KR20180112149A - Mass production method of wolfiporia cocos fruitbody - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 복령 균주의 자실체를 대량생산하는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for mass-producing fruiting bodies of bivalve strains.
복령(伏笭: Poria cocos)은 버섯류의 일종으로서 담자균류로 분류되며, 구멍장이 버섯과에 속하는 복륜류이다. 복령은 벌채된 소나무 뿌리에서 기생하는 둥글거나 길쭉한 균핵 덩어리로 표면은 적갈색 또는 흑갈색이며, 복령버섯 또는 복령으로 불린다. Poria cocos is a kind of mushroom, which is classified as bacillus, and is a two-wheeled species belonging to the mushroom family. It is a round or elongated sclerotial parasite parasitized in the roots of a pine tree with a reddish brown or blackish brown surface.
복령은 북미에서도 일부 자생하나 주산지는 우리나라를 비롯한 동남아 지역에 대부분 분포되어있다. 복령은 균핵체의 선택에 따라 백복령 및 적복령으로 나뉘고 야생지역에 따라서 변이종이 많다. 이들 종에 따라 인공 재배에서의 균사 생장력이 다르게 나타날 뿐만 아니라, 품질이나 수확량의 차이도 크다. 따라서 복령의 대량 생산을 위한 인공 재배는 균주의 특성에 따라서 성패를 좌우할 수 있는 아주 중요한 요인이 된다.Byeongryong is native to some parts of North America, but the majority is distributed in Southeast Asia including Korea. Depending on the choice of sclerotia, Byeongryeong is divided into Baekbokryeong and Baekbokryeong. Not only the mycelial growth ability of artificial cultivation is different according to these species but also the difference in quality and yield is great. Therefore, artificial cultivation for the mass production of Byeongryong is very important factor to determine the success or failure according to the characteristics of the strain.
복령은 예로부터 한약, 복령죽, 복령칼국수, 복령차 및 복령주의 재료로서 사용되거나 피부미용 등에 널리 이용되었다. 최근 자연산 복령의 채취는 줄어들고 있는 반면, 웰빙의 생활화로 복령을 식품, 화장품 또는 의약품의 원료로 이용하고자 하는 수요가 증가하여 이의 소비는 계속 증가하고 있다. 이와 같이, 복령의 수요와 공급의 불균형으로 인해 한약재 시장에서는 중국 등으로부터 대부분의 복령을 수입하여 판매하고 있다. 특히 최근 복령 피(껍질)에 생리활성 인자가 많이 함유되어 있음이 밝혀져 이에 대한 연구가 진행되고 있다. Boryeong has been widely used as herbal medicine, bokryeong porridge, bokryeokguksu, bokryeong tea and bokryeong materials and skin beauty. Recently, the consumption of natural ginseng has been decreasing, but the demand for using ginseng as a raw material for food, cosmetics or medicine has increased due to wellbeing and the consumption of it has been continuously increasing. In this way, due to imbalance of supply and demand of Boryeong, most of the Chinese medicine market is imported and sold in Chinese herbal medicine market. Recently, it has been found that a lot of physiologically active factors are contained in the bark of bokryeong (peel).
일반적으로, 복령은 1990년대에는 소나무원목을 복령종균과 함께 땅속에 매몰하는 방법으로 재배하였으며, 2000년대 후반부터는 비닐봉지를 이용한 비매립 복령 재배방법으로 시설하우스 또는 기존 버섯 재배사에서 지상 재배로 이루어지고 있다.In the 1990s, Boryeong was cultivated as a method of burying pine trees with the bryophyte seedlings in the soil. From the late 2000s, it was cultivated as a non-landfill method using plastic bags, have.
이외에도, 복령을 대량생산하기 위한 재배방법으로서, 톱밥 및 영양원을 포함하는 복령 재배용 배지 조성물을 이용하여 복령을 대량생산하는 재배방법이 대한민국 특허공개 제10-2017-0024290호에 개시되어 있으며, 소나무, 침엽수, 활엽수 등 다양한 원목을 20 내지 30 cm로 절단한 다음, 층별로 쌓거나 비닐봉지에 입봉하여 종균을 접종 및 활착시키고, 균이 활착된 원목을 지하에 매설하지 않고, 노지 또는 시설물의 실내에서 복령을 재배하는 방법이 대한민국 특허공개 제10-2010-0060589호에 개시되어 있다.In addition, Korean Patent Laid-Open Publication No. 10-2017-0024290 discloses a cultivation method for mass production of bamboo shoots using a medium composition for bamboo shoot cultivation including sawdust and a nutrient as a cultivation method for mass production of bamboo shoots, It is possible to cut various wood such as conifer, hardwood, etc. to 20-30 cm and then stack them or put them in a plastic bag to inoculate the seed bacterium. A method of growing bamboo shoots is disclosed in Korean Patent Publication No. 10-2010-0060589.
그러나 상기 재배방법들은 균핵 덩어리인 복령의 생산에만 최적화되어 있어 포자를 받기 위한 자실체 유도 및 자실체 형성을 관찰하기에는 부적합하다. However, the above cultivation methods are optimized only for the production of sclerotia, a scallop mass, and are not suitable for observing fruiting body formation and fruiting body formation for receiving spores.
이에, 본 발명자들은 복령 균주의 자실체를 대량생산하기 위한 방법을 개발하던 중, 20℃인 암조건에서 5일 동안 배양된 복령 균주의 균사체를 12시간 동안 명조건이 지속되고, 이후 12시간 동안 암조건이 지속되는 광주기의 조건으로, 28℃의 온도에서 32일 동안 배양하면 복령 균주의 자실체 형성률이 가장 높음을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.Therefore, the inventors of the present invention have developed a method for mass production of fruiting body fruiting body, and have found that the mycelial body of the brewer's strain cultured for 5 days under the dark condition at 20 ° C is maintained for 12 hours, The present inventors completed the present invention by confirming that the fruiting body formation rate of the bacillus strains is the highest when cultured for 32 days at a temperature of 28 캜 under the condition of continuous light condition.
본 발명의 목적은 복령 균주 자실체의 대량생산방법을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a mass production method of bacillus strains fruiting bodies.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 1) 복령 균주의 균사체를 배양 배지에서 암배양하는 단계; 및 2) 상기 단계 1)의 암배양된 균사체를 10 내지 30℃의 온도 및 8 내지 14:10 내지 16(명:암)의 광주기 조건하에서 배양하는 단계를 포함하는 복령 균주 자실체의 대량생산방법을 제공한다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a method for culturing mycelium of Bacillus sp. Strain in a culture medium; And 2) culturing the mycelium cultured in step 1) at a temperature of 10 to 30 占 폚 and 8 to 14: 10 to 16 (light: dark), and culturing the mycelial cultured mycelium of step 1) .
본 발명의 복령 균주 자실체의 생산방법은 자실체를 대량생산할 수 있어 복령 균주 자실체의 육종이나 기타 생리특성 연구에 유용하게 사용될 수 있다.The method of producing the fruiting body fruiting body of the present invention can be massively produced fruiting body, and thus can be useful for studying breeding and other physiological characteristics of fruiting body fruiting bodies.
도 1은 20℃인 암조건에서 5일 동안 배양된 복령 균주의 균사체를 12시간 동안 명조건이 지속되고, 이후 12시간 동안 암조건이 지속되는 광주기의 조건으로, 28℃의 온도에서 30일 동안 배양하여 형성된 자실체 및 포자를 관찰한 사진이다.Fig. 1 shows the results of the mycelial growth of the bacterium strains cultured for 5 days under the dark condition at 20 캜 for 12 hours at a temperature of 28 캜 for 30 days And the spores were observed.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명은 1) 복령 균주의 균사체를 배양 배지에서 암배양하는 단계; 및 2) 상기 단계 1)의 암배양된 균사체를 10 내지 30℃의 온도 및 8 내지 14:10 내지 16(명:암)의 광주기 조건하에서 배양하는 단계를 포함하는 복령 균주 자실체의 대량생산방법을 제공한다.The present invention provides: 1) culturing mycelium of Bacillus sp. Strain in a culture medium; And 2) culturing the mycelium cultured in step 1) at a temperature of 10 to 30 占 폚 and 8 to 14: 10 to 16 (light: dark), and culturing the mycelial cultured mycelium of step 1) .
본 발명에 따른 복령 균주 자실체의 대량생산방법은 복령 균주의 균사체를 배양 배지에서 암배양하는 단계를 제공한다. 상기 복령 균주는 통상의 기술분야에 복령 균주로 알려진 어떠한 균주일 수 있다. 구체적으로, 상기 복령 균주는 Andong 01, Andong 02, Andong 03, KFRI 1103, KFRI 1104, KFRI 1105, KFRI 1106, KFRI 1107, KFRI 1108 및 ASI 13007, 10종으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.The present invention provides a method for mass-producing a fruiting body fruiting body, comprising the step of culturing mycelium of a bruleis strain in a culture medium. The bacterium strain may be any strain known in the art as a bacterium strain. Specifically, the bacterium strain may be any one selected from the group consisting of Andong 01, Andong 02, Andong 03, KFRI 1103, KFRI 1104, KFRI 1105, KFRI 1106, KFRI 1107, KFRI 1108 and ASI 13007 .
상기 단계 1)의 암배양은 15 내지 24℃, 구체적으로는 17 내지 22℃, 더욱 구체적으로는 19 내지 21℃의 온도에서 수행될 수 있다. 상기 단계 1)의 암배양은 2 내지 10일, 구체적으로는 3 내지 8일, 더욱 구체적으로는 4 내지 6일 동안 수행될 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 단계 1)의 암배양은 20℃에서 5일 동안 수행될 수 있다.The above-mentioned arm culturing of step 1) may be carried out at a temperature of 15 to 24 캜, specifically, 17 to 22 캜, more specifically, 19 to 21 캜. The above-mentioned arm culturing in step 1) may be carried out for 2 to 10 days, specifically 3 to 8 days, more particularly 4 to 6 days. In one embodiment of the present invention, the arm culturing of step 1) above can be carried out at 20 DEG C for 5 days.
상기 배양 배지는 인위적으로 제조하여 사용하거나, 상업적으로 시판되는 것을 사용할 수 있다. 상기 시판되고 있는 배양 배지의 예로는, 구체적으로, PSA(potato sucrose agar)배지, PDA(potato dextrose agar)배지, MEA(malt extract agar)배지, QEA(quercus extract agar)배지, PEA(poplar extract agar)배지, RBEA(rice bran extract agar)배지, WBEA(wheat bran extract agar)배지, MCM(mushroom complete medium)배지, CDA(Czapedox agar)배지, SCA(Spawn complex agar)배지, OMA(oatmealagar)배지 및 CYM(complete yeast medium)배지 등이 있다. The culture medium may be artificially manufactured or used, or commercially available ones may be used. Specific examples of commercially available culture media include PSA (potato sucrose agar) medium, PDA (potato dextrose agar) medium, MEA (malt extract agar) medium, QEA (quercus extract agar) medium, PEA ), A rice bran extract agar medium, a WBEA (wheat bran extract agar) medium, a MCM (mushroom complete medium) medium, a CDA (Czapedox agar) medium, an SCA (Spawn complex agar) medium, an OMA (oatmealagar) medium, CYM (complete yeast medium) medium.
상기 배양 배지를 제조하여 사용할 때, 배양 배지는 탄소원, 질소원, 미량원소 및 아미노산으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 함유할 수 있다. 상기 탄소원은 아라비노오스, 프럭토오스, 갈락토오스, 포도당, 만노오스, 람노오스, 자일로오스, 락토오스, 말토오스, 라피노오스, 셀룰로오스, 목화씨가루, 덱스트린, 말토덱스트린, 녹말, 글리세롤, 솔비톨, 만니톨, 이노시톨 및 감자전분으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 탄소원은 포도당 및 감자전분일 수 있다.When the culture medium is prepared and used, the culture medium may contain any one or more selected from the group consisting of carbon sources, nitrogen sources, trace elements, and amino acids. The carbon source may be selected from the group consisting of arabinose, fructose, galactose, glucose, mannose, rhamnose, xylose, lactose, maltose, raffinose, cellulose, cotton seed flour, dextrin, maltodextrin, starch, glycerol, sorbitol, mannitol, Inositol, and potato starch. In one embodiment of the present invention, the carbon source may be glucose and potato starch.
상기 질소원은 소이톤, 대두박, 효모추출물, 소고기 추출물, 트립톤, 펩톤, 어분, 요소, 카사미노산, 아스파라긴, N-Zamine, NH4NO3, NH4Cl, KNO3, NH4H2PO4, NaNO2, NaNO3, (NH4)2SO4, (NH4)2CO3, Ca(NO3)2 및 CH3COONH4로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다. The nitrogen source may be selected from the group consisting of soy sauce, soybean meal, yeast extract, beef extract, tryptone, peptone, fish meal, urea, casamino acid, asparagine, N-Zamine, NH 4 NO 3 , NH 4 Cl, KNO 3 , NH 4 H 2 PO 4 , NaNO 2 , NaNO 3 , (NH 4 ) 2 SO 4 , (NH 4 ) 2 CO 3 , Ca (NO 3 ) 2 And CH 3 COONH 4 .
상기 미량원소는 KH2PO4, K2HPO4, NaH2PO4, Na2HPO4, FeSO4, MgSO4, MgCl2, CaCl2, CuSO4 5H2O, ZnSO4, MnSO4, MnCl2, FeCl3, NaHCO3, KHSO4, KCl, NaCl 및 CaCO3로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.Wherein the trace element is selected from the group consisting of KH 2 PO 4 , K 2 HPO 4 , NaH 2 PO 4 , Na 2 HPO 4 , FeSO 4 , MgSO 4 , MgCl 2 , CaCl 2 , CuSO 4 5H 2 O, ZnSO 4 , MnSO 4 , MnCl 2 , FeCl 3 , NaHCO 3 , KHSO 4 , KCl, NaCl and CaCO 3 .
상기 아미노산은 글루탐산 및 글루타민으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.The amino acid may be any one or more selected from the group consisting of glutamic acid and glutamine.
상기 배양 배지는 배양 목적에 따라 액체 배지, 고체 배지, 톱밥 배지 또는 원목 배지로서 제조될 수 있고, 고체 배지로 제조하는 경우에는 한천 및 젤라이트와 같은 성분이 추가로 첨가될 수 있다. 상기 원목은 통상의 기술분야에서 복령을 재배하는데 사용할 수 있다고 알려진 어떠한 원목일 수 있다. The culture medium may be prepared as a liquid medium, a solid medium, a sawdust medium or a wood medium according to the purpose of culturing, and in the case of a solid medium, an ingredient such as agar and gelite may be further added. The log may be any log, which is known to be useful for growing logs in the prior art.
본 발명에 따른 복령 균주 자실체의 대량생산방법은 암배양된 균사체를 10 내지 30℃의 온도 및 8 내지 14:10 내지 16(명:암)의 광주기 조건하에서 배양하는 단계를 제공한다. The method for mass production of ginseng fruiting body fruiting body according to the present invention provides a step of culturing the fused mycelium at a temperature of 10 to 30 DEG C and under a photoperiod condition of 8 to 14: 10 to 16 (female).
상기 단계 2)의 배양은 10 내지 30℃, 구체적으로는 16 내지 30℃, 더욱 구체적으로는 23 내지 30℃의 온도에서 수행될 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 단계 2)의 배양은 28℃에서 수행될 수 있다.The cultivation of step 2) may be carried out at a temperature of 10 to 30 캜, specifically, 16 to 30 캜, more specifically, 23 to 30 캜. In one embodiment of the invention, the culture of step 2) may be carried out at 28 < 0 > C.
상기 단계 2)의 배양은 8 내지 14:10 내지 16(명:암), 구체적으로는 9 내지 13:11 내지 15(명:암), 더욱 구체적으로는 11 내지 13:11 내지 13(명:암)의 광주기 조건하에서 수행될 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 단계 2)의 배양은 12:12(명:암)의 광주기 조건하에서 수행될 수 있다.The culture of step 2) is carried out at a concentration of 8 to 14:10 to 16 (female), specifically 9 to 13:11 to 15 (female), more specifically 11 to 13:11 to 13 Lt; RTI ID = 0.0 > photochemical < / RTI > conditions). In one embodiment of the present invention, the culture of step 2) above can be carried out under the photoperiod condition of 12:12 (female).
상기 단계 2)의 배양은 20 내지 40일, 구체적으로는 25 내지 35일, 더욱 구체적으로는 28 내지 33일 동안 수행될 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 단계 2)의 배양은 32일 동안 수행될 수 있다.The culture of step 2) may be carried out for 20 to 40 days, specifically 25 to 35 days, more specifically 28 to 33 days. In one embodiment of the present invention, the culture of step 2) may be performed for 32 days.
상기 단계 2)의 배양은 상술한 바와 같은 특징을 갖는 배양 배지에서 수행될 수 있다. 배양과정에서 배지의 교체는 통상의 기술자가 적절히 선택하여 필요에 따라 수행될 수 있다.The culture of step 2) may be carried out in a culture medium having the characteristics as described above. Replacement of the medium in the course of the culture can be carried out as needed by a person skilled in the art.
본 발명의 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 온도 조건에 따른 복령 균주의 자실체 형성률을 비교함으로써, 20℃인 암조건에서 5일 동안 배양한 후, 12시간 동안 명조건이 지속되고, 이후 12시간 동안 암조건이 지속되는 광주기의 조건으로, 28℃의 온도에서 32일 동안 배양하면 복령 균주 자실체 형성률이 최대가 됨을 확인하였다(표 1 및 도 1 참조).In a specific example of the present invention, the present inventors measured the fruiting body formation rate of the benthic strain according to the temperature condition, and then cultured for 5 days under the dark condition at 20 캜, followed by incubation for 12 hours, It was confirmed that when the culture was continued for 28 days at a temperature of 28 ° C under the condition of light period in which the dark condition was maintained, the fruiting body fruiting body formation rate became maximum (see Table 1 and FIG. 1).
이하, 본 발명을 하기 실시예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by the following examples.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.However, the following examples are illustrative of the present invention, and the contents of the present invention are not limited thereto.
복령 균주 균사체의 제조Production of Mycelium of Bacillus sp.
복령 균주는 Andong 01, Andong 02, Andong 03, KFRI 1103, KFRI 1104, KFRI 1105, KFRI 1106, KFRI 1107, KFRI 1108, ASI 13007을 사용하였다. Andong 01, Andong 02 및 Andong 03 균주는 Ryu Chunghyeon medicinal mushroom. Co., Led에서, KFRI 1103, KFRI 1104, KFRI 1105, KFRI 1106, KFRI 1107 및 KFRI 1108 균주는 산림청에서, ASI 13007 균주는 농촌진흥청에서 분양을 받았다. 이들을 각각 PDA(potato dextrose agar) 평판배지의 중앙에 이식한 다음, 25℃에서 7일 동안 배양하였다. Andong 01, Andong 02, Andong 03, KFRI 1103, KFRI 1104, KFRI 1105, KFRI 1106, KFRI 1107, KFRI 1108 and ASI 13007 were used. Andong 01, Andong 02, and Andong 03 strain were Ryu Chunghyeon medicinal mushroom. Co., Led, KFRI 1103, KFRI 1104, KFRI 1105, KFRI 1106, KFRI 1107 and KFRI 1108 strains were purchased from the Forest Service and ASI 13007 strains were distributed from the Rural Development Administration. They were each transplanted into the center of a PDA (potato dextrose agar) plate culture medium, and then cultured at 25 DEG C for 7 days.
온도조건에 따른 복령 균주의 자실체 형성률 비교Comparison of Fruit Body Formation Rate of Benthic Strains by Temperature Conditions
먼저, 증류수와 PDA 배지의 가루를 혼합하여 4%의 PDA 용액을 제조한 후, 이를 고압 살균하여 지름이 90 mm, 두께가 15 mm인 페트리디쉬에 두께의 2/3정도 높이가 되도록 부어준 후, 굳혀서 PDA 평판배지를 제조하였다.First, 4% PDA solution was prepared by mixing the powder of distilled water and the PDA medium. The PDA solution was sterilized by high pressure and poured into a Petri dish having a diameter of 90 mm and a thickness of 15 mm to a height of about 2/3 of the thickness , And solidified to prepare a PDA plate culture medium.
제조한 PDA 배지에 상기 <실시예 1>의 균주가 배양된 PDA 평판배지에서 균사의 생장이 활발히 일어나고 있는 가장자리 부분을 코르크보러(cork borer)를 이용하여 5 mm 크기의 절편으로 만들었다. 상기 균사 절편을 추가의 PDA 평판배지의 중앙에 이식한 다음, 계대한 복령 균사 PDA 평판배지들을 20℃, 암조건의 인큐베이터에서 5일 동안 배양했다. 암배양된 복령 균주 균사체를 12시간 동안 명조건이 지속되고, 이후 12시간 동안 암조건이 지속되는 광주기의 조건으로, 12, 16, 20, 24 또는 28℃의 온도에서 32일 동안 배양하여 자실체를 형성시켰다. 이때, 자실체 형성률을 측정하여 표 1 및 도 1에 나타내었다.The PDA medium on which the strain of Example 1 was cultured was used to produce a 5 mm-sized piece of the edge portion where the growth of the hypha was actively performed using a cork borer. The mycelium slices were transplanted to the center of the additional PDA plate medium, and then the whole germinal hyphae mycelial PDA plate media were incubated for 5 days in an incubator at 20 캜 in a dark condition. The cultured mycelia of bacteriological strain were cultured for 12 days at a temperature of 12, 16, 20, 24, or 28 ℃ for 12 days under the light condition, . At this time, the fruiting body formation rate was measured and shown in Table 1 and Fig.
기간
term
배양온도
Incubation temperature
03Andong
03
1103KFRI
1103
1104KFRI
1104
1105KFRI
1105
1106KFRI
1106
1107KFRI
1107
1108KFRI
1108
13007ASI
13007
접종
후
12일
inoculation
after
12th
16℃
20℃
24℃
28℃12 ° C
16 ℃
20 ℃
24 ℃
28 ℃
접종 후
19일
After inoculation
19th
16℃
20℃
24℃
28℃12 ° C
16 ℃
20 ℃
24 ℃
28 ℃
접종 후
25일
After inoculation
25th
16℃
20℃
24℃
28℃12 ° C
16 ℃
20 ℃
24 ℃
28 ℃
접종 후
32일
After inoculation
32nd
16℃
20℃
24℃
28℃12 ° C
16 ℃
20 ℃
24 ℃
28 ℃
접종 후
37일
After inoculation
37th
16℃
20℃
24℃
28℃12 ° C
16 ℃
20 ℃
24 ℃
28 ℃
표 1 및 도 1에 나타낸 바와 같이, 12℃와 16℃와 같은 저온 조건에서는 복령의 자실체가 거의 형성되지 않았으나, 18℃부터는 점차 형성률이 증가하여, 28℃에서 자실체 형성률이 가장 높았다. 24℃에서 배양된 복령 균주는 28℃에서 배양된 복령 균주와 자실체 형성률이 비슷하였으나, 자실체가 완전히 형성되기까지 시간이 5주가 걸려, 28℃에서 배양된 복령 균주에 비해 자실체가 형성되는데 더 많은 시간이 필요했다(표 1 및 도 1). As shown in Table 1 and Fig. 1, the fruiting bodies of the berry were hardly formed at low temperatures such as 12 캜 and 16 캜, but the rate of formation was gradually increased from 18 캜, and the fruiting body formation rate was the highest at 28 캜. The bacillus strains cultured at 24 ℃ had similar fruiting rate to the bacillus strains cultivated at 28 ℃, but it took 5 weeks to complete the formation of fruiting bodies. Fruit bodies were formed more time than the bacillus strains cultured at 28 ℃ (Table 1 and Fig. 1).
따라서, 복령 균주의 자실체는 복령 균주의 균사체를 20℃, 암조건에서 5일 동안 배양한 후, 이를 12시간 동안 명조건이 지속되고, 이후 12시간 동안 암조건이 지속되는 광주기의 조건으로, 28℃의 온도에서 32일 동안 배양하는 경우에 가장 우수한 자실체 형성률을 나타냄으로써, 상기 조건으로 복령 균주의 자실체를 대량생산할 수 있음을 확인하였다.Therefore, the fruiting body of the bamboo shoot was cultured for 20 days at 20 ℃ in dark condition for 5 days, and then the condition of light was maintained for 12 hours and then dark for 12 hours. It was confirmed that the fruiting body of the benthic strain can be mass produced under the above conditions by exhibiting the most excellent fruiting body formation rate when cultivated at a temperature of 28 캜 for 32 days.
Claims (10)
2) 상기 단계 1)의 암배양된 균사체를 10 내지 30℃의 온도 및 8 내지 14:10 내지 16(명:암)의 광주기 조건하에서 배양하는 단계를 포함하는 복령 균주 자실체의 대량생산방법.
1) culturing the mycelium of the bacterium strain in a culture medium; And
2) a step of culturing the mycelium cultured in step 1) at a temperature of 10 to 30 DEG C and 8 to 14: 10 to 16 (light: dark).
The method according to claim 1, wherein the arm cultivation of step 1) is carried out at a temperature of 15 to 24 캜.
The method according to claim 1, wherein the arm culturing of step 1) is carried out for 2 to 10 days.
The method according to claim 1, wherein the culture medium of step 1) contains at least one selected from the group consisting of carbon source, nitrogen source, trace element and amino acid.
The method according to claim 4, wherein the carbon source is selected from the group consisting of arabinose, fructose, galactose, glucose, mannose, rhamnose, xylose, lactose, maltose, raffinose, cellulose, cotton seed flour, dextrin, maltodextrin, Glycerol, sorbitol, mannitol, inositol, and potato starch.
The method of claim 4, wherein the nitrogen source is selected from the group consisting of soybean, soybean meal, yeast extract, beef extract, tryptone, peptone, fish meal, urea, casamino acid, asparagine, N-Zamine, NH 4 NO 3 , NH 4 Cl, KNO 3 , NH 4 H 2 PO 4 , NaNO 2 , NaNO 3 , (NH 4 ) 2 SO 4 , (NH 4 ) 2 CO 3 , Ca (NO 3 ) 2 And CH 3 COONH 4 , in a mass production method of a benthic strain fruiting body.
The method of claim 4, wherein the trace element is selected from the group consisting of KH 2 PO 4 , K 2 HPO 4 , NaH 2 PO 4 , Na 2 HPO 4 , FeSO 4 , MgSO 4 , MgCl 2 , CaCl 2 , CuSO 4 5H 2 O, ZnSO 4 , MnSO 4 , MnCl 2 , FeCl 3 , NaHCO 3 , KHSO 4 , KCl, NaCl and CaCO 3 .
5. The method according to claim 4, wherein the amino acid is at least one selected from the group consisting of glutamic acid and glutamine.
The method according to claim 1, wherein the culture of step 2) is carried out for 20 to 40 days.
2. The method according to claim 1, wherein the bacteriological strain is selected from the group consisting of Andong 01, Andong 02, Andong 03, KFRI 1103, KFRI 1104, KFRI 1105, KFRI 1106, KFRI 1107, KFRI 1108 and ASI 13007. Method for mass production of strain fruiting bodies.
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- 2017-03-30 KR KR1020170040745A patent/KR101944611B1/en active IP Right Grant
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| Publication number | Publication date |
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