KR20050005630A

KR20050005630A - 아이쥐에프-1 분비 촉진 활성이 뛰어난 인동 추출물, 이의제조방법 및 용도

Info

Publication number: KR20050005630A
Application number: KR1020030045586A
Authority: KR
Inventors: 박명규; 최미희
Original assignee: 주식회사 엠디바이오알파
Priority date: 2003-07-07
Filing date: 2003-07-07
Publication date: 2005-01-14

Abstract

본 발명은 생체 내 IGF-1 분비를 유도하는 인동초 (Lonicera japonica) 추출물의 제조방법, 상기 방법에 의해 얻어지는 인동초 추출물 및 이를 활성성분으로 포함하는 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 인동초를 물, 알콜 또는 알콜과 물의 혼합 용매를 첨가하여 추출되는 인동초 추출물의 제조방법, 상기 방법에 의해 얻어지는 인동초 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 약제학적 조성물, 화장품 조성물 및 건강식품 조성물 등에 관한 것이다. 본 발명의 인동초 추출물은 강력한 IGF-1 분비촉진 활성을 나타냄은 물론, 천연 약재로서 안전성이 확보되어 있으므로 IGF-1 분비 촉진제용 의약품, 화장품 및 음료를 포함한 식품류 등에 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 인동초 추출물은 IGF-1 분비가 저조한 어린이와 IGF-1 분비능력이 저하되는 성인에게 의약 또는 건강식품 등의 형태로 경구 또는 비 경구로 투여 될 수 있다.

Description

아이쥐에프-1 분비 촉진 활성이 뛰어난 인동 추출물, 이의 제조방법 및 용도{Lonicera japonica extract having activity of enhancing IGF-1 secretion, its process method, and application}

본 발명은 IGF-1 분비를 유도하는 인동초(Lonicera japonica) 추출물의 제조방법, 상기 방법에 의해 얻어지는 인동초 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 여러 형태의 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 인동초를 물, 알콜 또는 알콜과 물의 혼합 용매를 첨가하여 추출되는 인동초 추출물의 제조방법, 상기 방법에 의해 제조된 IGF-1 분비를 유도하는 인동초 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 약제학적 조성물, 화장품 조성물 및 건강식품 조성물 등에 관한 것이다.

IGF-1 (Insulin-like Growth Factor-1)은 70개의 아미노산으로 구성된 단일쇄 폴리 펩타이드이로서, 간에서 주로 분비된다. IGF-1은 IGF-1 수용체를 통하여 자신의 기능을 발휘하게 된다. IGF-1의 생체 내 기능에 관해서 많은 연구가 실시되었으며, 그러한 연구를 통하여 IGF-1의 성장 촉진 이외의 다양한 기능 (예: 단백질 합성 촉진, 혈당량 감소 및 세포 분화 촉진)이 규명되었다. 예를 들어, Arsenijevic Y. et al, J. Neurosci., 15;21(18):7194(2001)에는 IGF-1이 신경성 줄기 세포의 증식에 필수적임을 보고하고 있고, Cappola AR. et al., J. Clin. Endocrinol. Metab., 86(9):4139(2001)는 고령의 여자에 있어서 근력의 감소 및 운동능의 감소와 IGF-1의 생체 내 농도의 감소가 직접적으로 연관되어 있음을 보고하고 있다. 또한, 골격근의 재생을 IGF-1을 통하여 할 수 있다는 보고가 Shiotani A. et al., Gene Ther. 8(14):1043(2001)에 되어 있고, 에탄올 과용 후에는 IGF-1의 생체 내 이용효율 (bioavailability)이 크게 감소된다는 보고도 있다 (Rojdmark S. et al., J. Endocrinol. Invest., 24(7):476(2001)). 한편, IGF-1은 세포의 증식에 중요한 역할을 한다는 것이 보고되어 있고 (Singleton JR. et al., Neurobiol. Dis. 8(4):541(2001)), 당뇨 환자 (제 1 형 및 제 2 형)에 있어서 IGF-1이 치료 효과를 나타낸다는 것도 보고 되어 있다 (Thraikill KM, Diabetes Technol Ther., 2(1):69-80(2000)). Seck T. et al.은 IGF-1의 혈액 내 저 농도 상태가 폐경기 이후의 여성에 있어서 대퇴골의 감퇴와 직접적인 연관이 있음을 규명하였고 (Clin. Endocrinol., 55(1):101(2001)), Conti E. et al.은 심근 경색의 급성 단계에서 IGF-1의 급격한 감소가 관찰 되었음을 보고 하였다 (J. Am. Coll. Cardiol., 38(1):26(2001)).

IGF-1은 다양한 기관에서 허혈-리퍼퓨전 손상에 대한 세포 보호능을 갖고 있다는 다양한 보고가 있고, Nakao Y. et al., J. Thorac Cardiovasc. Surg.,122(1):136(2001)은 IGF-1이 신경 세포 사멸을 억제하는 능력이 있음을 보고하고 있다. 또한, IGF-1의 결핍은 생후 성장의 결여, 정신 발달 지연, 소두증 및 감각 신경의 무감증을 초래하며, 이러한 증상을 나타내는 환자에는 성장 호르몬이 정상적으로 분비가 되고, 성장 호르몬에 의한 시그널링이 정상적으로 이루어지나, IGF-1이 국소적으로 또는 전신적으로 생성되지 않는다는 보고도 있다 (Woods KA. et al., N. Engl. J. Med., 335:1363(1996)). 한편, IGF-1이 결핍된 환자에게 IGF-1을 투여한 경우에는 체조성, 인슐린 민감성, 골 무기질 밀도 및 길이 성장이 개선된다는 보고도 있다 (K.A. Woods. et al., J. Clin. Endocri. ＆ Met., 85:1407(2000)). 또한 다낭성 신장질환 치료에 사용(미국특허 5,985,830)된 보고도 있다. 또한, Blum et al. (J. Clin. Endocrinol. Metab. 76:1610-1616(1993))의 보고에 따르면, IGF-1과 IGF 결합 단백질 3 (IGFBP-3)의 혈액 내의 수준이 낮은 어린이는 키가 작고, 키가 큰 아이는 IGF-1의 수준이 높다고 보고하였다. 또 다른 논문에 의하면, IGF-1의 장기적인 치료는 키 성장 속도를 증가시키는데 효과적이라는 것이 보고된바 있어 (Ranke et al., Horm. Res. 44: 253-264 (1995)), IGF-1은 성장 호르몬이 부족한 환자들의 치료에 효과적임을 규명하였다.

상술한 바와 같이, IGF-1은 생체 내에서 다양한 기능을 하고, 성장 호르몬과 협동적으로 또는 개별적으로 생체 내에서 작용을 하며, 성장 호르몬의 시그널에 의해 또는 개별적으로 생체 내에서 작용을 하여 상술한 다양한 기능을 발휘한다는 것을 알 수 있다.

본 발명자는 종래부터 생약재로 사용되었던 인동초 (또는, 인동이라고도 불리어 질 수 있으나 동일한 의미이다) 추출물이 상술한 다양한 기능을 발휘하는 IGF-1의 분비를 유도하는 효과를 나타냄은 물론, 그 안전성이 입증되어 인동초 추출물을 포함한 의약, 화장품 및 식품 등 여러 형태의 조성물이 인체 또는 동물에 무해하다는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 IGF-1 분비 유도용 약제학적 조성물, 화장품조성물,식품 등의 다양한 조성물을 제공하는 데 있다. 본 발명의 다른 목적은 노화로 발생되는 각종 생리적 질환의 치료 및 예방, 그리고 성장보조 목적을 갖는 생리 활성 증진용 건강 식품을 제공하는 데 있다. 본 발명의 또 다른 목적은 인동초로부터 IGF-1 분비 유도 활성을 갖는 성분의 제조방법을 제공하는 데 있다.

도 1은 본 발명의 인동초 추출물에 의한 혈중 IGF-1의 농도 변화를 나타내는 그래프

본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 (a) 인동초를 열수 처리하여 추출한 다음 열수 추출액을 흡착수지인 HP-20에 흡착시켜 분리한 인동초 추출액의 약제학적 유효량; 및 (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 IGF-1 (Insulin like Growth Factor-1) 분비를 유도하는 약제학적 조성물을 제공한다.

상술한 IGF-1 분비를 유도하는 본 발명의 약제학적 조성물은 IGF-1의 생체 내 생성이 감소된 개체에 투여되어 다양한 증상 및 질환을 개선시킬 수 있다. 예컨대, 체조성, 인슐린 민감성, 골 무기질 밀도 및 길이 성장을 개선시킬 수 있고, 또한 정신 발달 지연, 소두증, 감각 신경의 무감증 및 폐경기 이후의 여성의 대퇴골 감소를 억제할 수 있으며, 신경 세포의 증식을 촉진시킬 수 있고, 만성스트레스로 인한 질환, 불면증, 대사장애, 성적능력의 저하, 연골의 재생 및 증식 그리고 글리코사미노글리칸의 합성을 촉진시켜 골관절염을 포함한 퇴행성관절염 고령의 여성에 있어서 근력의 감소 및 운동능의 감소를 억제할 수 있다. 그리고 성장판이 닫히지 않았으나 성장이 지체 혹은 부족한 어린이와 청소년들에게는 성장을 촉진시킬 수 있다.

이러한 다양한 기능을 하는 IGF-1의 분비 유도제로 이용될 수 있는 후보 물질을 본 발명에서는 생약재로 하였는 바, 이는 생약재는 천연물질이고, 종래부터 약재로서 이용되어 그 안정성이 입증된 것이기 때문이다. 탐색한 생약재 가운데 인동초가 가장 우수한 IGF-1 분비 유도 효과를 나타내었다.

인동(忍冬)은 우리나라의 전국 산야지의 수림아래에 자생하는 인동과(Capriofoliaceae)의 반상록 덩굴성 관목 식물로서, 꽃봉오리는 '금은화'라하고 잎과 줄기는 '인동등(忍冬藤)'이라 하여 한방에서 널리 이용되어온 식물이다. 지금까지 알려진 인동등에 함유된 유효활성 성분으로는 로니세린(Lonicerin; luteolin-7-rhamnoglucoside), 카페오일퀸산(caffeoylquinicacid), 메틸 카페에이트(methyl caffeate), 클로로겐산(chlorogenic acid), 이소-클로로겐산(iso-chlorogenic acid) 등의 플라보노이드(flavonoides) ; 오크나플라본(ochnaflavon) 등의 바이플라보노이드(biflavnoides) ; 사포닌(saponin)의 일종이 풀보토멘토사이드(fulvotomentoside) A, α-헤데린(α-hederin), 사핀도사이드(sapindoside) B 및 본 발명자 등에 의하여 규명된 신물질인 로니세로사이드(Loniceroside) A, B(한국특허공개 제94-2267호) ;로가닌(Loganin), 보겔로사이드,(Vogeloside), 에피-보겔로사이드(Epi-vogeloside) 등의 이리도이드 글리코사이드(Iridoid glycosides) 등이 함유되어 있는 것으로 밝혀졌다. 이러한 인동은 예로부터 그 탕제(湯劑)는 모든 옹저(癰疽, 속과 겉의 염증)에 유효하다 하여 관절염, 기관지염, 천식 등에 널리 이용되어 왔으며, 근자에 와서는 유행성 감기, 각종화농성 감염증, 습열로 인하여 일어나는 관절의 발적, 종창, 간독성 보호, 세포면역능력 저하의 회복에 효과가 있다고 알려져 있다.

그러나 기성 한의서(漢醫書)나 관련 문헌에서는 대부분 인동자체에 대한 한방의학적 약효에 대해서만 언급되어 있을 뿐 인동이 IGF-1 분비 촉진 효과를 갖고 있다는 연구결과가 지금까지 발표된 바 없다. 특허 0163813에는 인동의 생약성분의 추출효율을 극대화하고 인동을 보다 과학적으로 유용하게 이용하고자 인동의 줄기와 잎을 활성물질의 함량이 가장 많은 생육시기에 채취하고 줄기와 잎의 첨가비율을 최적화하여 유효활성 성분을 추출하는 방법을 알아냈으며 동시에 인동의 채취시기, 잎과 줄기의 혼합비율을 조절하여 소염진통 생리활성이 있는 유효성분을 가장 활성이 우수한 조성으로 추출하는 방법과 그 추출유효성분을 함유한 생약조성물에 관한 특허가 있으며 강 등은(출원번호 1992-0011752) 인동으로부터 항염증, 항알러지 및 항 류마티스에 유효한 바이후라보노이드의 분리 및 유효성에 관한 특허, 강 등은 (특1995-0007924) 인동으로부터 헤드라게닌 배당체 단일물질의 분리 및 구조결정에 대한 특허를 출원하였다.

이하, 본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다.

본 발명은 인동으로부터 유효활성 성분을 추출ㆍ정제하여 IGF-1 분비촉진효과에 관한 발명으로 본 발명에 이용 가능한 인동은 채집한 계절에 상관없이 인동의 꽃, 잎, 열매, 줄기, 그리고 뿌리 등을 호르몬분비 촉진제의 소재로 사용할 수 있다. 또한, 본 발명은 인동으로부터 추출한 로니세로사이드 (Loniceroside) A, 로니세로사이드 B, C, 헤드라게닌(hedragenin)유도체, 로니세린 (Lonicerin), 로가닌 (Loganin)이 함유되어 있는 생약 조성물을 포함한다.

이와 같은 본 발명을 더욱 상세히 설명하면 다음과 같다.

본 발명은 인동의 줄기와 잎으로부터 IGF-1분비 촉진 생리활성이 우수한 유효성분을 추출ㆍ정제하는 방법으로서, 본 발명에서 사용한 인동의 줄기와 잎은 각각 특정시기에 채취한 것을 사용하므로써 유효성분함량을 극대화시킬 수 있다.

본 발명에서는 상기 혼합된 인동잎과 줄기의 생약원료를 물로 추출하는데, 생약원료 중량의 8∼12배의 물을 가하여 5시간 정도 환류 추출한 후 여과하여 여액을 모으고, 다시 잔사를 생약원료 중량의 3∼7배의 물을 가하여 가온 후 여과하여 여액을 앞의 여액과 혼합함으로써 물 추출효율을 높인다. 물 추출물로부터 생약 잔사를 원심분리 및 여과를 통하여 제거한 후 분리액을 흡착제인 HP-20에 흡착시켜 생리활성성분 분획을 분리하고자 하였다. 생리활성성분이 흡착된 컬럼을 충분히 물로 세척한 후 에탄올을 이용하여 용출시켰다. 용출된 용액을 50도에서 감압농축하여 진공건조하였다.

상기와 같은 본 발명에 따른 방법으로 인동의 잎과 줄기로부터 추출된 규격화된 분획의 IGF-1 분비촉진 유효 생리활성 물질을 분석한 결과 로니세로사이드(Loniceroside) A, B 를 비롯하여 이미 알려진 성분인 로가닌(Loganin), 로니세린 (Lonicerin) 등이 함유되어 있다. 따라서, 본 발명에 따른 추출 정제방법으로 얻어낸 분말 엑기스로 생약 조성물을 제조하여 사용하는 경우 IGF-1 분비촉진제로 유용하게 이용될 수 있다.

본 발명에 따른 분말 엑기스로 제조되는 생약 조성물은 인동 분말 엑기스를 통상의 방법으로 제형화하여 정제, 연질캅셀, 주사제 등의 형태로 투여할 수 있으며, 이때 사용되는 기제, 예컨대 락토오스(Lactose), 미세결정 셀룰로오즈(Microcrystalline Cellulose), 마그네슘 스테아린산(Magnesium Stearate) 등의 기제성분과 인동 분말엑기스를 일정 비율로 혼합하여 사용할 수 있으며, 바람직하게는 1: 1.5 내지 1.5 : 1의 비율로 사용하면 기존의 것에 비해 보다 월등한 IGF-1 분비촉진 활성을 나타내게 된다. 특히, 본 발명의 생약 조성물을 인체에 투여하는 경우 천연 추출물인 관계로 다른 합성의약품에 비해 부작용의 염려가 거의 없으며, 이러한 부작용 감소의 일 예로서는, 일반적인 NSAID(Non Steroidal Anti Inflammatory Drug)계 약물이 나타내는 위장장애 및 궤양유발 부작용에 대한 동물모델실험에서 입증되었다.

즉, 본 발명에서 제조된 인동추출물에서는 이러한 IGF-1 분비촉진 효과가 탁월하였으며(실험예 참조), 일반 인동추출물은 마우스(mouse) 및 랫트(rat)에 대한 급성 독성실험결과 전혀 무독한 것으로 판명되었다. (LD₅₀= 5g ext's/Kg 이상, 생약학회지 Vol. 25, No.4, 1994).

상술한 바와 같이, 본 발명에 따르면 인동으로부터 유효생리활성 성분을 추출 정제함으로 종래에 한약탕제 등의 형태로만 이용되었던 인동추출물을 투여가 편리한 분말, 연고제, 정제, 주사제 등의 제형으로 투여 가능케 할 수 있는 효과가 있다.

이에, 본 발명자들은 인동초 추출물의 생리학적 활성을 연구한 결과, 인동초 추출물이 IGF-1 분비촉진제로 작용하여 IGF-1의 생산을 증가시킴을 밝힘으로써 본 발명을 완성하였다

본 발명의 조성물을 제조하는 상술한 제조방법은 용이하게 실시할 수 있으면서도, 고순도, 고수율 및 경제적으로 IGF-1 분비 작용을 지닌 핵심 성분을 분리할 수 있는 장점이 있다. 본 발명의 약제학적 조성물은 약리학적 효과는 길이 성장 지연 치료, 길이 성장 촉진, 골 무기질 밀도의 개선 (골다공증 예방 및 치료), 노화 억제, 체조성 개선, 폐경기 이후의 여성의 대퇴골 감퇴의 치료 , 신장질환개선, 허혈성 심장질환, 만성스트레스관련 질환, 불면증, 대사장애, 성적능력의 저하, 고령의 여성에 있어서 근력의 감소 및 운동능의 감소 억제, 연골의 재생 및 증식 그리고 글리코사미노글리칸의 합성을 촉진시켜 골 관절염을 포함한 퇴행성 관절염 및 신경세포의 보호를 포함한다.

본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 IGF-1 분비촉진용 약학적 조성물은 상기 인동초 추출물을 유효 성분으로 함유한다. 상기 인동초 추출물은 임상 투여 시에 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 즉, 본 발명의 인동초 추출물은 실제 임상 투여 시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 인동초 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토오스 및 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제와 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤 및 젤라틴 등이 사용될 수 있다.

투약 단위는, 예를 들면 개별 투약량의 1, 2, 3 또는 4배를 함유하거나 또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를 함유할 수 있다. 개별 투약량은 바람직하기로는 유효 약물이 1회에 투여되는 양을 함유하며, 이는 통상 1일 투여량의 전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에 해당한다. 인동초 추출물의 유효용량은 농도 의존적이나 바람직하게는 0.1 내지 1g/㎏이고, 더욱 바람직하기로는 0.4 내지 200 mg/kg이며, 하루 1-6 회 투여될 수 있다.

또한, 본 발명은 인동초 추출물을 유효성분으로 함유하는 IGF-1 분비 촉진용 건강식품 조성물을 제공한다.

본 명세서에서 건강식품이란 일반 식품에 인동초 추출물을 첨가함으로써 일반 식품의 기능을 향상시킨 식품이며, 인동초 추출물을 일반식품에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조할 수 있다. 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오고, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하였기 때문에 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있다.

본 발명의 인동초 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 인동초 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용되고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 인동초 추출물을 식품 또는 음료의 제조 시에 원료에 대하여 0.0001 내지 10 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 5 중량%의 양으로 첨가될 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하로 조절할 수 있다. 또한, 본 발명의 건강식품은 상기 약학적 조성물로 이용하는 경우는 측정된 독성 범위내의 인동초 추출물을 함유되도록 하는 것이 바람직하다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 인동초 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있다. 구체적으로, 인동초 추출물을 함유하는 건강 식품으로는 인동초를 주성분으로 만든 즙, 차, 젤리, 쥬스 등의 건강식품 및 기호품을 들 수 있으며, 부종, 신장염, 요도염 등을 목적으로 하는 민간요법제 등을 들 수 있다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예1. 인동초 추출물의 제조 1

인동초 건조물 분말 50 g을 메탄올 500 ㎖에 첨가하여 실온에서 2일 동안 교반시켰다. 교반 과정을 거쳐 얻어진 용액을 거름종이로 여과한 후 감압 농축하여 메탄올을 제거한 뒤 동결 건조하여 수분을 제거하여 본 발명의 인동초 추출물을 제조하였다.

실시예2. 인동초 추출물의 제조 2

인동초 건조물 분말 50 g을 증류수 500 ㎖에 넣고 100℃에서 3시간 동안 추출하였다. 3시간 동안 추출한 후 여과 및 원심분리하여 불용성고형분을 제거한 후 상등액을 감압 농축하여 동결건조하여 본 발명의 인동초 추출물을 제조하였다.

실시예3. 인동초 추출물의 정제

인동초 건조물 분말 50 g을 증류수 500 ㎖에 넣고 100℃에서 3시간 동안 추출하였다. 3시간 동안 추출한 후 여과 및 원심분리하여 불용성고형분을 제거한 후 상등액을 HP-20 수지가 흡착된 칼럼(상품명 DIAION)에 20ml/분의 유속으로 흘려보내 농축물 중의 IGF-1 분비촉진용 성분이 수지에 흡착되도록 하였다.

상기 칼럼에 증류수를 충분히 흘려보내 수지를 세척한 후, 에탄올(95 %)을 흘려보내 수지에 흡착된 IGF-1 분비촉진 성분이 함유된 분획을 회수하였다. 회수된 에탄올 용출액을 온도 60?에서 감압 농축하여 농축물을 얻고, 이 농축물을 65?에서 감압 건조하여 2.5 %의 활성분획을 얻었다.

실시예 4. 본 발명의 인동초 추출물의 생체내 IGF-1 분비 유도 효과

상기 실시예 3에서 얻은 추출 분말 50 mg을 증류수 1 ㎖에 용해하여 투여액을 제조하였다.

본 실시예에서 이용된 동물은 평균체중이 약 200 g이고, 7 주령된 SD 수컷 랫트이다. 실험 동물은 본 발명의 추출물을 투여하기 전 하루 동안 절식을 시켰는데 그 이유는 IGF-1의 분비 자극에 대한 반응성 증대를 위한 것이다. 동물수는 대조군은 6마리, 실험군은 7마리로 하였다. 이어, 상기 래트에 경구 투여용 주사기를 이용하여 상기 투여액 1000 ㎕를 위에 강제 투입하였다. 채혈은 투여 전, 그리고 투여 후 2시간 간격으로 심장에서 직접 채취하였으며 마지막 채혈 시간은 10시간이 경과한 다음에 실시하였다. 또한, IGF-1의 분비 패턴에 영향을 줄 수 있는 마취제는 실험 동안에는 사용하지 않았다. 그런 다음, 채혈된 시료에서의 IGF-1의 정량은 미국 DSL(Diagnostic System Laboratory)에서 제조 판매하는 EIA (enzyme immunoassay) 키트를 구입하여 제공된 프로토콜에 따라 측정하였다. 그 결과는 첨부한 도 1과 같다.

도 1에서 확인할 수 있듯이, 본 발명의 인동초 추출물이 투여된 실험군은 투여후 4시간이 경과한 다음부터 대조군과 현저하게 혈중 IGF-1의 농도 차이가 발생하였다. 따라서, 본 발명의 인동초 추출물은 동물에서 혈중 IGF-1의 농도를 상승시킨다는 것을 알 수 있다. 또한 상승된 혈중 IGF-1 수위는 시간이 경과함에 따라 다시 원상태로 회복이 됨을 확인할 수가 있다. 이 결과에서 보면 혈중 IGF-1 농도는 시료 투여가 실시된 직후 8시간이 경과 되어 최고 상승점에 도달되는 것으로 나타났다. 따라서 본 발명의 인동초 추출물은 IGF-1의 분비를 유도한다는 것이 명백하다.

실시예5. 주사액제의 제조방법

유효성분 10 ㎎을 함유하는 주사액제는 다음과 같은 방법으로 제조하였다. 인동초 추출물 10 g 을 생리식염수 1,000ml에 용해시킨 후 0.2um 무균여과를 하여 주사제로 사용하였다.

상기 주사액제의 구성성분은 다음과 같다.

실시예 3 10 g

생리식염수 1,000 ml

실시예6. 정제의 제조방법

유효성분이 함유된 정제는 다음과 같은 방법으로 제조한다.

인동초 추출물 600 g, 아르기닌 240 g, 결정셀룰로오스 140 g, 스테아린산마그네슘 10 g, 그리고 하이드록시프로필메칠셀룰로오스를 혼합하여 정제를 만들었다.

상기 정제의 구성성분은 다음과 같다.

인동초 추출물 600 g

아르기닌 240 g

결정셀룰로오스 140 g

스테아르산 마그네슘 10 g

하이드록시프로필메칠셀룰로오스 10 g

실시예7. 인동초 추출물의 우유에의 적용

우유-----------------------100g

실시예2---------------------1g

실시예8. 인동초 추출물의 오렌지쥬스에의 적용

액상과당--------------------5%

폴리덱스트로스---------------1%

구연산---------------------5%

비타민C--------------------0.02%

실시예9--------------------2%

오렌지과즙농축액-------------25%

물------------------------67%

실시예9. 인동초 추출물의 화장품 lotion에의 적용

1,3-butylene glycol---------------5%

glycerine-----------------------5%

EDTA-2Na---------------------0.02%

trimethylglycine-----------------2.0%

cetanol------------------------1.0%

glyceryl monostearate emulsifier---1.0%

polysorbate 60------------------1.2%

sorbitan sesquioleate-------------0.3%

cetyl 2-ethyl-hexaoate-----------4.0%

squalane-----------------------5.0%

dimethicone---------------------0.3%

glyceryl stearate-----------------0.5%

carbomer-----------------------0.15%

triethanoamine-------------------0.5%

imidazolidinyl urea----------------0.2%

실시예3-------------------------2.0%

정제수--------------------------71.8%

실시예10. 인동초 추출물의 화장품 skin에의 적용

1,3-butylene glycol---------------4.0%

dipropylene glycol----------------5.0%

EDTA-2Na----------------------0.02%

octyldodeceth-16-----------------0.3%

PEG60 hydrogenate castor oil-------0.2%

실시예3-------------------------0.5%

정제수--------------------------90%

실시예11. 음료의 제조

젖산칼슘 50 ㎎

구연산 5 ㎎

니코틴산아미드 10 ㎎

염산리보플라빈나트륨 3 ㎎

염산피리독신 2 ㎎

아르기닌 30 ㎎

실시예 2 100 ㎎

물 200 ㎖

상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 음료를 제조하였다.

상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 인동초 추출물은 매우 높은 IGF-1 분비촉진 활성을 나타내고 이 추출물의 원료인 인동초가 오래 동안 사용되어온 인체에 무해하고 흡수율이 좋은 천연 약재이므로 IGF-1과 관련된 각종 질환의 치료 및 예방에 유용하게 사용될 수 있다.

Claims

인동초 (Lonicera japonica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 IGF-1(Insulin-like Growth Factor-1) 분비 유도 및/또는 촉진 조성물
제 1 항에 있어서, 상기 인동초 추출물은 꽃(금은화), 열매, 뿌리 및/또는 잎과 줄기(인동등) 추출물인 것임을 특징으로 하는 조성물
제 1 항에 있어서, 상기 인동초 추출물은 로니세로사이드 (Loniceroside) A, 로니세로사이드 B, C, 헤드라게닌(hedragenin)유도체, 로니세린 (Lonicerin), 로가닌 (Loganin) 및 보겔로사이드(Vogeloside), 에피-보겔로사이드(Epi-vogeloside) 등의 이리도이드 글리코사이드(Iridoid glycosides)류로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나 이상의 유효성분을 함유하는 것임을 특징으로 하는 조성물
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 인동초 추출물은 환류 추출된 것임을 특징으로 하는 조성물
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 인동초 추출물은 물, 알콜 또는 알콜과 물의 혼합 용매로 추출된 것임을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 내지 제 5 항의 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 왜소증 치료 활성을 갖는 것임을 특징으로 하는 조성물
제 1 항 내지 제 5 항의 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 단백질 합성 촉진, 혈당량 감소 및/또는 신경성 줄기세포 또는 근세포 등의 세포 분화촉진 활성을 갖는 것임을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 내지 제 5 항의 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 제1형 및/또는 제2형 당뇨 치료활성을 갖는 것임을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 내지 제 5 항의 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 길이 성장 지연 치료, 길이 성장 촉진, 골 무기질 밀도의 개선 (골 다공증 예방 및 치료), 노화 억제, 체조성 개선, 폐경기 이후의 여성의 대퇴골 감퇴의 치료 , 신장질환개선, 허혈성 심장질환, 만성스트레스관련 질환, 불면증, 대사장애, 성적능력의 저하, 고령의 여성에 있어서 근력의 감소 및 운동능의 감소 억제, 연골의 재생 및 증식 그리고 글리코사미노글리칸의 합성을 촉진시켜 골 관절염을 포함한 퇴행성 관절염 및 신경세포의 보호 활성을 갖는 것임을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 내지 제 5 항의 어느 한 항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 것임을 특징으로 하는 조성물
제 10 항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제는 락토오스(Lactose), 미세결정 셀룰로오즈(Microcrystalline Cellulose), 마그네슘 스테아린산(Magnesium Stearate) 등의 기제성분에서 선택된 하나 이상의 것임을 특징으로 하는 조성물
제 10 항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제와 인동추출물과의 혼합비율이 1: 1.5 내지 1.5 : 1 인 것을 특징으로 하는 조성물
제 1 항 내지 제 5 항의 어느 한 항에 있어서, 식용 음료 또는 식품의 형태로서 제제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 13 항에 있어서, 상기 조성물의 인동초 추출물 함유비가 0.0001 내지 10 중량%인 것임을 특징으로 하는 조성물
제 1 항 내지 제 5 항의 어느 한 항에 있어서, 화장품 조성물의 제조에 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 내지 제 5 항의 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물을 활성성분으로포함하고 선택적으로 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 IGF-1 분비 촉진제
제 16 항에 있어서, 제산제를 추가로 포함함을 특징으로 하는 제제
제 16 항에 있어서, 상기 제제가 정제, 산제, 경질 또는 연질 캅셀제, 현탁제, 주사용 제제, 유화액, 좌약제, 비경구 투여용의 단위 투여형 또는 수회 투여형 제제인 것임을 특징으로 하는 제제
제 16 항 내지 제 18 항에 있어서, 활성성분의 함량이 성인 체중 1Kg 당 25~24,000mg/일 범위로 투여 되는 것임을 특징으로 하는 제제
a) 인동초를 수용성 용매로 환류 추출하여 조 추출물을 얻는 단계 b) 선택적으로, 상기 추출물을 농축하거나, 여과하는 단계 c) 흡착제인 HP-20에 흡착시키는 단계 및 d) 활성성분이 흡착된 컬럼을 물로 세척한 후 수용성 용매를 이용하여 활성성분을 용출시키는 단계 및 e) 선택적으로 적당한 온도에서 감압농축하여 진공건조시키는 단계를 포함하는 인동 추출물의 제조방법
제 20 항에 있어서, 상기 c)단계 이전에 음이온 교환 크로마토그래피법에 의한 정제단계와 투석단계를 추가로 포함함을 특징으로 하는 방법
제 20 항의 a) 또는 d) 단계에 있어서, 상기 추출에 수용성 용매는 물, 저급 알코올 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 제조방법.
제 22 항에 있어서, 상기 저급알콜은 에탄올, 메탄올, 아이소포로필알콜, 프로판올, 아세톤인 것임을 특징으로 하는 제조방법.
제 20 항 내지 제 23 항 중 어느 한 항의 제조방법에 의해서 제조된 인동(인동초) 추출물.
제 24 항에 있어서, 상기 추출물은 로니세로사이드 (Loniceroside) A, B, C, 헤드라게닌(hedragenin)유도체, 로가닌 (Loganin), 로니세린 (Lonicerin), 및 보겔로사이드(Vogeloside), 에피-보겔로사이드(Epi-vogeloside) 등의 이리도이드 글리코사이드(Iridoid glycosides)류로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 유효성분을 포함하는 것임을 특징으로 하는 추출물