KR102480074B1

KR102480074B1 - 설폰아마이드 화합물 및 이의 용도

Info

Publication number: KR102480074B1
Application number: KR1020207018727A
Authority: KR
Inventors: 히로유키 나카무라; 징 텡; 나단 지냑
Original assignee: 다이호야쿠힌고교 가부시키가이샤
Priority date: 2017-11-29
Filing date: 2018-11-28
Publication date: 2022-12-21
Also published as: RU2020121153A3; EP3717462A4; ES2969901T3; TWI762743B; SG11202004877UA; JP6846574B2; TW201925182A; WO2019106579A1; MA51224A; EP3717462B1; JP2021504432A; CA3084030A1; PH12020550703A1; CN111386260A; CN111386260B; US20200361883A1; AU2018377036B2; KR20200096261A; BR112020010148A2; RU2020121153A

Abstract

본원은 설폰아마이드 화합물의 새로운 결정형, 결정형 화합물을 포함하는 약학적 조성물, 이를 제조하는 방법 및 이의 용도에 관해 개시한다.

Description

설폰아마이드 화합물 및 이의 용도

본원은 리보뉴클레오티드 환원 효소 억제 활성을 가지는 설폰아마이드 화합물의 새로운 결정형, 상기 결정형 화합물을 포함하는 약학적 조성물, 이를 제조하는 방법 및 이의 용도에 관해 개시한다.

리보뉴클레오타이드 환원효소 (이하, RNR라고도 함)은 대서브 유닛 M1과 소서브 유닛 M2의 헤테로 올리고머로 구성되어, 양자의 발현이 효소 활성에 필요로 된다. RNR은 리보뉴클레오시드 5'-디포스페이트 (이하, NDP라고도 함)를 기질로서 인식하여 2'-데옥시리보뉴클레오시드 5'-디포스페이트 (이하 dNDP라고도 함)로 환원하는 반응을 촉매한다. RNR은 de novo dNTP 합성 경로에서 율속으로 되는 효소이기 때문에, RNR은 DNA 합성 및 복구에 필수적인 역할을 하고 있다.

RNR의 효소 활성은 세포의 증식과 밀접한 관련이 있으며, 특히 암에서 효소 활성이 높다는 보고가 있다. 실제로 다양한 종류의 고형암과 혈액 암에서 RNR의 서브 유닛 중 하나인 M2의 과잉 발현이나 그 예후와의 상관 관계가 많이 보고되고 있다. 또한, 일부의 암종 유래의 세포주 및 비 임상 모델에서 RNR을 저해하는 것에 의한 세포 증식 억제, in vivo에서 항종양 효과가 보고되고 있으며, RNR가 암 치료의 중요한 표적 분자의 하나인 것이 강하게 시사되고 있다.

종래, RNR 저해 활성을 가지는 화합물로는 하이드록시 우레아 (이하, HU라고도 함) 및 3-아미노피리딘-2-카르복시알데히드 티오세미카바존 (이하, 3-AP라고도 함)이 알려져 있다 (Biochem.Pharmacol.78,1178-1185 (2009)). 이들 화합물은, 본 발명에 따른 설폰 아마이드 화합물과 구조가 다르다. HU는 임상에서 30년 이상 사용되어 왔으나, RNR 저해 활성이 매우 약해서 그 효과가 한정되어 있다. 또한 HU의 사용에 대한 내성도 과제로 되고 있다. 한편, 3-AP는 금속 이온에 킬레이트 가능한 구조를 가지고 있으며, 주로 철 이온에 킬레이트하여 RNR을 저해한다고 되어 있다. 그러나 3-AP는 다른 다양한 철 이온 요구성 단백질에 오프 타겟 작용이 시사되고 있으며, 임상에서는 저산소증, 호흡 곤란, 메트 헤모글로빈 혈증 등의 부작용을 일으키는 것으로 알려져 있다.

따라서, 보다 우수한 RNR 저해 활성 및 금속 이온에 킬레이트하지 않는 구조를 가지며, RNR 관련 질환, 예를 들면 종양에 대해 유용한 RNR 억제제의 개발이 강하게 요구되고 있다.

또한, 취급하기에 용이한 RNR 억제제를 개발하려는 필요성이 있다. 생물학적 활성 화합물의 충전성(chargeability) 및 흡습성은 잠재적인 제약 조성물로의 혼입 동안 화합물의 취급에 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. 예를 들어, 정전기의 영향을 받는 활성 화합물은 생산량 감소 및 고르지 않은 포장과 같은 제조 과정에서 문제를 일으킬 수 있다. 따라서, 정전기가 낮은 활성 화합물이 바람직하다. 흡습성 화합물은 수분 흡수로 인해 문제를 일으켜 주변 환경에 존재하는 물의 양에 따라 화합물 질량의 변화를 유발하여 화합물의 생물학적 효능을 정확하게 평가하고 화합물을 함유하는 제약 조성물의 균일성을 보장하는 것을 어렵게 한다. 따라서 흡습성이 낮은 활성 화합물이 바람직하다.

본 발명의 목적 중 하나는 강력하고 선택적인 RNR 억제제이고, 항종양제 또는 RNR 관련 질병의 치료제로서 사용될 수 있는 신규하고 안정적이고, 덜 정적인(static) 결정형, 공결정(co-crystal) 및/또는 염을 제공하는 것이다. 상술한 요건을 만족시키는 화합물을 확인하기 위한 광범위한 연구 결과, 본 발명자들은 우수한 RNR 억제 활성을 가지며, 치료제로서 사용되는 안정하고 낮은 정전기 및 비흡습성 형태의, RNR 관련 종양 및 기타 질병 치료용 설폰 아마이드 화합물을 발견하였다. 상기 설폰 아마이드 화합물은 공결정형과 같은 결정형 및/또는 염 형태로 존재한다.

본원에 개시된 다양한 측면은 다음의 [1] 내지 [28]을 제공한다.

[1] 하기 화합물로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 화합물의 결정형:

5-브로모-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-에틸-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드;

5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드;

N-((1S,2R)-2-(3-브로모-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-5-클로로-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드;

5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드; 및

5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시크로만-8-설폰아마이드.

[2] [1]에 따른 결정형에 있어서, 상기 결정형의 화학적 순도가 90% 이상인 결정형.

[3] [1] 또는 [2]에 따른 결정형에 있어서, 상기 결정형의 광학적 순도가 100%ee인 결정형.

[4] [1]-[3] 중 어느 하나에 따른 결정형에 있어서, 상기 결정형은 약 40 ℃ 및 약 75%의 상대 습도에 약 4주 동안 노출되었을 때 안정한 것인, 결정형.

[5] [1]-[4] 중 어느 하나에 따른 결정형에 있어서, 상기 결정형은 벤조산염을 더 포함하는 결정형.

[6] [1]-[5] 중 어느 하나에 따른 결정형에 있어서, 상기 결정형은 상기 벤조산 및 상기 화합물의 공결정형(co-crystal)인 것인, 결정형.

[7] (1) [1]-[6] 중 어느 하나에 따른 결정형 및 (2) 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물.

[8] 생체 내 리보뉴클레오티드 환원 효소를 억제하는 방법으로서, 이를 필요로 하는 인간 대상체에게 치료적 유효량의 [7]에 따른 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 방법. 일 실시예에서 리보튜클레오티드 환원 효소 억제는 인간 대상체의 종양 세포에서 일어난다.

[9] [1]-[6] 중 어느 하나에 따른 결정형을 유효성분으로 포함하는 항 종양제. 일 실시예에서 상기 항종양제는 경구용 항종양제이다.

[10] 리보뉴클레오티드 환원 효소 억제제를 생산하기 위한 [1]-[6] 중 어느 하나에 따른 결정형의 용도.

[11] [1]-[6] 중 어느 하나에 따른 결정형의 약제로서의 용도.

[12] [1]-[6] 중 어느 하나에 따른 결정형의 항종양제로서의 용도. 일 실시예에서 상기 항종양제는 경구용인, 항종양제.

[13] 리보뉴클레오티드 환원 효소 억제제로 사용하기 위한 [1]-[6] 중 어느 하나에 따른 결정형.

[14] 종양의 예방 또는 치료용인 [1]-[6] 중 어느 하나에 따른 결정형.

[15] 화합물을 경구용으로 투여하여 종양을 예방 또는 치료하기 위한 [1]-[6] 중 어느 하나에 따른 결정형.

[16] [1]-[6] 중 어느 하나에 따른 결정형에 있어서, 상기 화합물 또는 벤조산염은 하나 이상의 방사성 동위원소 또는 비방사성 동위원소로 치환되는 것인, 결정형.

[17] 하기 화합물로 구성되는 군으로부터 선택되는 벤조산염:

5-브로모-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

[18] (1) [17]에 따른 벤조산염 및 (2) 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물.

[19] 생체 내 리보뉴클레오티드 환원 효소를 억제하는 방법으로서, 이를 필요로 하는 인간 대상체에게 치료적 유효량의 [18]에 따른 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 방법. 일 실시예에서, 리보뉴클레오티드 환원 효소의 억제는 인간 대상체의 종양 세포에서 일어난다.

[20] [17]에 따른 벤조산염을 유효성분으로 포함하는 항종양제. 일 실시예에서 상기 항종양제는 경구용 항종양제이다.

[21] 리보뉴클레오티드 환원 효소 억제제를 생산하기 위한 [17]에 따른 벤조산염의 용도.

[22] [17]에 따른 벤조산염의 약제로서의 용도.

[23] [17]에 따른 벤조산염의 항종양제로서의 용도. 일 실시예에서 상기 항종양제는 경구용 항종양제이다.

[24] 리보뉴클레오티드 환원 효소 억제제로 사용하기 위한 [17]에 따른 벤조산염.

[25] 종양의 예방 또는 치료용 [17]에 따른 벤조산염.

[26] 화합물을 경구용으로 투여하여 종양을 예방 또는 치료하기 위한 벤조산염.

[27] [17]에 따른 벤조산염에 있어서, 상기 벤조산염은 하나 이상의 방사성 동위원소 또는 비방사성 동위원소로 치환되는 것인, 벤조산염.

[28] 본 발명은 RNR 억제제로서의 [1]-[6] 중 어느 하나에 따른 결정형, [6]에 따른 상기 공결정형 및/또는 [17]에 따른 벤조산염에 대해 개시한다.

본 발명에서 개시하는 상기 결정형, 공결정형 및/또는 벤조산염은 우수한 RNR-억제 활성 및 안정성을 보이며, 비흡습성 및/또는 비정전기적이므로 다루기가 용이하다. 따라서, 상기 결정형, 공결정형 및/또는 벤조산염은 RNR 관련 질명의 치료에 사용되기에 적합하다.

도 1은 본원에 따른 실시예 화합물을 투여한 후의 상대적 종양 체적(Relative tumor volume, 이하 “RTV”라고도 함) 일일 변화를 나타낸 도면이다.
도 2는 본원에 따른 실시예 화합물을 투여한 후의 RTV 일일 변화를 나타낸 도면이다.
도 3은 본원에 따른 실시예 화합물을 투여한 후의 RTV 일일 변화를 나타낸 도면이다.
도 4는 본원에 따른 실시예 화합물을 투여한 후의 RTV 일일 변화를 나타낸 도면이다.
도 5는 본원에 따른 실시예 결정형을 도시한 도면이다. 실시예 결정형은 0.15 × 0.20 × 0.25 mm의 크기를 가지며, 무색이고, 평평한 모양이다.
도 6은 실시예 공결정형의 X-선 회절 분말 (XRD) 차트를 나타내는 도면이다.
도 7은 실시예 공결정형의 시차 주사 열량 (DSC) 곡선을 나타내는 도면이다.
도 8은 실시예 화합물의 공결정형 (A) 및 동일 화합물의 자유 형태 (B)의 수분 흡착/탈착 등옥 곡선을 나타내는 도면이다.
도 9는 실시예 벤조산염 공결정형의 단일 결정 분석 결과에 근거한 X-선 회절 패턴을 나타내는 도면이다.
도 10 내지 도 12는 실시예 결정형의 광학적 순도를 측정한 데이터를 나타내는 도면이다.

본원은 하기 화합물로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 화합물의 결정형, 공결정형 또는 벤조산염에 관해 개시한다.

5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

5-브로모-2-(N-((1S,2R)-2-(2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

5-클로로-2-(N-(1S,2R)-2-(2-플루오로나프탈렌-1-일)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

5-브로모-2-(N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

2-(N-((1S,2R)-2-(3-브로모-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)-5-클로로-벤즈아마이드;

5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-6-(피롤리딘-1-카보닐)피리딘-2-설폰아마이드;

N-((1S,2R)-2-(3-브로모-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-5-클로로-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드;

5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드;

5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시크로만-8-설폰아마이드;

3-클로로-6-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)-N,N-다이메틸피콜린아마이드;

4-아미노-2-메톡시-N-((1S,2R)-2-(8-메틸나프탈렌-1-일)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)벤젠설폰아마이드;

4-아미노-N-((1S,2R)-2-(2,3-다이하이드로-1H-인덴-4-일)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-2-메톡시벤젠설폰아마이드; 및

5-클로로-2-((1S,2R)-메틸-d3-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드.

일 실시예에서, 상기 화합물은 하기 그룹으로부터 선택된다:

N-((1S,2R)-3-(3-브로모-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-5-클로로-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드;

5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3,-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시크로만-8-설폰아마이드.

추가 실시예에서, 상기 화합물은 하기 화합물로 구성되는 군으로부터 선택된다:

5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3,-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

5-클로로-2-(N-(1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드;

5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)-프로필)-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드; 및

일 실시예에서, 상기 화합물은 5-브로모-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드이다. 일 실시예에서, 본원은 5-브로모-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)설파모일)벤즈아마이드의 결정형 또는 벤조산의 공결정형에 관해 개시한다.

일 실시예에서, 상기 화합물은 5-브로모-2-(N-((1S,2R)-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드이다. 일 실시예에서, 본원은 5-브로모-2-(N-((1S,2R)-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형 또는 벤조산 및 상기 화합물의 공결정형에 관해 개시한다.

일 실시예에서, 상기 화합물은 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드이다. 일 실시예에서, 본원은 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형 또는 벤조산 및 상기 화합물의 공결정형에 관해 개시한다.

일 실시예에서, 상기화합물은 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드이다. 일 실시예에서, 본원은 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형 또는 벤조산 및 상기 화합물의 공결정형에 관해 개시한다.

일 실시예에서, 상기 화합물은5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드이다. 일 실시예에서, 본원은 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드의 결정형 또는 벤조산 및 상기 화합물의 공결정형에 관해 개시한다.

일 실시예에서, 상기 화합물은 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시크로만-8-설폰아마이드이다. 일 실시예에서, 본원은 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시크로만-8-설폰아마이드의 결정형 또는 벤조산 및 상기 화합물의 공결정형에 관해 개시한다.

본원에 따른 결정형, 공결절형 및/또는 벤조산염 및 이들의 중간체는 재결정롸, 결정화, 증류 및 컬럼 크로마토그래피와 같은 기존에 잘 알려진 분리 및 정제 기술로 분리 및 정제될 수 있다.

광학 이성질체, 입체 이성질체, 토토머 또는 회전 이성질체가 본 개시 내용의 결정질 화합물, 공 결정 또는 벤조산 염에서 가능하지만 명시적으로 도시되지 않은 경우, 결정질 화합물, 공결정 및/또는 벤조산 염은 이들 이성질체를 개별적으로 또는 이들의 혼합물로 포함하도록 의도된다. 예를 들어, 달리 언급되지 않는 한, 본 발명의 결정질 화합물, 공결정 및/또는 벤조산염이 라세미체로 나타날 때, 라세미체로부터 분해될 수 있는 가능한 거울상 이성질체 및/또는 부분 입체 이성질체는 또한 본 개시 내용에 포함된다. 거울상 이성질체 및/또는 부분 입체 이성질체는 일반적으로 공지 된 합성 방법에 의해 수득 될 수 있다.

본 명세서에 사용된 바와 같이 그리고 달리 명시되지 않는 한, 화합물, 물질, 변형, 재료, 성분 또는 생성물을 설명하기 위해 사용될 때 본원에 사용된 용어 "결정"및 관련 용어는 화합물, 물질, 변형, 물질, 성분 또는 생성물을 의미한다 X- 선 회절에 의해 결정되는 바와 같이 실질적으로 결정질이다. 예를 들어, Remington : The Science and Practice of Pharmacy, 21 판, Lippincott, Williams and Wilkins, Baltimore, MD (2005); 미국 약전, 제 23 판. 1843-1844 (1995).

본 명세서에서 사용된 바와 같이 그리고 달리 명시되지 않는 한, 용어 "결정혀" 및 관련 용어는 결정질인 고체 형태를 지칭한다. 결정형은 단일 성분 결정질 형태 및 다성분 결정질 형태를 포함하고, 선택적으로 공결정, 염 (제약 상 허용되는 염 포함), 다형체, 용매화물, 수화물 및/또는 다른 분자 복합체를 포함 할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 특정 구체 예에서, 물질의 결정질 형태는 비정질 형태 및/또는 다른 결정질 형태가 실질적으로 없을 수 있다. 특정 실시 양태에서, 물질의 결정질 형태는 중량 기준으로 약 0.1, 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 또는 50 %. 미만의 하나 이상의 비정질 형태 및/또는 다른 결정 형태를 함유할 수 있다.

용어 "공결정"은 당업계에 공지된 다수의 공결정 형성제로부터 유래 된 분자 복합체를 지칭한다. 염과 달리, 공결정은 전형적으로 공결정 형성제와 약물 사이의 수소 전달을 포함하지 않으며, 대신 공결정 형성제와 약물 사이의 수소 결합, 결정구조에서 공결정 형성제와 설폰 아마이드 화합물사이의 방향족 고리 적층 또는 분산력과 같은 분자간 상호 작용을 수반한다. 일부 실시 양태에서, 본 개시 내용은 본원에 기재된 바와 같은 벤조산 및 설폰 아미드 화합물을 포함하거나 이로 이루어진 공결정에 관한 것이다.

본원에서 사용된 바와 같이 그리고 달리 명시되지 않는 한, 용어 "다형체", "다형체 형태"및 본원에서 관련된 용어는 본질적으로 동일한 분자, 분자 및/또는 이온으로 이루어진 2 개 이상의 결정질 형태를 지칭한다. 상이한 결정질 형태와 같이, 상이한 다 형체는 분자 및/또는 이온의 배열 또는 형태의 결과로서 용융 온도, 용융 열, 용해도, 용해 특성 및/또는 진동 스펙트럼과 같은 상이한 물리적 특성을 가질 수있다. 결정 격자. 물리적 특성의 차이는 저장 안정성, 압축성 및 밀도 (제제 및 제품 제조에서 중요) 및 용해 속도 (생체 이용률의 중요한 요소)와 같은 제약 매개 변수에 영향을 줄 수 있다. 안정성의 차이는 화학적 반응성의 변화 (예를 들어, 차등 산화, 투여 형태가 다른 다 형체를 포함 할 때 보다 하나의 다형체를 포함 할 때 더 빠르게 변색 됨) 또는 기계적 변화 (예를 들어, 동역학적으로 선호되는 정제가 저장시 부서짐)에 기인 할 수 있다. 다 형체는 열역학적으로보다 안정한 다형체로 전환되거나) 또는 둘 다 (예를 들어, 하나의 다형체의 정제는 높은 습도에서 분해되기 쉽다). 용해도/용해 차이의 결과로, 극단적인 경우 일부 고체 상태 전이는 효능이 부족하거나 다른 극단적인 경우 독성이 발생할 수 있다. 또한, 물리적 특성은 가공에 중요 할 수 있다 (예를 들어, 하나의 다형체는 용매화물을 형성할 가능성이 높거나 불순물을 걸러서 세척 및 세척하기 어려울 수 있으며, 입자 형태 및 크기 분포는 다 형체마다 다를 수 있다).

본원에 사용된 그리고 달리 명시되지 않는 한, 용어 "무정형", "무정형 형태" 및 본원에 사용된 관련 용어는 해당 물질, 성분 또는 생성물이 X-선 회절에 의해 결정되는 바와 같이 실질적으로 결정질이 아님을 의미한다. 특히, 용어 "비정질 형태"는 무질서한 고체 형태, 즉 장거리 결정질이 결여된 고체 형태를 기술한다.

용어 "약학적으로 허용되는 염"은 당업계에 공지된 다양한 유기 및 무기 반대 이온으로부터 유래된 염을 지칭한다. 제약 상 허용되는 염은 동물 또는 인간 소비에 안전할 수 있다.

일 측면에서, 본 개시 내용은 상기 기재된 바와 같은 설폰 아마이드 화합물의 결정질 형태에 관한 것이다. 일부 실시예에서, 본원에 개시된 설폰 아미드 화합물의 결정의 구조는 라스(lath), 플레이트(plate) 및/또는 평면(planar) 결정 구조를 포함한다.

결정질 형태 및 비정질 형태의 특성화 기술은 열 중량 분석 (TGA), 시차 주사 열량 측정 (DSC), X- 선 분말 회절 분석 (XRPD), 단결정 X- 선 회절 분석, 진동 분광법, 예를 들어, 적외선 (IR) 및 라만 분광법, 고체 및 용액 핵 자기 공명 (NMR) 분광법, 광학 현미경, 핫 스테이지 광학 현미경, 주사 전자 현미경 (SEM), 전자 결정학 및 정량 분석, 입자 크기 분석 (PSA) 표면적 분석, 용해도 측정, 용출 측정, 원소 분석 및 칼 피셔 분석. 특징적인 단위 셀 파라미터는 단결정 회절 및 분말 회절을 포함하는 X- 선 회절 및 중성자 회절과 같은 하나 이상의 기술을 사용하여 결정될 수 있다. 분말 회절 데이터를 분석하는데 유용한 기술은 예를 들어 하나 이상의 고체상을 포함하는 샘플에서 단일 상과 관련된 회절 피크를 분석하기 위해 사용될 수 있는 리트 벨트 정제와 같은 프로파일 정제를 포함한다. 분말 회절 데이터를 분석하는데 유용한 다른 방법은 단위 세포 색인화를 포함하는데, 이는 당업자가 결정 성 분말을 포함하는 샘플로부터 단위 세포 파라미터를 결정할 수있게한다.

분말 X- 선 회절 스펙트럼에서, 회절 각도 및 전체 패턴은 데이터의 특성으로 인한 결정의 동일성을 식별하는데 중요 할 수 있다. 분말 X- 선 회절 스펙트럼의 상대 강도는 결정 성장 방향, 입자 크기 또는 측정 조건에 따라 달라질 수 있으므로 엄격하게 해석되어서는 안된다. 또한, 다양한 패턴으로부터 얻어진 일부 값은 결정 성장 방향, 입자 크기, 측정 조건 등에 따라 약간의 오차를 유발할 수 있다. 예를 들어, 회절 각도는 분말 X-선 회절 스펙트럼에서 회절 각도 (2θ± 0.2 °) 일 수 있으며, 이는 달리 명시되지 않는 한 회절 각도가 임의의 특정 값의 ± 0.2 ° 내에 개별적으로 존재할 수 있음을 의미한다.

일 실시예에서, 본 개시 내용은 5-브로모-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형에 관한 것이다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 X-선 회절 패턴은 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ ± 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 또는 1.0 °) 중 두 개 이상, 세 개 이상, 네 개 이상, 다섯 개 이상, 여섯 개 이상, 일곱 개 이상, 여덟 개 이상, 아홉 개 이상의 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 상기 5-브로모-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 또는 161 °C 내지 약 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169 또는 170 °C의 흡열 피크를 갖는다.

일 실시예에서 5-브로모-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 155 °C부터 168 °C, 158 °C부터 162 °C, 159 °C부터 161 °C, 159 °C부터 165 °C, 또는160 °C부터 163 °C의 흡열 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 5-브로모-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 또는 170 °C의 흡열 피크를 가진다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 광학적 순도는 100%ee이다.

일 실시예에서, 본 개시 내용은 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형에 관한 것이다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 X-선 회절 패턴은 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ ± 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 또는 1.0 °) 중 두 개 이상, 세 개 이상, 네 개 이상, 다섯 개 이상, 여섯 개 이상, 일곱 개 이상, 여덟 개 이상, 아홉 개 이상의 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 상기 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 또는 161 °C 내지 약 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169 또는 170 °C의 흡열 피크를 갖는다.

일 실시예에서 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 155 °C부터 168 °C, 158 °C부터 162 °C, 159 °C부터 161 °C, 159 °C부터 165 °C, 또는160 °C부터 163 °C의 흡열 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 또는 170 °C의 흡열 피크를 가진다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 광학적 순도는 100%ee이다.

일 실시예에서, 본 개시 내용은 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-에틸-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형에 관한 것이다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 X-선 회절 패턴은 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ ± 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 또는 1.0 °) 중 두 개 이상, 세 개 이상, 네 개 이상, 다섯 개 이상, 여섯 개 이상, 일곱 개 이상, 여덟 개 이상, 아홉 개 이상의 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 상기 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-에틸-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 또는 161 °C 내지 약 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169 또는 170 °C의 흡열 피크를 갖는다.

일 실시예에서, 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-에틸-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 155 °C부터 168 °C, 158 °C부터 162 °C, 159 °C부터 161 °C, 159 °C부터 165 °C, 또는160 °C부터 163 °C의 흡열 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-에틸-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 또는 170 °C의 흡열 피크를 가진다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 광학적 순도는 100%ee이다.

일 실시예에서, 본 개시 내용은 벤조산 및 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 공결정형에 관한 것이다. 추가 실시예에서, 상기 공결정형의 X-선 회절 패턴은 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ ± 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 또는 1.0 °) 중 두 개 이상, 세 개 이상, 네 개 이상, 다섯 개 이상, 여섯 개 이상, 일곱 개 이상, 여덟 개 이상, 아홉 개 이상의 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 상기 공결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 또는 161 °C 내지 약 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169 또는 170 °C의 흡열 피크를 갖는다.

일 실시예에서 벤조산 및 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 공결정형은 DSC에 의해 측정되는 155 °C부터 168 °C, 158 °C부터 162 °C, 159 °C부터 161 °C, 159 °C부터 165 °C, 또는160 °C부터 163 °C의 흡열 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 상기 공결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 또는 170 °C의 흡열 피크를 가진다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 광학적 순도는 100%ee이다.

일 실시예에서, 본 개시 내용은 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형에 관한 것이다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 X-선 회절 패턴은 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ ± 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 또는 1.0 °) 중 두 개 이상, 세 개 이상, 네 개 이상, 다섯 개 이상, 여섯 개 이상, 일곱 개 이상, 여덟 개 이상, 아홉 개 이상의 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 상기 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 또는 161 °C 내지 약 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169 또는 170 °C의 흡열 피크를 갖는다. 일 실시예에서 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 155 °C부터 168 °C, 158 °C부터 162 °C, 159 °C부터 161 °C, 159 °C부터 165 °C, 또는160 °C부터 163 °C의 흡열 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 또는 170 °C의 흡열 피크를 가진다. 의 흡열 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 광학적 순도는 100%ee이다.

일 실시예에서, 본 개시 내용은 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드의 결정형에 관한 것이다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 X-선 회절 패턴은 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ ± 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 또는 1.0 °) 중 두 개 이상, 세 개 이상, 네 개 이상, 다섯 개 이상, 여섯 개 이상, 일곱 개 이상, 여덟 개 이상, 아홉 개 이상의 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 상기 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 또는 161 °C 내지 약 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169 또는 170 °C의 흡열 피크를 갖는다. 일 실시예에서, 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 155 °C부터 168 °C, 158 °C부터 162 °C, 159 °C부터 161 °C, 159 °C부터 165 °C, 또는160 °C부터 163 °C의 흡열 피크를 갖는다. 추가 실시에에서, 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 또는 170 °C의 흡열 피크를 가진다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 광학적 순도는 100%ee이다.

일 실시예에서, 본 개시 내용은 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드의 결정형에 관한 것이다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 X-선 회절 패턴은 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ ± 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 또는 1.0 °) 중 두 개 이상, 세 개 이상, 네 개 이상, 다섯 개 이상, 여섯 개 이상, 일곱 개 이상, 여덟 개 이상, 아홉 개 이상의 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 상기 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 또는 161 °C 내지 약 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169 또는 170 °C의 흡열 피크를 갖는다. 일 실시예에서, 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는155 °C부터 168 °C, 158 °C부터 162 °C, 159 °C부터 161 °C, 159 °C부터 165 °C, 또는160 °C부터 163 °C의 흡열 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 또는 170 °C의 흡열 피크를 가진다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 광학적 순도는 100%ee이다.

일 실시예에서, 본 개시 내용은 N-((1S,2R)-2-(3-브로모-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-5-클로로-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드의 결정형에 관한 것이다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 X-선 회절 패턴은 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ ± 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 또는 1.0 °) 중 두 개 이상, 세 개 이상, 네 개 이상, 다섯 개 이상, 여섯 개 이상, 일곱 개 이상, 여덟 개 이상, 아홉 개 이상의 피크를 갖는다. 추가 실시예에서 상기 N-((1S,2R)-2-(3-브로모-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-5-클로로-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 또는 161 °C 내지 약 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169 또는 170 °C의 흡열 피크를 갖는다. 일 실시예에서, N-((1S,2R)-2-(3-브로모-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-5-클로로-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 155 °C부터 168 °C, 158 °C부터 162 °C, 159 °C부터 161 °C, 159 °C부터 165 °C, 또는160 °C부터 163 °C의 흡열 피크를 갖는다. 일 실시예에서, N-((1S,2R)-2-(3-브로모-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-5-클로로-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 155 °C부터 168 °C, 158 °C부터 162 °C, 159 °C부터 161 °C, 159 °C부터 165 °C, 또는160 °C부터 163 °C의 흡열 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, N-((1S,2R)-2-(3-브로모-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-5-클로로-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 또는 170 °C의 흡열 피크를 가진다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 광학적 순도는 100%ee이다.

일 실시예에서, 본 개시 내용은 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드의 결정에 관한 것이다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 X-선 회절 패턴은 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ ± 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 또는 1.0 °) 중 두 개 이상, 세 개 이상, 네 개 이상, 다섯 개 이상, 여섯 개 이상, 일곱 개 이상, 여덟 개 이상, 아홉 개 이상의 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 상기 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 또는 161 °C 내지 약 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169 또는 170 °C의 흡열 피크를 갖는다. 일 실시예에서, 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 155 °C부터 168 °C, 158 °C부터 162 °C, 159 °C부터 161 °C, 159 °C부터 165 °C, 또는160 °C부터 163 °C의 흡열 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 또는 170 °C의 흡열 피크를 가진다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 광학적 순도는 100%ee이다.

일 실시예에서, 본 개시 내용은 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시크로만-8-설폰아마이드의 결정형에 관한 것이다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 X-선 회절 패턴은 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ ± 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 또는 1.0 °) 중 두 개 이상, 세 개 이상, 네 개 이상, 다섯 개 이상, 여섯 개 이상, 일곱 개 이상, 여덟 개 이상, 아홉 개 이상의 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 상기 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 또는 161 °C 내지 약 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169 또는 170 °C의 흡열 피크를 갖는다. 일 실시예에서, 상기 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 155 °C부터 168 °C, 158 °C부터 162 °C, 159 °C부터 161 °C, 159 °C부터 165 °C, 또는160 °C부터 163 °C의 흡열 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 상기 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시크로만-8-설폰아마이드의 결정형은 DSC에 의해 측정되는 약 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 또는 170 °C의 흡열 피크를 가진다. 추가 실시예에서, 상기 결정형의 광학적 순도는 100%ee이다.

일 실시예에서, 본 개시에 따른 결정형의 X-선 회절 패턴은 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ ± 0.2 °) 중 두 개 이상의 피크를 갖는다. 일 실시예에서, 상기 결정형은 DSC에 의해 측정되는 155 °C 내지 168° C의 흡열 피크를 갖는다. 추가 실시예에서, 본 발명에 따른 상기 결정형은 상기에 개시된 서로 다른 실시예의 조합인 것을 특징으로 할 수 있다. 예를 들어, 상기 결정형은 상기 개시된 X-선 회절 패던의 피크 및 상기 개시된 DSC에 의해 측정되는 흡열 피크의 조합으로 특징지어 질 수 있다.

DSC 곡선의 흡열 피크의 피크 온도에서 사용된 용어 “약”은 각 값의 ± 2, 3, 4 또는 5 °C의 온도 값을 의미한다.

본 명에서에서 달리 특정되지 않는 한, 용어 “약”은 특정 고체 형태를 특징 짓기 위해 제공되는 숫자 값 또는 값, e.g. 특정 온도 또는 온도 범위; e.g. 온도 또는 습도의 함수로서의 질량변화와 같은 질량 변화; 용매 또는 수분 함량 e.g. 질량 또는 백분율; 피크 위치 e.g. IR 또는 라만 분광학 또는 XRPD에 의한 분석; 특정 고체 형태를 설명하면서 값 또는 값의 범위가 당업자에게 합리적인 것으로 간주될 수 있는 값와 관련하여 사용된다. 예를 들어 트그정 실시예에서, 본 문맥에서 사용될 때 용어 “약”은 달리 명시되지 않는 한, 수치 또는 값의 범위는 인용된 값 또는 값의 범위의 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, 0.5, 또는 0.25%을 가리킨다.

일 실시예에서, 본원에 개시된 결정형, 공결정형 또는 벤조산염은 공간적으로 규칙적인 원자 배열을 갖는 복수의 결정 (결정 다형체)을 포함할 수 있고 상이한 물리화학적 특성이 발생할 수 있다. 추가 실시예에서, 본원에 개시된 결정형, 공결정형 또는 벤조산염은 결정 다형체와의 혼합물일 수 있다.

일 실시예에서, 본원에 개시된 결정형, 공결정형 또는 벤조산 염에서 설폰아마이드 화합물과 벤조산염의 몰비는 약 0.4 내지 1.6, 약 0.6 내지 1.4, 약 0.8 내지 약 1.2, 약 0.9 내지 1.1, 또는 약 1 내지 약 1이다. 추가 실시예에서, 본원에 개시된 상기 결정형, 공결정형 또는 벤조산염에서 설폰아마이드 화합물과 벤조산의 몰비는 약 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 1.1, 1.2, 1.3 내지 약 1.3, 1.2, 1.1, 1.0, 0.9, 0.8, 0.7, 0.6, 0.5, 또는 0.4이다. 추가 실시예에서, 설폰아마이드 화합물과 벤조산염의 몰비는 약 1:1이다.

본원에 개시된 상기 결정형, 공결정형 또는 벤조산염의 일 실시예에 따라, 설폰아마이드 화합물 또는 벤조산은 하나 이상의 방사성 동위원소 또는 비방사성 동위원소로 치환될 수 있다.

일 실시예에서, 본원에 개시된 상기 결정형, 공결정형 또는 벤조산의 광학적 순도는 적어도 약 70, 80, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 99.5 또는 99.8%이다. 본원에 사용된 광학적 순도 또는 키랄 순도는 거울상 이성질체의 혼합물을 갖는 샘플의 관찰된 광학 회전 때 하나의 순수한 거울상 이성질체의 광학 회전 비를 지칭한다. 추가 실시예에서, 광학적 순도는 약 95% 이상이다. 추가 실시예에서, 광학적 순도는 98% 이상이다. 또 다른 실시예에서, 광학적 순도는 약 100%이다. 일 실시예에서 상기 광학적 순도는 HPLC를 통해 측정될 수 있다. 일 실시예에서 본원은 설폰아마이드 화합물을 벤조산과 혼합하거나 결정형, 공결정형 또는 벤조산염으로 형성하여 설폰아마이드 화합물의 광학적 순도를 높이는 방법을 개시한다.

특정 실시예에서, 본원에 개시된 상기 결정형, 공결정형 또는 화합물의 벤조산염은 물리적 및/또는 화학적으로 순수한 것일 수 있다. 특정 실시예에서, 본원에 개시된 결정형, 공결정형 또는 화합물의 벤조산염은 적어도 약 100, 99, 98, 97, 96, 95, 94, 93, 92, 91, 90, 89, 88, 87, 86, 85, 84, 83, 82, 81 또는 80% 물리적 및/또는 화학적으로 순수하다. 일 실시예에서, 본원에 개시된 결정형, 공결정형 또는 화합물의 벤조산염은 실질적으로 순수하다. 본원에서 사용되고 달리 명시되지 않은 한, “실질적으로 순수한”, e.g. 다른 고체 형태 및/또는 다른 화학 화합물이 실질적으로 없는 특정 결정질 형태 또는 무정형 형태를 포함하는 샘플은 특정 실시에에서 약 25%, 20%, 15%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.75%, 0.5%, 0.25% 또는 0.1% 미만의 하나 이상의 다른 고체 형태 및/또는 다른 화합물의 중량이다.

일 실시예에서, 본원에 개시된 결정형, 공결정형 또는 벤조산염은 약 30, 40, 50, 60, 70 또는 80 °C 및 약 65, 70, 75, 80 또는 85 %의 상대습도 조건에서 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 12, 16, 24, 36, 48, 60, 72, 84, 96, 108, 120, 132, 144, 또는 156 주 동안 또는 약 160, 156, 150, 138, 126, 114, 102, 90, 78, 66, 54, 42, 30, 24, 18, 12 또는 6 주 이하 동안의 조건에서 노출되었을 때 안정하다. 상기 조건은 개방된 조건이거나 폐쇄된 조건일 수 있다. 본원에 사용되는 “폐쇄된” 조건은 안정성 실험 동안 샘플을 함유하는 병의 뚜겅이 폐쇄 또는 밀봉되었음을 의미할 수 있고, “개방된” 조건은 뚜껑이 개방되었음을 의미할 수 있다. 일 실시예에서 본원에 개시된 상기 결정형, 공결정 또는 벤조산염은 약 40 °C 및 약 75%의 상대 습도에서 적어도 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 또는 22 주 동안 노출되었을 때 안정하다. 일 실시예에서 상기 조건은 폐쇄된 조건이다. 추가 실시예에서 본원에 개시된 상기 결정형, 공결정형, 또는 벤조산염은 약 40 °C 및 약 75%의 상대 습도 조건에서 약 4주 동안 노출되었을 때 안정하다. 일 실시예에서 상기 조건은 폐쇄된 조건이다. 따라서, 본원에 개시된 결정형, 공결정형 또는 벤조산염은 연장된 기간동안 우수한 저장성을 가진다. 여기서, “안정한”은 (i) 광학적 순도의 변화가 초기 광학적 순도에 비해 약 1.0, 0.5, 0.3, 0.1, 0.05, 또는 0.01% 이하인 것을 의미하고, (ii) 불순물의 증가가 약 초기 불순물 양에 비해 1.0, 0.5, 0.3, 0.1, 0.05, 또는 0.01% 이하이고, 및/또는 (iii) X-선 회절 패턴이 (2θ ± 0.2°)에서 초기 피크의 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 또는 90% 이상을 유지하는 것이다.

본 개시의 또 다른 실시예는 본원에 개시된 결정형, 공결정형 및/또는 벤조산염의 제조방법에 관한 것이고, 상기 방법은 본원에 개시된 벤조산 및 설폰아마이드 화합물을 2 종 이상의 용매를 포함하는 용매 시스템에 용해시키는 단계; 및 결정형, 공결정형, 및/또는 벤조산염이 형성될 때까지 용매 시스템을 과포화시키는 단계 및 용매 시스템으로부터 분리되는 단계를 포함한다. 다른 측면에서, 본 발명은 비결정질형태로부터 본원에 대시된 설폰아마이드 화합물의 결정형을 제조하는 방법에 관한 것으로, 상기 방법은 벤조산 및 설폰아마이드 화합물을 2종 이상의 용매를 포함하는 용매를 포함하는 용매 시스템에 용해시키는 단계; 생성물이 용매 시스템으로부터 결정화될 때까지 용매 시스템을 과포화시키는 단계를 포함한다.

일 실시예에서, 상기 방법은 벤조산과 본원에 개시된 화합물을 추가하거나 또는 혼합하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 추가 실시예에서, 설폰아마이드 화합물과 비교하여 약 0.8, 0.9, 1, 2, 3, 4 또는 5 내지 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 또는 9 몰 당량의 벤조산 설폰아마이드 화합물과 혼합될 수 있다. 일부 실시예에서 상기 방법은 약 0.8 내지 약 5, 약 2 내지 약 5, 약 3 내지 약 5, 약 1 내지 약 4, 또는 약 1 내지 약 6 몰 당량의 첨가 또는 혼합하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 추가 실시예에서 설폰아마이드 화합물과 비교하여 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7 몰 당량의 벤조산이 설폰아마이드 화합물과 혼합될 수 있다.

추가 실시예에서, 용해 단계는 용매 시스템을 벤조산 및 설폰아마이드 화합물과 첨가 또는 혼합하는 단계를 포함할 수 있고, 여기서 용매 시스템은 약 10, 11, 12, 13, 14, 15, 18, 20, 22, 25, 27, 30, 35, 38 또는 40 배를 포함하여 약 10 내지 40배, 약 20 내지 30배, 약 10 내지 30배 부피일 수 있다. 추가 실시예에서, 용해 단계는 용매 시스템을 벤조산 및 설폰아마이드 화합물을 첨가하는 단계를 포함할 수 있고, 여기서 용매 시스템은 약 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 내지 약 60, 55, 50, 45, 40, 35 또는 30의 부피일 수 있다. 추가 실시예에서 적어도 두 개의 용매 중 적어도 하나의 용매는 헵테인 또는 톨루엔이다. 추가 실시예에서, 용매 시스템은 헵테인 및 톨루엔을 포함한다.

추가 실시예에서, 용매 시스템 또는 헵테인 및 톨루엔의 혼합용액에서, 톨루엔 비는 약 5, 8, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 및 20%을 포함하는 약 5, 6, 7, 8, 9, 10 또는 11 내지 약 10, 15, 17 또는 20%이다. 추가 실시예에서, 헵테인 및 톨루엔의 혼합 용액에서 톨루엔의 비는 5 내지 20%, 10 내지 20%, 5 내지 10%, 또는 8 내지 15%이다.

일 실시예에서, 과포화 단계는 용매 시스템을 가열하는 단계를 포함한다. 추가 실시예에서, 과포화 단계는 용해 단계로부터 현탁액을 실온 이상의 온도에서 또는 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55 또는 56 °C 내지 약 50, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65 또는 66 °C에서 약 1, 2, 3, 4 또는 5 시간 내지 약 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30 또는 40 시간 동안 혼합하는 단계를 포함할 수 있다. 또 다른 추가 실시예에서, 과포화 단계는 약 40 내지 약 60 °C, 약 50 내지 60 °C. 약 40 내지 약 50 °C 또는 38 내지 65 °C에서, 1 내지 40 시간, 약 3 내지 4 시간, 약 4 내지 5 시간 또는 3 내지 10 시간, 약 4 내지 5시간 또는 약 3 내지 10 시간 동안 현탁액을 혼합하는 단계를 포함할 수 있다. 추가 실시예에서, 과포화 단계는 약 40 내지 60 °C에서 3 내지 10 시간 동안 현탁액을 혼합하는 단계를 포함할 수 있다.

일 실시예에서, 본원에 개시된 결정형, 공결정형 및/또는 벤조산염의 제조방법은 과포화 단계로부터 수득된 생성물을 세척하여 잔류 과량의 벤조산을 제거하는 단계를 추가로 포함한다.

본원에 개시된 결정형, 공결정형, 벤조산염의 프로드러그(prodrug)도 본원 개시에 포함되지만, 용어 “프로드러그(prodrug)”는 본원에 개시된 화합물 또는 그의 염이 효소와의 반응에 의해 전환되는 화합물을 말한다. 또는 생체 내 생리학적 조건 하의 위산, 즉 효소 산화, 환원 또는 가수 분해 등에 의해 전환된느 본 발명에 따른 화합물 또는 이의 염, 위산의 작용에 의해 전환되는 화합물 또는 이의 염을 말한다. 또한, 본원에 개시된 화합물 또는 이의 염의 프로드러그는 Hirokawa Shoten 1990 annual "Development of Pharmaceuticals" Vol. 7, Molecular Design, pages 163-198에 기재된 바와 같은 생리학적 조건 하에서 본원에 개시된 화합물 또는 이의 염으로 전환되는 것일 수 있다.

또한, 본 발명의 결정형, 공결정형 또는 벤조산염은 용매화물 (예를 들어, 수화물 등) 또는 비용매화물일 수 있고, 이 둘 모두는 본원에 개시된 화합물 또는 이의 염에 포함된다. 동위원소로 표시된 화합물 (예를 들어, 중수소, ³H, ¹⁴C, ³⁵S, ¹²⁵I 등) 등도 본원에 개시된 화합물 또는 이의 염에 포함된다.

본원에 개시된 결정형, 공결정형 또는 벤조산염은 RNR에 대한 억제 활성을 나타낸다. 본원에 대시된 결정형, 공결정형 또는 벤조산염은 우수한 RNR 활성, 이의 구조, 금속 이온과 킬레이트 하지 않는 것으로 인해 단백질을 필요로 하는 철 이온의 표적외 효과에 기초하여 부작용을 유발하지 않으면서 RNR 관련 질환의 예방 또는 치료용 약제로서 유용하게 사용될 수 있다. “RNR이 관여하는 질환”으로는, RNR 기능을 결실, 억제 및/또는 억제하는 것에 의해, 발병률 저하, 증상의 관해, 완화, 및/또는 완치하는 질환을 들 수 있다. 이와 같은 질환으로서, 예를 들면, 악성 종양을 예시할 수 있다. 대상이 되는 악성 종양은 특히 한정되지 않으나, 두경부암, 소화기암(식도암, 위암, 십이지장암, 간암, 담도암(담낭·담관암 등), 췌장암, 대장암(결장암, 직장암 등) 등), 폐암(비소 세포암, 소세포 폐암, 중피종 등), 유방암, 생식기암(난소 암, 자궁암(자궁 경부암, 자궁 내막암 등) 등), 비뇨기암(신장암, 방광암, 전립선암, 고환암 등), 조혈기 종양(백혈병, 악성 림프종, 다발성 골수종 등), 뼈·연부 종양, 피부암, 뇌종양 등을 들 수 있다.

본원에서 “RNR”은 인간 또는 비인간 RNR 바람직하게는 인간RNR을 포함한다.

따라서, 본원에 개시된 내용은 본원에 개시된 결정형, 공결정형, 벤조산염을 활성 성분으로 포함하는 RNR 억제제를 제공한다. 또한, 본 발명은 RNR 억제제의 제조를 위한 본원에 개시된 결정형, 공결정형 또는 염의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 또한 RNR 억제제로서 본원에 개시된 결정형, 공결정형 또는 벤조산 염의 용도를 제공한다. 또한 본원에 개시된 내용은 RNR 억제제와 관련된 장애의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 본원에 개시된 결정형, 공결정형, 벤조산염을 제공한다.

또 다른 실시예에서, 본 개시 내용은 활성 성분으로서 본원에 기재된 결정형, 공 결정 또는 벤조산 염을 함유하는 약제를 제공한다. 또한, 본 개시 내용은 의약의 제조를 위한 본원에 기재된 결정형, 공결정형 또는 벤조산 염의 용도에 관한 것이다. 또한, 본 개시 내용은 본원에 기재된 결정형, 공결정 형또는 벤조산 염의 약제로서의 용도를 제공한다. 또한, 본 개시 내용은 의약으로서 사용하기 위한 본원에 기재된 결정질형, 공 결정 또는 벤조산 염을 제공한다.

또 다른 실시 양태에서, 본 개시 내용은 본원에 기재된 결정형, 공결정형 또는 벤조산 염 및 제약 상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 본원에 개시된 결정형, 공 결정 또는 벤조산 염은 흡습성이 낮거나 없고, 대전성이 낮아서 취급성이 우수하다. 흡습성이 감소됨에 따라, 저장 상태에 존재하는 습도의 보존 및 품질 관리의 문제가 완화되고, 정제 또는 캡슐과 같은 고체 제제를 제조 할 때, 제제의 품질 (균일 성)에 의해 대량 제어가 쉽게 제어 될 수 있습니다. 또한, 대전 성이 낮기 때문에 제조 설비 및 포장에 대한 접착력은 중요하지 않다.

일부 실시예에서, 의약 또는 제약 조성물은 RNR 관련 질환의 치료제이고, 보다 바람직한 실시 양태에서, 의약 또는 제약 조성물은 항종 제이다.

추가의 실시예에서, 본 개시 내용은 RNR 활성 억제 방법을 제공하기 위해 본원에 기재된 유효량의 결정형, 공결정형 또는 벤조산 염을 이를 필요로하는 대상체에게 투여하는 것에 관한 것이다. 또한, 본 개시 내용은 유효량의 본원에 기재된 결정형, 공 결정형 또는 염을 대상체에게 투여하여 RNR 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료 방법을 제공하는 것을 포함한다. 일부 실시 양태에서, RNR 관련 질환을 예방, 개선 또는 치료하는 방법은 종양을 예방, 개선 또는 치료하는 방법이다. 이 방법에서, 대상은 그러한 방법을 필요로 하는 인간 또는 비인간 동물 (예를 들어, 소, 돼지, 말, 개, 고양이 등)을 포함한다. 추가의 실시 양태에서, 대상체는 본원에 기재된 RNR 관련 질환을 앓고 있는 대상체일 수 있다.

결정형, 공결정형 또는 벤조산염를 의약으로 사용할 때는 필요에 따라 약제 학적으로 허용되는 담체를 배합하여, 예방 또는 치료 목적에 따라 각종의 투여 형태를 채용할 수 있으며, 상기 형태로는, 예를 들면, 경구제, 주사제, 좌제, 연고제, 첨부제 등 어느 것이라도 좋다. 화학식 Ⅰ로 표시되는 본 발명 설폰 아마이드 화합물 또는 이의 염은 우수한 경구 흡수성이 있기 때문에, 경구제가 바람직하다. 이러한 투여 형태는 각각 당업자에게 공지 관용의 제제 방법에 의해 제조할 수 있다.

약학적으로 허용되는 담체로는, 제제 소재로서 관용의 각종 유기 또는 무기 담체 물질이 사용되고, 고형 제제의 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 착색제, 액상 제제의 용제, 용해 보조제, 현탁화제, 등장화제, 완충제, 무통화제 등으로 배합된다. 또한, 필요에 따라 방부제, 산화 방지제, 착색제, 감미제, 교취제, 안정화제 등의 제제 첨가물을 사용할 수도 있다.

약학적으로 허용되는 담체 및 제제 첨가물로는, 일반적으로, 예를 들면, 부형제로서는, 유당, 백당, 염화 나트륨, 포도당, 전분, 탄산 칼슘, 고령토, 미결정 셀룰로오스, 규산 등을 들 수 있으며; 부형제로는, 물, 에탄올, 프로판올, 단 시럽, 포도당액, 전분액, 젤라틴 용액, 카르복시 메틸 셀룰로오스, 하이드록시 프로필 셀룰로오스, 하이드록시 프로필 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스, 셸락(shellac), 인산 칼슘, 폴리비닐 피롤리돈 등을 들 수 있으며; 붕해제로는, 건조 전분, 알긴산 나트륨, 한천 분말, 탄산 수소 나트륨, 탄산 칼슘, 라우릴 황산 나트륨, 스테아린산 모노글리세라이드, 유당 등을 들 수 있고; 활택제로는 정제 탈크, 스테아린산 염, 붕사, 폴리에틸렌 글리콜 등을 들 수 있으며; 착색제로는, 산화 티탄, 산화철 등을 들 수 있고; 교미·교취제로는 백당, 등피, 구연산, 주석산 등을 들 수 있다.

경구용 고형 제제를 조제하는 경우, 본원에 개시된 결정형, 공결정형 또는 벤조산염에 부형제, 필요에 따라, 결합제, 붕해제, 활택제, 착색제, 감미제, 교취제 등을 가한 후, 통상적인 방법에 의해 정제, 코팅 정제, 과립제, 산제, 캡슐제 등을 제조할 수 있다.

주사제를 조제하는 경우, 본원에 개시된 결정형, 공결정형 또는 벤조산염에 pH 조절제, 완충제, 안정화제, 등장화제, 국소 마취제 등을 첨가하여, 통상적인 방법에 의해 피하, 근육 내 및 정맥용 주사제를 제조할 수 있다.

직장 좌약을 제조할 때, 좌약은 본원에 기재된 활성 성분에 부형제, 및 필요한 경우 계면 활성제 등을 첨가한 후 통상적인 방법에 의해 제조 될 수 있다. 연고, 예를 들어 페이스트, 크림 및 겔의 형태로 제조할 때, 염기, 안정제, 습윤제, 보존제 등이 필요에 따라 배합되고 통상적인 방법에 의해 제형화된다. 예를 들어, 백색 바셀린, 파라핀, 글리세린, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트 등이 염기로서 사용될 수 있다. 보존제로서, 메틸 파라 하이드록시 벤조에이트, 에틸 파라 하이드록시 벤조 에이트, 프로필 파라 하이드록시 벤조에이트 등이 사용될 수 있다. 패치를 제조하는 경우, 연고, 크림, 겔, 페이스트 등은 공지 된 방법에 의해 지지체에 적용될 수 있다. 지지체로는 면, 방적, 화학 섬유, 부직포, 연질 염화 비닐 필름, 폴리에틸렌, 폴리 우레탄 등의 필름 또는 발포 시트가 적합 할 수 있다.

상기 기재된 각각의 투여 단위 형태로 제제화되는 본원에 기재된 결정형, 공결정형 또는 벤조산 염의 양은 일반적으로 투여 단위 형태 당 약 0.05, 0.1, 1, 5, 10 또는 20 일 수 있다 경구 투여의 경우 약 100, 500 또는 1000 mg, 주사의 경우 약 0.01 또는 0.1 내지 약 200, 300 또는 500 mg, 및 프로 비소와 좌약의 경우 약 1, 5 또는 10 내지 약 100, 500 또는 1000 mg 이들 양은 적용되는 환자의 증상 또는 투여 형태에 따라 변경 될 수 있다.

또한, 상기 투여 형태를 가지는 약제의 1일 투여량은 환자의 증상, 체중, 연령, 성별 등에 의해 상이하여 통틀어 결정할 수 없으나, 본 발명 결정형, 공결정형 또는 벤조산염으로서 일반적으로 성인(체중 50 kg) 1일 0.05 ~ 5000 mg, 바람직하게는 0.1 ~ 2000 mg로 하면 좋고, 이를 1일 1회 또는 2 ~ 3회 정도 나누어 투여하는 것이 바람직하고, 환자의 상태, 몸무게, 나이 또는 성별 등에 따라 달라질 수 있다.

도 10 내지 12에 기술된 유사한 물질이 또한 본 출원에 포함된다. 본 발명의 유사 물질은 공지 된 방법에 의해 합성될 수 있거나 시판 제품으로부터 얻을 수 있다. 유사 물질은 고성능 액체 크로마토그래피에서의 유지 시간, 질량 스펙트럼, 및 이와 같이 수득 된 유사 물질과 본 발명에 따라 검출 된 유사 물질 사이의 포토 다이오드어레이 (PDA)로부터의 결과를 비교함으로써 확인될 수 있다.

또한, 이들 유사 물질은 외부 표준 방법 또는 내부 표준 방법에 의해 정량적으로 측정 될 수 있다.

이들 유사 물질이 의약 또는 제약 제제에 불순물로서 함유 될 수 있는 경우, 이들 유사 물질은 인간 사용을 위한 제약 기술 요건의 조화를 위한 국제위원회의 지침 ICH-Q3A에 따라 규제된다. 본 발명의 방법은 가이드 라인의 표준이 만족되는지를 확인할 수 있기 때문에 매우 유용하다.

상기 유사 물질을 하기 표에 나타내었다.

화합물 명	화학적 구조
OPC: (2S,3R)-2-((2-카바모일-4-클로로페닐)설폰아마이도)-3-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)부탄산
SAC: 5-((1S,2R)-1-(5-클로로-1,1-다이옥사이도-3-옥소벤조[d]아이소싸이아졸-2(3H)-일)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)프로필)-1,3,4-옥사다이아졸-2(3H)-온
OPH: 5-클로로-2-(N-((2S,3R)-3-(6-클루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-하이드라진일-1-옥소부탄-2-일)설파모일)벤즈아마이드
deMe: 5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(2-플루오로-4-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드
OPD1
OPHD

이하에 실시예 및 시험예를 나타내어, 본 발명을 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명은 이러한 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예에서 사용한 각종 시약은, 별도의 기재가 없는 한 시판품을 사용하였다. 실리카겔 크로마토그래피는, 바이오 타지 제 SNAP-ULTRA(등록 상표) Silica 프레팍드 칼럼 또는, 역상 실리카겔 크로마토 그래피는 바이오 타지 제 SNAP KP-C18-HS(등록 상표) Silica 프레팍드 컬럼을 사용하였다. 역상 분취 HPLC 컬럼 크로마토 그래피는 다음 조건에서 실시하였다. 인젝션량과 그레디언트는 적절하게 설정하여 실시하였다.

컬럼: YMC-Actus Triart C18, 30 × 50 mm, 5 μm

UV 검출: 254 nm

컬럼 유속: 40 mL / min

이동상: water / 아세토나이트릴 (0.1% 포름산)

주입양: 1.0 mL

그래디언트: water / 아세토나이트릴 (10 % to 90 %)

NMR 스펙트럼은, AL400(400 MHz; 일본 전자(JEOL)) Mercury400(400 MHz; 애질런트 테크놀러지)를 사용하여, 중용매 중에 테트라메틸 실란을 포함하는 경우는 내부 기준으로 테트라메틸 실란을 사용하고, 이 외의 경우에는 내부 기준으로 NMR 용매를 사용하여 측정하고, 전체 δ값을 ppm으로 나타내었다. 또한, LCMS 스펙트럼은 Waters 제 ACQUITY SQD(사중극형)를 이용하여 이하의 조건에서 측정하였다.

컬럼 : Waters 제 ACQUITY UPLC(등록 상표) BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 μm

MS 검출: ESI negative

UV 검출: 254 and 280 nm

컬럼 유속: 0.5 mL / min

이동상: water / 아세토나이트릴 (0.1 % 포름산)

주입양: 1 μL

[표 2]

그래디언트

시간(분) 물 아세토나이트릴

0 95 5

0.1 95 5

2.1 5 95

3.0 STOP

약어의 의미를 이하에 나타낸다.

s : 싱글렛(singlet)

d : 더블렛(doublet)

t : 트리플렛(triplet)

q : 콰르렛(quartet)

dd : 더블 더블렛

dt : 더블 트리플렛

td : 트리플 더블렛

tt : 트리플 트리플렛

ddd : 더블 더블 더블렛

ddt : 더블 더블 트리플렛

dtd : 더블 트리플 더블렛

tdd : 트리플 더블 더블렛

m : 멀티플렛 (multiplet)

br : 브로드(broad)

brs : 브로드 싱글릿

DMSO-d₆ : 중 디메틸 설폭사이드

CDCl₃ : 중 클로로포름

CD₃OD : 중 메탄올

CDI : 1, 1'-카르보닐 디이미다졸

DAST : 삼불화 N,N-디에틸 아미노 유황

DIBAL-H : 수소화 디이소부틸 알루미늄

DMF : 디메틸 포름아마이드

DMSO : 디메틸 설폭사이드

THF : 테트라 하이드로 퓨란

WSC = EDCI = 1-에틸-3-(3-디메틸 아미노 프로필)카르보디이미드

HOBt = 1-하이드록시 벤조 트리아졸

[참고예 A1: 2-(1-브로모에틸)-1-플루오로-3,4-디메틸 벤젠]

[화학식 I]

(공정 1)

1-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)에탄올 6-플루오로-2,3-디메틸벤즈알데하이드(22.0g)의 THF용액(300 mL)에 브롬화 메틸마그네슘의 디에틸에테르 용액(3.0 M, 70 mL)을 0℃에서 적하 후, 반응액을 실온에서 1시간 교반하였다. 얼음 욕조 하에, 포화 염화암모늄 수용액(150 mL)을 적하하여, 초산에틸(200 mL)을 가하여, 분층하였다. 유기층을 염산(1M, 200 mL), 물(200 mL) 및 포화 식염수(200 mL)로 순차 세척 후, 무수 황산마그네슘으로 건조하여, 감압 하 농축한 것으로 1-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)에탄올(23.7 g)를 얻었다.

(공정 2)

상기 공정 1에서 얻어진 1-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)에탄올(23.7g)의 클로로포름 용액(120 mL)에, 트리브롬화인(26.5 mL)을 0℃에서 적하하여, 반응액을 0℃에서 30분간 교반하였다. 반응액을, 얼음 냉각한 포화 탄산수소나트륨 수용액(1L)에 넣은 혼합액에 클로로포름(500 mL)을 가한 후, 분층하여, 유기층을 물(200 mL) 및 포화 식염수(200 mL)로 순차적으로 세척하였다. 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조하여, 감압 하 농축한 것으로 표기 화합물(29.5g)를 얻었다.

참고예 A2 및 A3: 참고예 A1의 공정 1, 공정 2와 같은 방법으로 출발물질인 알데하이드 및 메틸 마그네슘 브로마이드가 함께 반응한 뒤, 포스포러스트리브로마이드과 반응하여 하기와 같은 실시예 A2 및 A3을 제조하였다.

참고예	출발 물질	합성화합물
A2
A3

참고예 A4: 2-(1-브로모에틸)-4-에틸-1-플루오로-3-메틸벤젠

[화학식 II]

(공정 1) 2-브로모-3-에틸-6-플루오로벤즈알데하이드

2-브로모-1-에틸-4-플루오로벤젠(14.4g)의 THF 용액(150 mL)에, -78℃에서 리튬 디이소프로필아마이드의 THF 용액(1.5M, 54 mL)을 적하하였다. 반응액을 30분간 교반 후, DMF(6.5 mL)을 가하여, 더 20분간 교반하였다. 반응액에 물(50 mL), 염산(6 M, 50 mL)를 순차적하하여, 헥산(100 mL)으로 2회 추출하였다. 하나로 한 유기층을 포화 식염수(50 mL)으로 2회 세척하고, 무수황산나트륨으로 건조 후, 감압 하 농축한 것으로, 2-브로모-3-에틸-6-플루오로벤즈알데하이드(14.5g)를 얻었다.

(공정 2) 3-에틸-6-플루오로-2-메틸벤즈알데하이드

상기 공정 1에서 얻어진 2-브로모-3-에틸-6-플루오로벤즈알데하이드(14.5g)의 1,4-디옥산용액(200 mL)에, 물(90 mL), 인산 트리칼륨(32.0g), 메틸보론산(6.4g), 비스(디페닐포스피노)페로센 팔라듐(II)디클로라이드　디클로로메탄 첨가물(1.75g)을 가하여, 반응액을 110℃에서 2시간 가열 환류하였다.반응액을 실온까지 냉각하여, 헥산(90 mL)을 가한 후, 더욱 2시간 교반하였다. 반응액을셀라이트 여과하여, 잔류물을헥산으로 세척 후, 여액을 분층하였다. 유기층을 포화 식염수(100 mL)으로 2회 세척하여, 무수황산나트륨으로 건조 후, 감압 하 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(전개용매：헥산/초산에틸)로 정제한 것으로 3-에틸-6-플루오로-2-메틸벤즈알데하이드(8.4g)를 얻었다.

(공정 3)

참고예 A1 공정 1,2의 방법에 준하여, 상기 공정 2에서 얻어진3-에틸-6-플루오로-2-메틸벤즈알데하이드(8.4g)를 사용하여, 동일한 제조방법으로 표기 화합물을 얻었다.

참고예 B1: (2S, 3R)-2-아미노-3-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)부탄산

[화학식 III]

(S)-2-[o-[(N-벤질프롤릴)아미노]페닐]-벤질리덴아미노-아세테이트(2-)-N,N,N-니켈(II)(14.5g)의 DMF용액(50 mL)에 참고예 A1에서 얻어진 2-(1-브로모에틸)-1-플루오로-3,4-디메틸벤젠(14.0g)의 DMF용액(50 mL)을 적하하여, 0℃에서 수산화 칼륨(16.3g)을 가하여, 1시간 동일한 온도에서 교반하였다. 반응액에 포화염화암모늄용액(50 mL) 및 초산에틸(50 mL)을 가하고 분층하여, 물층을 초산에틸(50 mL)로 2회 추출하였다. 하나로 한 유기층을 물(50 mL), 포화 식염수(50 mL)로 순차 세척하여, 무수황산나트륨으로 건조 후, 감압 하 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(전개용매：초산에틸/헥산)으로 정제하였다. 얻어진 화합물을 메탄올(120 mL)에 용해하여, 염산(3 M, 90 mL)을 가하여, 80℃에서 45분간 교반하였다. 메탄올을 감압 류거하여, 잔류물에 클로로포름(50 mL) 및 물(50 mL)을 가했다. 물층을 클로로포름(50 mL)으로 세척 후, 감압 하 농축하였다. 잔류물을 역상 실리카겔 크로마토그래피(메탄올/물)로 정제한 것으로, 표기 화합물(2.0g)를 얻었다. ¹H NMR(CD₃OD)δJ=8.2, 5.7Hz, 1H), 6.79(DD, J=11.7, 8.4Hz, 1H), 3.74-3.87(m, 2H), 2.29(S, 3H), 2.25(S, 3H), 1.40(DD, J=6.8, 2.4Hz, 3H)

참고예 B2-B4:

참고예 A2-A4에서 얻어진 알킬화제와 (S)-2-[o-[(N-벤질프롤릴)아미노]페닐]-벤질리덴아미노-아세테이트(2-)-N,N,N-니켈(II)을 반응시킨 후, 산 가수분해에 의해 하기에 나타낸 참고예 B2-B4를 제조하였다.

참고예	출발물질 (참고예 번호 또는 구조식)	합성화합물
B2	A2
B3	A2
B4	A4

참고예 C1: 5-클로로-8-(클로로설포닐)-4-메틸-d3-크로만-4-일　아세테이트

[화학식 IV]

(공정 1) 8-브로모-5-클로로-4-메틸크로만-4-올

요오드화 메틸-d3-마그네슘의 디에틸에틸에테르용액(1.0M, 63 mL)에 THF(50 mL)을 가하여, 8-브로모-5-클로로크로만-4-온(7.5g)의 THF(50 mL)용액을 실온에서 적하하였다. 반응액을 동일한 온도에서 10분간 교반한 후, 얼음 욕조 하, 염산(1M, 50 mL)를 천천히 적하하여, 초산에틸(50 mL)을 가하여, 분층하였다. 물층을 초산에틸(50 mL)로 추출하여, 하나로 한 유기층을 포화 식염수(50 mL)으로 세척하여, 무수황산나트륨으로 건조 후, 감압 하 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(전개용매：헥산/초산에틸)로 정제한 것으로 8-브로모-5-클로로-4-메틸크로만-4-올(7.7g)를 얻었다.

(공정 2) 8-브로모-5-클로로-4-메틸-d3-크로만-4-일　아세테이트

상기 공정 1에서 얻어진 8-브로모-5-클로로-4-메틸크로만-4-올(7.7g)의 무수초산용액(100 mL)에 트리플루오로메탄설폰산 스칸디움(III)(340 mg)의 아세트나이트릴(12 mL)용액을 -40℃에서 적하하여, 반응액을 동일한 온도에서 30분간 교반하였다. 반응액에 포화 탄산수소나트륨수용액(100 mL), 초산에틸(100 mL)을 순차 가하여, 분층하였다. 물층을 초산에틸(100 mL)로 추출하여, 하나로 한 유기층을 포화 탄산수소나트륨수용액(100 mL)으로 2회, 포화 식염수(100 mL)로 1회 세척하였다. 유기층을 무수황산나트륨으로 건조 후, 감압 하 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(전개용매：헥산/초산에틸)로 정제한 것으로 8-브로모-5-클로로-4-메틸-d3-크로만-4-일　아세테이트(8.9g)를 얻었다.

(공정 3) 8-(벤질티오)-5-클로로-4-메틸-d3-크로만-4-일　아세테이트

상기 공정 2에서 얻어진 8-브로모-5-클로로-4-메틸-d3-크로만-4-일　아세테이트(6.7g)의 1,4-디옥산(70 mL)용액에, 4,5-비스(디페닐포스피노)-9,9-디메틸크산텐(600 mg), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0)(480 mg), N,N-디이소프로필에틸아민(7.2 mL), 벤질 메르캅탄(2.8 mL)을 가하여, 반응액을 90℃에서 2시간 교반하였다. 반응액을 실온까지 냉각하여, 셀라이트 여과하였다. 잔류물을 헥산(50 mL)으로 세척 후, 여액에 물(50 mL)을 가하여 분층하였다. 유기층을 포화 식염수(50 mL)으로 세척하여, 무수황산나트륨으로 건조 후, 감압 하 농축하였다. 반응액을 감압 하 농축하여, 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(전개용매：헥산/초산에틸)로 정제한 것으로 8-(벤질티오)-5-클로로-4-메틸-d3-크로만-4-일　아세테이트(6.3g)를 얻었다.

(공정 4)

상기 공정 3에서 얻어진8-(벤질티오)-5-클로로-4-메틸-d3-크로만-4-일　아세테이트(6.3g)의 아세트나이트릴(100 mL)용액에, 0℃에서 물(3.0 mL), 초산(4.3 mL), 1,3-디클로로-5,5-디메틸히단토인(7.2g)를 각각 가하여, 반응액을 동일한 온도에서 30분간 교반하였다. 반응액에 포화 탄산수소나트륨 수용액(70 mL), 초산에틸(70 mL)을 가하여, 분층하였다. 물층을 초산에틸(70 mL)으로 추출하였다. 하나로 한 유기층을 포화 식염수(70 mL)으로 세척하여, 무수황산나트륨으로 건조 후, 감압 하 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(전개용매：헥산/초산에틸)로 정제한 것으로 표기 화합물(5.3g)를 얻었다.

참고예 C2-C4: 참고예 C1 공정 1-4의 방법에 따라 상기 화합물 참고예 C2는 하기 표에 따른 출발물질으로부터 합성하였다. 참고예 C1 공정 3 및 4의 방법에 따라 참고예 C3 및 C4의 화합물을 합성하였다.

참고예	출발물질	합성화합물
C2
C3
C4

참고예 D1: 5-((1S,2R)-1-아미노-2-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)프로필)-1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온일염산염

[화학식 V]

(공정 1) (2S,3R)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)부탄산

참고예 B1 의해 얻어진 (2S,3R)-2-아미노-3-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)부탄산(515 mg)에 물(9 mL), 1,4-디옥산(9 mL), 트리에틸아민(955 μL)을 순차 가하여, 0℃로 냉각하였다. 반응액에 이탄산디-tert-부틸(650 mg)를 동일한 온도에서 가하여, 45분간 교반하였다. 반응액을 염산(1 M, 20 mL)에 가하여, 초산에틸(20 mL)으로 추출하였다. 유기층을 포화 식염수(20 mL)으로 세척하여, 무수 황산마그네슘으로 건조 후, 감압 하 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(전개용매：헥산/초산에틸/2%초산)로 정제한 것으로, (2S,3R)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-3-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)부탄산(745 mg)를 얻었다.

(공정 2) tert-부틸　((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-디하이드로-1,3,4-옥사디아졸-2-일)프로필)카바메이트

상기 공정 1에서 얻어진 (2S,3R)-2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-3-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)부탄산(440 mg)의 THF(14.0 mL)용액에, CDI(302 mg)을 가하여, 반응액을 실온에서 20분간 교반하였다. 반응액을 0℃으로 냉각하여, 하이드라진·일수화물(200μL)을 가하여, 동일한 온도에서 30분간 교반하였다. 반응액을 물(20 mL)에 가하여, 초산에틸(20 mL)으로 추출하였다. 유기층을 포화 식염수(20 mL)으로 세척하여, 무수황산나트륨으로 건조 후, 감압 하 농축하였다. 얻어진 잔류물의 1,4-디옥산(14 mL)용액에, CDI(560 mg)을 가하여, 반응액을 실온에서 30분 교반하였다. 반응액을 물(20 mL)에 가하여, 초산에틸(20 mL)으로 추출하였다. 유기층을 포화 식염수(20 mL)으로 세척하여, 무수황산나트륨으로 건조 후, 감압 하 농축하였다. 얻어진 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(전개용매：헥산/초산에틸)로 정제한 것으로 tert-부틸　((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-디하이드로-1,3,4-옥사디아졸-2-일)프로필)카바메이트(356 mg)를 얻었다.

(공정 3)

상기 공정 2에서 얻어진 tert-부틸　((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-디하이드로-1,3,4-옥사디아졸-2-일)프로필)카바메이트(550 mg)를 염산-1,4-디옥산(4 M, 5.0 mL)에 용해하여, 반응액을 실온에서 1.5시간 교반하였다. 반응액을 감압 하 농축한 것으로 표기 화합물을 얻었다.

참고예 D2및 D3: 참고예 D1 공정 1 내지 3의 방법에 따라 하기 화합물 참고예 D2 및 D3을 합성하였다.

참고예	출발물질 (참고예 번호 또는 구조식)	합성화합물
D2	참고예 B2
D3	참고예 B3

실시예 1: 5-브로모-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-디하이드로-1,3,4-옥사디아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드

(공정 1)

참고예 B1의해 얻어진 (2S,3R)-2-아미노-3-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)부탄산(300 mg)의 물(5.0 mL), 1,4-디옥산(5.0 mL)용액에, 트리에틸아민(570μL)을 가한 후, 0℃로 냉각하였다. 반응액에 4-브로모-2-시아노벤젠-1-설포닐클로라이드(362 mg)을 가하여, 동일한 온도에서 45분간 교반하였다. 반응액을염산(1M, 15 mL)에 가하여, 초산에틸(15 mL)으로 추출하였다. 유기층을 포화 식염수(20 mL)으로 세척하여, 무수 황산마그네슘으로 건조 후, 감압 하 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(전개용매：헥산/초산에틸/2%초산)로 정제한 것으로, (2S,3R)-2-(4-브로모-2-시아노페닐설폰아마이드)-3-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)부탄산(465 mg)를 얻었다.

(공정 2)

상기 공정 1에서 얻어진 (2S,3R)-2-(4-브로모-2-시아노페닐설폰아마이드)-3-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)부탄산(465 mg)의 THF(5.0 mL)용액에, CDI(210 mg)을 가하여, 반응액을 실온에서 20분간 교반하였다. 반응액을 0℃으로 냉각하여, 하이드라진·일수화물(200μL)을 가하여, 동일한 온도에서 20분간 교반하였다. 반응액을 물(20 mL)에 가하여, 초산에틸(20 mL)으로 추출하였다. 유기층을 포화 식염수(20 mL)으로 세척하여, 무수황산나트륨으로 건조 후, 감압 하 농축하였다. 얻어진 잔류물의 1,4-디옥산(4.0 mL)용액에 CDI(211 mg)을 가하여, 반응액을 45℃에서 1시간 교반하였다. 반응액을 물(20 mL)에 가하여, 초산에틸(20 mL)으로 추출하였다. 유기층을 포화 식염수(20 mL)으로 세척하여, 무수황산나트륨으로 건조 후, 감압 하 농축하였다. 얻어진 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(전개용매：헥산/초산에틸)로 정제한 것으로 4-브로모-2-시아노-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-디하이드로-1,3,4-옥사디아졸-2-일)프로필)벤젠설폰아마이드(386 mg)를 얻었다.

(공정 3)

상기 공정 2에서 얻어진4-브로모-2-시아노-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-디메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-디하이드로-1,3,4-옥사디아졸-2-일)프로필)벤젠설폰아마이드(386 mg)의 DMSO(5.0 mL)용액에, 얼음 욕조 하에서 과탄산수소수(1.0 mL), 탄산칼륨(420 mg)을 순차 가하여, 반응액을 60℃에서2.5시간 교반하였다. 반응액을 수욕한 염산(1 M, 15 mL)에 천천히 가한 후, 초산에틸(15 mL)으로 추출하였다. 유기층을 포화 식염수(20 mL)으로 세척 후, 무수황산나트륨으로 건조하여, 감압 하 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(전개용매：헥산/초산에틸)로 정제한 것으로, 표기 화합물을 얻었다.

실시예 2-4

실시예 2 내지 4의 화합물을 실시예 1 공정 1 내지 3의 방법에 따라 합성하였다. 반드시 필요한 물질을 하기 표에 기재하였다.

실시예	출발물질	ArSO₂Cl	합성화합물명
2	참고예 B1		5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드
3	참고예 B4		5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-에틸-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드
4	참고예 B2		5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드

실시예 5: 5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드 이성체 A 및 이성체 B

(공정 1) 5-클로로-8-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)-4-메틸-d3-크로만-4-일 아세테이트

참조예 D1으로부터 얻은 5-((1S,2R)-1-아미노-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)프로필)-1,3,4-옥사다이아졸-2(3H)-온 모노하이드로클로라이드 (45 mg)의 피리딘 (1.5 mL) 용액에, 참조예 C1으로부터 얻은 5-클로로-8-(클로로설포닐)-4-메틸-d3-크로만-4-일아세테이트 (80 mg)를 첨가하고, 반응 용액을 상온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 용액은 감압 상태에서 농축되었으며, 얻어진 잔여물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (용출: 헥세인 / 에틸 아세테이트) 표제의 화합물 (59 mg) 을 1:1 부분입체 이성질체 혼합물로 얻었다.

(공정 2) A1: 상기 공정 1에서 얻은 5-클로로-8-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)-4-메틸-d3-크로만-4-일 아세테이트 (59 mg)의 1 부분입체이성질체 혼합물을 메탄올 (2.0 mL)에 용해시키고, 물 (1.0 mL), 리튬 하이드록사이드 (5 mg)를 첨가하고, 반응용액을 55 ℃에서 한시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축한 후, 하이드로클로릭 산 (1 M, 10 mL) 및 에틸 아세테이트 (10 mL)를 잔여물에 첨가하였으며, 층이 분리되었다. 수용층은 에틸 아세테이트 (10 mL)로 추출하였고, 컴바인 유기층은 브라인 (10 mL)으로 워싱하였다. 유기층은 무수성 소듐 설페이트 하에 건조시키고, 감압 상태에서 농축하였다. 잔여물을 역상 HPLC (물/아세토나이트릴)을 이용하여 정제하였고, 분획물은 두가지 부분입체이성질체 생성물로 농축되었다. 첫번째로 농축된 물질을 화합물 A라 하고, 후에 용출된 물질을 화합물 B라 한다.

실시예 6-8: 실시예 5 공정 2의 방법에 따라, 하기 실시예 6-8의 화합물을 합성하였다. 부분입체 이성질체 분리의 경우, 이전에 용출된 화합물을 A라 하고, 후에 용출된 화합물을 B라 한다. 부분입체 이성질체 비율은 달리 명시되지 않은 한 1:1혼합물이다. 필수 원료는 하기 표에 나열되어 있다.

실시예	출발물질	ArSO₂Cl	합성화합물명
6A 및 6B	참고예 D2	참고예 C2	5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드
7A 및 7B	참고예 D3	참고예 C2	N-((1S,2R)-2-(3-브로모-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-5-클로로-4-하이드록시-4-메틸크로만-8-설폰아마이드
8A 및 8B	참고예 D2	참고예 C1	5-클로로-N-((1S,2R)-2-(3-클로로-6-플루오로-2-메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시-4-메틸-d3-크로만-8-설폰아마이드

실시예 9: 5-플루오로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시크로만-8-설폰아마이드 이성체 A 및 이성체 B

(공정 1) 참조예 D1로부터 얻은 5-((1S,2R)-1-아미노-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)프로필)-1,3,4-옥사다이아졸-2-(3H)-온 모노하이드로클로라이드 (40 mg) 및 참조예 C3로부터 얻은 5-플루오로-4-옥소크로만-8-설포닐 클로라이드 (60 mg)를 이용하여 실시예 5 공정 1의 방법에 따라 5-플루오로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-옥소크로만-8-설폰아마이드 (44 mg)를 얻었다.

(공정 2) 상기 공정 1에서 얻은 5-플루오로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-옥소크로만-8-설폰아마이드 (44 mg)의 에탄올 (2.0 mL) 용액에 소듐 보로하이드라이드 (13.5 mg)를 첨가한 후, 반응 용액을 상온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 상태에서 농축시킨 후, 물 (10 mL) 및 에틸 아세테이트 (10 mL)를 잔여물에 첨가하고, 분리하여 수용층은 에틸 아세테이트 (10 mL)로 추출하였다. 컴바인 유기 층은 브라인 (10 mL)으로 워싱하였고, 무수 소듐 설페이트 하에서 건조한 후 감압 상태에서 농축하였다. 잔여물은 역상 HPLC (물/아세토나이트릴)로 정제하고, 분획물은 농축하여 각각 두개의 부분입체이성질체 생성물로 농축되었다. 첫번째로 용출된 물질은 화합물 A라 하고, 후에 용출된 물질을 화합물 B라 한다.

실시예 10: 실시예 5 공정 1 및 실시예 9 공정 2에 따라, 하기의 실시예 10 화합물을 합성하였다. 부분입체 이성질체 분리의 경우, 첫번째로 용출된 화합물을 A라하고, 후에 용출된 화합물을 B라 한다. 부분입체 이성질체의 비율을 달리 명시되지 않는 한 1:1 혼합물이다. 필수 원료는 하기 표에 나열되어 있다.

실시예	출발물질	ArSO₂C	합성화합물명
10A 및 10B	참고예 D1	참고예 C4	5-클로로-N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)-4-하이드록시크로만-8-설폰아마이드

비교예로서, 하기 화합물을 얻었다. [화학식 VI]

¹H NMR (CD3OD) δ7.54 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.17-7.29 (m, 5H), 7.08-7.14 (m, 2H), 4.55-4.61 (m, 1H), 3.00-3.13 (m, 2H), 2.39 (s, 3H)

이하, 실시예 1 내지 10의 화합물 구조식 및 물성을 나타내었다.

실시예	구조식	물성값
1		1H NMR (CD3OD) δ7.74-7.78 (m, 3H), 6.97 (dd, J=8.2, 5.7 Hz, 1H), 6.71 (dd, J=11.7, 8.4 Hz, 1H), 4.78-4.81 (m, 1H), 3.51-3.61 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 1.44 (d, J=7.0 Hz, 3H); LC/MS RT 1.67min, m/z [M-H]^- 525,527
2		1H NMR (CD3OD) δ7.84 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.62 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.58 (dd, J=8.4, 2.2 Hz, 1H), 6.98 (dd, J=8.2, 5.7 Hz, 1H), 6.72 (dd, J=11.7, 8.4 Hz, 1H), 4.82 (d, J=11.4 Hz, 1H), 3.50-3.60 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 1.45 (d, J=7.0 Hz, 3H); LC/MS RT 1.65min, m/z [M-H]^- 481,483
3		1H NMR (CD3OD) δ7.84 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.62 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.58 (dd, J=8.4, 2.2 Hz, 1H), 6.98 (dd, J=8.4, 5.9 Hz, 1H), 6.75 (dd, J=11.7, 8.8 Hz, 1H), 4.78 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.50-3.60 (m, 1H), 2.52-2.59 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 1.46 (d, J=7.0 Hz, 3H), 1.06 (t, J=7.5 Hz, 3H),; LC/MS RT 1.73min, m/z [M-H]^- 495,497
4		1H NMR (CD3OD) δ7.86 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.63 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.59 (dd, J=8.4, 2.2 Hz, 1H), 7.25 (dd, J=8.8, 5.1 Hz, 1H), 6.88 (t, J=10.0 Hz, 1H), 4.80 (d, J=11.4 Hz, 1H), 3.55-3.65 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.47 (d, J=7.0 Hz, 3H); LC/MS RT 1.68min, m/z [M-H]^- 501,503
5A		1H NMR (CD3OD) δ7.61 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.02 (d, J=8.5 Hz, 1H), 6.96 (dd, J=8.2, 5.7 Hz, 1H), 6.70 (dd, J=11.7, 8.4 Hz, 1H), 4.71 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.40-4.46 (m, 1H), 4.26 (td, J=10.8, 2.6 Hz, 1H), 3.62-3.71 (m, 1H), 2.23 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.05-2.13 (m, 2H), 1.50 (d, J=7.0 Hz, 3H); LC/MS RT 1.64min, m/z [M-H]^- 527,529
5B		1H NMR (CD3OD) δ7.59 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.02 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.97 (dd, J=8.4, 5.9 Hz, 1H), 6.71 (dd, J=11.7, 8.4 Hz, 1H), 4.75 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.41-4.48 (m, 1H), 4.32 (td, J=10.7, 2.7 Hz, 1H), 3.63-3.73 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 2.05-2.13 (m, 2H), 1.48 (d, J=7.0 Hz, 3H); LC/MS RT 1.71min, m/z [M-H]^- 527,529
6A		1H-NMR (CDCl3) δ8.15 (1H, s), 7.66 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.19 (1H, dd, J = 8.6, 5.1 Hz), 6.99 (1H, d, J = 8.6 Hz), 6.78 (1H, dd, J = 10.8, 9.0 Hz), 5.52 (1H, d, J = 11.0 Hz), 4.87 (1H, t, J = 10.4 Hz), 4.47-4.44 (1H, m), 4.28-4.25 (1H, m), 3.48 (1H, s), 3.29 (1H, s), 2.37 (3H, s), 2.32-2.28 (1H, m), 2.09-2.06 (1H, m), 1.78 (3H, s), 1.54 (3H, d, J = 7.0 Hz).; LC/MS RT 1.68min, m/z [M-H]^- 544,546
6B		1H-NMR (CDCl3) δ8.68 (1H, br s), 7.64 (1H, d, J = 8.8 Hz), 7.19 (1H, dd, J = 8.8, 4.9 Hz), 7.01 (1H, d, J = 8.8 Hz), 6.78 (1H, dd, J = 10.8, 8.8 Hz), 5.47-5.42 (1H, m), 4.81 (1H, t, J = 10.9 Hz), 4.45-4.42 (1H, m), 4.32 (1H, t, J = 10.9 Hz), 3.53 (1H, br s), 3.40 (1H, br s), 2.35 (3H, s), 2.33-2.27 (1H, m), 2.15-2.10 (1H, m), 1.78 (3H, s), 1.59-1.58 (3H, m).; LC/MS RT 1.74min, m/z [M-H]^- 544,546
7A		1H NMR (CD3OD) δ7.61 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.42 (dd, J=9.0, 5.3 Hz, 1H), 7.03 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.81 (dd, J=11.2, 9.0 Hz, 1H), 4.69 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.39-4.47 (m, 1H), 4.22-4.33 (m, 1H), 3.63-3.78 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.17-2.24 (m, 1H), 2.05-2.15 (m, 1H), 1.75 (s, 3H), 1.52 (d, J=6.6 Hz, 3H); LC/MS RT 1.70min, m/z [M-H]^- 588,590
7B		1H NMR (CD3OD) δ7.60 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.43 (dd, J=8.9, 5.1 Hz, 1H), 7.02 (d, J=8.6 Hz, 1H), 6.82 (dd, J=11.2, 8.9 Hz, 1H), 4.74 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.39-4.47 (m, 1H), 4.33 (td, J=10.8, 2.6 Hz, 1H), 3.65-3.77 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.22-2.31 (m, 1H), 2.05-2.12 (m, 1H), 1.75 (s, 3H), 1.50 (d, J=7.0 Hz, 3H); LC/MS RT 1.76min, m/z [M-H]^- 588,590
8A		1H NMR (CD3OD) δ7.61 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.24 (dd, J=8.8, 5.1 Hz, 1H), 7.03 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.87 (dd, J=11.0, 8.8 Hz, 1H), 4.69 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.41-4.47 (m, 1H), 4.26 (td, J=10.9, 2.4 Hz, 1H), 3.65-3.72 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.15-2.25 (m, 1H), 2.05-2.13 (m, 1H), 1.52 (d, J=6.6 Hz, 3H); LC/MS RT 1.68min, m/z [M-H]^- 547,549
8B		1H NMR (CD3OD) δ7.60 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.24 (dd, J=9.0, 4.9 Hz, 1H), 7.02 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.87 (dd, J=11.2, 9.0 Hz, 1H), 4.74 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.41-4.46 (m, 1H), 4.29-4.36 (m, 1H), 3.64-3.74 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.22-2.29 (m, 1H), 2.05-2.13 (m, 1H), 1.50 (d, J=7.0 Hz, 3H); LC/MS RT 1.74min, m/z [M-H]^- 547,549
9A		1H NMR (CD3OD) δ7.73 (dd, J=8.8, 6.2 Hz, 1H), 6.96 (dd, J=8.4, 5.9 Hz, 1H), 6.66-6.77 (m, 2H), 4.69 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.84-4.90 (m, 1H), 4.53-4.60 (m, 1H), 4.35 (ddd, J=13.1, 10.9, 2.4 Hz, 1H), 3.62-3.71 (m, 1H), 2.21 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 1.95-2.12 (m, 2H), 1.49 (d, J=7.0 Hz, 3H); LC/MS RT 1.57min, m/z [M-H]^- 494
9B		1H NMR (CD3OD) δ7.77 (dd, J=8.8, 6.2 Hz, 1H), 6.97 (dd, J=8.2, 5.7 Hz, 1H), 6.68-6.78 (m, 2H), 4.85-4.93 (m, 1H), 4.74 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.51-4.60 (m, 1H), 4.33 (td, J=11.5, 3.3 Hz, 1H), 3.62-3.71 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 1.96-2.09 (m, 2H), 1.47 (d, J=6.6 Hz, 3H); LC/MS RT 1.61min, m/z [M-H]^- 494
10A		1H NMR (CD3OD) δ7.66 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.05 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.96 (dd, J=8.1, 5.5 Hz, 1H), 6.69 (dd, J=11.7, 8.4 Hz, 1H), 4.86-4.93 (m, 1H), 4.71 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.53-4.61 (m, 1H), 4.29-4.39 (m, 1H), 3.63-3.71 (m, 1H), 2.21 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.01-2.06 (m, 2H), 1.49 (d, J=7.0 Hz, 3H); LC/MS RT 1.61min, m/z [M-H]^- 510,512
10B		1H NMR (CD3OD) δ7.70 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.07 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.97 (dd, J=8.3, 5.7 Hz, 1H), 6.71 (dd, J=11.7, 8.3 Hz, 1H), 4.92-4.95 (m, 1H), 4.75 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.53-4.60 (m, 1H), 4.26-4.39 (m, 1H), 3.58-3.75 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 1.95-2.14 (m, 2H), 1.47 (d, J=7.0 Hz, 3H); LC/MS RT 1.67min, m/z [M-H]^- 510,512

시험예: 본 발명에 따른 화합물을, 이하의 시험법을 사용하여 평가하였다.

시험예 1: 인간 RNR 저해 작용

피검 화합물의 리보뉴클레오타이드 환원 반응(이하 RNR 반응)에 대한 저해 활성을, 하기 방법에 의해 시티딘디포스페이트(이하 CDP)로부터의 데옥시시티딘디포스페이트(이하 DCDP)의 생성을 측정하는 것에 의해 구하였다.

아미노 말단에 히스디딘 태그를 융합한 인간 M1 서브 유닛과 인간 M2 서브 유닛 (아미노 말단 59 아미노산을 결손시킨 돌연변이) 를 대장균에서 과발현시켜, 회수 후에 가용화하고, 히스티딘 태크 부가 인간 M1 및 히스티딘 태크 부가 인간 M2 단백질을 니켈 킬레이트 컬럼으로 정제하였다.

피검 화합물의 RNR 반응에 대한 억제 활성 측정법은, 문헌 [CANCER RESEARCH 64, 1-6, 2004]에 기재되어있는 방법을 참고하였다.

먼저, 피검 화합물을 DMSO로 단계적으로 희석한 다음, 0.02% 소 태아 혈청 유래 알부민 수용액 중에 인간 M1 단백질과 인간 M2 단백질을 가한 후, 본 발명 화합물 DMSO 용액 또는 대조 DMSO 용액(DMSO의 최종 농도는 1%)을 가하여, 실온에서 20 분간 방치하였다. 그 후, 반응 완충액[최종 농도로 50 mM HEPES 완충액(pH 7.2), 최종 농도로 4 mM 초산 마그네슘, 최종 농도로 100 mM 염화 칼륨, 최종 농도로 6 mM 디티오트레이톨, 최종 농도에서 2 mM 아데노신 트리포스페이트, 최종 농도로 0.24 mM 니코틴 아마이드 아데닌 디뉴클레오티드 인산]과 최종 농도로 10 μM CDP을 가하여 37 ℃에서 30분 동안 배양하고 RNR 반응을 실시하였다. 반응 후 즉시 100℃에서 15분 동안 가열하여 반응을 정지시킨 후, 10,000 rpm으로 10분 동안 원심 분리하였다. 원심 분리 후, 얻어진 상층액의 일부(5 μL)를 Shim-pack XR-ODS (시마즈 디에루시사 제, 3.0 × 100 mm)를 사용하여 고속 액체 크로마토 그래프 (시마즈 제작소 제, Prominence)에서 분석하였다. 측정 파장 265 nm, 유속 0.5 mL / min에서 이동상 A(10 mM 인산 칼륨(pH 6.7), 10 mM 테트라 부틸 암모늄 0.25% 메탄올)과 이동상 B(50 mM 인산 칼륨(pH 6.7), 5.6 mM 테트라 부틸 암모늄 30% 메탄올)의 12:13 혼합액으로부터 2 : 3 혼합액에의 9분 동안 농도 구배에 의해 용리하여, 기질인 CDP(RT 5.9 min) 및 반응 생성물인 DCDP(RT 6.2 min)를 측정하였다.

피검 화합물의 저해 활성은 다음 식에 의해 구하여, RNR 반응을 50 % 저해하는 피검 화합물의 농도를 IC₅₀(μM)로서 표 11에 나타내었다.

[수학식 1]

그 결과, 하기 표에 의해 알 수 있듯이, 본발명의 화합물은 우수한 RNR 저해 작용을 갖는 것으로 밝혀졌다. 반대로 대조예 1 화합물은 43 μM의 IC₅₀을 가지며, 본 발명의 실시예 화합물에서 보이던 RNR에 대해 저해 활성을 보이지 않았다.

실시예 번호	RNR 효소저해활성 IC₅₀ (μM)	실시예 번호	RNR 효소저해활성 IC₅₀ (μM)	실시예 번호	RNR 효소저해활성 IC₅₀ (μM)
1	0.06	6A	0.10	9A	0.12
2	0.14	6B	0.18	9B	0.05
3	0.18	7A	0.08	10A	0.08
4	0.25	7B	0.06	10B	0.07
5A	0.03	8A	0.08
5B	0.08	8B	0.14

시험예 2 : 인간 유래 유방암 세포주에 대한 세포 증식 억제 효과

인간 유래 유방암 세포주 HCC1806 세포(American Type Culture Collection, ATCC)를, 10% 소 태아 혈청(FBS)을 포함하는 ATCC 권장의 로스웰 파크 기념 연구소 매체(RPMI-1640) 중에서, 80%를 초과하지 않는 세포 밀도에서 일상적으로 계대하였다. 세포 증식 억제 활성의 시험을 시작하기 위해, HCC1806 세포를 상기 배지 중에 현탁하여, 96 웰 평저 플레이트의 각 웰에 1 웰당의 세포 수가 각각 2,000개가 되도록 180μL 파종한 후, 5% 탄산 가스 함유의 배양기에서 37 ℃에서 1일간 배양하였다. 다음날, 피검 화합물을 DMSO에 용해하고 최종 농도의 10배 농도로 증류수로 희석한 약제 첨가 용액을 세포의 배양 플레이트의 각 웰에 20 μL 가하여, 5% 탄산 가스 함유 배양기에서 37℃로 72시간 배양하였다. 72 시간 배양 후, 글루탈알데하이드 20 μL를 각 well에 첨가하여 30분 정치한 후, plate를 물로 10회 씻어 건조시켰다. 염색액(0.05 % Crystal violet in 20% 메탄올 용액) 100 μL를 각 well에 첨가하여 30분 정치한 후, plate를 물로 10 회 씻어 건조시켰다. 추출액(0.1 N NaH₂PO₄: 100% 에탄올 = 1 : 1) 100 μL를 각 well에 첨가·혼합하여 플레이트 리더(코로나 전기 주식회사, MTP-450)를 이용하여 540 nm의 파장에서 측정하였다. 이하의 식에 의해 증식 저해율을 산출하고, 50% 저해하는 피검 화합물의 농도(IC₅₀ (μM))를 구한 결과를 표 12에 나타낸다.

증식 저해율 (%) = {(C-B) - (T-B)} / (C-B) × 100

T : 피검 화합물을 첨가한 웰의 흡광도

C : 피검 화합물을 첨가하지 않은 웰의 흡광도

B : 세포 현탁액을 첨가하지 않은 웰의 흡광도

그 결과, 하기 표에서 알 수 있듯이, 본원에 개시된 화합물은 암세포에 대한 증식 억제 활성을 가지는 것으로 밝혀졌다.

실시예 번호	세포증식억제 IC₅₀ (μM)	실시예 번호	세포증식억제 IC₅₀ (μM)	실시예 번호	세포증식억제 IC₅₀ (μM)
1	0.16	6A	0.06	9A	0.29
2	0.20	6B	0.82	9B	0.78
3	0.64	7A	0.06	10A	0.1
4	0.56	7B	0.67	10B	0.40
5A	0.05	8A	0.14
5B	0.46

시험예 3: 사람 유래 각종 암세포주에 대한 세포 증식 억제 효과

시험예 2의 방법에 따라 표 13 및 표 14에 기재한 각종 암세포주에 대한 세포 증식 억제 효과를 평가하였다.

그 결과, 하기 표에서 알 수 있듯이, 본원에 개시된 화합물은 인간 유래의 다양한 암세포에 대한 증식 억제 활성을 갖는 것으로 밝혀졌다.

세포주	NUGC-3	NCI-H460	CFPAC-1	A673	GB-1	HLE	MSTO-211H	DU145
암종	위암	폐암	췌장암	유잉육종	교모세포종	간암	중피종	전립선암
배지	RPMI-1640+10% FBS	ATCC 추천 RPMI-1640+10% FBS	IMDM+10% FBS	DMEM+10% FBS	DMEM+10% FBS	DMEM+10% FBS	ATCC 추천 RPMI-1640+10% FBS	EMEM+0.1 mM 비필수아미노산+ 1 mM 소듄피루베이트+10% FBS
세포수(세포/웰)	2000	1000	2000	2000	3000	3000	6000	5000
실시예2	1.22	0.73	0.94	1.09	1.57	0.79	0.70	1.04
실시예10A	0.71	0.35	0.35	0.61	1.12	0.42	0.39	0.53
실시예3	3.11	1.50	1.71	2.56	5.22	1.74	1.54	1.84
실시예1	1.12	0.57	0.54	0.92	1.56	0.56	0.65	0.73
실시예6A	0.40	0.25	0.33	0.32	0.64	0.26	0.32	0.31
실시예7A	0.36	0.18	0.23	0.25	0.46	0.20	0.27	0.26
실시예5A	0.27	0.13	0.17	0.18	0.37	0.14	0.17	0.17
실시예8A	0.51	0.31	0.36	0.40	0.85	0.29	0.37	0.34

세포주	A2780	ACHN	HCT116	RPMI7932	NCI-H2228	NCI-H2170
암종	난소암	신장암	대장암	흑색종	폐암	폐암
배지	RPMI-1640+10% FBS	EMEM+10% FBS	McCoy's 5A+10% FBS	RPMI-1640+10% FBS	ATCC 추천 RPMI-1640+10% FBS	ATCC 추천 RPMI-1640+10% FBS
세포수(세포/웰)	2000	2000	1000	4000	5000	5000
실시예 2	0.83	0.75	0.91	2.67	1.27	1.89
실시예 10A	0.40	0.38	0.48	1.23	0.88	1.10
실시예 3	2.08	1.50	2.30	4.74	3.21	3.90
실시예 1	0.63	0.68	0.75	1.74	1.35	1.41
실시예 6A	0.30	0.22	0.28	0.72	0.73	0.57
실시예 7A	0.19	0.17	0.27	0.51	0.48	0.52
실시예 5A	0.13	0.13	0.22	0.43	0.50	0.49
실시예 8A	0.38	0.32	0.38	0.65	0.74	0.88

시험예 4: 인간 유래 혈액암 세포주(MV-4-11) 피하 이식 모델을 이용한 항 종양 효과의 평가(in vivo)

인간 유래 혈액암 세포주 MV-4-11를 누드 마우스의 피하에 이식하여, 종양이 생착한 누드 마우스의 종양 체적이 100 ~ 300 mm³ 정도된 시점에서, 각 군의 종양 체적 평균이 균일되도록 무작위층별화로 1군 4마리를 할당(0일째), 본 발명 실시예 화합물을 14일간, 1일 1회 100 mg / kg / Day 연일 경구 투여하였다.

각 화합물 투여에서 종양의 경시적 성장 추이를 비교하기 위해 종양의 성장 비율로 군 분류시 종양 체적을 1로 한 상대 종양 체적(Relative tumor colume; RTV)을 다음 식에 따라 산출하고, 각 개체의 RTV의 평균치의 추이를 도 1 내지 도 4에 나타내었다.

RTV = (종양 체적 계측일의 종양 체적) / (군 분류 시의 종양 체적)

최종 평가일의 본 발명 화합물 투여군의 평균 RTV 값이, 대조군의 평균 RTV 값보다 작고, 통계적으로 유의차(Student-t 검정)를 나타낸 경우에, 본 발명 실시예 화합물은 상당히 유효인 것으로 판정하여, 도에 * 으로 표시된다 (* : p <0.05).

그 결과, 본원에 개시된 화합물은 유의한 항암 효과를 나타내는 것으로 나타났다.

시험예 5: 결정형, 공결정형, 또는 염 예시 샘플의 형성

상기 실시예 1- 10으로부터 선택된 화합물은 총 47 개의 2차 화합물 (수산화 소듐, 수산화 포타슘, L-아르기닌, 수산화 칼슘, 수산화 콜린, 다이에틸 아민, L-리신, 다이에탄올 아민, 트로 메타민, 에틸렌다이아민, 옥살산, 다이벤조일 -L-타르타르산, 말레산, 글루타민산, 말론산, 푸마르산, L-타르타르산, 4-하이드록시 벤즈아미드, 니코틴아미드, 아이소니코틴아미드, 사카린, 갈락타르산, 시트르산, D- 글루코론산, L-말산, 에틸렌다이아민, 글루타르산, 숙신산, 우레아, 아르기닌, 벤조산, 아스코르브 산, 메틸파라벤, 바닐린, 글리콜산, 염산, 히푸르산, L-락트산, 메탄 설폰산, 인산, p-톨루엔-술폰산 일수화물, 황산, L-알라닌, 글리신, 메글루민, L-프롤린, L-세린, L-발린)와 함께 결정화하였다. 그러나 벤조산과의 조합만이 결정형, 공결정 또는 염 예시 샘플을 형성 하였다.

처음에, 실시예 1-10에서 선택된 93 m의 화합물을 500 μL의 아이소 프로필 아세테이트에 용해시키고 용액을 60 ℃에서 교반 하였다; 메탄올 중 233 μL의 벤조산 용액 (농도 : 0.8672 mmol / mL)을 샘플에 첨가 하였다. 혼합물을 60 ℃에서 10분 동안 교반하고, 예열된 시린지 필터 (0.2㎛, 나일론)를 통해 여과 한 후, 주위 온도로 냉각시킨 후, 주위 온도 이하의 저장, 증발 및 교반에 의해 겔을 수득 하였다. 주위 조건에서 30 일 동안 1 mL 헵탄에서 증발시켜 1 당량의 벤조산을 함유하는 예시 샘플을 수득 하였다. 그러나, 이 제조 방법에서는, 제조 기간이 30 일 이상 걸리고, 예시 샘플의 약 10mg만이 얻어졌다.

다른 예에서, 동일한 양의 동일한 화합물을 헵탄-톨루엔 혼합 용매에 현탁시키고 40 ℃이상에서 교반하는 방법에 의해 예시 샘플 3g을 수득하였다. 예를 들어, 실시 예 1-10에서 선택된 화합물 3000 mg에 벤조산 1518 mg을 첨가하고, 헵탄 57 mL 및 톨루엔 3 mL를 첨가 하였다. 현탁액을 60 ℃에서 가열하면서 약 4.5 시간 동안 교반 하였다. 현탁액을 여과에 의해 수집하고, 헵탄 및 톨루엔의 19 : 1 혼합물로 세척하고 60 ℃에서 가열 하였다. 고체를 회수하고 건조시켜 3420.6을 수득 하였다. 98.67 % 화학적 순도 및 100 % ee 광학 순도를 갖는 생성물의 mg (회복 속도 91 %). H-NMR(CDCl₃) δ8.77 (s, 1H), 8.09 (d, J=8.0Hz, 2H), 7.89 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.60 (t, J=7.2Hz, 1H), 7.54 (d, J=2Hz, 1H), 7.40 - 7.51 (m, 3H), 6.91 (dd, J=6.0Hz, 8.4Hz, 1H), 6.87 (d, 9.6Hz, 1H), 6.67 (dd, J=8.0Hz, 8.4Hz, 1H), 6.55 (br s, 1H), 6.34 (br s, 1H), 4.88 (dd, J=9.6Hz , 10.4Hz, 1H), 3.40 - 3.55 (m, 1H), 2.15 (s, 6H), 1.42 (d, J=6.8Hz, 3H).

현탁액을 여과하고, 고체를 헵탄 및 톨루엔의 혼합물로 헹구고 60 ℃에서 가열하였다. 얻어진 결정형, 공결정형 또는 염의 물리 화학적 특성을 평가 한 결과, 본 생성물은 저장 안정성이 우수하고, 흡습성 및 대전성이 더 낮고 취급이 용이하다는 것이 놀랍게도 밝혀졌다.

다른 예에서, 실시 예 1-10에서 선택된 화합물 1000mg에 506mg의 벤조산을 첨가하고, 19 mL의 헵탄 및 1 mL의 톨루엔을 첨가 하였다. 현탁액을 60 ℃에서 가열하면서 약 3.5 시간 동안 교반 하였다. 현탁액을 여과에 의해 수집하고, 헵탄 및 톨루엔의 19 : 1 혼합물로 세척하고, 60 ℃에서 가열 하였다. 고체를 회수하고 건조시켜 예시 샘플 947 mg (회수 속도 : 75.6 %)를 얻었다.

또한, 결정화 연구에 사용되는 47 종의 2 차 화합물 중에서 염기성 작용기 (또는 양이온)를 함유하는 2 차 화합물이 있었지만, 산성인 본 화합물은 이러한 염기성 2 차 화합물과 결정을 형성하지 않았다. 따라서, 산성 화합물이 산성 화합물인 벤조산과만 결정형, 공결정형 또는 염을 형성하는 것은 예상치 못한 것이었다. 또한, 얻어진 결정형, 공결정형 또는 염이 어떠한 물리 화학적 특성을 갖는지는 예측할 수 없다.

시험예 6: 구조적 특성

단결정 분석 : 5 mL의 헵탄, 3 mL의 n-프로필 아세테이트 및 203.3 mg의 벤조산을 실시 예 2의 화합물을 사용하여 시험예 5로부터의 샘플 100 mg에 첨가 하였다 (이하, "예시 적이라고도한다" 용해된 생성물에 810 mg의 벤조산을 첨가하고 용해시켰다. 소량의 생성물을 첨가하고, 혼합물을 60 ℃에서 밤새 방치했다. 그 후, 온도를 50 ℃로 낮추고 6일 동안 방치하여 단결정 분석 용 결정을 수득 하였다.

다음 측정 조건 하에서 측정을 수행하고, 데이터 측정 및 처리 소프트웨어 CrysAlisPro, 구조 분석 프로그램 패키지 CrystalStructure 및 통합 분말 X- 선 분석 소프트웨어 PDXL을 사용하여 데이터 처리를 수행 하였다.

장치: XtaLAB PRO MM 007

X-ray 소스: Cu Kα (λ = 1.54184 Å)

튜브 전압 · 튜브 전류: 40 kV - 30 mA

측정 온도: -173 ° C (분무 저온 장치 사용)

콜리메이터: Φ0.3 mm

카메라 길이: 39.71 mm

진동 각도: 0.25 °

노출 시간: 0.25 sec / piece

총 측정 수: 14476 sheets

총 측정 시간: 1 hour 35 minutes

그 결과를 하기 및 도 5에 나타내었다.

결정 시스템: monoclinic system

Space group: P21 / n (No. 4)

격자 상수: a = 13.89023 (9) Å

b = 7.77623 (4) Å

c = 14.00408 (9) Å

α = 90 °

β = 110.5202 (7) °

γ = 90 °

단위세포 부피: 1416.653 (16) Å 3

본 발명의 예시 샘플의 분말 X-선 회절 데이터는 하기 시험 조건에 따라 측정되었다.

기구: EMPYREAN made by PANalytical

반사법 (intensive method)

타겟: Cu

X-ray 튜브 전류: 40 mA

X-ray 튜브 전압: 45 kV

스캐닝 범위: 2θ = 5.0 to 40.0 °

Step: 2θ = 0.0131 °

평균 시간 / 단계: 8.670s

스캔 범위: 0.0015 ° / s

발산 슬릿: 1 °

산란 슬릿: 2.0 mm

수광 슬릿: 8.0 mm

X-선 회절 스펙트럼을 도 6에 나타내었다. 샘플의 분말 X-선 회절 패턴은 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13 .4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ ± 0.2°)의 회절각을 갖는다.

시험예 7: 시차 주사 열량 분석 (DSC 측정)

본 발명의 예시 샘플의 DSC 측정은 하기 시험 조건에 따라 수행되었다.

장치: DSC 1 STAR System made by METTLER TOLEDO

샘플: 약 1 mg

샘플 용기: 알루미늄으로 만듦

상승 범위: 25 내지 290°C

온도 상승률: 10 ℃./min.

대기 가스: 질소

질소 가스 유속: 50 mL / min.

데이터 처리를 포함한 장치의 취급은 DSC 장치와 함께 제공된 설명서에 따라 이루어졌다. DSC 곡선 결과를 도 7에 나타내었다. 결과에 도시된 바와 같이, 흡열 피크 (피크 탑)가 162 ℃로 나타났다.

도 9는 단결정 분석 결과에서 XRD 회절 패턴을 시뮬레이션한 결과를 나타내며, 회절각 (2θ ± 0.2°) (6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2°)의 피크의 특성은 상기 예시에 매치된다.

시험예 9: 흡습성

수분 흡착/탈착 시험은 하기 조건에 따라 수행되었다.

약 10 내지 15 mg의 샘플을 전용 석영 홀더에 충전하고, 각 습도에서 각 샘플의 중량을 연속적으로 측정한 뒤, 하기 조건 하에 기록하였다. 데이터 처리를 포함하는 장치의 취급은 각 장치에 의해 지시된 방법 및 절차에 따랐다.

장치: VTI SA + (manufactured by TA Instruments Inc.)

건조 온도: 60 ℃

가열속도: 1 ℃./min

건조 평형: 300분을 초과하지 않는 범위에서, 5분 내에 0.01 wt% 감소하지 않는지 확인

측정 온도: 20 ℃

가습 평형: 120분을 초과하지 않는 범위에서, 5분 내에 0.01 wt% 감소하지 않는지 확인

상대 습도 프로그램: 5 % RH 5 % ~ 95 % RH 증가, 5 % RH 95 % RH에서 5 % RH 감소

유리 형태의 화합물이 처음에 비정질 물질로서 얻어 졌을 때, 유리 형태는 흡습성을 가지며 (도 8) 또한 대전 특성이 높다. 여기서, "자유형"은 약물 물질 단독에 의한 비정질 물질을 의미한다. 그러나, 전술 한 바와 같이, 실시 예 2의 화합물의 유리 형태의 결정형, 공결정 또는 염이 얻어졌으며, 이 샘플은 흡습성이 없고 (도 8) 대전 특성이 약하였다.

도 8에 도시된 바와 같이, 얻어진 제품 (분쇄된 제품)의 흡습성은 수분 흡착 / 탈착 시험에서 95 %의 상대 습도 하에서 약 0.1 %의 질량 변화였으므로, 제품은 거의 흡습성을 나타내지 않았다. 이러한 물리 화학적 특성은 동일한 화합물의 유리 형태의 흡습성 및 대전 성보다 우수하다.

얻어진 실시예 2의 고체 생성물은 대전성이 낮고, 주걱 또는 유리병에 대한 소량의 부착이 관찰되었다.

비교예로서 상기 화합물은 잔류 용매를 제거하기 위해 분무 건조를 수행하였다. 2 g의 화합물을 18 g의 에탄올에 용해시키고, 다음 조건 하에서 분무 건조를 수행하였다.

열 입력 예열 후: 진행

배기 열 온도 78 ℃

공급 유량 5 mL/min

스프레이 질소 유량 350 L/hour

얻어진 분무 건조물을 90 ℃의 분위기 하에서 1 시간 감압 건조함으로써, 비정질이며, 대전성이 높고, 또한, 주걱 또는 유리병에 의해 이동했을 때의 밀착성이 높은 자유 형태의 화합물을 얻었다.. 또한, 도 8에 도시 된 바와 같이, 수분 흡착 / 탈착 시험에서 상대 습도 95 %에서 약 3.8 %의 질량 증가가 관찰되었다. 이 비교예는 이하의 안정성 시험에도 사용되었다.

시험예 9: 안정성 시험

우선, 화학 순도는 이하의 방법으로 측정했다.

샘플 용액 중 유사한 물질의 양을 HPLC 분석에 의해 측정 하였다. 데이터 처리를 포함한 장치의 취급은 장치와 함께 제공된 설명서에 따라 이루어졌습니다. (즉, Prominence-i). 본 발명의 예시적인 샘플 약 2 mg을 4 mL의 이동상 A / 이동상 B 혼합물 (17 : 3)에 용해시키고, 생성 된 혼합물을 샘플 용액으로 사용 하였다.

컬럼: Shiseido에서 제조한 CAPCELL PAK ADME (4.6 × 150 mm, 3 μm)

UV 검출: 220 nm

컬럼 온도: 40°C

컬럼 유속: 1.0 mL / min

이동상: A; 5 mM 인산 완충액, pH 6.2 / 아세토나이트릴 (4:1)

B: 아세토나이트릴

주입량: 5 μL

샘플 쿨러 온도: 5°C

수집 시간: 40 분

HPLC 그래디언트

시간 (분)	이동상 A vol%	이동상 B vol%
0~10	85→68	15→32
10~22	68	32
22~32	68→35	32→65
32~40	35	65
40~41	35→85	65→15
41~50	85	15

샘플을 2 주 또는 4 주 동안 40 ℃/ 75 % RH (폐쇄 및 개방 상태)에서 저장한 후, 본 발명의 예시적인 샘플 및 상기 수득된 유리 형태의 고체 안정성을 시험 하였다. 열린 상태는 유리 병의 뚜껑이 제거되어 Kimwipe로 덮여 있음을 의미한다.측정지점: 2주 및 4주

저장량: 약 50~60 mg

저장용기: 갈색 유리병

	처음	40^oC/75%RH (개방)		40^oC/75%RH (폐쇄)
	처음	2주	4주	2주	4주
비교예 화학적 순도(%)	98.49	98.35	98.14	98.42	98.16
비교예유사한 물질의 전체 양(%)	1.51	1.65	1.86	1.58	1.84
실시예 화학적 순도(%)	98.67	98.67	98.60	98.67	98.62
실시예유사한 물질의 전체 양(%)	1.33	1.33	1.40	1.33	1.38

저장 후, 샘플은 소량의 유사 물질만을 생성하여 자유 형태를 갖는 비교예에 비해 우수한 안정성을 나타냈다. 따라서 본 발명의 시료는 안정성이 우수함을 확인 하였다.

광학 수도는 또한 하기 HPLC 조건에 의해 측정되었다.

검출기: UV at 240 nm

컬럼: CHIRALPAK IE　(4.6 ×250 mm, 5 μm)/Daicel corp.

컬럼 온도: 40 ^oC

이동상: n-헥세인/에탄올/에탄올아민/아세트산 (65:35:0.5:0.2)

유속: 1.0 mL/min

주입: 5 μL

샘플 온도: 5 ^oC

측정 시간: 40 min

정량한계(LOQ):

화합물 - RR,RS,SS : 0.05%

0.2 % 광학 이성질체를 첨가하여 광학 순도를 측정 하였다.

샘플을 40 ℃/ 75 % RH (폐쇄 및 개방 상태)에서 24 시간 동안 저장하기 전후에 본 발명의 예시적인 샘플 및 상기 수득된 유리 형태의 고체 안정성을 시험 하였다. 24 시간 후에는 광학 순도에 큰 변화가 관찰되지 않았다.

광학 순도 측정 연구의 결과는 도 10-12에 나타내었다.

시험예 10: 용해성 시험

본 발명의 예시적인 샘플 약 15 mg을 각 용매 1 mL에 첨가하고 내광성 조건 하에서 37 ℃에서 2 시간 동안 팽창시켰다. 원심 분리 후, 각각의 상청액을 여과하고, 0.7 mL의 물과 아세토나이트릴 (1 : 1)의 혼합물을 0.1 mL의 여과 액에 첨가 하였다. 용해성 시험은 하기 조건에 따라 5 μL의 용매로 수행 하였다.

검출기: 자외선 분광 광도계 (파장: 230 nm)

컬럼: CAPCELPAK ADME (4.6 ×150 mm, 3 mm)

컬럼 온도: 약 40 ℃의 항온

이동상 A: A: 5 mM 인산 완충액 (pH 6.52) 및 아세토나이트릴 (4:1) 혼합물 B: 아세토나이트릴

이동상 다음 : 아래 표에 지시된대로 이동상 A와 B를 혼합하여 그래디언트를 제어

유속 : 분당 1.0 mL

측정 시간 : 주입 후 12 분

HPLC 그래디언트

샘플 주입 후 시간 (분)	이동상 A vol%	이동상 B vol%
0-4	70→30	30→70
4-12	30	70
12-13	30→70	70→30
13-18	70	30

용해도 시험 결과는 하기 표 18에 나타내었다.

용해도 데이터

용매	용해도 (mg/mL)
용매	유리산 (free acid)	예시 샘플
물	0.23	0.23
용해 시험을 위한 첫번째 유체, pH 1.2	0.23	0.23
아세테이트 완충용액 (50 mM, pH 4.0)	0.25	0.26
용해 시험을 위한 두번째 유체, pH 6.8	0.80	0.61
0.5 % HPMC	0.19	0.13

2 시간의 용해도 시험 후 XRD 패턴에서 유의미한 변화가 관찰되지 않았으며, 유리산 형태와 본 발명의 예시 샘플간에 유의미한 차이가 관찰되지 않았다.

시험예 11: 고체 안정성 시험

2주 또는 4주 후 샘플을 40 ℃ / 75 % RH (개방 조건), 70 ℃ (폐쇄) 및 80 ℃ (폐쇄)에서 저장한 후, 본 발명의 예시적인 샘플 및 상기 수득된 유리 형태의 고체 안정성을 시험 하였다. 열린 상태는 유리 병의 뚜껑이 제거되어 Kimwipe, 70 ℃ 및 80 ℃ (폐쇄)로 덮여 있음을 의미합니다.

측정 지점: 2주 및 4주

저장량: 약 30 mg

저장 용기: 갈색 유리 병

샘플 용액 중 유사한 물질의 양을 HPLC 분석에 의해 측정하였다. 데이터 처리를 포함한 장치의 취급은 장치와 함께 제공된 설명서에 따라 이루어졌다. (즉, Prominence-i). 본 발명의 예시 샘플 약 2 mg을 4 mL의 이동상 A / 이동상 B 혼합물 (17 : 3)에 용해시키고, 생성된 혼합물을 샘플 용액으로 사용하였다.

컬럼: Shiseido에서 제조한 CAPCELL PAK ADME (4.6 × 150 mm, 3 μm)

UV 검출: 220 nm

컬럼 온도: 40 ℃

컬럼 유속: 1.0 mL / min

이동상: A: 5 mM 인산 완충용액, pH 6.5/ 아세토나이트릴 (4:1), B: 아세토나이트릴

주입량: 5 μL

샘플 쿨러 온도: 5°C

수집 시간: 40분

HPLC 그래디언트

시간 (min)	이동상 A vol%	이동상 B vol%
0~10	85→68	15→32
10~22	68	32
22~32	68→35	32→65
32~40	35	65
40~41	35→85	65→15
41~50	85	15

	처음	40℃ 75%RH (개방)	70 ℃ (폐쇄)		80 ℃ (폐쇄)
	처음	4주	2주	4주	2주	4주
비교예 화학적 순도(%)	98.33	97.97	97.31	96.39	95.90	92.92
비교예 유사한 물질의 전체 양(%)	1.67	2.03	2.69	3.61	4.10	7.08
실시예 화학적 순도(%)	99.69	99.69	99.67	99.68	99.66	99.66
실시예 유사한 물질의 전체 양(%)	0.31	0.31	0.33	0.32	0.34	0.34

Claims

벤조산과 하기 화합물의 공결정형:
5-클로로-2-(N-((1S,2R)-2-(6-플루오로-2,3-다이메틸페닐)-1-(5-옥소-4,5-다이하이드로-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)프로필)설파모일)벤즈아마이드.
삭제
제1항에 있어서, 상기 공결정형의 화학적 순도(chemical purity)가 90% 이상인 것인, 공결정형.
제1항에 있어서, 상기 공결정형의 광학적 순도(optical purity)가 100%ee인 것인, 공결정형.
제1항에 있어서, 상기 공결정형은 40 ℃ 및 75%의 상대 습도에 노출되었을 때 안정한 것인, 공결정형.
삭제
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제1항에 있어서, 상기 화합물 및 벤조산의 몰비가 1:1인 것인, 공결정형.
제1항, 제3항 내지 제5항 및 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 공결정형의 분말 X-선 회절 패턴이 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ±0.2°)에서 두 개 이상의 피크를 갖는, 공결정형.
제1항, 제3항 내지 제5항 및 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 공결정형의 분말 X-선 회절 패턴이 6.8°, 7.8°, 11.2°, 13.4°, 13.7°, 16.0°, 17.1°, 17.8° 및 23.2° (2θ±0.2°)의 회절각을 갖는, 공결정형.
제1항, 제3항 내지 제5항 및 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 공결정형이 시차주사 열량 측정법(Differential scanning calorimetry, DSC)으로 측정되는 155 ℃ 내지 168 ℃에서 흡열 피크를 갖는, 공결정형.
제1항, 제3항 내지 제5항 및 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 공결정형이 시차주사 열량 측정법(Differential scanning calorimetry, DSC)으로 측정되는 162 ℃에서 흡열 피크를 갖는, 공결정형.
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제1항, 제3항 내지 제5항 및 제8항 중 어느 한 항의 공결정형을 유효성분으로 포함하는 종양 예방 및 치료용 약학적 조성물.
제16항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 경구용인, 약학적 조성물.
제16항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 리보뉴클레오티드 환원 효소를 억제하는 것인, 약학적 조성물.
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