화아크릴 (99.9 ㎎), 디이소프로필에틸아민 (713 ㎎) 을 첨가하여, 0 ℃ 에서 1 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하고, 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (아세트산에틸 : 메탄올) 로 정제하여, 목적물 (281 ㎎) 을 얻었다.

실시예 11(3) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 11(2) 의 화합물 (65 ㎎), 디클로로비스(트리페닐포스핀)디팔라듐 (9.2 ㎎), 요오드화구리(Ⅰ) (5.0 ㎎), 시클로프로필아세틸렌 (13.0 ㎎), 트리에틸아민 (39.7 ㎎), N,N-디메틸포름아미드 (1.3 ㎖) 를 첨가하여 계 내를 질소 치환한 후, 70 ℃ 에서 2.5 시간 교반하였다. 반응 혼합물에 아세트산에틸, 포화 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 아세트산에틸로 추출하고, 합친 유기층을 물, 이어서 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (클로로포름 : 메탄올) 로 정제하여, 목적물 (50 ㎎) 을 얻었다.

실시예 12 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(3,3-디메틸부티-1-인-1-일)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 11(3) 에 있어서, 시클로프로필아세틸렌 대신에, 3,3-디메틸-1-부틴을 사용한 것 이외에는, 실시예 11 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 13 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(3-메톡시-3-메틸부티-1-인-1-일)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 11(3) 에 있어서, 시클로프로필아세틸렌 대신에, 3-메톡시-3-메틸-1-부틴을 사용한 것 이외에는, 실시예 11 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 14 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(부티-1-인-1-일)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 11(3) 에 있어서, 시클로프로필아세틸렌 대신에, 1-트리메틸실릴-1-부틴, 및 불화테트라-n-부틸암모늄을 사용한 것 이외에는, 실시예 11 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 15 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-(2-(2-플루오로페닐)프로판-2-일)-6-(3-메틸부티-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 11(1) 에 있어서, (R)-(＋)-1-페닐에틸아민 대신에, 2-(2-플루오로페닐)프로판-2-아민을 사용하여, 실시예 11(3) 에 있어서, 시클로프로필아세틸렌 대신에, 3-메틸-1-부틴을 사용한 것 이외에는, 실시예 11 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 16

실시예 16(1) tert-부틸(2R,4S)-4-(벤질옥시)-2-((토실옥시)메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트

tert-부틸(2R,4S)-4-(벤질옥시)-2-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (2.0 g) 를 염화메틸렌 (20 ㎖) 에 용해시켜, 0 ℃ 로 냉각 후, 1,4-디아자비시클로[2.2.2]옥탄 (2.2 g) 과 염화토실레이트 (1.9 g) 를 첨가하고, 실온으로 승온하여 4 시간 교반하였다. 반응 혼합물에 포화 탄산수소나트륨 수용액을 첨가한 후, 아세트산에틸로 추출하였다. 합친 유기층을 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세트산에틸) 로 정제하여, 목적물 (4.32 g) 을 얻었다.

실시예 16(2) tert-부틸(2S,4S)-4-(벤질옥시)-2-에틸피롤리딘-1-카르복실레이트

질소 분위기 하, 요오드화구리 (2.04 g) 를 디에틸에테르 (12 ㎖) 에 현탁시켜, 0 ℃ 로 냉각 후, 1.04 M 메틸리튬의 디에틸에테르 용액 (0.36 ㎖) 을 첨가하여 0 ℃ 에서 30 분간 교반하였다. 이어서, 실시예 16(1) 의 화합물 (1.98 g) 의 염화메틸렌 (4.0 ㎖) 용액을 첨가하고, 실온으로 승온하여 1 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 0 ℃ 로 냉각 후, 포화 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 합친 유기층을 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세트산에틸) 로 정제하여, 목적물 (707 ㎎) 을 얻었다.

실시예 16(3) tert-부틸(2S,4S)-2-에틸-4-하이드록시피롤리딘-1-카르복실레이트

실시예 16(2) 의 화합물 (1.06 g), 10 ％ 수산화팔라듐탄소 촉매 (160 ㎎) 를 에탄올 (11 ㎖) 과 THF (11 ㎖) 에 현탁시킨 후, 수소 치환하여, 실온에서 20 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 여과하고, 에탄올로 세정하여, 여과액을 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세트산에틸) 로 정제하여, 목적물 (709 ㎎) 을 얻었다.

실시예 16(4) tert-부틸(2S,4R)-4-(4-클로로-5-요오드-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-에틸피롤리딘-1-카르복실레이트

실시예 16(3) 의 화합물 (709 ㎎) 과 4-클로로-5-요오드-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (1.11 g) 을 THF (7.1 ㎖) 에 용해시켜, 0 ℃ 로 냉각 후, 트리페닐포스핀 (1.3 g) 와 디이소프로필아조디카르복실레이트 (1.00 ㎖) 를 첨가하고, 실온으로 승온하여 1 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 농축한 후, 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세트산에틸) 로 정제하여, 대응하는 커플링체를 얻었다. 얻어진 화합물은 추가로 정제하지 않고 다음 반응에 사용하였다. 내압관 중에, 얻어진 커플링체와 THF (5.4 ㎖) 와 암모니아수 (5.4 ㎖) 를 첨가하고, 100 ℃ 에서 14 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 물 (12.8 ㎖) 에 붓고, 아세트산에틸로 추출하였다. 합친 유기층을 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세톤) 로 정제하여, 목적물 (797 ㎎) 을 얻었다.

실시예 16(5) tert-부틸(2S,4R)-4-(4-아미노-6-브로모-5-(((R)-1-페닐에틸)카르바모일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-에틸피롤리딘-1-카르복실레이트

실시예 16(4) 의 화합물 (797 ㎎), 디클로로비스(트리페닐포스핀)디팔라듐 (25 ㎎), (R)-(＋)-1-페닐에틸아민 (0.55 ㎖) 을 DMF (8.0 ㎖) 에 현탁시킨 후, 일산화탄소 치환하여, 80 ℃ 에서 2 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물을 첨가하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 합친 유기층을 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세톤) 로 정제하여, 대응하는 아미드체를 얻었다. 얻어진 화합물은 추가로 정제하지 않고 다음 반응에 사용하였다. 얻어진 아미드체를 아세토니트릴 (8.2 ㎖) 에 용해시켜, -10 ℃ 로 냉각 후, N-브로모숙신이미드 (457 ㎎) 의 아세토니트릴 (8.2 ㎖) 용액을 천천히 적하하여, 반응 혼합물에 30 분간 교반하였다. 반응 혼합물에 아황산나트륨 수용액, 탄산수소나트륨 수용액을 첨가하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 합친 유기층을 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세톤) 로 정제하여, 목적물 (650 ㎎) 을 얻었다.

실시예 16(6) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-에틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-브로모-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 16(5) 의 화합물 (650 ㎎) 에 아세토니트릴 (9.7 ㎖) 을 첨가하여 0 ℃ 로 냉각시킨 후, 요오드화나트륨 (1.05 g) 과 염화트리메틸실릴 (0.89 ㎖) 을 첨가하여 0 ℃ 에서 1 시간 교반하였다. 반응 혼합물에 순차적으로, 에탄올 (9.7 ㎖), 이소프로필에틸아민 (2.0 ㎖) 과 아크릴산 무수물 (0.16 ㎖) 을 첨가하여 0 ℃ 에서 30 분간 교반하였다. 반응 혼합물에 암모니아수와 물을 첨가하여, 아세트산에틸로 추출하였다. 합친 유기층을 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세톤) 로 정제하여, 목적물 (256 ㎎) 을 얻었다.

실시예 16(7) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-에틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-페닐에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 16(6) 의 화합물 (120 ㎎), 아세토니트릴 (1.2 ㎖), 트리에틸아민 (0.10 ㎖), PdCl₂(PPh₃)₂ (8.2 ㎎), 요오드화구리(Ⅰ) (0.4 ㎎) 에 1.0 M 프로핀의 DMF 용액 (0.70 ㎖) 을 첨가하여 질소 치환한 후, 60 ℃ 에서 2 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 아세트산에틸과 포화 염화암모늄 수용액을 첨가한 후, 아세트산에틸로 추출하고, 합친 유기층을 물, 이어서 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (아세트산에틸 : 메탄올) 로 정제하여, 목적물 (102 ㎎) 을 얻었다.

실시예 17 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-에틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 16(7) 에 있어서, 1.0 M 프로핀의 DMF 용액 대신에, 시클로프로필아세틸렌을 사용한 것 이외에는, 실시예 16 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 18 7-((3R,5R)-1-아크릴로일-5-(메톡시메틸)피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 16(4) 에 있어서, 실시예 16(3) 의 화합물 대신에, tert-부틸(2R,4S)-4-하이드록시-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트를 사용하여, 실시예 16(7) 에 있어서, 1.0 M 프로핀의 DMF 용액 대신에, 시클로프로필아세틸렌을 사용한 것 이외에는, 실시예 16 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

실시예 19 7-((3R,5R)-1-아크릴로일-5-(에톡시메틸)피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 16(4) 에 있어서, 실시예 16(3) 의 화합물 대신에, tert-부틸(2R,4S)-2-(에톡시메틸)-4-하이드록시피롤리딘-1-카르복사미드를 사용하여, 실시예 16(7) 에 있어서, 1.0 M 프로핀의 DMF 용액 대신에, 시클로프로필아세틸렌을 사용한 것 이외에는, 실시예 16 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

비교예 1 4-아미노-N-(4-(메톡시메틸)페닐)-7-(1-메틸시클로프로필)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

국제 공개 제2017/146116호의 실시예 95 에 기재된 방법에 의해서, 표제 화합물을 얻었다.

비교예 2 1-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-(4-(2-(디메틸아미노)-2-옥소에틸)-2,3-디메틸페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-카르복사미드

국제 공개 제2017/038838호의 실시예 79 에 기재된 방법에 의해서, 표제 화합물을 얻었다.

비교예 3 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-(시클로헥실메틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(5) 에 있어서, (R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 대신에, 시클로헥실메탄아민을 사용한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

비교예 4 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-(2-메틸벤질)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(5) 에 있어서, (R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 대신에, o-톨릴메탄아민을 사용한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

비교예 5 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-메틸-N-((R)-1-페닐에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

실시예 1(5) 에 있어서, (R)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 대신에, (R)-N-메틸-1-페닐에탄-1-아민을 사용한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일하게 하여, 표제 화합물을 얻었다.

비교예 6(1) tert-부틸(2S,4R)-4-(4-아미노-5-(((R)-1-페닐에틸)카르바모일)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-메틸피롤리딘-1-카르복실레이트

실시예 11(1) (230 ㎎), 아세토니트릴 (4.6 ㎖), 트리에틸아민 (0.29 ㎖), PdCl₂(PPh₃)₂ (5.9 ㎎), 요오드화구리(Ⅰ) (1.6 ㎎) 에 1.0 M 프로핀의 DMF 용액 (2.1 ㎖) 을 첨가하여 질소 치환한 후, 70 ℃ 에서 1 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 아세트산에틸과 포화 탄산수소나트륨 수용액을 첨가한 후, 아세트산에틸로 추출하고, 합친 유기층을 물, 이어서 포화 식염수로 세정하여, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산 : 아세트산에틸) 로 정제하여, 목적물 (193 ㎎) 을 얻었다.

비교예 6(2) 4-아미노-7-((3R,5S)-5-메틸피롤리딘-3-일)-N-((R)-1-페닐에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드 염산염

비교예 6(1) (530 ㎎) 에 4 M 염산의 1,4-디옥산 용액 (5 ㎖) 을 첨가하고, 실온에서 2 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하여, 목적물 (420 ㎎) 을 얻었다.

비교예 6(3) 4-아미노-7-((3R,5S)-1-((E)-부츠-2-에노일)-5-메틸피롤리딘-3-일)-N-((R)-1-페닐에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드

비교예 6(2) (18 ㎎) 에 아세토니트릴 (0.5 ㎖) 을 첨가하여 0 ℃ 로 냉각시킨 후, 염화아크릴 (0.004 ㎖), 디이소프로필에틸아민 (0.036 ㎖) 을 첨가하여 0 ℃ 에서 1 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하고, 역상 분취 HPLC (물 : 아세토니트릴 (0.1 ％ 포름산)) 로 정제하여, 목적물 (8.7 ㎎) 을 얻었다.

이하에, 상기 실시예 및 비교예에서 합성한 화합물을 나타낸다.

[표 B-1]

[표 B-2]

[표 B-3]

[표 C]

시험예 1 HER2 인산화 활성 저해 작용 (in vitro) 의 측정

HER2 인산화 활성에 대한 화합물의 인 비트로에서의 저해 활성 측정법의 조건 설정에 있어서, 파킨엘머사의 ProfilerPro Peptide 22 와 동서열 (5-FAM-EEPLYWSFPAKKK-CONH₂) 의 펩티드를 기질로서 사용한 HER2 키나아제 반응의 보고 (XieH etal., PLoS One. 2011 ; 6 (7) : e21487) 에 기초하여, ProfilerPro Peptide 22 를 기질에 사용하였다. 시험에 사용한 정제 리콤비넌트 인간 HER2 단백질은 카르나바이오 사이언스사로부터 구입하였다. 화합물의 저해 활성 측정에 있어서는, 먼저, 본 발명의 화합물을 디메틸술폭시드 (DMSO) 로 단계 희석하였다. 다음으로, 키나아제 반응용 완충액 (13.5 mM Tris (pH 7.5), 2 mM 디티오트레이톨, 0.009 ％ Tween20) 중에 HER2 단백질, 기질 펩티드 (종농도는 1 μM), 염화망간 (종농도는 10 mM), ATP (종농도는 5 μM) 와 본 발명의 화합물의 DMSO 용액 (DMSO 의 종농도는 5 ％) 을 첨가하고, 25 ℃ 에서 30 분간 인큐베이션하여 키나아제 반응을 행하였다. 그곳에 종농도 30 mM 이 되도록 EDTA 를 첨가함으로써 반응을 정지시켰다. 마지막으로, LabChip (등록상표) EZ ReaderⅡ (파킨엘머사) 로, 인산화되지 않은 기질 펩티드 (S) 와 인산화된 펩티드 (P) 를 마이크로 유로 캐필러리 전기 영동에 의해서 분리·검출하였다. S 와 P 각각의 피크의 높이로부터 인산화 반응량을 구하고. 인산화 반응을 50 ％ 억제할 수 있는 화합물 농도를 IC 50 치 (nM) 로 정의하여, 이하의 표 1 에 나타내었다.

시험예 2 엑슨 20 삽입 변이형 HER2 (HER2ex20insYVMA) 인산화 활성 저해 작용 (in vitro) 의 측정

엑슨 20 삽입 변이형 HER2 인산화 활성에 대한 화합물의 인 비트로에서의 저해 활성 측정법의 조건 설정에 있어서, HER2 와 동일하게 ProfilerPro Peptide 22 를 기질에 사용하였다. 시험에 사용한 정제 리콤비넌트 인간 엑슨 20 삽입 변이형 HER2 (A775_G776insYVMA) 단백질은 서열 번호 7 에 나타내는 것이고, Signal Chem 사로부터 구입하였다. 화합물의 저해 활성 측정에 있어서는, 먼저, 본 발명의 화합물을 디메틸술폭시드 (DMSO) 로 단계 희석하였다. 다음으로, 키나아제 반응용 완충액 (13.5 mM Tris (pH 7.5), 2 mM 디티오트레이톨, 0.009 ％ Tween20) 중에 엑슨 20 삽입 변이형 HER2 단백질과 본 발명의 화합물 DMSO 용액 (DMSO 의 종농도는 5 ％) 을 첨가하여 25 ℃ 에서 30 분간 프레인큐베이션하였다. 그 후, 기질 펩티드 (종농도는 1 μM), 염화망간 (종농도는 25 mM), 염화마그네슘 (종농도는 20 mM), ATP (종농도는 200 μM) 를 첨가하고, 25 ℃ 에서 220 분간 인큐베이션하여 키나아제 반응을 행하였다. 그곳에 종농도 30 mM 이 되도록 EDTA 를 첨가하는 것으로 반응을 정지시켰다. 마지막으로, LabChip (등록상표) EZ ReaderⅡ (파킨엘머사) 로, 인산화되지 않은 기질 펩티드 (S) 와 인산화된 펩티드 (P) 를 마이크로 유로 캐필러리 전기 영동에 의해서 분리·검출하였다. S 와 P 각각의 피크의 높이로부터 인산화 반응량을 구하고. 인산화 반응을 50 ％ 억제할 수 있는 화합물 농도를 IC 50 치 (nM) 로 정의하여, 이하의 표 1 에 나타내었다.

[표 1]

이상의 결과로부터, 본 발명의 화합물은, HER2 인산화의 우수한 저해 활성 및 엑슨 20 삽입 변이형 HER2 인산화에 대해서, 우수한 저해 활성을 갖는 것이 명확해졌다.

시험예 3 HER2 발현 세포주에 대한 증식 저해 활성의 측정

HER2 과잉 발현 인간 유방암 세포주인 SK-BR-3 세포를, 10 ％ 소 태아 혈청을 포함하는 McCoy's 5a 배지 (라이프 테크놀로지스사 제조) 중에 현탁시켰다. 세포 현탁액을, 384 웰 평저 (平底) 마이크로 플레이트의 각 웰에 파종하여, 5 ％ 탄산 가스 함유의 배양기 중 37 ℃ 에서 1 일 배양하였다. 본 발명의 화합물을 DMSO 에 용해시키고, DMSO 를 사용하여 화합물을 종농도의 500 배의 농도가 되도록 희석하였다. 화합물의 DMSO 용액을 세포의 현탁에 사용한 배지로 희석하고, 이것을 세포의 배양 플레이트의 각 웰에 DMSO 의 최종 농도가 0.2 ％ 가 되도록 첨가하고, 5 ％ 탄산 가스 함유의 배양기 중 37 ℃ 에서 추가로 3 일 배양하였다. 화합물 존재 하에서 3 일간 배양 후의 세포수 계측을 CellTiter-Glo2.0 (프로메가사 제조) 을 사용하여 행하고, 이하의 식으로부터 증식 저해율을 산출하였다. 증식을 50 ％ 저해할 수 있는 화합물 농도를 IC 50 치 (nM) 로 정의하였다.

증식 저해율 (％) ＝ (C-T)/(C) × 100

T : 피검 화합물을 첨가한 웰의 발광 강도

C : 피검 화합물을 첨가하지 않은 웰의 발광 강도

결과를 이하의 표 2 에 나타내었다.

시험예 4 엑슨 20 삽입 변이형 HER2 발현 세포주에 대한 증식 저해 활성의 측정

엑슨 20 삽입 변이형 HER2 에 대한 증식 저해 활성은, 인간 엑슨 20 삽입 변이형 HER2 유전자를 도입한 마우스 B 임파구 전구 세포주인 Ba/F3 세포를 사용하여 행하였다. Ba/F3 세포는 10 ％ 소 태아 혈청 (FBS), 100 U/㎖ 페니실린, 100 ㎍/㎖ 스트렙토마이신 (서모피셔 사이언티픽) 및 1 ng/㎖ 마우스 인터류킨-3 (mIL-3) (CST) 을 포함하는 RPMI-1640 배지 (서모피셔 사이언티픽) 에서 유지하고, 인간 엑슨 20 삽입 변이형 HER2 유전자 (A775_G776insYVMA (HER2ex20insYVMA)), Internal Ribosome Binding Sequence (IRES) 및 쿠사비라 오렌지 유전자를 넣은 pCDNA3.1-hyg (＋) 벡터를 Amaxa (등록상표) Cell Line Nucleofector (등록상표) Kit V 에 의한 전기 천공법에 의해서 도입하였다. 하이그로마이신 B (나카라이테스크) 에서 선택한 엑슨 20 삽입 변이형 HER2 를 발현한 Ba/F3 세포 (Ba/F3-HER2insYVMA) 는 mIL-3 비의존적인 증식을 나타내었다.

세포 증식 저해 활성의 평가시에, Ba/F3-HER2insYVMA 세포를 10 ％ FBS, 100 U/㎖ 페니실린, 100 ㎍/㎖ 스트렙토마이신을 포함하는 RPMI-1640 배지에서 현탁하고, 세포 현탁액을 96 웰 평저 마이크로 플레이트의 각 웰에 파종하여, 5 ％ 탄산 가스 함유의 배양기 중 37 ℃ 에서 1 일 배양하였다. 본 발명의 화합물을 DMSO 에 용해시키고, DMSO 혹은 세포의 현탁에 사용한 배지를 사용하여 희석하고, 이것을 세포의 배양 플레이트의 각 웰에 DMSO 의 최종 농도가 0.2 ％ 가 되도록 첨가하여, 5 ％ 탄산 가스 함유의 배양기 중 37 ℃ 에서 추가로 3 일 배양하였다. 화합물 존재 하에서 3 일간 배양 후의 세포수 계측은 CellTiter-Glo (프로메가사 제조) 를 사용하여, 이하의 식으로부터 증식 저해율을 산출하였다. 증식을 50 ％ 저해할 수 있는 화합물 농도를 IC 50 치 (nM) 로 정의하였다.

증식 저해율 (％) ＝ (C-T)/(C) × 100

T : 피검 화합물을 첨가한 웰의 발광 강도

C : 피검 화합물을 첨가하지 않은 웰의 발광 강도

결과를 이하의 표 2 에 나타내었다.

[표 2]

이상의 결과로부터, 본 발명의 화합물군은, HER2 발현 세포주 (SK-BR-3) 및 엑슨 20 삽입 변이형 HER2 발현 세포주 (Ba/F3-HER2insYVMA) 에 있어서도 우수한 세포 증식 억제 활성을 갖는 것이 명확해졌다.

시험예 5 HER2 발현 세포주 (NCI-N87) 에 대한 증식 저해 활성의 측정

HER2 과잉 발현 인간 위암 세포주인 NCI-N87 세포 (American Type Culture Collection, Cat No. ATCC (등록상표) CRL-5822) 를, 10 ％ 소 태아 혈청을 포함하는 RPMI1640 배지 (와코 순약 공업 주식회사) 중에 현탁시켰다. 이어서, 세포 현탁액을, 96 웰 평저 마이크로 플레이트의 각 웰에 파종하여, 5 ％ 탄산 가스 함유의 배양기 중 37 ℃ 에서 1 일 배양하였다. 본 발명의 화합물을 DMSO 에 용해시키고, DMSO 를 사용하여 피검 화합물을 종농도의 1000 배의 농도가 되도록 희석하였다. 피검 화합물의 DMSO 용액을 세포의 현탁에 사용한 배지에서 희석하고, 이것을 세포의 배양 플레이트의 각 웰에 DMSO 의 최종 농도가 0.1 ％ 가 되도록 첨가하였다. Control 용 웰에는, DMSO 를 세포의 현탁에 사용한 배지에서 희석하고, 이것을 세포의 배양 플레이트의 각 웰에 DMSO 의 최종 농도가 0.1 ％ 가 되도록 첨가하였다. 약액을 첨가 후, 5 ％ 탄산 가스 함유의 배양기 중 37 ℃ 에서 추가로 3 일 배양하였다. 화합물 존재 하에서 3 일간 배양 후의 세포수 계측은 CellTiter-Glo2.0 (프로메가사 제조) 을 사용하고, 프로메가사가 추천하는 프로토콜에 준하여 행하였다. 이하의 식으로부터 증식 저해율을 산출하고, 증식을 50 ％ 저해할 수 있는 피검 화합물의 농도를 IC 50 치 (nM) 로 정의하였다.

증식 저해율 (％) ＝ (C-T)/C × 100

T : 피검 화합물을 첨가한 웰의 발광 강도

C : 피검 화합물을 첨가하지 않은 웰의 발광 강도

결과를 이하의 표 3 에 나타내었다.

[표 3]

이상의 결과로부터, 본 발명의 화합물은, HER2 과잉 발현 세포주 (NCI-N87) 에 있어서도 우수한 세포 증식 억제 활성을 갖는 것이 명확해졌다.

시험예 6 경구 흡수성의 평가

본 발명의 화합물을 0.5 ％ HPMC 수용액, 0.1 N 염산에 현탁 또는 용해시키고, BALB/cA 마우스 (재팬 클레어 주식회사) 에게 50 ㎎/㎏/day 의 용량으로 경구 투여하였다. 경구 투여 후, 0.5, 1, 2, 4 및 6 시간 후에 안면 정맥으로부터 시간 경과적으로 채혈하여 혈장을 얻었다. 얻어진 혈장 중의 화합물 농도를 LC-MS/MS 에 의해서 측정하고, 경구 흡수성의 평가를 행하였다.

결과를 이하의 표 4 에 나타내었다.

[표 4]

이상의 결과로부터, 본 발명의 화합물은 충분한 혈장 중 농도가 관측되어, 양호한 경구 흡수성을 나타내었다. 그에 비해서, 비교예 2 는 경구 흡수성이 본 발명의 화합물과 비교하여 4 배 이상 감약하였다.

시험예 7 뇌이행성의 평가

본 발명의 화합물을 0.5 ％ HPMC 수용액, 0.1 N 염산에 현탁 또는 용해시키고, BALB/cA 마우스 (재팬 클레어 주식회사) 에 50 ㎎/㎏/day 의 용량으로 경구 투여하였다. 경구 투여 후, 0.5 시간 후에 안면 정맥으로부터 채혈 후, 뇌 전체를 적출하여 혈장 및 뇌 샘플을 얻었다. 얻어진 뇌 샘플에 3 배량의 물을 첨가 후, 초음파 호모게나이저를 사용하여 호모게나이즈하여, 뇌 호모게네이트를 얻었다. 얻어진 혈장 중 및 뇌 호모게네이트 중의 화합물 농도를 LC-MS/MS 에 의해서 측정하고, 뇌/혈장 중 화합물 농도로부터 뇌이행성을 평가하였다.

결과를 이하의 표 5 에 나타내었다.

[표 5]

이상의 결과로부터, 본 발명의 화합물은 비교예 2 와 비교하여 뇌/혈장 중 화합물 농도 (Kp 치) 가 높아, 양호한 뇌이행성을 나타내었다. 또, 비교예 2 는 뇌중 화합물 농도가, 본 발명의 화합물과 비교하여 80 배 이상 감약되어 있었다.

시험예 8 Lusiferase 유전자 도입 HER2 발현 세포주 (NCI-N87-luc) 의 뇌 직접 이식 모델에 대한 항종양 효과 확인 시험 (in vivo)

뇌 직접 이식 모델에 의한 피검 화합물의 항종양 효과는, American Type Culture Collection 으로부터 구입한 인간 위암 종양 세포인 NCI-N87 에 Lusiferase 유전자를 도입한 NCI-N87-Luc 를 사용하였다. NCI-N87-Luc 는, 10 ％ 소 태아 혈청 (FBS) 을 포함하는 RPMI-1640 (4.5 g/ℓ 글루코오스, 10 mM HEPES 및 1 mM 피루브산나트륨 함유) (와코 순약 주식회사) 배지에 있어서, 5 ％ CO2 인큐베이터 중에 있어서 37 ℃ 에서 세포주를 배양하였다.

NCI-N87-Luc 세포를 PBS 중에 6.25 × 10⁷ 세포/㎖ 의 농도로 재현탁하였다.

마우스용 이어 바를 사용하여 약 6 ∼ 7 주령의 누드 마우스 (BALB/cAJcl-nu/nu, 재팬 클레어 주식회사) 를 뇌 정위 고정 장치에 고정시키고, 뇌 상부의 피부를 알코올 면으로 소독 후에, 메스로 절개하였다.

마이크로 드릴을 사용하여, 두개골에 구멍을 내고, 머니플레이터, 시린지 펌프를 사용하여, 세포 현탁액 4 ㎕ 를 0.8 ㎕/분의 조건에서 뇌 내에 이식하였다.

뇌 내 종양량의 기준으로, 이식 약 3 주일 후에 생존예 전체 예에 대해서, IVIS (PerkinElmer,Inc., 형식 : LuminaⅡ) 를 사용하여 총 플럭스 (Total Flux) (Photon/sec) 를 측정하였다. 그 결과로부터, MiSTAT (Ver.2.00) 의 군 분리 프로그램을 이용하여, 각 군 6 마리씩의 동물을 할당하였다.

피검 화합물은 1 일 1 회, 군 분리 다음날부터 21 일간 (Day 1 ∼ 21) 연일 경구 투여하였다. 효과의 유무 판단에는, 판정일 (Day 22) 의 총 플럭스 (Total Flux) 를 대수 변환 (Log10) 한 값을 사용하였다. 실시예 2 (Example 2), 및 실시예 11 (Example 11) 은 25 ㎎/㎏/day, 실시예 12 (Example 12) 는 50 ㎎/㎏/day 의 용량으로 투여하였다.

세로축에 각 군의 평균 총 플럭스 (Total Flux) 를 대수 변환 (Log10) 한 값, 가로축에 이식 후의 일수 (Day) 를 설정한 그래프를 작성하고, 약제 투여 기간 중의 총 플럭스 (Total Flux) 의 시간 경과적 추이를 관찰하였다.

피검 화합물로는, 실시예 2, 실시예 11, 및 실시예 12 의 화합물을 사용하고, 컨트롤 (Control) 로는 0.1 N HCl, 0.5 ％ HPMC 수용액을 사용하였다.

결과를 이하의 도 1 내지 도 3 에 나타내었다. 각 군의 Day 22 의 총 플럭스 (Total Flux) 를 대수 변환 (Log10) 한 값을 Dunnett 검정, 혹은 Student-t 검정으로 해석한 결과, 피검 화합물군은 컨트롤군과 비교하여, 통계학적으로 유의 (유의 수준 양측 5 ％) 하게 낮은 것으로 나타났다 (도 1 : 실시예 2 의 화합물을 사용, P＝0.0077 ; 도 2 : 실시예 11 의 화합물을 사용, P＝0.0007 ; 도 3 : 실시예 12 의 화합물을 사용, P＝0.0012). 또, 체중 측정에는 동물용 전자 저울을 사용하였다. n 일째의 체중 (BWn) 으로부터 n 일째 체중 변화율 (BWCn) 을 하기의 식에 의해서 산출하였다.

BWCn (％) ＝ [(n 일째의 체중) - (군 분리일의 체중)]/(군 분리일의 체중) × 100

이 시험 결과로부터, 본 발명의 화합물은, 누드 마우스 뇌 내에 이식한 HER2 과잉 발현 세포주 (NCI-N87-luc) 에 대해서, 우수한 항종양 효과를 갖는 것이 명확해졌다. 또, 실시예 2 (Example 2), 실시예 11 (Example 11) 을 투여한 마우스는, 모든 개체에서 -20 ％ 이상의 체중 감소는 보이지 않았기 때문에, 위중한 부작용은 없는 것이 명확해졌다.

또한, 본 명세서에 기재된 모든 문헌 및 간행물은, 그 목적에 관계없이 참조에 의해서 그 전체를 본 명세서에 받아 들이는 것으로 한다. 또, 본 명세서는, 본원의 우선권 주장의 기초가 되는 일본국 특허출원인 일본 특허출원 2019-003403호 (2019년 1월 11일 출원) 의 특허청구범위, 명세서 및 도면의 개시 내용을 포함한다.

본 발명의 몇몇 실시형태를 설명했지만, 이들 실시형태는 예로서 제시한 것으로서, 발명의 범위를 한정하는 것은 의도하지 않는다. 이들 신규 실시형태는, 그 밖의 여러 가지 형태로 실시될 수 있고, 발명의 요지를 일탈하지 않는 범위에서 다양한 생략, 치환, 변경이 가능하다. 이들 실시형태나 그 변형은, 발명의 범위나 요지에 포함됨과 함께, 특허청구범위에 기재된 발명과 그 균등 범위에 포함된다.

SEQUENCE LISTING <110> TAIHO PHARMACEUTICAL CO., LTD. <120> Pyrimidine compound or salt thereof <130> G2225 <150> JP 2019-003403 <151> 2019-01-11 <160> 7 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 4664 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 gcttgctccc aatcacagga gaaggaggag gtggaggagg agggctgctt gaggaagtat 60 aagaatgaag ttgtgaagct gagattcccc tccattggga ccggagaaac caggggagcc 120 ccccgggcag ccgcgcgccc cttcccacgg ggccctttac tgcgccgcgc gcccggcccc 180 cacccctcgc agcaccccgc gccccgcgcc ctcccagccg ggtccagccg gagccatggg 240 gccggagccg cagtgagcac catggagctg gcggccttgt gccgctgggg gctcctcctc 300 gccctcttgc cccccggagc cgcgagcacc caagtgtgca ccggcacaga catgaagctg 360 cggctccctg ccagtcccga gacccacctg gacatgctcc gccacctcta ccagggctgc 420 caggtggtgc agggaaacct ggaactcacc tacctgccca ccaatgccag cctgtccttc 480 ctgcaggata tccaggaggt gcagggctac gtgctcatcg ctcacaacca agtgaggcag 540 gtcccactgc agaggctgcg gattgtgcga ggcacccagc tctttgagga caactatgcc 600 ctggccgtgc tagacaatgg agacccgctg aacaatacca cccctgtcac aggggcctcc 660 ccaggaggcc tgcgggagct gcagcttcga agcctcacag agatcttgaa aggaggggtc 720 ttgatccagc ggaaccccca gctctgctac caggacacga ttttgtggaa ggacatcttc 780 cacaagaaca accagctggc tctcacactg atagacacca accgctctcg ggcctgccac 840 ccctgttctc cgatgtgtaa gggctcccgc tgctggggag agagttctga ggattgtcag 900 agcctgacgc gcactgtctg tgccggtggc tgtgcccgct gcaaggggcc actgcccact 960 gactgctgcc atgagcagtg tgctgccggc tgcacgggcc ccaagcactc tgactgcctg 1020 gcctgcctcc acttcaacca cagtggcatc tgtgagctgc actgcccagc cctggtcacc 1080 tacaacacag acacgtttga gtccatgccc aatcccgagg gccggtatac attcggcgcc 1140 agctgtgtga ctgcctgtcc ctacaactac ctttctacgg acgtgggatc ctgcaccctc 1200 gtctgccccc tgcacaacca agaggtgaca gcagaggatg gaacacagcg gtgtgagaag 1260 tgcagcaagc cctgtgcccg agtgtgctat ggtctgggca tggagcactt gcgagaggtg 1320 agggcagtta ccagtgccaa tatccaggag tttgctggct gcaagaagat ctttgggagc 1380 ctggcatttc tgccggagag ctttgatggg gacccagcct ccaacactgc cccgctccag 1440 ccagagcagc tccaagtgtt tgagactctg gaagagatca caggttacct atacatctca 1500 gcatggccgg acagcctgcc tgacctcagc gtcttccaga acctgcaagt aatccgggga 1560 cgaattctgc acaatggcgc ctactcgctg accctgcaag ggctgggcat cagctggctg 1620 gggctgcgct cactgaggga actgggcagt ggactggccc tcatccacca taacacccac 1680 ctctgcttcg tgcacacggt gccctgggac cagctctttc ggaacccgca ccaagctctg 1740 ctccacactg ccaaccggcc agaggacgag tgtgtgggcg agggcctggc ctgccaccag 1800 ctgtgcgccc gagggcactg ctggggtcca gggcccaccc agtgtgtcaa ctgcagccag 1860 ttccttcggg gccaggagtg cgtggaggaa tgccgagtac tgcaggggct ccccagggag 1920 tatgtgaatg ccaggcactg tttgccgtgc caccctgagt gtcagcccca gaatggctca 1980 gtgacctgtt ttggaccgga ggctgaccag tgtgtggcct gtgcccacta taaggaccct 2040 cccttctgcg tggcccgctg ccccagcggt gtgaaacctg acctctccta catgcccatc 2100 tggaagtttc cagatgagga gggcgcatgc cagccttgcc ccatcaactg cacccactcc 2160 tgtgtggacc tggatgacaa gggctgcccc gccgagcaga gagccagccc tctgacgtcc 2220 atcatctctg cggtggttgg cattctgctg gtcgtggtct tgggggtggt ctttgggatc 2280 ctcatcaagc gacggcagca gaagatccgg aagtacacga tgcggagact gctgcaggaa 2340 acggagctgg tggagccgct gacacctagc ggagcgatgc ccaaccaggc gcagatgcgg 2400 atcctgaaag agacggagct gaggaaggtg aaggtgcttg gatctggcgc ttttggcaca 2460 gtctacaagg gcatctggat ccctgatggg gagaatgtga aaattccagt ggccatcaaa 2520 gtgttgaggg aaaacacatc ccccaaagcc aacaaagaaa tcttagacga agcatacgtg 2580 atggctggtg tgggctcccc atatgtctcc cgccttctgg gcatctgcct gacatccacg 2640 gtgcagctgg tgacacagct tatgccctat ggctgcctct tagaccatgt ccgggaaaac 2700 cgcggacgcc tgggctccca ggacctgctg aactggtgta tgcagattgc caaggggatg 2760 agctacctgg aggatgtgcg gctcgtacac agggacttgg ccgctcggaa cgtgctggtc 2820 aagagtccca accatgtcaa aattacagac ttcgggctgg ctcggctgct ggacattgac 2880 gagacagagt accatgcaga tgggggcaag gtgcccatca agtggatggc gctggagtcc 2940 attctccgcc ggcggttcac ccaccagagt gatgtgtgga gttatggtgt gactgtgtgg 3000 gagctgatga cttttggggc caaaccttac gatgggatcc cagcccggga gatccctgac 3060 ctgctggaaa agggggagcg gctgccccag ccccccatct gcaccattga tgtctacatg 3120 atcatggtca aatgttggat gattgactct gaatgtcggc caagattccg ggagttggtg 3180 tctgaattct cccgcatggc cagggacccc cagcgctttg tggtcatcca gaatgaggac 3240 ttgggcccag ccagtccctt ggacagcacc ttctaccgct cactgctgga ggacgatgac 3300 atgggggacc tggtggatgc tgaggagtat ctggtacccc agcagggctt cttctgtcca 3360 gaccctgccc cgggcgctgg gggcatggtc caccacaggc accgcagctc atctaccagg 3420 agtggcggtg gggacctgac actagggctg gagccctctg aagaggaggc ccccaggtct 3480 ccactggcac cctccgaagg ggctggctcc gatgtatttg atggtgacct gggaatgggg 3540 gcagccaagg ggctgcaaag cctccccaca catgacccca gccctctaca gcggtacagt 3600 gaggacccca cagtacccct gccctctgag actgatggct acgttgcccc cctgacctgc 3660 agcccccagc ctgaatatgt gaaccagcca gatgttcggc cccagccccc ttcgccccga 3720 gagggccctc tgcctgctgc ccgacctgct ggtgccactc tggaaaggcc caagactctc 3780 tccccaggga agaatggggt cgtcaaagac gtttttgcct ttgggggtgc cgtggagaac 3840 cccgagtact tgacacccca gggaggagct gcccctcagc cccaccctcc tcctgccttc 3900 agcccagcct tcgacaacct ctattactgg gaccaggacc caccagagcg gggggctcca 3960 cccagcacct tcaaagggac acctacggca gagaacccag agtacctggg tctggacgtg 4020 ccagtgtgaa ccagaaggcc aagtccgcag aagccctgat gtgtcctcag ggagcaggga 4080 aggcctgact tctgctggca tcaagaggtg ggagggccct ccgaccactt ccaggggaac 4140 ctgccatgcc aggaacctgt cctaaggaac cttccttcct gcttgagttc ccagatggct 4200 ggaaggggtc cagcctcgtt ggaagaggaa cagcactggg gagtctttgt ggattctgag 4260 gccctgccca atgagactct agggtccagt ggatgccaca gcccagcttg gccctttcct 4320 tccagatcct gggtactgaa agccttaggg aagctggcct gagaggggaa gcggccctaa 4380 gggagtgtct aagaacaaaa gcgacccatt cagagactgt ccctgaaacc tagtactgcc 4440 ccccatgagg aaggaacagc aatggtgtca gtatccaggc tttgtacaga gtgcttttct 4500 gtttagtttt tacttttttt gttttgtttt tttaaagatg aaataaagac ccagggggag 4560 aatgggtgtt gtatggggag gcaagtgtgg ggggtccttc tccacaccca ctttgtccat 4620 ttgcaaatat attttggaaa acagctaaaa aaaaaaaaaa aaaa 4664 <210> 2 <211> 1255 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Glu Leu Ala Ala Leu Cys Arg Trp Gly Leu Leu Leu Ala Leu Leu 1 5 10 15 Pro Pro Gly Ala Ala Ser Thr Gln Val Cys Thr Gly Thr Asp Met Lys 20 25 30 Leu Arg Leu Pro Ala Ser Pro Glu Thr His Leu Asp Met Leu Arg His 35 40 45 Leu Tyr Gln Gly Cys Gln Val Val Gln Gly Asn Leu Glu Leu Thr Tyr 50 55 60 Leu Pro Thr Asn Ala Ser Leu Ser Phe Leu Gln Asp Ile Gln Glu Val 65 70 75 80 Gln Gly Tyr Val Leu Ile Ala His Asn Gln Val Arg Gln Val Pro Leu 85 90 95 Gln Arg Leu Arg Ile Val Arg Gly Thr Gln Leu Phe Glu Asp Asn Tyr 100 105 110 Ala Leu Ala Val Leu Asp Asn Gly Asp Pro Leu Asn Asn Thr Thr Pro 115 120 125 Val Thr Gly Ala Ser Pro Gly Gly Leu Arg Glu Leu Gln Leu Arg Ser 130 135 140 Leu Thr Glu Ile Leu Lys Gly Gly Val Leu Ile Gln Arg Asn Pro Gln 145 150 155 160 Leu Cys Tyr Gln Asp Thr Ile Leu Trp Lys Asp Ile Phe His Lys Asn 165 170 175 Asn Gln Leu Ala Leu Thr Leu Ile Asp Thr Asn Arg Ser Arg Ala Cys 180 185 190 His Pro Cys Ser Pro Met Cys Lys Gly Ser Arg Cys Trp Gly Glu Ser 195 200 205 Ser Glu Asp Cys Gln Ser Leu Thr Arg Thr Val Cys Ala Gly Gly Cys 210 215 220 Ala Arg Cys Lys Gly Pro Leu Pro Thr Asp Cys Cys His Glu Gln Cys 225 230 235 240 Ala Ala Gly Cys Thr Gly Pro Lys His Ser Asp Cys Leu Ala Cys Leu 245 250 255 His Phe Asn His Ser Gly Ile Cys Glu Leu His Cys Pro Ala Leu Val 260 265 270 Thr Tyr Asn Thr Asp Thr Phe Glu Ser Met Pro Asn Pro Glu Gly Arg 275 280 285 Tyr Thr Phe Gly Ala Ser Cys Val Thr Ala Cys Pro Tyr Asn Tyr Leu 290 295 300 Ser Thr Asp Val Gly Ser Cys Thr Leu Val Cys Pro Leu His Asn Gln 305 310 315 320 Glu Val Thr Ala Glu Asp Gly Thr Gln Arg Cys Glu Lys Cys Ser Lys 325 330 335 Pro Cys Ala Arg Val Cys Tyr Gly Leu Gly Met Glu His Leu Arg Glu 340 345 350 Val Arg Ala Val Thr Ser Ala Asn Ile Gln Glu Phe Ala Gly Cys Lys 355 360 365 Lys Ile Phe Gly Ser Leu Ala Phe Leu Pro Glu Ser Phe Asp Gly Asp 370 375 380 Pro Ala Ser Asn Thr Ala Pro Leu Gln Pro Glu Gln Leu Gln Val Phe 385 390 395 400 Glu Thr Leu Glu Glu Ile Thr Gly Tyr Leu Tyr Ile Ser Ala Trp Pro 405 410 415 Asp Ser Leu Pro Asp Leu Ser Val Phe Gln Asn Leu Gln Val Ile Arg 420 425 430 Gly Arg Ile Leu His Asn Gly Ala Tyr Ser Leu Thr Leu Gln Gly Leu 435 440 445 Gly Ile Ser Trp Leu Gly Leu Arg Ser Leu Arg Glu Leu Gly Ser Gly 450 455 460 Leu Ala Leu Ile His His Asn Thr His Leu Cys Phe Val His Thr Val 465 470 475 480 Pro Trp Asp Gln Leu Phe Arg Asn Pro His Gln Ala Leu Leu His Thr 485 490 495 Ala Asn Arg Pro Glu Asp Glu Cys Val Gly Glu Gly Leu Ala Cys His 500 505 510 Gln Leu Cys Ala Arg Gly His Cys Trp Gly Pro Gly Pro Thr Gln Cys 515 520 525 Val Asn Cys Ser Gln Phe Leu Arg Gly Gln Glu Cys Val Glu Glu Cys 530 535 540 Arg Val Leu Gln Gly Leu Pro Arg Glu Tyr Val Asn Ala Arg His Cys 545 550 555 560 Leu Pro Cys His Pro Glu Cys Gln Pro Gln Asn Gly Ser Val Thr Cys 565 570 575 Phe Gly Pro Glu Ala Asp Gln Cys Val Ala Cys Ala His Tyr Lys Asp 580 585 590 Pro Pro Phe Cys Val Ala Arg Cys Pro Ser Gly Val Lys Pro Asp Leu 595 600 605 Ser Tyr Met Pro Ile Trp Lys Phe Pro Asp Glu Glu Gly Ala Cys Gln 610 615 620 Pro Cys Pro Ile Asn Cys Thr His Ser Cys Val Asp Leu Asp Asp Lys 625 630 635 640 Gly Cys Pro Ala Glu Gln Arg Ala Ser Pro Leu Thr Ser Ile Ile Ser 645 650 655 Ala Val Val Gly Ile Leu Leu Val Val Val Leu Gly Val Val Phe Gly 660 665 670 Ile Leu Ile Lys Arg Arg Gln Gln Lys Ile Arg Lys Tyr Thr Met Arg 675 680 685 Arg Leu Leu Gln Glu Thr Glu Leu Val Glu Pro Leu Thr Pro Ser Gly 690 695 700 Ala Met Pro Asn Gln Ala Gln Met Arg Ile Leu Lys Glu Thr Glu Leu 705 710 715 720 Arg Lys Val Lys Val Leu Gly Ser Gly Ala Phe Gly Thr Val Tyr Lys 725 730 735 Gly Ile Trp Ile Pro Asp Gly Glu Asn Val Lys Ile Pro Val Ala Ile 740 745 750 Lys Val Leu Arg Glu Asn Thr Ser Pro Lys Ala Asn Lys Glu Ile Leu 755 760 765 Asp Glu Ala Tyr Val Met Ala Gly Val Gly Ser Pro Tyr Val Ser Arg 770 775 780 Leu Leu Gly Ile Cys Leu Thr Ser Thr Val Gln Leu Val Thr Gln Leu 785 790 795 800 Met Pro Tyr Gly Cys Leu Leu Asp His Val Arg Glu Asn Arg Gly Arg 805 810 815 Leu Gly Ser Gln Asp Leu Leu Asn Trp Cys Met Gln Ile Ala Lys Gly 820 825 830 Met Ser Tyr Leu Glu Asp Val Arg Leu Val His Arg Asp Leu Ala Ala 835 840 845 Arg Asn Val Leu Val Lys Ser Pro Asn His Val Lys Ile Thr Asp Phe 850 855 860 Gly Leu Ala Arg Leu Leu Asp Ile Asp Glu Thr Glu Tyr His Ala Asp 865 870 875 880 Gly Gly Lys Val Pro Ile Lys Trp Met Ala Leu Glu Ser Ile Leu Arg 885 890 895 Arg Arg Phe Thr His Gln Ser Asp Val Trp Ser Tyr Gly Val Thr Val 900 905 910 Trp Glu Leu Met Thr Phe Gly Ala Lys Pro Tyr Asp Gly Ile Pro Ala 915 920 925 Arg Glu Ile Pro Asp Leu Leu Glu Lys Gly Glu Arg Leu Pro Gln Pro 930 935 940 Pro Ile Cys Thr Ile Asp Val Tyr Met Ile Met Val Lys Cys Trp Met 945 950 955 960 Ile Asp Ser Glu Cys Arg Pro Arg Phe Arg Glu Leu Val Ser Glu Phe 965 970 975 Ser Arg Met Ala Arg Asp Pro Gln Arg Phe Val Val Ile Gln Asn Glu 980 985 990 Asp Leu Gly Pro Ala Ser Pro Leu Asp Ser Thr Phe Tyr Arg Ser Leu 995 1000 1005 Leu Glu Asp Asp Asp Met Gly Asp Leu Val Asp Ala Glu Glu Tyr 1010 1015 1020 Leu Val Pro Gln Gln Gly Phe Phe Cys Pro Asp Pro Ala Pro Gly 1025 1030 1035 Ala Gly Gly Met Val His His Arg His Arg Ser Ser Ser Thr Arg 1040 1045 1050 Ser Gly Gly Gly Asp Leu Thr Leu Gly Leu Glu Pro Ser Glu Glu 1055 1060 1065 Glu Ala Pro Arg Ser Pro Leu Ala Pro Ser Glu Gly Ala Gly Ser 1070 1075 1080 Asp Val Phe Asp Gly Asp Leu Gly Met Gly Ala Ala Lys Gly Leu 1085 1090 1095 Gln Ser Leu Pro Thr His Asp Pro Ser Pro Leu Gln Arg Tyr Ser 1100 1105 1110 Glu Asp Pro Thr Val Pro Leu Pro Ser Glu Thr Asp Gly Tyr Val 1115 1120 1125 Ala Pro Leu Thr Cys Ser Pro Gln Pro Glu Tyr Val Asn Gln Pro 1130 1135 1140 Asp Val Arg Pro Gln Pro Pro Ser Pro Arg Glu Gly Pro Leu Pro 1145 1150 1155 Ala Ala Arg Pro Ala Gly Ala Thr Leu Glu Arg Pro Lys Thr Leu 1160 1165 1170 Ser Pro Gly Lys Asn Gly Val Val Lys Asp Val Phe Ala Phe Gly 1175 1180 1185 Gly Ala Val Glu Asn Pro Glu Tyr Leu Thr Pro Gln Gly Gly Ala 1190 1195 1200 Ala Pro Gln Pro His Pro Pro Pro Ala Phe Ser Pro Ala Phe Asp 1205 1210 1215 Asn Leu Tyr Tyr Trp Asp Gln Asp Pro Pro Glu Arg Gly Ala Pro 1220 1225 1230 Pro Ser Thr Phe Lys Gly Thr Pro Thr Ala Glu Asn Pro Glu Tyr 1235 1240 1245 Leu Gly Leu Asp Val Pro Val 1250 1255 <210> 3 <211> 4940 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 3 aagttcctgt gttctttatt ctactctccg ctgaagtcca cacagtttaa 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caggcgcaga tgcggatcct gaaagagacg 2640 gagctgagga aggtgaaggt gcttggatct ggcgcttttg gcacagtcta caagggcatc 2700 tggatccctg atggggagaa tgtgaaaatt ccagtggcca tcaaagtgtt gagggaaaac 2760 acatccccca aagccaacaa agaaatctta gacgaagcat acgtgatggc tggtgtgggc 2820 tccccatatg tctcccgcct tctgggcatc tgcctgacat ccacggtgca gctggtgaca 2880 cagcttatgc cctatggctg cctcttagac catgtccggg aaaaccgcgg acgcctgggc 2940 tcccaggacc tgctgaactg gtgtatgcag attgccaagg ggatgagcta cctggaggat 3000 gtgcggctcg tacacaggga cttggccgct cggaacgtgc tggtcaagag tcccaaccat 3060 gtcaaaatta cagacttcgg gctggctcgg ctgctggaca ttgacgagac agagtaccat 3120 gcagatgggg gcaaggtgcc catcaagtgg atggcgctgg agtccattct ccgccggcgg 3180 ttcacccacc agagtgatgt gtggagttat ggtgtgactg tgtgggagct gatgactttt 3240 ggggccaaac cttacgatgg gatcccagcc cgggagatcc ctgacctgct ggaaaagggg 3300 gagcggctgc cccagccccc catctgcacc attgatgtct acatgatcat ggtcaaatgt 3360 tggatgattg actctgaatg tcggccaaga ttccgggagt tggtgtctga attctcccgc 3420 atggccaggg acccccagcg ctttgtggtc atccagaatg aggacttggg cccagccagt 3480 cccttggaca gcaccttcta ccgctcactg ctggaggacg atgacatggg ggacctggtg 3540 gatgctgagg agtatctggt accccagcag ggcttcttct gtccagaccc tgccccgggc 3600 gctgggggca tggtccacca caggcaccgc agctcatcta ccaggagtgg cggtggggac 3660 ctgacactag ggctggagcc ctctgaagag gaggccccca ggtctccact ggcaccctcc 3720 gaaggggctg gctccgatgt atttgatggt gacctgggaa tgggggcagc caaggggctg 3780 caaagcctcc ccacacatga ccccagccct ctacagcggt acagtgagga ccccacagta 3840 cccctgccct ctgagactga tggctacgtt gcccccctga cctgcagccc ccagcctgaa 3900 tatgtgaacc agccagatgt tcggccccag cccccttcgc cccgagaggg ccctctgcct 3960 gctgcccgac ctgctggtgc cactctggaa aggcccaaga ctctctcccc agggaagaat 4020 ggggtcgtca aagacgtttt tgcctttggg ggtgccgtgg agaaccccga gtacttgaca 4080 ccccagggag gagctgcccc tcagccccac cctcctcctg ccttcagccc agccttcgac 4140 aacctctatt actgggacca ggacccacca gagcgggggg ctccacccag caccttcaaa 4200 gggacaccta cggcagagaa cccagagtac ctgggtctgg acgtgccagt gtgaaccaga 4260 aggccaagtc cgcagaagcc ctgatgtgtc ctcagggagc agggaaggcc tgacttctgc 4320 tggcatcaag aggtgggagg gccctccgac cacttccagg ggaacctgcc atgccaggaa 4380 cctgtcctaa ggaaccttcc ttcctgcttg agttcccaga tggctggaag gggtccagcc 4440 tcgttggaag aggaacagca ctggggagtc tttgtggatt ctgaggccct gcccaatgag 4500 actctagggt ccagtggatg ccacagccca gcttggccct ttccttccag atcctgggta 4560 ctgaaagcct tagggaagct ggcctgagag gggaagcggc cctaagggag tgtctaagaa 4620 caaaagcgac ccattcagag actgtccctg aaacctagta ctgcccccca tgaggaagga 4680 acagcaatgg tgtcagtatc caggctttgt acagagtgct tttctgttta gtttttactt 4740 tttttgtttt gtttttttaa agatgaaata aagacccagg gggagaatgg gtgttgtatg 4800 gggaggcaag tgtggggggt ccttctccac acccactttg tccatttgca aatatatttt 4860 ggaaaacagc taaaaaaaaa aaaaaaaaa 4889 <210> 6 <211> 1225 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 6 Met Lys Leu Arg Leu Pro Ala Ser Pro Glu Thr His Leu Asp Met Leu 1 5 10 15 Arg His Leu Tyr Gln Gly Cys Gln Val Val Gln Gly Asn Leu Glu Leu 20 25 30 Thr Tyr Leu Pro Thr Asn Ala Ser Leu Ser Phe Leu Gln Asp Ile Gln 35 40 45 Glu Val Gln Gly Tyr Val Leu Ile Ala His Asn Gln Val Arg Gln Val 50 55 60 Pro Leu Gln Arg Leu Arg Ile Val Arg Gly Thr Gln Leu Phe Glu Asp 65 70 75 80 Asn Tyr Ala Leu Ala Val Leu Asp Asn Gly Asp Pro Leu Asn Asn Thr 85 90 95 Thr Pro Val Thr Gly Ala Ser Pro Gly Gly Leu Arg Glu Leu Gln Leu 100 105 110 Arg Ser Leu Thr Glu Ile Leu Lys Gly Gly Val Leu Ile Gln Arg Asn 115 120 125 Pro Gln Leu Cys Tyr Gln Asp Thr Ile Leu Trp Lys Asp Ile Phe His 130 135 140 Lys Asn Asn Gln Leu Ala Leu Thr Leu Ile Asp Thr Asn Arg Ser Arg 145 150 155 160 Ala Cys His Pro Cys Ser Pro Met Cys Lys Gly Ser Arg Cys Trp Gly 165 170 175 Glu Ser Ser Glu Asp Cys Gln Ser Leu Thr Arg Thr Val Cys Ala Gly 180 185 190 Gly Cys Ala Arg Cys Lys Gly Pro Leu Pro Thr Asp Cys Cys His Glu 195 200 205 Gln Cys Ala Ala Gly Cys Thr Gly Pro Lys His Ser Asp Cys Leu Ala 210 215 220 Cys Leu His Phe Asn His Ser Gly Ile Cys Glu Leu His Cys Pro Ala 225 230 235 240 Leu Val Thr Tyr Asn Thr Asp Thr Phe Glu Ser Met Pro Asn Pro Glu 245 250 255 Gly Arg Tyr Thr Phe Gly Ala Ser Cys Val Thr Ala Cys Pro Tyr Asn 260 265 270 Tyr Leu Ser Thr Asp Val Gly Ser Cys Thr Leu Val Cys Pro Leu His 275 280 285 Asn Gln Glu Val Thr Ala Glu Asp Gly Thr Gln Arg Cys Glu Lys Cys 290 295 300 Ser Lys Pro Cys Ala Arg Val Cys Tyr Gly Leu Gly Met Glu His Leu 305 310 315 320 Arg Glu Val Arg Ala Val Thr Ser Ala Asn Ile Gln Glu Phe Ala Gly 325 330 335 Cys Lys Lys Ile Phe Gly Ser Leu Ala Phe Leu Pro Glu Ser Phe Asp 340 345 350 Gly Asp Pro Ala Ser Asn Thr Ala Pro Leu Gln Pro Glu Gln Leu Gln 355 360 365 Val Phe Glu Thr Leu Glu Glu Ile Thr Gly Tyr Leu Tyr Ile Ser Ala 370 375 380 Trp Pro Asp Ser Leu Pro Asp Leu Ser Val Phe Gln Asn Leu Gln Val 385 390 395 400 Ile Arg Gly Arg Ile Leu His Asn Gly Ala Tyr Ser Leu Thr Leu Gln 405 410 415 Gly Leu Gly Ile Ser Trp Leu Gly Leu Arg Ser Leu Arg Glu Leu Gly 420 425 430 Ser Gly Leu Ala Leu Ile His His Asn Thr His Leu Cys Phe Val His 435 440 445 Thr Val Pro Trp Asp Gln Leu Phe Arg Asn Pro His Gln Ala Leu Leu 450 455 460 His Thr Ala Asn Arg Pro Glu Asp Glu Cys Val Gly Glu Gly Leu Ala 465 470 475 480 Cys His Gln Leu Cys Ala Arg Gly His Cys Trp Gly Pro Gly Pro Thr 485 490 495 Gln Cys Val Asn Cys Ser Gln Phe Leu Arg Gly Gln Glu Cys Val Glu 500 505 510 Glu Cys Arg Val Leu Gln Gly Leu Pro Arg Glu Tyr Val Asn Ala Arg 515 520 525 His Cys Leu Pro Cys His Pro Glu Cys Gln Pro Gln Asn Gly Ser Val 530 535 540 Thr Cys Phe Gly Pro Glu Ala Asp Gln Cys Val Ala Cys Ala His Tyr 545 550 555 560 Lys Asp Pro Pro Phe Cys Val Ala Arg Cys Pro Ser Gly Val Lys Pro 565 570 575 Asp Leu Ser Tyr Met Pro Ile Trp Lys Phe Pro Asp Glu Glu Gly Ala 580 585 590 Cys Gln Pro Cys Pro Ile Asn Cys Thr His Ser Cys Val Asp Leu Asp 595 600 605 Asp Lys Gly Cys Pro Ala Glu Gln Arg Ala Ser Pro Leu Thr Ser Ile 610 615 620 Ile Ser Ala Val Val Gly Ile Leu Leu Val Val Val Leu Gly Val Val 625 630 635 640 Phe Gly Ile Leu Ile Lys Arg Arg Gln Gln Lys Ile Arg Lys Tyr Thr 645 650 655 Met Arg Arg Leu Leu Gln Glu Thr Glu Leu Val Glu Pro Leu Thr Pro 660 665 670 Ser Gly Ala Met Pro Asn Gln Ala Gln Met Arg Ile Leu Lys Glu Thr 675 680 685 Glu Leu Arg Lys Val Lys Val Leu Gly Ser Gly Ala Phe Gly Thr Val 690 695 700 Tyr Lys Gly Ile Trp Ile Pro Asp Gly Glu Asn Val Lys Ile Pro Val 705 710 715 720 Ala Ile Lys Val Leu Arg Glu Asn Thr Ser Pro Lys Ala Asn Lys Glu 725 730 735 Ile Leu Asp Glu Ala Tyr Val Met Ala Gly Val Gly Ser Pro Tyr Val 740 745 750 Ser Arg Leu Leu Gly Ile Cys Leu Thr Ser Thr Val Gln Leu Val Thr 755 760 765 Gln Leu Met Pro Tyr Gly Cys Leu Leu Asp His Val Arg Glu Asn Arg 770 775 780 Gly Arg Leu Gly Ser Gln Asp Leu Leu Asn Trp Cys Met Gln Ile Ala 785 790 795 800 Lys Gly Met Ser Tyr Leu Glu Asp Val Arg Leu Val His Arg Asp Leu 805 810 815 Ala Ala Arg Asn Val Leu Val Lys Ser Pro Asn His Val Lys Ile Thr 820 825 830 Asp Phe Gly Leu Ala Arg Leu Leu Asp Ile Asp Glu Thr Glu Tyr His 835 840 845 Ala Asp Gly Gly Lys Val Pro Ile Lys Trp Met Ala Leu Glu Ser Ile 850 855 860 Leu Arg Arg Arg Phe Thr His Gln Ser Asp Val Trp Ser Tyr Gly Val 865 870 875 880 Thr Val Trp Glu Leu Met Thr Phe Gly Ala Lys Pro Tyr Asp Gly Ile 885 890 895 Pro Ala Arg Glu Ile Pro Asp Leu Leu Glu Lys Gly Glu Arg Leu Pro 900 905 910 Gln Pro Pro Ile Cys Thr Ile Asp Val Tyr Met Ile Met Val Lys Cys 915 920 925 Trp Met Ile Asp Ser Glu Cys Arg Pro Arg Phe Arg Glu Leu Val Ser 930 935 940 Glu Phe Ser Arg Met Ala Arg Asp Pro Gln Arg Phe Val Val Ile Gln 945 950 955 960 Asn Glu Asp Leu Gly Pro Ala Ser Pro Leu Asp Ser Thr Phe Tyr Arg 965 970 975 Ser Leu Leu Glu Asp Asp Asp Met Gly Asp Leu Val Asp Ala Glu Glu 980 985 990 Tyr Leu Val Pro Gln Gln Gly Phe Phe Cys Pro Asp Pro Ala Pro Gly 995 1000 1005 Ala Gly Gly Met Val His His Arg His Arg Ser Ser Ser Thr Arg 1010 1015 1020 Ser Gly Gly Gly Asp Leu Thr Leu Gly Leu Glu Pro Ser Glu Glu 1025 1030 1035 Glu Ala Pro Arg Ser Pro Leu Ala Pro Ser Glu Gly Ala Gly Ser 1040 1045 1050 Asp Val Phe Asp Gly Asp Leu Gly Met Gly Ala Ala Lys Gly Leu 1055 1060 1065 Gln Ser Leu Pro Thr His Asp Pro Ser Pro Leu Gln Arg Tyr Ser 1070 1075 1080 Glu Asp Pro Thr Val Pro Leu Pro Ser Glu Thr Asp Gly Tyr Val 1085 1090 1095 Ala Pro Leu Thr Cys Ser Pro Gln Pro Glu Tyr Val Asn Gln Pro 1100 1105 1110 Asp Val Arg Pro Gln Pro Pro Ser Pro Arg Glu Gly Pro Leu Pro 1115 1120 1125 Ala Ala Arg Pro Ala Gly Ala Thr Leu Glu Arg Pro Lys Thr Leu 1130 1135 1140 Ser Pro Gly Lys Asn Gly Val Val Lys Asp Val Phe Ala Phe Gly 1145 1150 1155 Gly Ala Val Glu Asn Pro Glu Tyr Leu Thr Pro Gln Gly Gly Ala 1160 1165 1170 Ala Pro Gln Pro His Pro Pro Pro Ala Phe Ser Pro Ala Phe Asp 1175 1180 1185 Asn Leu Tyr Tyr Trp Asp Gln Asp Pro Pro Glu Arg Gly Ala Pro 1190 1195 1200 Pro Ser Thr Phe Lys Gly Thr Pro Thr Ala Glu Asn Pro Glu Tyr 1205 1210 1215 Leu Gly Leu Asp Val Pro Val 1220 1225 <210> 7 <211> 1259 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic construct <400> 7 Met Glu Leu Ala Ala Leu Cys Arg Trp Gly Leu Leu Leu Ala Leu Leu 1 5 10 15 Pro Pro Gly Ala Ala Ser Thr Gln Val Cys Thr Gly Thr Asp Met Lys 20 25 30 Leu Arg Leu Pro Ala Ser Pro Glu Thr His Leu Asp Met Leu Arg His 35 40 45 Leu Tyr Gln Gly Cys Gln Val Val Gln Gly Asn Leu Glu Leu Thr Tyr 50 55 60 Leu Pro Thr Asn Ala Ser Leu Ser Phe Leu Gln Asp Ile Gln Glu Val 65 70 75 80 Gln Gly Tyr Val Leu Ile Ala His Asn Gln Val Arg Gln Val Pro Leu 85 90 95 Gln Arg Leu Arg Ile Val Arg Gly Thr Gln Leu Phe Glu Asp Asn Tyr 100 105 110 Ala Leu Ala Val Leu Asp Asn Gly Asp Pro Leu Asn Asn Thr Thr Pro 115 120 125 Val Thr Gly Ala Ser Pro Gly Gly Leu Arg Glu Leu Gln Leu Arg Ser 130 135 140 Leu Thr Glu Ile Leu Lys Gly Gly Val Leu Ile Gln Arg Asn Pro Gln 145 150 155 160 Leu Cys Tyr Gln Asp Thr Ile Leu Trp Lys Asp Ile Phe His Lys Asn 165 170 175 Asn Gln Leu Ala Leu Thr Leu Ile Asp Thr Asn Arg Ser Arg Ala Cys 180 185 190 His Pro Cys Ser Pro Met Cys Lys Gly Ser Arg Cys Trp Gly Glu Ser 195 200 205 Ser Glu Asp Cys Gln Ser Leu Thr Arg Thr Val Cys Ala Gly Gly Cys 210 215 220 Ala Arg Cys Lys Gly Pro Leu Pro Thr Asp Cys Cys His Glu Gln Cys 225 230 235 240 Ala Ala Gly Cys Thr Gly Pro Lys His Ser Asp Cys Leu Ala Cys Leu 245 250 255 His Phe Asn His Ser Gly Ile Cys Glu Leu His Cys Pro Ala Leu Val 260 265 270 Thr Tyr Asn Thr Asp Thr Phe Glu Ser Met Pro Asn Pro Glu Gly Arg 275 280 285 Tyr Thr Phe Gly Ala Ser Cys Val Thr Ala Cys Pro Tyr Asn Tyr Leu 290 295 300 Ser Thr Asp Val Gly Ser Cys Thr Leu Val Cys Pro Leu His Asn Gln 305 310 315 320 Glu Val Thr Ala Glu Asp Gly Thr Gln Arg Cys Glu Lys Cys Ser Lys 325 330 335 Pro Cys Ala Arg Val Cys Tyr Gly Leu Gly Met Glu His Leu Arg Glu 340 345 350 Val Arg Ala Val Thr Ser Ala Asn Ile Gln Glu Phe Ala Gly Cys Lys 355 360 365 Lys Ile Phe Gly Ser Leu Ala Phe Leu Pro Glu Ser Phe Asp Gly Asp 370 375 380 Pro Ala Ser Asn Thr Ala Pro Leu Gln Pro Glu Gln Leu Gln Val Phe 385 390 395 400 Glu Thr Leu Glu Glu Ile Thr Gly Tyr Leu Tyr Ile Ser Ala Trp Pro 405 410 415 Asp Ser Leu Pro Asp Leu Ser Val Phe Gln Asn Leu Gln Val Ile Arg 420 425 430 Gly Arg Ile Leu His Asn Gly Ala Tyr Ser Leu Thr Leu Gln Gly Leu 435 440 445 Gly Ile Ser Trp Leu Gly Leu Arg Ser Leu Arg Glu Leu Gly Ser Gly 450 455 460 Leu Ala Leu Ile His His Asn Thr His Leu Cys Phe Val His Thr Val 465 470 475 480 Pro Trp Asp Gln Leu Phe Arg Asn Pro His Gln Ala Leu Leu His Thr 485 490 495 Ala Asn Arg Pro Glu Asp Glu Cys Val Gly Glu Gly Leu Ala Cys His 500 505 510 Gln Leu Cys Ala Arg Gly His Cys Trp Gly Pro Gly Pro Thr Gln Cys 515 520 525 Val Asn Cys Ser Gln Phe Leu Arg Gly Gln Glu Cys Val Glu Glu Cys 530 535 540 Arg Val Leu Gln Gly Leu Pro Arg Glu Tyr Val Asn Ala Arg His Cys 545 550 555 560 Leu Pro Cys His Pro Glu Cys Gln Pro Gln Asn Gly Ser Val Thr Cys 565 570 575 Phe Gly Pro Glu Ala Asp Gln Cys Val Ala Cys Ala His Tyr Lys Asp 580 585 590 Pro Pro Phe Cys Val Ala Arg Cys Pro Ser Gly Val Lys Pro Asp Leu 595 600 605 Ser Tyr Met Pro Ile Trp Lys Phe Pro Asp Glu Glu Gly Ala Cys Gln 610 615 620 Pro Cys Pro Ile Asn Cys Thr His Ser Cys Val Asp Leu Asp Asp Lys 625 630 635 640 Gly Cys Pro Ala Glu Gln Arg Ala Ser Pro Leu Thr Ser Ile Ile Ser 645 650 655 Ala Val Val Gly Ile Leu Leu Val Val Val Leu Gly Val Val Phe Gly 660 665 670 Ile Leu Ile Lys Arg Arg Gln Gln Lys Ile Arg Lys Tyr Thr Met Arg 675 680 685 Arg Leu Leu Gln Glu Thr Glu Leu Val Glu Pro Leu Thr Pro Ser Gly 690 695 700 Ala Met Pro Asn Gln Ala Gln Met Arg Ile Leu Lys Glu Thr Glu Leu 705 710 715 720 Arg Lys Val Lys Val Leu Gly Ser Gly Ala Phe Gly Thr Val Tyr Lys 725 730 735 Gly Ile Trp Ile Pro Asp Gly Glu Asn Val Lys Ile Pro Val Ala Ile 740 745 750 Lys Val Leu Arg Glu Asn Thr Ser Pro Lys Ala Asn Lys Glu Ile Leu 755 760 765 Asp Glu Ala Tyr Val Met Ala Tyr Val Met Ala Gly Val Gly Ser Pro 770 775 780 Tyr Val Ser Arg Leu Leu Gly Ile Cys Leu Thr Ser Thr Val Gln Leu 785 790 795 800 Val Thr Gln Leu Met Pro Tyr Gly Cys Leu Leu Asp His Val Arg Glu 805 810 815 Asn Arg Gly Arg Leu Gly Ser Gln Asp Leu Leu Asn Trp Cys Met Gln 820 825 830 Ile Ala Lys Gly Met Ser Tyr Leu Glu Asp Val Arg Leu Val His Arg 835 840 845 Asp Leu Ala Ala Arg Asn Val Leu Val Lys Ser Pro Asn His Val Lys 850 855 860 Ile Thr Asp Phe Gly Leu Ala Arg Leu Leu Asp Ile Asp Glu Thr Glu 865 870 875 880 Tyr His Ala Asp Gly Gly Lys Val Pro Ile Lys Trp Met Ala Leu Glu 885 890 895 Ser Ile Leu Arg Arg Arg Phe Thr His Gln Ser Asp Val Trp Ser Tyr 900 905 910 Gly Val Thr Val Trp Glu Leu Met Thr Phe Gly Ala Lys Pro Tyr Asp 915 920 925 Gly Ile Pro Ala Arg Glu Ile Pro Asp Leu Leu Glu Lys Gly Glu Arg 930 935 940 Leu Pro Gln Pro Pro Ile Cys Thr Ile Asp Val Tyr Met Ile Met Val 945 950 955 960 Lys Cys Trp Met Ile Asp Ser Glu Cys Arg Pro Arg Phe Arg Glu Leu 965 970 975 Val Ser Glu Phe Ser Arg Met Ala Arg Asp Pro Gln Arg Phe Val Val 980 985 990 Ile Gln Asn Glu Asp Leu Gly Pro Ala Ser Pro Leu Asp Ser Thr Phe 995 1000 1005 Tyr Arg Ser Leu Leu Glu Asp Asp Asp Met Gly Asp Leu Val Asp 1010 1015 1020 Ala Glu Glu Tyr Leu Val Pro Gln Gln Gly Phe Phe Cys Pro Asp 1025 1030 1035 Pro Ala Pro Gly Ala Gly Gly Met Val His His Arg His Arg Ser 1040 1045 1050 Ser Ser Thr Arg Ser Gly Gly Gly Asp Leu Thr Leu Gly Leu Glu 1055 1060 1065 Pro Ser Glu Glu Glu Ala Pro Arg Ser Pro Leu Ala Pro Ser Glu 1070 1075 1080 Gly Ala Gly Ser Asp Val Phe Asp Gly Asp Leu Gly Met Gly Ala 1085 1090 1095 Ala Lys Gly Leu Gln Ser Leu Pro Thr His Asp Pro Ser Pro Leu 1100 1105 1110 Gln Arg Tyr Ser Glu Asp Pro Thr Val Pro Leu Pro Ser Glu Thr 1115 1120 1125 Asp Gly Tyr Val Ala Pro Leu Thr Cys Ser Pro Gln Pro Glu Tyr 1130 1135 1140 Val Asn Gln Pro Asp Val Arg Pro Gln Pro Pro Ser Pro Arg Glu 1145 1150 1155 Gly Pro Leu Pro Ala Ala Arg Pro Ala Gly Ala Thr Leu Glu Arg 1160 1165 1170 Pro Lys Thr Leu Ser Pro Gly Lys Asn Gly Val Val Lys Asp Val 1175 1180 1185 Phe Ala Phe Gly Gly Ala Val Glu Asn Pro Glu Tyr Leu Thr Pro 1190 1195 1200 Gln Gly Gly Ala Ala Pro Gln Pro His Pro Pro Pro Ala Phe Ser 1205 1210 1215 Pro Ala Phe Asp Asn Leu Tyr Tyr Trp Asp Gln Asp Pro Pro Glu 1220 1225 1230 Arg Gly Ala Pro Pro Ser Thr Phe Lys Gly Thr Pro Thr Ala Glu 1235 1240 1245 Asn Pro Glu Tyr Leu Gly Leu Asp Val Pro Val 1250 1255

Claims (21)

1. 하기 일반식 (Ⅰ)
   

   

   
   (식 중, R₁ 은, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 가져도 되는 C1 - C4 알킬기, 또는 C3 - C4 시클로알킬기를 나타내고 ;
   R₂ 는, 수소 원자, 할로겐 원자, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기 혹은 불소 원자를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기, 또는 C1 - C6 알콕시기를 나타내며 ;
   R₃ 은, 수소 원자, 또는 치환기로서 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기를 나타내고 ;
   R₄ 는, 수소 원자, 또는 C1 - C4 알킬기를 나타내고 ;
   R₅ 는, 불소 원자 및 염소 원자에서 선택되는 치환기를 1 내지 3 개 가져도 되는 페닐기를 나타낸다.)
   로 나타내는 화합물 또는 그 염.
2. 제 1 항에 있어서,
   하기 일반식 (Ⅱ)
   

   

   
   (식 중, R₁ 은, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 가져도 되는 C1 - C4 알킬기, 또는 C3 - C4 시클로알킬기를 나타내고 ;
   R₂ 는, 수소 원자, 할로겐 원자, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기 혹은 불소 원자를 각각 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기, 또는 C1 - C6 알콕시기를 나타내며 ;
   R₃ 은, 수소 원자, 또는 치환기로서 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기를 나타내고 ;
   R₄ 는, 수소 원자, 또는 C1 - C4 알킬기를 나타내고 ;
   R₅ 는, 불소 원자 및 염소 원자에서 선택되는 치환기를 1 내지 3 개 가져도 되는 페닐기를 나타낸다.)
   로 나타내는, 화합물 또는 그 염.
3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
   R₂ 가, 치환기로서 C1 - C4 알콕시기를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C6 알킬기인, 화합물 또는 그 염.
4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
   R₃ 이, 치환기로서 불소 원자를 1 내지 5 개 가져도 되는 C1 - C4 알킬기인, 화합물 또는 그 염.
5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
   R₅ 가, 불소 원자 및 염소 원자로 이루어지는 군에서 선택되는 치환기를 1 또는 2 개 가져도 되는 페닐기인, 화합물 또는 그 염.
6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
   R₁ 이, 메틸기, tert-부틸기, 또는 시클로프로필기인, 화합물 또는 그 염.
7. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서,
   R₂ 가, 메틸기, 에틸기, 메톡시메틸기, 또는 에톡시메틸기인, 화합물 또는 그 염.
8. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
   R₃ 이, 메틸기인, 화합물 또는 그 염.
9. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서,
   R₄ 가, 수소 원자인, 화합물 또는 그 염.
10. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R₅ 가, 페닐기인, 화합물 또는 그 염.
11. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    화합물이, 이하의 (1) ∼ (3) 에서 선택되는 화합물인, 화합물 또는 그 염.
    (1) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-N-((R)-1-페닐에틸)-6-(프로프-1-인-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드
    (2) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(시클로프로필에티닐)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드
    (3) 7-((3R,5S)-1-아크릴로일-5-메틸피롤리딘-3-일)-4-아미노-6-(3,3-디메틸부티-1-인-1-일)-N-((R)-1-페닐에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-카르복사미드
12. 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염을 함유하는 의약 조성물.
13. 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염을 유효 성분으로 하는 항종양제.
14. 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염을 유효 성분으로 하는 경구 투여용의 항종양제.
15. 의약 조성물을 제조하기 위한 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염의 사용.
16. 항종양제를 제조하기 위한 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염의 사용.
17. 경구 투여용의 항종양제를 제조하기 위한 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염의 사용.
18. 의약으로서 사용하기 위한 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염.
19. 종양의 치료에 사용하기 위한 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염.
20. 경구 투여하여 종양의 치료에 사용하기 위한 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염.
21. 종양의 치료 방법으로서, 그것을 필요로 하는 대상에, 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 방법.

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