KR20160043621A

KR20160043621A - 우수한 보습성 및 항염증성을 갖는 괴화 추출물을 포함하는 조성물 및 그 제조방법

Info

Publication number: KR20160043621A
Application number: KR1020140137874A
Authority: KR
Inventors: 임순성; 장영수; 강범구; 조익현
Original assignee: 이스트힐(주)
Priority date: 2014-10-13
Filing date: 2014-10-13
Publication date: 2016-04-22

Abstract

본 발명은 우수한 보습성 및 항염증성을 갖는 괴화 추출물을 포함하는 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 괴화 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물, 괴화 추출물을 유효 성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물 및 괴화를 분쇄하는 단계; 및 분쇄된 괴화로부터 괴화 추출물을 수득하는 단계를 포함하는, 괴화 추출물을 포함하는 조성물의 제조방법을 제공한다.

Description

우수한 보습성 및 항염증성을 갖는 괴화 추출물을 포함하는 조성물 및 그 제조방법{COMPOSITION COMPRISING EXTRACT OF SOPHORAE FLOS HAVING EXCELLENT MOISTURIZING AND ANTI-INFLAMMATORY ACTIVITY AND METHOD FOR PREPARING THE SAME}

본 발명은 괴화 추출물을 포함하는 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 괴화 추출물을 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물 및 괴화 추출물을 포함하는 염증의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물과 그 제조방법에 관한 것이다.

피부는 외부에서부터 순서대로 표피, 진피, 피하지방 조직의 3개 층으로 크게 구분되며, 인체를 외부 환경의 물리적, 화학적인 자극으로부터 보호해 주는 기능을 하는데, 특히 피부는 인체가 갖고 있는 약 65~70%의 수분이 체외로 증발되는 것을 조절해 준다.

그 중에서도 표피는 외부로부터 각질층, 과립층, 유극층, 기저층의 순서로 구분되고, 표피의 각질층은 약 10~20%의 수분을 함유하며 인체의 최외각에 존재하여 체내로부터의 수분 증발을 억제하는 한편 외부로부터의 물질 과잉 침투를 차단한다(J. Invest. Dermatol. 80(Suppl.), 44-49. 1983).

이러한 각질층을 구성하고 있는 세포에는 수용성 성분인 고농도의 자연보습인자(Natural Moisturizing Factor, NMF)가 존재하여 피부가 유연성을 나타내도록 작용함은 물론 적절한 수분을 유지할 수 있도록 돕는다(J. Invest. Dermatol.54, 24-31, 1970).

그러나, 환경의 변화 혹은 생활 패턴의 변화, 사회 생활에서 발생되는 각종 스트레스와 환경 오염, 화장 습관에 따른 잦은 세안 및 연령 증가에 따른 자연적인 피부 노화 등의 원인으로 각질층의 수분이 감소하여 피부가 건조해지고 표면이 거칠게 되며, 피부가 윤기를 잃어 칙칙하게 보이는 등의 현상이 발생하여 피부 보습에 관한 문제는 그 중요성이 점점 더 커지고 있다.

이에, 최근에는 피부 보습을 개선하고자 하는 의미에서 다양한 화장품 원료들이 개발되고 있는데, 근래의 외부 환경을 살펴 보면 동물성 원료들에 대한 소비자들의 선호도 하락과 광우병 등의 파문으로 동물성 원료에 대한 사용이 급격히 줄어들고 천연 식물 유래의 원료들이 각광 받고 있다.

한편, 염증 반응은 내재성 면역 반응(innate immunity) 중 하나로서 바이러스나 박테리아의 감염으로부터 우리 몸을 보호하고 유지하는 항상성 반응이다. 하지만 과도한 급성 염증 및 만성 염증 반응은 3대 주요 사망 원인 질병인 암, 당뇨 및 혈관 관련 질환의 주 발생 요인으로 알려져 있다.

구체적으로, 대사성 질환, 혈관 관련 질환, 자가면역 질환, 신경계 질환, 근골격계 질환 및 암 등은 지속적으로 유지된 염증 상태에서 기인한 다양한 병리학적 과정(라디칼 생성, 염증성사이토카인 생성, 케모카인 생성 등)에 의해 발생한다고 알려져 있다. 따라서 염증 반응을 적절하고 효과적으로 제어 및 치료할 수 있다면, 상기 주요 사망 원인 질병을 충분히 줄일 수 있을 것으로 생각된다. 이에, 염증 반응을 안전하면서도 효과적으로 억제할 수 있는 물질에 대한 요구가 존재한다.

한편, 괴화(槐花)는 본초강목에 회화라고도 하며, 회충을 죽이며 열리, 치루, 및 장풍을 다스린다. 회화나무는 콩과의 낙엽교목으로 키가 10 m에 이르며 잎은 난형의 쪽잎이 6 ~ 8쌍 모인 겹잎으로 되어있으며, 전국의 각지에 산재한다. 괴화는 예로부터 동의보감, 향약집성방 및 광제비급 등의 기성 한약서나 관련문헌에서 단방 생약으로서 처방하고 있으나, 이러한 처방은 괴화의 외형상의 형태감별 방법 및 한방의학적 약효와 탕액의 제조방법에 관한 간단한 언급에 불과하다.

최근 국내등록특허 제509,682호는 괴각추출물을 유효성분으로 함유하는 갱년기 질환의 예방 및 치료용 조성물에 대하여, 국내등록특허 제539,457호는 괴각추출물을 포함하는 고지혈증, 동맥경화증 및 지방간의 예방 및 치료용 조성물에 대해, 국내등록특허 제539,456호에서는 괴각추출물을 포함하는 암의 예방 및 치료용 조성물에 대해, 국내공개특허 제2006-0033070호에서는 괴화를 포함한 여러 한약제들이 치질 또는 부인과 질환의 치료를 위한 좌욕제 및 이를 포함하는 좌욕제백에 관해 개시하고 있다.

해외에서는 뇌경색을 유발한 쥐 모델 실험에 있어서 괴화추출물이 은행(Ginkgo biloba)처럼 인터루킨-1의 생산, 미세교세포(microglial cell)의 활성 및 뇌세포 죽음을 감소시키는 효과가 있어 인간의 뇌경색 등 뇌질환 치료에 효과가 있을 것이라고 제안한 논문이 발표된 바 있다(Lao CJ et al., Am J Chin Med.33(3):425-438, 2005년).

본 발명의 일 목적은 괴화 추출물을 포함하여 피부에 수분 공급효과를 부여하는 피부 보습용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명의 다른 목적은 괴화 추출물을 포함하여 염증의 예방 또는 치료 효과를 갖는 약제학적 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명의 또 다른 목적은 이들 조성물을 제조하는 방법을 제공하고자 한다.

본 발명의 일 구현 예에 따르면, 괴화 추출물을 유효 성분으로 포함하는, 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다.

상기 괴화 추출물은 발효된 괴화 추출물, 괴화 물 추출물 또는 이들의 혼합물일 수 있다.

상기 괴화 추출물은 50~500㎍/ml의 농도로 포함될 수 있다.

상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.

본 발명의 다른 구현 예에 따르면, 괴화 추출물을 유효 성분으로 포함하는, 염증의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공한다.

상기 괴화 추출물은 50~500㎍/ml의 농도로 포함될 수 있다.

본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 괴화를 분쇄하는 단계; 및

분쇄된 괴화로부터 괴화 추출물을 수득하는 단계를 포함하는, 괴화 추출물을 포함하는 조성물의 제조방법을 제공한다.

상기 괴화 추출물을 수득하는 단계는 분쇄된 괴화를 정제수에 넣고 0~10℃에서 6~72시간 동안 추출하는 단계를 포함할 수 있다.

상기 괴화 추출물을 수득하는 단계는 분쇄된 괴화와 효모를 정제수에 넣고 20~40℃에서 6~24시간 동안 발효 및 추출하는 단계를 포함할 수 있다.

상기 효모는 상면효모(Sacch. cerevisiae), 하연효모(Sacch, carlsbergensis), 스키조폼베(Schizopombe), 사카로미세스세레비시아(Saccharomyces cerevisiae) 및 사카로마이세스엘립소이더스(Saccharomyces ellipsoideus)로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다.

본 발명에서 제공하는 조성물은 천연 유래 물질인 괴화 추출물을 포함하여 피부에 강력한 보습 효과를 부여할 수 있고, 항염증 작용 또한 뛰어나 염증을 예방하고 치료하는 데에 효과적이다.

또한, 본 발명에서 제공하는 조성물에 포함된 괴화 추출물은 천연 유래 물질로서, 이를 피부에 적용하거나 섭취 또는 인체 내 투여하는 등 다양한 방법으로 사용하여도 독성이나 부작용이 없다.

도 1의 (a) 및 (b)는 참고예 1에서 제조예 1과 제조예 2에서 얻어진 괴화 추출물의 박층크로마토그래피(TLC)를 수행한 결과를 사진으로 도시한 것이다.
도 2는 참고예 2에서 제조예 1과 제조예 2에서 얻어진 괴화 추출물의 고속 액체 크로마토그래피(HPLC)를 수행한 결과를 그래프로 나타낸 것이다.
도 3의 (a) 내지 (e)는 실험예 1에서 대조군 1 및 실시예 1의 보습 실험을 수행한 결과를 그래프로 나타낸 것이다.
도 4는 실험예 2에서 대조군 2와 실시예 2 내지 4 및 6 내지 8에 대하여 항염증 효능을 실험한 결과를 그래프로 나타낸 것이다.
도 5는 실험예 3에서 대조군 3과 실시예 1 내지 8에 대하여 MTT assay를 수행한 결과를 그래프로 나타낸 것이다.

이하, 본 발명의 바람직한 실시형태들을 설명한다. 그러나, 본 발명의 실시형태는 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 이하 설명하는 실시 형태로 한정되는 것은 아니다. 또한, 본 발명의 실시형태는 당해 기술분야에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 더욱 완전하게 설명하기 위해서 제공되는 것이다.

본 발명은 괴화 추출물을 포함하는 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 괴화 추출물을 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물 및 괴화 추출물을 포함하는 염증의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 관한 것이다.

구체적으로, 본 발명의 일 구현 예에 따르면, 괴화 추출물을 유효 성분으로 포함하는, 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에서 추출물(extract)은 천연물로부터 분리된 활성성분을 의미하며, 여기서는 괴화로부터 분리된 물질을 의미한다. 이렇듯, 본 발명의 화장료 조성물에 포함된 괴화 추출물은 천연물 유래의 물질로서, 독성이나 부작용은 거의 없으면서 피부에 강력한 수분 공급 효과를 부여할 수 있다.

본 발명에서 사용할 수 있는 괴화 추출물은 그 추출 형태를 특별히 한정하지는 않으나, 바람직하게는 발효된 괴화 추출물, 괴화 물 추출물 또는 이들의 혼합물을 사용하는 것이 보습 효과를 더욱 높일 수 있다.

여기서 상기 괴화 물 추출물은 괴화를 정제수로 추출한 추출물일 수 있고, 발효된 괴화 추출물은 괴화를 효모, 당 및 정제수를 이용하여 발효시키면서 추출한 추출물일 수 있다.

또한, 본 발명은 필요에 따라, 괴화 추출물에 대하여 감압 증류, 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정을 거쳐 분말 상태로 제조된 것을 사용할 수 있다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물에서 상기 괴화 추출물의 사용량은 특별히 한정하지는 않으나, 바람직하게는 상기 괴화 추출물을 50~500㎍/ml의 농도로 포함할 수 있다. 괴화 추출물의 농도가 50㎍/ml 미만인 경우, 피부에 수분을 공급하는 효과가 미미할 수 있고, 농도가 500㎍/ml를 초과하는 경우, 원가 상승으로 인해 경제적인 점에서 문제가 될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 제형 역시 특별히 한정하는 것은 아니나, 예를 들면, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형일 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물에 포함된 괴화 추출물은 천연물 유래의 물질로서 독성이나 부작용은 거의 없으면서, 염증을 억제하고 치료하는데 우수한 효과를 가져 염증성 질환을 개선 및 치료할 수 있다.

본 발명에서 사용할 수 있는 괴화 추출물은 그 추출 형태를 특별히 한정하지는 않으나, 바람직하게는 발효된 괴화 추출물, 괴화 물 추출물 또는 이들의 혼합물을 사용하는 것이 항염증 효과를 더욱 높일 수 있다.

또한, 본 발명의 약제학적 조성물에서 상기 괴화 추출물의 사용량은 특별히 한정하지는 않으나, 바람직하게는 상기 괴화 추출물을 50~500㎍/ml의 농도로 포함할 수 있다. 괴화 추출물의 농도가 50㎍/ml 미만인 경우, 항염증 효과가 미미할 수 있고, 농도가 500㎍/ml를 초과하는 경우, 원가 상승으로 인해 경제적인 점에서 문제가 될 수 있다.

또한, 본 발명의 약제학적 조성물은 경구, 직장, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 골수 내, 경막 내 또는 피하 등으로 투여될 수 있다.

여기서, 경구 투여를 위한 제형은 정제, 환제, 연질 또는 경질 캅셀제, 과립제, 산제, 액제 또는 유탁제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 비경구 투여를 위한 제형은 주사제, 점적제, 로션, 연고, 겔, 크림, 현탁제, 유제, 좌제, 패취 또는 분무제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 본 발명의 약제학적 조성물은 필요에 따라 희석제, 부형제, 활택제, 결합제, 붕해제, 완충제, 분산제, 계면 활성제, 착색제, 향료 또는 감미제 등의 첨가제를 포함할 수 있다.

한편, 본 발명에서 용어, "예방"이란 조성물의 투여에 의해 염증을 억제하거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미하고, "치료"란 조성물의 투여에 의해 염증에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.

본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 괴화를 분쇄하는 단계; 및 분쇄된 괴화로부터 괴화 추출물을 수득하는 단계를 포함하는, 괴화 추출물을 포함하는 조성물의 제조방법을 제공한다.

본 발명의 제조방법은 우선 괴화를 준비한 뒤, 이를 증류수로 세척하고, 분쇄기를 사용하여 잘게 분쇄하는 단계를 수행할 수 있다.

또한, 본 발명의 제조방법은 상기와 같이 분쇄된 괴화로부터 괴화 추출물을 수득하는 단계를 수행할 수 있는데, 괴화 추출물을 수득하는 방법은 특별히 한정하지 않으며, 예를 들어, 초음파 추출법, 여과법 및 환류 추출법 등 당업계의 통상적인 추출방법일 수 있다.

다만, 바람직하게는, 분쇄된 괴화에 정제수를 괴화 중량 대비 3~20배 양으로첨가하고 0~10℃에서 6~72시간 동안 물 추출하여 수행될 수 있다.

보다 바람직하게는, 분쇄된 괴화에 효모와 당을 첨가한 뒤, 정제수를 괴화 중량 대비 1~5배 양으로 넣고 20~40℃에서 6~24시간 동안 발효 및 추출하여 수행될 수 있다.

여기서, 상기 발효 시 사용할 수 있는 효모의 종류로는, 상면효모(Sacch. cerevisiae), 하연효모(Sacch, carlsbergensis), 스키조폼베(Schizopombe), 사카로미세스세레비시아(Saccharomyces cerevisiae) 및 사카로마이세스엘립소이더스(Saccharomyces ellipsoideus)로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있지만, 이에 제한되는 것은 아니다.

여기서, 상기 발효 시 사용할 수 있는 당류로는, 단당류, 이당류, 올리고당 또는 다당류를 사용할 수 있으나, 바람직하게는 아가베(agave) 시럽을 사용할 수 있다.

본 발명의 제조방법은, 필요에 따라 수득한 괴화 추출물에 감압 증류, 동결 건조 또는 분무 건조 등의 공정을 수행하여 분말 상태의 괴화 추출물을 획득하는 단계를 더 포함할 수 있다.

본 발명에서 상기와 같이 얻어진 괴화 추출물은 피부에 수분을 공급하는 효과가 우수하고, 염증을 억제 및 치료하는 효과 또한 우수하다. 따라서, 본 발명의 제조방법은 얻어진 괴화 추출물에 정제수 등의 용매와 기타 목적에 따라 적절한 성분를 함께 첨가하여 다양한 용도의 조성물을 제조할 수 있다.

바람직하게는, 얻어진 괴화 추출물에 정제수, 보습제, 피부에 미용 기능성을 부여하는 기능성 화장 성분, 기타 첨가제를 첨가하여 피부 보습용 화장료 조성물을 제조할 수 있다.

바람직하게는, 얻어진 괴화 추출물에 희석제, 부형제, 활택제, 결합제, 붕해제, 완충제, 분산제, 계면 활성제, 착색제, 향료 또는 감미제 등을 첨가하여 염증의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제조할 수 있다.

실시예

이하, 구체적인 실시예를 통해 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 예시에 불과하며, 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다.

제조예 1: 발효된 괴화 추출물의 제조

괴화를 증류수를 이용하여 깨끗이 세척한 뒤 분쇄기를 이용해 잘게 분쇄하였다. 이후, 분쇄된 괴화 4.5g을 취하고, 이에 정제수 142.5ml, 아가베 시럽(agave syrup) 7.5ml 및 효모 0.75g을 넣고 30℃에서 8시간 발효하여, 발효된 괴화 추출물을 얻었다.

제조예 2: 괴화 물 추출물의 제조

괴화를 증류수를 이용하여 깨끗이 세척한 뒤 분쇄기를 이용해 잘게 분쇄하였다. 이후, 분쇄된 괴화 15g을 취하고, 이에 정제수 150ml를 넣은 뒤, 4℃에서 72시간 유지하여, 괴화 물 추출물을 얻었다.

실시예 1 내지 4: 발효된 괴화 추출물을 포함하는 조성물의 제조

상기 제조예 1에서 얻어진 발효된 괴화 추출물에 30% 1,3-뷰틸렌 글리콜(1,3-butylene glycol)을 첨가하여 상기 괴화 추출물의 농도가 각각 50㎍/ml, 100㎍/ml, 200㎍/ml 및 500㎍/ml가 되도록 조성물을 제조하였다.

실시예5 내지 8: 괴화물 추출물을 포함하는 조성물의 제조

상기 제조예 2에서 얻어진 괴화 물 추출물에 30% 1,3-뷰틸렌 글리콜(1,3-butylene glycol)을 첨가하여 상기 괴화 추출물의 농도가 각각 50㎍/ml, 100㎍/ml, 200㎍/ml 및 500㎍/ml가 되도록 조성물을 제조하였다.

참고예 1: 박층크로마토그래피(Thin Layer Chromatography,TLC)를 이용한 괴화 추출물의 성분 분석 실험

상기 제조예 1 및 2에서 얻어진 추출물의 성분사를 확인하기 위하여 특정 조건에서 TLC를 수행하였다. 구체적으로는 TLC 플레이트에 상기 추출물을 각각 스팟팅(spotting)한 뒤, 클로로포름(Chloroform):메탄올(MeOH):증류수(Water)가 6.5:1.75:0.25의 부피비로 혼합된 용매를 전개 용매로 사용하여, 이들을 전개시켰다. 이 후, 각각에 254nm, 360nm의 UV spectrum을 조사하여 그 결과를 각각 도 1의 (a) 및 (b)에 사진으로 나타내었다.

도 1의 (a) 및 (b)에서 보는 바와 같이, 각각 254nm 및 360nm의 자외선을 조사한 결과, 가장 활성이 높은 성분이 TLC 플레이트 상에 발색 스팟(spot)을 내는 것을 볼 수 있고, 분석 결과, 괴화 물 추출물과 발효된 괴화 추출물이 각각 다른 패턴을 보이고 있어, 성분 상 차이가 생겼음을 알 수 있다.

참고예 2: 고속 액체 크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)를 이용한 괴화 추출물의 성분 분석 실험

상기 제조예 1 및 2에서 얻어진 물 추출물과 발효된 추출물의 성분 상 차이를 확인하기 위하여 특정 조건 하에서 HPLC를 수행하여, 그 분석 결과를 도 2에 나타내었다.(HPLC 조건: 컬럼 : Agilent Edipse XDB-Phenyl Column (3.5㎛), 4.6×150 ㎜, Waters; 이동상 :Solvent: A(0.1% TFA), B(MeOH) : 0분 B 20%, 40분 B 100%, 50분 B 100%, 55분 B 20%, 60% B 20% ; 검출기 : 자외부흡광광도계 (UV 254㎚); 유 속 : 0.7㎖/min; 시료 농도 : 1mg/ml; 컬럼 온도 : 30℃)

도 2에서 보는 바와 같이, 노란색 화살표로 표시된 부분에서 발효 시 HPLC 피크가 확연히 증가한 것을 볼 수 있고, 빨간색 화살표로 표시된 부분에서는 발효 시 HPLC 피크가 감소한 것을 볼 수 있다. 이러한 결과로부터 발효된 괴화 추출물과 괴화 물 추출물은 추출 방법에 따라 포함된 일부 성분의 함량에 차이가 발생한 것을 볼 수 있다.

실험예 1: 보습 테스트

본 발명에 따른 괴화 추출물을 포함하는 조성물의 보습력 정도를 확인하기 위하여 이하의 실험을 수행하였다. 구체적으로는 Cutometer MPA 580 기기를 이용하여 임의로 정한 실험자의 피부 수분 함량을 측정하고, 상기 실시예 1에서 얻어진 조성물을 파이펫(pipet)으로 정확히 10㎕로 취한 뒤, 이를 임의로 선정한 실험자의 피부에 떨어뜨리고 면봉으로 가볍게 발라주었다. 여기서, 상기 조성물을 도포한 직후에서부터 시간이 경과함에 따라 상기 조성물이 도포된 부위의 수분 함량 변화를 측정하였고, 이와 같은 실험을 5차에 걸쳐 수행하여, 그 결과를 도 3의 (a) 내지 (e)에 그래프로 나타내었다.

단, 상기 보습 테스트는 온도 22~23℃, 습도 17~18%의 조건 하에서 수행되었고, 본 발명에 따르는 조성물의 보습력을 평가하기 위하여 대조군으로는 보습제로 흔히 사용되는 화학 성분인 1,3-뷰틸렌 글리콜을 사용하였다.

도 3의 (a) 내지 (e)에서 보는 바와 같이, 실시예 1의 조성물을 포함하는 경우, 오로지 1,3-뷰틸렌 글리콜만을 사용한 경우(대조군 1)와 대비하였을 때, 도포 후 시간이 상당히 경과되어도, 더욱 높은 수분 함량이 유지되는 것을 볼 수 있다.

실험예 2: 항염증 효능 테스트

본 발명에 따른 괴화 추출물을 포함하는 조성물의 항염증 효능 여부를 확인하기 위하여 이하의 실험을 수행하였다. 구체적으로는, DMEM(in 10% FBS, 1% Penicillin/ streptomysin)을 배지로 사용하여, Raw264.7 cell을 처음 100π plate 2개에 접종(seeding)을 한 뒤, 24시간 후에 Raw264.7 cell이 70% 정도 증식하면 100π plate 4개로 계대배양을 하여, 24시간 후 Raw264.7 cell이 70% 정도 증식하면 24well plate(또는 48well)에 4.0x10⁵의 Raw264.7 cell을 접종(seeding)하였다. 접종 후 24시간이 경과하면 활성화(activation)시키기 위해 200ng/ml의 LPS를 넣은 배지(media)로 바꿔주고, 상기 실시예 2 내지 4 및 6 내지 8에서 얻어진 조성물을 이들 배지에 처리하였다. 24시간 후 Griess reagent system을 이용하여 NO량을 측정하고, ELISA(micro plat reader)를 이용하여 흡광도(Optical Density)를 570nm에서 측정해 그 결과를 도 4에 나타내었다.

또한, 각 실시예 별로 LPS에 의해 세포에서 생성되는 NO의 농도와, 농도에 따라 확인 할 수 있는 inhibition%를 하기 식 (1)과 같이 측정한 후, 그것을 농도 별로 확인하여 IC₅₀를 측정해 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

[식 (1)]

Inhibition(%) = 100 - (Blank-Sample)/(Blank-Control)x100))

다만, 본 발명에 따르는 조성물의 항염증 효능을 확인하기 위하여, LPS 배지로 바꿔준 후 아무 처리를 하지 않은 경우를 대조군으로 하여 도 4에 함께 나타내었다.

구분	억제능(%)	IC₅₀
실시예 2	13.9	180.8
실시예 3	63.9
실시예 4	100
실시예 6	27.3	252.5
실시예 7	32.4
실시예 8	98.3

도 4에서 보는 바와 같이, 본 발명에 따르는 실시예 2 내지 4 및 6 내지 8의 조성물을 처리한 결과, 아무 처리를 하지 않은 경우(대조군 2)와 대비하였을 때, 균주 수가 현저히 감소하여 항염증 효능이 있음을 볼 수 있으며, 이러한 효능은 추출물의 함량이 증가할수록 더욱 향상되는 것을 볼 수 있다.

또한, 상기 표 1에서도 마찬가지로 추출물의 농도가 높아질수록 균주의 발육 저해 정도가 높아지는 것을 볼 수 있다. 다만, 농도가 같다면 괴화 물 추출물보다 발효된 괴화 추출물이 세포 발육 억제 정도가 우수하고, 따라서 항염증 효능이 우수한 것을 볼 수 있다. IC₅₀또한 괴화 물 추출물 보다 발효된 괴화 추출물이 현저히 낮은 값을 갖는 것을 볼 수 있다.

실험예3: MTT assay 실험

본 발명에 따른 괴화 추출물을 포함하는 조성물이 세포 사멸에 직접적인 영향을 주는지 확인하기 위하여 이하의 실험을 수행하였다. 구체적으로는, DMEM(in 10% FBS, 1% Penicillin/ streptomysin)을 배지로 사용하여, Raw264.7 cell 처음 100π plate 1개에 접종(seeding)을 하고, 24시간 후에 Raw264.7 cell이 70% 정도 증식 하면 100π plate 2개에 계대배양을 하였다. 24시간이 경과된 후, Raw264.7 cell이 70% 정도 증식 하면 96well plate에 4.0x10⁵의 Raw264.7 cell을 접종하고, 이 후 12~24시간이 지나면 상기 실시예 1 내지 8에서 얻어진 조성물을 이들 배지에 처리하였다. 24시간 후에 MTT 시약을 각 well당 20㎕ 씩 처리하고 37℃ incubator에서 30분 incubate한 후에 450nm에서 흡광도를 확인하여, 그 결과를 도 5에 그래프로 나타내었다. 다만, 아무 처리를 하지 않은 경우의 결과를 대조군으로하여 도 5에 함께 나타내었다.

도 5에서 보는 바와 같이, 실시예 1 내지 8의 조성물을 처리한 결과, 아무 처리를 하지 않은 경우(대조군 3)와 대비하였을 때, 흡광도가 증가하였는바 세포 사멸에는 직접적인 영향을 주지 않는 것을 볼 수 있다.

Claims

괴화 추출물을 유효 성분으로 포함하는, 피부 보습용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 괴화 추출물은 발효된 괴화 추출물, 괴화 물 추출물 또는 이들의 혼합물인, 피부 보습용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 괴화 추출물은 50~500㎍/ml의 농도로 포함되는, 피부 보습용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 갖는, 피부 보습용 화장료 조성물.
괴화 추출물을 유효 성분으로 포함하는, 염증의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
제5항에 있어서,
상기 괴화 추출물은 발효된 괴화 추출물, 괴화 물 추출물 또는 이들의 혼합물인, 염증의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
제5항에 있어서,
상기 괴화 추출물은 50~500㎍/ml의 농도로 포함되는, 염증의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
괴화를 분쇄하는 단계; 및
분쇄된 괴화로부터 괴화 추출물을 수득하는 단계를 포함하는, 괴화 추출물을 포함하는 조성물의 제조방법.
제8항에 있어서,
상기 괴화 추출물을 수득하는 단계는 분쇄된 괴화를 정제수에 넣고 0~10℃에서 6~72시간 동안 추출하는 단계를 포함하는, 괴화 추출물을 포함하는 조성물의 제조방법.
제8항에 있어서,
상기 괴화 추출물을 수득하는 단계는 분쇄된 괴화와 효모 및 당을 정제수에 넣고 20~40℃에서 6~24시간 동안 발효 및 추출하는 단계를 포함하는, 괴화 추출물을 포함하는 조성물의 제조방법.
제10항에 있어서,
상기 효모는 상면효모(Sacch. cerevisiae), 하연효모(Sacch, carlsbergensis), 스키조폼베(Schizopombe), 사카로미세스세레비시아(Saccharomyces cerevisiae) 및 사카로마이세스엘립소이더스(Saccharomyces ellipsoideus)로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상인, 괴화 추출물을 포함하는 조성물의 제조방법.
제10항에 있어서,
상기 당은 아가베(agave) 시럽인, 괴화 추출물을 포함하는 조성물의 제조방법.