KR20160003328A - Btk 활성의 억제제로서의 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 화합물 - Google Patents

Btk 활성의 억제제로서의 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 화합물 Download PDF

Info

Publication number
KR20160003328A
KR20160003328A KR1020157036122A KR20157036122A KR20160003328A KR 20160003328 A KR20160003328 A KR 20160003328A KR 1020157036122 A KR1020157036122 A KR 1020157036122A KR 20157036122 A KR20157036122 A KR 20157036122A KR 20160003328 A KR20160003328 A KR 20160003328A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
mmol
cancer
compound
pyridin
methyl
Prior art date
Application number
KR1020157036122A
Other languages
English (en)
Inventor
제임스 존 크러포드
다니엘 프레드 오트와인
빈칭 웨이
웬디 비 영
Original Assignee
에프. 호프만-라 로슈 아게
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 에프. 호프만-라 로슈 아게 filed Critical 에프. 호프만-라 로슈 아게
Publication of KR20160003328A publication Critical patent/KR20160003328A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D487/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4985—Pyrazines or piperazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4995—Pyrazines or piperazines forming part of bridged ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/53—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with three nitrogens as the only ring hetero atoms, e.g. chlorazanil, melamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5383—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D495/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic System
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
    • C07F7/1804—Compounds having Si-O-C linkages

Abstract

Btk 키나아제를 억제하고 면역 장애(예컨대, Btk 키나아제에 의해 매개되는 염증)를 치료하는데 유용한 하기 화학식 I의 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 화합물(입체 이성질체 및 호변 이성질체 포함) 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다:
[화학식 I]
Figure pat00417

상기 식에서, X1, X2 및 X3 중 1개 또는 2개는 N이다.
상기 화학식 I의 화합물을 사용하여, 포유동물 세포에서 상기 장애 또는 관련 병리 증상을 시험관 내, 동일반응계 내 및 생체 내에서 진단하고 치료하는 방법이 개시된다.

Description

Btk 활성의 억제제로서의 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 화합물{HETEROARYL PYRIDONE AND AZA-PYRIDONE COMPOUNDS AS INHIBITORS OF BTK ACTIVITY}
본 발명은 일반적으로, 브루톤 타이로신 키나아제(Btk)에 의해 매개되는 장애(염증, 면역 및 암 포함)를 치료하기 위한 화합물, 더욱 구체적으로는 Btk 활성을 억제하는 화합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한, 상기 화합물을 사용하여 포유동물 세포 또는 관련 병리 증상을 시험관 내, 동일반응계 내 및 생체 내에서 진단하거나 치료하는 방법에 관한 것이다.
관련 출원의 상호참조
미국 연방 규정 37 CFR §1.53(b) 하에 출원된 본 정규 출원은, 2011년 11월 3일자로 출원된 미국 특허 가출원 제 61/555,393 호를 미국 특허법 35 USC §119(e) 하에 우선권으로 주장하며, 상기 가출원 전체를 본원에 참고로 인용한다.
인간 효소의 최대 패밀리인 단백질 키나아제는 500개를 훨씬 넘는 단백질을 포함한다. 브루톤 타이로신 키나아제(Btk)는 타이로신 키나아제의 Tec 패밀리의 일원이며, 초기 B-세포 발달뿐만 아니라 성숙한 B-세포 활성화, 신호전달 및 생존의 조절제이다.
B-세포 수용체(BCR)를 통한 B-세포 신호전달은 광범위한 생물학적 산출물을 유발하며, 이는 다시 B-세포의 발달 단계에 의존한다. BCR 신호의 크기 및 지속 기간은 정확히 조절되어야 한다. 이상 BCR-매개된 신호전달은 비조절된 B-세포 활성화 및/또는 병원성 자가-항체의 형성을 유발하여, 다수의 자가면역성 및/또는 염증성 질환을 제공할 수 있다. 인간에서 Btk의 돌연변이는 X-연관 무감마글로불린혈증(XLA)을 제공한다. 이 질환은 B-세포의 손상된 성숙, 감소된 면역글로불린 생산, 타협된(compromised) T-세포-독립적 면역 반응 및 BCR 자극시 지속되는 칼슘 신호의 두드러진 감쇠와 관련된다. 알레르기 장애 및/또는 자가면역 질환 및/또는 염증성 질환에서 Btk의 역할에 대한 증거는 Btk-결핍 마우스 모델에서 확립되었다. 예를 들어, 전신 홍반 루푸스(SLE)의 표준 설치류 임상전 모델에서, Btk-결핍은 질환 전이에 두드러진 개선을 제공하는 것으로 나타났다. 더욱이, Btk-결핍 마우스는 또한 콜라겐-유도된 관절염의 발달에 내성일 수 있으며, 포도상구균-유도된 관절염에 덜 민감할 수 있다. 수많은 증거가 자가면역성 및/또는 염증성 질환의 발병에서 B-세포 및 체액 면역 시스템의 역할을 뒷받침한다. B-세포를 제거하기 위해 개발된 단백질계 치료제(예컨대, 리투싼(Rituxan))는 수많은 자가면역성 및/또는 염증성 질환의 치료에 대한 접근법을 제시한다. B-세포 활성화에서 Btk의 역할 때문에, Btk의 억제제가 B-세포-매개된 병원 활성(예컨대, 자가-항체 생산)의 억제제로서 유용할 수 있다. Btk는 또한 파골세포, 비만 세포 및 단핵구에서 발현되며, 이들 세포의 기능에 중요한 것으로 나타났다. 예를 들어, 마우스에서 Btk 결핍은 손상된 IgE-매개된 비만 세포 활성화(TNF-알파 및 기타 염증성 사이토카인 방출의 두드러진 감소)와 관련되며, 인간에서 Btk 결핍은 활성화된 단핵구에 의한 매우 감소된 TNF-알파 생산과 관련된다.
따라서, Btk 활성의 억제는 알레르기성 장애 및/또는 자가면역성 및/또는 염증성 질환, 예컨대 SLE, 류마티스성 관절염, 다발성 혈관염, 특발성 혈소판 감소성 자반병(ITP), 중증 근무력증, 알레르기성 비염, 및 천식의 치료에 유용할 수 있다(문헌[Di Paolo et al (2011) Nature Chem. Biol. 7(1):41-50]; 및 문헌[Liu et al (2011) Jour. of Pharm. and Exper. Ther. 338(1):154-163] 참고). 또한, Btk는 세포자멸사에서 역할을 하는 것으로 보고되었다. 따라서, Btk 활성의 억제는 암뿐만 아니라 B-세포 림프종, 백혈병 및 기타 혈액암의 치료에 유용할 수 있다. 더욱이, 파골 세포 기능에서의 Btk의 역할을 고려하면, Btk 활성의 억제는 골 장애, 예컨대 골다공증의 치료에 유용할 수 있다. 특정 Btk 억제제가 보고되었다(문헌[Liu (2011) Drug Metab. and Disposition 39(10):1840-1849]; 미국 특허 제 7,884,108 호; 국제 특허 출원 공개 WO 2010/056875 호; 미국 특허 제 7,405,295 호; 미국 특허 제 7,393,848 호; 국제 특허 출원 공개 제 WO 2006/053121 호; 미국 특허 제 7,947,835 호; 미국 특허 제 2008/0139557 호; 미국 특허 제 7,838,523 호; 미국 특허 출원 공개 제 2008/0125417 호; 미국 특허 출원 공개 제 2011/0118233 호; 2011년 8월 31일에 출원된 국제 특허 출원 제 PCT/US2011/050034 호("피리디논/피라지논, 그의 제조 방법 및 이용 방법"); 2011년 8월 31일에 출원된 국제 특허 출원 제 PCT/US2011/050013 호("피리다지논, 그의 제조 방법 및 이용 방법"); 2011년 5월 6일에 출원된 미국 특허 출원 제 13/102720 호("피리돈 및 아자피리돈 화합물 및 이용 방법) 참고).
본 발명은 일반적으로, 브루톤 타이로신 키나아제(Btk) 조절 활성을 갖는 화학식 I의 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 화합물에 관한 것이다.
화학식 I의 화합물은 하기 구조를 가지며, 그의 입체 이성질체, 호변 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함한다.
[화학식 I]
Figure pat00001
본 발명의 하나의 양태는, 화학식 I의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체, 활택제, 희석제 또는 부형제로 구성된 약학 조성물이다. 상기 약학 조성물은 추가로 제 2 치료제를 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 양태는, 화학식 I의 화합물을 약학적으로 허용가능한 담체와 배합하는 것을 포함하는, 약학 조성물의 제조 방법이다.
본 발명은 질환 또는 장애의 치료 방법을 포함하며, 이때 상기 방법은, 면역 장애, 암, 심혈관 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경계 장애로부터 선택되고 브루톤 타이로신 키나아제에 의해 매개된 질환 또는 장애를 갖는 환자에게 화학식 I의 화합물을 치료 효과량 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은, (a) 화학식 I의 화합물을 포함하는 제 1 약학 조성물 및 (b) 사용 설명서를 포함하고, 브루톤 타이로신 키나아제에 의해 매개된 증상을 치료하기 위한 키트를 포함한다.
본 발명은, 면역 장애, 암, 심혈관 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경계 장애로부터 선택되고 브루톤 타이로신 키나아제에 의해 매개된 질환 또는 장애의 치료용 약제로서 사용하기 위한 화학식 I의 화합물을 포함한다.
본 발명은, 면역 장애, 암, 심혈관 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경계 장애의 치료를 위한 약제의 제조에서의 화학식 I의 화합물의 용도를 포함하며, 이때 상기 약제는 브루톤 타이로신 키나아제를 매개한다.
본 발명은 화학식 I의 화합물의 제조 방법을 포함한다.
도 1은 2,2,2-트라이클로로-1-(4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-일)에탄온 101a로부터 출발하여 2-(4-(하이드록시메틸)-5-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 101을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 2는 1-메틸-3-[5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-5-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-1H-피리딘-2-온 102a로부터 출발하여 2-(4-(하이드록시메틸)-5-(1-메틸-5-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 102를 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 3은 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드 103a로부터 출발하여 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 103을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 4는 4-브로모-2-클로로니코틴알데하이드 104a로부터 출발하여 2-(3-(하이드록시메틸)-2-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-4-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 104를 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 5는 N-메톡시-N-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로벤조[b]티오펜-2-카복스아마이드 105a로부터 출발하여 4-하이드록시메틸- 3-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-5-{6-옥소-8-티아-5-아자트라이사이클로-[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7)-다이엔-5-일}피리딘 105를 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 6은 3,3-다이메틸사이클로펜탄온 106a로부터 출발하여 4-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-5-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8), 2(6)-다이엔-10-일}피리딘-4-카브알데하이드 106을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 7은 (E)-에틸 3-(2-클로로-4,4-다이메틸사이클로펜트-1-엔일)아크릴레이트 107a로부터 출발하여 10-[4-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-4-(하이드록시메틸)피리딘-3-일]-4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 107을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 8은 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a로부터 출발하여 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 108을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 9는 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 109a로부터 출발하여 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-4,4-다이메틸-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-9-온 109를 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 10은 1-메틸-3-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 110a로부터 출발하여 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 110을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 11은 (6-아미노피리딘-3-일)(모폴리노)메탄온 111a로부터 출발하여 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 111을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 12는 메틸 5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 112a로부터 출발하여 2-(4-(하이드록시메틸)-5-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1(2H)-온 112를 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 13은 (3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올 113a로부터 출발하여 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로 [1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 113을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 14는 (R)-5-브로모-3-(4-(1,4-다이메틸-3-옥소피페라진-2-일)페닐아미노)-1-메틸피라진-2(1H)-온 114a로부터 출발하여 (R)-2-(4-(6-(4-(1,4-다이메틸-3-옥소피페라진-2-일)페닐아미노)-4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로피라진-2-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 114를 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 15는 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 115a로부터 출발하여 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 115를 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 16은 3-브로모-5-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-4-카브알데하이드 116a로부터 출발하여 4-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-5-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘 116을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 17은 5-(메틸티오)-2-나이트로피리딘 117a로부터 출발하여 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(메틸설폰일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 117을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 18은 3급-부틸 5-아미노-3-사이클로프로필-1H-피라졸-1-카복실레이트 118a로부터 출발하여 2-(4-(5-(5-사이클로프로필-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 118을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 19는 (S)-(4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 119a로부터 출발하여 (S)-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 119를 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 20은 5-브로모-3-(5-(4-(2-하이드록시-2-메틸프로필)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 120a로부터 출발하여 2-(4-(5-(5-(4-(2-하이드록시-2-메틸프로필)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 120을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 21은 4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 121a로부터 출발하여 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 121을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 22는 (2R, 5S)-3급-부틸 2,5-다이메틸-4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 122a로부터 출발하여 2-(4-(5-(5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 122를 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 23은 (2-브로모에톡시)(3급-부틸)다이메틸실란 123a로부터 출발하여 2-(4-(5-(5-(4-(2-하이드록시에틸)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 123을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 24는 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a로부터 출발하여 3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘 124를 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 25는 에틸 1H-피롤-2-카복실레이트로부터 출발하여 7,7-다이플루오로-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온(화합물 140의 제조에 유용함)을 제조하는 것을 도시한 것이다.
도 26은 3-나이트로-1H-피라졸로부터 출발하여 5-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸-3-아민(화합물 266의 제조에 유용함)을 제조하는 것을 도시한 것이다.
이제, 본 발명의 특정 실시양태(그 예가 첨부된 구조 및 화학식에서 도시됨)를 자세히 참고할 것이다. 본 발명은 열거되는 실시양태와 관련하여 기술되지만, 본 발명이 이러한 실시양태에 한정되는 것으로 의도되지는 않는다. 반대로, 본 발명은, 첨부된 특허청구범위에서 정의된 바와 같은 본 발명의 범주 이내에 포함될 수 있는 모든 대체물, 변형 및 등가물을 포괄하는 것으로 의도된다. 당업자는 본원에 기술된 것과 유사하거나 동등하며 본 발명의 실시에 사용될 수 있는 수많은 방법 및 물질을 알 것이다. 본 발명은 기술된 방법 및 물질에 제한되지 않는다. 인용된 문헌, 특허 및 유사한 자료 중 하나 이상(비제한적으로, 정의된 용어, 용어 사용, 설명된 기술 등)이 본 출원과 상이하거나 상충되는 경우, 본 출원이 우선할 것이다. 달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는, 본 발명이 속하는 분야의 당업자가 통상적으로 이해하는 바와 같은 의미를 갖는다. 본원에 기술된 것과 유사하거나 동등한 방법 및 물질이 본 발명의 실시 또는 시험에 사용될 수 있지만, 적합한 방법 및 물질은 후술된다. 본원에 언급된 모든 문헌, 특허 출원, 특허 및 기타 참고문헌 전체를 본원에 참고로 인용한다. 달리 기재되지 않는 한, 본원에 사용된 명명법은 IUPAC 체계 명명법에 기초한다.
정의
치환기의 개수를 나타내는 경우, "하나 이상"이라는 용어는, 하나의 치환기 내지 가능한 가장 많은 수의 치환기, 즉, 치환기에 의한 하나의 수소 내지 모든 수소의 대체를 지칭한다. "치환기"라는 용어는, 모 분자 상의 수소 원자를 대체하는 원자 또는 원자들의 그룹을 나타낸다. "치환된"이라는 용어는, 특정 기가 하나 이상의 치환기를 가짐을 나타낸다. 임의의 기가 복수개의 치환기를 가질 수 있으며 다양한 가능한 치환기들이 제공되는 경우, 치환기들은 독립적으로 선택되며, 동일할 필요는 없다. "비치환된"이라는 용어는, 특정 기가 치환기를 갖지 않음을 의미한다. "임의적으로 치환된"이라는 용어는, 특정 기가 비치환되거나, 가능한 치환기들의 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환됨을 의미한다. 치환기의 개수를 나타내는 경우, "하나 이상"이라는 용어는, 하나의 치환기 내지 가능한 가장 많은 수의 치환기, 즉, 치환기에 의한 하나의 수소 내지 모든 수소의 대체를 지칭한다.
본원에서 "알킬"이라는 용어는, 1 내지 12개의 탄소 원자(C1-C12)의 포화된 선형 또는 분지형 1가 탄화수소 라디칼을 지칭하며, 이때 알킬 라디칼은 독립적으로, 후술되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있다. 다른 실시양태에서, 알킬 라디칼은 1 내지 8개의 탄소 원자(C1-C8) 또는 1 내지 6개의 탄소 원자(C1-C6)이다. 알킬 기의 예는, 비제한적으로 메틸(Me, -CH3), 에틸(Et, -CH2CH3), 1-프로필(n-Pr, n-프로필, -CH2CH2CH3), 2-프로필(i-Pr, i-프로필, -CH(CH3)2), 1-부틸(n-Bu, n-부틸, -CH2CH2CH2CH3), 2-메틸-1-프로필(i-Bu, i-부틸, -CH2CH(CH3)2), 2-부틸(s-Bu, s-부틸, -CH(CH3)CH2CH3), 2-메틸-2-프로필(t-Bu, t-부틸, -C(CH3)3), 1-펜틸(n-펜틸, -CH2CH2CH2CH2CH3), 2-펜틸(-CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-펜틸(-CH(CH2CH3)2), 2-메틸-2-부틸(-C(CH3)2CH2CH3), 3-메틸-2-부틸(-CH(CH3)CH(CH3)2), 3-메틸-1-부틸(-CH2CH2CH(CH3)2), 2-메틸-1-부틸(-CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-헥실(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3), 2-헥실(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3), 3-헥실(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3)), 2-메틸-2-펜틸(-C(CH3)2CH2CH2CH3), 3-메틸-2-펜틸(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3), 4-메틸-2-펜틸(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2), 3-메틸-3-펜틸(-C(CH3)(CH2CH3)2), 2-메틸-3-펜틸(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2), 2,3-다이메틸-2-부틸(-C(CH3)2CH(CH3)2), 3,3-다이메틸-2-부틸(-CH(CH3)C(CH3)3, 1-헵틸, 1-옥틸 등이다.
본원에서 "알킬렌"이라는 용어는, 1 내지 12개의 탄소 원자(C1-C12)의 포화된 선형 또는 분지쇄 2가 탄화수소 라디칼을 지칭하며, 이때 상기 알킬렌 라디칼은 독립적으로, 후술되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있다. 다른 실시양태에서, 알킬렌 라디칼은 1 내지 8개의 탄소 원자(C1-C8), 1 내지 6개의 탄소 원자(C1-C6)이다. 알킬렌 기의 예는, 비제한적으로 메틸렌(-CH2-), 에틸렌(-CH2CH2-), 프로필렌(-CH2CH2CH2-) 등을 포함한다.
"알켄일"이라는 용어는, 하나 이상의 불포화 부위(즉, 탄소-탄소 sp2 이중 결합)를 갖는 2 내지 8개의 탄소 원자(C2-C8)의 선형 또는 분지쇄 1가 탄화수소 라디칼을 지칭하며, 이때 상기 알켄일 라디칼은 독립적으로, 본원에 기술된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있으며, "시스" 및 "트랜스" 배향 또는 다르게는 "E" 및 "Z" 배향을 갖는 라디칼을 포함한다. 그 예는, 비제한적으로 에틸렌 또는 비닐(-CH=CH2), 알릴(-CH2CH=CH2) 등을 포함한다.
"알켄일렌"이라는 용어는, 하나 이상의 불포화 부위(즉, 탄소-탄소 sp2 이중 결합)를 갖는 2 내지 8개의 탄소 원자(C2-C8)의 직쇄 또는 분지쇄 2가 탄화수소 라디칼을 지칭하며, 이때 상기 알켄일렌 라디칼은 독립적으로, 본원에 기술된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있으며, "시스" 및 "트랜스" 배향 또는 다르게는 "E" 및 "Z" 배향을 갖는 라디칼을 포함한다. 그 예는, 비제한적으로 에틸렌일렌 또는 비닐렌(-CH=CH-), 알릴(-CH2CH=CH-) 등을 포함한다.
"알킨일"이라는 용어는, 하나 이상의 불포화 부위(즉, 탄소-탄소 sp 삼중 결합)를 갖는 2 내지 8개의 탄소 원자(C2-C8)의 선형 또는 분지형 1가 탄화수소 라디칼을 지칭하며, 이때 상기 알킨일 라디칼은 독립적으로, 본원에 기술된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있다. 그 예는, 비제한적으로 에틴일(-C≡CH), 프로핀일(프로파길, -CH2C≡CH) 등을 포함한다.
"알킨일렌"이라는 용어는, 하나 이상의 불포화 부위(즉, 탄소-탄소 sp 삼중 결합)를 갖는 2 내지 8개의 탄소 원자(C2-C8)의 선형 또는 분지형 2가 탄화수소 라디칼을 지칭하며, 이때 상기 알킨일렌 라디칼은 독립적으로, 본원에 기술된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있다. 그 예는, 비제한적으로 에틴일렌(-C≡C-), 프로핀일렌(프로파길렌, -CH2C≡C-) 등을 포함한다.
"카보사이클", "카보사이클일", "카보사이클릭 고리" 및 "사이클로알킬"이라는 용어는, 일환형 고리로서 3 내지 12개의 탄소 원자(C3-C12) 또는 이환형 고리로서 7 내지 12개의 탄소 원자를 갖고 포화되거나 부분적으로 불포화된 1가 비-방향족 고리를 지칭한다. 7 내지 12개의 원자를 갖는 이환형 카보사이클은, 예를 들어 바이사이클로 [4,5], [5,5], [5,6] 또는 [6,6] 시스템으로서 배열될 수 있으며, 9 또는 10개의 고리 원자를 갖는 이환형 카보사이클은 바이사이클로 [5,6] 또는 [6,6] 시스템으로 배열되거나, 가교된(bridged) 시스템, 예컨대 바이사이클로[2.2.1]헵탄, 바이사이클로[2.2.2]옥탄 및 바이사이클로[3.2.2]노난으로 배열될 수 있다. 스파이로 잔기도 본 발명의 범주 내에 포함된다. 일환형 카보사이클의 예는, 비제한적으로 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 1-사이클로펜트-1-엔일, 1-사이클로펜트-2-엔일, 1-사이클로펜트-3-엔일, 사이클로헥실, 1-사이클로헥스-1-엔일, 1-사이클로헥스-2-엔일, 1-사이클로헥스-3-엔일, 사이클로헥사다이엔일, 사이클로헵틸, 사이클로옥틸, 사이클로노닐, 사이클로데실, 사이클로운데실, 사이클로도데실 등을 포함한다. 카보사이클일 기는 독립적으로, 본원에 기술된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된다.
"아릴"이란, 모(parent) 방향족 고리 시스템의 단일 탄소 원자로부터 하나의 수소 원자를 제거함으로써 유도된, 6 내지 20개의 탄소 원자(C6-C20)의 1가 방향족 탄화수소 라디칼을 의미한다. 몇몇 아릴 기는 예시적인 구조에서 "Ar"로 제시된다. 아릴은, 포화되거나 부분적으로 불포화된 고리 또는 방향족 카보사이클릭 고리에 융합된 방향족 고리를 포함하는 이환형 라디칼을 포함한다. 전형적인 아릴 기는, 비제한적으로 벤젠(페닐), 치환된 벤젠, 나프탈렌, 안트라센, 바이페닐, 인덴일, 인단일, 1,2-다이하이드로나프탈렌, 1,2,3,4-테트라하이드로나프틸 등으로부터 유도된 라디칼을 포함한다. 아릴 기들은 독립적으로, 본원에 기술된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된다.
"아릴렌"이란, 모 방향족 고리 시스템의 2개의 탄소 원자로부터 2개의 수소 원자를 제거함으로써 유도된, 6 내지 20개의 탄소 원자(C6-C20)의 2가 방향족 탄화수소 라디칼을 의미한다. 몇몇 아릴렌 기는 예시적 구조에서 "Ar"로 제시된다. 아릴렌은, 포화되거나 부분적으로 불포화된 고리 또는 방향족 카보사이클릭 고리에 융합된 방향족 고리를 포함하는 이환형 라디칼을 포함한다. 전형적인 아릴렌 기는, 비제한적으로 벤젠(페닐렌), 치환된 벤젠, 나프탈렌, 안트라센, 바이페닐렌, 인덴일렌, 인단일렌, 1,2-다이하이드로나프탈렌, 1,2,3,4-테트라하이드로나프틸 등으로부터 유도된 라디칼을 포함한다. 아릴렌 기는, 본원에 기술된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된다.
"헤테로사이클", "헤테로사이클일" 및 "헤테로사이클릭 고리"라는 용어는 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 3 내지 약 20개의 고리 원자(이때, 하나 이상의 고리 원자는 질소, 산소, 인 및 황으로부터 선택된 헤테로원자이고, 나머지 고리 원자는 C임)의 포화되거나 부분적으로 불포화된(즉, 고리 내에 하나 이상의 이중 및/또는 삼중 결합을 갖는) 카보사이클릭 라디칼을 지칭하며, 이때 하나 이상의 고리 원자는 독립적으로, 하기 기술되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된다. 헤테로사이클은, 3 내지 7개의 고리 일원(2 내지 6개의 탄소 원자, 및 N, O, P 및 S으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자)을 갖는 모노사이클 또는 7 내지 10개의 고리 일원(4 내지 9개의 탄소 원자, 및 N, O, P 및 S으로부터 선택되는 1 내지 6개의 헤테로원자)을 갖는 바이사이클, 예를 들어 바이사이클로 [4,5], [5,5], [5,6] 또는 [6,6] 시스템일 수 있다. 헤테로사이클은 문헌[Paquette, Leo A., "Principles of Modern Heterocyclic Chemistry"(W.A. Benjamin, New York, 1968)], 특히 1, 3, 4, 6, 7 및 9장; 문헌["The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs"(John Wiley & Sons, New York, 1950 to present)], 특히 13, 14, 16, 19 및 28권; 및 문헌[J. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566]에 기술되어 있다. "헤테로사이클일"은 또한, 포화되거나 부분적으로 불포화된 고리 또는 방향족 카보사이클릭 또는 헤테로사이클릭 고리와 헤테로사이클 라디칼이 융합된 라디칼을 포함한다. 헤테로사이클릭 고리의 예는, 비제한적으로 모폴린-4-일, 피페리딘-1-일, 피페라진일, 피페라진-4-일-2-온, 피페라진-4-일-3-온, 피롤리딘-1-일, 티오모폴린-4-일, S-다이옥소티오모폴린-4-일, 아조칸-1-일, 아제티딘-1-일, 옥타하이드로피리도[1,2-a]피라진-2-일, [1,4]다이아제판-1-일, 피롤리딘일, 테트라하이드로퓨란일, 다이하이드로퓨란일, 테트라하이드로티엔일, 테트라하이드로피란일, 다이하이드로피란일, 테트라하이드로티오피란일, 피페리딘o, 모폴리노, 티오모폴리노, 티옥산일, 피페라진일, 호모피페라진일, 아제티딘일, 옥세탄일, 티에탄일, 호모피페리딘일, 옥세판일, 티에판일, 옥사제핀일, 다이아제핀일, 티아제핀일, 2-피롤린일, 3-피롤린일, 인돌린일, 2H-피란일, 4H-피란일, 다이옥산일, 1,3-다이옥솔란일, 피라졸린일, 다이티안일, 다이티올란일, 다이하이드로피란일, 다이하이드로티엔일, 다이하이드로퓨란일, 피라졸리딘일이미다졸린일, 이미다졸리딘일, 3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산일, 3-아자바이사이클로[4.1.0]헵탄일, 아자바이사이클로[2.2.2]헥산일, 3H-인돌일, 퀴놀리진일 및 N-피리딜 우레아을 포함한다. 스파이로 잔기도 본 발명의 범주 내에 포함된다. 2개의 고리 원자가 옥소(=O) 잔기로 치환된 헤테로사이클릭 기의 예는 피리미딘온일 및 1,1-다이옥소-티오모폴린일이다. 본원에서 헤테로사이클 기는 독립적으로, 본원에 기술된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된다.
"헤테로아릴"이라는 용어는, 5원, 6원 또는 7원 고리의 1가 방향족 라디칼을 지칭하며, 독립적으로 질소, 산소 및 황으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 5 내지 20개의 원자의 융합된 고리 시스템들(이들 중 하나 이상이 방향족임)을 포함한다. 헤테로아릴 기의 예는 피리딘일(예를 들어, 2-하이드록시피리딘일 포함), 이미다졸일, 이미다조피리딘일, 피리미딘일(예를 들어, 4-하이드록시피리미딘일 포함), 피라졸일, 트라이아졸일, 피라진일, 테트라졸일, 퓨릴, 티엔일, 아이속사졸일, 티아졸일, 옥사다이아졸일, 옥사졸일, 아이소티아졸일, 피롤일, 퀴놀린일, 아이소퀴놀린일, 테트라하이드로아이소퀴놀린일, 인돌일, 벤즈이미다졸일, 벤조퓨란일, 신놀린일, 인다졸일, 인돌리진일, 프탈라진일, 피리다진일, 트라이아진일, 아이소인돌일, 프테리딘일, 퓨린일, 옥사다이아졸일, 트라이아졸일, 티아다이아졸일, 티아다이아졸일, 퓨라잔일, 벤조퓨라잔일, 벤조티오페닐, 벤조티아졸일, 벤즈옥사졸일, 퀸아졸린일, 퀸옥살린일, 나프티리딘일 및 퓨로피리딘일이다. 헤테로아릴 기는 독립적으로, 본원에 기술된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된다.
가능한 경우, 헤테로사이클 또는 헤테로아릴 기는 탄소 결합되거나(탄소-연결되거나) 질소 결합될(질소-연결될) 수 있다. 비제한적인 예로서, 탄소 결합된 헤테로사이클 또는 헤테로아릴은 피리딘의 2, 3, 4, 5 또는 6번 위치, 피리다진의 3, 4, 5 또는 6번 위치, 피리미딘의 2, 4, 5 또는 6번 위치, 피라진의 2, 3, 5 또는 6번 위치, 퓨란, 테트라하이드로퓨란, 티오퓨란, 티오펜, 피롤 또는 테트라하이드로피롤의 2, 3, 4 또는 5번 위치, 옥사졸, 이미다졸 또는 티아졸의 2, 4 또는 5번 위치, 아이속사졸, 피라졸 또는 아이소티아졸의 3, 4 또는 5번 위치, 아지리딘의 2 또는 3번 위치, 아제티딘의 2, 3 또는 4번 위치, 퀴놀린의 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8번 위치, 또는 아이소퀴놀린의 1, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8번 위치에서 결합된다.
비제한적인 예로서, 질소 결합된 헤테로사이클 또는 헤테로아릴은, 아지리딘, 아제티딘, 피롤, 피롤리딘, 2-피롤린, 3-피롤린, 이미다졸, 이미다졸리딘, 2-이미다졸린, 3-이미다졸린, 피라졸, 피라졸린, 2-피라졸린, 3-피라졸린, 피페리딘, 피페라진, 인돌, 인돌린 또는 1H-인다졸의 1번 위치, 아이소인돌 또는 아이소인돌린의 2번 위치, 모폴린의 4번 위치 및 카바졸 또는 β-카볼린의 9번 위치에서 결합된다.
"치료하다" 및 "치료"라는 용어는, 바람직하지 않은 생리학적 변화 또는 장애, 예컨대 관절염 또는 암의 발달 또는 전이를 늦추는(줄이는) 것이 목적인 치료법을 지칭한다. 본 발명의 목적상, 이롭거나 바람직한 임상 결과는, 비제한적으로 검출가능하거나 검출가능하지 않은, 증상의 완화, 질환의 정도의 감소, 질환의 안정화된(즉, 악화되지 않는) 상태, 질환 진행의 지연 또는 늦춤, 질환 상태의 개선 또는 일시적 완화, 및 차도(일부 또는 전부)를 포함한다. "치료"는 또한, 이러한 치료를 받지 않을 경우 예상된 생존에 비해 연장된 생존을 의미할 수도 있다. 치료가 필요한 개체는 증상 또는 장애를 갖는 개체를 포함한다.
"치료 효과량"이라는 표현은, (i) 특정 질환, 증상 또는 장애를 치료하거나, (ii) 특정 질환, 증상 또는 장애의 하나 이상의 징후를 약화, 개선 또는 제거하거나, (iii) 본원에 기술된 특정 질환, 증상 또는 장애의 하나 이상의 징후의 개시를 방지하거나 지연시키는 본 발명의 화합물의 양을 의미한다. 암의 경우, 약물의 치료 효과량은 암 세포의 개수를 줄이고; 종양 크기를 감소시키고; 주변 장기로 암 세포의 침투를 억제하고(즉, 어느 정도 늦추거나 바람직하게는 멈추고); 종양의 성장을 어느 정도 억제하고/하거나; 암과 관련된 하나 이상의 징후를 어느 정도 경감시킬 수 있다. 존재하는 암 세포의 성장을 막고/막거나 죽일 수 있는 만큼, 약물은 세포증식억제성 및/또는 세포독성일 수 있다. 암 치료법의 경우, 효능은, 예를 들어 질환 전이 시간(TTP)을 평가하고/하거나 반응 속도(RR)를 결정함으로써 측정될 수 있다.
본원에서 "염증성 장애"란, 과도하거나 비제어된 염증성 반응이 과도한 염증성 증상, 숙주 조직 손상 또는 조직 기능의 손실을 유발하는 임의의 질환, 장애 또는 증후군을 지칭할 수 있다. "염증성 장애"는 또한, 백혈구의 유입 및/또는 호중구 주화성에 의해 매개된 병리 증상을 지칭한다.
본원에서 "염증"이란, 조직의 손상 또는 파괴에 의해 유발된 국부적 보호 반응을 지칭하며, 이는, 손상시키는 인자 및 손상된 조직 둘 다를 파괴하거나 희석하거나 떼어내는(봉쇄하는) 역할을 한다. 염증은 백혈구의 유입 및/또는 호중구 주화성과 분명히 관련된다. 염증은 병원성 미생물 및 바이러스의 감염 및 비감염성 수단(예컨대, 심근 경색 또는 뇌졸증에 후행하는 외상 또는 재관류, 외래 항원에 대한 면역 반응, 및 자가면역 반응)으로부터 유래될 수 있다. 따라서, 화학식 I의 화합물로 치료할 수 있는 염증성 장애는, 특이적 방어 시스템의 반응뿐만 아니라 비특이적 방어 시스템의 반응과도 관련된 장애를 포함한다.
"특이적 방어 시스템"이란, 특정 항원의 존재에 대해 반응하는 면역 시스템의 구성요소를 지칭한다. 특이적 방어 시스템의 반응으로부터 유발되는 염증의 예는 외래 항원에 대한 고전적 반응, 자가면역 질환, 및 T-세포에 의해 매개된 지연된 유형의 과민반응을 포함한다. 만성 염증성 질환, 고체 이식된 조직 및 기관(예컨대, 신장 및 골수 이식물)에 대한 거부반응, 및 이식편 대 숙주 질환(GVHD)이 특이적 방어 시스템의 염증 반응의 추가적 예이다.
본원에서 "비특이적 방어 시스템"이라는 용어는, 면역 기억이 불가능한 백혈구(예컨대, 과립구 및 대식세포)에 의해 매개된 염증성 장애를 지칭한다. 적어도 부분적으로 비특이적 방어 시스템으로부터 유래하는 염증의 예는, 성인 (급성) 호흡 곤란 증후군(ARDS) 또는 다발성 장기 손상 증후군; 재관류 손상; 급성 사구체신염; 반응성 관절염; 급성 염증성 요소를 갖는 피부병; 급성 화농성 수막염 또는 기타 중추 신경계 염증성 장애(예컨대, 뇌졸증); 열 손상; 염증성 창자 질환; 과립구 수혈 관련 증후군; 및 사이토카인-유도된 독성과 같은 증상과 관련된 염증을 포함한다.
본원에서 "자가면역 질환"은, 조직 손상이 신체 자체의 구성요소에 대한 체액 또는 세포-매개된 반응과 관련된, 장애의 임의의 그룹을 지칭한다.
본원에서 "알레르기성 질환"은, 알레르기로부터 유래된 임의의 징후, 조직 손상 또는 조직 기능 손실을 지칭한다. 본원에서 "관절염 질환"은, 다양한 병인학에 기인하는 관절의 염증성 병변을 특징으로 하는 임의의 질환을 지칭한다. 본원에서 "피부염"은, 다양한 병인학에 기인하는 피부 염증을 특징으로 하는 임의의 피부 질환의 큰 계열을 지칭한다. 본원에서 "이식 거부반응"은, 이식된 조직과 주변 조직의 기능 손실, 통증, 부기, 백혈구 증가 및 혈소판 감소를 특징으로 하는, 이식된 조직(예를 들면, 기관 또는 세포)(예컨대, 골수)에 대한 임의의 면역 반응을 지칭한다. 본 발명의 치료 방법은, 염증성 세포 활성화와 관련된 장애의 치료 방법을 포함한다.
"염증성 세포 활성화"는, 증식성 세포 반응의 자극(예컨대, 비제한적으로 사이토카인, 항원 또는 자가-항원); 가용성 매개체(예컨대, 비제한적으로 사이토카인, 산소 라디칼, 효소, 프로스타노이드 또는 혈관작용성 아민)의 생산; 또는 염증성 세포(예를 들면, 비제한적으로 단핵구, 대식세포, T 림프구, B 림프구, 과립구(즉, 다핵형 백혈구, 예컨대 호중구, 호염기구 및 호산구), 비만 세포, 수지상 세포, 랑게르한스(Langerhans) 세포 및 내피 세포)에서 새롭거나 증가된 수의 매개체(예컨대, 비제한적으로 주요 조직적합성 항원 또는 세포 부착 분자)의 세포 표면 발현에 의한 유도를 지칭한다. 당업자는, 이러한 세포들의 표현형들 중 하나 또는 조합의 활성화가 염증성 장애의 개시, 영구화 또는 악화에 기여할 수 있음을 이해할 것이다.
"NSAID"라는 용어는, "비-스테로이드성 항-염증성 약물"에 대한 두문자어이며, 진통 및 해열 효과(의식을 손상시키지 않고, 상승된 체온을 낮추고 통증을 완화시킴)를 갖고 높은 투여량에서는 항-염증성 효과(염증을 감소시킴)를 갖는 치료제이다. "비-스테로이드성"이라는 용어는, (다른 광범위한 효과 중에서) 유사한 아이코사노이드-억압성 항-염증성 작용을 갖는 스테로이드와 상기 약물을 구별하는데 사용되다. 진통제로서, NSAID는 비-마약성이라는 점에서 특이적이다. NSAID는 아스피린, 이부프로펜 및 나프록센을 포함한다. NSAID는 일반적으로, 통증 및 염증이 존재하는 급성 또는 만성 증상의 치료를 위해 처방된다. NSAID는 일반적으로 다음 증상의 징후 경감을 위해 처방된다: 류마티스성 관절염, 골관절염, 염증성 관절증(예컨대, 강직성 척추염, 건선성 관절염, 라이터(Reiter) 증후군, 급성 통풍, 월경곤란증, 전이성 골 통증, 두통 및 편두통, 수술후 통증, 염증 및 조직 손상으로 인한 경도 내지 중등도 사이의(mild-to-moderate) 통증, 발열, 장폐색 및 신산통. 대부분의 NSAID는, 사이클로옥시게나아제-1(COX-1) 및 사이클로옥시게나아제-2(COX-2) 동종효소를 둘 다 억제하는, 사이클로옥시게나아제 효소의 비-선택적 억제제로서 작용한다. 사이클로옥시게나아제는 아라키돈산(이 자체는, 포스포리파아제 A2에 의해 세포 인지질 이중막으로부터 유도됨)으로부터 프로스타글란딘 및 트롬복산의 형성을 촉진한다. 프로스타글란딘은 (특히) 염증의 과정에서 전령 분자로서 작용한다. COX-2 억제제는 셀레콕시브, 에토리콕시브, 루미라콕시브, 파레콕시브, 로페콕시브 및 발데콕시브를 포함한다.
"암"이라는 용어는, 전형적으로 비제어된 세포 성장을 특징으로 하는, 포유동물의 생리적 증상을 지칭하거나 기술한다. "종양"은 하나 이상의 암 세포를 포함한다. 암의 예는, 비제한적으로 암종, 림프종, 모세포종, 육종 및 백혈병 또는 림프 악성종양을 포함한다. 이러한 암의 추가의 특정 예는 편평 세포 암(예컨대, 상피 편평 세포 암), 폐암, 예컨대 소세포 폐암, 비-소세포 폐암("NSCLC", 폐 선암 및 폐의 편평 암종, 복막암, 간세포암, 위암(예컨대, 위장암), 췌장암, 아교모세포종, 자궁경부 암, 난소암, 간암, 방광 암, 간종양, 유방 암, 결장 암, 직장 암, 결장직장 암, 자궁내막암 또는 자궁 암종, 침샘 암종, 신장암, 전립샘 암, 음문암, 갑상선암, 간 암종, 항문 암종, 음경 암종뿐만 아니라 두경부 암을 포함한다.
"혈액암(hematological malignancies)"(영국식 스펠링은 "Haematological" malignancies")은, 혈액, 골수 및 림프절에 영향을 주는 암 유형이다. 이들 세가지는 면역 시스템을 통해 밀접하게 연관되어 있기 때문에, 이들 세가지 중 하나에 영향을 주는 질환은 흔히 다른 질환에도 영향을 준다. 림프종은 림프절의 질환이지만, 이는 흔히 골수로 퍼져 혈액에 영향을 준다. 혈액암은 악성 종양(neoplasms)("암")이며, 일반적으로 혈액학 및/또는 종양학 전문가에 의해 치료된다. 몇몇 센터에서, "혈액학/종양학"은 내과의 하나의 하위 전문분야이지만, 다른 분야에서는 이를 별도의 분과로 간주한다(외과 및 방사선 종양학자도 존재한다). 모든 혈액학적 장애가 악성("암")은 아니며, 다른 혈액 증상도 혈액학자가 다룰 수 있다. 혈액암은 2개의 주요 혈액 세포 혈통(골수 및 림프 세포주)으로부터 유도될 수 있다. 골수 세포주는 일반적으로 과립구, 적혈구, 혈소판, 대식세포 및 비만 세포를 생산하고; 림프 세포주는 B, T, NK 및 혈장 세포를 생산한다. 림프종, 림프구성 백혈병 및 골수종은 림프 세포주로부터 유래하고, 급성 및 만성 골수성 백혈병, 골수형성이상 증후군 및 골수 증식성 질환은 근원이 골수이다. 백혈병은 급성 림프모구 백혈병(모든), 급성 골수성 백혈병(AML), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 급성 단핵구 백혈병(AMOL) 및 소 림프구성 림프종(SLL)을 포함한다. 림프종은 호지킨(Hodgkin) 림프종(모두 4개의 아형) 및 비-호지킨 림프종(모든 아형)을 포함한다.
"화학 치료제"는, 작용 기작에 관계 없이 암의 치료에 유용한 화합물이다. 화학치료제의 부류는, 비제한적으로 알킬화제, 항대사물질, 방추체 저해제 식물성 알칼로이드, 세포독성/항종양 항생제, 토포아이소머라제 억제제, 항체, 감광제 및 키나아제 억제제를 포함한다. 화학치료제는, "표적화된 요법" 및 통상적인 화학 요법에서 사용되는 화합물을 포함한다. 화학치료제의 예는 다음을 포함한다: 에를로티닙(타르세바(TARCEVA, 등록상표), 제네테크텍(Genentech)/OSI 파마슈티컬스(Pharm.)), 도세탁세(탁소텔(TAXOTERE, 등록상표), 사노피-아벤티스(Sanofi-Aventis)), 5-FU(플루오로우라실, 5-플루오로우라실, CAS 번호 51-21-8), 젬시타빈(젬자르(GEMZAR, 등록상표) 릴리(Lilly)), PD-0325901(CAS 번호 391210-10-9, 화이자(Pfizer)), 시스플라틴(시스-다이아민, 다이클로로백금(II), CAS 번호 15663-27-1), 카보플라틴(CAS 번호 41575-94-4), 파클리탁셀(탁솔(TAXOL, 등록상표), 브리스톨-마이어스 스퀴브 온콜로지(Bristol-Myers Squibb Oncology, 미국 뉴저지주 프린스톤), 트라스투주마브(trastuzumab)(허셉틴(HERCEPTIN, 등록상표), 제넨테크), 테모졸로미드(4-메틸-5-옥소-2,3,4,6,8-펜트아자바이사이클로 [4.3.0] 노나-2,7,9-트라이엔-9-카복스아마이드, CAS 번호 85622-93-1, 테모다르(TEMODAR, 등록상표), 테모달(TEMODAL, 등록상표), 셰링 플라우(Schering Plough)), 타목시펜((Z)-2-[4-(1,2-다이페닐부트-1-엔일)페녹시]-N,N-다이메틸에탄아민, 놀바덱스(NOLVADEX, 등록상표), 이스투발(ISTUBAL, 등록상표), 발레덱스(VALODEX, 등록상표) 및 독소루비신(아드리아마이신(ADRIAMYCIN, 등록상표), 아크티(Akti)-1/2, HPPD 및 라파마이신(rapamycin).
화학치료제의 추가의 예는 다음을 포함한다: 옥살리플라틴(엘록사틴(ELOXATIN, 등록상표), 사노피), 보르테조미브(벨케이드(VELCADE, 등록상표), 밀레니엄 팜(Millennium Pharm)), 수텐트(SUNITINIB, 등록상표), SU11248, 화이자), 레트로졸(페마라(FEMARA, 등록상표), 노바티스(Novartis)), 이마티니브 메실레이트(GLEEVEC, 등록상표), 노바티스), XL-518(Mek 억제제, 엑셀릭시스(Exelixis), 국제 특허 출원 공개 제 WO 2007/044515 호), ARRY-886(Mek 억제제, AZD6244, 어레이 바이오파마(Array BioPharma), 아스트라 제네카(Astra Zeneca)), SF-1126(PI3K 억제제, 세마포어 파마슈티컬스(Semafore Pharmaceuticals)), BEZ-235(PI3K 억제제, 노바티스), XL-147(PI3K 억제제, 엑셀릭시스), PTK787/ZK 222584(노바티스), 풀베스트란트(파슬로덱스(FASLODEX, 등록상표), 아스트라제네카), 류코보린(폴린산), 라파마이신(시롤리무스, 라파문(RAPAMUNE, 등록상표), 와이어쓰), 라파티니브(타이케르브(TYKERB, 등록상표), GSK572016, 글락소 스미스 클라인(Glaxo Smith Kline)), 로나파니브(사르사르(SARASAR, 상표명), SCH 66336, 쉐링 플로), 소라페니브(넥사바르(NEXAVAR, 등록상표), BAY43-9006, 배이어 랩스(Bayer Labs)), 제피티니브(이레싸(IRESSA, 등록상표), 아스트라 제네카), 이리노테칸(캠프토사르(CAMPTOSAR, 등록상표), CPT-11, 화이자), 티피파니브(자르네스트라(ZARNESTRA, 등록상표), 존슨앤존슨(Johnson&Johnson)), 아브락산(ABRAXANE, 상표명)(크레모포-비함유), 파클리탁셀의 알부민-조작된 나노입자 포뮬레이션(일리노이주 샤움버그 소재의 아메리칸 파마슈티칼 파트너스(American Pharmaceutical Partners, 미국 일리노이주 샤움버그)), 반데타니브(rINN, ZD6474, 작티마(ZACTIMA, 등록상표), 아스트라 제네카), 클로람부실, AG1478, AG1571(SU 5271; 수겐(Sugen)), 템시롤리무스(토리셀(TORISEL, 등록상표), 와이어쓰), 파조파니브(글락소 스미스 클라인), 칸포스파미드(텔사이타(TELCYTA, 등록상표), 텔릭(Telik)), 티오테파 및 사이클로스포스파미드(사이톡산(CYTOXAN, 등록상표), 네오사르(NEOSAR), 등록상표); 알킬 설포네이트, 예컨대 부설판, 임프로설판 및 피포설판; 아지리딘, 예컨대 벤조도파, 카보쿠온, 메투레도파 및 우레도파; 에틸렌이민 및 메틸라멜라민류, 예컨대 알트레타민, 트리에틸렌멜아민, 트리에틸렌포스포아미드, 트리에틸렌티오포스포아미드 및 트리메틸로멜라민; 아세토제닌(특히, 불락타신 및 불라타시논); 캠토테신(예컨대, 합성 유사체 토포테칸); 브리오스타틴; 칼리스타틴; CC-1065(예컨대, 이의 아도젤레신, 카젤레신 및 비젤레신 합성 유사체); 크립토피신(구체적으로, 크립토피신 1 및 크립토피신 8); 돌라스타틴; 듀오카마이신(예컨대, 합성 유사체, KW-2189 및 CB1-TM1); 엘류테로빈; 판크라티스타틴; 사르코딕틴; 스폰지스타틴; 질소 머스타드, 예컨대 클로람부실, 클로르나파진, 클로로포스파미드, 에스트라무스틴, 이포스파미드, 메클로레타민, 메클로레타민 옥사이드 염산염, 멜팔란, 노벰비친, 페네스테린, 프레드니무스틴, 트로포스파미드, 우라실 머스타드; 니트로소우레아, 예컨대 카무스틴, 클로로조토신, 포테무스틴, 로무스틴, 니무스틴 및 라님누스틴; 항생제, 예컨대 에네디인 항생제(예, 칼리케아미신, 칼리케아미신 감마1I, 칼리케아미신 오메가I1(Angew Chem. Intl. Ed. Engl. (1994) 33:183-186); 다인미신(dynemicin), 다인미신 A; 비스포스포네이트, 예컨대 클로드로네이트; 에스페라미신; 뿐만 아니라 네오카르지노스타틴 발색단 및 관련 색소단백질 에네디인 항생제 발색단), 아클라시노미신, 악티노마이신, 오트라마이신, 아자세린, 블레오마이신, 캑티노마이신, 카라비신, 카미노마이신, 카지노필린, 크로모마이시니스, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-디아조-5-옥소-L-노르류신, 모르폴리노-독소루비신, 시아노모르폴리노-독소루비신, 2-피롤리노-독소루비신 및 데옥시독소루비신), 에피루비신, 에소루비신, 이다루비신, 네모루비신, 마르셀로마이신, 미토마이신, 예컨대 미토마이신 C, 미코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 피플로마이신, 포르피로마이신, 퓨로마이신, 쿠엘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 투베르시딘, 우베니멕스, 지노스타틴, 조루비신; 항대사물질, 예컨대 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실(5-FU); 엽산 유사체, 예컨대 데노프테린, 메토트렉세이트, 프테로프테린, 트리메트렉세이트; 퓨린 유사체, 예컨대 플루다라빈, 6-머캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌; 피리미딘 유사체, 예컨대 안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카모푸르, 시타라빈, 디데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 플록스우리딘; 안드로겐, 예컨대 칼러스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토락톤; 항-부신류, 예컨대 아미노글루테티미드, 미토탄, 트릴로스탄; 엽산 보충물, 예컨대 프롤린산; 아세글라톤; 알도포스파미드 글리코사이드; 아미노레불린산; 에닐우라실; 암사크린; 베스트라부실; 비산트렌; 에다트락세이트; 데포파민; 데메콜친; 디아지쿠온; 엘프오르니틴; 엘립티늄 아세테이트; 에포틸론; 에토글루시드; 갈륨 니트레이트; 하이드록시우레아; 렌티난; 로니다이닌; 메이탄시노이드, 예컨대 메이탄신 및 안사미토신; 미토구라존; 미토잔트론; 모피단몰; 니트라에린; 펜토스타틴; 페나메트; 피라루비신; 로소잔트론; 포도필린산; 2-에틸하이드라자이드; 프로카바진; PSK, 등록상표) 폴리사카라이드 복합체(JHS 네추럴 프로덕츠(JHS Natural Products, 미국 오레곤주 유진)); 라족산; 리족신; 시조피란; 스피로게르마늄; 테누아존산; 트리아지쿠온; 2,2',2"-트리클로로트리에틸아민; 트리초테세네스(특히, T-2 독소, 베라쿠린 A, 로리딘 A 및 안구이딘); 우레탄; 빈데신; 다카바진; 만노무스틴; 미토브로니톨; 미토락톨; 피포브로만; 가사이토신; 아라비노사이드("Ara-C"); 사이클로포스파미드; 티오테파; 6-티오구아닌; 머캅토퓨린; 메토트렉세이드; 백금 유사체, 예컨대 시스플라틴 및 카보플라틴; 빈블라스틴; 에토포사이드(VP-16); 이포스파미드; 미토잔트론; 빈크리스틴; 비노렐빈(NAVELBINE, 등록상표)); 노반트론; 테니포사이드; 에다트렉세이트; 다우노마이신; 아미노프테린; 카페시타빈(XELODA, 등록상표), 로슈(Roche)); 이반드로네이트; CPT-11; 토포이소머라제 억제제 RFS 2000; 디플루오로메틸 오르니틴(DMFO); 레티노이드, 예컨대 리틴산; 및 전술한 임의의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염, 산 및 유도체를 포함한다.
또한, "화학치료제"의 정의에는 (i) 항에스트로겐 및 선택적 에스트로겐 수용체 조절인자(SERM)와 같이 종양에서 호르몬 작용을 조절하거나 저해하는 작용을 하는 항호르몬 제제, 예컨대 타목시펜(예컨대, 놀바덱스(NOLVADEX, 등록상표), 타목시펜시트레이트), 랄옥시펜, 드롤옥시펜, 4-하이드록시타목시펜, 트리옥시펜, 케옥시펜, LY117018, 오나프리스톤 및 파레스톤(FARESTON, 등록상표)(토레미핀 시트레이트); (ii) 부신에서 에스트로겐 생산을 조절하는 효소 아로마타제를 저해하는 아로마타제 억제제, 예컨대 4(5)-이미다졸, 아미노글루테티미드, 메가세(MEGASE, 등록상표)(메제스트롤 아세테이트), 아로마신(AROMASIN, 등록상표)(엑세메스탄; 화이자), 포메스타니, 파드로졸, 리비소르(RIVISOR, 등록상표)(보로졸), 페마라(FEMARA, 등록상표)(레트로졸; 노바티스), 및 아리미덱스(ARIMIDEX, 등록상표)(아나스트로졸; 아스트라제네카); (iii) 항-안드로겐, 예컨대 플루타미드, 닐루타미드, 비칼루타미드, 류프롤리드 및 고세렐린; 뿐만 아니라 트록사시타빈(1,3-디옥솔란 뉴클레오사이드 사이토신 유사체); (iv) 단백질 키나아제 억제제, 예컨대 MEK 억제제(국제 특허 출원 공제 제 WO 2007/044515 호); (v) 지질 키나아제 억제제; (vi) 안티센스 올리고뉴클레오타이드, 구체적으로 이상 세포 증식에 관련된 신호화 경로에서 유전자의 발현을 저해하는 것, 예컨대 PKC-알파, Raf 및 H-Ras, 예컨대 오블리머센(제나센스(GENASENSE, 등록상표), 젠타 인코포레이티드(Genta Inc.)); (vii) 리보자임, 예컨대 VEGF 발현 억제제(예컨대, 안지오자임(ANGIOZYME, 등록상표)) 및 HER2 발현 억제제; (viii) 백신, 예컨대 유전자요법 백신, 예컨대, 알로벡틴(ALLOVECTIN, 등록상표), 류벡틴(LEUVECTIN, 등록상표) 및 박시드(VAXID, 등록상표), 프로류킨(PROLEUKIN, 등록상표) rIL-2; 토포이소머라제 1 억제제, 예컨대 루르토테칸(LURTOTECAN, 등록상표); 아바렐릭스(ABARELIX, 등록상표) rmRH; (ix) 항-혈관형성제, 예컨대 베바시주마드(아바스틴(AVASTIN, 등록상표), 제넨테크); 및 전술한 임의의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염, 산 및 유도체가 포함된다.
또한, "화학치료제"의 정의에는 치료 항체, 예컨대 알렘투주마브(캄파쓰(Campath)), 베박시주마브(아바스틴(AVASTIN, 등록상표), 제넨테크); 세툭시마브(ERBITUX, 등록상표), 임클론(Imclone)); 파니투무마브(벡티빅스(VECTIBIX, 등록상표)), 암젠(Amgen)), 리툭시마브((리툭산(RITUXAN, 등록상표)), 제넨테크/바이오겐 아이덱(Biogen Idec)), 퍼투주마브(옴니타르그(OMNITARG, 상표명), 2C4, 제넨테크), 트라스투주마브(헤르셉틴(HERCEPTIN, 등록상표), 제넨테크), 토시투모마브(벡사르(Bexxar), 코릭시아(Corixia)) 및 항체 약물 접합체, 젬투주마브 오조가미신(마일로타르그(MYLOTARG, 등록상표), 와이어쓰)가 포함된다.
본 발명의 Btk 억제제와 함께 화학치료제로 치료 잠재력이 있는 인간화된 단클론 항체로는, 알렘투주마브, 아폴리주마브, 아셀리주마브, 아틀리주마브, 바피뉴주마브, 베박시주마브, 비바투주마브 머탄신, 칸투주마브 머탄신, 세델리주마브, 세르톨리주마브 페골, 시드푸시투주마브, 시드투주마브, 다클리주마브, 에큘리주마브, 에팔리주마브, 에프라투주마브, 에를리주마브, 펠비주마브, 폰톨리주마브, 젬투주마브 오조가미신, 이노투주마브 오조가미신, 이필리무마브, 라베투주마브, 린투주마브, 마투주마브, 메폴리주마브, 모타비주마브, 모토비주마브, 나탈리주마브, 니모투주마브, 놀로비주마브, 누마비주마브, 오클레리주마브, 오마리주마브, 팔리비주마브, 파스콜리주마브, 펙푸시투주마브, 펙투주마브, 퍼투주마브, 펙셀리주마브, 랄리비주마브, 라니비주마브, 레슬리비주마브, 레슬리주마브, 레시비주마브, 로벨리주마브, 루플리주마브, 시브로투주마브, 시플리주마브, 손투주마브, 타카투주마브 테트락세탄, 타도시주마브, 탈리주마브, 테피바주마브, 토실리주마브, 토랄리주마브, 트라스투주마브, 투코투주마브 셀모류킨, 투쿠시투주마브, 우마비주마브, 우르톡사주마브 및 비실리주마브를 포함한다.
"대사물질"은 특정 화합물 또는 이의 염이 체내 대사를 통해 생산하는 산물이다. 화합물의 대사물질은 당 분야에 공지된 통상의 기술로 동정할 수 있고, 이의 활성은 본 명세서에 기술된 바와 같은 시험방법으로 측정할 수 있다. 이러한 산물은, 예컨대 투여된 화합물의 산화, 환원, 가수분해, 아미드화, 탈아미드화, 에스테르화, 탈에스테르화, 효소 절단 등으로부터 생성될 수 있다. 따라서, 본 발명은 본 발명의 화합물의 대사물질, 예컨대 포유 동물과 본 발명의 화합물을 이의 대사물질을 생성하기에 충분한시간 동안 접촉시키는 것을 포함하는 방법에 의해 생산된 화합물을 포함한다.
"패키지 동봉물"이라는 용어는 상업적 치료 제품 패키지에 통상적으로 포함된 설명서를 의미하기 위해 사용되며 지시, 용법, 투여량, 투여, 상기 치료 제품의 사용에 관한 금기 및/또는 경고에 대한 정보를 포함한다.
"키랄"이라는 용어는 거울상 파트너의 비중첩성을 나타내는 분자를 의미하는 반면, "비키랄"이라는 용어는 거울상 파트너에 중첩될 수 있는 분자를 의미한다.
"입체 이성질체"라는 용어는, 화학적 구성은 동일하지만 원자 또는 기의 공간 배열에서 상이한 화합물을 의미한다.
"부분입체 이성질체"라는 용어는, 2개 이상의 키랄성 중심을 보유하고 분자가 서로 거울상이 아닌 입체 이성질체를 의미한다. 부분입체 이성질체는 물성, 예컨대 융점, 비등점, 분광 성질 및 반응성이 다르다. 부분입체 이성질체의 혼합물은 전기영동 및 크로마토그래피와 같은 고해상능 분석 절차로 분리할 수 있다.
"거울상 이성질체"는, 서로 비중첩성 거울상인, 하나의 화합물의 2종의 입체 이성질체를 의미한다.
본 명세서에 사용된 입체화학적 정의 및 관례는 일반적으로 문헌[S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; and Eliel, E. and Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Chemicals", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994]을 따른다. 본 발명의 화합물은 비대칭 또는 키랄 중심을 함유할 수 있고, 따라서 여러 입체 이성질체 형태로 존재한다. 본 발명의 화합물의 모든 입체 이성질체 형태, 예컨대 비제한적으로 부분입체 이성질체, 거울상 이성질체 및 아트로프 이성질체뿐만 아니라 이들의 혼합물, 예컨대 라세미 혼합물도 본 발명의 일부를 구성한다. 많은 유기 화합물은 광학적 활성 형태로 존재하며, 즉 평면-편광의 평면을 회전시키는 능력을 나타낸다. 광학적 활성 화합물을 나타내는데 있어서, 접두사 D 및 L, 또는 R 및 S는 키랄 중심(들)에 대한 분자의 절대 배열을 의미한다. 접두사 d 및 l, 또는 (+) 및 (-)는 화합물에 의한 평면-편광의 회전 기호를 나타내는데 사용되고, (-) 또는 l은 화합물이 좌선성임을 의미한다. (+) 또는 d 접두어가 있는 화합물은 우선성이다. 주어진 화학 구조에서, 이들 입체 이성질체는 서로 거울상이라는 것을 제외하고는 동일하다. 따라서, 특정 입체 이성질체는 거울상 이성질체로 지칭될 수 있고, 이러한 이성질체들의 혼합물은 종종 거울상 이성질체 혼합물이라 지칭된다. 거울상 이성질체의 50:50 혼합물은 라세미 혼합물 또는 라세미체라 지칭되며, 화학 반응 또는 과정에서 입체선택 또는 입체특이성이 전혀 없는 경우에 나타날 수 있다. "라세미 혼합물" 및 "라세미체"라는 용어는, 광학 활성이 없는 2종의 거울상 이성질체의 등몰(equimolar) 혼합물을 의미한다.
"호변 이성질체" 또는 "호변 이성질체 형태"라는 용어는, 낮은 에너지 장벽을 통해 상호변환할 수 있는 상이한 에너지의 구조 이성질체를 의미한다. 예를 들어, 광자 호변 이성질체(또한, 양성자성 호변 이성질체로도 알려져 있음)는 광자의 이동을 통한 상호변환, 예컨대 케토-에놀 및 이민-엔아민 이성질체화를 포함한다. 원자가 호변 이성질체는 결합 전자 중 일부 전자의 재편성에 의한 상호전환을 포함한다.
"약학적으로 허용가능한 염"이라는 용어는, 생물학적으로 또는 다른 측면에서 바람직하지 않은 것이 아닌 염을 나타낸다. 약학적으로 허용가능한 염은 산 및 염기 부가 염을 둘다 포함한다. "약학적으로 허용가능한"이라는 어구는, 성분 또는 조성물이 조성물을 차지하는 다른 구성요소 및/또는 치료할 포유동물과 화학적으로 및/또는 독소적으로 상용성이어야 함을 나타낸다.
"약학적으로 허용가능한 산 부가 염"이라는 용어는, 무기산(예컨대, 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 카본산, 인산) 및 유기산의 지방족, 사이클로지방족, 방향족, 방향지방족, 헤테로사이클릭 카복실산 및 설폰산 부류로부터 선택되는 유기산(예컨대 폼산, 아세트산, 프로피온산, 글라이콜산, 글루콘산, 락트산, 피루브산, 옥살산, 말산, 말레산, 말론산, 석신산, 퓨마르산, 타르타르산, 시트르산, 아스파트산, 아스코르브산, 글루탐산, 안트라닐산, 벤조산, 신남산, 만델산, 엠본산, 페닐아세트산, 메탄설폰산 "메실레이트", 에탄설폰산, p-톨루엔설폰산 및 살리실산)과 형성된 약학적으로 허용가능한 염을 나타낸다.
"약학적으로 허용가능한 염기 부가 염"이라는 용어는, 유기 또는 무기 염기와 형성된 약학적으로 허용가능한 염을 나타낸다. 약학적으로 허용가능한 무기 염기의 예는 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망간 및 알루미늄 염을 포함한다. 약학적으로 허용가능한 비독성 유기 염기로부터 유도된 염은, 1급, 2급 및 3급 아민, 치환된 아민(자연발생적 치환된 아민 포함), 환형 아민 및 염기성 이온 교환 수지(예컨대, 아이소프로필아민, 트라이메틸아민, 다이에틸아민, 트라이에틸아민, 트라이프로필아민, 에탄올아민, 2-다이에틸아미노에탄올, 트라이메트아민, 다이사이클로헥실아민, 라이신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 하이드라브아민, 콜린, 베타인, 에틸렌다이아민, 글루코스아민, 메틸글루코사민, 테오브로민, 퓨린, 피페라진, 피페리딘, N-에틸피페리딘 및 폴리아민 수지)의 염을 포함한다.
"용매화물"이란, 하나 이상의 용매 분자와 본 발명의 화합물의 연합체 또는 착체를 지칭한다. 용매화물을 형성하는 용매의 예는, 비제한적으로 물, 아이소프로판올, 에탄올, 메탄올, DMSO, 에틸아세테이트, 아세트산 및 에탄올아민을 포함한다.
"EC50"이라는 용어는, 반수 최대 효과 농도이며, 생체 내에서 특정 효과의 최대치의 50%를 수득하는데 필요한 특정 화합물의 혈장 농도를 나타낸다.
"Ki"라는 용어는, 억제 상수이며, 수용체에 대한 특정 억제제의 절대 결합 친화도를 나타낸다. 이는, 경쟁 결합 분석을 이용하여 측정되며, 경쟁 리간드(예컨대, 방사리간드)가 존재하는 않는 경우 특정 억제제가 수용체의 50%를 차지하는 농도와 동일하다. Ki 값은 pKi 값(-log Ki)으로 대수적으로 전환될 수 있으며, 이때 더 높은 값은 지수적으로 더 큰 효능을 나타낸다.
"IC50"이라는 용어는, 반수 최대 억제 농도이며, 실험관 내에서 생물학적 과정의 50% 억제를 수득하는데 필요한 특정 화합물을 농도를 나타낸다. IC50 값은 pIC50 값(-log IC50)으로 대수적으로 전환될 수 있으며, 이때 더 높은 값은 지수적으로 더 큰 효능을 나타낸다. IC50 값은 절대값이 아니며, 실험 조건, 예컨대 사용되는 농도에 따라 다르며, 청-프루소프(Cheng-Prusoff) 방정식을 사용하여 절대 억제 상수(Ki)로 전환될 수 있다(문헌[Biochem. Pharmacol. (1973) 22:3099] 참조). 다른% 억제 매개변수, 예컨대 IC70, IC90 등도 계산할 수 있다.
"본 발명의 화합물" 및 "화학식 I의 화합물"이라는 용어는, 화학식 I의 화합물 및 그의 입체 이성질체, 기하 이성질체, 호변 이성질체, 용매화물, 대사물질 및 약학적으로 허용가능한 염 및 전구약물을 포함한다.
본원에서 제시된 화학식 I의 화합물을 비롯한 임의의 화학식 또는 구조식은 또한, 수화물, 용매화물 및 이러한 화합물의 다형체 및 이들의 혼합물을 나타내는 것으로 의도된다.
본원에서 제시된 화학식 I의 화합물을 비롯한 임의의 화학식 또는 구조식은 또한, 상기 화합물의 비-표지된 형태뿐만 아니라 동위원소-표지된 형태도 나타내는 것으로 의도된다. 동위원소-표지된 화합물은, 선택된 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 하나 이상의 원자가 대체된 것을 제외하고는, 본원에 제시된 화학식으로 도시된 구조를 갖는다. 본 발명의 화합물 내로 혼입될 수 있는 동위원소의 예는, 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 불소 및 염소의 동위원소, 예컨대 비제한적으로 2H(중수소, D), 3H(삼중수소), 11C, 13C, 14C, 15N, 18F, 31P, 32P, 35S, 36Cl 및 125I를 포함한다. 본 발명의 다양한 동위원소-표지된 화합물, 예를 들어 방사성 동위원소 3H, 13C 및 14C가 혼입된 화합물이 포함된다. 이러한 동위원소-표지된 화합물은 대사 연구, 반응 역학 연구, 검출 또는 이미지화 기법, 예컨대 양전자 방출 단층 촬영술(PET) 또는 단일-광자 방출 계산 단층 촬영술(SPECT)(약물 또는 기질 조직 분포 분석 포함), 또는 환자의 방사성 치료에 유용할 수 있다. 본 발명의 중수소-표지되거나 치환된 치료 화합물은, 분포, 대사 및 분비(ADME)와 관련하여 개선된 DMPK(약물 대사 및 약물 동태학) 특성을 가질 수 있다. 더 무거운 동위원소(예컨대, 중수소)를 사용한 치환은, 더 큰 대사 안정성(예컨대, 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여량 필요성)로부터 유발되는 특정 치료 이점을 제공할 수 있다. 18F-표지된 화합물은 PET 또는 SPECT 연구에 유용할 수 있다. 본 발명의 동위원소-표지된 화합물 및 그의 전구약물은 일반적으로, 반응식에 개시된 절차를 수행함으로써 또는 후술되는 실시예 및 제조방법에서 비-동위원소-표지된 시약을 시판되는 동위원소-표지된 시약으로 대체함으로써 제조할 수 있다. 또한, 더 무거운 동위원소, 특히 중수소(즉, 2H 또는 D)를 사용한 대체는, 더 큰 대사 안정성(예컨대, 증가된 생체내 반감기, 감소된 투여량 필요성 또는 치료 지수에서의 개선)으로부터 유래하는 특정 치료 이점을 제공할 수 있다. 이러한 문맥에서 중수소는 화학식 I의 화합물의 치환기로 간주됨이 이해된다. 이러한 더 무거운 동위원소(특히, 중수소)의 농도는, 동위원소 풍부 인자(isotopic enrichment factor)에 의해 정의된다. 본 발명의 화합물에서, 특정 동위원소로 지정되지 않은 임의의 원자는, 그 원자의 임의의 안정한 동위원소를 나타내는 것으로 의도된다. 달리 언급되지 않는 한, 하나의 위치가 특히 "H" 또는 "수소"로 지정된 경우, 그 위치는, 자연 존재비 동위원소 조성을 갖는 것으로 이해된다. 따라서, 본 발명의 화합물에서, 구체적으로 중수소(D)로 지정된 임의의 원자는 중수소를 나타내는 것으로 의도된다.
헤테로아릴 피리돈 및 아자 - 피리돈 화합물
본 발명은, Btk 키나아제에 의해 매개되는 질환, 증상 및/또는 장애의 치료에 잠재적으로 유용한 하기 화학식 I의 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 화합물(입체 이성질체, 호변 이성질체, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 포함), 예컨대 화학식 Ia-Ii 및 그들의 약학 조성물을 제공한다:
[화학식 I]
Figure pat00002
상기 식에서,
X1은 CR1 또는 N이고;
X2는 CR2 또는 N이고;
X3는 CR3 또는 N이되;
X1, X2 및 X3 중 1개 또는 2개는 N이고;
R1, R2 및 R3는 독립적으로, H, F, Cl, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2OH 및 C1-C3 알킬로부터 선택되고;
R4는 H, F, Cl, CN, -CH2OH, -CH(CH3)OH, -C(CH3)2OH, -CH(CF3)OH, -CH2F, -CHF2, -CH2CHF2, -CF3, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHC(O)CH3, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2OH, 사이클로프로필, 사이클로프로필메틸, 1-하이드록시사이클로프로필, 이미다졸일, 피라졸일, 3-하이드록시-옥세탄-3-일, 옥세탄-3-일 및 아제티딘-1-일로부터 선택되고;
R5는, 임의적으로 치환된, C6-C20 아릴, C3-C12 카보사이클일, C2-C20 헤테로사이클일, C1-C20 헤테로아릴, -(C6-C20 아릴)-(C2-C20 헤테로사이클일), -(C1-C20 헤테로아릴)-(C2-C20 헤테로사이클일), -(C1-C20 헤테로아릴)-(C2-C20 헤테로사이클일)-(C2-C20 헤테로사이클일), -(C1-C20 헤테로아릴)-(C2-C20 헤테로사이클일)-(C1-C6 알킬), -(C1-C20 헤테로아릴)-(C1-C6 알킬), -(C2-C20 헤테로사이클일)-(C1-C6 알킬), -(C2-C20 헤테로사이클일)-(C3-C12 카보사이클일), -(C1-C20 헤테로아릴)-(C3-C12 카보사이클일) 또는 -(C1-C20 헤테로아릴)-C(=O)-(C2-C20 헤테로사이클일)이고;
R6는 H, -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2OH, -CHF2, -NH2 또는 -OH이고;
R7은 하기 구조식
Figure pat00003
으로부터 선택되되, 이때 물결형 라인은 부착 부위를 나타내고,
Y1 및 Y2는 독립적으로, CH 및 N으로부터 선택되되, Y1 및 Y2가 각각 N은 아니고;
상기 알킬, 카보사이클일, 헤테로사이클일, 아릴 및 헤테로아릴은, 독립적으로 F, Cl, Br, I, -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH(OH)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH2OH, -CH2CH2SO2CH3, -CH2OP(O)(OH)2, -CH2F, -CHF2, -CF3, -CH2CF3, -CH2CHF2, -CH(CH3)CN, -C(CH3)2CN, -CH2CN, -CO2H, -COCH3, -CO2CH3, -CO2C(CH3)3, -COCH(OH)CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -N(CH3)COCH3, -NHS(O)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3, -NO2, =O, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2OCH3, -OCH2CH2OH, -OCH2CH2N(CH3)2, -OP(O)(OH)2, -S(O)2N(CH3)2, -SCH3, -S(O)2CH3, -S(O)3H, 사이클로프로필, 옥세탄일, 아제티딘일, 1-메틸아제티딘-3-일)옥시, N-메틸-N-옥세탄-3-일아미노, 아제티딘-1-일메틸 및 모폴리노로부터 선택되는 하나 이상의 기로 임의적으로 치환된다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 하기 화학식 Ia 내지 Ic의 화합물을 포함한다.
Figure pat00004
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 또한 하기 화학식 Id 내지 Ii의 화합물을 포함한다.
Figure pat00005
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는, X1이 N이거나, X1이 N이거나, X1이 N이거나, X1 및 X3가 N이거나, X1 및 X2가 N이거나, X2 및 X3가 N인, 화학식 Ic-Ii로 도시된 바와 같은 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는, R5가, 피라졸일, 피리딘일, 피리미딘일, 5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일, 5-아세틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일, 6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일 및 1-메틸-5-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일로부터 선택되는 임의적으로 치환된 C1-C20 헤테로아릴인, 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는, R5가 -(C1-C20 헤테로아릴)-(C2-C20 헤테로사이클일)(이때, 헤테로아릴은 임의적으로 치환된 피리딘일이고, 헤테로사이클일은 임의적으로 치환된 피페라진일임)인, 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는, R5가, F, Cl, -CH3, -S(O)2CH3, 사이클로프로필, 아제티딘일, 옥세탄일 및 모폴리노로부터 선택되는 하나 이상의 기로 임의적으로 치환된 페닐인, 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는, R5가 하기 구조식으로부터 선택되되, 이때 물결형 라인은 부착 부위를 나타내는, 화합물을 포함한다.
Figure pat00006
Figure pat00007
Figure pat00008
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는, R5가
Figure pat00009
이되, 이때 R8이 H, -CH3, -CH2OCH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH2OH, -CH2CH2OCH3, -CH2F, -CHF2, -CF3, -CH2CF3, -CH2CHF2, -CH(CH3)CN, -C(CH3)2CN, -CH2CN, -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH(CH3)2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2OH, 사이클로프로필 및 옥세탄일로부터 선택되는, 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는, R6가 CH3인 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는, Y1이 CH이고 Y2가 N이거나, Y1이 N이고, Y2가 CH이거나, Y1 및 Y2가 각각 CH이거나, Y1 및 Y2가 각각 CH이고, R6가 CH3인, 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 하기 표 1 및 2의 화합물을 포함한다.
본 발명의 화학식 I의 화합물은 비대칭 또는 키랄 중심을 함유할 수 있으며, 따라서 상이한 입체 이성질체 형태로 존재할 수 있다. 본 발명의 화합물의 모든 입체 이성질체 형태, 예컨대 비제한적으로, 부분입체 이성질체, 거울상 이성질체 및 아트로프 이성질체뿐만 아니라 이들의 혼합물, 예컨대 라세미 혼합물이 본 발명의 일부를 형성하는 것으로 의도된다.
본 발명은 또한, 모든 부분입체 이성질체(시스-트랜스(기하) 및 형태 이성질체 포함)를 포함한다. 예를 들어, 화학식 I의 화합물이 이중 결합 또는 융합된 고리를 포함하는 경우, 이들의 시스- 및 트랜스- 형태뿐만 아니라 혼합물도 본 발명의 범주 내에 포함된다.
본원에 도시된 구조식에서, 임의의 특정 키랄 원자의 입체화학이 지정되지 않은 경우, 모든 입체 이성질체가 고려되며, 본 발명의 화합물로서 포함된다. 특정 배열을 나타내는 특정 고체 쐐기 또는 대쉬(---) 라인으로 입체화학이 지정되는 경우, 입체 이성질체는 그렇게 지정되고 정의된다.
본 발명의 화합물은 약학적으로 허용가능한 용매(예컨대, 물, 에탄올 등)와 함께 비용매화된 형태뿐만 아니라 용매화된 형태로 존재할 수 있으며, 본 발명은 용매화된 형태 및 비용매화된 형태 둘 다를 포함하는 것으로 의도된다.
본 발명의 화합물은 또한 상이한 호변 이성질체 형태로 존재할 수 있으며, 및 이러한 모든 형태가 본 발명의 범주 내에 포함된다. "호변 이성질체" 또는 "호변 이성질체 형태"라는 용어는, 낮은 에너지 장벽을 통해 상호전환가능한 상이한 에너지의 구조 이성질체들을 지칭한다. 예를 들어, 양자 호변 이성질체(양성자성 호변 이성질체로도 공지됨)는 양자의 이동을 통한 상호전환, 예컨대 케토-에놀 및 이민-엔아민 이성질체화를 포함한다. 원자가 호변 이성질체는 결합 원자들 중 일부의 재편성에 의한 상호전환을 포함한다.
생물학적 평가
효소 활성(또는 다른 생물학적 활성)의 억제제로서의 화학식 I의 화합물의 상대적 효율은, 각각의 화합물이 사전 정의된 정도로 활성을 억제한 때의 농도를 측정한 후, 그 결과를 비교하여 얻을 수 있다. 전형적으로, 바람직한 측정은 생화학 분석에서 50%의 활성을 억제하는 농도, 즉 50% 억제 농도 또는 "IC50"이다. IC50 값의 결정은 당 분야에 공지된 통상적 기술을 사용하여 이루어질 수 있다. 일반적으로, IC50은 연구 중인 억제제의 농도 범위의 존재 하에 주어진 효소의 활성을 측정하여 결정할 수 있다. 이어서, 실험적으로 수득한 효소 활성 값을 사용된 억제제 농도에 대하여 플로팅한다. 50% 효소 활성(임의의 억제제의 부재 하의 활성과 비교시)을 나타내는 억제제의 농도를 IC50 값으로 한다. 유사하게, 다른 억제 농도는 활성의 적절한 측정을 통하여 정의될 수 있다. 예컨대, 일부 설정에서는 90% 억제 농도, 즉 IC90 등을 측정하는 것이 바람직할 수 있다.
화학식 I의 화합물을 표준 생화학적 Btk 키나아제 분석에 의해 시험하였다(실시예 901).
화학식 I의 화합물을 시험하는데 사용될 수 있는 표준 세포 Btk 키나아제 분석을 위한 일반 절차는 라모스(Ramos) 세포 Btk 분석이다(실시예 902).
표준 세포질 B-세포 증식 분석은, Balb/c 마우스의 비장으로부터 정제된 B-세포를 사용하여 화학식 I의 화합물을 시험하는데 사용할 수 있다(실시예 903).
표준 T-세포 증식 분석은, Balb/c 마우스의 비장으로부터 정제된 T-세포를 사용하여 화학식 I의 화합물을 시험하는데 사용할 수 있다(실시예 904).
CD86 억제 분석은, 8 내지 16주차 Balb/c 마우스의 비장으로부터 정제된 총 마우스 지라세포를 사용한 B 세포 활성의 억제를 위해, 화학식 I의 화합물에 대해 수행할 수 있다(실시예 905)
B-ALL 세포 생존 분석은, 배양시 생존가능한 B-모든 세포의 수를 측정하기 위해 화학식 I의 화합물에 대해 수행할 수 있다(실시예 906).
CD69 전혈 분석은, 표면 IgM과 염소 F(ab')2 항-인간 IgM의 가교결합에 의해 활성화된 인간 전혈에서 B 림프구에 의해 CD69의 생산을 억제하는 화합물을 능력을 결정하기 위해, 화학식 I의 화합물에 대해 수행할 수 있다(실시예 907). CD69는, 림프구 이동 및 사이토카인 분비와 관련된 유형 II C-유형 렉틴이다. CD69 발현은 백혈구 활성화의 가장 초기에 이용가능한 지표를 나타내며, 그의 빠른 유도는 전사 활성화를 통해 일어난다(문헌[Vazquez et al (2009) Jour. of Immunology Published October 19, 2009, doi:10.4049/J. Immunol.0900839] 참고). 선택적 Btk 억제제에 의해 자극된 항원 수용체의 농도-의존성 억제는 림프구 활성화 마커 CD69의 세포 표면 발현을 유도한다(Honigberg et al (2010) Proc. Natl. Acad. Sci. 107(29):13075-13080). 따라서, 선택적 Btk 억제제에 의한 CD69 억제는 특정 B-세포 장애의 치료 효능과 관련될 수 있다. CD69 인간 혈액 FACS IC70 값은 하기 표 1 및 2에서 화학식 I의 예시적 화합물에 대해 나타내었다.
화학식 I의 예시적 화합물의 세포독성 또는 세포증식억제 활성은, 세포 배양 매질 내에서 증식성 포유동물 종양 세포주를 확립하고, 화학식 I의 화합물을 가하고, 세포를 약 6시간 내지 약 5일의 기간 동안 배양하고, 세포 생존능을 측정함으로써 측정할 수 있다(실시예 908). 세포에 기초한 시험관 내 분석은 생존능, 즉 증식(IC50), 세포독성(EC50) 및 세포자멸사(카스파제 활성화)의 유도를 측정하는데 사용되며, 혈액암 및 고형 종양에 대한 임상 효능을 예측하는데 유용할 수 있다.
화학식 I의 화합물과 화학치료제의 조합물의 시험관 내 효력은 실시예 908의 세포 증식 분석(셀타이터-글로(CellTiter-Glo, 등록상표) 발광 세포 생존능 분석, 프로메가 코포레이션(Promega Corp, 미국 위스콘신주 메디슨)으로부터 상업적으로 입수가능)에 의해 측정될 수 있다. 이러한 균질 분석 방법은 딱정벌레목(Coleoptera) 루시퍼라제의 재조합 발현에 기초한 것이며(미국 특허 제 5,583,024 호; 제 5,674,713 호; 제 5,700,670 호 참고), 존재하는 정량적 ATP(대사적으로 활성인 세포의 지시자임)에 기초하여, 배양시 생존가능한 세포의 수를 결정한다(문헌[Crouch et al (1993) J. Immunol. Meth. 160:81-88]; 미국 특허 제 6,602,677 호 참고). 셀타이터-글로(등록상표) 분석을 96 또는 384 웰 포멧에서 수행하여, 자동화된 고-처리량 스크리닝(HTS)을 처리할 수 있게 하였다(문헌[Cree et al (1995) Anticancer Drugs 6:398-404] 참고). 균질 분석 절차는 단일 시약(셀타이터-글로(등록상표) 시약)을 혈청-보충된 배지에서 배양된 세포에 직접 가하는 것을 포함한다. 세포 세척, 배지 제거 및 복수의 피펫팅 단계는 필요하지 않다. 이 시스템은 시약 첨가 및 혼합 후 10분 후에 384-웰 포멧에서 겨우 15 세포/웰을 검출한다.
균질 "첨가-혼합-측정" 포멧은 세포 용해, 및 존재하는 ATP 양에 비례하는 발광 신호의 생성을 제공한다. ATP 양은 배양 내에 존재하는 세포의 수에 직접 비례한다. 셀타이터-글로(등록상표) 분석은 루시퍼라제 반응에 의해 생성된 "글로우(glow)-유형" 발광 신호를 생성하며, 이는 사용되는 세포 유형 및 배지에 따라 일반적으로 5시간보다 긴 반감기를 갖는다. 생존가능한 세포는 상대적 발광 유닛(RLU)에 비친다. 기질인 비틀 루시페린(Beetle Luciferin)은, ATP에서 AMP로의 부수적 전환 및 광자의 생성과 함께, 재조합 반딧불 루시퍼라제에 의해 산화적으로 탈카복실화된다. 연장된 반감기는 시약 주입기를 사용할 필요성을 제거하고, 복수개의 플레이트의 연속식 또는 배취식 모드에 대한 융통성을 제공한다. 이러한 세포 증식 분석은 다양한 다중웰 포멧, 예컨대 96 또는 384 웰 포멧과 함께 사용될 수 있다. 데이터는 광도계 또는 CCD 카메라 이미지화 장치에 의해 기록될 수 있다. 발광 출력(output)은 시간에 따라 측정된 상대적 광 유닛(RLU)으로 제시된다.
화학식 I의 예시적 화합물 및 화학치료제와의 조합물의 항-증식성 효능은 특정 혈액학적 종양 세포주에 대한 셀타이터-글로(등록상표) 분석에 의해 측정된다(실시예 908). EC50 값은 시험된 화합물 및 조합물에 대해 규명된다.
하기 표 1 및 2의 화학식 I의 예시적 화합물들을 제조하고, 특성을 분석하고, 본 발명의 방법에 따른 Btk 억제에 대해 시험하였으며, 이들은 하기 구조 및 대응 명칭을 갖는다(켐드로우 울트라(ChemDraw Ultra), 버전 9.0.1 및 켐바이오드로우(ChemBioDraw), 버전 11.0, 캠브리지소프트 코포레이션(CambridgeSoft Corp., 미국 매사추세츠주 캠브리지)). 화학식 I의 화합물 또는 중간체와 관련하나 하나보다 많은 명칭이 존재하는 경우, 화학 구조식이 그 화합물을 정의한다.
[표 1]
Figure pat00010
Figure pat00011
Figure pat00012
Figure pat00013
Figure pat00014
Figure pat00015
Figure pat00016
Figure pat00017
Figure pat00018
Figure pat00019
Figure pat00020
Figure pat00021
Figure pat00022
Figure pat00023
Figure pat00024
Figure pat00025
Figure pat00026
Figure pat00027
Figure pat00028
[표 2]
Figure pat00029
Figure pat00030
Figure pat00031
Figure pat00032
Figure pat00033
Figure pat00034
Figure pat00035
Figure pat00036
Figure pat00037
Figure pat00038
Figure pat00039
Figure pat00040
Figure pat00041
Figure pat00042
Figure pat00043
Figure pat00044
Figure pat00045
Figure pat00046
Figure pat00047
Figure pat00048
Figure pat00049
Figure pat00050
Figure pat00051
Figure pat00052
Figure pat00053
Figure pat00054
Figure pat00055
Figure pat00056
화학식 I의 화합물의 투여
본 발명의 화합물은 치료할 증상에 적합한 임의의 경로로 투여될 수 있다. 적합한 경로는 경구, 비경구(예컨대, 피하, 근육내, 정맥내, 동맥내, 피내, 경막내 및 경막외), 경피, 직장, 비측, 국부(예컨대, 협측 및 설하), 질, 복강내, 폐내 및 비내 투여를 포함한다. 국소 면역억제 치료에서, 화합물은 병변 내 투여로 투여할 수 있으며, 예컨대 관류 또는 이식 전에 억제제와 이식편을 접촉시켜 투여할 수 있다. 바람직한 경로는 수용체의 증상 등에 따라 달라질 수 있음을 잘 알고 있을 것이다. 화합물이 경구 투여되는 경우에는 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제와 함께 환제, 캡슐, 정제 등으로 조제될 수 있다. 화합물이 비경구 투여되는 경우에는 약학적으로 허용가능한 비경구 부형제와 함께, 이하에 기술되는 단위 투약 주사성 형태로 조제할 수 있다.
인간 환자를 치료하기 위한 투여량은 약 10 mg 내지 약 1000 mg의 화학식 I의 화합물 범위일 수 있다. 일반적인 투여량은 약 100 mg 내지 약 300 mg의 화합물일 수 있다. 투여량은 특정 화합물의 흡수, 분포, 대사 및 배출을 비롯한 약물동태학 및 약력학적 성질에 따라 1일 1회(QID), 1일 2회(BID), 또는 더 자주 투여할 수 있다. 또한, 독성 인자는 투여량 및 투여 섭생에 영향을 미칠 수 있다. 경구 투여될 때, 환제, 캡슐 또는 정제는 특정시간 기간 동안 매일 또는 더 드물게 투여할 수도 있다. 섭생은 다양한 치료 사이클로 반복할 수 있다.
화학식 I의 화합물에 의한 치료 방법
본 발명의 화학식 I의 화합물은, Btk 키나아제와 관련된 비정상적 세포 성장, 기능 또는 거동으로부터 기인하며 따라서 상기 정의된 바와 같은 본 발명의 화합물을 투여하는 것을 포함하는 방법에 의해 치료될 수 있는 질환 또는 장애(예컨대, 면역 장애, 심혈관 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 장애 또는 신경 장애)를 앓는 인간 또는 동물 환자를 치료하는데 유용하다. 암을 앓는 인간 또는 동물 환자는 또한, 상기 정의된 바와 같은 본 발명의 화합물을 그들에게 투여하는 것을 포함하는 방법에 의해 치료될 수 있다. 이로써 환자의 증상이 개선되거나 좋아질 수 있다.
화학식 I의 화합물은 포유동물 세포, 생물체 또는 관련된 병리 증상(예를 들면, 전신성 및 국부성 염증, 면역-염증성 질환, 예컨대 류마티스성 관절염, 면역 억제, 장기 이식 거부, 알레르기, 궤양성 대장염, 크론병, 피부염, 천식, 전신 홍반 루푸스, 쇼그렌 증후군, 다발성 경화증, 피부경화증/전신경화증, 특발성 혈소판 감소성 자반병(ITP), 항-호중성 세포질 항체(ANCA) 혈관염, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 건선)의 시험관 내, 동일반응계 내 및 생체 내 진단 또는 치료 및 일반적 관절 보호 효과에 유용할 수 있다
본 발명의 방법은 또한, 관절염 질환, 예컨대 류마티스 관절염, 단일 관절염, 퇴행성 관절염, 통풍성 관절염, 척추염; 베체트병; 패혈증, 패혈성 쇼크, 내독소성 쇼크, 그람 음성 패혈증, 그람 양성 패혈증 및 독성 쇼크 증후군; 패혈증, 외상 또는 출혈에 의한 제 2차 다발성 장기 손상; 안과 장애, 예컨대 알레르기 결막염, 봄철 결막염, 포도막염 및 갑상샘 안병증; 호산구성 육아종; 폐 또는 호흡 장애, 예컨대 천식, 만성 기관지염, 알레르기 비염, ARDS, 만성 폐 염증성 질환(예컨대, 만성 폐쇄성 폐질환), 규페증, 폐 사르코이드증, 흉막염, 폐포염, 혈관염, 폐기종, 폐렴, 기관지 확장증 및 폐 산소 중독; 심근, 뇌 또는 사지의 재관류 손상; 섬유증, 예컨대 낭포성 섬유증; 켈로이드 형성 또는 흉터 조직 형성; 죽상 동맥 경화증; 자가 면역 질환, 예컨대 전신성 홍반성 낭창(SLE), 자가 면역성 감상샘염, 다발성 경화증, 당뇨병의 일부 형성 및 레이나우드 증후군; 및 이식 거부 장애, 예컨대 GVHD 및 동종 이식편 거부반응; 만성 사구체 신염; 염증성 장 질환, 예컨대 만성 염증성 장 질환(CIBD), 크론병, 궤양성 대장염 및 괴사성 장염; 염증성 피부염, 예컨대 접촉성 피부염, 아토피 피부염, 건선 또는 두드러기; 감염에 의한 발열 및 근육통; 중추 또는 말초 신경계 염증성 질환, 예컨대 뇌수막염, 뇌염 및 미미한 상처에 의한 뇌 또는 척수 손상; 쇠그렌 증후군; 백혈구 누출로 인한 질환; 알코올성 간 질환; 세균성 폐렴; 항원-항체 착체 매개된 질환; 저혈량성 쇼크; 제 1 형 진성 당뇨병; 급성 및 지연성 과민증; 백혈병 조혈 장애 및 전이에 의한 질병 상태; 열 손상; 과립구 유입-관련 증후군; 및 사이토카인-유도된 독성을 치료하는 것을 포함한다.
본 발명의 방법 또한, 유방암, 난소암, 자궁경부암, 전립샘암, 고환암, 비뇨생식관암, 식도암, 후두암, 아교모세포종, 신경모세포종, 위암, 피부암, 각질극세포종, 폐암, 표피모양 암종, 대세포 암종, 비-소세포 암종(NSCLC), 소세포 암종, 폐 선암종, 골암, 대장암, 선종, 췌장암, 선암, 갑상선암, 소포 암종, 미분화 암종, 유두상 암종, 고환종, 흑색종, 육종, 방광 암종, 간 암종 및 담도암, 신장 암종, 췌장암, 골수 장애, 림프종, 모발 세포암, 구강암, 비인두암, 인두암, 입술 암, 설암, 구강암, 소장암, 결장-직장암, 대장암, 직장암, 뇌암, 중추 신경계암, 호지킨병, 백혈병, 기관지암, 갑상선암, 간암, 간내 담관암, 간세포암, 위암, 신경아교종/아교모세포종, 자궁내막암, 흑색종, 신장암, 신우암, 방광암, 자궁 체부암, 자궁 경부암, 다발성 골수종, 급성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 림프구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병(CLL), 골수성 백혈병, 구강암, 인두암, 비-호지킨 림프종, 흑색종 및 융모 결장 선종으로부터 선택되는 암을 치료하는 것을 포함한다.
본 발명의 방법은 재관류 손상, 즉 조직 또는 기관이 허혈 후에 재관류를 경험하는 상황으로부터 초래된 손상을 입고 있거나 입을 수 있는 개체를 치료하는 데 유용하다. "허혈"이라는 용어는, 동맥혈의 유입 차단으로 인한 국소적인 조직 빈혈을 지칭한다. 일시적 허혈 후의 재관류는 특징적으로 발병 위치에서 혈관의 내피를 통한 호중구 활성 및 이동을 야기한다. 결국, 활성화된 호중구의 축적은 반응성 산소 대사물질을 생성하고, 이는 연관된 조직 또는 기관의 성분을 손상시킨다. 이러한 "재관류 손상" 현상은 일반적으로 증상, 예컨대 혈관 뇌졸중(전뇌 허혈 및 국소 허혈 포함), 출혈성 쇼크, 심근 허혈 또는 경색, 장기 이식 및 뇌혈관 수축과 관련된다. 예를 들면, 심장이 혈액 공급이 차단된 후 재관류를 시작하는 경우 재관류 손상은 심장 혈관 우회의 말미 또는 심장 마비 중에 일어난다. 이러한 상황에서 Btk 활성의 억제는 재관류 손상량을 감소시킬 수 있을 것으로 기대된다.
약학 제형
인간을 비롯한 포유동물의 치료에 화학식 I의 화합물을 사용하기 위해, 이는 일반적으로 약학 조성물로서의 표준 약학적 관례에 따라 조제된다. 이러한 본 발명의 양태에 따르면, 본 발명의 화합물을 약학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체와 함께 포함하는 약학 조성물이 제공된다.
전형적인 제형은 본 발명의 화합물과 담체, 희석제 또는 부형제를 혼합하여 제조된다. 적합한 담체, 희석제 및 부형제는 당업자에게 공지되어 있고, 탄수화물, 왁스, 수용성 및/또는 팽윤성 중합체, 친수성 또는 소수성 물질, 젤라틴, 오일, 용매, 물 등과 같은 물질을 포함한다. 사용되는 특정 담체, 희석제 또는 부형제는 본 발명의 화합물이 적용되는 수단 및 목적에 따라 달라질 것이다. 용매는 일반적으로 포유동물에게 투여하기에 안전한 것으로 당업자에게 인식된 용매(GRAS)를 기초로 하여 선택한다. 일반적으로, 안전한 용매는 물과 같은 비독성 수성 용매, 및 물에 용해성 또는 혼화성인 다른 비독성 용매이다. 적합한 수성 용매는 물, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜(예컨대, PEG 400, PEG 300) 등, 및 이의 혼합물을 포함한다. 또한, 제형은 완충액, 안정제, 계면활성제, 습윤제, 윤활제, 유화제, 현탁제, 보존제, 산화방지제, 불투명화제, 활택제, 가공보조제, 착색제, 감미제, 향미제, 방향제 및 기타 약물(즉, 본 발명의 화합물 또는 이의 약학 조성물)의 우아한 외양을 제공하거나 약학적 산물(즉, 약제)의 제조를 돕는 기타 공지된 첨가제를 하나 이상 포함할 수 있다.
제형은 통상적인 용해 및 혼합 절차를 이용해 제조될 수 있다. 예컨대, 벌크 약물 물질(즉, 본 발명의 화합물 또는 이 화합물의 안정화된 형태(예컨대, 사이클로덱스트린 유도체 또는 다른 공지된 착제를 갖는 착물))은 전술된 하나 이상의 부형제의 존재 하에 적합한 용매에 용해된다. 본 발명의 화합물은 일반적으로 용이하게 조절가능한 약물 투여량을 제공하고 환자의 처방된 요법에 맞는 약학적 투여 형태로 조제된다.
적용하기 위한 약학 조성물(또는 제형)은 약물 투여에 사용되는 방법에 따라 다양한 방식으로 포장될 수 있다. 일반적으로, 분배용 물품은 적합한 형태의 약학 조성물이 담겨 있는 용기를 포함한다. 적합한 용기는 당업자에게 공지되어 있고, 병(플라스틱 및 유리), 사쉐, 앰플, 플라스틱 백, 금속 실린더 등과 같은 소재를 포함한다. 또한, 용기는 패키지의 내용물에 부주의한 접근을 방지하기 위해 손댐방지 어셈블리를 포함할 수도 있다. 또한, 용기는 용기의 내용물을 기재한 라벨이 부착된다. 또한, 상기 라벨은 적절한 경고를 포함한다.
본 발명의 화합물의 약학 조성물은 다양한 투여 경로 및 종류로 제조할 수 있다. 예컨대, 목적하는 순도를 갖는 화학식 I의 화합물을 경우에 따라 약학적으로 허용가능한 희석제, 담체, 부형제 또는 안정제와 혼합하여(문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(1980) 16th edition, Osol, A. Ed.] 참고), 동결건조 제형, 밀링된 분말 또는 수용액 형태로 제조할 수 있다. 상온에서 적합한 pH 및 바람직한 정도의 순도에서 생리적으로 허용가능한 담체, 즉 이용되는 투여량 및 농도에서 수혜자에게 비독성인 담체와 혼합하여 제형화할 수 있다. 상기 제형의 pH는 주로 화합물의 특정 용도 및 농도에 따라 달라지지만, 약 3 내지 약 8 범위일 수 있다. pH 5의 아세테이트 완충액 중의 제형이 적합한 실시양태이다.
상기 화합물은 보통 고체 조성물, 동결건조 제형 또는 수성 용액으로 보관될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은, 즉 투여량, 농도, 스케줄, 과정, 비히클 및 투여 경로가 우수한 의학적 관례와 일치하는 방식으로 조제, 용량화 및 투여될 수 있다. 이러한 상황에서 고려해야 하는 요인으로는 치료할 특정 장애, 치료할 특정 포유동물, 각 환자의 임상 증상, 장애의 원인, 제제의 전달 부위, 투여 방법, 투여 스케줄, 의료업자에게 공지된 기타 요인을 포함한다. 투여되는 화합물의 "치료 효과량"은 이러한 고려사항을 따를 것이며, 과증식성 장애를 개선 또는 치료하는데 필요한 최소량이다.
일반적 처방으로서, 복용량 당 비경구 투여되는 억제제의 초기 약학적 유효량은 약 0.01 내지 100 mg/kg 범위, 즉 약 0.1 내지 20 mg/환자 체중 kg/일이고, 사용되는 화합물의 전형적인 초기 범위는 0.3 내지 15 mg/kg/일이다.
허용가능한 희석제, 담체, 부형제 및 안정제는 이용되는 투여량 및 농도에서 수혜자에게 비독성이고, 예컨대 인산염, 구연산염 및 다른 유기산과 같은 완충액; 아스코르브산 및 메티오닌을 비롯한 산화방지제; 보존제(예컨대, 옥타데실다이메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알콜; 알킬 파라벤, 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조시놀; 사이클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10개 잔기 미만) 폴리펩타이드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신; 단당류, 이당류 및 다른 탄수화물, 예컨대 글루코오스, 만노오스 또는 덱스트린; 킬레이트제, 예컨대 EDTA; 당, 예컨대 수크로오스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨; 염형성 반대이온, 예컨대 나트륨; 금속 착물(예컨대, Zn-단백질 착물); 및/또는 비이온 계면활성제, 예컨대 트윈(TWEEN, 상표명), 플루로닉스(PLURONICS, 상표명) 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함한다. 활성 약학적 성분은 또한 코아세르베이션 기술 또는 계면 중합 등에 의해 제조된 마이크로캡슐, 예컨대 각각 하이드록시메틸셀룰로오스 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리-(메틸메타크릴레이트) 마이크로캡슐, 콜로이드성 약물 전달 시스템(예컨대, 리포좀, 알부민 미소구, 마이크로에멀젼, 나노입자 및 나노캡슐) 또는 마크로에멀젼에 포획될 수 있다. 이러한 기술은 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed.(1980)]에 개시되어 있다.
화학식 I의 화합물의 지속 방출형 제제가 제조될 수 있다. 지속 방출 제제의 적합한 예로는 매트릭스가 성형 물품 형태, 예컨대 필름 또는 마이크로캡슐인, 화학식 I의 화합물을 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스를 포함한다. 지속 방출형 매트릭스의 예는 폴리에스터, 하이드로겔(예컨대, 폴리(2-하이드록시에틸-메타크릴레이트) 또는 폴리(비닐 알콜)), 폴리락타이드(미국 특허 3,773,919), L-글루탐산과 감마-에틸-L-글루타메이트의 공중합체, 비-분해성 에틸렌-비닐 아세테이트, 분해성 젖산-글리콜산 공중합체, 예컨대 루프론 디폿(LUPRON DEPOT, 상표명)(젖산-글리콜산 공중합체와 류프롤라이드 아세테이트로 구성된 주사성 미소구) 및 폴리-D-(-)-3-하이드록시부티르산을 포함한다.
제형은 본 명세서에서 상술한 투여 경로에 적합한 것을 포함한다. 제형은 단위 투여 형태로 편리하게 제공될 수 있고 약학 분야에 공지된 임의의 방법으로 제조할 수 있다. 기술 및 제형은 일반적으로 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA]에서 찾을 수 있다. 이러한 방법은 하나 이상의 보조 성분을 함유하는 담체와 활성 성분을 회합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 제형은 활성 성분과 액체 담체 또는 미분된 고체 담체 또는 이 둘 모두를 균일하게 친밀하게 회합시키고, 그 다음 필요하면 산물을 성형하여 제조한다.
경구 투여에 적합한 화학식 I의 화합물의 제형은 소정량의 화학식 I의 화합물을 각각 함유하는 환제, 캡슐, 사쉐 또는 정제와 같은 개별 단위로 제조할 수 있다. 압축 정제는 경우에 따라 결합체, 윤활제, 불활성 희석제, 보존제, 계면활성제 또는 분산제와 혼합한, 분말 또는 과립과 같은 자유 유동 형태의 활성 성분을 적합한 기계로 압축하여 제조할 수 있다. 성형 정제는 분말화된 활성 성분을 불활성 액체 희석제로 습윤화시킨 혼합물을 적합한 기계에서 성형하여 제조할 수 있다. 정제는 임의적으로 코팅하거나 스코어링할 수 있고, 임의적으로 활성 성분의 저속 방출 또는 조절 방출을 제공하도록 조제한다. 정제, 트로키, 로젠지, 수성 또는 오일 현탁액, 분산성 분말 또는 과립, 에멀젼, 경질 또는 연질 캡슐, 예컨대 젤라틴 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르는 경구용으로 제조할 수 있다. 경구용으로 의도된 화학식 I의 화합물의 제형은 약학 조성물의 제조에 대해 당업계에 공지된 임의의 방법에 따라 제조할 수 있고, 이러한 조성물은 감미제, 방향제, 착색제 및 보존제를 비롯한 하나 이상의 제제를 함유하여 맛좋은 제제를 제공할 수 있다. 활성 성분을 함유하는 정제는 이 정제의 제조에 적합한 비독성 약학적으로 허용가능한 부형제와 혼합된 것이 적당하다. 이러한 부형제로는, 예컨대 불활성 희석제, 예컨대 탄산 칼슘 또는 탄산 나트륨, 락토오스, 칼슘 또는 나트륨 포스페이트; 과립화 및 붕해제, 예컨대 옥수수 전분 또는 알긴산; 결합제, 예컨대 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 및 윤활제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 또는 활석일 수 있다. 정제는 비코팅되거나 또는 마이크로캡슐화를 비롯한 공지의 기술로 코팅하여 위장관에서의 붕해 및 흡수를 지연시키고 장기간 동안 지속적인 작용을 제공할 수 있다. 예컨대, 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 다이스테아레이트와 같은시간 지연 물질을 단독으로 또는 왁스와 함께 사용할 수 있다.
눈 또는 다른 외부 조직, 예컨대 입 및 피부의 치료를 위해, 제형은 활성 성분(들)을 예컨대 0.075 내지 20 중량%의 양으로 함유하는 국부 연고 또는 크림으로 적용되는 것이 바람직할 수 있다. 연고로 조제될 때, 활성 성분은 파라핀계 또는 수혼화성 연고 베이스와 함께 이용될 수 있다. 다르게는, 활성 성분은 수중유 크림 베이스와 함께 크림으로 조제될 수 있다. 필요한 경우, 크림 베이스의 수성 상은 다가 알콜, 즉 하이드록실 기가 2개 이상인 알콜, 예컨대 프로필렌 글리콜, 부탄 1,3-다이올, 만니톨, 소르비톨, 글리세롤 및 폴리에틸렌 글리콜(예컨대, PEG 400) 및 이의 혼합물을 포함할 수 있다. 국부 제형은 피부 또는 다른 환부를 통해 활성 성분의 흡수 또는 침투를 증강시키는 화합물을 적당하게 포함할 수 있다. 이러한 피부 침투 증강제의 예는 다이메틸 설폭사이드 및 관련 유사체를 포함한다. 본 발명의 에멀젼의 오일 상은 지방 또는 오일 또는 지방 및 오일과 함께 하나 이상의 유화제를 함유한 혼합물을 포함하는 공지된 성분으로부터 공지의 방식으로 구성될 수 있다. 친수성 유화제는 안정제로 작용하는 친지성 유화제와 함께 포함되는 것이 바람직하다. 종합하면, 유화제(들)는 안정제(들)와 함께 또는 안정제 없이 소위 유화 왁스를 구성하고, 오일 및 지방과 함께 왁스는 크림 제형의 오일 분산 상을 형성하는 소위 유화 연고 베이스를 구성한다. 본 발명의 제형에 사용하기에 적합한 유화제 및 에멀젼 안정제는 트윈(등록상표) 60, 스팬(Span, 등록상표) 80, 세토스테아릴 알콜, 벤질 알콜, 미리스틸 알콜, 글리세릴 모노-스테아레이트 및 나트륨 라우릴 설페이트를 포함한다.
화학식 I의 화합물의 수성 현탁액은 수성 현탁액의 제조에 적합한 부형제와 혼합된 활성 물질을 함유한다. 이러한 부형제로는 현탁제, 예컨대 나트륨 카복시메틸셀룰로오스, 크로스카멜로오스, 포비돈, 메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필 메틸셀룰로오스, 나트륨 알기네이트, 폴리비닐피롤리돈, 검 트라가칸트 및 검 아카시아 및 분산제 또는 습윤제, 예컨대 천연 포스파타이드(예컨대, 레시틴), 지방산과 알킬렌 옥사이드의 축합 산물(예컨대, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트), 장쇄 지방족 알콜과 에틸렌 옥사이드의 축합 산물(예컨대, 헵타데카에틸렌옥시세탄올), 지방산과 헥시톨 무수물 유래의 부분 에스터와 에틸렌 옥사이드의 축합 산물(예컨대, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트)을 포함한다. 수성 현탁액은 또한 하나 이상의 보존제, 예컨대 에틸 또는 n-프로필 p-하이드록시벤조에이트, 하나 이상의 착색제, 하나 이상의 방향제 및 하나 이상의 감미제, 예컨대 수크로오스 또는 사카린을 함유할 수 있다.
화학식 I의 화합물의 약학 조성물은 멸균 주사성 제제, 예컨대 멸균 주사성 수성 또는 유성 현탁액 형태일 수 있다. 이 현탁액은 앞에서 언급한 적합한 분산제 또는 습윤화제 및 현탁화제를 이용하여 공지된 기술에 따라 제조할 수 있다. 멸균 주사성 제제는 또한 비독성의 비경구 허용가능한 희석제 또는 용매 중의 멸균 주사성 용액 또는 현탁액, 예컨대 1,3-부탄다이올 중의 용액이거나, 또는 동결건조 분말로 제조될 수 있다. 이용될 수 있는 허용가능한 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액 및 등장성 염화나트륨 용액이 사용될 수 있다. 또한, 멸균 고정 오일은 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로 이용될 수 있다. 이 목적을 위해, 합성 모노글리세라이드 또는 다이글리세라이드를 포함하는 모든 상표의 고정 오일이 이용될 수 있다. 또한, 지방산, 예컨대 올레산이 마찬가지로 주사제의 제조에 이용될 수 있다.
단일 투여 형태를 제조하기 위해 담체 물질과 배합될 수 있는 활성 성분의 양은 치료받는 숙주 및 특정 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 예컨대, 인간에게 경구 투여하려는시간-방출 제형은, 총 조성물의 약 5 내지 약 95 중량%로 변할 수 있는 적당하고 편리한 양의 담체 물질과 함께, 약 1 내지 1000 mg의 활성 물질을 함유할 수 있다. 이 약학 조성물은 투여 시 쉽게 측정가능한 양을 제공하도록 제조할 수 있다. 예컨대, 정맥 내 주입용으로 제조된 수용액은 용액 1 ml당 활성 성분 약 3 내지 500 ㎍을 함유하여 약 30 ml/hr 속도의 적합한 용량이 주입될 수 있다.
비경구 투여에 적합한 제형은, 산화방지제, 완충액, 세균발육정지제, 및 의도된 수용체의 혈액과 등장성으로 만드는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 주사 용액; 및 현탁제 및 증점제를 함유할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다.
또한, 눈에 국부 투여하기에 적합한 제형은 적합한 담체, 특히 활성 성분의 수성 용매에 활성 성분이 용해되거나 현탁된 점안제를 포함한다. 이러한 제형에서 활성 성분은 약 0.5 내지 20 중량%, 예컨대 약 0.5 내지 10 중량% 농도, 예컨대 약 1.5 중량%의 농도로 존재하는 것이 바람직하다.
입에 국부 투여하기에 적합한 제형은 방향성 베이스, 보통 수크로오스 및 아카시아 또는 트라가칸트에 활성 성분을 함유하는 로젠지; 젤라틴 및 글리세린 또는 수크로오스 및 아카시아와 같은 비활성 베이스 중에 활성 성분을 함유하는 파스틸; 및 적합한 액체 담체에 활성 성분을 함유하는 구강세정제를 포함한다.
직장 투여용 제형은, 예컨대 코코아 버터 또는 살리실레이트를 함유하는 적합한 베이스와 함께 좌약으로 제공될 수 있다.
폐내 또는 비강 투여에 적합한 제형은 입자 크기가 예컨대 0.1 내지 500 마이크론 범위(예컨대, 0.5, 1, 30 마이크론, 35 마이크론 등과 같은 마이크론 증분으로 0.1 내지 500 마이크론 범위의 입자 크기를 포함함)이고, 비강을 통한 급속 흡입 또는 폐포낭에 도달하도록 구강을 통한 흡입에 의해 투여된다. 적합한 제형은 활성 성분의 수성 또는 오일 용액을 포함한다. 에어로졸 또는 무수 분말 투여에 적합한 제형은 통상의 방법에 따라 제조할 수 있고, 이하에 기술된 장애를 치료 또는 예방하는데 지금까지 사용된 화합물과 같은 다른 치료제와 함께 전달될 수 있다.
질 투여에 적합한 제형은 활성 성분 외에 당업자에게 적합한 것으로 공지된 담체를 함유하는 페사리, 탐폰, 크림, 젤, 페이스트, 포움 또는 스프레이 제형으로 제공될 수 있다.
제형은 단위 용량 또는 다회 용량 용기, 예컨대 밀봉된 앰플 및 바이알에 포장될 수 있고, 사용 직전에 주사를 위해 멸균 액체 담체, 예컨대 물의 첨가만을 필요로 하는 동결건조 상태로 보관될 수 있다. 임시 주사 용액 및 현탁액은 앞서 기술된 종류의 멸균 분말, 과립 및 정제로 제조된다. 바람직한 단위 투약 제형은 위에서 언급한 활성 성분의 1일 용량 또는 단위 1일 분할용량이나 이의 적합한 분획을 함유하는 제형이다.
또한, 본 발명은 상기 정의된 하나 이상의 활성 성분을 수의학용 담체와 함께 함유하는 수의학용 조성물을 제공한다. 수의학용 담체는 조성물 투여 목적에 유용한 물질이고, 수의학적으로 비활성이거나 허용가능하고 활성 성분과 융화성인 고체, 액체 또는 기체 물질일 수 있다. 이러한 수의학용 조성물은 비경구, 경구 또는 임의의 다른 바람직한 경로를 통해 투여될 수 있다.
병용 요법
화학식 I의 화합물을 단독으로 또는 다른 치료제와 함께 본원에 기재된 질환 또는 장애, 예컨대 염증 또는 과증식 장애(예컨대, 암)를 치료하는데 이용할 수 있다. 특정 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 약학적 복합 제형 또는 병용 요법과 같은 투여 섭생으로, 항 염증 성질 또는 항-과증식 성질을 갖거나 염증, 면역 반응 장애 또는 과증식 장애(예컨대, 암)를 치료하는데 유용한 제 2 치료 화합물과 함께 배합된다. 제 2 치료제는 항염제, 면역조절제, 화학치료제, 세포자멸사-개선제, 향신경제, 심혈관질환 치료제, 간질환 치료제, 항-바이러스제, 혈액 장애 치료제, 당뇨병 치료제, 면역결핍 장애 치료제일 수 있다. 제 2 치료제는 NSAID 항-염증제일 수 있다. 제 2 치료제는 화학치료제일 수 있다. 약학적 복합 제형 또는 투여 섭생의 제 2 화합물은 서로 악영향을 미치지 않도록 화학식 I의 화합물에 보충 활성을 나타내는 것이다. 이러한 화합물은 의도한 목적에 효과적인 양으로 함께 적당하게 존재한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물은 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체, 호변 이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구 약물을 화학치료제, 예컨대 NSAID와 함께 포함한다.
병용 요법은 동시 또는 연속 섭생으로 투여될 수 있다. 연속 투여될 때, 복합물은 2회 이상의 투여로 투여될 수 있다. 병용 투여는 별도의 제형 또는 단일 약학 조성물의 공동투여, 및 임의의 순서로의 연속 투여를 포함하고, 이때 두 활성제(또는 모든 활성제)가 각각의 생물학적 활성을 동시에 발휘하는 시간 간격을 두는 것이 바람직하다.
상기 임의의 동시투여 제제의 적합한 투여량은 현재 사용되는 양이고, 새로 동정된 제제 및 다른 치료제 또는 치료의 복합 작용(상승작용)으로 인해 저하될 수 있다.
병용 요법은 "상승 효과"를 제공하고 "상승 효과"를 증명할 수 있다(즉, 화합물을 별도로 사용하여 수득되는 효과의 합보다 활성 성분을 함께 사용할 때 더 큰 효과를 달성할 수 있다). 상승 효과는, 활성 성분이 (1) 동시조제되고 병용의 단위 투약 제형으로 동시에 투여 또는 전달될 때; (2) 별도의 제형으로 교대로 또는 병행해서 전달될 때; 또는 (3) 일부 다른 섭생으로 달성될 수 있다. 교대 요법으로 전달될 때, 상승 효과는 화합물이, 예컨대 다른 주사기로 다른 주입에 의해, 별개의 환제 또는 캡슐로 또는 분리 주입으로 연속해서 투여 또는 전달될 때 달성될 수 있다. 일반적으로, 교대 요법 동안, 각 활성 성분의 유효 투여량은 연속, 즉 계대로 투여되는 반면, 병용 요법에서는 2개 이상의 활성 성분의 유효 투여량이 함께 투여된다.
요법의 특정한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체, 호변 이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구 약물은 본원에 기재된 바와 같은 다른 치료제, 호르몬제 또는 항체 제제와 조합되기도 하고, 수술 요법 및 방사선요법과 조합될 수 있다. 따라서, 본 발명에 따른 병용 요법은 하나 이상의 화학식 I의 화합물, 이의 입체 이성질체, 호변 이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구 약물의 투여, 및 하나 이상의 다른 암 치료 방법의 이용을 포함한다. 화학식 I의 화합물(들) 및 다른 약학적 활성 화학치료제(들)의 양 및 상대적 투여 타이밍은 바람직한 병용 치료 효과를 달성하도록 선택한다.
화학식 I의 화합물의 대사물질
또한, 본 발명의 범위에는 본원에 기재된 화학식 I의 생체 내 대사 산물이 포함된다. 이 산물은, 예컨대 투여된 화합물의 산화, 환원, 가수분해, 아마이드화, 탈아마이드화, 에스터화, 탈에스터화, 효소 절단 등으로부터 산출될 수 있다. 따라서, 본 발명은 화학식 I의 화합물의 대사물질, 예컨대 본 발명의 화합물을 이의 대사 산물을 산출하기에 충분한시간 동안 포유동물과 접촉시키는 것을 포함하는 방법에 의해 생성되는 화합물을 포함한다.
대사물질은 일반적으로 본 발명의 화합물의 방사능표지된(예컨대, 14C 또는 3H) 동위원소를 제조하는 단계, 이것을 동물, 예컨대 래트, 마우스, 기니아 피그, 원숭이 또는 사람에게 검출가능한 용량(예컨대, 약 0.5 mg/kg 초과)으로 비경구적으로 투여하는 단계, 충분한시간 동안(예컨대, 약 30초 내지 30시간) 대사가 일어나도록 하는 단계, 및 이의 전환 산물을 소변, 혈액 또는 다른 생물학적 시료로부터 단리하는 단계에 의해 동정된다. 이 산물은 표지되어 있기 때문에 쉽게 단리된다(다른 것은 대사물질에 생존하는 에피토프에 결합할 수 있는 항체를 이용하여 단리한다). 대사물질의 구조는 통상의 방식, 예컨대 MS, LC/MS 또는 NMR 분석으로 측정한다. 일반적으로, 대사물질의 분석은 당업계에 공지된 통상의 약물 대사 연구와 같은 방식으로 수행한다. 대사물질은 생체 내에서 다르게 발견되지 않는 한, 본 발명의 화합물의 치료적 용량에 대한 진단 분석에 유용할 수 있다.
물품의 제조
본 발명의 또 다른 실시양태에서, 전술한 질환 및 장애의 치료에 유용한 물질을 함유하는 제조 물품 또는 "키트"가 제공된다. 하나의 실시 양태에서, 이 키트는 화학식 I의 화합물 또는 그의 입체 이성질체, 호변 이성질체, 용매화물, 대사물질 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 함유하는 용기를 포함한다. 키트는 또한 라벨 또는 패키지 동봉물을 용기 위에 또는 용기에 결합시켜 포함한다. "패키지 동봉물"이라는 용어는 치료 제품의 상업적 패키지에 통상적으로 포함되는 설명서로서, 이 치료 제품의 사용에 관한 지시, 사용법, 투여량, 투여법, 금기 및/또는 경고를 포함하는 설명서를 의미하는 것이다. 적합한 용기는, 예컨대 병, 바이알, 주사기, 블리스터 팩 등을 포함한다. 용기는 유리 또는 플라스틱과 같은 다양한 소재로 형성될 수 있다. 용기는 증상의 치료에 효과적인 화학식 I의 화합물 또는 이의 제형을 보유할 수 있고 멸균 접근 입구를 가질 수 있다(예컨대, 용기는 피하 주사 바늘로 찌를 수 있는 스토퍼를 보유한 바이알 또는 정맥 내 용액 백일 수 있다). 조성물 중의 하나 이상의 활성제는 화학식 I의 화합물이다. 라벨 또는 패키지 동봉물은 선택한 증상, 예컨대 암을 치료하는데 조성물이 사용된다는 것을 나타낸다. 또한, 라벨 또는 패키지 동봉물은 치료할 환자가 과증식 장애, 신경 변성, 심장 비대, 통증, 편두통 또는 신경외상 질환 또는 사태와 같은 장애를 가진 자임을 나타낼 수 있다. 하나의 실시양태에서, 라벨 또는 패키지 동봉물은 화학식 I의 화합물을 함유하는 조성물이 비정상 세포 증식으로부터 초래되는 장애를 치료하는데 사용될 수 있다는 것을 나타낸다. 또한, 라벨 또는 패키지 동봉물은 조성물이 다른 장애를 치료하는데 사용될 수 있음을 나타낼 수도 있다. 다르게는, 또는 추가로, 제조 물품은 약학적으로 허용가능한 완충액, 예컨대 세포발육정지성 주사용수(BWFI), 인산염-완충 식염수, 링거액 및 덱스트로스 용액을 함유하는 제 2 용기를 포함할 수 있다. 또한, 상업적 및 사용자 견지에서 바람직한 다른 재료, 예컨대 다른 완충액, 희석제, 필터, 주사바늘 및 주사기를 포함할 수 있다.
키트는 추가로 화학식 I의 화합물의 투여에 대한 안내서, 및 존재하는 경우, 제 2 약학 조성물을 포함할 수 있다. 예컨대, 키트가 화학식 I의 화합물을 함유하는 제 1 조성물 및 제 2 약학 조성물을 포함하는 경우, 키트는 추가로 치료가 필요한 환자에게 제 1 및 제 2 약학 조성물을 동시, 연속 또는 분할 투여하는 것에 대한 지침서를 포함할 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 키트는 화학식 I의 화합물의 고체 경구 형태, 예컨대 정제 또는 캡슐을 전달하기에 적합하다. 이러한 키트는 다수의 단위 투여량을 포함하는 것이 바람직하다. 이러한 키트는 투여량이 의도한 사용 순서대로 배열되어 있는 카드를 포함할 수 있다. 이러한 카드의 한 예는 "블리스터 팩"이다. 블리스터 팩은 포장 산업에 공지되어 있고 약학적 단위 투여 형태를 포장하는데 널리 사용된다. 필요한 경우, 기억 보조자가 예컨대 수, 문자 또는 다른 표식 형태로 또는 투여량이 투여될 수 있는 치료 스케줄의 날짜를 표시한 달력 동봉물로 구비될 수 있다.
하나의 실시양태에 따르면, 키트는 (a) 화학식 I의 화합물이 담겨있는 제 1 용기; 및 임의적으로 (b) 항-과증식 활성이 있는 제 2 화합물을 포함하는 제 2 약학 조성물이 담겨있는 제 2 용기를 포함할 수 있다. 다르게는, 또는 추가로 키트는 약학적으로 허용가능한 완충액, 예컨대 세균발육정지성 주사용수(BWFI), 인산염 완충 식염수, 링거액 및 덱스트로스 용액을 함유하는 제 3 용기를 포함할 수 있다. 추가로, 상업적 및 사용자 견지에서 바람직한, 다른 완충액, 희석제, 필터, 주사바늘 및 주사기를 비롯한 다른 재료를 추가로 포함할 수 있다.
키트가 화학식 I의 조성물 및 제 2 치료제를 함유하는 다른 특정한 실시양태에서, 키트는 각 조성물을 담기 위한 용기, 예컨대 분할된 병 또는 분할된 호일 패킷을 포함할 수 있지만, 각 조성물은 미분할된 단일 용기에 담겨있을 수도 있다. 일반적으로, 키트는 각 성분의 투여에 대한 지시를 포함한다. 키트 형태는 각 성분이 상이한 투여 형태(예컨대, 경구 및 비경구)로 투여되는 것이 바람직하거나, 상이한 투약 간격으로 투여될 때, 또는 제형의 각 성분의 역가가 주치의 처방이 필요할 때 특히 유리하다.
화학식 I의 화합물의 제조
화학식 I의 화합물은 화학 분야에 널리 공지된 것과 유사한 공정을 포함하는 합성 경로에 의해, 특히 본 명세서에 포함된 설명 및 다른 헤테로사이클에 대해 본원에 참고로서 인용된 문헌(문헌[Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, Editors Katritzky and Rees, Elsevier, 1997, e.g. Volume 3]; 문헌[Liebigs Annalen der Chemie,(9):1910-16,(1985)]; 문헌[Helvetica Chimica Acta, 41:1052-60,(1958)]; 및 문헌[Arzneimittel-Forschung, 40(12):1328-31,(1990)] 참고, 이들 각각을 명시적으로 본원에 참고로 인용함)에 비추어 합성될 수 있다. 출발 물질은 일반적으로 알드리치 케미칼스(Aldrich Chemicals, 미국 위스콘신주 밀워키)와 같은 시판원에서 입수할 수 있거나 당업자에게 공지된 방법을 이용해 용이하게 제조할 수 있다(예컨대, 문헌[Louis F. Fieser and Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, v. 1-23, Wiley, N.Y.(1967-2006) ed.] 또는 문헌[Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl. ed. Springer-Verlag, Berlin](부록 포함)에 일반적으로 기술된 방법에 의해 제조될 수 있음)(또한, 바일슈타인(Beilstein) 온라인 데이터베이스를 통해서도 입수할 수 있음).
화학식 I의 화합물, 필요한 시약 및 중간체 합성에 유용한 합성 화학 전환 및 보호기 방법론(보호 및 탈보호)은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면 문헌[R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers(1989); T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley and Sons(1999)] 및 문헌[L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons(1995)] 및 이의 후속 판에 기재된 것을 포함한다.
화학식 I의 화합물을 단독으로 제조하거나 또는 적어도 2개, 예컨대 5 내지 1000개의 화합물 또는 10 내지 100개의 화합물을 포함하는 화합물 라이브러리로 제조할 수 있다. 화학식 I의 화합물의 라이브러리는 조합적 "분리 및 혼합(split and mix)" 접근법으로 제조하거나, 또는 용액상 또는 고상 화학을 이용하는 여러 병행 합성법 또는 당업자에게 공지된 절차에 의해 제조할 수 있다. 본 발명의 추가로 양태에 따르면 적어도 2개의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 화합물 라이브러리가 제공된다.
첨부된 도면 및 실시예는 화학식 I의 화합물의 예시적 제조 방법을 제공한다. 당업자는 화학식 I의 화합물을 합성하는데 다른 합성 경로가 사용될 수 있음을 알 것이다. 특정 출발 물질 및 시약이 도 및 실시예에 도시되고 논의되지만, 다양한 유도체 및/또는 반응 조건을 제공하기 위해 다른 출발 물질 및 시약이 용이하게 대체될 수 있다. 또한, 기술된 방법에 의해 제조된 다수의 예시적 화합물은, 당업자에게 널리 공지된 통상적인 화학을 이용하고 본원에 비추어 추가로 개질될 수 있다.
화학식 I의 화합물을 제조하는데 있어서, 중간체의 원위(remote) 작용기(예컨대, 1급 또는 2급 아민)의 보호가 필요할 수 있다. 이러한 보호의 필요는 원위 작용기의 성질 및 제조방법의 조건에 따라 달라질 것이다. 적합한 아미노-보호기는 아세틸, 트라이플루오로아세틸, t-부톡시카보닐(Boc), 벤질옥시카보닐(CBz) 및 9-플루오렌일메틸렌옥시카보닐(Fmoc)을 포함한다. 이러한 보호의 필요는 당업자에 의해 쉽게 결정된다. 보호기 및 이의 사용에 대한 일반적인 설명은 문헌[T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991]을 참고한다.
화학식 I의 화합물의 제조에 유용한 실험 절차, 중간체 및 시약은, 2011년 5월 6일에 출원된 미국 특허 출원 제 13/102720 호("피리돈 및 아자-피리돈 화합물 및 사용 방법")에서 확인할 수 있으며, 상기 출원 전체를 본원에 참고로 인용한다.
도 1 내지 24는 화학식 I의 화합물(101-124)의 예시적 실시양태의 합성을 기술하며(실시예 101 내지 124에서 보다 자세히 기술됨), 다른 화학식 I의 화합물의 제조에 유용할 수 있다.
일반 제조 절차
일반 절차: 스즈키 커플링
Figure pat00057
스즈키-유형 커플링 반응은 화학식 I의 화합물 및 중간체(예컨대, 화합물 A-3)의 고리에 부착되는 탄소-탄소 결합을 형성하는데 유용하다(문헌[Suzuki (1991) Pure Appl. Chem. 63:419-422]; 문헌[Miyaura and Suzuki (1979) Chem. Reviews 95(7):2457-2483]; 및 문헌[Suzuki (1999) J. Organometal. Chem. 576:147-168] 참고). 스즈키 커플링은 헤테로아릴할라이드(예컨대, 화합물 B-2 또는 B-4)와 보론산(예컨대, 화합물 A-1 또는 A-2)의 팔라듐 매개된 교차 커플링 반응이다. 예를 들어, 화합물 B-2를 약 1.5 당량의 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)과 합치고, 약 3 당량의 탄산 나트륨(물 및 동일 부피의 아세토나이트릴 중의 1 M 용액으로서)에 용해시킬 수 있다. 촉매량 이상의 저가(low valent) 팔라듐 시약, 예컨대 비스(트라이페닐포스핀)팔라듐(II) 다이클로라이드를 가한다. 몇몇 경우, 수성 층의 pH를 조절하기 위해 탄산 나트륨 대신 칼륨 아세테이트를 사용한다. 이어서, 이 반응물을 마이크로파 반응기(바이오태지(Biotage) AB, 스웨덴 웁살라) 내에서 압력 하에 약 140 내지 150℃로 10 내지 30분 동안 가열한다. 내용물을 에틸 아세테이트 또는 다른 유기 용매로 추출한다. 유기 층을 증발시킨 후, 붕소 에스터 A-1을 실리카 상에서 또는 역상 HPLC로 정제할 수 있다. 치환기는 정의된 바와 같거나, 그의 보호된 형태 또는 전구체이다. 마찬가지로, 브로마이드 중간체 B-4는 붕소화되어 화합물 A-2를 제공할 수 있다.
화합물 B-2와 화합물 A-2의 스즈키 커플링 또는 화합물 A-1와 화합물 B-4의 스즈키 커플링은, 화학식 I의 화합물 또는 중간체 A-3을 제공한다. 보론산 에스터(또는 보론산)(1.5 당량) A-1 또는 A-2 및 팔라듐 촉매, 예컨대 비스(트라이페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(0.05 당량)를 아세토나이트릴과 1 M의 탄산 나트륨 수성 용액(아세토나이트릴과 동일 부피) 중의 할로 중간체(1 당량) B-2 또는 B-4의 혼합물에 가한다. 이 반응 혼합물을 마이크로파 반응기 내에서 약 150℃로 약 15분 동안 가열한다. LC/MS는 언제 반응이 완료되는지 나타낸다. 이 혼합물에 물을 가하고, 침전된 생성물을 여과하고, HPLC로 정제하여, 생성물 A-3을 수득한다. 치환기 R1', R2' 및 R4'은 정의된 바와 같은 R1, R2 및 R4이거나 그들의 보호된 형태 또는 전구체일 수 있다.
스즈키 커플링 단계 동안 다양한 팔라듐 촉매를 사용할 수 있다. 다양한 저가 Pd(II) 및 Pd(0) 촉매, 예컨대 PdCl2(PPh3)2, Pd(t-Bu)3, PdCl2 dppf CH2Cl2, Pd(PPh3)4, Pd(OAc)/PPh3, Cl2Pd[(Pet3)]2, Pd(DIPHOS)2, Cl2Pd(Bipy), [PdCl(Ph2PCH2PPh2)]2, Cl2Pd[P(o-tol)3]2, Pd2(dba)3/P(o-tol)3, Pd2(dba)/P(furyl)3, Cl2Pd[P(furyl)3]2, Cl2Pd(PMePh2)2, Cl2Pd[P(4-F-Ph)3]2, Cl2Pd[P(C6F6)3]2, Cl2Pd[P(2-COOH-Ph)(Ph)2]2, Cl2Pd[P(4-COOH-Ph)(Ph)2]2 및 캡슐화된 촉매 Pd 인캡트(EnCat, 등록상표) 30, Pd 인캡트(등록상표) TPP30 및 Pd(II)인캡트(등록상표) 바이냅(BINAP)30(미국 특허 출원 공개 제 2004/0254066 호)을 스즈키 커플링 반응에 사용할 수 있다.
일반 절차: 부흐발트(Buchwald) 반응
Figure pat00058
부흐발트 반응은 6-브로모 중간체 B-1을 아민화하는데 유용하다(문헌[Wolf and Buchwald (2004) Org. Synth Coll. Vol. 10:423]; 및 문헌[Paul et al (1994) Jour. Amer. Chem. Soc. 116:5969-5970] 참고). DMF 중의 할로 중간체 B-1의 용액에 적절한 아민 R5-NH2(200 mol%), Cs2CO3(50 mol%), Pd2(dba)3(5 mol%) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(잔트포스(Xantphos), CAS 등록 번호161265-03-8, 10 mol%)을 가한다. 이 반응물을 마이크로파 반응기(바이오태지 AB, 스웨덴 웁살라) 내에서 압력 하에 약 110℃로 약 30분 동안 가열한다. 생성 용액을 진공 중에서 농축하여, 화합물 B-2를 수득한다. 다른 팔라듐 촉매 및 포스핀 리간드도 유용할 수 있다.
Figure pat00059
N-헤테로아릴 아마이드 중간체 B-4는 또한, 부흐발트 조건 하에 환형 아마이드 중간체(R7), 예컨대 3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 101e 및 헤테로아릴 다이브로마이드 B-3을 사용하여 제조할 수 있다.
분리 방법
화학식 I의 화합물을 제조하는 방법에서, 반응 생성물들을 서로 및/또는 출발 물질과 분리하는 것이 유익할 수 있다. 각 단계 또는 일련의 단계들의 원하는 산물은 당업계에 일상적인 기술을 통해 바람직한 균질도로 분리 및/또는 정제된다. 전형적으로, 이러한 분리는 다중상 추출, 용매 또는 용매 혼합물로부터 결정화, 증류, 승화 또는 크로마토그래피를 수반한다. 크로마토그래피는, 예컨대 역상 및 정상상; 크기 배제; 이온 교환; 고압, 중간압 및 저압의 액체 크로마토그래피 방법 및 장치; 소규모 분석; 모의 이동상(SMB) 및 제조용 박층 또는 후막층 크로마토그래피뿐만 아니라 소규모 박층 및 플래쉬 크로마토그래피 기술을 비롯한 임의의 여러 방법을 포함할 수 있다.
다른 부류의 분리 방법은 목적하는 생성물, 미반응 출발 물질, 반응 부산물 등에 결합하거나 이들을 분리할 수 있도록 선택한 시약으로 혼합물을 처리하는 것을 포함한다. 이러한 시약으로는 활성탄, 분자체, 이온교환 매질 등과 같은 흡착제 또는 흡수제를 포함한다. 다르게는, 염기성 물질인 경우, 시약은 산, 산성 물질인 경우, 염기, 항체와 같은 결합 시약, 결합 단백질, 크라운 에터와 같은 선택적 킬레이트제, 액체/액체 이온 추출 시약(LIX) 등일 수 있다. 적합한 분리 방법의 선택은 관계된 물질의 성질, 예컨대 증류 및 승화 중의 비등점 및 분자량, 크로마토그래피 중의 극성 작용기의 존재 또는 부재, 다중상 추출에서 산성 및 염기성 매질 중의 물질의 안정성 등에 따라 달라진다.
부분입체 이성질체 혼합물은 크로마토그래피 및/또는 분별 결정과 같은 당업자에게 공지된 방법으로 물리 화학적 차이를 기초로 하여 각 부분입체 이성질체로 분리할 수 있다. 거울상 이성질체는 거울상 이성질체 혼합물을 적합한 광학 활성 화합물(예컨대, 키랄 알콜 또는 모셔(Mosher)의 산 클로라이드와 같은 키랄 보조제)와 반응시켜 부분입체 이성질체 혼합물로 변환시키고, 부분입체 이성질체를 분리한 뒤, 각 부분입체 이성질체를 상응하는 순수 거울상 이성질체로 변환(예컨대, 가수분해)시켜 분리할 수 있다. 또한, 본 발명의 일부 화합물은 아트로프이성질체(예컨대, 치환된 바이아릴)일 수 있고 본 발명의 일부로 간주된다. 또한, 거울상 이성질체는 키랄 HPLC 컬럼을 이용하여 분리할 수 있다.
단일 입체 이성질체(예컨대, 실질적으로 입체 이성질체가 없는 거울상 이성질체)는 라세미 혼합물을 광학 활성 분할제를 이용한 부분입체 이성질체의 형성과 같은 방법으로 분할하여 수득할 수 있다(문헌[Eliel, E. and Wilen, S. "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994]; 및 문헌[Lochmuller, C. H., (1975) J. Chromatogr., 113(3):283-302] 참고). 본 발명의 키랄 화합물의 라세미 혼합물은 임의의 적합한 방법으로 분리 및 단리시킬 수 있는데, 그 예로는 (1) 키랄 화합물을 이용한 이온성 부분입체 이성질체 염의 형성 및 분별결정 또는 다른 방법에 의한 분리, (2) 키랄 유도체화 시약을 이용한 부분입체 이성질체 화합물의 형성, 부분입체 이성질체의 분리 및 순수 입체 이성질체로의 변환, 및 (3) 키랄 조건 하에 직접 실질적으로 순수하거나 농축된 입체 이성질체의 분리가 있다(문헌["Drug Stereochemistry, Analytical Methods and Pharmacology", Irving W. Wainer, Ed., Marcel Dekker, Inc., New York (1993)] 참고).
방법 (1) 하에, 부분입체 이성질체 염은 거울상 이성질적으로 순수한 키랄 염기, 예컨대 브루신, 퀴닌, 에페드린, 스트리크닌, α-메틸-β-페닐에틸아민(암페타민) 등을 카복시산 및 설폰산과 같은 산성 작용기를 보유한 비대칭 화합물과 반응시켜 제조할 수 있다. 부분입체 이성질체 염은 분별결정 또는 이온 크로마토그래피에 의해 분리 유도될 수 있다. 아미노 화합물의 광학 이성질체 분리의 경우, 키랄 카복시산 또는 설폰산, 예컨대 캠퍼설폰산, 타르타르산, 만델산 또는 젖산의 첨가는 부분입체 이성질체 염을 형성시킬 수 있다.
다르게는, 방법 (2)에서는 분할할 기질을 키랄 화합물의 하나의 거울상 이성질체와 반응시켜 부분입체 이성질체 쌍을 형성한다(문헌[E. and Wilen, S. "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., 1994, p. 322]). 부분입체 이성질체 화합물은, 비대칭 화합물을 거울상 이성질적으로 순수한 키랄 유도체화 시약, 예컨대 멘틸 유도체와 반응시킨 뒤, 이 부분입체 이성질체를 분리하고 가수분해하여 순수한 또는 농축된 거울상 이성질체를 수득함으로써 형성할 수 있다. 광학 순도를 측정하는 방법은 염기의 존재하에 키랄 에스터, 예컨대 멘틸 에스터, 예컨대 (-) 멘틸 클로로포름에이트를 제조하거나, 또는 라세미 혼합물의 모셔 에스터, 즉 α-메톡시-α-(트라이플루오로메틸)페닐 아세테이트를 제조하고(문헌[Jacob III. J. Org. Chem. (1982) 47:4165]), 두 아트로프 이성질체성 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체의 존재에 대해 1H NMR 스펙트럼을 분석하는 것을 포함한다. 아트로프 이성질체 화합물의 안정한 부분입체 이성질체는 아트로프 이성질체성 나프틸-이소퀴놀린을 분리하는 방법에 따라 정상 및 역상 크로마토그래피로 분리 및 단리할 수 있다(WO 96/15111). 방법 (3)에 의하면, 두 거울상 이성질체의 라세미 혼합물은 키랄 정지상을 이용한 크로마토그래피로 분리할 수 있다(문헌["Chiral Liquid Chromatography" (1989) W. J. Lough, Ed., Chapman and Hall, New York; Okamoto, J. Chromatogr., (1990) 513:375-378]). 농축되거나 정제된 거울상 이성질체는 다른 키랄 분자를 비대칭 탄소 원자와 구별하는데 사용되는 방법, 예컨대 광학 회전 및 원편광 이색성 등으로 구별할 수 있다.
실시예
실시예 101a: 2,2,2-트라이클로로-1-(4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-일)에탄온 101a
Figure pat00060
자석 교반기, 응축기 및 질소 주입구를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌(3.00 g, 24.8 mmol), 트라이클로로아세틸 클로라이드(13.5 g, 74.4 mmol) 및 1,2-다이클로로에탄(50 mL)을 넣었다. 이 용액을 85℃에서 2시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여, 100% 수율(6.50 g)의 2,2,2-트라이클로로-1-(4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-일)에탄온 101a를 흑색 반-고체로서 수득하였다: 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.94 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 2.62 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.47 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.80 (m, 2H), 1.65 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 266.0 (M+H)
실시예 101b: 에틸 4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-카복실레이트 101b
Figure pat00061
자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 101a(6.50 g, 24.8 mmol), 나트륨 에톡사이드(17.0 mg, 0.25 mmol) 및 에탄올(40 mL)을 넣었다. 이 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 100% 수율(4.80 g)의 에틸 4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-카복실레이트 101b를 갈색 고체로서 수득하였다: mp 70-72℃; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.08 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.25 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 2.65 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.56 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.85 (m, 4H), 1.28 (t, 3H, J = 7.2 Hz); MS (ESI+) m/z 194.1 (M+H)
실시예 101c: 에틸 1-(시아노메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-카복실레이트 101c
Figure pat00062
자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 125 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 101b(5.76 g, 29.8 mmol) 및 DMF(50 mL)를 넣었다. 이 용액을 빙욕을 이용하여 0℃로 냉각하였다. 여기에 NaH(미네랄 오일 중의 60%, 1.43 g, 35.8 mmol)를 가했다. 생성 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 브로모아세토나이트릴(1.43 g, 35.8 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 에틸 아세테이트(150 mL)와 물(450 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트(3×150 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 55% 수율(3.80 g)의 에틸 1-(시아노메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-카복실레이트 101c를 황색 반-고체로서 수득하였다: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.66 (s, 1H), 5.29 (s, 2H), 4.28 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 2.62 (t, 2H, J = 6.3 Hz), 2.49 (t, 2H, J = 6.3 Hz), 1.92 (m, 2H), 1.75 (m, 2H), 1.33 (t, 3H, J = 7.2 Hz); MS (ESI+) m/z 233.1 (M+H)
실시예 101d: 에틸 1-(2-아미노에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-카복실레이트 101d
Figure pat00063
200 mL 파(Parr) 반응 병을 질소로 퍼지하고, 10% Pd/C(50% 습윤, 1.28 g 건조 중량), 화합물 101c(3.00 g, 12.9 mmol), 12% 염산(6.5 mL, 25 mmol), 에틸 아세테이트(60 mL) 및 에탄올(40 mL)을 넣었다. 이 병을 파 수소발생기에 부착하고, 배기하고, 50 psi의 압력까지 수소 기체를 넣고, 6시간 동안 진탕하였다. 그 후, 수소를 배기하고, 질소를 상기 병에 넣었다. 규조토 필터제(셀라이트(CELITE, 등록상표, 이머리스 미네랄스 캘리포니아 인코포레이티드(Imerys Minerals California, Inc.)) 셀라이트(등록상표) 521(4.0 g)을 가하고, 이 혼합물을 셀라이트(등록상표) 521의 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 에탄올(2 x 20 mL)로 세척하고, 합친 여액을 감압 하에 농축 건조하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(150 mL)와 10% 수성 탄산 칼륨(100 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트(3 x 75 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에탄올(5 mL)로 마쇄하여, 71% 수율(1.71 g)의 에틸 1-(2-아미노에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-카복실레이트 101d를 백색 고체로서 수득하였다: mp 102-104℃; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 6.61 (s, 1H), 6.22 (br, 2H), 4.15 (m, 4H), 2.77 (m, 2H), 2.59 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 2.42 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 1.70 (m, 2H), 1.62 (m, 2H), 1.23 (t, 3H, J = 7.0 Hz); MS (APCI+) m/z 237.2 (M+H)
실시예 101e: 3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 101e
Figure pat00064
자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 101d(1.80 g, 7.63 mmol), 나트륨 에톡사이드(1.55 g, 22.8 mmol) 및 에탄올(50 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 55℃에서 5시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 에틸 아세테이트(200 mL)와 물(100 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트(2×100 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 42% 수율(605 mg)의 3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 101e를 백색 고체로서 수득하였다: mp 207-209℃; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.41 (s, 1H), 6.36 (s, 1H), 3.84 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 3.42 (m, 2H), 2.51 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.42 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.76 (m, 2H), 1.65 (m, 2H); (APCI+) m/z 191.3 (M+H)
실시예 101f: 3-브로모-5-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)아이소니코틴알데하이드 101f
Figure pat00065
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 101e(300 mg, 1.57 mmol), 3,5-다이브로모아이소니코틴알데하이드(2)(517 mg, 1.96 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(잔트포스, 120 mg, 0.2 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(180 mg, 0.2 mmol), Cs2CO3(650 mg, 2 mmol) 및 1,4-다이옥산(8 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃에서 6시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/MeOH(40:1 내지 20:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 101f(350 mg, 40%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 374.
실시예 101g: 3급-부틸 4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 101g
Figure pat00066
DMSO(1 L) 중의 5-브로모-2-나이트로피리딘(30 g, 148 mmol)의 용액에 K2CO3(40 g, 296 mmol) 및 3급-부틸 피페라진-1-카복실레이트(28g, 148 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 65℃에서 밤새도록 교반하였다. 냉각 후, 이를 물(2 L)에 부었다. 침전된 고체를 수집하고, 진공 하에 건조하였다. 이어서, 이를, 석유 에터/에틸 아세테이트(20:1) 및 이어서 메틸렌클로라이드로 용리하는 플래시 칼럼으로 추가로 정제하여, 화합물 101g(17 g, 37%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 309.
실시예 101h: 3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 101h
Figure pat00067
500 mL 병을 질소로 퍼지하고, 3급-부틸 4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 101g(3.1 g, 10 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 1.0 g) 및 에탄올(100 mL)을 넣었다. 이를 배기하고, 수소 기체를 넣고, 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 병에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표)의 패드를 통해 여과하여 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여, 를 수득하였다 101h(2.7 g, 97%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 279
실시예 101i: 3급-부틸 4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 101i
Figure pat00068
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(50 mL), 101h(1.3 g, 4.7 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.24 g, 4.7 mmol) 및 세슘 카보네이트(3.8 g, 12 mmol)를 넣었다. 생성 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 잔트포스(272 mg, 0.47 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(430 mg, 0.47 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 3시간 동안 가열 환류시켰다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(100 mL)와 물(100 mL) 사이에 분배하고, 여과하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(50 mL×2)로 추출하였다. 유기 층을 합치고, 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(50:1)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 101i(1.3 g, 59%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 464.
실시예 101j: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 101j
Figure pat00069
화합물 101i(3.6 g, 7.8 mmol)와 4.0 M HCl/다이옥산(10 mL)의 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하였다. 잔사를 수성 1.0M NaOH로 염기성화시키고, 메틸렌클로라이드로 추출하였다. 합친 유기 층을 물로 세척하고, 감압 하에 농축하여, 화합물 101j(2.46 g, 87%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 364.
실시예 101k: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 101k
Figure pat00070
메탄올(125 mL) 중의 화합물 101j(2.75 g, 7.5 mmol), 옥세탄-3-온(1.6 g, 22.7 mmol), NaBH3CN(4.75 g, 22.5 mmol) 및 아연 클로라이드(3 g, 22.7 mmol)의 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물에 가하고, 메틸렌클로라이드로 3회 추출하였다. 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(25:1)로 용리하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 101k(1.92 g, 61%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 420. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.58 (d, J = 2.5, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.94 (d, J = 3, 1H), 7.54 (d, J = 2.5, 1H), 7.39 (dd, J = 3, 1H), 7.25 (d, J = 4, 1H), 4.56 (t, J = 6.5, 2H), 4.46 (t, J = 6.5, 2H), 3.50 (s, 3H), 3.43 (m, 1 H), 3.01 (m, 4H), 2.40 (m, 4H).
실시예 101l: 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 500 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 101k (10.5 g, 25 mmol), Pin2B2 (15.6 g, 2.5 당량, 62 mmol), Pd2(dba)3 (1.14 g, 0.05 당량, 1.25 mmol), 잔트포스(1.16 g, 0.1 당량, 2.5 mmol), AcOK (7.35 g, 3 당량, 75 mmol) 및 다이옥산(150 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 65℃로 14시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, PE/EA=3/1(80 mL)로 세척하여, 화합물 101l(10.5 g, 94%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 468.
실시예 101m: 3-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-5-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)아이소니코틴알데하이드 101m
밀봉된 튜브에 아세토나이트릴/H2O(8 mL/1mL) 중의 화합물 101f(200 mg, 0.53 mmol), 화합물 101l(250 mg, 0.53 mmol), PdCl2(dppf)(42 mg, 0.05mmol), K3PO4(210 mg, 1.0 mmol) 및 NaOAc(85 mg, 1.0 mmol)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 밀봉된 튜브 내에서 4시간 동안 100℃로 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, DCM/MeOH(20:1)로 용리하는 역상 콤비-플래시로 정제하여, 화합물 101m(135 mg, 40%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 635.
실시예 101: 2-(4-(하이드록시메틸)-5-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 101
MeOH(5 mL) 중의 화합물 101m(135 mg, 0.21 mmol) 및 NaBH4(20 mg, 0.5 mmol)의 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물로 켄칭하고, 잔사를 EtOAc(5 mL X 2)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 101(55 mg, 40%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 637. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.58 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.86 (d, J=3.0, 1H), 7.38-7.37 (m, 2H), 7.25-7.23 (m, 1H), 6.54 (s, 1H), 5.16 (t, J=3.0, 1H), 4.56 -4.40 (m, 6H), 4.19 -4.12 (m, 3H), 3.95 (t, J=3.0, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.43-3.41(m, 1H), 3.06 (s, 4H), 2.57-2.61 (m, 2H), 2.45-2.48 (m, 6H), 1.78-1.80 (m, 2H), 1.69-1.70 (m, 2H)
실시예 102a: 1-메틸-3-[5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-5-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-1H-피리딘-2-온 102a
Figure pat00071
자석 교반기 및 온도 조절기를 장착한 1 L 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 5-브로모-1-메틸-3-[5-(4-메틸피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-1H-피리딘-2-온(미국 특허 출원 공개 제 2009/0318448 호에 따라 제조됨), (10.0 g, 0.027 mol), 비스(피나콜레이토)이붕소(8.06 g, 0.032 mol), 칼륨 아세테이트(10.4 g, 0.11 mol) 및 1,4-다이옥산(200 mL)을 넣었다. 생성 현탁액에 30분 동안 질소 스트림을 통과시킨 후, Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2(582 mg, 0.795 mmol)를 가했다. 생성 반응 혼합물을 3시간 동안 환류 하에 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 물(400 mL)과 에틸 아세테이트(600 mL) 사이에 분배하고, 셀라이트(등록상표)의 패드를 통해 여과하였다. 유기 상을 추출하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 다이에틸 에터(50 mL)와 헥산(250 mL)의 혼합물로 마쇄하고, 이 현탁액을 여과하였다. 필터 케이크를 진공 하에 실온에서 건조하여, 27% 수율(3.04 g)의 1-메틸-3-[5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-5-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-1H-피리딘-2-온 102a를 갈색 고체로서 수득하였다.
실시예 102b: 3-(1-메틸-5-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-5-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)아이소니코틴알데하이드 102b
밀봉된 튜브에 아세토나이트릴/H2O(8 mL/1 mL) 중의 3-브로모-5-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)아이소니코틴알데하이드 101f(200 mg, 0.53 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 102a(225 mg, 0.53 mmol), PdCl2(dppf)(42 mg, 0.05mmol), K3PO4(210 mg, 1 mmol) 및 NaOAc(85mg, 1 mmol)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, DCM/MeOH(20:1)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 102b(135 mg, 43%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 593.
실시예 102: 2-(4-(하이드록시메틸)-5-(1-메틸-5-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 102
MeOH(5 mL) 중의 3-(1-메틸-5-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-5-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)아이소니코틴알데하이드 102b(135 mg, 0.22 mmol) 및 NaBH4(20 mg, 0.5 mmol)의 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물로 켄칭하고, 잔사를 EtOAc(5 mL X 2)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 102(18 mg, 20%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 595. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.59 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.37-7.38 (m, 2H), 7.23-7.25 (m, 1H), 6.54 (s, 1H), 5.16 (t, J=3.0, 1H), 4.40 (s, 2H), 4.14-4.18 (m, 3H), 3.93-3.95 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.09 (s, 4H), 2.60-2.61(m, 6H), 2.48-2.34 (m, 5H), 1.78-1.79 (m, 2H), 1.69-1.70 (m, 2H)
실시예 103a: 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드 103a
-70℃로 냉각된 무수 테트라하이드로퓨란(40 mL) 중의 2-브로모-4-클로로피리딘(1.6 g, 8.0 mmol)의 용액에 리튬 다이아이소프로필-아마이드(5.0 mL, 10.0 mmol, 2.0 M)의 용액을 5분의 시간에 걸쳐 가하고, -70℃에서 추가로 1시간 동안 교반하였다. 무수 DMF(1.3 g)를 3분의 시간에 걸쳐 도입하고, 이 혼합물을 추가로 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이를 포화된 NH4Cl(30 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(20 mL×3)로 추출하였다. 합친 유기 층을 무수 Mg2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 103a(900 mg, 48%)를 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 10.21 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 5.0 Hz, 1H).
실시예 103b: 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 103b
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 103a(800 mg, 3.5 mmol), 3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 101e(665 mg, 3.5 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(320 mg, 0.35 mmol), 잔트포스(400 mg, 0.7 mmol), Cs2CO3(2.3 g, 7.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 103b(1.2 g, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 330.
실시예 103c: 4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 103c
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 103b(600 mg, 1.0 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사-보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(468 mg, 1.0 mmol), Pd(dppf)Cl2(81 mg, 0.1 mmol), K3PO4·3H2O(678 mg, 3.0 mmol) 및 테트라하이드로퓨란(20 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 4시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 103c(510 mg, 73%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 635.
실시예 103: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 103
0℃에서 메탄올(50 mL) 중의 화합물 103c(500 mg, 0.8 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(91 mg, 2.4 mmol)를 가하고, 추가로 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(3 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 103(224 mg, 45%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 637. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.61 (d, J=3.0, 1H), 8.48 (d, J=6.0, 1H), 7.92 (d, J=3.5, 1H), 7.81(d, J=3.0, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.38 (d, J=6.0, 1H), 7.24-7.27 (m, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.81 (d, J=11.5,1H), 5.01-5.04, (m, 1H), 4.60-4.71 (m, 5H), 4.32-4.49 (m, 2H), 3.83-4.15 (m, 3H), 3.70(s, 3H), 3.53-3.59 (m, 1H), 3.13-3.16 (m, 4H), 2.55-2.61 (m, 4H), 2.49-2.52 (m, 4H), 1.78-1.90 (m, 4H)
실시예 104a: 4-브로모-2-클로로니코틴알데하이드 104a
Figure pat00072
-70℃로 냉각된 무수 테트라하이드로퓨란(300 mL) 중의 4-브로모-2-클로로피리딘(12.0 g, 60.0 mmol)의 용액에 리튬 다이아이소프로필아마이드(30.0 mL, 60.0 mmol, 2.0 M)의 용액을 30분의 시간에 걸쳐 가하고, 추가로 -70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 무수 DMF(12.0 g)를 10분의 시간에 걸쳐 도입하고, 추가로 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이를 포화된 NaHCO3(200 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(100 mL×3)로 추출하였다. 합친 유기 층을 무수 Mg2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 104a(4.0 g, 29%)를 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 10.23 (s, 1H), 8.44 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 5.5 Hz, 1H).
실시예 104b: 2-클로로-4-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 104b
Figure pat00073
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 104a(1.1 g, 5.0 mmol), 3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 101e(477 mg, 2.5 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(230 mg, 0.25 mmol), 잔트포스(430 mg, 0.75 mmol), Cs2CO3(1.6 g, 5.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(50 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 65℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 104b(1.1 g, 80%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 330.
실시예 104c: 2-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-4-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 104c
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 104b(658 mg, 1.0 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사-보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(622 mg, 2.0 mmol), Pd(dppf) Cl2(65 mg, 0.08 mmol), K3PO4·3H2O(361 mg, 1.6 mmol) 및 테트라하이드로퓨란(40 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 4시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 104c(400 mg, 63%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 635.
실시예 104: 2-(3-(하이드록시메틸)-2-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-4-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 104
0℃에서 메탄올(50 mL) 중의 화합물 104c(360 mg, 0.6 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(70 mg, 1.8 mmol)를 가하고, 추가로 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(2 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 104(63 mg, 16%)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 637. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.70 (d, J=3.0, 1H), 8.65 (d, J=5.5, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.85(d, J=3.0, 1H), 7.60 (d, J=2.5, 1H), 7.36-7.37 (m, 2H), 7.22-7.23 (m, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.12 (t, J=5.5, 1H), 4.55-4.56 (m, 2H), 4.43-4.45 (m, 4H), 4.14-4.16 (m, 3H), 3.93-3.95 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.43-3.44 (m, 1H), 3.05-3.08 (m, 4H), 2.61-2.63 (m, 2H), 2.46-2.47 (m, 2H), 2.36-2.39 (m, 4H), 1.68-1.78 (m, 4H).
실시예 105a: N-메톡시-N-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로벤조[b]티오펜-2-카복스아마이드 105a
Figure pat00074
자석 교반기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 4,5,6,7-테트라하이드로벤조[b]티오펜-2-카복실산(3.00 g, 16.5 mmol), 메틸렌클로라이드(80 mL) 및 DMF(60 mg, 0.825 mmol)를 넣고, 0℃로 냉각하였다. 생성 용액에, 옥살일 클로라이드(2.31 g, 18.2 mmol)를 적가했다. 이 첨가가 완료된 후, 이 반응물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응물을 감압 하에 농축 건조하였다. 생성 백색 고체를 메틸렌클로라이드(80 mL)에 용해시키고, 이 용액을 0℃로 냉각하였다. 이어서, 트라이에틸아민(5.00 g, 49.5 mmol) 및 N,O-다이메틸하이드록실아민(1.61 g, 16.5 mmol)을 가했다. 이 첨가가 완료된 후, 냉각 욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 물(100 mL)과 에틸 아세테이트(200 mL) 사이에 분배하였다. 층들을 분리하고, 수성 상을 에틸 아세테이트(100 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 물(100 mL) 및 이어서 염수(100 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 용매를 감압 하에 증발시켰다. 생성 잔사를, 플래시 크로마토그래피로 정제하여, 88% 수율의 화합물 105a(3.29 gm)를 백색 고체로서 수득하였다: mp 36-37℃; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.79 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.34 (s, 3H), 2.78 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.62 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.82 (m, 4H); MS (APCI+) m/z 226.3 (M+H)
실시예 105b: 3-클로로-1-(4,5,6,7-테트라하이드로벤조[b]티오펜-2-일)프로판-1-온 105b
Figure pat00075
자석 교반기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 105a(2.70 g, 12.0 mmol) 및 무수 THF(45 mL)를 넣고, 아세톤/빙욕을 사용하여 이 용액을 -10℃로 냉각하였다. 여기에 THF(13.2 mL, 13.2 mmol) 중의 비닐마그네슘 브로마이드의 1.0 M 용액을 적가하고, 생성 반응 혼합물을 0℃에서 4시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(100 mL)와 2 M 수성 염산(40 mL) 사이에 분배하였다. 층들을 분리하고, 수성 상을 에틸 아세테이트(40 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 물(100 mL) 및 이어서 염수(100 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 메틸렌클로라이드(30 mL)에 용해시키고, 다이에틸 에터(15 mL) 중의 수소 클로라이드의 2 M 용액을 가했다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 용매를 감압 하에 제거하였다. 생성 잔사를, 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 29% 수율(804 mg)의 화합물 105b를 회백색 고체로서 수득하였다: mp 57-58℃; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.41 (s, 1H), 3.89 (t, 2H, J = 7.0 Hz), 3.30 (t, 2H, J = 7.0 Hz), 2.81 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.64 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.83 (m, 4H); MS (ECI+) m/z 229.1 (M+H)
실시예 105c: 5,6,7,8-테트라하이드로-1H-벤조[b]사이클로펜타[d]티오펜-3(2H)-온 105c
Figure pat00076
자석 교반기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 105b(800 mg, 3.51 mmol) 및 98% 황산(8 mL)을 넣었다. 95℃에서 16시간 동안 교반한 후, 이 반응 혼합물을 얼음(50 g)에 붓고, 생성 현탁액을 에틸 아세테이트(3×50 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 합치고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 플래시 크로마토그래피로 정제하여, 47% 수율의 화합물 105c(320 mg)를 회백색 고체로서 수득하였다: mp 75-76℃; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 2.89 (m, 2H), 2.87-2.83 (m, 4H), 2.56 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 1.84 (m, 4H)
실시예 105d: 5,6,7,8-테트라하이드로-1H-벤조[b]사이클로펜타[d]티오펜-3(2H)-온 옥심 105d
Figure pat00077
기계적 교반기 및 질소 주입구를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 하이드록실아민 하이드로클로라이드(573 mg, 8.25 mmol) 및 메탄올(10 mL)을 넣었다. 빙욕을 사용하여 이 혼합물을 0℃로 냉각하였다. 여기에 나트륨 아세테이트(677 mg, 8.25 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 그 후, 화합물 105c(319 mg, 1.65 mmol)를 가하고, 이 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 혼합물을 농축하고, 생성 잔사를, 물(10 mL)로 마쇄하였다. 생성 고체를 수집하고, 진공 오븐 내에서 45℃에서 건조하여, 84% 수율(287 mg)의 화합물 105d를 회백색 고체로서 수득하였다: mp 173-174℃; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.38 (s, 1H), 2.97 (m, 2H), 2.77-2.73 (m, 4H), 2.47 (m, 2H), 1.75 (m, 4H); MS (APCI+) m/z 208.3 (M+H)
실시예 105e: 3,4,5,6,7,8-헥사하이드로벤조티에노[2,3-c]피리딘-1(2H)-온 105e
Figure pat00078
환류 응축기, 자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 105d(285 mg, 1.38 mmol) 및 폴리인산(15 g)을 넣었다. 80℃에서 16시간 동안 교반한 후, 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 물(30 mL)을 가했다. 생성 혼합물을 30분 동안 교반하고, 여과하였다. 필터 케이크를 물(20 mL)로 세척하고, 진공 오븐 내에서 45℃에서 건조하여, 75% 수율(215 mg)의 화합물 105e를 회백색 고체로서 수득하였다: mp 203℃ 분해(dec); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 5.62 (s, 1H), 3.59 (t, 2H, J = 7.0 Hz), 2.81 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.72 (t, 2H, J = 7.0 Hz), 2.48 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.84 (m, 4H). MS (APCI+) m/z 208.3 (M+H)
실시예 105f: 3-브로모-5-{6-옥소-8-티아-5-아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7)-다이엔-5-일}피리딘-4-카브알데하이드 105f
Figure pat00079
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(15 mL), 3,5-다이브로모아이소니코틴-알데하이드(400 mg, 1.5 mmol), 8-티아-5-아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7)-다이엔-6-온 105e(146 mg, 0.76 mmol) 및 세슘 카보네이트(176 mg, 1.5 mmol)를 넣었다. 여기에 잔트포스(40 mg, 0.08 mmol) 및 Pd2(dba)3(70 mg, 0.08 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, DCM:MeOH(20:1)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 105f(200 mg, 70%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 377.
실시예 105g: 3-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-5-{6-옥소-8-티아-5-아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7)-다이엔-5-일}피리딘-4-카브알데하이드 105g
Figure pat00080
밀봉된 튜브에 CH3CN(5 mL) 및 H2O(1.5 mL) 중의 화합물 105f(200 mg, 0.53 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일) 피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(240 mg, 0.51 mmol), PdCl2(dppf)(42 mg, 0.05 mmol), K3PO4(230 mg, 1 mmol) 및 NaOAc(80 mg, 1 mmol)를 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/MeOH(10:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 105g를 40% 수율(138 mg)로 연황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 638.
실시예 105: 4-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-5-{6-옥소-8-티아-5-아자트라이사이클로-[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7)-다이엔-5-일}피리딘 105
0℃에서 메탄올(5 mL) 중의 3-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-5-{6-옥소-8-티아-5-아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]-트라이데카-1(9),2(7)-다이엔-5-일}피리딘-4-카브알데하이드 105g(130 mg, 0.20 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(22 mg, 0.6 mmol)를 가하고, 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(1.0 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 105(90 mg, 65%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ :654. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.58 (d, J=2.0, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.24-7.22 (m,1H), 5.14 (t, J=3.0, 1H), 4.56-4.42 (m, 6H), 4.08-3.90 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.43 (d, J=3.5,1H), 3.07 (s, 4H), 2.89-2.79 (m, 4H), 2.55-2.53 (m, 2H), 2.39-2.37 (m, 4H), 1.80-1.81 (m, 4H)
실시예 106a: 3,3-다이메틸사이클로펜탄온 106a
Figure pat00081
자석 교반기, 첨가 깔때기 및 질소 주입구를 장착한 1 L 3구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 에터(200 mL) 및 구리(I) 요오다이드(54.46 g, 0.286 mol)를 넣었다. 이 혼합물을 0℃로 냉각하고, 이 반응 혼합물에 메틸리튬(에터 중의 1.6 M, 357.5 mL, 0.572 mol)을 1.5시간에 걸쳐 적가하고, 0℃에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 그 후, 에터(150 mL) 중의 3-메틸사이클로-펜트-2-엔온(25 g, 0.260 mol)의 용액을 1.5시간에 걸쳐 적가했다. 이어서, 이 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 나트륨 설페이트·십수화물(300 g)에 부었다. 생성 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 그 후, 이 혼합물을 여과하고, 에터(1000 mL)로 세척하였다. 여액을 농축하고, 감압 하에 증류하여, 70% 수율(20.5 g)의 3,3-다이메틸사이클로-펜탄온 106a를 무색 액체로서 수득하였다: bp 50-55℃ (10 mmHg에서); 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 2.31 (t, 2H, J = 7.8 Hz), 2.05 (s, 2H), 1.79 (t, 2H, J = 7.8 Hz); MS (ESI+) m/z 113.3 (M+H)
실시예 106b: 에틸 5,5-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타[b]티오펜-2-카복실레이트 106b
Figure pat00082
자석 교반기, 환류 응축기, 첨가 깔때기 및 질소 주입구를 장착한 500 mL 3구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 DMF(9.49 g, 0.100 mol) 및 메틸렌클로라이드(100 mL)를 넣었다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 이 반응물에 인 옥시클로라이드(14.1 g, 0.920 mol)를 30분에 걸쳐 적가했다. 이 첨가가 완료되면, 이 반응물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 메틸렌클로라이드(100 mL) 중의 화합물 106a(11.2 g, 0.100 mol)의 용액을 1시간에 걸쳐 적가했다. 이어서, 이 반응물을 18시간 동안 환류 하에 교반하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 분쇄된 얼음(400 mL)과 나트륨 아세테이트(100 g, 1.22 mol)의 혼합물에 부었다. 생성 혼합물을 45분 동안 교반하였다. 그 후, 수성 층을 분리하고, 메틸렌클로라이드(2×500 mL)로 추출하였다. 이어서, 합친 유기 층을 물(2×200 mL) 및 이어서 염수(200 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 이어서, 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 농축하여, 조생성물인 2-클로로-4,4-다이메틸사이클로펜트-1-엔카브알데하이드를 수득하고, 기계적 교반기, 환류 응축기 및 질소 주입구를 장착한 500 mL 3구 환저 플라스크에 넣었다. 이어서, 메틸렌클로라이드(200 mL), 에틸 2-머캅토아세테이트(11.0 g, 0.092 mol) 및 트라이에틸아민(30 g, 0.207 mol)을 가했다. 이어서, 이 반응 혼합물을 6시간 동안 환류 하에 교반하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 농축하여, 걸쭉한 오렌지색 잔사를 수득하였다. 여기에 에탄올(200 mL) 및 트라이에틸아민(30.0 g, 0.207 mol)을 가하고, 이 반응물을 12시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 에터(600 mL)로 희석하였다. 생성 혼합물을 1 M 염산(150 mL) 및 염수(100 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 플래시 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 106b를 34% 수율(7.70 g)로 무색 액체로서 수득하였다: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.48 (s, 1H), 4.33 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 2.72 (s, 2H), 2.56 (s, 2H), 1.38 (t, 3H, J = 1.8 Hz), 1.17 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 225.1
실시예 106c: 5,5-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타[b]티오펜-2-카복실산 106c
Figure pat00083
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크 내에서, 화합물 106b(4.00 g, 17.8 mmol)를 에탄올(50 mL)에 용해시켰다. 여기에 THF(50 mL), 물(50 mL) 및 리튬 하이드록사이드(854 mg, 35.6 mmol)를 가하고, 이 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 2M 염산을 사용하여 pH 1.5로 산성화시키고, 이어서 에틸 아세테이트(2×200 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합치고, 물(2×100 mL) 및 이어서 염수(100 ml)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 이어서, 건조제를 여과에 의해 분리하였다. 생성 여액을 증발시킨 후, 화합물 106c를 91% 수율(3.2 g)로 백색 고체로서 수득하였다: mp 170-172℃; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 12.77 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 2.71 (s, 2H), 2.53 (s, 2H), 1.20 (s, 6H); MS (ESI+ m/z 195.0
실시예 106d: 5,5-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타[b]티오펜-2-카복실산 106d
Figure pat00084
자석 교반기, 환류 응축기 및 상기 응축기 상에 놓인 버블러(bubbler)를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 106c(2.30 g, 11.6 mmol), 톨루엔(25 mL), 티오닐 클로라이드(4.09 g, 34.9 mmol) 및 DMF(1 방울)를 넣었다. 이 혼합물을 1시간 동안 가열 환류시키고, 이어서 감압 하에 회전 증발기 상에서 45℃에서 증발시켰다. 생성 산 클로라이드를 메틸렌클로라이드(20 mL)로 희석하였다.
자석 교반기를 장착한 별도의 250 mL 3구 환저 플라스크 내에서, 질소 하에 N,O-다이메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드(2.26 g, 23.2 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(2.97 g, 23.0 mmol)을 무수 메틸렌클로라이드(20 mL)에 용해시키고, 이 용액을 빙수 욕 내에서 0℃로 냉각하였다. 여기에 상기 산 클로라이드의 용액을 가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물(100 mL), 10% 수성 시트르산(50 mL) 및 포화된 수성 중탄산 나트륨과 물의 1:1 혼합물(100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 감압 하에 회전 증발기 상에서 증발시켜, 93% 수율(2.60 g)의 화합물 106d를 연황색 고체로서 수득하였다: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.66 (s, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.35 (s, 3H), 2.74 (s, 2H), 2.58 (s, 2H), 1.23 (s, 6H)
실시예 106e: 3-클로로-1-(5,5-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타[b]티오펜-2-일)프로판-1-온 106e
Figure pat00085
자석 교반기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 106d(2.41 g, 10.0 mmol) 및 무수 THF(20 mL)를 넣었다. 이 용액을 -70℃로 냉각하고, 반응 온도를 -60℃ 미만으로 유지하면서, THF(11 mL, 11.0 mmol) 중의 1 M 비닐마그네슘 브로마이드를 가했다. 이 반응 혼합물을 -13 내지 -7℃에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 30분에 걸쳐 실온으로 가온했다. 이 반응물을 다시 -70℃로 냉각하고, 에터(22.5 ml, 45 mmol) 중의 수소 클로라이드의 2 M 용액을 가했다. 이어서, 이 반응물을 냉동고 내에서 -10℃로 밤새도록 저장했다. 그 후, 이 혼합물을 감압 하에 회전 증발기 상에서 증발시키고, 생성 잔사를, 물(100 mL)과 에터(100 mL) 사이에 분배하였다. 에터 추출물을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 감압 하에 회전 증발기 상에서 증발시켜, 약 75% 순도(NMR에 의함)를 갖는 조질 화합물 106e(2.86 g, 118%)를 갈색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.45 (s, 1H), 3.89 (t, 2H, J = 6.9 Hz), 3.30 (t, 2H, J =6.9 Hz), 2.75 (s, 2H), 2.59 (s, 2H), 1.24 (s, 6H)
실시예 106f: 6,6-다이메틸-1,2,6,7-테트라하이드로다이사이클로펜타[b,d]티오펜-3(5H)-온 106f
Figure pat00086
자석 교반기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 조질 화합물 106e(2.86 g, 정량적 수율로 추정하여 10.0 mmol로 산정됨) 및 98% 황산을 넣었다. 이 반응 혼합물을 90℃ 오일 욕 내에서 밤새도록 가열하였다. 이 반응 혼합물을 얼음/아세톤 욕에 두고, 물(300 mL) 중의 이칼륨 수소 포스페이트(105 g, 0.603 mol)의 차가운(5℃) 용액을 한꺼번에 가했다. 생성 혼합물을 에틸 아세테이트(300 mL)와 진탕하고, 여과하였다. 필터 케이크를 에틸 아세테이트(100 mL)로 세척하였다. 여액의 에틸 아세테이트 층을 분리하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 감압 하에 회전 증발기 상에서 증발시켰다. 생성 잔사를, 플래시 칼럼 크로마토그래피(실리카, 80:20 헥산/에틸 아세테이트)로 정제하여, 화합물 106f를 2단계에 걸쳐 37% 수율(683 mg)로 비정질 갈색 고체로서 수득하였다: mp 60-62℃; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 2.92-2.87 (m, 4H), 2.79 (s, 2H), 2.53 (s, 2H), 1.26 (s, 6H); LCMS (ESI+) m/z 207.0 (M+H)
실시예 106g: 6,6-다이메틸-1,2,6,7-테트라하이드로다이사이클로펜타[b,d]티오펜-3(5H)-온 106g
Figure pat00087
자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 하이드록실아민 하이드로클로라이드(688 mg, 9.90 mmol), 나트륨 아세테이트(812 mg, 9.90 mmol) 및 메탄올(10 mL)을 넣고, 이 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 후, 화합물 106f(680 mg, 3.30 mmol)의 용액을 실온에서 적가하고, 이 반응물을 질소 분위기 하에 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응이 완료되지 않았기 때문에, 하이드록실아민 하이드로클로라이드(1.15 g, 16.5 mmol) 및 나트륨 아세테이트(1.35 g, 16.5 mmol)를 가하고, 실온에서 58시간 동안 계속 교반하였다. 그 후, 이 혼합물을 메틸렌클로라이드(150 mL) 및 물(100 mL)로 희석하고, 층들을 분리하였다. 유기 층을 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 농축하여, 조질 화합물 106g를 정량적 수율(730 mg)로 황색 반-고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다: mp 122-124℃; 주요 이성질체에 대한 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 3.13-3.11 (m, 2H), 2.85-2.83 (m, 2H), 2.77 (s, 2H), 2.49 (s, 2H), 1.24 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 222.0 (M+H)
실시예 106h: 6,6-다이메틸-3,4,6,7-테트라하이드로-5H-사이클로펜타[4,5]티에노[2,3-c]피리딘-1(2H)-온 106h
Figure pat00088
환류 응축기, 기계적 교반기 및 질소 주입구를 장착한 100 mL 3구 환저 플라스크에 화합물 106g(700 mg, 3.16 mmol) 및 폴리인산(25 g)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 80℃에서 13시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 혼합물을 0℃로 냉각하고, 내부 온도를 10 내지 45℃로 유지하면서, 물(50 mL) 조심스럽게 적가했다. 이 혼합물을 메틸렌클로라이드/메탄올(90:10)(100 mL)로 희석하고, 층들을 분리하였다. 수성 층을 메틸렌클로라이드/메탄올(90:10)(50 mL)로 추출하고, 합친 유기 층을 포화된 수성 중탄산 나트륨(50 mL) 및 염수(150 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 플래시 칼럼 크로마토그래피(실리카, 95:5 메틸렌클로라이드/메탄올)로 정제하여, 6,6-다이메틸-3,4,6,7-테트라하이드로-5H-사이클로펜타[4,5]티에노[2,3-c]피리딘-1(2H)-온 106h를 90% 수율(630 mg)로 비정질 회백색 고체로서 수득하였다: mp 205-207℃; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 5.51 (s, 1H), 3.60-3.56 (m, 2H), 2.76-2.73 (m, 4H), 2.49 (s, 2H), 1.26 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 222.0 (M+H)
실시예 106i: 3-브로모-5-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8), 2(6)-다이엔-10-일}피리딘-4-카브알데하이드 106i
Figure pat00089
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(15 mL), 3,5-다이브로모아이소니코틴-알데하이드(400mg, 1.5 mmol), 4,4-다이메틸-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-9-온(106h)(170 mg, 0.76 mmol) 및 세슘 카보네이트(176 mg, 1.5 mmol)를 넣었다. 여기에 잔트포스(40 mg, 0.08 mmol) 및 Pd2(dba)3(70 mg, 0.08 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, DCM:MeOH(20:1)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 106i(200 mg, 65%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 405.
실시예 106j: 3-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-5-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8), 2(6)-다이엔-10-일}피리딘-4-카브알데하이드 106j
Figure pat00090
밀봉된 튜브에 CH3CN(5 mL) 및 H2O(1.5 mL) 중의 화합물 106i(200 mg, 0.50 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일) 피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(240 mg, 0.51 mmol), PdCl2(dppf)(42 mg, 0.05 mmol), K3PO4(230 mg, 1 mmol) 및 NaOAc(80 mg, 1 mmol)를 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/MeOH(10:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 106j(130 mg, 40%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 666.
실시예 106: 4-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-5-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8), 2(6)-다이엔-10-일}피리딘-4-카브알데하이드 106
0℃에서 메탄올(5 mL) 중의 화합물 106j(130 mg, 0.20 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(22 mg, 0.6 mmol)를 가하고, 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(1.0 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 106(60 mg, 45%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+: 668. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.58 (d, J=2.0, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.87 (d, J=2.5, 1H), 7.38-7.36 (m, 2H), 7.24-7.22 (m, 1H), 5.15 (t, J=5.0, 1H), 4.56-4.42 (m, 6H), 4.08-4.04 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.43-3.42 (m, 1H), 3.07-2.94 (m, 6H), 2.55-2.53 (m, 4H), 2.39-2.38 (m, 4H), 1.23 (s, 6H)
실시예 107a: (E)-에틸 3-(2-클로로-4,4-다이메틸사이클로펜트-1-엔일)아크릴레이트 107a
Figure pat00091
문헌[Organic Preparations and Proedures Int., 29(4):471-498]으로부터 하기 2가지 절차를 채용하였다. 자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 500 mL 1구 환저 플라스크에 벤젠(240 mL) 중의 2-클로로-4,4-다이메틸사이클로펜트-1-엔카브알데하이드(38 g, 240 mmol)를 넣었다. 이 용액에 에톡시카보닐메틸렌트라이페닐포스포란(84 g, 240 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 14시간 동안 교반하였다. 그 후, 용매를 증발시키고, 잔사를 헥산(2 L)으로 마쇄하여, PPh3 부산물로부터 생성물을 추출하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 잔사를, 100% 헥산 내지 헥산/에틸 아세테이트(1:1) 구배를 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 37% 수율(20 g)의 (E)-에틸 3-(2-클로로-4,4-다이메틸사이클로펜트-1-엔일)아크릴레이트 107a를 수득하였다.
실시예 107b: 에틸 5,5-다이메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[b]피롤-2-카복실레이트 107b
Figure pat00092
자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 DMSO(100 mL) 중의 화합물 107a(17 g, 74 mmol)를 넣었다. 이 용액에 나트륨 아자이드(9.6 g, 150 mmol)를 가했다. 이어서, 이 혼합물을 75℃로 가열하고, 8시간 동안 교반하였다. rt(실온)로 냉각한 후, H2O(100 mL) 및 CH2Cl2(200 mL)를 가하고, 유기 층을 분리하였다. 수성 층을 CH2Cl2(50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 잔사를 100% 헥산 내지 헥산/에틸 아세테이트(1:1) 구배를 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 37% 수율(5.7 g)의 화합물 107b를 수득하였다.
실시예 107c: 에틸 1-(시아노메틸)-5,5-다이메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로-펜타[b]피롤-2-카복실레이트 107c
Figure pat00093
자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 DMF(57 mL) 중의 화합물 107b(6.2 g, 30 mmol)를 넣었다. 이 용액에 NaH(미네랄 오일 중의 80% 분산액, 1.26 g, 42.1 mmol)를 가했다. 생성 혼합물을 실온에서 90분 동안 교반하였다. 그 후, 브로모아세토나이트릴(2.94 mL, 42 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 14시간 동안 교반하였다. 그 후, 물(100 mL) 및 에틸 아세테이트(200 mL)를 가하고, 유기 층을 분리하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트(2 X 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 95% 수율(7 g)의 화합물 107c를 수득하였다.
실시예 107d: 에틸 1-(2-아미노에틸)-5,5-다이메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로-펜타[b]피롤-2-카복실레이트 하이드로클로라이드 107d
Figure pat00094
500 mL 파 반응 병을 질소로 퍼지하고, 10% Pd/C(50% 습윤, 2.0 g 건조 중량), 화합물 107c(4.5 g, 18 mmol), 12% 염산(9.2 mL, 37 mmol), 에틸 아세테이트(80 mL) 및 에탄올(52 mL)을 넣었다. 이 병을 파 수소발생기에 부착하고, 배기하고, 50 psi의 압력까지 수소 기체를 넣고, 6시간 동안 진탕하였다. 그 후, 수소를 배기하고, 질소를 상기 병에 넣었다. 셀라이트(등록상표) 521(10.0 g)을 가하고, 이 혼합물을 셀라이트(등록상표) 521의 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 에탄올(2×50 mL)로 세척하고, 합친 여액을 감압 하에 농축 건조하였다. 조질 잔사인 에틸 1-(2-아미노에틸)-5,5-다이메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[b]피롤-2-카복실레이트 하이드로클로라이드 107d를 추가의 정제 없이 다음 단계로 보냈다.
실시예 107e: 4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 107e
Figure pat00095
자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 조질 1-(2-아미노에틸)-5,5-다이메틸-1,4,5,6-테트라하이드로사이클로펜타[b]피롤-2-카복실레이트 하이드로클로라이드 107d(약 18 mmol), 나트륨 에톡사이드(6.2 g, 92 mmol) 및 에탄올(120 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 55℃에서 밤새도록 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 에틸 아세테이트(200 mL)와 물(100 mL) 사이에 분배하였다. 이 용액을 여과하였다. 고체를 에틸 아세테이트(15 mL)로 세척하여, 850 mg의 목적 생성물 107e를 수득하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트(2×100 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여, 거의 건조하였다. 이 용액을 여과하고, 고체(1.44 g)를 에틸 아세테이트(15 mL)로 세척하였다. 합친 고체를 진공 하에 건조하여, 61% 수율(2.3 g)의 화합물 107e를 수득하였다.
실시예 107f: 3-브로모-5-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-카브알데하이드 107f
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(15 mL), 3,5-다이브로모아이소니코틴알데하이드(400 mg, 1.5 mmol), 화합물 107e(155 mg, 0.76 mmol) 및 세슘 카보네이트(176 mg, 1.5 mmol)를 넣었다. 잔트포스(40 mg, 0.08 mmol) 및 Pd2(dba)3(70 mg, 0.08 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, DCM:MeOH(20:1)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 107f(200 mg, 70%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 388.
실시예 107g: 5-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-3-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]-도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-카브알데하이드 107g
밀봉된 튜브에 CH3CN(5 mL) 및 H2O(1.5 mL) 중의 화합물 107f(200 mg, 0.51 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(240 mg, 0.51 mmol), PdCl2(dppf)(42 mg, 0.05 mmol), K3PO4(230 mg, 1 mmol) 및 NaOAc(80 mg, 1 mmol)를 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/MeOH(10:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 107g를 35% 수율(120 mg)로 갈색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 649.
실시예 107: 10-[4-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-4-(하이드록시메틸)피리딘-3-일]-4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 107
0℃에서 메탄올(5 mL) 중의 화합물 107g(120 mg, 0.18 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(22 mg, 0.6 mmol)를 가하고, 이 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(1.0 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 107(72 mg, 60%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+: 651. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.65 (s,1H), 8.59 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.86 (d, J=1.5, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.22 (d, J=2.4, 2H), 6.52 (s, 1H), 5.16 (t, J=3.0, 1H), 4.56-4.44 (m, 6H), 4.21-4.12 (m, 3H), 3.92 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.43-3.42 (m, 1H), 3.06 (s, 4H), 2.57-2.38 (m, 8H),1.21 (s, 6H)
실시예 108a: 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드 103a(3.0 g, 13.6 mmol), 4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 107e(1.84 g, 9.0 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(826 mg, 0.9 mmol), 잔트포스(1.04 mg, 1.8 mmol), Cs2CO3(5.8 g, 18.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(40 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 90℃로 5시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여, 화합물 108a(730 mg, 순도: 99%; 수율: 31.7%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 344.0.
실시예 108b: 4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]-도데카-2(6),7-다이엔-10-일}니코틴알데하이드 108b
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자-트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(350 mg, 1.02 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(476 mg, 1.02 mmol), Pd(dppf)Cl2(83 mg, 0.10 mmol), K3PO4(526 mg, 3.06 mmol) 및 테트라하이드로퓨란(20 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 4시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 108b(400 mg, 61%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 649.4.
실시예 108: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 108
0℃에서 메탄올(30 mL) 중의 4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로-[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}니코틴알데하이드 108b(400 mg, 0.62 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(70 mg, 1.86 mmol)를 가하고, 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(1.0 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 108(170 mg, 42%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 651.4. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.63 (d, J=2.0, 1H), 8.48 (d, J= 5.0, 1H), 7.92 (d, J= 2.5, 1H), 7.82 (d, J = 2.5, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.0,1H), 7.27-7.25 (m, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.81 (d, J = 9.5, 1H), 5.05 (t, J = 6.5, 1H), 4.72-4.64 (m, 5H), 4.51-4.48 (m, 1H), 4.34-4.32 (m,1H), 4.15 (d, J = 4.5, 2H), 3.87-3.84 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.59-3.54 (m, 1H), 3.16-3.14 (m, 4H), 2.58-2.50 (m, 8H), 1.27(s, 6H)
실시예 109a: 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 109a
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드 103a(660 mg, 3.0 mmol), 4,4-다이메틸-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-9-온 106h(665 mg, 3.0 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(270 mg, 0.3 mmol), 잔트포스(340 mg, 0.6 mmol), Cs2CO3(2.0 g, 6.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL). 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 90℃로 5시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 다이클로로메탄 화합물 109a(105 mg, 14%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 361.
실시예 109b: 4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]-도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}니코틴알데하이드 109b
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 109a(75 mg, 0.2 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(94 mg, 0.2 mmol), Pd(dppf)Cl2(17 mg, 0.02 mmol), K3PO4·3H2O(140 mg, 0.6 mmol) 및 테트라하이드로퓨란(10 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 4시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 109b(60 mg, 47%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 666.
실시예 109: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-4,4-다이메틸-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-9-온 109
0℃에서 메탄올(5 mL) 중의 화합물 109b(60 mg, 0.1 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(11 mg, 0.3 mmol)를 가하고, 이 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(0.3 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 109(14 mg, 24%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 668. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.60 (d, J=2.5, 1H), 8.48 (d, J=5.0, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.85(d, J=3.0, 1H), 7.44 (d, J=2.0, 1H), 7.34-7.38 (m, 2H), 7.23 (d, J=9.0, 1H), 4.94 (t, J=5.0, 1H), 4.55 (t, J=7.0, 2H), 4.39-4.46 (m, 4H), 4.14-4.19 (m, 1H), 3.79-3.83 (m, 1H), 3.59(s, 3H), 3.42-3.44 (m, 1H), 3.00-3.07 (m, 5H), 2.85-2.90 (m, 1H), 2.76 (s, 2H), 2.52-2.59 (m, 2H), 2.36-2.39 (m, 4H), 1.21(d, J=6.5, 6H)
실시예 110a: 1-메틸-3-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 110a
자석 교반기 및 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온(0.45 g, 1.08 mmol), (PinB)2(1.37 g, 5.4 mmol), Pd2(dba)3(49 mg, 0.054 mmol), 잔트포스(52 mg 0.11 mmol), KOAc(318 mg, 3.24 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 반응 혼합물을 15시간 동안 60℃로 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여, 조질 화합물 110a를 수득하고, 이를 다음 반응에 직접 사용하였다. MS: [M+H]+ 426.
실시예 110b: 4-(1-메틸-5-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 110b
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노-[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 103b(377mg, 1.15 mmol), 110a(320 mg, 0.78 mmol), Pd(dppf)Cl2(130 mg, 0.16 mmol), K3PO4·3H2O(52.9 mg, 0.23 mmol) 및 테트라하이드로퓨란(20 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 밤새도록 가열 환류시키고, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 110b(351 mg, 76%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 593.
실시예 110: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 110
0℃에서 메탄올(50 mL) 중의 화합물 110b(60 mg, 0.1 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(11.5 mg, 0.3 mmol)를 가하고, 이 혼합물을 추가로 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(3 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 110(26.2 mg, 49%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 595. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.69 (d, J = 1.5, 1H), 8.46 (d, J = 5.0, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.41-7.37 (m, 1H), 7.34 (d, J = 1.5, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.22 (d, J = 8.0, 1H), 6.15 (d, J = 8.5, 1H), 5.10 (t, J = 6.5, 1H), 4.66-4.64 (m, 1H), 4.51-4.30 (m, 2H), 4.15-4.12 (m, 2H), 3.93-3.89(m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.58-3.48 (m, 4H), 2.61-2.56(m, 7H), 2.47-2.39 (m, 3H), 1.91-1.87 (m, 2H), 1.79-1.78 (d, J = 5.0, 3H)
실시예 111a: (6-아미노피리딘-3-일)(모폴리노)메탄온 111a
Figure pat00096
EtOH(400 mL) 중의 모폴린(9.00 g, 103 mmol)의 용액에 EDCI(10.0 g, 52.2 mmol), HOBt(7.00 g 51.8 mmol) 및 6-아미노니코틴산(6.00 g, 43.4 mmol)을 가했다. 18시간 동안 교반한 후, 생성 현탁액을 여과하였다. 고체를 MeOH(100 mL)와 메틸렌클로라이드(100 mL)의 혼합물로 마쇄하여, 화합물 111a(2.7 g, 30%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ 208
실시예 111b: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 111b
Figure pat00097
화합물 101i의 합성에 대해 기술된 절차에 따라, 중간체 111a 및 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온을 반응시켜 화합물 111b를 21% 수율로 수득하였다. LCMS: (M+H)+ 394. 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.84 (d, J=2.5, 1H), 8.42 (d, J=2, 1H), 7.72 (m, 1H), 7.42 (d, J=2, 1H), 7.11 (d, J=8.5, 1H), 3.72 (m, 8H), 3.63 (s, 3H).
실시예 111c: 1-메틸-3-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 111c
자석 교반기 및 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 111b(1.0 g, 0.25 mmol), 잔트포스(120 mg, 0.025 mmol), Pd2(dba)3(110 g, 0.0125 mmol), KOAc(750 mg, 0.75 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(3.2g, 1.25mmol) 및 1,4-다이옥산(50 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 반응 혼합물을 100℃로 15시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(5:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 111c(700 mg, 63%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 441.
실시예 111d: 4-(1-메틸-5-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 111d
자석 교반기 및 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 111c(450 mg, 1.26 mmol), 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 103b(413 mg, 1.26 mmol), Pd(dppf)Cl2(102 mg, 0.126 mmol), K3PO4·3H2O(85 mg, 0.352 mmol) 및 THF(10 mL)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 반응 혼합물을 100℃로 15시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(7:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 111d(700 mg, 63%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 608.
실시예 111: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 111
화합물 111d(60 mg, 0.05 mmol), NaBH4(6.4mg, 0.1mmol) 및 MeOH(5 mL)의 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 EtOAc(10 mL X 2)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 111(27 mg, 44%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 610. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 9.00 (s, 1H), 8.78 (d, J=2.0, 1H), 8.49 (d, J=5, 1H), 8.26 (d, J=2.0, 1H), 7.65-7.67 (m, 2H), 7.60 (d, J=2.5, 1H), 6.58 (s,1H), 4.96 (t, J=5, 1H), 4.40-4.46 (m, 2H), 4.11-4.24 (m, 3H), 3.86-3.88 (m, 1H), 3.56-3.62 (m, 8H), 3.50 (s, 4H), 2.62-2.63 (m, 2H), 2.46-2.47 (m, 2H), 1.67-1.80 (m, 4H)
실시예 112a: 메틸 5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 112a
Figure pat00098
자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 500 mL 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실산(30.4 g, 184 mmol), DMF(1.00 g, 13.6 mmol) 및 메틸렌클로라이드(300 mL)를 넣었다. 이 용액을 빙욕을 이용하여 0℃로 냉각하였다. 여기에 옥살일 클로라이드(28.0 g, 221 mmol)를 적가하고, 이 반응 혼합물을 실온으로 30분에 걸쳐 가온하고, 5시간 동안 교반하였다. 그 후, 생성 용액을 농축하여, 갈색 고체를 수득하였다. 이 고체를 무수 메탄올(400 mL)에 용해시키고, 이 용액을 0℃로 냉각하였다. 이 반응 혼합물에 트라이에틸아민(57 g, 552 mmol)을 가하고, 이를 실온에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축 건조하였다. 잔사를 메틸렌클로라이드(300 mL)로 희석하고, 물(200 mL) 및 포화된 수성 중탄산 나트륨(200 mL)로 세척하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 헥산(200 mL)으로 마쇄하여, 화합물 112a를 58% 수율(19.1 g)로 수득하였다: mp 72-74℃; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.13 (s, 1H), 6.23 (s, 1H), 3.93 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 3.77 (s, 3H), 2.75 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.93 (m, 2H), 1.80 (m, 2H); (APCI+) m/z 180.1 (M+H)
실시예 112b: 메틸 3-(시아노메틸)-5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 112b
Figure pat00099
첨가 깔때기 및 온도계를 장착한 500 mL 3구 환저 플라스크에 화합물 112a(6.70 g, 37.4 mmol), 요오도아세토나이트릴(12.5 g, 74.9 mmol), 철(II) 설페이트·칠수화물(5.20 g, 18.7 mmol) 및 다이메틸 설폭사이드(250 mL)를 넣었다. 실온에서 수욕을 이용하여 시린지 펌프를 통해, 이 반응 혼합물에 수소 퍼옥사이드(35%, 18.2 g, 187 mmol)를 1시간 내에 적가했다. 온도를 25℃ 내지 35℃로 유지 하기 위해, 반응 혼합물의 색깔이 진적색이 될 때까지, 이 반응 혼합물에 철(II) 설페이트·칠수화물(2 내지 3 당량)을 가했다. TLC가 반응이 완료되지 않은 것으로 나타나는 경우, 이어서, 반응이 완료될 때까지 추가의 수소 퍼옥사이드(2 내지 3 당량) 및 추가의 철(II) 설페이트·칠수화물(1 내지 2 당량)을 동일한 방식으로 가했다. 그 후, 이 반응 혼합물을 포화된 중탄산 나트륨 용액(200 mL)과 에틸 아세테이트(400 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트(2×100 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 포화된 나트륨 티오설페이트 용액(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 78% 수율(6.40 g)의 화합물 112b를 황색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.23 (s, 1H), 4.23 (s, 2H), 3.94 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 3.81 (s, 3H), 2.74 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 2.00 (m, 2H), 1.83 (m, 2H); (APCI+) m/z 219.3 (M+H)
실시예 112c: 메틸 3-(2-아미노에틸)-5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 수소 클로라이드 염 112c
Figure pat00100
50 psi의 수소 하에 수소 클로라이드의 존재 하에 에탄올 및 에틸 아세테이트 중에서 메틸 3-(시아노메틸)-5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 112b를 백금 옥사이드 촉매로 실온에서 밤새도록 수소화시켜, 화합물 112c(380 mg, 1.74 mmol)를 수득하고, 이를 직접 다음 단계에 사용하였다.
실시예 112d: 3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1(2H)-온 112d
Figure pat00101
자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 메틸 3-(2-아미노에틸)-5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 수소 클로라이드 염 112c(상기 제조됨, 정량적 수율로 추정하여 1.74 mmol로 산정됨), 나트륨 에톡사이드(354 mg, 5.22 mmol) 및 에탄올(20 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 55℃에서 5시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 에틸 아세테이트(200 mL)와 물(100 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트(2×100 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 67% 수율(220 mg)의 화합물 112d를 백색 고체로서 수득하였다: mp 195-197℃; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 6.76 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 3.78 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 3.35 (m, 2H), 2.66 (m, 4H),1.87 (m, 2H), 1.72 (m, 2H); (APCI+) m/z 191.3 (M+H)
실시예 112e: 3-브로모-5-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)아이소니코틴알데하이드 112e
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(15 mL), 3,5-다이브로모아이소니코틴알데하이드(400mg, 1.5 mmol), 112d(142 mg, 0.76 mmol) 및 세슘 카보네이트(176 mg, 1.5 mmol)를 넣었다. 여기에 잔트포스(40 mg, 0.08 mmol) 및 Pd2(dba)3(70 mg, 0.08 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, DCM:MeOH(20:1)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 112e(200 mg, 70%)를 수득하였다. MS: [M+H]
실시예 112f: 3-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-5-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)아이소니코틴알데하이드 112f
밀봉된 튜브에 CH3CN(5 mL) 및 H2O(1.5 mL) 중의 화합물 112e(200 mg, 0.53 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일) 피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(240 mg, 0.51 mmol), PdCl2(dppf)(42 mg, 0.05 mmol), K3PO4(230 mg, 1 mmol) 및 NaOAc(80 mg, 1 mmol)를 가했다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/MeOH(10:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 112f(138 mg, 40%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 635.
실시예 112: 2-(4-(하이드록시메틸)-5-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1(2H)-온 112
0℃에서 MeOH(5 mL) 중의 화합물 112f(130 mg, 0.20 mmol) 및 NaBH4(20 mg, 0.5 mmol)의 혼합물을 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물로 켄칭하고, EtOAc(5 mL X 2)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 112(48 mg, 34%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ :637. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.58 (s,1H), 8.48 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.86 (d, J=2.4, 1H), 7.37-7.36 (m, 2H), 7.23-7.21 (m, 1H), 6.02 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.54 (t, J=6.5, 2H), 4.45 (t, J=5.5, 2H), 4.36-4.35 (m, 2H), 4.00-3.79 (m, 4H), 3.59 (s, 3H), 3.43-3.41 (m, 1H), 3.07-2.96 (m, 6H), 2.70 (t, J=6.0, 2H), 2.39-2.38 (m, 4H), 1.92-1.90 (m, 2H), 1.75-1.73 (m, 2H).
실시예 113a: (3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올 113a
Figure pat00102
기계적 교반기, 첨가 깔때기 및 질소 주입구를 장착한 3 L 3구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 3-나이트로피라졸-5-카복실산(28.0 g, 178 mmol) 및 THF(420 mL)를 넣고, 얼음/아세톤 욕을 사용하여 -5℃로 냉각하였다. 내부 반응 온도를 5℃ 미만으로 유지하는 속도로, 보란-THF 착체 용액(1.0 M, 535 mL, 535 mmol)을 가했다. 첨가가 완료된 후, 냉각 욕을 제거하고, 이 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응물을 얼음/아세톤 욕을 사용하여 -5℃로 냉각하고, 물(70 mL) 및 4N 염산(70 mL)을 가하고, 피라졸과의 보란 착체를 분해시키기 위해, 이 반응물을 1시간 동안 환류 하에 교반하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 약 30 mL의 부피로 농축하였다. 에틸 아세테이트(175 mL)를 가하고, 이 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(4×200 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 포화된 수성 중탄산 나트륨(2×50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여, (3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올 113a를 94% 수율(24.0 g)로 연황색 고체로서 수득하였다: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.90 (br s, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.58 (t, 1H, J = 5.4 Hz), 4.53(d, 2H, J = 5.1 Hz); MS (ESI+) m/z 144.0 (M+H)
실시예 113b: (1-(2-브로모에틸)-3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올 113b
Figure pat00103
기계적 교반기 및 온도 조절기를 장착한 1 L 3구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 113a(25.0 g, 175 mmol), DMF(250 mL) 및 세슘 카보네이트(70.0 g, 215 mmol)를 넣고, 104℃로 5분 동안 가열하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 얼음/아세톤 욕을 사용하여 0℃로 냉각하고, 다이브로모에탄(329 g, 1.75 mol)을 분획들로 나누어 가했다(발열 없음). 이 반응물을 0℃에서 1시간 동안 및 이어서 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 그 후, 물(400 mL) 중의 KH2PO4(40 g)의 용액을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트(450 mL)를 가하고, 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(2×100 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 물(200 mL) 및 염수(200 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 건조제를 여과에 의해 제거하였다. 여액을 감압 하에 농축하여, 86% 수율(37.5 g)의 조질 화합물 113b를 오렌지색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.85 (s, 1H), 4.82 (d, 2H, J = 5.4 Hz), 4.66 (t, 2H, J = 6.3 Hz), 3.83 (t, 2H, J = 6.3 Hz); MS (ESI+) m/z 249.9 (M+H).
실시예 113c: 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸 113c
Figure pat00104
자석 교반기, 질소 주입구 및 환류 응축기를 장착한 500 mL 3구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 113b(37.0 g, 148 mmol) 및 클로로폼(160 mL)을 넣었다. 이 반응물을 얼음/아세톤 욕을 사용하여 -5℃로 냉각하고, 인 트라이브로마이드(40.0 g, 148 mmol)를 분획들로 나누어 가했다. 냉각 욕을 제거하고, 이 반응물을 2시간 동안 환류 하에 교반하였다. 그 후, 이 반응물을 -5℃로 냉각하고, pH 8.5에 도달할 때까지, 포화된 수성 중탄산 나트륨(250 mL)을 가했다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트(3×150 mL)로 추출하고, 합친 유기 층을 포화된 수성 탄산 나트륨(2×50 mL) 및 염수(75 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 건조제를 여과에 의해 제거하였다. 여액을 감압 하에 농축하여, 황색 잔사를 수득하고, 이를 가볍게 가열하면서 메틸렌클로라이드(60 mL)에 용해시켰다. 여기에 헥산(약 20 mL)을 가하자, 용액이 탁해졌다. 고체가 형성될 때까지 이 혼합물을 가열하고, 메틸렌클로라이드(9 mL)를 가하자, 용액이 투명해졌다. 이 용액을 실온으로 냉각하고, 4시간 후, 생성 결정을 진공 여과에 의해 수집하였다. 필터 케이크를 메틸렌클로라이드:헥산의 빙냉 1:2 혼합물(2×20 mL)로 세척하여, 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸(19.7 g)을 수득하였다. 합친 여액을 증발시키고, 상기 절차를 다시 수행하여, 추가로 9.70 g의 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모-메틸)-3-나이트로-1H-피라졸을 수득하였다. 고체를 합치고, 고진공 하에 18시간 동안 건조하여, 57% 수율(26.0 g)의 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸 113c를 백색 결정으로서 수득하였다: mp 95-97℃; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.93 (s, 1H), 4.63 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 4.54 (s, 2H), 3.86 (t, 2H, J = 6.0 Hz).
실시예 113d: 5-메틸-2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 113d
Figure pat00105
자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 1 L 1구 환저 플라스크에 THF(350 mL), 화합물 113c(10.0 g, 32.2 mmol) 및 THF 중의 2M 메틸아민 용액(113 mL, 225 mmol)을 넣고, 실온에서 72시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응물을 감압 하에 농축 건조하고, 생성 고체를 에틸 아세테이트(75 mL)와 10% 수성 탄산 칼륨(75 mL)의 혼합물과 함께 교반하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(2×75 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 10% 수성 탄산 칼륨(75 mL) 및 이어서 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여, 화합물 113d를 97% 수율(5.70 g)로 황색 고체로서 수득하였다: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.62 (s, 1H), 4.28 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 3.67 (s, 2H), 2.95 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 2.52 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 183.0 (M+H)
실시예 113e: 5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 113e
Figure pat00106
500 mL 파 반응 병을 질소로 퍼지하고, 10% Pd/C(50% 습윤, 800 mg 건조 중량) 및 에탄올(160 mL) 중의 화합물 113d(4.00 g, 2.20 mmol)의 용액을 넣었다. 이 병을 파 수소발생기에 부착하고, 배기하고, 45 psi의 압력까지 수소 기체를 넣고, 2시간 동안 진탕하였다. 그 후, 수소를 배기하고, 질소를 상기 병에 넣었다. 셀라이트(등록상표) 521(1.0 g)을 가하고, 이 혼합물을 셀라이트(등록상표) 521의 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 에탄올(2×75 mL)로 세척하고, 합친 여액을 감압 하에 농축 건조하여, 99% 수율의 화합물 113e(3.31 g)를 오렌지색 고체로서 수득하였다: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.34 (s, 1H), 3.98 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 3.52 (s, 3H), 2.84 (t, 2H, J = 5.7 Hz), 2.45 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 153.1 (M+H)
실시예 113f: 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노) 피리딘-2(1H)-온 113f
Figure pat00107
자석 교반기를 장착한 밀봉된 튜브에 화합물 113e(1.02 g, 6.7 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(2.15 g, 8.1 mmol), Pd2(dba)3(610 mg, 0.67mmol), 2,2-비스(다이페닐포스피노)-1,1-바이나프틸(775 mg, 1.34 mmol), 세슘 카보네이트(4.37 g, 13.6 mmol) 및 1,4-다이옥산(30 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 110℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(15:1, 부피비)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 113f(380 mg, 14%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 338
실시예 113g: 2-(4-클로로-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 113g
Figure pat00108
10℃에서 메탄올(50 mL) 중의 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 103b(1.0 g, 3.0 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(380 mg, 9.0 mmol)를 가하고, 이 혼합물을 추가로 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(1 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(50 mL)에 용해시키고, 물(10 mL)로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 증발시켜, 화합물 113g(900 mg, 90%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 332.
실시예 113h: (4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 113h
Figure pat00109
실온에서 교반하면서 다이클로로메탄(5 mL) 중의 화합물 113g(900 mg, 2.7 mol) 및 트라이에틸아민(900 mg, 9.0 mol)의 혼합물에 아세틸 클로라이드(600 mg, 6.0 mol)를 적가하고, 추가로 1시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 농축하고, 다이클로로메탄으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 113h(950 mg, 94%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 374.
실시예 113i: (2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 113i
Figure pat00110
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 113h(950 mg, 2.5 mmol), Pin2B2(1.6 g, 2.0 당량, 5 mmol), Pd2(dba)3(230 mg, 0.1 당량, 0.25 mmol), 잔트포스(232 mg, 0.2 당량, 0.5 mmol), AcOK(735 mg, 3 당량, 7.5 mmol) 및 다이옥산(20 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 65℃로 14시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, PE/EA=3/1(10 mL)로 세척하여, 화합물 113i(950 mg, 87%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 383.
실시예 113j: (4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 113j
Figure pat00111
자석 교반기를 장착한 밀봉된 튜브에 화합물 113f(190 mg, 0.56 mmol), 113i(215 mg, 0.56 mmol), Pd(dppf)Cl2(47 mg, 0.056 mmol), 1.0 M NaOAc(93 mg, 1.12 mmol, 2.0 당량), 1.0 M K3PO4(240 mg, 1.12 mmol, 2.0 당량) 및 아세토나이트릴(3 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 110℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(10:1, 부피비)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 113j(300 mg, 94%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 597
실시예 113: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 113
iPrOH/THF(1:1, 3 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 113j(300 mg, 0.50 mmol) 및 LiOH·H2O(120mg, 2.50 mmol)의 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 EtOAc(10 mL X 2)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 113(91 mg, 32%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 555. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.47 (d, J=5.0, 1H), 7.95 (d, J=5.0, 1H), 7.72 (d, J=2.0, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.35 (d, J=5.0, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.69 (s,1H), 5.01-5.02 (m, 1H), 4.61-4.62 (m, 1H), 4.48-4.49 (m, 1H), 4.32-4.33 (m, 1H), 4.15-4.07 (m, 4H), 3.86-3.87 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.60-3.59 (m, 2H), 2.88 (t, J=6.0, 2H), 2.61-2.56 (m, 4H), 2.47 (s, 3H), 1.89-1.90 (m, 2H), 1.78-1.79 (m, 2H)
실시예 114a: (R)-5-브로모-3-(4-(1,4-다이메틸-3-옥소피페라진-2-일)페닐아미노)-1-메틸피라진-2(1H)-온 114a
Figure pat00112
자석 교반기를 장착한 밀봉된 튜브에 (R)-3-(4-아미노페닐)-1,4-다이메틸피페라진-2-온(1.08 g, 5 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.47 g, 5.5 mmol), 다이아이소프로필에틸아민(1.94 g, 15 mmol) 및 iPrOH(20 mL)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 110℃로 밤새도록 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 물(20 mL)을 가하고, 이 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL X 2)로 추출하였다. 유기 층을 분리하고, 합치고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 농축하였다. 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(10:1, 부피비)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 114a(1.8 g, 90%)를 적색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 406
실시예 114b: (R)-(4-(6-(4-(1,4-다이메틸-3-옥소피페라진-2-일)페닐아미노)-4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로피라진-2-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 114b
Figure pat00113
자석 교반기를 장착한 밀봉된 튜브에 화합물 114a (228 mg, 0.56 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(215 mg, 0.56 mmol), Pd(dppf)Cl2(47 mg, 0.056 mmol), 1.0 M NaOAc(93 mg, 1.12 mmol, 2.0 당량), 1.0 M K3PO4(240 mg, 1.12 mmol, 2.0 당량) 및 아세토나이트릴(3 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 110℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(10:1, 부피비)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 114b(360 mg, 96%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 665.
실시예 114: (R)-2-(4-(6-(4-(1,4-다이메틸-3-옥소피페라진-2-일)페닐아미노)-4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로피라진-2-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 114
iPrOH/THF(1:1, 3 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 114b(360 mg, 0.54 mmol) 및 LiOH·H2O(138mg, 2.76 mmol)의 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 EtOAc(10 mL x 2)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 114(72 mg, 21%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 623. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.53 (d, J=4.5, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.83-7.78 (m, 3H), 7.36 (d, J=8.0, 2H), 6.89 (s, 1H), 5.12-5.14 (m, 1H), 4.68-4.70 (m, 1H), 4.49-4.53 (m, 1H), 4.38-4.43 (m, 1H), 4.15-4.06 (m, 2H), 3.89-3.90 (m, 1H), 3.72-3.73 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.21-3.22 (m, 1H), 3.01-3.03 (m, 4H), 2.71-2.56 (m, 5H), 2.20 (s, 3H), 1.90-1.92 (m, 2H), 1.79-1.80 (m, 2H)
실시예 115a: 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 115a
Figure pat00114
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(15 mL), 5-메틸-1H-피라졸-3-아민(1 g, 10 mmol)(1), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(4 g, 15 mmol)(2) 및 세슘 카보네이트(6.4 g, 20 mmol)를 넣었다. 잔트포스(400 mg, 0.8 mmol) 및 Pd2(dba)3(700 mg, 0.8 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, DCM:MeOH(20:1)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 115a(1.0 g, 35%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 283.
실시예 115b: 4-(1-메틸-5-(5-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 115b
Figure pat00115
밀봉된 튜브에 CH3CN(10 mL) 및 H2O(3 mL) 중의 화합물 115a(280 mg, 1 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(420 mg, 1.1 mmol), PdCl2(dppf)(41 mg, 0.056 mmol), K3PO4(100 mg) 및 NaOAc(50 mg)를 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/MeOH(10:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 115b를 35% 수율(190 mg)로 연황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 542.
실시예 115: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 115
100 mL 1구 환저 플라스크에 THF/iPA/H2O(5 mL/5 mL/2 mL) 및 LiOH(85 mg, 3.5 mmol) 중의 화합물 115b(190 mg, 0.35 mol)를 교반하면서 넣었다. 이 혼합물을 50℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 20 mL H2O을 가하고, 이 혼합물을 EA(30 mL X 3)로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 농축하여, 황색 고체를 수득하고, 이를 추가로 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 115(48 mg, 30% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 500. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=6.0, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.30 (d, J=6.0, 2H), 6.87 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 4.59-3.86 (m, 7H), 3.69 (s, 3H), 2.57-2.56 (m, 4H), 2.25 (s, 3H) 1.88-1.77 (m, 4H)
실시예 116a: 3-브로모-5-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-4-카브알데하이드 116a
Figure pat00116
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(15 mL), 3,5-다이브로모아이소니코틴알데하이드(200 mg, 0.76 mmol), 8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-6-온 191d(160 mg, 0.76 mmol) 및 세슘 카보네이트(176 mg, 1.5 mmol)를 넣었다. 제 1 요오드화 구리 CuI(100 mg, 0.76 mmol) 및 4,7-다이메톡시-1,10-페난트롤린(127 mg, 0.52 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, EtOAC/PE(1:2)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 116a(80 mg, 30%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 390.
실시예 116b: 3-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-5-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-4-카브알데하이드 116b
Figure pat00117
밀봉된 튜브에 CH3CN(5 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 116a(80 mg, 0.20 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(96 mg, 0.20 mmol), PdCl2(dppf)(18 mg, 0.02 mmol), K3PO4(30 mg) 및 NaOAc(20 mg)를 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/MeOH(10:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 116b를 35% 수율(46 mg)로 수득하였다. MS: [M+H]+ 651.
실시예 116: 4-하이드록시메틸-3-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-5-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘 116
0℃에서 메탄올(4 mL) 중의 화합물 116b(46 mg, 0.07 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(20 mg, 0.7 mmol)를 가하고, 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(1.0 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 116(12 mg, 28%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 653. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.60 (s,1H), 8.59 (s, 1H), 8.56 (d, J=2.0 ,1H), 8.50 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.87 (d, J=3.0, 1H), 7.38-7.36 (m, 2H), 7.24-7.22 (m, 1H), 4.90 (m, 1H), 4.56-4.53 (m, 2H), 4.46-4.44 (m, 4H), 3.59 (s, 3H), 3.44-3.42 (m, 1H), 3.06 (t, J=4.5, 4H), 2.94-2.93(m, 2H), 2.85-2.84 (m, 2H), 2.38(t, J=4.0, 4H), 1.89-1.84 (m, 4H)
실시예 117a: 5-(메틸티오)-2-나이트로피리딘 117a
Figure pat00118
0℃에서 MeOH(20 mL) 중의 5-클로로-2-나이트로피리딘(3 g, 18 mmol)의 혼합물에, 나트륨 메탄티올레이트(1.4 g, 20 mmol)를 가하고, 이 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성 현탁액을 여과하고, 물로 세척하고, 진공 하에 건조하여, 조질 화합물 117a(2 g, 66%)를 황색 고체로서 수득하고, 추가의 정제 없이 다음 단계로 보냈다. MS: [M+H]+ 171.
실시예 117b: 5-(메틸설폰일)-2-나이트로피리딘 117b
Figure pat00119
아세트산(15 mL) 중의 화합물 117a(260 mg, 0.5 mmol)의 혼합물에 H2O2(30% 수용액)(7.5 mL)를 가하고, 이 반응 혼합물을 25℃에서 밤새도록 교반하였다. 이 반응 용액을 물에 붓고, EtOAc로 추출하고, 농축하여 연황색 액체를 수득하고, EtOAC/PE(1:3)를 사용하여 실리카 겔로 정제하여, 화합물 117b(2 g, 86%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 203.
실시예 117c: 5-(메틸설폰일)피리딘-2-아민 117c
Figure pat00120
메탄올(8 mL) 중의 화합물 117b(2 g, 10 mmol), MeOH(10 mL), Pd/C(120 mg)의 혼합물을 25℃에서 H2(50 Psi) 하에 밤새도록 교반하였다. Pd/C를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여, 화합물 117c(1.7 g, 98%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 173.
실시예 117d: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(메틸설폰일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 117d
Figure pat00121
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(15 mL), 화합물 117c(1.7 g, 10 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(5.2 g, 20 mmol) 및 세슘 카보네이트(6.4 g, 20 mmol)를 넣었다. 잔트포스(300 mg, 0.8 mmol) 및 Pd2(dba)3(500 mg, 0.8 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 100℃로 5시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이 혼합물을 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, DCM:MeOH(20:1)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 117d(1 g, 30%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 358.
실시예 117e: (4-(1-메틸-5-(5-(메틸설폰일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 117e
Figure pat00122
밀봉된 튜브에 MeCN(8 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 117d(100 mg, 0.28 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(115 mg, 0.3 mmol), PdCl2(dppf)(25 mg, 0.03 mmol), K3PO4(126 mg, 0.6 mmol) 및 NaOAc(60 mg, 0.6 mmol)를 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM:MeOH(20:1) 로 용리하는 실리카 겔 플래시 칼럼으로 정제하여, 화합물 117e(100 mg, 40%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 617.
실시예 117: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(메틸설폰일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 117
100 mL 1구 환저 플라스크에 THF/iPA/H2O(5 mL/5 mL/2 mL) 및 LiOH(50 mg, 2 mmol) 중의 화합물 117e(100 mg, 0.2 mol)를 교반하면서 넣었다. 이 혼합물을 50℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 20 mL H2O을 가하고, 이 혼합물을 EA(30 mL X 3)로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 농축하여, 황색 고체를 수득하고, 이를 추가로 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 117(72 mg, 90% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 575. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.39 (s, 1H), 8.84 (d, J=2.0,1H), 8.60 (d, J=2.5, 1H), 8.50 (d, J=2.5, 1H), 7.98 (dd, J=2.5, 4.0, 1H), 7.69 (d, J=2.4, 1H), 7.49-7.47 (d, J=9.0, 1H), 7.38-7.37 (m, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.99 (t, J=4.5, 1H), 4.47-4.39 (m, 2H), 4.26-4.11 (m, 3H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.66-2.54 (m, 2H), 2.48-2.46 (m, 2H), 1.79-1.66 (m, 4H)
실시예 118a: 3급-부틸 5-아미노-3-사이클로프로필-1H-피라졸-1-카복실레이트 118a
Figure pat00123
THF(5 mL) 중의 3-사이클로프로필-1H-피라졸-5-아민(0.25 g, 2 mmol) 및 K2CO3(0.828 g, 6 mmol)의 혼합물에 THF(5 mL) 중의 (Boc)2O(0.436g, 2 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 여과하고, 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(6:1)로 용리하는 플래시 칼럼으로 정제하여, 화합물 118a(240 mg, 54%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M-Boc)+ 124.
실시예 118b: 5-브로모-3-(3-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 118b
Figure pat00124
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(15 mL), 화합물 118a(455 mg, 1.95 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(0.40 g, 1.5 mmol) 및 세슘 카보네이트(1.22 g, 3.75 mmol)를 넣었다. 생성 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 잔트포스(87 mg, 0.15 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(70 mg, 0.075 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 15시간 동안 가열 환류시켰다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(30 mL)와 물(30 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(50 mL×2)로 추출하였다. 유기 층을 합치고, 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, DCM/MeOH(50:1)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 118b(320 mg, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ 309. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 11.85 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.02 (d, J = 2.5, 1H), 7.35 (d, J = 2.5, 1H), 5.77 (d, J = 2, 1H), 3.46 (s, 3H), 1.83 (m, 1H), 0.90 (m, 2H), 0.64 (m, 2H)
실시예 118c: (4-(5-(5-사이클로프로필-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 118c
Figure pat00125
자석 교반기를 장착한 밀봉된 튜브에 화합물 118b(310 mg, 1 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(385 mg, 1 mmol), Pd(dppf)Cl2(80 mg, 0.1 mmol), K3PO4(424 mg, 2 mmol), NaOAc(165 mg, 2 mmol), CH3CN(15 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 110℃로 3시간 동안 가열하였다. 이를 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1, 부피비)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 118c(400 mg, 68%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 569
실시예 118: 2-(4-(5-(5-사이클로프로필-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 118
iPrOH/THF(1:1, 3 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 118c(350 mg, 0.62 mmol) 및 LiOH·H2O(260 mg, 6.2 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 EtOAc(10 mL X 2)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 118(200 mg, 54%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 526. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 11.83 (s, 1H), 8.48 (d, J=5, 1H), 8.05 (d, J=2, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.38 (d, J=2, 1H), 7.31 (d, J=5, 1H), 6.58 (s, 1H), 5.81 (d, J=2, 1H), 4.95 (t, J=5, 1H), 4.49-4.51 (m, 1H), 4.38-4.40 (m, 1H), 4.19-4.21 (m, 3H), 3.85-3.87 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 2.61-2.62 (m, 1H), 2.56-2.57 (m, 1H), 2.48-2.49 (m, 2H), 1.81-1.82 (m, 3H), 1.70-1.71 (m, 2H), 0.88-0.89 (m, 2H), 0.63-0.64 (m, 2H)
실시예 119a: (S)-(4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 119a
Figure pat00126
화합물 118c에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, (2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 113i(250 mg) 및 (S)-5-브로모-1-메틸-3-(3-메틸-5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 130e(233 mg)를 반응시켜, 화합물 119a(230 mg, 62%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 693
실시예 119: (S)-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 119
화합물 118에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 119a를 iPrOH/THF(1:1) 및 H2O 중의 LiOH·H2O로 아세테이트 가수분해시켜, 화합물 119(184 mg, 85%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 651. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J=2.5, 1H), 8.50 (d, J=5.0, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.84 (d, J=2.0, 1H), 7.35 (d, J=5.0, 1H), 7.33 (d, J=7.0, 1H), 6.90 (s, 1H), 6.83 (d, J=9.0, 1H), 5.04-5.06 (m, 1H), 4.62-4.73 (m, 5H), 4.51 (s, 1H), 4.32 (s, 1H), 4.16 (s, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.89 (s, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.57 (t, J=6.0, 1H), 3.48 (s, 1H), 3.07-3.12 (m, 2H), 2.53-2.63 (m, 7H), 2.24 (m,1H), 1.88-1.93 (m, 2H), 1.80 (s, 2H), 0.99 (d, J=6.5, 3H).
실시예 120a: 5-브로모-3-(5-(4-(2-하이드록시-2-메틸프로필)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 120a
Figure pat00127
자석 교반기를 장착한 밀봉된 튜브에 화합물 5-브로모-1-메틸-3-(5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 101j(500 mg, 1.37 mmol), 2,2-다이메틸옥시란(990 mg, 13.7 mmol), Cs2CO3(1.3 g, 4.11 mmol) 및 CH3CN(15 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 110℃로 15시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에서 증발시켰다. 이렇게 수득된 조질 화합물 120a(460 mg, 77%)를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. LCMS: [M+H]+ 437.
실시예 120b: (4-(5-(5-(4-(2-하이드록시-2-메틸프로필)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 120b
Figure pat00128
화합물 118c의 제조에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 120a(435 mg, 1.0 mmol)와 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(383 mg, 1 mmol)를 반응시켜 화합물 120b(437 mg, 63%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 696.
실시예 120: 2-(4-(5-(5-(4-(2-하이드록시-2-메틸프로필)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 120
화합물 118의 제조에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 120b(70 mg, 0.1 mmol)를 iPrOH/THF(1:1) 및 H2O 중의 LiOH·H2O로 아세테이트 가수분해시켜, 화합물 120(27 mg, 42%)을 회색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 653. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (d, J=3, 1H), 8.50 (d, J=5, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.83 (d, J=3, 1H), 7.46 (d, J=2, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.24 (d, J=9,1H), 6.58 (s, 1H), 4.95 (m, 1H), 4.44 (m, 2H), 4.24 (m, 2H), 4.13 (m, 2H), 3.87-3.88 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.03-3.05 (m, 4H), 2.64-2.66 (m, 5H), 2.61-2.63 (m, 1H), 2.49-2.51 (m, 2H), 2.24 (s, 2H), 1.70-1.71 (m, 4H), 1.10 (s, 6H).
실시예 121a: 4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 121a
플라스크에 THF(5 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 4-클로로-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 103b(88 mg, 0.27 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(125 mg, 0.27 mmol), PdCl2(dppf)(18 mg, 0.02 mmol) 및 K3PO4(30 mg)를 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 4시간 동안 환류시키고, 이어서 실온으로 냉각하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, DCM/MeOH(10:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 121a(90 mg, 56%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 633.
실시예 121: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 121
0℃에서, 메탄올(4 mL) 중의 화합물 121a(76 mg, 0.12 mmol)의 현탁액에 나트륨 보로하이드라이드(20 mg, 0.7 mmol)를 가하고, 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(1.0 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 121(56 mg, 74%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 635. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.66 (d, J=2.0, 1H), 8.57 (d, J=5.0, 1H), 7.93 (d, J=3.0, 1H), 7.85 (d, J=2.5, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.50 (d, J=5.0, 1H), 7.24-7.27 (m, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.97 (d, J=6.0, 1H), 6.81 (d, J=8.0, 1H), 6.67 (d, J=6.0, 1H), 5.08 (d, J=11.5, 1H), 4.67-4.72 (m, 4H), 4.51 (d, J=12.0, 1H), 4.35 (t, J=12.0, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.57-3.59 (m, 1H), 3.16-3.17 (m, 4H), 2.70-2.74 (m, 4H), 2.52-2.53 (m, 4H), 1.94-1.95 (m, 2H), 1.84-1.86(m, 2H).
실시예 122a: (2R, 5S)-3급-부틸 2,5-다이메틸-4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 122a
Figure pat00129
화합물 101g에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, (2R, 5S)-3급-부틸-2,5-다이메틸피페라진-1-카복실레이트(1.5 g, 6.0 mmol)와 5-브로모-2-나이트로피리딘(1212 mg, 6.0 mmol)을 반응시켜, 화합물 122a(1500 mg, 75%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 337
실시예 122b: (2R, 5S)-3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-2,5-다이메틸피페라진-1-카복실레이트 122b
Figure pat00130
화합물 101h에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 122a(1.5 g, 4.46 mmol)를 반응시켜 화합물 122b(1130 mg, 83%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 307
실시예 122c: (2R, 5S)-3급-부틸 4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)-2,5-다이메틸피페라진-1-카복실레이트 122c
Figure pat00131
화합물 101i에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 122b(766 mg, 2.50 mmol)와 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(668 mg, 2.50mmol)을 반응시켜 화합물 122c(978 mg, 79%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 492
실시예 122d: (2R, 5S)-3급-부틸 4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)-2,5-다이메틸피페라진-1-카복실레이트 122d
Figure pat00132
화합물 101j에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 122c(978 mg, 1.99 mmol)를 반응시켜 화합물 122d(700 mg, 90%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 392
실시예 122e: 5-브로모-3-(5-((2S, 5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 122e
Figure pat00133
화합물 101k에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 122d(700 mg, 1.79 mmol)를 반응시켜 화합물 122e(723 mg, 91%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 448
실시예 122f: (4-(5-(5-((2S, 5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 122f
Figure pat00134
화합물 113j에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 122e(723 mg, 1.62 mmol)와 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(613 mg, 1.62 mmol)를 반응시켜 화합물 122f(464 mg, 41%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 707
실시예 122: 2-(4-(5-(5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 122
화합물 113에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 122f(464 mg, 0.66 mmol)를 리튬 하이드록사이드로 가수분해시켜, 화합물 122(83 mg, 20%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 665. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.69 (d, J=2.5, 1H), 8.51 (d, J=5.0,1H), 8.03 (d, J=2.5, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.86 (d, J=2.5, 1H), 7.38 (d, J=5.0, 2H), 6.90 (s, 1H), 6.82 (d, J=9.0, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.77-4.72 (m, 2H), 4.68-4.61 (m, 3H), 4.52 (s, 1H), 4.33 (s, 1H), 4.17-4.11 (m, 2H), 3.88 (s, 1H), 3.76 (s, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.19 (s, 1H), 2.93-2.90 (m, 1H), 2.73 (s, 2H), 2.63-2.57 (m, 4H), 2.48 (s, 1H), 1.99-1.90 (m, 3H), 1.80 (s, 2H), 0.91 (t, J=5.5, 6H)
실시예 123a: (2-브로모에톡시)(3급-부틸)다이메틸실란 123a
Figure pat00135
DCM(20 mL) 중의 2-브로모에탄올(5.0 g, 40.3 mmol)의 용액에 3급-부틸다이메틸실릴 클로라이드(9.1 g, 60.5 mmol)를 가하고, 이어서 트라이에틸아민(8.14 g, 80.6 mmol) 및 4-다이메틸아미노피리딘(49.2 mg, 0.4 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반하고, 진공 중에서 농축하였다. 잔사를 1N HCl과 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 수성 부분을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합친 유기 부분을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 중에서 농축하여, 황색 오일을 수득하고, 이를, PE:EA(50:1)로 용리하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 123a(6.0 g, 62.4%)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ 241.
실시예 123b: 5-브로모-3-(5-(4-(2-(3급-부틸다이메틸실릴옥시)에틸)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 123b
Figure pat00136
70℃에서 MeCN(40 mL) 중의 화합물 123a(231 mg, 0.96 mmol)의 현탁액에 5-브로모-1-메틸-3-(5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 101j(350 mg, 0.96 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 3일 동안 교반하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 123b(452 mg, 90%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 524.7.
실시예 123c: 5-브로모-3-(5-(4-(2-하이드록시에틸)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 123c
Figure pat00137
실온에서 MeOH(20 mL) 중의 화합물 123b(300 mg, 0.57 mmol)의 현탁액에 L(-)-캄포어설폰산(199 mg, 0.86 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 밤새도록 교반하였다. 물(20 mL)을 가하고, 이 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL X 2)로 추출하였다. 합친 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 농축하여, 화합물 123c(325 mg, 95%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 408.7.
실시예 123d: (4-(5-(5-(4-(2-하이드록시에틸)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 123d
Figure pat00138
밀봉된 튜브에 화합물 123c(200 mg, 0.49 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산(113i)(188 mg, 0.49 mmol), Pd(dppf)Cl2(40 mg, 0.049 mmol), K3PO4(208 mg, 0.98 mmol), NaOAc(133 mg, 0.98 mmol), H2O(3 mL) 및 MeCN(50 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 110℃로 3시간 동안 가열하였다. 용매를 진공 중에서 증발시키고, 잔사를, DCM/MeOH(30:1)로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 123d(187 mg, 57%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 667.7.
실시예 123: 2-(4-(5-(5-(4-(2-하이드록시에틸)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 123
iPrOH/THF(1:1, 3.5 mL) 및 H2O(0.5 mL) 중의 화합물 123d(187 mg, 0.28 mmol) 및 LiOH(235 mg, 5.6 mmol)의 혼합물을 35℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 EtOAc(5 mL X 2)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 123(40 mg, 31%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 625.4. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.63 (d, J = 2.5, 1H), 8.49 (d, J = 5.0, 1H), 7.92 (d, J = 2.5, 1H), 7.82 (d, J = 2.0, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.5, 1H), 7.27-7.25 (m, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.81 (d, J = 9.5, 1H), 5.04-5.02 (m, 1H), 4.62 (d, J = 10, 1H), 4.50-4.47 (m, 1H), 4.34 -4.29 (m, 1H), 4.12 -4.09 (m, 2H), 3.89-3.85 (m, 1H), 3.71-3.67 (m, 5H), 3.15-3.12 (m, 4H), 2.74-2.54 (m, 10H), 1.92-1.87 (m, 2H), 1.79-1.78 (m, 3H)
실시예 124a: 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a
다이옥산(20 mL) 중의 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드 103a(641 mg, 2.9 mmol) 및 8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-6-온 191d(400 mg, 1.94 mmol)의 현탁액에 K2CO3(536 mg, 3.88 mmol), CuI(369 mg, 1.94 mmol) 및 4,7-다이메톡시-1,10-페난트롤린(471 mg, 1.96 mmol)을 가했다. 생성 용액을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 이를 실온으로 냉각하고, H2O(100 mL)에 가했다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(2×200 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(100 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, PE:EA(5:1)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 124a(230 mg, 34%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 346
실시예 124b: 4-[1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124b
환저 플라스크에 화합물 124a, 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(271 mg, 0.58 mmol), PdCl2(dppf)(50 mg, 0.06 mmol), K3PO4·3H2O(323 mg, 1.16 mmol), THF(15 mL) 및 H2O(5 mL)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 70℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(1:3)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하여, 화합물 124b(200 mg, 53%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 651
실시예 124: 3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘 124
4-[1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124b(200 mg, 0.31 mmol), NaBH4(35 mg, 0.92 mmol) 및 CH3OH(10 mL)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 혼합물을 CH2Cl2(10 mL X 2)로 추출하였다. 합친 CH2Cl2 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 124(100 mg, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 653. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.64 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 8.57 (d, J=5.0 Hz, 1 H), 8.46-8.48 (m, 2 H), 7.88 (d, J=3.0 Hz, 1 H), 7.54 (d, J=5.0 Hz, 1 H), 7.48 (d, J=2.5 Hz, 1 H), 7.37-7.39 (m, 1 H), 7.24 (d, J=9.0 Hz, 1 H), 4.85-4.87 (m, 1 H), 4.55-4.57 (m, 2 H), 4.45-4.47 (m, 2 H), 3.67-4.39 (m, 2 H), 3.60 (s, 3 H), 3.42-3.45 (m, 1 H), 3.06-3.08 (m, 4 H), 2.95 (s, 2 H), 2.87 (s, 2 H), 2.38-2.40 (m,4 H), 1.87-1.89 (m, 4 H).
실시예 125a: (3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올 125a
Figure pat00139
기계적 교반기, 첨가 깔때기 및 질소 주입구를 장착한 3 L 3구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 3-나이트로피라졸-5-카복실산(28.0 g, 178 mmol) 및 THF(420 mL)를 넣고, 얼음/아세톤 욕을 사용하여 -5℃로 냉각하였다. 내부 반응 온도가 5℃ 미만으로 유지되는 속도로 보란-THF 착체 용액(1.0 M, 535 mL, 535 mmol)을 가했다. 첨가가 완료된 후 냉각 욕을 제거하고, 이 반응물을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응물을 얼음/아세톤 욕을 사용하여 -5℃로 냉각하고, 물(70 mL) 및 4N 염산(70 mL)을 가하고, 피라졸과의 보란 착체를 분해하기 위해, 이 반응물을 환류 하에 1시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 약 30 mL의 부피로 농축하였다. 에틸 아세테이트(175 mL)를 가하고, 이 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(4×200 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 포화된 수성 중탄산 나트륨(2×50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여, 화합물 125a를 94% 수율(24.0 g)로 연황색 고체로서 수득하였다: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.90 (br s, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.58 (t, 1H, J = 5.4 Hz), 4.53(d, 2H, J = 5.1 Hz); MS (ESI+) m/z 144.0 (M+H)
실시예 125b: (1-(2-브로모에틸)-3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올 125b
Figure pat00140
기계적 교반기 및 온도 조절기를 장착한 1 L 3구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 125a(25.0 g, 175 mmol), DMF(250 mL) 및 세슘 카보네이트(70.0 g, 215 mmol)를 넣고, 104℃로 5분 동안 가열하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 얼음/아세톤 욕을 사용하여 0℃로 냉각하고, 다이브로모에탄(329 g, 1.75 mol)을 분획들로 나누어 가했다(발열 없음). 이 반응물을 0℃에서 1시간 동안 이어서 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 그 후, 물(400 mL) 중의 KH2PO4(40 g)의 용액을 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트(450 mL)를 가하고, 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(2×100 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 물(200 mL) 및 염수(200 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 건조제를 여과에 의해 제거하였다. 여액을 감압 하에 농축하여, 86% 수율(37.5 g)의 조질 화합물 125b를 오렌지색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.85 (s, 1H), 4.82 (d, 2H, J = 5.4 Hz), 4.66 (t, 2H, J = 6.3 Hz), 3.83 (t, 2H, J = 6.3 Hz); MS (ESI+) m/z 249.9 (M+H).
실시예 125c: 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸 125c
Figure pat00141
자석 교반기, 질소 주입구 및 환류 응축기를 장착한 500 mL 3구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 125b(37.0 g, 148 mmol) 및 클로로폼(160 mL). 이 반응물을 얼음/아세톤 욕을 사용하여 -5℃로 냉각하고, 인 트라이브로마이드(40.0 g, 148 mmol)를 분획들로 나누어 가했다. 냉각 욕을 제거하고, 이 반응물을 환류 하에 2시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응물을 -5℃로 냉각하고, pH 8.5에 도달할 때까지, 포화된 수성 중탄산 나트륨(250 mL)을 가했다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트(3×150 mL)로 추출하고, 합친 유기 층을 포화된 수성 탄산 나트륨(2×50 mL) 및 염수(75 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 건조제를 여과에 의해 제거하였다. 여액을 감압 하에 농축하여, 황색 잔사를 수득하고, 이를 가볍게 가열하면서 메틸렌클로라이드(60 mL)에 용해시켰다. 헥산(약 20 mL)을 가하자, 이 용액이 탁해졌다. 고체 침전물이 형성될 때까지 이 혼합물을 가열하고, 메틸렌클로라이드(9 mL)를 가하자, 용액이 투명해졌다. 이 용액을 실온으로 냉각하고, 4시간 후에, 생성 결정을 진공 여과에 의해 수집하였다. 필터 케이크를 메틸렌클로라이드:헥산(2×20 mL)의 빙냉 1:2 혼합물로 세척하여, 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸(19.7 g)을 수득하였다. 합친 여액을 증발시키고, 상기 절차를 다시 수행하여, 추가로 9.70 g의 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모-메틸)-3-나이트로-1H-피라졸을 수득하였다. 고체를 합치고, 고진공 하에 18시간 동안 건조하여, 57% 수율(26.0 g)의 화합물 125c를 백색 결정으로서 수득하였다: mp 95-97℃; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.93 (s, 1H), 4.63 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 4.54 (s, 2H), 3.86 (t, 2H, J = 6.0 Hz).
실시예 125d: 2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 125d
Figure pat00142
자석 교반기를 장착한 밀봉된 튜브에 화합물 125c(4 g, 12.9 mmol) 및 다이옥산 중의 0.5M 암모니아 용액(200 mL)을 넣었다. 생성 혼합물을 50℃로 밤새도록 조심스럽게 가열하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사에 H2O(50 mL) 및 EtOAc(50 mL)를 가했다. 수성 층을 분리하고, EtOAc(2×50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 염수(100 mL)로 세척하고 , 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 생성 용액을 감압 하에 농축하여, 100% 수율(2.1 g)의 조질 화합물 125d를 수득하였다.
실시예 125e: 1-(2-나이트로-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-일)에탄온 125e
Figure pat00143
200 mL 환저 플라스크에 화합물 125d(2.1g, 12.9 mmol), 트라이에틸아민(5.5 mL, 38.7 mmol), 아세틸 클로라이드(1.1 mL, 15.5 mmol) 및 CH2Cl2(100 mL)를 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사에 H2O(50 mL) 및 EtOAc(50 mL)를 가했다. 수성 층을 분리하고, EtOAc(2×50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 염수(100 mL)로 세척하였다. 합친 수성 추출물을 CH2Cl2:MeOH(9:1)(2 x 50 mL)로 역추출하였다. 합친 유기물을 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 생성 잔사를, CH2Cl2 내지 CH2Cl2: MeOH(9:1)의 구배로 용리하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 84% 수율(2.3 g)의 화합물 125e를 수득하였다.
실시예 125f: 1-(2-아미노-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-일)에탄온 125f
Figure pat00144
500 mL 파 수소화 병에 화합물 125e(2.3 g, 10.9 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 570 mg 건조 중량) 및 에탄올(100 mL)을 넣었다. 이 병을 배기하고, 50 psi의 압력까지 수소 기체를 넣고, 2시간 동안 파 수소화 장치 상에서 진탕하였다. 촉매를 CH2Cl2:MeOH(1:1)(500mL)로 세척하면서 셀라이트(등록상표) 521의 패드를 통해 여과하여 제거하였다. 생성 용액을 감압 하에 농축하여, 95% 수율(1.9 g)의 조질 화합물 125f를 수득하였다.
실시예 125g: 3-(5-아세틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 125g
Figure pat00145
밀봉된 튜브에 자석 교반기를 장착하고, 1,4-다이옥산(67 mL) 중의 화합물 125f(860 mg, 4.8 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.8 g, 6.7 mmol) 및 세슘 카보네이트(3.4 g, 10.5 mmol)를 넣었다. 이 용액을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 잔트포스(330 mg, 0.6 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤) 이팔라듐(0)(300 mg, 0.3 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 100℃로 16시간 동안 가열하였다. 그 후, H2O(50 mL) 및 EtOAc(50 mL)를 가했다. 수성 층을 분리하고, EtOAc(2×50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 염수(100 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 생성 잔사를, CH2Cl2 내지 CH2Cl2:Et2O:MeOH(60:35:5)의 구배로 용리하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 41% 수율의 화합물 125g(720 mg)를 수득하였다.
실시예 125h: 5-브로모-1-메틸-3-(4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 125h
Figure pat00146
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 환저 플라스크에 화합물 125g(250 mg, 0.7 mmol), 수성 NaOH(5N, 6 mL) 및 에탄올(6 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 환류 하에 30분 동안 교반하였다. 그 후, 에틸 아세테이트(5 mL) 및 물(5 mL)을 가했다. 분리된 수성 층을 에틸 아세테이트(2 x 5 mL)로 추출하였다. 합친 유기물을 염수(10 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하여, 91% 수율(200 mg)의 조질 화합물 125h를 수득하였다.
실시예 125i: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 125i
Figure pat00147
화합물 125i를 화합물 101k와 동일한 절차를 사용하여 합성하되, 이때 메탄올(8 mL) 중에서 5-브로모-1-메틸-3-(4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온(125h)(250 mg, 0.78 mmol) 및 옥세탄-3-온(600 mg, 8.3 mmol)을 혼합하였다. 여기에 메탄올(8 mL) 중의 나트륨 시아노보로하이드라이드(148 mg, 3 mmol) 및 아연 클로라이드(165 mg, 1.5 mmol)를 가하고, 이 반응물을 48℃로 12시간 동안 가열하였다. 분리정제 및 플래시 칼럼 크로마토그래피(실리카, 메틸렌클로라이드/다이에틸 에터/메탄올(60:35:5))로 처리하여, 34% 수율(100 mg)의 5-브로모-1-메틸-3-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 125i를 연녹색 고체로서 수득하였다: MS (ESI+) m/z 382.1 (M+H).
실시예 125j: (4-(1-메틸-5-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 125j
Figure pat00148
화합물 113j에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(200 mg, 0.52 mmol)과 화합물 125i(198 mg, 0.52 mmol)를 반응시켜, 화합물 125j(200 mg, 60%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 639
실시예 125: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 125
화합물 123에서 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 125j(200 mg 0.31 mmol)를리튬 하이드록사이드로 가수분해시켜, 화합물 125(116 mg, 62%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 597. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.48 (d, J=5.0, 1H), 7.95 (d, J=2.0, 1H), 7.69 (d, J=2.0, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.34 (d, J=5.5, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.73 (s, 1H), 5.02 (t, J=6.5, 1H), 4.75 (t, J=6.5, 2H), 4.67 (t, J=6.5, 2H), 4.61-4.63 (m, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.31-4.35 (m, 1H), 4.10-4.16 (m, 4H), 3.86-3.88 (m, 1H), 3.74-3.79 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.56 (d, J=4.5, 2H), 2.82 (t, J=4.5, 2H), 2.50-2.62 (m, 4H), 1.88-1.92 (m, 2H), 1.78-1.82 (m, 2H)
실시예 126a: 3-브로모-5-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)아이소니코틴알데하이드 126a
Figure pat00149
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(15 mL), 3,5-다이브로모아이소니코틴알데하이드(604 mg, 2.28 mmol), 6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온(142 mg, 0.76 mmol) 및 세슘 카보네이트(485 mg, 1.5 mmol)를 넣었다. CuI(143 mg, 0.76 mmol) 및 4,7-다이메톡시-1,10-페난트롤린(127 mg, 0.52 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, EtOAC/PE(1:2)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 126a(100 mg, 35%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 372.
실시예 126b: 3-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-5-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)아이소니코틴알데하이드 126b
Figure pat00150
밀봉된 튜브에 CH3CN(5 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 126a(100 mg, 0.27 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(125 mg, 0.27 mmol), PdCl2(dppf)(18 mg, 0.02 mmol), K3PO4(30 mg) 및 NaOAc(20 mg)를 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, DCM/MeOH(10:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 126b(80 mg, 48%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 633.
실시예 126: 2-(4-(하이드록시메틸)-5-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 126
0℃에서 메탄올(4 mL) 중의 화합물 126b(76 mg, 0.12 mmol)의 현탁액에 나트륨 보로하이드라이드(20 mg, 0.7 mmol)를 가하고, 이 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(1.0 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 126(28 mg, 37%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 635. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.61 (d, J=2.5, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.86 (d, J=3.0, 1H), 7.38-7.36 (m, 2H), 7.27-7.22 (m, 2H), 6.82 -6.78 (m, 2H), 5.18-5.11 (m, 1H), 4.55 (t, J=6.0, 2H), 4.45 (t, J=6.0, 2H), 4.41-4.29 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.44-3.42 (m, 1H), 3.06 (t, J=4.5, 4H), 2.75-2.73 (m, 2H), 2.62-2.60(m, 2H), 2.38 (t, J=4.5, 4H), 1.86-1.75 (m, 4H).
실시예 127a: (4-(1-메틸-6-옥소-5-(5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 127a
Figure pat00151
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 101j(200 mg, 0.55 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(210 mg, 0.55 mmol), Pd(dppf)Cl2(45 mg, 0.055 mmol), K3PO4(284 mg, 1.65 mmol) 및 테트라하이드로퓨란(20 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 5시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(33:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 127a(200 mg, 58.3%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 623.7.
실시예 127: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-6-옥소-5-(5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 127
iPrOH/THF(1:1, 3.5 mL) 및 H2O(0.5 mL) 중의 화합물 127a(190 mg, 0.31 mmol) 및 LiOH(571 mg, 13.6 mmol)의 혼합물을 35℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 EtOAc(5 mL X 2)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 127(50 mg, 26.9%)을 수득하였다. MS: [M+H]+ 581.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.63 (d, J = 2.0, 1H), 8.49 (d, J = 5.0, 1H), 7.91 (d, J = 3.5, 1H), 7.82 (d, J = 2.0, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.37 (d, J = 5.0,1H), 7.20-7.25 (m,1H), 6.89 (s, 1H), 6.81 (d, J = 9.0,1H), 5.04-5.02 (m, 1H), 4.64-4.61 (m, 1H), 4.50 (d, J = 5.0, 1H), 4.34-4.31 (m, 1H), 4.18-4.08 (m, 2H), 3.89-3.86 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.05-3.06 (m, 8H), 2.62-2.56 (m, 4H), 1.92-1.88 (m, 2H), 1.81-1.78 (m, 3H)
실시예 128a: 5-사이클로프로필-2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 128a
Figure pat00152
THF(40 mL) 중의 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸 113c(4 g, 12.9 mmol) 및 사이클로프로판아민(7.35 g, 129 mmol)의 혼합물을 30℃에서 밤새도록 교반하였다. 반응이 완료된 후, 이 혼합물을 여과하고, 고체를 THF(100 mL)로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축하여, 화합물 128a(2.68 g, 99%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 209.
실시예 128b: 5-사이클로프로필-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 128b
Figure pat00153
에탄올(30 mL) 및 물(5 mL) 중의 화합물 128a(2.68 g, 12.9 mmol), Fe(3.6 g, 64.4 mmol) 및 NH4Cl(4.1 g, 77.4 mmol)의 혼합물을 2시간 동 가열 환류시켰다. 반응이 완료된 후, 이 혼합물을 여과하고, 고체를 에탄올(150 mL)로 세척하였다. 여액을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 메탄올 /메틸렌클로라이드(1/7)로 추출하였다. 합친 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 증발시켰다. 잔사를 역상 콤비-플래시 상에서 정제하여, 화합물 128b(1.8 g, 75%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 179.
실시예 128c: 5-브로모-3-(5-사이클로프로필-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 128c
Figure pat00154
1,4-다이옥산(30 mL) 중의 화합물 128b(1.39 g, 7.8 mmol), 잔트포스(450 mg, 0.78 mmol), Pd2dba3(476 mg, 0.52 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.72 g, 6.5 mmol) 및 Cs2CO3(6.3 mg. 19.5 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 가열 환류시켰다. 반응이 완료된 후, 이 혼합물을 여과하고, 고체를 메탄올(60 mL)로 세척하였다. 여액을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 역상 콤비-플래시 상에서 정제하여, 화합물 128c(0.84 g, 30%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 364.
실시예 128d: (4-(5-(5-사이클로프로필-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 128d
Figure pat00155
화합물 113j에서 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 128c(230 mg, 0.6 mmol)과 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(218 mg, 0.6 mmol)를 반응시켜, 화합물 128d(331 mg, 89%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 623
실시예 128: 2-(4-(5-(5-사이클로프로필-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 128
화합물 113에서 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 128d(331 mg, 0.53 mmol)를 리튬 하이드록사이드로 가수분해시켜, 화합물 128(54 mg, 20%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 581. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.48 (d, J=5.0, 1H), 7.93 (d, J=2.0, 1H), 7.72 (d, J=2.0, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.34 (d, J=5.0, 1H), 6.90 (s, 1H), 5.70 (s,1H), 5.03-5.02 (m, 1H), 4.64-4.62 (m, 1H), 4.52 (s, 1H), 4.32 (s, 1H), 4.16-4.03 (m, 4H), 3.89-3.87 (m, 1H), 3.80 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.12-3.10 (m, 2H), 2.61-2.57 (m, 4H), 1.90 (d, J=5.5, 3H), 1.79 (s, 2H), 0.56 (d, J=6.0, 2H), 0.53 (s, 2H)
실시예 129a: 2-나이트로-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진 129a
Figure pat00156
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸 113c(3.00 g, 9.59 mmol) 및 4M 수성 브롬화수소산(120 mL)을 넣고, 생성 혼합물을 24시간 동안 가열 환류시켰다. 그 후, 이 반응 혼합물을 감압 하에 약 6 mL 부피로 농축하고, 잔사를 2M 수성 나트륨 하이드록사이드(40 mL) 중에서 2시간 동안 교반하였다. 그 후, 메틸렌클로라이드(40 mL)를 가하고, 이 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 수성 층을 분리하고, 메틸렌클로라이드(2×50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 염수(100 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여, 62% 수율(1.01 g)의 화합물 129a를 백색 고체로서 수득하였다: mp 110-112℃; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.68 (s, 1H), 4.87 (s, 2H), 4.28 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 4.20 (t, 2H, J = 5.1 Hz); MS (ESI+) m/z 170.0 (M+H).
실시예 129b: 6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-아민 129b
Figure pat00157
500 mL 파 수소화 병에 질소로 퍼지하고, 화합물 129a(1.01 g, 5.92 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 125 mg 건조 중량) 및 에탄올(50 mL)을 넣었다. 이 병을 배기하고, 수소 기체를 25 psi의 압력까지 넣고, 파 수소화 장치 상에서 2시간 동안 진탕하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 이 병에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 521의 패드를 통해 여과하여 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 400 cc의 실리카 겔을 사용하고 메틸렌클로라이드 중의 3% 메탄올로 용리하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 화합물 129b를 함유하는 분획들을 수집하고, 감압 하에 농축한 후, 73% 수율(601 mg)의 화합물 129b를 황색 고체로서 수득하였다: mp 74-76℃ 1H NMR (300 MHz, CDCl3 δ 5.37 (s, 1H), 4.72 (s, 2H), 4.07 (t, 2H, J = 5.1 Hz), 3.98 (t, 2H, J = 5.1 Hz), 3.57 (br s, 2H); MS (ESI+) m/z 140.4 (M+H).
실시예 129c: 5-브로모-3-(6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 129c
Figure pat00158
자석 교반기, 환류 응축기 및 질소 주입구를 장착한 50 mL 3구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(20 mL), 화합물 129b(600 mg, 4.31 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸 피리딘-2(1H)-온(1.44 g, 5.40 mmol) 및 세슘 카보네이트(3.08 g, 9.48 mmol)를 넣었다. 생성 용액을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 잔트포스(300 mg, 0.52 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(320 mg, 0.35 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 2시간 동안 가열 환류시켰다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(75 mL)와 물(75 mL) 사이에 분배하고, 여과하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(2×25 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합치고, 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 500 cc의 실리카 겔을 사용하고 메틸렌클로라이드 중의 1% 메탄올로 용리하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 화합물 129c를 함유하는 분획들을 수집하고, 감압 하에 농축한 후, 31% 수율(433 mg)의 화합물 129c를 녹색 고체로서 수득하였다: mp 195-197℃; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.92 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 7.44 (s, 1H), 6.90 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 5.65 (s, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.13 (s, 2H), 3.61 (s, 5H); MS (ESI+) m/z 324.9 (M+H).
실시예 129d: (4-(5-(6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 129d
Figure pat00159
화합물 113j에서 기술된 바와 같은 절차를 따라, 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(200 mg, 0.52 mmol)과 129c(170 mg, 0.52 mmol)를 반응시켜, 화합물 129d(185 mg, 61%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 584
실시예 129: 2-(4-(5-(6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 129
화합물 113에서 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 129d(180 mg 0.31 mmol)를 리튬 하이드록사이드로 가수분해시켜, 화합물 129(100 mg, 62%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 542. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.48 (d, J=5.0, 1H), 7.98 (d, J=2.0, 1H), 7.71 (d, J=2.0, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.35 (d, J=5.0, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.72 (s, 1H), 5.03 (d, J=6.5, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.61-4.64 (m, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.31-4.35 (m, 1H), 4.06-4.16 (m, 6H), 3.86 (s, 1H), 3.71 (s, 3H), 2.56-2.62 (m, 4H), 1.88-1.92 (m, 2H), 1.80 (m, 2H)
실시예 130a: (3S)-3급-부틸 3-메틸-4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 130a
Figure pat00160
화합물 101g에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 5-브로모-2-나이트로피리딘(10.5 g, 50 mmol)과 (3S)-3급-부틸-3-메틸피페라진-1-카복실레이트(10.0 g, 50 mmol)를 반응시켜, 화합물 130a(8.05 g, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 323
실시예 130b: (3S)-3급-부틸-4-(6-아미노피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 130b
Figure pat00161
화합물 101h에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 130a(5.8 g)를 수소화하여, 화합물 130b(4.9 g, 96%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 293
실시예 130c: (3S)-3급-부틸-4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노) 피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 130c
Figure pat00162
화합물 101i에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화하붐ㄹ 130b(4.0 g)와 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(5.5 g)을 반응시켜, 화합물 130c(5.4 g, 83%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 478
실시예 130d: (3S)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 130d
Figure pat00163
화합물 101j에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 130c(3.1 g)의 Boc 기를 산성 가수분해시켜, 화합물 130d(2.3 g, 95%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 380.
실시예 130e: (3S)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 130e
Figure pat00164
화합물 101k에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 130d(2.35 g)를 옥세탄-3-온(0.4 mL)으로 환원성 아미노화하여, 화합물 130e(2.6 g, 98%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 434.
실시예 130f: (3S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 130f
Figure pat00165
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 130e(1.0 g, 1.0 당량, 2.3 mmol), Pin2B2(1.46 g, 2.50 당량, 5.75 mmol), Pd2(dba)3(105 mg, 0.05 당량, 0.125 mmol), 잔트포스(93 mg, 0.1 당량, 0.23 mmol), AcOK(676 mg, 3.0 당량, 6.9 mmol) 및 다이옥산(50 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 90℃로 4시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, PE/EA(3:1)(80 mL)로 세척하여, 화합물 130f(1.0 g, 90%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 482.
실시예 130g: (3S)-4-[1-메틸-5-({5-[2-메틸 4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 130g
Figure pat00166
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 130f(420 mg, 1.0 당량, 0.44 mmol), 하기 구조식의 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(200 mg, 2 당량, 0.88 mmol), PdCl2(dppf)(36 mg, 0.1 당량, 0.044 mmol), K3PO4(279 mg, 3 당량, 1.32 mmol) 및 THF(20 mL)를 넣었다.
Figure pat00167
진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 5시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, PE/EA(3:1)(80 mL)로 세척하여, 화합물 130g(90 mg, 31%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 663.
실시예 130: (3S)-10-[4-[1-메틸-5-({5-[2-메틸 4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일]-4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 130
50 mL 1구 환저 플라스크에 자석 교반기를 장착하고, 화합물 130g(90 mg, 1 당량, 0.11 mmol), LiOH(7.9 mg, 3 당량, 0.33 mmol), i-PrOH(3 mL), THF(3 mL) 및 H2O(2 mL)를 넣었다. 이 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 여과하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 130(40 mg, 44%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 665.4. 1H NMR (500 MHz, CDCl3)　 δ 8.65 (d, J=2.0, 1H), 8.48 (d, J=5.0, 1H), 7.96 (d, J=2.0, 1H), 7.84-7.83 (m, 2H), 7.36 (d, J=5.0, 1H), 7.31 (dd, J=3.0, 9.0, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.81 (d, J=9.0, 1H), 5.08-5.05 (m, 1H), 4.71-4.61 (m, 5H), 4.51-4.29 (m, 2H), 4.16-4.15 (m, 2H), 3.87-3.85 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.55-3.45 (m, 2H), 3.06 -3.08 (m, 2H), 2.59-2.47 (m, 7H), 2.22-2.17 (m, 1H), 1.27 (s, 6H), 0.98 (d, J=6.5, 3H).
실시예 131a: (S)-(4-(5-(5-(2-에틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 131a
Figure pat00168
자석 교반기를 장착한 밀봉된 튜브에 하기 구조식의 (S)-5-브로모-3-(5-(2-에틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 161e(269 mg, 0.60 mmol), 화합물 113i(230 mg, 0.60 mmol), Pd(dppf)Cl2(25 mg, 0.03 mmol), NaOAc(98 mg, 1.2 mmol), K3PO4(254 mg, 1.2 mmol) 및 아세토나이트릴(4 mL)을 넣었다.
Figure pat00169
진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1, 부피비)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 131a(150 mg, 40%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 707
실시예 131: (S)-2-(4-(5-(5-(2-에틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 131
iPrOH/THF(1:1, 4 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 131a(150 mg, 0.21 mmol) 및 LiOH(50 mg, 2.1 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 EtOAc(10 mL X 2)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 131(26 mg, 25%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 665. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.64 (d, J=2.0, 1H), 8.50 (d, J=5.0, 1H), 7.93 (d, J=2.5, 1H), 7.83 (d, J=1.5, 2H), 7.38 (d, J=5.0, 1H), 7.27 (d, J=5.0,1H), 6.90 (s,1H), 6.83 (d, J=8.5, 1H), 4.73-4.64 (m, 5H), 4.50 (s, 1H), 4.33-4.31 (m, 1H), 4.20-4.16 (m, 2H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.53-3.51 (m, 1H), 3.33 (s, 1H), 3.13 (t, J=5.0, 2H), 2.61-2.56 (m, 4H), 2.45 (d, J=4.0, 2H), 2.37 (s,1H), 1.91-1.79 (m, 7H), 1.39-1.40 (m, 1H), 0.83 (t, J=7.0, 3H).
실시예 132a: 6-클로로-4-(6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온 132a
Figure pat00170
1,4-다이옥산(40 mL) 중의 6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-아민 129b(0.8 g, 5.76 mmol), 잔트포스(360 mg, 0.623 mmol), Pd2dba3(384 mg, 0.42 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(1.28 g, 5.76 mmol) 및 Cs2CO3(5.05 g. 17.3 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 가열 환류시켰다. 반응이 완료된 후, 이 혼합물을 여과하고, MeOH(60 mL)로 세척하였다. 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를 역상 콤비-플래시 상에서 정제하여, 화합물 132a(1.3 g, 81%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 282.
실시예 132b: (4-(5-(6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 132b
Figure pat00171
화합물 131a에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(200 mg, 0.52 mmol)와 132a(146 mg, 0.52 mmol)를 반응시켜, 화합물 132b(100 mg, 53%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 585
실시예 132: 2-(4-(5-(6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 132
화합물 131에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 화합물 132b(100 mg 0.171 mmol)를 리튬 하이드록사이드로 가수분해시켜, 화합물 132(60 mg, 65%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 543. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.55 (d, J=5.0, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.43 (d, J=5.5, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.97 (s, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.58 (s, 3H), 4.47 (s, 1H), 4.15-1.14 (m, 2H), 4.11(s, 4H), 3.90 (s, 4H), 2.61-2.60 (m, 2H), 2.57 (t, J=6.5, 2H), 1.89-1.91 (m, 2H), 1.79-1.80 (m, 2H)
실시예 133a: 6-클로로-2-메틸-4-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 133a
Figure pat00172
환류 응축기, 자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 250 mL 3구 환저 플라스크에 하기 구조식의 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(1.90 g, 8.53 mmol), 화합물 113e(1.18 g, 7.75 mmol) 및 1,4-다이옥산(40 mL)을 넣었다.
Figure pat00173
이 플라스크를 질소로 퍼지하고, 0℃로 냉각하였다. THF(39 mL, 39.0 mmol) 중의 리튬 헥사메틸다이실라자이드의 1 M 용액을 가했다. 생성 현탁액을 통해 30분 동안 버블링한 후, 잔트포스(381 mg, 0.659 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴-아세톤)이팔라듐(0)(355 mg, 0.388 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 2시간 동안 가열 환류시켰다. 그 후, 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 물(10 mL)로 희석하였다. 2 N 염산을 사용하여 이 용액의 pH를 7.6으로 조절하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트(3×40 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 실리카 화합물 상에서 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 76% 수율(1.74 g)의 화합물 133a를 회백색 고체로서 수득하였다: mp 184-186℃; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.62 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.04 (t, 2H, J = 5.1 Hz), 3.65 (s, 3H), 3.53 (s, 2H), 2.82 (t, 2H, J = 5.1 Hz), 2.37 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 295.1 (M+H).
실시예 133b: (4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 133b
Figure pat00174
화합물 131a에 대해 기술된 바와 같은 절차를 따라, 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(200 mg, 0.52 mmol) 및 화합물 132a(153 mg, 0.52 mmol)로부터 출발하여, 화합물 132b(170 mg, 55%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 598
실시예 133: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 133
화합물 133b(160 mg 0.267 mmol)를 리튬 하이드록사이드로 가수분해시켜, 화합물 133(94 mg, 63%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 556. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.55 (d, J=5.0, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.43 (d, J=5.0, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.57 (s, 3H), 4.47 (s, 1H), 4.11-4.15 (m, 4H), 3.89 (s, 3H), 3.87 (s, 1H), 3.61 (d, J=4.0 , 2H), 2.90 (s, 2H), 2.61(d, J=4.0, 2H), 2.57 (t, J=6.0, 2H), 2.49 (s, 3H), 1.89-1.91 (m, 2H), 1.79-.80 (m, 2H)
실시예 134a: 10-브로모-1H,2H,3H,4H,6H,7H,8H,9H-피라지노[1,2-a]인돌-1-온 134a
0℃에서 250 mL 3구 환저 플라스크에 N,N-다이메틸폼아마이드(100 mL) 중의 1H,2H,3H,4H,6H,7H,8H,9H-피라지노[1,2-a]인돌-1-온 101e(9.5 g, 49.94 mmol, 1.00 당량)의 용액을 넣고, 이어서 N-브로모석신이미드(9.8 g, 55.06 mmol, 1.10 당량)를 몇개의 배취로 가했다. 생성 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 500 mL의 물로 희석하였다. 침전물을 여과하고, 진공 오븐 내에서 건조하여, 9.5 g(71%)의 화합물 119a를 연갈색 고체로서 수득하였다.
실시예 134b: 10-플루오로-1H,2H,3H,4H,6H,7H,8H,9H-피라지노[1,2-a]인돌-1-온 134b
질소의 비활성 분위기로 퍼지하고 유지된 2 L 4구 환저 플라스크에 테트라하이드로퓨란(200 mL) 중의 화합물 134a(40 g, 148.62 mmol, 1.00 당량)의 용액을 넣고, 이어서 -78℃에서 교반하면서 n-BuLi(2.4 M)(218 mL, 3.50 당량)을 적가하였다. 생성 용액을 -40℃에서 3시간 동안 교반하였다. -78℃에서, 여기에 테트라하이드로퓨란(200 mL) 중의 N-플루오로벤젠설폰이미드(98.7 g, 313.33 mmol, 2.10 당량)의 용액을 적가했다. 생성 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 200 mL의 물을 가하여 켄칭하고, 3x500 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합친 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하였다. 조 생성물(30 g) 을 조건(이동 상, A: 0.05% 트라이플루오로아세트산/물; B: CH3CN; 구배: 10% B 내지 25% B)에 따라 분취용 HPLC로 정제하여, 5.05 g(16%)의 화합물 134b를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 209. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.16 (br, 1H), 3.90-3.86 (m, 2H), 3.65-3.62 (m, 2H), 2.53-2.47 (m, 4H), 1.88-1.80 (m, 2H), 1.77-1.72 (m, 2H).
실시예 134c: 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c
Figure pat00175
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(60 mL), 하기 구조식의 134b(500 mg, 2.4 mmol), 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드 103a(1.60 g, 7.2 mmol) 및 칼륨 아세테이트(471 mg, 4.8 mmol)를 넣었다.
Figure pat00176
생성 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 잔트포스(140 mg, 0.24 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(220 mg, 0.24 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 80℃로 10시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(40 mL)와 물(40 mL) 사이에 분배하고, 여과하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(50 mL×3)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, PE/EA(3:1)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 134c(678 mg, 81%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 348. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.87 (s, 1H), 8.60 (d, J=5.5, 1H), 7.56 (d, J=5.5, 1H), 4.23-4.25 (m, 2H), 4.13-4.15 (m, 2H), 2.59 (t, J=6.0, 2H), 2.41 (t, J=6.0, 2H), 1.75-1.80 (m, 2H), 1.66-1.70 (m, 2H)
실시예 134d: 2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드 134d
Figure pat00177
CH3CN(25 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 134c(300 mg, 0.86 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(403 mg, 0.86 mmol), CH3COONa(142 mg, 1.72 mmol), K3PO4(460 mg, 1.72 mmol), PdCl2(dppf)(71 mg, 0.086 mmol)의 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 반응 후, 이를 증발시키고, 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼으로 정제하여, 화합물 134d(312 mg, 수율 55%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)+ 653.
실시예 134: 10-플루오로-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 134
MeOH(20 mL) 중의 화합물 134d(200 mg, 0.30 mmol)의 용액에 NaBH4(40 mg, 0.9 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 후, 이를 증발시키고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 134(108 mg, 수율 54%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: (M+H)+ 655. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (d, J=2.0, 1H), 8.49 (d, J=5.0, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.85 (d, J=2.5, 1H), 7.45 (d, J=1.5, 1H), 7.37-7.39 (m, 1H), 7.35 (d, J=5.0, 1H), 7.24 (d, J=9.0, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.56 (t, J=6.5, 2H), 4.40-4.47 (m, 4H), 4.18-4.22 (m, 2H), 4.05-4.09 (m, 1H), 3.84-3.96 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.41-3.46 (m, 1H), 3.07 (s, 4H), 2.54-2.61 (m, 2H), 2.39-2.42 (m, 6H), 1.78 (s, 2H), 1.69 (s, 2H)
실시예 135a: 1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 135a
Figure pat00178
자석 교반기 및 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 113h(1.0 g, 3 mmol), Pin2B2(3.8 g, 15 mmol), Pd(dppf)Cl2(137 mg, 0.15mmol), 잔트포스(143 mg, 0.3mmol), KOAc(88 mg, 9 mmol) 및 1,4-다이옥산(50 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 반응 혼합물을 15시간 동안 60℃로 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 석유 에터로 세척하여, 화합물 135a(0.87 g, 75%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 386
실시예 135b: 2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드 135b
Figure pat00179
N2 풍선 하에 CH3CN(50 ml) 중의 화합물 135a(385 mg, 1 mmol), 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(347 mg, 1 mmol), K3PO4(424 mg, 2 mmol), NaOAc(164g, 2mmol) 및 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(41 mg, 0.05 mmol)의 현탁액을 100℃로 4시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, DCM(50 ml) 및 물(80 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, DCM(3×50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 어두운색 잔사를, DCM/MeOH(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 135b(285 g, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 571
실시예 135: 10-플루오로-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 135
실온에서 MeOH(50 mL) 중의 화합물 135b(280 g, 0.49 mmol)의 용액에 NaBH4(56 g, 1.47 mmol)를 가했다. 이 반응물을 3시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 이어서, 이 혼합물을 H2O(50 mL)에 붓고, DCM(50 mL×3)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 135(187 mg, 67%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 572. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.47 (d, J=5.5, 1H), 7.95 (d, J=2.0, 1H), 7.70 (d, J=2.0, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.35 (d, J=5.5, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.96 (t, J=7.0, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.45 (s, 1H), 4.33 (s, 1H), 4.07-4.12 (m, 4H), 3.84 (s, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.60 (s, 2H), 2.88 (t, J=5.5, 2H), 2.61 (s, 2H), 2.57 (s, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.86-1.90 (m, 2H), 1.77 (s, 2H)
실시예 136a: (S)-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드 136a
Figure pat00180
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일) 피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 130f(225 mg, 1.5 당량, 0.47 mmol), 하기 구조식의 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노 [1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(150 mg, 1 당량, 0.43 mmol), PdCl2(dppf)(35 mg, 0.1 당량, 0.043 mmol), K3PO4(273 mg, 3 당량, 1.29 mmol) 및 THF(20 mL)를 넣었다.
Figure pat00181
진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 5시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/EtOH(40:1)를 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 136a(100 mg, 34%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 667.3.
실시예 136: (S)-10-플루오로-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일) 피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 136
자석 교반기를 장착한 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 136a(100 mg, 1.0 당량, 0.15 mmol), NaBH4(17 mg, 3.0 당량, 0.45 mmol) 및 MeOH(10 mL)를 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 136(64 mg, 64%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 669.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.64 (d, J=2.0, 1H), 8.48 (d, J=5.0, 1H), 7.96 (d, J=2.5, 1H), 7.83-7.82 (m, 2H), 7.36 (d, J=5.0, 1H), 7.30 (dd, J=2.5, 9.0, 1H), 6.81 (d, J=8.5, 1H), 4.99-4.96 (m, 1H), 4.71-4.61 (m, 5H), 4.45-3.83 (m, 5H), 3.71 (s, 3H), 3.54-3.45 (m, 2H), 3.08-3.06 (m, 2H), 2.56-2.47 (m, 7H), 2.21-2.17 (m, 1H), 1.89-1.76 (m, 4H), 0.98 (d, J=6.5, 3H)
실시예 137a: (R)-(4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 137a
Figure pat00182
아세토나이트릴(30 mL) 중의 (R)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 151f, 하기 구조식의 화합물 130f의 거울상 이성질체(283 mg, 0.65 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(250 mg, 0.65 mmol), PdCl2(dppf)(53 mg, 0.065 mmol), NaOAc(107 mg, 1.3 mmol) 및 K3PO4(347 mg, 1.3 mmol)의 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다.
Figure pat00183
용매를 진공 중에서 증발시키고, 잔사를, DCM/MeOH(30:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 137a(216 mg, 48%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 693.4
실시예 137: (R)-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사-하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 137
프로판-2-올(8 mL) 중의 화합물 137a(200 mg, 0.29 mmol), 테트라하이드로퓨란(8 mL) 및 물(2.0 mL)의 용액에 LiOH(690 mg, 29 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 증발시키고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 137(143 mg, 76%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ 651.4. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.63 (d, J=2.0, 1H), 8.49 (d, J=5.0, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.84 (d, J=2.5, 1H), 7.47 (d, J=2.0, 1H), 7.37-7.39 (m, 1H), 7.35 (d, J=5.5, 1H), 7.25 (d, J = 9.5, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.95 (t, J=4.0, 1H), 4.54-4.58 (m, 2H), 4.40-4.49 (m, 4H), 4.11-4.26 (m, 3H), 3.86-3.88 (m, 1H), 3.68 (s, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.37-3.42 (m, 1H), 3.08-3.11 (m, 1H), 2.95 (t, J=9.0, 1H), 2.62-2.67 (m, 1H), 2.54-2.59 (m, 2H), 2.48 (t, J=6.0, 2H), 2.30-2.36 (m, 2H), 2.19 (t, J=8.0, 1H), 1.81 (s, 2H), 1.68-1.72 (m, 2H), 0.93 (d, J=6.0, 3H)
실시예 138a: 3-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-5-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)아이소니코틴알데하이드 138a
Figure pat00184
100 mL 1구 환저 플라스크에 CH3CN(70 mL) 중의 3-브로모-5-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)아이소니코틴알데하이드 101f(298 mg, 0.7 mmol), 1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라-메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 135a(325 mg, 0.84 mmol), PdCl2(dppf)(30 mg, 0.035 mmol), K3PO4(300 mg, 1.4 mmol) 및 NaOAc·3H2O(200 mg, 1.4 mmol)를 넣었다. 이 시스템을 배기하고, 아르곤으로 재충전했다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/MeOH(25:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 138a(220 mg, 55%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 553.3.
실시예 138: 2-(4-(하이드록시메틸)-5-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 138
MeOH(60 mL) 중의 화합물 138a(200 mg, 0.36 mmol) 및 NaBH4(50 mg, 1.2 mmol)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물로 켄칭하고, EtOAc(10 mL X 3)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 138(162 mg, 85%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ :555.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.64 (s,1H), 8.49 (s, 1H), 7.97 (d, J=2.5, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.33 (d, J=2, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.68 (s, 1H), 4.65-4.63 (m, 1H), 4.57-4.55 (m, 1H), 4.37 (t, J=11, 1H), 4.20-4.16 (m, 3H), 4.07-3.98 (m, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.59 (s, 2H), 2.87 (t, J=5.5, 2H), 2.61-2.56 (m, 4H), 2.48 (s, 3H), 1.92-1.90 (m, 2H), 1.80-1.79 (m, 2H)
실시예 139a: 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 139a
Figure pat00185
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(50 mL), 2-브로모-4-클로로니코틴-알데하이드 103a(1.4 g, 6.4 mmol), 3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1(2H)-온 112d(0.6 g, 3.2 mmol), Pd2(dba)3(293 mg, 0.32mmol), 잔트포스(370 mg, 0.64 mmol) 및 탄산 칼륨(627 mg, 6.4 mmol)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 80℃로 밤새도록 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, DCM/CH3OH(20:1, 부피비)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 139a(528 mg, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 330. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 10.09 (s, 1H), 8.37 (d, J=5.5, 1H), 7.16 (d, J=5.5, 1H), 6.25 (s, 1H), 4.29-4.32 (m, 2H), 3.83-3.86 (m, 2H), 2.96-2.99 (m, 2H), 2.75-2.78 (m, 2H), 2.00-2.07 (m, 2H), 1.82-1.85 (m, 2H)
실시예 139b: 4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 139b
Figure pat00186
환저 플라스크에 화합물 139a(100 mg, 0.30 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(140 mg, 0.30 mmol), PdCl2(dppf)(25 mg, 0.03 mmol), K3PO4·3H2O(160 mg, 0.60 mmol), NaOAc(59 mg, 0.60 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 H2O(5 mL)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(1:3)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하여, 화합물 139b(95 mg, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 635
실시예 139: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1(2H)-온 139
화합물 139b(95 mg, 0.15 mmol), NaBH4(17 mg, 0.45) 및 CH3OH(10 mL)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 CH2Cl2(10 mL X 2)로 추출하였다. 합친 CH2Cl2 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 139(60 mg, 63%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 637. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.63 (d, J=2.0, 1H), 8.47 (d, J=5.5, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.85 (d, J=2.5, 1H), 7.49 (d, J=2.0, 1H), 7.37-7.39 (m, 1H), 7.30 (d, J=5.0, 1H), 7.24 (d, J=9.0, 1H), 6.05 (s, 1H), 4.47-4.57 (m, 2H), 4.41-4.47 (m, 2H), 4.39-4.41 (m, 1H), 4.33-4.35 (m, 1H), 4.11-4.16 (m, 1H), 3.93-3.96 (m, 1H), 3.76-3.82 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.41-3.45 (m, 2H), 3.06-3.08 (m, 4H), 2.98-3.01 (m, 1H), 2.92-2.95 (m, 1H), 2.71-2.72 (m, 2H), 2.36-2.39 (m, 4H), 1.91-1.93 (m, 2H), 1.72-1.78 (m, 2H)
실시예 140a: (S)-2-(7,7-다이플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드 140a
Figure pat00187
실시예 130g에서 기술된 바와 같은 절차에 따라, (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 130f와 하기 구조식의 4-클로로-2-(7,7-다이플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴-알데하이드(170 mg)를 반응시켜, 화학식 140a(200 mg, 60%)를 황색 고체로서 수득하였다.
Figure pat00188
LCMS: [M+H]+ 684.3.
4-클로로-2-(7,7-다이플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴-알데하이드는 도 25의 반응식에 따라 7,7-다이플루오로-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온으로부터 제조하였다.
실시예 140: (S)-7,7-다이플루오로-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 140
실시예 130에서 기술된 바와 같은 절차에 따라, 화합물 140a(200 mg)를 나트륨 보로하이드라이드 환원시켜, 화합물 140(104 mg, 51%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 686.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.62 (d, J=2.0, 1H), 8.46-8.49 (m, 2H), 7.83 (d, J=3.0, 1H), 7.45(d, J=2.5, 1H), 7.35-7.38(m, 2H), 7.25 (d, J=9.5, 1H), 6.64 (s, 1H), 4.95-4.97 (m, 1H), 4.54-4.57 (m, 2H), 4.38-4.48 (m, 4H), 4.15-4.27 (m, 3H), 3.87-3.90 (m, 1H), 3.67 (s, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.26-3.39 (m, 3H), 3.08-3.10 (m, 1H), 2.92-2.96 (m, 1H), 2.63-2.67 (m, 2H), 2.52-2.55 (m, 1H), 2.30-2.36 (m, 2H),2.18-2.24 (m, 3H), 0.93 (d, J=6.0, 3H)
실시예 141a: 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 141a
Figure pat00189
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드 103a(3.0 g, 13.6 mmol), 4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 107e(1.84 g, 9.0 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(826 mg, 0.9 mmol), 잔트포스(1.04 mg, 1.8 mmol), Cs2CO3(5.8 g, 18.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(40 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 90℃로 5시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여, 화합물 141a(730 mg, 31.7%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 344.0.
실시예 141b: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-메틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-카브알데하이드 141b
Figure pat00190
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 141a(130mg, 0.38 mmol), 1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 135a(146 mg, 0.38 mmol), Pd(dppf)Cl2(31 mg, 0.038 mmol), K3CO3(105 mg, 0.76 mmol) 및 DMF(20 mL)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 110℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 141b(160 mg, 74.6%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 567.3.
실시예 141: 2-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 141
실온에서 메탄올(10 mL) 중의 화합물 141b(150 mg, 0.26 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(29 mg, 0.78 mmol)를 가하고, 생성 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 이를 물(1.0 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 141(35 mg, 23.2%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 569.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J = 5.0, 1H), 7.94 (d, J = 2.5, 1H), 7.72 (d, J = 2.0, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (d, J = 5.5, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.68 (s, 1H), 5.03-5.00 (m, 1H), 4.64-4.61 (m, 1H), 4.51-4.48 (m, 1H), 4.32-4.27 (m, 1H), 4.21-4.09 (m, 4H), 3.91-3.82 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.62-3.58 (m, 2H), 2.87 (t, J=2.5, 2H), 2.57 (d, J=4.0, 2H), 2.54 (s, 2H), 2.51 (s, 3H), 1.27 (s, 6H)
실시예 142a: 5-브로모-1-메틸-3-(피리미딘-4-일아미노)피리딘-2(1H)-온 142a
Figure pat00191
자석 교반기 및 질소 주입구를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(2.00 g, 21.0 mmol), 2-아미노피리미딘(5.61 g, 21.0 mmol), 세슘 카보네이트(13.7 g, 42.1 mmol), DMF(5 mL) 및 1,4-다이옥산(70 mL)을 넣었다. 생성 현탁액을 통해 30분 동안 버블링한 후, 잔트포스(1.10 g, 1.89 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(963 mg, 1.05 mmol)을 가했다. 상기 플라스크에 환류 응축기를 부착하고, 이 반응 혼합물을 100℃로 4시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 메틸렌클로라이드/메탄올(90:10)(150 mL) 및 물(100 mL)로 희석하고, 층들을 분리하였다. 수성 층을 메틸렌클로라이드/메탄올(90:10)(50 mL)로 추출하고, 합친 유기 층을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 플래시 칼럼 크로마토그래피(실리카, 90:10 메틸렌클로라이드/메탄올)로 정제하여, 화합물 142a를 58% 수율(3.42 g)로 비정질 연녹색 고체로서 수득하였다: mp 217-219℃; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.29 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.72 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 5.5, 1.0 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H); LCMS (ESI+) m/z 281.0 (M+H).
실시예 142b: (4-(1-메틸-6-옥소-5-(피리미딘-4-일아미노)-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 142b
Figure pat00192
자석 교반기를 장착한 밀봉된 튜브에 화합물 142a(154.5 mg, 0.55 mmol), (2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 113i(252.5 mg, 0.55 mmol), Pd(dppf)Cl2(25.9 mg, 0.03135 mmol), NaOAc(108 mg, 1.1 mmol), K3PO4·3H2O(293 mg, 1.1 mmol), 아세토나이트릴(6 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 110℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(15:1, 부피비)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 142b(117 mg, 30%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 540.2
실시예 142: 2-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-5-(피리미딘-4-일아미노)-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-2H-피라지노[1,2-a]인돌-1-온 142
iPrOH/THF(1:1, 4 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 142b(121.6 mg, 0.225 mmol) 및 LiOH(100 mg, 4.2 mmol)의 혼합물을 35℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 EtOAc(20 mL X 3)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 142(54 mg, 48.2%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 498.1. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.23 (s, 1H), 8.76 (d, J=2.5, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.50 (d, J=5.0, 1H), 8.31 (d, J=6.0, 1H), 7.69 (d, J=2.5, 1H), 7.37 (d, J=5.0, 1H), 7.31-7.33 (m, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.97 (t, J=4.5, 1H), 4.39-4.43 (m, 2H), 4.10-4.24 (m, 3H), 3.87 (d, J=12.0, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.57-2.64 (m, 2H), 2.47 (d, J=6, 2H), 1.79 (d, J=4.0, 2H), 1.69 (d, J=6.0, 2H)
실시예 143a: 1-메틸-3-(피리미딘-4-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 143a
Figure pat00193
자석 교반기 및 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(피리미딘-4-일아미노)피리딘-2(1H)-온 142a(4.0 g, 14 mmol), 잔트포스(400 mg, 0.7 mmol), Pd2(dba)3(635 mg, 0.7 mmol), KOAc(7.3 mg, 28 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(10.6 g, 42 mmol) 및 1,4-다이옥산(100 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 반응 혼합물을 60℃로 8시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(5:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 143a(3.8 mg, 82%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 329.5.
실시예 143b: 4-(1-메틸-5-(피리미딘-4-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}니코틴알데하이드 143b
Figure pat00194
자석 교반기 및 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 CH3CN(5 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 143a(150 mg, 0.46 mmol), 하기 구조식의 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 109a(164 mg, 0.46 mmol), Pd(dppf)Cl2(16 mg, 0.02 mmol), K3PO4·3H2O(223 mg, 0.92 mmol)를 넣었다.
Figure pat00195
진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 반응 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/MeOH(20:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 143b(110 mg, 48%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 527.
실시예 143: 6-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-5-(피리미딘-4-일아미노)-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-2,2-다이메틸-2,3,5,6-테트라하이드로-1H,4H-8-티아-6-아자-사이클로펜타[a]인덴-7-온 143
화합물 143b(110 mg, 0.2 mmol), NaBH4(30 mg, 0.8 mmol) 및 MeOH(5 mL)의 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 EtOAc(10 mL X 2)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 143(48 mg, 44%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 529. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 9.23 (s, 1H), 8.76 (d, J=2.5, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.51-8.49 (m, 1H), 8.31 (m, 1H), 7.67 (d, J=3.0, 1H), 7.38-7.37 (m, 1H), 7.33-7.31 (m, 1H), 5.02-5.01 (m, 1H), 4.43 (d, J=2.5, 2H), 4.18-4.15 (m, 1H), 3.83-3.81 (m, 1H), 3.61-3.59 (m, 3H), 3.03-2.99 (m, 1H), 2.91-2.89 (m, 1H), 2.76 (s, 2H), 2.60-2.53 (m, 2H), 1.23-1.22 (m, 6H)
실시예 144a: 4-(1-메틸-5-(피리미딘-4-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}니코틴알데하이드 144a
Figure pat00196
자석 교반기 및 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 CH3CN(5 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 1-메틸-3-(피리미딘-4-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 143a(150 mg, 0.46 mmol), 하기 구조식의 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(157 mg, 0.46 mmol), Pd(dppf)Cl2(16 mg, 0.02 mmol) 및 K3PO4·3H2O(223 mg, 0.92 mmol)를 넣었다.
Figure pat00197
진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 반응 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/MeOH(20:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 144a(98 mg, 48%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 510.
실시예 144: 2-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-5-(피리미딘-4-일아미노)-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타-[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 144
화합물 144a(98 mg, 0.19 mmol), NaBH4(30 mg, 0.8mmol) 및 MeOH(5 mL)의 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 EtOAc(10 mL x 2)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 144(25 mg, 42%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 512. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 9.18 (s, 1H), 8.76-8.74 (m, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.50-8.47 (m, 1H), 8.31-8.30 (m, 1H), 7.68-7.69 (m, 1H), 7.37-7.36 (m, 1H), 7.33-7.31 (m, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.07-5.04 (m, 1H), 4.44-4.41 (m, 2H), 4.23-4.18 (m, 3 H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.61-2.56 (m, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.21-1.20 (m, 6H)
실시예 145a: (S)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}니코틴알데하이드 145a
Figure pat00198
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일) 피페라진-1-일) 피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 130f(160 mg, 1 당량, 0.33 mmol), 하기 구조식의 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 109a(120 mg, 1 당량, 0.33 mmol), PdCl2(dppf)(27 mg, 0.1 당량, 0.033 mmol), K3PO4(140 mg, 2 당량, 0.66 mmol), NaOAc(54 mg, 2 당량, 0.66 mmol) 및 CH3CN(20 mL)을 넣었다.
Figure pat00199
진공/아르곤 플래시의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/EtOH(40/1)로 용리하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 145a(97 mg, 43%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 680.3.
실시예 145: 6-{3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-((S)-2-메틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-2,2-다이메틸-2,3,5,6-테트라하이드로-1H,4H-8-티아-6-아자-사이클로펜타[a]인덴-7-온 145
자석 교반기를 장착한 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 145a(97 mg, 1.0 당량, 0.14 mmol), NaBH4(16 mg, 3.0 당량, 0.42 mmol) 및 MeOH(10 mL)를 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 145(61 mg, 63%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 682.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J=2.5, 1H), 8.50 (d, J=5.0, 1H), 7.97 (d, J=2.5, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.80 (d, J=2.5, 1H), 7.37 (d, J=5.0, 1H), 7.30 (dd, J=3.0, 9.0, 1H), 6.81 (d, J=9.0, 1H), 4.82-4.79 (m, 1H), 4.71-4.61 (m, 5H), 4.45-4.31 (m, 2H), 3.85-3.80 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.54-3.46 (m, 2H), 3.07 (d, J=5.0, 2H), 2.98-2.93 (m, 2H), 2.79 (s, 2H), 2.60-2.46 (m, 5H), 2.21-2.18 (m, 1H), 1.28 (s, 6H), 0.98 (d, J=6.0, 3H)
실시예 146a: 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 146a
Figure pat00200
다이옥산(50 mL) 중의 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드 103a(1600 mg, 7.27 mmol) 및 하기 구조식의 10-플루오로-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온(500 mg, 2.40 mmol)의 용액에 KOAc(471 mg, 4.82 mmol), Pd2(dba)3(220 mg, 0.24 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸-잔텐(140 mg, 0.24 mmol)을 가했다.
Figure pat00201
생성 용액을 통해 아르곤을 30분 동안 버블링한 후, 이 혼합물을 80℃에서 10시간 동안 교반하였다. 이를 실온으로 냉각하고, H2O(100 mL)를 가했다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(2×200 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(100 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, PE/EA(3:1)로 용리하는 플래시 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 146a(420 mg, 49%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 348
실시예 146b: 2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-6-옥소-5-(피리미딘-4-일아미노)-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드 146b
Figure pat00202
환저 플라스크에 화합물 146a(200 mg, 0.58 mmol), 1-메틸-3-(피리미딘-4-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일) 피리딘-2(1H)-온 143a(227 mg, 0.69 mmol), PdCl2(dppf)(47 mg, 0.06 mmol), K3PO4(244 mg, 1.15 mmol), NaOAc(94 mg, 1.15 mmol), 아세토나이트릴(30 mL) 및 H2O(3 mL)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하여, 화합물 146b(79 mg, 27%)를 적색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 514
실시예 146: 10-플루오로-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-6-옥소-5-(피리미딘-4-일아미노)-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 146
화합물 146b(79 mg, 0.15 mmol), NaBH4(22 mg, 0.60) 및 CH3OH(10 mL)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 CH2Cl2(10 mL X 2)로 추출하였다. 합친 CH2Cl2 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 146(39 mg, 49%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 516. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.83 (d, J=2.0, 1 H), 8.78 (s, 1 H), 8.52 (d, J=5.0, 1 H), 8.35 (d, J=5.5, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 8.03 (d, J=2.0, 1 H), 7.36 (d, J=5.0, 1 H), 6.76-6.77 (m, 1 H), 5.07 (s, 1 H), 4.65 (d, J=9.5, 1 H), 4.48 (d, J=9.5, 1 H), 4.29 (d, J=1.5, 1 H), 4.02-4.13 (m, 2 H), 3.79 (d, J=6.5, 1 H), 3.73 (s, 3 H), 2.52-2.58 (m, 4 H), 1.85-1.90 (m, 2 H), 1.77 (d, J=5.0, 2 H)
실시예 147a: 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 147a
Figure pat00203
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(50 mL), 2-브로모-4-클로로니코틴-알데하이드 103a(1.4 g, 6.4 mmol), 3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1(2H)-온 112d(0.6 g, 3.2 mmol), Pd2(dba)3(293 mg, 0.32 mmol), 잔트포스(370 mg, 0.64 mmol) 및 칼륨 아세테이트 (627 mg, 6.4 mmol)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 80℃로 밤새도록 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, CH2Cl2/CH3OH(20:1, 부피비)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 147a(528 mg, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 330. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 10.09 (s, 1H), 8.37 (d, J=5.5, 1H), 7.16 (d, J=5.5, 1H), 6.25 (s, 1H), 4.29-4.32 (m, 2H), 3.83-3.86 (m, 2H), 2.96-2.99 (m, 2H), 2.77-2.78 (m, 2H), 2.00-2.07 (m, 2H), 1.83-1.85 (m, 2H)
실시예 147b: 2-(3-폼일-4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1(2H)-온 147b
Figure pat00204
환저 플라스크에 화합물 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 147a(100 mg, 0.30 mmol), 1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 135a(116 mg, 0.30 mmol), PdCl2(dppf)(25 mg, 0.03 mmol), K3PO4·3H2O(160 mg, 0.60 mmol), NaOAc(59 mg, 0.60 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 H2O(5 mL)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(1:3)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하여, 화합물 147b(100 mg, 60%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 553
실시예 147: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1(2H)-온 147
화합물 147b(100 mg, 0.18 mmol), NaBH4(21 mg, 0.54) 및 CH3OH(10 mL)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 CH2Cl2(10 mL X 2)로 추출하였다. 합친 CH2Cl2 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 147(60 mg, 60%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 555. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.45 (d, J=5.0, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.06 (d, J=5.0, 1H), 7.41 (d, J=2.0, 1H), 7.29 (d, J=5.0, 1H), 6.04 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.33-4.42 (m, 2H), 4.11-4.16 (m, 1H), 3.91-3.96 (m, 3H), 3.77-3.82 (m, 2H), 3.57 (s, 3H), 3.45-3.48 (m, 2H), 2.91-3.01 (m, 2H), 2.71-2.79 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 1.90-1.92 (m, 2H), 1.71-1.79 (m, 2H)
실시예 148a: 3-(2-브로모-4-클로로피리딘-3-일)옥세탄-3-올 148a
Figure pat00205
-70℃에서 건조 THF(200 mL) 중의 2-브로모-4-클로로피리딘(14 g, 70 mmol)의 용액에 LDA(42.0 mL, 84.0 mmol, 2.0 M)를 적가했다. 이 온도에서 0.5시간 동안 교반한 후, 건조 THF(40 mL) 중의 옥세탄-3-온(6.6 g, 90 mmol)의 용액을 천천히 가하고, 이 반응 혼합물을 0℃에서 추가로 1시간 동안 교반하였다. 여기에, 포화된 수성 NH4CI(50 mL) 및 EA(200 mL)를 가했다. 이 혼합물을 물과 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합친 유기 층을 물 및 염수로 세척하였다. 무수 마그네슘 설페이트 상에서 건조한 후, 용매를 증발시키고, 조 물질을, DCM으로 용리하는 SGC로 정제하여, 화합물 148a(8.8 g, 45%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 266.0.
실시예 148b: 2-(4-클로로-3-(3-하이드록시옥세탄-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 148b
Figure pat00206
자석 교반기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 101e(190 mg, 1.0 mmol), 화합물 148a(795 mg, 3.0 mmol), CuI(95 mg, 0.5 mmol), DMEDA(88 mg, 1.0 mmol), KOAc(294 mg, 3.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(50 ml)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, 이어서 N2로 재충전하였다. 이 플라스크에 환류 응축기를 부착하고, 이 반응 혼합물을 15시간 동안 85℃로 가열하였다. 이어서, 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(2:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 148b(156 mg, 42%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 374.2.
실시예 148: (S)-2-(3-(3-하이드록시옥세탄-3-일)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 148
100 mL 1구 환저 플라스크에 CH3CN(30 mL) 중의 화합물 148b(100 mg, 0.3 mmol), (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 130f(173 mg, 0.36 mmol), Pd(dppf)Cl2(15 mg, 0.015 mmol), K3PO4(130 mg, 0.6 mmol) 및 NaOAc·3H2O(90 mg, 0.6 mmol)를 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, DCM/MeOH(25:1)로 용리하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 148(30 mg, 20%)을 연황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 693.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.69 (d, J=2, 1H), 8.50 (d, J=5, 1H), 8.01 (d, J=2.5, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.38-7.32 (m, 2H), 6.89 (s, 1H), 6.83 (d, J=8.5, 1H), 6.67 (s, 1H), 4.93 (d, J=6, 1H), 4.71-4.63 (m, 6H), 4.46 (d, J=7.5, 1H), 4.24-4.18 (m, 2H), 4.10-4.05 (m, 1H), 3.90 (d, J=12.5, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.55-3.46 (m, 2H), 3.10 (t, J=4.5, 2H), 2.63-2.48 (m, 7H), 2.22 (t, J=7.5, 1H), 1.92-1.88 (m, 2H), 1.82-1.77 (m, 2H), 1.02-1.00 (m, 3H)
실시예 149a: (S)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 149a
Figure pat00207
환류 응축기를 장착한 100 mL 환저 플라스크에 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 139a(100 mg, 0.30 mmol), (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)-피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 191j(146 mg, 0.30 mmol), PdCl2(dppf)(25 mg, 0.030 mmol), K3PO4·삼수화물(160 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트(49 mg, 0.60 mmol), 아세토나이트릴(20 mL) 및 물(3 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(1:3)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 149a(97 mg, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 649
실시예 149: 2-{3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-((S)-2-메틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-2,3,5,6,7,8-헥사하이드로-4H-2,4b-다이아자-플루오렌-1-온 149
화합물 149a(97 mg, 0.15 mmol), NaBH4(17 mg, 0.45) 및 메탄올(10 mL)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(10 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 149(62 mg, 63%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 651.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.63 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.83 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.38-7.36 (m, 1H), 7.31 (J = 5.0 Hz, 1H), 7.25-7.23 (m, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.57-4.55 (m, 2H), 4.48-4.46 (m, 1H), 4.42-4.38 (m, 2H), 4.35-4.33 (m, 1H), 4.15-4.12 (m, 1H), 3.96-3.94 (m, 1H), 3.82-3.78 (m, 2H), 3.69-3.67 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.41-3.38 (m, 2H), 3.18-3.15 (m, 2H), 3.00-2.95 (m, 3H), 2.73-2.71 (m, 2H), 2.30-2.28 (m, 2H), 2.20-2.16 (m, 1H), 1.93-1.89 (m, 3H), 1.77-1.75 (m, 1H), 0.93 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 150a: 3-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-5-[1-메틸-5-({5-메틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-4-카브알데하이드 150a
Figure pat00208
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 25 mL 1구 환저 플라스크에 3-브로모-5-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-카브알데하이드 107f(233 mg, 0.60 mmol), 1-메틸-3-({5-메틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1,2-다이하이드로피리딘-2-온 135a(231 mg, 0.60 mmol), Pd(dppf)Cl2(49 mg, 0.060 mmol), 칼륨 아세테이트(118 mg, 1.2 mmol), K3PO4·삼수화물(320 mg, 1.2 mmol), 아세토나이트릴(12 mL) 및 물(5 방울)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 110℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 150a(168 mg, 49%)를 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 567
실시예 150: 2-[4-하이드록시메틸-1'-메틸-5'-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6'-옥소-1',6'-다이하이드로-[3,3']바이피리딘일-5-일]-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 150
0℃에서 메탄올(10 mL) 중의 화합물 150a(170 mg, 0.30 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(68 mg, 1.8 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(2 mL)로 켄칭하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 150(42 mg, 25%)을 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 569. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.63 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.95 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.32 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 5.67 (s, 1H), 4.63-4.55 (m, 2H), 4.37-4.35 (m 1H), 4.22-4.18 (m, 3H), 4.05-3.97 (m, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.59-3.57 (m, 2H), 2.86 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.56 (s, 2H), 2.50 (s, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.26 (s, 6H).
실시예 151a: (R)-3급-부틸 3-메틸-4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 151a
Figure pat00209
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(60 mL), 5-브로모-2-나이트로피리딘(2.0 g, 10.0 mmol), (R)-3급-부틸 3-메틸피페라진-1-카복실레이트(2.0 g, 10.0 mmol) 및 세슘 카보네이트(6.5 g, 20 mmol)를 넣었다. 생성 혼합물을 통해 질소를 10분 동안 버블링한 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(915 mg, 1.0 mmol) 및 잔트포스(579 mg, 1.0 mmol)를 가했다. 이 시스템을 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클로 처리하고, 100℃로 15시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(100 mL)와 물(100 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(100 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 151a(1.6 g, 44%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 323. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.21 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.45-7.43 (m, 1H), 4.34-4.33 (m, 1H), 3.92-3.99 (m, 1H), 3.80 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 3.06-3.23 (m, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.09 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 151b: (R)-3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 151b
250 mL 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 151a(1.5 g, 4.6 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 200 mg) 및 메탄올(70 mL)을 넣었다. 이를 배기하고, 수소 기체를 넣고, 실온에서 10시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 이 플라스크에 질소를 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표)의 패드를 통한 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여, 화합물 151b(1.1 g, 81%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 293
실시예 151c: (R)-3급-부틸 4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 151c
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(40 mL), 화합물 151b(1.0 g, 3.4 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(2.7 g, 10.2 mmol) 및 세슘 카보네이트(2.2 g, 6.8 mmol)를 넣었다. 생성 혼합물을 통해 질소를 10분 동안 버블링한 후, 잔트포스(198 mg, 0.34 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(313 mg, 0.34 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클로 처리하고, 100℃로 5시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(50 mL)와 물(50 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 151c(1.1 g, 63%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 478.
실시예 151d: (R)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 151d
메탄올(20 mL) 중의 화합물 151c(600 mg, 1.26 mmol)의 혼합물에 HCl/다이옥산(4M, 4 mL)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하였다. 잔사를 수성 1M NaOH로 염기성화시키고, 다이클로로메탄(3 X 30 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, 감압 하에 농축하여, 화합물 151d(450 mg, 95%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 378.
실시예 151e: (R)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 151f
메탄올(700 mL) 중의 화합물 151d(40.0 g, 106 mmol), 옥세탄-3-온(11.4 g, 159 mmol), NaBH3CN(10.0 g, 159 mmol) 및 아연 클로라이드(21.3 g, 159 mmol)의 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물에 물(50 mL)을 가하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 200 mL)으로 추출하고, 합친 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 151e(35 g, 73%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 434.
실시예 151f: (R)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 151f
Figure pat00210
다이옥산(50 mL) 중의 화합물 151e(2.0 g, 4.60 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(3.50 g, 13.80 mmol)의 용액에 PdCl2(dppf)(377.10 mg, 0.46 mmol) 및 칼륨 아세테이트(2.70 g, 27.80 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 아르곤 분위기 하에 10℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 후, 이 혼합물을 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(15:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 151f(1.10 g, 49%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 482.3
실시예 151g: (R)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 151g
환류 응축기를 장착한 100 mL 환저 플라스크에 4-클로로-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 103b(150 mg, 0.45 mmol), 151f(331 mg, 0.69 mmol), PdCl2(dppf)(37 mg, 0.045 mmol), K3PO4(190 mg, 0.90 mmol), 나트륨 아세테이트(74 mg, 0.90 mmol), 아세토나이트릴(15 mL) 및 물(1.5 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 151g(89 mg, 30%)를 적색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 647
실시예 151: 2-{3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-((R)-2-메틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-6,7,8,9-테트라하이드로-2H-피라지노[1,2-a]인돌-1-온 151
화합물 151g(89 mg, 0.14 mmol), NaBH4(22 mg, 0.60) 및 메탄올(10 mL)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(8 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 151(35 mg, 39%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 649. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.83 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.50-7.48 (m, 2H), 7.38-7.36 (m, 1H), 7.26-7.24 (m, 2H), 6.83-6.80 (m, 2H), 4.98 (bs, 1H), 4.57-4.54 (m, 2H), 4.48-4.33 (m, 4H), 3.67-3.66 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.39-3.38 (m, 2H), 3.09-3.08 (m, 1H), 2.96-2.94 (m, 1H), 2.76-2.74 (m, 2H), 2.64-2.62 (m, 2H), 2.36-2.31 (m, 2H), 2.20-2.17 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 1.88-1.86 (m, 2H), 1.75-1.74 (m, 2H), 0.93 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 152a: 3급-부틸 8-(6-나이트로피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트 152a
Figure pat00211
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(100 mL), 5-브로모-2-나이트로피리딘(2.5 g, 12.4 mmol), 3급-부틸 3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트(869 g, 4.1 mmol), Pd2(dba)3(193 mg, 0.21 mmol), 잔트포스(237 mg, 0.41 mmol) 및 세슘 카보네이트(2.7 g, 8.2 mmol)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 110℃에서 밤새도록 교반하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(3:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 152a(2.63 g, 66.8%) 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 335.2.
실시예 152b: 3급-부틸 8-(6-아미노피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트 152b
100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 152a(2.5 g, 7.5 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 250 mg) 및 메탄올(40 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 배기하고, 수소 기체를 넣고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 이 플라스크에 질소를 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표)의 패드를 통해 여과하여 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여, 를 수득하였다 152b(1.51 g, 66%)를 무색 오일로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 305.3
실시예 152c: 3급-부틸 8-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실레이트 152c
자석 교반기를 장착한 밀봉된 튜브에 화합물 152b(1.3 g, 4.3 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.2 g, 4.3 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(394 mg, 0.43 mmol), 잔트포스(497 mg, 0.86 mmol), Cs2CO3(2.8 g, 8.6 mmol) 및 1,4-다이옥산(15 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 120℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 152c(900 mg, 43%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 490.3.
실시예 152d: 3-(5-(3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-일아미노)-5-브로모-1-메틸-피리딘-2(1H)-온 152d
화합물 152c(900 mg, 1.84 mmol) 및 4.0M HCl/다이옥산(60 mL)의 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하여, 를 수득하였다 조질 152d(700 mg, 98%)를 황색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 390.3.
실시예 152e: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(3-(옥세탄-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 152e
메탄올(30 mL) 중의 화합물 152d(676 mg, 1.7 mmol), 옥세탄-3-온(251 mg, 3.5 mmol), NaBH3CN(274 mg, 4.4 mmol) 및 아연 클로라이드(592 mg, 4.4 mmol)의 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반하였다. 물을 가하고, 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하여, 조질 화합물 152e(650 mg, 84%)를 황색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 446.2.
실시예 152f: (4-(1-메틸-5-(5-(3-(옥세탄-3-일)-3,8-다이아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 152f
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 152e(300 mg, 0.67 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113h(257 mg, 0.67 mmol), Pd(dppf)Cl2(55 mg, 0.067 mmol), K3PO4(284 mg, 1.34 mmol), 나트륨 아세테이트(110 mg, 1.34 mmol), 물(6 방울) 및 아세토나이트릴(20 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 환류 하에 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 152f(200 mg, 42%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 705.4.
실시예 152: 2-{3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-((1S,5R)-3-옥세탄-3-일-3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]℃t-8-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-2H-피라지노[1,2-a]인돌-1-온 152
i-프로판올/THF(1:1, 4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 152f(180 mg, 0.26 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(215 mg, 5.1 mmol)의 혼합물을 35℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 물 및 에틸 아세테이트로 희석하였다. 수 상을 분리하고, 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 152(12 mg, 71%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 663.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6)　 δ 8.55 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.80 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.25-7.23 (m, 1H), 7.20 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.96-4.94 (m, 1H), 4.48-4.43 (m, 3H), 4.39-4.37 (m, 3H), 4.25-4.19 (m, 5H), 3.85 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.66-2.54 (m, 4H), 2.40-2.36 (m, 3H), 2.17 (d, J = 10.5 Hz, 2H), 1.94-1.65 (m, 8H).
실시예 153a: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-[(2R)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-카브알데하이드 153a
Figure pat00212
환류 응축기를 장착한 50 mL 환저 플라스크에 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(105 mg, 0.30 mmol), 1-메틸-3-({5-[(2R)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-5-(테트라-메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1,2-다이하이드로피리딘-2-온 151g(216 mg, 0.45 mmol), PdCl2(dppf)(25 mg, 0.030 mmol), K3PO4(126 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트(49 mg, 0.60 mmol), 아세토나이트릴(15 mL) 및 물(1.5 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 80℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 153a(82 mg, 41%)를 적색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 663
실시예 153: 2-{3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-((R)-2-메틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 153
화합물 153a(82 mg, 0.12 mmol), NaBH4(22 mg, 0.60) 및 메탄올(10 mL)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물(5 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 153(22 mg, 28%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 665. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.83 (s, 1H),7.36 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.32-7.26 (m,1H), 6.84-6.80 (m, 2H), 5.30 (s, 1H), 4.71-4.32 (m, 7H), 4.15 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 3.85 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.57-3.43 (m, 2H), 3.08-3.06 (m, 2H), 2.57-2.48 (m, 7H), 2.22-2.20 (m, 1H), 1.27 (s, 6H), 0.98 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 154a: 4-[1-메틸-5-({5-[(2R)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일} 아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 154a
Figure pat00213
환류 응축기를 장착한 100 mL 환저 플라스크에 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a(84 mg, 0.24 mmol), (R)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 151g(173 mg, 0.36 mmol), PdCl2(dppf)(20 mg, 0.024 mmol), K3PO4(100 mg, 0.48 mmol), 나트륨 아세테이트(40 mg, 0.48 mmol), 아세토나이트릴(20 mL) 및 물(2 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 154a(112 mg, 70%)를 적색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 665
실시예 154: 3-{3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-((R)-2-메틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-6,7,8,9-테트라하이드로-3H-벤조[4,5]티에노[2,3-d]피리다진-4-온 154
화합물 154a(150 mg, 0.23 mmol), NaBH4(35 mg, 0.92) 및 메탄올(10 mL)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 혼합물을 물(8 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 154(29 mg, 19%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 667. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.49-8.47 (m, 2H), 7.85 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.38-7.36 (m, 1H), 7.24 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.85 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 4.57-4.54 (m, 2H), 4.43-4.36 (m, 4H), 3.69-3.68 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.40-3.36 (m, 1H), 3.11-3.07 (m, 1H), 2.97-2.86 (m, 6H), 2.33-2.31 (m, 2H), 2.16 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 1.89-1.86 (m, 4H), 0.92 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 155a: 3-(5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 155a
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-3-(5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 122e(3.0 g, 6.70 mmol), Pin2B2(8442 mg, 33.5 mmol), Pd2(dba)3(311 mg, 0.34 mmol), 잔트포스(319 mg, 0.67 mmol), 칼륨 아세테이트(1970 mg, 20.1mmol) 및 다이옥산(50 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 60℃로 16시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(8:1)(80 mL)로 세척하고, 화합물 155a(3 g, 90%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 496.4.
실시예 155b: 4-(5-(5-(2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 155b
Figure pat00214
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 139a(133 mg, 0.40 mmol), 화합물 155a(198 mg, 0.40 mmol), Pd(dppf)Cl2(17 mg, 0.020 mmol), K3PO4(254 mg, 1.2 mmol), 나트륨 아세테이트(98 mg, 1.2 mmol), 물(5 방울) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 3시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 155b(80 mg, 30%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 663.3.
실시예 155: 2-{5-[5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-2,3,5,6,7,8-헥사하이드로-4H-2,4b-다이아자-플루오렌-1-온 155
0℃에서 메탄올(5 mL) 중의 화합물 155b(80 mg, 0.12 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(12 mg, 0.36 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물(1 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 155(32 mg, 40%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 665.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.86 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.37-7.33 (m, 2H), 6.82 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.02 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 4.78-4.71 (m, 2H), 4.67-4.61 (m, 3H), 4.44 -4.39 (m,1H), 4.31-4.29 (m,1H), 3.96-3.91 (m, 1H), 3.86-3.80 (m, 2H), 3.78-3.75 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.21-3.19 (m, 1H), 3.01-2.93 (m, 3H), 2.85-2.83 (m, 2H), 2.72 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 2.49-2.47 (m, 1H), 2.05-2.03 (m, 2H), 1.98-1.97
실시예 156a: 4-(5-(5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 156a
Figure pat00215
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 3-(5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 155a(171 mg, 0.35 mmol), 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(120 mg, 0.35 mmol), K3PO4(146 mg, 0.69 mmol), PdCl2(dppf)(28 mg, 0.035 mmol), 나트륨 아세테이트(56 mg, 0.69 mmol), 물(5 방울) 및 아세토나이트릴(20 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 156a(60 mg, 25%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 681.3
실시예 156: 2-{5-[5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-10-플루오로-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-2H-피라지노[1,2-a]인돌-1-온 156
자석 교반기를 장착한 50 mL 환저 플라스크에 화합물 156a(60 mg, 0.088 mmol), NaBH4(17 mg, 0.44 mmol) 및 메탄올(10 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 156(15 mg, 25%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 683.5. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.67 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.84 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.37-7.35 (m, 2H), 6.81 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.99-4.59 (m, 6H), 4.45-4.32 (m, 2H), 4.12-4.03 (m, 2H), 3.85-3.73 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.19-3.16 (m, 1H), 2.91-2.89 (m, 1H), 2.75-2.69 (m, 2H), 2.57-2.47 (m, 5H), 1.97-1.76 (m, 5H), 0.89-0.87 (m, overlap, 6H).
실시예 157: 2-{5'-[5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-4-하이드록시메틸-1'-메틸-6'-옥소-1',6'-다이하이드로-[3,3']바이피리딘일-5-일}-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-2H-피라지노[1,2-a]인돌-1-온 157
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 25 mL 1구 환저 플라스크에 3-브로모-5-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2a]인돌-2(1H)-일)아이소니코틴알데하이드 101f(200 mg, 0.54 mmol), 3-(5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 155a(267 mg, 0.54 mmol), Pd(dppf)Cl2(44 mg, 0.054 mmol), K3PO4(229 mg, 1.08 mmol), 나트륨 아세테이트(89 mg, 1.08 mmol), 물(0.2 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 가열 환류시켰다 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 157(35.5 mg, 11%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 665.4. 1H NMR (500 MHz, CDCl3)　 δ 8.65-8.63 (m, 2H), 8.50 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.48-7.47 (m, 1H), 7.36 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.81 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.75-4.54 (m, overlap, 6H), 4.37-4.13 (m, overlap, 4H), 4.00-3.95 (m, 1H), 3.74-3.73 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.19-3.15 (m, 1H), 2.91-2.90 (m, 1H), 2.74-2.44 (m, overlap, 7H), 1.92-1.88 (m, 2H), 1.81-1.79 (m, 2H), 0.90-0.89 (m, 6H).
실시예 158a: 4-[5-({5-[(2S,5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자tri-사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 158a
Figure pat00216
환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 (4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드) 108a(280 mg, 0.80 mmol), 3-(5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 155a(480 mg, 0.96 mmol), Pd(dppf)Cl2(33 mg, 0.040 mmol), K3PO4(339 mg, 1.6 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(218 mg, 1.6 mmol) 및 아세토나이트릴(100 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 158a(300 mg, 54%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 677.3.
실시예 158: 2-{5-[5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 158
메탄올(30 mL) 중의 화합물 158a(200 mg, 0.30 mmol) 및 NaBH4(36 mg, 0.90 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(5 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(3 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 158(110 mg, 55%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 679.4. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.87 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.37-7.36 (m, 2H), 6.85 (s, 1H), 6.81 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 5.07 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 4.77-4.71 (m, 2H), 4.67-4.61 (m, 3H), 4.53-4.51 (m, 1H), 4.34-4.32 (m, 1H), 4.16 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.76 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.20-3.17 (m, 1H), 2.92 (dd, J = 3.0, 11.5 Hz, 1H), 2.76-2.70 (m, 2H), 2.58 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.52 (s, 2H), 2.49-2.46 (m, 1H), 1.97-1.93 (m, 1H), 1.28 (s, 6H), 0.92-0.89 (m, 6H).
실시예 159a: 4-[5-({5-[2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 159a
Figure pat00217
환류 응축기를 장착한 100 mL 환저 플라스크에 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a(200 mg, 0.58 mmol), 3-({5-[(2S,5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1,2-다이하이드로피리딘-2-온 155a(1.0 g, 2.0 mmol), PdCl2(dppf)(47 mg, 0.060 mmol), K3PO4(280 mg, 1.2 mmol), 나트륨 아세테이트(95 mg, 1.2 mmol), 아세토나이트릴(15 mL) 및 물(1.5 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 159a(150 mg, 38%)를 적색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 679
실시예 159: 3-{5-[5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-6,7,8,9-테트라하이드로-3H-벤조[4,5]티에노[2,3-d]피리다진-4-온 159
화합물 159a(130 mg, 0.19 mmol), NaBH4(22 mg, 0.60) 및 메탄올(10 mL)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 혼합물을 물(8 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 159(28 mg, 22%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 681. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.71 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.65 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.70 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.67-4.61 (m, 2H), 4.71-4.64 (m, 2H), 4.44-4.42 (m, 2H), 4.34-4.33 (m, 1H), 3.83-3.76 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.20-3.16 (m, 1H), 2.99-2.84 (m, 6H), 2.79-2.71 (m, 2H), 2.50-2.48 (m, 1H), 2.02-1.98 (m, 4H), 0.91 (d, J = 6.0 Hz, 6H).
실시예 160a: 4-(5-(5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a] 인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 160a
Figure pat00218
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 103b(150 mg, 1.0 당량, 0.46 mmol), 3-(5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 155a(228 mg, 0.46 mmol), K3PO4(195 mg, 0.92 mmol), PdCl2(dppf)(37 mg, 0.046 mmol), 나트륨 아세테이트(75 mg, 0.92 mmol), 물(8 방울) 및 아세토나이트릴(20 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/에탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 160a(80 mg, 26%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 661.4.
실시예 160: 2-{5-[5-((2S,5R)-2,5-다이메틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-6,7,8,9-테트라하이드로-2H-피라지노[1,2-a]인돌-1-온 160
자석 교반기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 160a(80 mg, 0.12 mmol), NaBH4(23 mg, 0.60 mmol) 및 메탄올(10 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이를 물(1 mL)로 켄칭하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 160(44 mg, 55%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 663.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.72-8.70 (m, 1H), 8.57 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.89-7.87 (m, 2H), 7.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.37-7.35 (m, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.97 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.68 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.10-5.08 (m, 1H), 4.76-4.32 (m, 6H), 3.76-3.72 (m, 4H), 3.20-3.17 (m, 1H), 2.93-2.90 (m, 1H), 2.76-2.69 (m, 6H), 2.49-2.46 (m, 1H), 1.97-1.94 (m, 3H), 1.87-1.84 (m, 2H), 0.89 (t, J = 6.5 Hz, 6H).
실시예 161a: (S)-3급-부틸 3-에틸-4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 161a
Figure pat00219
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(50 mL), 5-브로모-2-나이트로피리딘(2.02 g, 10 mmol), (S)-3급-부틸 3-에틸피페라진-1-카복실레이트(2.14 g, 10.0 mmol), Pd2(dba)3(458 mg, 0.50mmol), 잔트포스(576 mg, 1.0 mmol) 및 세슘 카보네이트(6.52 g, 20 mmol)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 밤새도록 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(3:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 161a(700 mg, 22%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 336
실시예 161b: (S)-3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-3-에틸피페라진-1-카복실레이트 161b
100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 161a(0.7 g, 2.08 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 208 mg) 및 메탄올(40 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 배기하고, 수소 기체를 넣고, 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 이 플라스크에 질소를 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표)의 패드를 통해 여과하여 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여, 화하붐ㄹ 161b(568 mg, 89%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 306
실시예 161c: (S)-3급-부틸 4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노) 피리딘-3-일)-3-에틸피페라진-1-카복실레이트 161c
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(50 mL), 161b(568 mg, 1.86 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(498 mg, 1.86 mmol), Pd2(dba)3(85 mg, 0.093mmol), 잔트포스(107 mg, 0.186 mmol) 및 세슘 카보네이트(1.198 g, 3.72 mmol)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 6시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 161c(502 mg, 55%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 492.
실시예 161d: (S)-5-브로모-3-(5-(2-에틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸 피리딘-2(1H)-온 161d
화합물 161c(502 mg, 1.02 mmol), 다이클로로메탄(2 mL) 및 4.0 M HCl/다이옥산(4 mL)의 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하여, 조질 화합물 161d(263 mg, 66%)를 황색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS: [M+H]+ 392.
실시예 161e: (S)-5-브로모-3-(5-(2-에틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 161e
Figure pat00220
메탄올(10 mL) 중의 화합물 161d(263 mg, 0.67 mmol), 옥세탄-3-온(96 mg, 1.34 mmol), NaBH3CN 104 mg, 1.68 mmol) 및 아연 클로라이드(227 mg, 1.68 mmol)의 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응물에 물(10 mL)을 가했다. 생성 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 161e(203 mg, 68%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 448.
실시예 161f: (S)-3-(5-(2-에틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 161f
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 161e(3219 mg, 7.20 mmol), Pin2B2(9072 mg, 36.0 mmol), Pd2(dba)3(329 mg, 0.36 mmol), 잔트포스(302 mg, 0.72 mmol), 칼륨 아세테이트(2117 mg, 21.6 mmol) 및 다이옥산(50 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 60℃로 16시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(8:1)(80 mL)로 세척하고, 화합물 161f(3.0 g, 84%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 496.4.
실시예 161g: 4-(5-(5-(2-에틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 161g
Figure pat00221
환류 응축기를 장착한 50 mL 환저 플라스크에 화합물 161f(200 mg, 0.40 mmol), 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 139a(132 mg, 0.40 mmol), K3PO4 3물(213 mg, 0.80 mmol), 나트륨 아세테이트(66 mg, 0.80 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(16 mg, 0.020 mmol) 및 아세토나이트릴(20 mL)을 넣었다. 진공/N2 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 N2 보호 하에 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(50 mL) 및 물(50 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3×20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 어두운색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 161g(150 mg, 57%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 663
실시예 161: 2-{5-[5-((S)-2-에틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-2,3,5,6,7,8-헥사하이드로-4H-2,4b-다이아자-플루오렌-1-온 161
메탄올(20 mL) 중의 화합물 161g(120 mg, 0.18 mmol)의 용액에 NaBH4(21 mg, 0.54 mmol)를 가했다. 이 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 이어서, 이 혼합물을 물(20 mL)에 붓고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 40 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사 고체를 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 161(97 mg, 81%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 665. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.63 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.84-7.82 (m, 2H), 7.35 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.82 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.01-4.99 (m, 1H), 4.73-4.64 (m, 5H), 4.45-4.40 (m, 1H), 4.30 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 3.94-3.91 (m, 1H), 3.85-3.83 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.55-3.53 (m, 1H), 3.34-3.32 (m, 1H), 3.14-3.12 (m, 2H), 3.04-2.92 (m, 2H), 2.84-2.82 (m, 2H), 2.59-2.57 (m, 1H), 2.46-2.44 (m, 2H), 2.38-2.36 (m, 1H), 2.06-2.01 (m, 2H), 1.90-1.86 (m, 2H), 1.68-1.66 (m, 1H), 1.43-1.39 (m, 1H), 0.82 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
실시예 162a: 5-브로모-1-메틸-3-(피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 162a
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 피라진-2-아민(500 mg, 5.3 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸 피리딘-2(1H)-온(1335 mg, 5.3 mmol), Pd2(dba)3(229 mg, 0.25 mmol), 잔트포스(289 mg, 0.50 mmol), 세슘 카보네이트(3.26 g, 10 mmol) 및 1,4-다이옥산(50 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 162a(420 mg, 30%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 281.0.
실시예 162b: (4-(1-메틸-6-옥소-5-(피라진-2-일아미노)-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 162b
Figure pat00222
환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 162a(170 mg, 0.61 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(280 mg, 0.72 mmol), Pd(dppf)Cl2(30 mg, 0.037 mmol), K3PO4·삼수화물(270 mg, 1.2 mmol), 나트륨 아세테이트(180 mg, 1.2 mmol), 아세토나이트릴(20 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 162b(130 mg, 40%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 540.3
실시예 162: 2-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-5-(피라진-2-일아미노)-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-2H-피라지노[1,2-a]인돌-1-온 162
i-프로판올/THF(1:1, 4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 162b(110 mg, 0.20 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(84 mg, 2.0 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 물 및 에틸 아세테이트로 희석하였다. 수 상을 분리하고, 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 162(85 mg, 85%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 498.3. 1H NMR (500 MHz, CHCl3) δ 8.73 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.54 (d, J = 5 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.15-8.14 (m, 2H), 8.01 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.37(d, J = 5 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 4.66-4.65 (m, 1H), 4.52-4.51 (m, 1H), 4.32-4.31 (m, 1H), 4.18-4.17 (m, 1H), 4.14-4.12 (m, 1H), 3.90-3.88 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.62-2.57 (m, 4H), 1.92-1.88 (m, 3H), 1.80-1.79 (m, 2H).
실시예 163a: 1-메틸-5-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일보론산 163a
자석 교반기를 장착한 100 mL 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 125i(1.0 g, 2.64 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(2.0 g, 7.92 mmol), PdCl2(dppf)(190 mg, 0.26 mmol), 칼륨 아세테이트(776 mg, 7.92 mmol) 및 다이옥산(40 mL)을 넣었다. 이 혼합물 내로 아르곤을 30분 동안 버블링한 후, 환류 응축기를 이 플라스크에 부착하고, 혼합물 아르곤 분위기 하에 100℃에서 6시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 0.3% NH4HCO3/물/CH3CN으로 용리하는 역상 콤비-플래시로 정제하여, 화합물 163a(300 mg, 33%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 346.
실시예 163b: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(1-메틸-5-{[5-(옥세탄-3-일)-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노}-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-카브알데하이드 163b
Figure pat00223
환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 (4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드) 108a(280 mg, 0.81 mmol), 화합물 163a(440 mg, 0.96 mmol), Pd(dppf)Cl2(40 mg, 0.049 mmol), K3PO4(360 mg, 1.6 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(240 mg, 1.6 mmol), 물(6 방울) 및 아세토나이트릴(20 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 163b(150 mg, 31%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 609.3
실시예 163: 2-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 163
메탄올(5 mL) 중의 화합물 163b(80 mg, 0.12 mmol) 및 NaBH4(15 mg, 0.36 mmol)의 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(3 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 163(30 mg, 50%)을 진적색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 611.4. 1H NMR (500 MHz, CHCl3) δ 8.48 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 2, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.34 (d, J = 5 Hz, 1H), 6.8 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.03 (t, J = 6, 1H), 4.77-4.73 (m, 3H), 4.68 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.51-4.50 (m, 1H), 4.34-4.33 (m, 1H), 4.23-4.16 (m, 2H), 4.09 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.86-3.85 (m, 1H), 3.79-3.74 (m, 1H), 3.71 (s, 3H ), 3.56 (d, J = 4, 2H), 2.83 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.58 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 2.52 (s, 2H ), 1.28 (s, 6H ).
실시예 164a: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[5-({5-[(2S)-2-에틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-카브알데하이드 164a
Figure pat00224
환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 (4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드) 108a(280 mg, 0.8 mmol), (S)-3-(5-(2-에틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라-메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 161f(500 mg, 0.96 mmol), Pd(dppf)Cl2(33 mg, 0.040 mmol), K3PO4(360 mg, 1.6 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(240 mg, 1.6 mmol) 및 아세토나이트릴(100 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 164a(320 mg, 60%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 677.3.
실시예 164: 2-{5-[5-((S)-2-에틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 164
메탄올(30 mL) 중의 화합물 164a(200 mg, 0.30 mmol) 및 NaBH4(36 mg, 0.90 mmol)의 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(3 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 164(140 mg, 72%)를 연녹색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 679.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.63 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.37 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.82 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.71-4.61 (m, 5H), 4.52-4.50 (m, 1H), 4.34-4.32 (m, 1H), 4.16 (d, J = 4.5 Hz, 2H), 3.87-3.85 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.55-3.50 (m, 1H), 3.33-3.30 (m, 1H), 3.12 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.58-2.55 (m, 3H), 2.52 (s, 2H), 2.44 (d, J = 3.5 Hz, 2H), 2.35 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 1.68-1.64 (m, 1H), 1.42-1.37 (m, 1H), 1.28 (s, 6H), 0.82 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
실시예 165a: (S)-4-(5-(5-(2-에틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 165a
Figure pat00225
환류 응축기를 장착한 50 mL 플라스크에 4-클로로-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 103b(164 mg, 0.50 mmol), (S)-3-(5-(2-에틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 161f(347 mg, 0.70 mmol), 칼륨 아세테이트(137 mg, 1.4 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(29 mg, 0.035 mmol), 물(5 방울) 및 아세토나이트릴(20 mL)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 아르곤 분위기 하에 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(50 mL) 및 물(50 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3×20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 어두운색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 25/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 165a(151 mg, 46%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 661
실시예 165: 2-{5-[5-((S)-2-에틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-6,7,8,9-테트라하이드로-2H-피라지노[1,2-a]인돌-1-온 165
실온에서 메탄올(10 mL) 중의 화합물 165a(100 mg, 0.15 mmol)의 용액에 NaBH4(34 mg, 0.90 mmol)를 가했다. 이 반응물을 1시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 이어서, 이 혼합물을 물(8 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 165(35 mg, 35%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 663. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6)　 δ 8.64 (s, 1H), 8.57 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.82 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.51-7.48 (m, 2H), 7.35 (dd, J = 2.0 Hz, 9.0 Hz, 1H), 7.27-7.23 (m, 2H), 6.83-6.81 (m, 2H), 4.97 (bs, 1H), 4.59-4.55 (m, 2H), 4.49-4.32 (m, 4H), 3.61 (s, 3H), 3.51 -3.47 (m, 1H), 3.42-3.37 (m, 1H), 3.17-3.16 (m, 1H), 3.01-2.98 (m, 1H), 2.76-2.74 (m, 2H), 2.63-2.61 (m, 3H), 2.55-2.54 (m, 1H), 2.19-2.16 (m, 1H), 2.12-2.07 (m, 1H), 1.90-1.85 (m, 2H), 1.77-1.66 (m, 3H), 1.27-1.25 (m, 1H), 0.79 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
실시예 166a: 2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드 166a
Figure pat00226
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1-메틸-3-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a] 피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 163a(354 mg, 0.83 mmol), 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(289 mg, 0.83 mmol), PdCl2(dppf)(68 mg, 0.08 mmol), K3PO4(352 mg, 1.66 mmol), 나트륨 아세테이트(136 mg, 1.66 mmol), 아세토나이트릴(50 mL) 및 물(3 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 166a(305 mg, 60%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+:613.6.
실시예 166: 10-플루오로-2-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-2H-피라지노[1,2-a]인돌-1-온 166
0℃에서 메탄올(20 mL) 중의 화합물 166a(250 mg, 0.41 mmol)의 현탁액에 나트륨 보로하이드라이드(47 mg, 1.23 mmol)를 넣었다. 이 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물(2 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 166(20 mg, 6.6%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 615.6. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.75 (s, 1H), 4.95 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.76-4.74 (m, 2H), 4.69-4.65-4.67 (m, 3H), 4.46-4.44 (m, 1H), 4.35-4.33 (m, 1H), 4.10-4.08 (m, 4H), 3.38-3.35 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.58-3.56 (m, 2H), 2.842.82 (m, 2H), 2.58-2.53 (m, 4H), 1.89-1.84 (m, 2H), 1.77-1.76 (m, 2H).
실시예 167a: 3-클로로바이사이클로[2.2.1]hept-2-엔-2-카브알데하이드 167a
Figure pat00227
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 3구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 무수 1,2-다이클로로에탄(24 mL) 및 무수 DMF(9.12 g, 125 mmol)를 넣었다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 반응 온도를 0℃ 내지 10℃로 유지하면서 인 옥시클로라이드(15.3 g, 100 mmol)를 가했다. 냉각 욕을 제거하고, 이 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 1,2-다이클로로에탄(10 mL) 중의 바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-온(5.50 g, 50.0 mmol)의 용액을 가하고, 생성 혼합물을 80℃에서 밤새도록 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 물(200 mL) 중의 인산 일수소 칼륨(43.5 g, 250 mmol)의 용액에 붓고, 15분 동안 교반하였다. 유기 층을 분리하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메틸렌클로라이드(300 mL)에 용해시키고, 물(2 x 50 mL)로 세척하였다. 메틸렌클로라이드 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:100)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 167a(2.2 g, 28%)를 황색 오일로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 157. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.80 (s, 1H), 3.42-3.41 (m, 1H), 3.08-3.07 (m, 1H), 1.95-1.77 (m, 2H), 1.68-1.66 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 3H).
실시예 167b: (E)-에틸 3-(3-클로로바이사이클로[2.2.1]hept-2-en-2-일)아크릴레이트 167b
Figure pat00228
메틸렌클로라이드(250 mL) 중의 화합물 167a(9.0 g, 57.7 mmol)의 용액에 에틸 2-(트라이페닐-λ5-포스포아닐리덴)아세테이트(20 g, 57.7 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:100)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 167b(6.0 g, 46%)를 황색 오일로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 227.
실시예 167c: 에틸 3-아자트라이사이클로[5.2.1.02,6]데카-2(6),4-다이엔e-4-카복실레이트 167c
Figure pat00229
DMSO(30 mL) 중의 화합물 167b(5.0 g, 22 mmol)의 용액에 NaN3(2.2 g, 33 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 105℃에서 6시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 이 반응 혼합물에 물(13 mL)을 가하고, 생성 혼합물을 메틸렌클로라이드(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 상을 Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 증발 건조하였다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 167c(2.7 g, 60%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 206. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 11.51 (s, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.16 (q, J = 6.5 Hz, 2H), 3.26-3.24 (m, 2H), 1.82-1.79 (m, 2H), 1.74-1.72 (m, 2H), 1.24 (t, J = 6.5 Hz, 3H), 0.91-0.89 (m, 2H).
실시예 167d: 에틸 3-(시아노메틸)-3-아자트라이사이클로[5.2.1.02,6]데카-2(6),4-다이엔e-4-카복실레이트 167d
Figure pat00230
무수 DMF(30 mL) 중의 화합물 167c(3.0 g, 14.6 mmol)의 용액에 NaH(880 mg, 22 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 2-브로모아세토나이트릴(3.5 g, 29.3 mmol)을 가하고, 생성 혼합물을 65℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온에서 밤새도록 교반하였다. 반응 후, 물(30 mL)을 가하고, 생성 혼합물을 에틸 아세테이트(200 mL×3)로 추출하였다. 합친 유기 상을 감압 하에 증발 건조하였다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 167d(2.6 g, 72%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 245.
실시예 167e: 에틸 3-(2-아미노에틸)-3-아자트라이사이클로[5.2.1.02,6]데카-2(6),4-다이엔e-4-카복실레이트 167e
Figure pat00231
메탄올(60 mL) 중의 화합물 167d(4.0 g, 16 mmol) 및 라니(Raney) Ni(400 mg)의 현탁액을 파 장치 내에서 50 psi로 밤새도록 수소화하였다. 이 혼합물을 셀라이트(등록상표)의 패드를 통해 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 167e(2.0 g, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 249.
실시예 167f: 3,6-다이아자테트라사이클로[9.2.1.02,10.03,8]테트라데카-2(10),8-다이엔-7-온 167f
Figure pat00232
에탄올(40 mL) 중의 화합물 167e(1.8 g, 7.2 mmol)의 용액에 나트륨 메톡사이드(2.5 g, 36 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 65℃에서 12시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하였다. 용매를 감압 하에 증발 건조하였다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 라세미체(800 mg, 53%)를 갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 키랄 분해하여 화합물 167f 및 170a를 수득하였다. MS: [M+H]+ 203.
실시예 167g: 4-클로로-2-[(1S,11R)-7-옥소-3,6-다이아자테트라사이클로[9.2.1.02,10.03,8]테트라데카-2(10),8-다이엔-6-일]피리딘-3-카브알데하이드 167g
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 1,4-다이옥산(30 mL), 화합물 167f(400 mg, 2.0 mmol), 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드(1.30 g, 6.0 mmol) 및 칼륨 아세테이트(390 mg, 4.0 mmol)를 넣었다. 생성 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 잔트포스(110 mg, 0.20 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(180 mg, 0.20 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 80℃에서 10시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(50 mL)와 물(30 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(20 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(2:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 167g(391 mg, 57%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 342.2
실시예 167h: 4-[1-메틸-5-({5-메틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-[(1S,11R)-7-옥소-3,6-다이아자테트라사이클로[9.2.1.02,10.03,8]테트라데카-2(10),8-다이엔-6-일]피리딘-3-카브알데하이드 167h
Figure pat00233
환류 응축기를 장착한 100 mL 환저 플라스크에 화합물 167g(150 mg, 0.44 mmol), 1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라-메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 135a(169 mg, 0.44 mmol), 나트륨 아세테이트(72 mg, 0.88 mmol), K3PO4(234 mg, 0.88 mmol), PdCl2(dppf)(36 mg, 0.044 mmol), 아세토나이트릴(20 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 N2 하에 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 167h(132 mg, 53%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 565.3
실시예 167: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-6,9-메타노피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 167
메탄올(20 mL) 중의 화합물 167h(120 mg, 0.21 mmol)의 용액에 NaBH4(24 mg, 0.63 mmol)를 넣었다. 이 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 물로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 167(98 mg, 83%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 567.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.05 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.32 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.98 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.48-4.30 (m, 3H), 4.27-4.22 (m, 2H), 3.92-3.91 (m, 2H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.52-3.33 (m, 3H), 3.29 (ps, 1H), 2.79-2.77 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.87-1.76 (m, 3H), 1.60-1.59 (m, 1H), 1.09-0.91 (m, 2H).
실시예 168a: 3-(6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 168a
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 환저 플라스크에 5-브로모-3-(6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 129c(1.3 g, 4.0 mmol), 비스(피나콜레이토)이붕소(2.03 g, 8.0 mmol), PdCl2(dppf)(439 mg, 0.60 mmol), 칼륨 아세테이트(784 mg, 8.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(60 mL)의 혼합물을 넣었다. 이 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 15시간 동안 가열 환류시켰다. 반응이 완료된 후, 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 에틸 아세테이트(100 mL)로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 증발시키고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 168a(446 mg, 30%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 373.
실시예 168b: 4-(1-메틸-5-(6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일)니코틴알데하이드 168b
Figure pat00234
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(200 mg, 0.58 mmol), 화합물 168a(433 mg, 1.16 mmol), PdCl2(dppf)(48 mg, 0.052 mmol), K3PO4(246 mg, 1.16 mmol), 나트륨 아세테이트(96 mg, 1.16 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 168b(250 mg, 78%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 554.6.
실시예 168: 2-[5-(6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 168
0℃에서 메탄올(10 mL) 중의 화합물 168b(200 mg, 0.36 mmol)의 현탁액에 나트륨 보로하이드라이드(42 mg, 1.1 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 물(2 mL)로 켄칭하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 168(53 mg, 21%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 556.6. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.33 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.71 (s, 1H), 5.04-5.01 (m, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.64-4.62 (m, 1H), 4.49 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.32-4.28 (m, 1H), 4.14 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 4.09-4.08 (m, 4H), 3.87-3.83 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.56 (d, J = 2.8 Hz, 2H), 2.50 (s, 2H), 1.26 (s, 6H).
실시예 169a: 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-5-아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7)-다이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 169a
Figure pat00235
환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드 103a(1276 mg, 5.80 mmol), 8-티아-5-아자트라이사이클로[7.4.0.02,7}]트라이데카-1(9),2(7)-다이엔-6-온 105e(600 mg, 2.90 mmol), CuI(551 mg, 2.90 mmol), K2CO3(800 mg, 5.80 mmol), 4,7-다이메톡시-1,10-페난트롤린(696 mg, 2.90 mmol) 및 다이옥산(20 mL)을 넣었다. 생성 용액을 통해 10분 동안 질소를 버블링한 후, 이 혼합물을 95℃에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 잔사에 물(20 mL)을 가했다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(3×20 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 169a(171 mg, 17%)를 수득하였다. LCMS-ESI: [M+H]+ 347
실시예 169b: 4-[1-메틸-5-({5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-5-아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7)-다이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 169b
환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 169a(150 mg, 0.43 mmol), 3-(5-(2-에틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(200 mg, 0.43 mmol), Pd2(dba)3(37 mg, 0.040 mmol), 트라이사이클로헥실포스핀(120 mg, 0.43 mmol), Cs2CO3(281 mg, 0.86 mmol), 다이옥산(10 mL) 및 물(0.1 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 110℃로 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(1:3)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 169b(45 mg, 16%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS-ESI: [M+H]+ 652
실시예 169: 2-{3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-(4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-3,4,5,6,7,8-헥사하이드로-2H-벤조[4,5]티에노[2,3-c]피리딘-1-온 169
화합물 169b(45 mg, 0.070 mmol), NaBH4(8 mg, 0.21) 및 메탄올(5 mL)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물(5 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 169(14 mg, 30%)를 수득하였다. LCMS-ESI: [M+H]+ 654. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.62 (s, 1H), 8.50 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.86 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.39-7.34 (m, 2H), 7.25-7.22 (m, 1H), 4.95-4.93 (m, 1H), 4.57-4.55 (m, 2H), 4.47-4.41 (m, 4H), 4.19-4.17 (m, 1H), 3.82-3.80 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.45-3.43 (m, 1H), 3.32-3.30 (m, 1H), 3.09-3.07 (m, 4H), 3.01-2.90 (m, 1H), 2.89-2.88 (m, 1H), 2.80-2.79 (m, 2H), 2.51-2.50 (m, 1H), 2.40-2.38 (m, 4H), 1.83-1.80 (m, 4H).
실시예 170b: 4-클로로-2-[(1R,11S)-7-옥소-3,6-다이아자테트라사이클로[9.2.1.02,10.03,8]테트라데카-2(10),8-다이엔-6-일]피리딘-3-카브알데하이드 170b
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(30 mL), (1S,11R)-3,6-다이아자테트라사이클로[9.2.1.02,10.03,8]테트라데카-2(10),8-다이엔-7-온 170a(400 mg, 2.0 mmol), 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드 103a(1.30 g, 6.0 mmol) 및 칼륨 아세테이트(390 mg, 4.0 mmol)를 넣었다. 생성 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 잔트포스(110 mg, 0.20 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(180 mg, 0.20 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 80℃로 10시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(50 mL)와 물(30 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(20 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(2:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 170b(405 mg, 59%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 342.2
실시예 170c: 4-[1-메틸-5-({5-메틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-[(1R,11S)-7-옥소-3,6-다이아자테트라사이클로[9.2.1.02,10.03,8]테트라데카-2(10),8-다이엔-6-일]피리딘-3-카브알데하이드 170c
Figure pat00236
환류 응축기를 장착한 100 mL 환저 플라스크에 화합물 170b(150 mg, 0.44 mmol), 1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라-메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 135a(169 mg, 0.44 mmol), 나트륨 아세테이트(72 mg, 0.88 mmol), K3PO4(234 mg, 0.88 mmol), Pd(dppf)Cl2(36 mg, 0.044 mmol), 아세토나이트릴(20 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 170c(146 mg, 52%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 565.3
실시예 170: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-6,9-메타노피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 170
메탄올(20 mL) 중의 화합물 170c(122 mg, 0.22 mmol)의 용액에 NaBH4(24 mg, 0.64 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 표제 화합물(98 mg, 75%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 567.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.05 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.32 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.53 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.98 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.48-4.30 (m, 3H), 4.27-4.22 (m, 2H), 3.92-3.91 (m, 2H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.49-3.47 (m, 3H), 3.30-3.28 (m, 1H), 2.79-2.77 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.87-1.76 (m, 3H), 1.61-1.59 (m, 1H), 1.09-0.88 (m, 2H).
실시예 171a: 4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-[(1S,11R)-7-옥소-3,6-다이아자테트라사이클로[9.2.1.02,10.03,8]테트라데카-2(10),8-다이엔-6-일]피리딘-3-카브알데하이드 171a
Figure pat00237
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 아세토나이트릴(30 mL), 4-클로로-2-[(1S,11R)-7-옥소-3,6-다이아자테트라사이클로[9.2.1.02,10.03,8]테트라데카-2(10),8-다이엔-6-일]피리딘-3-카브알데하이드 167g(170 mg, 0.50 mmol), (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 130f(336 mg, 0.70 mmol), 물(3 mL) 및 칼륨 아세테이트(147 mg, 1.5 mmol)를 넣었다. 이 현탁액을 통해 30분 동안 아르곤을 버블링한 후, 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(408 mg, 0.05 mmol)을 가했다. 이 시스템을 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클로 처리하고, 80℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 100 ml)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 171a(95 mg, 29%) 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 661.3
실시예 171: (S)-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-6,9-메타노피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 171
실온에서 메탄올(10 mL) 중의 화합물 171a(90 mg, 0.136 mmol)의 용액에 NaBH4(26 mg, 0.7 mmol)를 가했다. 이 반응물을 1시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 이를 물(30 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 30 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사 고체를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 171(35 mg, 31.5%)을 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 663.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6)　 δ 8.62 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.83 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.38 (dd, J = 2.5, 9.0 Hz 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 4.97 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.58-4.54 (m, 2H), 4.50-4.37 (m, 4H), 4.30-4.24 (m, 2H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.69-3.67 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.47 (s, 1H), 3.42-3.37 (m, 1H), 3.30 (s, 2H), 3.10-3.07 (m, 1H), 2.95-2.92 (m, 1H), 2.36-2.29 (m, 3H), 2.21-2.16 (m, 1H), 1.88-1.754 (m, 3H), 1.60-1.58 (m, 1H), 1.08-1.05 (m, 1H), 0.98-0.96 (m, 1H), 0.93 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 172a: 3-(1,2,4-트라이아진-3-일아미노)-5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 172a
Figure pat00238
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 500 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(100 mL), 1,2,4-트라이아진-3-아민(1.5 g, 15.6 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(4.2 g, 15.6 mmol), Pd2(dba)3(458 mg, 1.56 mmol), 잔트포스(1.8 g, 3.12 mmol) 및 세슘 카보네이트(10 g, 31.2 mmol)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 90℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응물을 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 생성 잔사를 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여, 화합물 172a(1.76 g, 40%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 282.
실시예 172b: (4-(5-(1,2,4-트라이아진-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 172b
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 172a(200 mg, 0.71 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(272 mg, 0.71 mmol), Pd(dppf)Cl2(58 mg, 0.071 mmol), 나트륨 아세테이트(193 mg, 1.42 mmol), K3PO4(321 mg, 1.42 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응물을 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 생성 잔사를 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여, 화합물 172b(380 mg, 99%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 541.2
실시예 172: 2-(4-(5-(1,2,4-트라이아진-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 172
i-프로판올/THF(1:1, 5 mL) 및 물(0.5 mL) 중의 화합물 172b(350 mg, 0.65 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(273 mg, 6.5 mmol)의 혼합물을 36℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 세척하여, 화합물 172(90 mg, 28%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 499.2. 1H NMR (500 MHz, CDCl3)　 δ 8.77 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.72 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.34 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.10 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.65-4.51 (m, 2H), 4.31-4.27 (m, 1H), 4.16-4.08 (m, 2H), 3.90-3.87 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.62-2.56 (m, 4H), 1.92-1.87 (m, 2H), 1.79-1.78 (m, 2H).
실시예 173a: 5-브로모-3-(2,6-다이메틸피리미딘-4-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 173a
Figure pat00239
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(150 mL), 2,6-다이메틸피리미딘-4-아민(2.5 g, 20.3 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(5.4 g, 20.3 mmol), Pd2(dba)3(1.86mg, 2.03 mmol), 잔트포스(2.3 g, 4.06 mmol) 및 세슘 카보네이트(13.2 g, 40.6 mmol)를 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 90℃로 2.5시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 생성 잔사를 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여, 화합물 173a(4.4 g, 40%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 309.0.
실시예 173b: 3-(2,6-다이메틸피리미딘-4-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 173b
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 173a(1.5 g, 4.9 mmol), Pin2B2(6.2 g, 24.5 mmol), Pd2(dba)3(449 mg, 0.49 mmol), 잔트포스(467 mg, 0.98 mmol), 칼륨 아세테이트(1.4 g, 14.7 mmol) 및 다이옥산(60 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 가열하였다. 이 반응물을 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 생성 잔사를 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여, 화합물 173b(1.2 g, 72%)를 연회색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 357.2.
실시예 173c: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{5-[(2,6-다이메틸피리미딘-4-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-카브알데하이드 173c
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 환저 플라스크에 화합물 173b(250 mg, 0.70 mmol), 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(240 mg, 0.70 mmol), Pd(dppf)Cl2(57 mg, 0.071 mmol), 나트륨 아세테이트(19 mg, 1.4 mmol), K3PO4(316 mg, 1.4 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(15 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 여과하고, 여액을 진공 중에 증발시켰다. 생성 잔사를 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여, 화합물 173c(300 mg, 80%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 538.3.
실시예 173: 2-[5-(2,6-다이메틸-피리미딘-4-일아미노)-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 173
0℃에서, 메탄올(5 mL) 중의 화합물 173c(290 mg, 0.54 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(62 mg, 1.62 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 물(1 mL)로 켄칭하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 173(50 mg, 17%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 540.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3)　 δ 8.90 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.35 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.45 (s, 1H), 5.16-5.13 (m, 1H), 4.67-4.52 (m, 2H), 4.33-4.29 (m, 1H), 4.16 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 3.90-3.86 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.58-2.56 (m, overlap, 5H), 2.51 (s , 2H), 2.40 (s, 3H), 2.02 (s, 6H).
실시예 174a: 4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일} 아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-[(1R,11S)-7-옥소-3,6-다이아자테트라사이클로[9.2.1.02,10.03,8]테트라데카-2(10),8-다이엔-6-일]피리딘-3-카브알데하이드 174a
Figure pat00240
환저 플라스크에 4-클로로-2-[(1R,11S)-7-옥소-3,6-다이아자테트라사이클로[9.2.1.02,10.03,8]테트라데카-2(10),8-다이엔-6-일]피리딘-3-카브알데하이드 170b(200 mg, 0.59 mmol), 1-메틸-3-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1,2-다이하이드로피리딘-2-온 191j(400 mg, 0.88 mmol), PdCl2(dppf)(50 mg, 0.06 mmol), K3PO4 3물(300 mg, 1.20 mmol), 나트륨 아세테이트(100 mg, 1.20 mmol), 아세토나이트릴(15 mL) 및 물(1.5 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 174a(170 mg, 44%)를 적색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 661.3
실시예 174: (1R,11S)-6-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-2-일]-3,6-다이아자테트라사이클로[9.2.1.02,10.03,8]테트라데카-2(10),8-다이엔-7-온 174
화합물 174a(150 mg, 0.23 mmol), NaBH4(34 mg, 0.90) 및 메탄올(10 mL)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(30 ml)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 174(42 mg, 28%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 663.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.85-7.84 (m, 2H), 7.36 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 3.5, 11.0 Hz, 1H), 6.82-6.80 (m, 2H), 5.16-5.06 (m, 1H), 4.72-4.61 (m, 5H), 4.08-4.05 (m, 1H), 4.32-4.21 (m, 3H), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.54-3.50 (m, 2H), 3.38-3.37 (m, 2H), 3.08-3.06 (m, 2H), 2.57-2.54 (m, 1H), 2.48-2.45 (m, 2H), 2.21-2.17 (m, 1H), 1.93-1.91 (m, 3H), 1.66-1.64 (m, 1H), 1.14-1.08 (m, 2H), 0.98 (d, J = 8.0 Hz, 3H).
실시예 175a: 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 175a
Figure pat00241
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a(150 mg, 0.43 mmol), 3-(5-(2-에틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 161f(215 mg, 0.43 mmol), PdCl2(dppf)(33 mg, 0.040 mmol), K3PO4·삼수화물(202 mg, 0.86 mmol), 나트륨 아세테이트(71 mg, 0.86 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(2 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(1:3)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 175a(108 mg, 37%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 679
실시예 175: 3-{5-[5-((S)-2-에틸-4-옥세탄-3-일-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일}-6,7,8,9-테트라하이드로-3H-벤조[4,5]티에노[2,3-d]피리다진-4-온 175
화합물 175a(200 mg, 0.16 mmol), NaBH4(18 mg, 0.48) 및 메탄올(8 mL)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(10 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 175(55 mg, 50%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 681. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8.61 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.57-8.56 (m, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.83 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.54-7.53 (m, 1H), 7.47 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.35-7.32 (m, 1H), 7.24-7.22 (m, 1H), 4.85-4.83 (m, 1H), 4.59-4.55 (m, 2H), 4.47-4.44 (m, 1H), 4.40-4.36 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.51-3.49 (m, 1H), 3.40-3.38 (m, 1H), 3.17-3.14 (m, 1H), 3.00-2.95 (m, 3H), 2.87-2.85 (m, 2H), 2.66-2.60 (m, 1H), 2.55-2.53 (m, 1H), 2.18-2.15 (m, 1H), 2.10-2.06 (m, 1H), 1.89-1.86 (m, 4H), 1.68-1.64 (m, 1H), 1.28-1.25 (m, 2H), 0.79 (t, J = 9.5 Hz, 3H).
실시예 176a: (S)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 176a
Figure pat00242
환저 플라스크에 4-클로로-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 121a(180 mg, 0.55 mmol), (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 191j(397 mg, 0.82 mmol), PdCl2(dppf)(45 mg, 0.06 mmol), K3PO4·삼수화물(286 mg, 1.10 mmol), 나트륨 아세테이트(90 mg, 1.10 mmol), 아세토나이트릴(15 mL) 및 물(1.5 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 176a(228 mg, 64%)를 적색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 647.3
실시예 176: (S)-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 176
화합물 176a(200 mg, 0.31 mmol), NaBH4(47 mg, 1.20) 및 메탄올(10 mL)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 물(10mL)로 켄칭하과, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 176(42 mg, 28%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 649.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.84 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.50-7.48 (m, 2H), 7.39-7.36 (m, 1H), 7.26-7.24 (m, 2H), 6.83-6.80 (m, 2H), 4.57-4.54 (m, 2H), 4.48-4.40 (m, 3H), 4.35-4.33 (m, 1H), 3.69-3.67 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.41-3.38 (m, 2H), 3.11-3.08 (m, 1H), 2.97-2.93 (m, 1H), 2.76-2.74 (m, 2H), 2.62-2.60 (m, 2H), 2.52-2.51 (m, 1H), 2.35-2.32 (m, 2H), 2.19-2.17 (m, 1H), 1.90-1.87 (m, 2H), 1.77-1.75 (m, 2H), 0.94 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 177a: (4-(5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 177a
Figure pat00243
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-3-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 208c(300 mg, 0.85 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(1.21 g, 3.16 mmol), PdCl2(dppf)(35 mg, 0.043 mmol), K3PO4(361 mg, 1.70 mmol), 나트륨 아세테이트(140 mg, 1.70 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 177a(365 mg, 60%)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 611
실시예 177: 2-(4-(5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 177
프로판-2-올(4 mL), 테트라하이드로퓨란(4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 177a(300 mg, 0.49 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(35 mg, 1.47 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이를 증발시키고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 177(79 mg, 28%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 569. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.33 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.69 (s, 1H), 4.99-4.97 (m, 1H), 4.61-4.60 (m, 1H), 4.48-4.46 (m, 1H), 4.33-4.31 (m, 1H), 4.14-4.06 (m, 4H), 3.87-3.85 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.62 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 2.91 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 2.63-2.55 (m, 6H), 1.91-1.87 (m, 2H), 1.79-1.78 (m, 2H), 1.17 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
실시예 178a: 5-브로모-1-메틸-3-(피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 178a
Figure pat00244
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(60 mL), 5-브로모-2-나이트로피리딘(8.0 g, 31.8 mmol), 피리딘-2-아민(1.0 g, 10.6 mmol) 및 세슘 카보네이트(7.0 g, 21.2 mmol)를 넣었다. 생성 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 잔트포스(616 mg, 1.0 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(973 mg, 1.0 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클로 처리하고, 100℃로 12시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(100 mL)와 물(100 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(3 X 150 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 178a(1.5 g, 51%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 280
실시예 178b: 1-메틸-3-(피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 178b
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 178a(1.06 g, 3.8 mmol), Pin2B2(4.8 g, 19.0 mmol), Pd2(dba)3(348 mg, 0.38 mmol), 잔트포스(350 mg, 0.76 mmol), 칼륨 아세테이트(1.12 g, 11.40 mmol) 및 다이옥산(30 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 60℃에서 6시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(3:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 178b(1.2 g, 96%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 328.2
실시예 178c: 4-{1-메틸-6-옥소-5-[(피리딘-2-일)아미노]피리딘-3-일}-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 178c
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 178b(131 mg, 0.40 mmol), 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a(138 mg, 0.40 mmol), Pd(dppf)Cl2(33 mg, 0.040 mmol), K3PO4(170 mg, 0.80 mmol), 나트륨 아세테이트(66 mg, 0.80 mmol), 물(6 방울) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 2시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 178c(180 mg, 88%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 511.2
실시예 178: 3-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-5-(피리딘-2-일아미노)-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-6,7,8,9-테트라하이드로-3H-벤조[4,5]티에노[2,3-d]피리다진-4-온 178
0℃에서 메탄올(6 mL) 중의 화합물 178c(179 mg, 0.35 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(39 mg, 1.05 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 물(1.0 mL)로 켄칭하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 178(100 mg, 56%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 513.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.81 (s, 1H), 8.68 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.27 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.94 (bs, 1H), 7.76 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.58-7.56 (m, 2H), 6.85-6.80 (m, 2H), 4.47-4.45 (m, 2H), 4.38-4.36 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.01-2.99 (m, 2H), 2.89-2.87 (m, 2H), 2.02-1.99 (m, 4H).
실시예 179a: 4-(1-메틸-5-(2-메틸피리미딘-4-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일)니코틴알데하이드 179a
Figure pat00245
환류 응축기를 장착한 50 mL 환저 플라스크에 1-메틸-3-(2-메틸피리미딘-4-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 213b(510 mg, 1.5 mmol), 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(343 mg, 1.0 mmol), K3PO4(424 mg, 2.0 mmol), 나트륨 아세테이트(272 mg, 2.0 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(40 mg, 0.044 mmol), 아세토나이트릴(20 mL) 및 물(0.5 mL)을 가했다. 이 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 N2 보호 하에 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(30 mL) 및 물(30 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3×20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 어두운색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 179a(300 mg, 57%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 524
실시예 179: 2-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-(2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 179
실온에서 메탄올/다이클로로메탄(10/10 mL) 중의 화합물 179a(262 mg, 0.50 mmol)의 용액에 NaBH4(57 mg, 1.5 mmol)를 가했다. 이 반응물을 1시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 이어서, 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물(5 mL) 및 다이클로로메탄(20 mL)으로 희석하였다. 수 상을 분리하고, 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사 고체를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 179(180 mg, 69%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 526. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.03 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.60 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.18-5.16 (m, 1H), 4.70-4.67 (m, 1H), 4.55-4.53 (m, 1H), 4.33-4.31 (m, 1H), 4.18-4.16 (m, 2H), 3.91-3.90 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 2.58 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 2.52 (s, 2H), 1.28 (s, 6H).
실시예 180a: 5-브로모-1-메틸-3-(6-메틸피리미딘-4-일아미노)피리딘-2(1H)-온 180a
Figure pat00246
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 6-메틸피리미딘-4-아민(800 mg, 2.6 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(694 mg, 2.6 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(238 mg, 0.26 mmol), 잔트포스(300 mg, 0.52 mmol), Cs2CO3(1.7 g, 5.2 mmol) 및 1,4-다이옥산(30 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 90℃로 2.5시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 180a(800 mg, 36%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 295.1
실시예 180b: 1-메틸-3-(6-메틸피리미딘-4-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 180b
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 180a(1.0 g, 3.4 mmol), Pin2B2(4.3 g, 17 mmol), Pd2(dba)3(312 mg, 0.34 mmol), 잔트포스(324 mg, 0.68 mmol), 칼륨 아세테이트(666 mg, 6.8 mmol) 및 다이옥산(40 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 65℃에서 14시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 로 세척하고 석유 에터/에틸 아세테이트(3:1)(80 mL) 화합물 180b(600 mg, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 343.2.
실시예 180c: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(6-메틸피리미딘-4-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-카브알데하이드 180c
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 180b(239 mg, 0.70 mmol), 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(239mg 0.70 mmol), Pd(dppf)Cl2(57 mg , 0.070 mmol), 나트륨 아세테이트(115 mg, 1.4 mmol), K3PO4(320 mg, 1.4 mmol), 물(5 mL) 및 아세토나이트릴(15 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 180c(170 mg, 47%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 524.2.
실시예 180: 2-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-(6-메틸-피리미딘-4-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 180
0℃에서, 화합물 180c의 용액에 물(1 mL)을 가했다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 180(47 mg, 32%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 526.2. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.82 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.51 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.02-8.00 (m, 2H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 5.13 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.67-4.52 (m, 2H), 4.29-4.15 (m, 3H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.57 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 2.51 (s, 2H), 2.43 (s, 3H), 1.28 (s, 6H).
실시예 181a: 4-[1-메틸-5-({5-메틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9), 2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 181a
Figure pat00247
환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a(210 mg, 0.60 mmol), 1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라-메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 135a(346 mg, 0.90 mmol), Pd(dppf)Cl2(30 mg, 0.030 mmol), K3PO4(270 mg, 1.2 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(180 mg, 1.2 mmol), 물(6 방울) 및 아세토나이트릴(40 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃로 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 181a(300 mg, 88%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 569.3.
실시예 181: 3-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-6,7,8,9-테트라하이드로-3H-벤조[4,5]티에노[2,3-d]피리다진-4-온 181
메탄올(20 mL) 중의 화합물 181a(300 mg, 0.50 mmol) 및 NaBH4(60 mg, 1.5 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(3 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 181(100 mg, 35%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 571.2. 1H NMR (500 MHz, CHCl3) δ 8.64 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.00 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.45-4.43 (m, 2H), 4.32 (bs, 1H), 4.11-4.09 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.63 (s, 2H), 2.99-2.97 (m, 2H), 2.93-2.91 (m, 2H), 2.88-2.86 (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.00-1.98 (m, 4H).
실시예 182a: 4-{1-메틸-6-옥소-5-[(피리미딘-4-일)아미노]-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 182a
Figure pat00248
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a(345 mg, 1.0 mmol), 1-메틸-3-(피리미딘-4-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 143a(328 mg, 1.0 mmol), Pd(dppf)Cl2(82 mg, 0.10 mmol), 나트륨 아세테이트(162 mg, 2.0 mmol), K3PO4(424 mg, 2.0 mmol) 및 아세토나이트릴/물(20/1 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 182a(156 mg, 30%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 512.1.
실시예 182: 3-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-5-(피리미딘-4-일아미노)-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-6,7,8,9-테트라하이드로-3H-벤조[4,5]티에노[2,3-d]피리다진-4-온 182
실온에서, 메탄올(5 mL) 중의 화합물 182a(140 mg, 0.27 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(31 mg, 0.82 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 20분 동안 교반하고, 물(1 mL)로 켄칭하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(60:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 182(60 mg, 43%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 514.2. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.89 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.70 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.89 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 4.44-4.42 (m, 3H), 3.75 (s, 3H), 2.99-2.98 (m, 2H), 2.88-2.87 (m, 2H), 2.03-1.98 (m, 4H).
실시예 183a: 2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-6-옥소-5-(피리딘-2-일아미노)-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드 183a
Figure pat00249
환류 응축기를 장착한 100 mL 플라스크에 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(297 mg, 0.57 mmol), 1-메틸-3-(피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 178b(186 mg, 0.57 mmol), 나트륨 아세테이트(90 mg, 1.1 mmol), K3PO4(234 mg, 1.1 mmol), PdCl2(dppf)(50 mg, 0.057 mmol), 아세토나이트릴(25 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 질소 분위기 하에 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 183a(178 mg, 61%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 513.3.
실시예 183: 10-플루오로-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-6-옥소-5-(피리딘-2-일아미노)-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 183
메탄올(20 mL) 중의 화합물 183a(160 mg, 0.31 mmol) 및 NaBH4(59 mg, 1.55 mmol)의 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응물을 물로 켄칭하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 183(42 mg, 26%)을 회백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 515.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.74 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.18-8.17 (m, 1H), 7.61-7.58 (m, 1H), 7.53 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.81-6.79 (m, 1H), 4.95 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.49-4.40 (m, 2H), 4.22-4.14 (m, 2H), 4.10-4.05 (m, 1H), 3.87-3.85 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.64-2.60 (m, 1H), 2.57-2.53 (m, 1H), 2.43-2.41 (m, 2H), 1.81-1.75 (m, 2H), 1.71-1.67 (m, 2H).
실시예 184a: 1-메틸-3-(피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 184a
Figure pat00250
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 162a(600 mg, 2.1 mmol), Pin2B2(2540 mg, 10 mmol), Pd2(dba)3(100 mg, 0.11 mmol), 잔트포스(100 mg, 0.25 mmol), 칼륨 아세테이트(600 mg, 6.1 mmol) 및 다이옥산(30 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 65℃에서 15시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 석유 에터 화합물로 세척하여, 184a(700 mg, 90%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 329.4
실시예 184b: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-6-옥소-5-[(피라진-2-일)아미노]-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-카브알데하이드 184b
환류 응축기를 장착한 25 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 109a(100 mg, 0.30 mmol), 화합물 184a(170 mg, 0.60 mmol), Pd(dppf)Cl2(12 mg, 0.015 mmol), K3PO4(130 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(85 mg, 0.60 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(6 방울)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 184b(80 mg, 54%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 527.2.
실시예 184: 6-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-5-(피라진-2-일아미노)-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-2,2-다이메틸-2,3,5,6-테트라하이드로-1H,4H-8-티아-6-아자-사이클로펜타[a]인덴-7-온 184
메탄올(5 mL) 중의 화합물 184b(80 mg, 0.15 mmol) 및 NaBH4(18 mg, 0.45 mmol)의 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(3 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 184(24 mg, 35%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 529.3. 1H NMR (500 MHz, CHCl3) δ 8.73 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.54 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.14 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 8.02 (s, 1H), 7.96 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.86-4.83 (m, 1H), 4.71-4.68 (m, 1H), 4.46-4.41 (m, 1H), 4.32 (t, J = 11.0 Hz, 1H), 3.85-3.81 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 2.99-2.94 (m, 2H), 2.81 (s, 2H), 2.61-2.51 (m, 2H), 1.30 (s, 6H).
실시예 185a: 5-브로모-3-(이미다조[1,2-a]피리딘-7-일아미노)-1-메틸피라진-2(1H)-온 185a
Figure pat00251
환류 응축기를 장착한 100 mL 환저 플라스크에 이미다조[1,2-a]피리딘-7-아민(665 mg, 5.0 mmol), Cs2CO3(3.26 g, 10 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피라진-2(1H)-온(1.86 g, 7.0 mmol), 잔트포스(289 mg, 0.50 mmol), Pd2(dba)3(458 mg, 0.50 mmol) 및 1,4-다이옥산(30 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 질소 분위기 하에 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 약간의 출발 물질이 남아있음을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 다이클로로메탄(60 mL) 및 물(50 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3×20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 어두운색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(60/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 185a(700 mg, 44%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 320
실시예 185b: 6-(이미다조[1,2-a]피리딘-7-일아미노)-4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로피라진-2-일보론산 185b
환류 응축기를 장착한 100 mL 환저 플라스크에 화합물 185a(638 mg, 1.99 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(Pin2B2, 2.54 mg, 10 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(163 mg, 0.18 mmol), Cs2CO3(1.3 g, 3.98 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 질소 분위기 하에 80℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 석유 에터(150 mL) 및 에틸 아세테이트(15 mL)로 희석하였다. 생성 현탁액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 다이클로로메탄/메탄올(60/1 내지 15/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 추가로 정제하여, 화합물 185b(400 mg, 70%)를 회백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 286
실시예 185c: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(6-{이미다조[1,2-a]피리딘-7-일아미노}-4-메틸-5-옥소피라진-2-일)피리딘-3-카브알데하이드 185c
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 환저 플라스크에 화합물 185b(400 mg, 1.40 mmol), 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(192 mg, 0.56 mmol), 칼륨 아세테이트(220 mg, 2.24 mmol), 아세토나이트릴(20 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 현탁액을 통해 30분 동안 버블링한 후, 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(49 mg, 0.054 mmol)을 가했다. 이 시스템을 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클로 처리하고, 80℃로 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 20 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1 내지10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 185c(90 mg, 29%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 549
실시예 185: 2-{3-하이드록시메틸-4-[6-(이미다조[1,2-a]피리딘-7-일아미노)-4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-피라진-2-일]-피리딘-2-일}-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 185
실온에서 메탄올(5 mL) 중의 화합물 185c(80 mg, 0.146 mmol)의 용액에 NaBH4(34 mg, 0.90 mmol)를 가했다. 이 반응물을 1시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 물(3 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 185(49 mg, 61%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 551. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6)　 δ 9.67 (s, 1H), 8.57 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.41 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.46 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 6.59 (s, 1H), 5.04-5.02 (m, 1H), 4.67-4.64 (m, 1H)?4.519-4.481 (m, 1H), 4.31-4.20 (m, 3H), 3.88 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 3.58 (s, 3H), 2.63-2.55 (m, 2H), 2.44-2.42 (m, 2H), 1.23 (s, 6H).
실시예 186a: 5-브로모-1-메틸-3-(피리딘-3-일아미노)피라진-2(1H)-온 186a
Figure pat00252
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 피리딘-3-아민(940 mg, 10 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피라진-2(1H)-온(5.4 g, 20 mmol), i-프로판올(50 mL) 및 다이-i-프로필에틸아민(10 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 5시간 동안 가열 환류시켰다. 반응이 완료된 후, 이를 실온으로 냉각하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 조 생성물을 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 186a(1.4 g, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 281.6.
실시예 186b: 4-메틸-5-옥소-6-(피리딘-3-일아미노)-4,5-다이하이드로피라진-2-일보론산 186b
환류 응축기를 장착한 250 mL 환저 플라스크에 화합물 186a(800 mg, 2.86 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(2.18 g, 8.57 mmol), Pd(dppf)Cl2(204 mg, 0.28 mmol), 칼륨 아세테이트(560 mg, 5.71 mmol ) 및 다이옥산(60 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 질소 하에 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사 고체를 석유 에터(2 X 30 mL)로 세척하여, 화합물 186b(406 mg, 58%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 247.3.
실시예 186c: 2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(4-메틸-5-옥소-6-(피리딘-3-일아미노)-4,5-다이하이드로피라진-2-일)니코틴알데하이드 186c
환류 응축기를 장착한 50 mL 환저 플라스크에 화합물 186b(127 mg, 0.52 mmol), 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(180 mg, 0.52 mmol), Na2CO3(110 mg, 1.04 mmol), PdCl2(dppf)(38 mg, 0.052 mmol), DMF(12 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 질소 하에 50℃에서 8시간 동안 가열하였다. 이어서, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 186c(132 mg, 49%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 514.3.
실시예 186: 10-플루오로-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(4-메틸-5-옥소-6-(피리딘-3-일아미노)-4,5-다이하이드로피라진-2-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 186
메탄올(15 mL) 중의 화합물 186c(118 mg, 0.23 mmol)의 용액에 NaBH4(27 mg, 0.70 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 물로 켄칭하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 186(33 mg, 28%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 516.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.78 (s, 1H), 8.54 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.39-8.37 (m, 2H), 8.06-8.04 (m, 2H), 7.76 (s, 1H), 7.59 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.97 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.68-4.65 (m, 1H), 4.51-4.47 (m, 1H), 4.25-4.19 (m, 2H), 4.10-4.05 (m, 1H), 3.91-3.88 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 2.66-2.60 (m, 1H), 2.57-2.53 (m, 1H), 2.44-2.42 (m, 2H), 1.82-1.75 (m, 2H), 1.71-1.67 (m, 2H).
실시예 187a: (4-(5-(5-(2,2-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 187a
Figure pat00253
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-3-(5-(2,2-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 190e(200 mg, 1.0 당량, 0.45 mmol), (2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 113i(345 mg, 2 당량, 0.90 mmol), PdCl2(dppf)(36 mg, 0.1 당량, 0.045 mmol), K3PO4(191 mg, 2 당량, 0.90 mmol), 나트륨 아세테이트(74 mg, 2.0 당량, 0.90 mmol), 아세토나이트릴(15 mL) 및 물(0.1 mL)을 가했다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/에탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 187a(100 mg, 31%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 707.4.
실시예 187: 2-(4-(5-(5-(2,2-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 187
자석 교반기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 187a(100 mg, 1 당량, 0.14 mmol), 리튬 하이드록사이드(54 mg, 10 당량, 1.4 mmol), i-프로판올(3 mL), THF(3 mL) 및 물(2 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 187(43 mg, 46%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 665.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.69 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.51(d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.42-7.40 (m, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.98 (brs, 1H), 4.54 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.46-4.38 (m, 4H), 4.25-3.85 (m, 4H), 3.60 (s, 3H), 3.38-3.35 (m, 1H), 3.03-2.54 (m, 4H), 2.47 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.32-2.12 (m, 4H), 1.79-1.67 (m, 4H), 0.97 (s, 6H).
실시예 188a: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-6-옥소-5-[(피라진-2-일)아미노]-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 188a
Figure pat00254
환류 응축기를 장착한 50 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 162a(210 mg, 0.70 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(560 mg, 1.4 mmol), Pd(dppf)Cl2(70 mg, 0.035 mmol), K3PO4(320 mg, 1.4 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(210 mg, 1.4 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(6 방울)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 188a(150 mg, 40%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 554.2.
실시예 188: 2-[3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-5-(피라진-2-일아미노)-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-2'-일]-7,7-다이메틸-3,4,7,8-테트라하이드로-2H,6H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 188
i-프로판올 /THF(5:3, 8 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 188a(150 mg, 0.27 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(103 mg, 2.7 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공 중에서 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(2 X 20 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 188(40 mg, 35%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 512.3. 1H NMR (500 MHz, CHCl3) δ 8.73 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.15-8.13 (m, overlap, 2H), 8.02-8.00 (m, 2H), 7.38 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.68-4.51 (m, 2H), 4.33-4.29 (m, 1H), 4.18 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.91-3.86 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.60-2.58 (m, 2H), 2.53 (s, 2H), 1.28 (s, 6H).
실시예 189a: 3급-부틸 4-(피라진-2-일)피페라진-1-카복실레이트 189a
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 500 mL 1구 환저 플라스크에 DMSO(250 mL), 3급-부틸 피페라진-1-카복실레이트(15.8 g, 85.0 mmol), 2-클로로피라진(9.7 g, 85.0 mmol) 및 Cs2CO3(55.3 g, 170 mmol)를 넣었다. 이 혼합물을 60℃로 3일 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(5:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 189a(13.3 g, 60%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 265.3
실시예 189b: 3급-부틸 4-(5-브로모피라진-2-일)피페라진-1-카복실레이트 189b
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 500 mL 1구 환저 플라스크에 아세토나이트릴(150 mL), 화합물 189a(3.0 g, 8.8 mmol) 및 N-브로모석신이미드(1.56 g, 8.8 mmol)를 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 189b(2.85 g, 73.4%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 343.3. 1H NMR (500 MHz, (CD3)2CO) δ 8.03 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 3.48-3.46 (m, 4H), 3.42-3.40 (m, 4H), 1.33 (s, 9H).
실시예 189c: 3급-부틸 4-(5-(다이페닐메틸렌아미노)피라진-2-일)피페라진-1-카복실레이트 189c
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 189b(3.3 g, 9.6 mmol), 다이페닐메탄이민(1.74 g, 9.6 mmol), 팔라듐 다이아세테이트(440 mg, 0.48 mmol), (R)-(+)-2,2'-비스(다이페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸(598 mg, 0.96 mmol), Cs2CO3(6.2 g, 19.2 mmol) 및 1,4-다이옥산(80 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 115℃에서 64시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(5:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 189c(3.2 g, 75%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 444.2.
실시예 189d: 3급-부틸 4-(5-아미노피라진-2-일)피페라진-1-카복실레이트 189d
메탄올(25 mL) 중의 화합물 189c(2.5 g, 5.6 mmol)의 용액에 나트륨 아세테이트(0.56 g, 6.8 mmol) 및 하이드록실아민 하이드로클로라이드(0.7 g, 10 mmol)를 넣었다. 이 반응 혼합물을 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(15:1)로 용리하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 189d(1.3 g, 71%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 280.3.
실시예 189e: 3급-부틸 4-(5-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피라진-2-일)피페라진-1-카복실레이트 189e
1,4-다이옥산(150 mL) 중의 화합물 189d(1.1 g, 3.94 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.1 g, 3.94 mmol), 팔라듐 다이아세테이트(45 mg, 0.20 mmol), (R)-(+)-2,2'-비스(다이페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸(245 mg, 0.39 mmol) 및 Cs2CO3(2.6 g, 7.9 mmol)의 혼합물을 120℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 189e(900 mg, 54%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 465.1.
실시예 189f: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(피페라진-1-일)피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 189f
화합물 189e(1.0 g, 2.2 mmol) 및 4.0 M HCl/다이옥산(60 mL)의 혼합물을 실온에서 교반하였다 5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하여, 조질 화합물 189f(760 mg, 98%)를 황색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS: [M+H]+ 395.1.
실시예 189g: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 189g
Figure pat00255
메탄올(60 mL) 중의 화합물 189f(740 mg, 2.0 mmol), 옥세탄-3-온(288 mg, 4.0 mmol), NaBH3CN(315 mg, 5.0 mmol) 및 아연 클로라이드(680 mg, 5.0 mmol)의 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하여, 조질 화합물 189g(660 mg, 78%)를 황색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS: [M+H]+ 423.1.
실시예 189h: (4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 189h
환류 응축기를 장착한 50 mL 환저 플라스크에 화합물 189g(180 mg, 0.43 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(165 mg, 0.43 mmol), Pd(dppf)Cl2(35 mg, 0.043 mmol), 나트륨 아세테이트(71 mg, 0.86 mmol), K3PO4(194 mg, 0.86 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클 후, 이 혼합물을 100℃로 3시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 반응물을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 189h(100 mg, 34%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 680.3.
실시예 189: 2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 189
실온에서, i-프로판올 /THF(1:1, 5 mL) 및 물(0.5 mL) 중의 화합물 189h(90 mg, 0.13 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(126 mg, 2.9 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 35℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 189(60 mg, 71%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 638.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.82 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.04-5.01 (m, 1H), 4.72-4.50 (m, 6H), 4.32-4.30 (m, 1H), 4.15-4.09 (m, 2H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.57-3.49 (m, 5H), 2.61-2.43 (m, 8H), 1.92-1.78 (m, 4H).
실시예 190a: 3급-부틸 3,3-다이메틸-4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 190a
Figure pat00256
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-2-나이트로피리딘(5.6 g, 28.0 mmol), 3급-부틸 3,3-다이메틸-4-피페라진-1-카복실레이트(3.0 g, 14.0 mmol), 세슘 카보네이트(9.1 g, 28 mmol) 및 1,4-다이옥산(50 mL)을 넣었다. 생성 용액을 통해 30분 동안 질소를 버블링한 후, 바이냅(Binap)(870 mg, 1.4 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)-이팔라듐(0)(1.2 g, 1.4 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클로 처리하고, 120℃에서 24시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하고, 여액을 에틸 아세테이트(200 mL)와 물(50 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(3×50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(5:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 190a(1.27 g, 27%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 337.2.
실시예 190b: 3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-3,3-다이메틸피페라진-1-카복실레이트 190b
50 mL 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 화합물 3급-부틸 3,3-다이메틸-4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 190a(1100 mg, 3.2 mmol), 10% Pd/C(10% 습윤, 110 mg) 및 메탄올(20 mL)을 넣었다. 이어서, 이를 배기하고, 수소 기체를 넣고, 실온에서 교반하였다 5시간 동안 교반하였다. 수소를 배기하고, 이 플라스크에 질소를 넣었다. 촉매를 규조토 필터제(셀라이트(등록상표), 이머리 미네랄스 캘리포니아 인코포레이티드)의 패드를 통해 여과하여 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여, 화합물 190b(950 mg, 94%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 307.3
실시예 190c: 3급-부틸 4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)-3,3-다이메틸피페라진-1-카복실레이트 190c
자석 교반기 및 환류 응축기를 장착한 100 mL 1구 환저 플라스크에 3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-3,3-다이메틸피페라진-1-카복실레이트 190b(950 mg, 3.1 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1240 mg, 4.6 mmol), 1,4-다이옥산(30 mL) 및 세슘 카보네이트(2015 mg, 6.2 mmol)를 넣었다. 생성 용액을 통해 5분 동안 질소를 버블링한 후, 잔트포스(179 mg, 0.31 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(283 mg, 0.31 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 진공/아르곤 플러쉬의 3 사이클로 처리하고, 10시간 동안 가열 환류시켰다. 그 후, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(50 mL)와 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(3×20 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(4:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 190c(1.21 g, 79%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 492.1.
실시예 190d: 5-브로모-3-(5-(2,2-다이메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 190d
다이클로로메탄(20 mL) 중의 3급-부틸 4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)-3,3-다이메틸피페라진-1-카복실레이트 190c(1.19 g, 1.9 mmol)의 용액에 다이에틸 에터(15 mL) 중의 3M HCl을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하여, 화합물 190d(900 mg, 95%)를 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 392.1.
실시예 190e: 5-브로모-3-(5-(2,2-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온190e
메탄올(30 mL) 중의 5-브로모-3-(5-(2,2-다이메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-피리딘-2(1H)-온 190d(900 mg, 2.3 mmol), 옥세탄-3-온(497 mg, 6.9 mmol), NaBH3CN(435 mg, 6.9 mmol), 및 아연 클로라이드(311 mg, 2.3 mmol)의 혼합물을 50℃에서 4시간 동안 교반하였다. 이어서, 감압 하에 농축하였다. 물(10 mL)을 잔사에 가하고, 이 혼합물을 클로로폼(3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼-크로마토그래피로 정제하여, 화합물 190e(800 mg, 78%)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 448.1. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.37-7.34 (m, 1H), 6.96 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.69-4.61 (m, 4H), 3.60 (s, 3H), 3.50-3.14 (m, 3H), 2.43-2.17 (m, 4H), 1.06 (s, 6H).
실시예 190f: 2-(4-클로로-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 190f
Figure pat00257
메탄올(30 mL) 중의 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-니코틴알데하이드 103b(1.06 g, 3.0 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(380 mg, 9.0 mmol)를 10℃에서 가했다. 이 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 물(10 mL)로 켄칭하였다. 이어서, 감압 하에 농축하고, 잔사를 다이클로로메탄(50 mL)에 용해시켰다. 이 혼합물을 물(10 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 증발시켜 화합물 190f를 황색 고체(900 mg, 90%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 332.
실시예 190g: (4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 190g
다이클로로메탄(25 mL) 중의 2-(4-클로로-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 190f(900 mg, 2.7 mol) 및 트라이에틸아민(900 mg, 9.0 mol)의 혼합물에 실온에서 교반하면서 아세틸 클로라이드(600 mg, 6.0 mol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 190g를 백색 고체(950 mg, 94%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 374.
실시예 190h: (4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 190h
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 (4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 190g(950 mg, 2.5 mmol), Pin2B2(4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(1.6 g, 2.0 당량, 5 mmol), Pd2(dba)3(230 mg, 0.1 당량, 0.25 mmol), 잔트포스(232 mg, 0.2 당량, 0.50 mmol), 칼륨 아세테이트(735 mg, 3 당량, 7.5 mmol), 및 다이옥산(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 65℃에서 15시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(3:1)로 세척하여, 화합물 190h를 황색 고체(950 mg, 87%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 383.
실시예 190i: (4-(5-(5-(2,2-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 190i
Figure pat00258
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-3-(5-(2,2-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 190e(200 mg, 1.0 당량, 0.45 mmol), (2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 190h(345 mg, 2 당량, 0.90 mmol), PdCl2(dppf)(36 mg, 0.1 당량, 0.045 mmol), K3PO4(191 mg, 2 당량, 0.90 mmol), 나트륨 아세테이트(74 mg, 2.0 당량, 0.90 mmol), 아세토나이트릴(15 mL) 및 물(0.1 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/에탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 190i(100 mg, 31%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 707.4.
실시예 190: 2-[4-[5-[[5-[2,2-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 190
자석 교반기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 (4-(5-(5-(2,2-다이메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 190i(100 mg, 1 당량, 0.14 mmol), 리튬 하이드록사이드(54 mg, 10 당량, 1.4 mmol), i-프로판올(3 mL), THF(3 mL) 및 물(2 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 190을 백색 고체(43 mg, 46%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 665.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.69 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.51(d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.42-7.40 (m, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.98 (brs, 1H), 4.54 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.46-4.38 (m, 4H), 4.25-3.85 (m, 4H), 3.60 (s, 3H), 3.38-3.35 (m, 1H), 3.03-2.54 (m, 4H), 2.47 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.32-2.12 (m, 4H), 1.79-1.67 (m, 4H), 0.97 (s, 6H)
실시예 191a: N-3급-부틸-4,5,6,7-테트라하이드로벤조[b]티오펜-2-카복스아마이드 191a
4,5,6,7-테트라하이드로벤조[b]티오펜-2-카복실산(500 g, 2.75 mol, 1.0 당량) 및 티오닐 클로라이드(655 g, 5.5 mol, 2.0 당량)의 혼합물을 3시간 동안 가열 환류시켰다. 과량의 티오닐 클로라이드를 감압 하에 증류시켜 제거하였다. 잔사를 다이클로로메탄(1.0 L)에 취하고, 다이클로로메탄(500 mL) 중의 3급-부틸아민(402 g, 5.5 mol, 2.0 당량)의 용액을, 교반 하에 혼합물의 온도를 10℃ 미만으로 유지하면서 가했다. 생성 용액을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용매의 대부분을 감압 하에 제거하였다. 잔사를 빙욕 중에서 냉각하고, 교반하면서 2M KOH 용액을 천천히 도입하여, pH를 11로 조정하였다. 그 현탁액을 여과하고, 고체를 수집하고, 물로 3회 세척하고, 진공에서 건조시켜 화합물 191a를 백색 고체(580 g, 80%, 2 단계)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 238. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.02 (s, 1H), 5.77 (s, 1H), 2.65 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 2.47 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 1.74-1.70 (m, 4H), 1.35 (s, 9H).
실시예 191c: N-3급-부틸-3-(다이아젠일메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로벤조-[b]티오펜-2-카복스아마이드 191c
THF(500 mL) 중의 화합물 191a(100 g, 0.42 mol, 1.0 당량)의 용액을 -78℃에서 아르곤 보호 하에 n-부틸 리튬(672 mL, THF 중의 2.5M, 1.68 mol, 4.0 당량)에 천천히 가했다. 이 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 온도를 -78℃에서 유지시키면서 N,N-다이메틸폼아마이드(306 g, 4.2 mol, 10.0 당량)를 혼합물에 가했다. 추가로 2.0시간 후에, 이 반응 혼합물을 -78℃에서 메탄올(500 mL)을 가하여 켄칭하였다. 이를 0.50시간 동안 실온에서 교반하여 화합물 191b를 동일 반응계 내에서 수득하였다. 그 후, 80% 수성 하이드라진 수화물(131 g, 2.1 mol)을 가하고, 이 혼합물을 65℃에서 밤새도록 환류시켰다. 유기 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 여과하고, 생성 황색 고체를 물로 세척하였다. 고체를 진공에서 건조시켜 화합물 191c를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. MS: [M+H]+ 280.
실시예 191d: 8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-(9),2(7),3-트라이엔-6-온 191d
Figure pat00259
H2SO4(30% 수성, 3 L) 중의 N-3급-부틸-3-(다이아젠일메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로벤조[b]티오펜-2-카복스아마이드 191c(40 g, 144 mmol)의 혼합물을 105℃에서 24시간 동안 환류시켰다. 이어서, 여과하고, 여액을 다이클로로메탄(3ⅹ1 L)으로 추출하였다. 합친 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 191d를 백색 고체(9.0 g, 31%)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 207. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.15 (s, 1H), 2.96-2.94 (m, 2H), 2.86-2.84 (m, 2H),1.96-1.94 (m, 4H).
실시예 191e: (3S)-3급-부틸 3-메틸-4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 191e
화합물 101g에 대해 기재된 절차를 따라 (3S)-3급-부틸 3-메틸피페라진-1-카복실레이트(10.0 g, 50 mmol) 및 5-브로모-2-나이트로피리딘(10.5 g, 50 mmol)으로부터 출발하여 화합물 191e를 황색 고체(8.05 g, 50%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 323
실시예 191f: (3S)-3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 191f
화합물 101h에 대해 기재된 절차를 따라 (3S)-3급-부틸 3-메틸-4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 191e(5.8 g, 18 mmol)로부터 출발하여 화합물 191f를 갈색 고체(4.9 g, 93%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 293
실시예 191g: (3S)-3급-부틸 4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노) 피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 191g
화합물 101i에 대해 기재된 절차를 따라 (3S)-3급-부틸-3-메틸-4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 191f(4.0 g, 13.7 mmol) 및 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(5.5 g, 20.6 mmol)으로부터 출발하여 화합물 191g를 황색 고체(5.4 g, 83%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 478
실시예 191h: (3S)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 191h
Figure pat00260
화합물 101j에 대해 기재된 절차를 따라 (3S)-3급-부틸 4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)-3-메틸-피페라진-1-카복실레이트 191g(3.1 g, 6.5 mmol)로부터 출발하여 화합물 191h를 황색 고체(2.3 g, 94%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 378.
실시예 191i: (S)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 191i
메탄올(700 mL) 중의 (S)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 191h(40.0 g, 106 mmol), 옥세탄-3-온(11.4 g, 159 mmol), NaBH3CN(10.0 g, 159 mmol), 및 아연 클로라이드(21.3 g, 159 mmol)의 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(100 mL)에 넣고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(200 mL x 3)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 191i(35 g, 73%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 434.
실시예 191j: (3S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 191j
Figure pat00261
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 (S)-3급-부틸-4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 191i(1.0 g, 1.0 당량, 2.3 mmol), Pin2B2(1.46 g, 2.50 당량, 5.75 mmol), Pd2(dba)3(105 mg, 0.05 당량, 0.125 mmol), 잔트포스(93 mg, 0.1 당량, 0.23 mmol), 칼륨 아세테이트(676 mg, 3.0 당량, 6.9 mmol), 및 다이옥산(50 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃ 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(3:1)(80 mL)로 세척하여, 화합물 191j를 황색 고체(1.0 g, 90%)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 482.
실시예 191k: 4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자-트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이-데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 191k
Figure pat00262
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 191j(168 mg, 0.35 mmol), 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a(121 mg, 0.35 mmol), K3PO4(148 mg, 0.70 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(13 mg, 0.0175 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(95 mg, 0.70 mmol), 물(6 방울) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 이 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 100℃에서 N2 보호 하에 1시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 전환이 완료됐음을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(30 mL) 및 물(30 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 191k(118 mg, 51%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 665
실시예 191: 5-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-2-일]-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-6-온 191
메탄올/다이클로로메탄(10/10 mL) 중의 4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로-[7.4.0.02,7]-트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 191k(118 mg, 0.18 mmol)의 용액에 실온에서 NaBH4(21 mg, 0.54 mmol)를 가했다. 이 반응물을 1시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 그 후, 이 혼합물을 물(20 mL)에 붓고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(20 mL x 3)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4, 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔류 고체를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 191(71 mg, 60%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 667. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.58 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.48-8.46 (m, 2H), 7.86 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 3.0, 9.0 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 4.86-4.85 (m, 1H), 4.58-4.55 (m, 2H), 4.48-4.46 (m, 2H), 4.42-4.40 (m, 2H), 3.65-3.64 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.41-3.99 (m, 1H), 3.05-3.04 (m, 1H), 2.97-2.95 (m, 3H), 2.87-2.86 (m, 2H), 2.52-2.51 (m, 1H), 2.34-2.32 (m, 2H), 2.21-2.20 (m, 1H), 1.89-1.87 (m, 4H), 0.94 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 192a: 메틸 1-폼일-5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 192a
자석 교반기가 장착된 100 mL 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 무수 다이클로로에탄(10 mL) 및 무수 DMF(0.7 mL, 9.0 mmol)를 넣었다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 0℃ 내지 10℃의 반응 온도를 유지하면서 인 옥시클로라이드(0.7 mL, 7.3 mmol)를 2분에 걸쳐 가했다. 냉각 욕을 제거하고, 이 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 아세토나이트릴(10 mL) 중의 메틸 5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 112a(1.0 g, 5.6 mmol)의 용액을 가하고, 이 혼합물을 실온에서 추가로 3시간 동안 교반하였다. 이시간 후에, 용매를 감압 하에 농축하고, 오일성 잔사를 포화된 수성 NaHCO3(20 mL)과 함께 취하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트(3 x 70 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 물(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 192a를 백색 고체(406 mg, 33%)로서 수득하였다. MS: (M+H)+ 208.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 10.29 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 3.99 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.76 (s, 3H), 2.95 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.90-1.85 (m, 2H), 1.78-1.74 (m, 2H).
실시예 192b: 7,8,9,10-테트라하이드로피리다지노[4,5-a]인돌리진-4(3H)-온 192b
Figure pat00263
100 mL 1구 환저 플라스크에 하이드라지늄 하이드록사이드(20 mL), 메틸 1-폼일-5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 192a(2.5 g, 12.0 mmol)를 넣었다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이시간 이후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과시켜 화합물 192b를 황색 고체(1.9 g, 83%)로서 수득하였다. MS: (M+H)+ 190.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 11.44 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 4.18 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.96 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.98-1.93 (m, 2H), 1.87-1.82 (m, 2H).
실시예 192c: 4-클로로-2-(4-옥소-7,8,9,10-테트라하이드로피리다지노[4,5-a]인돌리진-3(4H)-일)니코틴알데하이드 192c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(50 mL), 칼륨 카보네이트(1.5 g, 10.6 mmol), 7,8,9,10-테트라하이드로피리다지노[4,5-a]인돌리진-4(3H)-온 192b(1.0 g, 5.3 mmol), 및 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드(3.5 g, 15.9 mmol)를 넣었다. 생성 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 구리(I) 브로마이드(75.0 mg, 0.53 mmol) 및 사르코신(47.0 mg, 0.53 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 95℃에서 12시간 동안 가열하였다. 이시간 이후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 메틸렌클로라이드(60 mL)와 물(40 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 메틸렌클로라이드(3 x 70 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 용리하여 화합물 192c를 갈색 고체(521 mg, 30%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 329.2.
실시예 192d: (S)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(4-옥소-7,8,9,10-테트라하이드로피리다지노[4,5-a]인돌리진-3(4H)-일)니코틴알데하이드 192d
Figure pat00264
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 4-클로로-2-(4-옥소-7,8,9,10-테트라하이드로피리다지노[4,5-a]인돌리진-3(4H)-일)니코틴알데하이드 192c(196 mg, 0.60 mmol), (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)-피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 191j(290 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트(100 mg, 1.2 mmol), K3PO4(320 mg, 1.2 mmol), PdCl2(dppf)(50 mg, 0.060 mmol), 아세토나이트릴(25 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 이 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 100℃에서 3시간 동안 N2 보호 하에 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 192d(173 mg, 44%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 648.4.
실시예 192: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,8,9,10-테트라하이드로피리다지노[4,5-a]인돌리진-4-온 192
MeOH(20 mL) 중의 화합물 192d(160 mg, 0.25 mmol)의 용액에 NaBH4(28 mg, 0.75 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 192(97 mg, 60%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 650.4. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.54 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.86 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.51 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.38-7.36 (m, 1H), 7.25 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.57-4.54 (m, 2H), 4.48-4.46 (m, 1H), 4.43-4.41 (m, 1H), 4.33 (s, 2H), 4.25-4.21 (m, 2H), 3.69-3.66 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.42-3.37 (m, 1H), 3.11-3.07 (m, 1H), 3.06-3.04 (m, 2H), 2.97-2.92 (m, 1H), 2.55-2.53 (m, 1H), 2.35-2.29 (m, 2H), 2.19-2.17 (m, 1H), 2.04-1.96 (m, 2H), 1.93-1.85 (m, 2H), 0.93 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 193a: 메틸 2-(하이드록시(피리딘-2-일)메틸)아크릴레이트 193a
Figure pat00265
250 mL 1구 환저 플라스크에 클로로폼(100 mL), 피콜린알데하이드(10.7 g, 0.10 mol), 메틸 아크릴레이트(8.60 g, 0.10 mol), 및 1,4-다이아자-바이사이클로[2.2.2]옥탄(0.560 g, 5.00 mmol)을 가했다. 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 이시간 이후에, 이 반응물을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(3:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 193a를 진황색 오일(11.6 g, 60%)로서 수득하였다. MS-ESI: (M+H)+ 194.2. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.54 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.69-7.66 (m, 1H), 7.42 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.22-7.20 (m, 1H), 6.36 (s, 1H), 5.97 (s, 1H), 5.62 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 3.74 (s, 3H).
실시예 193b: 메틸 인돌리진-2-카복실레이트 193b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 아세트산 무수물(80 mL) 및 화합물 193a(6.68 g, 34.6 mmol)를 넣었다. 이 반응 혼합물을 환류 온도에서 질소 하에 4시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 얼음(100 g) 및 수성 포화된 중탄산 나트륨(200 mL)의 혼합물에 붓고, 1시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 포화된 수성 중탄산 나트륨으로 중화시키고, 메틸렌클로라이드(3 x 200 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 193b를 백색 고체(2.1 g, 35%)로서 수득하였다. MS-ESI: (M+H)+ 176.2. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.86-7.84 (m, 1H), 7.79 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.36-7.34 (m, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.70-6.66 (m, 1H), 6.55-6.51 (m, 1H), 3.88 (s, 3H).
실시예 193c: 메틸 5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 193c
250 mL 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 193b(2.0 g, 11.4 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 200 mg), 및 메탄올(50 mL)을 넣었다. 이를 배기하고, 수소 가스를 넣고, 5 atm 하에 수소 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 193c를 백색 고체(1.1 g, 81%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 180.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.25 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.09 (s, 1H), 3.93 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 2.67 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.87-1.83 (m, 2H), 1.75-1.70 (m, 2H).
실시예 193d: 메틸 3-폼일-5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 193d
자석 교반기가 장착된 100 mL 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 무수 다이클로로에탄(20 mL) 및 무수 DMF(0.70 mL, 9.0 mmol)를 넣었다. 이 혼합물에 0℃에서 인 옥시클로라이드(0.70 mL, 7.3 mmol)를 0℃ 내지 10℃의 반응 온도를 유지하면서 2분에 걸쳐 가했다. 냉각 욕을 제거하고, 이 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 아세토나이트릴(10 mL) 중의 화합물 193c(1.0 g, 5.6 mmol)의 용액을 가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 이시간 후에, 이를 감압 하에 농축하였다. 오일성 잔사를 포화된 수성 NaHCO3(20 mL)과 함께 취하고, 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 물(50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:5)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 193d를 백색 고체(703 mg, 58%)로서 수득하였다. MS-ESI: (M+H)+ 208.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.14 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 4.27 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.78 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.94-1.85 (m, 2H), 1.78-1.69 (m, 2H).
실시예 193e: 6,7,8,9-테트라하이드로피리다지노[4,5-b]인돌리진-1(2H)-온 193e
환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 193d(600 mg, 2.9 mmol) 및 하이드라진 수화물(20 mL)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하여 화합물 193e를 황색 고체(413 mg, 75%)로서 수득하였다. MS-ESI: (M+H)+ 190.1. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.17 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 6.33 (s, 1H), 4.16 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.88 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.00-1.96 (m, 2H), 1.84-1.79 (m, 2H).
실시예 193f: 4-클로로-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피리다지노[4,5-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 193f
환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(40 mL), 화합물 193e(800 mg, 3.6 mmol), 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드(2.8 g, 12.6 mmol), 및 칼륨 카보네이트(1.2 g, 8.4 mmol)를 넣었다. 생성 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 구리(I) 요오다이드(800 mg, 4.2 mmol) 및 4,7-다이메톡시-1,10-펜안트롤린(1.0 g, 4.2 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 90℃에서 12시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 메틸렌클로라이드(60 mL)과 물(40 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 메틸렌클로라이드(3 x 40 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 193f를 갈색 고체(513 mg, 수율 37%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H] + 329.1.
실시예 193g: (S)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)-피리딘-2-일-아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로-피리다지노[4,5-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 193g
Figure pat00266
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 화합물 193f(200 mg, 0.61 mmol), 화합물 191j(293 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트(98 mg, 1.2 mmol), K3PO4(254 mg, 1.2 mmol), PdCl2(dppf)(50 mg, 0.060 mmol), 아세토나이트릴(25 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 이 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 193g(206 mg, 53%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H] + 648.3.
실시예 193: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-6,7,8,9-테트라하이드로피리다지노[4,5-b]인돌리진-1-온 193
메탄올(20 mL) 중의 화합물 193g(180 mg, 0.28 mmol)의 용액에 NaBH4(32 mg, 0.84 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하고, 물로 켄칭하였다. 이어서, 이를 감압 하에 증발시키고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 193(140 mg, 78%)을 회백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H] + 650.4. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.67 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.85 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.52-7.50 (m, 2H), 7.38-7.36 (m, 1H), 7.25 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.72 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.57-4.54 (m, 2H), 4.47 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.41 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.33-4.29 (m, 2H), 4.28-4.25 (m, 2H), 3.71-3.65 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.41-3.77 (m, 1H), 3.10-3.08 (m, 1H), 2.98-2.90 (m, 3H), 2.57-2.52 (m, 1H), 2.35-2.30 (m, 2H), 2.18-2.16 (m, 1H), 2.06-2.0 (m, 2H), 1.89-1.82 (m, 2H), 0.93 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 194a: 1-메틸-3-(피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 194a
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 142a(600 mg, 2.0 mmol), Pin2B2(2.54 g, 10 mmol), Pd2(dba)3(100 mg, 0.10 mmol), 잔트포스(100 mg, 0.20 mmol), 칼륨 아세테이트(600 mg, 6.0 mmol), 및 다이옥산(80 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 석유 에터로 세척하여, 화합물 194a를 황색 고체(조질 생성물)(1.0 g, LCMS 순도: 70%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 329.4.
실시예 194b: 4-{1-메틸-6-옥소-5-[(피라진-2-일)아미노]-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 194b
Figure pat00267
환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a(345 mg, 1.0 mmol), 화합물 194a(659 mg, 2.0 mmol), Pd(dppf)Cl2(50 mg, 0.050 mmol), K3PO4(450 mg, 2.0 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(300 mg, 2.0 mmol), 물(6 방울) 및 아세토나이트릴(40 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 194b(250 mg, 49%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 512.3.
실시예 194: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-6-옥소-5-(피라진-2-일아미노)-3-피리딜]-2-피리딜]-6,7,8,9-테트라하이드로벤조티오페노[2,3-d]피리다진-4-온 194
메탄올(20 mL) 중의 화합물 194b(200 mg, 0.4 mmol) 및 NaBH4(48 mg, 1.2 mmol)의 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(5 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(3 x 10 mL)로 추출하였다. 에틸 아세테이트와 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 194(60 mg, 30%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 514.2. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.78 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.69 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.04 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 5 Hz, 1H), 4.44-4.37 (m, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.01-2.99 (m, 2H), 2.88-2.86 (m, 2H), 2.01-1.96 (m, 4H).
실시예 195a: 에틸 4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-카복실레이트 195a
Figure pat00268
DMSO(100 mL) 중의 에틸 3-(2-클로로사이클로헥스-1-엔일)아크릴레이트(21.4 g, 100 mmol)의 혼합물에 나트륨 아자이드(9.75 g, 150 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 105℃에서 4시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 이 혼합물을 빙수에 부었다. 생성 침전물을 여과로 수집하여, 화합물 195a(18.0 g, 93.3%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 194.
실시예 195b: 에틸 1-(2,2-다이에톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-카복실레이트 195b
N,N-다이메틸폼아마이드(DMF)(30 mL) 중의 NaH(1.44 g, 60.2 mmol)의 현탁액에 0℃에서 화합물 195a(5.80 g, 30.1 mmol)를 천천히 가했다. 생성 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하고, 이어서 2-브로모-1,1-다이에톡시에탄(11.9 g, 60.2 mmol)을 가했다. 이 반응물을 70℃에서 30시간 동안 가열하고, 물(100 mL)로 켄칭하였다. 이어서, 이 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 100 mL)로 추출하였다. 합친 유기 상을 감압 하에 농축하고, 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 195b(4.7 g, 51%)를 수득하였다. MS-ESI: [M-EtOH+H]+ 264. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 6.65 (s, 1H), 4.59 (t, J =5.0 Hz, 1H), 4.17-4.16 (m, 4H), 3.59-3.57 (m, 2H), 3.27-3.26 (m, 2H), 2.61 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.51 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.73-1.71 (m, 2H), 1.63-1.61 (m, 2H), 1.25 (t, J = 7.0 Hz, 3 H), 1.02 (t, J = 7.0 Hz, 6H).
실시예 195c: 1-(2,2-다이에톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-카복실산 195c
에탄올(20 mL), 테트라하이드로퓨란(20 mL) 및 물(30 mL)의 혼합 용매 중의 화합물 195b(4.7 g, 15.2 mmol)의 혼합물에 나트륨 하이드록사이드(3.0 g, 75.0 mmol)를 가했다. 이 반응물을 75℃에서 2 일 동안 가열하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물에 현탁시키고, 묽은 수성 시트르산 용액으로 중화시켰다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트(3 X 100 mL)로 추출하고, 합친 유기 상을 감압 하에 농축하여 화합물 195c(3.32 g, 78%)를 수득하였다. MS-ESI: [M-EtOH+H]+ 236.
실시예 195d: 1-(2,2-다이에톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-1H-인돌-2-카복스아마이드 195d
N,N-다이메틸폼아마이드(30 mL) 중의 화합물 195c(2.8 g, 10.0 mmol)의 혼합물에 O-(7-아자벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N′,N′-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(HATU)(5.7 g, 15.0 mmol), Et3N(1.5 g, 15.0 mmol), 및 DMAP(128 mg, 1.0 mmol)를 넣었다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 포화된 암모늄 하이드록사이드(30 mL)를 가하고, 생성 혼합물을 추가로 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물(100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(3 X 100 mL)로 추출하였다. 합친 유기 상을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(6:1 내지 3:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 195d(2.7 g, 96%)를 수득하였다. MS-ESI: [M-EtOH+H]+ 235. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 7.35 (bs, 1H), 6.70 (bs, 1H), 6.60 (s, 1H), 4.60 (t, J =5.5 Hz, 1H), 4.18 (d, J =4.0 Hz, 2H), 3.57-3.56 (m, 2H), 3.25 (m, 2H), 2.57 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.40 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.71 (t, J =5.0 Hz, 2H), 1.64 (t, J =5.0 Hz, 2H), 1.01 (t, J = 7.0 Hz, 6H).
실시예 195e: 6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 195e
화합물 195d(2.7 g, 9.6 mmol) 및 아세트산(10 mL)의 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 수성 탄산 나트륨 용액으로 중화시키고, 에틸 아세테이트(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기 상을 감압 하에 농축하여 화합물 195e를 황색 고체(1.6 g, 88%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 189.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.28 (s, 1H), 7.02 (d, J =5.5 Hz, 1H), 6.63 (s, 1H), , 6.52 (pt, J =5.5 Hz,1H), 2.66 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.57 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.83-1.82 (m, 2H), 1.73-1.72 (m, 2H).
실시예 195f: 4-클로로-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 195f
Figure pat00269
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(15 mL), 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드 103a(503 mg, 2.28 mmol), 화합물 195e(142 mg, 0.76 mmol), 세슘 카보네이트(490 mg, 1.5 mmol), CuI(143 mg, 0.76 mmol), 및 4,7-다이메톡시-1,10-펜안트롤린(127 mg, 0.52 mmol)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 80℃에서 10시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 염수로 세척하고, 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:4)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 195f(160 mg, 65%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 328.
실시예 195g: 2-(3-(폼일)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-6,7,8,9-테트라하이드로-피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 195g
환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 195f(130 mg, 0.40 mmol), 1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라-메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 135a(154 mg, 0.40 mmol), Pd(dppf)Cl2(29 mg, 0.040 mmol), K3PO4(170 mg, 0.80 mmol), 나트륨 아세테이트(66 mg, 0.80 mmol), 물(6 방울) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 환류 온도에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 195g를 황색 고체(120 mg, 54%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 551.2
실시예 195: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-6,7,8,9-테트라하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 195
0℃에서 메탄올(5 mL) 중의 화합물 195g(120 mg, 0.22 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(25 mg, 0.66 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물(1.0 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 195(70 mg, 58%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 553.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.97 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.08-5.06 (m, 1H), 4.51-4.49 (m, 1H), 4.36-4.34 (m, 1H), 4.14-4.05 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.62-3.60 (m, 2H), 2.91-2.89 (m, 2H), 2.75-2.70 (m, 4H), 2.49 (s, 3H), 1.97-1.95 (m, 2H), 1.86-1.84 (m, 2H).
실시예 196a: 2-사이클로프로필피리미딘-4-아민 196a
Figure pat00270
사이클로프로필카브아미딘 하이드로클로라이드(1.0 g, 8.3 mmol)를 에탄올(25 mL) 및 트라이에틸아민(1.26 g, 12.5 mmol)에 용해시키고, 이어서 2-클로로아크릴로-나이트릴(870 mg, 10 mmol)을 가했다. 생성 주황색 용액을 1시간 동안 환류시켰다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 진공에서 농축하고, 잔사를 역상 콤비플래쉬로 정제하여, 화합물 196a(300 mg, 27%)를 연갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 136
실시예 196b: 5-브로모-3-(2-사이클로프로필피리미딘-4-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 196b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 196a(300 mg, 2.22 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(593 mg, 2.22 mmol), 및 세슘 카보네이트(1.45 g, 4.44 mmol)를 넣었다. 이 현탁액을 통해 30분 동안 버블링한 후, 잔트포스(127 mg, 0.22 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(100 mg, 0.11 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 5시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 50 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를 아세토나이트릴(5mL)로 세척하여, 화합물 196b(420 mg, 59%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 321
실시예 196c: 3-(2-사이클로프로필피리미딘-4-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 196c
자석 교반기 및 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 196b(380 mg, 1.2 mmol), Pin2B2(1.5 g, 5.9 mmol), Pd2(dba)3(55 mg, 0.060 mmol), 잔트포스(57 mg, 0.060 mmol), 칼륨 아세테이트(350 mg, 3.6 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 60℃에서 15시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 석유 에터로 세척하여, 화합물 196c(410 mg, 94%)을 황색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 369
실시예 196d: 4-{5-[(2-사이클로프로필피리딘-4-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 196d
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 196c(258 mg, 0.70 mmol), 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(240 mg, 0.70 mmol), K3PO4(297 mg, 1.4 mmol), 나트륨 아세테이트(190 mg, 1.4 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(29 mg, 0.035 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 100℃에서 N2 보호 하에 1시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 분석은 목적 생성물로의 전환이 완료됐음을 나타냈다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄(20 mL) 및 물(20 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 196d(220 mg, 57%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 549
실시예 196: 3-[4-[5-[(2-사이클로프로필피리미딘-4-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 196
메탄올/다이클로로메탄(5/5 mL) 중의 화합물 196d(200 mg, 0.36 mmol)의 용액에 실온에서 NaBH4(42 mg, 1.1 mmol)를 가했다. 이 반응물을 1시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 물(10 mL)을 잔사에 가했다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(20 mL x 3)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 196(135 mg, 68%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 551. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.84 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.38 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.52 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.22-5.19 (m, 1H), 4.72-4.69 (m, 1H), 4.56-4.54 (m, 1H), 4.31 (t, J = 11.0 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 3.94-3.91 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 2.58 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 2.53 (s, 2H), 2.18-2.13 (m, 1H), 1.29 (s, 6H), 1.16-1.13 (m, 1H), 1.06-0.95 (m, 3H).
실시예 197a: 3급-부틸 4-(5-나이트로피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트 197a
Figure pat00271
2-브로모-5-나이트로피리딘(5.0 g, 24.6 mmol), 3급-부틸 피페라진-1-카복실레이트(13.8 g, 74.2 mmol) 및 아세토나이트릴(150 mL)의 혼합물을 환류 온도에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 용매를 감압 하에 제거하여 화합물 197a를 황색 고체(4.1 g, 54%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 309.
실시예 197b: 3급-부틸 4-(5-아미노피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트 197b
250 mL 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 197a(4.0 g, 13.0 mmol), 10% Pd/C(10% 습윤, 500 mg), 및 메탄올(130 mL)을 넣었다. 이 플라스크를 배기하고, 수소 가스를 넣고, 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 197b(3.3 g, 91%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 279
실시예 197c: 3급-부틸 4-(5-(6-브로모-4-메틸-3-옥소-3,4-다이하이드로피라진-2-일아미노)피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트 197c
화합물 197b(500 mg, 1.8 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피라진-2(1H)-온(530 mg, 2.0 mmol), N-에틸-N-아이소프로필프로판-2-아민(1.5 mL, 0.90 mmol), 및 프로판-2-올(20 mL)의 혼합물을 100℃에서 15시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 용매를 감압 하에 제거하여 화합물 197c(375 mg, 45%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 465.
실시예 197d: 5-브로모-1-메틸-3-(6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일아미노)-피라진-2(1H)-온 197d
다이클로로메탄(10 mL) 중의 화합물 197c(500 mg, 1.08 mmol)의 용액에 4.0 M HCl/다이옥산(10 mL)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하여 화합물 197d(358 mg, 91%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 365.
실시예 197e: 5-브로모-1-메틸-3-(6-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-3-일아미노)피라진-2(1H)-온 197e
메탄올(30 mL) 중의 화합물 197d(0.75 g, 2.1 mmol), 옥세탄-3-온(0.24 mL, 4.2 mmol), NaBH3CN(0.32 g, 5.1 mmol), 및 아연 클로라이드/다이에틸 에터(5.1 mL, 5.1 mmol)의 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 197e(550 mg, 64%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 421.
실시예 197f: (4-(4-메틸-6-(6-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-3-일아미노)-5-옥소-4,5-다이하이드로피라진-2-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 197f
Figure pat00272
환류 응축기가 장착된 환저 플라스크에 화합물 197e(200 mg, 0.48 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(364 mg, 0.95 mmol), PdCl2(dppf)(40 mg, 0.049 mmol), K3PO4 3H2O(250 mg, 0.95 mmol), 나트륨 아세테이트(80 mg, 0.95 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 197f(230 mg, 70%)를 적색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 680
실시예 197: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[4-메틸-6-[[6-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-3-피리딜]아미노]-5-옥소-피라진-2-일]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 197
THF(9 mL), i-프로판올(6 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 197f(200 mg, 0.30 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(70 mg, 3.0 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 물(4 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하고, 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 197(59 mg, 30%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 638. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.30 (s, 1 H), 8.70 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 8.14-8.11 (m, 1 H), 7.59 (s, 1 H), 7.55 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 6.82 (d, J = 9.5 Hz, 1 H), 6.58 (s, 1 H), 4.93 (t, J = 5.5 Hz, 1 H), 4.60-4.54 (m, 3 H), 4.48-4.42 (m, 3 H), 4.26-4.08 (m, 3 H), 3.86 (d, J = 12.0 Hz, 1 H), 3.54 (s, 3 H), 3.44-3.40 (m, 중첩, 5 H), 2.66-2.53 (m, 2 H), 2.46-2.47 (m, 2 H), 2.35-2.33 (m, 4 H), 1.80-1.68 (m, 4 H).
실시예 198a: 4-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(4-옥소-7,8,9,10-테트라하이드로피리다지노[4,5-a]인돌리진-3(4H)-일)니코틴알데하이드 198a
Figure pat00273
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 4-클로로-2-(4-옥소-7,8,9,10-테트라하이드로피리다지노[4,5-a]인돌리진-3(4H)-일)니코틴알데하이드 192c(118 mg, 0.36 mmol), 1-메틸-3-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일-아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 101l(171 mg, 0.36 mmol), Na2CO3(78 mg, 0.72 mmol), Pd(dppf)Cl2(30 mg, 0.036 mmol), DMF(10 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 이 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 50℃에서 10시간 동안 N2 보호 하에 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 198a(93 mg, 40%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 634.3.
실시예 198: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,8,9,10-테트라하이드로피리다지노[4,5-a]인돌리진-4-온 198
메탄올(4 mL) 중의 화합물 198a(80 mg, 0.13 mmol)의 용액에 NaBH4(14 mg, 0.39 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 증발시키고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 198(38 mg, 43%)을 회백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 636.4. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.54 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.88 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.50 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.39-7.36 (m, 1H), 7.25-7.23 (m, 1H), 4.67 (bs, 1H), 4.55 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.46 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.33-4.31 (m, 2H), 4.26-4.20 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.46-3.41 (m, 1H), 3.09-3.03 (m, 6H), 2.39-2.37 (m, 4H), 2.04-1.96 (m, 2H), 1.93-1.86 (m, 2H).
실시예 199a: 이미다조[1,2-a]피리미딘-7-아민 199a
Figure pat00274
에탄올(90 mL) 및 수성 NaHCO3(2M, 20 mL) 중의 피리미딘-2,4-다이아민(3.0 g, 0.027 mol)의 용액에 2-클로로아세트알데하이드(4.3 g, 0.055 mol)를 가했다. 이 혼합물을 70℃에서 밤새도록 교반하였다. TLC는 출발 물질의 소진을 나타내었다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 에틸 아세테이트(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(1:5)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 199a(2.2 g, 60%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 135.1.
실시예 199b: 5-브로모-3-(이미다조[1,2-a]피리미딘-7-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 199b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 환저 플라스크에 화합물 199a(2.2 g, 16.4 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(8.77 g, 32.8 mmol), Pd2dba3(1.5 g, 1.64 mmol), 잔트포스(1.88 g, 3.28 mmol), Cs2CO3(10.7 g. 32.8 mmol) 및 1,4-다이옥산(150 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, 이어서 N2로 재충전하였다. 이어서, 이를 환류 온도에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 완료 후에, 이 혼합물을 여과하고, 고체를 메탄올(60 mL)로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 증발시키고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 199b를 연녹색 고체(1.63 g, 31%)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 320.1
실시예 199c: 10-[4-클로로-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일]-4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 199c
Figure pat00275
자석 교반기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 0℃에서 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(9.0 g, 26.1 mmol, 1.0 당량), 메탄올(50 mL), 다이클로로메탄(30 mL), 및 NaBH4(5.95 g, 156.6 mmol, 5.0 당량)를 넣었다. 이 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 이 반응물을 물로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:4)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 199c를 백색 고체(7.0 g, 77%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 345.9.
실시예 199d: (4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로-[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 199d
자석 교반기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 199c(7.0 g, 20.2 mmol, 1.0 당량), 트라이에틸아민(4.08 g, 40.4 mmol, 2.0 당량), 및 THF(50 mL)를 넣었다. 이 혼합물에 THF(20 mL) 중의 아세틸 클로라이드(2.36 g, 30.3 mmol, 1.5 당량) 용액을 적가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 이를 빙수로 켄칭하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 에틸 아세테이트/석유(1:8)로 세척하여, 화합물 199d를 백색 고체(5.9 g, 76%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 388.3.
실시예 199e: {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6] 도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 199d(4.5 g, 1.0 당량, 11.6 mmol), Pin2B2(7.38 g, 2.5 당량, 29.0 mmol), PdCl2(dppf)(473 mg, 0.05 당량, 0.58 mmol), 잔트포스(470 mg, 0.1 당량, 1.16 mmol), 칼륨 아세테이트(3.41 g, 3.0 당량, 34.8 mmol), 및 다이옥산(100 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 65℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 조질물 199e를 갈적색 액체(4.0 g, 순도: 65%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 398.3.
실시예 199f: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[5-({이미다조[1,2-a]피리미딘-7-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 199f
환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 199b(500 mg, 1.5 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이-사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(1200 mg, 3.0 mmol), Pd(dppf)Cl2(65 mg, 0.075 mmol), K3PO4(650 mg, 3.0 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(420 mg, 3.0 mmol), 물(6 방울) 및 아세토나이트릴(20 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 199f(240 mg, 40%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 593.4.
실시예 199: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-(이미다조[1,2-a]피리미딘-7-일아미노)-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 199
i-프로판올/THF(5:3, 8 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 199f(180 mg, 0.30 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(130 mg, 3.0 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 잔사를 물(3 mL)로 희석시켰다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 199(40 mg, 30 %)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 551.3. 1H NMR (500 MHz, CHCl3) δ 9.09 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.13 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.38 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.47 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.10 (s, 1H), 4.67-4.50 (m, 2H), 4.32-4.18 (m, 3H), 3.93-3.88 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 2.60-2.58 (m, 2H), 2.52 (s, 2H), 1.28 (s, 6H).
실시예 200a: 3급-부틸 4-(6-나이트로피리딘-3-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트 200a
Figure pat00276
아세토나이트릴(100 mL) 및 물(5 mL) 중의 5-브로모-2-나이트로피리딘(2.0 g, 9.7 mmol), 3급-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(3.0 g, 9.7 mmol), Pd(dppf)Cl2(792 mg, 0.97 mmol), K3PO4.3H2O(5.2 g, 19.4 mmol), 및 나트륨 아세테이트(1.59 g, 19.4 mmol)의 혼합물을 배기하고, 이어서 N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 80℃에서 6시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:5)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 200a를 황색 고체(2.2 g, 74%)로서 수득하였다.
실시예 200b: 3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트 200b
500 mL 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 200a(2.5 g, 8.2 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 300 mg), 및 메탄올(80 mL)을 넣었다. 이 플라스크를 배기하고, 수소 가스를 넣고, 실온에서 수소 분위기 하에 12시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 200b(1.8 g, 78%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 278.1
실시예 200c: 3급-부틸 4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트 200c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 200b(2.0 g, 7.2 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.9 g, 7.2 mmol), 세슘 카보네이트(4.7 g, 14.4 mmol) 및 1,4-다이옥산(50 mL)을 넣었다. 생성 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 잔트포스(418 mg, 0.72 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(661 mg, 0.72 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 6시간 동안 가열하였다. 이시간 이후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(120 mL)과 물(60 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(3 x 80 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:4)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 200c(2.0 g, 61%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 463.2
실시예 200d: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 200d
화합물 200c(1.0 g, 2.3 mmol) 및 4 M HCl/다이옥산(10 mL)의 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 수성 나트륨 하이드록사이드로 염기성화시키고, 다이클로로메탄으로 추출하였다. 합친 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여 화합물 200d(650 mg, 84%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 363.0
실시예 200e: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(1-(옥세탄-3-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 200e
메탄올(20 mL) 중의 화합물 200d(500 mg, 1.4 mmol), 옥세탄-3-온(298 mg, 4.2 mmol), NaBH3CN(261 mg, 4.2 mmol), 및 에톡시에탄(4 mL, 4.2 mmol) 중의 1 mol/L 아연 클로라이드의 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 이 반응물에 가하고, 생성 혼합물을 다이클로로메탄(3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 200e(450 mg, 78%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 419.1
실시예 200f: (4-(1-메틸-5-(5-(1-(옥세탄-3-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 200f
환류 응축기가 장착된 환저 플라스크에 화합물 200e(300 mg, 0.72 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(414 mg, 1.08 mmol), PdCl2(dppf)(57 mg, 0.070 mmol), K3PO4 3H2O(560 mg, 2.16 mmol), 나트륨 아세테이트(177 mg, 2.16 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 200f를 적색 고체(324 mg, 68%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 676.2
실시예 200: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[1-(옥세탄-3-일)-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-4-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 200
THF(9 mL), 아이소프로판올(6 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 200f(260 mg, 0.39 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(92.4 mg, 3.85 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 추출하고, 감압 하에 농축하고, 물(4 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하고, 합친 C 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 200(53.1 mg, 20%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 634.2. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.76 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.74 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 8.24 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.73-7.71 (m, 1 H), 7.54 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 7.36 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 7.30 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 6.58 (s, 1 H), 6.11 (s, 1 H), 4.97 (s, 1 H), 4.57 (t, J = 6.5 Hz, 2 H), 4.38-4.49 (m, 4 H), 4.08-4.26 (m, 3 H), 3.86 (d, J = 12.0 Hz, 1 H), 3.61 (s, 3 H), 3.54-3.45 (m, 1 H), 2.95 (s, 2 H), 2.68-2.54 (m, 2 H), 2.48-2.46 (m, 중첩, 6 H),1.83-1.75 (m, 2 H), 1.73-1.65 (m, 2 H).
실시예 201a: 5-브로모-3-(이미다조[1,2-a]피리딘-7-일아미노)-1-메틸피라진-2(1H)-온 201a
Figure pat00277
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 이미다조[1,2-a]피리딘-7-아민(665 mg, 5.0 mmol), Cs2CO3(3.26 g, 10 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피라진-2(1H)-온(1.86 g, 7.0 mmol), 잔트포스(289 mg, 0.50 mmol), Pd2(dba)3(458 mg, 0.50 mmol), 및 1, 4-다이옥산(30 mL)을 넣었다. 이 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 100℃에서 질소 분위기 하에 16시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 출발 물질이 거의 남아 있지 않음을 나타내었다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 다이클로로메탄(60 mL) 및 물(50 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(60/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 201a(700 mg, 44%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 320
실시예 201b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[6-({이미다조[1,2-a]피리딘-6-일}아미노)-4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로피라진-2-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 201b
환류 응축기기 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 201a(64 mg, 0.20 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(160 mg, 0.40 mmol), Pd(dppf)Cl2(10 mg, 0.012 mmol), K3PO4(100 mg, 0.39 mmol), NaOAc·3H2O(60 mg, 0.44 mmol), 물(6 방울) 및 아세토나이트릴(5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 동안 교반하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 201b(40 mg, 34%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 593.2.
실시예 201: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[6-(이미다조[1,2-a]피리딘-6-일아미노)-4-메틸-5-옥소-피라진-2-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 201
i-프로판올/THF(3:2, 5 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 201b(40 mg, 0.067 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(25 mg, 0.60 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 201(10 mg, 30%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 551.3. 1H NMR (500 MHz, CHCl3) δ 9.58 (s, 1H), 8.58 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.73 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.63-7.61 (m, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.13-7.11 (m, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.19-5.17 (m, 1H), 4.77-4.75 (m, 1H), 4.57-4.42 (m, 2H), 4.20-4.17 (m, 2H), 3.92-3.90 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.60-2.53 (m, 4H), 1.29 (s, 6H).
실시예 202a: 4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(4-옥소-7,8,9,10-테트라하이드로피리다지노[4,5-a]인돌리진-3(4H)-일)니코틴알데하이드 202a
Figure pat00278
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 4-클로로-2-(4-옥소-7,8,9,10-테트라하이드로피리다지노[4,5-a]인돌리진-3(4H)-일)니코틴알데하이드 192c(200 mg, 0.60 mmol), 1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 135a(230 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트(100 mg, 1.2 mmol), K3PO4(320 mg, 1.2 mmol), PdCl2(dppf)(50 mg, 0.060 mmol), 아세토나이트릴(25 mL) 및 물(1 mL)을 가했다. 이 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 100℃에서 3시간 동안 N2 보호 하에 가열하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 202a(205 mg, 62%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 552.3.
실시예 202: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,8,9,10-테트라하이드로피리다지노[4,5-a]인돌리진-4-온 202
메탄올(25 mL) 중의 화합물 202a(180 mg, 0.33 mmol)의 용액에 NaBH4(37 mg, 0.99 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하고, 물로 켄칭하였다. 이어서, 이를 감압 하에 증발시키고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 202(120 mg, 66%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 554.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.53 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.45 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.65 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.34-4.32 (m, 2H), 4.26-4.20 (m, 2H), 3.93-3.91 (m, 2H), 3.58 (s, 3H), 3.49 (s, 2H), 3.06-3.04 (m, 2H), 2.79-2.77 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.04-1.96 (m, 2H), 1.93-1.86 (m, 2H).
실시예 203a: 5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로티아졸로[5,4-c]피리딘-2-아민 203a
Figure pat00279
2-프로판올(80 mL) 중의 1-메틸-4-피페리돈(11.3 g, 100 mmol)의 용액을 50℃로 가열하였다. 이 용액에 2-프로판올(25 mL) 중의 사이안아마이드(4.2 g, 100 mmol)의 용액 및 황 분말(3.2 g, 100 mmol)을 순차적으로 가했다. 촉매량의 피롤리딘(1.3 mL)을 첨가한 후에, 생성 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 밤새도록 교반하였다. 이어서, 이를 빙수 욕에서 10℃ 이하로 냉각하고, 1시간 동안 동일 온도에서 교반하였다. 침전된 결정을 여과에 의해 수집하고, 2-프로판올(20 mL)로 세척하였다. 습윤 결정을 진공에서 건조시켜 화합물 203a(10 g, 59%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 170. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 6.70 (s, 2H), 3.31 (s, 2H), 2.61 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.45 (m, 2H), 2.33 (s, 3H).
실시예 203b: 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 203b
화합물 191g에 대해 기재된 절차를 따라 화합물 203a(4.0 g, 23.5 mmol) 및 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(3.0 g, 17.8 mmol)으로부터 출발하여 화합물 203b를 황색 고체(2.8 g, 44%)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 357.
실시예 203c: 10-[3-(아세톡시메틸)-4-[1-메틸-5-({5-메틸-4H,5H,6H,7H-[1,3]티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-2-일]-4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 203c
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 203b(178 mg, 0.50 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(200 mg, 0.50 mmol), K3PO4(212 mg, 1.0 mmol), 나트륨 아세테이트(82 mg, 1.0 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센-다이클로로팔라듐(II)(21 mg, 0.025 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 100℃에서 N2 보호 하에 1시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를 다이클로로메탄(20 mL) 및 물(10 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(2 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 203c(135 mg, 43%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 584
실시예 203: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-6,7-다이하이드로-4H-티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 203)
THF/i-프로판올/물(5/2/2 mL) 중의 화합물 203c(140 g, 0.22 mmol)의 용액에 실온에서 LiOH(54 mg, 2.2 mmol)를 가했다. 이 반응물을 1시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 그 후, 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 물(3 mL)로 희석시켰다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 203(85 mg, 66%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 586. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.95 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.11-5.09 (m, 1H), 4.67-4.64 (m, 1H), 4.52 (bs, 1H), 4.30-4.28 (m, 1H), 4.16 (d, J = 4.5 Hz, 2H), 3.89-3.86 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.60 (s, 2H), 2.84-2.81 (m, 4H), 2.58 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.52 (s, 2H), 1.28 (s, 6H).
실시예 204a: 4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피리다지노[4,5-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 204a
Figure pat00280
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 4-클로로-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피리다지노[4,5-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 193f(200 mg, 0.60 mmol), 1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로-[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 135a(230 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트(100 mg, 1.2 mmol), K3PO4(320 mg, 1.2 mmol), PdCl2(dppf)(50 mg, 0.060 mmol), 아세토나이트릴(25 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 생성 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 204a(185 mg, 55%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H] + 552.3.
실시예 204: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-6,7,8,9-테트라하이드로피리다지노[4,5-b]인돌리진-1-온 204)
메탄올(20 mL) 중의 화합물 204a(160 mg, 0.29 mmol)의 용액에 NaBH4(33.0 mg, 0.87 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하고, 물로 켄칭하였다. 이어서, 이를 감압 하에 증발시키고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 204(120 mg, 75%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H] + 554.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.09 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.73 (bs, 1H), 4.30 (s, 2H), 4.27-4.25 (m, 2H), 3.93-3.91 (m, 2H), 3.58 (s, 3H), 3.49 (s, 2H), 2.95-2.93 (m, 2H), 2.78-2.76 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.04-1.99 (m, 2H), 1.88-1.83 (m, 2H).
실시예 205a: 2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 205a
Figure pat00281
자석 교반기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 THF(35 mL) 및 수성 암모니아(135 mL, 25-28%) 중의 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸 125c(3.0 g, 9.64 mmol)를 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 72시간 동안 질소 하에 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 에틸 아세테이트(100 mL)와 물(100 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 10% 칼륨 카보네이트(2 x 100 mL), 염수(200 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과로 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 205a를 황색 고체(1.23 g, 76%)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 169
실시예 205b: 3급-부틸 2-나이트로-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-카복실레이트 205b
THF(20 mL) 중의 화합물 205a(504 mg, 3.0 mmol)의 용액에 (Boc)2O(785 mg, 3.60 mmol) 및 DMAP(74 mg, 0.60 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 그 후, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 205b를 백색 고체(750 mg, 80%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 269.3
실시예 205c: 3급-부틸 2-아미노-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-카복실레이트 205c
100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 205b(0.75 g, 2.80 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 280 mg), 및 메탄올(30 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 배기하고, 수소 가스를 넣고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 205c(524 mg, 79%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 239.1
실시예 205d: 3급-부틸 2-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-카복실레이트 205d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 205c(524 mg, 2.2 mmol), Pd2(dba)3(201 mg, 0.22 mmol), 잔트포스(254 mg, 0.44 mmol), 세슘 카보네이트(1434 mg, 4.4 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 205d(600 mg, 70%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 424.2
실시예 205e: 3급-부틸 2-(5-(3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일)-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-카복실레이트 205e
자석 교반기가 장착된 밀봉된 튜브에 화합물 205d(213 mg, 0.50 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(192 mg, 0.50 mmol), Pd(dppf)Cl2(41 mg, 0.050 mmol), 나트륨 아세테이트(82 mg, 1.0 mmol), K3PO4(212 mg, 1.0 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 205e(280 mg, 82%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 683.3
실시예 205f: (4-(1-메틸-6-옥소-5-(4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 205f
화합물 205e(280 mg, 0.41 mmol), 4.0 M HCl/다이옥산(4 mL), 및 다이클로로메탄(4 mL)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하여 화합물 205f를 황색 고체(165 mg, 66%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 583.3.
실시예 205: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-6-옥소-5-(4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 205
i-프로판올/THF(1:1, 4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 205f(165 mg, 0.28 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(67 mg, 2.80 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 물(4 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(10 mL X 2)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 205(70 mg, 46%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 541.2. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.35 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.64-4.61 (m, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.16-3.99 (m, 6H), 3.89-3.87 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.30 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.63-2.57 (m, 4H), 1.92-1.89 (m, 2H), 1.80-1.78 (m, 3H).
실시예 206a: 3급-부틸 3-요오도아제티딘-1-카복실레이트 206a
Figure pat00282
톨루엔(200 mL) 중의 3급-부틸 3-하이드록시아제티딘-1-카복실레이트(3.5 g, 0.020 mol)의 용액을 이미다졸(4.08 g, 0.060 mol), 트라이페닐포스핀(0.60 g, 0.040 mol), 및 요오딘(7.62 g, 0.030 mol)으로 처리하였다. 이 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 포화된 NaHCO3 용액(30 mL)에 부었다. 과량의 트라이페닐포스핀을, 유기 층에 요오딘 색상이 지속될 때까지 요오딘을 첨가하여 파괴하였다. 이 혼합물을 5% Na2SO3 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 진공에서 증발시켰다. 잔사를 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 206a(5.31 g, 93%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 284.
실시예 206b: 3급-부틸 3-(6-나이트로피리딘-3-일옥시)아제티딘-1-카복실레이트 206b
DMF(8 mL) 중의 화합물 206a(2.24 g, 7.9 mmol), 6-나이트로피리딘-3-올(1.0 g, 7.2 mmol), 및 Cs2CO3(2.6 g, 7.9 mmol)의 혼합물을 125℃에서 밀봉된 튜브 내에서 밤새도록 가열하였다. 고체를 여과시키고, 에틸 아세테이트(2 X 20 mL)로 세척하였다. 합친 여액을 진공에서 증발시키고, 잔사를 역상 콤비플래쉬 상에서 정제하여, 화합물 206b(1.25 g, 59%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 296.
실시예 206c: 3급-부틸 3-(6-아미노피리딘-3-일옥시)아제티딘-1-카복실레이트 206c
100 mL 파(Parr) 수소화 보틀을 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 206b(1.07 g, 3.6 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 0.30 g), 및 메탄올(60 mL)을 넣었다. 상기 보틀을 배기하고, 수소 가스를 25 psi의 압력으로 넣고, 2시간 동안 파 수소화 장치에서 진탕시켰다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 보틀에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 206c(0.95 g, 99%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 266.
실시예 206d: 3급-부틸 3-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일옥시)아제티딘-1-카복실레이트 206d
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 화합물 206c(950 mg, 3.6 mmol), 잔트포스(125 mg, 0.29 mmol), Pd2dba3(260 mg, 0.29 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.03 g, 3.9 mmol), Cs2CO3(1.8 g, 7.2 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이어서, 이를 환류 온도에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 완료 후에, 이 혼합물을 여과하고, 메탄올(100 mL)로 세척하였다. 합친 여액을 진공에서 증발시키고, 잔사를 역상 콤비플래쉬 상에서 정제하여, 화합물 206d(1.46 g, 90%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 451.
실시예 206e: 3-(5-(아제티딘-3-일옥시)피리딘-2-일아미노)-5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 하이드로클로라이드 206e
메탄올(20 mL) 중의 화합물 206d(1.46 g, 3.2 mmol) 및 HCl/1,4-다이옥산(3.2 mL, 4M, 12.8 mmol)의 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 이 혼합물을 감압 하에 농축하여 화합물 206e(1.24 g, 99%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 351.
실시예 206f: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(1-메틸아제티딘-3-일옥시)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 206f
메탄올(10 mL) 중의 화합물 206e (1.24 g, 3.2 mmol), 37% 수성 폼알데하이드 용액(15 mL), 아세트산(1 mL), 및 NaBH(OAc)3(1.36 g, 6.4 mmol)의 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 진공에서 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(3 X 20 mL)로 추출하였다. 합친 추출물을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 콤비플래쉬 상에서 정제하여, 화합물 206f(940 mg, 80%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 365.
실시예 206g: (4-(1-메틸-5-(5-(1-메틸아제티딘-3-일옥시)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 206g
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL) 중의 화합물 206f(108 mg, 0.30 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(115 mg, 0.30 mmol), Pd(dppf)Cl2(15 mg, 0.015 mmol), K3PO4(135 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(90 mg, 0.60 mmol)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 206g(90 mg, 52%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 624.2.
실시예 206: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(1-메틸아제티딘-3-일)옥시-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 206)
THF/i-프로판올(5:3, 8 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 206g(93.6 mg, 0.15 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(65 mg, 1.5 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 물(3 mL)로 희석시켰다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 206(35 mg, 42%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 582.3. 1H NMR (500 MHz, CHCl3) δ 8.62 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.76 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.12-7.10 (m, 1H), 6.90 (s, 1H), 6.81-6.80 (m, 1H), 5.07-5.04 (m, 1H), 4.77 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.64-4.62 (m, 1H), 4.52-4.50 (m, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 4.16-4.10 (m, 2H), 3.97-3.88 (m, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.25-3.24 (m, 2H), 2.63-2.57 (m, 4H), 2.51 (s, 3H), 1.93-1.91 (m, 2H), 1.80-1.79 (m, 2H).
실시예 207a: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-[(1-메틸아제티딘-3-일)옥시]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소피리딘-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 207a
Figure pat00283
환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(5-(1-메틸아제티딘-3-일옥시)피리딘-2-일아미노)-피리딘-2(1H)-온 206f(108 mg, 0.40 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자-트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(240 mg, 0.60 mmol), Pd(dppf)Cl2(20 mg, 0.02 mmol), K3PO4(180 mg, 0.80 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(120 mg, 0.80 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 207a(100 mg, 45%)를 황갈색 고체로서 수득하였다. LCMS-ESI: [M+H]+ 638.4.
실시예 207: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(1-메틸아제티딘-3-일)옥시-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 207)
THF/i-프로판올(5:3, 8 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 207a(90 mg, 0.15 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(65 mg, 1.5 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 물(4 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(2 X 20 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 207(30 mg, 38%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 596.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.61 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.51 (d, J=5.0 Hz, 1H), 7.86-7.83 (m, 2H), 7.77 (d, J=3.0 Hz, 1H), 7.37 (d, J=5.0 Hz, 1H), 7.12-7.10 (m, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.81 (d, J=3.5 Hz, 1H), 5.07-5.04 (m, 1H), 4.74-4.64 (m, 2H), 4.52-4.51 (m, 1H), 4.34-4.32 (m, 1H), 4.17-4.16 (m, 2H), 3.88-3.87 (m, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.17-3.16 (m, 2H), 2.58 (d, J=5.5 Hz, 2H), 2.52 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.28 (s, 6H).
실시예 208a: 5-에틸-2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 208a
Figure pat00284
자석 교반기가 장착된 150 mL 1구 환저 플라스크에 메탄올(60 mL), 2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 205a(1.5 g, 8.9 mmol), ZnCl2(2.43 g, 17.8 mmol), 아세트알데하이드(784 mg, 17.8 mmol), 및 NaBH3CN(1.12 g, 17.8 mmol)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 208a(1.4 g, 81%)를 황색 오일로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 197
실시예 208b: 5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 208b
50 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 208a(1.4 g, 7.1 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 208 mg), 메탄올(30 mL), 및 수소 가스를 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 수소 분위기 하에 2시간 동안 교반하였다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 208b(1.0 g, 84%)를 황색 오일로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 167
실시예 208c: 5-브로모-3-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 208c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 208b(1.0 g, 6.0 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.6 g, 6.0 mmol), Pd2(dba)3(274 mg, 0.30 mmol), 잔트포스(347 mg, 0.60 mmol), 세슘 카보네이트(3.9 g, 12.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(50 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 208c(630 mg, 29%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 352
실시예 208d: 3-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 208d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(20 mL), 화합물 208c(350 mg. 0.99 mmol), 비스(피나콜레이토) 이붕소(1.31 g, 4.99 mmol), Pd2(dba)3(45 mg, 0.050 mmol), 잔트포스(58 mg, 0.10 mmol), 및 칼륨 아세테이트(291 mg, 2.97 mmol)를 넣었다. 이 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 90℃에서 3시간 동안 가열하였다. 그 후, 이를 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를 석유 에터로 세척하여, 화합물 208d(120 mg, 30%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 400.2
실시예 208e: 4-(5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 208e
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 208d(120 mg, 0.30 mmol), 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도-[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 139a(99 mg, 0.30 mmol), PdCl2(dppf)(13 mg, 0.015 mmol), K3PO4(127 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트(49 mg, 0.60 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 208e(95 mg, 56%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 567.2.
실시예 208: 2-[4-[5-[(5-에틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1-온 208)
0℃에서 메탄올(10 mL) 중의 화합물 208e(95 mg, 0.16 mmol)의 혼합물에 나트륨 보로하이드라이드(19 mg, 0.50 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 물(2.0 mL)로 켄칭하였다. 이어서, 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 208(8 mg, 9%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 569.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 2.0 Hz, 1H, 7.70 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.30 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.30 (s, 1H), 5.71 (s, 1H), 4.93-4.96 (m, 1H), 4.63-4.61 (m, 1H), 4.42-4.26 (m, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.94-3.81 (m, 3H), 3.69-3.68 (m, 중첩, 5H), 3.06-2.90 (m, 4H), 2.81 (d, J = 3.0 Hz, 2H), 2.66 (d, J = 3.5 Hz, 2H), 2.04-2.00 (m, 2H), 1.88-1.85 (m, 2H), 1.20 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
실시예 209a: 1-(2-나이트로-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-일)에탄온 209a
Figure pat00285
다이클로로메탄(20 mL) 중의 2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 205a(672 mg, 4.0 mmol)의 용액에 아세틸 클로라이드(936 mg, 12.0 mmol) 및 K2CO3(1104 mg, 8.0 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 밤새도록 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 209a를 백색 고체(500 mg, 60%)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 211.2
실시예 209b: 1-(2-아미노-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-일)에탄온 209b
50 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 209a(492 mg, 2.34 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 234 mg), 및 메탄올(20 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 배기하고, 수소 가스를 넣고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 209b(380 mg, 80%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 181.1
실시예 209c: 3-(5-아세틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 209c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(481 mg, 1.8 mmol), 화합물 209b(270 mg, 1.5 mmol), 1,4-다이옥산(20 mL), Pd2(dba)3(137 mg, 0.15 mmol), 잔트포스(173 mg, 0.30 mmol), 및 세슘 카보네이트(978 mg, 3.0 mmol)를 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 6시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 209c(540 mg, 89%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 368.0
실시예 209d: 3-(5-아세틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 209d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 209c(365 mg, 1.0 mmol), Pin2B2(1.26 g, 5.0 mmol), Pd2(dba)3(91 mg, 0.10 mmol), 잔트포스(92 mg, 0.20 mmol), AcOK(294 mg, 3.0 mmol), 및 다이옥산(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 209d를 갈색 고체(330 mg, 80%)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 414.2
실시예 209e: (4-(5-(5-아세틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 209e
자석 교반기가 장착된 밀봉된 튜브에 화합물 209d(185 mg, 0.50 mmol), (4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노-[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 113h(192 mg, 0.50 mmol), Pd(dppf)Cl2(41 mg, 0.050 mmol), 나트륨 아세테이트(82 mg, 1.0 mmol), K3PO4(212 mg, 1.0 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 209e(150 mg, 48%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 625.4
실시예 209: 2-[4-[5-[(5-아세틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 209)
i-프로판올/THF(1:1, 4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 209e(150 mg, 0.24 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(58 mg, 2.4 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 물(4 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 209(75 mg, 53%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 583.3. 1H NMR (500 MHz, T=80℃, DMSO-d6) δ 8.44 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.93-7.90 (m, 2H), 7.34 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.98 (s, 1H), 4.72-4.63 (m, 3H), 4.45-4.43 (m, 2H), 4.16-4.10 (m, 3H), 3.99-3.86 (m, 중첩, 5H), 3.58 (s, 3H), 2.62-2.57 (m, 2H), 2.49-2.47 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.83-1.77 (m, 2H), 1.72-1.68 (m, 2H).
실시예 210a: 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로-[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카복실산 210a
Figure pat00286
4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(500 mg, 1.46 mmol), 3급-부틸 알코올(20 mL), 및 다이클로로메탄(5 mL)의 혼합물에 2-메틸-2-부텐(3066 mg, 43.8 mmol)을 가했다. NaClO2(263 mg, 2.92 mmol) 및 NaH2PO4·2H2O(683 mg, 4.38 mmol)의 수성 용액(8 mL)을 -10℃에서 적가하고, 이 반응 혼합물을 -10℃에서 밤새도록 교반하였다. 이를 감압 하에 농축하고, 잔사를 에틸 아세테이트(4 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고, 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 210a(315 mg, 60%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 360.1
실시예 210b: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-카복실산 210b
환류 응축기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 화합물 210a(400 mg, 1.1 mmol), (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 191j(536 mg, 1.1 mmol), PdCl2(dppf)(81 mg, 0.11 mmol), K3PO4(466 mg, 2.2 mmol), 나트륨 아세테이트(216 mg, 2.2 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.2 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 석유/에틸 아세테이트(1:3)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 210b를 황색 고체(306 mg, 41%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 679.3
실시예 210: 2-(7,7-다이메틸-4-옥소-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-3-일)-4-[1-메틸-5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]피리딘-3-카복스아마이드 210)
25 mL 환저 플라스크에 화합물 210b(300 mg, 0.44 mmol), 트라이에틸아민(1 mL), DMAP(5 mg, 0.040 mmol), HATU(250 mg, 0.66 mmol), 및 DMF(10 mL)를 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그 후, 37% 수성 암모니아(15 mL)를 천천히 가하고, 이 반응물을 실온에서 추가로 2.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 화합물 20 mL 물로 처리하고, 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로써 정제하여, 화합물 210(98 mg, 33%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 678.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.71 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.84 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.45-7.42 (m, 2H), 7.38-7.36 (m, 1H), 7.24-7.22 (m, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.57-4.54 (m, 2H), 4.48-4.47 (m, 1H), 4.43-4.40 (m, 1H), 4.12-4.11 (m, 2H), 4.04-4.00 (m, 2H), 3.67-3.66 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.42-3.37 (m, 1H), 3.10-3.08 (m, 1H), 2.97-2.92 (m, 1H), 2.55-2.53 (m, 3H), 2.41 (s, 2H), 2.36-2.29 (m, 2H), 2.21-2.18 (m, 1H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.0 Hz, 3H)
실시예 211: 2-(7,7-다이메틸-4-옥소-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-3-일)-N-메틸-4-[1-메틸-5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]피리딘-3-카복스아마이드 211)
환저 플라스크에 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-카복실산 210b(300 mg, 0.44 mmol), 트라이에틸아민(1 mL), DMAP(5 mg, 0.040 mmol), HATU(250 mg, 0.66 mmol), 및 DMF(10 mL)를 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그 후, CH3NH2(27 mg, 0.88 mmol)를 천천히 가하고, 이 반응물을 실온에서 추가로 2.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(20 mL)로 처리하고, 다이클로로메탄(20 mL x 3)으로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 211(106 mg, 35%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 692.5. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.71 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.11-8.08 (m, 1H), 7.86 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.44-7.41 (m, 2H), 7.38-7.35 (m, 1H), 7.24-7.22 (m, 1H), 6.48 (s, 1H), 4.58-4.56 (m, 2H), 4.48-4.46 (m, 1H), 4.43-4.41 (m, 1H), 4.08-4.07 (m, 2H), 3.97-3.94 (m, 2H), 3.66-3.65 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.41-3.39 (m, 1H), 3.10-3.08 (m, 1H), 2.97-2.93 (m, 1H), 2.56 (s, 2H), 2.53-2.48 (m, 중첩, 4H), 2.37-2.36 (m, 2H), 2.35-2.31 (m, 2H), 2.29-2.19 (m, 1H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 212a: {4-[5-({5-아세틸-4H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소피리딘-3-일]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]-도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일}메틸 아세테이트 212a
Figure pat00287
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 3-(5-아세틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 209c(185 mg, 0.50 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(200 mg, 0.50 mmol), Pd(dppf)Cl2(41 mg, 0.050 mmol), 나트륨 아세테이트(82 mg, 1.0 mmol), K3PO4(212 mg, 1.0 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 212a(180 mg, 56%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 639.3
실시예 212: 3-[4-[5-[(5-아세틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 212)
i-프로판올/THF(1:1, 4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 212a(180 mg, 0.28 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(67 mg, 2.8 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 물(4 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 212(70 mg, 42%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 597.3. 1H NMR (500 MHz, T=80℃, DMSO-d6) δ 8.47 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.37 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.66 (bs, 2H), 4.47 (s, 2H), 4.20-4.18 (m, 3H), 4.00-3.99 (m, 3H), 3.92-3.88 (m, 3H), 3.61 (s, 3H), 2.59 (s, 2H), 2.46 (s, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.25 (s, 6H).
실시예 213a: 5-브로모-1-메틸-3-(2-메틸피리미딘-4-일아미노)피리딘-2(1H)-온 213a
Figure pat00288
실시예 196에 기재된 절차에 따라, 2-메틸피리미딘-4-아민(2.0 g, 18.3 mmol) 및 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(9.6 g, 36 mmol)을 반응시켜 화합물 213a를 황색 고체(2.3 g, 43.4%)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 295. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.20 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.26 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.18 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.52 (s, 3H).
실시예 213b: 1-메틸-3-(2-메틸피리미딘-4-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 213b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 비스(피나콜레이토) 이붕소(689 mg, 2.61 mmol), 1,4-다이옥산(30 mL), 화합물 213a(307 mg, 1.04 mmol), Pd2(dba)3(47 mg, 0.050 mmol), 잔트포스(48 mg, 0.10 mmol), 및 칼륨 아세테이트(305 mg, 3.12 mmol)를 넣었다. 이 혼합물을 65℃에서 6시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켜 화합물 213b(300 mg, 84%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 342.2
실시예 213c: 2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(2-메틸피리미딘-4-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드 213c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(150 mg, 0.43 mmol), 화합물 213b(147 mg 0.43 mmol), Pd(dppf)Cl2(35 mg, 0.043 mmol), 나트륨 아세테이트(71 mg, 0.86 mmol), K3PO4(182 mg, 0.86 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(15 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 이 반응물을 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 213c를 황색 고체(130 mg, 57%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 528.2.
실시예 213: 10-플루오로-2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(2-메틸피리미딘-4-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 213
0℃에서 메탄올(10 mL) 중의 화합물 213c(120 mg, 0.23 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(26 mg, 0.69 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 20분 동안 교반하고, 물(10 mL)로 켄칭하였다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하고, 합친 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 213(62 mg, 44 %)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 530.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.11 (s, 1H), 8.93 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.96 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.57-4.45 (m, 2H), 4.23-4.18 (m, 2H), 4.08-4.05 (m, 1H), 3.90-3.87 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.64-2.56 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.43-2.42 (m, 2H), 1.78-1.76 (m, 2H), 1.72-1.66 (m, 2H).
실시예 214a: 3-브로모-5-요오도피리딘-2-올 214a
Figure pat00289
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 아세토나이트릴(50 mL), 트라이플루오로아세트산(10 mL), 3-브로모피리딘-2-올(4.0 g, 11.56 mmol) 및 N-요오도석신이미드(5.2 g, 11.56 mmol)를 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(100 mL)로 희석하고, 생성 백색 고체를 여과로 수집하여, 화합물 214a(6.6 g, 96%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 300
실시예 214b: 3-브로모-5-요오도-1-메틸피리딘-2(1H)-온 214b
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 DMF(50 mL), 화합물 214a(6.0 g, 20.0 mmol), 요오도메탄(4.26 g, 30.0 mmol), 및 K2CO3(5.52 g, 40.0 mmol)를 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 물(200 mL)로 희석하였다. 생성 백색 고체를 여과로 수집하여, 화합물 214b(5.97 g, 95%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 314
실시예 214c: [4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 214c
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 214b(1.57 g, 5.0 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]-도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(1.98 g, 5.0 mmol), PdCl2(dppf)(205 mg, 0.25 mmol), K3PO4(2.12 g, 10.0 mmol), 나트륨 아세테이트(820 mg, 10.0 mmol), 아세토나이트릴(45 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 30℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 214c(580 mg, 22%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 539.2. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 5.15 (s, 2H), 4.55-4.51 (m, 1H), 4.27-4.25 (m, 1H), 4.15-4.13 (m, 1H), 4.06-4.04 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 2.58-2.56 (m, 2H), 2.51 (s, 2H), 1.86 (s, 3H), 1.28 (s, 6H).
실시예 214d: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-6-옥소-5-({4H,6H,7H-피라노[4,3-d][1,3]티아졸-2-일}아미노)-1,6-다이하이드로-피리딘-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 214d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(10 mL), 화합물 214c(150 mg, 0.28 mmol), Pd2(dba)3(27 mg, 0.030 mmol), 잔트포스(35 mg, 0.060 mmol), 및 세슘 카보네이트(183 mg, 0.56 mmol)를 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플래쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 10시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 214d(89 mg, 52%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 615.2
실시예 214: 3-[4-[5-(6,7-다이하이드로-4H-피라노[4,3-d]티아졸-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 214)
화합물 214d(89 mg, 0.14 mmol), 리튬 하이드록사이드(35 mg, 1.45 mmol), 및 물/THF/i-프로판올(3 mL /5 mL /5 mL)의 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 214(45 mg, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 573.2. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.01 (s, 1H), 8.67 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.59 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.96-4.94 (m, 1H), 4.61 (s, 2H), 4.46-4.43 (m, 2H), 4.22-4.17 (m, 3H), 3.89-3.87 (m, 3H), 3.61 (s, 3H), 2.62-2.57 (m, 4H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 215a: 3-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-5-{1-메틸-5-[(2-메틸피리미딘-4-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-4-카브알데하이드 215a
Figure pat00290
밀봉된 튜브에 3-브로모-5-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로-[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-피리딘-4-카브알데하이드 107f(210 mg, 0.54 mmol), 1-메틸-3-(피리미딘-4-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2-온 213b(177 mg, 0.54 mmol), PdCl2(dppf)(42 mg, 0.050 mmol), K3PO4(210 mg, 1.0 mmol), 및 나트륨 아세테이트(85 mg, 1.0 mmol), 아세토나이트릴(8 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 215a(150 mg, 53%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 524.2.
실시예 215: 3-[4-(하이드록시메틸)-5-[1-메틸-5-[(2-메틸피리미딘-4-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-3-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 215
메탄올(5 mL) 중의 화합물 215a(150 mg, 0.28 mmol) 및 NaBH4(20 mg, 0.50 mmol)의 혼합물을 25℃에서 0.2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(5 mL)로 켄칭하고, 진공에서 증발시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 215(80 mg, 53%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 526.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.09 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.20 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.61(s, 1H), 7.13 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 5.19-5.18 (m, 1H), 4.47-4.46 (m, 2H), 4.23-4.20 (m, 3H), 3.95-3.93 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.57 (s, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.41 (s, 2H), 1.21 (s, 6H).
실시예 216a: 1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 216a
Figure pat00291
5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 203b(997 mg, 2.8 mmol)를 다이옥산(50 mL)에 용해시키고, 이어서 비스(피나콜레이토)이붕소(3.0 g, 12.0 mmol), Pd2(dba)3(128 mg, 0.14mmol), 잔트포스(134 mg, 0.28 mmol), 및 칼륨 아세테이트(823 mg, 8.4 mmol)를 가했다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 가압 하에 농축하고, 잔사를 석유 에터(2 x 10 mL)로 세척하여, 화합물 216a를 황색 고체(968 mg, 86%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 403.2
실시예 216b: 4-[1-메틸-5-({5-메틸-4H,6H,7H-[1,3]티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 216b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 환저 플라스크에 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a(138 mg, 0.40 mmol), 화합물 216a(240 mg, 0.60 mmol), PdCl2(dppf)(20 mg, 0.020 mmol), K3PO4(180 mg, 0.80 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(120 mg, 0.80 mmol), 물(6 방울) 및 아세토나이트릴(15 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 그 후, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시키고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 216b를 황색 고체(100 mg, 45%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 586.2.
실시예 216: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-6,7-다이하이드로-4H-티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-6,7,8,9-테트라하이드로벤조티오페노[2,3-d]피리다진-4-온 216)
메탄올(6 mL) 중의 화합물 216b(100 mg, 0.15 mmol)의 용액에 NaBH4(18 mg, 0.45 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하고, 염수(10 mL)로 켄칭하였다. 이어서, 이를 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 20 mL)으로 추출하고, 합친 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 216을 백색 고체(40 mg, 40%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 588.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.79 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.43-4.39 (m, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.57-3.55 (m, 2H), 3.00-2.98 (m, 2H), 2.88-2.86 (m, 2H), 2.82-2.80 (m, 4H), 2.50 (s, 3H), 2.03-1.95 (m, 4H).
실시예 217a: (4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 217a
Figure pat00292
자석 교반기가 장착된 밀봉된 튜브에 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(766 mg, 2.0 mmol), 3-브로모-5-요오도-1-메틸피리딘-2(1H)-온 214b(626 mg, 2.0 mmol), Pd(dppf)Cl2(164 mg, 0.20 mmol), 나트륨 아세테이트(328 mg, 4.0 mmol), K3PO4(848 mg, 4.0 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 217a(700 mg, 67%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 525.2
실시예 217b: (4-(5-(1H-이미다조[4,5-b]피리딘-5-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 217b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 217a(158 mg, 0.30 mmol), 1H-이미다조[4,5-b]피리딘-5-아민(80 mg, 0.60 mmol), Pd2(dba)3(27 mg, 0.030 mmol), 잔트포스(35 mg, 0.061 mmol), 세슘 카보네이트(200 mg, 0.60 mmol) 및 1,4-다이옥산(5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 6시간 동안 교반하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 217b(40 mg, 23%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 579.4
실시예 217: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-(1H-이미다조[4,5-b]피리딘-5-일아미노)-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 217
i-프로판올/THF(1:1, 4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 217b(40 mg, 0.070 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(26 mg, 0.70 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 잔사를 물 및 에틸 아세테이트로 희석하였다. 수 상을 분리하고, 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 217(15 mg, 40%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 537.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.62 (s, 1H), 8.91-8.64 (m, 2H), 8.52 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.19-8.06 (m, 1H), 7.89-7.79 (m, 1H), 7.57-7.53 (m, 1H), 7.43-7.40 (m, 1H), 7.22 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 5.06-4.96 (m, 1H), 4.5-4.40 (m, 2H), 4.26-4.11 (m, 3H), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.62-2.54 (m, 2H), 2.50-2.48 (m, 2H), 1.81-1.79 (m, 2H), 1.71-1.67 (m, 2H).
실시예 218a: 5-브로모-3-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 218a
Figure pat00293
무수 DMF(10 mL) 중의 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온(2.8 g, 9.9 mmol)의 용액을, 질소 하에 교반하면서 미네랄 오일 중의 NaH(0.51 g, 13 mmol)의 60% 분산액으로 처리하였다. 거품이 난 후에, 이 반응물을 추가로 30분 동안 교반하였다. 이 시점에서, 질소 하에 2시간 동안 계속 교반하면서 반응물을 요오도메탄(0.98 g, 7.0 mmol)으로 처리하였다. 물(50 mL)을 천천히 가하고, 이 혼합물을 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(3:1)로 용리하는 플러쉬 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 218a(0.70 g, 24%)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 297.
실시예 218b: (4-{5-[(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리딘-3-일}-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 218b
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 218a(130 mg, 0.44 mmol), (3-(아세톡시메틸)-2-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로-펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-2(6H)-일)피리딘-4-일)보론산 199e(175 mg, 0.44 mmol), PdCl2(dppf)(36 mg, 0.044 mmol), K3PO4(343 mg, 1.32 mmol), 나트륨 아세테이트(108 mg, 1.32 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 218b를 적색 고체(103 mg, 42%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 570.2
실시예 218: 3-[4-[5-[(1,5-다이메틸피라졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 218
화합물 218b(103 mg, 0.17 mmol), 리튬 하이드록사이드(42 mg, 1.75 mmol), THF(3 mL), i-프로판올(2 mL) 및 물(1 mL)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 물(4 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(10 mL X 2)으로 추출하고, 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 218(29 mg, 48%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 528.4. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 8.02 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 7.38 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.32 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 6.55 (s, 1 H), 5.89 (s, 1 H), 4.97 (s, 1 H), 4.48-4.39 (m, 2 H), 4.24-4.16 (m, 3 H), 3.86-3.84 (m, 1 H), 3.58 (s, 3 H), 3.57 (s, 3 H), 2.62-2.56 (m, 2 H), 2.42 (s, 2 H), 2.16 (s, 3 H), 1.22 (s, 6 H).
실시예 219a: 3-(3-아미노페닐아미노)-5-브로모-1-메틸피라진-2(1H)-온 219a
Figure pat00294
아이소프로판올(18 mL) 중의 3,5-다이브로모-1-메틸피라진-2(1H)-온(536 mg, 2.0 mmol) 및 벤젠-1,3-다이아민(324 mg, 3.0 mmol)의 용액에 트라이에틸아민(2.8 mL)을 가했다. 이 반응 혼합물을 80℃에서 밤새도록 교반하였다. 그 후, 이 혼합물을 감압 하에 증발시켜 화합물 219a(480 mg, 81%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 295.0
실시예 219b: (4-{6-[(3-아미노페닐)아미노]-4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로피라진-2-일}-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 219b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 219a(480 mg, 1.62 mmol), (3-(아세톡시메틸)-2-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-2(6H)-일)피리딘-4-일)보론산 199e(1.61 g, 4.05 mmol), Pd(dppf)Cl2(134 mg, 0.162 mmol), 칼륨 아세테이트(318 mg, 3.24 mmol), K3PO4(706 mg, 3.24 mmol), 아세토나이트릴(20 mL) 및 물(8 방울)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 219b(354 mg, 38%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 568.3
실시예 219: 3-[4-[6-(3-아미노아닐리노)-4-메틸-5-옥소-피라진-2-일]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 219
i-프로판올/THF(1:1, 8 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 219b(283.5 mg, 0.50 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·일수화물(630 mg, 15.0 mmol)의 혼합물을 35℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 잔사를 물(3 mL)로 희석시켰다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 219(170 mg, 79%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 526.4. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.85 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.92-6.91 (m, 2H), 6.57(s, 1H), 6.24-6.22 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.84-4.75 (m, 2H), 4.49-4.46 (m, 1H), 4.30-4.26 (m, 1H), 4.20-4.19 (m, 2H), 3.95-3.92 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 2.62-2.54 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.23 (s, 6H).
실시예 220a: (S)-2-클로로-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드 220a
Figure pat00295
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 191j(1.5 g, 1.0 당량, 3.11 mmol), 4-브로모-2-클로로니코틴알데하이드 104a(1.02 g, 1.5 당량, 4.67 mmol), PdCl2(dppf)(130 mg, 0.05 당량, 0.16 mmol), K3PO4(1.32 g, 2 당량, 6.22 mmol), 나트륨 아세테이트(510 mg, 2.0 당량, 6.22 mmol), 아세토나이트릴(35 mL) 및 물(1.0 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/에탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 220a(1.1 g, 71%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 495.3.
실시예 220b: (S)-2-(3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드 220b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 220a(300 mg, 1.0 당량, 0.61 mmol), 1,2,3,4,6,7,8,9-옥타하이드로피라지노[1,2-a]인돌(128 mg, 1.2 당량, 0.73 mmol), Pd2(dba)3(55 mg, 0.1 당량, 0.060 mmol), 잔트포스(30 mg, 0.1 당량, 0.060 mmol), Cs2CO3(390 mg, 2.0 당량, 1.22 mmol), 및 다이옥산(15.0 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/EtOH(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 220b(100 mg, 26%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 635.3.
실시예 220: 5-[2-(3,4,6,7,8,9-헥사하이드로-1H-피라지노[1,2-a]인돌-2-일)-3-(하이드록시메틸)-4-피리딜]-1-메틸-3-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]피리딘-2-온 220)
50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 220b(100 mg, 1.0 당량, 0.15 mmol), NaBH4(30 mg, 5.0 당량, 0.75 mmol), 메탄올(5 mL), 및 다이클로로메탄(5 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하고, 물(5 mL)로 켄칭하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 표제 화합물(10 mg, 10%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 637.5. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.24 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.39-7.36 (m, 1H), 7.24 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.55 (s, 1H), 5.36-5.35 (m, 1H), 4.57-4.54 (m, 2H), 4.48-4.40 (m, 6H), 3.92-3.90 (m, 2H), 3.79-3.67 (m, 3H), 3.59 (s, 3H), 3.40-3.37 (m, 2H), 3.09-3.07 (m, 1H), 2.95-2.92 (m, 1H), 2.55-2.51 (m, 2H), 2.38-2.30 (m, 4H), 2.17-2.16 (m, 1H), 1.75-1.74 (m, 2H), 1.68-1.65 (m, 2H), 0.92 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 221a: 3-[(6-아미노피리딘-2-일)아미노]-5-브로모-1-메틸-1,2-다이하이드로피리딘-2-온 221a
Figure pat00296
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(20 mL), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.06 g, 4.0 mmol), 피리딘-2,6-다이아민(872 mg, 8.0 mmol), Pd2(dba)3(732 mg, 0.80 mmol), 잔트포스(462.4 mg, 0.80 mmol), 및 세슘 카보네이트(2.6 g, 8.0 mmol)를 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 110℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 221a(570 mg, 48%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 295.0
실시예 221b: (4-{5-[(6-아미노피리딘-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 221b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 221a(354 mg, 1.2 mmol), (3-(아세톡시메틸)-2-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-2(6H)-일)피리딘-4-일)보론산 199e(1.20 g, 3.0 mmol), Pd(dppf)Cl2(99 mg, 0.12 mmol), 칼륨 아세테이트(235 mg, 2.4 mmol), K3PO4(532 mg, 2.4 mmol), 아세토나이트릴(12 mL) 및 물(10 방울)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 221b(210 mg, 31%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 568.3
실시예 221: 3-[4-[5-[(6-아미노-2-피리딜)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 221
i-프로판올/THF(1:1, 6 mL) 및 물(1.5 mL) 중의 화합물 221b(181 mg, 0.32 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·일수화물(148 mg, 3.2 mmol)의 혼합물을 35℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 221(82 mg, 49%)을 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 526.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.84 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.57(s, 1H), 6.36 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.91 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.79 (bs, 2H), 5.07 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.58-4.47 (m, 2H), 4.27-4.20 (m, 3H), 3.90 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.60 (s, 3H), 2.62-2.57 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 222a: N-(5-클로로-2-메톡시피리딘-3-일)-2-메틸피리미딘-4-아민 222a
Figure pat00297
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(30 mL), 3-브로모-5-클로로-2-메톡시피리딘(865 mg, 3.9 mmol), 2-메틸피리미딘-4-아민(327 mg, 3.0 mmol), Pd2(dba)3(275 mg, 0.30 mmol), 잔트포스(173.4 mg, 0.30 mmol), 및 세슘 카보네이트(1.96 g, 6.0 mmol)를 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(5:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 222a(555 mg, 74%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 251.0
실시예 222b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{6-메톡시-5-[(2-메틸피리미딘-4-일)아미노]피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 222b
자석 교반기가 장착된 밀봉된 튜브에 화합물 222a(550 mg, 2.2 mmol), (3-(아세톡시메틸)-2-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로-[1,2-a]피라진-2(6H)-일)피리딘-4-일)보론산 199e(2.18 g, 5.5 mmol), Pd2(dba)3(201 mg, 0.22 mmol), 트라이사이클로헥실포스핀(84 mg, 0.30 mmol), Cs2CO3(1.43 g, 4.4 mmol), 다이옥산(12 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 110℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 222b(310 mg, 25%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 568.6
실시예 222c: 10-[3-(하이드록시메틸)-4-{6-메톡시-5-[(2-메틸피리미딘-4-일)아미노]피리딘-3-일}피리딘-2-일]-4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 222c
i-프로판올/THF(1:1, 10 mL) 및 물(2.5 mL) 중의 화합물 222b(283.5 mg, 0.50 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·일수화물(630 mg, 15.0 mmol)의 혼합물을 35℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 잔사를 물(3 mL)로 희석시켰다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 감압 하에 농축하여 화합물 222c(240 mg, 92%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 526.2
실시예 222: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[(2-메틸피리미딘-4-일)아미노]-6-옥소-1H-피리딘-3-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 222
다이옥산(8 mL) 중의 화합물 222c(226 mg, 0.43 mmol)의 용액에 진한 HCl(1.1 mL)을 가했다. 이 반응물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 포화된 수성 NaHCO3을 도입하여 이 혼합물을 pH 7.0로 조정하였다. 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하고, 합친 추출물을 감압 하에 증발시켰다. 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 222(30 mg, 14%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 512.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.24 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.96 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 5.08-5.06 (m, 1H), 4.50-4.42 (m, 2H), 4.25-4.19 (m, 3H), 3.87-3.85 (m, 1H), 2.62-2.53 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.43 (s, 2H), 1.23 (s, 3H), 1.22 (s, 3H)
실시예 223a: 2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드 223a
Figure pat00298
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 1-메틸-3-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라-메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 216a(200 mg, 0.50 mmol), 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(174 mg, 0.50 mmol), K3PO4(212 mg, 1.0 mmol), 나트륨 아세테이트(82mg, 1.0 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(21 mg, 0.025 mmol), 및 아세토나이트릴/물(15/1 mL)을 넣었다. 이 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 100℃에서 1시간 동안 N2 보호 하에 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(50 mL) 및 물(50 mL)로 희석하였다. 수성 층을 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(70/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 223a(167 mg, 57%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 588.1
실시예 223: 10-플루오로-2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-6,7-다이하이드로-4H-티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 223
화합물 223a(160 mg, 0.27 mmol)를 메탄올(30 mL)에 용해시키고, 이어서 0℃에서 NaBH4(31 mg, 082 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 이어서 물(10 mL)로 켄칭하였다. 이를 감압 하에 농축하고, 잔사를 다이클로로메탄(3 X 30 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 상을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 223(56 mg, 35%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 590.2. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 9.92 (s,1H), 8.64 (d, J = 2.5 Hz,1H), 8.48 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.93 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.46-4.41 (m, 2H), 4.19-4.17 (m, 2H), 4.08-4.03 (m, 1H), 3.88-3.85 (m, 1H ), 3.60 (s, 3H), 3.42 (s, 2H), 2.63-2.58 (m, 6H), 2.41(s, 3H), 2.34 (s, 2H), 1.78-1.76 (m, 2H), 1.68-1.66 (m, 2H).
실시예 224a: (S)-3급-부틸 4-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 224a
Figure pat00299
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 (S)-3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 191f(2.5 g, 8.5 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(2.2 g, 10.0 mmol), 잔트포스(240 mg, 0.40 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(360 mg, 0.40 mmol), Cs2CO3(5.5 g, 17 mmol) 및 1,4-다이옥산(100 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 224a를 연황색 고체(3.2 g, 86%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 435.1.
실시예 224b: (S)-6-클로로-2-메틸-4-(5-(2-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 224b
화합물 224a(3.0 g, 6.9 mmol) 및 4.0M HCl/에탄올(20 mL)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 혼합물을 감압 하에 농축하여 조질물 224b를 황색 고체(2.5 g, 98%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 335.1.
실시예 224c: (S)-6-클로로-2-메틸-4-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 224c
메탄올(20 mL) 중의 화합물 224b(2.3 g, 6.8 mmol), 옥세탄-3-온(1.4 g, 20.0 mmol), NaBH3CN(620 mg, 10 mmol), 및 아연 클로라이드(1.36 g, 10 mmol)의 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(40 mL)에 가하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 유기 층을 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 224c(2.0 g, 75%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 391.2.
실시예 224d: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 224d
자석 교반기가 장착된 밀봉된 튜브에 화합물 224c(200 mg, 0.50 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(240 mg, 0.60 mmol), Pd(dppf)Cl2(18 mg, 0.025 mmol), 나트륨 아세테이트(74 mg, 0.90 mmol), K3PO4(191 mg, 0.90 mmol), 및 아세토나이트릴/물(6:1, 3.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시키고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 224d(180 mg, 51%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 708.3.
실시예 224: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-피리다진-3-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 224
i-프로판올/THF(5/3 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 224d(180 mg, 0.25 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(72 mg, 3.0 mmol)의 혼합물을 35℃에서 0.2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(10 mL X 2)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 물/아세토나이트릴 중의 0.3% NH4HCO3로 용리하는 역상 콤비플러쉬로 정제하여, 화합물 224(54 mg, 33%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 666.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.29 (s, 1H), 8.52 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.43-7.42 (m, 2H), 7.40-7.39 (m, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.77-4.75 (m, 1H), 4.57-4.55 (m, 3H), 4.48-4.47 (m, 1H), 4.43-4.41 (m, 2H), 4.28-4.26 (m, 1H), 4.19-4.18 (m, 2H), 3.88-3.86 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.38-3.37 (m, 1H), 3.21-3.19 (m, 1H), 2.98-2.96 (m, 1H), 2.64-2.62 (m, 1H), 2.58-2.56 (m, 2H), 2.42-2.41 (m, 3H), 2.26-2.25 (m, 1H), 2.11-2.09 (m, 1H), 1.21 (s, 6H), 0.98 (d, J = 5.5 Hz, 3H).
실시예 225a: 6-클로로-2-메틸-4-(2-메틸피리미딘-4-일아미노)피리다진-3(2H)-온 225a
Figure pat00300
환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 2-메틸피리미딘-4-아민(330 mg, 3.03 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(675 mg, 3.03 mmol), Pd2(dba)3(274 mg, 0.30 mmol), 잔트포스(143 mg, 0.30 mmol), Cs2CO3(2960 mg, 9.09 mmol), 및 다이옥산(40 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 밤새도록 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 225a 황색 고체(560 mg, 73%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 252.1
실시예 225b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(2-메틸피리미딘-4-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 225b
환류 응축기가 장착된 환저 플라스크에 화합물 225a(200 mg, 0.80 mmol), (3-(아세톡시메틸)-2-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-2(6H)-일)피리딘-4-일)보론산 199e(318 mg, 0.80 mmol), PdCl2(dppf)(65.3 mg, 0.080 mmol), K3PO4(624 mg, 2.4 mmol), 나트륨 아세테이트(200 mg, 2.4 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 225b를 적색 고체(150 mg, 47%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 569.3
실시예 225: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(2-메틸피리미딘-4-일)아미노]-6-옥소-피리다진-3-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 225
화합물 225b(120 mg, 0.21 mmol), 리튬 하이드록사이드(59 mg, 2.11 mmol), THF(6 mL), i-프로판올(4 mL) 및 물(2 mL)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 물(3 mL)로 희석시켰다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 225를 백색 고체(29 mg, 48%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 527.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.82 (s, 1 H), 8.88 (s, 1 H), 8.54 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 8.37 (d, J = 6.0 Hz, 1 H), 7.44 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 7.34 (d, J = 3.5 Hz, 1 H), 6.56 (d, J = 4.0 Hz, 1 H), 4.87 (t, J = 1.5 Hz, 1 H), 4.67 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 4.42 (d, J = 12.5 Hz, 1 H), 4.29-4.25 (m, 1 H), 4.20 (bs, 2 H), 3.93 (d, J = 9.5 Hz, 1 H), 3.81 (s, 3 H), 2.62-2.58 (m, 2 H), 2.50-2.49 (m, underneath solvent peak, 2H), 2.40 (s, 3 H), 1.22 (s, 6 H).
실시예 226a: 6-클로로-2-메틸-4-({5-[(모폴린-4-일)카보닐]피리딘-2-일}아미노)-2,3-다이하이드로피리다진-3-온 226a
Figure pat00301
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(40 mL), (6-아미노피리딘-3-일)(모폴리노)메탄온 111a(2.07 g, 10.0 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(3.35 g, 15.0 mmol), Pd2(dba)3(915 mg, 1.0 mmol), 잔트포스(578 mg, 1.0 mmol), 및 세슘 카보네이트(6.52 g, 20 mmol)를 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 8시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 20 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여 화합물 226a(2.45 g, 51%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 350.1
실시예 226b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-[(모폴린-4-일)카보닐]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 226b
자석 교반기가 장착된 밀봉된 튜브에 화합물 226a(279 mg, 0.80 mmol), (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일) 메틸 아세테이트 199e(1.53 g, 3.2 mmol), Pd2(dba)3(73.2 mg, 0.080 mmol), 트라이사이클로헥실-포스핀(44.6 mg, 0.16 mmol), 세슘 카보네이트(521.6 mg, 1.6 mmol), 1,4-다이옥산(10 mL) 및 물(8 방울)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 110℃에서 4시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 226b를 황색 고체(120 mg, 23%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 667.3
실시예 226: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(모폴린-4-카보닐)-2-피리딜]아미노]-6-옥소-피리다진-3-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 226
i-프로판올/THF/물(3 mL /3 mL /2 mL) 중의 화합물 226b(120 mg, 0.18 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·일수화물(227 mg, 5.4 mmol)의 혼합물을 35℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 잔사를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 226을 백색 고체(53 mg, 47%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 625.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.54 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.79-7.77 (m, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.60-4.57 (m, 1H), 4.40-4.37 (m, 1H), 4.27-4.25 (m, 1H), 4.20-4.17 (m, 2H), 3.91-3.88 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.60-3.45 (m, 중첩, 8H), 2.62-2.56 (m, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 227a: {4-[1-메틸-5-({5-[(모폴린-4-일)카보닐]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일]-2-{1-옥소-1H,2H,3H,4H,6H,7H,8H,9H-피라지노[1,2-a]인돌-2-일}피리딘-3-일}메틸 아세테이트 227a
Figure pat00302
자석 교반기가 장착된 밀봉된 튜브에 6-클로로-2-메틸-4-({5-[(모폴린-4-일)카보닐]피리딘-2-일}아미노)-2,3-다이하이드로피리다진-3-온 226a(244 mg, 0.70 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(558 mg, 1.5 mmol), Pd2(dba)3(64 mg, 0.070 mmol), 트라이사이클로헥실포스핀(39 mg, 0.14 mmol), 세슘 카보네이트(456 mg, 1.4 mmol), 1,4-다이옥산(7 mL) 및 물(6 방울)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 110℃에서 4시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 227a를 황색 고체(290 mg, 63%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 653.3
실시예 227: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(모폴린-4-카보닐)-2-피리딜]아미노]-6-옥소-피리다진-3-일]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 227
i-프로판올/THF/물(4 mL /4 mL /2 mL) 중의 화합물 227a(131 mg, 0.20 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·1H2O(120 mg, 2.0 mmol)의 혼합물을 35℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 잔사를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 227을 백색 고체(75 mg, 62%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 611.2. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.54 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.79-7.77 (m, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.60-4.57 (m, 1H), 4.38-4.36 (m, 1H), 4.29-4.19 (m, 2H), 4.10-4.05 (m, 1H), 3.93-3.90 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.60-3.50 (m, 중첩, 8H), 2.66-2.54 (m, 2H), 2.48-2.46 (m, 2H), 1.81-1.66 (m, 4H).
실시예 228a: (S)-(4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피라진-2-일-아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 228a
Figure pat00303
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 (S)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온(90 mg, 0.21 mmol) 191i, 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(80.4 mg, 0.21 mmol), Pd(dppf)Cl2(17.2 mg, 0.021 mmol), K3PO4(89 mg, 0.42 mmol), 나트륨 아세테이트(57.1 mg, 0.42 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(30 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 환류 온도에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 228a를 갈색 고체(60 mg, 42%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 694.3.
실시예 228: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피라진-2-일]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 228
i-프로판올/THF(1:1, 4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 228a(50 mg, 0.070 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(43 mg, 1.8 mmol)의 혼합물을 35℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 228(10 mg, 21%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 652.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (s, 1H), 8.48 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.94 (bs, 1H), 4.56-4.55 (m, 2H), 4.49-4.47 (m,1H), 4.42-4.36 (m, 중첩, 4H) 4.25-4.17 (m, 2H), 4.13-4.10 (m, 1H), 3.86-3.76 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.39-3.37 (m, 1H), 3.01-2.96 (m, 1H), 2.78-2.76 (m, 1H), 2.62-2.57(m, 중첩, 3H), 2.50-2.47 (m, 2H), 2.10-2.07 (m, 1H), 1.94-1.90 (m, 1H), 1.80-1.78 (m, 2H), 1.70-1.69 (m, 2H), 1.12 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 229a: 2-에틸피리미딘-4-아민 229a
Figure pat00304
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 2-클로로피리미딘-4-아민(2.60 g, 20.0 mmol), 트라이에틸보란(20.0 mL, THF 중의 1.0 M, 20.0 mmol), Pd(dppf)Cl2(816 mg, 1.0 mmol), K3PO4(13.0 g, 40.0 mmol), 물(2 mL), 및 테트라하이드로퓨란(50 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 환류 온도에서 14시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 229a를 황색 고체(600 mg, 24%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 124.3
실시예 229b: 5-브로모-3-(2-에틸피리미딘-4-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 229b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 229a(246 mg, 2.0 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(534 mg, 2.0 mmol), Pd2(dba)3(182 mg, 0.20 mmol), 잔트포스(231 mg, 0.40 mmol), Cs2CO3(1.30 g, 4.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 229b를 회백색 고체(308 mg, 50%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 309.1
실시예 229c: (2'-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로펜타-[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-2(6H)-일)-5-((2-에틸피리미딘-4-일)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4'-bi피리딘]-3'-일)메틸 아세테이트 229c
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 화합물 229b(277 mg, 0.90 mmol), (3-(아세톡시메틸)-2-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-2(6H)-일)피리딘-4-일)보론산 199e(358 mg, 0.90 mmol), Pd(dppf)Cl2(74 mg, 0.090 mmol), K3PO4(381 mg, 1.80 mmol), 물(2 mL), 및 테트라하이드로퓨란(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 환류 온도에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/ 메탄올(60:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 229c를 백색 고체(291 mg, 50%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 582.4
실시예 229: 3-[4-[5-[(2-에틸피리미딘-4-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 229
테트라하이드로퓨란(10 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 229c(291 mg, 0.45 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(48 mg, 2.0 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 229(165 mg, 61%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 540.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.12 (s, 1H), 8.96 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.00 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.55-4.44 (m, 2H), 4.26-4.19 (m, 중첩, 3H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.62(s, 3H), 2.74 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 2.59-2.54 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22-1.20 (m, 중첩, 9H).
실시예 230a: (S)-3급-부틸 4-(5-브로모피라진-2-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 230a
Figure pat00305
(S)-3급-부틸 3-메틸피페라진-1-카복실레이트(6.0 g, 30 mmol) 및 2,5-다이브로모피라진(14.1 g, 60 mmol)의 혼합물을 80℃에서 15시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 석유 에터/에틸 아세테이트(10:1 내지 2:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 230a를 황색 고체(1.14 g, 19%)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 359.1.
실시예 230b: (S)-3급-부틸 4-(5-(다이페닐메틸렌아미노)피라진-2-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 230b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 230a(2.6 g, 7.3 mmol), 다이페닐메탄이민(1.3 g, 7.3 mmol), Pd2(dba)3(669 mg, 0.73 mmol), (R)-(+)-2,2'-비스(다이페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸(968 mg, 1.46 mmol), Cs2CO3(4.7 g, 14.6 mmol) 및 1,4-다이옥산(40 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 96℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(10:1 내지 3:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 230b를 적색 오일(3.3 g, 75 %)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 458.3.
실시예 230c: (S)-3급-부틸 4-(5-아미노피라진-2-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 230c
메탄올(25 mL) 중의 화합물 230b(3.3 g, 7.2 mmol)의 용액에 나트륨 아세테이트(708 mg, 8.6 mmol) 및 하이드록실아민 하이드로클로라이드(907 mg, 8.6 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 진공에서 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 230c를 황색 오일(1.35 g, 64%)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 294.3.
실시예 230d: (S)-3급-부틸 4-(5-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피라진-2-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 230d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 230c(1.25 g, 4.3 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(3.4 g, 12.9 mmol), Pd2(dba)3(394 mg, 0.43 mmol), 잔트포스(497 mg, 0.86 mmol), Cs2CO3(4.7 g, 14.6 mmol) 및 1,4-다이옥산(80 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 230d(1.9 g, 72 %)를 수득하였다. MS: [M+H]+ 481.2.
실시예 230e: (S)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸피페라진-1-일)피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 230e
화합물 230d(1.9 g, 3.97 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(4 mL)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하여 조질물 230e(1.45 g, 97 %)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS: [M+H]+ 381.2.
실시예 230f: (S)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 230f
메탄올(60 mL) 중의 화합물 230e(2.0 g, 5.3 mmol), 옥세탄-3-온(763 mg, 10.6 mmol), NaBH3CN(835 mg, 13.3 mmol), 및 아연 클로라이드(1.8 g, 13.3 mmol)의 혼합물을 50℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사에 물을 가하고, 생성 혼합물을 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 유기 층을 이어서 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 230f를 황색 오일(1.6 g, 70%)로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 437.2.
실시예 230g: 5-[4-클로로-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일]-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-6-온 230g
Figure pat00306
4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트린-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a(797 mg, 2.31 mmol), NaBH4(263 mg, 6.92 mmol), 및 CH3OH(50 mL)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 물(30 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 30 mL)으로 추출하고, 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 5:1로 용리하는 실리카-겔 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 230g(649 mg, 81%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 348.1
실시예 230h: (4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트리엔-5-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 230h
환저 플라스크에 화합물 230g(597 mg, 1.72 mmol), 다이클로로메탄(50 mL), 및 트라이에틸아민(5 mL)을 넣었다. 그 용액을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하고, 아세틸 클로라이드(135 mg, 1.72 mmol)를 천천히 가했다. 이 혼합물을 0℃에서 추가로 2.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(9:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 230h(602 mg, 90%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 390.1
실시예 230i: 4-(다이하이드록시보란일)-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로-[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 230i
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 230h(595 mg, 1.53 mmol), Pin2B2(1.94 g, 7.65 mmol), PdCl2(dppf)(65 mg, 0.080 mmol), 잔트포스(73 mg, 0.15 mmol), 칼륨 아세테이트(304 mg, 3.1 mmol), 및 다이옥산(50 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 65℃에서 5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 석유 에터로 세척하여, 화합물 230i(409 mg, 67%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 400.1
실시예 230j: {4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피라진-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-일}메틸 아세테이트 230j
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 230f(100 mg, 0.23 mmol), 화합물 230i(140 mg, 0.35 mmol), Pd(dppf)Cl2(19 mg, 0.023 mmol), 나트륨 아세테이트(63 mg, 0.46 mmol), K3PO4(98 mg, 0.46 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각한 후 이 반응물을 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 230j를 황색 고체(90 mg, 55%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 710.2.
실시예 230: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피라진-2-일]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-6,7,8,9-테트라하이드로벤조티오페노[2,3-d]피리다진-4-온 230
i-프로판올/THF(1:1, 10 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 230j(80 mg, 0.11 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(27 mg, 1.1 mmol)의 혼합물을 35℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 230(34 mg, 45%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 668.2. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (s, 1H), 8.56 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.40 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.34 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.53 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.84 (bs, 1H), 4.58-4.54 (m, 2H), 4.50-4.47 (m, 1H), 4.43-4.36 (m, 중첩, 4H), 3.78-3.75 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.39-3.35 (m, 1H), 3.02-3.0 (m, 1H), 2.98-2.95 (m, 2H), 2.90-2.82 (m, 2H), 2.78-2.76 (m, 1H), 2.60-2.56 (m, 1H), 2.10-2.09 (m, 1H), 1.95-1.88 (m, 중첩, 5H), 1.10 (d, J = 8.0 Hz, 3H).
실시예 231a: 2-(4-클로로-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-10-플루오로-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1(2H)-온 231a
Figure pat00307
4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(800 mg, 2.31 mmol), NaBH4(263 mg, 6.92 mmol), 및 메탄올(50 mL)의 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 물(30 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 30 mL)으로 추출하고, 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(5:1)로 용리하는 실리카-겔 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 231a(650 mg, 81%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 340.1
실시예 231b: (4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 231b
환저 플라스크에 화합물 231a(600 mg, 1.72 mmol), 다이클로로메탄(50 mL), 및 트라이에틸아민(5 mL)을 넣었다. 그 용액을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하고, 아세틸 클로라이드(135 mg, 1.72 mmol)를 천천히 가했다. 이 혼합물을 0℃에서 추가로 2.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(9:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 231b(605 mg, 90%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 392.1
실시예 231c: 3-(아세톡시메틸)-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a] 인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 231c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 231b(600 mg, 1.53 mmol), Pin2B2(1.94 g, 7.65 mmol), PdCl2(dppf)(65 mg, 0.080 mmol), 잔트포스(73 mg, 0.15 mmol), 칼륨 아세테이트(304 mg, 3.1 mmol), 및 다이옥산(30 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 65℃에서 5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 석유 에터로 세척하여, 화합물 231c(412 mg, 67%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 402.1
실시예 231d: (S)-(2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 231d
Figure pat00308
환류 응축기가 장착된 환저 플라스크에 화합물 231c(200 mg, 0.50 mmol), (S)-6-클로로-2-메틸-4-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 224c(195 mg, 0.50 mmol), PdCl2(dppf)(24 mg, 0.030 mmol), K3PO4(212 mg, 1.0 mmol), 나트륨 아세테이트(98 mg, 1.0 mmol), 아세토나이트릴(30 mL) 및 물(3 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 석유/에틸 아세테이트(1:3)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 231d를 황색 고체(213 mg, 60%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 712.3
실시예 231: 10-플루오로-2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-피리다진-3-일]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 231
i-프로판올/THF(1:1, 10 mL) 및 물(3 mL) 중의 화합물 231d(150 mg, 0.21 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(51 mg, 2.1 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 231(83 mg, 59%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 670.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.29 (s, 1H), 8.53 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.43-7.40 (m, 3H), 4.76 (bs, 1H), 4.60-4.54 (m, 3H), 4.49-4.46 (m, 1H), 4.43-4.37 (m, 2H), 4.21-4.56 (m, 2H), 4.07-4.03 (m, 1H), 3.89-3.83 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.41-3.37 (m, 1H), 3.22-3.19 (m, 1H), 3.00-2.93 (m, 1H), 2.65-2.60 (m, 2H), 2.55-2.54 (m, 1H), 2.43-2.39 (m, 3H), 2.27-2.24 (m, 1H), 2.12-2.07 (m, 1H), 1.76-1.66 (m, 4H), 0.97 (d, J = 9.0 Hz, 3H).
실시예 232a: 2-나이트로-5-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리딘 232a
Figure pat00309
HCl/다이옥산(20 mL, 4M) 중의 3급-부틸 4-(6-나이트로피리딘-3-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트 200a(2.0 g, 6.6 mmol)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트(3 X 7 mL)로 세척하여, 화합물 232a를 황색 고체(1.0 g, 74%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 206.
실시예 232b: 5-(1-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-2-나이트로피리딘 232b
CH3OH(25 mL) 중의 화합물 232a(1.2 g, 5.8 mmol)의 용액에 HCHO(1 mL, 35 mmol) 및 아세트산(1 mL)을 가하고, 이어서 NaBHCN3(1.0 g, 12 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 증발시키고, 잔사를, 물/아세토나이트릴 중의 0.3% NH4HCO3로 용리하는 역상 콤비플러쉬로 정제하여, 화합물 232b를 황색 고체(1.0 g, 78%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 220.
실시예 232c: 5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-아민 232c
250 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 232b(2.0 g, 9.0 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 200 mg), 및 메탄올(40 mL)을 넣었다. 상기 플라스크를 배기하고, 수소 가스를 넣고, 수소 하에 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 232c(1.6 g, 92.5%)를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 192
실시예 232d: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 232d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 232c(1.5 g, 7.9 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(2.0 g, 7.9 mmol), 세슘 카보네이트(5.0 g, 16 mmol) 및 1,4-다이옥산(50 mL)을 넣었다. 30분 동안 생성 현탁액에 질소를 버블링시킨 후에, 잔트포스(455 mg, 0.79 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(718 mg, 0.79 mmol)를 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(100 mL)와 물(100 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(3 X 20 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:3)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 232d를 갈색 고체(1.5 g, 50%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 377.
실시예 232e: (4-(1-에틸-5-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 232e
환류 응축기가 장착된 환저 플라스크에 화합물 232d(160 mg, 0.40 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(191 mg, 0.50 mmol), Pd(dppf)Cl2(20 mg, 0.024 mmol), K3PO4(180 mg, 0.80 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(120 mg, 0.80 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/CH3OH(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 232e를 황색 고체(180 mg, 55%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 636.3
실시예 232: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(1-메틸-4-피페리딜)-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 232
THF/i-프로판올(6:3, 9 mL) 및 물(3 mL) 중의 화합물 232e(180 mg, 0.30 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(130 mg, 3.0 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(2 X 20 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 232(55 mg, 35 %)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 594.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.72 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.44-7.36 (m, 2H), 6.90 (s, 1H), 6.80-6.78 (m, 1H), 5.08-5.04 (m, 1H), 4.64-4.50 (m, 2H), 4.34-4.29 (m, 1H), 4.16-4.10 (m, 2H), 3.91-3.87 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.03-3.00 (m, 2H), 2.62-2.56 (m, 4H), 2.46-2.42 (m, 1H), 2.36 (s, 1H) 2.13-2.07 (m, 2H), 1.92-1.82 (m, 중첩, 8H).
실시예 233a: 3급-부틸 2-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)-6,7-다이하이드로티아졸로[5,4-c]피리딘-5(4H)-카복실레이트 233a
Figure pat00310
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 3급-부틸 2-아미노-6,7-다이하이드로티아졸로[5,4-c]피리딘-5(4H)-카복실레이트(600 mg, 2.35 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(942 mg, 3.53 mmol), Pd2(dba)3(214 mg, 0.235 mmol), 잔트포스(270.5 mg, 0.47 mmol), Cs2CO3(1.53 g, 4.7 mmol), 및 다이옥산(30 mL)을 넣었다. 이 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 110℃에서 N2 보호 하에 12시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를 아세토나이트릴로 세척하여, 화합물 233a(600 mg, 54%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 441.1
실시예 233b: 3급-부틸 2-[(5-{3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)아미노]-4H,5H,6H,7H-[1,3]티아졸로[5,4-c]피리딘-5-카복실레이트 233b
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 233a(300 mg, 0.68 mmol), (3-(아세톡시메틸)-2-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로-[1,2-a]피라진-2(6H)-일)피리딘-4-일)보론산 199e(1.8 g, 2.72 mmol), Pd(dppf)Cl2(27.7mg, 0.034 mmol), K3PO4(288.3 mg, 1.36 mmol), 나트륨 아세테이트(111.5 mg, 1.36 mmol), 물(10 방울) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 이 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이를 100℃에서 N2 보호 하에 1시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 혼합물을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 233b(220 mg, 45%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 714.3
실시예 233c: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-6-옥소-5-({4H,5H,6H,7H-[1,3]티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일}아미노)-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 233c
에틸 아세테이트(5 mL) 중의 화합물 233b(220 mg, 0.308 mmol)의 용액에 에틸 아세테이트(0.123 mL, 2.5M, 0.308 mmol) 중의 HCl 용액을 가했다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하여 화합물 233c(180 mg, 조질)를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 614.3
실시예 233: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-6-옥소-5-(4,5,6,7-테트라하이드로티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일아미노)-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 233
THF(3 mL) 및 프로판-2-올(3 mL) 중의 화합물 233c(180 mg, 0.29 mmol)의 용액에 물(1 mL) 및 리튬 하이드록사이드(14.0 mg, 0.58 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 233(28.6 mg, 17%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 572.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.85 (s, 1H), 8.63 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.95-4.92 (m, 1H), 4.47-4.37 (m, 2H), 4.25-4.18 (m, 3H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.71 (s, 2H), 3.59 (s, 3H), 2.92-2.90 (m, 2H), 2.62-2.56 (m, 2H), 2.50-2.39 (m, 5H), 1.21 (s, 6H).
실시예 235a: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피라진-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 235a
Figure pat00311
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 (S)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일) 피페라진-1-일)피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 230f(200 mg, 0.46 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]-도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(366 mg, 0.92 mmol), Pd(dppf)Cl2(38 mg, 0.046 mmol), 나트륨 아세테이트(126 mg, 0.92 mmol), K3PO4(196 mg, 0.92 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 65℃에서 3시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각한 후 이 반응물을 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 235a를 갈색 고체(100 mg, 31%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 708.5.
실시예 235: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피라진-2-일]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 235
i-프로판올/THF(1:1, 5 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 235a(90.0 mg, 0.13 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(36.4 mg, 3.25 mmol)의 혼합물을 35℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 235(18.2 mg, 22%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 666.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (s, 1H), 8.48 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.39 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.47 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.96 (bs, 1H), 4.57-4.55 (m, 2H), 4.49-4.47 (m, 1H), 4.42-4.37 (m, 중첩, 4H), 4.22-4.18 (m, 중첩, 3H), 3.84-3.76 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.39-3.37 (m, 1H), 3.02-2.81 (m, 1H), 2.78-2.76 (m, 1H), 2.62-2.56 (m, 3H), 2.43-2.41 (m, 2H), 2.10-2.07 (m, 1H), 1.92-1.90 (m, 1H), 1.22 (s, 6H), 1.12 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 236a: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(1-메틸-5-{[5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일]아미노}-6-옥소피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 236a
Figure pat00312
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 232d (160 mg, 0.40 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(240 mg, 0.60 mmol), Pd(dppf)Cl2(20 mg, 0.020 mmol), K3PO4(180 mg, 0.80 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(120 mg, 0.80 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하여, 화합물 236a를 황색 고체(150 mg, 38%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 650.3
실시예 236: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(1-메틸-4-피페리딜)-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 236
THF/i-프로판올(6:3, 9 mL) 및 물(3 mL) 중의 화합물 236a(150 mg, 0.25 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(105 mg, 2.5 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(2 X 20 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 236(40 mg, 30%)을 연녹색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 608.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.73 (s, 1H), 8.52 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.90-7.88 (m, 2H), 7.45-7.37 (m, 2H), 6.86-6.80 (m, 2H), 5.11 (bs, 1H), 4.67-4.65 (m, 1H), 4.53-4.51 (m, 1H), 4.35-4.33 (m, 1H), 4.18 (bs, 2H), 3.90-3.89 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.24-3.22 (m, 2H), 2.59-2.50 (m, , 중첩, 8H), 2.36-2.32 (m, 2H), 2.01-1.87 (m, 4H), 1.29 (s, 6H).
실시예 237a: 2-{10-플루오로-1-옥소-1H,2H,3H,4H,6H,7H,8H,9H-피리도[3,4-b]인돌리진-2-일}-4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-카브알데하이드 237a
Figure pat00313
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(70 mg, 0.20 mmol), 1-메틸-3-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-5-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1,2-다이하이드로피리딘-2-온 191j(192 mg, 0.40 mmol), Pd(dppf)Cl2(33 mg, 0.040 mmol), 칼륨 아세테이트(39 mg, 0.40 mmol), K3PO4(87 mg, 0.40 mmol), 아세토나이트릴(7 mL) 및 물(6 방울)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 95℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 237a(286 mg, 순도: 46%, 수율: 98%)를 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 667.3
실시예 237: 10-플루오로-2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1-온 237
메탄올(7 mL) 중의 화합물 237a(131 mg, 0.197 mmol)의 용액에 0℃에서 나트륨 보로하이드라이드(59.8 mg, 1.57 mmol)를 가했다. 이 반응물을 0 내지 25℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물(1.5 mL)로 켄칭하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 다이클로로메탄(3 X 30 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 237(36 mg, 28%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 669.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.66 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.83 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.36-7.32 (m, 2H), 6.84 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.90-4.86 (m, 1H), 4.73-4.65 (m, 5H), 4.39-4.30 (m, 2H), 3.90-3.77 (m, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.56-3.48 (m, 2H), 3.10-3.09 (m, 2H), 2.98-2.92 (m, 2H), 2.79-2.75 (m, 2H), 2.59-2.57 (m, 1H), 2.50-2.49 (m, 2H), 2.22-2.21 (s, 1H), 2.04-1.99 (m, 2H), 1.88-1.84 (m, 2H), 1.01 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 238a: (E)-메틸 3-((3급-부틸설핀일이미노)메틸)-5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 238a
Figure pat00314
자석 교반기가 장착된 500 mL 1구 환저 플라스크에 메틸 3-폼일-5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트(10.0 g, 48.3 mmol, 1.0 당량), 2-메틸프로판-2-설핀아마이드(11.7 g, 96.6 mmol, 2.0 당량), KHSO4(32.8 g, 241.5 mmol, 5 당량), 및 다이클로로메탄(250 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 10시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:3)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 238a(12.4 g, 83%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 311.3.
실시예 238b: 메틸 3-((1,1-다이메틸에틸설핀아마이도)메틸)-5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 238b
자석 교반기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 238a(4.0 g, 12.8 mmol, 1.0 당량), NaBH4(2.9 g, 76.9 mmol, 6.0 당량), 및 메탄올(100 mL)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이시간 후에, 물(50 mL)을 이 반응물에 가하고, 생성 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 증발시켜 화합물 238b(3.9 g, 96%)를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: [M-C4H10NOS]+ 192.3.
실시예 238c: 메틸 3-(아미노메틸)-5,6,7,8-테트라하이드로인돌리진-2-카복실레이트 238c
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 238b(3.5 g, 11.2 mmol), 포화된 HCl/다이에틸 에터 용액(15 mL), 및 다이클로로메탄(15 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 포화된 수성 NaHCO3 용액(50 mL)을 반응 혼합물에 가하고, 이 혼합물을 다이클로로메탄(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 증발시켜 화합물 238c(2.2 g, 94%)를 수득하고, 이를 직접 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS: [M-NH2]+ 192.1. 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 6.28 (s, 1H), 4.38 (s, 2H), 4.03 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.84 (s, 3H), 2.78 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.06-2.02 (m, 2H), 1.87-1.82 (m, 2H).
실시예 238d: 2,3,5,6,7,8-헥사하이드로피롤로[3,4-b]인돌리진-1-온 238d
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 238c(1.3 g, 6.25 mmol, 1.0 당량) 및 THF(20 mL)을 넣었다. -78℃에서, 상기 용액에 리튬 헥사메틸다이실라잔/THF(18.7 mL, 18.7 mmol, 3.0 당량)를 가했다. 이어서, 이를 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 포화된 수성 NH4Cl 용액(30 mL)을 가하고, 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 50 mL)으로 추출하고, 합친 유기 층을 감압 하에 증발시켰다. 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(60:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 238d(585 mg, 53%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 177.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.38 (s, 1H), 5.82 (s, 1H), 4.13 (s, 2H), 3.86 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.73 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 191-1.88 (m, 2H), 1.75-1.73 (m, 2H).
실시예 238e: 4-클로로-2-(1-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-1H-피롤로[3,4-b]인돌리진-2(3H)-일)니코틴알데하이드 238e
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 238d(400 mg, 2.27 mmol), 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드(1.50 g, 6.90 mmol, 3.0 당량), Pd2(dba)3(208 mg, 0.227 mmol, 0.1 당량), 잔트포스(131 mg, 0.227 mmol, 0.1 당량), Cs2CO3(1.50 g, 4.54 mmol, 2.0 당량), 및 다이옥산(30 mL)을 넣었다. 생성 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 이 반응 혼합물을 90℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:3)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 238e(300 mg, 42%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 316.1.
실시예 238f: (S)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일-아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-1H-피롤로[3,4-b]인돌리진-2(3H)-일)니코틴알데하이드 238f
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL1구 환저 플라스크에 화합물 238e(150 mg, 0.48 mmol, 1.0 당량), (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 191j(459 mg, 0.95 mmol, 2.0 당량), Pd(dppf)Cl2(39 mg, 0.048 mmol, 0.1 당량), 나트륨 아세테이트(78 mg, 0.95 mmol, 2.0 당량), K3PO4(202 mg, 0.95 mmol, 2.0 당량), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 85℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/에탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 238f(90 mg, 30%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 635.3.
실시예 238: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-5,6,7,8-테트라하이드로-1H-피롤로[3,4-b]인돌리진-3-온 238
자석 교반기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 238f (90 mg, 1.0 당량, 0.14 mmol), NaBH4(23 mg, 5 당량, 0.60 mmol), 및 메탄올(5 mL)을 넣었다. 생성 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 물로 켄칭하였다. 이어서, 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 238(60 mg, 66%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 637.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.69 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.36-7.31 (m, 2H), 6.83 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.15 (s, 1H), 5.71 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.72-4.63 (m, 4H), 4.52-4.51 (m, 2H), 3.97-3.95 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.55-3.53 (m, 1H), 3.48-3.46 (m, 1H), 3.10-3.08 (m, 2H), 2.91-2.89 (m, 2H), 2.58-2.56 (m, 1H), 2.49-2.48 (m, 2H), 2.23-2.19 (m, 1H), 2.08-2.02 (m, 2H), 1.93-1.89 (m, 2H), 1.00 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 239a: 3급-부틸 3-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)아제티딘-1-카복실레이트 239a
Figure pat00315
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(50 mL), 3급-부틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)아제티딘-1-카복실레이트(1.8 g, 7.2 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.9 g, 7.2 mmol), 및 세슘 카보네이트(4.7 g, 14.4 mmol)를 넣었다. 생성 현탁액에 질소를 30분 동안 버블링시킨 후에, 잔트포스(418 mg, 0.72 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(661 mg, 0.72 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 105℃에서 0.5시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(120 mL)과 물(60 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(3 X 80 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:4)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 239a를 황색 고체(3.06 g, 98%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 435.
실시예 239b: 3-(5-(아제티딘-3-일)피리딘-2-일아미노)-5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 239b
화합물 239a(1.0 g, 2.3 mmol)를 4M HCl/다이옥산(10 mL)에 현탁시켰다. 이 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 이어서, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 수성 NaOH로 염기성화시키고, 생성 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, 감압 하에 농축하여 화합물 239b를 황색 고체(650 mg, 84%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 335.
실시예 239c: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(1-메틸아제티딘-3-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 239c
메탄올(40 mL) 중의 화합물 239b(469 mg, 1.4 mmol), 37% 수성 폼알데하이드(4.0 g, 50 mmol), NaBH3CN(261 mg, 4.2 mmol), 및 에톡시에탄(4 mL, 4.2 mmol) 중의 1M 아연 클로라이드의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(20 mL)에 가하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 239c를 황색 고체(300 mg, 83%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 349.
실시예 239d: (4-(1-메틸-5-(4-(1-메틸아제티딘-3-일)페닐아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 239d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 239c(106 mg, 0.30 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사-하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(115 mg, 0.30 mmol), Pd(dppf)Cl2(25 mg, 0.030 mmol), K3PO4(127 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트(49 mg, 0.60 mmol), 물(1 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 2시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(15:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 239d를 백색 고체(100 mg, 49%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 607.3
실시예 239: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(1-메틸아제티딘-3-일)-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 239
프로판-2-올(2 mL), 테트라하이드로퓨란(2 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 239d(100 mg, 0.16 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(38 mg, 1.60 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 증발시키고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 239(22.5 mg, 26%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 566.4. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.75 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.91-7.89 (m, 2H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.84 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.09-5.06 (m, 1H), 4.66-4.64 (m, 1H), 4.54-4.50 (m, 1H), 4.36-4.33 (m, 1H), 4.18-4.11 (m, 2H), 3.92-3.88 (m, 1H), 3.75-3.72 (m, 중첩, 5H), 3.63-3.58 (m, 1H), 3.16-3.14 (m, 2H), 2.64-2.58 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 1.93-1.90 (m, 2H), 1.84-1.79 (m, 2H).
실시예 240a: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(1-메틸-5-{[5-(1-메틸아제티딘-3-일)피리딘-2-일]아미노}-6-옥소피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 240a
Figure pat00316
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(5-(1-메틸아제티딘-3-일)피리딘-2-일아미노)-피리딘-2(1H)-온 239c(106 mg, 0.30 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(119 mg, 0.30 mmol), Pd(dppf)Cl2(25 mg, 0.031 mmol), K3PO4(127 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트(49 mg, 0.60 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 환류 온도에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(15:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 240a를 백색 고체(80 mg, 48%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 622.7
실시예 240: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(1-메틸아제티딘-3-일)-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 240
프로판-2-올(2 mL), 테트라하이드로퓨란(2 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 240a (80 mg, 0.130 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(38 mg, 1.60 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 240(24.3 mg, 33%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 580.4. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.76 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.92-7.90 (m, 2H), 7.59 (dd, J = 1.5, 8.5 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.84 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.09-5.06 (m, 1H), 4.68-4.66 (m, 1H), 4.56-4.54 (m, 1H), 4.37-4.35 (m, 1H), 4.19-4.17 (m, 2H), 3.90-3.88 (m, 1H), 3.75-3.72 (m, 중첩, 5H), 3.64-3.62 (m, 1H), 3.19-3.16 (m, 2H), 2.60 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 2.54 (s, 2H), 2.42 (s, 3H), 1.30 (s, 6H).
실시예 241a: 2-{10-플루오로-1-옥소-1H,2H,3H,4H,6H,7H,8H,9H-피리도[3,4-b]인돌리진-2-일}-4-[1-메틸-5-({5-메틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-카브알데하이드 241a
Figure pat00317
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도 [3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(59.6 mg, 0.17 mmol), 1-메틸-3-({5-메틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-5-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사-보롤란-2-일)-1,2-다이하이드로피리딘-2-온 135a(261.8 mg, 0.68 mmol), Pd(dppf)Cl2(25.0 mg, 0.030 mmol), Na2CO3(54.1 mg, 0.51 mmol), DMF(6 mL) 및 물(0.75 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 241a(100 mg, 순도: 54%, 수율: 56%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 571.3
실시예 241: 10-플루오로-2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1-온 241
메탄올(5 mL) 중의 화합물 241a(54.0 mg, 0.095 mmol)의 용액에 0℃에서 나트륨 보로하이드라이드(28.9 mg, 0.76 mmol)를 가했다. 이 반응물을 0 내지 25℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물(5 mL)로 켄칭하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 다이클로로메탄(3 X 30 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 241(8.0 mg, 15%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 573.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.06 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.40(d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.87-4.85 (m, 1H), 4.44-4.35 (m, 2H), 4.13-4.08 (m, 1H), 3.92-3.89 (m, 3H), 3.79-3.76 (m, 2H), 3.58 (s, 3H), 3.49 (s, 2H), 2.99-2.94 (m, 2H), 2.79-2.77 (m, 2H), 2.66-2.64 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.90-1.78 (m, 2H), 1.75-1.73 (m, 2H).
실시예 242a: 3-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 242a
Figure pat00318
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-3-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 218a(800 mg, 2.69 mmol, 1.0 당량), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(1.70 g, 6.73 mmol, 2.5 당량), Pd2(dba)3(123 mg, 0.13 mmol, 0.05 당량), 잔트포스(128 mg, 0.27 mmol, 0.1 당량), 칼륨 아세테이트(528 mg, 5.38 mmol, 2.0 당량), 및 다이옥산(50 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:70)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 242a(740 mg, 79%)를 녹색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 345.3
실시예 242b: 4-(5-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 242b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 242a(282 mg, 0.82 mmol, 1.5 당량), 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일) 니코틴알데하이드 139a(180 mg, 0.55 mmol, 1.0 당량), Pd(dppf)Cl2(45 mg, 0.055 mmol, 0.1 당량), 나트륨 아세테이트(90 mg, 1.25 mmol, 2.0 당량), K3PO4(232 mg, 1.25 mmol, 2.0 당량), 아세토나이트릴(20 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 242b(150 mg, 48%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 512.3.
실시예 242: 2-[4-[5-[(1,5-다이메틸피라졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1-온 242
자석 교반기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 242b(150 mg, 0.29 mmol, 1.0 당량), NaBH4(55 mg, 1.46 mmol, 5.0 당량), 및 메탄올(10 mL)을 넣었다. 생성 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 242(100 mg, 66%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 514.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.04-8.03 (m, 2H), 7.42 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.05 (s, 1H), 5.90 (s, 1H), 4.87-4.85 (m, 1H), 4.43-4.35 (m, 2H), 4.18-4.12 (m, 1H), 3.98-3.93 (m, 1H), 3.84-3.78 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 3.06-2.92 (m, 2H), 2.75-2.68 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.94-1.92 (m, 2H), 1.79-1.73 (m, 2H).
실시예 243a: 3급-부틸 4-(메틸설폰일옥시)피페리딘-1-카복실레이트 243a
Figure pat00319
0℃에서 트라이에틸아민(9.9 g, 98 mmol) 및 다이클로로메탄(100 mL) 중의 3급-부틸 4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트(14.0 g, 70.0 mmol)의 용액에 메탄설폰일 클로라이드(11.2 g, 98.0 mmol)를 적가하였다. 이 반응물을 주위 온도가 되게 하고, 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 물(50 mL)로 켄칭하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(2 X 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 243a(19.5 g, 100%)를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M-t-Bu]+ 224.1
실시예 243b: 3급-부틸 4-(4-나이트로-1H-이미다졸-1-일)피페리딘-1-카복실레이트 243b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 243a(7.0 g, 25.1 mmol), DMF(120 mL), 4-나이트로-1H-이미다졸(2.80 g, 25.1 mmol), 및 K2CO3(6.9 g, 50.2 mmol)를 넣었다. 이 혼합물을 120℃에서 밤새도록 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터/다이클로로메탄(2:2:1)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 243b(2.4 g, 32.4%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 297.3
실시예 243c: 3급-부틸 4-(4-아미노-1H-이미다졸-1-일)피페리딘-1-카복실레이트 243c
100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 243b(2.3 g, 7.8 mmol), 10% Pd/C(10% 습윤, 230 mg), 및 에탄올(40 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 배기하고, 수소 가스를 넣고, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 243c(2.0 g, 95 %)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 267.2.
실시예 243d: 3급-부틸 4-(4-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)-1H-이미다졸-1-일)피페리딘-1-카복실레이트 243d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 243c(2.3 g, 8.6 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(2.3 g, 8.6 mmol), 트리스-(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(789 mg, 0.86 mmol), 잔트포스(994 mg, 1.72 mmol), Cs2CO3(5.6 g, 17.2 mmol) 및 1,4-다이옥산(80 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 95℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 243d를 황색 오일 고체(2.3 g, 59%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 452.3.
실시예 243e: 5-브로모-1-메틸-3-(1-(피페리딘-4-일)-1H-이미다졸-4-일아미노)피리딘-2(1H)-온 243e
화합물 243d(2.2 g, 4.88 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(20 mL)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하여 조질물 243e(1.5 g, 88 %)를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 352.2
실시예 243f: 5-브로모-1-메틸-3-(1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-이미다졸-4-일아미노)피리딘-2(1H)-온 243f
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 243e(2.2 g, 6.3 mmol), NaBH3CN(995 mg, 15.8 mmol), 옥세탄-3-온(907 mg, 12.6 mmol), 아연 클로라이드(2.1 g, 15.8 mmol), 및 메탄올(60 mL)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사에 물을 가하고, 생성 혼합물을 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 유기 층을 이어서 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 메탄올 중의 1% 트라이에틸아민으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 감압 하에 농축하였다. 다이클로로메탄을 잔사에 가하고, 생성 현탁액을 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 243f를 황색 고체(800 mg, 62%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 408.2
실시예 243g: (4-(1-메틸-5-(1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-이미다졸-4-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 243g
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 243f (300 mg, 0.74 mmol), 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 113i(567 mg, 1.48 mmol), Pd(dppf)Cl2(60.5 mg, 0.074mmol), K3PO4(314 mg, 1.48 mmol), 나트륨 아세테이트(201 mg, 1.48 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 0.5% 트라이에틸아민을 함유하는 다이클로로메탄/메탄올(1:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 243g를 황색 고체(100 mg, 20 %)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 667.4.
실시예 243: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[1-[1-(옥세탄-3-일)-4-피페리딜]이미다졸-4-일]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 243
i-프로판올/THF/물(2:2:1, 8 mL) 중의 화합물 243g(80 mg, 0.12 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(100 mg, 2.4 mmol)의 혼합물을 35℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사에 물을 가하고, 생성 혼합물을 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 243(28.0 mg, 30%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 625.4. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.45 (d, J =3.0 Hz, 1H), 7.35-7.34 (m, 2H), 7.11(d, J = 1.0 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 5.14 (bs, 1H), 4.54 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 4.43-4.40 (m, 4H), 4.23-4.11 (m, 3H), 3.99-3.96 (m, 1H), 3.91-3.84 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.43-3.39 (m, 1H), 2.77-2.76 (m, 2H), 2.62-2.57 (m, 2H), 2.47-2.46 (m, 2H), 1.94-1.89 (m, 6H), 1.79-1.78 (m, 2H),1.69-1.66 (m, 2H).
실시예 244a: 2-(4-클로로-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일)-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1(2H)-온 244a
Figure pat00320
메탄올(30 mL) 중의 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 139a(1.0 g, 3.0 mmol)의 용액에 30℃에서 나트륨 보로하이드라이드(380 mg, 9.0 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반하고, 물(10 mL)로 켄칭하였다. 이어서, 감압 하에 농축하고, 잔사를 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 증발시켜 화합물 244a를 황색 고체(920 mg, 92%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 332.3
실시예 244b: (4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 244b
다이클로로메탄(30 mL) 중의 화합물 244a(900 mg, 2.7 mmol) 및 트라이에틸아민(810 mg, 8.1 mmol)의 혼합물에 아세틸 클로라이드(630 mg, 8.1 mmol)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 244b를 백색 고체(900 mg, 90%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 374.2
실시예 244c: 3-(아세톡시메틸)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)피리딘-4-일보론산 244c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 244b(900 mg, 2.4 mmol), Pin2B2(3.05 g, 12 mmol), Pd(dppf)Cl2(98 mg, 0.12 mmol), 잔트포스(114 mg, 0.24 mmol), 칼륨 아세테이트(720 mg, 7.2 mmol), 및 다이옥산(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 65℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(5:1)(10 mL)로 세척하여, 화합물 244c를 황색 고체(1.0 g, 순도: 60%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 384.1.
실시예 244d: (4-(1-메틸-5-(5-(1-메틸아제티딘-3-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 244d
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(5-(1-메틸아제티딘-3-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 239c(140 mg, 0.40 mmol), 화합물 244c(230 mg, 0.60 mmol), Pd(dppf)Cl2(20 mg, 0.020 mmol), K3PO4(180 mg, 0.80 mmol), 나트륨 아세테이트·3H2O(120 mg, 0.80 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하여, 화합물 244d를 황색 고체(90 mg, 43%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 608.3
실시예 244: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(1-메틸아제티딘-3-일)-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1-온 244
THF/i-프로판올(5:3, 8 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 244d(90 mg, 0.15 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(60 mg, 1.5 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 잔사를 물(3 mL)로 희석시켰다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(20 mL X 2)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 244(25 mg, 30%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 566.4. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.74 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.87 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.59-7.57 (m, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.85-6.83 (m, 1H), 6.33 (s, 1H), 5.04-5.01 (m, 1H), 4.67-4.65 (m, 1H), 4.44-4.39 (m, 1H), 4.33-4.29 (m, 1H), 3.95-3.91 (m, 1H), 3.86-3.83 (m, 2H), 3.76-3.74 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.62-3.59 (m, 1H), 3.16-3.13 (m, 2H), 3.02-2.95 (m, 2H), 2.84-2.83 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.05-2.02 (m, 2H), 1.90-1.87 (m, 2H).
실시예 245a: 4-클로로-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 245a
Figure pat00321
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 6,7,8,9-테트라하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1(2H)-온 112d(1.48 g, 7.9 mmol, 1.0 당량), 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드(3.48 g, 15.8 mmol, 2.0 당량), CuI(1.50 g, 7.9 mmol, 1.0 당량), 4,7-다이메톡시-1,10-펜안트롤린(2.13 g, 7.9 mmol, 1.0 당량), K2CO3(2.18 g, 15.8 mmol, 2.0 당량) 및 다이옥산(50 mL)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 이 혼합물을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:2)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 245a(550 mg, 21%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 328.1.
실시예 245b: 4-플루오로-2-(1-메틸-5-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-6-(1-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-1H-피롤로[3,4-b]인돌리진-2(3H)-일)벤즈알데하이드 245b
환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 245a(140 mg, 0.42 mmol, 1.0 당량), (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 191i(308 mg, 0.63 mmol, 1.5 당량), Pd(dppf)Cl2(35 mg, 0.042 mmol, 0.1 당량), 나트륨 아세테이트(70 mg, 0.84 mmol, 2.0 당량), K3PO4(175 mg, 0.84 mmol, 2.0 당량), 아세토나이트릴(20 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 245b(100 mg, 36%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 647.4.
실시예 245: (S)-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일) 피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-2-일)-6,7,8,9-테트라하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1(2H)-온 245
자석 교반기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 245b(100 mg, 0.15 mmol, 1.0 당량), NaBH4(29 mg, 0.77 mmol, 5.0 당량), 및 메탄올(10 mL)을 넣었다. 생성 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 245(80 mg, 79%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 649.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.69-8.68 (m, 1H), 8.57 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.85 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.39-7.36 (m, 1H), 7.26-7.24 (m, 2H), 6.69 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.31 (s, 1H), 4.97 (bs, 1H), 4.58-4.54 (m, 2H), 4.49-4.41 (m, 2H), 4.34-4.27 (m, 2H), 4.09-4.06 (m, 2H), 3.69-3.68 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.41-3.39 (m, 1H), 3.12-3.19 (m, 1H), 2.97-2.93 (m, 1H), 2.87 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.56-2.54 (m, 1H), 2.37-2.30 (m, 2H), 2.21-2.16 (m, 1H), 2.03-1.98 (m, 2H), 1.85-1.82 (m, 2H), 0.94 (d, J = 5.5 Hz, 3H).
실시예 246a: 4-(5-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 246a
Figure pat00322
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-(1-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 245a(130 mg, 0.39 mmol, 1.0 당량), 3-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 218a(600 mg, 1.75 mmol, 4.0 당량), Pd(dppf)Cl2(32 mg, 0.040 mmol, 0.1 당량), 나트륨 아세테이트(64 mg, 0.78 mmol, 2.0 당량), K3PO4(165 mg, 0.78 mmol, 2.0 당량), 아세토나이트릴(15 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/에탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 246a(38 mg, 19%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 510.3.
실시예 246: 2-[4-[5-[(1,5-다이메틸피라졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-6,7,8,9-테트라하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1-온 246
자석 교반기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 246a(38 mg, 0.074 mmol, 1.0 당량), NaBH4(29 mg, 0.37 mmol, 5.0 당량), 및 메탄올(5 mL)을 넣었다. 생성 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 표제 화합물(18 mg, 48%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 512.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.58 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.17 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.58-6.57 (m, 2H), 5.74 (s, 1H), 5.41-5.39 (m, 1H), 4.42-4.32 (m, 2H), 4.08 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 2.98 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.25 (s, 3H), 2.13-2.09 (m, 2H), 1.97-1.92 (m, 2H).
실시예 247a: {4-[5-({5-아세틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-일}메틸 아세테이트 247a
Figure pat00323
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 3-(5-아세틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 209c(183 mg, 0.50 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-4-일}보론산 230i(200 mg, 0.50 mmol), Pd(dppf)Cl2(37 mg, 0.05 mmol), K3PO4(212 mg, 1.0 mmol), 나트륨 아세테이트(82 mg, 1.0 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 247a를 황색 고체(100 mg, 31 %)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 641.2.
실시예 247: 3-[4-[5-[(5-아세틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-6,7,8,9-테트라하이드로벤조티오페노[2,3-d]피리다진-4-온 247
i-프로판올/THF/물(2:2:1,10 mL) 중의 {4-[5-({5-아세틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-일}메틸 아세테이트 247a(100 mg, 0.16 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(96 mg, 4.0 mmol)의 혼합물을 35℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사에 물(5 mL)을 가하고, 생성 혼합물을 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 유기 층을 이어서 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 247(51 mg, 53%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 599.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6 , T=80℃) δ 8.54-8.51 (m, 1H), 8.38 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.93-7.91 (m, 2H), 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.64-4.62 (m, 2H), 4.39 (s, 2H), 3.98-3.95 (m, 2H), 3.89-3.86 (m, 2H), 3.58 (s, 3H), 2.95-2.93 (m, 2H), 2.87-2.84 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.89-1.87 (m, 4H).
실시예 248a: (R)-(6-아미노피리딘-3-일)(3-메틸모폴리노)메탄온 248a
에탄올(25 mL) 중의 (R)-3-메틸모폴린(2.02 g, 20 mmol)의 용액에 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필) 카보다이이미드(EDCI)(3.33 g, 17.4 mmol), 하이드록시벤조트라이아졸(HOBt)(2.35 g, 17.4 mmol), 및 6-아미노니코틴산(2.0 g, 14.5 mmol)을 가했다. 18시간 동안 실온에서 교반한 후, 반응 현탁액을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(3:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 248a를 백색 고체(1.6 g, 36%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 222.3.
Figure pat00324
실시예 248b: 6-클로로-2-메틸-4-[(5-{[(3R)-3-메틸모폴린-4-일]카보닐}피리딘-2-일)아미노]-2,3-다이하이드로피리다진-3-온 248b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(50 mL), 화합물 248a(330 mg, 1.5 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(446 mg, 2.0 mmol), 세슘 카보네이트(978 mg, 3.0 mmol), 잔트포스(88 mg, 0.15 mmol), 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(68 mg, 0.075 mmol)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 환류 온도에서 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(3 X 30 mL)으로 세척하고, 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(2:1 내지 1:2)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 248b(430 mg, 79%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 364.3
실시예 248c: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(5-{[(3R)-3-메틸모폴린-4-일]카보닐}피리딘-2-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 248c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 248b(364 mg, 1.0 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(596 mg, 1.5 mmol), K3PO4(424 mg, 2.0 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(73 mg, 0.10 mmol), 나트륨 아세테이트(164 mg, 2.0 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 반응 혼합물을 100℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(50 mL) 및 물(50 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80:1 내지 50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 248c(250 mg, 37%)를 황색 오일로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H] + 681.3
실시예 248: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(3R)-3-메틸모폴린-4-카보닐]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-피리다진-3-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 248
THF/i-프로판올/물(2.5/2/0.5 mL) 중의 화합물 248c(250 mg, 0.37 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(86 mg, 3.6 mmol)를 실온에서 가했다. 이 반응물을 3시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 그 후, 이 혼합물을 물(20 mL)에 붓고, 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔류 고체를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 248(110 mg, 48%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H] + 639.3. 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.85 (s, 1H), 8.58 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 2.5, 8.5 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 5.0 HzzH, 1H), 7.32 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.85-4.83 (m, 1H), 4.66-4.64 (m, 1H), 4.42-4.27 (m, 4H), 4.02-3.88 (m, over lap, 6H), 3.74-3.67 (m, 2H), 3.56-3.46 (m, 2H), 2.67-2.59 (m, 2H), 2.51 (s, 2H), 1.39 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.28 (s, 6H).
실시예 249a: (R)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(3-메틸모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노) 피리딘-2(1H)-온 249a
Figure pat00325
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(15 mL), (R)-(6-아미노피리딘-3-일)(3-메틸모폴리노)메탄온 248a(332 mg, 1.5 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(480 mg, 1.8 mmol), 및 세슘 카보네이트(978 mg, 3.0 mmol)를 넣었다. 이 현탁액을 통해 3분 동안 버블링한 후, 잔트포스(87 mg, 0.15 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(69 mg, 0.075 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 환류 온도에서 2.5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 50 mL)으로 세척하고, 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(2:1 내지 1:2)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 249a(430 mg, 70%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 407.3
실시예 249b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(5-{[(3R)-3-메틸모폴린-4-일]카보닐}피리딘-2-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 249b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 249a(407 mg, 1.0 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(800 mg, 2.0 mmol), K3PO4(424 mg, 2.0 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(73 mg, 0.1 mmol), 나트륨 아세테이트(164 mg, 2.0 mmol), 아세토나이트릴(8 mL) 및 물(0.2 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(20 mL) 및 물(20 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(20 mL x 3)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(60:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 249b(200 mg, 29%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 680.1
실시예 249: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(3R)-3-메틸모폴린-4-카보닐]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 249
THF/i-프로판올/물(3/3/0.5 mL) 중의 화합물 249b(204 mg, 0.30 mmol)의 용액에 실온에서 리튬 하이드록사이드(72 mg, 3 mmol)를 가했다. 이 반응물을 3시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 물(10 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC(A: 물 중의 1‰ NH4HCO3, B: 아세토나이트릴)로 정제하여, 화합물 249(85 mg, 44%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 638.3. 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.0, 6.5 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.70 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.40-4.27 (m, 4H), 3.99-3.89 (m, 3H), 3.74 (S, 3H), 3.55-3.46 (m, 중첩, 4H), 2.67-2.59 (m, 2H), 2.51 (s, 2H), 1.39 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.28 (s, 6H).
실시예 250a: 1-(5-(하이드록시메틸)-3-나이트로-1H-피라졸-1-일)프로판-2-올 250a
Figure pat00326
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 (3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올(0.57 g, 4.0 mmol), Cs2CO3(261 mg, 0.8 mmol), 및 2-메틸옥시란(20 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 30℃에서 2일 동안 교반하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄(100 mL)으로 희석하였다. 생성 혼합물을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 250a(0.40 g, 50%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 202.3
실시예 250b: 1-(5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸-1-일)프로판-2-올 250b
0℃에서 냉각된 클로로폼(100 mL) 중의 화합물 250a(4.0 g, 20.0 mmol)의 혼합물에, 5℃ 미만의 내부 온도를 유지하면서 30 분에 걸쳐 클로로폼(20 mL) 중의 POBr3(22.9 g, 80 mmol)의 용액을 가했다. 이 반응 혼합물을 50℃로 가온시키고, 이 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 0℃로 냉각하고, 물로 켄칭하였다. 유기 층을 분리하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 250b(3.3 g, 62%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 264.1
실시예 250c: 1-(5-((메틸아미노)메틸)-3-나이트로-1H-피라졸-1-일)프로판-2-올 250c
다이클로로메탄(30 mL) 중의 화합물 250b(3.0 g, 11.4 mmol)의 용액에 CH3NH2(3.0 g, 34.2 mmol, 물 중의 35%) 용액을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 250c(1.9 g, 78%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 215.3
실시예 250d: 5,6-다이메틸-2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 250d
0℃에서 냉각된 무수 THF(40 mL) 중의 화합물 250c(1.129 g, 5.27 mmol) 및 트라이페닐포스핀(4.14 g, 15.8 mmol)의 혼합물에, 5℃ 미만의 내부 온도를 유지하면서 THF(15 mL) 중의 다이아이소프로필 아조다이카복실레이트(DIAD)(3.19 g, 15.8 mmol) 용액을 30 분에 걸쳐 가했다. 이 반응 혼합물을 30℃로 가온시키고, 이 온도에서 5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 혼합물을 물(50 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 80 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 250d(0.83 g, 80%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 197.2
실시예 250e: 5,6-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 250e
메탄올(20 mL) 중의 화합물 250d(550 mg, 2.8 mmol)의 용액에 라니 Ni(약 600 mg)을 가했다. 이 반응물을 수소 가스 (풍선을 통해)로 충전하고, 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 이를 셀라이트(등록상표) 플러그로 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 250e를 황색 고체(400 mg, 86%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 167.3
실시예 250f: (4-(5-(5,6-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 250f
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 (4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이-하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 217a(525 mg, 1.0 mmol), 화합물 250e(166 mg, 1.0 mmol), 세슘 카보네이트(652 mg, 2.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(10 mL)을 넣었다. 이 현탁액을 통해 30분 동안 버블링한 후, 잔트포스(116 mg, 0.20 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(92 mg, 0.10 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 5시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 30 mL)으로 세척하고, 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 250f(80 mg, 13%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 611.4
실시예 250: 2-[4-[5-[(5,6-다이메틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 250
THF/i-프로판올/물(4/2/2 mL) 중의 화합물 250f(75 mg, 0.123 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(15 mg, 0.62 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 250을 백색 고체(40 mg, 57%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 569.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.96 (bs, 1H), 7.73 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 5.71 (s, 1H), 5.03 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 4.65-4.62 (m, 1H), 4.52-4.50 (m, 1H), 4.35-4.33 (m, 1H), 4.17-4.05 (m, 3H), 3.91-3.88 (m, 2H), 3.73-3.71 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.55-3.52 (m, 1H), 2.90-2.87 (m, 1H), 2.64-2.58 (m, 4H), 2.43 (s, 3H), 1.93-1.90 (m, 2H), 1.81-1.80 (m, 2H), 1.24 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 252a: 5-브로모-3-(1-에틸-5-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 252a
Figure pat00327
100 mL 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 115a(800 mg, 2.83 mmol), 브로모에탄(216 mg, 1.98 mmol), K2CO3(780 mg, 5.66 mmol), 및 DMF(20 mL)를 넣었다. 이 혼합물을 85℃에서 밤새도록 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 252a를 적색 고체(298 mg, 37%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 311.0. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.28 (s, 1H), 7.99 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.85 (s, 1H), 3.98-3.94 (m, 2H), 3.48 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 1.27 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
실시예 252b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{5-[(1-에틸-5-메틸-1H-피라졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 252b
환류 응축기가 장착된 환저 플라스크에 화합물 252a(200 mg, 0.64 mmol), (3-(아세톡시메틸)-2-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-2(6H)-일)피리딘-4-일)보론산 199e(309 mg, 0.64 mmol), PdCl2(dppf)(52.5 mg, 0.060 mmol), K3PO4(333 mg, 1.29 mmol), 나트륨 아세테이트(105 mg, 1.29 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 252b를 황색 고체(120 mg, 27.6%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 584.3
실시예 252: 3-[4-[5-[(1-에틸-5-메틸-피라졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 252
THF(6 mL), i-프로판올(4 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 252b(120 mg, 0.21 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(23 mg, 0.82 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 감압 하에 농축하고, 잔사를 물(5 mL)로 희석하였다. 생성 혼합물을 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 252(52 mg, 47%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 542.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.06 (d, J=5.5 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.07 (s, 1 H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (d, J=5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.97 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.50-4.41 (m, 2H), 4.24-4.19 (m, 3H), 3.93-3.85 (m, 3H), 3.59 (s, 3 H), 2.62-2.57 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 2.19 (s, 3 H), 1.27-1.23 (m, 중첩, 9 H).
실시예 253a: 4-브로모-6-클로로-2-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 253a
Figure pat00328
자석 교반기가 장착된 500 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 무수 DMF(150 mL) 및 4-브로모-6-클로로-피리다진-3(2H)-온(10.0 g, 47.8 mmol)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 나트륨 하이드라이드를 가했다. 이 반응물을 0℃에서 20분 동안 교반하였다. 이시간 후에, 2-(트라이메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(11.9 g, 71.6 mmol)를 가하고, 냉각 욕을 제거하고, 이 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응물을 포화된 수성 중탄산 나트륨(30 mL)으로 켄칭하였다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트(2 x 300 mL)로 추출하였다. 추출물을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 253a를 56% 수율(9.00 g)로 황색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 5.42 (s, 2H), 3.79 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 0.96 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 0.01 (s, 9H).
실시예 253b: (S)-3급-부틸 4-(6-(6-클로로-3-옥소-2-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)-메틸)-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 253b
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 (S)-3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 191f(580 mg, 2.0 mmol), 화합물 253a(1.36 g, 4.0 mmol), Pd2(dba)3(180 mg, 0.20 mmol), 잔트포스(230 mg, 0.40 mmol), Cs2CO3(1.3 g, 4.0 mmol), 및 다이옥산(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시키고, 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(4:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 253b(1.0 g, 91%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 551.2
실시예 253c: (S)-6-클로로-4-(5-(2-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 253c
50 mL 환저 플라스크에 화합물 253b(551 mg, 1.0 mmol), 진한 HCl(2 mL), 및 메탄올(10 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하여 화합물 253c를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 321.1
실시예 253d: (S)-6-클로로-4-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 253d
자석 교반기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 253c(321 mg, 1.0 mmol), 3-옥세탄온(142 mg, 2.0 mmol), NaBH3CN(125 mg, 2.0 mmol), ZnCl2(272 mg, 2.0 mmol), 및 메탄올(10 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 물(20 mL)을 잔사에 가하고, 생성 혼합물을 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 에틸 아세테이트로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 253d(210 mg, 56%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 377.3.
실시예 253e: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 253e
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 253d(172 mg, 0.46 mmol), (3-(아세톡시메틸)-2-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-2(6H)-일)피리딘-4-일)보론산 199e(0.91 g, 2.29 mmol), Pd(dppf)Cl2(36 mg, 0.050 mmol), K3PO4(195 mg, 0.92 mmol), 나트륨 아세테이트(75 mg, 0.050 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시키고, 생성 잔사를, 에틸 아세테이트/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 253e(100 mg, 31%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 694.3.
실시예 253: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-1H-피리다진-3-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 253
자석 교반기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 253e(92 mg, 0.13 mmol), 리튬 하이드록사이드(16 mg, 0.65 mmol), THF(2 mL), i-프로판올(2 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 감압 하에 농축하였다. 물(10 mL)을 잔사에 가하고, 생성 혼합물을 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 253(22 mg, 26%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 652.2. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 10.83 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.58 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.05 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 3.0 Hz, 5.5 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.74-4.68 (m, 3H), 4.65-4.58 (m, 3H), 4.26-4.14 (m, 2H), 3.99-3.96 (m, 1H), 3.71-3.69 (m, 1H), 3.55-3.53 (m, 1H), 3.18-3.14 (m, 2H), 2.64-2.59 (m, 3H), 2.53-2.47 (m, 4H), 2.40-2.33 (m, 2H), 1.29 (s, 6H), 1.09 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
실시예 254a: 4-[5-({5-아세틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 254a
Figure pat00329
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 3-(5-아세틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일-아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 209d(344 mg, 0.83 mmol), 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 109a(202 mg, 0.56 mmol), Pd(dppf)Cl2(20 mg, 0.028 mmol), K3PO4(235 mg, 1.11 mmol), 나트륨 아세테이트(91 mg, 1.11 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 254a(400 mg, 조질)를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 직접 다음 단계에서 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 612.3
실시예 254: 3-[4-[5-[(5-아세틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]티에노[1,3-c]피리딘-4-온 254
메탄올 및 다이클로로메탄 중의 화합물 254a(98 mg, 0.16 mmol)의 용액에 NaBH4(13 mg, 0.33 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 혼합물을 수성 NH4Cl 용액(5 mL)으로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 254(53 mg, 54%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 613.9. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6, T=80℃) δ 8.45 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.93-7.92 (m, 2H), 7.33 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.97 (s, 1H), 4.67-4.63 (m, 3H), 4.46-4.45 (m, 2H), 3.97-3.93 (m, 2H), 3.89-3.86 (m, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.97-2.91 (m, 2H), 2.53-2.55 (m, 2H), 2.49-2.46 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.21 (s, 6H).
실시예 255a: 4-(5-(5-아세틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 255a
Figure pat00330
실시예 246에 기재된 절차를 따르고 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(200 mg, 0.575 mmol) 및 3-(5-아세틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 209d(356 mg, 0.863 mmol)로부터 출발하여, 화합물 255a를 적색 오일(320 mg, 93%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+599.3
실시예 255: 2-[4-[5-[(5-아세틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-10-플루오로-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 255
실시예 254에 기재된 절차를 따르고 화합물 255a(200 mg, 0.334 mmol)로부터 출발하여, 화합물 255를 백색 고체(55.5 mg, 28%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 601.3. 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6, T=80℃) δ 8.45 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 3.5 Hz, 2H), 7.33 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.97 (s, 1H), 4.70-4.63 (m, 3H), 4.46 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 4.10-3.86 (m, 중첩, 8H), 3.58 (s, 3H), 2.57-2.55 (m, 2H), 2.43-2.39 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.79-1.67 (m, 4H).
실시예 256a: (S)-(6-아미노피리딘-3-일)(3-메틸모폴리노)메탄온 256a
Figure pat00331
에탄올(20 mL) 중의 (S)-3-메틸모폴린(1.5 g, 15.0 mmol)의 용액에 실온에서 EDCI(3.33 g, 17.4 mmol), HOBt(2.35 g, 17.4 mmol), 및 6-아미노니코틴산(2.07 g, 15.0 mmol)을 가했다. 18시간 동안 교반한 후, 생성 현탁액을 여과하였다. 고체를 석유 에터/에틸 아세테이트(2:1) 내지 스트레이트 에틸 아세테이트로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 256a(1.0 g, 30%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: 222.3 (M+H)+.
실시예 256b: (S)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(3-메틸모폴린-4-카보닐 피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 256b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(10 ml), 화합물 256a(111 mg, 0.50 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(134 mg, 0.60 mmol), 세슘 카보네이트(326 mg, 1.0 mmol), 잔트포스(29 mg, 0.05 mmol), 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(23 mg, 0.025 mmol)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(3 X 30 mL)으로 세척하고, 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(2:1 내지 1:2)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 256b(140 mg, 77%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 364.3
실시예 256c: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(5-{[(3S)-3-메틸모폴린-4-일]카보닐}피리딘-2-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 256c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 256b(140 mg, 0.38 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(159 mg, 0.40 mmol), K3PO4(85 mg, 0.40 mmol), 나트륨 아세테이트(33 mg, 0.40 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노) 페로센다이클로로팔라듐(II)(15 mg, 0.020 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄(30 mL) 및 물(30 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄:메탄올(60:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 256c(90 mg, 35%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 681.3
실시예 256: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(3S)-3-메틸모폴린-4-카보닐]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-피리다진-3-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 256
THF/i-프로판올/물(2.0/1/0.5 ml) 중의 화합물 256c(90 mg, 0.13 mmol)의 용액에 실온에서 리튬 하이드록사이드(31 mg, 1.3 mmol)를 가했다. 이 반응물을 3시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 그 후, 이 혼합물을 물(15 mL) 및 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 256(40 mg, 48%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 639.3. 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.86 (s, 1H), 8.58 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 2.0, 6.5 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.85-4.82 (m, 1H), 4.66-4.64 (m, 1H), 4.42-4.27 (m, 4H), 4.02-3.88 (m, 중첩, 6H), 3.74-3.67 (m, 2H), 3.56-3.46 (m, 2H), 2.67-2.59 (m, 2H), 2.51 (s, 2H), 1.39 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.28 (s, 6H).
실시예 257: (S)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(3-메틸모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 257a
Figure pat00332
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 (S)-(6-아미노피리딘-3-일)(3-메틸모폴리노)메탄온(222 mg, 1.0 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(320 mg, 1.2 mmol), 세슘 카보네이트(652 mg, 2 mmol) 및 1,4-다이옥산(10 mL)을 넣었다. 이 현탁액을 10분 동안 버블링한 후, 잔트포스(58 mg, 0.10 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(46 mg, 0.050 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 환류 온도에서 2.5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 30 mL)으로 세척하고, 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(2:1 내지 1:2)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 257a(280 mg, 69%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 407.3
실시예 257b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(5-{[(3S)-3-메틸모폴린-4-일]카보닐}피리딘-2-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 257b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 257a(203 mg, 0.50 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(640 mg, 1.6 mmol), K3PO4(212 mg, 1.0 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(18 mg, 0.025 mmol), 나트륨 아세테이트(82 mg, 1.0 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.2 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(20 mL) 및 물(20 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(60:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 257b(160 mg, 47%)를 흑색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 680.1
실시예 257: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(3S)-3-메틸모폴린-4-카보닐]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 257
THF/i-프로판올/물(2/2/0.5 mL) 중의 화합물 257b(157 mg, 0.23 mmol)의 용액에 실온에서 리튬 하이드록사이드(55 mg, 2.3 mmol)를 가했다. 이 반응물을 3시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 이 혼합물을 물(15 mL)에 붓고, 다이클로로메탄(3 X 15 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔류 고체를 역상 분취용 HPLC(A: 물 중의 1‰ NH4HCO3, B: 아세토나이트릴)로 정제하여, 화합물 257(52 mg, 35%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 668.3. 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.94 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.0, 6.5 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.70 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.41-4.27 (m, 4H), 3.99-3.89 (m, 3H), 3.74-3.66 (m, 중첩, 5H), 3.55-3.46 (m, 2H), 2.67-2.59 (m, 2H), 2.51 (s, 2H), 1.39 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.28 (s, 6H).
실시예 258a: 6-클로로-2-메틸-4-({5-[(모폴린-4-일)카보닐]피리딘-2-일}아미노)-2,3-다이하이드로피리다진-3-온 258a
Figure pat00333
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(40 mL), (6-아미노피리딘-3-일)(모폴리노)-메탄온(2.07 g, 10.0 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온 111a(3.35 g, 15.0 mmol), Pd2(dba)3(915 mg, 1.0 mmol), 잔트포스(578 mg, 1.0 mmol), 및 세슘 카보네이트(6.52 g, 20 mmol)를 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 8시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 20 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여 화합물 258a(2.45 g, 51%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 350.1
실시예 258b: 1-메틸-5-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일보론산 258b
Figure pat00334
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 258a(2.0 g, 5.73 mmol, 1.0 당량), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(7.56 g, 28.6 mmol, 5.0 당량), Pd(dppf)Cl2(465 mg, 0.57 mmol, 0.1 당량), 잔트포스(461 mg, 1.14 mmol, 0.2 당량), 칼륨 아세테이트(1.11 g, 11.4 mmol, 2.0 당량), 및 다이옥산(50 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 50℃에서 6시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1:3)로 세척하여, 화합물 258b(1.70 g, 83%)를 황색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS: [M+H]+ 360.1
실시예 258c: 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일} 피리딘-3-카브알데하이드 258c
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 4-클로로-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-카브알데하이드 124a(100 mg, 0.29 mmol), 화합물 258b(128 mg, 0.36 mmol), PdCl2(dppf)(24 mg, 0.031 mmol), K3PO4(123 mg, 0.58 mmol), 나트륨 아세테이트(57 mg, 0.58 mmol), 아세토나이트릴(30 mL) 및 물(3 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 석유/에틸 아세테이트(1:3)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 258c를 황색 고체(45 mg, 25%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 625.2
실시예 258: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(모폴린-4-카보닐)-2-피리딜]아미노]-6-옥소-피리다진-3-일]-2-피리딜]-6,7,8,9-테트라하이드로벤조티오페노[2,3-d]피리다진-4-온 258
화합물 258c(45 mg, 0.071 mmol), NaBH4(8 mg, 0.21 mmol), 및 메탄올(7 mL)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 물(5 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하고, 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 258(24 mg, 53%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 627.2. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.80 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.65 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.39 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.80-7.78 (m, 1H), 7.67 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.85 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.52-4.35 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.60-3.49 (m, 8H), 2.95-2.93 (m, 2H), 2.89-2.84 (m, 2H),1.94-1.83 (m, 4H).
실시예 259a: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-[(모폴린-4-일)카보닐]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소피리다진-3-일]피리딘-3-카브알데하이드 259a
Figure pat00335
환류 응축기가 장착된 환저 플라스크에 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 109a(144 mg, 0.40 mmol), 1-메틸-5-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일보론산 258a(215 mg, 0.60 mmol), PdCl2(dppf)(16 mg, 0.020 mmol), K3PO4·삼수화물(207 mg, 0.80 mmol), 나트륨 아세테이트(66 mg, 0.80 mmol), 아세토나이트릴(15 mL) 및 물(1.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 259a를 황색 고체(80 mg, 30%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 640.3.
실시예 259: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(모폴린-4-카보닐)-2-피리딜]아미노]-6-옥소-피리다진-3-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]티에노[1,3-c]피리딘-4-온 259
화합물 259a(80 mg, 0.12 mmol), NaBH4(14 mg, 0.36 mmol), 및 메탄올(5 mL)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 염수(5 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하고, 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 259를 백색 고체(38 mg, 49%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 642.8. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.78 (s, 1H), 8.61 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 7.80-7.77 (m, 1H), 7.45 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.06-7.04 (m, 1H), 4.65-4.59 (m, 2H), 4.42 (s, 1H), 4.30-4.27 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.90-3.87 (m, 1H), 3.76-3.68 (m, 8H), 3.04-2.92 (m, 2H), 2.82-2.80 (m, 2H), 2.59-2.54 (m, 2H), 1.30 (s, 6H).
실시예 260a: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(5-메틸-1H-피라졸-3-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 260a
Figure pat00336
환류 응축기가 장착된 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 218a(201 mg, 0.71 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(282 mg, 0.71 mmol), Pd(dppf)Cl2(51 mg, 0.07 mmol), K3PO4(301 mg, 1.42 mmol), 나트륨 아세테이트(116 mg, 1.42 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.2 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 메탄올/다이클로로메탄(1:20)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 260a를 적색 고체(150 mg, 38%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 556.3
실시예 260: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-1H-피라졸-3-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 260
THF(6 mL), i-프로판올(4 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 260a(150 mg, 0.27 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(13 mg, 0.54 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 물(5 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하고, 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 260(28 mg, 20%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 514.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.76 (s, 1 H), 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 8.07-8.05 (m, 2 H), 7.38-7.31 (m, 2 H), 6.55 (s, 1 H), 5.88 (s, 1 H), 4.95-4.93 (m, 1 H), 4.48-4.39 (m, 2 H), 4.22-4.18 (m, 3 H), 3.83 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 3.58 (s, 3 H), 2.64-2.56 (m, 2 H), 2.36-2.34 (m, 2 H), 2.16 (s, 3 H), 1.22 (s, 6 H).
실시예 261a: 4-{5-[(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로 피리딘-3-일}-2-{10-플루오로-1-옥소-1H,2H,3H,4H,6H,7H,8H,9H-피리도[3,4-b]인돌리진-2-일}피리딘-3-카브알데하이드 261a
Figure pat00337
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도 [3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(97 mg, 0.28 mmol), 3-[(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일)아미노]-1-메틸-5-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1,2-다이하이드로피리딘-2-온 218a(192.6 mg, 0.56 mmol), Pd2(dba)3(54.9 mg, 0.060 mmol), 트라이(사이클로헥실)포스핀(50.2 mg, 0.18 mmol), Cs2CO3(182.6 mg, 0.56 mmol), 다이옥산(8 mL) 및 물(0.25 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/메탄올(35:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 261a(90 mg, 61%)를 흑색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 530.2
실시예 261: 2-[4-[5-[(1,5-다이메틸피라졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-10-플루오로-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1-온 261
메탄올(5 mL) 중의 화합물 261a(90.0 mg, 0.17 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(64.6 mg, 1.7 mmol)를 실온에서 가했다. 이 반응물을 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물(2 mL)로 켄칭하고, 진공에서 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 261(47.0 mg, 52%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 532.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 8.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.31(d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.87-4.85 (m, 1H), 4.45-4.36 (m, 2H), 4.11-4.09 (m, 1H), 3.93-3.91 (m, 1H), 3.79-3.76 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 3.00-2.94 (m, 2H), 2.66-2.63 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.90-1.88 (m, 2H), 1.78-1.73 (m, 2H)
실시예 262a: 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸옥사졸-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 262a
Figure pat00338
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 5-메틸옥사졸-2-아민(276 mg, 2.82 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(753 mg, 2.82 mmol), 트리스-(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(256 mg, 0.28 mmol), 잔트포스(324 mg, 0.56 mmol), Cs2CO3(1.8 g, 5.64 mmol) 및 1,4-다이옥산(30 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 92℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 262a를 백색 고체(702 mg, 88 %)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 284.1.
실시예 262b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(5-메틸-1,3-옥사졸-2-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일} 피리딘-3-일)메틸 아세테이트 262b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 262a(150 mg, 0.53 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(421 mg, 1.06 mmol), Pd(dppf)Cl2(37 mg, 0.050 mmol), K3PO4(225 mg, 1.06 mmol), 나트륨 아세테이트(87 mg, 1.06 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 262b를 황색 고체(100 mg, 34%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 556.9.
실시예 262: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸옥사졸-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 262
i-프로판올/THF/물(4/4/2 mL) 중의 화합물 262b(100 mg, 0.18 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(108 mg, 4.5 mmol)의 혼합물을 35℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사에 물(5 mL)을 가하고, 생성 혼합물을 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 262를 백색 고체(21.0 mg, 23%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 515.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.19 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.60 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.96-4.94 (m, 1H), 4.45-4.36 (m, 2H), 4.24-4.14 (m, 3H), 3.84 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.62-2.56 (m, 2H), 2.44-2.42 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.22 (s, 6H).
실시예 263a: 6-클로로-2-메틸-4-(피리미딘-4-일아미노)피리다진-3(2H)-온 263a
Figure pat00339
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(150 mL), 피리미딘-4-아민(1.7 g, 18.0 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(4.0 g, 18.0 mmol), 및 세슘 카보네이트(11.74 g, 36.0 mmol)를 넣었다. 이 현탁액을 통해 30분 동안 버블링한 후, 잔트포스(1.04 g, 1.8 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(823 mg, 0.9 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 환류 온도에서 15시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 50 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 농축하고, 잔사를 아세토나이트릴(5 mL)로 세척하여, 화합물 263a(2.99 g, 70%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS: [M+H]+ 238
실시예 263b: 1-메틸-6-옥소-5-(피리미딘-4-일아미노)-1,6-다이하이드로피리다진-3-일-보론산 263b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 263a(500 mg, 2.11 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(2.68 g, 10.6 mmol), Pd(dppf)Cl2(170 mg, 0.20 mmol), 잔트포스(170 mg, 0.40 mmol), 칼륨 아세테이트(410 mg, 4.21 mmol), 및 다이옥산(30 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 50℃에서 6시간 동안 교반하였다. LCMS는, 화합물 263a이 화합물 263b로 전부 전환되었음을 나타냈다.
실시예 263c: 2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-6-옥소-5-(피리미딘-4-일아미노)-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)니코틴알데하이드 263c
실온에서 화합물 263b의 혼합물에 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(300 mg, 0.90 mmol), Pd(dppf)Cl2(170 mg, 0.20 mmol), K3PO4(103 mg, 0.40 mmol) 및 물(2 mL)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 다시 처리하고, 80℃에서 4시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 물(30 mL)로 희석하고, 여과하였다. 여액을 다이클로로메탄(2 x 30 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1 내지 20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 263c를 황색 고체(210 mg, 45%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 515.3
실시예 263: 10-플루오로-2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-6-옥소-5-(피리미딘-4-일아미노)피리다진-3-일]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 263
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 263c(100 mg, 0.19 mmol), NaBH4(30 mg, 0.78 mmol), 및 메탄올(20 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물(30 mL)로 희석하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 30 mL)으로 추출하고, 합친 다이클로로메탄 추출물을 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 263을 백색 고체(67 mg, 68%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 517.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.93 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.55 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 1.0, 6.0 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.83 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.62-4.58 (m, 1H), 4.39-4.36 (m, 1H), 4.25-4.19 (m, 2H), 4.06-4.04 (m, 1H), 3.92-3.90 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 2.64-2.54 (m, 2H), 2.43-2.41 (m 2H), 1.781.76 (m, 2 H), 1.69-1.67 (m, 2H).
실시예 264a: 2-(4-아미노피리미딘-2-일)프로판-2-올 264a
Figure pat00340
-20℃에서 냉각된 무수 테트라하이드로퓨란(50 mL) 중의 에틸 4-아미노피리미딘-2-카복실레이트(840 mg, 5.0 mmol)의 용액에 5 분에 걸쳐 THF(8.5 mL, 25.0 mmol, 3.0 M) 중의 메틸마그네슘 브로마이드의 용액을 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 포화된 NH4Cl(20 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(5 X 40 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 무수 Mg2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 역상 콤비플래쉬로 정제하여, 화합물 264a를 황색 고체(240 mg, 32%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 154.1
실시예 264b: 5-브로모-3-(2-(2-하이드록시프로판-2-일)피리미딘-4-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 264b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 264a(300 mg, 2.0 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(800 mg, 3.0 mmol), Pd2(dba)3(182 mg, 0.20 mmol), 잔트포스(231 mg, 0.40 mmol), Cs2CO3(1.30 g, 4.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 15시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고, 추가로 역상 콤비플래쉬로 정제하여, 화합물 264b를 백색 고체(200 mg, 30%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 339.0
실시예 264c: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(5-{[2-(2-하이드록시프로판-2-일)피리미딘-4-일]아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 264c
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 264b(170 mg, 0.50 mmol), (3-(아세톡시메틸)-2-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-2(6H)-일)피리딘-4-일)보론산 199e(200 mg, 0.50 mmol), Pd(dppf)Cl2(40 mg, 0.050 mmol), K3PO4(212 mg, 1.0 mmol), 물(0.5 mL), 및 테트라하이드로퓨란(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 환류 온도에서 6시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 264c를 갈색 고체(200 mg, 54%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 612.3
실시예 264: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[2-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)피리미딘-4-일]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 264
테트라하이드로퓨란(10 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 264c(170 mg, 0.27 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(64 mg, 3.0 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 35℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 264(86 mg, 46%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 570.1. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.27 (s, 1H), 8.94 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.41(d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.14 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.48-4.42 (m, 2H), 4.23-4.19 (m, 중첩, 3H), 3.85-3.84 (m, 1H), 3.62(s, 3H), 2.67-2.56 (m, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.42 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.21 (s, 중첩, 6H).
실시예 265a: 1-(2-나이트로-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-일)프로판-1-온 265a
Figure pat00341
다이클로로메탄(8 mL) 중의 2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 209a(200 mg, 1.19 mmol)의 용액에 Et3N(240 mg, 2.38 mmol)을 가했다. 5분 동안 교반한 후, 다이클로로메탄(2 mL) 중의 프로피온일 클로라이드(121 mg, 1.31 mmol)의 용액을 가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 혼합물을 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 265a(260 mg, 98%)를 백색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 225.0
실시예 265b: 1-(2-아미노-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-일)프로판-1-온 265b
메탄올(10 mL) 중의 화합물 265a(260 mg, 1.16 mmol)의 용액에 10% Pd/C(26 mg)를 가했다. 이 시스템을 배기하고, 이어서 H2로 재충전하였다. 2시간 동안 교반한 후, LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 혼합물을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 265b를 황색 고체(225 mg, 99%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 195.1
실시예 265c: 5-브로모-1-메틸-3-(5-프로피온일-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 265c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 265b(200 mg, 1.03 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(414 mg, 1.55 mmol), Pd2(dba)3(47 mg, 0.052 mmol), 잔트포스(60 mg, 0.103 mmol), Cs2CO3(671.6 mg, 2.06 mmol), 및 다이옥산(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 반응 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 265c(280 mg, 72%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 380.2
실시예 265d: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-6-옥소-5-({5-프로판오일-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 265d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 265c(200 mg, 0.53 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(834 mg, 2.10 mmol), Pd(dppf)Cl2(19 mg, 0.0263 mmol), K3PO4(223 mg, 1.052 mmol), 나트륨 아세테이트(86 mg, 1.052 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(5 방울)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 반응 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(60:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 265d(100 mg, 29%)를 황색 오일로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 653.3
실시예 265: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-6-옥소-5-[(5-프로판오일-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 265
THF(3 mL), i-프로판올(3 mL) 및 물(5 mL) 중의 화합물 265d (100 mg, 0.153 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(37 mg, 1.53 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 265(50 mg, 54%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 611.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6, T=80℃) δ 8.45 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.93-7.90 (m, 2H), 7.35 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.98 (s, 1H), 4.74-4.71 (m, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.46-4.44 (m, 2H), 4.18-4.16 (m, 2H), 3.97-3.87 (m, 중첩, 5H), 3.58 (s, 3H), 2.57-2.56 (m, 2H), 2.49-2.37 (m, 4H), 1.22 (s, 6H), 1.03 (t, J = 12.0 Hz, 3H).
실시예 266a: 5-브로모-1-메틸-3-((5-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸-3-일)아미노)피리딘-2(1H)-온 266a
Figure pat00342
도 26의 반응식에 따라, 화합물 266a를 제조하였다.
실시예 266b: (2'-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-2(6H)-일)-1-메틸-5-((5-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸-3-일)아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4'-bi피리딘]-3'-일)메틸 아세테이트 266b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 266a(33 mg, 0.10 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(60 mg, 0.15 mmol), Pd(dppf)Cl2(7 mg, 0.010 mmol), K3PO4(42 mg, 0.20 mmol), 나트륨 아세테이트(16 mg, 0.20 mmol), 아세토나이트릴(6 mL), 물(0.1 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 환류 온도에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 266b를 백색 고체(17 mg, 28%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 598.4
실시예 266: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸-3-일]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 266
i-프로판올/THF(1:1, 4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 266b(15 mg, 0.025 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(6 mg, 0.25 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 물(5 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 266(4.5 mg, 33%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 556.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 5.07-5.04 (m, 2H), 4.79-4.76 (m, 2H), 4.68-4.66 (m, 1H), 4.54-4.51 (m, 1H), 4.37-4.34 (m, 1H), 4.28-4.25 (m, 1H), 4.18 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.89-3.87 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.59-2.57 (m, 2H), 2.54-2.52 (m, 3H), 1.29 (s, 6H).
실시예 267a: 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸-1,3,4-티아다이아졸-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 267a
Figure pat00343
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 5-메틸-1,3,4-티아다이아졸-2-아민(1.15 g, 10.0 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(4.00 g, 15.0 mmol), Pd2(dba)3(916 mg, 1.0 mmol), 잔트포스(1.16 g, 2.0 mmol), Cs2CO3(6.52 g, 20.0 mmol), 및 다이옥산(50 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시키고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 267a(2.2 g, 73%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 301.2
실시예 267b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(5-메틸-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 267b
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 267a(150 mg, 0.50 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(640 mg, 1.5 mmol), PdCl2(dppf)(37 mg, 0.050 mmol), K3PO4(212 mg, 1.0 mmol), 나트륨 아세테이트(82 mg, 1.0 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.2 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시키고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 267b(80 mg, 28%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 574.2
실시예 267: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 267
자석 교반기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 화합물 267b(80 mg, 0.14 mmol), 리튬 하이드록사이드(17 mg, 0.70 mmol), THF(2 mL), i-프로판올(2 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물(5 mL)로 희석하고, 다이클로로메탄(10 mL x 3)으로 추출하고, 합친 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 267(32 mg, 43%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 532.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.19 (s, 1H), 8.57 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.92 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.45-4.37 (m, 2H), 4.22-4.17 (m, 3H), 3.85-3.80 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 2.58-2.56 (m, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.42 (s, 2H), 1.17 (s, 6H).
실시예 268a: 1-메틸-4-나이트로-1H-이미다졸 268a
Figure pat00344
아세토나이트릴(20 mL) 중의 4-나이트로-1H-이미다졸(2.0 g, 17.7 mmol) 및 K2CO3(3.67 g, 26.5 mmol)의 혼합물에, 실온에서 교반하면서 요오도메탄(1.3 mL, 3.0 g, 21.2 mmol)을 적가하였다. 생성 혼합물을 60℃에서 밤새도록 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 증발시키고, 잔사를 물(20 mL)로 희석하였다. 이 혼합물을 다이클로로메탄(2 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 268a를 황색 고체(1.8 g, 82%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 128.1. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.37 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 3.76 (s, 3H).
실시예 268b: 1-메틸-1H-이미다졸-4-아민 268b
100 mL 환저 플라스크에 화합물 268a(1.6 g, 12.6 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 160 mg), 및 에탄올(15 mL)을 넣었다. 상기 플라스크를 배기하고, 수소 가스를 넣고, 실온에서 밤새도록 교반하였다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 268b(1.2 g, 98%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 98.2
실시예 268c: 5-브로모-1-메틸-3-(1-메틸-1H-이미다졸-4-일아미노)피리딘-2(1H)-온 268c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(50 mL), 화합물 268b(1.1 g, 11.3 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(3.0 g, 11.3 mmol), Pd2(dba)3(1.0 g, 1.13 mmol), 잔트포스(1.3 g, 2.26 mmol), 및 세슘 카보네이트(7.3 g, 22.6 mmol)를 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 92℃에서 4.5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1 내지 50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 268c(2.4 g, 76 %)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 283.1
실시예 268d: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(1-메틸-1H-이미다졸-4-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 268d
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 268c(150 mg, 0.53 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(80.4 mg, 0.21 mmol), Pd(dppf)Cl2(17.2 mg, 0.021 mmol), K3PO4(89 mg, 0.42 mmol), 나트륨 아세테이트(57.1 mg, 0.42 mmol), 물(0.2 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1 내지 20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 268d(110 mg, 37.2%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 556.4.
실시예 268: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(1-메틸이미다졸-4-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 268
i-프로판올/THF(1:1, 4.0 mL) 및 물(1.0 mL) 중의 화합물 268d(100 mg, 0.18 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(189 mg, 4.5 mmol)의 혼합물을 35℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사에 물(5 mL)을 가하고, 생성 혼합물을 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 268(19.8 mg, 22%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 514.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.44 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.36 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.12-5.10 (m, 1H), 4.44-4.41 (m, 2H), 4.22-4.18 (m, 3H), 3.84-3.82 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.59 (s, 3H), 2.59-2.56 (m, 2H), 2.44-2.42 (m, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 269a: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-[(모폴린-4-일)카보닐]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-카브알데하이드 269a
Figure pat00345
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 108a(100 mg, 0.29 mmol), 1-메틸-3-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이-옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 111c(192 mg, 0.44 mmol), Pd(dppf)Cl2(12 mg, 0.015 mmol), K3PO4(123 mg, 0.58 mmol), 나트륨 아세테이트(47 mg, 0.58 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(5 방울)을 넣었다. 3 사이클의 진공/N2 플러쉬 후, 이 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피(다이클로로메탄/메탄올(40:1))로 정제하여, 화합물 269a(150 mg, 83%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 621.8
실시예 269: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(모폴린-4-카보닐)-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 269
다이클로로메탄(5 mL) 및 메탄올(5 mL) 중의 화합물 269a(150 mg, 0.24 mmol)의 용액에 NaBH4(18.2 mg, 0.482 mmol)를 가했다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후에, 이 혼합물을 수성 NH4Cl(10 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 20 m)으로 추출하였다. 합친 추출물을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하고, 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 269(114 mg, 76%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 624.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.00 (s, 1H), 8.79 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 2.0, 9.0 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.38-7.36 (m, 2H), 6.56 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.47-4.40 (m, 2H), 4.25-4.19 (m, 3H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.62-3.60 (중첩, m, 4H), 3.51 (s, 3H), 3.52-3.50 (m, 4H), 2.59-2.57 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 270a: 에틸 N-[(피라진-2-일)카바모티오일]카바메이트 270a
Figure pat00346
자석 교반기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 피라진-2-아민(7.6 g, 80.0 mmol, 1.0 당량), O-에틸 카본아이소티오사이아나티데이트(12.5 g, 95.4 mmol, 1.2 당량), 및 다이옥산(150 mL)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 감압 하에 약 20 mL의 체적으로 농축하고, 생성 현탁액을 여과하였다. 고체를 농축하고, 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 세척하고, 화합물 270a(14.0 g, 77%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI:[M+H]+ 227.3
실시예 270b: [1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-2-아민 270b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 270a(6.00 g, 26.43 mmol, 1.0 당량), 하이드록실아민 하이드로클로라이드(3.32 g, 47.52 mmol, 1.8 당량), DIPEA(12 mL), 에탄올(40 mL), 및 메탄올(40 mL)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 이를 실온으로 냉각하고, 감압 하에 약 20 mL의 체적으로 농축하였다. 생성 현탁액을 여과에 의해 수집하고, 고체를 60:1 다이클로로메탄/에탄올(50 mL)로 세척하여, 화합물 270b(3.3 g, 92%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI:[M+H]+ 136.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.84 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.70 (dd, J = 1.0, 4.0 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.47 (s, 2H).
실시예 270c: 3급-부틸 [1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-2-일카바메이트 270c
자석 교반기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 270b(2.00 g, 14.8 mmol, 1.0 당량), Boc2O(3.87 g, 17.77 mmol, 1.2 당량), 및 무수 THF(60 mL)를 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 -78℃로 냉각하고, 이어서 LHMDS(37.0 mL, 37.0 mmol, 2.5 당량, THF 중의 1.0M)를 가했다. 이 반응물을 -78℃에서 2시간 동안 교반한 후, 이를 포화된 수성 NH4Cl 용액(30 mL)으로 켄칭하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 다이클로로메탄(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:4)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 270c(1.87 g, 53%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI:[M-t-Bu]+ 180.0. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.31 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.72 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 1.25 (s, 9H).
실시예 270d: 3급-부틸 5,6,7,8-테트라하이드로-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-2-일카바메이트 270d
100 mL 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 270c(1.0 g, 4.25 mmol), 화합물 20% Pd/C(10% 습윤, 200 mg), 및 에탄올(40 mL)을 넣었다. 이어서, 이를 배기하고, 수소 가스(25 atm)로 충전하고, 60℃에서 24시간 동안 교반하였다. 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 270d(700 mg, 68%)를 수득하였다. MS-ESI: [M-t-Bu]+184.0
실시예 270e: 3급-부틸 7-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-2-일-카바메이트 270e
실시예 191i의 절차를 따르고, 화합물 270d(500 mg, 2.1 mmol, 1.0 당량), 파라폼알데하이드(630 mg, 21.0 mmol, 10.0 당량), ZnCl2/다이에틸 에터(2.1 mL, 2.1 mmol, 1.0 M), NaBH3CN(390 mg, 6.3 mmol, 3.0 당량), 및 메탄올(20 mL)로부터 출발하여 화합물 270e를 황색 고체(500 mg, 94%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M-tBu]+198.0.
실시예 270f: 7-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-2-아민 270f
실시예 131e의 절차를 따르고, 화합물 270e(500 mg, 1.97 mmol)로써 출발하고 산으로 Boc 탈보호시켜 화합물 270f를 황색 고체(200 mg, 66%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 154.1.
실시예 270g: (4-(1-메틸-5-(7-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 270g
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 270f(100 mg, 0.65 mmol, 1.7 당량), (4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 217a(200 mg, 0.38 mmol, 1.0 당량), DMF(10 mL), 및 세슘 카보네이트(499 mg, 1.52 mmol, 4.0 당량)를 넣었다. 생성 용액에 10분 동안 질소를 버블링시킨 후, 잔트포스(44 mg, 0.076 mmol, 0.20 당량) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(35 mg, 0.038 mmol, 0.10 당량)을 가했다. 이 반응 혼합물을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(50 mL)와 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하여, 화합물 270g(90 mg, 41%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 598.3.
실시예 270: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(7-메틸-6,8-다이하이드로-5H-[1,2,4]트라이아졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 270
실시예 241에 대한 절차를 따르고 화합물 270g(90 mg, 0.15 mmol)로부터 출발하여, 화합물 270을 백색 고체(47 mg, 56%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 556.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.50 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.93 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.44-4.38 (m, 2H), 4.24-4.02 (m, 5H), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.61-3.59 (m, 중첩, 5H), 2.87 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.64-2.58 (m, 2H), 2.49-2.46 (m, 2H), 2.40 (s, 3H), 1.80-1.69 (m, 4H).
실시예 271a: (S)-3급-부틸 4-(6-(5-클로로-2-메톡시피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 271a
Figure pat00347
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(40 mL), (S)-3급-부틸 4-(6-아미노 피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 101h (2.04 g, 7.0 mmol), 3-브로모-5-클로로-2-메톡시피리딘(2.8 g, 12.6 mmol), Pd2(dba)3(640 mg, 0.70 mmol), 잔트포스(404.6 mg, 0.70 mmol), 및 세슘 카보네이트(4.56 g, 14.0 mmol)를 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:3)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 271a(1.7 g, 57%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 434.2
실시예 271b: 3급-부틸 (3S)-4-(6-{[5-(2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-3-(하이드록시메틸)피리딘-4-일)-2-메톡시피리딘-3-일] 아미노}피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 271b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 271a(650 mg, 1.50 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(1.79 g, 4.5 mmol), Pd2(dba)3(137.2 mg, 0.15 mmol), P(cy)3(167.4 mg, 0.60 mmol), Cs2CO3(978 mg, 3.0 mmol), 다이옥산(20 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 리튬 하이드록사이드·일수화물(1.89 g, 45 mmol) 및 물(2.0 mL)을 가했다. 생성 혼합물을 45℃에서 4시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(3:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 271b(290 mg, 27%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 709.3
실시예 271c: 10-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-({5-[(2S)-2-메틸피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-2-일]-4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 271c
다이옥산/HCl(30 mL) 중의 화합물 271b(286.6 mg, 0.40 mmol)의 용액을 50℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이를 감압 하에 증발시켜 화합물 271c(450 mg, 조질)를 흑색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 595.3
실시예 271: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-1H-피리딘-3-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 271
메탄올(10 mL) 중의 화합물 271c(450 mg, 0.75 mmol)의 용액에 옥세탄-3-온(162 mg, 2.25 mmol), NaBH3CN(141.8 mg, 2.25 mmol), 및 ZnCl2(306 mg, 2.25 mmol)를 가했다. 이 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 물(5 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하고, 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 271(23.0 mg, 8.8%, 2 단계)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+651.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.76 (s, 1H), 8.74 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.41 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.35 (dd, J = 2.5 Hz, 8.5 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.85 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 5.16-5.13 (m, 1H), 4.72-4.69 (m, 5H), 4.54-4.53 (m, 1H), 4.36-4.35 (m, 1H), 4.19-4.17 (m, 2H), 3.89-3.87 (m, 1H), 3.56-3.49 (m, 2H), 3.11-3.09 (m, 2H), 2.60-2.48 (m, 중첩, 7H), 2.24-2.21 (m, 1H), 1.29 (s, 6H), 1.02 (d, J = 6.0 Hz, 3H)
실시예 272a: 5-브로모-1-메틸-3-(5-(1-(옥세탄-3-일)아제티딘-3-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 272a
Figure pat00348
메탄올(10 mL) 중의 3-(5-(아제티딘-3-일)피리딘-2-일아미노)-5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 239b(140 mg, 0.42 mmol), 옥세탄-3-온(91 mg, 1.26 mmol), NaBH3CN(78 mg, 1.26 mmol), 및 아연 클로라이드(171 mg, 1.26 mmol)의 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 물(5 mL)을 잔사에 가했다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 272a(145 mg, 85%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 390.8
실시예 272b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-[1-(옥세탄-3-일)아제티딘-3-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소피리딘-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 272b
환류 응축기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 화합물 272a(140 mg, 0.35 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자-트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(140 mg, 0.35 mmol), Pd(dppf)Cl2(28 mg, 0.035 mmol), 나트륨 아세테이트(58 mg, 0.70 mmol), K3PO4(148 mg, 0.70 mmol), 물(6 방울) 및 아세토나이트릴(6 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 272b(114 mg, 46%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 664.4
실시예 272: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[1-(옥세탄-3-일)아제티딘-3-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 272
i-프로판올/THF(1:1, 4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 272b(114 mg, 0.17 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(41 mg, 1.7 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 진공에서 증발시키고, 잔사를 물(5 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 272(52 mg, 50%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 622.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.77 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.90 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.61 (dd, J =2.0, 8.5 Hz,1H), 7.38 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.86-6.84 (m, 2H), 5.12-5.09 (m, 1H), 4.77-4.74 (m, 2H), 4.69-4.66 (m, 1H), 4.61-4.59 (m, 2H), 4.54 (bs, 1H), 4.36-4.32 (m, 1H), 4.19-4.17 (m, 2H), 3.90-3.83 (m, 2H), 3.80-3.77 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.71-3.68 (m, 1H), 3.30-3.27 (m,2H), 2.60-2.59 (m, 2H), 2.54 (s, 2H), 1.30 (s, 6H).
실시예 273a: [4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 273a
Figure pat00349
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 3-브로모-5-요오도-1-메틸피리딘-2(1H)-온 214b(1.57 g, 5.0 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(1.98 g, 5.0 mmol), PdCl2(dppf)(205 mg, 0.25 mmol), K3PO4(2.12 g, 10.0 mmol), 나트륨 아세테이트(820 mg, 10.0 mmol), 아세토나이트릴(45 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 30℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 273a(580 mg, 22%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 539.2. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 5.15 (s, 2H), 4.55-4.51 (m, 1H), 4.27-4.25 (m, 1H), 4.15-4.13 (m, 1H), 4.06-4.04 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 2.58-2.56 (m, 2H), 2.51 (s, 2H), 1.86 (s, 3H), 1.28 (s, 6H).
실시예 273b: (2'-(7,7-다이메틸-1-옥소-3,4,7,8-테트라하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-2(6H)-일)-1-메틸-6-옥소-5-(피리딘-2-일아미노)-1,6-다이하이드로-[3,4'-bi피리딘]-3'-일)메틸 아세테이트 273b
Figure pat00350
1-드램 바이알에 무수 1,4-다이옥산(0.2 M) 중의 화합물 273a(40 mg, 0.074 mmol), 2-아미노피리딘(1.2 당량), 세슘 카보네이트(1.5 당량), 잔트포스(10 mol%) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤) 이팔라듐(0)(5 mol%)을 가했다. 이어서, 이 반응물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 이어서 이 반응물을 다이클로로메탄(3 mL)으로 희석하고, 물(2 x 3 mL)로 세척하였다. 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 이어서 조 생성물 273b를 정제 없이 후속 단계에서 사용하였다.
실시예 273: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-6-옥소-5-(2-피리딜아미노)-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 273
1 드램 바이알에 THF 및 물(1 mL)의 4:1 혼합물 중의 화합물 273b(1 당량)를 가했다. 리튬 하이드록사이드(1.5 당량)를 이어서 혼합물에 가하고, 이 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응물을 다이클로로메탄(3 mL)으로 희석하고, 물(2 x 3 mL)로 세척하였다. 유기 층을 수집하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 조질 물질을 역상 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 273을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.73 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.17 (dd, J = 5.1, 1.9 Hz, 1H), 7.62 -7.56 (m, 1H), 7.54 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.80 (dd, J = 7.0, 5.1 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.96 -4.93 (m, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 2H), 4.24 - 4.17 (m, 2H), 3.89 - 3.84 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.58 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.43 (s, 3H), 1.22 (s, 6H).
실시예 274: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸피라진-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 274
실시예 273의 절차를 따르되, 2-아미노피리딘을 2-아미노-5-메틸피라진으로 대체하여, 화합물 274를 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.98 (s, 1H), 8.68 - 8.58 (m, 2H), 8.49 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.58 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.75 (s, 1H), 4.93 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.47 - 4.37 (m, 2H), 4.25 - 4.16 (m, 2H), 3.88 - 3.82 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.57 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.22 (s, 6H).
실시예 275: 3-[4-[5-[(5-플루오로-2-피리딜)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 275
실시예 273의 절차를 따르되, 2-아미노피리딘을2-아미노-5-플루오로피리딘으로 대체하여, 화합물 275를 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.79 (s, 1H), 8.65 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 7.58 (td, J = 8.7, 3.1 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 9.2, 3.9 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.98 - 4.91 (m, 1H), 4.46 - 4.38 (m, 2H), 4.23 - 4.16 (m, 2H), 3.88 - 3.82 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.61 - 2.51 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 276: 6-[[5-[2-(7,7-다이메틸-4-옥소-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-3-일)-3-(하이드록시메틸)-4-피리딜]-1-메틸-2-옥소-3-피리딜]아미노]피리딘-3-카보나이트릴 276
실시예 273의 절차를 따르되, 2-아미노피리딘을 2-아미노-5-사이아노피리딘으로 대체하여, 화합물 276을 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1H), 8.73 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.58 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.94 (dd, J = 9.0, 2.4 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.75 (s, 1H), 4.97 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.46 - 4.38 (m, 2H), 4.21 (s, 3H), 3.84 (s, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.58 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 2.45 (s, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 277: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[(5-메톡시-2-피리딜)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 277
실시예 273의 절차를 따르되, 2-아미노피리딘을 2-아미노-5-메톡시피리딘으로 대체하여, 화합물 277을 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.51 - 8.47 (m, 2H), 7.91 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.33 - 7.29 (m, 2H), 6.56 (s, 1H), 4.94 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.47 - 4.38 (m, 2H), 4.24 - 4.16 (m, 2H), 3.87 - 3.83 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 2.58 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 278: 3-[4-[5-[(5-사이클로프로필-2-피리딜)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 278
실시예 273의 절차를 따르되, 2-아미노피리딘을 2-아미노-5-사이클로프로필피리딘으로 대체하여, 화합물 278을 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.53 - 8.45 (m, 2H), 8.01 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 8.6, 2.5 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.96 - 4.92 (m, 1H), 4.47 - 4.41 (m, 2H), 4.24 - 4.16 (m, 2H), 3.89 - 3.85 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 2.58 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 2.44 (s, 2H), 1.86 - 1.77 (m, 1H), 1.22 (s, 6H), 0.93 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 0.90 - 0.85 (m, 1H), 0.67 - 0.58 (m, 2H).
실시예 279: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-6-옥소-5-[[5-(트라이플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 279
실시예 273의 절차를 따르되, 2-아미노피리딘을 2-아미노-5-트라이플루오로메틸피리딘으로 대체하여, 화합물 279를 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.23 (s, 1H), 8.80 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.54 - 8.46 (m, 2H), 7.88 (dd, J = 8.7, 2.6 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.97 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 4.50 - 4.40 (m, 2H), 4.26 - 4.16 (m, 2H), 3.90 - 3.81 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.58 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 280: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[1-메틸-5-(모폴린-4-카보닐)피라졸-3-일]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 280
실시예 273의 절차를 따르되, 2-아미노피리딘을 (3-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)(모폴리노)메탄온으로 대체하여, 화합물 280을 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.05 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 6.30 (s, 2H), 4.99 - 4.91 (m, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 2H), 4.23 - 4.15 (m, 7H), 3.89 - 3.82 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.59 (s, 3H), 3.27 (s, 2H), 2.58 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 281: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-2-피리딜)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 281
실시예 273의 절차를 따르되, 2-아미노피리딘을 2-아미노-5-메틸피리딘으로 대체하여, 화합물 281을 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 8.01 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.75 (s, 1H), 4.93 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.46 - 4.36 (m, 2H), 4.26 - 4.16 (m, 2H), 3.86 - 3.80 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 2.58 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.22 (s, 6H).
실시예 282a: 3,3-다이메틸사이클로펜탄온 282a
Figure pat00351
0℃로 냉각된 무수 에틸 에터(500 mL) 중의 CuI(81.0 g, 420 mmol)의 현탁액에 30 분에 걸쳐 에틸 에터 중의 메틸리튬(430 mL, 860 mmol, 2.0M) 용액을 가했다. 이 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물에 3-메틸사이클로펜트-2-에논(33.6 g, 350 mmol)을 0℃에서 1시간에 걸쳐 가했다. 생성 혼합물을 0℃에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 포화된 NH4Cl(300 mL)로 켄칭하고, 여과하였다. 여액을 에틸 에터(2 X 200 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 무수 Mg2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시켜 화합물 282a를 무색 오일(28 g, 71%)로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 2.31 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 2.05 (s, 2H), 1.79 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.12 (s, 6H).
실시예 282b: 2-클로로-4,4-다이메틸사이클로펜트-1-엔카브알데하이드 282b
0℃로 냉각된 다이클로로메탄(300 mL) 중의 DMF(18.3 g, 250 mmol)의 용액에 10 분에 걸쳐 POCl3(40.5 g, 250 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물에 화합물 282a(28.0 g, 250 mmol)를 20 분에 걸쳐 적가하였다. 생성 혼합물을 환류 온도에서 20시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 빙수(400 g) 중의 나트륨 아세테이트(60 g)의 용액에 부었다. 이 혼합물을 다이클로로메탄(2 X 300 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 물(2 X 200 mL)로 세척하고, 무수 Mg2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시켜 화합물 282b를 무색 오일(33.0 g, 조질)로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.99 (s, 1H), 2.62 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 2.38 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 1.15 (s, 6H).
실시예 282c: 에틸 5,5-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타[b]티오펜-2-카복실레이트 282c
다이클로로메탄(400 mL) 및 트라이에틸아민(60 g, 600 mmol) 중의 화합물 282b(33.0 g, 조질)의 용액에 에틸 2-머캅토아세테이트(19.2 g, 160 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 환류 온도에서 6시간 동안 가열하였다. 이어서, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에탄올(400 mL) 및 트라이에틸아민(60 g, 600 mmol)에 용해시켰다. 이 혼합물을 환류 온도에서 12시간 동안 가열하였다. 이를 다시 감압 하에 농축하고, 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 282c를 황색 고체(18.0 g, 32%, 2 단계)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 225.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.49 (s, 1H), 4.32 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.72 (s, 2H), 2.56 (s, 2H), 1.35 (t, J = 7.0 Hz, 3H),1.22 (s, 6H).
실시예 282d: 5,5-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타[b]티오펜-2-카복실산 282d
프로판-2-올(200 mL), 테트라하이드로퓨란(200 mL) 및 물(200 mL) 중의 화합물 282c(16.0 g, 71.0 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(6.82 g, 284 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 65℃에서 5시간 동안 가열하였다. 유기 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사의 pH를 염산(12M)으로 1.0로 조정하였다. 침전물을 여과에 의해 수집하고, 진공에서 건조시켜 화합물 282d(12.0 g, 86%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 196.9
실시예 282e: N-3급-부틸-5,5-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타[b]티오펜-2-카복스아마이드 282e
SOCl2(80 mL) 중의 화합물 282d(12.0 g, 61.0 mmol)의 현탁액을 65℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(20 mL)으로 희석하고, 이를 다이클로로메탄(180 mL) 중의 2-메틸프로판-2-아민(4.45 g, 61.0 mmol) 및 트라이에틸아민(18.0 g, 180 mmol)의 용액에 가했다. 생성 혼합물을 16시간 동안 교반하고, 다이클로로메탄(200 mL)로 희석하였다. 이를 물(3 X 50 mL)로 세척하고, 무수 Mg2SO4, 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 증발시켜 화합물 282e(15.0 g, 97%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 252.0
실시예 282f: N-3급-부틸-3-폼일-5,5-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타[b]티오펜-2-카복스아마이드 282f
-70℃에서 냉각된 무수 THF(60 mL) 중의 화합물 282e(1.5 g, 6.0 mmol)의 용액에 n-부틸 리튬(10.0 mL, 25 mmol, 헥산 중의 2.5 M) 용액을 5 분에 걸쳐 가했다. 이를 -70℃에서 6시간 동안 교반하였다. DMF(1.3 g, 18.0 mmol)를 5 분에 걸쳐 가하고, 생성 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 이어서, 이를 포화된 NH4Cl(40 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(2 X 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 무수 Mg2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시켜 화합물 282f를 황색 고체(1.34 g, 80%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 280.3
실시예 282g: N-3급-부틸-3-(하이드라조노메틸)-5,5-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-사이클로펜타[b]티오펜-2-카복스아마이드 282g
THF(180 mL) 중의 85% 수성 하이드라진(10 mL)의 용액에 무수 THF(20 mL) 중의 화합물 282f(5.6 g, 20.0 mmol)를 5분에 걸쳐 가했다. 이를 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 화합물 282g를 흑색 고체(6.0 g, 수율: 95%, 순도: 95%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 294.0
실시예 282h: 4,4-다이메틸-7-티아-10,11-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6),11-트라이엔-9-온 282h
30% H2SO4(100 mL) 중의 화합물 282g(3.8 g, 13.0 mmol)의 용액을 환류 온도에서 16시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄(3 X 200 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 282h를 황색 고체(1.72 g, 60%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 221.0
실시예 282i: 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10,11-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6),11-트라이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 282i
실시예 108a의 제조에 대한 절차를 따르고, 화합물 282h(330 mg, 1.5 mmol) 및 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드(950 mg, 4.5 mmol)로부터 출발하여, 화합물 282i를 황색 고체(260 mg, 48%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 359.9
실시예 282j: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10,11-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6),11-트라이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-카브알데하이드 282j
실시예 191k의 제조에 대한 절차를 따르고, 화합물 282i (216 mg, 0.60 mmol), 및 (S)-1-메틸-3-(5-(2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 191j(482 mg, 0.90 mmol)로부터 출발하여, 화합물 282j를 황색 고체(407 mg, 48%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 678.8
실시예 282: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-[(2S)-2-메틸-4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-6,8-다이하이드로사이클로펜타[3,4]티에노[1,3-d]피리다진-4-온 282
실시예 191의 절차를 따르고, 화합물 282j(370 mg, 0.55 mmol)로부터 출발하여, 화합물 282를 황색 고체(64 mg, 17%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 681.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.63 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.46-8.45 (m, 2H), 7.85(d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 5.0 Hz,1H), 7.47 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.36 (dd, J = 3.0, 9.0 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.85 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.57-4.54 (m, 2H), 4.47 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.4-4.37 (m, 3H), 3.68-3.67 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.40-3.38 (m, 1H), 3.11-3.08 (m, 1H), 2.96-2.90 (m, 3H), 2.81-2.79 (m, 2H), 2.56-2.53 (m, 1H), 2.33-2.32 (m, 2H), 2.19-2.16 (m, 1H), 1.28 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 0.93 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 283a: 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸아이속사졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 283a
Figure pat00352
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 5-메틸아이속사졸-3-아민(1.0 g, 10.2 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(4.09 g, 15.3 mmol), Pd2(dba)3(467 mg, 0.51 mmol), 잔트포스(598 mg, 1.02 mmol), Cs2CO3(6.65 g, 20.4 mmol), 및 다이옥산(50 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 반응 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 혼합물이 여전히 뜨거울 때에 이를 여과시켰다. 여액을 실온으로 냉각하고, 생성 침전물을 여과로 수집하여, 화합물 283a(1.6 g, 55%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 284.1
실시예 283b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(5-메틸-1,2-옥사졸-3-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 283b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 283a(150 mg, 0.53 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(834 mg, 2.1 mmol), Pd(dppf)Cl2(21 mg, 0.026 mmol), K3PO4(224 mg, 0.053 mmol), 나트륨 아세테이트(87 mg, 1.1 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(5 방울)을 넣었다. 3 사이클의 진공/N2 플러쉬 후, 이 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 가열하였다. 그 후, 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를 아세토나이트릴로 세척하여, 화합물 283b(100 mg, 34%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 557.3
실시예 283: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸아이속사졸-3-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 283
THF(5 mL), i-프로판올(5 mL) 및 물(5 mL) 중의 화합물 283b(90 mg, 0.162 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(3.8 mg, 1.62 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(20 mL x 3)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 283(65 mg, 78%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 514.9. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.98 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 6.25 (s, 1H), 4.93 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.48-4.38 (m, 2H), 4.25-4.19 (m, 3H), 3.87-3.85 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 2.62-2.54 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.22 (s, 6H).
실시예 284a: 2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드 284a
Figure pat00353
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1-메틸-3-(5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 163a(354 mg, 0.83 mmol), 4-클로로-2-(10-플루오로-1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)니코틴알데하이드 134c(289 mg, 0.83 mmol), PdCl2(dppf)(68 mg, 0.08 mmol), K3PO4(352 mg, 1.66 mmol), 나트륨 아세테이트(136 mg, 1.66 mmol), 아세토나이트릴(50 mL) 및 물(3 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 284a(305 mg, 60%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+:613.6.
실시예 284: 10-플루오로-2-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-(옥세탄-3-일)-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1-온 284
메탄올(20 mL) 중의 화합물 284a(250 mg, 0.41 mmol)의 현탁액에 0℃에서 나트륨 보로하이드라이드(47 mg, 1.23 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물(2 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 284(20 mg, 6.6 %)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 615.6. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.75 (s, 1H), 4.95 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.76-4.74 (m, 2H), 4.69-4.65-4.67 (m, 3H), 4.46-4.44 (m, 1H), 4.35-4.33 (m, 1H), 4.10-4.08 (m, 4H), 3.38-3.35 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.58-3.56 (m, 2H), 2.842.82 (m, 2H), 2.58-2.53 (m, 4H), 1.89-1.84 (m, 2H), 1.77-1.76 (m, 2H).
실시예 285a: 4-나이트로-1-(옥세탄-3-일)-1H-이미다졸 285a
Figure pat00354
밀봉된 튜브에 4-나이트로-1H-이미다졸(500 mg, 4.42 mmol), 3-요오도옥세탄(920 mg, 5.0 mmol), Cs2CO3(2.90 g, 8.84 mmol), 및 다이옥산(12 mL)을 넣었다. 밀봉된 튜브를 120℃에서 16시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 285a를 백색 고체(250 mg, 33%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 170.2.
실시예 285b: 1-(옥세탄-3-일)-1H-이미다졸-4-아민 285b
25 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 285a(100 mg, 0.6 mmol), 10% Pd/C(10% 습윤, 10 mg) 및 메탄올(10 mL)을 넣었다. 상기 플라스크를 배기하고, 수소 가스(풍선을 통해)로 충전하고, 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 285b(70 mg, 85%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 140.3.
실시예 285c: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(1-메틸-5-{[1-(옥세탄-3-일)-1H-이미다졸-4-일]아미노}-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 285c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 화합물 285b(40 mg, 0.28 mmol), [4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이-사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 273a(150 mg, 0.28 mmol), Pd2(dba)3(15 mg, 0.015 mmol), 잔트포스(18 mg, 0.03 mmol), 세슘 카보네이트(200 mg, 0.6 mmol) 및 1,4-다이옥산(6 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 285c를 황색 고체(80 mg, 47%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 598.3.
실시예 285: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[1-(옥세탄-3-일)이미다졸-4-일]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 285
i-프로판올/THF(3:2, 5 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 285c(80 mg, 0.13 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·H2O(55 mg, 1.3 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 물(5 mL)을 잔사에 가했다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 285(36 mg, 50%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 556.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.47-7.45 (m, 2H), 7.35-7.34 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.27-5.19 (m, 2H), 5.10-5.07 (m, 2H), 4.94-4.91 (m, 2H), 4.69-4.65 (m, 1H), 4.52-4.44 (m, 2H), 4.17-4.16 (m, 2H), 3.87-3.84 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.59-2.58 (m, 2H), 2.53 (s, 2H), 1.29 (s, 6H).
실시예 286a: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(1,2-옥사졸-3-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 286a
Figure pat00355
환류 응축기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 [4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 273a(161 g, 0.30 mmol), 아이속사졸-3-아민(25 mg, 0.30 mmol), 세슘 카보네이트(196 mg, 0.60 mmol) 및 1,4-다이옥산(10 mL)을 넣었다. 이 현탁액을 10분 동안 버블링한 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(14.0 mg, 0.015 mmol) 및 잔트포스(17 mg, 0.030 mmol)를 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 5시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 세척하였다. 합친 유기 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 286a(96 mg, 59%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 542.8.
실시예 286: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-(아이속사졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 286
THF/i-프로판올/물(5/3/2mL) 중의 화합물 286a(96 mg, 0.18 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(21 mg, 0.88 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 이 혼합물을 가압 하에 증발시키고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 286을 백색 고체(75 mg, 85%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 501.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.97 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.37 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.18 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.12-5.11 (m, 1H), 4.66-4.64 (m, 1H), 4.52-4.51 (m, 1H), 4.29-4.27 (m, 1H), 4.18-4.16 (m, 2H), 3.87-3.86 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.59-2.57 (m, 2H), 2.53-2.51 (m, 2H), 1.28 (s, 6H).
실시예 287a: N-메톡시-N-메틸-3-나이트로-1H-피라졸-5-카복스아마이드 287a
Figure pat00356
자석 교반기가 장착된 500 mL 1구 환저 플라스크에 3-나이트로-1H-피라졸-5-카복실산(15.7 g, 1.0 당량, 100 mmol), N,O-다이메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드(19.5 g, 2.0 당량, 200 mmol), HATU(76.0 g, 2.0 당량, 200 mmol), 트라이에틸아민(40.4 g, 4.0 당량, 400 mmol), 및 다이클로로메탄(300 mL)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 실온에서 밤새도록 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 287a(16.0 g, 80%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 201.1
실시예 287b: 3-아미노-N-메톡시-N-메틸-1H-피라졸-5-카복스아마이드 287b
250 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 287a(16.0 g, 1.0 당량, 80.0 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 800 mg), 및 메탄올(100 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 배기하고, 수소 가스를 넣고, 수소 분위기 하에 실온에서 밤새도록 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀리이트(등록상표) 패드로 여과시켜 제거하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 287b(11.0 g, 81%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 171.1
실시예 287c: 3-(2,5-다이메틸-1H-피롤-1-일)-N-메톡시-N-메틸-1H-피라졸-5-카복스아마이드 287c
자석 교반기 및 딘-스타크 트랩이 장착된 250 mL 환저 플라스크에 화합물 287b(11.0 g, 1.0 당량, 64.7 mmol), 헥산-2,5-다이온(11.1 g, 1.5 당량, 97.2 mmol), p-톨루엔설폰산·일수화물(558 mg, 0.05 당량, 3.24 mmol), 및 톨루엔(100 mL)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 밤새도록 환류시켰다. 생성 혼합물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(1:2)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 287c(10.4 g, 65%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 249.0
실시예 287d: 3급-부틸 2-(3-(2,5-다이메틸-1H-피롤-1-일)-5-(메톡시(메틸)카밤오일)-1H-피라졸-1-일)에틸카바메이트 287d
2자석 교반기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 287c(10.4 g, 1.0 당량, 41.9 mmol), 3급-부틸 2-클로로에틸카바메이트(37.7 g, 5.0 당량, 210.0 mmol), Na2CO3(22.3 g, 5.0 당량, 210.0 mmol), 및 DMF(100 mL)를 넣었다. 이 반응 혼합물을 110℃에서 밤새도록 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 생성 혼합물을 물(200 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(3 X 100 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 에틸 아세테이트로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 287d(10.8 g, 66%)를 황색 오일로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 392.0
실시예 287e: 3급-부틸 2-(5-아세틸-3-(2,5-다이메틸-1H-피롤-1-일)-1H-피라졸-1-일)에틸카바메이트 287e
2자석 교반기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 N2 보호 하에 화합물 287d(7.82 g, 1.0 당량, 20.0 mmol) 및 THF(100 mL)를 넣었다. MeMgBr(에터 중의 3.0 M)(17 mL, 2.5 당량, 50.0 mmol)의 용액을 -78℃에서 가했다. 이 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 포화된 NH4Cl 용액으로 켄칭하였다. 이어서, 감압 하에 농축하고, 잔사를 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(4:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 287e를 무색 오일(5.40 g, 78%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 347.0. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.57 (s, 1H), 5.91 (s, 2H), 4.93 (bs, 1H), 4.71 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.62 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.57 (s, 3H), 2.16 (s, 6H), 1.28 (s, 9H).
실시예 287f: 2-(2,5-다이메틸-1H-피롤-1-일)-4-메틸-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 287f
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 287e(5.40 g, 1.0 당량, 15.6 mmol), CF3COOH(10 mL), 및 다이클로로메탄(50 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하여 조질물 287f를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 229.1
실시예 287g: 2-(2,5-다이메틸-1H-피롤-1-일)-4-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 287g
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 287f (3.56 g, 1.0 당량, 15.6 mmol), NaBH4(2.96 g, 5.0 당량, 78.0 mmol), 및 메탄올(50 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물(50 mL)과 다이클로로메탄(50 mL) 사이에 분배하였다. 수 상을 다이클로로메탄(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 287g를 무색 오일(1.54 g, 43% 2 단계)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 231.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 5.91 (s, 1H), 5.86 (s, 2H), 4.17-4.11 (m, 3H), 3.51-3.48 (m, 1H), 3.36-3.31 (m, 1H), 2.13 (s, 6H), 1.50 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 287h: 2-(2,5-다이메틸-1H-피롤-1-일)-4,5-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 287h
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 287g(1.54 g, 1.0 당량, 6.70 mmol), 폼알데하이드(물 중의 37%)(1.09 g, 2.0 당량, 13.4 mmol), NaBH3CN(2.11 g, 5.0 당량, 33.5 mmol), HOAc(3 mL), 및 메탄올(30 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물(50 mL)과 다이클로로메탄(50 mL) 사이에 분배하였다. 수 상을 다이클로로메탄(3 X 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하여 조질물 287h를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 245.0
실시예 287i: 4,5-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 287i
환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 287h(1.63 g, 1.0 당량, 6.70 mmol), NH2OH.HCl(2.33 g, 5.0 당량, 33.5 mmol), 및 에탄올(50 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 2 일 동안 환류시켰다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 287i를 황색 고체(211 mg, 19%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 167.1. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 5.36 (s, 1H), 4.04-4.00 (m, 1H), 3.94-3.92 (m, 1H), 3.61 (bs, 2H), 3.30 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 3.10-3.08 (m, 1H), 2.81-2.75 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 287j: (4-(5-(4,5-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 287j
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 화합물 287i(20 mg, 1.0 당량, 0.12 mmol), (4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 273a(127 mg, 2.0 당량, 0.24 mmol), Pd2(dba)3(9.0 mg, 0.1 당량, 0.010 mmol), 잔트포스(11 mg, 0.2 당량, 0.020 mmol), Cs2CO3(78 mg, 2.0 당량, 0.24 mmol), 및 다이옥산(5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/N2 플러쉬 후, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 287j를 갈색 고체(60 mg, 82%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 610.9
실시예 287: 2-[4-[5-[(4,5-다이메틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 287
자석 교반기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 287j(60 mg, 1.0 당량, 0.098 mmol), 리튬 하이드록사이드(12 mg, 5.0 당량, 0.49 mmol), i-프로판올/THF(4/4 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 287을 황색 고체(24 mg, 43%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 568.9. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.72 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.04-5.02 (m, 1H), 4.64-4.62 (m, 1H), 4.56-4.54 (m, 1H), 4.39-4.37 (m, 1H), 4.17-3.92 (m, 4H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.45-3.37 (m,1H), 3.17-3.14 (m, 1H), 2.89-2.81 (m, 1H), 2.64-2.58 (m, 4H), 2.48 (s, 3H), 1.93-1.89 (m, 2H), 1.81-1.80 (m, 2H), 1.46 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 288a: 1-메틸-3-(5-메틸아이속사졸-3-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 288a
Figure pat00357
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸아이속사졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 283a(330 mg, 1.16 mmol), Pin2B2(442 mg, 1.74 mmol), Pd2(dba)3(53 mg, 0.058 mmol), 잔트포스(55 mg, 0.116 mmol), 칼륨 아세테이트(227 mg, 2.32 mmol), 및 다이옥산(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/N2 플러쉬 후, 이 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를 석유 에터로 세척하여, 화합물 288a(300 mg, 78%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 332.3
실시예 288b: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10,11-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6),11-트라이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(5-메틸-1,2-옥사졸-3-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리딘-3-일}피리딘-3-카브알데하이드 288b
자석 교반기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10,11-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6),11-트라이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 282i(72 mg, 0.20 mmol), 화합물 288a(102 mg, 0.30 mmol), PdCl2(dppf)(16 mg, 0.020 mmol), K3PO4(85 mg, 0.40 mmol), 나트륨 아세테이트(33 mg, 0.40 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 혼합물에 10분 동안 질소를 버블링시킨 후, 환류 응축기를 상기 플라스크에 부착시키고, 이 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 288b를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 529.3.
실시예 288: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸아이속사졸-3-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-6,8-다이하이드로사이클로펜타[3,4]티에노[1,3-d]피리다진-4-온 288
메탄올(10 mL) 중의 화합물 288a(82 mg, 0.16 mmol) 및 NaBH4(18.1 mg, 0.48 mmol)의 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(5 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 288(54 mg, 2 단계: 34%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 531.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.0 (s, 1H), 8.57 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.00 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.25 (s, 1H), 4.86 (bs, 1H), 4.39 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 3.60 (s, 3H), 2.91 (s, 2H), 2.81 (s, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.28 (s, 6H).
실시예 289a: 3급-부틸 3-아미노-1H-피라졸-1-카복실레이트 289a
Figure pat00358
1,4-다이옥산(35 mL) 중의 3-사이클로프로필-1H-피라졸-5-아민(3.0 g, 36 mmol) 및 트라이에틸아민(7.6 g, 75 mmol)의 혼합물에 (Boc)2O(7.8 g, 36 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(3:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼으로 정제하여, 화합물 289a를 백색 고체(3.4 g, 52%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 184.1.
실시예 289b: 3-(1H-피라졸-3-일아미노)-5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 289b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 289a(2.2 g, 12 mmol), 잔트포스(0.69 g, 1.2 mmol), Pd2(dba)3(1.1 g, 1.2 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(6.4 g, 24 mmol), Cs2CO3(15.6 g, 48 mmol) 및 1,4-다이옥산(50 mL)을 넣었다. 생성 혼합물을 통해 질소를 10분 동안 버블링한 후, 이를 105℃에서 15시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 이를 메탄올(8 mL)로 세척하고, 화합물 289b를 연황색 고체(1.2 g, 37%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 269.1.
실시예 289c: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-6-옥소-5-[(1H-피라졸-3-일)아미노]-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 289c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 289b(200 mg, 0.74 mmol), (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-{3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(360 mg, 0.90 mmol), PdCl2(dppf)(41 mg, 0.050 mmol), K3PO4(320 mg, 1.5 mmol), 나트륨 아세테이트(123 mg, 1.5 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.2 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, 이어서 N2로 재충전하였다. 그 후, 이를 90℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 289c를 연황색 고체(150 mg, 38%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 542.3.
실시예 289: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-6-옥소-5-(1H-피라졸-3-일아미노)-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 289
THF(4 mL), i-프로판올(4 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 289c(150 mg, 0.28 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·수화물(236 mg, 5.6 mmol)의 혼합물을 40℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 물(10 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(3 X 15 mL)로 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 289를 연황색 고체(25 mg, 18%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 499.9. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.07 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.55-7.54 (m, 1H), 7.40-7.39 (m, 1H), 7.32 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 4.94-4.92 (m, 1H), 4.48-4.47 (m, 1H), 4.41-4.39 (m, 1H), 4.23-4.17 (m, 3H), 3.84-3.82 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.58-2.56 (m, 2H), 2.50-2.42 (m, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 290a: 5-브로모-1-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 290a
Figure pat00359
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(100 mL), 1-메틸-1H-피라졸-3-아민(970 mg, 10.0 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2-(1H)-온(2.9 g, 11 mmol), 및 세슘 카보네이트(6.5 g, 20.0 mmol)를 넣었다. 이 현탁액을 10분 동안 버블링한 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(457 mg, 0.50 mmol) 및 잔트포스(587 mg, 1.0 mmol)를 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 환류 온도에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 50 mL)으로 세척하고, 합친 유기 여액을 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 290a를 황색 고체(900 mg, 32%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 283.1
실시예 290b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(1-메틸-1H-피라졸-3-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 290b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이-사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(595 mg, 1.5 mmol), 화합물 290a(282 mg, 1.0 mmol), K3PO4(424 mg, 2.0 mmol), 나트륨 아세테이트(164 mg, 2.0 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(82 mg, 0.1 mmol), 및 아세토나이트릴/물(15/1 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/N2 플러쉬 후, 이 혼합물을 100℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(30 mL)과 물(30 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 50/1)으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 290b(300 mg, 54%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 556.1
실시예 290: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(1-메틸피라졸-3-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 290
THF(5mL), 프로판-2-올(5 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 290b(139 mg, 0.25 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(60 mg, 2.5 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(20 mL)과 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 추출물을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 290(30 mg, 23%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 514.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 6.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.97 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.47-4.40 (m, 2H), 4.24-4.18 (m, 3H), 3.85-3.83 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 2.58-2.56 (m, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 291a: (4-{1-메틸-5-[(5-메틸-1,2-옥사졸-3-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}-2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 291a
Figure pat00360
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 (2-{6-옥소-8-티아-4,5-다이아자트라이사이클로[7.4.0.02,7]트라이데카-1(9),2(7),3-트라이엔-5-일}-4-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 230i(150 mg, 0.31 mmol), 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸아이속사졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 283a(88 mg, 0.31 mmol), PdCl2(dppf)(24 mg, 0.031 mmol), K3PO4(131 mg, 0.62 mmol), 나트륨 아세테이트(61 mg, 0.62 mmol), 물(0.2 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(20 mL)과 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 수 층을 다이클로로메탄(2 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 291a(104 mg, 60%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 559.1
실시예 291: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸아이속사졸-3-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-6,7,8,9-테트라하이드로벤조티오페노[2,3-d]피리다진-4-온 291
THF/i-프로판올/물(10/5/5 mL) 중의 화합물 291a(100 mg, 0.18 mmol)의 용액에 실온에서 리튬 하이드록사이드(43 mg, 1.8 mmol)를 가했다. 1시간 동안 교반한 후, MS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 그 후, 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 물(10 mL)과 다이클로로메탄(15 mL) 사이에 분배하였다. 수 상을 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 291(56 mg, 60%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 517.2. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.02 (s, 1H), 8.58 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.00 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.25 (s, 1H), 4.87-4.85 (m, 1H), 4.42-4.36 (m, 2H), 3.61 (s, 3H), 2.98-2.85 (m, 4H), 2.32 (s, 3H), 1.92-1.86 (m, 4H).
실시예 292a: 4-{5-[(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리딘-3-일}-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10,11-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),(6),11-트라이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 292a
Figure pat00361
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 3-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 242a(344 mg, 1.0 mmol), 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10,11-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6),11-트라이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 282i(538.5 mg, 1.5 mmol), Pd2(dba)3(91.5 mg, 0.10 mmol), 트라이사이클로헥실포스핀(112 mg, 0.40 mmol), 세슘 카보네이트(652 mg, 2.0 mmol), 1,4-다이옥산(20 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 75℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 석유 에터로 세척하여, 화합물 292a(300 mg, 조질)를 흑색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 542.2
실시예 292: 3-[4-[5-[(1,5-다이메틸피라졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-6,8-다이하이드로사이클로펜타[3,4]티에노[1,3-d]피리다진-4-온 292
메탄올(6 mL) 중의 화합물 292a(162.6 mg, 0.30 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(114 mg, 3.0 mmol)를 0℃에서 가했다. 이 반응물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 물(10 mL)로 켄칭하였다. 생성 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 292(35 mg, 22%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 543.8. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.57 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 8.02 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.90 (s, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.40 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 2.92 (d, J = 4.5 Hz, 2H), 2.81 (s, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.28 (s, 6H).
실시예 293a: 1-메틸-4-나이트로-1H-1,2,3-트라이아졸 293a
Figure pat00362
0℃에서 4-나이트로-2H-1,2,3-트라이아졸(2.0 g, 17.5 mmol) 및 THF(10 mL)를 함유하는 100 mL 1구 환저 플라스크에 NaH(1.7 g, 35.0 mmol, 2.0 당량)를 가했다. 이 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. 아세톤(40 mL) 중의 요오도메탄(3.68 g, 26.3 mmol, 1.5 당량)의 용액을 가하고, 생성 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 0℃에서 물(20 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(100 mL)으로 희석하였다. 이어서, 이를 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(6:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 293a(800 mg, 35%)를 연황색 고체로서 및 구조이성질체 1-메틸-5-나이트로-1H-1,2,3-트라이아졸(1.34 g, 60%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.34 (s, 1H), 4.26 (s, 3H).
실시예 293b: 1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-아민 293b
실시예 130b의 절차를 따르고, 화합물 293a(800 mg, 6.25 mmol) 및 10% Pd/C(50% 습윤, 160 mg)로부터 출발하여 화합물 293b를 황색 고체(600 mg, 98%)로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.91 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.65 (brs, 2H).
실시예 293c: 5-브로모-1-메틸-3-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일아미노)피리딘-2(1H)-온 293c
실시예 130c의 절차를 따르고, 화합물 293b(500 mg, 5.10 mmol, 1.0 당량) 및 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(2.04 g, 7.65 mmol, 1.5 당량)으로부터 출발하여 화합물 293c를 황색 고체(760 mg, 52%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 283.9.
실시예 293d: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 293d
실시예 283b의 절차를 따르고, 화합물 293c(150 mg, 0.53 mmol, 1.0 당량) 및 {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(629 mg, 1.59 mmol, 3.0 당량)으로부터 출발하여 화합물 293d를 황색 고체(110 mg, 37%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 557.4.
실시예 293: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(1-메틸트라이아졸-4-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 293
실시예 283의 절차를 따르고, 화합물 293d(110 mg, 0.20 mmol)로부터 출발하여 화합물 293을 연황색 고체(78 mg, 75%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 514.9. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.33 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.25 (brs, 1H), 4.65-4.38 (m, 3H), 4.21-4.20 (m, 2H), 4.08 (s, 3H), 3.89-3.85 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.59 (s, 2H), 2.54 (s, 2H), 1.29 (s, 6H).
실시예 294: 3-[4-[5-[(5-3급-부틸아이속사졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 294
실시예 273의 절차를 따르되, 2-아미노피리딘을 5-(3급-부틸)아이속사졸-3-아민으로 대체하여, 화합물 294를 제조하였다(5.1 mg, 16% 수율). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.93 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.22 (s, 1H), 4.90 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.51 - 4.36 (m, 2H), 4.26 - 4.16 (m, 3H), 3.85 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 3.60 (s, 3H), 2.58 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.27 (s, 9H), 1.22 (s, 6H). ES-MS m/z 557.4 [M+1].
실시예 295a: 5-에틸아이속사졸-3-아민 295a
Figure pat00363
물(20 mL) 중의 3-옥소펜탄나이트릴(1.0 g, 10.3 mmol)의 용액에 NaOH(535.6 mg, 13.4 mmol)를 가했다. 5분 동안 교반한 후, 하이드록실아민 하이드로클로라이드(787.4 mg, 11.33 mmol)를 가하고, 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 가열하였다. 이 시점에서, 진한 HCl(3 mL)을 가하고, 이 반응 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 수성 NaOH(30%)로써 pH를 10으로 조정하였다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(2:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 295a를 황색 고체(300 mg, 25%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 113.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 5.55 (s, 1H), 5.40 (s, 2H), 2.56-2.52 (m, 2H), 1.13 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
실시예 295b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{5-[(5-에틸-1,2-옥사졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 295b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 295a(24.8 mg, 0.222 mmol), [4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이-사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 273a(100 mg, 0.185 mmol), Pd2(dba)3(8.5 mg, 0.0093 mmol), 잔트포스(10.7 mg, 0.019 mmol), Cs2CO3(120.6 mg, 0.37 mmol), 및 다이옥산(10 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 N2 보호 하에 3시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 아세토나이트릴(0.5 mL)로 세척하여, 화합물 295b를 백색 고체(52 mg, 49.5%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 570.8
실시예 295: 3-[4-[5-[(5-에틸아이속사졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 295
THF(4 mL), i-프로판올(4 mL) 및 물(4 mL) 중의 화합물 295b(42 mg, 0.0736 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(17.7 mg, 0.736 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물(5 mL)로 희석하고, 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 295(22 mg, 57%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 528.8. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.99 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 6.25 (s, 1H), 4.94-4.92 (m, 1H), 4.48-4.38 (m, 2H), 4.26-4.19 (m, 3H), 3.87-3.85 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.68-2.66 (m, 2H), 2.62-2.59 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H), 1.19 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
실시예 296a: (3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올 296a
Figure pat00364
질소 주입구가 장착된 100 mL 3구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 3-나이트로피라졸-5-카복실산(0.56 g, 3.56 mmol) 및 THF(8 mL)를 넣었다. 이 시스템을 얼음/아세톤 욕을 사용하여 -5℃로 냉각하였다. 보란-THF 복합 용액(1.0M, 11 mL, 11.0 mmol)을 내부 반응 온도를 5℃ 미만으로 유지시키는 속도로 가했다. 첨가 완료 후 냉각 욕을 제거하고, 이 반응물을 60℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 얼음/아세톤 욕을 사용하여 -5℃로 냉각하고, 물(2 mL) 및 4N 염산(2 mL)을 가했다. 이 반응 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 보란-피라졸 복합체를 파괴하기 위해 교반하였다. 이를 실온으로 냉각하고, 감압 하에 약 1 mL의 부피로 농축하였다. 에틸 아세테이트(20 mL) 및 물(10 mL)을 가하고, 이 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(4 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 포화된 수성 중탄산 나트륨(2 x 10 mL), 염수(10 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 296a(345 mg, 68%)를 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 144
실시예 296b: (1-(2-브로모에틸)-3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올 296b
DMF(5 mL) 중의 화합물 296a(345 mg, 2.41 mmol), 및 세슘 카보네이트(965 mg, 2.96 mmol)의 혼합물을 얼음/아세톤 욕을 사용하여 0℃로 냉각하고, 다이브로모에탄(4.48 g, 24.1 mmol)을 분획들로 나누어 가했다(발열 없음). 이 반응물을 0℃에서 1시간 동안 및 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 이시간 후에, 에틸 아세테이트(20 mL) 및 물(15 mL)을 가했다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 물(10 mL)로 세척하고, 염수(10 mL), 및 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과로 제거하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이를 석유 에터/에틸 아세테이트(6:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 296b(300 mg, 50%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 250
실시예 296c: 1-(2-브로모에틸)-5-(클로로메틸)-3-나이트로-1H-피라졸 296c
질소 주입구 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 3구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 296b(438 mg, 1.76 mmol) 및 클로로폼(10 mL)을 넣었다. 이 반응물을 얼음/아세톤 욕을 사용하여 -5℃로 냉각하고, SOCl2(628 mg, 5.28 mmol)를 분획들로 나누어 가했다. 냉각 욕을 제거하고, 이 반응물을 70℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이시간 후에, 용매를 감압 하에 제거하였다. 에틸 아세테이트를 잔사에 가하고, 생성 용액을 -5℃로 냉각하였다. pH 8.5가 될 때까지 포화된 수성 중탄산 나트륨(3 mL)을 가했다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 합친 유기 층을 포화된 수성 탄산 나트륨(2 x 5 mL), 염수(10 mL)으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과로 제거하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 296c(284 mg, 60%)를 수득하였다.
실시예 296d: 5-(2-메톡시에틸)-2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 296d
자석 교반기가 장착된 마이크로 바이알에 화합물 296c(2.67 g, 10.0 mmol), 2-메톡시에탄아민(2.25 g, 30.0 mmol), 및 DMSO(14 mL)를 넣었다. 이 반응 혼합물을 120℃에서 마이크로파 조사 하에 1.0시간 동안 가열하였다. 이를 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(40 mL)로 희석하였다. 이 혼합물을 물(3 X 15 mL)로 세척하였다. 유기 층을 건조하고, 여과하였다. 여액을 가압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 296d(1.7 g, 75%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 227.0
실시예 296e: 5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 296e
에탄올(50 mL) 중의 화합물 296d(1.7 g, 7.5 mmol)의 용액에 Pd/C(10%, 800 mg)를 가했다. 이 반응물을 수소 가스(풍선을 통해)로 충전하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 이 혼합물을 셀라이트(등록상표) 플러그로 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 화합물 296e를 황색 고체(1.2 g, 82%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 직접 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 197.3
실시예 296f: 5-브로모-3-(5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 296f
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(40 mL), 화합물 296e(588 mg, 3.0 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(800 mg, 3.0 mmol), 및 세슘 카보네이트(1.96 g, 6.0 mmol)를 넣었다. 이 현탁액을 20분 동안 버블링한 후, 잔트포스(173 mg, 0.30 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(137 mg, 0.15 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 5시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 15 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔류 고체를 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 296f(745 mg, 65%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 382.9
실시예 296g: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(5-{[5-(2-메톡시에틸)-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 296g
환류 응축기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(198 mg, 0.50 mmol), 화합물 296f(190 mg, 0.50 mmol), K3PO4(212 mg, 1.0 mmol), 나트륨 아세테이트(82 mg, 1.0 mmol), Pd(dppf)Cl2(21 mg, 0.025 mmol), 아세토나이트릴(8 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 N2 보호 하에 1시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(20 mL)과 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 수 층을 다이클로로메탄(2 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 296g(163 mg, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 654.9
실시예 296: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-(2-메톡시에틸)-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 296
THF/i-프로판올/물(8/5/3mL) 중의 화합물 296g(160 mg, 0.245 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(29 mg, 1.22 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 가압 하에 증발시켰다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 296을 백색 고체(117 mg, 78%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 613.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.71 (s, 1H), 5.05 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 4.66-4.65 (m, 1H), 4.52-4.50 (m, 1H), 4.36-4.34 (m, 1H), 4.17-4.05 (m, 2H), 4.10-4.08 (m, 2H), 3.88-3.87 (m, 1H), 3.75-3.73 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.61-3.59 (m, 2H), 2.40 (s, 3H), 3.04-3.03 (m, 2H), 2.80 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.59-2.57 (m, 2H), 2.54-2.53 (m, 2H), 1.29 (s, 6H).
실시예 297a: 6-클로로-2-메틸-4-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온 297a
Figure pat00365
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(30 mL), 5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 113e(1.70 g, 11.2 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(2.68 g, 12.0 mmol), 및 세슘 카보네이트(7.30 g, 22.4 mmol)를 넣었다. 이 현탁액을 통해 30분 동안 버블링한 후, 잔트포스(0.59 g, 1.02 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(467 mg, 0.51 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플래쉬로 처리하고, 90℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 진공에서 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 297a(1.9 g, 60%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ 295.1
실시예 297b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-메틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 297b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 화합물 297a(195 mg, 0.66 mmol), (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 199e(315 mg, 0.66 mmol), PdCl2(dppf)(40 mg, 0.050 mmol), K3PO4(250 mg, 1.2 mmol), 나트륨 아세테이트(100 mg, 1.20 mmol), 아세토나이트릴(8 mL) 및 물(1 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, 이어서 N2로 재충전하였다. 이어서, 이를 100℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 297b를 황색 고체(150 mg, 38%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 612.3.
실시예 297: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-옥소-피리다진-3-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 297
THF(8 mL), i-프로판올(8 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 297b(150 mg, 0.24 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·수화물(96 mg, 2.4 mmol)의 혼합물을 40℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 다이클로로메탄(15 mL)과 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 297을 연황색 고체(98 mg, 70%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 570.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.30 (s, 1H), 8.52 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.38 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.74-4.73 (m, 1H), 4.60-4.58 (m, 1H), 4.40-4.37 (m, 1H), 4.26-4.24 (m, 1H), 4.19-4.18 (m, 2H), 3.96-3.95 (m, 2H), 3.89-3.87 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.53-3.52 (m, 2H), 2.80-2.78 (m, 2H), 2.57-2.55 (m, 2H), 2.52-2.50 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.22 (s, 6H).
실시예 298a: (4-{5-[(5-사이아노피라진-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 298a
Figure pat00366
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 [4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 273a(269 mg, 0.50 mmol), 5-아미노피라진-2-카보나이트릴(60 mg, 0.50 mmol), 잔트포스(29 mg, 0.050 mmol), Pd2(dba)3(45 mg, 0.050 mmol), Cs2CO3(326 mg, 1.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(10 mL)을 넣었다. 3회의 대기/아르곤 플러쉬 후에 이 반응 혼합물을 100℃에서 마이크로파 조사 하에 1시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 여과하고, 고체를 메탄올(50 mL)로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 증발시키고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 298a(200 mg, 69%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 579.3.
실시예 298: 5-[[5-[2-(7,7-다이메틸-4-옥소-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-3-일)-3-(하이드록시메틸)-4-피리딜]-1-메틸-2-옥소-3-피리딜]아미노]피라진-2-카보나이트릴 298
i-프로판올/THF(5 mL/5 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 298a(200 mg, 0.35 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(84 mg, 3.5 mmol)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(20 mL)와 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 298(40 mg, 21%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 537.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.96 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.701 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.00 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.42-4.39 (m, 2H), 4.24-4.19 (m, 3H), 3.84 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 2.57 (m, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.23 (s, 6H)
실시예 299a: 5-페닐아이속사졸-3-아민 299a
Figure pat00367
물(10 mL)/EtOH(10 mL) 중의 3-옥소-3-페닐프로판나이트릴(1.5 g, 10.3 mmol) 및 NaOH(452 mg, 11.3 mmol)의 교반 용액에 (785 mg, 11.3 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 80℃에서 밤새도록 교반하였다. 이 시점에서, 진한 HCl(1.3 mL, 15.5 mmol)를 가하고, 생성 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 pH 10으로 염기성화시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:50 내지 1:10)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 299a를 황색 고체(1.1 g, 68%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+161.3.
실시예 299b: 5-브로모-1-메틸-3-(5-페닐아이속사졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 299b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(40 mL), 화합물 299a(640 mg, 4.0 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.1 g, 4.0 mmol), Pd2(dba)3(366.8 mg, 0.40 mmol), 잔트포스(462.4 mg, 0.80 mmol), 및 세슘 카보네이트(2.6 g, 8.0 mmol)를 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 92℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 아세토나이트릴로 세척하여, 화합물 299b(1.7 g, 87%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 346.0.
실시예 299c: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-6-옥소-5-[(5-페닐-1,2-옥사졸-3-일)아미노]-1,6-다이하이드로피리딘-피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 299c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 299b(138 mg, 0.40 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자-트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(158.8 mg, 0.40 mmol), Pd(dppf)Cl2(32.7 mg, 0.040 mmol), K3PO4(169.6 mg, 0.80 mmol), 나트륨 아세테이트(108.8 mg, 0.80 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 299c를 갈색 고체(120 mg, 49%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 618.8.
실시예 299: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-6-옥소-5-[(5-페닐아이속사졸-3-일)아미노]-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 299
i-프로판올/THF(1:1, 4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 299c(100 mg, 0.16 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(96 mg, 4.0 mmol)의 혼합물을 40℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 물(5 mL)로 희석하였다. 생성 혼합물을 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 299를 백색 고체(35 mg, 31%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 576.8. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.17 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.79-7.77 (m, 2H), 7.60 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.55-7.49 (m, 3H), 7.35 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.96-4.93 (m, 1H), 4.50-4.40 (m, 2H), 4.26-4.19 (m, 3H), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 2.62-2.59 (m, 2H), 2.44-2.42 (m, 2H), 1.23 (s, 6H).
실시예 300a: 5-(1-메톡시프로판-2-일)-2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 300a
Figure pat00368
자석 교반기가 장착된 마이크로 바이알에 1-(2-브로모에틸)-5-(클로로메틸)-3-나이트로-1H-피라졸 296c(1.0 g, 3.7 mmol), 1-메톡시프로판-2-아민(1.0 g, 11.2 mmol), 및 DMSO(6 mL)를 넣었다. 이 혼합물을 120℃에서 마이크로파 조사 하에 1.0시간 동안 가열하였다. 이를 실온으로 냉각하고, 물(30 mL)로 희석하였다. 생성 혼합물을 에틸 아세테이트(3 X 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(60/1 내지 1/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 300a(600 mg, 68%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 241.0
실시예 300b: 5-(1-메톡시프로판-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 300b
EtOH(40 mL) 중의 화합물 300a(600 mg, 2.5 mmol)의 용액을 Pd/C(10%, 60 mg)를 가했다. 이 반응 혼합물에 수소 가스 (풍선을 통해)를 충전하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 이 혼합물을 셀라이트(등록상표) 플러그로 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 300b를 황색 고체(467 mg, 89%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 211.1
실시예 300c: 5-브로모-3-(5-(1-메톡시프로판-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]-피라진-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 300c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(40 mL), 화합물 300b(400 mg, 1.9 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(H-001)(508 mg, 1.9 mmol), 및 세슘 카보네이트(1.24 g, 3.8 mmol)를 넣었다. 이 현탁액을 20분 동안 버블링한 후, 잔트포스(109 mg, 0.19mmol) 및 Pd2(dba)3(87 mg, 0.095 mmol)를 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 5시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 30 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 300c(436 mg, 58%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 396.0
실시예 300d: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(5-{[5-(1-메톡시프로판-2-일)-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 300d
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(238 mg, 0.60 mmol), 화합물 300c(240 mg, 0.80 mmol), K3PO4(254 mg, 1.2 mmol), 나트륨 아세테이트(98 mg, 1.6 mmol), Pd(dppf)Cl2(22 mg, 0.030 mmol), 및 아세토나이트릴/물(12/0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 N2 보호 하에 1시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(30 mL)과 물(30 mL) 사이에 분배하였다. 수 층을 다이클로로메탄(2 x 30 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 300d(200 mg, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 669.4
실시예 300: (R)-2-(3'-(하이드록시메틸)-5-((5-(1-메톡시프로판-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4'-bi피리딘]-2'-일)-7,7-다이메틸-2,3,4,6,7,8-헥사하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 300
THF/i-프로판올/물(6/3/3mL) 중의 화합물 300d(200 mg, 0.30 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(36 mg, 1.5 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(15 mL)와 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 수 상을 에틸 아세테이트(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 분취용 HPLC 및 키랄 분해에 의해 2 종의 거울상 이성질체를 수득하였다. 화합물 300(35 mg, 18.6%)을 백색 고체로서 수득하고, 화합물 303(28 mg, 15%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 627.4. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.72 (s, 1H), 5.05-5.03 (m,1H), 4.67-4.45 (m,1H), 4.52-4.50 (m, 1H), 4.35-4.31 (m, 1H), 4.18-4.16 (m, 2H), 4.09-4.07 (m, 2H), 3.87-3.85 (m, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.56-3.52 (m, 1H), 3.45-3.43 (m, 1H), 3.38 (s, 3H), 3.11-3.08 (m, 3H), 2.60-2.58 (m, 2H), 2.53 (s, 2H), 1.29 (s, 6H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 301a: 6-(트라이플루오로메틸)피리다진-3-아민 301a
Figure pat00369
THF(3 mL) 중의 3-클로로-6-트라이플루오로메틸피리다진(1.6 g, 8.80 mmol) 및 암모늄 하이드록사이드(9 mL)의 혼합물을 100℃에서 마이크로파 반응기에서 1시간 동안 가열하였다. 이 기간 후에, 이 반응 혼합물을 증발시키고, 잔사를 다이클로로메탄으로 추출하였다. 합친 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 증발시켜 화합물 301a(1.3 g, 93%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 164.1
실시예 301b: 5-브로모-1-메틸-3-(6-(트라이플루오로메틸)피리다진-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 301b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 301a(750 mg, 4.6 mmol), 잔트포스(532 mg, 0.92 mmol), Pd2dba3(421 mg, 0.46 mmol), 2-브로모-4-클로로니코틴알데하이드(H-001)(1.84 g, 6.9 mmol), Cs2CO3(3.0 g, 9.2 mmol) 및 1,4-다이옥산(50 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 90℃에서 밤새도록 가열하였다. 반응 완료 후에, 이 혼합물을 여과하고, 고체를 메탄올(30 mL)로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 증발시키고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 301b(1.38 g, 89%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 350.8
실시예 301c: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(1-메틸-6-옥소-5-{[6-(트라이플루오로메틸)피리다진-3-일]아미노}-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 301c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 301b(300 mg, 0.86 mmol), (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 199e(824 mg, 1.72 mmol), CH3COONa(140 mg, 1.72 mmol), PdCl2(dppf)(70 mg, 0.086 mmol), K3PO4(360 mg, 1.72 mmol), 아세토나이트릴(20 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 생성 혼합물을 통해 질소를 20분 동안 버블링한 후, 이를 100℃에서 질소 분위기 하에 2시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시키고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 301c를 백색 고체(125 mg, 23%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 622.3
실시예 301: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-6-옥소-5-[[6-(트라이플루오로메틸)피리다진-3-일]아미노]-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 301
i-프로판올/THF/물(6 mL /4 mL /2 mL) 중의 화합물 301c(90 mg, 0.14 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(24 mg, 0.56 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 다이클로로메탄(20 mL)과 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 301c를 백색 고체(39 mg, 48%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 580.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.57 (s, 1H), 8.87 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.98-4.97 (m, 1H), 4.48-4.40 (m, 2H), 4.27-4.20 (m, 3H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 2.62-2.53 (m, 2H), 2.42-2.41 (m, 2H), 1.2 (s, 6H).
실시예 302a: N-메틸(1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄아민 302a
0℃에서(빙욕) 아세톤(10 mL) 중의 MeNH2(물 중의 30%)(2.5 g, 20 mmol)의 교반 용액에 K2CO3(415 mg, 3 mmol)를 가하고, 이어서 아세톤(5 mL) 중의 5-(브로모메틸)-1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸(220 mg, 1 mmol)의 용액을 가했다. 이어서, 이 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 3시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔사를 메틸렌클로라이드(3 X 15 mL)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 농축하여 화합물 302a를 황색 오일(170 mg, 99%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. LCMS: (M+H)+ 171
실시예 302b: N-메틸-N-((1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메틸)옥세탄-3-아민 302b
메탄올(4 mL) 중의 화합물 302a(170 mg, 1 mmol)의 혼합물에, ZnCl2(다이에틸 에터 중의 1 mmol/L)(2 mL, 2 mmol) 및 옥세탄-3-온(150 mg, 2 mmol)을 실온에서 질소 보호 하에 가하고, 이어서 NaBH3CN(130 mg, 2 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 50℃로 가온시키고, 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 용매를 제거하였다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(50:1)로 용리하는 플러쉬 칼럼 사이에서 정제하여, 화합물 302b를 황색 고체(180 mg, 80%, 2 단계)로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ 227. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 6.99 (s, 1H), 4.52 (t, J=6.5, 2H), 4.42 (t, J=6, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.63 (m, 1H), 3.50 (s, 2H), 2.03 (s, 3H).
실시예 302c: 1-메틸-5-((메틸(옥세탄-3-일)아미노)메틸)-1H-피라졸-3-아민 302c
에탄올(20 mL) 및 물(20 mL) 중의 화합물 302b(1.8 g, 7.96 mmol)의 용액에, NH4Cl(3.3 g, 63.6 mmol) 및 철 분말(1.80 g, 31.8 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 그 후, 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 증발시키고, 잔사를 메틸렌클로라이드(3 X 30 mL)로 추출하고, Na2SO4를 건조하고, 농축하여 조 생성물을 수득하고, 0.5% 트라이에틸아민을 함유하는 메틸렌클로라이드/메탄올(50:1)로 용리하는 플래쉬 칼럼 상에서 정제하여, 화합물 302c를 황색 오일(1.3 g, 83%)로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ 197
실시예 302d: 5-브로모-1-메틸-3-(1-메틸-5-((메틸(옥세탄-3-일)아미노)메틸)-1H-피라졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 302d
Figure pat00370
실시예 292c의 절차를 따르고, 화합물 302c 및 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온로부터 출발하여 화합물 302d를 63% 수율로 수득하였다. LCMS: (M+H)+ 383. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.35 (s, 1H), 7.99 (d, J=2.5, 1H), 7.36 (d, J=2.5, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.50 (t, J=7, 2H), 4.40 (t, J=6.5, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.57 (m, 1H), 3.49 (s, 3H), 3.35 (s, 2H), 2.01 (s, 3H).
실시예 302e: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(1-메틸-5-{[메틸(옥세탄-3-일)아미노]메틸}-1H-피라졸-3-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 302e
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 화합물 302d (200 mg, 0.52 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(210 mg, 0.53 mmol), PdCl2(dppf)(37 mg, 0.050 mmol), K3PO4(250 mg, 1.2 mmol), 나트륨 아세테이트(100 mg, 1.20 mmol), 아세토나이트릴(8 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, 이어서 N2로 재충전하였다. 이 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 302e를 황색 고체(150 mg, 44%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 655.3.
실시예 302: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[1-메틸-5-[[메틸(옥세탄-3-일)아미노]메틸]피라졸-3-일]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 302
THF(8 mL), i-프로판올(8 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 302e(150 mg, 0.23 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·수화물(90 mg, 2.3 mmol)의 혼합물을 40℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물(10 mL) 및 다이클로로메탄(3 X 15 mL) 사이에 분배하였다. 합친 유기 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 302를 연황색 고체(105 mg, 75%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 612.8. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.05 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.99-4.97 (m, 1H), 4.50-4.46 (m, 3H), 4.40-4.38 (m, 3H), 4.25-4.18 (m, 3H), 3.85-3.84 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.59 (s, 3H), 3.58-3.54 (m, 1H), 2.58-2.56 (m, 2H), 2.52-2.50 (m, 2H),2.43-2.42 (m, 2H), 2.00 (s, 3H), 1.22 (s, 6H).
실시예 303: (S)-10-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-({5-[(2R)-1-메톡시프로판-2-일]-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-2-일]-4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 303
실시예 300에 따라, 단일 거울상 이성질체 303(28 mg, 15 %)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 627.4. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.72 (s, 1H), 5.05-5.03 (m,1H), 4.67-4.45 (m,1H), 4.52-4.50 (m, 1H), 4.35-4.31 (m, 1H), 4.18-4.16 (m, 2H), 4.09-4.07 (m, 2H), 3.87-3.85 (m, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.56-3.52 (m, 1H), 3.45-3.43 (m, 1H), 3.38 (s, 3H), 3.11-3.08 (m, 3H), 2.60-2.58 (m, 2H), 2.53 (s, 2H), 1.29 (s, 6H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 304a: 5-(2-메톡시에틸)-2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 304a
Figure pat00371
아세토나이트릴(10 mL) 중의 2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진(190 mg, 1.13 mmol) 125i의 용액에 K2CO3(311.9 mg, 2.26 mmol) 및 1-브로모-2-메톡시에탄(188.3 mg, 1.36 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 80℃에서 17시간 동안 마이크로파 조사 하에 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 304a를 백색 고체(230 mg, 90%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 227.0
실시예 304b: 5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 304b
메탄올(10 mL) 중의 화합물 304a(286 mg, 1.26 mmol)의 용액에 Pd/C(28.6 mg)를 가했다. 이 시스템을 배기하고, 이어서 H2로 재충전하였다. 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 이 혼합물을 여과해냈다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 304b를 황색 고체(240 mg, 97%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 197.0
실시예 304c: 5-브로모-3-(5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 304c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 화합물 304b(230 mg, 1.17 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(468.4 mg, 1.76 mmol), Pd2(dba)3(53.5 mg, 0.0585 mmol), 잔트포스(67.6 mg, 0.117 mmol), Cs2CO3(762.8 mg, 2.34 mmol), 및 다이옥산(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/N2 플러쉬 후, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 304c를 진흑색 고체(380 mg, 85%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 382.2
실시예 304d: 3-(5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 304d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 304c(330 mg, 0.86 mmol), Pin2B2(329mg, 1.30 mmol), Pd2(dba)3(40 mg, 0.043 mmol), 잔트포스(41 mg, 0.086 mmol), 칼륨 아세테이트(169 mg, 1.726 mmol), 및 다이옥산(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/N2 플러쉬 후, 이 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터로 세척하여, 화합물 304d를 진흑색 오일(240 mg, 80%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 348.3
실시예 304e: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10,11-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6),11-트라이엔-10-일}-4-(5-{[5-(2-메톡시에틸)-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-카브알데하이드 304e
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10,11-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6),11-트라이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 282i(60 mg, 0.167 mmol), 화합물 304d(143.4 mg, 0.334 mmol), Pd(dppf)Cl2(6.8 mg, 0.0084 mol), K3PO4(70.8 mg, 0.334 mmol), 나트륨 아세테이트(27.4 mg, 0.334 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(3 방울)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 1시간 동안 N2 보호 하에 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 304e(80 mg, 77%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 626.8
실시예 304: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-(2-메톡시에틸)-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-6,8-다이하이드로사이클로펜타[3,4]티에노[1,3-d]피리다진-4-온 304
다이클로로메탄(4 mL) 및 메탄올(4 mL) 중의 화합물 304e (80 mg, 0.128 mmol)의 용액에 NaBH4(9.7 mg, 0.256 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이를 수성 NH4Cl(10 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하고, 잔사를 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 304(23.5 mg, 29%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 628.8. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.57 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.05 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.89 (s,1H), 4.87 (s, 1H), 4.39 (s, 2H), 3.92-3.90 (m, 2H), 3.61 (s, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.50 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.26 (s, 3H), 2.92-2.89 (m, 4H), 2.81 (s, 2H), 2.68-2.66 (m, 2H), 1.29 (s, 3H), 1.28 (s, 3H).
실시예 305a: 6-클로로-4-(5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온 305a
Figure pat00372
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 304b(392 mg, 2.0 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(446 mg, 2.0 mmol), 세슘 카보네이트(1.30 g, 4.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(40 mL)을 넣었다. 이 현탁액을 10분 동안 버블링한 후, 잔트포스(115 mg, 0.20 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(92 mg, 0.10 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 15 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 305a(412 mg, 61%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 338.9
실시예 305b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(5-{[5-(2-메톡시에틸)-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 305b
환류 응축기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 화합물 305a(200 mg, 0.60 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(238 mg, 0.60 mmol), K3PO4(254 mg, 1.2 mmol), 나트륨 아세테이트(98 mg, 1.2 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(22 mg, 0.030 mmol), 및 아세토나이트릴/물(8/0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 N2 보호 하에 1시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(30 mL)과 물(20 mL) 사이에 분배하였다. 수 층을 다이클로로메탄(2 x 30 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 305b(169 mg, 43%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 655.9
실시예 305: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-(2-메톡시에틸)-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노]-1-메틸-6-옥소-피리다진-3-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 305
THF/i-프로판올/물(6/4/3mL) 중의 화합물 305b(160 mg, 0.24 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(29 mg, 1.2 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물(15 mL)과 에틸 아세테이트(20 mL) 사이에 분배하였다. 수 상을 에틸 아세테이트(3 X 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 건조하고, 가압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 305를 백색 고체(88 mg, 60%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 614.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.44 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.59-4.57 (m, 3H), 4.49-4.47 (m, 1H), 4.17-4.12 (m, 4H), 3.92-3.90 (m, 4H, overlap), 3.77-3.75 (m, 2H), 3.61-3.60 (m, 2H), 3.41 (s, 3H), 3.05-3.03 (m, 2H), 2.81-2.79 (m, 2H), 2.60-2.58 (m, 2H), 2.52-2.50 (m, 2H), 1.28 (s, 6H).
실시예 306a: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{5-[(6-메톡시피리다진-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 306a
Figure pat00373
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 6-메톡시피리다진-3-아민(65 mg, 0.52 mmol), 잔트포스(29 mg, 0.050 mmol), Pd2dba3(45 mg, 0.050 mmol), [4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 273a(281 mg, 0.52 mmol), Cs2CO3(326 mg, 1.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(10 mL)을 넣었다. 생성 혼합물을 통해 질소를 20분 동안 버블링한 후, 이를 환류 온도에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 완료 후에, 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(20 mL)와 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트를 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 306a(180 mg, 60%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 584.3.
실시예 306: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[(6-메톡시피리다진-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 306
THF(5 mL), i-프로판올(5 mL) 및 물(1.5 mL) 중의 화합물 306a(180 mg, 0.32 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·일수화물(84 mg, 2.0 mmol)의 혼합물을 40℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(20 mL)와 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트를 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 306(80 mg, 49%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 542.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.86 (s, 1H), 8.76 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.11-7.10 (m, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.94-4.93 (m, 1H), 4.48-4.45 (m, 1H), 4.40-4.38 (m, 1 H), 4.25-4.18 (m, 3H), 3.91 (s, 3H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.58-2.56 (m, 2H), 2.50-2.49 (m, 2H), 1.21 (s, 6H).
실시예 307a: 1,3-다이메틸-5-나이트로-1H-인다졸 307a
Figure pat00374
무수 에탄올(15 mL) 중의 1-(2-클로로-5-나이트로페닐)에탄온(500 mg, 2.5 mmol)의 용액에 1,1-다이메틸하이드라진 하이드로클로라이드(3.38 g, 35.0 mmol)를 질소 보호 하에 가했다. 이 혼합물을 환류 온도에서 10시간 동안 가열하고, 감압 하에 증발시켜 조질물 307a(3.0 g)를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 192.2
실시예 307b: 1,3-다이메틸-1H-인다졸-5-아민 307b
에탄올(95%, 30 mL) 중의 화합물 307a(조질, 2.5 mmol)의 용액에 NH2NH2 .물(1.25 g, 25.0 mmol), Pd/C(100 mg)를 질소 보호 하에 가했다. 이 혼합물을 50℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 셀라이트(등록상표) 패드로 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를 무수 에탄올(5 mL)로부터 재결정하여 화합물 307b를 백색 고체(340 mg, 84% 2 단계)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 162.3
실시예 307c: 5-브로모-3-(1,3-다이메틸-1H-인다졸-5-일아미노-1-메틸피라진-2(1H)-온 307c
i-프로판올(7 mL) 중의 화합물 307b(280 mg, 1.74 mmol)의 용액에 트라이에틸아민(352 mg, 3.48 mmol) 및 3,5-다이브로모-1-메틸피라진-2(1H)-온(H-005)(700 mg, 2.61 mmol)을 가했다. 환류 온도에서 6시간 동안 교반한 후, 이 혼합물을 실온으로 냉각하였다. 침전물을 여과하고, i-프로판올(2 X 2 mL)로 세척하고, 60℃에서 감압 하에 건조시켜 화합물 307c를 갈색 고체(560 mg, 92%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 347.8.
실시예 307d: (4-{6-[(1,3-다이메틸-1H-인다졸-5-일)아미노]-4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-피라진-2-일}-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 307d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 307c(300 mg, 0.86 mmol), 1,4-다이옥산(20 mL), 물(1 mL), [4-(다이하이드록시보란일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 199e(512 mg, 1.28 mmol), 및 세슘 카보네이트(560 mg, 1.72 mmol)를 넣었다. 이 현탁액을 10분 동안 버블링한 후, Cy3P(96 mg, 0.34 mmol) 및 Pd2(dba)3(79 mg, 0.086 mmol)를 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 환류 온도에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 307d(230 mg, 43%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 620.9
실시예 307: 3-[4-[6-[(1,3-다이메틸인다졸-5-일)아미노]-4-메틸-5-옥소-피라진-2-일]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 307
i-프로판올/THF(1:1, 10 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 307d(230 mg, 0.37 mmol), 리튬 하이드록사이드(89 mg, 3.7 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 307(41 mg, 19%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 578.4. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.58 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.88 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 2.0, 9.0 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.17-5.14 (m, 1H), 4.75-4.73 (m, 1H), 4.55-4.52 (m, 1H), 4.48-4.43 (m, 1H), 4.20-4.16 (m, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.92-3.70 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.60 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 2.57 (s, 3H), 2.54 (s, 2H), 1.30 (s, 6H).
실시예 308a: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}-4-(5-{[5-(2-메톡시에틸)-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-카브알데하이드 308a
Figure pat00375
실시예 304의 절차를 따르고, 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 109a(250 mg, 0.693 mmol) 및 3-(5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 304d(595 mg, 0.1.386 mmol)로부터 출발하여, 화합물 308a를 황색 고체(250 mg, 57%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 628.3
실시예 308: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-(2-메톡시에틸)-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]티에노[1,3-c]피리딘-4-온 308
실시예 304의 절차를 따르고, 화합물 308a(230 mg, 0.366 mmol) 및 NaBH4(27.7 mg, 0.732 mmol)로부터 출발하여, 화합물 308을 백색 고체(53.2 mg, 23%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 629.8. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.04 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.95-4.93 (m, 1H), 4.47-4.39 (m, 2H), 4.20-4.14 (m, 1H), 3.92-3.91 (m, 2H), 3.84-3.80 (m, 1H), 3.61 (s, 2H), 3.58 (s, 3H), 3.51-3.49 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.06-3.00 (m, 1H), 2.91-2.87 (m, 3H), 2.77 (s, 2H), 2.68-2.53 (m, 4H), 1.19 (s, 3H), 1.18 (s, 3H).
실시예 309a: 5-(3-메톡시프로필)-2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 309a
Figure pat00376
자석 교반기가 장착된 마이크로 바이알에 1-(2-브로모에틸)-5-(클로로메틸)-3-나이트로-1H-피라졸 296c(600 mg, 2.2 mmol), 3-메톡시프로판-1-아민(595 mg, 6.6 mmol), 및 DMSO(6 mL)를 넣었다. 이를 120℃에서 마이크로파 조사 하에 0.5시간 동안 가열하였다. 이어서, 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(30 mL)로 희석하였다. 생성 혼합물을 물(3 X 10 ml)로 세척하였다. 유기 층을 건조하고, 여과하였다. 여액을 가압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 309a(350 mg, 66%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 241.1
실시예 309b: 5-(3-메톡시프로필)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 309b
에탄올(20 mL) 중의 화합물 309a(300 mg, 1.25 mmol)의 용액에 Pd/C(10%, 30 mg)를 가했다. 이 반응물을 수소 가스(풍선을 통해)로 충전하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 이 혼합물을 셀라이트(등록상표) 플러그로 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 309b를 황색 고체(250 mg, 92%)로서 수득하고, 이를 다음 단계에서 추가의 정제 없이 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 211.3
실시예 309c: 5-브로모-3-(5-(3-메톡시프로필)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일-아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 309c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(320 mg, 1.2 mmol), 화합물 309b(250 mg, 1.2 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤) 이팔라듐(0)(55 mg, 0.060 mmol), 잔트포스(70 mg, 0.12 mmol), 세슘 카보네이트(782 mg, 2.4 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 309c(200 mg, 42%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 396.2
실시예 309d: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(5-{[5-(3-메톡시프로필)-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 309d
환류 응축기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 화합물 309c(120 mg, 0.30 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(240 mg, 0.60 mmol), K3PO4(127 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트·일수화물(82 mg, 0.60 mmol), Pd(dppf)Cl2(12 mg, 0.015 mmol), 및 아세토나이트릴/물(8/0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 N2 보호 하에 2시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(20 mL)과 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 수 층을 다이클로로메탄(2 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 309d(150 mg, 74%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 668.9
실시예 309: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-(3-메톡시프로필)-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 309
THF/i-프로판올/물(5/3/3mL) 중의 화합물 309d(120 mg, 0.18 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드·일수화물(76 mg, 1.8 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 이 혼합물을 여과하고, 용매를 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 309를 백색 고체(85 mg, 76%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 627.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.71 (s, 1H), 5.05 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.66-4.64 (m, 1H), 4.52-4.50 (m, 1H), 4.36-4.32 (m, 1H), 4.17-4.16 (m, 2H), 4.08-4.06 (m, 2H), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.65-3.64 (m, 2H), 3.48 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.36 (s, 3H), 2.93 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.65-2.62 (m, 2H), 2.59-2.58 (m, 2H), 2.53 (s, 2H), 1.87-1.83 (m, 2H), 1.29 (s, 6H).
실시예 310a: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(5-메틸-1,2-티아졸-3-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 310a
Figure pat00377
25 mL 밀봉 튜브에 [4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 273a(150 mg, 0.28 mmol), 5-메틸아이소티아졸-3-아민 하이드로클로라이드(55 mg, 0.33 mmol), Cs2CO3(183 mg, 0.56 mmol), Pd2(dba)3(27 mg, 0.030 mmol), 잔트포스(35 mg, 0.060 mmol), 및 다이옥산(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 110℃에서 마이크로파 조사 하에 0.5시간 동안 가열하였다. 이를 실온으로 냉각하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 메틸렌클로라이드/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼으로 정제하여, 화합물 310a를 황색 고체(50 mg, 31%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 573.2.
실시예 310: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸아이소티아졸-3-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 310
THF/i-프로판올/물(4 mL/4 mL/1 mL) 중의 화합물 310a(50 mg, 0.090 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(21 mg, 0.90 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물(10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(3 X 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4로 건조하고, 감압 하에 농축하여 황색 고체를 수득하고, 이를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 310을 황색 고체(20 mg, 43%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 530.8. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.61 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.09-5.06 (m, 1H), 4.66-4.47 (m, 2H), 4.28-4.27 (m, 1H), 4.17-4.12 (m, 2H), 3.89-3.82 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 2.57 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.52-2.50 (m, 중첩, 5H), 1.27 (s, 6H).
실시예 311a: (4-{5-[(5-사이클로프로필-1,2-옥사졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리딘-3-일}-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 311a
Figure pat00378
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 5-사이클로프로필아이속사졸-3-아민(80 mg, 0.65 mmol), 잔트포스(29 mg, 0.050 mmol), Pd2dba3(45 mg, 0.050 mmol), [4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 273a(350 mg, 0.65 mmol), Cs2CO3(390 mg, 1.2 mmol) 및 1,4-다이옥산(10 mL)을 넣었다. 생성 혼합물을 통해 질소를 10분 동안 버블링한 후, 이를 환류 온도에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(20 mL)와 물(10 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 311a(120 mg, 32%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 583.2.
실시예 311: 3-[4-[5-[(5-사이클로프로필아이속사졸-3-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 311
THF(5 mL), i-프로판올(5 mL) 및 물(1.5 mL) 중의 화합물 311a(120 mg, 0.20 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·일수화물(80 mg, 2.0 mmol)의 혼합물을 40℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 물(5 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 311(65 mg, 58%)을 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 541.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.92 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.19 (s, 1H), 4.92-4.90 (m, 1H), 4.45-4.44 (m, 1H), 4.40-4.39 (m, 1H), 4.24-4.18 (m, 3 H), 3.86-3.83 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.58-2.56 (m, 2H), 2.44-243 (m, 2H), 2.07-2.04 (m, 1H), 1.22 (s, 6H) 1.03-0.99 (m, 2H), 0.84-0.81 (m, 2H).
실시예 312a: 5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸-1-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 312a
Figure pat00379
5-브로모-1-메틸-3-(5-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)피리딘-2(1H)-온 115a(200 mg, 0.71 mmol), 3-요오도옥세탄(647 mg, 3.53 mmol), Cs2CO3(1150 mg, 3.53 mmol) 및 아세토나이트릴(5 mL)의 혼합물을 80℃에서 밀봉된 튜브에서 밤새도록 가열하였다. 이어서, 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 312a를 황색 고체(120 mg, 50%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 339.1
실시예 312b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(1-메틸-5-{[5-메틸-1-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸-3-일]아미노}-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 312b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 312a(170 mg, 0.50 mmol), (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,{3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(200 mg, 0.50 mmol), CH3COONa(82 mg, 1.00 mmol), PdCl2(dppf)(41 mg, 0.050 mmol), K3PO4(212 mg, 1.00 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 생성 혼합물을 통해 질소를 20분 동안 버블링한 후, 이를 100℃에서 질소 분위기 하에 2시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시키고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 312b를 백색 고체(172 mg, 56%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 612.4
실시예 312: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[5-메틸-1-(옥세탄-3-일)피라졸-3-일]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 312
i-프로판올/THF/물(6/4/2 mL) 중의 화합물 312b(90 mg, 0.15 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(14 mg, 0.60 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물(10 mL)과 다이클로로메탄(3 X 20 mL) 사이에 분배하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 312를 백색 고체(54 mg, 64%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 569.9. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.48 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 5.46-5.42 (m, 1H), 4.99-4.91 (m, 3H), 4.81-4.78 (m, 2H), 4.52-4.41 (m, 2H), 4.24-4.18 (m, 3H), 3.87-3.84 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 2.61-2.56 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 2.15 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.19 (s, 3H).
실시예 313a: 에틸 2-(5-(하이드록시메틸)-3-나이트로-1H-피라졸-1-일)아세테이트 313a
Figure pat00380
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 아세토나이트릴(30 mL), (3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올(1.43 g, 10.0 mmol), Cs2CO3(490 mg, 1.5 mmol), 및 에틸 2-브로모아세테이트(2.00 g, 12 mmol)를 넣었다. 이 혼합물을 40℃에서 5시간 동안 교반하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 313a(1.65 g, 72%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 229.9
실시예 313b: 에틸 2-(5-(클로로메틸)-3-나이트로-1H-피라졸-1-일)아세테이트 313b
Figure pat00381
0℃에서 냉각된 CHCl3(60 mL) 중의 화합물 313a(1.50 g, 6.55 mmol)의 혼합물에, 5℃ 미만의 내부 온도를 유지하면서 SOCl2(2.34 g, 19.6 mmol)를 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 50℃로 가온시키고, 이 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 0℃로 냉각하고, 물로 켄칭하였다. 유기 층을 분리하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 313b(1.1 g, 68%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 247.9
실시예 313c: 5-메틸-2-나이트로-4,5-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-6(7H)-온 313c
Figure pat00382
다이클로로메탄(30 mL) 중의 화합물 313b(1.0 g, 4.0 mmol)의 용액에 CH3NH2 (1.07 g, 12.0 mmol, 메탄올 중의 35%) 용액을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 물(30 mL)로 희석하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 313c(450 mg, 57%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 196.9
실시예 313d: 2-아미노-5-메틸-4,5-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-6(7H)-온 313d
Figure pat00383
에탄올(30 mL) 중의 화합물 313c(450 mg, 2.3 mmol)의 용액에 Pd/C(10%, 400 mg)를 가했다. 이 반응물을 수소 가스(풍선을 통해)로 충전하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 이 혼합물을 셀라이트(등록상표) 플러그로 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 313d를 황색 고체(320 mg, 84%)로서 수득하고, 이를 다음 단계에서 추가의 정제 없이 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 167.1
실시예 313e: 2-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)-5-메틸-4,5-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-6(7H)-온 313e
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 화합물 313d(300 mg, 1.8 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(482 mg, 1.8 mmol), 세슘 카보네이트(1.17 g, 3.6 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 이 현탁액을 10분 동안 버블링한 후, 잔트포스(104 mg, 0.18 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(82 mg, 0.090 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬로 처리하고, 5시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 30 m)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 30/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 313e(390 mg, 61%)를 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 313f: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-메틸-6-옥소-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 313f
Figure pat00384
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 313e(150 mg, 0.43 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(170 mg, 0.43 mmol), K3PO4(183 mg, 0.86 mmol), 나트륨 아세테이트(71 mg, 0.86 mmol), Pd(dppf)Cl2(35 mg, 0.043 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 313f(131 mg, 49%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 625.3.
실시예 313: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-6-옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 313
i-프로판올/THF(1:1, 7 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 313f (130 mg, 0.21 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(10 mg, 0.42 mmol)의 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물(10 mL) 및 에틸 아세테이트(3 X 10 mL) 사이에 분배하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 313(60 mg, 49%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 582.8. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.37(s, 1H), 8.10 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.95 (bs, 1H), 4.62-4.54 (m, 4H), 4.46-4.42 (m, 2H), 4.24-4.19 (m, 3H), 3.89-3.82 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 2.99 (s, 3H), 2.60-2.57 (m, 2H), 2.45-2.44 (m, 2H), 1.23 (s, 6H).
실시예 314a: 1-(6-나이트로피리딘-3-일)아제티딘-3-올 314a
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 아세토나이트릴(50 mL), 5-플루오로-2-나이트로피리딘(1.2 g, 7.9 mmol), K2CO3(2.1 g, 15.8 mmol), 및 아제티딘-3-올 하이드로클로라이드(1.3 g, 11.9 mmol)를 넣었다. 이 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 314a(1.1 g, 73%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+196.0.
실시예 314b: 1-(6-아미노피리딘-3-일)아제티딘-3-올 314b
100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 314a(1.0 g, 5.1 mmol), 10% Pd/C(10% 습윤, 100 mg), 및 에탄올(40 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 배기하고, 수소 가스를 넣고, 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 314b를 황색 고체(792 mg, 85%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 166.1.
실시예 314c: 5-브로모-3-(5-(3-하이드록시아제티딘-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 314c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 314b(792 mg, 4.8 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.9 g, 7.2 mmol), 트리스-(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(440 mg, 0.48 mmol), 잔트포스(555 mg, 0.96 mmol), Cs2CO3(3.1 g, 9.6 mmol) 및 1,4-다이옥산(40 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 90℃에서 3.0시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 314c를 황색 고체(1.5 g, 89%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 351.1
실시예 314d: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(5-{[5-(3-하이드록시아제티딘-1-일)피리딘-2-일]아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로 피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 314d
Figure pat00385
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 314c(176 mg, 0.50 mmol), {3-[(아세톡시) 메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이-사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일} 보론산 199e(198 mg, 0.50 mmol), Pd(dppf)Cl2(41 mg, 0.050 mmol), K3PO4(212.0 mg, 1.0 mmol), 나트륨 아세테이트(82.0 mg, 1.0 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 95℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 조질물 314d를 갈색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 623.8.
실시예 314: 3-[4-[5-[[5-(3-하이드록시아제티딘-1-일)-2-피리딜]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 314
i-프로판올/THF/물(2:2:1,10 mL) 중의 화합물 314d(조질 생성물 311.5 mg, 0.50 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·수화물(300 mg, 12.5 mmol)의 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물(10 mL)과 다이클로로메탄(3 X 10 mL) 사이에 분배하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 314(46 mg, 2단계: 16%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 581.9. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.54 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.83-6.81 (m, 2H), 6.75 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.04-5.02 (m, 1H), 4.77-4.75 (m, 1H), 4.64-4.62 (m, 1H), 4.50-4.48 (m, 1H), 4.34-4.32 (m, 1H), 4.17-4.14 (m, 4H), 3.86-3.83 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.64-3.62 (m, 2H), 2.57-2.56 (m, 2H), 2.51 (s, 2H), 2.31-2.30 (m, 1H),1.27 (s, 6H).
실시예 315: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[[1-메틸-5-(피롤리딘-1-카보닐)피라졸-3-일]아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 315
실시예 273의 절차를 따르되, 2-아미노피리딘을 (3-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)(피롤리딘-1-일)메탄온으로 대체하여, 화합물 315를 제조하였다. 27.3 mg, 60% 수율. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.05 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.95 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.42 - 4.47 (m, 1H), 4.17 - 4.21 (m, 3H), 3.79 (s, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.48 (dt, J = 11.1, 6.6 Hz, 3H), 3.27 (s, 2H), 2.57 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.90 - 1.84 (m, 3H), 1.22 (s, 6H). ES-MS m/z 611.4 [M+1].
실시예 316: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-(메톡시메틸)-1-메틸-피라졸-3-일]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 316
실시예 273의 절차를 따르되, 2-아미노피리딘을 5-(메톡시메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-아민으로 대체하여, 화합물 316을 제조하였다. 43.2 mg, 84% 수율. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.04 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.96 - 4.90 (m, 1H), 4.38 - 4.46 (m, 1H), 4.38 (s, 2H), 4.19 (d, J = 9.8 Hz, 2H), 3.82 - 3.96 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 3.27 (s, 2H), 2.57 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H). ES-MS m/z 558.3 [M+1].
실시예 317a: 5-메틸-2-(1-메틸-2-옥소-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)-4,5-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-6(7H)-온 317a
Figure pat00386
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 2-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)-5-메틸-4,5-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-6(7H)-온 313e(270 mg, 1.0 당량, 0.68 mmol), Pin2B2(863.6 mg, 5.0 당량, 3.4 mmol), Pd2(dba)3(62.4 mg, 0.1 당량, 0.068 mmol), 잔트포스(64.8 mg, 0.2 당량, 0.14 mmol), 칼륨 아세테이트(200 mg, 3.0 당량, 2.04 mmol), 및 다이옥산(15 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 65℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 조질물 317a를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 399.9.
실시예 317b: 2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}-4-[1-메틸-5-({5-메틸-6-옥소-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-카브알데하이드 317b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 317a(100 mg, 0.28 mmol), 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 109a(112 mg, 0.28 mmol), Pd(dppf)Cl2(22.9 mg, 0.028 mmol), K3PO4(118.7 mg, 0.56 mmol), 나트륨 아세테이트(45.9 mg, 0.56 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 환류 온도에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 317b를 황색 고체(60 mg, 36%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 597.8.
실시예 317: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(5-메틸-6-옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]티에노[1,3-c]피리딘-4-온 317
메탄올(5 mL) 중의 화합물 317b(60 mg, 0.10 mmol) 및 NaBH4(11.3 mg, 0.30 mmol)의 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(15 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 317(15 mg, 25%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 599.8. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.0 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.82-4.66 (m, 4H), 4.56 (s, 2H), 4.42-4.33 (m, 2H), 3.83-3.81 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 2.98-2.94 (m, 2H), 2.80 (s, 2H), 2.57-2.52 (m, 2H), 1.28 (s, 6H).
실시예 318a: {4-[5-({4,5-다이메틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일}메틸 아세테이트 318a
Figure pat00387
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 4,5-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 287i(123 mg, 1.0 당량, 0.74 mmol), [4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 273a(400 mg, 1.0 당량, 0.74 mmol), Pd2(dba)3(68 mg, 0.1 당량, 0.074 mmol), 잔트포스(86 mg, 0.2 당량, 0.148 mmol), Cs2CO3(487 mg, 2.0 당량, 1.48 mmol), 및 다이옥산(15 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/N2 플러쉬 후, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 에틸 아세테이트/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 318a를 갈색 고체(221 mg, 48%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 624.9
실시예 318b: 10-{4-[5-({4,5-다이메틸-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일}-4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 318b
자석 교반기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 318a(200 mg, 1.0 당량, 0.32 mmol), 리튬 하이드록사이드(38 mg, 5.0 당량, 1.60 mmol), i-프로판올/THF(8/8 mL) 및 물(2 mL)을 가했다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 가하고, 물과 다이클로로메탄 사이에 분배하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 라세미 혼합물 318b를 황색 고체(91 mg, 43%)로서 수득하였다.
실시예 318: (R)-2-(5-((4,5-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노)-3'-(하이드록시메틸)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4'-bi피리딘]-2'-일)-7,7-다이메틸-2,3,4,6,7,8-헥사하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 318
화합물 318b를 키랄 HPLC(칼럼: OZ-H, 100% 메탄올(0.1% 에틸 아세테이트)) 분해시켜 거울상 이성질체 318 및 319를 분리하였다. 화합물 318: MS-ESI: [M+H]+ 582.8. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.72 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.04 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.66-4.64 (m, 1H), 4.52-4.48 (m,1H), 4.36-4.34 (m,1H), 4.18-4.05 (m, 중첩, 4H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.43-3.41 (m, 1H), 3.17-3.15 (m, 1H), 2.87-2.85 (m, 1H), 2.60-2.59 (m, 2H), 2.53 (s, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.46 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.29 (s, 6H).
실시예 319: (S)-2-(5-((4,5-다이메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노)-3'-(하이드록시메틸)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4'-bi피리딘]-2'-일)-7,7-다이메틸-2,3,4,6,7,8-헥사하이드로-1H-사이클로펜타[4,5]피롤로[1,2-a]피라진-1-온 319
화합물 318b를 키랄 HPLC(칼럼: OZ-H, 100% 메탄올(0.1% 에틸 아세테이트)) 분해시켜 거울상 이성질체 318 및 319를 분리하였다. 화합물 319: MS-ESI: [M+H]+ 582.8. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.72 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.04 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.67-4.65 (m, 1H), 4.52-4.48 (m,1H), 4.36-4.34 (m, 1H), 4.18-4.05 (m, 중첩, 4H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.43-3.41 (m, 1H), 3.17-3.15 (m, 1H), 2.87-2.85 (m, 1H), 2.60-2.59 (m, 2H), 2.53 (s, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.46 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.30 (s, 6H).
실시예 320a: (6-아미노피리딘-3-일)((3R,5S)-3,5-다이메틸모폴리노)메탄온 320a
Figure pat00388
DMF(15 mL) 중의 (3S,5R)-3,5-다이메틸모폴린(1.15 g, 10 mmol)의 용액에 실온에서 HATU(3.8 g, 10 mmol), DIPEA(2.6 g, 20 mmol), 및 6-아미노니코틴산(1.38 g, 10 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 18시간 동안 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 콤비플래쉬(A: 1‰ NH4HCO3/물, B: 아세토나이트릴)로 정제하여, 화합물 320a(650 mg, 27% )를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 236.1.
실시예 320b: 5-브로모-3-(5-((3R,5S)-3,5-다이메틸모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 320b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 320a(160 mg, 1.0 당량, 0.68 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(273 mg, 1.5 당량, 1.02 mmol), Pd2(dba)3(64 mg, 0.1 당량, 0.070 mmol), 잔트포스(79 mg, 0.2 당량, 0.14 mmol), Cs2CO3(444 mg, 2.0 당량, 1.36 mmol), 및 다이옥산(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시키고, 생성 잔사를, 에틸 아세테이트로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 320b(190 mg, 66%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 420.8.
실시예 320c: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{5-[(5-{[(3R,5S)-3,5-다이메틸모폴린-4-일]카보닐}피리딘-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 320c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 320b(150 mg, 1.0 당량, 0.36 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(286 mg, 2.0 당량, 0.72 mmol), PdCl2(dppf)(29 mg, 0.10 당량, 0.040 mmol), K3PO4(153 mg, 2.0 당량, 0.72 mmol), 나트륨 아세테이트(59 mg, 2.0 당량, 0.72 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.2 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시키고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 320c(161 mg, 64%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 693.8
실시예 320: 3-[4-[5-[[5-[(3S,5R)-3,5-다이메틸모폴린-4-카보닐]-2-피리딜]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 320
자석 교반기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 320b(145 mg, 1.0 당량, 0.21 mmol), 리튬 하이드록사이드(26 mg, 5.0 당량, 1.05 mmol), THF(4.0 mL), i-프로판올(4.0 mL) 및 물(1.0 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를 물(10 mL)로 희석하고, 다이클로로메탄(3 X 15 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 320(35 mg, 26%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 651.9
실시예 321a: 6-클로로-4-(5-((3R,5S)-3,5-다이메틸모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온 321a
Figure pat00389
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 (6-아미노피리딘-3-일)((3R,5S)-3,5-다이메틸모폴리노)메탄온 320a(235 mg, 1.0 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(232 mg, 1.05 mmol), 세슘 카보네이트(652 mg, 2.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(6.0 mL)을 넣었다. 이 현탁액을 10분 동안 버블링한 후, 잔트포스(116 mg, 0.20 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(70 mg, 0.10 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 환류 온도에서 2.5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(3 X 10 ml)으로 세척하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(2:1 내지 1:10)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 321a(140 mg, 37%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 378.3
실시예 321b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{5-[(5-{[(3R,5S)-3,5-다이메틸모폴린-4-일]카보닐}피리딘-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 321b
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 321a(140 mg, 0.37 mmol), (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 199e(355 mg, 0.74 mmol), K3PO4(157 mg, 0.74 mmol), 나트륨 아세테이트(61 mg, 0.74 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노) 페로센다이클로로팔라듐(II)(36 mg, 0.040 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.2 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 N2 보호 하에 1.5시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(30 mL)과 물(30 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(60:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 320b(105 mg, 41%)를 흑색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 695.3
실시예 321: 3-[4-[5-[[5-[(3S,5R)-3,5-다이메틸모폴린-4-카보닐]-2-피리딜]아미노]-1-메틸-6-옥소-피리다진-3-일]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 321
THF/i-프로판올/물(2/1/0.5 mL) 중의 화합물 321b(105 mg, 0.15 mmol)의 용액에 실온에서 리튬 하이드록사이드(36 mg, 1.5 mmol)를 가했다. 이 반응물을 3시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 그 후, 이 혼합물을 물(25 mL)에 붓고, 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC(A: 1‰ NH4HCO3/물, B: 아세토나이트릴)로 정제하여, 화합물 321(100 mg, 95%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 652.8. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.69 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.53 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.77-7.75 (m, 1H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 5.0 Hz,1H), 6.56 (s, 1H), 4.78 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.60-4.57 (m, 1H), 4.41-4.37 (m, 1H), 4.30-4.25 (m, 1H), 4.19 (d, J = 3.5 Hz, 2H), 4.01-4.00 (m, 2H), 3.92-3.88 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.65-3.61 (m, 2H), 3.56-3.53 (m, 2H), 2.61-2.58 (m, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.25 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.21 (s, 6H)
실시예 322a: (4-(5-(5-((3R,5S)-3,5-다이메틸모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 322a
Figure pat00390
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 환저 플라스크에 (6-아미노피리딘-3-일)((3R,5S)-3,5-다이메틸모폴리노)메탄온 320a(120 mg, 0.50 mmol), (4-(5-브로모-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-2(1H)-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 217a(262 mg, 0.50 mmol), 세슘 카보네이트(326 mg, 1.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(6 mL)을 넣었다. 이 현탁액을 10분 동안 버블링한 후, 잔트포스(58 mg, 0.10 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(45mg, 0.050 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 환류 온도에서 2.5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80/1 내지 50/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 322a(200 mg, 59%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 680.3
실시예 322: 2-[4-[5-[[5-[(3S,5R)-3,5-다이메틸모폴린-4-카보닐]-2-피리딜]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피라지노[1,2-a]인돌-1-온 322
THF/i-프로판올/물(4/2/1 mL) 중의 화합물 322a(136 mg, 0.20 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(48 mg, 2.0 mmol)를 실온에서 가했다. 이 반응물을 2시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 그 후, 이 혼합물을 물(15 mL)에 붓고, 다이클로로메탄(3 X 15 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC(A: 1‰ NH4HCO3/물, B: 아세토나이트릴)로 정제하여, 화합물 322(50 mg, 40%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 638.3. 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.94 (s, 1H), 8.77 (d, J = 5.5 Hz,1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.64-7.62 (m, 1H), 7.59 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.37-7.35 (m, 2H), 6.57 (s, 1H), 4.95 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.47-4.38 (m, 2H), 4.23-3.99 (m, 5H), 3.88-3.87 (m, 1H), 3.65-3.61 (m, 중첩, 5H), 3.56-3.53 (m, 2H), 2.66-2.56 (m, 2H), 2.47-2.44 (m, 2H), 1.80-1.79 (m, 2H), 1.70-1.66 (m, 2H), 1.25 (d, J = 6.0 Hz, 6H)
실시예 323a: 5-(3-메톡시아제티딘-1-일)-2-나이트로피리딘 323a
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 3-메톡시아제티딘 하이드로클로라이드(1.0 g, 8.09 mmol), 5-브로모-2-나이트로피리딘(1.97 g, 9.71 mmol), Pd2(dba)3(370.1 mg, 0.404 mmol), 잔트포스(467.6 mg, 0.809 mmol), Cs2CO3(7.9 g, 24.3 mmol), 및 다이옥산(50 mL)을 넣었다. 20분 동안 반응 혼합물에 질소를 버블링시킨 후, 이를 100℃에서 N2 보호 하에 3시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 323a를 황색 고체(1.63 g, 96%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 210.2
실시예 323b: 5-(3-메톡시아제티딘-1-일)피리딘-2-아민 323b
메탄올(150 mL) 중의 화합물 323a(1.5 g, 7.17 mmol)의 용액에 10 % Pd/C(150 mg)를 가했다. 이 시스템을 배기하고, 이어서 H2로 재충전하였다. 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 이 혼합물을 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 323b를 황색 오일(1.2 g, 93%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 180.1
실시예 323c: 5-브로모-3-(5-(3-메톡시아제티딘-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 323c
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 화합물 323b(1.2 g, 6.7 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(2.14 g, 8.04 mmol), Pd2(dba)3(306.5 mg, 0.335 mmol), 잔트포스(387.3 mg, 0.67 mmol), Cs2CO3(4.37 g, 13.4 mmol), 및 다이옥산(50 mL)을 넣었다. 20분 동안 반응 혼합물에 질소를 버블링시킨 후, 100℃에서 N2 보호 하에 3시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터로 세척하여, 화합물 323c를 갈색 고체(1.16 g, 47%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 364.8.
실시예 323d: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(5-{[5-(3-메톡시아제티딘-1-일)피리딘-2-일]아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 323d
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 323c(150 mg, 0.411 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(326.5 mg, 0.822 mmol), Pd(dppf)Cl2(16.8 mg, 0.0205 mmol), K3PO4(174.3 mg, 0.822 mmol), 나트륨 아세테이트(67.5 mg, 0.822 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(5 방울)을 넣었다. 20분 동안 반응 혼합물에 질소를 버블링시킨 후, 100℃에서 N2 보호 하에 1시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 323d를 황색 오일(180 mg, 68.7%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 637.8
실시예 323: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-(3-메톡시아제티딘-1-일)-2-피리딜]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 323
THF(5 mL), i-프로판올(5 mL) 및 물(5 mL) 중의 화합물 323d(160 mg, 0.251 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(95 mg, 2.51 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이어서, 감압 하에 농축하고, 잔사를 물(10 mL)로 희석하였다. 생성 혼합물을 다이클로로메탄(3 X 15 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 323(33.8 mg, 23%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 595.8. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.48 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.91 (dd, J = 2.5, 8.5 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.96-4.94 (m, 1H), 4.47-4.39 (m, 2H), 4.31-4.19 (m, 4H), 4.03-4.00 (m, 2H), 3.85-3.83 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.55-3.53 (m, 2H), 3.23 (s, 3H), 2.62-2.54 (m, 2H), 2.44-2.42 (m, 2H), 1.22 (s, 6H).
실시예 324a: (6-아미노피리딘-3-일)((3S,5S)-3,5-다이메틸모폴리노)메탄온 324a
Figure pat00392
DMF(2 mL) 중의 (3S,5S)-3,5-다이메틸모폴린(115 mg, 1.0 mmol)의 용액에 실온에서 HATU(380 mg, 1.0 mmol), DIPEA(260 mg, 2.0 mmol), 및 6-아미노니코틴산(138 mg, 1.0 mmol)을 가했다. 18시간 동안 교반한 후, 이 반응 혼합물을 여과하고, 콤비플래쉬(A: 1‰ NH4HCO3/물, B: 아세토나이트릴)로 정제하여, 화합물 324a(80 mg, 34% )를 황색 고체로서 수득하였다. MS (ESI): 236.1 (M+H).
실시예 324b: 6-클로로-4-(5-((3S,5S)-3,5-다이메틸모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온 324b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(8 mL), 세슘 카보네이트(221 mg, 0.68 mmol), 324a(80 mg, 0.34 mmol), 및 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(80 mg, 0.36 mmol)을 넣었다. 이 현탁액을 5분 동안 버블링한 후, 잔트포스(40 mg, 0.068 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(24 mg, 0.034 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 환류 온도에서 2.5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(2/1 내지 100% 에틸 아세테이트)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 324b(40 mg, 31%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 378.3
실시예 324c: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{5-[(5-{[(3S,5S)-3,5-다이메틸모폴린-4-일]카보닐}피리딘-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 324c
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 324b(40 mg, 0.11 mmol), (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 199e(105 mg, 0.22 mmol), K3PO4(47 mg, 0.22 mmol), 나트륨 아세테이트(18 mg, 0.22 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센다이클로로팔라듐(II)(20 mg, 0.022 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(6 방울)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 N2 보호 하에 1.5시간 동안 가열하였다. LCMS 분석은, 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(50 mL) 및 물(50 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(60:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 324c(40 mg, 52%)를 흑색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 695.3
실시예 324: 3-[4-[5-[[5-[(3S,5S)-3,5-다이메틸모폴린-4-카보닐]-2-피리딜]아미노]-1-메틸-6-옥소-피리다진-3-일]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 324
THF/i-프로판올/물(1/1/0.5 ml) 중의 화합물 324c(40 mg, 0.057 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(14 mg, 0.57 mmol)를 실온에서 가했다. 이 반응물을 3시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 그 후, 이 혼합물을 물(20 mL)에 붓고, 다이클로로메탄(3 X 15 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔류 고체를 역상 분취용 HPLC(A: 1‰ NH4HCO3/물, B: 아세토나이트릴)로 정제하여, 화합물 324 (10 mg, 27.7%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 653.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.69 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.53 (d, J = 5.0, 1H), 8.31 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.77-7.75 (m, 1H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.78 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.60-4.57 (m, 1H), 4.41-4.37 (m, 1H), 4.30-4.25 (m, 1H), 4.19 (d, J = 3.5 Hz, 2H), 4.01 (s, 2H), 3.92-3.88 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.65-3.61 (m, 2H), 3.56-3.53 (m, 2H), 2.57 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 2.42 (s, 2H), 1.25 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.21 (s, 6H)
실시예 325a: 3-아미노-5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 325a
Figure pat00393
에틸 아세테이트(10 mL) 중의 5-브로모-3-(다이페닐메틸렌아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온(3.82 g, 10.4 mmol)의 용액에 4 M HCl/다이옥산(7.8 mL, 31.3 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 0.5시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 3급-부틸 메틸 에터로 세척하고, 여과하였다. 고체를 에틸 아세테이트(10 mL) 및 물(10 mL)에 용해시켰다. 생성 혼합물의 pH를 K2CO3을 점진적으로 첨가하여 7 내지 8로 조정하였다. 수 상을 분리하고, 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하여 화합물 325a를 황색 고체(1.1 g, 52%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 202.9.
실시예 325b: 1-(2-브로모-5-플루오로피리딘-4-일)에탄올 325b
250 mL 3구 플라스크에 2-브로모-5-플루오로피리딘(8.80 g, 50 mmol)의 THF 용액(20 mL)을 가했다. -78℃에서, 상기 용액에 LDA(25.0 mL, 50 mmol, THF 중의 2.5 M)를 적가하였다. 5분 동안 교반한 후, 다이아이소프로필아민(7.0 mL, 50 mmol)을 시린지를 통해 적가하고, 이 혼합물을 -78℃에서 4시간 동안 교반하였다. 아세트알데하이드(11 mL, 55 mmol, THF 중의 5M)의 THF 용액을 시린지를 통해 적가하였다. 내용물을 냉욕으로부터 제거하고, 실온으로 가온시키면서 밤새도록 교반하였다. 이 혼합물을 물(150 mL)로 희석하고, 5분 동안 강하게 교반하였다. 내용물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 에틸 에터(3 x 150 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 MgSO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하여 황색 오일을 수득하고, 이를 석유 에터/에틸 아세테이트(10:1 내지 5:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 325b(8.0 g, 72.7%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 220.1. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.15 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 5.17 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 2.18-2.16 (m, 1H), 1.52 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 325c: 1-(2-브로모-5-플루오로피리딘-4-일)에탄온 325c
에틸 아세테이트(200 mL) 중의 화합물 325b(7.5 g, 34.2 mmol) 및 2-요오독시벤조산(38.4 g, 137 mol)의 혼합물을 85℃에서 20시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(20:1 내지 10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 325c(6.8 g, 92%)를 황색 오일로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 217.9.
실시예 325d: 5-브로모-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-c]피리딘 325d
환류 응축기가 장착된 250 mL 환저 플라스크에 무수 에틸렌 글라이콜(30 mL) 및 화합물 325c(4.3 g, 20 mmol)를 가했다. 그 후, 하이드라진 수화물(5.0 mL, 4.8 g, 81.6 mmol)을 시린지를 통해 적가하였다. 이 혼합물을 165℃에서 3.5시간 동안 가열하였다. 생성 주황-암갈색 혼합물을 실온으로 냉각하고, 내용물을 100 mL 얼음/물(1:1)의 교반 혼합물에 붓고, 이 때 침전이 일어났다. 10분 동안 교반한 후, 회백색 침전물을 수집하고, 이를 진공에서 건조시켜 화합물 325d를 회백색 고체(3.1 g, 74%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 211.9.
실시예 325e: 5-브로모-1,3-다이메틸-1H-피라졸로[3,4-c]피리딘 325e 및 5-브로모-2,3-다이메틸-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘 326a
아세토나이트릴(60 mL) 중의 화합물 325d(3.0 g, 14.2 mmol), CH3I(2.40 g, 17.0 mmol), 및 K2CO3(2.9 g, 21.3 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(8:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 325e(920 mg, 29.0%)를 백색 고체로서 수득하고, 석유 에터/에틸 아세테이트(2:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 326a(390 mg, 12.0%)를 회색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 226.1.
실시예 325f: 5-브로모-3-(1,3-다이메틸-1H-피라졸로[3,4-c]피리딘-5-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 325f
밀봉된 튜브에 화합물 325e(202 mg, 1.0 mmol), 화합물 325a(337.5 mg, 1.5 mmol), Pd2(dba)3(91.7 mg, 0.10 mmol), BINAP(124.6 mg, 0.20 mmol), 세슘 카보네이트(650 mg, 2.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 밀봉된 튜브를 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(5:1 내지 2:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 325f(140 mg, 40%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 348.2.
실시예 325g: {4-[5-({1,3-다이메틸-1H-피라졸로[3,4-c]피리딘-5-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일}메틸 아세테이트 325g
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 화합물 325f (120 mg, 0.35 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(417 mg, 1.05 mmol), Pd(dppf)Cl2(29 mg, 0.035 mmol), K3PO4(148.0 mg, 0.70 mmol), 나트륨 아세테이트(57.4 mg, 0.70 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(15 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 환류 온도에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 325g를 황색 고체(70 mg, 33%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 620.8.
실시예 325: 3-[4-[5-[(1,3-다이메틸피라졸로[3,4-c]피리딘-5-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 325
i-프로판올/THF(1:1, 4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 325g(60 mg, 0.10 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(60 mg, 2.5 mmol)의 혼합물을 35℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물에 물(10 mL)을 가하고, 생성 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 325를 황색 고체(20 mg, 31%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 578.8. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.80 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.49 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.06-5.05 (m, 1H), 4.51-4.43 (m, 2H), 4.25-4.19 (m, 3H), 4.00 (s, 3H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 2.62-2.59 (m, 2H), 2.44-2.43 (m, 중첩, 5H), 1.22 (s, 6H).
실시예 326b: 5-브로모-3-(2,3-다이메틸-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-5-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 326b
Figure pat00394
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 실시예 325으로부터의 5-브로모-2,3-다이메틸-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘 326a(452 mg, 2.0 mmol), 3-아미노-5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 325a(400 mg, 2.0 mmol), 세슘 카보네이트(1.3 g, 4.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(10 mL)을 넣었다. 이 현탁액을 5분 동안 버블링한 후, BINAP (124 mg, 0.2 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(140 mg, 0.2 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 환류 온도에서 2.5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(2/1) 내지 100% 에틸 아세테이트로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 326b(160 mg, 23%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 348.3
실시예 326c: {4-[5-({2,3-다이메틸-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-5-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일}메틸 아세테이트 326c
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 326b(160 mg, 0.46 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(300 mg, 0.69 mmol), K3PO4(195 mg, 0.92 mmol), 나트륨 아세테이트(75 mg, 0.92 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노) 페로센다이클로로팔라듐(II)(42 mg, 0.046 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(6 방울)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 N2 보호 하에 1.5시간 동안 가열하였다. LCMS 분석은 목
분석은, 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(50 mL) 및 물(50 mL)로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 다이클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(60:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 326c(130 mg, 45%)를 흑색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 621.3
실시예 326: 3-[4-[5-[(2,3-다이메틸피라졸로[3,4-c]피리딘-5-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 326
THF/i-프로판올/물(4/2/1 mL) 중의 화합물 326c(130 mg, 0.21mmol)의 용액에 실온에서 리튬 하이드록사이드(50 mg, 2.0 mmol)를 가했다. 이 반응물을 3시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 그 후, 이 혼합물을 물(30 mL)에 붓고, 다이클로로메탄(3 X 30 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 잔류 고체를 역상 분취용 HPLC(A: 1‰ NH4HCO3/물, B: 아세토나이트릴)로 정제하여, 화합물 326(60 mg, 50%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 579.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.86 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 1.5Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.47 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.38 (d, J = 5.0 Hz,1H), 6.57 (s, 1H), 5.13 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.50-4.46 (m, 2H), 4.24-4.19 (m, 3H), 4.09 (s, 3H), 3.86-3.85 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.62-2.53 (m, 중첩, 5H), 2.43 (s, 2H), 1.22 (s, 6H)
실시예 327a: 5-(2-메톡시에틸)-2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 327a
Figure pat00395
아세토나이트릴(10 mL) 중의 2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진(190 mg, 1.13 mmol) 209a의 용액에 K2CO3(311.9 mg, 2.26 mmol) 및 1-브로모-2-메톡시에탄(188.3 mg, 1.36 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 80℃에서 17시간 동안 마이크로파 조사 하에 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 327a를 백색 고체(230 mg, 90%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 227.0
실시예 327b: 5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민 327b
Figure pat00396
메탄올(10 mL) 중의 화합물 327a(286 mg, 1.26 mmol)의 용액에 Pd/C(28.6 mg)를 가했다. 이 시스템을 배기하고, 이어서 H2로 재충전하였다. 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 이 혼합물을 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 327b를 황색 고체(240 mg, 97%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 197.0
실시예 327c: 3,5-다이브로모-6-메틸피리딘-2(1H)-온 327c
6-메틸-피리딘-2-올(10.9 g, 0.10 mol)을 무수 다이클로로메탄(300 mL)에 현탁시키고, 주변 온도에서 교반하였다. 얼음/물 냉각 욕을 사용한 냉각 하에, N-브로모석신이미드(NBS)(11.4 g, 0.20 mol)를 5분 간격에 걸쳐 천천히 분획들로 나누어 가했다. 현탁액을 환류 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 이 후, 상기 현탁액을 여과하였다. 필터 케이크를 메탄올로 완전히 세척하고, 진공에서 건조시켜 화합물 327c를 백색 고체(22.7 g, 85%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 266.
실시예 327d: 3,5-다이브로모-1,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온 327d
자석 교반기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 DMF(50 mL), 화합물 327c(10.0 g, 37.5 mmol), CH3I(5.3 g, 37.5 mmol), 및 K2CO3(7.8 g, 56.2 mmol)를 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 물(100 mL)을 가하고, 생성 백색 고체를 수집하여, 화합물 327d(8.2 g, 78%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 280.
실시예 327e: 5-브로모-3-(5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온 327e
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 화합물 327b(392 mg, 2.0 mmol), 327d(562 mg, 2.0 mmol), 세슘 카보네이트(1.30 g, 4.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 이 현탁액을 10분 동안 버블링한 후, 잔트포스(115 mg, 0.20 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(92 mg, 0.10 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 5시간 동안 가열 환류시켰다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 고체를 다이클로로메탄(2 X 15 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 327e(490 mg, 62%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 396.2
실시예 327f: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(5-{[5-(2-메톡시에틸)-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노}-1,2-다이메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 327f
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 25 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 327e(158 mg, 0.40 mmol), {3-[(아세틸옥시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(159 mg, 0.40 mmol), K3PO4(170 mg, 0.80 mmol), 나트륨 아세테이트(66 mg, 0.80 mmol), Pd(dppf)Cl2(15 mg, 0.020 mmol), 및 아세토나이트릴/물(7/0.5 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/N2 플러쉬 후, 이 혼합물을 95℃에서 1시간 동안 가열하였다. LCMS 분석은, 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 다이클로로메탄(50 mL) 및 물(30 mL)로 희석하였다. 수 층을 다이클로로메탄(2 x 30 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하였다. 진흑색 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(80:1 내지 30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 327f(120 mg, 45%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 668.8
실시예 327: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-(2-메톡시에틸)-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노]-1,2-다이메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 327
THF/i-프로판올/물(6/4/3 mL) 중의 화합물 327f(120 mg, 0.18 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(22 mg, 0.90 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 물(15mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(3 X 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 가압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 327을 백색 고체(55 mg, 49%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 626.9. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.15 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 5.61 (bs, 1H), 4.53-4.45 (m, 3H), 4.26-4.16 (m, 3H), 4.03-3.97 (m, 3H), 3.71-3.69 (m, 5H, overlap), 3.58 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.39 (s, 3H), 2.98 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.60-2.57 (m, 2H), 2.53 (s, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.29 (s, 6H).
실시예 328a: 3-(5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 328a
Figure pat00397
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 5-브로모-3-(5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 296f(330 mg, 0.86 mmol), Pin2B2(329mg, 1.30 mmol), Pd2(dba)3(40 mg, 0.043 mmol), 잔트포스(41 mg, 0.086 mmol), 칼륨 아세테이트(169 mg, 1.726 mmol), 및 다이옥산(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/N2 플러쉬 후, 이 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터로 세척하여, 화합물 328a를 진흑색 오일(240 mg, 80%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 348.3
실시예 328b: 3-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-5-(5-{[5-(2-메톡시에틸)-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-4-카브알데하이드 328b
자석 교반기가 장착된 밀봉된 튜브에 3-브로모-5-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-카브알데하이드 107f(100 mg, 0.26 mmol), 화합물 328a(110 mg, 0.26 mmol), Pd(dppf)Cl2(10 mg, 0.026mmol), 나트륨 아세테이트(50 mg, 0.50 mmol), K3PO4(100 mg, 0.50 mmol), 및 아세토나이트릴/물(5 mL/1mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(10:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 328b(50 mg, 32%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 611.3.
실시예 328: 3-[4-(하이드록시메틸)-5-[5-[[5-(2-메톡시에틸)-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 328
메탄올(4 mL) 중의 화합물 328b(50 mg, 0.08 mmol) 및 NaBH4(8.0 mg, 0.20 mmol)의 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물(10 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 가하고, 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 328(13 mg, 25%)을 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 613.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.62 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.92 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 5.67 (s, 1H), 4.64-4.62 (m, 1H), 4.57-4.55 (m, 1H), 4.38-4.34 (m, 1H), 4.22-4.17 (m, 3H), 4.05-4.02 (m, 2H), 3.99-3.96 (m, 1H), 3.71-3.70 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.57 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.37 (s, 3H), 2.99 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.56 (s, 2H), 2.51 (s, 2H), 1.27 (s, 6H).
실시예 329a: 2-클로로-4-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 329a
Figure pat00398
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 4,4-다이메틸-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-9-온 107e(612 mg, 3.0 mmol), 4-브로모-2-클로로니코틴알데하이드(2.0 g, 9.0 mmol), Pd2(dba)3(275 mg, 0.30 mmol), 잔트포스(347 mg, 0.60 mmol), 세슘 카보네이트(1.95 g, 6.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(30 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 97℃에서 밤새도록 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:2)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 329a를 황색 고체(660 mg, 65%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 344.1.
실시예 329b: 4-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-2-(5-{[5-(2-메톡시에틸)-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-카브알데하이드 329b
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 329a(100 mg, 0.30 mmol), 3-(5-(2-메톡시에틸)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 328a(257 mg, 0.60 mmol), Pd(dppf)Cl2(25 mg, 0.030 mmol), K3PO4(127 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트(49 mg, 0.60 mmol), 물(0.50 mL), 및 THF(10 mL)를 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 환류 온도에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 329b를 갈색 고체(60 mg, 34%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 611.3.
실시예 329: 3-[3-(하이드록시메틸)-2-[5-[[5-(2-메톡시에틸)-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-4-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 329
메탄올(5 mL) 중의 화합물 329b(50 mg, 0.080 mmol) 및 NaBH4(9.1 mg, 0.24 mmol)의 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(10 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 10 m)으로 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 329(15 mg, 30%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 613.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.66 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.12 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.71 (s, 1H), 4.67-4.63 (m, 1H), 4.49-4.43 (m, 1H), 4.24-4.23 (m, 2H), 4.19-4.17 (m, 1H), 4.06-4.04 (m, 2H), 4.01-3.97 (m, 1H), 3.74-3.71 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.59-3.55 (m, 2H), 3.38 (s, 3H), 3.00 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.56 (s, 2H), 2.51 (s, 2H), 1.27 (s, 6H).
실시예 330a: 10-[4-클로로-3-(하이드록시메틸)피리딘-2-일]-4,4-다이메틸-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-9-온 330a
Figure pat00399
4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 109a(1.2 g, 3.3 mmol), NaBH4(228 mg, 6.0 mmol), 및 메탄올(10 mL)의 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 물(10 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 X 15 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하여 화합물 330a를 연황색 고체(1.0 g, 84%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 362.9
실시예 330b: (4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 330b
화합물 330a(1.0 g, 2.76 mmol), 트라이에틸아민(610 mg, 6.0 mmol), 및 아세트산 무수물(5 mL)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 그 후, 이 반응 혼합물을 물(10 mL)로 켄칭하고, pH를 NaHCO3(수성)로써 약 8로 조정하였다. 이 혼합물을 다이클로로메탄(2 X 15 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(1:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 330b를 연황색 고체(1.0 g, 90%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 405.2
실시예 330c: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 330c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 330b(1.0 g, 2.47 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(1.87 g, 7.40 mmol), Pd(dppf)Cl2(100 mg, 0.13 mmol), 잔트포스(125 mg, 0. 25 mmol), 칼륨 아세테이트(500 mg, 5.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 65℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켜 화합물 330c(1.0 g, 98%)를 추가의 정제 없이 갈색 오일로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 415.2.
실시예 330d: (3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올 330d
3-나이트로-1H-피라졸-5-카복실산(4.71 g, 30 mmol), BH3/THF(75 mL, 1 mol/L, 75 mmol)의 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 4M HCl(19 mL, 75 mmol)을 가했다. 이를 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트와 염수(100:100 mL) 사이에 분배하였다. 수성 상을 에틸 아세테이트(4 X 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(5:1 내지 1:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 330d(3.5 g, 79%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 144.2
실시예 330e: 1-(5-(하이드록시메틸)-3-나이트로-1H-피라졸-1-일)-2-메틸프로판-2-올 330e
밀봉된 튜브에 화합물 330d (2.145 g, 15 mmol), Cs2CO3(978 mg, 3.0 mmol), 및 2,2-다이메틸옥시란(15 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 이 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트(5:1 내지 1:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 330e(1.2 g, 38%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 216.2
실시예 330f: 6,6-다이메틸-2-나이트로-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진 330f
DMF(10 mL) 중의 화합물 330e(1.1 g, 5.1 mmol)의 용액에, 0℃에서 NaH(미네랄 오일 중의 60 % 분산액, 246 mg, 6.14 mmol)를 가했다. 생성 현탁액을 30분 동안 교반하고, 이어서 p-톨루엔설폰일 클로라이드(1169 mg, 6.14 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 60℃에서 밤새도록 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 포화된 암모늄 클로라이드 용액을 가하고, 이 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 석유 에터/에틸 아세테이트 구배(9:1 내지 2:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 330f(228 mg, 22%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 198.3
실시예 330g: 6,6-다이메틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-아민 330g
50 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 330f (0.21 g, 1.25 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 125 mg), 및 메탄올(10 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 배기하고, 수소 가스를 넣고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 330g(167 mg, 93%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 168.1
실시예 330h: 6-클로로-4-(6,6-다이메틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온 330h
Figure pat00400
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 330g(250 mg, 1.5 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(669 mg, 3.0 mmol), Pd2(dba)3(137 mg, 0.15 mmol), 잔트포스(173 mg, 0.30 mmol), Cs2CO3(978 mg, 3.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 에틸 아세테이트로 세척하여, 화합물 330h를 황색 고체(209 mg, 45%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 310.1.
실시예 330i: {4-[5-({6,6-다이메틸-4H,6H,7H-피라졸로[3,2-c][1,4]옥사진-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}피리딘-3-일}메틸 아세테이트 330i
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 330h(133 mg, 0.43 mmol), 화합물 330c(178 mg, 0.43 mmol), 나트륨 아세테이트(71 mg, 0.86 mmol), K3PO4(182 mg, 0.86 mmol), Pd(dppf)Cl2(35 mg, 0.043 mmol), 아세토나이트릴(15 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 생성 혼합물을 통해 질소를 20분 동안 버블링한 후, 이 반응 혼합물을 95℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 330i를 황색 고체(69 mg, 25%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 644.3.
실시예 330: 3-[4-[5-[(6,6-다이메틸-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-피리다진-3-일]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]티에노[1,3-c]피리딘-4-온 330
i-프로판올/THF(1:1, 3.5 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 330i(69 mg, 0.11 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(10 mg, 0.42 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 물(10 mL)로 희석하였다. 이를 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 330(30 mg, 47%)을 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 602.5. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.43 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.82 (s, 2H), 4.60-4.58 (m, 2H), 4.38-4.36 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.89-3.87 (m, 3H), 3.02-2.93 (m, 2H), 2.79-2.75 (m, 2H), 2.59-2.54 (m, 2H), 1.37 (s, 6H), 1.28 (s, 6H).
실시예 331a: 5-브로모-1-메틸-3-(3-메틸아이소티아졸-5-일아미노)피라진-2(1H)-온 331a
Figure pat00401
자석 교반기가 장착된 밀봉된 튜브에 3-메틸아이소티아졸-5-아민(170 mg, 1.5 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피라진-2(1H)-온(400 mg, 1.5 mmol), Pd(OAc)2(84 mg, 0.375 mmol), BINAP(116 mg, 0.188 mmol), K2CO3(450 mg, 4.5 mmol) 및 1,4-다이옥산(4 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 120℃에서 밀봉된 튜브에서 18시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1 내지 25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 331a(220 mg, 50%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 301.0.
실시예 331b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{4-메틸-6-[(3-메틸-1,2-티아졸-5-일)아미노]-5-옥소-4,5-다이하이드로피라진-2-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 331b
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 331a(150 mg, 0.50 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(400 mg, 1.0 mmol), Pd(dppf)Cl2(25 mg, 0.025 mmol), K3PO4(220 mg, 1.0 mmol), 나트륨 아세테이트·삼수화물(136 mg, 1.0 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 배기하고, N2로 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100/1 내지 25/1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 331b(200 mg, 70%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 574.2.
실시예 331: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[4-메틸-6-[(3-메틸아이소티아졸-5-일)아미노]-5-옥소-피라진-2-일]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 331
THF/i-프로판올(4:2, 6 mL) 및 물(2 mL) 중의 화합물 331b(120 mg, 0.21 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·일수화물(88 mg, 2.1 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 물(10 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(2 x 15 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 331(50 mg, 45%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 532.2. 1H NMR (500 MHz, CHCL3) δ 9.13 (s, 1H), 8.61 (d, J = 5 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.99 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 5.32-5.39 (m, 1H), 4.77-4.75 (m, 1H), 4.58-4.56 (m, 1H), 4.32-4.37 (m, 1H), 4.21-4.18 (m, 2H), 3.96-3.94 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.61-2.58 (m, 2H), 2.54 (s, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.30 (s, 6H).
실시예 332a: 5-브로모-3-(5-에틸-1,3,4-티아다이아졸-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 332a
Figure pat00402
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 5-에틸-1,3,4-티아다이아졸-2-아민(500 mg, 3.88 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.55 g, 5.81 mmol), Pd2(dba)3(357 mg, 0.39 mmol), 잔트포스(451 mg, 0.78 mmol), Cs2CO3(2.5 g, 7.67 mmol) 및 1,4-다이옥산(40 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 90℃로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 빙수 욕에서 냉각하고, 이어서 다시 여과하여 화합물 332a(574 mg, 47%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 315.1
실시예 332b: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-{5-[(5-에틸-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 332b
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 화합물 332a(200 mg, 0.63 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(754 mg, 1.89 mmol), PdCl2(dppf)(51 mg, 0.063 mmol), K3PO4(267 mg, 1.26 mmol), CH3COONa(103 mg, 1.26 mmol), 아세토나이트릴(15 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 생성 혼합물을 통해 질소를 20분 동안 버블링한 후, 이를 100℃에서 질소 분위기 하에 2시간 동안 가열하였다. 생성 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 증발시키고, 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 332b를 갈색 고체(178 mg, 48%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 588.2
실시예 332: 3-[4-[5-[(5-에틸-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 332
i-프로판올/THF/물(9 mL /6 mL /6 mL) 중의 화합물 332b(158 mg, 0.27 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(19 mg, 0.81 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 다이클로로메탄 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 332 백색 고체(80 mg, 54%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 546.2. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.20 (s, 1H), 8.60 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.92 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.49-4.39 (m, 2H), 4.25-4.19 (m, 3H), 3.87-3.85 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.92-2.88 (m, 2H), 2.58-2.53 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.27-1.22 (m, 중첩, 9H).
실시예 333a: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}-4-{1-메틸-5-[(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 333a
Figure pat00403
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10-아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6)-다이엔-10-일}-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 330c(180 mg, 0.37 mmol), 5-브로모-1-메틸-3-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일아미노)피리딘-2(1H)-온 292c(125 mg, 0.43 mmol), Pd(dppf)Cl2(20 mg, 0.025 mmol), 칼륨 아세테이트(80 mg, 0.80 mmol), K3PO4(165 mg, 0.80 mmol), 및 아세토나이트릴/물(10 mL /1 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 333a(150 mg, 71%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 574.1
실시예 333: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[1-메틸-5-[(1-메틸트라이아졸-4-일)아미노]-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]티에노[1,3-c]피리딘-4-온 333
THF(5 mL), i-프로판올(5 mL) 및 물(1.5 mL) 중의 화합물 333a(150 mg, 0.26 mmol) 및 리튬 하이드록사이드·수화물(84 mg, 2.0 mmol)의 혼합물을 40℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 물(10 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 다이클로로메탄(2 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 333(52 mg, 38%)을 연황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 532.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.48-8.47 (m, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.78-7.77 (m, 2H), 7.42 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.34-7.33 (m, 1H), 4.97-4.95 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.43-4.41 (m, 2H), 4.17-4.16 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.94-3.92 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.04-3.02 (m, 1H), 2.90-2.89 (m, 1H), 2.77-2.75 (m, 2H), 2.56-2.54 (m, 2H), 1.23 (s, 3H), 1.22 (s, 3H).
실시예 334: 3-[4-[5-[(5-사이클로프로필-1,3,4-티아다이아졸-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 334
실시예 273의 절차를 따르되, 2-아미노 피리딘을 5-사이클로프로필-1,3,4-티아다이아졸-2-아민으로 대체하여 화합물 334(8.7 mg, 22% 수율)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.10 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.95 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.55 - 4.49 (m, 1H), 4.27 - 4.23 (m, 3H), 3.78 (s, 2H), 3.51 (s, 3H), 3.48 (dt, J = 12.3, 5.2 Hz, 3H), 3.24 (s, 2H), 2.50 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.33 (s, 2H), 1.85 - 1.82 (m, 3H), 1.23 (s, 6H). ES-MS m/z 531.3 [M+1].
실시예 335a: 5-브로모-3-(6,6-다이메틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 335a
Figure pat00404
환류 응축기가 장착된 100 mL 환저 플라스크에 1,4-다이옥산(10 mL), 6,6-다이메틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-아민 330g(167 mg, 1.0 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(320 mg, 1.2 mmol), Pd2(dba)3(91 mg, 0.10 mmol), 잔트포스(116 mg, 0.20 mmol), 및 세슘 카보네이트(652 mg, 2.0 mmol)를 넣었다. 3 사이클의 진공/아르곤 플러쉬 후에, 이 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(100:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 335a(210 mg, 60%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 352.9
실시예 335b: 3-(6,6-다이메틸-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 335b
다이옥산(20 mL) 중의 화합물 335a(160 mg, 0.45 mmol) 및 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(572 g, 2.25 mmol)의 혼합물에 PdCl2(dppf)(36.8 mg, 0.045 mmol) 및 칼륨 아세테이트(88.2 mg, 0.90 mmol)를 가했다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 90℃에서 4시간 동안 질소 분위기 하에 교반하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켜 화합물 335b를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+401.3.
실시예 335c: 4-[5-({6,6-다이메틸-4H,6H,7H-피라졸로[3,2-c][1,4]옥사진-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10,11-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6),11-트라이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 335c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 335b(240 mg, 0.60 mmol), 4-클로로-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-7-티아-10,11-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-1(8),2(6),11-트라이엔-10-일}피리딘-3-카브알데하이드 282i(107.7 mg, 0.30 mmol), Pd(dppf)Cl2(24.5 mg, 0.030 mmol), K3PO4(127.2 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트(49.2 mg, 0.60 mmol), 물(0.5 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 95℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 335c를 갈색 고체(60 mg, 22%, 2 단계)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 598.2.
실시예 335: 3-[4-[5-[(6,6-다이메틸-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-6,8-다이하이드로사이클로펜타[3,4]티에노[1,3-d]피리다진-4-온 335
메탄올(5 mL) 중의 화합물 335c(50 mg, 0.080 mmol) 및 NaBH4(9.1 mg, 0.24 mmol)의 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(10 mL)로 켄칭하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 10 mL)으로 추출하였다. 합친 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 335(15 mg, 30%)를 황색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 600.2. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.85-4.83 (m, 1H), 4.72 (s, 2H), 4.38-4.37 (m, 2H), 3.79-3.78 (m, 2H), 3.3 (s, 3H), 2.92-2.91 (m, 2H), 2.81 (s, 2H), 1.28 (s, 6H), 1.25 (s, 6H).
실시예 336a: 5-(메톡시메틸)-1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸 336a
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 5-(브로모메틸)-1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸(8.8 g, 40 mmol), 나트륨 메톡사이드(4.3 g, 80 mmol), 및 메탄올(50 mL)을 넣었다. 이 반응 혼합물을 환류 온도에서 2시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(60 mL)와 물(60 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(2 X 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(50 mL)로 세척하고. 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 336a를 황색 오일(6.1 g, 90%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 172.
실시예 336b: 5-(메톡시메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-아민 336b
자석 교반기가 장착된 250 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 336a(4.0 g, 23 mmol), Pd/C(1.0 g), 및 에탄올(100 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 수소화시켰다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 336b를 황색 오일(3.3 g, 99%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 142.
실시예 336c: 5-브로모-3-(5-(메톡시메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 336c
Figure pat00405
실시예 335a의 절차를 따르고, 화합물 335b(1.7 g, 12 mmol) 및 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(3.2 g, 12 mmol)으로부터 출발하여 화합물 336c를 황색 고체(2.8 g, 71%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 327. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.86 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 6.88 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.41 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 3.36 (s, 3H).
실시예 336d: 3-(5-(메톡시메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 336d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 336c(600 mg, 1.83 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(1.39 g, 5.49 mmol), Pd2(dba)3(183 mg, 0.20 mmol), 잔트포스(190 mg, 0.40 mmol), 칼륨 아세테이트(392 mg, 4.0 mmol) 및 1,4-다이옥산(30 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 85℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하여 조질물 336d를 흑색 오일(400 mg, 75%)로서 수득하고, 이를 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 293.1
실시예 336e: 4-(5-(5-(메톡시메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 336e
Figure pat00406
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 336d(368 mg, 0.98 mmol), 4-클로로-2-(1-옥소-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-2(1H)-일)니코틴알데하이드 139a(270 mg, 0.82 mmol), PdCl2(dppf)(60 mg, 0.082 mmol), K3PO4(348 mg, 1.64 mmol)), 나트륨 아세테이트(135 mg, 1.65 mmol), 아세토나이트릴(15 mL) 및 물(0.5 mL)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 95℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 잔사를, 에틸 아세테이트/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 336e(100 mg, 22%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 542.2
실시예 336: 2-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-(메톡시메틸)-1-메틸-피라졸-3-일]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-3,4,6,7,8,9-헥사하이드로피리도[3,4-b]인돌리진-1-온 336
메탄올(10 mL) 중의 화합물 336e(100 mg, 0.18 mmol)의 용액에 NaBH4(41 mg, 1.08 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, LCMS는, 출발 물질이 소진되었음을 나타냈었다. 이 반응물을 1.0 M HCl 용액(10 mL)으로 켄칭하고, 대부분의 메탄올이 증류될 때까지 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 다이클로로메탄(3 X 15 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na2SO4로써 건조하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 336을 백색 고체(41 mg, 41%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 544.2. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.33 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.99-4.96 (m, 1H), 4.67-4.64 (m, 1H), 4.42-4.41 (m, 3H), 4.36-4.26 (m, 1H), 3.98-3.91 (m, 1H), 3.88-3.82 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 3.06-2.91 (m, 2H), 2.87-2.79 (m, 2H), 2.08-2.01 (m, 2H), 1.91-1.86 (m, 2H).
실시예 337a: 1,2-다이메틸-4-나이트로-1H-이미다졸 337a
Figure pat00407
DMF(80 mL) 중의 2-메틸-4-나이트로-1H-이미다졸(10.0 g, 78.7 mmol) 및 K2CO3(21.7 g, 160 mmol)의 혼합물에 CH3I(13.4 g, 94 mmol)를 실온에서 교반하면서 적가하였다. 이 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 물(200 mL)을 혼합물에 가했다. 생성 현탁액을 여과하고, 물로 세척하고, 진공에서 건조시켜 화합물 337a를 백색 고체(5.0 g, 45%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 142.1.
실시예 337b: 3급-부틸 1,2-다이메틸-1H-이미다졸-4-일카바메이트 337b
100 mL 1구 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 337a(2.0 g, 14.1 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 400 mg), (Boc)2O(9.22 g, 43.3 mmol), 트라이에틸아민(2.85 g, 28.2 mmol), 및 에탄올(20 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 배기하고, 수소 가스를 넣고, 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(40:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 337b(1.2 g, 40%)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 212.1
실시예 337c: 1,2-다이메틸-1H-이미다졸-4-아민 하이드로클로라이드 337c
다이클로로메탄(5.0 mL) 중의 화합물 337b(1.2 g, 5.68 mmol)의 용액에 다이옥산(5.0 mL) 중의 3M HCl을 가했다. 이 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축하였다. 조 생성물을 에틸 아세테이트로 세척하여, 화합물 337c(450 mg, 55%)를 연황색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 112.2
실시예 337d: 5-브로모-3-(1,2-다이메틸-1H-이미다졸-4-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 337d
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 337c(400 mg, 3.60 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(960 mg, 3.60 mmol), 잔트포스(240 mg, 0.40 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(360 mg, 0.40 mmol), Cs2CO3(4.69 g, 14.4 mmol) 및 1,4-다이옥산(20 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 90℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(30:1 내지 20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 337d를 연황색 고체(350 mg, 33%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 297.1.
실시예 337e: (4-{5-[(1,2-다이메틸-1H-이미다졸-4-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일}-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]-도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일)메틸 아세테이트 337e
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 337d(20mg, 0.67 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(270 mg, 0.67 mmol), Pd(dppf)Cl2(42 mg, 0.050 mmol), 나트륨 아세테이트(82 mg, 1.0 mmol), K3PO4·삼수화물(266 mg, 1.0 mmol), 물(6 방울) 및 아세토나이트릴(6 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 95℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 여과하고, 여액을 감압 하에 증발시켰다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(25:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 337e(200 mg, 50%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS-ESI: [M+H]+ 570.3
실시예 337: 3-[4-[5-[(1,2-다이메틸이미다졸-4-일)아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-3-(하이드록시메틸)-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 337
i-프로판올/THF(1:1, 4 mL) 및 물(1 mL) 중의 화합물 337e(100 mg, 0.19 mmol) 및 리튬 하이드록사이드(34 mg, 1.4 mmol)의 혼합물을 40℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 감압 하에 증발시키고, 잔사를 물(10 mL)로 희석하였다. 이어서, 이를 에틸 아세테이트(2 X 10 mL)로 추출하였다. 합친 에틸 아세테이트 추출물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 337(35 mg, 40%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS-ESI: [M+H]+ 528.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.45 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.28-7.27 (m, 2H), 7.25 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.62-4.40 (m, 3H), 4.15-4.14 (m, 2H), 3.84-3.81 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.52 (s, 3H), 2.57-2.56 (m, 2H), 2.51 (s, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.27 (s, 6H).
실시예 338a: 3-(2-나이트로-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-일)프로판나이트릴 338a
Figure pat00408
실시예 296d의 절차를 따르고, 1-(2-브로모에틸)-5-(클로로메틸)-3-나이트로-1H-피라졸 296d(268 mg, 1.00 mmol) 및 3-아미노프로판나이트릴(210 mg, 3.00 mmol)로부터 출발하여 화합물 338a를 백색 고체(180 mg, 81%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 222.1
실시예 338b: 3-(2-아미노-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-일)프로판나이트릴 338b
실시예 296e의 절차를 따르고, 화합물 338a(180 mg, 0.81 mmol)으로부터 출발하여 화합물 338b를 황색 고체(120 mg, 77%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 192.2
실시예 338c: 3-(2-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)-6,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-5(4H)-일)프로판나이트릴 338c
실시예 309c의 절차를 따르고, 화합물 338b(120 mg, 0.63 mmol) 및 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(169 mg, 0.63 mmol)으로부터 출발하여 화합물 338c를 황색 고체(150 mg, 63%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 377.2
실시예 338d: [4-(5-{[5-(2-사이아노에틸)-4H,5H,6H,7H-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일]아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-3-일]메틸 아세테이트 338d
실시예 309d의 절차를 따르고, 화합물 338c(150 mg, 0.45 mmol) 및 {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(358 mg, 0.90 mmol)으로부터 출발하여 화합물 338d를 황색 고체(150 mg, 52%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 650.3
실시예 338: 3-[2-[[5-[2-(7,7-다이메틸-4-옥소-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-3-일)-3-(하이드록시메틸)-4-피리딜]-1-메틸-2-옥소-3-피리딜]아미노]-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-5-일]프로판나이트릴 338
실시예 309의 절차를 따르고, 화합물 338e(150 mg, 0.23 mmol)으로부터 출발하여 화합물 338을 백색 고체(55 mg, 40%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 608.3. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.05 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.66-4.64 (m, 1H), 4.52-4.50 (m, 1H), 4.36-4.34 (m, 1H), 4.17-4.16 (m, 2H), 4.09-4.07 (m, 2H), 3.88-3.84 (m, 1H), 3.75 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.05-3.03 (m, 2H), 2.93-2.90 (m, 2H), 2.63-2.58 (m, 4H), 2.53 (s, 2H), 1.29 (s, 6H).
실시예 339a: 3급-부틸 4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 339a
DMSO(1 L) 중의 5-브로모-2-나이트로피리딘(30.0 g, 148 mmol)의 용액에 K2CO3(40.0 g, 296 mmol) 및 3급-부틸 피페라진-1-카복실레이트(28.0 g, 148 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 65℃에서 밤새도록 교반하였다. 냉각한 후, 이를 물(2 L)에 부었다. 침전된 고체를 농축하고, 진공에서 건조하였다. 이어서, 이를 추가로 20:1 석유 에터/에틸 아세테이트로 용리하고 이어서 다이클로로메탄으로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 339a를 황색 고체(17.0 g, 37%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 309.
실시예 339b: 3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 339b
500 mL 환저 플라스크를 질소로 퍼지하고, 여기에 화합물 339a(3.1 g, 10 mmol), 10% Pd/C(50% 습윤, 1.0 g), 및 에탄올(100 mL)을 넣었다. 이를 배기하고, 풍선을 통해 수소 가스를 충전하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 수소를 배기하고, 질소를 상기 플라스크에 넣었다. 촉매를 셀라이트(등록상표) 패드에 여과시켜 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하여 화합물 339b(2.7 g, 97%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 279
실시예 339c: 3급-부틸 4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 339c
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 100 mL 1구 환저 플라스크에 화합물 339b(1.3 g, 4.7 mmol), 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(1.24 g, 4.7 mmol), 세슘 카보네이트(3.8 g, 12 mmol) 및 1,4-다이옥산(50 mL)을 넣었다. 생성 혼합물에 30분 동안 질소를 버블링한 후, 잔트포스(272 mg, 0.47 mmol) 및 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(430 mg, 0.47 mmol)을 가했다. 이 시스템을 3 사이클의 아르곤/진공 플러쉬로 처리하고, 환류 온도에서 3시간 동안 가열하였다. 이시간 후에, 이 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(100 mL)와 물(100 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 분리하고, 에틸 아세테이트(2 X 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(50 mL)로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(50:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 339c(1.3 g, 59%)를 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 464.
실시예 339d: 3급-부틸 4-{6-[(5-{3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)아미노]피리딘-3-일}피페라진-1-카복실레이트 339d
Figure pat00409
자석 교반기 및 환류 응축기가 장착된 50 mL 1구 환저 플라스크에 (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 199e(287.4 mg, 0.60 mmol), 화합물 339c(145 mg, 0.30 mmol), Pd(dppf)Cl2(24.5 mg, 0.030 mmol), K3PO4(127.2 mg, 0.60 mmol), 나트륨 아세테이트(49.2 mg, 0.60 mmol), 물(0.50 mL) 및 아세토나이트릴(10 mL)을 넣었다. 3 사이클의 진공/질소 플러쉬 후, 이 혼합물을 95℃에서 1시간 동안 가열하였다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를, 에틸 아세테이트로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 339d를 황색 고체(140 mg, 61%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 737.3.
실시예 339e: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-(1-메틸-6-옥소-5-{[5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일]아미노}-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)피리딘-3-일)메틸 아세테이트 339e
화합물 339d(130 mg, 0.18 mmol) 및 HCl/메탄올(4.0 mL)의 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 감압 하에 농축하여 조질물 339e(100 mg, 87%)를 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 637.3.
실시예 339: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-[4-(2-메톡시에틸)피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 339
밀봉된 튜브 내의 아세토나이트릴(5.0 mL) 중의 화합물 339e(100 mg, 0.18 mmol), 1-브로모-2-메톡시에탄(24.8 mg, 0.18 mmol), 및 K2CO3(49.7 mg, 0.36 mmol)의 혼합물을 85℃에서 밤새도록 교반하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사에 물을 가하고, 생성 혼합물을 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 유기 층을 감압 하에 농축하고, 생성 잔사를 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 339를 황색 고체(31.1 mg, 30%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 653.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.61 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.84 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.38-7.34 (m, 2H), 7.23 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.97-4.95 (m, 1H), 4.45-4.40 (m, 2H), 4.23-4.19 (m, 3H), 3.85-3.83 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.47-3.44 (m, 2H), 3.24 (s, 3H), 3.04-3.02 (m, 4H), 2.59-2.53 (m, 중첩, 8H), 2.43 (s, 2H), 1.23 (s, 6H).
실시예 340a: (3S)-3급-부틸 3-메틸-4-(6-나이트로피리딘-3-일)피페라진-1-카복실레이트 340a
실시예 323a의 절차를 따르고, (3S)-3급-부틸 3-메틸피페라진-1-카복실레이트(10.0 g, 50 mmol) 및 5-브로모-2-나이트로피리딘(10.5 g, 50 mmol)으로부터 출발하여 화합물 340a를 황색 고체(8.05 g, 50%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 323
실시예 340b: (3S)-3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 340b
실시예 323b의 절차를 따르고, 화합물 340a(5.8 g, 18 mmol)로부터 출발하여 화합물 340b를 갈색 고체(4.9 g, 93%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 293
실시예 340c: (3S)-3급-부틸 4-(6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노) 피리딘-3-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트 340c
실시예 323c의 절차를 따르고, 화합물 340b(4.0 g, 13.7 mmol) 및 3,5-다이브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온(5.5 g, 20.6 mmol)으로부터 출발하여 화합물 340c를 황색 고체(5.4 g, 83%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 478
실시예 340d: (3S)-5-브로모-1-메틸-3-(5-(2-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)피리딘-2(1H)-온 340d
실시예 271c의 절차를 따르고, 화합물 340c(3.1 g, 6.5 mmol)로부터 출발하여 화합물 340d를 황색 고체(2.3 g, 94%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 378.
실시예 340e: (S)-5-브로모-3-(5-(4-(2-메톡시에틸)-2-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일아미노)-1-메틸피리딘-2(1H)-온 340e
Figure pat00410
밀봉된 튜브에서 화합물 340d(500 mg, 1.32 mmol), 1-브로모-2-메톡시에탄(239.1 mg, 1.72 mmol), K2CO3(364 mg, 2.64 mmol) 및 아세토나이트릴(6 mL)의 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이를 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 물(20 mL) 및 에틸 아세테이트(30 mL)에 용해시켰다. 수 상을 에틸 아세테이트(3 X 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하여 조질물 340e를 진흑색 오일(600 mg)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI: [M+H]+ 436.1
실시예 340f: (2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}-4-[5-({5-[(2S)-4-(2-메톡시에틸)-2-메틸피페라진-1-일]피리딘-2-일}아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일]피리딘-3-일)메틸 아세테이트 340f
환류 응축기가 장착된 50 mL 환저 플라스크에 화합물 340e(180 mg, 0.412 mmol), {3-[(아세톡시)메틸]-2-{4,4-다이메틸-9-옥소-1,10-다이아자트라이사이클로[6.4.0.02,6]도데카-2(6),7-다이엔-10-일}피리딘-4-일}보론산 199e(327.3 mg, 0.824 mmol), Pd(dppf)Cl2(16.8 mg, 0.0206 mmol), K3PO4(174.7 mg, 0.824 mmol), 나트륨 아세테이트(67.6 mg, 0.824 mmol), 아세토나이트릴(10 mL) 및 물(3 방울)을 넣었다. 이 시스템을 3 사이클의 진공/질소 플러쉬로 처리하고, 100℃에서 N2 보호 하에 1시간 동안 가열하였다. LCMS에 의한 반응 혼합물의 분석은 목적 생성물로의 완전한 전환을 나타냈다. 이어서, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를, 다이클로로메탄/메탄올(20:1)로 용리하는 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 화합물 340f를 황색 오일(190 mg, 65%)로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 709.4
실시예 340: 3-[3-(하이드록시메틸)-4-[5-[[5-[(2S)-4-(2-메톡시에틸)-2-메틸-피페라진-1-일]-2-피리딜]아미노]-1-메틸-6-옥소-3-피리딜]-2-피리딜]-7,7-다이메틸-1,2,6,8-테트라하이드로사이클로펜타[3,4]피롤로[3,5-b]피라진-4-온 340
THF(6 mL), i-프로판올(6 mL) 및 물(6 mL) 중의 화합물 340f(170 mg, 0.24 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드(57.6 mg, 2.4 mmol)를 가했다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후에, 이 반응 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(20 mL) 및 물(10 mL)에 용해시켰다. 수 상을 다이클로로메탄(3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하고, 역상 분취용 HPLC로 정제하여, 화합물 340(48.5 mg, 30%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS-ESI: [M+H]+ 667.3. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.62 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.82 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.37-7.34 (m, 2H), 7.24 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.97-4.95 (m, 1H), 4.47-4.41 (m, 2H), 4.25-4.19 (m, 3H), 3.85-3.83 (m, 1H), 3.63-3.62 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.47-3.45 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.06-3.04 (m, 1H), 2.93-2.89 (m, 1H), 2.70-2.68 (m, 1H), 2.62-2.32 (m, 중첩, 9H), 1.22 (s, 6H), 0.91 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 901: 생화학적 Btk 분석
화학식 I의 화합물을 시험하는데 사용될 수 있는 표준 생화학적 Btk 키나제 분석을 위한 일반적인 과정은 다음과 같다. 1X 세포 신호전달 키나제 완충제(25 mM 트리스(Tris)-HCl, pH 7.5, 5 mM 베타-글리세로포스페이트, 2 mM 다이티오트레이톨, 0.1 mM Na3VO4, 10 mM MgCl2), 0.5 μM 프로메가 PTK 바이오티닐화된 펩티드 기질 2 및 0.01% BSA를 함유하는 마스터 믹스 마이너스 Btk 효소를 제조한다. 1X 세포 신호전달 키나제 완충제, 0.5 μM PTK 바이오티닐화된 펩티드 기질 2, 0.01% BSA 및 100 ng/웰(0.06 mU/웰) Btk 효소를 함유하는 마스터 믹스 플러스 Btk 효소를 제조한다. Btk 효소를 다음과 같이 제조한다: C-말단 V5 및 6x His 태그를 갖는 전장 인간 야생형 Btk(수탁번호 NM-000061)를, 에피토프-표지된 Btk를 갖는 바큘로바이러스를 제조하기 위하여, pFastBac 벡터로 서브클로닝한다. 바큘로바이러스의 생성은 공개된 프로토콜 "Bac-to-Bac 바큘로바이러스 발현 시스템"(카탈로그 번호 10359-016 및 10608-016)에 상세히 기록된 인비트로겐(Invitrogen)의 지침에 기초하여 수행된다. Sf9 세포를 감염시켜 재조합 Btk 단백질을 과발현시키기 위해 계대배양 3 바이러스를 사용한다. 이어서, Ni-NTA 컬럼을 사용하여 Btk 단백질을 균질하게 정제한다. 최종 단백질 제제의 순도는 민감성 사이프로-루비(Sypro-Ruby) 착색에 기초하여 95% 초과이다. 200 μM ATP의 용액을 물에서 제조하고, 1N NaOH에 의해 pH 7.4로 조정한다. 5% DMSO 중의 1.25 μL의 양의 화합물을 96-웰 ½ 면적 코스타(Costar) 폴리스티렌 플레이트로 옮긴다. 화합물을 단독으로, 및 11-점 투여-반응성 곡선(출발 농도는 10 μM; 1:2 희석임)으로 시험한다. 18.75 μL의 양의 마스터 믹스 마이너스 효소(음성 대조군으로서) 및 마스터 믹스 플러스 효소를 96-웰 ½ 면적 코스타 폴리스티렌 플레이트 중의 적절한 웰로 옮긴다. 5 μL의 200 μM ATP를 40 μM의 최종 ATP 농도를 위해 96-웰 ½ 면적 코스타 폴리스티렌 플레이트 중의 상기 혼합물에 첨가한다. 반응물을 1시간 동안 실온에서 항온처리한다. 30 mM EDTA, 20 nM SA-APC 및 1 nM PT66 Ab를 함유하는 퍼킨 엘머(Perkin Elmer) 1X 검출 완충제로 반응을 중단시킨다. 여기 필터 330 nm, 방출 필터 665 nm 및 2차 방출 필터 615 nm를 사용하는 퍼킨 엘머 엔비젼(Perkin Elmer Envision)에 의한 시간-분해 형광에 의해 플레이트를 판독한다. 이어서, IC50 값을 계산한다. 다르게는, 란타스크린(Lanthascreen) 분석을 사용하여 인산화된 펩티드 생성물의 정량화를 통해 Btk 활성을 평가한다. 펩티드 상의 플루오레세인과 검출 항체 상의 터븀 사이에 발생하는 형광 공명 에너지 전달(Fluorescence Resonance Energy Transfer: FRET)은 펩티드의 인산화를 감소시키는 Btk 억제제의 첨가에 의해 감소한다. 25 μL의 최종 반응 부피에서, Btk(h)(0.1 ng/25 μL 반응)를 50 mM 헤페스(Hepes) pH 7.5, 10 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 2 mM DTT, 0.2 mM NaVO4, 0.01% BSA 및 0.4 μM 플루오레세인 폴리-GAT와 함께 항온처리한다. ATP를 25 μM(ATP의 Km)까지 첨가함으로써 반응을 개시한다. 실온에서 60분 동안 항온처리한 후, 실온에서 30분 동안 최종 농도의 60 mM EDTA 중의 2 nM Tb-PY20 검출 항체를 첨가함으로써, 반응을 중단시킨다. 340 nM 여기, 및 495 nm 및 520 nm에서의 방출을 사용하여 퍼킨 엘머 엔비젼 상에서 검출한다. 예시적인 Btk 억제 IC50 값은 표 1, 2 및 3에 제시된다.
실시예 902: 라모스 세포 Btk 분석
화학식 I의 화합물을 시험하는데 사용될 수 있는 표준 세포성 Btk 키나제 분석을 위한 다른 일반적인 과정은 다음과 같다. 라모스 세포을 시험 화합물의 존재 하에 37℃에서 1시간 동안 0.5 x 107 세포/mL의 밀도로 항온처리한다. 이어서, 10 μg/mL 항-인간 IgM F(ab)2와 함께 37℃에서 5분 동안 항온처리함으로써, 세포를 자극한다. 세포를 펠렛화시키고, 용해시키고, 단백질 분석을 세정된 용해물에 대해 수행한다. 동등한 단백질 양의 각각을 샘플이 항-포스포Btk(Tyr223) 항체(세포 신호전달 기술 번호 3531; 에피토믹스(Epitomics), 카탈로그 번호 2207-1) 또는 포스포Btk(Tyr551) 항체(비디 트랜스덕션 랩스(BD Transduction Labs) 번호 558034)를 각각 사용하는 SDS-PAGE 및 웨스턴 블롯팅을 거치게 하여, 각각의 용해물 중의 Btk의 총량을 조절하기 위하여, Btk 자가인산화 또는 항-Btk 항체(비디 트랜스덕션 랩스 번호 611116)를 평가한다.
실시예 903: B-세포 증식 분석
화학식 I의 화합물을 시험하는데 사용될 수 있는 표준 세포성 B-세포 증식 분석을 위한 일반적인 과정은 다음과 같다. B-세포를 B-세포 단리 키트(밀텐이 바이오텍(Miltenyi Biotech), 카탈로그 번호 130-090-862)를 사용하여 8 내지 16주령 Balb/c 마우스의 비장으로부터 정제한다. 시험 화합물을 0.25% DMSO에 희석하고, 30분 동안 2.5 x 105 정제된 마우스 비장 B-세포와 함께 항온처리한 후, 10 μg/mL의 항-마우스 IgM 항체(서던 바이오테크놀로지 어쏘시에이트스(Southern Biotechnology Associates) 카탈로그 번호 1022-01)를 100 μL의 최종 부피에 첨가한다. 24시간 동안 항온처리한 후, 1 μCi 3H-티미딘을 가하고, 플레이트를 추가로 36시간 동안 항온처리한 후, SPA[3H] 티미딘 흡수 분석 시스템(아머샴 바이오사이언시스(Amersham Biosciences) 번호 RPNQ 0130)에 관한 제조사 프로토콜을 사용하여 수확한다. SPA-비드 기반 형광을 마이크로베타 계수기(월리스 트라이플렉스(Wallace Triplex) 1450, 퍼킨 엘머)에서 계수한다.
실시예 904: T-세포 증식 분석
화학식 I의 화합물을 시험하는데 사용될 수 있는 표준 T-세포 증식 분석을 위한 일반적인 과정은 다음과 같다. T-세포를 팬 T-세포 단리 키트(밀텐이 바이오텍, 카탈로그 번호 130-090-861)를 사용하여 8 내지 16주령의 Balb/c 마우스로부터 정제한다. 시험 화합물을 0.25% DMSO에 희석하고, 항-CD3(BD 번호 553057) 및 항-CD28(BD 번호 553294) 항체 각각 10 μg/mL로 37℃에서 90분 동안 예비코팅된 평평하고 투명한 바닥 플레이트에서 100 μL의 최종 부피로 2.5 x 105 정제된 마우스 비장 T-세포와 함께 항온처리한다. 24시간 동안 항온처리한 후, 1 μCi 3H-티미딘을 가하고, 플레이트를 추가로 36시간 동안 항온처리한 후, SPA[3H] 티미딘 흡수 분석 시스템(아머샴 바이오사이언시스 번호 RPNQ 0130)에 관한 제조사 프로토콜을 사용하여 수확한다. SPA-비드 기반 형광을 마이크로베타 계수기(월리스 트라이플렉스 1450, 퍼킨 엘머)에서 계수한다.
실시예 905: CD86 억제 분석
화학식 I의 화합물을 시험하는데 사용될 수 있는 B-세포의 억제에 관한 표준 분석을 위한 일반적인 과정은 다음과 같다. 전체 마우스 비장세포를 적혈구 용해(비디 파민겐(BD Pharmingen) 번호 555899)에 의해 8 내지 16주령 Balb/c 마우스의 비장으로부터 정제한다. 시험 화합물을 0.5% DMSO에서 희석하고 37℃에서 60분 동안 평평한 투명 바닥 플레이트(팔콘(Falcon) 353072)에서 200 μL의 최종 농도로 1.25 x 106 비장세포와 함께 항온처리한다. 이어서, 15 μg/mL IgM(잭슨 이뮤노리서치(Jackson ImmunoResearch) 115-006-020)의 첨가에 의해 세포를 자극하고, 37℃, 5% CO2에서, 24시간 동안 항온처리한다. 24시간 동안 항온처리한 후, 세포를 원뿔 바닥 투명 96-웰 플레이트로 옮기고, 1200 x g x 5분으로 원심분리함으로써 펠렛화시킨다. 세포를 CD16/CD32(비디 파민겐 번호 553142)로 사전차단(preblocking)하고, CD19-FITC(비디 파민겐 번호 553785), CD86-PE(비디 파민겐 번호 553692) 및 7AAD(비디 파민겐 번호 51-68981E)로 삼중 착색한다. 세포를 비디 팍스칼리버(BD FACSCalibur) 상에서 분류하고 CD19+/7AAD- 집단 상에서 게이팅(gating)한다. 게이팅된 집단 상의 CD86 표면 발현의 수준을 시험 화합물 농도에 대해 측정한다.
실시예 906: B-ALL 세포 생존 분석
생존 세포의 수를 측정하기 위하여 XTT 판독을 사용하는 표준 B-ALL(급성 림프구성 백혈병) 세포 생존 연구를 위한 과정은 다음과 같다. 이러한 분석은 배양균에서 B-ALL 세포의 생존을 억제하는 이들의 능력에 관해 화학식 I의 화합물을 시험하는데 사용될 수 있다. 사용될 수 있는 하나의 인간 B-세포 급성 림프구성 백혈병 라인은 SUP-B15(ATCC로부터 입수가능한 인간 Pre-B-세포 ALL 라인)이다.
SUP-B15 pre-B-ALL 세포는 100 μL의 이스코브(Iscove) + 20% FBS에서 5 x 105 세포/mL의 농도로 다중 96-웰 마이크로타이터 플레이트에서 평판배양된다. 이어서, 시험 화합물을 0.4% DMSO의 최종 농도로 첨가한다. 세포를 37℃에서 5% CO2 하에 3일 이하 동안 항온처리한다. 3일 후, 세포를 시험 화합물을 함유하는 신선한 96-웰 플레이트에 1:3으로 나누고, 추가로 3일까지 성장시킨다. 각각 24시간의 기간 후, 50 μL의 XTT 용액을 복제 96-웰 플레이트 중 하나에 가하고, 흡광 판독치를 제조사의 지침에 따라 2, 4 및 20시간에 취한다. 이어서, 분석(0.5-1.5)의 선형 범위 내에서 DMSO만으로 처리된 세포에 대해 OD로 취해진 판독치가 취해지고, 화합물 처리된 웰 중 생존 세포의 퍼센트가 DMSO만으로 처리된 세포에 대해 측정된다.
실시예 907: CD69 전혈 분석
인간 혈액을 1주 동안 약물 미복용 및 비흡연 조건을 만족하는 건강한 자원 봉사자로부터 수득한다. 혈액(8개의 화합물을 시험하기 위해 약 20 mL)을 나트륨 헤파린을 포함한 배큐테이너(Vacutainer: 등록상표)(벡튼, 디킨슨 앤드 캄파니(Becton, Dickinson and Co.)) 관으로 정맥 천자하여 수집한다.
DMSO 중의 10 mM의 화학식 I의 화합물의 용액을 100% DMSO 중에서 1:10 희석하고, 이어서, 10-점 투여량-반응 곡선을 위해 100% DMSO 중에서 3배 계대 희석한다. 화합물을 PBS 중에서 추가로 1:10 희석하고, 이어서 각각의 화합물의 분취액(5.5 μL)을 96-웰 플레이트(2 mL)에 2회씩 가하고, 대조군 및 무-자극 웰로서 PBS 중의 10% DMSO(5.5 μL)를 가한다. 인간 전혈-HWB(100 μL)를 각각의 웰에 가한다. 플레이트를 혼합한 후, 37℃, 5% CO2, 100% 습도에서 30분 동안 배양한다. 염소 F(ab')2 항-인간 IgM(10 μL의 500 μg/mL 용액, 최종 50 μg/mL)을 혼합하면서 각각의 웰(무-자극 웰 제외)에 가하고, 추가로 20시간 동안 플레이트를 배양한다. 20시간 동안 항온처리 말기에, 샘플을 형광 표지된 항체와 함께 30분 동안 37℃, 5% CO2, 100% 습도에서 배양한다. 보상 조정 및 초기 전압 설정을 위해 유도된 대조군, 미염색군 및 단일 염색군을 포함한다. 이어서, 샘플을 제조자의 지시에 따라 파엠 라이스(PharM Lyse: 상표)(비디 바이오사이언시스 파민겐)로 용해시킨다. 이어서, 샘플을 LSRII 기계 상의 비디 바이오사이언시스 HTS 96 웰 시스템 상에서 실험하는데 적합한 96 플레이트에 옮긴다. 획득된 데이터 및 평균 형광 강도 값은 비디 바이오사이언시스 디바(DIVA) 소프트웨어를 사용하여 수득한다. 결과는 초기에 FACS 분석 소프트웨어(플로우 조(Flow Jo))로 분석한다. 시험 화합물에 대한 억제 농도(IC50, IC70, IC90 등)는 항-IgM에 의해 자극된 CD20 포지티브인 CD69 세포의 포지티브 퍼센트(무-자극 백그라운드에 대한 8개의 웰의 평균을 감산한 후의 8개의 대조군 웰의 평균)를 50% 감소시키는 농도로서 정의된다. IC70 값은 비-선형 회귀 곡선 정합을 사용하는 프리즘(Prism) 버전 5에 의해 계산되고, 표 1 및 2에 제시된다.
실시예 908: 시험관 내 세포 증식 분석
화학식 I의 화합물 효능을 하기 프로토콜을 사용하는 세포 증식 분석에 의해 측정한다(문헌[Mendoza et al (2002) Cancer Res. 62:5485-5488]). 시약 및 프로토콜을 비롯한 셀타이터-글로(등록상표) 발광 세포 생존 분석은 상업적으로 이용가능하다(프로메가 코포레이션, 미국 위스콘신주 매디슨 소재, 테크니컬 불러틴(Technical Bulletin) TB288). 분석은 세포를 도입하고 세포 증식을 억제하는 화합물의 능력을 평가한다. 분석 원리는, 셀타이터-글로 시약의 첨가가 세포 용해, 및 루시퍼라제 반응을 통한 발광 신호의 발생을 야기하는 동종 분석에 존재하는 ATP를 정량화시킴에 의한, 존재하는 생존 세포의 수의 측정에 기초한다. 발광 신호는 존재하는 ATP의 양에 비례한다.
B-세포 림프종 세포주의 패널(BJAB, SUDHL-4, TMD8, OCI-Ly10, OCI-Ly3, WSU-DLCL2)을 정상 성장 매질에서 384-웰 플레이트로 평판배양하고, 연속적으로 희석된 BTK 억제제 또는 DMSO를 단독으로 각각의 웰에 첨가한다. 세포 생존능을 96시간 동안 항온처리한 후 셀타이터-글로(등록상표)(프로메가)에 의해 평가한다. 데이터는 DMSO-처리된 대조군 세포에 대한 BTK 억제제-처리된 세포의 상대적인 세포 생존능으로서 제공될 수 있다. 데이터 포인트는 각각의 투여량 수준에서 4개의 복제물의 평균이다. 오차 막대는 평균으로부터의 SD를 나타낸다.
절차: 1일 - 세포 플레이트(384-웰 블랙, 투명 바닥, 마이크로클리어, 팔콘 번호 353962로부터의 뚜껑을 갖는 TC 플레이트)를 시딩하고, 세포를 수확하고, 3일 분석 동안 384 웰 세포 플레이트로의 웰 당 54 μL 당 1000 세포로 세포를 시딩한다. 세포 배지: RPMI 또는 DMEM 고 글루코스, 10% 소 태아 혈청, 2 mM L-글루타민, P/S. 37℃, 5% CO2에서 항온처리 O/N.
2일 - 세포로 약물을 가하고, 화합물을 희석하고(DMSO 플레이트(9개의 포인트에 대해 시리얼 1:2)), 96 웰 플레이트의 2차 컬럼 중 10 mM로 20 μL 화합물을 첨가한다. 프레시젼(Precision)을 사용하여 총 9개의 지점에 대해 플레이트를 통해 시리얼 1:2를 수행한다(10μL + 20μL 100% DMSO). 눈크(Nunc)(카탈로그 번호 249946)로부터의 매질 플레이트 96-웰 원뿔 바닥 폴리프로필렌 플레이트(1:50 희석). 147 μL의 매질을 모든 웰에 첨가한다. DMSO 플레이트 중 각각의 웰로부터의 3 μL의 DMSO + 화합물을 래피드플레이트(Rapidplate)를 사용하여 매질 플레이트 상의 각각의 상응하는 웰로 옮긴다.
세포로 약물을 가하고(세포 플레이트(1:10 희석)), 세포(이미 세포 상의 54 μL의 매질)로 6 μL의 매질 + 화합물을 직접적으로 가하고, 자주 개방되지 않을 인큐베이터 중에서 37℃, 5% CO2에서 항온처리한다.
5일 - 플레이트를 성장시키고, 셀타이터-글로 완충제를 실온에서 해빙한다. 37℃에서 세포 플레이트를 제거하고, 약 30분 동안 실온으로 평형화시킨다. 셀타이터-글로 완충제를 셀타이터-글로 기질에 첨가한다(병으로부터 병으로). 세포의 각각의 웰로 30 μL 셀타이터-글로 시약(프로메가 카탈로그 번호 G7572)을 첨가한다. 약 30분 동안 플레이트 진탕기 상에 위치시킨다. 애널리스트 HT 플레이트 리더 상에서 발광을 판독한다(웰 당 0.5초).
세포 생존능 분석 및 조합 분석: 세포를 384-웰 플레이트 중에 16시간 동안 1000 내지 2000 세포/웰로 시딩한다. 2일에, 9개의 시리얼 1:2 화합물 희석액을 96 웰 플레이트에서 DMSO 중에서 제조한다. 화합물을 래피드플레이트 로봇(자이마크 코포레이션(Zymark Corp.), 미국 매사추세츠주 홉킨톤 소재)을 사용하여 성장 매질 내로 더욱 희석시킨다. 이어서, 희석된 화합물을 384-웰 세포 플레이트 중 4개의 웰에 가하고, 37℃ 및 5% CO2에서 항온처리한다. 4일 후, 생존 세포의 상대적인 수를 제조사의 설명서에 따라 셀타이터-글로(프로메가)를 사용하는 발광에 의해 측정하고, 월락 멀티라벨 리더(Wallac Multilabel Reader)(퍼킨 엘머, 미국 포스터 시티 소재) 상에서 판독한다. EC50 값을 프리즘(등록상표) 4.0 소프트웨어(그래프패드(GraphPad), 미국 샌 디에고 소재)를 사용하여 계산한다. 화학식 I의 화합물 및 화학요법제를 모든 분석에서 동시에 또는 4시간씩 떨어져서(다른 것 전에 하나) 첨가한다.
추가의 예시적인 시험관 내 세포 증식 분석은 하기 단계를 포함한다:
1. 매질 내에 약 104개의 세포를 함유하는 100 mL의 분취액의 세포 배양균을 384-웰 불투명-벽 플레이트의 각각에 웰에 놓는다.
2. 매질을 함유하고 세포가 없는 대조군 웰을 준비한다.
3. 화합물을 실험 웰에 가하고, 3 내지 5일 동안 항온처리한다.
4. 플레이트를 약 30분 동안 실온으로 평형화시킨다.
5. 각각의 웰에 존재하는 세포 배지의 부피와 동등한 부피의 셀타이터-글로 시약을 첨가한다.
6. 내용물을 오비탈 진탕기 상에서 2분 동안 혼합하여 세포 용해를 유도한다.
7. 플레이트를 실온에서 10분 동안 항온처리하여 발광 신호를 안정화시킨다.
8. 발광을 기록하고, RLU(상대적인 발광 단위)로서 그래프로 보고한다.
상기 발명이 명료한 이해의 목적을 위해 설명 및 예에 의해 다소 상세히 기술되었지만, 명세서 및 실시예가 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 간주되어서는 안 된다. 따라서, 모든 적합한 변형물 및 등가물이 하기 특허청구범위에 의해 한정되는 본 발명의 범주에 속하는 것으로 간주될 수 있다. 본원에 인용된 모든 특허 및 과학 문헌의 개시내용 전체를 본원에 참고로서 명시적으로 인용한다.

Claims (29)

  1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 입체 이성질체, 호변 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 I]
    Figure pat00411

    X1은 CR1 또는 N이고;
    X2는 CR2 또는 N이고;
    X3는 CR3 또는 N이되;
    X1, X2 및 X3 중 1개 또는 2개는 N이고;
    R1, R2 및 R3는 독립적으로, H, F, Cl, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2OH 및 C1-C3 알킬로부터 선택되고;
    R4는 H, F, Cl, CN, -CH2OH, -CH(CH3)OH, -C(CH3)2OH, -CH(CF3)OH, -CH2F, -CHF2, -CH2CHF2, -CF3, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHC(O)CH3, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2OH, 사이클로프로필, 사이클로프로필메틸, 1-하이드록시사이클로프로필, 이미다졸일, 피라졸일, 3-하이드록시-옥세탄-3-일, 옥세탄-3-일 및 아제티딘-1-일로부터 선택되고;
    R5는, 임의적으로 치환된, C6-C20 아릴, C3-C12 카보사이클일, C2-C20 헤테로사이클일, C1-C20 헤테로아릴, -(C6-C20 아릴)-(C2-C20 헤테로사이클일), -(C1-C20 헤테로아릴)-(C2-C20 헤테로사이클일), -(C1-C20 헤테로아릴)-(C2-C20 헤테로사이클일)-(C2-C20 헤테로사이클일), -(C1-C20 헤테로아릴)-(C2-C20 헤테로사이클일)-(C1-C6 알킬), -(C1-C20 헤테로아릴)-(C1-C6 알킬), -(C2-C20 헤테로사이클일)-(C1-C6 알킬), -(C2-C20 헤테로사이클일)-(C3-C12 카보사이클일), -(C1-C20 헤테로아릴)-(C3-C12 카보사이클일) 또는 -(C1-C20 헤테로아릴)-C(=O)-(C2-C20 헤테로사이클일)이고;
    R6는 H, -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2OH, -CHF2, -NH2 또는 -OH이고;
    R7은 하기 구조식
    Figure pat00412

    으로부터 선택되되, 이때 물결형 라인은 부착 부위를 나타내고,
    Y1 및 Y2는 독립적으로, CH 및 N으로부터 선택되되, Y1 및 Y2가 각각 N은 아니고;
    상기 알킬, 카보사이클일, 헤테로사이클일, 아릴 및 헤테로아릴은, 독립적으로 F, Cl, Br, I, -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH(OH)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH2OH, -CH2CH2SO2CH3, -CH2OP(O)(OH)2, -CH2F, -CHF2, -CF3, -CH2CF3, -CH2CHF2, -CH(CH3)CN, -C(CH3)2CN, -CH2CN, -CO2H, -COCH3, -CO2CH3, -CO2C(CH3)3, -COCH(OH)CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -N(CH3)COCH3, -NHS(O)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3, -NO2, =O, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2OCH3, -OCH2CH2OH, -OCH2CH2N(CH3)2, -OP(O)(OH)2, -S(O)2N(CH3)2, -SCH3, -S(O)2CH3, -S(O)3H, 사이클로프로필, 옥세탄일, 아제티딘일, 1-메틸아제티딘-3-일)옥시, N-메틸-N-옥세탄-3-일아미노, 아제티딘-1-일메틸 및 모폴리노로부터 선택되는 하나 이상의 기로 임의적으로 치환된다.
  2. 제 1 항에 있어서,
    X1이 N인, 화합물.
  3. 제 1 항에 있어서,
    X2가 N인, 화합물.
  4. 제 1 항에 있어서,
    X3가 N인, 화합물.
  5. 제 1 항에 있어서,
    X1 및 X3가 N이거나,
    X1 및 X2가 N이거나,
    X2 및 X3가 N인, 화합물.
  6. 제 1 항에 있어서,
    R5가, 피라졸일, 피리딘일, 피리미딘일, 5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일, 5-아세틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일, 6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-c][1,4]옥사진-2-일 및 1-메틸-5-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일로부터 선택되는 임의적으로 치환된 C1-C20 헤테로아릴인, 화합물.
  7. 제 1 항에 있어서,
    R5가 -(C1-C20 헤테로아릴)-(C2-C20 헤테로사이클일)이되, 이때 헤테로아릴은 임의적으로 치환된 피리딘일이고, 헤테로사이클일은 임의적으로 치환된 피페라진일인, 화합물.
  8. 제 1 항에 있어서,
    R5가, F, Cl, -CH3, -S(O)2CH3, 사이클로프로필, 아제티딘일, 옥세탄일 및 모폴리노로부터 선택되는 하나 이상의 기로 임의적으로 치환된 페닐인, 화합물.
  9. 제 1 항에 있어서,
    R5가 하기 구조식으로부터 선택되되, 이때 물결형 라인은 부착 부위를 나타내는, 화합물:
    Figure pat00413

    Figure pat00414

    Figure pat00415
  10. 제 1 항에 있어서,
    R5가
    Figure pat00416
    이고,
    이때 R8은 H, -CH3, -CH2OCH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH2OH, -CH2CH2OCH3, -CH2F, -CHF2, -CF3, -CH2CF3, -CH2CHF2, -CH(CH3)CN, -C(CH3)2CN, -CH2CN, -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH(CH3)2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2OH, 사이클로프로필 및 옥세탄일로부터 선택되는, 화합물.
  11. 제 1 항에 있어서,
    R6가 CH3인, 화합물.
  12. 제 1 항에 있어서,
    Y1이 CH이고, Y2가 N인, 화합물.
  13. 제 1 항에 있어서,
    Y1이 N이고, Y2가 CH인, 화합물.
  14. 제 1 항에 있어서,
    Y1 및 Y2가 각각 CH인, 화합물.
  15. 제 1 항에 있어서,
    Y1 및 Y2가 각각 CH이고, R6가 CH3인, 화합물.
  16. 제 1 항에 있어서,
    본원 명세서의 표 1로부터 선택되는 화합물.
  17. 제 1 항에 있어서,
    본원 명세서의 표 2로부터 선택되는 화합물.
  18. 제 1 항 내지 제 17 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체, 활택제, 희석제 또는 부형제로 구성된 약학 조성물.
  19. 제 18 항에 있어서,
    치료제를 추가로 포함하는 약학 조성물.
  20. 제 1 항 내지 제 17 항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 약학적으로 허용가능한 담체와 배합하는 것을 포함하는, 약학 조성물의 제조 방법.
  21. 면역 장애, 암, 심혈관 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경계 장애로부터 선택되고 브루톤(Bruton) 타이로신 키나아제에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 갖는 환자에게, 제 18 항에 따른 약학 조성물을 치료 효과량 투여하는 것을 포함하는, 질환 또는 장애의 치료 방법.
  22. 제 21 항에 있어서,
    상기 질환 또는 장애가 면역 장애인, 방법.
  23. 제 22 항에 있어서,
    상기 면역 장애가 류마티스성 관절염인, 방법.
  24. 제 21 항에 있어서,
    상기 질환 또는 장애가 전신성 및 국부성 염증, 관절염, 면역 억제와 관련된 염증, 장기 이식 거부, 알레르기, 궤양성 대장염, 크론병, 피부염, 천식, 전신 홍반 루푸스, 쇼그렌 증후군, 다발성 경화증, 피부경화증/전신경화증, 특발성 혈소판 감소성 자반병 (ITP), 항-호중성 세포질 항체 (ANCA) 혈관염, 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD) 또는 건선인, 방법.
  25. 제 21 항에 있어서,
    상기 질환 또는 장애가, 유방암, 난소암, 자궁경부암, 전립샘암, 고환암, 비뇨생식관암, 식도암, 후두암, 아교모세포종, 신경모세포종, 위암, 피부암, 각질극세포종, 폐암, 표피모양 암종, 대세포 암종, 비-소세포 암종 (NSCLC), 소세포 암종, 폐 선암종, 골암, 대장암, 선종, 췌장암, 선암, 갑상선암, 소포 암종, 미분화 암종, 유두상 암종, 고환종, 흑색종, 육종, 방광 암종, 간 암종 및 담도암, 신장 암종, 췌장암, 골수 장애, 림프종, 모발 세포암, 구강암, 비인두암, 인두암, 입술 암, 설암, 구강암, 소장암, 결장-직장암, 대장암, 직장암, 뇌암 and 중추 신경계암, 호지킨병, 백혈병, 기관지암, 갑상선암, 간암, 간내 담관암, 간세포암, 위암, 신경아교종/아교모세포종, 자궁내막암, 흑색종, 신장암, 신우암, 방광암, 자궁 체부암, 자궁 경부암, 다발성 골수종, 급성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 림프구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 골수성 백혈병, 구강암, 인두암, 비-호지킨 림프종, 흑색종 및 융모 결장 선종으로부터 선택되는 암인, 방법.
  26. 제 21 항에 있어서,
    항-염증제, 면역조절제, 화학치료제, 세포자멸사 개선제, 신경성장 인자, 심혈관 질환 치료제, 간 질환 치료제, 항-바이러스제, 혈액 장애 치료제, 당뇨병 치료제 및 면역결핍 장애 치료제로부터 선택되는 추가의 치료제를 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
  27. 브루톤 타이로신 키나아제에 의해 매개되는 증상을 치료하기 위한 키트로서,
    (a) 제 18 항에 따른 약학 조성물; 및
    (b) 사용 설명서
    를 포함하는, 키트.
  28. 제 18 항에 있어서,
    면역 장애, 암, 심혈관 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경계 장애로부터 선택되고 브루톤 타이로신 키나아제에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는 약제로서 사용하기 위한, 약학 조성물.
  29. 면역 장애, 암, 심혈관 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경계 장애 치료용이며 브루톤 타이로신 키나아제를 매개하는 약제의 제조에서의 제 18 항에 따른 약학 조성물의 용도.
KR1020157036122A 2011-11-03 2012-11-02 Btk 활성의 억제제로서의 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 화합물 KR20160003328A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161555393P 2011-11-03 2011-11-03
US61/555,393 2011-11-03
PCT/US2012/063194 WO2013067274A1 (en) 2011-11-03 2012-11-02 Heteroaryl pyridone and aza-pyridone compounds as inhibitors of btk activity

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020147014661A Division KR101659193B1 (ko) 2011-11-03 2012-11-02 Btk 활성의 억제제로서의 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 화합물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20160003328A true KR20160003328A (ko) 2016-01-08

Family

ID=47146779

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020157036122A KR20160003328A (ko) 2011-11-03 2012-11-02 Btk 활성의 억제제로서의 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 화합물
KR1020147014661A KR101659193B1 (ko) 2011-11-03 2012-11-02 Btk 활성의 억제제로서의 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 화합물

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020147014661A KR101659193B1 (ko) 2011-11-03 2012-11-02 Btk 활성의 억제제로서의 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 화합물

Country Status (34)

Country Link
US (10) US8716274B2 (ko)
EP (5) EP4019508A1 (ko)
JP (5) JP5976827B2 (ko)
KR (2) KR20160003328A (ko)
CN (2) CN107011348B (ko)
AR (2) AR088641A1 (ko)
AU (5) AU2012332365B2 (ko)
CA (1) CA2853975C (ko)
CL (1) CL2014001103A1 (ko)
CO (1) CO6950472A2 (ko)
CR (1) CR20140194A (ko)
CY (1) CY1117097T1 (ko)
DK (2) DK3002284T3 (ko)
EA (1) EA023263B1 (ko)
ES (3) ES2555168T3 (ko)
HK (1) HK1201265A1 (ko)
HR (2) HRP20151442T1 (ko)
HU (2) HUE044959T2 (ko)
IL (1) IL232060A (ko)
IN (1) IN2014CN03250A (ko)
LT (1) LT3002284T (ko)
MA (1) MA35819B1 (ko)
MX (2) MX361807B (ko)
PE (1) PE20141586A1 (ko)
PL (3) PL3521288T3 (ko)
PT (2) PT2773638E (ko)
RS (2) RS54505B1 (ko)
SG (1) SG11201401992YA (ko)
SI (2) SI2773638T1 (ko)
TR (1) TR201909849T4 (ko)
TW (4) TWI609868B (ko)
UA (1) UA111756C2 (ko)
WO (1) WO2013067274A1 (ko)
ZA (1) ZA201804727B (ko)

Families Citing this family (58)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
UA111756C2 (uk) * 2011-11-03 2016-06-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Сполуки гетероарилпіридону та азапіридону як інгібітори тирозинкінази брутона
JP5976828B2 (ja) * 2011-11-03 2016-08-24 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｂｔｋ活性阻害剤としてのアルキル化ピペラジン化合物
KR101815360B1 (ko) * 2013-07-03 2018-01-04 에프. 호프만-라 로슈 아게 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 아마이드 화합물
JP2016535764A (ja) * 2013-10-04 2016-11-17 ビヨンド オンコロジー ファーマシューティカル エルエルシー ブルトンのチロシンキナーゼの阻害剤
EP3077384B1 (en) * 2013-12-05 2017-09-06 F. Hoffmann-La Roche AG Heteroaryl pyridone and aza-pyridone compounds with electrophilic functionality
CN106922146B (zh) 2014-10-02 2020-05-26 豪夫迈·罗氏有限公司 用于治疗由布鲁顿酪氨酸激酶(btk)介导的疾病的吡唑甲酰胺化合物
JP6368043B2 (ja) * 2014-10-27 2018-08-01 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 三環式ラクタム化合物の製造法
CN106188063A (zh) * 2015-05-08 2016-12-07 中国科学院上海药物研究所 用作Lp-PLA2抑制剂的双环类化合物、其制备方法及医药用途
UY36875A (es) 2015-09-02 2017-03-31 Glaxosmithkline Intellectual Property (No 2) Ltd Composiciones inhibidoras de bromodominios para el tratamiento de diversas enfermedades
WO2017070708A1 (en) 2015-10-23 2017-04-27 Array Biopharma, Inc. 2-aryl- and 2-heteroaryl-substituted 2-pyridazin-3(2h)-one compounds as inhibitors of fgfr tyrosine kinases
BR112018016842A2 (pt) * 2016-02-19 2018-12-26 Novartis Ag compostos de piridona tetracíclica como antivirais
EP4049660A1 (en) * 2016-02-29 2022-08-31 F. Hoffmann-La Roche AG Dosage form compositions comprising an inhibitor of bruton's tyrosine kinase
EP3448861B1 (en) 2016-04-28 2021-04-21 F. Hoffmann-La Roche AG A process for the preparation of 2-pyrazolo[1,5-a]pyrazin-2-ylpyrido[1,2-a]pyrimidin-4-one
CN108101905A (zh) * 2016-11-24 2018-06-01 中国科学院上海药物研究所 嘧啶并[5,4-b]吲嗪或嘧啶并[5,4-b]吡呤化合物、其制备方法及用途
JP2020511462A (ja) 2016-12-03 2020-04-16 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド キナーゼ阻害剤との組み合わせで治療用ｔ細胞を使用するための方法および組成物
WO2018111902A1 (en) 2016-12-12 2018-06-21 Multivir Inc. Methods and compositions comprising viral gene therapy and an immune checkpoint inhibitor for treatment and prevention of cancer and infectious diseases
TWI766176B (zh) * 2016-12-15 2022-06-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 製備btk抑制劑之方法
US11053238B2 (en) 2016-12-22 2021-07-06 Betta Pharmaceuticals Co., Ltd. Benzimidazole derivatives, preparation methods and uses thereof
TW201836642A (zh) 2017-03-24 2018-10-16 美商建南德克公司 治療自體免疫及發炎疾病的方法
CN107445981B (zh) * 2017-08-25 2018-06-22 牡丹江医学院 一种用于防治***的活性化合物
KR102613433B1 (ko) * 2017-10-11 2023-12-13 주식회사 대웅제약 신규한 페닐피리딘 유도체 및 이를 포함하는 약학 조성물
JP7100125B2 (ja) 2017-10-27 2022-07-12 フレゼニウス・カビ・オンコロジー・リミテッド リボシクリブおよびその塩の改善された調製のためのプロセス
US11100492B2 (en) * 2018-02-19 2021-08-24 Peter Garrett General purpose re-loadable card aggregation implementation
TWI801517B (zh) 2018-03-12 2023-05-11 加拿大商愛彼特生物製藥公司 經取代的2-吡啶酮三環化合物、其類似物及其使用方法
US20210113568A1 (en) 2018-04-27 2021-04-22 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. PREVENTIVE AND/OR THERAPEUTIC AGENT FOR AUTOIMMUNE DISEASE COMPRISING COMPOUND HAVING Btk INHIBITORY ACTIVITY AS ACTIVE INGREDIENT
CR20210045A (es) 2018-07-25 2021-06-18 Novartis Ag Inhibidores de inflamasoma nlrp3
KR102328682B1 (ko) * 2018-08-27 2021-11-18 주식회사 대웅제약 신규한 헤테로사이클릭아민 유도체 및 이를 포함하는 약학 조성물
US20220362357A1 (en) 2018-08-31 2022-11-17 Stichting Radboud Universitair Medisch Centrum Synergistic Combinations of Amino Acid Depletion Agent Sensitizers (AADAS) and Amino Acid Depletion Agents (AADA), and Therapeutic Methods of Use Thereof
EP3867242A1 (en) 2018-10-15 2021-08-25 Nurix Therapeutics, Inc. Bifunctional compounds for degrading btk via ubiquitin proteosome pathway
TW202033523A (zh) * 2019-01-17 2020-09-16 美商愛彼特生物製藥股份有限公司 經取代的多環羧酸、其類似物及使用其之方法
CN113423401A (zh) 2019-01-22 2021-09-21 豪夫迈·罗氏有限公司 使用布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂来治疗类风湿性关节炎、慢性自发性荨麻疹和***性红斑狼疮的方法
CN113939292A (zh) * 2019-02-25 2022-01-14 广州麓鹏制药有限公司 Btk及其突变体的抑制剂
AU2020242287A1 (en) 2019-03-21 2021-09-02 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) A Dbait molecule in combination with kinase inhibitor for the treatment of cancer
WO2020210508A1 (en) 2019-04-09 2020-10-15 Nurix Therapeutics, Inc. 3-substituted piperidine compounds for cbl-b inhibition, and use of a cbl-b inhibitor in combination with a cancer vaccine and/or oncolytic virus
EP3969447A1 (en) 2019-05-17 2022-03-23 Nurix Therapeutics, Inc. Cyano cyclobutyl compounds for cbl-b inhibition and uses thereof
AR119731A1 (es) 2019-05-17 2022-01-05 Novartis Ag Inhibidores del inflamasoma nlrp3
US20220363689A1 (en) 2019-10-05 2022-11-17 Newave Pharmaceutical Inc. Inhibitor of btk and mutants thereof
WO2021089791A1 (en) 2019-11-08 2021-05-14 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the treatment of cancers that have acquired resistance to kinase inhibitors
EP4055019A1 (en) * 2019-11-08 2022-09-14 Nurix Therapeutics, Inc. Bifunctional compounds for degrading btk via ubiquitin proteosome pathway
US11820781B2 (en) 2019-12-04 2023-11-21 Nurix Therapeutics, Inc. Bifunctional compounds for degrading BTK via ubiquitin proteosome pathway
WO2021148581A1 (en) 2020-01-22 2021-07-29 Onxeo Novel dbait molecule and its use
EP4107154A4 (en) 2020-02-20 2024-02-28 Hutchison Medipharma Ltd HETEROARYL HETEROCYCLIC COMPOUNDS AND THEIR USES
MX2022010513A (es) 2020-02-28 2022-09-21 Genentech Inc Metodos para tratar esclerosis multiple progresiva primaria usando un inhibidor de tirosina quinasa de bruton.
KR20220163986A (ko) 2020-04-03 2022-12-12 제넨테크, 인크. 브루톤 티로신 키나아제의 억제제를 이용한 재발성 다발성 경화증의 치료 방법
CN115715291A (zh) * 2020-06-18 2023-02-24 上海华汇拓医药科技有限公司 布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法
US20230295109A1 (en) * 2020-08-04 2023-09-21 Hoffmann-La Roche Inc. Pyridinone compounds for the treatment of autoimmune disease
WO2022036171A1 (en) * 2020-08-14 2022-02-17 Newave Pharmaceutical Inc. Dosage form compositions comprising an inhibitor of btk and mutants thereof
BR112023002031A2 (pt) 2020-08-14 2023-03-07 Novartis Ag Derivados de espiropiperidinila substituídos por heteroarila e usos farmacêuticos dos mesmos
IL301275A (en) * 2020-09-21 2023-05-01 Hutchison Medipharma Ltd Heterocyclic heteroaryl compounds and their uses
US20230382900A1 (en) 2020-10-30 2023-11-30 Newave Pharmaceutical Inc. Inhibitors of btk
US20240058457A1 (en) 2020-12-20 2024-02-22 Newave Pharmaceutical Inc. Btk degrader
WO2022212893A1 (en) 2021-04-02 2022-10-06 Biogen Ma Inc. Combination treatment methods of multiple sclerosis
KR20240004918A (ko) 2021-05-05 2024-01-11 에프. 호프만-라 로슈 아게 Btk 억제제 제조 공정
CN113603685A (zh) * 2021-07-23 2021-11-05 都创(上海)医药开发有限公司 Fenebrutinib化合物的晶型及其制备方法和用途
WO2023110970A1 (en) 2021-12-14 2023-06-22 Netherlands Translational Research Center Holding B.V Macrocyclic btk inhibitors
WO2023137225A1 (en) * 2022-01-17 2023-07-20 Newave Pharmaceutical Inc. Btk degrader
WO2023143491A1 (zh) * 2022-01-28 2023-08-03 和记黄埔医药（上海）有限公司 7,8-二氢-2h-环戊二烯并吡咯并吡嗪酮化合物的合成方法
US20240067627A1 (en) 2022-08-03 2024-02-29 Novartis Ag Nlrp3 inflammasome inhibitors

Family Cites Families (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US5583024A (en) 1985-12-02 1996-12-10 The Regents Of The University Of California Recombinant expression of Coleoptera luciferase
US5543523A (en) 1994-11-15 1996-08-06 Regents Of The University Of Minnesota Method and intermediates for the synthesis of korupensamines
JPH08336393A (ja) 1995-04-13 1996-12-24 Mitsubishi Chem Corp 光学活性なγ−置換−β−ヒドロキシ酪酸エステルの製造法
US6602677B1 (en) 1997-09-19 2003-08-05 Promega Corporation Thermostable luciferases and methods of production
CA2453113A1 (en) 2001-07-12 2003-01-23 Avecia Limited Microencapsulated catalyst, methods of preparation and methods of use thereof
WO2005014599A1 (en) 2003-06-04 2005-02-17 Cellular Genomics, Inc. Imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines and method of inhibition of bruton’s tyrosine kinase by such compounds
WO2005005429A1 (en) 2003-06-30 2005-01-20 Cellular Genomics, Inc. Certain heterocyclic substituted imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines and methods of inhibition of bruton’s tyrosine kinase by such compounds
WO2006017295A2 (en) 2004-07-12 2006-02-16 Idun Pharmaceuticals, Inc. Tetrapeptide analogs
CA2587192A1 (en) 2004-11-10 2006-05-18 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Imidazo[1 , 2-a] pyrazin-8-ylamines useful as modulators of kinase activity
KR101357524B1 (ko) 2005-03-10 2014-02-03 질레드 코네티컷 인코포레이티드 특정 치환된 아미드, 그의 제조 방법, 및 사용 방법
AU2006302415B2 (en) 2005-10-07 2012-09-13 Exelixis, Inc. Azetidines as MEK inhibitors for the treatment of proliferative diseases
AR063946A1 (es) 2006-09-11 2009-03-04 Cgi Pharmaceuticals Inc Determinadas pirimidinas sustituidas, el uso de las mismas para el tratamiento de enfermedades mediadas por la inhibicion de la actividad de btk y composiciones farmaceuticas que las comprenden.
PE20080839A1 (es) 2006-09-11 2008-08-23 Cgi Pharmaceuticals Inc Determinadas amidas sustituidas, metodo de elaboracion y metodo de uso de las mismas
US7838523B2 (en) 2006-09-11 2010-11-23 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain substituted amides, method of making, and method of use thereof
KR101315610B1 (ko) * 2006-09-22 2013-10-10 파마시클릭스, 인코포레이티드 브루톤 티로신 키나제 억제제
CL2008002793A1 (es) * 2007-09-20 2009-09-04 Cgi Pharmaceuticals Inc Compuestos derivados de amidas sustituidas, inhibidores de la actividad de btk; composicion farmaceutica que los comprende; utiles en el tratamiento del cancer, trastornos oseos, enfermedades autoinmunes, entre otras
EP2205564B1 (en) * 2007-10-23 2014-07-30 F. Hoffmann-La Roche AG Novel kinase inhibitors
US8426441B2 (en) 2007-12-14 2013-04-23 Roche Palo Alto Llc Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
SI2242749T1 (sl) * 2008-02-05 2013-07-31 F.Hoffmann-La Roche Ag Novi piridinoni in piridazinoni
US7683064B2 (en) 2008-02-05 2010-03-23 Roche Palo Alto Llc Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
AU2009244291B2 (en) 2008-05-06 2014-02-13 Genentech, Inc. Substituted amides, method of making, and use as Btk inhibitors
EP2297142B1 (en) * 2008-06-24 2015-10-14 F. Hoffmann-La Roche AG Novel substituted pyridin-2-ones and pyridazin-3-ones
RU2507202C2 (ru) 2008-07-02 2014-02-20 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Новые фенилпиразиноны в качестве ингибиторов киназы
CA2636807A1 (en) 2008-07-04 2010-01-04 Steven Splinter Methods for obtaining cyclopamine
JP5318952B2 (ja) 2008-07-15 2013-10-16 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 新規なフェニル−イミダゾピリジン類及びピリダジン類
US8598174B2 (en) 2008-11-12 2013-12-03 Genetech, Inc. Pyridazinones, method of making, and method of use thereof
US8299077B2 (en) * 2009-03-02 2012-10-30 Roche Palo Alto Llc Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
SG175287A1 (en) * 2009-04-24 2011-11-28 Hoffmann La Roche Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
WO2010126960A1 (en) * 2009-04-29 2010-11-04 Locus Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolotriazine compounds
DK2473049T3 (en) * 2009-09-04 2019-04-01 Biogen Ma Inc INHIBITORS OF BRUTON'S TYROSINKINASE
CA3034600C (en) * 2010-05-07 2020-11-10 Genentech, Inc. Pyridone and aza-pyridone compounds and methods of use
AR082590A1 (es) 2010-08-12 2012-12-19 Hoffmann La Roche Inhibidores de la tirosina-quinasa de bruton
US9249123B2 (en) 2010-09-01 2016-02-02 Genentech, Inc. Pyridinones/pyrazinones, method of making, and method of use thereof
JP5842004B2 (ja) 2010-09-01 2016-01-13 ジーアイリード コネチカット インコーポレーテッドＧｉｌｅａｄ Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ，Ｉｎｃ． ピリダジノン、その製造方法及びその使用方法
KR101585753B1 (ko) 2011-05-17 2016-01-14 에프. 호프만-라 로슈 아게 브루톤 티로신 키나아제의 억제제
PE20140865A1 (es) 2011-08-17 2014-07-19 Hoffmann La Roche Inhibidores de la tirosina-quinasa de bruton
US8669251B2 (en) * 2011-11-03 2014-03-11 Genentech, Inc. 8-fluorophthalazin-1(2H)-one compounds
JP5976828B2 (ja) 2011-11-03 2016-08-24 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｂｔｋ活性阻害剤としてのアルキル化ピペラジン化合物
UA111756C2 (uk) * 2011-11-03 2016-06-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Сполуки гетероарилпіридону та азапіридону як інгібітори тирозинкінази брутона
KR101815360B1 (ko) * 2013-07-03 2018-01-04 에프. 호프만-라 로슈 아게 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 아마이드 화합물
EP3077384B1 (en) * 2013-12-05 2017-09-06 F. Hoffmann-La Roche AG Heteroaryl pyridone and aza-pyridone compounds with electrophilic functionality
EP4049660A1 (en) * 2016-02-29 2022-08-31 F. Hoffmann-La Roche AG Dosage form compositions comprising an inhibitor of bruton's tyrosine kinase

Also Published As

Publication number Publication date
JP2020183397A (ja) 2020-11-12
JP2014532762A (ja) 2014-12-08
HRP20191307T1 (hr) 2019-10-18
CR20140194A (es) 2014-06-03
AU2019216728A1 (en) 2019-09-05
AU2018201557B2 (en) 2019-09-19
CA2853975C (en) 2020-02-25
TWI701250B (zh) 2020-08-11
AR088641A1 (es) 2014-06-25
EP2773638B1 (en) 2015-10-07
DK2773638T3 (en) 2015-10-19
PT3002284T (pt) 2019-07-17
EP3002284A1 (en) 2016-04-06
PL3002284T3 (pl) 2019-11-29
CN107011348A (zh) 2017-08-04
IL232060A (en) 2016-02-29
US20160228432A1 (en) 2016-08-11
CL2014001103A1 (es) 2014-10-03
KR101659193B1 (ko) 2016-09-22
SI2773638T1 (sl) 2015-12-31
JP2016028046A (ja) 2016-02-25
TW201906845A (zh) 2019-02-16
CN104125959B (zh) 2017-05-03
AU2012332365A1 (en) 2014-05-01
MA35819B1 (fr) 2014-12-01
ZA201804727B (en) 2023-03-29
NZ624021A (en) 2016-09-30
PL2773638T3 (pl) 2016-03-31
DK3002284T3 (da) 2019-07-29
HRP20151442T1 (hr) 2016-01-29
AR117501A2 (es) 2021-08-11
TW202124384A (zh) 2021-07-01
WO2013067274A1 (en) 2013-05-10
RS54505B1 (en) 2016-06-30
TWI652270B (zh) 2019-03-01
US20190194203A1 (en) 2019-06-27
AU2020202707B2 (en) 2021-09-02
CN104125959A (zh) 2014-10-29
EP2773638A1 (en) 2014-09-10
EA201490858A1 (ru) 2014-08-29
ES2898938T3 (es) 2022-03-09
ES2738329T3 (es) 2020-01-22
JP2019108342A (ja) 2019-07-04
US20230279012A1 (en) 2023-09-07
PL3521288T3 (pl) 2021-12-27
EP4050012A1 (en) 2022-08-31
RS59016B1 (sr) 2019-08-30
US9782405B2 (en) 2017-10-10
US20210079002A1 (en) 2021-03-18
PT2773638E (pt) 2016-01-12
AU2016273930A1 (en) 2017-01-12
MX361807B (es) 2018-12-17
HK1201265A1 (en) 2015-08-28
LT3002284T (lt) 2019-08-12
JP5976827B2 (ja) 2016-08-24
US9238655B2 (en) 2016-01-19
KR20140096097A (ko) 2014-08-04
TW201326175A (zh) 2013-07-01
US20180071286A1 (en) 2018-03-15
IL232060A0 (en) 2014-05-28
IN2014CN03250A (ko) 2015-07-03
EP3002284B1 (en) 2019-05-22
USRE48239E1 (en) 2020-10-06
US20130116235A1 (en) 2013-05-09
AU2020202707A1 (en) 2020-05-14
US10045983B2 (en) 2018-08-14
US20140194408A1 (en) 2014-07-10
US8716274B2 (en) 2014-05-06
SG11201401992YA (en) 2014-05-29
PE20141586A1 (es) 2014-10-25
CA2853975A1 (en) 2013-05-10
BR112014010459A2 (pt) 2017-04-18
EA023263B1 (ru) 2016-05-31
HUE028019T2 (en) 2016-11-28
UA111756C2 (uk) 2016-06-10
SI3002284T1 (sl) 2019-08-30
US20200062769A1 (en) 2020-02-27
MX2014005331A (es) 2014-05-28
CY1117097T1 (el) 2017-04-05
JP6571215B2 (ja) 2019-09-04
AU2012332365B2 (en) 2016-09-15
ES2555168T3 (es) 2015-12-29
JP2018080193A (ja) 2018-05-24
EP3521288A1 (en) 2019-08-07
EP3521288B1 (en) 2021-09-08
HUE044959T2 (hu) 2019-12-30
US20140378432A1 (en) 2014-12-25
AU2019216728B2 (en) 2020-04-09
TR201909849T4 (tr) 2019-07-22
EP4019508A1 (en) 2022-06-29
CO6950472A2 (es) 2014-05-20
AU2016273930B2 (en) 2018-03-08
TWI609868B (zh) 2018-01-01
AU2018201557A1 (en) 2018-03-22
CN107011348B (zh) 2020-01-10
TW201741315A (zh) 2017-12-01
US8921353B2 (en) 2014-12-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101659193B1 (ko) Btk 활성의 억제제로서의 헤테로아릴 피리돈 및 아자-피리돈 화합물
BR122020017743B1 (pt) Processo para fabricação de uma composição farmacêutica e uso de uma composição farmacêutica
BR112014010459B1 (pt) Compostos e composição farmacêutica
NZ624021B2 (en) Heteroaryl pyridone and aza-pyridone compounds as inhibitors of btk activity

Legal Events

Date Code Title Description
A107 Divisional application of patent
WITN Application deemed withdrawn, e.g. because no request for examination was filed or no examination fee was paid