KR20190108080A

KR20190108080A - 2,4,5-치환된 피리미딘 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 암 또는 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Info

Publication number: KR20190108080A
Application number: KR1020190028954A
Authority: KR
Inventors: 정명호; 김주빈; 전현호; 이윤호; 이화; 강세인; 조서현; 강주희; 김환; 김현경; 서경아; 손정범; 김남두; 석지윤; 이선화
Original assignee: 보로노이바이오 주식회사; 보로노이 주식회사
Priority date: 2018-03-13
Filing date: 2019-03-13
Publication date: 2019-09-23
Also published as: WO2019177374A8; WO2019177374A1

Abstract

2,4,5-치환된 피리미딘 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 암 또는 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. 상기 화합물은 EGFR(epidermal growth factor receptor) 야생형 또는 돌연변이에 대하여 높은 억제능을 나타내고, JAK3에 대한 억제효과가 우수하므로, EGFR 야생형 또는 EGFR 돌연변이가 발현된 암이나, JAK3의 활성과 관련됨 암 또는 염증질환의 치료에 유용하게 사용될 수 있고, 폐암 세포주 증식 억제능이 우수한 바, 특히, 폐암의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

2,4,5-치환된 피리미딘 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 암 또는 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 {2,4,5-substituted pyrimidine derivatives, preparation method thereof, and pharmaceutical composition for use in preventing or treating cancer or inflammatory disease in containing the same as an active ingredient}

2,4,5-치환된 피리미딘 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 암 또는 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

암의 발생은 화학물질, 방사선, 바이러스를 포함하는 여러 가지 환경적인 요인과 종양 유전자, 종양 억제 유전자, 세포사멸(apoptosis)과 DNA 복구에 관련된 유전자의 변화 등에 관련되어 있는데, 최근 이러한 암의 분자적 메커니즘을 이해함에 따라 새로운 치료법인 표적 항암치료가 가능하게 되었다.

표적 치료제들은 일반적으로 암세포가 특징적으로 가지고 있는 분자를 표적으로 하여 그 효과를 나타낼 수 있도록 만들어지며, 분자적 표적이 되는 것은 암세포의 신호전달경로(signal transduction pathway), 혈관신생(angiogenesis), 세포간질(matrix), 세포주기조절인자(cell cycle regulator), 세포사멸(apoptosis) 등에 관련된 유전자들이다. 현재 치료에서 중요한 표적 치료제로 사용되고 있는 것으로는 티로신 키나아제(tyrosine kinase) 억제제를 비롯한 '신호전달경로 억제제'와 '신생혈관생성 억제제'들이 있다.

단백질 티로신 키나아제(protein tyrosine kinase)는 많은 악성 종양에서 중요한 역할을 하는 것으로 밝혀졌으며, 특히 erbB 패밀리의 수용체 티로신 키나아제(receptor tyrosine kinase)인 상피 성장 인자 수용체(epidermal growth factor receptor, EGFR)는 비소세포폐암종(NSCLC), 유방암, 신경교종, 두경부의 편평 세포 암종, 대장암, 곧창자 생암종, 두경부암, 위암 및 전립선암을 포함한 많은 상피세포 종양에서 비정상적으로 활성화되어 있고, 상기 EGFR-티로신 키나아제의 활성화가 지속적인 세포 증식, 주변 조직에 대한 침범, 원격 전이, 혈관 형성을 일으키며 세포 생존을 증가시킴이 알려진 바 있다.

구체적으로, 상기 EGFR은 ErbB 티로신키나아제 수용체군(tyrosine kinase receptors family; EGFR, HER-2, ErbB-3, ErbB-4) 중의 하나로, 세포외 리간드결합영역(extracelluar ligand-binding domain)과 티로신 키나아제영역(tyrosine kinase domain)을 포함한 세포내 영역(intracellular domain)을 가지고 있는 막경유 티로신키나아제(transmembrane tyrosine kinase)이다. 호모다이머(homodimer) 또는 헤테로다이머(heterodimer)를 이룬 수용체에 리간드가 결합하면 세포내의 티로신키나아제가 활성화되고 이렇게 EGFR에 의해 자극된 신호는 포스파티딜이노지톨 3-키나아제(phosphatidylinositol 3-kinase(PI3K)/AKT/mTOR, RAS/RAF/MAPK, JAK/STAT) 신호전달 경로를 활성화한다(Nat Rev Cancer 2007;7:169-81).

EGFR은 특히, 비소세포폐암(non-small cell lungcancer, NSCLC)의 절반이상에서 과발현되어 치료의 표적으로 많은 연구들이 시행되었다. EGFR 티로신키나아제 활성을 억제하는 EGFR TKI(tyrosine kinase inhibitor)가 개발되었으며, 대표적인 약제로는 제피티닙(IRESSA™), 에를로티닙(TARCEVA™), 라파티닙(TYKERB™, TYVERB™)이 있다.

한편, 2004년 EGFR의 활성화 돌연변이가 비소세포 폐암(NSCL: non-small-cell lungcancer)에서 제피티닙 요법에 대한 반응과 상관관계가 있다는 것이 보고되었다(Science [2004] Vol.304, 1497-500 및 New England Journal of Medicine [2004] Vol. 350, 2129-39).

구체적으로, 상기 EGFR 돌연변이는 크게 민감성(sensitizing) 돌연변이와 내성(resistant) 돌연변이로 구분되는데 엑손 19의 결손(deletion)과 엑손 21의 L858R 점 돌연변이(point mutation)가가장 중요한 민감성 돌연변이로서 약 85∼90%를 차지하고 있고 엑손 19 del 돌연변이가 TKI에 대한 민감성이 더 좋은 것으로 알려져 있다. 반면 엑손 20의 T790M 점 돌연변이는 가장 중요한 내성 돌연변이로서 획득 내성 환자의 50% 이상에서 발견되는 것으로 알려져 있다(Clin Cancer Res 2006;12:6494-6501.).

지금까지 동정된 체세포 돌연변이에는 엑손 19 내 틀내 결손 또는 엑손 20 내 삽입뿐만 아니라, 발현된 단백질 내에서 단일 핵산 잔기가 변형된 점 돌연변이(예컨대, L858R, G719S, G719C, G719A, L861Q)가 포함된다(Fukuoka et al. JCO 2003; Kris et al JAMA 2003 and Shepherd et al NEJM 2004).

EGFR 돌연변이를 갖는 NSCLC 환자에게서 제피티닙/에를로티닙의 초기 임상 효과에도 불구하고, 대부분의 환자에게서 결국에는 이들 제제에 대한 요법을 받는 동안 진행성 암이 발병한다. 재발된 표본의 초기연구에서 제피티닙 및 에를로티닙을 EGFR 키나아제 활성의 비효과적인 억제제가 되게 하는 이차 EGFR 돌연변이, T790M가 동정되었다(Kobayashi et al NEJM 2005 and Pao et al PLOS Medicine 2005). EGFR T790M 돌연변이가 제피티닙 또는 에를로티닙에 대해 내성을 획득한 환자 유래 종양의 대략 50%(24/48)에서 발견됨이 후속 연구에서 입증되었다(Kosaka et al CCR 2006; Balak et al CCR 2006 and Engelman et al Science 2007). 이러한 이차 유전적 변형은 키나아제 억제제로 치료된 환자에게서 '게이트키퍼(gatekeeper)' 잔기 및 이것과 연관된 이차 내성 대립 유전자와 유사한 위치에서 야기된다(예를 들어, 이마티닙 내성 CML에서 ABL 내 T315I).

EGFR 돌연변이인 EGFR_del19 또는 EGFR_L858R이 비소세포폐암과 두경부암의 주요한 원인이라는 것은 오래 전부터 알려져 왔고, 이들의 치료약물인 이레사, 타세바가 개발되어 현재 임상에서 사용되고 있다. 하지만, 이러한 약물을 환자에 사용하였을 때 약물의 구조에 기반을 두는 EGFR 2차 돌연변이가 생기는 획득내성(acquired resistance)이 관찰되었고, 이것이 실제 약제내성의 주요원인이라는 것도 밝혀졌다. EGFR 1세대 저해제를 평균 10개월 정도 사용하게 되면 EGFR 키나아제의 게이트키퍼(gatekeeper)에 위치한 T790M 돌연변이라는 획득내성이 발생하여 EGFR 1세대 저해제들이 약효를 내지 못하는 것이다. 즉, EGFR_del19_T790M 또는 EGFR_L858R_T790M 이중돌연변이가 발생하여 기존 치료제가 약효를 나타내지 못하게 된다.

단백질 키나아제(kinase)는 다른 단백질의 특정 잔기의 인산화를 촉매하는 효소로서, 인간의 게놈에는 약 500개의 단백질 키나아제가 존재하며 이들은 전체 인간 유전자의 약 2%를 차지한다. 단백질 키나아제는 기질에 따라 세린 및/또는 트레오닌 잔기를 차별적으로 인산화하는 카이네즈, 타이로신 잔기를 차별적으로 인산화하는 카이네즈, 및 타이로신 및 세린/트레오닌 잔기 모두를 인산화하는 카이네즈로 분류될 수 있다. 단백질 키나아제는 세포외 신호를 핵으로 전달(transduction)하는 신호 전달경로에 있어 핵심적인 요소로서, 세포 주기, 세포 성장, 분화(differentiation), 세포자살(apoptosis), 세포 이동성(cell mobility), 유사분열(mitogenesis) 등을 조절함으로써, 생체내 다양한 질환에 관여한다. 이러한 키나아제 관련 질환에는 자가면역성 질환인 아토피성 피부염(atopic Dermatitis), 천식, 류마티스성 관절염(rheumatoid arthritis), 크론병(Crohn's disease), 건선, 크루존 증후군(Crouzon syndrome), 연골 무형성증(achondroplasia), 및 타나토포릭 이형성증(thanatophoric dysplasia); 암, 예컨대 전립선암, 결장암, 유방암, 뇌 및 목 암, 백혈병 및 림프종(lymphoma); 당뇨병; 재협착증(restenosis); 동맥경화증(atherosclerosis); 간 및 신장의 섬유증(fibrosis); 골수 증식성 질환(myeloproliferative disorder) 및 림프 증식성 질환(lymphoproliferative disorder); 및 안구 질환 등이 보고되어 있으며, 이들 질환은 키나아제 효소의 돌연변이, 과다발현 또는 비정상적인 활성화와 관련된 키나아제에 대한 적절한 조절 메커니즘의 손상, 상위 또는 하위 신호전달에 관여하는 성장 인자나 사이토카인의 과다 생산 또는 과소 생산에 의해 직접적으로 또는 간접적으로 야기될 수 있다고 알려져 있다. 따라서, 키나아제의 작용을 선택적으로 저해함으로써 상기 질환 등을 예방 및 치료할 수 있을 것으로 예상되며, 이를 위해 효과적인 단백질 키나아제 억제제를 발견하고자 하는 노력이 의약 및 화학 분야에서 계속되고 있다(공개특허 10-2013-0076046 A).

한편, 상기 키나아제 중 JAK 단백질, 그 중에서도 JAK3은 T-세포에서만 발현이 되고 IL-2에 의해 활성화되기 때문에 JAK3는 염증에 대하여 특이성을 갖고 있다고 할 수 있다. 조혈작용 및 적혈구 항상성에 관여하는 JAK2나 여러 조직에서 발현되는 JAK1과 달리 JAK3는 주로 림프구에서 발현되어 IL-2, IL-4, IL-7, IL-9 및 IL-15 등의 다양한 사이토카인을 통한 신호전달에 매우 중요한 역할을 하기 때문에 부작용의 측면에서 JAK3이 더욱 주목받는 키나아제라 할 수 있다(Flanagan et al, Journal of medicinal Chemistry, 53, 8468, 2010). 동물 연구에 따르면 JAK3은 B-세포 및 T-세포의 성숙에 결정적 역할을 할 뿐만 아니라, T-세포의 기능을 유지시키는데도 중요한 역할을 한다. 따라서 JAK, 특히 JAK3의 저해제는 류마티스 관절염, 건선, 아토피성 피부염, 낭창(루프스), 다발성 경화증, 유형 I의 당뇨병 및 당뇨에 의한 합병증, 암, 천식, 자가면역 갑상선 장애, 궤양성 대장염, 크론병, 알츠하이머병, 백혈병 등의 자가면역성 질환, 및 장기이식 또는 이종이식 거부반응 등 면역억제가 요구되는 제증상의 치료에 유용할 수 있다(Pesu M, Laurence A, Kishore N, et al., Immunol . Rev , 223, 132, 2008.; Kawahara A, Minami Y, Miyazaki T, et al., Proc . Natl . Acad. Sci . USA , 92, 8724, 1995; Nosaka T, van Deursen JMA, Tripp RA, et al., Science, 270, 800, 1995; Papageorgiou AC, Wikman LEK., et al., Trends Pharm . Sci ., 25, 558, 2004).

본 발명의 일 목적은 2,4,5-치환된 피리미딘 유도체, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 2,4,5-치환된 피리미딘 유도체의 제조방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 2,4,5-치환된 피리미딘 유도체, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 2,4,5-치환된 피리미딘 유도체, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 2,4,5-치환된 피리미딘 유도체, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암 또는 염증질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 일 측면에서의 목적은 상기 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 이를 필요로 하는 개체나 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 암의 치료방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 일 측면에서의 목적은 암의 치료에 사용하기 위한 상기 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 일 측면에서의 목적은 암 치료용 약제의 제조에 사용하기 위한 상기 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도(use)를 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여,

본 발명의 일 측면에 따라, 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다:

[화학식 1]

(상기 화학식 1에서,

A는 N 또는 CR⁴이고, 여기서 R⁴는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알킬 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알콕시이고, 상기 알킬 및 알콕시는 비치환이거나, 할로겐 및 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬로 하나 이상 치환된 아민으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고;

B는

또는

이고;

은 C_6-14아릴, 또는 N을 하나 이상 포함하는 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬이되, 이때 상기 헤테로사이클로알킬은 O 또는 S를 하나 이상 더 포함할 수 있고,

상기 아릴은

이 치환되고, 상기 헤테로사이클로알킬의 N은

이 치환되고, 상기 아릴 및 헤테로사이클로알킬은 -OH, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬, 및 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 더 치환될 수 있고;

R²는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알킬, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알콕시, -NR⁵R⁶, 또는 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬이고,

상기 헤테로사이클로알킬은 비치환 또는 디C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬아미노 C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알킬 및 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬으로 하나 이상 치환된 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고,

상기 R⁵ 및 R⁶는 독립적으로 수소, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬, 또는 디C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬아미노 C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬이고;

R³는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알콕시, 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알킬이고, 상기 알킬은 하나 이상의 할로겐으로 치환될 수 있고;

L¹은 결합, -NH(CH₂)_p-, 또는 -O(CH₂)_q-이고, p 및 q는 독립적으로 0 내지 5의 정수이고;

L²는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알킬렌, -(C=O)-, -(C=O)NH-, 또는 -NH(C=O)-이고;

n은 0 또는 1이고; 및

m은 0 내지 4의 정수이다).

본 발명의 다른 측면에 따라, 하기 반응식 1에 나타난 바와 같이,

화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계를 포함하는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법이 제공된다:

[반응식 1]

(상기 반응식 1에서, A, B,

, R², R³, L¹, L², m, 및 n은 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같고; 및

X¹은 할로겐이다).

본 발명의 다른 측면에 따라, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물이 제공된다.

본 발명의 다른 측면에 따라, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물이 제공된다.

본 발명의 다른 측면에 따라, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 개선용 건강기능식품이 제공된다.

본 발명의 다른 일 측면은 상기 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 이를 필요로 하는 개체나 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 암의 치료방법을 제공한다.

본 발명의 또 다른 일 측면은 암의 치료에 사용하기 위한 상기 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.

본 발명의 다른 일 측면은 암 치료용 약제의 제조에 사용하기 위한 상기 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도(use)를 제공한다.

본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물은 EGFR(epidermal growth factor receptor) 야생형 또는 돌연변이에 대하여 높은 억제능을 나타내므로, EGFR Del19, EGFR L858R, EGFR Del19/T790M, EGFR L858R/T790M, EGFR L858R/T790M/C797S, EGFR Del19/T790M/C797S, EGFR NPH, EGFR SVD, EGFR NPG, EGFR H, EGFR ASV, EGFR FQEA 및 HER2 YVMA 등의 EGFR 돌연변이가 발현된 암의 치료에 유용하게 사용될 수 있고, 폐암 세포주 증식 억제능이 우수한 바, 특히, 폐암의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.

한편, 본 발명의 실시 형태는 여러가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 이하 설명하는 실시형태로 한정되는 것은 아니다. 또한 본 발명의 실시 형태는 당해 기술분야에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 더욱 완전하게 설명하기 위해서 제공되는 것이다. 나아가, 명세서 전체에서 어떤 구성요소를 "포함"한다는 것은 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있다는 것을 의미한다.

본 발명의 일 측면은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

[화학식 1]

(상기 화학식 1에서,

B는

또는

이고;

상기 아릴은

이 치환되고, 상기 헤테로사이클로알킬의 N은

n은 0 또는 1이고; 및

m은 0 내지 4의 정수이다).

다른 측면에서,

상기 A는 N 또는 CR⁴이고, 여기서 R⁴는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알콕시이고, 상기 알킬 및 알콕시는 비치환이거나, 할로겐 및 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬로 하나 이상 치환된 아민으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고;

상기 B는

또는

이고;

상기

은 C_6-14아릴, 또는 N을 하나 이상 포함하는 5 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬이되, 이때 상기 헤테로사이클로알킬은 O 또는 S를 하나 이상 더 포함할 수 있고,

상기 아릴은

이 치환되고, 상기 헤테로사이클로알킬의 N은

이 치환되고, 상기 아릴 및 헤테로사이클로알킬은 -OH, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬, 및 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 더 치환될 수 있고;

상기 R²는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알콕시, -NR⁵R⁶, 또는 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬이고,

상기 헤테로사이클로알킬은 비치환 또는 디C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬아미노 C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬 및 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬으로 하나 이상 치환된 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고,

상기 R⁵ 및 R⁶는 독립적으로 수소, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬, 또는 디C_1-3의 직쇄 또는 분지쇄 알킬아미노 C_1-3의 직쇄 또는 분지쇄 알킬이고;

상기 R³는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알콕시, 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬이고, 상기 알킬은 하나 이상의 할로겐으로 치환될 수 있고;

상기 L¹은 결합, -NH(CH₂)_p-, 또는 -O(CH₂)_q-이고, p 및 q는 독립적으로 0 내지 3의 정수이고;

상기 L²는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬렌, -(C=O)-, -(C=O)NH-, 또는 -NH(C=O)-이고;

상기 n은 0 또는 1이고; 및

상기 m은 0 내지 3의 정수일 수 있다.

또 다른 측면에서,

상기 A는 N 또는 CR⁴이고, 여기서 R⁴는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알콕시이고, 상기 알킬 및 알콕시는 비치환이거나, 할로겐 및 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬로 하나 이상 치환된 아민으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고;

상기 B는

또는

이고;

상기

은 페닐, 또는 N을 하나 이상 포함하는 5 내지 6원자의 헤테로사이클로알킬이되, 이때 상기 헤테로사이클로알킬은 O 또는 S를 하나 이상 더 포함할 수 있고,

상기 페닐은

이 치환되고, 상기 헤테로사이클로알킬의 N은

이 치환되고, 상기 아릴 및 헤테로사이클로알킬은 할로겐이 하나 이상 더 치환될 수 있고;

상기 R²는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알콕시, -NR⁵R⁶, 또는 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 5 내지 6원자의 헤테로사이클로알킬이고,

상기 헤테로사이클로알킬은 비치환 또는 디C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬아미노 C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬 및 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬으로 하나 이상 치환된 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고,

상기 R³는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알콕시, 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬이고, 상기 알킬은 하나 이상의 할로겐으로 치환될 수 있고;

상기 L¹은 결합, -NH(CH₂)_p-, 또는 -O(CH₂)_q-이고, p 및 q는 독립적으로 0 내지 2의 정수이고;

상기 L²는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬렌, -(C=O)-, -(C=O)NH-, 또는 -NH(C=O)-이고;

상기 n은 0 또는 1이고; 및

상기 m은 0 내지 2의 정수일 수 있다.

또 다른 측면에서,

상기 A는 C-H, N, C-CF₃, C-O(CH₂)₂N(CH₃)₂, 또는 C-OCH₃이고;

상기 B는

또는

이고;

상기

은

,

,

,

, 또는

이고;

상기 R²는 수소, 할로겐, -OCH₃,

,

,

,

,

,

,

,

, 또는

이고;

상기 R³는 수소, 할로겐, -OCH₃, 또는 -CF₃이고;

상기 L¹은 결합, -NH(CH₂)_p-, 또는 -O(CH₂)_q-이고, p 및 q는 독립적으로 0 또는 1의 정수이고;

상기 L²는 -CH₂-, -(C=O)-, -(C=O)NH-, -NH(C=O)-, 또는 -(CH₂)₂-이고;

상기 n은 0 또는 1이고; 및

상기 m은 0 또는 1일 수 있다.

또 다른 측면에서,

상기 화학식 1로 표시되는 화합물은, 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나의 화합물일 수 있다.

(1) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(2) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((2-(다이메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(3) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((6-(4-에틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(4) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-yl)-2-((4-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(5) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((3-메톡시-4-(4-몰포리노피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드;

(6) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((3-(2-(디메틸아미노)에톡시)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(7) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)-3-(트리플로오르메틸)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(8) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(9) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(10) 4-((4-((3-아크릴아미도페닐)아미노)-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-2-일)아미노)-3-메톡시-N-(1-메틸피페리딘-4-일)벤젠아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(11) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-카보닐)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(12) N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(피페리딘-4-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(13) N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염

(14) N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피레라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(15) N-(4-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(16) N-(3-(((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;

(17) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(18) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((2-(다이메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(19) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-페닐피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(20) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((2-(다이메틸아미노)에틸)메틸)아미노)-2-메톡시페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(21) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-에틸피페라진-1-일)-2-메톡시페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(22) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(23) 4-((4-(3-아크릴아미도페녹시)-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-2-일)아미노)-3-메톡시-N-(1-메틸피페리딘-4-일)벤즈아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(24) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-카보닐)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(25) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(몰포린-4-카보닐)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(26) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((3-(2-(다이메틸아미노)에톡시)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(27) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((6-(4-에틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(28) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-yl)-2-((4-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(29) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((3-메톡시-4-(4-몰포리노피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(30) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)-3-(트리플로우로메틸)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드

2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(31) N-(4-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(32) N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(피페리딘-4-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)-5-플로우로페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(33) N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)-5-플로우로페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(34) N-(3-(((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염;

(35) N-(3-((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드;

(36) N-(3-((2-((4-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(37) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(38) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(39) N-(3-((2-((3-(2-(디메틸아미노)에톡시)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(40) N-(3-((2-((4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)-3-(트리플로우로메틸)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(41) N-(3-((2-((3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(42) N-(3-((2-((3-메톡시-4-(4-모폴린피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(43) N-(4-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(44) (S)-1-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)프로프-2-엔-1-온 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(45) (S)-1-(3-((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-몰포리노피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)프로프-2-엔-1-원2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(46) N-(3-((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(47) N-(3-((2-((4-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(48) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;

(49) 4-((4-(3-아크릴아마이도페녹시)-5-모폴리노피리미딘-2-일)아미노)-3-메톡시-N-(1-메틸피페리딘-4-일)벤자마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;

(50) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(모폴린-4-카보닐)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;

(51) N-(3-((2-((6-(4-에틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;

(52) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;

(53) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2- 트리플루오로아세테이트산염;

(54) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;

(55) N-(3-((2-((3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;

(56) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;

(57) N-(4-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;

(58) N-(4-((4-(3-아크릴아미도페녹시)-5-몰포리노피리미딘-2-일)아미노)페닐)-1-메틸피페리딘-4-카복시아미드 2,2,2- 트리플루오로아세테이트산염;

(59) N-(3-((5-모폴리노-2-((4-(2-모폴리노에틸)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;

(60) N-(3-((2-((3-클로로-4-플로오르페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;

(61) N-(3-((2-((4-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)-2-메톡시페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;

(62) N-(3-(((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(63) N-(3-(((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(64) N-(4-(((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(65) N-(3-(((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;

(66) N-(3-(((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염; 및

(67) N-(3-(2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)페닐)아크릴아미드.

본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 약학적으로 허용가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산, 아인산 등과 같은 무기산류, 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류 등과 같은 무독성 유기산, 트리플루오로아세트산, 아세테이트, 안식향산, 구연산, 젖산, 말레인산, 글루콘산, 메탄설폰산, 4-톨루엔설폰산, 주석산, 푸마르산 등과 같은 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염의 종류로는 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트, 만델레이트 등을 포함한다.

본 발명에 따른 산 부가염은 통상의 방법으로 제조할 수 있으며, 예를 들면 화학식 1의 유도체를 메탄올, 에탄올, 아세톤, 메틸렌클로라이드, 아세토니트릴 등과 같은 유기용매에 녹이고 유기산 또는 무기산을 가하여 생성된 침전물을 여과, 건조시켜 제조하거나, 용매와 과량의 산을 감압 증류한 후 건조시켜 유기용매 하에서 결정화시켜서 제조할 수 있다.

또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고, 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하다. 또한, 이에 대응하는 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 음염(예, 질산은)과 반응시켜 얻는다.

나아가, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염뿐만 아니라, 이로부터 제조될 수 있는 용매화물, 광학 이성질체, 수화물 등을 모두 포함한다.

본 발명의 다른 일 측면은,

하기 반응식 1에 나타난 바와 같이,

화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계를 포함하는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법을 제공한다.

[반응식 1]

(상기 반응식 1에서, A, B,

X¹은 할로겐이다).

이하, 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법을 설명한다.

상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법에 있어서, 상기 화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 화합물을 반응시켜, 화학식 1로 표시되는화합물을 제조하는 단계는 통상적으로 알려진 할로겐과 아민을 결합시켜 아민본드를 형성할 수 있는 조건이라면 특별히 한정되지 않는다.

본 발명에서는 Buchwald reaction을 통하여 반응을 진행하였으며, 염기 및 금속 리간드 존재하에 반응을 수행하였으며, 상기 염기는 Buchwald reaction에서 통상적으로 사용하는 염기라면 한정되지 않고, N,N-다이메틸아미노피리딘(DMAP), 피리딘, 트라이에틸아민, N,N-다이이소프로필에틸아민, 1,8-디아자비사이클로[5.4.0]-7-운데센(DBU) 등의 유기염기 또는 소듐카보네이트, 소듐바이카보네이트, 수산화나트륨, 수산화칼륨, NaH 등의 무기염기가 있으며, 이를 단독 또는 혼합하여, 당량 또는 과량으로 사용할 수 있다. 또한, 상기 금속 리간드는 팔라듐, 니켈, 구리 리간드 등을 사용할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는 팔라듐 리간드로서 Pd₂(dba)₃를 사용하였으나, 이는 일례일 뿐, 이에 한정되는 것은 아니다.

반응 용매는 아이소프로판올, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올을 포함하는 저급 알코올; 테트라하이드로퓨란(THF); 디옥산; 에틸에테르, 1,2-다이메톡시에탄 등을 포함하는 에테르용매; 디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 메틸렌클로라이드, 디클로로에탄, 물, 아세토나젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 에틸아세테이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시크레이트, 락테이트, 하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트, 만델레이트, 아세토나이트릴 등이 있으며, 이를 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있다.

본 발명의 다른 측면은 본 발명의 다른 측면은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

상기 암은 가성점액종, 간내 담도암, 간모세포종, 간암, 갑상선암, 결장암, 고환암, 골수이형성증후군, 교모세포종, 구강암, 구순암, 균상식육종, 급성골수성백혈병, 급성림프구성백혈병, 기저세포암, 난소상피암, 난소생식세포암, 남성유방암, 뇌암, 뇌하수체선종, 다발성골수종, 담낭암, 담도암, 대장암, 만성골수성백혈병, 만성림프구백혈병, 망막모세포종, 맥락막흑색종, 바터팽대부암, 방광암, 복막암, 부갑상선암, 부신암, 비부비동암, 비소세포폐암, 설암, 성상세포종, 소세포폐암, 소아뇌암, 소아림프종, 소아백혈병, 소장암, 수막종, 식도암, 신경교종, 신우암, 신장암, 심장암, 십이지장암, 악성 연부조직 암, 악성골암, 악성림프종, 악성중피종, 악성흑색종, 안암, 외음부암, 요관암, 요도암, 원발부위불명암, 위림프종, 위암, 위유암종, 위장관간질암, 윌름스암, 유방암, 육종, 음경암, 인두암, 임신융모질환, 자궁경부암, 자궁내막암, 자궁육종, 전립선암, 전이성 골암, 전이성뇌암, 종격동암, 직장암, 직장유암종, 질암, 척수암, 청신경초종, 췌장암, 침샘암, 카포시 육종, 파제트병, 편도암, 편평상피세포암, 폐선암, 폐암, 폐편평상피세포암, 피부암, 항문암, 횡문근육종, 후두암, 흉막암, 및 흉선암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있다.

상기 화합물은 EGFR(epidermal growth factor receptor) 야생형 또는 돌연변이를 억제할 수 있다.

상기 EGFR 돌연변이는 EGFR Del19, EGFR L858R, EGFR Del19/T790M, EGFR L858R/T790M, EGFR L858R/T790M/C797S, EGFR Del19/T790M/C797S, EGFR NPH, EGFR SVD, EGFR NPG, EGFR H, EGFR ASV, EGFR FQEA 및 HER2 YVMA으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다.

상기 암은 EGFR에 대하여 돌연변이가 발현된 것일 수 있다.

상기 화합물은 CSF1R, EGFR(L861Q), FLT3, FLT3(D835V), FLT3(D835Y), FLT3(ITD), FLT3(ITD,D835V), FLT3(K663Q), FLT3(N841I), GAK, JAK3(JH1domain-catalytic), KIT, KIT(A829P), KIT(L576P), KIT(V559D), KIT-autoinhibited, LRRK2(G2019S), PDGFRB, TSSK3, 및 TTK로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 단백질 키나아제에 대하여 저해활성을 나타내는 것일 수 있다.

Ba/F3세포주에서 본 발명의 모든 실시예 화합물이 EGFR 야생형에서도 우수한 억제능을 나타낼 뿐만 아니라, EGFR 단일 또는 이중 돌연변이에 대하여도 높은 억제능을 나타낸다. 또한, 폐암 세포주인 A549, PC9, PC9GR, H1975 세포에 대하여 우수한 증식 억제능을 나타낸다(실험예 1 참조).

따라서, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물은 EGFR(epidermal growth factor receptor) 야생형 또는 돌연변이에 대하여 높은 억제능을 나타내므로, EGFR 야생형 뿐만 아니라, EGFR Del19/T790M, EGFR L858R/T790M, EGFR L858R, EGFR Exon20 ins NPH, EGFR Exon20 ins SVD, EGFR Exon20 ins FQEA, EGFR Exon20 ins H, EGFR Exon20 ins ASV, EGFR Exon20 ins, HER2 YVMA 등의 EGFR 돌연변이가 발현된 암의 치료에 유용하게 사용될 수 있고, 폐암 세포주 증식 억제능이 우수한 바, 특히, 폐암의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등 이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다.

상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효 성분으로 하는 약학적 조성물은 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여는 피하주사, 정맥주사, 근육 내 주사 또는 흉부 내 주사를 주입하는 방법에 의한다.

이때, 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위하여 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 안정제 또는 완충제와 함께 물에 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고, 이를 앰플 또는 바이알 단위 투여형으로 제조할 수 있다. 상기 조성물은 멸균되고/되거나 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 보조제, 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 함유할 수 있으며, 통상적인 방법인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제제화할 수 있다.

경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경/연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제, 엘릭시르제, 트로키제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/또는 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/또는 폴리에틸렌 글리콜)를 함유하고 있다. 정제는 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘 등과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염 등과 같은 붕해제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제, 및 감미제를 함유할 수 있다.

상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나, 다른 사용중인 항암제와 병용투여하여 사용할 수 있다.

본 발명의 다른 측면은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 다른 측면은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.

상기 암은 EGFR에 대하여 돌연변이가 발현된 것일 수 있다.

본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.

또한, 본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 g당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.

나아가, 상기 외에 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.

이하, 본 발명을 후술하는 실시예 및 실험예를 통해 상세히 설명한다.

단, 후술하는 실시예 및 실험예는 본 발명을 일부 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 실시예에서 합성된 화화물은 하기의 HPLC 조건에 의해 정제하거나 또는 구조 분석을 실시 하였다.

<정제용 중압액체크로마토그래피(Medium pressure liquid chromatography; MPLC)>

중압액체크로마토그래피는 TELEEDYNE ISCO사의 CombiFlash Rf +UV을 사용하였다.

<분석용 HPLC 조건 (ACQUITY UPLC H-Class Core System)>

Waters사 제조 UPLC sytem(ACQUITY UPLC PDA Detector)에 Waters사 제조 mass QDA Detector가 장착된 장비를 사용하였다. 사용 컬럼은 Water사의 ACQUITY UPLC®BEH C18 (1.7　㎛, 2.1X50 mm)였으며 컬럼온도는 30℃에서 진행하였다

이동상 A는 0.1% 개미산이 포함된 물, 이동상 B는 0.1%의 개미산이 포함된 아세토니트릴을 사용하였다

Gradient condition(10-100% B로 3분, 이동속도=0.6 ml/min)

<정제용 Prep-LCMS (Preparative-Liquid chromatography mass spectrometry)>

Waters사 제조 AutopurificationHPLC sytem(2767 sample manger, 2545 binary gradient module, 2998 Photodiode Array Detector)에 Waters사 제조 mass QDA Detector가 장착된 장비를 사용하였다. 사용 컬럼은 Water사의 SunFire®Prep C18 OBD^TM(5　㎛, 19X50 mm)였으며 컬럼온도는 실온에서 진행하였다.

이동상 A는 0.035% 트리플루오로아세트산이 포함된 물, 이동상 B는 0.035%의 트리플루오로아세트산이 포함된 메탄올을 사용하였다.

Gradient condition(15-100% B로 10분, 이동속도=25 ml/min)

<정제용 Prep-150 LC System (Preparative-Liquid chromatography UV spectrometry)>

Waters사 제조 Prep 150 LC sytem(2545 Quaternarygradient module, 2998 Photodiode Array Detector, Fraction collector Ⅲ)에 Waters사 제조 장비를 사용하였다. 사용 컬럼은 Water사의 XTERRA®Prep RP18 OBD^TM (10　㎛, 30X300 mm)였으며 컬럼온도는 실온에서 진행하였다

사용된 시판 시약은 추가 정제 없이 사용하였다. 본 발명에서 실온이란 20~25℃정도의 온도를 말한다. 감압하 농축 또는 용매 증류 제거는, 회전식 증발기(rotary evaporator)를 사용하였다.

<실시예 1> N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오르아세트산염의 제조

단계 1: 5-브로모-2-클로로-N-(3-니트로페닐)피리미딘-4-아민의 제조

0℃에서 DMF/DMSO(비율 9/1)의 혼합물 중의 수소화나트륨(60%, 869.0mg, 21.72mmol)의 현탁액에 DMF/DMSO (비율 9/1) 중의 3-니트로아닐린(1.5g, 10.86mmol)을 천천히 적가하였다. 반응용액을 0℃에서 30분 동안 교반하고, DMF/DMSO(비율 9/1)에 희석된 5-브로모-2,4-디클로로피리미딘(2.1ml, 16.3mmol)을 천천히 적가하였다. 반응용액을 실온까지 서서히 가온시키고 밤새 교반하였다. 반응혼합물을 0℃에서 얼음물을 적가하여 반응을 종결시키고, 생성된 고체를 여과하여 갈색고체의 목적화합물 5-브로모-2-클로로-N-(3-니트로페닐)피리미딘-4-아민(2.0g, 56%)을 수득하였다

MS (m/z) : 329.0 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.73

단계 2 : 2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-N-(3-니트로페닐)피리미딘-4-아민의 제조

상기 실시예 1의 단계 1에서 제조된 5-브로모-2-클로로-N-(3-니트로페닐)피리미딘-4-아민(2.0g, 5.92mmol)과 3,6-디하이드로-2H-피란-4-보로닉 엑시드 피나콜 에스터(1.4g, 6.501mmol)이 녹아 있는 1,4-다이옥산(13.3ml)의 혼합용액에 1M Na₂CO₃(17.6ml, 17.75mmol)을 넣은 후, 10분 동안 질소를 흘려주면서 초음파 처리를 하였다. 반응 혼합물에 Pd(PPh₃)₄(0.7g, 0.59mmol)를 넣고 80℃로 교반하였다. 3시간 동안 반응 후, 상온으로 식히고 반응물을 EtOAc로 희석한다. 그 유기층은 sat.NaHCO₃ 수용액과 brine으로 순차적으로 씻어주고 황산나트륨으로 남은 물을 제거하였다. 그 혼합물을 감압하여 농축 후 MPLC(디클로로메탄/메탄올)로 정제하여 2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-N-(3-니트로페닐)피리미딘-4-아민(2.5g, 124%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 333.1 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.69

단계 3: 5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-N ² -(4-(4-메틸피페라진 -1-일)페닐)-N ⁴ -(3-니트로페닐)피리미딘-2,4-디아민의 제조

상기 실시예 1의 단계 2에서 얻어진 2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-N-(3-니트로페닐)피리미딘-4-아민(200.0mg, 0.60mmol), 4-(4-메틸피페라진-1-일)아닐린(173.0mg, 0.90mmol)과 탄산칼륨(415.0mg, 3.00mmol)를 sec-BuOH(5.0ml)에 첨가하여 희석한 후 질소를 흘리면서, 10분동안 초음파 처리하여 가스를 제거 하였다. 반응 혼합물에 Pd₂(dba)₃(55.0mg, 0.06mmol) 및 Xphos(29.0mg, 0.06mmol)을 100 ℃에서 첨가한 후, 2시간 동안 반응 시켰다. 반응 후 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 디클로로메탄으로 씻어주었다. 얻어진 여과액을 농축한 후, MPLC(MC/MeOH)로 정제하여 5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-N²-(4-(4-메틸피페라진 -1-일)페닐)-N⁴-(3-니트로페닐)피리미딘-2,4-디아민(152.0mg, 52%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 488.4 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.01

단계 4: N ⁴ -(3-아미노페닐)-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-N ² -(4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민

상기 실시예 1의 단계 3에서 얻어진 5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-N²-(4-(4-메틸피페라진 -1-일)페닐)-N⁴-(3-니트로페닐)피리미딘-2,4-디아민(152.0mg, 0.31mmol)및 SnCl·2H₂O(704.0mg, 3.12mmol)을 에틸아세테이트 (15.0ml)에 녹인 다음, 50℃에서 5시간동안 교반하였다. 반응용액의 온도를 실온으로 내린 후, pH 5가 될 때까지 암모니아수 용액을 적가하였다. 반응 혼합물에 탄산수소나트륨를 첨가하여 pH 7로 조절하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고,에틸아세테이트로 여러 번 닦아 주었다. 여과액을 감압 농축하여 N⁴-(3-아미노페닐)-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-N²-(4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민(79.0mg, 55%)을 얻었으며, 정제없이 다음 반응에 사용하였다.

MS (m/z) : 458.4 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 0.88

단계 5: N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오르아세트산염

상기 실시예 1의 단계 4에서 얻어진 N⁴-(3-아미노페닐)-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-N²-(4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민(79.0mg, 0.17mmol)을 THF(5.0ml)에 녹인 후, 포화 NaHCO₃(5.0ml)을 가한 뒤, 0℃ 에서 Acryloyl chloride(0.1ml, 1.73mmol)를 천천히 적가하였다. 같은 온도에서 10분간 격렬히 교반한 후, 에틸아세테이트와 증류수를 이용하여 추출한 뒤, 무수 황산나트륨으로 건조하였다. 여과액을 감압 농축한 후 Auto LC-MS 정제장치를 이용하여 N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오르아세트산염(6.0mg, 7%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 512.4 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 0.97

<실시예 2> N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((2-(다이메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오르아세트산염의 제조

단계 1: N ¹ -(2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-4-일)벤젠-1,3-디아민의 제조

상기 실시예 1의 단계 2에서 얻어진 2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-N-(3-니트로페닐)피리미딘-4-아민(1.0g, 3.00mmol)및 SnCl·2H₂O(6.8g, 30.05mmol)을 에틸아세테이트 (20.0ml)에 녹인 다음, 55℃에서 5시간동안 교반하였다. 반응 용액의 온도를 실온으로 내린 후, pH 5가 될 때까지 암모니아수 용액을 적가하였다. 반응 혼합물에 무수 탄산수소나트륨를 첨가하여 pH 7로 조절하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 사용하여 여과하고, 에틸아세테이트로 여러 번 닦아 주었다. 여과액을 감압 농축하여 N¹-(2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-4-일)벤젠-1,3-디아민 (948.0mg, 100%)을 얻었으며, 정제없이 다음 반응에 사용하였다.

MS (m/z) : 303.2 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.16

단계 2: N-(3-((2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드의 제조

상기 실시예 2의 단계 1에서 얻어진 N¹-(2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-4-일)벤젠-1,3-디아민(934.0mg, 3.09mmol)을 THF(8.0ml)에 녹인 후, 포화 NaHCO₃(8.0ml)을 가한 뒤, 0℃ 에서 Acryloyl chloride(2.5ml, 30.85mmol)를 천천히 적가하였다. 같은 온도에서 10분간 격렬히 교반한 후, 에틸아세테이트와 증류수를 이용하여 추출한 뒤, 황산나트륨으로 건조하였다. 여과액을 감압 농축하여 MPLC(디클로로메탄/메탄올)를 이용하여 목적화합물인 N-(3-((2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드(236.0mg, 21%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 357.2 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.46

단계 3: N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((2-(다이메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오르아세트산염의 제조

상기 실시예 2의 단계 2에서 얻어진 N-(3-((2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드(82.0mg, 0.22mmol), N¹-(2-(다이메틸아미노)에틸)-N¹-메틸벤젠-1,4-디아민(65.0mg, 0.34mmol)과 탄산칼륨(155.0mg, 1.12mmol)를 sec-BuOH(3.0ml)에 첨가하여 녹인 후 질소를 흘리면서, 10분동안 초음파 처리하여 가스를 제거 하였다. 반응 혼합물에 Pd₂(dba)₃(21.0mg, 0.02mmol) 및 Xphos(11.0mg, 0.02mmol)을 100 ℃에서 첨가한 후, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 디클로로메탄으로 씻어주었다. 얻어진 여과액을 농축한 후, autopurification LC-MS 정제장치를 이용하여 N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((2-(다이메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오르아세트산염(44.0mg, 38%)을 수득하였다.

MS(m/z) : 514.4 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.03

상기 실시예 1 및 2와 유사한 방법으로 실시예 3 내지 11을 제조하였으며, 실시예 1 내지 11의 화학구조를 하기 표 1에, 화합물명, 수율, 및 UPLC 분석 결과를 하기 표 2에 정리하여 나타내었다.

실시예	화학구조	실시예	화학구조
1		2
3		4
5		6
7		8
9		10
11		12
13		14
15		16

실시예	화합물명	NMR	MASS	UPLC r.t. (min)
1	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.17 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.83 (d, J = 22.6 Hz, 2H), 7.46 (s, 3H), 7.27 (s, 2H), 6.70 (s, 2H), 6.50-6.40 (m, 1H), 6.24 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.88 (s, 1H), 5.73 (s, 1H), 4.21 (s, 2H), 3.84 (s, 2H), 2.97 (s, 4H), 2.42 (s, 4H), 2.33 (s, 2H), 2.21 (s, 3H).	512.4[M+1]⁺	0.97
2	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((2-(다이메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.15 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.81 (d, J = 14.0 Hz, 2H), 7.41 (s, 3H), 7.32 (s, 1H), 7.26 - 7.19 (m, 1H), 6.50 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 6.43 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 17.8 Hz, 1H), 5.87 (s, 1H), 5.73 (s, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.83 (d, J = 2.9 Hz, 2H), 2.79 (s, 3H), 2.31 (s, 2H), 2.15 (s, 6H), 1.77 (s, 4H).	514.4[M+1]⁺	1.03
3	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((6-(4-에틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염		527.4[M+1]⁺	0.83
4	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-yl)-2-((4-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염		540.4[M+1]⁺	0.90
5	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((3-메톡시-4-(4-몰포리노피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₆) δ 7.88 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.52-7.45 (m, 1H), 7.36-7.28 (m, 4H), 7.24 (s, 1H), 7.15-7.09 (m, 1H), 6.87-6.81 (m, 1H), 6.40 (s, 1H), 5.97 (s, 2H), 5.90-5.77 (m, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.79 (s, 4H), 3.67 (s, 4H), 3.47-3.41 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 2.79 (s, 4H), 2.55-2.51 (m, 1H), 2.42 (s, 2H), 2.17 (s, 1H), 2.04 (s, 2H), 0.91 (s, 2H).	612.4[M+1]⁺	0.96
6	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((3-(2-(디메틸아미노)에톡시)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.20 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.39 (d, J = 24.1 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 19.2 Hz, 3H), 6.99 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 6.50 - 6.38 (m, 2H), 6.24 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 5.90 (s, 1H), 5.72 (s, 1H), 4.21 (s, 2H), 3.85 (s, 4H), 2.56 (d, J = 3.7 Hz, 2H), 2.33 (s, 2H), 2.18 (s, 6H).	501.4[M+1]⁺	0.89
7	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)-3-(트리플로오르메틸)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.22 (s, 1H), 9.48 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.01 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 7.83 (s, 1H), 7.42 (dd, J = 19.7, 7.5 Hz, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.28 - 7.21 (m, 1H), 6.50 - 6.40 (m, 1H), 6.23 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 5.92 (s, 1H), 5.73 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 4.21 (s, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.46 (s, 2H), 2.33 (s, 4H), 2.15 (s, 3H), 1.78 (s, 6H).	594.4[M+1]⁺	1.00
8	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염		542.3[M+1]⁺	0.85
9	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염		625.5[M+1]⁺	0.87
10	4-((4-((3-아크릴아미도페닐)아미노)-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-2-일)아미노)-3-메톡시-N-(1-메틸피페리딘-4-일)벤젠아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.21 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.27 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 6.99 (s, 1H), 6.42 (s, 1H), 6.24 (d, J = 16.9 Hz, 2H), 5.72 (s, 1H), 4.21 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.75 (s, 2H), 3.13 (s, 2H), 2.55 (d, J = 4.2 Hz, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.18 (s, 4H), 1.78 (s, 4H).	584.5[M+1]⁺	0.88
11	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-카보닐)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.17 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.24 - 8.16 (m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.45 - 7.37 (m, 1H), 7.30 - 7.21 (m, 2H), 6.98 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.49 - 6.38 (m, 1H), 6.24 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 5.93 (s, 1H), 5.73 (s, 1H), 4.21 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 2.33 (s, 6H), 2.13 (s, 4H), 1.82 (s, 4H), 1.78 - 1.66 (m, 2H), 1.39 - 1.27 (m, 3H), 1.23 (s, 2H).	653.5[M+1]⁺	0.83
12	N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(피페리딘-4-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.35 (s, 1H), 9.26 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.48 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 6.33 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.85 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.84 (d, J = 18.3 Hz, 5H), 3.39 (d, J = 11.0 Hz, 2H), 3.00 (d, J = 10.2 Hz, 2H), 2.80 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 2.28 (s, 2H), 1.92 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 1.80 (d, J = 12.8 Hz, 2H).	527.4[M+1]⁺	0.94
13	N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.36 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.35 (dd, J = 21.2, 13.1 Hz, 6H), 6.88 (s, 2H), 6.48 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 6.33 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 5.98 (s, 1H), 5.85 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.52 (s, 2H), 3.17 (s, 2H), 2.87 (s, 5H), 2.28 (s, 2H).	512.3[M+1]⁺	0.90
14	N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피레라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.40 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.34 (d, J = 36.8 Hz, 6H), 6.70 (s, 1H), 6.48 (d, J = 14.0 Hz, 2H), 6.33 (d, J = 16.6 Hz, 1H), 6.00 (s, 1H), 5.85 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.19 (s, 2H), 3.83 (d, J = 26.1 Hz, 7H), 3.54 (s, 2H), 3.16 (s, 2H), 2.97 (s, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.27 (s, 2H).	542.4[M+1]⁺	0.91
15	N-(4-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.68 (d, J = 8.8 Hz, 3H), 7.49 (d, J = 7.7 Hz, 3H), 6.76 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.43 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.13 (s, 1H), 5.84 (dd, J = 9.6, 2.2 Hz, 1H), 4.33 (d, J = 2.6 Hz, 2H), 3.99 (t, J = 5.3 Hz, 4H), 3.88 (s, 3H), 3.63 (s, 2H), 3.11 (s, 2H), 3.01 (d, J = 3.3 Hz, 3H), 2.45 - 2.38 (m, 2H).	542.4[M+1]⁺	0.87
16	N-(3-(((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.87 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.38 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 5.81 (dd, J = 9.6, 2.2 Hz, 1H), 4.72 (s, 2H), 4.32 - 4.27 (m, 2H), 3.96 (dd, J = 6.7, 4.2 Hz, 4H), 3.87 (s, 3H), 3.60 (s, 2H), 3.35 (dd, J = 5.6, 3.9 Hz, 1H), 3.26 - 3.22 (m, 1H), 3.14 - 3.01 (m, 2H), 3.00 (s, 3H), 2.38 (dd, J = 4.7, 2.8 Hz, 2H).	556.4[M+1]⁺	0.90

<실시예 17> N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염의 제조

단계 1: 5-브로모-2-클로로-4-(3-니트로페톡시)피리미딘의 제조

0℃에서 DMF/DMSO(비율 9/1)의 혼합물 중의 수소화나트륨(60%, 210.0mg, 8.78mmol)의 현탁액에 DMF/DMSO (비율 9/1) 중의 3-니트로페놀(611.0mg, 4.39mmol)을 천천히 적가하였다. 반응용액을 0℃에서 30분 동안 교반하고, DMF/DMSO(비율 9/1)에 희석된 5-브로모-2,4-디클로로피리미딘(1.0g, 4.39mmol)을 천천히 적가하였다. 반응용액을 실온까지 서서히 가온시키고 밤새 교반하였다. 반응혼합물을 0℃에서 얼음물을 적가하여 반응을 종결시키고, 생성된 고체를 여과하여 흰색고체의 목적화합물 5-브로모-2-클로로-N-(3-니트로페닐)피리미딘-4-아민(1.4g, 93%)을 수득하였다

MS (m/z) : 330.0 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.82

단계 2: 2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-4-(3-니트로페톡시)피리미딘의 제조

상기 실시예 17의 단계 1에서 얻어진 5-브로모-2-클로로-4-(3-니트로페톡시)피리미딘(725.0mg, 2.2mmol)과 2-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란 (504.0mg, 2.4mmol)을 1,4-다이옥산 용매 (0.1M)에 녹인 뒤에 1M Na₂CO₃(6.6ml, 6.6mmol)를 첨가하였다. 혼합액을 질소 가스 상에서 1분 동안 초음파 처리하여 가스를 제거하였다. 반응 혼합물에 Pd(PPh₃)₄ (254.0mg, 0.22mmol)를 넣고 90℃에서 3시간 교반하였다. 반응물의 온도를 상온까지 식힌 뒤에, 에틸아세테이트를 이용하여 추출하였다. 모아진 유기층은 소금물로 씻고, MgSO₄로 남아있는 물을 제거하였다. 얻어진 여과액을 농축한 후, 흰색 고체의 2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-4-(3-니트로페톡시)피리미딘(510,0mg, 70%)을 얻었다.

MS (m/z) : 334.2 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.79

단계 3: 3-((2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-4-일)옥시)아닐린의 제조

상기 실시예 17의 단계 2에서 얻어진 2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-4-(3-니트로페톡시)피리미딘 (540.0mg, 1.62mmol)을 에틸아세테이트 (0.5M)에 녹인 뒤 SnCl·2H₂O(3.7g, 16.2mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합액을 50℃에서 3시간 동안 교반한 뒤, 상온까지 식혔다. 암모니아수 용액과 고체의 탄산나트륨를 사용하여 반응물을 pH 7로 만들었다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하여, 고상의 반응 부수물을 제거하였고, 여과액에서 목적화합물인 흰색 고체의 3-((2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-4-일)옥시)아닐린(300.0mg, 61%)을 얻었다.

MS(m/z) : 304.2 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.46

단계 4: N-(3-((2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드의 제조

상기 실시예 17의 단계 3에서 얻어진 3-((2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-4-일)옥시)아닐린 (400.0mg, 1.32mmol)을 테트라하이드로퓨란(0.1M)에 녹인 후, 테트라하이드로퓨란의 동일 볼륨의 포화 탄산수소나트륨 수용액를 추가한 후 0℃ 에서 격렬하게 교반하였다. 혼합물에 아크릴로일 클로라이드 (1.1ml, 13.2mmol)을 적가한 후, 0℃ 에서 10분동안 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기층은 소금물로 씻고, MgSO4로 남아있는 물을 제거한 뒤, 유기용매를 제거하여 목적화합물인 흰색고체의 N-(3-((2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드을 얻었다.

MS(m/z) : 358.2 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.65

단계 5 : N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염의 제조

상기 실시예 17의 단계 4에서 얻어진 N-(3-((2-클로로-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드(30.0mg, 0.08mmol), 4-(4-메틸피페라진-1-일)아닐린 (24.0mg, 0.13mmol)과 탄산칼륨 (58.0mg, 0.42mmol)를 sec-BuOH(0.1M)에 첨가하여 녹인 후, 질소하에서 10분동안 초음파 처리하여 가스를 제거 하였다. 반응 혼합물에 Pd₂(dba)₃ (7.0mg, 0.01mmol) 및 Xphos(4.0mg, 0.01mmol)을 100 ℃에서 첨가한 후, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 디클로로메탄으로 씻어주었다. 얻어진 여과액을 농축한 후, Prep-HPLC로 정제하여 고체의 N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염(21.0mg, 40%)을 수득하였다.

MS(m/z) : 513.4 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.23

상기 실시예 17와 유사한 방법으로 실시예 17 내지 34를 제조하였으며, 실시예 17 내지 34의 화학구조를 하기 표 3에, 화합물명, 수율, 및 UPLC 분석 결과를 하기 표 4에 정리하여 나타내었다.

실시예	화학구조	실시예	화학구조
17		18
19		20
21		22
23		24
25		26
27		28
29		30
31		32
33		34

실시예	화합물명	NMR	MASS	UPLC r. t. (min)
17	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.32 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.63 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.43 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 6.95 (dd, J = 7.7, 2.4 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 6.46 - 6.37 (m, 1H), 6.26 (dd, J = 16.8, 1.7 Hz, 1H), 6.20 (s, 1H), 5.78 (dd, J = 9.8, 1.8 Hz, 1H), 4.23 (d, J = 2.6 Hz, 3H), 3.82 (t, J = 5.5 Hz, 3H), 3.62 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 3.50 (d, J = 12.1 Hz, 2H), 3.13 (dd, J = 20.9, 9.6 Hz, 2H), 2.83 (dd, J = 24.9, 8.3 Hz, 5H).	513.4[M+1]⁺	1.23
18	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((2-(다이메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염		515.4[M+1]⁺	1.25
19	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-페닐피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.33 (s, 1H), 9.71 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.40 (dd, J = 17.6, 9.3 Hz, 2H), 6.95 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.47 - 6.38 (m, 1H), 6.25 (dd, J = 28.0, 10.9 Hz, 3H), 5.81 - 5.74 (m, 1H), 4.23 (d, J = 2.6 Hz, 2H), 3.81 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.75 (d, J = 17.9 Hz, 5H), 3.51 (d, J = 11.7 Hz, 2H), 3.14 (d, J = 11.4 Hz, 2H), 2.88 (d, J = 11.4 Hz, 5H).	543.4[M+1]⁺	1.24
20	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((2-(다이메틸아미노)에틸)메틸)아미노)-2-메톡시페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염		545.4[M+1]⁺	1.36
21	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-에틸피페라진-1-일)-2-메톡시페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염		557.4[M+1]⁺	1.35
22	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.35 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.59 (s, 2H), 7.36 (d, J = 33.2 Hz, 2H), 6.92 (s, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.49 - 6.37 (m, 1H), 6.26 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 6.17 (s, 2H), 5.77 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.22 (s, 2H), 3.84 - 3.72 (m, 6H), 3.57 (d, J = 10.1 Hz, 2H), 2.55 (s, 2H), 2.27 (d, J = 17.3 Hz, 5H), 2.14 (s, 3H), 1.86 (s, 5H), 1.80 (d, J = 11.4 Hz, 2H), 1.46 (d, J = 11.2 Hz, 2H).	626.5[M+1]⁺	1.16
23	4-((4-(3-아크릴아미도페녹시)-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-2-일)아미노)-3-메톡시-N-(1-메틸피페리딘-4-일)벤즈아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.43 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.49 (d, J = 26.5 Hz, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.48 - 6.37 (m, 1H), 6.26 (s, 2H), 5.76 (s, 1H), 4.24 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.83 (s, 1H), 3.70 (s, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.92 (t, J = 10.3 Hz, 2H), 1.82 (s, 4H), 1.74 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 1.63-1.50 (m, 2H).	585.4[M+1]⁺	1.32
24	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-카보닐)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.93 (s, 1H), 10.10 (s, 1H), 8.64 (s, 2H), 8.53 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.44 - 6.32 (m, 1H), 6.17 (d, J = 16.6 Hz, 1H), 5.87 (s, 1H), 5.72 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.26 (s, 2H), 3.92 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.87 (s, 2H), 2.74 (d, J = 19.2 Hz, 6H), 2.29 (s, 5H), 2.20 (s, 3H), 1.62 (s, 6H).	654.5[M+1]⁺	1.28
25	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(몰포린-4-카보닐)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.99 (s, 1H), 10.35 (s, 2H), 8.37 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.75 - 7.59 (m, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.55 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 6.48 - 6.36 (m, 1H), 6.26 (s, 1H), 5.78 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 3.83 (s, 4H), 3.58 (s, 4H), 3.46 (s, 2H), 3.34 (s, 4H), 1.91 (s, 2H).	558.3[M+1]⁺	1.62
26	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((3-(2-(다이메틸아미노)에톡시)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염		502.4[M+1]⁺	1.36
27	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((6-(4-에틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.33 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.55 (d, J = 27.6 Hz, 3H), 7.41 (s, 2H), 6.93 (s, 1H), 6.47 - 6.37 (m, 1H), 6.25 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 6.18 (s, 1H), 5.77 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.23 (s, 2H), 3.81 (d, J = 2.9 Hz, 2H), 3.31 (s, 2H), 2.41 (s, 4H), 2.34 (s, 2H), 1.86 (s, 4H), 1.03 (s, 3H).	528.3[M+1]⁺	1.08
28	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-yl)-2-((4-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.35 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.59 (s, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.21 (s, 2H), 6.93 (s, 1H), 6.61 (s, 2H), 6.48 - 6.37 (m, 1H), 6.25 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 6.19 (s, 1H), 5.77 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.23 (s, 2H), 3.82 (d, J = 3.3 Hz, 2H), 3.46 (s, 2H), 2.17 (s, 4H), 1.85 (s, 6H), 1.78 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 1.42 (d, J = 10.2 Hz, 2H).	541.4[M+1]⁺	1.11
29	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((3-메톡시-4-(4-몰포리노피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.33 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.59 (s, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.94 (s, 2H), 6.54 (s, 1H), 6.47 - 6.37 (m, 1H), 6.25 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.18 (s, 1H), 5.77 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.23 (s, 2H), 3.81 (d, J = 2.7 Hz, 2H), 3.54 (d, J = 24.3 Hz, 10H), 3.22 (d, J = 9.7 Hz, 3H), 1.87 (s, 5H), 1.78 (d, J = 10.6 Hz, 2H), 1.52 - 1.43 (m, 2H).	613.5[M+1]⁺	1.13
30	N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)-3-(트리플로우로메틸)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염		595.4[M+1]⁺	1.44
31	N-(4-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 8.20 (s, 1H), 7.81 - 7.74 (m, 2H), 7.34 (dd, J = 8.9, 5.5 Hz, 1H), 7.24 - 7.20 (m, 2H), 6.67 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.29 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 5.87 (dd, J = 9.6, 2.3 Hz, 1H), 4.34 (dd, J = 5.3, 2.6 Hz, 2H), 3.95 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (d, J = 14.0 Hz, 2H), 3.59 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 3.24 (dd, J = 5.8, 4.1 Hz, 4H), 2.99 (s, 3H), 2.59 (d, J = 1.8 Hz, 2H).	543.3[M+1]⁺	1.16
32	N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(피페리딘-4-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)-5-플로우로페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염		546.3[M+1]⁺	1.05
33	N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)-5-플로우로페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염		531.4[M+1]⁺	1.00
34	N-(3-(((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.99 (s, 1H), 7.93 - 7.88 (m, 1H), 7.47 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.41 - 7.34 (m, 2H), 7.19 - 7.14 (m, 1H), 6.81 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.70 (dd, J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.21 (s, 1H), 5.81 (dd, J = 9.6, 2.3 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 2.6 Hz, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.87 (t, J = 5.4 Hz, 3H), 3.68 - 3.63 (m, 2H), 3.55 - 3.51 (m, 2H), 3.45 (d, J = 3.7 Hz, 2H), 3.00 (s, 4H), 2.92 (s, 2H), 2.45 (s, 2H).	557.4[M+1]⁺	1.09

<실시예 35> N-(3-((2-((4-(4-메틸사이크로헥실)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아마이드의 제조

단계 1: 5-모폴린피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 제조

5-브로모우라실(12.0g, 62.8mmol)을 모폴린(108.0ml, 1.24mol)에 넣은 후, 마이크로파를 조사하여 100℃에서 10분동안 가열한 후, 온도를 실온으로 낮추어 반응을 종료하였다. 생성된 현탁액에 메탄올로 희석한 다음 필터 하여 5-모폴린피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(11.0g, 89%)을 얻었다.

MS (m/z) : 198.2 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 0.38

단계 2: 4-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)모폴린의 제조

상기 실시예 35 단계 1에서 얻어진 5-모폴린피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(12.0g, 60.9mmol)에 트리에틸아민 염산염(25.1g, 182.4mmol)과 POCl₃(40ml)을 넣은 후, 80℃에서 4day동안 교반하고, 마지막 3시간동안 교반 환류를 시켰다. 반응물을 실온으로 식힌 후, 남은 POCl₃를 감압하에서 농축하여 얼음물에 넣었다. 생성된 고체를 과량의 에틸아세테이트에 녹여 포화 NaHCO₃ 용액으로 닦아 준 뒤, 유기층을 황산나트륨으로 건조 후 감압하에서 농축하여 4-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)모폴린(7.0g, 50%)을 얻었다.

MS (m/z) : 234.1 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.57

단계 3: 2-((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)-N,N-디메틸벤젠설폰아마이드의 제조

0℃에서 수소화나트륨(60%, 228.0mg, 5.70mmol)을 DMF/DMSO(비율 9/1)의 혼합용액에 넣은 현탁액에 3-니트로아닐린(794.5mg, 3.98mmol)을 DMF/DMSO (비율 9/1) 혼합용액에 희석한 것을 천천히 적가하였다. 반응혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, DMF/DMSO(비율 9/1)에 희석된 4-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)모폴린(1.4g, 5.98mmol)을 천천히 적가하였다. 반응혼합물을 실온까지 서서히 가온시키고 밤새 교반하였다. 반응혼합물을 0℃에서 얼음물을 적가하여 반응을 종결시키고, 생성된 고체를 여과하여 갈색고체의 목적화합물 2-((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)-N,N-디메틸벤젠설폰아마이드(1.2g, 84%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 336.2 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.67

단계 4: N ² -(4-(4-메틸사이클로헥실)페닐)-5-모폴리노-N ⁴ -(3-나이트로페닐)피리미딘-2,4-디아민의 제조

상기 실시예 35 단계 3에서 얻어진 2-((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)-N,N-디메틸벤젠설폰아마이드(200.0mg, 0.60mmol)에 4-(4-메틸피페라진-1-일)아닐린 (172.2mg, 0.90mmol)과 탄산칼륨(414.6mg, 3.00mmol)를 sec-BuOH(3ml)에 첨가하여 희석 후 질소를 흘리면서, 10분동안 초음파 처리하여 가스를 제거 하였다. 반응혼합물에 Pd₂(dba)₃(54.9mg, 0.06mmol) 및 Xphos(28.6mg, 0.06mmol)을 첨가한 후, 100 ℃에서 2시간 동안 반응 시켰다. 반응 후 반응혼합물을 셀라이트로 여과하고, 디클로메탄으로 씻어주었다. 얻어진 여과액을 농축한 후, 중압액체크로마토그래피(실리카겔, 디클로메탄:메탄올=15:1)로 정제하여 N²-(4-(4-메틸사이클로헥실)페닐)-5-모폴리노-N⁴-(3-나이트로페닐)피리미딘-2,4-디아민(215.8mg, 74%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 491.4 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 0.95

단계 5: N ⁴ -(3-아미노페닐)-N ² -(4-(4-메틸사이크로헥실)페닐)-5-모폴리노피리미딘-2,4-디아민의 제조

상기 실시예 35 단계 4에서 얻어진 N²-(4-(4-메틸사이클로헥실)페닐)-5-모폴리노-N⁴-(3-나이트로페닐)피리미딘-2,4-디아민(215.8mg, 0.44mmol) 및 SnCl₂·2H₂O(988.4mg, 4.38mmol)을 에틸아세테이트(40ml)에 녹인 후, 진한염산 한방울을 적가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 5시간동안 교반하였다. 반응혼합물의 온도를 실온으로 내린 후, pH 5가 될 때까지 암모니아수 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물에 고체 탄산수소나트륨을 첨가하여 pH 7로 조절하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 에틸아세테이트로 여러 번 닦아 주었다. 여과액을 감압하에 농축하여 N⁴-(3-아미노페닐)-N²-(4-(4-메틸사이크로헥실)페닐)-5-모폴리노피리미딘-2,4-디아민(156.7mg, 78%)을 얻었으며, 정제없이 다음 반응에 사용하였다.

MS (m/z) : 461.4 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 0.78

단계 6: N-(3-((2-((4-(4-메틸사이크로헥실)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아마이드의 제조

상기 실시예 35 단계 5에서 얻어진 N⁴-(3-아미노페닐)-N²-(4-(4-메틸사이크로헥실)페닐)-5-모폴리노피리미딘-2,4-디아민 (156.7mg, 0.34mmol)을 THF(25ml)에 녹인 후, 포화 NaHCO₃(25ml)을 가한 뒤, 0℃에서 Acryloyl chloride (275.0㎕, 3.40mmol)를 천천히 적가하였다. 같은 온도에서 10분간 격렬히 교반한 후, 에틸아세테이트와 증류수를 이용하여 추출한 후, 유기층을 황산나트륨으로 건조한다. 잔사를 중압액체크로마토그래피(실리카겔, DCM:MeOH=15:1)를 이용하여 목적화합물인 N-(3-((2-((4-(4-메틸사이크로헥실)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아마이드(7.0mg, 4%)을 얻었다.

MS (m/z) : 515.4 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 0.87

<실시예 36> N-(3-((2-((4-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염의 제조

단계 1: N ¹ -(2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)벤젠-1,3-디아민의 제조

상기 실시예 35의 단계 3에서 얻어진 2-((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)-N,N-디메틸벤젠설폰아마이드(0.5g, 1.49mmol) 및 SnCl₂·2H₂O(3.36g, 14.9mmol)을 에틸아세테이트 (35ml)에 녹인 다음, 60℃에서 5시간동안 교반하였다. 반응 용액의 온도를 실온으로 내린 후, pH 5가 될 때까지 암모니아수 용액을 적가하였다. 반응 혼합물에 고체 무수 탄산수소나트륨를 첨가하여 pH 7로 조절하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 사용하여 여과하고, 에틸아세테이트로 여러 번 닦아 주었다. 여과액을 감압 농축하여 N¹-(2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)벤젠-1,3-디아민(225.0mg, 50%)을 얻었으며, 정제없이 다음 반응에 사용하였다.

MS (m/z) : 306.2 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.04

단계 2: N-(3-((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드의 제조

상기 실시예 36의 단계 1에서 얻어진 N¹-(2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)벤젠-1,3-디아민 (225.0mg, 0.74mmol)을 THF(6ml)에 녹인 후, 포화 NaHCO₃(6ml)을 가한 뒤, 0℃ 에서 Acryloyl chloride(0.6ml, 7.40mmol)를 천천히 적가하였다. 같은 온도에서 10분간 격렬히 교반한 후, 에틸아세테이트와 증류수를 이용하여 추출한 뒤, 황산나트륨으로 건조하였다. 여과액을 감압 농축한 후, 중압액체크로마토그래피(실리카겔, 헥사:에틸아세테이트=20:1)를 이용하여 목적화합물인 N-(3-((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드(192.0mg, 76%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 360.3 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.58

단계 3: N-(3-((2-((4-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염의 제조

상기 실시예 36의 단계 2에서 얻어진 N-(3-((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드(70.0mg, 0.19mmol), N¹-(2-(다이메틸아미노)에틸)-N¹-메틸벤젠-1,4-디아민(55.1mg, 0.29mmol)과 탄산칼륨(131.3mg, 0.95mmol)를 sec-BuOH(3.0ml)에 첨가하여 녹인 후 질소를 흘리면서, 10분동안 초음파 처리하여 가스를 제거 하였다. 반응 혼합물에 Pd₂(dba)₃(17.4mg, 0.02mmol) 및 Xphos(9.1mg, 0.02mmol)을 100 ℃에서 첨가한 후, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 디클로메탄으로 씻어주었다. 얻어진 여과액을 농축한 후, autopurification LC-MS 정제장치를 이용하여 목적화합물인 N-(3-((2-((4-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염(37.1mg, 30%)을 수득하였다.

MS(m/z) : 517.4 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.08

상기 실시예 35 및 36와 유사한 방법으로 실시예 37 내지 45을 제조하였으며, 실시예 35 내지 45의 화학구조를 하기 표 5에, 화합물명과 mass 및 UPLC 분석 결과를 하기 표 6에 정리하여 나타내었다.

실시예	화학구조	실시예	화학구조
35		36
37		38
39		40
41		42
43		44
45

실시예	화합물명	NMR	MASS	UPLC r. t. (min)
35	N-(3-((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄)δ 7.93 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.35 (d, J = 5.8 Hz, 3H), 7.25 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.79 (d, J = 4.3 Hz, 2H), 6.30 (s, 2H), 5.69 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.78 (s, 5H), 3.03 (s, 4H), 2.82 (s, 5H), 2.55 (s, 4H), 2.28 (s, 3H).	515.4[M+1]⁺	0.87
36	N-(3-((2-((4-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.60 (d, J = 57.8 Hz, 3H), 7.34 (d, J = 31.1 Hz, 5H), 6.83 (s, 3H), 6.45 (d, J = 18.5 Hz, 2H), 5.83 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.93 (s, 4H), 3.69 (s, 4), 2.97 (s, 16H)	517.4[M+1]⁺	1.08
37	N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.14 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.97 (s, 2H), 7.86 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 14.9 Hz, 3H), 7.25 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.51 - 6.40 (m, 1H), 6.34 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.27 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.80 (s, 9H), 2.84 (s, 5H), 2.11 (d, J = 21.9 Hz, 8H), 1.90 (s, 7H), 1.82 (d, J = 10.7 Hz, 2H).	628.5[M+1]⁺	0.84
38	N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.16 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.99 (d, J = 9.1 Hz, 2H), 7.89 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 10.0 Hz, 3H), 7.28 - 7.22 (m, 1H), 6.60 (s, 1H), 6.51 - 6.42 (m, 1H), 6.35 (s, 1H), 6.27 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.80 (s, 4H), 3.06 (s, 6H), 2.84 (s, 4H), 2.45 (s, 4H), 2.22 (s, 4H).	545.4[M+1]⁺	0.91
39	N-(3-((2-((3-(2-(디메틸아미노)에톡시)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염		504.3[M+1]⁺	0.91
40	N-(3-((2-((4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)-3-(트리플로우로메틸)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄)δ 7.90 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.74 (d, J = 17.2 Hz, 3H), 7.61 (s, 3H), 7.41 - 7.21 (m, 3H), 6.41 (dd, J = 28.9, 13.4 Hz, 2H), 5.82 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 3.94 (s, 5H), 3.72 (s, 4H), 2.97 (d, J = 22.3 Hz, 12H).	597.4[M+1]⁺	0.97
41	N-(3-((2-((3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄)δ 7.97 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.37 (s, 3H), 7.15 - 6.87 (m, 4H), 6.43 (d, J = 13.3 Hz, 2H), 5.82 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 3.89 (d, J = 32.4 Hz, 5H), 3.70 (d, J = 23.0 Hz, 5H), 3.58 (s, 6H), 2.98 (s, 11H).	545.3[M+1]⁺	0.95
42	N-(3-((2-((3-메톡시-4-(4-모폴린피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.15 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.57 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.32 - 7.25 (m, 2H), 7.23 (s, 1H), 6.68 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 6.51 - 6.39 (m, 1H), 6.25 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 5.75 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.79 (s, 4H), 3.60 (d, J = 19.2 Hz, 8H), 3.27 (d, J = 12.4 Hz, 5H), 2.86 (s, 4H), 1.85 (s, 3H), 1.80 (d, J = 12.2 Hz, 2H), 1.50 (d, J = 11.3 Hz, 2H).	615.5[M+1]⁺	0.90
43	N-(4-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.68 (d, J = 8.9 Hz, 3H), 7.59 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.45 (s, 1H), 6.78 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.61 (dd, J = 8.5, 1.8 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.43 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.84 (dd, J = 9.6, 2.2 Hz, 1H), 3.95 - 3.88 (m, 6H), 3.87 (s, 3H), 3.71 - 3.57 (m, 2H), 3.20 - 3.06 (m, 2H), 3.02 (s, 3H), 2.97 - 2.93 (m, 4H), 1.31 (s, 2H).	545.4[M+1]⁺	0.85
44	(S)-1-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)프로프-2-엔-1-온 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 6.94 - 6.81 (m, 1H), 6.56 (t, J = 10.2 Hz, 2H), 6.30 (d, J = 16.6 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 16.6 Hz, 1H), 5.84 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 5.57 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 3.91 (s, 6H), 3.28 (s, 6H), 2.94 (d, J = 12.2 Hz, 7H), 2.84 (s, 7H), 2.60 (d, J = 10.0 Hz, 5H).	537.4[M+1]⁺	0.84
45	(S)-1-(3-((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-몰포리노피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)프로프-2-엔-1-원 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.64 (d, J = 18.1 Hz, 1H), 7.44 (s, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.90 - 6.39 (m, 1H), 6.18 (dd, J = 78.3, 17.1 Hz, 1H), 5.66 (dd, J = 122.9, 9.2 Hz, 1H), 4.18 - 3.98 (m, 2H), 3.91 - 3.68 (m, 6H), 3.58 (d, J = 10.2 Hz, 2H), 3.44 (s, 1H), 3.22 (s, 4H), 2.91 (s, 4H), 2.81 (s, 4H), 2.57 (d, J = 4.5 Hz, 3H), 1.79 (s, 2H).	507.5[M+1]⁺	0.81

<실시예 46> N-(3-((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염의 제조

단계 1: 3-아미노페놀의 제조

3-니트로페놀 (5.0g, 35.9mmol)을 메탄올(30ml)에 녹인 용액에 10% Pd/C(0.5g)를 첨가하고 수소 풍선을 달고 상온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트에 여과하여 고체를 제거한 다음, 여과액을 감압하에 농축하여 목적 화합물 3-아미노페놀(4.0g, 100%)을 얻었으며, 정제없이 다음 반응에 사용하였다.

MS (m/z) : 110.2 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 0.22

단계 2: N-(3-하이드록시페닐)아크릴아미드의 제조

상기 실시예 46의 단계 1에서 얻어진 3-아미노페놀(580.0mg, 5.30mmol)에 THF(5ml)와 포화 NaHCO₃(5ml)을 첨가한 후, 0℃ 에서 Acryloyl chloride(4.3ml, 53.0mmol)를 천천히 적가하였다. 같은 온도에서 10분간 격렬히 교반한 후, 에틸아세테이트와 증류수를 이용하여 추출하였고, 모아진 유기층을 황산나트륨으로 건조하였다. 여과액을 감압 농축하여 중압액체크로마토그래피(실리카겔, 디클로메탄:메탄올=15:1)를 이용하여 목적화합물인 N-(3-하이드록시페닐)아크릴아미드(500.0mg, 60%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 164.2 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.06

단계 3: N-(3-((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드의 제조

0℃에서 수산화나트륨(60%, 103.0mg, 4.28mmol)을 DMF/DMSO(비율 9/1)의 혼합용액에 넣은 현탁액에 3-니트로아닐린(794.5mg, 3.98mmol)을 DMF/DMSO (비율 9/1) 혼합용액에 희석한 것을 천천히 적가하였다. 반응용액을 0℃에서 30분 동안 교반하고, DMF/DMSO(비율 9/1)에 희석된 4-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)모폴린(500.0mg, 2.14mmol)을 천천히 적가하였다. 반응용액을 실온까지 서서히 가온시키고 밤새 교반하였다. 반응혼합물을 sat. NH₄Cl 포화수용액으로 반응 종료시킨 후, 에틸아세테이트를 이용하여 추출하였다. 모아진 유기층은 brine으로 씻고, MgSO₄로 남아있는 물을 제거하여 목적화합물인 N-(3-((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드(1.1g, 50%)을 수득하였다. 잔사는 정제과정없이 다음 반응에 바로 사용하였다.

MS (m/z) : 361.2 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.47

단계 4: N-(3-((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염의 제조

상기 실시예 46 단계 3에서 얻어진 N-(3-((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드(20.0mg, 0.06mmol), 4-(4-메틸피페라진-1-일)아닐린 (16.0mg, 0.08mmol)과 탄산칼륨(38.0mg, 0.30mmol)를 sec-BuOH(3ml)에 첨가하여 희석 후 질소를 흘리면서, 10분동안 초음파 처리하여 가스를 제거 하였다. 반응 혼합물에 Pd₂(dba)₃(5.0mg, 0.006mmol) 및 Xphos(3.0mg, 0.006mmol)을 100 ℃에서 첨가한 후, 2시간 동안 반응 시켰다. 반응 후 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 디클로메탄으로 씻어주었다. 얻어진 여과액을 농축한 후, Prep-HPLC로 정제하여 고체의 N-(3-((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오로아세트산염 (24.0mg, 69%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 516.4 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.09

상기 실시예 46와 유사한 방법으로 실시예 47 내지 61를 제조하였으며, 실시예 46 내지 61의 화학구조를 하기 표 7에, 화합물명과 mass 및 UPLC 분석 결과를 하기 표 8에 정리하여 나타내었다.

실시예	화학구조	실시예	화학구조
46		47
48		49
50		51
52		53
54		55
56		57
58		59
60		61

실시예	화합물명	NMR	MASS	UPLC r. t. (min)
46	N-(3-((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.32 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.43 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.97 (dd, J = 7.7, 1.7 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 6.48 - 6.38 (m, 1H), 6.26 (dd, J = 16.9, 1.8 Hz, 1H), 5.78 (dd, J = 10.2, 1.8 Hz, 1H), 3.80 - 3.68 (m, 4H), 3.61 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 3.50 (d, J = 11.5 Hz, 2H), 3.20 - 3.10 (m, 2H), 3.07 (dd, J = 12.5, 8.3 Hz, 4H), 2.90 - 2.75 (m, 5H).	516.4[M+1]⁺	1.09
47	N-(3-((2-((4-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.33 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.59 (d, J = 12.2 Hz, 2H), 7.42 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.96 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 9.1 Hz, 2H), 6.47 - 6.38 (m, 1H), 6.26 (dd, J = 17.0, 1.9 Hz, 1H), 5.78 (dd, J = 10.1, 1.9 Hz, 1H), 3.79 - 3.69 (m, 4H), 3.48 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.17 (s, 2H), 3.08 - 2.97 (m, 4H), 2.82 (s, 6H), 2.78 (s, 3H).	518.4[M+1]⁺	1.13
48	N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.37 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.61 (d, J = 17.5 Hz, 2H), 7.45 (s, 1H), 6.98 (d, J = 18.8 Hz, 2H), 6.62 (s, 1H), 6.46 - 6.36 (m, 1H), 6.25 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 5.78 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.76 (s, 6H), 3.58 (s, 6H), 3.09 (s, 8H), 2.85 (s, 4H), 1.97 (s, 2H), 1.51 (s, 2H).	657.5[M+1]⁺	1.36
49	4-((4-(3-아크릴아마이도페녹시)-5-모폴리노피리미딘-2-일)아미노)-3-메톡시-N-(1-메틸피페리딘-4-일)벤자마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.37 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.82 (s, 2H), 7.68 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.46 - 6.36 (m, 1H), 6.25 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 5.77 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 3.97 (s, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.76 (s, 4H), 3.47 (d, J = 11.1 Hz, 2H), 3.09 (s, 6H), 2.78 (s, 3H), 2.02 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 1.74 (d, J = 12.5 Hz, 2H).	588.4[M+1]⁺	1.32
50	N-(3-((2-((2-메톡시-4-(모폴린-4-카보닐)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.36 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.70 (s, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.59 (s, 1H), 6.40 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 6.25 (d, J = 15.7 Hz, 1H), 5.78 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.76 (s, 4H), 3.58 (s, 4H), 3.46 (s, 4H), 3.09 (s, 4H).	561.3[M+1]⁺	1.58
51	N-(3-((2-((6-(4-에틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.33 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.56 (d, J = 19.4 Hz, 2H), 7.42 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.41 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 5.78 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 4.21 (s, 2H), 3.74 (s, 5H), 3.55 (s, 2H), 3.05 (s, 7H), 1.25 (s, 5H).	531.3[M+1]⁺	1.22
52	N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.28 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.12 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.49 - 7.33 (m, 2H), 6.99 - 6.94 (m, 1H), 6.92 (s, 2H), 6.41 (dd, J = 17.0, 10.1 Hz, 1H), 6.25 (dd, J = 17.0, 2.1 Hz, 1H), 5.77 (dd, J = 10.1, 2.0 Hz, 1H), 3.77 - 3.70 (m, 7H), 3.49 (s, 6H), 3.05 (t, J = 4.5 Hz, 4H).	508.3[M+1]⁺	1.45
53	N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2- 트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.32 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.60 (d, J = 9.4 Hz, 2H), 7.42 (t, J = 8.2 Hz, 3H), 6.97 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.66 (s, 1H), 6.43 (dd, J = 17.0, 10.1 Hz, 1H), 6.27 (dd, J = 17.0, 2.0 Hz, 2H), 5.80 - 5.74 (m, 1H), 3.78 (s, 6H), 3.76 - 3.72 (m, 7H), 3.08 - 3.02 (m, 4H), 2.82 - 2.73 (m, 8H), 2.03 - 1.93 (m, 3H), 1.67 - 1.55 (m, 3H).	629.4[M+1]⁺	1.09
54	N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.29 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.61 - 7.52 (m, 2H), 7.44 (d, J = 32.0 Hz, 2H), 7.18 (s, 1H), 6.98 (dd, J = 21.7 Hz, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.41 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 5.76 (s, 1H), 3.55 - 3.52 (m, 3H), 3.38 - 3.27 (m, 8H), 3.08 - 3.00 (m, 9H), 2.14 - 2.05 (m, 3H), 1.79 - 1.71 (m, 3H).	616.4[M+1]⁺	1.35
55	N-(3-((2-((3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.29 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.09 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 5.1, 2.9 Hz, 2H), 7.49 - 7.35 (m, 2H), 7.20 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.63 (dd, J = 8.6, 4.3 Hz, 1H), 6.42 (dd, J = 17.0, 10.1 Hz, 1H), 6.26 (dd, J = 16.9, 2.0 Hz, 1H), 5.80 - 5.74 (m, 1H), 3.78 - 3.70 (m, 4H), 3.32 (s, 3H), 3.16 (s, 3H), 3.09 - 3.01 (m, 4H), 2.88 - 2.83 (m, 4H), 2.79 (t, J = 12.3 Hz, 4H).	546.3[M+1]⁺	1.17
56	N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.72 (s, 2H), 7.59 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.19 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.69 (s, 1H), 6.42 (t, J = 16.2 Hz, 3H), 5.82 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 8.0 Hz, 10H), 3.63 (d, J = 10.3 Hz, 3H), 3.38 - 3.18 (m, 6H), 3.18 - 3.03 (m, 6H), 3.03 - 2.81 (m, 5H).	546.3[M+1]⁺	1.12
57	N-(4-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드2,2,2-트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.31 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.75 (s, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.29 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.55 - 6.42 (m, 2H), 6.30 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 6.09 (s, 1H), 5.80 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.04 (s, 6H), 2.98 (s, 4H), 2.43 (s, 2H), 2.39 (s, 4H), 2.20 (s, 3H).	546.3[M+1]⁺	1.03
58	N-(4-((4-(3-아크릴아미도페녹시)-5-몰포리노피리미딘-2-일)아미노)페닐)-1-메틸피페리딘-4-카복시아미드 2,2,2- 트리플루오로아세테이트산염.	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.85 (s, 1H), 7.73 (d, J = 26.9 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.47 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.38 (m, 2H), 7.24 (m, 2H), 7.03 (s, 1H), 6.52 - 6.33 (m, 1H), 5.81 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.89 (s, 5H), 3.62 (d, J = 11.5 Hz, 2H), 3.44 (s, 1H), 3.17 (s, 4H), 3.08 (t, J = 12.7 Hz, 2H), 2.91 (s, 3H), 2.67 (m, 1H), 2.42 (m, 1H), 2.15 (d, J = 13.8 Hz, 2H), 2.08 - 1.92 (m, 2H), 1.31 (m, 1H), 1.21 (m, 1H), 0.92 (m, 6H).	558.4[M+1]⁺	1.01
59	N-(3-((5-모폴리노-2-((4-(2-모폴리노에틸)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.31 (s, 3H), 9.67 (s, 3H), 9.32 (s, 3H), 8.09 (s, 3H), 7.57 (s, 6H), 7.41 (s, 10H), 6.96 (d, J = 18.0 Hz, 10H), 6.41 (s, 3H), 6.24 (s, 2H), 5.78 (d, J = 9.9 Hz, 3H), 4.00 (d, J = 11.5 Hz, 8H), 3.75 (s, 14H), 3.24 (s, 9H), 3.06 (s, 26H), 2.82 (s, 8H), 2.33 (s, 10H)	531.3[M+1]⁺	1.07
60	N-(3-((2-((3-클로로-4-플로오르페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.32 (s, 1H), 9.67 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.58 (s, 2H), 7.40 (s, 3H), 6.96 (d, J = 24.2 Hz, 2H), 6.41 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 5.78 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.00 (d, J = 12.2 Hz, 4H), 3.48 (d, J = 11.8 Hz, 2H), 3.25 (s, 2H), 3.07 (s, 5H), 2.83 (s, 2H).	531.33[M+1]⁺	1.06
61	N-(3-((2-((4-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)-2-메톡시페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염	¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.32 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.58 (s, 2H), 7.43 (s, 2H), 6.96 (s, 1H), 6.57 (s, 1H), 6.43 (s, 1H), 6.27 (d, J = 16.9 Hz, 2H), 5.77 (s, 1H), 3.75 (d, J = 9.0 Hz, 9H), 3.04 (s, 4H), 2.78 (s, 6H), 2.67 (s, 2H), 2.61 (s, 1H), 2.33 (s, 2H), 2.01 (s, 2H), 1.67 (s, 2H), 1.27 - 1.22 (m, 1H).	574.4[M+1]⁺	1.06

<실시예 62> N-(3-(((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염의 제조

단계 1: 2-클로로-5-모폴리노-N-(3-나이트로벤질)피리미딘-4-아민의 제조

4-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)모폴린(1g, 4.27mmol)과 (3-니트로페닐)메탄아민(780mg, 5.13mmol)을 1,4-다이옥산(25ml)에 녹여 교반하였다. 반응혼합물에 다이이소프로필에틸아민(2.24ml, 12.82mmol)을 적가 한 후 100 ℃까지 서서히 가온시키고 밤새 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트와 증류수를 이용하여 추출한 뒤, 황산나트륨으로 건조하였다. 여과액을 감압 농축하여 중압액체크로마토그래피(실리카겔, 헥산:에틸아세테이트=20:1)를 이용하여 목적화합물인 2-클로로-5-모폴리노-N-(3-나이트로벤질)피리미딘-4-아민(1.28g, 86%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 350.2[M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.65

단계 2: N-(3-아미노벤질)-2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-아민의 제조

상기 실시예 62의 단계 1에서 얻어진 2-클로로-5-모폴리노-N-(3-나이트로벤질)피리미딘-4-아민 (1.03g, 2.94mmol)및 SnCl₂·2H₂O(6.64g, 29.4mmol)을 에틸아세테이트 (25ml)에 녹인 다음, 50℃에서 5시간동안 교반하였다. 반응 용액의 온도를 실온으로 내린 후, pH 5가 될 때까지 암모니아수 용액을 적가하였다. 반응 혼합물에 무수 탄산수소나트륨를 첨가하여 pH 7로 조절하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 사용하여 여과하고, 에틸아세테이트로 여러 번 닦아 주었다. 여과액을 감압 농축하여 N-(3-아미노벤질)-2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-아민(942.0mg, 98%)을 얻었으며, 정제없이 다음 반응에 사용하였다.

MS (m/z) : 320.2[M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.09

단계 3: N-(3-(((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드의 제조

상기 실시예 62의 단계 2에서 얻어진 N-(3-아미노벤질)-2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-아민 (924.0mg, 2.89mmol)을 THF(22.5ml)에 녹인 후, 포화 NaHCO₃(22.5ml)을 가한 뒤, 0℃ 에서 Acryloyl chloride(0.704ml, 8.67mmol)를 천천히 적가하였다. 같은 온도에서 10분간 격렬히 교반한 후, 에틸아세테이트와 증류수를 이용하여 추출한 뒤, 황산나트륨으로 건조하였다. 여과액을 감압 농축하고 중압액체크로마토그래피(실리카겔, 헥산:에틸아세테이트=20:1)를 이용하여 목적화합물인 N-(3-(((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드(77.1mg, 71.4%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 374.2 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.41

단계 4: N-(3-(((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염의 제조

상기 실시예 62의 단계 3에서 얻어진 N-(3-(((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드(50.0mg, 0.134mmol), 4-(4-메틸피페라진-1-일)아닐린 (38.4mg, 0.201mmol)과 탄산칼륨(92.0mg, 0.669mol)를 sec-BuOH(3ml)에 첨가하여 희석 후, 질소를 흘리면서 10분동안 초음파 처리하여 가스를 제거 하였다. 반응 혼합물에 Pd₂(dba)₃(12.25mg, 0.013mmol) 및 Xphos(6.38mg, 0.013mmol)을 100 ℃에서 첨가한 후, 2시간 동안 반응 시켰다. 반응 후 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 디클로메탄으로 씻어주었다. 얻어진 여과액을 농축한 후, Prep-HPLC로 정제하여 고체의 N-(3-(((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염 (41.0mg, 47.7%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 529.4 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 0.92

상기 실시예 62와 유사한 방법으로 실시예 54 및 55을 제조하였으며, 실시예 63 내지 64의 화학구조를 하기 표 9에, 화합물명과 mass 및 UPLC 분석 결과를 하기 표 10에 정리하여 나타내었다.

실시예	화학구조	실시예	화학구조
62		63
64		-	-

실시예	화합물명	NMR	MASS	UPLC r. t. (min)
62	N-(3-(((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.87 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.38 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 6.44 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.82 (dd, J = 9.6, 2.3 Hz, 1H), 4.74 (s, 2H), 3.93 - 3.87 (m, 5H), 3.84 (s, 2H), 3.61 (s, 2H), 3.25 (s, 1H), 3.04 (s, 2H), 2.99 (s, 3H), 2.95 - 2.90 (m, 4H).	529.4[M+1]⁺	0.92
63	N-(3-(((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.87 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.46 - 7.36 (m, 2H), 7.33 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.81 (dd, J = 9.6, 2.2 Hz, 1H), 4.75 (s, 2H), 3.93 - 3.84 (m, 10H), 3.61 (s, 2H), 3.35 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.07 (s, 2H), 3.00 (s, 3H), 2.93 - 2.89 (m, 4H).	493.4[M+1]⁺	1.00
64	N-(4-(((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.56 (s, 2H), 7.47 (s, 2H), 7.36 (s, 2H), 7.18 (s, 2H), 6.76 (s, 1H), 6.60 (s, 2H), 6.37 (s, 2H), 5.78 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 3.91 (s, 2H), 3.84 (s, 8H), 3.62 (s, 3H), 3.10 (d, J = 17.3 Hz, 3H), 2.98 (s, 4H).	559.4[M+1]⁺	0.88

<실시예 65> N-(3-(((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염의 제조

단계 1: 4-(2-클로로-4-((3-나이트로벤질)옥시)피리미딘-5-일)모폴린의 제조

0 ℃에서 수소화나트륨(60%, 683.0mg, 17.09mmol)과 4-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)모폴린(2g, 8.54mmol)을 테트라히드로푸란(35ml)에 녹여 교반하였다. 반응 혼합물을 0 ℃에서 10분간 교반 후 (3-니트로페닐)메탄올(1.57g, 10.25mmol)을 적가 하였다. 반응용액을 실온까지 서서히 가온시키고 밤새 교반하였다. 0℃에서 얼음물을 적가하여 반응을 종결시켰고, 생성된 고체를 여과 및 건조하여 고체의 목적화합물 4-(2-클로로-4-((3-나이트로벤질)옥시)피리미딘-5-일)모폴린 (2.81g, 94%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 351.2[M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.7

단계 2: 3-(((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)아닐린의 제조

상기 실시예 65의 단계 1에서 얻어진 4-(2-클로로-4-((3-나이트로벤질)옥시)피리미딘-5-일)모폴린 (4.43g, 12.63mmol)및 SnCl₂·2H₂O(28.5g, 126mmol)을 에틸아세테이트 (80ml)에 녹인 다음, 50℃에서 5시간동안 교반하였다. 반응 용액의 온도를 실온으로 내린 후, pH 5가 될 때까지 암모니아수 용액을 적가하였다. 반응 혼합물에 고체 무수 탄산수소나트륨를 첨가하여 pH 7로 조절하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 사용하여 여과하고, 에틸아세테이트로 여러 번 닦아 주었다. 여과액을 감압 농축하여 3-(((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)아닐린(3.65g, 90%)을 얻었으며, 정제없이 다음 반응에 사용하였다.

MS (m/z) : 321.1[M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.25

단계 3: N-(3-(((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드의 제조

상기 실시예 65의 단계 2에서 얻어진 3-(((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)아닐린 (3.65g, 11.38mmol)을 THF(50ml)에 녹인 후, 포화 NaHCO₃(50ml)을 가한 뒤, 0℃ 에서 Acryloyl chloride(1.849ml, 22.76mmol)를 천천히 적가하였다. 같은 온도에서 10분간 격렬히 교반한 후, 에틸아세테이트와 증류수를 이용하여 추출한 뒤, 황산나트륨으로 건조하였다. 여과액을 감압 농축하여 중압액체크로마토그래피(실리카겔, 디클로메탄:메탄올=15:1)를 이용하여 목적화합물인 N-(3-(((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 (3.93g, 92%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 516.3[M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.52

단계 4: N-(3-(((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염의 제조

상기 실시예 65의 단계 3에서 얻어진 N-(3-(((2-클로로-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 (50.0mg, 0.133mmol), 4-(4-메틸피페라진-1-일)아닐린 (30.6mg, 0.16mmol)과 탄산칼륨(92.0mg, 0.667mol)를 sec-BuOH(3ml)에 첨가하여 희석 후 질소를 흘리면서, 10분동안 초음파 처리하여 가스를 제거 하였다. 반응 혼합물에 Pd₂(dba)₃(12.22mg, 0.013mmol) 및 Xphos(6.36mg, 0.013mmol)을 100 ℃에서 첨가한 후, 2시간 동안 반응 시켰다. 반응 후 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 디클로메탄으로 씻어주었다. 얻어진 여과액을 농축한 후, Prep-HPLC로 정제하여 고체의 N-(3-(((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염 (24.0mg, 69%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 530.4[M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 0.96

상기 실시예 65와 유사한 방법으로 실시예 66을 제조하였으며, 실시예 65 및 66의 화학구조를 하기 표 11에, 화합물명과 mass 및 UPLC 분석 결과를 하기 표 12에 정리하여 나타내었다.

실시예	화학구조	실시예	화학구조
65		66

실시예	화합물명	NMR	MASS	UPLC r. t. (min)
65	N-(3-(((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.97 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.40 (d, J = 26.3 Hz, 5H), 7.11 (d, J = 19.0 Hz, 4H), 6.51 - 6.33 (m, 2H), 5.78 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.55 (s, 2H), 3.82 (d, J = 31.1 Hz, 7H), 3.60 (s, 4H), 2.99 (d, J = 23.4 Hz, 11H).	530.4[M+1]⁺	0.96
66	N-(3-(((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염	¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ 7.99 (s, 1H), 7.53 - 7.29 (m, 5H), 7.16 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.66 (s, 1H), 6.48 - 6.29 (m, 2H), 5.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.56 (s, 2H), 3.86 (s, 5H), 3.77 (s, 6H), 2.96 (t, J = 18.9 Hz, 10H).	560.4[M+1]⁺	0.98

<실시예 67> N-(3-(2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-몰포리노피리미딘-4-일)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염의 제조

단계 1: 4-(2-클로로-4-(3-나이트로페닐)피리미딘-5-일)몰포린의 제조

상기 실시예 35의 단계 2에서 얻어진 4-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)모폴린 (1.0g, 4.27mmol)과 (3-나이트로페닐)보론산 (0.784g, 4.70mmol)이 녹아있는 1,4-다이옥산(39ml)의 혼합용액에 1M Na₂CO₃(12.82ml, 12.82mmol)을 넣은 후, 10분 동안 질소를 흘려주면서 초음파 처리를 하였다. 반응 혼합물에 Pd(PPh₃)₄(0.494g, 0.427mmol)를 넣은 후, 80℃ 3시간 동안 교반하였다. 반응 완결 후 에틸아세테이트와 물을 이용하여 추출하였다. 모아진 유기층을 소금물로 씻어주고 무수 황산나트륨으로 건조한 다음 감압 하에서 농축하고, MPLC(디클로로메탄/메탄올)로 정제하여 목적 화합물(1.2g, 88%)을 얻었다.

MS (m/z) : 321.14 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.65

단계 2: 3-(2-클로로-5-몰포리노피리미딘-4-일)아닐린의 제조

상기 실시예 67 단계 1에서 얻어진 4-(2-클로로-4-(3-나이트로페닐)피리미딘-5-일)몰포린(1.2g, 3.74mmol) 및 SnCl₂·2H₂O(8.44g, 37.4mmol)을 에틸아세테이트(30ml)에 녹인 후, 진한염산 한방울을 적가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 5시간동안 교반하였다. 반응혼합물의 온도를 실온으로 내린 후, pH 5가 될 때까지 암모니아수 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물에 고체 탄산수소나트륨을 첨가하여 pH 7로 조절하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 에틸아세테이트로 여러 번 닦아 주었다. 여과액을 감압하에 농축하여 3-(2-클로로-5-몰포리노피리미딘-4-일)아닐린 (626mg, 57.5%)을 얻었으며, 정제없이 다음 반응에 사용하였다.

MS (m/z) : 291.1 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.09

단계 3: N-(3-(2-클로로-5-몰포리노피리미딘-4-일)페닐)아크릴아미드의 제조

상기 실시예 67 단계 2에서 얻어진 3-(2-클로로-5-몰포리노피리미딘-4-일)아닐린 (600mg, 2.064mmol)을 THF(7ml)에 녹인 후, 포화 NaHCO₃(7ml)을 가한 뒤, 0℃에서 Acryloyl chloride (934mg, 10.32mmol)를 천천히 적가하였다. 같은 온도에서 10분간 격렬히 교반한 후, 에틸아세테이트와 증류수를 이용하여 추출한 후, 유기층을 황산나트륨으로 건조한다. 잔사를 중압액체크로마토그래피(실리카겔, DCM:MeOH=15:1)를 이용하여 목적화합물인 N-(3-(2-클로로-5-몰포리노피리미딘-4-일)페닐)아크릴아미드 (500mg, 70.3%)을 얻었다.

MS (m/z) : 345.1 [M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.45

단계 4: N-(3-(2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-몰포리노피리미딘-4-일)페닐)아크릴아미드의 제조

상기 실시예 67 단계 3에서 얻어진 N-(3-(2-클로로-5-몰포리노피리미딘-4-일)페닐)아크릴아미드 (50.0mg, 0.145mmol)과 탄산칼륨(100.0mg, 0.725mol)를 sec-BuOH(3ml)에 첨가하여 희석 후 질소를 흘리면서, 10분동안 초음파 처리하여 가스를 제거 하였다. 반응 혼합물에 Pd₂(dba)₃(13.28mg, 0.015mmol) 및 Xphos(6.91mg, 0.015mmol)을 100 ℃에서 첨가한 후, 2시간 동안 반응 시켰다. 반응 후 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 디클로메탄으로 씻어주었다. 얻어진 여과액을 농축한 후, Prep-HPLC로 정제하여 고체의 N-(3-(2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-몰포리노피리미딘-4-일)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염 (10.0mg, 13.2%)을 수득하였다.

MS (m/z) : 530.4[M+1]⁺, UPLC r. t. (min) : 1.17

실시예	화학구조
67

실시예	화합물명	NMR	MASS	UPLC r. t. (min)
67	N-(3-(2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일) 페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염		530.4[M+1]⁺	0.96

<실험예 1> Ba/F3 및 폐암세포 증식 억제활성 평가

본 발명에 따른 화합물의 EGFR 돌연변이를 발현하는 Ba/F3 및 폐암세포 증식에 대한 억제활성을 평가하기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다.

EGFR 유전자를 발현하는 폐암세포주 중에 A549는 DMEM (Invitrogen)에 10% FBS (HyClone)을 넣은 후 배양하고, 다른 암세포들은 10% FBS를 첨가한 RPMI-1640 (Invitrogen)를 사용한다. Ba/F3 세포는 10% FBS와 5 ng/ml IL-3 (R&D Systems)을 넣은 RPMI-1640를 사용한다. 형질도입된 Ba/F3 세포는 같은 배지에 1 ug/mlpuromycin (Invitrogen)을 추가하여 배양한다. 세포는 화합물을 처리하기 24 시간 전에, 3000-5000 개 세포를 white clear bottom 96 well plate (Corning)의 well마다 분주해 놓는다. 화합물은 다이메틸설폭사이드에 희석시켜 (3 배씩 희석, 총 12개 농도) 최종농도가 0.3 nM - 50 uM이 되도록, 0.5 ul씩 주입하였다. 살아있는 세포의 측정은 화합물 처리후 72 시간 뒤에 CellTiter-Glo luminescentcell-viability reagent (Promega)를 사용하여 상온에서 10분 보관한 후에, 판독기 (SynergyNeo, Biotek)를 이용하여 발광강도를 측정하였다. 각 시험은 세번씩 반복하였다. 결과값은 대조군과 비교한 세포성장비율 (%)로 산출하였다. GraphPad Prism version 5.0 프로그램을 사용하여 그래프를 그리고 IC₅₀ 값을 계산하였다. EGFR 돌연변이를 발현하는 Ba/F3 세포의 증식 억제 활성 평가 결과를 표 13에, 폐암세포 증식에 대한 억제 활성을 표 14에 나타내었다.

실시예	Ba/F3 cell (IC₅₀ (uM))
	DM	DM	DM	SM	SM	WT	WT	TM	TM
	EGFR Del19/T790M (%Cont@500nM)	EGFR Del19/T790M	EGFR L858R/T790M	EGFR Del19	EGFR L858R	EGFR wt,	naive	EGFR L858R/T790M/C797S	EGFR Del19/T790M/C797S
1	1.741	0.096			0.002		7.936
2	1.299	0.398			0.009		11.788
3		0.266			0.007
4		0.516			0.008
5		1.555	3.022		0.075		11.77
6		0.481	0.176		0.013		14.74
7		0.185	0.07		0.004		2.561
8			0.501	0.296
9		0.968	0.358		0.059		4.776
10		0.474	0.092		0.017		9.417
11		5.836	2.414		0.194		16.98
12		>10.0					>10.0
13		1.555					2.581
14		7.465					>10.0
15		4.565					>10.0
16		2.733					>10.0
17	1.078	0.033			0.002		5.914
18	0.469	0.025			0.003		5.205
19	1.104	0.040			0.001		2.674
20	10.501	0.108			0.009		3.423
21	6.624	0.031			0.004		2.129
22	0.613	0.119			0.004		2.642
23	4.865	0.086			0.003		5.584
24	54.811
25	56.198
26	28.153
27		0.072			0.002
28		0.035			0.002
29		0.174			0.005
30	40.178	0.161			0.007		3.688
31		2.261					7.565
32		4.582	4.655		2.442		13.61
33		1.147	1.168		0.631		7.218
34		2.31					>10.0
35	1.974	0.113			0.006		7.909
36	48.103	0.599			0.038		4.886
37			0.229	0.252		0.258
38			0.24	0.158		0.184
39			1.907	1.024		1.051
40			0.576	0.388		0.291
41			0.49	0.209		0.133
42			0.639	0.534		0.574
43		11.94	6.084		1.199		11.35
44		>10.0					>10.0
45		>15.0	>15.0				>15.0	>15.0	>15.0
46	1.699	0.055			0.003		16.63
47	1.742	0.097			0.006		19.2
48			0.639	0.534		0.376
49			0.166	0.217		0.064
50			0.671	0.799		0.23
51			0.119	0.094		0.017
52			2.023	1.872		0.708
53			0.207	0.142		0.065
54			0.331	0.227		0.035
55			0.048	0.028		0.012
56			0.553	0.255		0.052
57		7.302	2.306		1.644		6.611
58		3.599	0.979		0.217		6.475
59		0.072	0.027		0.005		2.479
60		0.145	0.046		0.001		5.721
61		0.578	0.221		0.047		1.566
62		5.009	2.526		0.993		2.108
63		6.781	3.507		2.244		2.537
64		5.178	2.679		2.11		0.962
65		6.184	2.16		0.744		2.576
66		5.43	1.852		0.684		7.736
67		5.955					>10.0

* SM: 단일 돌연변이(Single mutant)

DM: 이중 돌연변이(Double mutant),

TM: 삼중 돌연변이(Triple mutant),

WT: 야생형(Wild Type)

실시예	Ba/F3 cell (IC₅₀ (uM))
	Exon 20 Ins
	EGFR NPH	EGFR SVD	EGFR NPG	EGFR H	EGFR ASV	EGFR FQEA	Her2 YVMA
19	0.133	0.108	0.022	0.119	0.04	0.008
38	2.573	2.599
45	>15.0	>15.0		>15.0	>15.0	>15.0	>15.0
56	0.595	0.74

실시예	cancer cell (IC₅₀ (uM))
실시예	PC9GR	H1975	PC9	A549
1	0.043	0.140	0.004	1.41
2	0.168	1.455	0.022	4.69
17	0.016	0.08	0.003	2.566
18	0.014	0.101	0.002	3.964
19	0.014	0.070	0.002	4.064
20	0.103	1.266	0.016	9.676
21	0.033	0.513	0.007	3.626
22	0.035	0.420	0.006	6.097
23	0.018	1.114	0.003	4.722
35	0.066	0.202	0.02	1.388
36	0.476	2.496	0.095	9.261
46	0.042	0.083	0.01	9.08
47	0.095	0.652	0.017	11.25

상기 표 15에 나타난 바와 같이, Ba/F3세포주에서 본 발명의 모든 실시예 화합물이 EGFR 야생형에서도 우수한 억제능을 나타낼 뿐만 아니라, EGFR 단일 또는 이중 돌연변이에 대하여도 높은 억제능을 나타냄을 알 수 있다.

상기 표 17에 나타난 바와 같이, 폐암 세포주인 A549, PC9, PC9GR, H1975 세포에 대하여 우수한 증식 억제능을 나타냄을 알 수 있다.

따라서, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물은 EGFR(epidermal growth factor receptor) 야생형 또는 돌연변이에 대하여 높은 억제능을 나타내므로, EGFR 야생형 뿐만 아니라, EGFR del19, EGFR del19/T790M, EGFR L858R, EGFR L858R/T790M, EGFR H773_V774insNPH, EGFR D770_N771insSVD 등의 EGFR 돌연변이가 발현된 암의 치료에 유용하게 사용될 수 있고, 폐암 세포주 증식 억제능이 우수한 바, 특히, 폐암의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

<실험예 2> 키나아제 효소능 측정

본 발명에 따른 화합물의 키나아제 효소능을 측정하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였으며, 그 결과를 표 17에 나타내었다.

JAK3 키나아제 효소 IC₅₀ 측정은 Kinase HotSpot service (Reaction Biology Corporation)을 이용하였으며, 시험 시 ATP농도는 10uM 조건으로 시행하였으며, 화합물의 시험농도는 10uM를 최고로 하여 3배 농도구배를 주어 측정하였다. 모든 실험방법은 Kinase HotSpot Customer Protocol에 제공되는 바에 따랐다(http://www.reactionbiology.com/webapps/site/Kinase_Assay_Protocol.aspx).

구체적으로, 하기와 같은 절차에 의해 수행하였다.

시약:

반응 버퍼(Base Reaction buffer); 20 mM Hepes (pH 7.5), 10 mM MgCl₂, 1 mM EGTA, 0.02% Brij35, 0.02 mg/ml BSA, 0.1 mM Na3VO4, 2 mM DTT, 1% DMSO

반응 절차:

1. 새로 준비된 반응 버퍼(Base Reaction Buffer)에 Peptide substrate, [GEEEEYFELVKKKK] 기질을 준비하여 기질 용액 제조

2. 상기 기질 용액에 보조인자 첨가

3. JAK3 키나아제를 기질 용액에 넣고 부드럽게 혼합

4. Acoustic technology (Echo550; nanoliter range)에 의한 키나아제 반응 혼합물에 DMSO 중의 화합물을 첨가하고, 실온에서 20 분간 배양

5. 33P-ATP (specific activity 10 mCi/ml)를 상기 반응 혼합물에 첨가하여 반응시작

6. 상온에서 2시간동안 키나아제 반응 배양

7. 반응물을 P81 이온 교환지에 스팟시킴

8. 필터-바인딩 방법(filter-binding method)으로 키나아제 활성 검출

실시예	Compound IC₅₀ DATA for JAK3(nM)
1	8.33
17	2.25
35	0.135
43	5.20

상기 표 18에 나타난 바와 같이,

본 발명의 실시예 화합물은 JAK3에 대하여 nM대의 IC₅₀값을 나타냄으로써, 우수한 키나아제 저해능을 나타내는 것을 알 수 있다.

따라서, 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물은 JAK3에 대하여 우수한 저해효과를 나타내는 바, JAK3의 활성과 관련된 질환, 구체적으로 암 또는 염증성 질환의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

<실험예 3> 본 발명에 따른 화합물의 다양한 키나아제 저해 활성 평가

본 발명에 따른 화합물의 보다 많은 효소에 대한 저해활성을 평가 하기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다.

구체적으로, 본 발명의 실시예 화합물 중, 선별된 실시예 65에 대하여, DiscoverX 사에 의뢰하여 효소(Kinase) 선택성을 측정하기로 하고, scanMAX^TM Kinase 분석용 패널을 사용하여 실험을 진행하였다. 이때, 효소에 처리되는 약물의 농도는 DMSO에 1uM로 하였고, 하기 수학식 1과 같은 방법으로 조절 백분율(% contorl)을 정하였고, 그 결과를 하기 표 18에 나타내었다

[수학식 1]

(실시예 화합물 - 양성 대조군)/(음성 대조군 - 양성대조군) X 100

여기서, 상기 양성 대조군은 0%의 조절 백분율을 나타내튼 화합물을 말하며, 음성 대조군은 DMSO로 100%의 조절 백분율을 나타낸다. 또한, 본 발명의 효소 선택성은 각각의 효소에 대하여 조절 백분율이 < 35%(즉, 35% 미만)이면 해당 효소에 대하여 활성을 갖는 것으로 판단하였다.

Kinase	실시예 65
AAK1	84
ABL1(E255K)-phosphorylated	68
ABL1(F317I)-nonphosphorylated	86
ABL1(F317I)-phosphorylated	100
ABL1(F317L)-nonphosphorylated	91
ABL1(F317L)-phosphorylated	65
ABL1(H396P)-nonphosphorylated	58
ABL1(H396P)-phosphorylated	78
ABL1(M351T)-phosphorylated	83
ABL1(Q252H)-nonphosphorylated	81
ABL1(Q252H)-phosphorylated	51
ABL1(T315I)-nonphosphorylated	99
ABL1(T315I)-phosphorylated	59
ABL1(Y253F)-phosphorylated	100
ABL1-nonphosphorylated	93
ABL1-phosphorylated	83
ABL2	92
ACVR1	100
ACVR1B	96
ACVR2A	100
ACVR2B	93
ACVRL1	82
ADCK3	100
ADCK4	100
AKT1	100
AKT2	71
AKT3	99
ALK	85
ALK(C1156Y)	65
ALK(L1196M)	99
AMPK-alpha1	92
AMPK-alpha2	85
ANKK1	69
ARK5	100
ASK1	94
ASK2	88
AURKA	94
AURKB	98
AURKC	99
AXL	75
BIKE	97
BLK	37
BMPR1A	98
BMPR1B	80
BMPR2	97
BMX	65
BRAF	87
BRAF(V600E)	94
BRK	98
BRSK1	95
BRSK2	99
BTK	74
BUB1	100
CAMK1	85
CAMK1B	82
CAMK1D	91
CAMK1G	88
CAMK2A	97
CAMK2B	100
CAMK2D	99
CAMK2G	94
CAMK4	73
CAMKK1	92
CAMKK2	97
CASK	78
CDC2L1	89
CDC2L2	85
CDC2L5	66
CDK11	97
CDK2	97
CDK3	82
CDK4	97
CDK4-cyclinD1	95
CDK4-cyclinD3	81
CDK5	100
CDK7	71
CDK8	94
CDK9	95
CDKL1	100
CDKL2	87
CDKL3	93
CDKL5	77
CHEK1	98
CHEK2	100
CIT	100
CLK1	90
CLK2	65
CLK3	96
CLK4	81
CSF1R	35
CSF1R-autoinhibited	55
CSK	89
CSNK1A1	98
CSNK1A1L	100
CSNK1D	97
CSNK1E	100
CSNK1G1	86
CSNK1G2	100
CSNK1G3	100
CSNK2A1	79
CSNK2A2	82
CTK	87
DAPK1	84
DAPK2	96
DAPK3	100
DCAMKL1	100
DCAMKL2	86
DCAMKL3	67
DDR1	69
DDR2	82
DLK	67
DMPK	98
DMPK2	100
DRAK1	97
DRAK2	96
DYRK1A	45
DYRK1B	100
DYRK2	78
EGFR	73
EGFR(E746-A750del)	52
EGFR(G719C)	39
EGFR(G719S)	51
EGFR(L747-E749del, A750P)	53
EGFR(L747-S752del, P753S)	44
EGFR(L747-T751del,Sins)	47
EGFR(L858R)	68
EGFR(L858R,T790M)	80
EGFR(L861Q)	34
EGFR(S752-I759del)	48
EGFR(T790M)	89
EIF2AK1	78
EPHA1	94
EPHA2	91
EPHA3	87
EPHA4	100
EPHA5	100
EPHA6	99
EPHA7	90
EPHA8	97
EPHB1	100
EPHB2	95
EPHB3	100
EPHB4	100
EPHB6	70
ERBB2	100
ERBB3	91
ERBB4	55
ERK1	100
ERK2	98
ERK3	100
ERK4	85
ERK5	99
ERK8	95
ERN1	87
FAK	96
FER	89
FES	98
FGFR1	40
FGFR2	75
FGFR3	83
FGFR3(G697C)	78
FGFR4	100
FGR	92
FLT1	87
FLT3	8.7
FLT3(D835H)	61
FLT3(D835V)	0.55
FLT3(D835Y)	26
FLT3(ITD)	31
FLT3(ITD,D835V)	19
FLT3(ITD,F691L)	85
FLT3(K663Q)	27
FLT3(N841I)	10
FLT3(R834Q)	36
FLT3-autoinhibited	43
FLT4	88
FRK	96
FYN	93
GAK	33
GCN2(Kin.Dom.2,S808G)	85
GRK1	96
GRK2	74
GRK3	65
GRK4	100
GRK7	76
GSK3A	54
GSK3B	85
HASPIN	85
HCK	100
HIPK1	96
HIPK2	90
HIPK3	85
HIPK4	85
HPK1	99
HUNK	83
ICK	79
IGF1R	92
IKK-alpha	98
IKK-beta	98
IKK-epsilon	71
INSR	85
INSRR	100
IRAK1	62
IRAK3	96
IRAK4	66
ITK	92
JAK1(JH1domain-catalytic)	93
JAK1(JH2domain-pseudokinase)	100
JAK2(JH1domain-catalytic)	78
JAK3(JH1domain-catalytic)	1.6
JNK1	63
JNK2	80
JNK3	81
KIT	3.2
KIT(A829P)	20
KIT(D816H)	75
KIT(D816V)	55
KIT(L576P)	1.2
KIT(V559D)	2.2
KIT(V559D,T670I)	98
KIT(V559D,V654A)	61
KIT-autoinhibited	16
LATS1	97
LATS2	100
LCK	76
LIMK1	100
LIMK2	100
LKB1	100
LOK	100
LRRK2	78
LRRK2(G2019S)	35
LTK	100
LYN	92
LZK	86
MAK	100
MAP3K1	81
MAP3K15	94
MAP3K2	78
MAP3K3	80
MAP3K4	92
MAP4K2	96
MAP4K3	100
MAP4K4	91
MAP4K5	94
MAPKAPK2	91
MAPKAPK5	100
MARK1	66
MARK2	100
MARK3	41
MARK4	54
MAST1	80
MEK1	100
MEK2	100
MEK3	84
MEK4	93
MEK5	45
MEK6	97
MELK	58
MERTK	81
MET	100
MET(M1250T)	99
MET(Y1235D)	99
MINK	79
MKK7	93
MKNK1	70
MKNK2	60
MLCK	60
MLK1	100
MLK2	61
MLK3	90
MRCKA	100
MRCKB	100
MST1	99
MST1R	100
MST2	91
MST3	76
MST4	85
MTOR	99
MUSK	94
MYLK	55
MYLK2	87
MYLK4	89
MYO3A	98
MYO3B	96
NDR1	84
NDR2	64
NEK1	93
NEK10	77
NEK11	100
NEK2	88
NEK3	81
NEK4	69
NEK5	97
NEK6	99
NEK7	100
NEK9	100
NIK	94
NIM1	87
NLK	99
OSR1	95
p38-alpha	91
p38-beta	95
p38-delta	96
p38-gamma	91
PAK1	85
PAK2	86
PAK3	99
PAK4	97
PAK6	96
PAK7	85
PCTK1	79
PCTK2	93
PCTK3	92
PDGFRA	56
PDGFRB	4
PDPK1	99
PFCDPK1(P.falciparum)	60
PFPK5(P.falciparum)	45
PFTAIRE2	100
PFTK1	89
PHKG1	97
PHKG2	86
PIK3C2B	66
PIK3C2G	86
PIK3CA	85
PIK3CA(C420R)	76
PIK3CA(E542K)	99
PIK3CA(E545A)	91
PIK3CA(E545K)	93
PIK3CA(H1047L)	71
PIK3CA(H1047Y)	71
PIK3CA(I800L)	66
PIK3CA(M1043I)	87
PIK3CA(Q546K)	85
PIK3CB	79
PIK3CD	76
PIK3CG	79
PIK4CB	78
PIKFYVE	74
PIM1	92
PIM2	85
PIM3	93
PIP5K1A	88
PIP5K1C	100
PIP5K2B	100
PIP5K2C	100
PKAC-alpha	89
PKAC-beta	98
PKMYT1	99
PKN1	100
PKN2	96
PKNB(M.tuberculosis)	81
PLK1	96
PLK2	99
PLK3	100
PLK4	92
PRKCD	82
PRKCE	97
PRKCH	93
PRKCI	91
PRKCQ	94
PRKD1	86
PRKD2	93
PRKD3	87
PRKG1	100
PRKG2	100
PRKR	100
PRKX	100
PRP4	100
PYK2	100
QSK	72
RAF1	100
RET	93
RET(M918T)	87
RET(V804L)	90
RET(V804M)	95
RIOK1	99
RIOK2	92
RIOK3	85
RIPK1	100
RIPK2	88
RIPK4	90
RIPK5	93
ROCK1	71
ROCK2	94
ROS1	88
RPS6KA4(Kin.Dom.1-N-terminal)	99
RPS6KA4(Kin.Dom.2-C-terminal)	94
RPS6KA5(Kin.Dom.1-N-terminal)	89
RPS6KA5(Kin.Dom.2-C-terminal)	93
RSK1(Kin.Dom.1-N-terminal)	100
RSK1(Kin.Dom.2-C-terminal)	97
RSK2(Kin.Dom.1-N-terminal)	83
RSK2(Kin.Dom.2-C-terminal)	93
RSK3(Kin.Dom.1-N-terminal)	89
RSK3(Kin.Dom.2-C-terminal)	95
RSK4(Kin.Dom.1-N-terminal)	88
RSK4(Kin.Dom.2-C-terminal)	83
S6K1	91
SBK1	88
SGK	75
SgK110	100
SGK2	68
SGK3	87
SIK	91
SIK2	68
SLK	89
SNARK	90
SNRK	93
SRC	83
SRMS	92
SRPK1	78
SRPK2	100
SRPK3	97
STK16	97
STK33	53
STK35	96
STK36	80
STK39	78
SYK	93
TAK1	70
TAOK1	89
TAOK2	93
TAOK3	91
TBK1	90
TEC	95
TESK1	100
TGFBR1	98
TGFBR2	91
TIE1	95
TIE2	86
TLK1	99
TLK2	71
TNIK	75
TNK1	89
TNK2	100
TNNI3K	50
TRKA	80
TRKB	56
TRKC	50
TRPM6	100
TSSK1B	86
TSSK3	33
TTK	18
TXK	85
TYK2(JH1domain-catalytic)	49
TYK2(JH2domain-pseudokinase)	100
TYRO3	79
ULK1	80
ULK2	77
ULK3	84
VEGFR2	75
VPS34	90
VRK2	79
WEE1	100
WEE2	82
WNK1	55
WNK2	76
WNK3	93
WNK4	77
YANK1	92
YANK2	68
YANK3	92
YES	83
YSK1	43
YSK4	61
ZAK	88
ZAP70	89

상기 표 19에서 확인할 수 있듯이, 본 발명에 따른 화합물은 CSF1R, EGFR(L861Q), FLT3, FLT3(D835V), FLT3(D835Y), FLT3(ITD), FLT3(ITD,D835V), FLT3(K663Q), FLT3(N841I), GAK, JAK3(JH1domain-catalytic), KIT, KIT(A829P), KIT(L576P), KIT(V559D), KIT-autoinhibited, LRRK2(G2019S), PDGFRB, TSSK3, 또는 TTK 키나아제에 대하여 조절 백분율 35%보다 작은 값을 가지는 것을 알 수 있다. 이는 본 발명에 따른 화합물이 상기 나열된 효소에 대하여 억제 활성을 갖고 있음을 나타내는 것이며, 이로부터 상기 나열된 효소와 관련된 질환에 사용시 유용한 효과가 있음을 암시하는 것이다.

따라서, 본 발명에 따른 유도체 화합물은 따른 CSF1R, EGFR(L861Q), FLT3, FLT3(D835V), FLT3(D835Y), FLT3(ITD), FLT3(ITD,D835V), FLT3(K663Q), FLT3(N841I), GAK, JAK3(JH1domain-catalytic), KIT, KIT(A829P), KIT(L576P), KIT(V559D), KIT-autoinhibited, LRRK2(G2019S), PDGFRB, TSSK3, 또는 TTK 키나아제 관련 질환의 치료 또는 예방용 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.

따라서, 본 발명의 일측면에서 제공하는 화합물은 다향한 효소의 저해 활성을 가진다는 것을 알 수 있다.

한편, 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 목적에 따라 여러 형태로 제제화가 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 제제화 방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.

<제제예 1> 산제의 제조

화학식 1로 표시되는 유도체 2g

유당 1g

상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.

<제제예 2> 정제의 제조

화학식 1로 표시되는 유도체 100 ㎎

옥수수전분 100 ㎎

유당 100 ㎎

스테아린산 마그네슘 2 ㎎

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.

<제제예 3> 캡슐제의 제조

화학식 1로 표시되는 유도체 100 ㎎

옥수수전분 100 ㎎

유당 100 ㎎

스테아린산 마그네슘 2 ㎎

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.

<제제예 4> 주사제의 제조

화학식 1로 표시되는 유도체 100 ㎎

만니톨 180 ㎎

Na₂HPO₄ㆍ2H₂O 26 ㎎

증류수 2974 ㎎

통상적인 주사제의 제조방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 함유시켜 주사제를 제조하였다.

<제제예 5> 건강식품의 제조

화학식 1로 표시되는 유도체 500ng

비타민 혼합물 적량

비타민 A 아세테이트 70mg

비타민 E 1.0mg

비타민 0.13mg

비타민 B2 0.15mg

비타민 B6 0.5mg

비타민 B12 0.2mg

비타민 C 10mg

비오틴 10mg

니코틴산아미드 1.7mg

엽산 50mg

판토텐산 칼슘 0.5mg

무기질 혼합물 적량

황산제1철 1.75mg

산화아연 0.82mg

탄산마그네슘 25.3mg

제1인산칼륨 15mg

제2인산칼슘 55mg

구연산칼륨 90mg

탄산칼슘 100mg

염화마그네슘 24.8mg

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.

<제제예 6> 건강음료의 제조

화학식 1로 표시되는 유도체 500ng

구연산 1000mg

올리고당 100g

매실농축액 2g

타우린 1g

정제수를 가하여 전체 900ml

통상의 건강 음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 건강 음료 조성물 제조에 사용하였다.

상기 조성비는 비교적 기호 음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호 도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

이상, 본 발명을 바람직한 제조예, 실시예 및 실험예를 통해 상세히 설명하였으나, 본 발명의 범위는 특성 실시예에 한정되는 것은 아니며, 첨부된 특허청구범위에 의하여 해석되어야 할 것이다. 또한, 이 기술분야에서 통상의 지식을 습득한 자라면, 본 발명의 범위에서 벗어나지 않으면서도 많은 수정과 변형이 가능함을 이해하여야 할 것이다.

Claims

하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
[화학식 1]

(상기 화학식 1에서,
A는 N 또는 CR⁴이고, 여기서 R⁴는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알킬 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알콕시이고, 상기 알킬 및 알콕시는 비치환이거나, 할로겐 및 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬로 하나 이상 치환된 아민으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고;

B는
또는
이고;

은 C_6-14아릴, 또는 N을 하나 이상 포함하는 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬이되, 이때 상기 헤테로사이클로알킬은 O 또는 S를 하나 이상 더 포함할 수 있고,
상기 아릴은
이 치환되고, 상기 헤테로사이클로알킬의 N은
이 치환되고, 상기 아릴 및 헤테로사이클로알킬은 -OH, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬, 및 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 더 치환될 수 있고;

R²는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알킬, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알콕시, -NR⁵R⁶, 또는 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬이고,
상기 헤테로사이클로알킬은 비치환 또는 디C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬아미노 C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알킬 및 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬으로 하나 이상 치환된 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고,
상기 R⁵ 및 R⁶는 독립적으로 수소, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬, 또는 디C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬아미노 C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬이고;

R³는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알콕시, 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알킬이고, 상기 알킬은 하나 이상의 할로겐으로 치환될 수 있고;

L¹은 결합, -NH(CH₂)_p-, 또는 -O(CH₂)_q-이고, p 및 q는 독립적으로 0 내지 5의 정수이고;

L²는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-10알킬렌, -(C=O)-, -(C=O)NH-, 또는 -NH(C=O)-이고;
n은 0 또는 1이고; 및
m은 0 내지 4의 정수이다).
제1항에 있어서,
상기 A는 N 또는 CR⁴이고, 여기서 R⁴는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알콕시이고, 상기 알킬 및 알콕시는 비치환이거나, 할로겐 및 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬로 하나 이상 치환된 아민으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고;

상기 B는
또는
이고;

상기
은 C_6-14아릴, 또는 N을 하나 이상 포함하는 5 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬이되, 이때 상기 헤테로사이클로알킬은 O 또는 S를 하나 이상 더 포함할 수 있고,
상기 아릴은
이 치환되고, 상기 헤테로사이클로알킬의 N은
이 치환되고, 상기 아릴 및 헤테로사이클로알킬은 -OH, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬, 및 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 더 치환될 수 있고;

상기 R²는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알콕시, -NR⁵R⁶, 또는 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬이고,
상기 헤테로사이클로알킬은 비치환 또는 디C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬아미노 C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬 및 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬으로 하나 이상 치환된 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고,
상기 R⁵ 및 R⁶는 독립적으로 수소, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬, 또는 디C_1-3의 직쇄 또는 분지쇄 알킬아미노 C_1-3의 직쇄 또는 분지쇄 알킬이고;

상기 R³는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알콕시, 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬이고, 상기 알킬은 하나 이상의 할로겐으로 치환될 수 있고;

상기 L¹은 결합, -NH(CH₂)_p-, 또는 -O(CH₂)_q-이고, p 및 q는 독립적으로 0 내지 3의 정수이고;

상기 L²는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-5알킬렌, -(C=O)-, -(C=O)NH-, 또는 -NH(C=O)-이고;

상기 n은 0 또는 1이고; 및
상기 m은 0 내지 3의 정수인 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 입제 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
제1항에 있어서,
상기 A는 N 또는 CR⁴이고, 여기서 R⁴는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알콕시이고, 상기 알킬 및 알콕시는 비치환이거나, 할로겐 및 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬로 하나 이상 치환된 아민으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고;

상기 B는
또는
이고;

상기
은 페닐, 또는 N을 하나 이상 포함하는 5 내지 6원자의 헤테로사이클로알킬이되, 이때 상기 헤테로사이클로알킬은 O 또는 S를 하나 이상 더 포함할 수 있고,
상기 페닐은
이 치환되고, 상기 헤테로사이클로알킬의 N은
이 치환되고, 상기 아릴 및 헤테로사이클로알킬은 할로겐이 하나 이상 더 치환될 수 있고;

상기 R²는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알콕시, -NR⁵R⁶, 또는 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 5 내지 6원자의 헤테로사이클로알킬이고,
상기 헤테로사이클로알킬은 비치환 또는 디C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬아미노 C_1-5의 직쇄 또는 분지쇄 알킬, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬 및 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬으로 하나 이상 치환된 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고,
상기 R⁵ 및 R⁶는 독립적으로 수소, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬, 또는 디C_1-3의 직쇄 또는 분지쇄 알킬아미노 C_1-3의 직쇄 또는 분지쇄 알킬이고;

상기 R³는 수소, 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알콕시, 또는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬이고, 상기 알킬은 하나 이상의 할로겐으로 치환될 수 있고;

상기 L¹은 결합, -NH(CH₂)_p-, 또는 -O(CH₂)_q-이고, p 및 q는 독립적으로 0 내지 2의 정수이고;
상기 L²는 직쇄 또는 분지쇄의 C_1-3알킬렌, -(C=O)-, -(C=O)NH-, 또는 -NH(C=O)-이고;
상기 n은 0 또는 1이고; 및
상기 m은 0 내지 2의 정수인 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 입제 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
제1항에 있어서,
상기 A는 C-H, N, C-CF₃, C-O(CH₂)₂N(CH₃)₂, 또는 C-OCH₃이고;

상기 B는
또는
이고;

상기
은
,
,
,
, 또는
이고;

상기 R²는 수소, 할로겐, -OCH₃,
,
,
,
,
,
,
,
, 또는
이고;

상기 R³는 수소, 할로겐, -OCH₃, 또는 -CF₃이고;

상기 L¹은 결합, -NH(CH₂)_p-, 또는 -O(CH₂)_q-이고, p 및 q는 독립적으로 0 또는 1의 정수이고;

상기 L²는 -CH₂-, -(C=O)-, -(C=O)NH-, -NH(C=O)-, 또는 -(CH₂)₂-이고;

상기 n은 0 또는 1이고; 및
상기 m은 0 또는 1인 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
제1항에 있어서,
상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
(1) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(2) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((2-(다이메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(3) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((6-(4-에틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(4) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-yl)-2-((4-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(5) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((3-메톡시-4-(4-몰포리노피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드;
(6) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((3-(2-(디메틸아미노)에톡시)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(7) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)-3-(트리플로오르메틸)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(8) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(9) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(10) 4-((4-((3-아크릴아미도페닐)아미노)-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-2-일)아미노)-3-메톡시-N-(1-메틸피페리딘-4-일)벤젠아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(11) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-카보닐)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(12) N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(피페리딘-4-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(13) N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염
(14) N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피레라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(15) N-(4-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(16) N-(3-(((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오르아세트산염;
(17) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(18) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((2-(다이메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(19) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-페닐피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(20) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((2-(다이메틸아미노)에틸)메틸)아미노)-2-메톡시페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(21) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-에틸피페라진-1-일)-2-메톡시페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(22) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(23) 4-((4-(3-아크릴아미도페녹시)-5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)피리미딘-2-일)아미노)-3-메톡시-N-(1-메틸피페리딘-4-일)벤즈아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(24) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-카보닐)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(25) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(몰포린-4-카보닐)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(26) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((3-(2-(다이메틸아미노)에톡시)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(27) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((6-(4-에틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(28) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-yl)-2-((4-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(29) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((3-메톡시-4-(4-몰포리노피페리딘-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드, 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(30) N-(3-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)-3-(트리플로우로메틸)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드
2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(31) N-(4-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(32) N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(피페리딘-4-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)-5-플로우로페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(33) N-(2-((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)-5-플로우로페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(34) N-(3-(((5-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플로오르아세트산염;
(35) N-(3-((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드;
(36) N-(3-((2-((4-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(37) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(38) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(39) N-(3-((2-((3-(2-(디메틸아미노)에톡시)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(40) N-(3-((2-((4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)-3-(트리플로우로메틸)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(41) N-(3-((2-((3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(42) N-(3-((2-((3-메톡시-4-(4-모폴린피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(43) N-(4-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(44) (S)-1-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)프로프-2-엔-1-온 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(45) (S)-1-(3-((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-몰포리노피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)프로프-2-엔-1-원2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(46) N-(3-((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(47) N-(3-((2-((4-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(48) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;
(49) 4-((4-(3-아크릴아마이도페녹시)-5-모폴리노피리미딘-2-일)아미노)-3-메톡시-N-(1-메틸피페리딘-4-일)벤자마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;
(50) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(모폴린-4-카보닐)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;
(51) N-(3-((2-((6-(4-에틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;
(52) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;
(53) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2- 트리플루오로아세테이트산염;
(54) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-(4-메틸피페라진-1-일)피페리딘-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;
(55) N-(3-((2-((3-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아마이드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;
(56) N-(3-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;
(57) N-(4-((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;
(58) N-(4-((4-(3-아크릴아미도페녹시)-5-몰포리노피리미딘-2-일)아미노)페닐)-1-메틸피페리딘-4-카복시아미드 2,2,2- 트리플루오로아세테이트산염;
(59) N-(3-((5-모폴리노-2-((4-(2-모폴리노에틸)페닐)아미노)피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;
(60) N-(3-((2-((3-클로로-4-플로오르페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;
(61) N-(3-((2-((4-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)-2-메톡시페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세테이트산염;
(62) N-(3-(((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(63) N-(3-(((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(64) N-(4-(((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)아미노)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(65) N-(3-(((2-((4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염;
(66) N-(3-(((2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)옥시)메틸)페닐)아크릴아미드 2,2,2-트리플루오로아세트산염; 및
(67) N-(3-(2-((2-메톡시-4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐)아미노)-5-모폴리노피리미딘-4-일)페닐)아크릴아미드.
하기 반응식 1에 나타낸 바와 같이,
화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계를 포함하는 제1항의 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법:
[반응식 1]

(상기 반응식 1에서, A, B,
, R², R³, L¹, L², m, 및 n은 제1항의 화학식 1에서 정의한 바와 같고; 및
X¹은 할로겐이다).
제1항의 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제7항에 있어서,
상기 화합물은 EGFR(epidermal growth factor receptor) 야생형 또는 돌연변이를 억제하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제8항에 있어서,
상기 EGFR 돌연변이는 EGFR Del19, EGFR L858R, EGFR Del19/T790M, EGFR L858R/T790M, EGFR L858R/T790M/C797S, EGFR Del19/T790M/C797S, EGFR NPH, EGFR SVD, EGFR NPG, EGFR H, EGFR ASV, EGFR FQEA 및 HER2 YVMA으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제7항에 있어서,
상기 화합물은 CSF1R, EGFR(L861Q), FLT3, FLT3(D835V), FLT3(D835Y), FLT3(ITD), FLT3(ITD,D835V), FLT3(K663Q), FLT3(N841I), GAK, JAK3(JH1domain-catalytic), KIT, KIT(A829P), KIT(L576P), KIT(V559D), KIT-autoinhibited, LRRK2(G2019S), PDGFRB, TSSK3, 및 TTK로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 단백질 키나아제에 대하여 저해활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제7항에 있어서,
상기 암은 EGFR에 대하여 돌연변이가 발현된 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제7항에 있어서,
상기 암은 가성점액종, 간내 담도암, 간모세포종, 간암, 갑상선암, 결장암, 고환암, 골수이형성증후군, 교모세포종, 구강암, 구순암, 균상식육종, 급성골수성백혈병, 급성림프구성백혈병, 기저세포암, 난소상피암, 난소생식세포암, 남성유방암, 뇌암, 뇌하수체선종, 다발성골수종, 담낭암, 담도암, 대장암, 만성골수성백혈병, 만성림프구백혈병, 망막모세포종, 맥락막흑색종, 바터팽대부암, 방광암, 복막암, 부갑상선암, 부신암, 비부비동암, 비소세포폐암, 설암, 성상세포종, 소세포폐암, 소아뇌암, 소아림프종, 소아백혈병, 소장암, 수막종, 식도암, 신경교종, 신우암, 신장암, 심장암, 십이지장암, 악성 연부조직 암, 악성골암, 악성림프종, 악성중피종, 악성흑색종, 안암, 외음부암, 요관암, 요도암, 원발부위불명암, 위림프종, 위암, 위유암종, 위장관간질암, 윌름스암, 유방암, 육종, 음경암, 인두암, 임신융모질환, 자궁경부암, 자궁내막암, 자궁육종, 전립선암, 전이성 골암, 전이성뇌암, 종격동암, 직장암, 직장유암종, 질암, 척수암, 청신경초종, 췌장암, 침샘암, 카포시 육종, 파제트병, 편도암, 편평상피세포암, 폐선암, 폐암, 폐편평상피세포암, 피부암, 항문암, 횡문근육종, 후두암, 흉막암, 및 흉선암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제1항의 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제13항에 있어서,
상기 화합물은 JAK3을 억제하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제1항의 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암 또는 염증 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.