KR20130099178A

KR20130099178A - 신규한 안지오텐신 타입 2 (ａｔ２) 수용기 작용물질 및 이의 용도

Info

Publication number: KR20130099178A
Application number: KR1020137015946A
Authority: KR
Inventors: 라우워 드 브리스; 시거 아드리안 넬레만스; 릭 린크; 안토니우스 야코버스 마리너스 록스; 헬트 니콜라스 몰
Original assignee: 랜시오펩 비.브이.
Priority date: 2010-11-23
Filing date: 2011-11-22
Publication date: 2013-09-05
Also published as: NZ610732A; DK2643342T3; KR101512916B1; ES2632553T3; AU2011332397A1; CN103314006B; WO2012070936A1; RS56130B1; US20140094400A1; JP2016074675A; US9707268B2; EP2643342B1; PL2643342T3; HUE035167T2; EP2455388A1; LT2643342T; PT2643342T; AU2011332397B2; SI2643342T1; US9290540B2

Abstract

본 발명은 신규한 약제학적으로-유용한 펩티드, 특히 AngⅡ 타입 2 수용기(AT2 수용기)의 작용물질인 고리형 펩티드에 관한 것이다. 본 발명은 또한 약제로서의 이러한 펩티드들의 용도, 이들을 포함하는 약제학적 조성물, 및 이의 생산에 관한 것이다.

Description

신규한 안지오텐신 타입 2 (ＡＴ２) 수용기 작용물질 및 이의 용도{NOVEL ANGIOTENSIN TYPE 2 (AT2) RECEPTOR AGONISTS AND USES THEREOF}

본 발명은 신규한 약제학적으로-유용한 펩티드, 특히 안지오텐신 II 타입 2 수용기(이하 AT2 수용기)의 작용물질인 고리형 펩티드(cyclic peptides)에 관한 것이다. 본 발명은 추가적으로, 약제로서 이러한 펩티드들의 용도, 이들을 포함하는 약제학적 조성물, 및 이의 생산을 위한 합성적 경로에 관한 것이다.

내생적 호르몬(endogenous hormone) AngⅡ는 선형 옥타펩티드(octapeptide; Asp1-Arg2-Val3-Tyr4-Ile5-His6-Pro7-Phe8)이며, 레닌-안지오텐신 시스템(renin-angiotensin system; RAS)의 활성 구성요소이다. 이는 레닌 및 안지오텐신 변형 효소(angiotensin converting enzyme; ACE)에 의한 프로-호르몬 안지오텐시노겐(pro-hormone angiotensinogen)의 순차적 과정에 의해 생성된다. 상기 RAS는 혈압, 체액 및 전해질 항상성의 조절에서 중요한 역할을 수행한다. AngⅡ는 신장, 부신, 심장, 혈관, 뇌, 위장관 및 생식기를 포함하는 많은 기관들 내에서 이러한 생리학적 활성을 발휘한다(de Gasparo et al, Pharmacol. Rev. (2000) 52, 415-472). AngⅡ 수용기의 두 가지 주요한 부류가 확인되었으며, 타입 1 수용기(이하 AT1 수용기)와 AT2 수용기로 지명되었다. 상기 AT1 수용기는 대부분의 기관 내에서 발현되고, AngⅡ의 생물학적 효과들의 대다수에서 책임을 진다고 여겨진다. 태아조직, 성인 난소, 부신 수질 및 췌장 내에서 상기 AT2 수용기는 AT1 수용기보다 더 만연하다. 뇌 및 자궁 내에서는 동등한 분포가 보고되었다(Ardaillou, J. Am. Soc. Nephrol., 10, S30-39 (1999)). 성인 개인들 내의 몇 가지 연구들은, AngⅡ 자극에 이어지는 반응의 조정에 있어서, AT2 수용기의 활성이, AT1 수용기에 의해 매개되는 것들에 반대적인 효과를 갖는다는 점을 분명히 하는 것으로 보인다.

상기 AT2 수용기는 세포 증식의 억제 및 세포사멸에 관여된 것으로 또한 나타났다(de Gasparo et al, supra를 참고하라). 게다가, 이는 혈압 제어(control) 역할을 수행하는 것으로 보인다. 심장혈관 질환에서 AT2 수용기의 기능적 관련성은 Jones et al.에서 논의되었다(Pharmacology& Therapeutics 120 (2008) 292-316). AT2 수용기의 발현은 혈관 손상, 상처 치유 및 심장 마비와 같은, 병리학적 상황 동안에 증가하는 것으로 또한 나타내었다(de Gasparo et al, supra를 참고하라).

AT2 수용기의 작용물질(agonism)의 기대되는 약제학적 효과들은 de Gasparo et al, supra에 일반적으로 서술되어있다. AT2 수용기 작용물질들은, 여러 장기 장애뿐만 아니라 소화불량 및 과민성 대장 증후군과 같은, 소화 기관의 장애의 예방 및/또는 치료에서 잠재적으로 유용한 것으로 나타내었다(WO 99/43339 를 참고하라).

(AT1 및/또는 AT2 수용기에 결합하는) AngⅡ 길항물질들(antagonists)은 그 중에서도 유럽 특허 출원 EP 409 332, EP 512 675; 국제 특허 출원 WO 94/27597, WO 94/02142, WO 95/23792 및 WO 94/03435; 및 미국 특허 번호 5,091,390, 5,177,074, 5,412,097, 5,250,521, 5,260,285, 5,376,666, 5,252,574, 5,312,820, 5,330,987, 5,166,206, 5,932,575 및 5,240,928에 개시되어 왔다. US 2009/326026 는 AT2 작용물질로서 트리시클릭(tricyclic), 이미다졸-함유 화합물의 용도를 개시한다. WO 2004046128은 AT2 수용기의 선택적인 작용물질로서 유용한 비시클릭(bicyclic) 화합물에 관한 것이다.

본원에 기술된 것들과 구조적으로 관련 없는, 펩티드 및 비-펩티드 AT2 수용기 작용물질 및 이의 잠재적인 용도들은, 예를 들어, 국제 특허 출원 WO 00/38676, WO 00/56345, WO 00/09144, WO 99/58140, WO 99/52540, WO 99/46285, WO 99/45945, WO 99/42122, WO 99/40107, WO 99/40106, WO 99/39743, WO 99/26644, WO 98/33813, WO 00/02905 및 WO 99/46285; US 5,834,432; 및 일본 특허 출원 JP 143695 에 개시되어 왔다.

치료를 위한 중요한 새로운 표적으로서 AT2 수용기의 최근 인식의 관점에서, 예를 들어, 고혈압 환자의 전반적인 관리(care)에서, 본 발명자들은 더 효과적이고 및/또는 선택적인 AT2 수용기 작용물질 확인에 착수하였으며, 이는 그 중에서도 상기-언급된 상태들(conditions)에서 유용성을 발견할 것이 기대된다. N-말단(N-terminus)에서 추가적인 아미노산으로 연장된 Ang(1-7)의 티오에테르-고리화된(cyclized) 펩티드 유사물들(analogs)이 AT2 수용기의 강력한 작용물질이라는 것이 놀랍게도 발견되었다.

따라서, 아미노산 Xaa⁵ 및 Xaa⁸이 함께 하기의 일반 화학식 중 어느 하나에 따른 구조를 형성하도록 Xaa⁵ 및 Xaa⁸의 곁사슬 사이에 티오에테르-브릿지 결합을 포함하는 아미노산 서열 Xaa¹- Asp- Arg- Ile/Val- Xaa⁵- Ile/Val- His- Xaa⁸로 이루어진 고리형 펩티드 화합물 또는 이의 약제학적으로 수용가능한 염이 제공된다:

이 식에서, R, R¹, R², R³, R⁴ 및 R⁵는 -H, 저급(예를 들어 C₁-C₁₀)알킬 또는 아랄킬 기로부터 독립적으로 선택된 것이고, 및

이 식에서, Xaa¹은, 대전된 아미노산(charged amino acids), 방향족 아미노산 및 소수성 아미노산, 및 이의 프로테아제-저항 변이체들로 이루어진 군으로부터 선택된 것이다.

펩티드 화합물 및 염들은 함께 "본 발명의 화합물"로 이하에서 언급된다.

약제학적으로-수용가능한 염들은 산 첨가 염들 및 염기 첨가 염들을 포함한다. 상기 염들의 예들은 무기산들, 예를 들어, 염화수소 산, 브롬화수소 산, 황산, 인산, 질산 등과 함께 형성된 산 첨가 염들이다. 염들은 또한, 예를 들어, 아세트산, 옥살산, 타르타르산, 숙신산, 말레산, 푸마르산, 글루콘산, 시트르산, 말산, 아스코르브산, 벤조산, 타닌산, 팜산, 알긴산, 폴리글루탐산 등과 같은 유기산과 함께 형성된다. 염들은, 아연, 칼슘, 비스무트, 바륨, 마그네슘, 알루미늄, 구리, 코발트, 니켈 등과 같은 다가의(polyvalent) 금속 양이온 또는 N,N'-디벤질에틸렌디아민 또는 에틸렌디아민과 같은 유기 양이온, 또는 이의 조합(예를 들어, 아연 타닌산 염)과 함께 형성될 수 있다. 비-독성의, 생리학적으로 수용가능한 염들이 바람직하다. 상기 염들은, 예를 들어, 임의적으로 염이 용해되지 않는 배지에서 또는 용매에서의 적합한 산 또는 염기의 하나 또는 그 이상의 등가물과 프리 산(free acid) 또는 프리 염기 형태의 본 발명의 화합물의 반응에 의한, 종래의 수단들에 의해 형성될 수 있으며, 그리고 난 다음에 표준 기술(예를 들어 진공 내에서 또는 냉동-건조에 의한)들을 사용하여, 상기 용매, 또는 상기 배지가 제거될 수 있다. 염들은 또한, 예를 들어 적절한 이온 교환 수지를 사용하여, 또 다른 반대-이온과 염의 형태로 본 발명의 화합물의 반대-이온을 교환함으로써 제조될 수 있다. 바람직하게는, R, R¹, R², R³, R⁴ 및 R⁵ 는 H 및 CH₃로부터 독립적으로 선택된다.

AT2 수용기 상호작용이 상기 화학식에서 위치 5 및 8에 아미노산들과 결합하는(linking) 란티오닌 고리(lanthionine ring)의 존재를 요구한다는 것이 발견되었다. 게다가, 상기 N-말단(N-terminal) 연장은, 두 번째 추가적인 잔기의 추가가 AT2 수용기 상호작용을 없앴기(abolished) 때문에, 단일 아미노산 잔기로 제한되어야 한다.

하나의 실시형태에서, 본 발명은 화학식 A에 따른 티오-에테르 브릿지(thio-ether bridge)를 포함하는, 즉 이 식에서 위치 5 및 8 에서 아미노산 사이의 결합은 -RCR¹-S-R²CR³- 의미(meaning)를 가지는 펩티드를 제공하고, 이 식에서 R, R¹, R² 및 R³은 -H, 저급(예를 들어 C₁-C₁₀) 알킬 또는 아랄킬 기로부터 독립적으로 선택된다. R, R¹, R² 및 R³ 는 바람직하게는 H 및 CH₃로부터 독립적으로 선택된다. 화학식 A에 따른 티오-에테르 브릿지를 포함하는 펩티드는 예를 들어 란티바이오틱 효소(lantibiotic enzymes)에 의해, 또는 이황화물의 황 배출(sulfur extrusion)에 의해 제조될 수 있다. 상기 황이 배출된 이황화물은 위치 5에서 D-시스테인 및 위치 8에서 L-시스테인에 의하여 또는 위치 5에서 하나의 D-시스테인 및 위치 8 에서 L-페니실아민에 의하여 형성될 수 있다(Galande, Trent and Spatola 2003 Biopolymers 71, 534-551).

대체적으로(alternatively), 상기 두 아미노산의 결합은 RCR¹-R²CR³-S-R⁴CR⁵ (화학식 B) 또는 RCR¹-S-R⁴CR⁵-R²CR³(화학식 C)으로 구성될 수 있으며, 이 식에서, R, R¹, R², R³, R⁴ 및 R⁵는, -H, 저급(예를 들어 C₁-C₁₀) 알킬 또는 아랄킬 기를 독립적으로 나타낸다. 화학식 B에 따른 티오-에테르 브릿지를 포함하는 펩티드는, 예를 들어 위치 5에서 D-호모시스테인 및 위치 8에서 L-시스테인에 의해 형성된 이황화물의 황 배출에 의하여 제조될 수 있다(Galande, Trent and Spatola 2003 Biopolymers 71, 534-551). 게다가, 화학식 C에 따른 티오-에테르 브릿지를 포함하는 펩티드는, 예를 들어 위치 5 에서 D-시스테인 및 위치 8 에서 L-호모시스테인에 의해 형성된 이황화물의 황 배출에 의하여 제조될 수 있다(Galande, Trent and Spatola 2003 Biopolymers 71, 534-551).

본 발명의 펩티드 유사물은 생물학적 시스템 내에서, 특히 (미생물의) 숙주 세포의 란티바이오틱 효소 시스템을 이용하여, 제조될 수 있다는 점이 편리하다. 따라서, 화학식A에 따른 티오에테르-브릿지를 포함하는 펩티드가 바람직하다.

하나의 측면에서, Xaa¹은 양전하적으로 대전된 아미노산, 바람직하게 Lys 또는 Arg 또는 이의 펩티다아제-저항 변이체 또는 유도체이다. 또 다른 측면에서, Xaa¹은 음전하적으로 대전된 아미노산, 바람직하게 Asp 또는 Glu 또는 이의 펩티다아제-저항 변이체 또는 유도체이다. 대체적으로 Xaa¹은 소수성 아미노산, 바람직하게 Ile, Leu 또는 Val 또는 방향족 아미노산, 바람직하게 Tyr 또는 Phe, 또는 이의 펩티다아제-저항 변이체 또는 유도체이다. 펩티다아제-저항 변이체들 및 유도체들은 아미노 펩티다아제(들)에 의한 분해에 대하여 상기 유사물(analog)을 보호할 수 있다. 하나의 실시형태에서, Xaa¹은 펩티다아제-저항 아미노산 변이체 또는 유도체, 예를 들어 D-배열(configuration)에서 상기 언급된 아미노산 중 하나이다. 다른 적합한 유도체들은, 내부에 프리 아미노기가 고리 구조를 형성하도록 고리화된, 피로글루타메이트(pyroglutamate; pGlu)와 같은 것들을 포함하며, 여기에서 상기 말단(terminus)은 란탐고리이다.

위치 2, 3, 4, 6 및 7에서 잔기들은 생물학적인 활성이 유지되는 기간만큼 다양해질 수 있다. 바람직한 실시형태에서, Xaa2는 Asp이고, Xaa3는 Arg이고, Xaa4는 Val이고, Xaa6는 Ile이고, 및/또는 Xaa7은 His이다. 티오에테르 브릿지 내에 포함된 잔기의 입체화학은 L- 또는 D- 형태가 될 수 있다. Xaa5가 D-입체이성질체이거나 및/또는 Xaa8이 L-입체이성질체인 고리형 펩티드들이 바람직하다. 가장 바람직한 것은 Xaa⁵가 D-입체이성질체이고, Xaa⁸이 L-입체이성질체인 유사물이다.

안지오텐신-(1-7)의 티오에테르-고리화된 유사물은 본 분야에 알려져 있다. 예를 들어 Kluskens et al. (J Pharmacol Exp Ther. 2009 Mar; 328(3):849-54) 및 WO2008/130217 를 참고하라. 1 내지 3 아미노산의 N-말단의 연장 없이 또는 연장과 함께 선형 안지오텐신 유사물은 K. Rodgers et al., 예를 들어 WO 99/40106, WO 99/52540 및 WO 96/39164 에 기재되어 있다. 그러나, 대전된 아미노산, 방향족 아미노산 및 소수성 아미노산으로부터 선택되는 단일 잔기와 함께 N-말단의 연장을 갖는 cAng(1-7) 유사물은 본 분야에 암시되거나 제시된 적이 없다.

본 발명의 구체적인 실시형태들에 따르면, 상기 고리형 펩티드 화합물은, 상기 펩티드가 두 개의 Abu(2-아미노부틸산) 잔기를 함유하지 않다는 조건 하에서 하기로 이루어진 군에서 선택된다;

Lys-Asp-Arg-Val-Abu/Ala-Ile-His-Abu/Ala ("K-cAng(1-7)"로 약칭됨)

Asp-Asp-Arg-Val-Abu/Ala-Ile-His-Abu/Ala ("D-cAng(1-7)"로 약칭됨)

Tyr-Asp-Arg-Val-Abu/Ala-Ile-His-Abu/Ala ("Y-cAng(1-7)"로 약칭됨)

Ile-Asp-Arg-Val-Abu/Ala-Ile-His-Abu/Ala ("I-cAng(1-7)"로 약칭됨)

Asn-Asp-Arg-Val-Abu/Ala-Ile-His-Abu/Ala ("N-cAng(1-7)"로 약칭됨). 유력한 혈관확장(vasodilating) 펩티드로서 그들의 효능의 관점에서, 화합물 K-cAng(1-7) 및 Y-cAng(1-7)은 특히 바람직하다.

본 발명의 화합물들은 약제학적 활성을 갖기 때문에 유용하다. 그러므로 본 발명의 화합물들은 제약(pharmaceuticals)으로서 지목된다. 특히, 본 발명의 화합물들은 AT2 수용기의 작용물질이고, 특히 예를 들어 하기에 서술된 테스트에서 증명된 바와 같이, 하위-수용기(sub-receptor)의 선택적인 작용물질이다. 본 발명의 화합물들은, AT2 수용기들이 발현되고 및 그들의 자극이 바람직하거나 요구되는 이러한 조건에서 유용할 것으로 예상된다.

본 발명의 화합물들은, 혈관수축(vasoconstriction), 증가된 세포 성장 및/또는 분화, 증가된 심장 수축성, 증가된 심장혈관 비대증, 및/또는 증가된 체액과 전해질 보존력에 의해 특징지어지는 상태들의 치료를 나타낸다. 게다가, 본 발명의 화합물들은 스트레스-관련된 장애의 치료를 나타내고, 및/또는 미세혈관 및/또는 점막-보호 기작의 개선을 나타낸다. 따라서, 본 발명의 화합물들은, 상기 언급된 바와 같이 특징지어질 수 있고, 예를 들어 위장관, 심장 혈관 계통, 호흡기, 신장, 눈, 여성의 생식(배란) 계통 및 중추 신경계(CNS)의 것들인, 장애들의 치료에서 유용할 것으로 기대된다. 또한 본 발명의 펩티드 화합물의 치료학적으로 유효량에 대하여 필요한 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 조직 회복을 가속화하는 방법이 제공된다.

언급될 수 있는 위장관의 장애는, 식도염, 바렛 식도(Barrett's oesophagus), 위 궤양, 십이지장 궤양, 소화 불량(dyspepsia)(비-궤양 소화 불량을 포함), 식도 역류(gastro-oesophageal reflux), 과민성 대장 증후군(IBS), 염증성 장 질환(IBD), 췌장염, 간 질환(간염과 같은), 담낭 질환(gall bladder disease), 여러 장기 장애(MOF) 및 패혈증을 포함한다. 언급될 수 있는 다른 위장 장애는, 구강건조증, 위염, 위 마비(gastroparesis), 위산 과다증, 담즙 관의 장애(disorders of the bilary tract), 코엘리시아(coelicia), 크론 질환(Crohn's disease), 궤양성 대장염, 설사, 변비, 복통, 연하곤란(dysphagia), 구토, 메스꺼움, 소화 불량(indigestion) 및 쇼그렌 증후군(Sjogren's syndrome)을 포함한다. 언급될 수 있는 기도(respiratory tract)의 장애는, 폐쇄성 폐 질환(만성 폐쇄성 폐 질환과 같은), 폐렴, 폐 고혈압(pulmonary hypertension), 급성 호흡 곤란 증후군 및 천식과 같은 염증성 장애를 포함한다. 언급될 수 있는 신장의 장애는 신부전, 신장염 및 신장 고혈압을 포함한다. 언급될 수 있는 눈의 장애는 당뇨병성 망막증(diabetic retinopathy), 조기 망막증 및 망막 미세혈관신생(retinal microvascularisation)을 포함한다. 언급될 수 있는 여성의 생식 계통의 장애는 배란 장애(ovulatory dysfunction)를 포함한다. 언급될 수 있는 심장혈관 장애는, 고혈압, 심장 비대증, 심부전, 동맥경화(artherosclerosis), 동맥 혈전증, 정맥 혈전증, 혈관 장애(endothelial dysfunction), 혈관 손상(endothelial lesions), 후-풍선 확장 협착증(post-balloon dilatation stenosis), 혈관신생(angiogenesis), 당뇨병 합병증, 미세혈관 장애, 협심증, 부정맥, 간헐성 파행(claudicatio intermittens), 자간전증, 심근 경색(myocardial infarction), 심근 경색(reinfarction), 허혈성 병변(ischaemic lesions), 발기 부전 및 평활근 증식(neointima proliferation)을 포함한다. 언급될 수 있는 CNS의 장애는, 인지 장애, 음식 섭취(배고픔/포만감) 및 갈증의 장애, 뇌졸증, 뇌 출혈, 대뇌 색전증 및 뇌경색증을 포함한다. 본 발명의 펩티드 화합물은 또한, 예를 들어 적혈구 생성 증가(augment erythropoiesis)에 효과적인 양으로 적어도 하나의 펩티드 화합물과 적혈구 전구 세포를 접촉시킴에 의해, 적혈구 생성 증가시키는데(augmenting erythropoiesis)에 유용하다.

본 발명의 화합물은 또한, 예를 들어 비대 질환, 전립선 비대증, 자가면역 질환, 건선, 비만, 신경 재생, 궤양의 치료, 지방 조직 비대의 억제, 줄기 세포 분화와 증식, 암(예를 들어 위장관, 폐암 등), 세포 사멸, 종양(일반적인)과 비대(hypertrophy), 당뇨병, 신경 병변의 치료 및 장기 이식과 같은, 성장 대사 및 증식의 조절에 유용할 수 있다.

본 발명의 화합물은 상기 증상들의 치료적 및/또는 예방적 처리에서 모두 바람직하다.

본 발명의 다른 측면에 따르면, 제약으로서 사용하기 위한 본 발명의 화합물이 이와 같이 제공된다. 또한 본 발명의 적어도 하나의 펩티드 화합물 및 약제학적으로 수용가능한 담체 및/또는 보조제를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 상기 약제학적 조성물은 장의(enteral) 또는 주사의(parenteral) 투여에 적합한 유기 또는 무기 담체와 혼합으로 본 발명에 따른 화합물을 함유한다. 그러므로 약제학적 조성물은, 다양한 불활성 화합물이 펩티드들과 반응하지 않는, 예를 들어 탄화수소가 담체로서 사용될 수 있는, 고체의 리포필리제이트(lyophilizate)로서, 제형화될 수 있다. 약제학적 조성물이 묽거나 또는 농축된 현탁액 또는 에멀젼으로서 제형화될 때, 이들은 다양한 보존제 및 안정제를 또한 포함한다. 정제(tablet), 캡슐 및 그와 같은 것들로 병합될 수 있는 보조제들의 실례가 되는 것들은 다음과 같다: 트래거캔스 고무(gum tragacanth), 아카시아, 옥수수 녹말 또는 젤라틴과 같은 바인더; 미정질(microcrystalline) 셀룰로오스와 같은 첨가제(excipient); 옥수수 녹말, 호화전분(pregelatinized starch), 알긴산 등과 같은 분해 제제(disintegrating agent); 마그네슘 스테아르산염과 같은 윤활제(lubricant); 수크로오스, 젖당 또는 사카린과 같은 감미료; 페퍼민트, 살리실란메틸(oil of wintergreen) 또는 체리와 같은 향신료. 투여 단위 형태(dosage unit form)가 캡슐일 때, 이는 상기 타입의 물질들, 지방유(fatty oil)와 같은 액상 담체를 추가로 함유할 수 있다. 다양한 다른 물질들은 코팅으로서, 또는 그렇지 않으면 투여 단위의 물리적 형태를 변경하기 위하여, 존재할 수 있다. 예를 들어, 정제는 셀락, 설탕 또는 둘 다로 코팅될 수 있다. 시럽 또는 영약(elixir)는 상기 활성 화합물, 감미료로서 수크로오스, 방부제로서 메틸 및 프로필 파라벤, 염료 및 체리 또는 오렌지 맛과 같은 향신료를 함유할 수 있다.

본 발명의 다른 측면에 따르면, AT2 수용기 작용물질의 내생적 생산(endogenous production)이 부족한 상태, 및/또는 AT2 수용기 작용물질의 효과의 증가가 바람직하거나 또는 요구되는 상태, 및/또는 AT2 수용기들이 발현되고, 그들의 자극이 바람직하거나 또는 요구되는 상태의 치료방법이 제공되며, 이런 방법은 상기 상태에 영향 받기 쉽거나, 또는 상기 상태로부터 고통을 겪는 사람에게, 본 발명의 화합물의 치료학적으로 유효한 양의 투여를 포함한다.

본 발명의 화합물은, 약제학적으로 수용가능한 투약 형태로 일반적으로, 다른 비경구적 경로에 의해, 또는 흡입을 통하여, 경구로(orally), 정맥으로, 피하로, 구강으로(buccally), 직장으로, 진피로(dermally), 코로(nasally), 기관으로(tracheally), 기관지로(bronchially), 투여될 것이다.

치료되어야 할 상태가 여러 장기 장애일 때, 투여의 바람직한 경로는 비경구이다(예를 들어 주사(injection)). 그렇지 않으면, 본 발명의 화합물을 위한 투여의 바람직한 경로는 경구이다. 본 발명의 화합물들은 단독으로 투여될 수 있으나, 바람직하게는 경구 투여를 위한 영약, 캡슐 또는 정제, 직장의 투여를 위한 좌약, 비경구 또는 근육 내 주사를 위한 멸균액 또는 현탁액 및 그와 유사한 것들을 포함하는, 알려진 약제학적 제형의 형태로 투여된다. 이러한 제형은 표준 및/또는 허용된 약제학적 실습에 따라 제조될 수 있다.

본 발명의 다른 측면에 따르면, 약제학적으로 수용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합으로, 본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적 제형들이 제공된다.

본 발명의 화합물은 또한, 로자탄(losartan)과 같은, 본 분야에서 알려진 AT1 수용기 길항물질과의 조합, 또는 안지오텐신 변형 효소(ACE)의 저해제와의 조합, 또는 Mas 수용기 작용물질, 예를 들어 4,7 고리형 안지오텐신-(1-7) 또는 안지오텐신 변형 효소2(ACE2)와의 조합 뿐만 아니라, 당해 기술에서 알려진 다른 AT2 작용물질과의 조합으로도 투여될 수 있다.

구체적인 측면에서, 본 발명은 조직의 치유 또는 성장을 촉진하는데 있어서 본 발명의 화합물의 용도에 관한 것이다. 예를 들어, 조직 회복에서의 사용을 위하여 본 발명에 따른 펩티드 화합물이 제공된다. 또한, 적합한 담체나 희석제 및 본 발명의 적어도 하나의 펩티드 화합물의 상처 치유를 가속화하는데 유효한 양을 포함하는, 상처 치유를 촉진하기 위한 조성물이 제공된다. 화합물은 기질(metrical) 또는 마이셀(micellar) 용액으로 주입될 수 있다. 하나의 실시형태에서, 화합물은 적합한 담체 또는 희석제에서 kg 몸무게 당 적어도 0.1 ng의 비율로 주입된다. 담체 또는 희석제는, 카르복시메틸 셀룰로오스 조제물질(carboxymethyl cellulose preparation), 결정질 조제물질(crystalloid preparations), 점탄성제(viscoelastics), 폴리에틸렌 글리콜 및 폴리프로필렌 글리콜로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 상기 화합물은 유리하게는 상처 소독(wound dressing)과 함께 투여될 수 있다.

본 발명의 다른 측면에 따르면, (A) 본 발명의 펩티드 화합물; 및 (B) AT1 수용기 길항물질 또는 ACE 저해제로부터 선택된 것, 및/또는 (C) Mas 수용기 작용물질 또는 ACE2,를 포함하는 조합 생성물(combination product)이 제공되며, 상기 구성요소 (A), (B) 및/또는 (C)의 각각은, 약제학적으로-수용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합물로 제형화된다. 상기 조합 생성물들은, AT1 수용기 길항물질, 또는 ACE 저해제, Mas 수용기 작용물질, 또는 ACE2와 결합으로 본 발명의 화합물의 투여를 위해 제공되고, 따라서, 분리된 제형(separate formulations) 중 적어도 하나는 본 발명의 화합물을 포함하고, 적어도 하나는 예를 들어 AT1 수용기 길항물질, 또는 ACE 저해제를 포함하는, 분리된 제형으로서 존재할 수 있거나, 또는 결합된 조제품(combined preparation)으로서 존재할(즉, 제형화될) 수 있다(즉, AT1 수용기 길항물질 또는 ACE 저해제 및 본 발명의 화합물을 포함하는 단일 제형으로서 존재함).

따라서 : (1) 약제학적으로-수용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합물로 본 발명의 화합물 및 AT1 수용기 길항물질, 또는 ACE 저해제 또는 Mas 수용기 작용물질, 또는 ACE2를 포함하는 약제학적 제형; 및

(2) 하기의 구성성분을 포함하는 부분의 키트가 더 제공된다:

(a) 약제학적으로-수용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합물로, 본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적 제형; 및

(b) AT1 수용기 길항물질, 또는 ACE 저해제를 포함하는 약제학적 제형,

(c) 약제학적으로 수용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합물로 Mas 수용기 작용물질, 또는 ACE2,

상기 (a), (b) 및 (c)는 다른 것과 결합으로 투여에 적합한 형태로 각각 제공된다.

치료되어야 할 환자 및 장애 및 투여의 경로에 따라, 본 발명의 화합물은 다양한 투여량으로 투여될 수 있다.

비록 투여량이 환자마다 다양할지라도, 예를 들어 피하 주사를 위해, 단일 투여량으로 투여되는 적합한 투여량은, 환자 당 약 1 내지 1000 microgram/kg/day의 범위이다. 보다 바람직한 매일 투여량은 환자 당 40 내지 80 microgram/kg/day의 범위이다. 정맥 투여량은 피하 투여량과 동일하다. 폐의 투여량은 피하 투여량보다 약 4-배 더 높다. 경구 투여량은 피하 투여량보다 적어도 5배 더 높으며, 적용되는 제형에 따라 매우 다르다. 본 발명의 화합물은 또한 주 당 한번 투여될 수 있다. 매주 투여량은 매일 투여량보다 약 10 내지 30 배 더 높다.

어느 경우에, 내과의사 또는 숙련자는, 나이, 몸무게, 성별 및 치료받을 특정 환자의 반응뿐만 아니라 치료받을 상태도 다양하기 쉬운, 개별적인 환자에 가장 적합한 사실상의 투여량을 결정할 수 있을 것이다. 상기-언급된 투여량은 평균 사례의 대표적인 것이고; 물론, 더 높거나 더 낮은 투여량 범위가 가치있는 개별적인 예시들일 수 있으며, 및 그 밖의 그러한 것들은 이 발명의 범위 내에 있다. 본 발명의 화합물들은, 이들이 AT2 수용기에 선택적으로 결합하고, AT2 수용기에 작용물질 활성을 나타내는 이점을 갖는다. AT2 수용기에 "선택적으로 결합하는" 화합물에 의하여, 관련된 화합물(AT2:AT1)을 위한 친화성 비율이 적어도 5:1, 바람직하게는 적어도 10:1, 및 보다 바람직하게는 적어도 20:1이라는 것을 포함한다. 본 발명의 화합물은 또한, 더 효과가 있고, 덜 독성이 있으며, 더 길게 작용하며, 더 강력하고, 부작용을 거의 발생시키지 않으며, 더 쉽게 흡수되고, 및/또는 더 좋은 약동학적 프로필[예를 들어, 더 높은 구강의 생물학적 이용도 및/또는 더 낮은 제거(clearance)]을 가지며, 및/또는 선행 기술에서 알려진 화합물 이상의, 그 밖의 유효한 약제학적, 물리적, 화학적 특성들을 가질 수 있다.

도 1. KcAng -(1-7) 및 YcAng -(1-7) 는 매우 강력한 혈관확장제이다.
KcAng-(1-7) 및 YcAng-(1-7) 는 스프래그 다우리 쥐(Sprague Dawley rat)의 대동맥의 페닐에프리딘-예비수축된 링(phenylephridine-precontracted rings)의 혈관확장을 유도한다. ×: 대조군; □: 선천적 안지오텐신-(1-7); ■: cAng-(1-7); ○: KcAng-(1-7); ●: YcAng-(1-7).
도 2. N-연장된 cAng -(1-7) 유사물은 AT2 수용기를 통해 호전작용( agonistic action)을 위하여 4,7 티오에테르 링을 요구한다.
cAng-(1-7)는 4,7 티오에테르 브릿지된 Ang-(1-7)이다. 위치 -1에 변이성의 추가적인 아미노산 하나(즉, 본원에 상기에 Xaa1로 표시된 잔기)와 함께 cAng-(1-7)인, XcAng-(1-7)는 Erk1 (도 2A) 및 Erk2 (도 2B) 및 전체 Erk 인산화(도 2C)를 유도한다. 오픈 막대(Open bars): 대조군; 해치 막대(hatched bars): Erk 인산화 유도된 펩티드; 블랙 막대(black bars): AT2 수용기 길항물질 PD123319로 예비처리 후에 Erk 인산화 유도된-펩티드. 막대들(도 2A 및 2B)에서 XcAng-(1-7)의 위치 -1에 아미노산 "X"의 동일성이 나타난다. PD123319와 함께 예비처리는 ScAng-(1-7)-유도된 Erk2 인산화(Fig 2B)에 영향을 미치지 않으며, 선형- DDRVAIHA-유도된 전체 Erk 인산화(Fig 2C)에 또한 영향을 미치지 않는다. dKcAng-(1-7)는 Lys의 D-이성질체로 N-말단 연장이 있는 cAng-(1-7)이다.
도 3. AT2 수용기 자극은 2개의 아미노산 N-말단 확장과 함께 cAng -(1-7) 유사물에 의해 가해지지 않는다. 패널(panel) A: HBE 세포들에서 Erk1의 Erk1 인산화가 유도된 DcAng-(1-7) 및 IcAng-(1-7). 패널 B: HBE 세포들에서 전체 Erk 인산화 유도된-IDcAng-(1-7) 및 IDDRVAIHA. 오픈 막대: 대조군; 해치 막대: HBE 세포의 예비처리 없이 ERK 인산화 유도된-펩티드; 블랙 막대: PD123319로 예비처리 후에 ERK 인산화 유도된-펩티드.
도 4. N-연장된 cAng -(1-7) 유사물은 상기 Mas 수용기를 통하여 작용하지 않는다.
상기 Mas 수용기 길항물질 D-Pro7 는 스프래그 다우리 쥐의 대동맥의 페닐에프리딘-예비수축된 링의 KcAng-(1-7)- 및 YcAng-(1-7)-유도된 혈관확장을 억제하지 않는다. ×: 대조군; ○: KcAng-(1-7); ▽: KcAng-(1-7) 및 Mas 수용기 길항물질 D-Pro7; ●: YcAng-(1-7); ▼: YcAng-(1-7) 및 Mas 수용기 길항물질 D-Pro7.

실시예 1. KcAng -(1-7) 및 YcAng -(1-7)은 강력한 혈관확장제이다.

본 실시예는 N-연장된 cAng-(1-7) 유사물이 스프래그 다우리 쥐로부터 예비수축된 대동맥 링(precontracted aorta rings)에서 혈관확장(vasodilation)을 강하게 유도할 수 있다는 것을 증명한다.

물질 및 방법.

펩티드: dC가 D-시스테인을 나타내는 KDRVdCIHC, 및 YDRVdCIHC는, JPT로부터 구입되었다. 350 내지 450 그램 무게인 특정한 병원균-프리 수컷 스프래그 다우리 쥐(SD)(Harlan, Zeist, The Netherlands)가 사용되었다. 실험에 앞서서, 동물들은, 12/12시간 낮/밤 순환으로, 온도 및 습도가 조절된 방에서 수돗물(top water)과 고체 음식의 자유로운 접근(Harlan, Zeist, The Netherlands)으로 함께 수용되었다. 서술된 모든 프로토콜은 동물 실험을 위한 그로닌겐 위원회의 대학(University of Groningen Committee for Animal Experimentation)에 의해 승인되었다.

티오에테르-브릿지된 펩티드는 이전과 같이 염기-보조된(base-asisted) 황 배출을 통하여 디설파이드 브릿지된 펩티드로부터 얻어졌다(Galande AK, et al 2003. Biopolymers 71:534-551).

예비수축된 대동맥-링 상의 혈관확장. 기관조 실험(organ bath experiments)을 위한 대동맥 링이 앞서 서술된 바와 같이 준비되었다(Kluskens LD, et al. 2009. J Pharmacol Exp Ther 328:849-54). 펩티드의 혈관확장 효과를 테스트하기 전에 상기 링은 30 nM 페닐에프린(PE)으로 50 %의 이들의 최대 수축 수준으로 예비수축되었다. 5, 8 티오에테르 브릿지된 펩티드 KDRV[AIHA]_c 또는 YDRV[AIHA]_c는 0.1 nM 내지 1 μM의 범위로 점증적으로 추가되었다. 혈관확장 데이터는 30 nM PE 수축의 완화의 퍼센트로서 나타내었다.

결과. 도 1은 스프래그 다우리 쥐로부터 예비수축된 대동맥 링의 혈관확장을 유도하는 KcAng-(1-7) 및 YcAng-(1-7)의 기능(capacity)를 나타낸다. 둘 다의 펩티드는 sub-nM 농도에서 이미 현저한 혈관확장 능력(vasodilating capacity)을 갖는다.

결론. 이러한 데이터는 KcAng-(1-7) 및 YcAng-(1-7)가 매우 강력한 혈관확장 펩티드임을 증명한다.

실시예 2. N-연장된 cAng -(1-7) 유사물은 AT2 수용기를 통한 호전작용( agonistic action )을 위하여 상기 4,7 티오에테르 링을 요구한다.

서론. 본 실시예는, 만약 하나의 N-말단 아미노산으로 연장된다면, 인간 기관지의 상피(human bronchial epithelial, HBE) 세포에서 세포밖-신호-조절되는 키나아제(ERK) 인산화를 자극하도록, 티오에테르-브릿지된 cAng-(1-7)의 기능을 나타낸다. 상기 티오에테르 브릿지된 펩티드의 AT2 수용기 특이성은, 펩티드-유도된 ERK 인산화가 AT2 수용기의 길항물질로서 널리 알려진 PD123319에 의해 억제될 수 있는지 여부를 측정함으로써 확립될 수 있다. 게다가 N-말단으로 연장된 유사물에서의 티오에테르 링이 AT2 수용기를 통한 호전작용을 위해 요구됨을 증명한다.

물질 및 방법.

펩티드는 JPT로부터 구입되었다: 선형 DDRVAIHA, dKDRVdCIHC, KDRVdCIHC, DDRVdCIHC, IDRVdCIHC, NDRVdCIHC, SDRVdCIHC, 이 식에서 dK는 D-리신을 나타내고, dC는 D-시스테인을 나타낸다. AT2 수용기 길항물질 PD123319는 Axon Medchem으로부터 얻는다. 연구는 영구적인 인간 기관지의 상피 세포주 HBE를 사용하여 수행되었다(Cozens AL, et al. 1994 CFTR expression and chloride secretion in polarized immortal human bronchial epithelial cells. Am J Respir Cell Mol Biol 10:38-47). 모든 배양 배지 및 보충물(supplements), 다중웰 플레이트(multiwell plates) 및 플라스크는 PAA로부터 얻는다.

세포 배양. 다중-웰 플레이트는 코팅 용액(112 ml에는 : F12 배지 100 ml; 소 혈청 알부민(bovine serum albumin) 10 ml(1 mg/ml); 콜라겐Ⅰ, 보바인(Bovine) 1 ml(3 mg/ml); 인간 피브로넥틴(human fibronectin) 1 ml(1 mg/ml))으로부터 1 ml 받았고, 37 ℃ 및 5 % CO₂에서 6시간 동안 배양되었다. 그 다음에, 상기 코팅 용액은 버려지고(discarded), 상기 플레이트는 층류 캐비넷(laminar flow cabinet)에서 2 시간 동안 건조시켰다. 각각의 12 웰 플레이트에서, 8.10⁴ HBE 세포는 각 웰당 접종된(seeded) 다음에, 37 ℃ 및 5 % CO₂에서 24 시간 동안 배양된다. 세포 배양 배지는 432.2 ml MEM 199 기초 배지를 50 ml(15%) FCS 및 5 ml L-글루타민(200 mM), 10 ml 페니실린/스트렙토마이신(10.000 units/ml / 10 mg/ml) 및 2.8 ml 젠타마이신(Gentamycin)(10 mg/ml)에 첨가함으로써 제조되었다. 85 내지 90 % 컨플루언시(confluency)에서 배지는 FCS 및 성장 인자 없는 배지로 교체된 다음에, 다시 37℃ 및 5 % CO₂에서 24 시간 동안 배양되었다.

Erk1 및 Erk2 인산화. 상기 배지는 각 웰로부터 제거되었으며, 칼슘 및 마그네슘이 없는 HBS 완충용액으로 한번 세척되었다. 10^-6 M에서 펩티드의 기능은, 10^-6 M의 PD123319 또는 동시 대조군(concomitant controls) 중 어느 한 쪽과 함께 20분 예비배양(preincubation) 후에 테스트된 다음에 세척되었다. 도전물(Challenges) 및 동시 대조군들은 10 분 동안 1 ml/well에서 수행되었다. 모든 샘플들은 3번 테스트 되었다. 이후 도전물 150 μl RIPA 완충용액[RIPA, TBS, 1 % Nonidet P-40, 0.5 % 소듐 데옥시콜레이트(sodium deoxycholate), 0.1 % SDS, 0.004 % 소듐 아지드(sodium azide), 1 % PMSF(2 mM 최종농도), 1 % 소듐 오르토바나데이트(sodium orthovanadat)(1 mM 최종농도) 및 1 % 프로테아제 저해 칵테일(inhibitor cocktail)]이 각 웰에 첨가되었다. 플레이트들은 4 ℃에서 15 분 동안 배양되었다. 용해된 세포들은 표면으로부터 긁어냈다. 용해물(lysate)은 1.5 ml 에펜도르프(eppendorf) 컵에 옮겨졌고, 세포 파편을 펠렛화하기 위해(to pellet the cell debris), 12,700 x g 에서 5 분 동안 원심분리 되었다. 상층액이 새로운 컵으로 옮겨졌고, 5 μl 샘플 중의 전체 단백질 내용물이, 눈금 단백질(calibration protein)로 사용되는 BSA와 함께, lowry(Bio-Rad)에 따른 DC 단백질 분석(assay)를 통하여 결정되었다. 단백질은 겔 상에 분리되었으며, p-ERK 마우스 단일클론 IgG2a(p-ERK mouse monoclonal IgG2a) 및 마우스 GAPDH 항-랫 IgG1 항체(mouse GAPDH anti-rat IgG1 antibodies) 및 제2 항체로서 염소 항-마우스 IgG-AP와 함께 블롯트되었다(blotted). 인산화된 Erk 단백질 및 GAPDH는 BCIP/NBT로 염색되었으며(stained), TotalLab 소프트웨어를 사용하여 전체 Erk 및 GAPDH와 비교하여 정량화되었다. 대체적으로, 전체 Erk 인산화는 비-분리된 세포들의 투과성화(permeabilization) 후에 측정되었다.

결과. 도 2AB는 N-말단(terminus)에 하나의 아미노산으로 연장된 cAng-(1-7) 유사물은 ERK1를 자극하는 것을 보여주며, 보다 적은 정도(extent) ERK2 인산화를 보여준다. ERK1 및 ERK2 인산화는 AT2 길항물질 PD123319에 의하여 억제될 수 있다. AT2 길항물질 PD123319가 펩티드-유도된 ERK 인산화를 억제할 수 있는 정도는, N-말단적으로 연장되는 위치 "-1"에서의 아미노산에 의존된다. PD123319에 의한 ERK 인산화의 억제는 연장된 위치에서 Asp, Lys 및 Ile인 경우에 완벽하였다. Asn 또는 Ser이 연장된 위치에 존재할 때, ERK1 인산화의 억제가 더 적으며, ERK2 인산화의 억제는 또한 더 적거나 또는 없다. 도 2C는, Erk 인산화가 유도된 선형 펩티드 DDRVAIHA가 Erk 인산화를 유도하지만, 이러한 선형 펩티드에 대해 유도된 Erk 인산화는 PD123319에 의해 억제되지 않음을 나타낸다. 반면에, 티오에테르 브릿지된 dKcAng-(1-7)에 의해 유도된 Erk 인산화는 PD123319에 의하여 억제될 수 있다.

결론. 이러한 데이터는, 단일 아미노산 N-말단 연장이 있는 cAng-(1-7)이 AT2 수용기를 통하여 ERK 인산화를 자극함을 명백하게 증명한다. N-말단에 연장된 cAng-(1-7)의 AT2 수용기와의 상호작용은 바로 N-말단 위치 "-1"에서의 아미노산에 의존한다. 다른 경우에 Xaa¹ 로서 나타내는, 이러한 N-말단 위치 "-1"에, 양전하적으로 또는 음전하적으로 대전된 아미노산 또는 소수성 아미노산은 높은 AT2 수용기 특이성을 유도하고; Ser 및 Asn과 같은 순전하(net charge) 없는 친수성 아미노산과 함께 연장된 펩티드는 AT2 수용기와 거의 또는 전혀 작용하지 않는다. AT2 길항물질 PD123319가 선형 N-연장된 Ang-(1-7)유사물에 의하여 유도되는 Erk 인산화를 억제할 수 없기 때문에, 상기 티오에테르 링은 AT2 수용기를 통하여 N-연장된 cAng-(1-7) 펩티드의 작용이 요구된다.

실시예 3. AT2 수용기 자극이 2 개의 N-말단 연장 아미노산과 함께 cAng -(1-7)유사물에 의하여 발휘되지 않는다.

도입. 본 실시예에서, 두 개의 아미노산의 N-말단 연장을 갖는 cAng-(1-7) 유사물이 AT2 수용기를 자극하는지를 조사하였다. 실시예 2에 나타낸 바와 같이, HBE 세포에서 펩티드-유도된 ERK 인산화가 측정되었고, AT2 길항물질 PD123319에서의 이러한 인산화의 의존이 측정되었다.

물질 및 방법.

티오에테르 브릿지된 펩티드 합성 및 세포 배양 및 Erk1- 및 전체 Erk 인산화의 측정은 기본적으로 실시예 2와 같다.

결과. 도 3A는, 티오에테르-브릿지된 유사물 IcAng-(1-7) 및 DcAng-(1-7) 둘 다가 PD123319와 함께 예비처리에 의해 억제되는 Erk1 인산화를 유도함을 나타낸다. 그러나 IDcAng-(1-7)-에서와 같은 두 개의 아미노산 연장의 경우에서 및 선형 IDDRVAIHA-유도된 Erk 인산화의 경우에서, AT2 길항물질 PD123319와 함께 예비처리에 의해 전부에서 어떠한 억제도 얻어지지 않았다(도 3B).

결론. 실시예 2는, 링이 N-연장된 Ang-(1-7)의 AT2 수용기 자극을 위하여 요구됨을 이미 증명하였다. 일관되게, 선형 변이체의 2 개의 아미노산과 함께 연장 또한 AT2 수용기를 자극하지 않았다. 2 개의 아미노산의 N-말단에 연장된 상기 비선형 cAng-(1-7)는 AT2 수용기를 자극하지 않기 때문에, cAng-(1-7)의 하나의 아미노산 N-말단 연장은 AT2 수용기 작용물질을 위한 N-말단 연장 한계(N-terminal extension limit)이다.

실시예 4. N-연장된 cAng -(1-7) 유사물은 Mas 수용기를 통하여 작용하지 않는다.

서론. 본 실시예에서 상기 Mas 수용기 길항물질 D-Pro7-Ang-(1-7)는 스프레그 다우리 쥐로부터 예비수축된 대동맥 링에서 KcAng-(1-7) 및 YcAng-(1-7)-유도된 혈관확장을 억제할 수 없다.

물질 및 방법.

Mas-수용기 길항물질인, 위치 7에서 프롤린의 D-이성질체와 함께 D-Pro7-ang-(1-7), ang-(1-7)는 JPT로부터 얻으며, 사용 전에 HPLC에 의해 정제된다. 이러한 길항물질은 Kluskens et al 2009 에서와 같이 사용되었다: 0.1 μM 농도에서30 nM PE의 첨가 전 10분. 다른 물질 및 방법은 실시예 1에서와 같다.

결과. 도 4는, 상기 Mas 수용기 길항물질 D-Pro7이 스프레그 다우리 쥐로부터 예비수축된 대동맥 링에서 KcAng-(1-7) 및 YcAng-(1-7)-유도된 혈관확장을 억제하지 않음을 증명하였다.

결론. KcAng-(1-7) 및 YcAng-(1-7)는 Mas 수용기를 통해 작용하지 않는다.

Claims

Xaa⁵ 및 Xaa⁸이 함께 하기의 일반 화학식 중 어느 하나에 따른 구조를 형성하도록 Xaa⁵ 및 Xaa⁸의 곁사슬 사이에 티오에테르-브릿지 결합을 포함하는 아미노산 서열 Xaa¹- Asp- Arg- Ile/Val- Xaa⁵- Ile/Val- His- Xaa⁸로 이루어진 고리형 펩티드 화합물 또는 이의 약제학적으로 수용가능한 염으로서;

이 식에서 R, R¹, R², R³, R⁴ 및 R⁵는, -H, 저급(예를 들어, C₁-C₁₀) 알킬 또는 아랄킬 기로부터 독립적으로 선택된 것이고, 바람직하게는 이 식에서 R, R¹, R², R³, R⁴ 및 R⁵는, H 및 CH₃로부터 독립적으로 선택된 것이고, 및
이 식에서 Xaa¹은, 대전된 아미노산, 방향족 아미노산 및 소수성 아미노산 및 이의 프로테아제-저항 변이체들로 이루어진 군으로부터 선택된 것인, 고리형 펩티드 화합물.
제1항에 있어서,
상기 Xaa¹은, 대전된 아미노산, 방향족 아미노산 및 소수성 아미노산의 프로테아제 저항 변이체들로 이루어진 군에서 선택된 것인, 펩티드 화합물.
제2항에 있어서,
상기 Xaa¹은 D-입체이성질체인, 펩티드 화합물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 Xaa¹은 양전하적으로 대전된 아미노산인, 펩티드 화합물.
제4항에 있어서,
상기 Xaa¹은 Lys 또는 Arg인, 펩티드 화합물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 Xaa¹은 음전하적으로 대전된 아미노산인, 펩티드 화합물.
제6항에 있어서,
상기 Xaa¹은 Asp, Glu 또는 pyroGlu인, 펩티드 화합물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 Xaa¹은 소수성 아미노산인, 펩티드 화합물.
제8항에 있어서,
상기 Xaa¹은 Ile, Leu 또는 Val인, 펩티드 화합물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 Xaa¹은 방향족 아미노산인, 펩티드 화합물.
제5항에 있어서,
상기 Xaa¹은 Tyr 또는 Phe인, 펩티드 화합물.
제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 Xaa⁵는 D-입체이성질체인, 펩티드 화합물.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 Xaa⁸은 L-입체이성질체인, 펩티드 화합물.
제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 Xaa⁵ 는 D-입체이성질체이고, Xaa⁸은 L-입체이성질체인, 펩티드 화합물.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 펩티드가 2개의 Abu(2-아미노부틸릭산) 잔기를 함유하지 않는다는 조건 하에서
Lys-Asp-Arg-Val-Abu/Ala-Ile-His-Abu/Ala (K-cAng(1-7))
Asp-Asp-Arg-Val-Abu/Ala-Ile-His-Abu/Ala (D-cAng(1-7))
Tyr-Asp-Arg-Val-Abu/Ala-Ile-His-Abu/Ala (Y-cAng(1-7))
Ile-Asp-Arg-Val-Abu/Ala-Ile-His-Abu/Ala (I-cAng(1-7))
Asn-Asp-Arg-Val-Abu/Ala-Ile-His-Abu/Ala (N-cAng(1-7))
로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는, 펩티드 화합물.
제1항 내지 제15항 중 어느 하나에 따른 펩티드 화합물, 및 약제학적으로 수용가능한 보조제, 희석제 또는 담체를 포함하는, 약제학적 조성물.
안지오텐신 II 타입 2 (AT₂) 수용기 작용물질(agonist)로서, 제1항 내지 제15항 중 어느 하나에 따른 펩티드 화합물의 생체외(In vitro) 용도.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서,
AT2 수용기의 선택적인 작용물질(agonism)이 바람직하거나 및/또는 요구되는 상태의 예방용 및/또는 치료용, 펩티드 화합물.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서,
제18항에서 상기 상태는 (타입 II) 당뇨병, 심혈관 질환, 고혈압, 심장 마비, 감염, 탈모, 빈혈, 혈구 감소증, 신경 질환, 염증, 섬유증, 암, 급성 호흡 곤란 증후군 또는 상처 치유인, 제 18 항에 따른 예방용 및/또는 치료용, 펩티드 화합물.
(A) 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 따른 펩티드 화합물; 및 (B) AT1 수용기 길항물질 및 ACE 저해제로부터 선택된 화합물, 및/또는 (C) Mas 수용기 작용물질 및 ACE2로부터 선택된 화합물,
을 포함하는 조합 생성물(combination product)로서,
상기 구성요소 (A), (B) 및/또는 (C) 각각은, 약제학적으로 수용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 함께 혼합물로 제형된 것인, 조합 생성물.