KR20020063906A - 4-피리미디닐-ｎ-아실-ｌ-페닐알라닌 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 VLA-4를 발현시키는 세포와 VCAM-1 사이의 결합의 억제제이고, 따라서 증후 및 손상이 VLA-4를 발현시키는 세포로의 VCM-1의 결합에 기인하는 질환을 치료하는데 유용한 하기 화학식 I의 화합물에 대한 것으로서, 여기서 R1내지 R6은 명세서에 정의된 바와 같다:
화학식 I

Description

4-피리미디닐-Ｎ-아실-Ｌ-페닐알라닌{4-PYRIMIDINYL-N-ACYL-L-PHENYLALANINES}
면역 글로불린(Ig) 초유전자군의 일원인 혈관 세포 유착 분자-1(VCAM-1)은 활성화되었으나 휴지중인 내피상에서 발현된다. 순환 림프구, 호산구, 호염기구 및 단핵구를 포함하나 호중구는 포함하지 않는 많은 세포 유형에서 발현되는 인테그린 VLA-4(α4β1)는 VCAM-1에 대한 주요 수용체이다. VCAM-1 또는 VLA-4에 대한 항체는 상기 단핵성 백혈구뿐만 아니라 흑색종 세포가 생체 내에서 활성화된 내피에 유착되는 것을 차단할 수 있다. 상기 두 단백질에 대한 항체는 염증에 대한 몇몇 동물 모델에서 백혈구 침윤을 억제하고 조직 손상을 방지하는데 효과적이다. 항-VLA-4 단일클론성 항체는 아주반트-유도된 관절염의 T-세포 유주를 차단하고,천식 모델에서 호산구 체류 및 기관지 수축을 방지하고, 실험적인 자가면역 뇌염(EAE)에서 마비를 감소시키고 단핵구 및 림프구 침윤을 억제함이 알려졌다. 항-VCAM-1 단일클론성 항체는 심장 동종이식의 생존 시간을 연장시키는 것으로 알려졌다. 최근의 연구로 항-VLA-4 mAb가 당뇨병에 걸린 비만이 아닌 생쥐의 췌도염 및 당뇨병을 방지할 수 있으며, 결장염의 코튼-톱(cotton-top) 타마린 모델에서 염증을 크게 약화시킬 수 있음이 밝혀졌다. 또한, 염증성 장 질환의 TNB/에탄올 래트 모델에서 염증이 생긴 군체성 조직의 내피 세포상에 VCAM이 발현됨이 알려졌다(참조: 문헌[Gastroenterology 1999, 116, 874-883]).
따라서, α4-함유 인테그린과 VCAM-1과의 상호작용을 억제하는 화합물이 류마티스성 관절염(RA), 다발성 경화증(MS), 천식 및 염증성 장 질환(IBD)와 같은 만성 염증성 질환의 치료를 위한 치료제로서 유용할 것이다. 본 발명의 화합물이 이러한 효과를 갖는다.
본 발명은 VLA-4를 발현시키는 세포와 VCAM-1 사이의 결합의 억제제이고, 따라서 증후 및 손상이 VLA-4를 발현시키는 세포로의 VCM-1의 결합에 기인하는 질환을 치료하는데 유용한 4-피리미디닐-N-아실-L-페닐알라닌에 관한 것이다.
본원에서, "할로겐"이란 용어는 다르게 지시되지 않은 한 브롬, 염소, 불소 및 요오드의 네 할로겐 중 임의의 것을 의미한다. 바람직한 할로겐은 브롬, 불소 및 염소이다.
"저급 알킬"이란 용어는, 단독으로 또는 조합되어, 최대 6개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 알킬기, 예컨대 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 2급 부틸, 이소부틸, 3급 부틸, n-펜틸, n-헥실 등을 의미한다.
"치환된 저급 알킬"이란 용어는 독립적으로 사이클로알킬, 니트로, 아릴옥시, 아릴, 하이드록시, 할로겐, 시아노, 저급 알콕시, 저급 알카노일, 저급 알킬티오, 저급 알킬 설피닐, 저급 알킬 설포닐, 아미노 및 모노 또는 디 저급 알킬 아미노로부터 선택된 하나 이상의 기에 의해 치환된 상기 정의된 바와 같은 저급 알킬기를 의미한다. 치환된 저급 알킬기의 예는 2-하이드록시에틸, 3-옥소부틸, 시아노메틸 및 2-니트로프로필을 포함한다.
R4, R22또는 R23을 위한 "퍼플루오로 저급 알킬"이란 용어는 수소 모두가 불소로 치환된 메틸 또는 에틸기인 상기 정의된 바와 같은 치환된 저급 알킬기, 즉 트리플루오로메틸 및 펜타플루오로에틸을 의미한다.
"저급 알케닐"이란 용어는 임의의 두 인접한 탄소 원자 사이에 위치한 이중 결합을 갖는 탄소수 2 내지 10의 알킬렌기를 의미한다.
"사이클로알킬"이란 용어는 치환되지 않았거나 치환된 3원 내지 7원 카바사이클릭 고리를 의미한다. 본 발명에 따라 유용한 치환체는 하이드록시, 할로겐, 시아노, 저급 알콕시, 저급 알카노일, 저급 알킬, 아로일, 저급 알킬티오, 저급 알킬 설피닐, 저급 알킬 설포닐, 아릴, 헤테로아릴 및 치환된 아미노이다.
"저급 알콕시"란 용어는 최대 6개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 알콕시기, 예컨대 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, 3급-부톡시 등을 의미한다.
"저급 알킬티오"란 용어는 2가 황 원자를 통하여 분자의 나머지에 결합된 저급 알킬기, 예를 들어 메틸 머캅토 또는 이소프로필 머캅토기를 의미한다. "저급 알킬설피닐"이란 용어는 설피닐기의 황 원자를 통해 분자의 나머지에 결합된 상기 정의된 바와 같은 저급 알킬기를 의미한다. "저급 알킬 설포닐"이란 용어는 설포닐기의 황 원자를 통해 분자의 나머지에 결합된 상기 정의된 바와 같은 저급 알킬기를 의미한다.
"아릴"이란 용어는 통상적인 치환기에 의해 치환되거나 치환되지 않은 1환 또는 2환 방향족기, 예컨대 페닐 또는 나프틸을 의미한다. 바람직한 치환체는 저급 알킬, 저급 알콕시, 하이드록시 저급 알킬, 하이드록시, 하이드록시알콕시, 할로겐, 저급 알킬티오, 저급 알킬설피닐, 저급 알킬설포닐, 시아노, 니트로, 퍼플루오로알킬, 알카노일, 아로일, 아릴 알키닐, 저급 알키닐 및 저급 알카노일아미노이다. 본 발명에 따라 사용될 수 있는 아릴기의 예는 페닐, p-톨릴, p-메톡시페닐, p-클로로페닐, m-하이드록시 페닐, m-메틸티오페닐, 2-메틸-5-니트로페닐, 2,6-디클로로페닐, 1-나프틸 등이다.
"아릴알킬"이란 용어는 하나 이상의 수소 원자가 본원에 정의되는 바와 같은 아릴 또는 헤테로아릴기로 치환된 상기 정의된 바와 같은 저급 알킬기를 의미한다. 본 발명에 따라 임의의 통상적인 아릴알킬, 예컨대 벤질 등이 사용될 수 있다.
"헤테로아릴"이란 용어는 독립적으로 N, S 또는 O인 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 치환되지 않았거나 치환된 5원 또는 6원 단환식 헤테로방향족 고리 또는 9원 또는 10원 이환식 헤테로방향족 고리를 의미한다. 헤테로아릴 고리의 예는 피리딘, 벤즈이미다졸, 인돌, 이미다졸, 티오펜, 이소퀴놀린, 퀴놀린 등이다. "아릴"에 대해 상기 정의된 바와 같은 치환체가 헤테로아릴의 정의에 포함된다.
"저급 알콕시카보닐"이란 용어는 카보닐기를 통해 분자의 나머지에 결합된 저급 알콕시기를 의미한다. 알콕시카보닐기의 예는 에톡시카보닐 등이다.
"저급 알킬카보닐옥시"라는 용어는 산소 원자를 통해 분자의 나머지에 결합된 저급 알킬카보닐옥시기, 예를 들어 아세톡시기를 의미한다. "아실옥시"란 용어는 동일한 의미를 갖는다.
"저급 알카노일"이란 용어는 카보닐기를 통해 분자의 나머지에 결합된 저급 알킬기를 의미하며 상기 정의의 견지에서 아세틸, 프로피오닐 등과 같은 기를 포괄한다. "퍼플루오로 저급 알카노일"이란 용어는 카보닐기를 통해 분자의 나머지에 결합된 퍼플루오로 저급 알킬기(모든 수소가 불소로 치환된 치환된 저급 알킬기, 바람직하게는 트리플루오로메틸 또는 펜타플루오로에틸)를 의미한다.
"퍼플루오로 저급 알카노일아미노"란 용어는 아미노기를 통해 분자의 나머지에 결합된 퍼플루오로 저급 알카노일기를 의미한다.
"저급 알킬카보닐아미노"란 용어는 질소 원자를 통해 분자의 나머지에 결합된 저급 알킬카보닐기, 예컨대 아세틸아미노를 의미한다. "저급 알킬아미노카보닐"이란 용어는 카보닐기를 통해 분자의 나머지에 결합된 저급 알킬 아미노기를 의미한다.
"아릴아미노카보닐"이란 용어는 아미노기에 결합되고 추가로 카보닐기를 통해 분자의 나머지에 결합된 아릴기를 의미한다.
"아로일"이란 용어는 카보닐기를 통해 분자의 나머지에 결합된 단환식 또는 이환식 아릴 또는 헤테로아릴기를 의미한다. 아로일기의 예는 벤조일, 3-시아노벤조일, 2-나프토일, 니코티노일 등이다.
약학적으로 허용가능한 염은 당 분야에 널리 공지되어 있으며 화합물의 화학적 성질을 고려하여 통상적인 방법으로 제조될 수 있다. 산성 화합물에 대한 약학적으로 허용가능한 염의 예는 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘과 같은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속, 염기성 아민 또는 염기성 아미노산, 암모늄 또는 알킬 암모늄염이다. 본 발명의 화합물에 대한 특히 바람직한 염은 나트륨염, 예컨대 R6이 H인 산성 화합물로부터의 나트륨염이다. 본 발명의 임의의 산의 나트륨염은 수산화나트륨으로 산을 처리함으로써 쉽게 수득할 수 있다. 염기성 화합물의 경우, 예는 무기 또는 유기산, 예컨대 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산, 시트르산, 포름산, 푸마르산, 말레산, 아세트산, 숙신산, 주석산, 메탄설폰산 및 p-톨루엔설폰산의 염이다.
한 실시양태에서 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 및 그의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:
본 발명에 따르면, R1은 아래 기술되는 바와 같은 Y-1, Y-2 또는 Y-3 기이다:
R1은 하기 화학식 Y-1의 기이거나:
[여기서, R22및 R23은 독립적으로 수소, 저급 알킬, 저급 알콕시, 사이클로알킬, 아릴, 아릴알킬, 니트로, 시아노, 저급 알킬티오, 저급 알킬설피닐, 저급 알킬설포닐, 저급 알카노일, 할로겐 또는 퍼플루오로 저급 알킬이되, R22및 R23중 하나 이상은 수소가 아니고,
R24는 수소, 저급 알킬, 저급 알콕시, 아릴, 니트로, 시아노, 저급 알킬 설포닐 또는 할로겐이다],
R1은 탄소 원자를 통해 아미드 카보닐에 결합된 5원 또는 6원 헤테로방향족 고리인 화학식 Y-2의 기이되, 상기 고리는 N, O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택된 하나, 둘 또는 세 개의 헤테로 원자를 함유하고, 상기 고리의 하나 또는 두 원자는 독립적으로 저급 알킬, 사이클로알킬, 할로겐, 시아노, 퍼플루오로알킬 또는 아릴에 의해 치환되고 상기 치환된 원자중 하나 이상은 아미드 카보닐에 결합된 탄소 원자에 인접해 있는 것이거나,
R1은 하기 화학식 Y-3의 3원 내지 7원 고리이고:
[여기서, R25는 저급 알킬, 비치환 또는 불소 치환된 저급 알케닐, 또는 화학식 R26-(CH2)e-의 기이되, 여기서 R26은 아릴, 헤테로아릴, 아지도, 시아노, 하이드록시, 저급 알콕시, 저급 알콕시카보닐, 저급 알카노일, 저급 알킬티오, 저급 알킬 설포닐, 저급 알킬 설피닐, 퍼플루오로 저급 알카노일, 니트로이거나, 화학식 NR28R29의 기(여기서, R28은 수소 또는 저급 알킬이고, R29는 수소, 저급 알킬, 저급 알콕시카보닐, 저급 알카노일, 아로일, 퍼플루오로 저급 알카노일아미노, 저급 알킬 설포닐, 저급 알킬아미노카보닐, 아릴아미노카보닐이거나; 또는 R28및 R29는 부착된 질소 원자와 함께, O, S 및 N-R40(여기서, R40은 H, 저급 알킬, 아릴, 저급 알카노일, 아로일 또는 저급 알콕시카보닐임)으로부터 선택된 추가적인 하나의 헤테로원자를 임의적으로 함유하는 4원, 5원 또는 6원 포화 헤테로사이클릭 고리를 형성함)이고, 상기 고리중의 탄소 원자는 치환되지 않았거나 저급 알킬 또는 할로겐에 의해 치환되고, Q는 -(CH2)fO-, -(CH2)fS-, (CH2)fN(R27)-, -(CH2)f-이되, 여기서, R27은 H, 저급 알킬, 아릴, 저급 알카노일, 아로일 또는 저급 알콕시카보닐이고, e는 0 내지 4의정수이고, f는 0 내지 3의 정수이다];
R2는 수소 또는 저급 알킬, 치환된 저급 알킬, 아릴알킬, 또는 아릴이고;
R3은 수소 또는 저급 알킬, 치환된 저급 알킬, 아릴알킬, 또는 아릴이고;
R4는 수소, 할로겐, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬(예: 퍼플루오로 저급 알킬), 또는 아릴이고;
R5는 수소, 저급 알킬, 클로로, 또는 저급 알콕시이고;
R6은 수소, 저급 알킬, 저급 알킬 카보닐옥시 저급 알킬, 치환된 저급 알킬이거나, R6은 하기 화학식 P-3의 기이거나:
[여기서, R32는 수소 또는 저급 알킬이고, R33은 수소, 저급 알킬, 아릴이고, R34는 수소 또는 저급 알킬이고, h는 0 내지 2의 정수이고, g는 0 내지 2의 정수이고, h와 g의 합은 1 내지 3이다];
R6은 하기 화학식 P-4의 기이다:
[여기서, R32, g 및 h는 상기와 같고, Q'은 O, S, -(CH2)j-, 또는 화학식 N-R35의 기이되, 여기서 R35는 수소, 저급 알킬, 저급 알카노일, 저급 알콕시카보닐이고, j는 0, 1 또는 2이다].
본 발명의 화합물은 입체이성질체 및 부분입체이성질체로서 존재할 수 있으며, 이들 모두가 본 발명의 범위에 포괄된다. 상기 및 하기 여러 양태에서 언급된 화합물은 각각 그의 약학적으로 허용가능한 염 형태로서도 고려된다.
화학식 I의 화합물의 구체적인 제1 양태에서, R2는 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬, 아릴알킬 또는 아릴이고; R3은 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬, 아릴알킬 또는 아릴이고; R4는 수소, 저급 알킬, 퍼플루오로 저급 알킬 또는 아릴이다.
화학식 I의 화합물의 구체적인 제2 양태에서, R2는 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴이고; R3은 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴이고; R4는 수소, 할로겐, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴이다.
화학식 I의 화합물의 구체적인 제3 양태 및 그의 상기 구체적인 제1 및 제2양태에서, 바람직하게는 구체적인 제1 양태에서, R2는 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴이고; R3은 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴이고; R4는 수소, 저급 알킬, 퍼플루오로 저급 알킬 또는 아릴이다.
화학식 I의 화합물의 바람직한 양태 및 그의 상기 세 구체적인 양태, 바람직하게는 제3 양태에서, R4는 수소, 저급 알킬 또는 퍼플루오로 저급 알킬이다.
화학식 I의 화합물의 더욱 바람직한 양태 및 그의 상기 세 구체적인 양태, 바람직하게는 제1 양태에서, R1은 화학식 I에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 Y-1의 기이고, R22및 R23은 독립적으로 수소 또는 할로겐이고; R24는 저급 알콕시, 바람직하게는 메톡시이다.
화학식 I의 다른 더욱 바람직한 양태 및 그의 특별한 양태는 R1이 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 Y-3의 기로서 식중 R25가 화학식 R26-(CH2)e-의 기이고, R26은 저급 알콕시이고, Q는 -(CH2)f-이고, e는 0 내지 4의 정수이고, f는 0 내지 3의 정수, 바람직하게는 2인 것이다.
화학식 I의 다른 더욱 바람직한 양태 및 그의 특별한 양태는 하기 화학식 Ib의 화합물이다:
상기 식에서,
R1은 화학식 I에서 정의된 바와 같고, R2는 저급 알킬이고, R3은 저급 알킬이고, R4는 수소, 퍼플루오로 저급 알킬 또는 저급 알킬이고, R5는 수소 또는 저급 알킬이고, R6은 수소, 저급 알킬, 바람직하게는 메틸, 저급 알킬-카보닐옥시 저급 알킬, 바람직하게는 1-(아세톡시)에틸, 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 P-3의 기 또는 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 P-4의 기이다. 이러한 더욱 바람직한 양태중에서, R1이 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 Y-1의 기로서 식중 R22및 R23이 독립적으로 퍼플루오로 저급 알킬, 바람직하게는 트리플루오로메틸; 저급 알킬, 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필 또는 이소프로필; 또는 할로겐, 바람직하게는 불소, 염소 또는 브롬이고; R24가 수소인 것이 특히 바람직하다.
R1이 상기 문단에서 정의된 바와 같은 화학식 Y-1의 특히 바람직한 기인 경우, i) R2및 R3이 저급 알킬이고; R4가 수소 또는 저급 알킬이고; R5및 R6이 수소인 것, ii) R2및 R3이 저급 알킬이고; R4가 수소 또는 저급 알킬이고, R5가 수소이며, R6이 수소, 저급 알킬 또는 저급 알킬카보닐옥시 저급 알킬이거나, R6이 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 P-3의 기이거나, R6이 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 P-4의 기(바람직하게는 R35는 수소이다)인 것, 특히 R6이 저급 알킬이거나, R6이 저급 알킬카보닐옥시 저급 알킬이거나, R6이 화학식 P-3의 기[여기서, R32는 수소이고, R33및 R34는 저급 알킬이고; h는 1이고, g는 0이다]이거나, R6이 P-4의 기[여기서, R32는 수소이고; h는 1이고; g는 0이고, Q'은 O이다]인 것, iii) R2및 R3는 저급 알킬이고, R4는 퍼플루오로 저급 알킬이고, R5및 R6은 수소인 것, 또는 iv) R2및 R3은 저급 알킬이고, R4는 수소이고, R5는 저급 알킬이고, R6은 수소인 것이 바람직하다.
상기 문단에서 언급된 바람직한 양태 i)와 관련된 구체적인 화합물은 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-브로모-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-에틸-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[[2-(2-메틸에틸)-6-메틸페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[[2-플루오로-6-(트리플루오로메틸)페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[[2,6-디-(2-메틸에틸)페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-클로로-6-에틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-클로로-6-프로필페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[[2-클로로-6-(2-메틸에틸)페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; 또는 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌으로부터 선택된다.
다른 화합물은 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-브로모-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; 또는 N-[(2-브로모-5-메톡시페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌으로부터 선택된다.
상기 ii)와 관련된 구체적인 화합물은 R6이 저급 알킬인 경우 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 에틸 에스테르; N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 에틸 에스테르; 또는 N-[(2,6-디플로오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 에틸 에스테르로부터 선택되고; R6이 저급 알킬카보닐옥시 저급 알킬인 경우 화합물은 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르; N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르; 또는 N-[(2,6-디플로오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르로부터 선택되고; R6이 화학식 P-3의 기인 경우 화합물은 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 에스테르; N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 에스테르; 또는 N-[(2,6-디플로오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 에스테르로부터 선택되고; R6이 화학식 P-4의 기인 경우 화합물은 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르; 또는 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르로부터 선택된다.
상기 iii)과 관련된 구체적인 화합물은 N-[1-(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; 또는 N-[[2-플루오로-6-(트리플루오로메틸)페닐]카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌으로부터 선택된다.
상기 iv)와 관련된 구체적인 화합물은 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌; N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌; 또는 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌으로부터 선택된다.
상기 정의된 본 발명의 화학식 Ib의 화합물에서:
[여기서, R1은 화학식 I에서 정의된 바와 같고, R2는 저급 알킬이고; R3은 저급 알킬이고; R4는 수소, 퍼플루오로 저급 알킬 또는 저급 알킬이고, R5는 수소 또는 저급 알킬이고; R6은 수소, 저급 알킬, 저급 알킬카보닐옥시 저급 알킬, 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 P-3의 기 또는 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 P-4의 기이다], R1이 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 Y-3의 기이고, 식중 R25는화학식 R26-(CH2)e-의 기이고, R26은 저급 알콕시이고, Q는 -(CH2)f-이고, e는 0 내지 4의 정수이고, f는 0 내지 3의 정수인 것이 또한 바람직하다. 이러한 화합물에서, R2및 R3이 저급 알킬이고, R4가 수소 또는 저급 알킬이고; R5및 R6이 수소인 것이 바람직하다.
이와 관련하여 구체적인 화합물은 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)]-N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-L-페닐알라닌; N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; 또는 4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-L-페닐알라닌이다.
본 발명의 화학식 Ib의 화합물의 다른 그룹에서:
[여기서, R1은 화학식 I에서 정의된 바와 같고, R3은 저급 알킬이고; R4는 수소, 퍼플루오로 저급 알킬 또는 저급 알킬이고, R5는 수소 또는 저급 알킬이고; R6은 수소, 저급 알킬, 저급 알킬카보닐옥시 저급 알킬, 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 P-3의 기 또는 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 P-4의 기이다], R2및R3이 저급 알킬이고; R4, R5및 R6이 수소인 것, 특히 R1이 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 Y-1의 기이고, 바람직하게는 식중 R22및 R23이 독립적으로 저급 알킬 또는 할로겐이고, R24가 수소이거나, R22및 R23이 독립적으로 수소 또는 할로겐이고 R24가 저급 알콕시인 것이 특히 바람직하다.
R2및 R3이 저급 알킬이고; R4, R5및 R6이 수소인 상기 문단의 화합물에서, R1이 탄소 원자를 통하여 아미드 카보닐에 결합된 5원 또는 6원 헤테로방향족 고리이되, 상기 고리가 N, O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택된 하나, 둘 또는 세 개의 헤테로원자를 함유하고, 상기 고리의 하나 또는 두 원자가 독립적으로 저급 알킬, 사이클로알킬, 할로겐, 시아노, 퍼플루오로알킬 또는 아릴에 의해 치환되며, 상기 치환된 원자중 하나 이상이 아미드 카보닐에 결합된 탄소 원자에 인접한 것이 또한 바람직하다.
R2및 R3이 저급 알킬이고; R4, R5및 R6이 수소인 두 문단 전의 화합물에서, R1이 화학식 I에서 정의된 바와 같은 화학식 Y-3의 기이고, 바람직하게는 식중 R25가 화학식 R26-(CH2)e-의 기이고, Q는 -(CH2)f-이되, 여기서 R26은 저급 알콕시이고, e는 0 내지 4의 정수이고, f는 0 내지 3의 정수, 바람직하게는 2인 것이 또한 바람직하다.
R2가 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴이고; R3이 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴이고; R4가 수소, 할로겐, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴인 화학식 I의 화합물의 다른 실시양태, 즉 구체적인 제2 실시양태에서, R1은 R22및 R23이 화학식 I에서 정의된 바와 같은 Y-1이다. 바람직하게는 R22및 R23이 독립적으로 저급 알킬 또는 할로겐이고; R24는 수소이거나, R22및 R23이 독립적으로 수소 또는 할로겐이고; R24가 저급 알콕시이다.
구체적인 제2 실시양태의 다른 양태에서, R1은 Y-2이다. 구체적인 제2 실시양태의 또다른 양태에서, R1은 Y-3으로서, 특히 식중 R25는 화학식 R26-(CH2)e-이고, Q는 -(CH2)f-이되, 여기서 R26은 저급 알콕시이고, e는 0 내지 4의 정수이고, f는 0 내지 3의 정수, 바람직하게는 2인 것이다.
구체적인 제2 실시양태의 더욱 특정한 양태에서, R2는 저급 알킬이고; R3은 저급 알킬이고; R4는 수소, 저급 알킬 또는 할로겐이고; R5는 수소이고 R6은 수소이다.
상기 더욱 특정한 양태의 바람직한 양태는 R4가 수소인 것이다. 이 바람직한 양태에서 R1은 화학식 I에서 정의된 바와 같은 Y-1로서, 특히 식중 R22및 R23은 독립적으로 저급 알킬 또는 할로겐이고; R24는 수소이거나, R22및 R23이 독립적으로 수소 또는 할로겐이고; R24가 저급 알콕시인 것이다. 이 바람직한 양태에서 R1은 또한 임의적으로 화학식 I에서 정의된 바와 같은 Y-2이거나 화학식 I에서 정의된 바와 같은 Y-3으로서, 특히 Y-3에서 R25가 화학식 R26-(CH2)e-의 기이고, Q는 -(CH2)f-이되, 여기서 R26은 저급 알콕시이고, e는 0 내지 4의 정수이고, f는 0 내지 3의 정수, 바람직하게는 2인 것이다.
추가로, 본 발명의 바람직한 실시양태는 화학식 I의 화합물이다:
화학식 I
상기 식에서,
R1은 화학식 Y-1의 기이고:
[여기서, R22및 R23는 독립적으로 수소, 저급 알킬, 저급 알콕시, 사이클로알킬, 아릴, 아릴알킬, 니트로, 시아노, 저급 알킬티오, 저급 알킬설피닐, 저급 알킬 설포닐, 저급 알카노일, 할로겐 또는 퍼플루오로 저급 알킬이되, R22및 R23중 하나 이상은 수소가 아니고; R24는 수소, 저급 알킬, 저급 알콕시, 아릴, 니트로, 시아노, 저급 알킬 설포닐 또는 할로겐이다]; R2는 저급 알킬이고; R3은 저급 알킬이고; R4는 수소 또는 저급 알킬이고; R5는 수소이고; R6은 수소이다.
본 발명의 상기 실시양태의 더욱 바람직한 양태는 상기 화학식 I의 화합물에서 R1이 화학식 Y-1의 기이고:
화학식 Y-1
[여기서, R22및 R23은 독립적으로 수소, 저급 알킬 또는 할로겐이고, R24는 수소 또는 저급 알콕시이다]; R2는 저급 알킬이고; R3은 저급 알킬이고; R4는 수소 또는 저급 알킬이고; R5는 수소이고; R6은 저급 알킬, 저급 알킬카보닐옥시 저급 알킬, 또는 바람직하게는 수소인 것이다.
본 발명의 다른 바람직한 실시양태는 상기 화학식 I의 화합물로서 식중 R1이 탄소 원자를 통해 아미드 카보닐에 결합된 5원 또는 6원 헤테로방향족 고리이고, 상기 고리가 N, O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택된 하나, 둘 또는 세 개의 헤테로원자이고, 상기 고리의 하나 또는 두 원자가 독립적으로 저급 알킬, 사이클로알킬, 할로겐, 시아노, 퍼플루오로알킬 또는 아릴에 의해 치환되고 상기 치환된 원자중 하나 이상이 아미드 카보닐에 결합된 탄소 원자에 인접해 있고; R2가 저급 알킬이고; R3이 저급 알킬이고; R4가 수소, 프플루오로 저급 알킬 또는 저급 알킬이고; R5가 수소이고; R6이 수소인 것이다.
본 발명의 다른 바람직한 실시양태는 상기 화학식 I의 화합물로서 식중 R1이 하기 화학식의 3원 내지 7원 고리인 화학식 Y-3의 기인 화합물이다:
화학식 Y-3
상기 식에서,
R25는 저급 알킬, 치환되지 않았거나 불소 치환된 저급 알케닐 또는 화학식 R26-(CH2)e-의 기이고, R26은 아릴, 헤테로아릴, 아지도, 시아노, 하이드록시, 저급 알콕시, 저급 알콕시카보닐, 저급 알카노일, 저급 알킬티오, 저급 알킬 설포닐, 저급 알킬 설피닐, 퍼플루오로 저급 알카노일, 니트로이거나, R26은 화학식 -NR28R29의 기(여기서, R28은 수소 또는 저급 알킬이고, R29는 수소, 저급 알킬, 저급 알콕시카보닐, 저급 알카노일, 아로일, 퍼플루오로 저급 알카노일아미노, 저급 알킬 설포닐, 저급 알킬아미노카보닐, 아릴아미노카보닐이거나; 또는 R28및 R29가, 그에 부착된 질소 원자와 함께, O, S 및 N-R40(여기서, R40은 H, 저급 알킬, 아릴, 저급 알카노일, 아로일 또는 저급 알콕시카보닐임)으로부터 선택된 하나의 추가적인 헤테로원자를 임의적으로 함유하는 4원, 5원 또는 6원 포화 헤테로사이클릭 고리를 형성함)이고, 상기 고리중의 탄소 원자는 치환되지 않았거나 저급 알킬 또는 할로겐으로 치환되고, Q는 -(CH2)fO-, -(CH2)fS-, -(CH2)fN(R27)-, (CH2)f-이되, 여기서 R27은 H, 저급 알킬, 아릴, 저급 알카노일, 아로일 또는 저급 알콕시카보닐이고, e는 0 내지 4의 정수이고, f는 0 내지 3의 정수이고; R2는 저급 알킬이고; R3은 저급 알킬이고; R4는 수소, 퍼플루오로 저급 알킬 또는 저급 알킬이고; R5는 수소이고; R6은 수소이다.
본 발명의 더욱 바람직한 양태는 상기 화학식 I의 화합물로서 식중 R1이 하기 화학식의 3원 내지 7원 고리인 화학식 Y-3의 기인 화합물이다:
화학식 Y-3
상기 식에서,
R25는 화학식 R26-(CH2)e-의 기이고, Q는 -(CH2)f-이되, 여기서 R26은 저급 알콕시이고, e는 0 내지 4의 정수이고, f는 0 내지 3의 정수이고; R2는 저급 알킬이고; R3은 저급 알킬이고; R4는 수소, 퍼플루오로 저급 일킬 또는 저급 알킬이고; R5는 수소이고; R6은 수소이다.
본 발명의 다른 측면은 하기 화학식 II의 화합물에 관한 것이다:
상기 식에서,
R2내지 R5는 화학식 I에서 정의된 바와 같고, P1및 P2는 각각 보호기이다. 더욱 특히, P1은 3급 부틸옥시-카보닐(Boc) 또는 카보벤질옥시기와 같은 표준 질소 보호기이고 P2는 저급 알킬 또는 치환된 저급 알킬과 같은 표준 카복시 보호기이다. 상기 화합물은 화학식 I의 화합물 제조의 유용한 중간체이다.
본 발명의 화합물은 순환 림프구, 호산구, 호염기구 및 단핵구("VLA-4-발현 세포") 상에서의 VCAM-1 및 피브로넥틴(fibronectin)의 VLA-4로의 결합을 억제한다. VCAM-1 및 피브로넥틴의 VLA-4로의 결합은 류머티스성 관절염, 다발성 경화증, 염증성 장 질환과 같은 일부 질환 상태와 관련이 있고, 특히 천식에서 발생하는 폐 염증의 원인이 되는 호산구의 기도 내피로의 결합에 관련이 있는 것으로 알려져 있다. 따라서, 본 발명의 화합물은 천식의 치료에 유용하다.
순환 림프구, 호산구, 호염기구 및 단핵구 상에서의 VCAM-1 및 피브로넥틴의 VLA-4로의 결합을 억제하는 능력을 바탕으로, 본 발명의 화합물은 특히 상기 결합과 관련되거나 상기 결합으로 매개되는 것으로 알려진 장애의 치료를 위한 약제 또는 약학 조성물로서 사용될 수 있다. 상기 장애의 예는 류머티스성 관절염, 다발성 경화증, 천식 및 염증성 장 질환이다. 본 발명의 화합물은 바람직하게는 천식과 같이 폐 염증을 포함하는 질환에 바람직하게 사용된다. 천식에서 발생하는 폐 염증은 천식-촉발 계기 또는 사건에 의해 활성화된 호산구, 단핵구 및 림프구의 활성과 및 폐 침윤과 관련된다.
게다가, 본 발명의 화합물은 VCAM-1 및 MadCAM가 림프구, 호산구 및 T-세포 상에서 발현되는 세포 수용체 α4-β7(일명 LPAM)에 결합되는 것을 또한 억제한다. 천식과 같은 염증성 조건에서 α4-β7의 다양한 리간드와의 상호작용의 정확한 역할은 완전히 이해되지는 않았지만, α4-β1 및 α4-β7 수용체 결합 둘 모두를 억제하는 본 발명의 화합물은 천식의 동물 모델에서 특히 효과적이다. 추가로 단일클론성 항체를 α4-β7에 대해 작용시킨 결과는 α4-β7의 MadCAM 또는 VCAM으로의 결합을 억제하는 화합물이 염증성 장 질환의 치료에 유용하다는 것을 시사한다. 또한, 상기 화합물은 상기 결합이 질환 손상 또는 증상의 원인으로서 관련된 다른 질환의 치료에도 유용하다.
본 발명의 화합물은 경구, 직장 또는 비경구적으로, 예컨대 정맥내, 근육내, 피하, 경막내 또는 경피 투여되거나, 경안구(opthalmalogical) 제제로서 투여되거나, 폐 염증의 경우 에어로졸로서 투여된다. 캡슐, 정제, 현탁액 또는 경구 투여를 위한 용액, 좌약, 주사 용액, 안약, 고약 또는 분무 용액이 투여 형태의 예이다.
정맥내, 근육내, 경구 또는 흡입 투여는 사용하기 바람직한 형태이다. 본 발명의 화합물이 효과적인 양으로 투여되는 투여량은 특정한 활성 성분의 성질, 환자의 연령 및 요구량 및 투약의 양식에 좌우된다. 투여량은 임의의 통상적인 방법, 예컨대 투여량-한정 임상 시험에 의해 결정될 수 있다. 따라서, 본 발명은 VLA-4-발현 세포로의 VCAM-1 또는 피브로넥틴의 결합이 질환 증후 또는 손상의 유발 인자인 질환을 앓는 호스트(host)에게 VLA-4-발현 세포로의 VCAM-1 또는 피브로넥틴의 결합을 억제하는데 충분한 양의 본 발명의 화합물을 투여함으로써 상기 증후 또는 손상이 감소되도록 치료하는 방법을 추가로 포함한다. 일반적으로, 약 0.1 내지 100mg/kg 체중/1일의 투여량이 바람직하고, 1 내지 25mg/kg 체중/1일의 투여량이 특히 바람직하고, 1 내지 10mg/kg 체중/1일의 투여량이 특별히 바람직하다.
다른 측면에서, 본 발명은 또한 약학적으로 유효한 양의 본 발명의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제 또는 약학 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 본 발명의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 상용성 약학 담체를 본초약적 투여 형태로 제조하는 것을 포함하는 약학 조성물의 제조방법에 관한 것이다. 상기 조성물은 임의의 통상적인 방법에 의해 조제될 수 있다. 정제 또는 과립은 일련의 결합제, 충전제, 담체 또는 희석제를 함유할 수 있다. 액체 조성물은 예를 들어 무균 수혼화성 용액의 형태일 수 있다. 캡슐은 활성 성분 외에 충전제 또는 농화제를 함유할 수 있다. 또한, 삼투압 조절을 위한 염, 완충액 및 다른 첨가제뿐만 아니라 보존, 안정화, 수분보유 및 유화제로서 사용되는 물질이외에 맛 개선용 첨가제가 또한 존재할 수 있다.
전술된 담체 물질 및 희석제는 임의의 통상적인 약학적으로 허용가능한 유기 또는 무기 물질, 예컨대 물, 젤라틴, 유당, 녹말, 마그네슘 스테아레이트, 활석, 아라비아 고무, 폴리알킬렌 글리콜 등을 포함할 수 있다.
정제 및 캡슐과 같은 경구 단위 투여 형태는 바람직하게는 본 발명의 화합물을 25mg 내지 1000mg 함유한다.
일반적으로, 본 발명의 화합물은 5-할로-2,4-디옥소피리미돈과의 팔라듐 촉매 반응을 통한 적당한 페닐알라닌 유도체로부터 제조될 수 있다.
반응식 1에 도시된 바와 같이, 화학식 1과 같은 4-요오도 또는 4-브로모 페닐알라닌 유도체는 보호된 페닐알라닌 유도체(2)로 전환되며, 여기서 R5'는 수소, 클로로, 저급 알킬 또는 저급 알콕시이고, P1은 Boc와 같은 표준 질소 보호기 또는 카보벤질옥시기이고 P2는 저급 알킬 또는 보호기로서 작용하도록 적절히 선택된 치환된 저급 알킬 또는 전구약물의 요소이다. P2기는 펩타이드 화학의 실시자에게 친숙한 통상적인 방법에 의해 도입될 수 있다. P1과 P2의 첨가 순서는 중요하지 않으며 시약의 구체적인 선택에 좌우된다. 보호기의 사용 및 도입에 관한 논의는 문헌[Theodora W. Greene and Peter G.M. Wuts.,Protecting Groups in OrganicSynthesis, Wiley Interscience, New York, 1991]에 제공되어 있다. 다르게는, 화학식 1의 화합물을 화학식 4의 화합물로 전환시킬 수 있으며, 여기서 R1'은 본 발명의 아실기의 성분을 나타낸다. 편리한 방법은 에스테르기(P2)를 먼저 도입한 후, 통상적인 펩타이드 커플링제, 예를 들어 HBTU를 디에틸이소프로필아민과 같은 3차 아민 염기의 존재하에 사용하여 유리 아민을 커플링 반응시키는 것이다. 또한, 시약의 구체적인 선택에 의해 R1' 및 P2의 도입 순서의 변경을 결정할 수 있다. 화학식 2 내지 4의 화합물이 유도체 3 또는 5로 전환되는 것(여기서, M은 치환된 주석 또는 붕소 원자를 나타낸다)은 팔라듐(0)의 존재하에 적당한 화학종, 예를 들어 헥사메틸이주석, 헥사부틸이주석 또는 테트라알콕시이붕소로 처리함으로써 수행될 수 있다. 방법론은 문헌[F. Diederich and P.J. Stang, ed, Metal Catalyzed Cross Coupling Reactions, Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 1998]에 개설되고 참조되어 있다.
화학식 6의 피리미딘-2,4-디온(우라실 유도체)(여기서, R4'은 수소, 저급 알킬 또는 퍼플루오로 저급 알킬이다)은 문헌에 잘 공지되었으며 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 화학식 7의 1,3-이치환된 피리딘-2,4-디온(여기서, R2' 및 R3'은 저급 알킬, 아릴 저급 알킬 또는 아릴이다)은 또한 공지된 화합물이며 표준 절차에 의해 제조될 수 있다. 상기 물질 구성의 합성 방법을 보고하는 논문은 문헌[Shigeo Senda, et al. Chem. Pharm. Bull. 1974, 22, 189-195, Chem Pharm Bull 1972, 20, 1389-1396, 및 Yasuo Morita, et al., Chem Comm. 1997, 359-360]을 포함한다. R2' 및 R3'이 저급 알킬 또는 아릴 저급 알킬인 경우, 화학식 7의 화합물은 탄산칼륨과 같은 염기 및 임의적으로 상전달 촉매의 존재하에 요오도메탄, 벤질브로마이드, 알릴 브로마이드와 같은 알킬화제로 처리함에 의한 화학식 6의 화합물의 알킬화에 의해 수득할 수 있다. 반응성이 적은 알킬화제를 사용하는 경우,알칼리 금속 하이드록사이드와 같은 더 강한 염기를 사용하고 반응 혼합물을 가열할 필요가 있다. 상기 정의된 화학식 6 또는 7의 화합물은 빙초산 또는 아세트산 수용액과 같은 적당한 용매중에서 브롬, N-요오도숙신이미드 또는 N-브로모숙신이미드와 같은 통상적인 할로겐화 시약으로 처리함으로써 5-위치가 할로겐화되어 화학식 8의 할로피리미딘이 수득된다(여기서, X는 Br 또는 I이고, R2' 및 R3'은 독립적으로 수소, 저급 알킬, 아릴 저급 알킬 또는 아릴이고, R4'는 수소, 저급 알킬 또는 퍼플루오로 알킬이다).
반응식 3에 도시된 바와 같이, 화학식 8의 화합물은 화학식 3 또는 5의 페닐알라닌 유도체와의 팔라딘 촉매된 커플링 반응에 사용될 수 있다. 예를 들어, M이 치환된 주석인 경우, 화학식 8의 화합물 및 화학식 3 또는 5의 페닐알라닌을 실온 내지 100℃의 온도에서 DMF와 같은 불활성 용매의 존재하에 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 또는 비스(트리페닐포스핀)팔라듐 디클로라이드와 같은 팔라듐(0) 공급원으로 처리함으로써 화학식 9 또는 10의 화합물이 수득된다. 구조식 9의 화합물은 보호기인 P1의 제거에 의해 구조식 10의 화합물로 전환될 수 있으며, 이는 P1의 선택에 좌우되는 통상적인 방법에 의해 완수될 수 있다. 예를 들어, P1은 Boc기인 경우 임의적으로 디클로로메탄과 같은 용매 및 스캐빈징제의 존재하에 트리플루오로아세트산과 같은 강산으로 처리함으로써 제거될 수 있다. 생성된 유리 아민은 이후 통상적인 펩타이드 커플링 기법을 사용하여 화학식 R1'CO2H의 산에 의해 아실화될 수 있다. 예를 들어, DMF와 같은 비양성자성 용매중에서 디에틸이소프로필아민과 같은 3차 아민 염기의 존재하에 HBTU로 처리함으로써 구조식 10의 화합물이 수득된다.
유리산(11)이 목적하는 최종 생성물인 경우, 에스테르기(P2)는 통상적인 방법에 의해 제거될 수 있다. 예를 들어, P2가 저급 알킬, 예를 들어 메틸인 경우, 적당한 용매, 예를 들어 임의적으로 가용성을 보조하기 위해 메탄올을 함유하는 THF 수용액중에서 알칼리 금속 수산화물, 예를 들어 수산화리튬으로 처리함으로써 제거될 수 있다. P2가 벤질 또는 치환된 벤질기인 경우, P2는 귀금속 촉매, 예를 들어 탄소 위의 팔라듐 위에서의 촉매성 수소화에 의해 또한 제거될 수 있다.
다르게는, 반응식 4에 도시된 바와 같이, 구조식 8의 화합물(여기서, X는 브로마이드 또는 요오다이드이다)은 화학식 12의 화학종(여기서, M'은 치환된 주석, 붕소 또는 아연 원자를 나타낸다)으로 전환될 수 있다. 주석 또는 붕소 유도체(M'이 치환된 주석 또는 붕소 원자를 나타낸다)의 경우, 전환은 팔라듐(0) 공급원의존재하에 적당한 화학종, 예를 들어 헥사메틸이주석, 헥사부틸이주석 또는 테트라알콕시이붕소로 처리함으로써 수행될 수 있다. 아연 유도체(12, M'=Zn(할로겐))의 형성을 위해서, 전환은 화학식 8의 화합물(X=I)을 적당한 불활성 용매, 예를 들어 디메틸아세트아미드중에서 실온 내지 100℃의 온도에서 전환이 완료될 때까지 활성화된 아연 금속의 공급원으로 처리함으로써 수행되며, 화학식 12의 화합물(M'=Zn(할로겐))이 수득된다. 화학식 12의 상기 화합물을 팔라듐(0) 공급원의 존재하에 화학식 4'(여기서, X'은 요오도, 브로모 또는 트리플루오로메틸설포닐옥시이다)의 4-치환된 페닐알라닌 유도체와 반응시켜 화학식 10'의 화합물을 수득할 수 있다. P2로 나타내는 에스테르기가 목적 화합물의 일부가 아닌 경우, 특정한 P2에 적절한 에스테르 가수분해 절차를 사용하여 제거할 수 있다. 예를 들어, P2가 저급 알킬, 예를 들어 메틸인 경우, 알칼리 금속 하이드록사이드, 예를 들어 수산화리튬을 사용하는 표준 염기 가수분해에 의해 제거될 수 있다. 상기 절차의 변형에서는, 커플링 반응에 의해 보호기를 전달하고, 나중에 그를 치환하는 것이 바람직할 수 있다. 이 경우, 화학식 2'의 화합물(여기서, P1'은 저급 알콕시카보닐 또는 벤질옥시카보닐이고 X'은 상기 정의한 바와 같다)을 구조식 12의 피리미딘디온과 커플링시켜 구조식 9'의 화합물을 수득할 수 있고, 이 화합물은 차례로 상기 반응식 3에서 설명된 일반적인 절차를 사용하여 본 발명의 화합물로 전환될 수 있다.
본 발명의 화합물로의 다른 루트는, R5'이 수소가 아닌 화합물에 특히 적용될 수 있는 반응식 5에 도시된 바와 같이, 화학식 14의 알데히드를 형성하는 것이다. 이는 화학식 12의 화합물을 화학식 13의 화합물(여기서, R5'은 저급 알킬 또는 저급 알콕시를 나타내고, X"은 트리플루오로메틸설포닐옥시 잔기의 요오다이드, 브로마이드를 나타내고, R8은 보호된 알콜 또는 알데히드를 나타낸다)과 반응시킴으로써 완수될 수 있다. 알콜의 경우, 적합한 보호기는 실릴 에테르, 벤질 에테르를 포함한다. 알데히드는 그의 아세탈 유도체로서 보호될 수 있다. 화학식 12의 화합물은 R8이 알콜인 경우 보호기 제거 단계 및 필요시 이후의 산화 단계를 포함하는 통상적인 단계에 의해 화학식 15의 알데히드로 전환될 수 있다. 알데히드로의 1차 벤질 알콜의 선택적 산화를 위한 통상적인 시약이 사용될 수 있으며, 예를 들어 불활성 용매중에서 활성화된 이산화망간으로 처리하는 것을 이용할 수 있다. R8이 보호된 알데히드를 나타내는 경우, 화학식 15의 알데히드로의 전환은 적당한 보호기 제거, 예를 들어 묽은 산을 이용한 아세탈의 가수분해에 의해 수행될 수 있다. 화학식 16의 데하이드로아미노산의 수득을 위한 15의 반응은 화학식 17의 비티히(Wittig) 시약(여기서, P1'은 저급 알콕시카보닐 또는 벤질옥시카보닐이고 P2는 상기 정의한 바와 같다)으로 처리함으로써 수행될 수 있다. 예를 들어 15를 적당한 염기, 예를 들어 테트라메틸구아니딘의 존재하에 (±)-N-(벤질옥시카보닐)-α-포스포노글리신 트리메틸 에스테르로 처리함으로써 직접적으로 화학식 16의 데하이드로아미노산(여기서, P2는 메틸이고, P1'은 벤질옥시카보닐이다)이 얻어진다. 화학식 16의 화합물의 L-아미소산(18)으로의 거울상선택성(enantioselective) 환원은 목적에 적합한 다수의 환원제, 예를 들어 최근에 기술된 에틸-DuPHOS 로듐 시약(문헌[Burk, M.J., Feaster, J.E.; Nugent, W.A.; Harlow, R.L.J. Am. Chem. Soc. 1993, 115, 10125] 참조)을 본질적으로 상기 문헌의 절차에 따라 사용함으로써 수행될 수 있다. 본 발명의 화합물로의 화학식 18의화합물의 추가적인 전환은 상기 논의된 일반적인 절차를 사용하여 수행될 수 있다.
한 실시양태에서, 구조식 11의 N-아실기(R1')는 2-치환된 벤조산으로부터 유도된다. 적당한 2-치환된 벤조산은 상업적으로 구입가능하거나 통상적인 방법에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어 오르토-치환된 아릴 요오다이드 또는 트리플레이트는 일산화탄소 및 적당한 팔라듐 촉매의 존재하에 카보닐화될 수 있다. 이러한 요오다이드 또는 트리플레이트 중간체의 제조는 목적하는 특정한 치환 양상에 좌우되며, 직접 요오드화에 의해, 또는 아닐린의 디아조화 이후에 요오드 공급원, 예를 들어 요오드화 칼륨으로 처리함으로써 수득될 수 있다. 트리플레이트는 상응하는페놀로부터 불활성 용매중에서 트리에틸아민 또는 디이소프로필에틸아민과 같은 염기의 존재하에 트리플루오로메탄 설폰산 무수물로 처리하는 등의 통상적인 방법에 의해 유도될 수 있다. 반응식 6에 도시된 바와 같이, 오르토-치환된 벤조산을 수득하는 다른 방법은 문헌[Meyers, A.I., Gabel, R., Mihelick, E.D,J. Org. Chem. 1978,43, 1372-1379]에 기술된 일반적 절차에 따라 화합물(19)(여기서, Z1및 Z2는 수소, 알킬, 클로로, 퍼플루오로알킬, 저급 알콕시이다)와 같은 2-메톡시페닐옥소졸린 유도체를 알킬 그리나드 시약으로 처리한 후 옥사졸린 고리를 가수분해하여 화학식 20의 산을 수득하는 것을 포함한다. 또한 2- 또는 2,6-이치환된 벤조니트릴이 상응하는 벤조산의 편리한 전구체로서 작용한다. 고도로 가려진(hindered) 니트릴, 예를 들어 2-클로로-6-메틸벤조니트릴의 경우, 산성 또는 염기성 조건하에서의 통상적인 가수분해는 곤란하며, 상응하는 벤즈알데히드로의 DIBAL 환원 이후에 크롬계 산화제를 사용하여 산화시킴으로써 더 좋은 결과가 얻어진다. 다른 방법은 첸(Chen) 등의 WO 99/10312호에 예시되어 있다.
이제 반응식 7을 참조하면, 화학식 23의 사이클릭산은 공지된 화합물이거나 표준 방법을 사용하여 제조될 수 있다. 치환된 알킬- 또는 사이클로알킬카복실산의 제조를 위해, 상기 산의 알칼리 금속 이음이온 또는 상응하는 에스테르의 단음이온을 사용하는 알킬화 반응을 이용할 수 있다. 예를 들어, 화학식 21의 사이클로알킬 카복실산 에스테르를 불활성 용매, 예를 들어 THF중에서 강염기, 예를 들어 리튬 디이소프로필아미드로 처리한 후 R41-Lv기(여기서, R41은 목적하는 측쇄, 예를 들어 치환된 벤질, 저급 알킬, 저급 알콕시 알킬, 아지도 저급 알킬 등을 나타내고, Lv는 브로마이드, 요오다이드, 메실레이트, 또는 에스테르 에놀레이트 알킬화 반응 관계자에게 공지된 유사한 기와 같은 이탈기를 나타낸다)를 첨가할 수 있다. 생성물 에스테르(22)는 적당한 용매, 예를 들어 알콜 수용액중에서 알칼리 금속 하이드록사이드를 사용하여 산(23)으로 가수분해될 수 있다. R41의 성질 및 최종 목표물질에 따라, 화합물(23)은 화합물(1)과 같은 아민에 커플링되어 목표물질로 직접 전환되거나 R41이 합성의 적당한 지점에서 추가로 조작될 수 있다. 예를 들어, R41이 아지도 저급 알킬 잔기인 경우, 아지드는 예를 들어 트리알킬 포스핀 시약을 사용하여 환원될 수 있고, 이후 생성물 아민을 알킬화, 아실화, 설포닐화 및 당해 분야의 숙련자에게 잘 공지된 관련 절차에 의해 작용화할 수 있다. R41이 이탈기, 예를 들어 말단 브롬 원자를 혼입하는 경우, 이 이탈기는 적절한 친핵성기, 예를 들어 나트륨 메틸 머캅타이드에 의해 치환되며, 이 경우 그 자체가 목적 생성물이거나 예를 들어 표준 반응 조건을 이용한 산화에 의해 추가로 조작되어 설폭사이드 또는 설폰이 될 수 있는 티오에테르가 수득된다. 본 발명의 화합물을 생성하는 중간체를 제조하는데 사용될 수 있는 다른 친핵성기는 시안화나트륨, 나트륨 메톡사이드, 나트륨 아지드, 모폴린 등을 포함한다. R41이 케탈기를 혼입하는 경우, 이 기는 합성중의 편리한 지점에서 가수분해되어 케토기를 제공할 수 있다. 차례로, 이 기는 예를 들어 알콜로의 환원 또는 옥심과 같은 옥심으로의 전환에 의해 추가로 조작될 수 있다.
본 방법의 방법을 화학식 23의 화합물 합성에 적용하는 예는 첸 등의 WO 99/10313호에 제공되어 있다. 일반적으로, R1이 Y-1인 화합물의 제조에 필요한 오르토-치환된 방향족 산은 첸 등의 WO 99/10312호에 예시된 바와 같이 제조될 수 있다.
화학식 28의 2-클로로-6-알킬벤조산(여기서, R43은 저급 알킬이다)의 합성을 위해서, 반응식 8에 기술된 절차가 특히 적합하다. 따라서, 화학식 24의 상업적으로 구입가능한 알데히드는 불활성 소수성 유기 용매, 예를 들어 헵탄중에서 부틸아민으로 처리함에 의해 이민(25)(여기서, R42는 저급 알킬, 바람직하게는 부틸이다)으로 전환된다. 생성된 화학식 25의 화합물을 불활성 용매, 예를 들어 THF중에서 과량의 그리나드 유도체(26)로 처리한 후, 마무리동안 산으로 처리하여 화학식 27의 알데히드를 수득한다. 화학식 28의 산으로의 화학식 27의 알데히드의 산화는 통상적인 방법, 예를 들어 아세토니트릴 수용액과 같은 적당한 용매중의 화학식 27의 알데히드의 용액을 실온 이하의 온도에서 아염소산 나트륨 및 30% 과산화수소로 처리함에 의해 수행될 수 있다.
합성 말기에 에스테르 잔기를 도입하는 것이 더 편리하기 때문에 본 발명의 화합물의 전구약물 에스테르를 제조하는 것이 바람직할 수 있다. 이 목적을 위해서, 카복실산으로부터 에스테르를 형성하는 다양한 통상의 기법이 사용될 수 있다. 유용할 수 있는 전형적인 방법은 산, 예를 들어 염산의 존재하에 알콜을 카복실산으로 커플링하는 것이며, 이 절차는 피셔(Fisher) 에스테르화로 통상적으로 공지되어 있다. 다르게는, 카복실산과 알콜 사이의 디이미드 중개된 커플링을 임의적으로 4,4-디메틸아미노피리딘과 같은 촉진제와 함께 사용할 수 있다. 전형적인 디이미드는 디사이클로헥실카보디이미드이다. 다른 대안은 카복실산을 염기, 예를 들어 중탄산나트륨 및 불활성 용매, 예를 들어 DMF의 존재하에 반응성 알킬 할라이드, 예를 들어 알킬 요오다이드 또는 아실옥시메틸 클로라이드로 처리하는 것이다. 방법의 구체적인 선택은 카복실산 및 목적하는 에스테르 잔기의 구체적인 조합의 성질에 의해 결정되며 당해 분야의 숙련자에게 명확할 것이다. 전구약물을 구성할수 있는 에스테르기는 합성중 임의의 편리한 지점에서 도입될 수 있다. 예를 들어 화학식 1에서 P2기는 목적하는 전구약물 에스테르를 나타낼 수 있고 최종 생성물에 보유될 수 있다.
하기 실시예는 본 발명을 설명하기 위함이고, 어떠한 방식으로도 본 발명을 제한하고자 하는 것은 아니다.
일반적인 방법
융점은 토마스-후버(Thomas-Hoover) 장치상에서 측정되고, 보정되지 않았다. 광회전은 퍼킨-엘머(Perkin-Elmer) 모델 241 편광계를 사용하여 측정되었다.1H-NMR 스펙트럼은, 내부 표준물질로서 테트라메틸실란(TMS)을 사용하여, 배리언(Varian) XL-200, 메커리(Mecury)-300 또는 우니티플러스(Unityplus) 400 MHz 분광계를 사용하여 기록되었다. 전자 충격(EI, 70ev) 및 고속 원자 충격(FAB) 질량 스펙트럼은 VG 오토스펙 또는 VG 70E-HF 질량 분광계 상에서 측정되었다. 컬럼 크로마토그래피용 실리카 겔은 플래시 크로마토그래피용 말린크로트 실리카르(Mallinkrodt SiliCar) 230-400 메시 실리카 겔이고; 컬럼은 유동을 돕기 위해서 0 내지 5psi 질소 헤드하에 실시되었다. 박층 크로마토그래피는 메르크사(E. Merck # 1.05719)에 의해 공급되는 실리카 겔로 코팅된 유리 박층 플레이트 상에서 실시되고, I2증기에 노출시켜 뷰 박스(view box)에서 254nm의 UV광에서 봄으로써, 또는 수성 에탄올 중 포스포몰리브드산(PMA), 또는 Cl2에 노출시킨 후 문헌[E. Von Arx, M. Faupel and M Brugger,J. Chromatography, 1976, 120, 224-228]에 따라 제조된 4,4'-테트라메틸디아미노디페닐메탄 시약으로 분무함으로써 시각화되었다.
역상 고압 액체 크로마토그래피(RP-HPLC)는, 35 내지 40분에 걸쳐 아세토니트릴:물(각각 0.75%의 TFA를 함유함), 전형적으로는 5 내지 95%의 아세토니트릴의 구배를 이용하고 49mL/분의 흐름하에 41.4x300mm, 8μM 다이나맥스(등록상표, Dynamax) C-18 컬럼을 이용한 레이닌(Rainin) HPLC를 사용하여 수행되었다. HPLC 조건은 전형적으로 형식 (5-95-35-214)으로 기술되며, 이는 214nM의 파장에서 UV 검출기로 유출물을 모니터링하면서, 35분동안에 걸친 물 중 5 내지 95%의 아세토니트릴의 선형 구배를 나타낸다.
메틸렌 클로라이드(디클로로메탄), 2-프로판올, DMF, THF, 톨루엔, 헥산, 에테르 및 메탄올은 피셔(Fisher)사 또는 베이커(Baker)사의 시약 등급으로서 추가의 정제없이 사용되었고, 예외적으로, 아세토니트릴은 피셔사 또는 베이커사의 hplc 등급으로서 그대로 사용되었다.
본원에서 사용된 정의:
THF는 테트라하이드로푸란이고,
DMF는 N,N-디메틸포름아미드이고,
DMA는 N,N-디메틸아세트아미드이고,
HOBT는 1-하이드록시벤조트리아졸이고,
BOP는 [(벤조트리아졸-1-일)옥시]트리스-(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트이고,
HATU는 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트이고,
HBTU는 O-벤조트리아졸-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트이고,
DIPEA는 디이소프로필에틸아민이고,
DMAP는 4-(N,N-디메틸아미노)피리딘이고,
DPPA는 디페닐포스포릴 아지드이고,
DPPP는 1,3-비스(디페닐포스피노)프로판이고,
DBU는 1,8-디아자비사이클로[5.4.0]운데크-7-엔이고,
NaH는 나트륨 하이드라이드이고,
염수는 포화 염화나트륨 수용액이고,
TLC는 박층 크로마토그래피이고,
LDA는 리튬 디이소프로필아미드이고,
BOP-Cl은 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스핀산 클로라이드이고,
NMP는 N-메틸피롤리디논이고,
라웨슨(Lawesson) 시약은 [2,4-비스(4-메톡시페닐)-1,3-디티아-2,4-디포스페탄-2,4-디설파이드]이고,
NIS는 N-요오도숙신산 무수물이다.
비오티지(Biotage) 컬럼 상의 실리카 겔 크로마토그래피는, 예비팩킹된 40g(40s 컬럼), 90g(40m 컬럼) 또는 800g(75m 컬럼)을 이용한 디액스 코포레이션(Dyax Corporation)의 비오티지 디비젼(Biotage Division)사에 의해 공급되는 플래시 크로마토그래피 시스템의 사용을 의미한다. 10 내지 15psi의 질소 압력하에 헥산-에틸 아세테이트 혼합물을 사용하여 용리가 수행된다.
실시예 1
N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-[(트리부틸)스탄닐]-L-페닐알라닌 메틸 에스테르
톨루엔(50ml) 중 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-요오도-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(5.3g, 13mmol) 및 헥사부틸디틴(27.5ml, 54mmol)의 용액은, 진공하에 액체 질소 욕에서 혼합물을 결빙시키고 아르곤하에 해동시키는 것을 교대로 반복(3회)함으로써 탈산소화하였다. 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(280mg, 0.22mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 환류하에 45분동안 가열함에 따라 색이 황색에서 흑색으로 변하였다. TLC(1:6 에틸 아세테이트:헥산)로 일부 출발물질인 요오다이드의 존재를 확인하고, 추가의 촉매(140mg, 0.11mmol)를 첨가하였다. 환류를 1시간동안 계속하였다. 혼합물을 냉각하고, 농축시켰다. 잔류물을 헥산(200ml)및 트리에틸아민(30ml)에 용해시키고, 30분동안 교반하고, 여과하였다. 여액을 농축시키고, 150g의 실리카 겔을 함유한 무수 실리카 겔 컬럼을 통해 헥산, 이어서 1:6의 에틸 아세테이트:헥산으로 용리시켜 크로마토그래피하여 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-[(트리부틸)스탄닐]-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(5.7g, 77%)를 투명 오일로서 수득하였다. LR(+)LSIMS(C27H47NO4Sn): m/z 1081(2M-C4H9) 570(M+H).
실시예 2
N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌
a) 5-요오도 우라실의 제조
메탄올(120ml) 중 우라실(28.6mmol, 3.2g) 및 요오드 모노클로라이드(49.2mmol, 7.988g)의 혼합물을 40시간동안 환류시켰다. 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 에탄올:물(1:1, 150ml)로부터 결정화하고, 냉장고에서 3시간동안 저장하였다. 생성된 침상물을 여과에 의해 수거하고, 에탄올:물(1:1 혼합물, 50ml), 물(30ml), 헥산(30ml)으로 세척하고, 공기중에서 건조시켜 5-요오도 우라실을 백색 침상물로서 5.47g(80%) 수득하였다(mp 278-282℃, Lit. 274-276℃,Synthetic communication1988, 18, 855-867). EI-HRMS m/e C4H3IN2O2(M+)에 대한 계산치 237.9239, 측정치 237.9244.
b) 1,3-디메틸-5-요오도 우라실의 제조
DMF(188ml) 중 5-요오도 우라실(22.2mmol, 5.28g) 및 분말 탄산칼륨(60mmol, 10.3g)의 혼합물을 실온에서 24시간동안 교반한 후, 메틸 요오다이드(53.5mmol, 3.33ml)를 첨가하였다. 그다음, 반응 혼합물을 실온에서 추가 72시간동안 교반하고 물(150ml) 및 에틸 아세테이트(150ml)에 부었다. 층분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트(2x100ml)로 추출하였다. 모아진 추출액을 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 용매를 농축시켜 조질 고형물을 수득하고, 에탄올:물(3:1, 150:50ml)로부터 결정화하고, 냉장고에서 하룻밤동안 저장하였다. 고형물을 여과에 의해 수거하고, 에탄올:물의 혼합물(3:1, 120ml), 물(30ml), 헥산(30ml)으로 세척하고, 진공하에 건조시켜 1,3-디메틸-5-요오도 우라실을 백색 침상물로서 4.61g(78%) 수득하였다(mp 226-228℃, Lit. 225-227℃,Synthetic communication1988, 18, 855-867). EI-HRMS m/e C6H7IN2O2(M+)에 대한 계산치 266.0021, 측정치 266.0023.
c) N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-[1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)]-L-페닐알라닌 메틸 에스테르
THF(3.0ml) 중 아연 분말(30mmol, 2.0g)의 현탁액에 실온에서 1,2-디브로모에탄(2.0mmol, 0.174ml)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 에틸렌 기체의 발생이 멈출때까지(관찰됨) 가열기로 60 내지 65℃까지 가열하였다. 상기 처리를 3번 반복하였다. 그다음, 현탁액을 실온으로 냉각하고, 트리메틸클로로실란(1.0mmol, 0.15ml)을 첨가하고, 혼합물을 10분동안 교반하였다. THF(3.0ml) 및 DMA(10ml) 중 5-요오도-1,3-디메틸우라실(11.0mmol, 2.92g)의 고온(요오도 화합물은 용매에 매우 가용성이아니고, 실온으로 냉각시 침전됨) 용액을 아연 현탁액에 첨가하였다. 첨가 후, 혼합물을 73℃로 가열하였다. 반응 혼합물의 내부 온도가 발열반응으로 인해 77 내지 78℃까지 올라갔다. 반응 혼합물을 73℃의 욕 온도에서 1.5시간동안 교반한 후, 실온으로 냉각하고, 추가의 1.5시간동안 교반하였다. 혼합물의 0.25ml 분취액의 가수분해물의1H-NMR로 출발물질의 존재를 확인하였고, 혼합물의 0.25ml 분취액을 요오도화하여 다시 요오다이드를 생성하였다. 반응 혼합물을 70℃로 가열하고, 추가의 30분동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각한 후 THF(5ml)로 희석시키고, 과량의 아연을 30 내지 60분동안 가라앉혔다.
상기와 같이 제조된 아연 화합물(5.5mmol)을 실온에서 THF(10ml) 중 Pd(dba)2(0.07mmol, 40mg), 트리푸릴포스핀(TFP)(0.26mmol, 66.6mg) 및 Boc-4-요오도-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(4.5mmol, 1.823g)의 현탁액에 첨가하고, 밝은 황색 혼합물을 15시간동안 교반하였다. 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고, 에틸 아세테이트(3x50ml)로 추출하였다. 모아진 여액을 염수로 세척하고 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 용매를 농축시켜 조질 생성물을 수득하고, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-[1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)]-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 백색 고형물로서 0.80g(43%) 수득하였다: mp 65-69℃. EI-HRMS m/e C21H27N3O6(M+)에 대한 계산치 418.1978, 측정치 418.1965.
d) 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
디옥산(5ml) 중 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(1.94mmol, 0.811g) 용액을 실온에서 디옥산 중 4.0N의 염산(5ml, 20mmol)으로 처리하고, 용액을 0.5시간동안 교반하였다. 이때, 밝은 황색 침전물이 천천히 형성되었다. 고형물을 여과에 의해 수거하고, 헥산으로 세척하여 412mg(60% 수율)을 수득하였다(mp 187-193℃). 모액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 디클로로메탄으로 분쇄하였다. 일부 출발물질을 함유한 수거된 고형물을 모아 메탄올에 용해시켰다. 메탄올 대부분을 증발시키고, 디클로로메탄을 첨가하여 침전물을 형성시켰다. 고형물을 수거하고, 건조시켜 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(mp 187-193℃)을 330mg(48%) 수득하였다. EI-HRMS m/e C16H19N3O4(M+H)에 대한 계산치 318.1454, 측정치 318.1447.
e) N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
DMF(4ml) 중 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(0.5mmol, 0.180g),2-클로로-6-메틸벤조산(0.55mmol, 0.084g) 및 HBTU(0.6mmol, 0.227g)의 현탁액에 실온에서 디이소프로필에틸아민(3.0mmol, 0.52ml)을 첨가하였다. 1분 후, 이들 모두는 용액으로 되고, 황색 투명한 용액을 실온에서 15시간동안 교반하였다. 이때, 갈색으로 변한 용액을 에틸 아세테이트(25ml)로 희석시켰다. 에틸 아세테이트 층을 물(2x20ml), 포화 중탄산나트륨 용액(25ml) 및 염수(25ml)로 연속해서 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 용매를 농축시켜 조질 생성물을 수득하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 백색 고형물로서 151.5mg(72% 수율) 수득하였다: mp 155-157℃. EI-HRMS m/e C24H24N3O5Cl(M+)에 대한 계산치 470.1483, 측정치 470.1484.
f) N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
에탄올(4ml) 중N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.278mmol, 131mg)의 현탁액에 실온에서 1.0N 수산화나트륨 수용액(3ml)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 40 내지 45℃로 가열하고, 생성된 투명 용액을 2 내지 3시간동안 교반하였다. 에탄올을 감압하에 제거하고, 잔류물을 물(20ml) 및 NaOH(3ml, 1.0N)로 희석시켜 나트륨 염을 용해시켰다. 수용액을 에테르(50ml)로 세척하고, 임의의 중성 불순물을 제거하였다. 수성층을 1.0N HCl로 산성화하고, 생성물을 에틸 아세테이트(2x50ml)로 추출하였다. 모아진 유기 추출액을 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 여액을 농축시켜 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌을 백색 고형물로서 107mg(85%) 수득하였다: mp 234-236℃. EI-HRMS m/e C23H22N3O5Cl(M+H)에 대한 계산치 456.1326, 측정치 456.1326.
실시예 3
4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-L-페닐알라닌의 제조
4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)]-N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]-카보닐]-L-페닐알라닌은 실시예 2에 기술된 일반적인 방법을 이용하여 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)]-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 1-(2-메톡시에틸)사이클로펜탄 카복실산(WO 9910312 참조)으로부터 제조하였다. EI-HRMS m/e C24H31N3O5(M+H)에 대한 계산치 458.2292, 측정치 458.2279.
실시예 4
N-[(2-브로모-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
N-[(2-브로모-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌은 실시예 2에 기술된 일반적인 방법을 이용하여 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 및 2-브로모-6-메틸벤조산으로부터 제조하였다. EI-HRMS m/e C23H22N3O5Br(M+H)에 대한 계산치 500.0822, 측정치 500.0825.
실시예 5
N-[(2-브로모-6-메톡시페닐)카보닐]-4-[1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐]-L-페닐알라닌의 제조
N-[(2-브로모-6-메톡시페닐)카보닐]-4-[1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐]-L-페닐알라닌은 실시예 2에 기술된 일반적인 방법을 이용하여 4-[1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐]-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 2-브로모-5-메톡시벤조산으로부터 제조하였다. EI-HRMS m/e C23H22N3O6Br(M+H)에 대한 계산치 516.0770, 측정치 516.0780.
실시예 6
N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌
a) 5-요오도-1,3,6-트리메틸 우라실의 제조
DMF(188ml) 중 5-요오도-6-메틸 우라실(22.18mmol, 5.58g) 및 분말 탄산칼륨(60mmol, 8.29g)의 혼합물을 실온에서 24시간동안 교반한 후, 메틸 요오다이드(90.6mmol, 3.33ml)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 추가 76시간동안 교반하고, 물(150ml) 및 에틸 아세테이트(150ml)에 부었다. 층분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트(2x100ml)로 추출하였다. 모아진 추출액을 염수(150ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고 용매를 농축시켜 조질 고형물을 수득하고, 에탄올:물(3:1, 150:50ml)로 결정화하고, 냉장고에서 하룻밤동안 저장하였다. 고형물을 여과에 의해 수거하고, 에탄올:물(3:1, 120ml), 물(30ml), 헥산(30ml)으로 세척하고, 진공하에 건조시켜 5-요오도-1,3,6-트리메틸 우라실을 백색 고형물로서 5.8g(93% 수율) 수득하였다: mp 155-157℃. EI-HRMS m/e 계산치 C7H9IN2O2(M+)에 대한 279.9709, 측정치 279.9709.
b) N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
THF(26.0ml) 중 아연 분말(800mmol, 52.29g)의 현탁액에 실온에서 1,2-디브로모에탄(53.2mmol, 4.58ml)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 에틸렌 기체의 발생이 멈출때까지(관찰됨) 가열기로 60 내지 65℃로 가열하였다. 상기 현탁액을 실온으로 냉각하고, 트리메틸클로로실란(26.6mmol, 3.38ml)을 첨가하고, 혼합물을 15분동안 교반하였다. DMA(225ml) 중 5-요오도-1,3,6-트리메틸 우라실(266mmol, 74.6g)의 현탁액을 가온하여 투명한 용액을 수득하고, 조금씩 반응 혼합물에 첨가하였다. 첨가 후, 혼합물을 70℃로 가열하였다. 반응 혼합물의 내부 온도는, 발열반응으로 인해 80 내지 85℃까지 올라갔다. 반응 혼합물을 70℃에서 3 내지 4시간동안 교반하고, 이때 포화 염화암모늄으로 반응정지시켰던 분취액을 TLC로 확인하여 출발물질의 부재를 확인하였다. 반응 혼합물을 THF(140ml)로 희석시키고, 실온으로 냉각하고, 과량의 아연 분말을 2 내지 3시간에 걸쳐 가라앉혔다.
아연 화합물(266mmol)을 함유한 상기 용액을 실온에서 THF(280ml) 중 Pd(dba)2(8mmol, 4.6g), 트리-o-톨릴포스핀[P(Tol)3](29.6mol, 9.0g) 및 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-요오도-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(186mmol, 75.56g)의 용액에 첨가하고, 밝은 황색 혼합물을 50 내지 55℃의 온도에서 48시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(3x750ml). 모아진 추출액을 염수(1.5L)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 농축시켜 조질 생성물을 수득하고, 비오티지(75m) 컬럼을 사용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 무정형 백색 고형물로서 57.88g(72% 수율) 수득하였다. EI-HRMS m/e C22H29N3O6(M+)에 대한 계산치 431.2056, 측정치 431.2054.
c) 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염의 제조
상기 수득된 고형물인 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(17.15mmol, 7.4g)의 일부를 실온에서 디옥산 중 4N 염산(68mmol, 17ml)으로 처리하고, 용액을 1시간동안 교반함에 따라 백색 침전물이 형성되었다. 혼합물을 디에틸 에테르로 희석하고, 상청액을 가만히 따르고, 잔류물을 먼저 회전 증발기로, 그다음 진공하에 건조시켜 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염을 무정형 황색 고형물로서 6.28g(99% 수율) 수득하였다. FAB-HRMS m/e C17H21N3O4(M+H)에 대한 계산치 332.1610, 측정치 332.1617.
d) N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
디클로로메탄(40ml) 중 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(3.12mmol, 1.15g) 및 2,6-디클로로벤조일 클로라이드(3.51mmol, 0.735g)의 현탁액에 실온에서 디이소프로필에틸아민(9.36mmol, 1.63ml)을 첨가하였다. 1분 후, 이들 모두는 용액으로 되고, 투명한 황색 용액을 실온에서 20시간동안 교반하였다. 생성된 갈색 용액을 디클로로메탄(50ml)으로 희석시켰다. 디클로로메탄 층을 1N 염산(2x50ml), 포화 중탄산나트륨 용액(50ml) 및 염수(50ml)로 연속해서 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 용매를 농축시켜 조질 생성물을 수득하고, 비오티지(40m) 컬럼을 사용한 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 무정형 백색 고형물로서 1.46g(93% 수율) 수득하였다. FAB-HRMS m/e C24H23Cl2N3O5(M+H)에 대한 계산치 504.1093, 측정치 504.1083.
e) N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
에탄올(12ml) 중 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(2.2mmol, 1.11g)의 현탁액에 실온에서 1.0N 수산화나트륨 수용액(8.8ml)을 첨가하였다. 혼합물을 45 내지 50℃까지 가열하고, 생성된 투명 용액을 약 2시간동안 교반하였다. 에탄올을 감압하에 제거하고, 잔류물을 물(50ml) 및 NaOH(5ml, 1.0N)로 희석시키고, 나트륨 염을 용해시켰다. 수용액을 디에틸 에테르(50ml)로 세척하여 임의의 중성 불순물을 제거하였다. 수성층을 1.0N HCl로 산성화하고, 생성물을 에틸 아세테이트(2x75ml)로 추출하였다. 모아진 유기 추출액을 염수(100ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 여액을 농축시켜 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌을 백색 고형물로서 970mg(90% 수율) 수득하였다: mp 225-227℃. FAB-HRMS m/e C23H21Cl2N3O5(M+H)에 대한 계산치 490.0937, 측정치 490.0940.
실시예 7
N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌
a) N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
DMF(2ml) 중 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(0.4mmol, 173mg), HBTU(0.5mmol, 189mg) 및 1-(2-메톡시에틸)사이클로펜탄 카복실산(0.5mmol, 86mg)의 현탁액에 실온에서 디이소프로필에틸아민(1.2mmol, 0.29ml)을 첨가하였다. 5분 후, 이들 모두는 용액으로 되고, 투명한 황색 용액을 실온에서 24시간동안 교반하였다. 생성된 어두운 갈색 용액을 에틸 아세테이트(30ml)로 희석시켰다. 에틸 아세테이트 층을 1N 염산(2x30ml), 포화 중탄산나트륨 용액(30ml) 및 염수(30ml)로 연속해서 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 용매를 농축시켜 조질 생성물을 수득하고, 비오티지(40m) 컬럼을 사용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 무정형 백색 고형물로서139mg(72% 수율) 수득하였다. FAB-HRMS m/e C26H35N3O6(M+H)에 대한 계산치 486.2604, 측정치 486.2602.
b) N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
에탄올(3ml) 중 N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.273mmol, 133mg)의 현탁액에 실온에서 1.0N 수산화나트륨 수용액(1.5ml)을 첨가하였다. 혼합물을 40 내지 45℃까지 가열하고, 생성된 투명 용액을 약 15시간동안 교반하였다. 에탄올을 감압하에 제거하고, 잔류물을 물(25ml) 및 NaOH(3ml, 1.0N)로 희석시키고, 나트륨 염을 용해시켰다. 수용액을 디에틸 에테르(50ml)로 세척하여 임의의 중성 불순물을 제거하였다. 수성층을 1.0N HCl로 산성화하고, 생성물을 에틸 아세테이트(2x25ml)로 추출하였다. 모아진 유기 추출액을 염수(50ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 여액을 농축시켜 N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌을 무정형 백색 고형물로서 121mg(94% 수율) 수득하였다. FAB-HRMS m/e C25H33N3O6(M+H)에 대한 계산치 472.2448, 측정치 472.2467.
실시예 8
N-[(2-브로모-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
N-[(2-브로모-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌은 실시예 7에 기술된 일반적인 방법을 이용하여 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 2-브로모-5-메틸벤조산으로부터 제조하고, 백색 고형물로서 수득하였다: mp 240-242℃. FAB-HRMS m/e C24H24BrN3O5(M+H)에 대한 계산치 514.0978, 측정치 514.0965.
실시예 9
N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌은 실시예 7에 기술된 일반적인 방법을 이용하여 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 2-클로로-6-메틸벤조산으로부터 제조하고, 백색 고형물로서 수득하였다: mp 238-240℃. FAB-HRMS m/e C24H24ClN3O5(M+H)에 대한 계산치 470.1483, 측정치 470.1489.
실시예 10
N-[(2-에틸-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
N-[(2-에틸-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌은 실시예 7에 기술된 일반적인 방법을 이용하여 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 2-에틸-6-메틸벤조산으로부터 제조하고, 백색 고형물로서 수득하였다: mp 127-133℃. ES-HRMS m/e C26H29N3O5(M+Na)에 대한 계산치 494.1498, 측정치 494.1501.
실시예 11
N-[[2-(2-메틸에틸)-6-메틸페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
N-[[2-(2-메틸에틸)-6-메틸페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌은 실시예 7에 기술된 일반적인 방법을 이용하여 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 2-(2-메틸에틸)-6-메틸벤조산으로부터 제조하고, 무정형 백색 고형물로서 수득하였다. ES-HRMS m/e C27H31N3O5(M+Na)에 대한 계산치 500.2156, 측정치 500.2160.
실시예 12
N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌은 실시예 7에 기술된 일반적인 방법을 이용하여 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 2,6-디플루오로벤조산으로부터 제조하고, 무정형 백색 고형물로서 수득하였다. ES-HRMS m/e C23H21F2N3O5(M+Na)에 대한 계산치 480.1483, 측정치 480.1489.
실시예 13
N-[[2-플루오로-6-(트리플루오로메틸)페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
N-[(2-플루오로-6-(트리플루오로메틸)페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌은 실시예 7에 기술된 일반적인 방법을 이용하여 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 2-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조산으로부터 제조하고, 백색 고형물로서 수득하였다: mp 218-220℃. ES-HRMS m/e C25H23F4N3O5(M+Na)에 대한 계산치 530.1310, 측정치 530.1317.
실시예 14
N-[[2,6-디-(2-메틸에틸)페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
N-[[2,6-디-(2-메틸에틸)페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌은 실시예 7에 기술된 일반적인 방법을 이용하여 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 2,6-디-(2-메틸에틸)벤조산으로부터 제조하고, 무정형 백색 고형물로서 수득하였다. ES-HRMS m/e C29H35N3O5(M+Na)에 대한 계산치 530.1310, 측정치 530.1317.
실시예 15
N-[(2-클로로-6-에틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌
a) N-(2-클로로-6-플루오로벤질리딘)부틸 아민의 제조(Ro 50-5007/000, 30935-229)
헵탄(200ml) 중 2-클로로-6-플루오로벤즈알데히드(416mmol, 66g)의 현탁액에 실온에서 n-부틸아민(460mmol, 45.5ml)을 첨가하였다. 첨가 후, 고체가 완전히 용해됨에 따라 발열반응이 일어났다. 용액을 실온에서 3시간동안 교반하고, 분리 깔대기에 옮기고, 염수(200ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 농축시켜 황색 오일을 수득하고, 진공하의 증류(bp 95-98℃/4.5mmHg)에 의해 정제하여 N-(2-클로로-6-플루오로벤질리딘)부틸 아민을 황색 오일로서 86.31g(97% 수율) 수득하였다. EI-HRMS m/e C11H13ClFN(M+)에 대한 계산치 213.0720, 측정치 213.0714.
b) 2-클로로-6-에틸벤즈알데히드의 제조
THF(20ml) 중 N-(2-클로로-6-플루오로벤질리딘)부틸 아민(15mmol, 3.21g)의 용액에 THF 중 에틸마그네슘 브로마이드(30mmol, 30ml, 1M)의 용액을 5 내지 15℃의 온도로 유지하면서 적가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 20℃로 가온하고, 5시간동안 교반하였다. 그다음, 0℃(빙욕)로 냉각하고, 물 중 20% HCl(50ml)을 빙욕에서 냉각하면서 15℃ 미만의 온도로 유지하면서 적하였다. 첨가 후, 혼합물을 실온으로 가온하고, 15시간동안 교반하였다. 그다음, 물(75ml)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2x50ml)로 추출하였다. 모아진 추출액을 염수(100ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 농축시켜 2-클로로-6-에틸벤즈알데히드를 황색 오일로서 2.27g(90% 수율) 수득하였다. EI-HRMS m/e C9H9ClO(M+)에 대한 계산치 167.0264, 측정치 167.0263.
c) 2-클로로-6-에틸벤조산의 제조
아세토니트릴(25ml) 중 2-클로로-6-에틸벤즈알데히드(13.5mmol, 2.27g)의 실온 현탁액에 물(7.5ml) 중 1염기 인산나트륨(3.4mmol, 0.465g)의 용액을 첨가하고, 이어서 과산화수소(1.8ml, 30%)를 첨가하였다. 그다음, 온도를 3℃ 미만으로 유지하면서 물(20ml) 중 나트륨 클로라이트(23.7mmol, 2.15g)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 첨가 후, 황색 현탁액을 0℃ 내지 실온에서 15시간동안 교반하였다. 이때, 혼합물의 TLC 분석으로 출발물질의 부재를 확인하였다. 그다음, 황색이 사라질때까지(KI-페이퍼 양성), 물(10ml) 중 나트륨 비설파이트 용액(20.5mmol, 2.8g)을 0℃에서 적가하였다. 발열반응을 조절하기 위해서 냉각은 필수적이다. 1시간 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 중성 불순물을 디에틸 에테르(200ml)로 추출하였다. 그다음, 염기성 수용액을 10% HCl을 사용하여 중화시켜 pH 약 1까지 만들었다. 침전된 백색 고형물을 여과에 의해 수거하고, 공기중에서 건조시켜 2-클로로-6-에틸벤조산을 무정형 백색 고형물로서 2.415g(97% 수율) 수득하였다. EI-HRMS m/e C9H9ClO2(M+)에 대한 계산치 184.0291, 측정치 184.0295.
d) N-[(2-클로로-6-에틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
DMF(2ml) 중 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(0.5mmol, 184mg), HBTU(0.7mmol, 265mg) 및 2-클로로-6-에틸벤조산(0.7mmol, 129mg)의 현탁액에 실온에서 디이소프로필에틸아민(1.25mmol, 0.22ml)을 첨가하였다. 5분 후, 이들 모두는 용액으로 되고, 투명한 황색 용액을 실온에서 15시간동안 교반하였다. 생성된 어두운 갈색 용액을 에틸 아세테이트(30ml)로 희석시켰다. 에틸 아세테이트 층을 1N 염산(2x30ml), 포화 중탄산나트륨 용액(30ml) 및 염수(30ml)로 연속해서 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 용매를 농축시켜 조질 생성물을 수득하고, 비오티지(40m) 컬럼을 사용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N-[(2-클로로-6-에틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 무정형 백색 고형물로서 175mg(70% 수율) 수득하였다. ES-HRMS m/e C26H28ClN3O5(M+Na)에 대한 계산치 520.1611, 측정치 520.1613.
e) N-[(2-클로로-6-에틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
에탄올(2ml) 중 N-[(2-클로로-6-에틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.33mmol, 164mg)의 현탁액에 실온에서 1.0N 수산화나트륨 수용액(0.7ml)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간동안 교반하였다. 에탄올을 감압하에 제거하고, 잔류물을 물(30ml)로 희석시켰다. 수용액을 디에틸 에테르(30ml)로 세척하여 임의의 중성 불순물을 제거하였다. 수성층을 1.0N HCl로 산성화하고, 생성물을 에틸 아세테이트(2x35ml)로 추출하였다. 모아진 유기 추출액을 염수(50ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 여액을 농축시켜 N-[(2-클로로-6-에틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌을 백색 고형물로서 138mg(87% 수율) 수득하였다: mp 187-190℃. ES-HRMS m/e C25H26ClN3O5(M+Na)에 대한 계산치 506.1459, 측정치 506.1455.
실온에서 에탄올(2㎖)중의 N-[(2-클로로-6-에틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.33mmol, 164㎎)의 현탁액에 1.0N의 수성 수산화나트륨(0.7㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 에탄올을 감압하에서 제거하고, 잔류물을 물(3㎖)로 희석시켰다. 수용액을 디에틸 에테르(30㎖)로 세척하여 임의의 중성 불순물을 제거하였다. 수성 층을 1.0N HCl로 산성화시키고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 35㎖). 합쳐진 유기 추출물을 염수 용액(50㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 백색 고형물로서 N-[(2-클로로-6-에틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 138㎎(87% 수율)을 수득하였다: 융점 187 내지 190℃.ES-HRMS m/e C25H26ClN3O5(M+Na)에 대한 계산치 506.1459, 측정치 506.1455.
실시예 16
N-[(2-클로로-6-프로필페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
a. 2-클로로-6-프로필벤조산의 제조
2-플루오로-6-클로로벤질리딘)-부틸아민 및 프로필 마그네슘 브로마이드로부터 실시예 15에 기술된 일반 절차를 사용하여 2-클로로-6-프로필벤조산을 제조하였다.
b. N-[(2-클로로-6-프로필페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 2-클로로-6-프로필벤조산으로부터 실시예 15에 기술된 일반 절차를 사용하여 N-[(2-클로로-6-프로필페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌을 제조하였으며, 백색 고형물로서 수득되었다: 융점 225 내지 227℃. ES-HRMS m/e C26H28ClN3O5(M+Na)에 대한 계산치 520.1611, 측정치 520.1615.
실시예 17
N-[[2-클로로-6-(2-메틸에틸)페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
a. 2-클로로-6-(2-메틸에틸)벤조산의 제조
2-플루오로-6-클로로벤질리딘)-부틸아민 및 이소프로필 마그네슘 브로마이드로부터 실시예 15에 기술된 일반 절차를 사용하여 2-클로로-6-(2-메틸에틸)벤조산을 제조하였다.
b. N-[[2-클로로-6-(2-메틸에틸)페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 2-클로로-6-(2-메틸에틸)벤조산으로부터 실시예 15에 기술된 일반 절차를 사용하여 N-[[2-클로로-6-(2-메틸에틸)페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌을 제조하였으며, 백색 고형물로서 수득되었다: 융점 205 내지 209℃. ES-HRMS m/e C26H28ClN3O5(M+Na)에 대한 계산치 520.1611, 측정치 520.1617.
실시예 18
N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
a) 5-요오도-1,3-디에틸-6-메틸 우라실의 제조
DMF(188㎖)중의 5-요오도-6-메틸 우라실(20.97mmol, 5.45g)과 분말 탄산칼륨(60mmol, 8.29g)의 현탁액에 에틸 요오다이드(83.88mmol, 6.7㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반하고, 물(150㎖) 및 에틸 아세테이트(150㎖)중에 부었다. 층들을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 100㎖). 합쳐진 추출물을 염수 용액(150㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 조질의 고형물을 수득하였으며, 이를 디클로메탄/디에틸 에테르/헥산(1:1:1)으로 분쇄하여 백색 결정질 고형물로서 5-요오도-1,3-디에틸-6-메틸 우라실 3.89g(60% 수율)을 수득하였다: 융점 159 내지 161.5℃. ES-HRMS m/e C9H13IN2O2(M+)에 대한 계산치 308.0022, 측정치 308.0018.
b) N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
실온에서 THF(3㎖)중의 아연 더스트(33mmol, 1.96g)의 현탁액에 1,2-디브로모에탄(3mmol, 0.261㎖)을 첨가하였다. 이 현탁액을 에틸렌 기체 생성이 중단될 때까지 히트 건(heat gun)으로 60 내지 65℃로 가열하였다. 현탁액을 실온으로 냉각시키고, 트리메틸클로로실란(1.5mmol, 0.19㎖)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. DMA(6㎖)중의 5-요오도-1,3-디에틸-6-메틸 우라실(11mmol, 3.39g)의 현탁액을 가온시켜 맑은 용액을 수득하였으며, 이를 반응 혼합물에 일부 첨가하였다. 첨가한 후, 혼합물을 70℃로 가열하였다. 반응 혼합물의 내부 온도가 발열 반응으로 인해 75℃로 상승되었다. 포화 염화암모늄 용액으로 급냉시키는 분취량의 반응 혼합물의 TLC 분석에서, 출발 물질의 부재를 나타내는 15시간 동안, 반응 혼합물을 70℃로 유지시켰다. 반응 혼합물을 THF(6㎖)로 희석시키고, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 과량의 아연 더스트를 침전시켰다.
이렇게 제조된 아연 화합물을 함유하는 용액(11mmol)을 실온에서 THF(6㎖)중의 Pd(dba)2(0.14mmol, 80㎎), 트리푸릴포스핀(TFP)(0.52mmol, 134㎎) 및 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-요오도-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(9mmol, 3.65g)의 용액에 첨가하고, 밝은 황색 혼합물을 50 내지 55℃에서 72시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄(100㎖)내에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(3 × 75㎖). 합쳐진 추출물을 염수 용액(150㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 조질의 고형물을 수득하였으며, 이를 비오티지 컬럼(Biotage column)(40m)을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 1.78g(43%)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C24H33N3O6(M+Na)에 대한 계산치 482.2262, 측정치 482.2262.
c). 4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염의 제조
실온에서 디옥산(10㎖)중의 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(3.87mmol, 1.78g)의 용액에 디옥산중의 4N의 염산(20mmol, 5㎖)을 첨가하고, 상기 용액을 1시간 동안 교반하였다. 용액을 농축시키고, 디에틸 에테르로 희석시켜 백색 고형물을 형성시켰다. 모액을 폐기시키고, 잔류물을 회전 증발기상에서 건조시킨 후, 고진공하에 방치시켜 무정형 고형물로서 4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염 0.72g(47%)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C19H25N3O4(M+Na)에 대한 계산치 382.1737, 측정치 382.1736.
d)N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
실온에서 디클로로메탄(2㎖)중의 4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(0.76mmol, 0.3g)과 2,6-디클로로벤조일 클로라이드(0.84mmol, 0.175g)의 현탁액에 디이소프로필에틸아민(3.03mmol, 0.53㎖)을 첨가하였다. 5분 후에 모든 물질이 용액으로 변하였고, 맑은 황색 용액을 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 생성된 갈색 용액을 디클로로메탄(25㎖)으로 희석시켰다. 디클로로메탄 층을 1N의 염산(2 × 25㎖), 포화 중탄산나트륨 용액(25㎖) 및 염수 용액(25㎖)으로 연속적으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 용매를 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40s) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 0.40g(99% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C26H27Cl2N3O5(M+Na)에 대한 계산치554.1221, 측정치 554.1229.
e) N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
실온에서 에탄올(2㎖)중의 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.77mmol, 0.41㎎)의 현탁액에 1.0N의 수성 수산화나트륨(1.5㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 50℃로 가열하고, 생성된 투명 용액을 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 에탄올을 감압하에서 제거하고, 잔류물을 물(25㎖) 및 NaOH(2㎖, 1.0N)로 희석시켜 나트륨 염을 용해시켰다. 수용액을 디에틸 에테르(30㎖)로 세척하여 임의의 중성 불순물을 제거하였다. 수성 층을 1.0N HCl로 산성화시키고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 25㎖). 합쳐진 유기 추출물을 염수 용액(50㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 무정형 백색 고형물로서 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 320㎎(80% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C25H25Cl2N3O5(M+Na)에 대한 계산치 541.3921, 측정치 541.3925.
실시예 19
N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
a) N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
실온에서 DMF(2㎖)중의 4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(0.758mmol, 300㎎), HBTU(0.84mmol, 318㎎) 및 2-클로로-6-메틸벤조산(0.84mmol, 142㎎)의 현탁액에 디이소프로필에틸아민(1.9mmol, 0.33㎖)을 첨가하였다. 5분 후에 모든 물질이 용액으로 변하였고, 맑은 황색 용액을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 생성된 암갈색 용액을 에틸 아세테이트(25㎖)로 희석시켰다. 에틸 아세테이트 층을 1N의 염산(2 × 30㎖), 포화 중탄산나트륨 용액(30㎖) 및 염수 용액(30㎖)으로 연속적으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 380㎎(98% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C27H30ClN3O5(M+Na)에 대한 계산치 535.1026, 측정치 535.1024.
b) N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
실온에서 에탄올(2㎖)중의 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.82mmol, 420㎎)의 현탁액에 1.0N의 수성 수산화나트륨(1.6㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 50℃로 가열하고, 생성된 투명 용액을 2시간 동안 교반하였다. 에탄올을 감압하에서 제거하고, 잔류물을 물(25㎖) 및 NaOH(3㎖, 1.0N)로 희석시켜 나트륨 염을 용해시켰다. 수용액을 디에틸 에테르(30㎖)로 세척하여 임의의 중성 불순물을 제거하였다. 수성 층을 1.0N HCl로 산성화시키고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 25㎖). 합쳐진 유기 추출물을 염수 용액(50㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 무정형 백색 고형물로서 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 277㎎(68% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C26H28ClN3O5(M+Na)에 대한 계산치 520.1611, 측정치 520.1616.
실시예 20
4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-L-페닐알라닌의 제조
4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 및 1-(2-메톡시에틸)-사이클로펜탄 카복실산으로부터 실시예 19에 기술된 일반 절차를 사용하여 4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-N-[[1-(2-메톡시에틸)-사이클로펜틸]카보닐]-L-페닐알라닌을 제조하였으며, 무정형 백색 고형물로서 수득되었다. ES-HRMS m/e C27H37N3O6(M+Na)에 대한 계산치 522.2575, 측정치522.2581.
실시예 21
N-[1-(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
a) 3-메틸-6-(트리플루오로메틸)우라실의 제조
20℃에서 15분에 걸쳐 DMSO(19㎖, 분자체상에서 건조시킴)중의 소듐 메톡사이드(55mmol, 2.97g) 및 에틸 3-아미노-4,4,4-트리플루오로크로토네이트(55mmol, 10.0g)의 예비혼합된 용액에 DMSO(2.5㎖)중의 메틸 이소시아네이트(55mmol, 3.2g)를 첨가하였다. 용액을 15분 동안 교반한 후, 다른 부분의 소듐 메톡사이드(27.5mmol, 1.34g)를 첨가하였다. 20℃에서 15분 동안 교반한 후, 상기 온도에서 메틸 이소시아네이트(14mmol, 0.8g)를 첨가하였다. 15분이 더 지난 후, 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 밤새도록 교반하였다. 생성된 황색 현탁액을 물(50㎖)중에 부어 밝은 황색 용액을 수득하였다. 중성 불순물을 디에틸 에테르로 추출하였다(3 × 50㎖). 수성 층을 농축 염산으로 산성화하여 백색 고형물을 수득하였다. 공기 건조시킨 후, 백색 고형물로서 3-메틸-6-(트리플루오로메틸)우라실 6.79g(63% 수율)을 수득하였다: 융점 235 내지 237g. EI-HRMS m/e C6H5F3N2O2(M+)에대한 계산치 194.0303, 측정치 194.0303.
b) 1,3-디메틸-6-(트리플루오로메틸)우라실의 제조
DMF(30㎖)중의 3-메틸-6-(트리플루오로메틸)우라실(20.6mmol, 4.0g)과 분말 탄산칼륨(41.2mmol, 5.7g)의 현탁액에 메틸 요오다이드(82.4mmol, 5.13g)를 첨가하였다. 그 다음, 반응 혼합물의 TLC 분석에서 출발 물질의 부재를 나타내는 4시간 동안, 반응 혼합물을 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(50㎖)로 희석시켰다. 그 다음, DME를 감압하에서 제거하여 백색 현탁액을 수득하였다. 고형물을 여과에 의해 수거하고, 물로 세척하였다. 공기 건조시킨 후, 백색 고형물로서 1,3-디메틸-6-(트리플루오로메틸)우라실 3.55g(83% 수율)을 수득하였다: 융점 85 내지 87g. EI-HRMS m/e C7H7F3N2O2(M+)에 대한 계산치 208.0459, 측정치 208.0460.
c) 1,3-디메틸-5-요오도-6-(트리플루오로메틸)우라실의 제조
1,3-디메틸-6-(트리플루오로메틸)우라실(16.91mmol, 3.52g), 트리플루오로아세트산(20㎖) 및 트리플루오로아세트산 무수물(5㎖)의 혼합물을 5분 동안 환류시켰다. 그 다음, NIS(16.91mmol, 3.8g)를 첨가하고, 반응 혼합물의 TLC 분석에서 출발 물질의 존재를 나타내는 15시간 동안, 생성된 혼합물을 교반하였다. 다른 부분의 NIS(8.45mmol, 1.9g)를 첨가하고, 5시간 더 계속적으로 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 포화 탄산칼륨 용액(100㎖)내로 서서히 부었다. 그 다음, 소듐 티오설파이트 용액을 첨가하여 과량의 요오드 색을 제거하였다. 생성된 고형물을 여과에 의해 수거하고, 물로 세척하였다. 공기 건조시킨 후, 백색 고형물로서 1,3-디메틸-5-요오도-6-(트리플루오로메틸)우라실 3.73g(66% 수율)을 수득하였다: 융점 149 내지 151g. EI-HRMS m/e C7H6F3IN2O2(M+)에 대한 계산치 333.9426, 측정치 333.9436.
d) N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
실온에서 THF(3㎖)중의 아연 더스트(33mmol, 1.96g)의 현탁액에 1,2-디브로모에탄(3mmol, 0.261㎖)을 첨가하였다. 이 현탁액을 에틸렌 기체 생성이 중단될 때까지 히트 건으로 60 내지 65℃로 가열하였다. 현탁액을 실온으로 냉각시키고, 트리메틸클로로실란(1.5mmol, 0.19㎖)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. DMA(8㎖)중의 1,3-디메틸-5-요오도-6-(트리플루오로메틸)우라실(10mmol, 3.34g)의 현탁액을 가온시켜 맑은 용액을 수득하였으며, 이를 반응 혼합물에 일부 첨가하였다. 첨가한 후, 혼합물을 70℃로 가열하였다. 반응 혼합물의 내부 온도가 발열 반응으로 인해 75℃로 상승되었다. 포화 염화암모늄 용액으로 급냉시키는 분취량의 반응 혼합물의 TLC 분석에서, 출발 물질의 부재를 나타내는 약 3시간 동안, 반응 혼합물을 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 THF(5㎖)로 희석시키고, 실온으로 냉각시키고, 과량의 아연 더스트를 침전시켰다.
상기 아연 화합물의 용액(10mmol)을 실온에서 THF(10㎖)중의 Pd(dba)2(1.0mmol, 520㎎), 트리푸릴포스핀(TFP)(4.0mmol, 0.93㎎) 및 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-요오도-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(7mmol, 2.84g)의 용액에 첨가하고, 밝은 황색 혼합물을 45℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄(100㎖)내에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(3 × 75㎖). 합쳐진 추출물을 염수 용액(150㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 조질의 고형물을 수득하였으며, 이를 비오티지 (40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3-디에틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 1.45g(42%)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C22H26NF3N3O6(M+Na)에 대한 계산치 508.1666, 측정치 508.1670.
e). 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염의 제조
실온에서 고체 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6)-2,4-디옥소-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(2.92mmol, 1.42g)를 디옥산중의 4N의 염산(20mmol, 7㎖)으로 처리하고, 상기 용액을 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(5㎖)으로 희석시키고, 회전 증발기상에서 감압하에서 농축시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르로 희석시켜 밝은 갈색 고형물을 형성시켰다. 고형물을 여과에 의해 수거하고, 디에틸 에테르로 세척하였다. 건조시킨 후, 밝은 갈색 고형물로서 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염 1.21g(91% 수율)을 수득하였다: 융점 244 내지 247℃. ES-HRMS m/e C17H18F3N3O4(M+H)에 대한 계산치 386.1322, 측정치 386.1319.
f) N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
실온에서 디클로로메탄(3㎖)중의 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(1.0mmol, 421㎎)과 2,6-디클로로벤조일 클로라이드(1.1mmol, 0.235g)의 현탁액에 디이소프로필에틸아민(4.4mmol, 0.622㎖)을 첨가하였다. 1분 후에 모든 물질이 용액으로 변하였고, 밝은 갈색 용액을 실온에서 72시간 동안 교반하였다. 생성된 암갈색 용액을 디클로로메탄(25㎖)으로 희석시켰다. 디클로로메탄 층을 1N의 염산(2 × 25㎖), 포화 중탄산나트륨 용액(25㎖) 및 염수 용액(25㎖)으로 연속적으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 용매를 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40s) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 N-[1-(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 0.541g(97% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C24H20Cl2F3N3O5(M+Na)에 대한 계산치 580.0624, 측정치 580.0629.
g) N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
실온에서 피리딘(15㎖)중의 N-[1-(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸에스테르(0.422mmol, 0.236㎎)의 현탁액에 리튬 요오다이드(4.22mmol, 0.571g)을 첨가하였다. 혼합물을 15시간 동안 가열 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 1N의 염산으로 희석시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 25㎖). 합쳐진 유기 추출물을 염수 용액(50㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 밝은 황색 고형물로서 N-[1-(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 201㎎(87% 수율)을 수득하였다: 융점 125 내지 128℃. ES-HRMS m/e C23H18Cl2F3N3O5(M+Na)에 대한 계산치 566.0469, 측정치 566.0468.
실시예 22
N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
DMF(4방울)를 함유한 디클로로메탄(7㎖)중의 2-클로로-6-메틸벤조산(190㎎, 1.14mmol)의 용액에 옥살릴 클로라이드(0.42㎖, 4.8mmol)로 처리하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 톨루엔으로 공비제거하여 미량의 옥살릴 클로라이드를 제거하고, 잔류물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
디클로로메탄(5㎖)중의 상기 제조된 산 클로라이드, 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(423㎎, 1.003mmol)의 혼합물을 DIPEA(0.625㎖, 4.46mmol)로 처리하고, 생성된 밝은 갈색 용액을 3일 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 에틸 아세테이트로 희석시키고, 1N의 HCl 및 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 여과 증발시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40s) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 포움으로서 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-[1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐]-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 수득하였다(179㎎, 33%). ES-HRMS m/e C25H23ClN3O5(M+Na)에 대한 계산치 560.1171, 측정치 560.1172.
피리딘(14㎖)중의 상기 실험에서와 같이 수득된 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-[1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐]-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(260㎎, 0.48mmol)와 리튬 요오다이드(6534㎎, 4.8mmol)의 용액을 밤새도록 가열 환류시켰다. 혼합물을 1N의 HCl로 희석시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합쳐진 추출물을 염수 용액을 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시키고, 여과 증발시켰다. 잔류물을 에테르, 헥산 및 디클로로메탄으로 분쇄시켜 백색 고형물로서 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-[1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐]-L-페닐알라닌를 수득하였다(205㎎, 81%).ES-HRMS m/e C24H21ClF3N3O5(M+Na)에 대한 계산치 546.1014, 측정치 546.1013.
실시예 23
N-[(2-플루오로-6-(트리플루오로메틸)페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
DMF(2방울)를 함유한 디클로로메탄(3㎖)중의 2-플루오로-6-트리플루오로메틸벤조산(125㎎, 0.60mmol)(알드리치(Aldrich) 33080-9)의 용액에 옥살릴 클로라이드(0.21㎖, 2.4mmol)로 처리하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 톨루엔으로 공비제거하여 미량의 옥살릴 클로라이드를 제거하고, 잔류물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
디클로로메탄(3㎖)중의 상기 제조된 산 클로라이드, 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(210㎎, 0.50mmol)의 혼합물을 DIPEA(0.336㎖, 2.4mmol)로 처리하고, 생성된 밝은 갈색 용액을 3일 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 에틸 아세테이트로 희석시키고, 1N의 HCl 및 염수 용액으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 여과 증발시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 비오티지 컬럼(40s)을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 포움으로서 N-[(2-플루오로-6-(트리플루오로메틸)페닐)카보닐]-4-[1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐]-L-페닐알라닌 메틸 에스테르를 수득하였다(179㎎, 62%). ES-HRMS m/e C25H20F7N3O5(M+Na)에 대한 계산치 598.1183, 측정치 598.1186.
피리딘(14㎖)중의 상기 실험에서와 같이 수득된 N-[[2-클로로-6-(트리플루오로메틸)페닐]카보닐]-4-[1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐]-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(266㎎, 0.46mmol)와 리튬 요오다이드(624㎎, 4.6mmol)의 용액을 밤새도록 가열 환류시켰다. 혼합물을 1N의 HCl로 희석시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합쳐진 추출물을 염수 용액을 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시키고, 여과 증발시켰다. 잔류물을 에테르 및 디클로로메탄으로 분쇄시켜 백색 고형물로서 N-[[2-클로로-6-(트리플루오로메틸)페닐]카보닐]-4-[1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐]-L-페닐알라닌를 수득하였다(167㎎, 64%). ES-HRMS m/e C24H18F7N3O5(M+Na)에 대한 계산치 584.1027, 측정치 584.1028.
실시예 24
N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌의 제조
a) 4-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]아미노-3-메틸벤질 알콜의 제조
실온에서 2시간 동안 에틸 아세테이트(240㎖)중의 4-니트로-3-메틸벤질 알콜(56.53mmol, 9.45g), 디-3급-부틸 디카보네이트(63mmol, 13.74g) 및 숯상의 팔라듐(450㎎)의 혼합물을 수소화시켰다. 그 다음, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과시키고, 에틸 아세테이트(50㎖)로 세척하였다. 여액을 진공하에서 농축시켜 밝은 황색 고형물로서 4-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]아미노-3-메틸벤질 알콜 10.18g(76% 수율)을 수득하였다. EI-HRMS m/e C13H19NO3(M+)에 대한 계산치 237.0126, 측정치 237.0129.
b) 4-[[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]아미노]-3-메틸벤즈알데히드의 제조
실온에서 디클로로메탄(85㎖)중의 4-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]아미노-3-메틸벤질 알콜(42.9mmol, 10.18g)의 용액에 이산화망간(138mmol, 12g) 및 4A 분자체(6g)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 76시간 도안 교반하고, 셀라이트 패드를 통해 여과시키고, 디클로로메탄으로 세척하였다. 여액을 진공하에서 농축시키고, 잔류물을 비오티지(40s) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고형물로서 4-[[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]아미노]-3-메틸벤즈알데히드 7.82g(77% 수율)을 수득하였다: 융점 109 내지 111℃. EI-HRMS m/e C13H17NO3(M+)에 대한 계산치 235.1208, 측정치 235.1207.
c) N-(벤질옥시카보닐)-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]아미노]-3-메틸데하이드로페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
실온에서 디클로로메탄(30㎖)중의 N-(벤질옥시카보닐)-α-포스포노글리신 트리메틸 에스테르(18mmol, 5.96g)(알드리치 케미칼 캄파니(Aldrich Chemical Company))의 용액에 테트라메틸구아니딘(18mmol, 2.07g)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이를 -30℃로 냉각시켰다. 그 다음, 디클로로메탄(12.5㎖)중의 4-[[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]아미노]-3-메틸벤즈알데히드(15mmol, 3.52g)의용액을 적가하였다. 온도에서 30분이 지난 후, 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고,15시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 디에틸 에테르(100㎖)로 희석시키고, 0.5N의 염산(2 × 50㎖), 포화 중탄산나트륨 용액(100㎖) 및 염수 용액(100㎖)으로 연속적으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고형물로서 N-(벤질옥시카보닐)-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]아미노]-3-메틸-데하이드로페닐알라닌 메틸 에스테르 3.87g(58% 수율)을 수득하였다. EI-HRMS m/e C24H28N2O6(M+)에 대한 계산치 440.1527, 측정치 440.1524.
d) N-(벤질옥시카보닐)-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]아미노]-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
아르곤 스트림을 밤새도록 파르(Parr) 압력 용기중에서 메탄올(25㎖)중의 N-(벤질옥시카보닐)-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]아미노]-3-메틸-데하이드로페닐알라닌 메틸 에스테르(8.08mmol, 3.56g)의 용액을 통해 통과시켰다. 그 다음, 촉매, (+)-1,2-비스((2S,5S)-2,5-디메틸포스폴라노)벤젠(사이클로옥타디엔)-로듐(I)트리플루오로메탄설포네이트[[Rh(COD)(S,S)-(me)DuPHOS]+TfO-](약 40㎎)를 글로브 박스내에서 아르곤 스트림하에서 첨가하였다. 용액을 22시간 동안 실온에서 수소 압력(60psi)하에서 교반하였다. 생성된 용액을 농축시키고, 조생성물을 비오티지(40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 N-(벤질옥시카보닐)-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]아미노]-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 2g(55% 수율)을 수득하였다. EI-HRMS m/e C24H30N2O6(M+)에 대한 계산치 442.1627, 측정치 442.1629.
e) N-(벤질옥시카보닐)-4-아미노-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염의 제조
실온에서 디옥산(12㎖)중의 N-(벤질옥시카보닐)-4-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]아미노-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(4.52mmol, 2g)의 용액에 디옥산(48mmol, 2㎖)중의 4N의 염산을 첨가하고, 용액을 약 2시간 동안 교반여 백색 침전물을 형성시켰다. 고형물을 에틸 에테르로 희석시키고, 모액을 폐기시키고, 잔류물을 우선 회전 증발기상에서 건조시킨 후, 고진공하에서 건조시켜 무정형황색 고형물로서 N-(벤질옥시카보닐)-4-아미노-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염 1.487g(87% 수율)을 수득하였다. FAB-HRMS m/e C19H22N2O4(M+H)에 대한 계산치 343.0142, 측정치 343.0144.
f) N-(벤질옥시카보닐)-4-요오도-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
황산(0.3㎖), 물(36㎖) 및 N-(벤질옥시카보닐)-4-아미노-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(2.9mmol, 1.1g)의 현탁액을 가열하여 맑은 용액을 수득하였다. 그 다음, 이를 -1℃로 냉각시키고, 물(8㎖)중의 아질산나트륨(5.8mmol, 400㎎)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 물(6㎖)중의 요오드화칼륨(8.7mmol, 1.5g)의 용액을 첨가하여 갈색 현탁액을 수득하엿다. 30분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고 1 시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 물(100㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(3 × 50㎖). 합쳐진 추출물을 포화 소듐 비스파이트 용액(100㎖) 및 염수 용액(100㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 N-(벤질옥시카보닐)-4-요오도-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 0.84g(64% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C19H20INO4(M+Na)에 대한 계산치 476.0329, 측정치 476.0336.
g) N-[(벤질옥시카보닐)-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
실온에서 THF(1.5㎖)중의 아연 더스트(15mmol, 0.98g)의 현탁액에 1,2-디브로모에탄(1mmol, 0.13㎖)을 첨가하였다. 이 현탁액을 에틸렌 기체 생성이 중단될 때까지 히트 건으로 60 내지 65℃로 가열하였다. 그 다음, 현탁액을 실온으로 냉각시키고, 트리메틸클로로실란(0.5mmol, 70㎕)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. DMA(2㎖)중의 5-요오도-1,3-디메틸 우라실(2.5mmol, 665㎎)의 현탁액을 가온시켜 맑은 용액을 수득하였으며, 이를 반응 혼합물에 일부 첨가하였다. 첨가한 후, 혼합물을 70℃로 가열하였다. 포화 염화암모늄 용액으로 급냉시키는 분취량의 반응 혼합물의 TLC 분석에서, 출발 물질의 부재를 나타내는 3시간 동안, 반응 혼합물을 70℃로 교반하였다. 혼합물을 THF(2㎖)로 희석시키고, 실온으로 냉각시키고, 과량의 아연 더스트를 침전시켰다.
이렇게 제조된 아연 화합물의 용액(2.5mmol)을 실온에서 THF(2㎖)중의 Pd(dba)2(0.05mmol, 27㎎), 트리푸릴포스핀(TFP)(0.2mmol, 50㎎) 및 N-(벤질옥시카보닐)-4-요오도-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.5mmol, 227㎎)의 용액에 첨가하고, 생성된 밝은 황색 혼합물을 45℃에서 15시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄내에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(3 × 30㎖). 합쳐진 추출물을 염수 용액(50㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지 (40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 N-(벤질옥시카보닐)-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 161㎎(69%)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C25H27N3O6(M+Na)에 대한 계산치 488.1792, 측정치 488.1801.
h) 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
에탄올(3㎖)중의 N-(벤질옥시카보닐)-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.34mmol, 159㎎), 사이클로헥센(1㎖) 및 탄소상의 10% 팔라듐(100㎎)의 혼합물을 20시간 동안 가열 환류시켰다. 그 다음, 이를 셀라이트 패드를 통해 여과시키고, 에탄올(10㎖)로 세척하였다. 합쳐진 여액을 농축시키고, 잔류물을 고진공하에서 건조시켜 점착성 황색 고형물로서 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 96㎎(85% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C17H21N3O4(M+Na)에 대한 계산치 354.1424, 측정치 354.1424.
i) N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
실온에서 DMF(2㎖)중의 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.125mmol, 46㎎), HBTU(0.125mmol, 47.5㎎) 및 2-클로로-6-메틸벤조산(0.137mmol, 25㎎)의 현탁액에 디이소프로필에틸아민(0.312mmol, 44㎕)을 첨가하였다. 5분 후에 모든 물질이 용액으로 변하였고, 맑은 황색 용액을실온에서 72시간 동안 교반하였다. 생성된 암갈색 용액을 에틸 아세테이트(30㎖)로 희석시켰다. 에틸 아세테이트 층을 1N의 염산(2 × 30㎖), 포화 중탄산나트륨 용액(30㎖) 및 염수 용액(30㎖)으로 연속적으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 용매를 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40s) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 오일성 잔류물로서 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 42㎎(70% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C25H26ClN3O5(M+Na)에 대한 계산치 506.1454, 측정치 506.1459.
j) N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌의 제조
실온에서 에탄올(1㎖)중의 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.083mmol, 40㎎)의 현탁액에 1.0N의 수성 수산화나트륨(0.7㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 에탄올을 감압하에서 제거하고, 잔류물을 물(5㎖)로 희석시켰다. 수용액을 디에틸 에테르(20㎖)로 세척하여 임의의 중성 불순물을 제거하였다. 수성 층을 1.0N HCl로 산성화시키고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 25㎖). 합쳐진 유기 추출물을 염수 용액(50㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 무정형 백색 고형물로서 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 34㎎(87% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C24H24ClN3O5(M+Na)에 대한 계산치 492.1295, 측정치 492.1301.
실시예 25
N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌의 제조
a) N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
실온에서 디클로로메탄(1㎖)중의 4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.128mmol, 47㎎)와 2,6-디클로로벤조일 클로라이드(0.153mmol, 32㎎)의 현탁액에 디이소프로필에틸아민(0.45mmol, 77㎕)을 첨가하였다. 5분 후에 모든 물질이 용액으로 변하였고, 맑은 황색 용액을 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 생성된 갈색 용액을 디클로로메탄(25㎖)로 희석시켰다. 디클로로메탄 층을 1N의 염산(2 × 25㎖), 포화 중탄산나트륨 용액(25㎖) 및 염수 용액(25㎖)으로 연속적으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 52㎎(81% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C24H23Cl2N3O5(M+Na)에 대한 계산치 526.0907, 측정치 526.0912.
b) N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌의 제조
실온에서 에탄올(1㎖)중의 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.1mmol, 59㎎)의 현탁액에 1.0N의 수성 수산화나트륨(0.2㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 에탄올을 감압하에서 제거하고, 잔류물을 물(10㎖)로 희석시켰다. 수용액을 디에틸 에테르(20㎖)로 세척하여 임의의 중성 불순물을 제거하였다. 수성 층을 1.0N HCl로 산성화시키고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 15㎖). 합쳐진 유기 추출물을 염수 용액(50㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 무정형 백색 고형물로서 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 20㎎(41% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C23H21C2N3O5(M+Na)에 대한 계산치 512.0752, 측정치 512.0754.
실시예 26
N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌의 제조
a) N-(벤질옥시카보닐)-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
실온에서 THF(3㎖)중의 아연 더스트(15mmol, 0.98g)의 현탁액에 1,2-디브로모에탄(1mmol, 0.13㎖)을 첨가하였다. 이 현탁액을 에틸렌 기체 생성이 중단될 때까지 히트 건으로 60 내지 65℃로 가열하였다. 그 다음, 현탁액을 실온으로 냉각시키고, 트리메틸클로로실란(0.5mmol, 70㎕)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. DMA(2㎖)중의 5-요오도-1,3,6-트리메틸 우라실(2.5mmol, 700㎎)의 현탁액을 가온시켜 맑은 용액을 수득하였으며, 이를 반응 혼합물에 일부 첨가하였다. 포화 염화암모늄 용액으로 급냉시키는 분취량의 반응 혼합물의 TLC 분석에서, 출발 물질의 부재를 나타내는 3 내지 4시간 동안, 반응 혼합물을 70℃로 유지시켰다. 그 다음, 반응 혼합물을 THF(3㎖)로 희석시키고, 과량의 아연 더스트를 침전시켰다.
이렇게 제조된 아연 화합물을 함유하는 용액(2.5mmol)을 실온에서 THF(2㎖)중의 Pd(dba)2(0.05mmol, 27㎎), 트리푸릴포스핀(TFP)(0.2mmol, 50㎎) 및 N-(벤질옥시카보닐)-4-요오도-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.5mmol, 227㎎)의 용액에 첨가하고, 밝은 황색 혼합물을 45℃에서 15시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응혼합물을 포화 염화암모늄내에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(3 × 30㎖). 합쳐진 추출물을 염수 용액(50㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 오일로서 N-(벤질옥시카보닐)-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 71㎎(30%)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C26H29N3O6(M+Na)에 대한 계산치 502.2173, 측정치 502.2174.
b). 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
에탄올(2㎖)중의 N-(벤질옥시카보닐)-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.145mmol, 70㎎), 사이클로헥센(1㎖) 및 탄소상의 10% 팔라듐(100㎎)의 혼합물을 15시간 동안 가열 환류시켰다. 그 다음, 이를 셀라이트 패드를 통해 여과시키고, 상기 패드를 에탄올(10㎖)로 세척하였다. 합쳐진 여액을 감압하에서 농축시켰다. 잔류물을 고진공하에서 건조시켜 밝은 황색 고형물로서 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 36㎎(72% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C18H23N3O4(M+Na)에 대한 계산치 368.1327, 측정치 368.1321.
c) N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
실온에서 디클로로메탄(2㎖)중의 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.089mmol, 34㎎)와 2,6-디클로로벤조일 클로라이드(0.1mmol, 21㎎)의 현탁액에 디이소프로필에틸아민(0.4mmol, 70㎕)을 첨가하였다. 5분 후에 모든 물질이 용액으로 변하였고, 맑은 황색 용액을 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 생성된 갈색 용액을 디클로로메탄(25㎖)로 희석시켰다. 디클로로메탄 층을 1N의 염산(2 × 25㎖), 포화 중탄산나트륨 용액(25㎖) 및 염수 용액(25㎖)으로 연속적으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 용매를 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 점성 오일로서 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 22㎎(48% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C25H25Cl2N3O5(M+Na)에 대한 계산치 541.1065, 측정치 541.1063.
d) N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌의 제조
실온에서 에탄올(2㎖)중의 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.04mmol, 22㎎)의 현탁액에 1.0N의 수성 수산화나트륨(0.5㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 에탄올을 감압하에서 제거하고, 잔류물을 물(10㎖)로 희석시켰다. 수용액을 디에틸 에테르(20㎖)로 세척하여 임의의 중성 불순물을 제거하였다. 수성 층을 1.0N HCl로 산성화시키고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 15㎖). 합쳐진 유기 추출물을 염수 용액(50㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 무정형 백색 고형물로서 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌20㎎(93% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C23H21Cl2N3O5[(M-H)+2Na)에 대한 계산치 548.0725, 측정치 548.0733.
실시예 27
N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 에틸 에스테르의 제조
실온에서 DMF(4㎖)중의 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌(0.6mmol, 300㎎)과 중탄산나트륨(3.6mmol, 302㎎)의 현탁액에 요오도에탄(3.6mmol, 0.29㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 72시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 물(50㎖)중에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(3 × 20㎖). 합쳐진 추출물을 염수 용액(60㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 결정질 백색 고형물로서 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 155㎎(50% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C25H25Cl2N3O5(M+Na)에 대한 계산치 540.1062, 측정치 540.1049.
실시예 28
N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 에스테르의 제조
에틸 아세테이트(5㎖) 및 물(5㎖)중의 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌(320㎎, 0.65mmol), 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 클로라이드 하이드로클로라이드(579㎎, 0.26mmol) 및 탄산칼륨(451㎎, 3.27mmol)의 혼합물을 밤새도록 실온에서 첨가하였다. 층들을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합쳐진 추출물을 염수 용액으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시키고, 농축시켜 무정형 백색 결정질 고형물로서 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 에스테르를 수득하였다(190㎎,49%). ES-HRMS m/e C29H34Cl2N4O5(M+H)에 대한 계산치 589.1978, 측정치 589.1980.
수성 층을 산성화시켜 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌(167㎎)을 회복 수득하였다.
실시예 29
N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 에스테르의 제조
N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 및 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 클로라이드 하이드로클로라이드로부터 실시예 28에 기술된 일반 절차를 사용하여 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 에스테르를 제조하였으며, 무정형 백색 고형물로서 수득되었다. ES-HRMS m/e C30H37ClN4O5(M+H)에 대한 계산치 569.2525, 측정치 569.2530.
실시예 30
N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 에틸 에스테르의 제조
N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 및 요오도에탄으로부터 실시예 27에 기술된 일반 절차를 사용하여 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 에틸 에스테르를 제조하였으며, 무정형 백색 고형물로서 수득되었다. ES-HRMS m/e C26H28ClN3O5(M+Na)에 대한 계산치 520.1610, 측정치 520.1591.
실시예 31
N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르의 제조
a) N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
실온에서 에탄올(20㎖)중의 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(8.8mmol, 3.79g)의 현탁액에 1.0N의 수성 수산화나트륨(17.57㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에탄올을 감압하에서 제거하였다. 수용액을 디에틸 에테르(100㎖)로 세척하여 임의의 중성 불순물을 제거하였다. 수성 층을 1.0N HCl로 산성화시키고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 100㎖). 합쳐진 유기 추출물을 염수 용액(200㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 밝은 갈색 고형물로서 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 3.44g(94% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C21H27N3O6(M+Na)에 대한 계산치 440.1792, 측정치 440.1792.
b) N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르의 제조
실온에서 THF(8㎖)중의 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌(1.21mmol, 505㎎)과 2-(4-모폴리노)에탄올(2.42mmol, 318㎎)의 용액에 디-이소-프로필카보디이미드(DIC)(1.82mmol, 0.287㎖) 및 4-디메틸아미노피리딘(0.6mmol, 74㎎)을 첨가하였다. 생성된 용액을 72시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 물(50㎖)중에 붓고, 에틸 아세테이트(3 × 50㎖)로 추출하였다. 합쳐진 추출물을 물(2 × 50㎖) 및 염수 용액(100㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 무정형 백색 고형물로서 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르 428㎎(67% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C27H38N4O7(M+Na)에 대한 계산치 553.2633, 측정치 553.2636.
c) 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸에스테르 하이드로클로라이드 염의 제조
실온에서 고체 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르(1.6mmol, 0.85g)를 디옥산중의 4N의 염산(16.02mmol, 4㎖)으로 처리하고, 상기 용액을 3시간 동안 교반하였으며, 이로 인해 백색 침전물이 형성되었다. 고형물을 디에틸 에테르로 희석시키고, 모액을 폐기시키고, 잔류물을 우선 회전 증발기상에서 건조시킨 후, 고진공하에 방치시켜 무정형 황색 고형물로서 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르 하이드로클로라이드 염 0.72g(99%)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C22H30N4O5(M+H)에 대한 계산치 431.2289, 측정치 431.2292.
d) N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르의 제조
실온에서 디클로로메탄(4㎖)중의 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(0.85mmol, 399㎎)과 2,6-디클로로벤조일 클로라이드(0.95mmol, 0.201g)의 현탁액에 디이소프로필에틸아민(4.75mmol, 0.66㎖)을 첨가하였다. 5분 후에 모든 물질이 용액으로 변하였고, 맑은 황색 용액을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 생성된 밝은 갈색 용액을 디클로로메탄(50㎖)으로 희석시켰다. 디클로로메탄 층을 1N의 염산(2 × 50㎖), 포화 중탄산나트륨 용액(50㎖) 및 염수 용액(50㎖)으로 연속적으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고형물로서 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르 0.427g(75% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C29H32Cl2N4O6(M+H)에 대한 계산치 603.1772, 측정치 603.1782.
실시예 32
N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르의 제조
4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르 및 2-클로로-6-메틸벤조일 클로라이드로부터 실시예 31에 기술된 일반 절차를 사용하여 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르를 제조하였으며, 무정형 백색 고형물로서 수득되었다. ES-HRMS m/e C30H35ClN4O6(M+H)에 대한 계산치 583.2318, 측정치 583.2326.
실시예 33
N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르의 제조
a) N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르의 제조
실온에서 DMF(8㎖)중의 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌(1.006mmol, 420㎎)과 중탄산나트륨(5.03mmol, 422㎎)의 용액에 1-클로로에틸 아세테이트(5.03mmol, 616㎎)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 72시간 동안 교반하였다. 그 다음, 이를 물(50㎖)중에 붓고, 에틸 아세테이트(3 × 50㎖)로 추출하였다. 합쳐진 추출물을 물(2 × 50㎖) 및 염수 용액(100㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40s 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 N-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르 390㎎(77% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C25H33N3O8(M+Na)에 대한 계산치 526.2160, 측정치 526.2143.
c) 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸에스테르 하이드로클로라이드 염의 제조
실온에서 디클로로메탄(5㎖)중의 4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(0.723mmol, 399㎎)과 2,6-디클로로벤조일 클로라이드(0.8mmol, 0.17g)의 현탁액에 디이소프로필에틸아민(3.2mmol, 0.45㎖)을 첨가하였다. 5분 후에 모든 물질이 용액으로 변하였고, 맑은 황색 용액을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 생성된 밝은 갈색 용액을 디클로로메탄(50㎖)으로 희석시켰다. 디클로로메탄 층을 1N의 염산(2 × 50㎖), 포화 중탄산나트륨 용액(50㎖) 및 염수 용액(50㎖)으로 연속적으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 용매를 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40s) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고형물로서 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르 0.312g(67% 수율)을 수득하였다: 융점 168 내지 170℃. ES-HRMS m/e C27H27Cl2N3O7(M+Na)에 대한 계산치 598.1118, 측정치 598.1122.
실시예 34
N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르의 제조
4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르 및 2-클로로-6-메틸벤조일 클로라이드로부터 실시예 33에 기술된 일반 절차를 사용하여 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르를 제조하였으며, 백색 고형물로서 수득되었다: 융점 84 내지 88℃. ES-HRMS m/e C28H30ClN3O7(M+Na)에 대한 계산치 578.1664, 측정치 578.1665.
실시예 35
L-프롤릴-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
a) L-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-프롤릴-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르의 제조
실온에서 DMF(28㎖)중의 4-(1,3,6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(7mmol, 2.57g), HBTU(8.75mmol, 3.32g) 및 L-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-프롤린(8.75mmol, 1.88g)의 현탁액에 디이소프로필에틸아민(21mmol, 3.65㎖)을 첨가하였다. 2분 후에 모든 물질이 용액으로 변하였고, 맑은 황색 용액을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 생성된 암갈색 용액을 에틸 아세테이트(100㎖)로 희석시켰다. 에틸 아세테이트 층을 1N의 염산(2 × 50㎖), 포화 중탄산나트륨 용액(100㎖) 및 염수 용액(100㎖)으로 연속적으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 용매를 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 L-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-프롤릴-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 2.5g(67% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C27H36N4O7(M+Na)에 대한 계산치 551.2476, 측정치 551.2476.
b) L-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-프롤릴-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
실온에서 에탄올(8㎖)중의 L-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-프롤릴-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(1.51mmol, 800㎎)의 현탁액에 1.0N의 수성 수산화나트륨(5㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 45 내지 50℃로 가열하고, 생성된 투명 용액을 3시간 동안 교반하였다. 에탄올을 감압하에서 제거하고, 잔류물을 물(25㎖)로 희석시켰다. 수용액을 디에틸 에테르(30㎖)로 세척하여 임의의 중성 불순물을 제거하였다. 수성 층을 1.0N HCl로 산성화시키고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 50㎖). 합쳐진 유기 추출물을 염수 용액(50㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 무정형 백색 고형물로서 L-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-프롤릴-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 640㎎(83% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C26H34N4O7(M+Na)에 대한 계산치 537.2320, 측정치 537.2321.
c) L-프롤릴-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌의 제조
실온에서 고체 L-[(1,1-디메틸에톡시)카보닐]-프롤릴-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌(0.89mmol, 462㎎)을 디옥산중의 4N의 염산(16mmol, 4㎖)으로 처리하고, 3시간 동안 교반하였다. 그 다음, 용매를 진공하에서 제거하고, 잔류물을 고진공하에서 건조시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 디클로로메탄, 디에틸 에테르 및 아세토니트릴로 분쇄시켜 밝은 무정형 황색 고형물로서 L-프롤릴-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 하이드로클로라이드 염 395㎎(99% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C21H26N4O5(M+H)에 대한 계산치 415.1976, 측정치 415.1976.
실시예 36
N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 에틸 에스테르의 제조
실온에서 DMF(3.8㎖)중의 N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌(0.743mmol, 340㎎)과 중탄산나트륨(5.94mmol, 499㎎)의 현탁액에 요오도에탄(5.94mmol, 0.475㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 물(100㎖)중에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(3 × 25㎖). 합쳐진 추출물을 염수 용액(80㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40s) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 결정질 백색 고형물로서 N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 메틸 에스테르 335㎎(93% 수율)을 수득하였다: 융점 218 내지 219℃. ES-HRMS m/e C25H25F2N3O5(M+Na)에 대한 계산치 508.1654, 측정치 508.1660.
실시예 37
N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 에스테르의 제조
실온에서 에틸 아세테이트(5㎖) 및 물(5㎖)중의 N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌(1.0mmol, 460㎎), 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 클로라이드 하이드로클라이드(8.05mmol, 1.43g) 및 탄산칼륨(8.05mmol, 1.11g)의 혼합물을 교반하였다. 층들을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 40㎖). 합쳐진 추출물을 염수(50㎖)로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 에스테르 426㎎(76% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C29H34F2N4O5(M+H)에 대한 계산치 557.2570, 측정치 557.2575.
실시예 38
N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르의 제조
실온에서 DMF(3.0㎖)중의 N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌(0.743mmol, 340㎎)과 중탄산나트륨(5.94mmol, 499㎎)의 현탁액에 1-클로로에틸 아세테이트(5.94mmol, 0.73㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 물(50㎖)중에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(3 × 25㎖). 합쳐진 추출물을 염수 용액(80㎖)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 건조제를 여과시키고, 여액을 농축시켜 조생성물을 수득하였으며, 이를 비오티지(40m) 컬럼을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무정형 백색 고형물로서 N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르 265㎎(66% 수율)을 수득하였다. ES-HRMS m/e C27H27F2N3O7(M+Na)에 대한 계산치 566.1709, 측정치 566.1710.
생물학적 정량예
실시예 A
VLA-4/VCAM-1 스크리닝 정량
고정된 VCAM-1로의 결합에 대한 경쟁 능력으로 정의되는 VLA-4 길항제 활성을, 고상, 이중 항체 ELISA를 사용하여 정량화하였다. VCAM-1에 결합된 VLA-4(α4β1 인테그린)는 항-인테그린 β1 항체: HRP-공액 항-생쥐 IgG: 색소생산성 기질(K-블루)의 복합체에 의해 검지되었다. 초기에, 이것은 96 웰 플레이트(눙크 맥시소프(Nunc Maxisorp))를 재조합형 인간 VCAM-1(100㎕ PBS중 0.4㎍)로 코팅하고, 각 플레이트를 밀봉한 후 플레이트를 약 18시간 동안 4℃에 두는 것을 수반하였다. 이후, VCAM-코팅된 플레이트를 1% BSA/0.02% NaN3로 차단시켜 비특정 결합을 감소시켰다. 정량 당일, 모든 플레이트를 VCAM 정량 완충액(Assay Buffer)(50mM 트리스-HCl, 100mM NaCl, 1mM MnCl2, 0.05% Tween 20의 200㎕/웰; pH 7.4)으로 2회 세척하였다. 시험 화합물을 100% DMSO에 용해시킨 후 1mg/mL BSA가 보충된 VCAM 정량 완충액중에 1:20으로 희석시켰다(즉, 최종 DMSO = 5%). 일련의 1:4 희석을 수행하여 각 시험 화합물에 대해 0.005nM 내지 1.563μM의 농도 범위를 달성하였다. 각 희석액 100㎕/웰을 VCAM-코팅된 플레이트에 가한 후, 라모스 세포(Ramos cell)-유도된 VLA-4를 가하였다. 이어서 상기 플레이트들을 플랫폼 진탕기에서 1분 동안 혼합하고, 37℃에서 2시간 동안 항온처리한 후, VCAM 정량 완충액 200㎕/웰로 4회 세척하였다. 생쥐 항-인간 인테그린 β1 항체 100㎕을 각 웰에 가하고(VCAM 정량 완충액 0.6㎍/mL + 1mg/mL BSA) 37℃에서 1시간 동안 항온처리하였다. 상기 항온처리 말기에, 모든 플레이트를 VCAM 정량 완충액(200㎕/웰)으로 4회 세척하였다. 상응하는 2차 항체인 HRP-공액 염소 항-생쥐 IgG(1:800 희석된 VCAM 정량 완충액 100㎕/웰 + 1mg/mL BSA)를 이어서 각 웰에 가한 후 실온에서 1시간 동안 항온처리하고 VCAM 정량 완충액(200㎕/웰)으로 3회 세척하여 마무리하였다. 색 전개는 K-블루 100㎕/웰을 가하여 개시시키고(실온에서 15분 항온처리) 레드 스톱(Red Stop) 완충액 100㎕/웰을 가하여 종결시켰다. 이후, 모든 플레이트를 650nM에서 UV/가시광 분광광도계로 읽었다. 결과는 총 결합(즉, 시험 화합물 부재하의 VLA-4 + VCAM-1)의 % 억제로서 계산하였다. 결과를 하기 표 I에 제공한다(A=IC50<1nM, B=IC50<10nM):
실시예 화합물 VCAM/VLA-4 ELISA 정량분석에서의 활성
2 A
3 B
4 A
5 B
실시예 B
라모스(VLA-4)/VCAM-1 세포-기본 스크리닝 정량 절차
물질:
가용성 재조합형 인간 VCAM-1(5- 및 7-Ig 영역의 혼합물)을 CHO 세포 배양 매질로부터 면역친화성 크로마토그래피에 의해 정제하여 0.1M 트리스-글리신(pH 7.5), 0.1M NaCl, 5mM EDTA, 1mM PMSF, 0.02% NaN3및 10㎍/mL 류펩틴을 함유하는용액에 보유시켰다. 칼세인(Calcein)-AM은 몰레큘라 프로브즈 인코포레이티드(Molecular Probes Inc.)로부터 구입하였다.
방법:
고정된 VCAM-1로의 결합에 대한 경쟁 능력으로 정의되는 VLA-4 길항제 활성을, 라모스-VCAM-1 세포 유착 정량법을 사용하여 정량화하였다. 세포-표면 VLA-4를 함유하는 라모스 세포는 형광 염료(칼세인-AM)로 표시하고 시험 화합물 존재하 또는 부재하에 VCAM-1에 결합되도록 하였다. 유착 세포에 연관된 형광 강도의 감소(% 억제)는 VLA-4 중개된 세포 유착이 시험 화합물에 의해 경쟁적으로 억제됨을 반영하였다.
초기에, 이것은 96 웰 플레이트(눙크 맥시소프)를 재조합형 인간 VCAM-1(PBS 100㎕중 100ng)로 코팅하고, 각 플레이트를 밀봉한 후 플레이트를 약 18시간 동안 4℃에 두는 것을 수반하였다. 이어서, VCAM-코팅된 플레이트를 PBS중의 0.05% Tween-20으로 2회 세척한 후, 차단 완충액(1% BSA/0.02% 티메로살(thimerosal)) 200㎕로 차단시켜 비특정 결합을 감소시켰다. 차단 완충액과 함께 항온처리한 후, 플레이트를 뒤집고, 블로팅(blotting)하고, 잔여 완충액을 흡인하였다. 이어서, 각 플레이트를 PBS 300㎕로 세척하고, 뒤집고, 잔여 PBS를 흡인하였다.
시험 화합물을 100% DMSO에 용해시킨 후 VCAM 세포 유착 정량 완충액(50mM 트리스-HCl중의 4mM CaCl2, 4mM MgCl2, pH 7.5)중에서 1:25로 희석시켰다(최종 DMSO= 4%). 각 시험 화합물에 대해 일련의 1:4 희석을 8회 수행하였다(1nM 내지12,500nM의 일반 농도 범위). 각 희석액 100㎕/웰을 VCAM-코팅된 플레이트에 가한 후, 라모스 세포 100㎕(1% BSA/PBS중의 200,000세포/웰)를 가하였다. 시험 화합물 및 라모스 세포를 함유하는 플레이트를 실온에서 45분 동안 항온처리한 후, PBS 165㎕/웰을 가하였다. 플레이트를 뒤집어 비유착 세포를 제거하고, 블롯팅하고 PBS 300㎕/웰을 가하였다. 플레이트를 다시 뒤집고, 블로팅하고 잔여 완충액을 온화하게 흡인하였다. 용해(Lysis) 완충액(50mM 트리스-HCl중의 0.1% SDS, pH 8.5) 100㎕를 각 웰에 가하고 회전 진탕 플랫폼상에서 2분 동안 진탕시켰다. 이어서 플레이트를 시토플루오(Cytofluor) 2300(밀리포어(Millipore)) 형광 측정 시스템(여기=485nm, 방사=530nm)상에서 형광 강도에 대해 읽었다. 그 결과를 하기 표 II에 표시하였다(A=IC50<100nm, B=IC50<10000nm):
실시예 화합물 VCAM/VLA-4 라모스 셀 정량에서의 활성
2 A
3 A
4 A
5 B
6 A
7 A
8 A
9 A
10 A
11 A
12 A
13 A
14 B
15 A
16 A
17 A
18 A
19 A
20 A
21 A
22 A
23 A
24 B
25 A
26 B
27 B
28 A
29 A
30 B
31 B
32 B
33 B
34 B
35 A
실시예 C
α4-β7 정량 절차
정량하기 2주 내지 1일 전에, 눙크 고결합성 에프96 맥시소프 면역플레이트(Nunc high-binding F96 Maxisorp immunoplate), #442404 또는#439454를 100㎕/웰의 부피 중의 MadCAM 25ng/웰(0.25㎍/ml)로 코팅하였다. 플레이트를 밀봉재로 덮고 사란(Saran) 랩으로 씌운 후 냉장고 내에서 24시간 이상 동안 항온처리하였다. 사용되는 코팅 완충액은 0.8g/L 탄산나트륨 및 1.55g/L 중탄산나트륨으로부터 제조되고 1N HCl를 사용하여 pH 9.6으로 조정된 10mM 탄산염/중탄산염 완충액이다. 정량 완충액은 다음으로 구성된다:
세척 완충액: PBS중의 0.05% Tween 20
차단 완충액: PBS중의 1% 탈지 분유
표시 완충액: PBS
세포 완충액: RPMI 1640 매질(첨가제 없음)
결합 완충액: 1.5mM CaCl2
0.5mM MnCl2
50mM 트리스-HCl; NaOH를 적가하여 pH 7.5로
H2O중의 부피가 되도록 함
pH 7.5로 조정함
희석 완충액: 결합 완충액중의 4% DMSO
플레이트를 세척 완충액으로 2회 세척한 후 실온에서 1시간 이상 동안 차단 완충액으로 차단시켰다. 밀봉된 플레이트를 밤새 냉장고 내에서 때때로 차단시켰다. 이어서 플레이트를 PBS로 세척하고 손으로 블로팅하여 건조시켰다. 잔여 액체를 웰로부터 흡인하였다.
충분한 RPMI 8866 세포를 정량을 위해 모액으로부터 제거하고(2×106세포/ml ×10ml/플레이트 ×플레이트의 수) 원심분리관에 위치시켰다. 관을 PBS로 부피까지 채우고 200 ×G에서 8분 동안 회전시켰다. 완충액을 따라내고 세포를 PBS중에 10×106/ml로 재현탁시키고 DMSO중의 칼세인의 모액(5mg/mL)을 5㎕/ml의 세포 현탁액에 가하였다. 현탁액을 암소에서 37℃로 30분 동안 항온처리하였다. 이어서 세포를 PBS로 세척하였다. PBS를 따라내고 정량에서의 피복(plating)을 위해 세포를 2×106세포/mL의 농도로 세포 완충액에 재현탁시켰다.
100% DMSO중의 25배의 첫번째 희석을 목적으로 하는 시험 화합물의 모액을 제조하였다. 시험 화합물뿐만 아니라 표준물질에 대한 첫번째 희석은 직선적인 결합 완충액으로의 1:25였던 반면, 나머지 일련의 희석은 희석 완충액으로의 것이었다(결합 완충액/4% DMSO). 모액 농도 및 스크리닝을 위한 화합물의 희석은 예상되는 활성에 의해 결정되었다.
정량을 위해, 결합 완충액 129㎕를 웰의 제 1 열에 피복하고 희석 완충액 100㎕를 나머지 웰에 피복하였다. 각 화합물 5.4㎕ 분량을 피펫으로 적절한 표시된 웰에 3회에 걸쳐 옮겼다. 다음에 플레이트를 낮추어 화합물을 희석시켰다(34㎕+100㎕ => 4배 희석). 대조군으로서, 희석 완충액 100㎕ + 세포 완충액 100㎕를 비특정 배경 웰(세포 및 화합물 없음)에 피복하고, 희석 완충액 100㎕ + 세포 100㎕를 전체 결합 웰(화합물 없음=100% 결합)에 피복하였다. 2×106세포/ml, 100㎕/웰(=2×105세포/웰)의 표시된 세포를 화합물을 함유하는 각 웰에 가하였다. 플레이트를 밀봉하고 암소에서 실온으로 45분 동안 항온처리하였다. 항온처리 후에, PBS 150㎕/웰을 가함으로써 결합 안된 세포를 제거하였다. 플레이트를 뒤집고, 종이 타올에 블로팅하고 PBS 200㎕를 가하여 온화하게 세척하고 다시 블로팅하였다. 남은 완충액을 웰로부터 주의깊게 흡인하였다. 최종적으로 PBS 100㎕를 각 웰에 가하였다.
이어서 플레이트를 시토플루오 2300(밀리포어) 형광 측정 시스템(여기=485nm, 방출=530nm)상에서 형광 강도에 대해 읽었다. 각 화합물의 IC50을 선형 회귀 분석에 의해 결정하였다. 그 결과를 하기 표 III에 표시하였다:
실시예 화합물 MadCAM/RPMI 세포 정량(A=IC50<100nM, B=IC50<10000nM, C=IC50<5,000nM)
6 A
7 A
8 A
9 A
10 B
11 C
12 A
13 B
14 C
15 B
16 B
17 B
18 A
19 B
20 B
21 B
22 B
23 B
24 B
25 B
26 B
27 B

Claims (44)

  1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 I
    상기 식에서,
    R1은 화학식 Y-1의 기이거나:
    화학식 Y-1
    [여기서, R22및 R23은 독립적으로 수소, 저급 알킬, 저급 알콕시, 사이클로알킬, 아릴, 아릴알킬, 니트로, 시아노, 저급 알킬티오, 저급 알킬설피닐, 저급 알킬 설포닐, 저급 알카노일, 할로겐 또는 퍼플루오로 저급 알킬이되, R22및 R23중 하나 이상은 수소가 아니고; R24는 수소, 저급 알킬, 저급 알콕시, 아릴, 니트로, 시아노, 저급 알킬 설포닐 또는 할로겐이다];
    R1은 탄소 원자를 통해 아미드 카보닐에 결합된 5원 또는 6원 헤테로방향족 고리인 화학식 Y-2의 기이되, 상기 고리는 N, O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택된 하나, 둘 또는 세 개의 헤테로 원자를 함유하고, 상기 고리의 하나 또는 두 원자는 독립적으로 저급 알킬, 사이클로알킬, 할로겐, 시아노, 퍼플루오로알킬 또는 아릴에 의해 치환되고 상기 치환된 원자중 하나 이상은 아미드 카보닐에 결합된 탄소 원자에 인접해 있는 것이거나;
    R1은 하기 화학식의 3원 내지 7원 고리인 화학식 Y-3의 기이고:
    화학식 Y-3
    [여기서, R25는 저급 알킬, 비치환 또는 불소 치환된 저급 알케닐 또는 화학식 R26-(CH2)e-의 기이되, 여기서 R26은 아릴, 헤테로아릴, 아지도, 시아노, 하이드록시, 저급 알콕시, 저급 알콕시카보닐, 저급 알카노일, 저급 알킬티오, 저급 알킬 설포닐, 저급 알킬 설피닐, 퍼플루오로 저급 알카노일, 니트로이거나, R26은 화학식 -NR28R29의 기(여기서, R28은 수소 또는 저급 알킬이고, R29는 수소, 저급 알킬, 저급 알콕시카보닐, 저급 알카노일, 아로일, 퍼플루오로 저급 알카노일아미노, 저급 알킬 설포닐, 저급 알킬아미노카보닐, 아릴아미노카보닐이거나; 또는 R28및 R29가 그에 부착된 질소 원자와 함께, O, S 및 N-R40(여기서, R40은 H, 저급 알킬, 아릴, 저급 알카노일, 아로일 또는 저급 알콕시카보닐임)으로부터 선택된 하나의 추가적인 헤테로 원자를 임의적으로 함유하는 4원, 5원 또는 6원 포화 헤테로사이클릭 고리를 형성함)이고,
    상기 고리중의 탄소 원자는 치환되지 않았거나 저급 알킬 또는 할로겐으로 치환되고,
    Q는 -(CH2)fO-, -(CH2)fS, -(CH2)fN(R27)-, -(CH2)f-이되, 여기서, R27은 H, 저급 알킬, 아릴, 저급 알카노일, 아로일 또는 저급 알콕시카보닐이고, e는 0 내지 4의 정수이고, f는 0 내지 3의 정수이다];
    R2는 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬, 아릴알킬 또는 아릴이고;
    R3은 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬, 아릴알킬 또는 아릴이고;
    R4는 수소, 할로겐, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴이고;
    R5는 수소, 저급 알킬, 클로로 또는 저급 알콕시이고;
    R6은 수소, 저급 알킬, 저급 알킬카보닐옥시 저급 알킬, 치환된 저급 알킬이거나,
    R6은 화학식 P-3의 기이거나:
    화학식 P-3
    [여기서, R32는 수소 또는 저급 알킬이고; R33은 수소, 저급 알킬, 아릴이고; R34는 수소 또는 저급 알킬이고; h는 0 내지 2의 정수이고; g는 0 내지 2의 정수이고; h와 g의 합은 1 내지 3이다];
    R6은 화학식 P-4의 기이다:
    화학식 P-4
    [여기서, R32, g 및 h는 상기 정의와 같고; Q'은 O, S, -(CH2)j- 또는 화학식 N-R35의 기이되, 여기서 R35는 수소, 저급 알킬, 저급 알카노일, 저급 알콕시카보닐이고; j는 0, 1 또는 2이다].
  2. 제 1 항에 있어서,
    R2가 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬, 아릴알킬 또는 아릴이고;
    R3이 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬, 아릴알킬 또는 아릴이고;
    R4가 수소, 저급 알킬, 퍼플루오로 저급 알킬 또는 아릴인 화합물.
  3. 제 1 항에 있어서,
    R2가 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴이고;
    R3이 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴이고;
    R4가 수소, 할로겐, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴인 화합물.
  4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R2가 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴이고;
    R3이 수소, 저급 알킬, 치환된 저급 알킬 또는 아릴이고;
    R4가 수소, 저급 알킬, 퍼플루오로 저급 알킬 또는 아릴인 화합물.
  5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4가 수소, 저급 알킬 또는 퍼플루오로 저급 알킬인 화합물.
  6. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1이 화학식 Y-1의 기로서 식중 R22및 R23가 독립적으로 저급 알킬 또는 할로겐이고; R24가 수소인 화합물.
  7. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1이 화학식 Y-1의 기로서 식중 R22및 R23이 독립적으로 수소 또는 할로겐이고; R24가 저급 알콕시인 화합물.
  8. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1이 하기 화학식의 3원 내지 7원 고리인 화학식 Y-3의 기인 화합물:
    화학식 Y-3
    상기 식에서,
    R25는 화학식 R26-(CH2)e-의 기이고, Q는 -(CH2)f-이되, 여기서 R26은 저급 알콕시이고, e는 0 내지 4의 정수이고, f는 0 내지 3의 정수이다.
  9. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기 화학식 I의 화합물:
    화학식 I
    상기 식에서,
    R1은 제 1 항에서 정의된 바와 같고;
    R2는 저급 알킬이고;
    R3은 저급 알킬이고;
    R4는 수소, 퍼플루오로 저급 알킬 또는 저급 알킬이고;
    R5는 수소 또는 저급 알킬이고;
    R6은 수소, 저급 알킬, 저급 알킬카보닐옥시 저급 알킬이거나,
    R6은 제 1 항에서 정의된 바와 같은 화학식 P-3의 기이거나,
    R6은 제 1 항에서 정의된 바와 같은 화학식 P-4의 기이다.
  10. 제 9 항에 있어서,
    R1이 화학식 Y-1의 기인 화합물:
    화학식 Y-1
    상기 식에서,
    R22및 R23은 독립적으로 퍼플루오로 저급 알킬, 저급 알킬 또는 할로겐이고; R24는 수소이다.
  11. 제 10 항에 있어서,
    R2및 R3이 저급 알킬이고; R4가 수소 또는 저급 알킬이고, R5및 R6이 수소인 화합물.
  12. 제 11 항에 있어서,
    N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-브로모-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-에틸-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[[2-(2-메틸에틸)-6-메틸페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2,6-디플루오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[[2-플루오로-6-(트리플루오로메틸)페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[[2,6-디-(2-메틸에틸)페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-클로로-6-에틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-클로로-6-프로필페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[[2-클로로-6-(2-메틸에틸)페닐]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; 또는 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌으로부터 선택된 화합물.
  13. 제 11 항에 있어서,
    N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-브로모-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; 또는 N-[(2-브로모-5-메톡시페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌으로부터 선택된 화합물.
  14. 제 10 항에 있어서,
    R2및 R3이 저급 알킬이고; R4가 수소 또는 저급 알킬이고, R5가 수소이고, R6이 수소, 저급 알킬카보닐옥시 저급 알킬, 저급 알킬이거나, R6이 화학식 P-3의 기이거나:
    화학식 P-3
    [여기서, R32는 수소 또는 저급 알킬이고; R33은 수소, 저급 알킬, 아릴이고; R34는 수소 또는 저급 알킬이고; h는 0 내지 2의 정수이고; g는 0 내지 2의 정수이고; h와 g의 합은 1 내지 3이다];
    R6이 화학식 P-4의 기인 화합물:
    화학식 P-4
    [여기서, R32, g 및 h는 위에서 정의된 바와 같고; Q'은 O, S, -(CH2)j- 또는 화학식 N-R35의 기(여기서, R35는 수소임)이다].
  15. 제 14 항에 있어서,
    R6이 저급 알킬인 화합물.
  16. 제 15 항에 있어서,
    N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 에틸 에스테르; N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 에틸 에스테르; 또는 N-[(2,6-디플로오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 에틸 에스테르인 화합물.
  17. 제 14 항에 있어서,
    R6이 저급 알킬카보닐옥시 저급 알킬인 화합물.
  18. 제 17 항에 있어서,
    N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르; N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르; 또는 N-[(2,6-디플로오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 1-(아세톡시)에틸 에스테르인 화합물.
  19. 제 14 항에 있어서,
    R6이 화학식 P-3의 기로서 식중 R32가 수소이고; R33및 R34가 저급 알킬이고; h가 1이고; g가 0인 화합물.
  20. 제 19 항에 있어서,
    N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 에스테르; N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 에스테르; 또는 N-[(2,6-디플로오로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-[(N,N-디에틸)아미노]에틸 에스테르인 화합물.
  21. 제 14 항에 있어서,
    R6이 화학식 P-4의 기로서 식중 R32가 수소이고; h가 1이고; g가 0이고; Q'이 O인 화합물.
  22. 제 21 항에 있어서,
    N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르; 또는 N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌 2-(4-모폴리노)에틸 에스테르인 화합물.
  23. 제 10 항에 있어서,
    R2및 R3이 저급 알킬이고; R4가 퍼플루오로 저급 알킬이고, R5및 R6이 수소인 화합물.
  24. 제 23 항에 있어서,
    N-[1-(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; 또는 N-[[2-플루오로-6-(트리플루오로메틸)페닐]카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-6-(트리플루오로메틸)-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌인 화합물.
  25. 제 10 항에 있어서,
    R2및 R3이 저급 알킬이고; R4가 수소이고; R5가 저급 알킬이고, R6이 수소인 화합물.
  26. 제 25 항에 있어서,
    N-[(2-클로로-6-메틸페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌; N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌; 또는 N-[(2,6-디클로로페닐)카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-3-메틸-L-페닐알라닌인 화합물.
  27. 제 9 항에 있어서,
    R1이 하기 화학식의 3원 내지 7원 고리인 화학식 Y-3의 기인 화합물:
    화학식 Y-3
    상기 식에서,
    R25는 화학식 R26-(CH2)e-의 기이고,Q는 -(CH2)f-이되, 여기서 R26은 저급 알콕시이고, e는 0 내지 4의 정수이고, f는 0 내지 3의 정수이다.
  28. 제 27 항에 있어서,
    R2및 R3이 저급 알킬이고, R4가 수소 또는 저급 알킬이고; R5및 R6이 수소인 화합물.
  29. 제 28 항에 있어서,
    4-(1,3-디메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)]-N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로-펜틸]카보닐]-L-페닐알라닌; N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-4-(1,3,6-트리메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-L-페닐알라닌; 또는 4-(1,3-디에틸-6-메틸-2,4-디옥소-5-피리미디닐)-N-[[1-(2-메톡시에틸)사이클로펜틸]카보닐]-L-페닐알라닌인 화합물.
  30. 제 9 항에 있어서,
    R2및 R3이 저급 알킬이고; R4가 수소이고, R5및 R6이 수소인 화합물.
  31. 제 30 항에 있어서,
    R1이 화학식 Y-1의 기인 화합물.
  32. 제 30 항에 있어서,
    R1이 화학식 Y-1의 기로서, 식중 R22및 R23이 독립적으로 저급 알킬 또는 할로겐이고; R24가 수소인 화합물.
  33. 제 31 항에 있어서,
    R1이 화학식 Y-1의 기로서, 식중 R22및 R23이 독립적으로 수소 또는 할로겐이고; R24가 저급 알콕시인 화합물.
  34. 제 30 항에 있어서,
    R1이 탄소 원자를 통해 아미드 카보닐에 결합된 5원 또는 6원 헤테로방향족 고리이되, 상기 고리가 N, O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택된 한 개, 두 개 또는 세 개의 헤테로원자를 함유하고, 상기 고리의 하나 또는 두 원자가 독립적으로 저급 알킬, 사이클로알킬, 할로겐, 시아노, 퍼플루오로알킬 또는 아릴에 의해 치환되고, 상기 치환된 원자중 하나 이상이 아미드 카보닐에 결합된 탄소 원자에 인접한 것인 화합물.
  35. 제 30 항에 있어서,
    R1이 화학식 Y-3의 기인 화합물.
  36. 제 35 항에 있어서,
    R1이 화학식 Y-3의 기로서, 식중 R25가 화학식 R26-(CH2)e-의 기이고, Q가 -(CH2)f-이되, 여기서 R26이 저급 알콕시이고, e가 0 내지 4의 정수이고, f가 0 내지 3의 정수인 화합물.
  37. 하기 화학식 II의 화합물:
    화학식 II
    상기 식에서,
    R2내지 R5는 제 1 항에서 정의된 바와 같고, P1및 P2는 각각 보호기이다.
  38. 제 1 항 내지 제 36 항 중 어느 한 항에 있어서,
    약제로서 사용되는 화합물.
  39. 제 1 항 내지 제 36 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물.
  40. VCAM-1 또는 VLA-4 또는 VLA-4-발현 세포의 결합에 의해 매개되는 질환 상태 치료, 특히 류마티스성 관절염, 다발성 경화증, 염증성 장 질환 및 천식 치료용의 제 1 항 내지 제 36 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  41. VCAM-1 또는 VLA-4 또는 VLA-4-발현 세포의 결합에 의해 매개되는 질환 상태 치료, 특히 류마티스성 관절염, 다발성 경화증, 염증성 장 질환 및 천식 치료용의 제 1 항 내지 제 36 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염의 용도.
  42. 제 1 항 내지 제 36 항에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 상용성 약학적 담체를 본초약적 투여 형태로 제조하는 것을 포함하는 약학 조성물의 제조방법.
  43. 류머티스성 관절염, 다발성 경화증, 염증성 장 질환 및 천식 치료용 약제의 제조에 있어서의 제 1 항 내지 제 36 항에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 가능한 염의 용도.
  44. 실질적으로 본원에서, 특히 신규한 화합물, 중간체, 약학 조성물 및 이들의 용도에 대하여 기술된 바와 같은 본 발명.
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Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6960597B2 (en) 2000-06-30 2005-11-01 Orth-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Aza-bridged-bicyclic amino acid derivatives as α4 integrin antagonists
JP3440469B2 (ja) * 2000-08-18 2003-08-25 味の素株式会社 新規フェニルアラニン誘導体
AR033765A1 (es) * 2001-05-22 2004-01-07 Syngenta Participations Ag Procedimiento para la preparacion de derivados 3-alquil-3h-isobenzofuran-1-ona 7-sustituidos.
EP1454898A4 (en) * 2001-12-13 2006-12-13 Ajinomoto Kk NEW PHENYL ALANIDE DERIVATIVES
US7345049B2 (en) 2003-12-22 2008-03-18 Ajinomoto Co., Inc. Phenylalanine derivatives
US7618981B2 (en) * 2004-05-06 2009-11-17 Cytokinetics, Inc. Imidazopyridinyl-benzamide anti-cancer agents
AU2005277634B2 (en) * 2004-08-16 2011-02-17 Merck Sharp & Dohme Corp. VLA-4 antagonists
JP4784224B2 (ja) 2004-09-24 2011-10-05 味の素株式会社 糖鎖転移方法および糖鎖転移酵素
EP2091916A2 (en) * 2005-11-23 2009-08-26 AstraZeneca AB L-phenylalanine derivatives and their use as integrin antagonists
AR059224A1 (es) * 2006-01-31 2008-03-19 Jerini Ag Compuestos para la inhibicion de integrinas y uso de estas
US20090203663A1 (en) * 2006-02-09 2009-08-13 Astrazeneca Ab Chemical compounds
CN101472900B (zh) * 2006-06-19 2011-07-27 东丽株式会社 多发性硬化症的治疗或预防药
DK2203430T3 (da) 2007-09-17 2011-09-26 Abbott Lab N-phenyl-dioxo-hydropyrimidiner anvendelige som inhibitorer for hepatitis C virus (HCV)
CN101842360B (zh) 2007-09-17 2014-12-17 艾伯维巴哈马有限公司 抗感染嘧啶及其用途
TWI437994B (zh) 2007-09-17 2014-05-21 Abbvie Bahamas Ltd 抗感染劑及其用途
EP2382222B1 (en) * 2008-12-22 2013-05-01 Icl-ip America Inc. Water miscible solvent based process for purifying a bisphosphate
US9216952B2 (en) 2010-03-23 2015-12-22 Abbvie Inc. Process for preparing antiviral compound
US9255074B2 (en) 2010-07-16 2016-02-09 Abbvie Inc. Process for preparing antiviral compounds
US8975443B2 (en) 2010-07-16 2015-03-10 Abbvie Inc. Phosphine ligands for catalytic reactions
NZ704603A (en) 2010-07-16 2016-06-24 Abbvie Inc Phosphine ligands for catalytic reactions
US8895737B2 (en) 2010-07-16 2014-11-25 Shashank Shekhar Process for preparing antiviral compounds
US8877815B2 (en) 2010-11-16 2014-11-04 Novartis Ag Substituted carbamoylcycloalkyl acetic acid derivatives as NEP
US9447035B2 (en) * 2012-01-27 2016-09-20 Hoffmann-La Roche Inc. Integrin antagonist conjugates for targeted delivery to cells expressing VLA-4
KR20140127234A (ko) * 2012-01-27 2014-11-03 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｖｌａ-4 발현 세포로의 표적화된 전달을 위한 인테그린 안타고니스트 접합체
WO2015048819A1 (en) 2013-09-30 2015-04-02 The Regents Of The University Of California Anti-alphavbeta1 integrin compounds and methods
CN109053723B (zh) * 2013-10-29 2021-09-03 Ea制药株式会社 磺酰胺衍生物及其药物用途
AU2016228852A1 (en) 2015-03-10 2017-10-19 The Regents Of The University Of California Anti-alphavbeta1 integrin inhibitors and methods of use
AU2019373242B2 (en) 2018-10-30 2023-07-13 Gilead Sciences, Inc. Compounds for inhibition of alpha 4 beta 7 integrin
CN112969687A (zh) 2018-10-30 2021-06-15 吉利德科学公司 作为α4β7整合素抑制剂的喹啉衍生物
CA3115830C (en) 2018-10-30 2023-09-12 Gilead Sciences, Inc. Compounds for inhibition of .alpha.4.beta.7 integrin
KR102641718B1 (ko) 2018-10-30 2024-02-29 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 알파4베타7 인테그린 억제제로서의 이미다조피리딘 유도체
CN114222730A (zh) 2019-08-14 2022-03-22 吉利德科学公司 用于抑制α4β7整合素的化合物

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998053817A1 (en) * 1997-05-29 1998-12-03 Merck & Co., Inc. Biarylalkanoic acids as cell adhesion inhibitors
EP1001764A4 (en) * 1997-05-29 2005-08-24 Merck & Co Inc Heterocyclic amides as cell adhesion inhibitors
NZ502813A (en) * 1997-08-22 2002-10-25 F N-aroylphenylalanine derivatives as inhibitors of the interaction between a4 containing integrins and VCAM-1
DE69821950T2 (de) * 1997-08-22 2004-12-16 F. Hoffmann-La Roche Ag N-aroylphenylalaninderivate
DE60021251D1 (de) * 1999-01-22 2005-08-18 Elan Pharm Inc Multizyklische verbindungen zur hemmung der durch vla-4 vermittelten leukozytenadhäsion

Also Published As

Publication number Publication date
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