KR102390970B1 - 내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 sw004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제 및 탈취제 - Google Patents

내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 sw004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제 및 탈취제 Download PDF

Info

Publication number
KR102390970B1
KR102390970B1 KR1020220023044A KR20220023044A KR102390970B1 KR 102390970 B1 KR102390970 B1 KR 102390970B1 KR 1020220023044 A KR1020220023044 A KR 1020220023044A KR 20220023044 A KR20220023044 A KR 20220023044A KR 102390970 B1 KR102390970 B1 KR 102390970B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
lactobacillus plantarum
strain
bacteria
lactobacillus
heat resistance
Prior art date
Application number
KR1020220023044A
Other languages
English (en)
Inventor
이석우
Original Assignee
주식회사 선한바이오
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 선한바이오 filed Critical 주식회사 선한바이오
Priority to KR1020220023044A priority Critical patent/KR102390970B1/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102390970B1 publication Critical patent/KR102390970B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L9/00—Disinfection, sterilisation or deodorisation of air
    • A61L9/01—Deodorant compositions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus
    • C12R2001/25—Lactobacillus plantarum

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

본 발명은 내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 SW004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제, 미생물제 및 탈취제에 관한 것으로서, 특히, 70℃의 고온에서도 균수의 변동성 없는 등 내열성이 우수하고, 40℃에서 90일동안 방치하더라도 균수의 변동성 없이 생균수를 유지하는 등 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 SW004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제, 미생물제 및 탈취제에 관한 것이다.

Description

내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 SW004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제 및 탈취제{Lactobacillus plantarum SW004 strain with excellent heat resistance and storage properties and feed additives and deodorants using the same}
본 발명은 내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 SW004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제, 미생물제 및 탈취제에 관한 것으로서, 특히, 70℃의 고온에서도 균수의 변동성 없는 등 내열성이 우수하고, 40℃에서 90일동안 방치하더라도 균수의 변동성 없이 생균수를 유지하는 등 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 SW004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제, 미생물제 및 탈취제에 관한 것이다.
김치는 우리나라를 대표하는 발효식품으로써 특히, 겨울철에 얻기 어려운신선한 채소로 담가두었던 저장식품인 김치류는 각종 유기산, 아미노산, 비타민, 무기질의 급원으로서 한국인의 건강유지와 영양공급에 지대한 공헌을 해왔다.
김치는 그 종류에 따라 담근 김치의 맛이 다르나, 발효과정에 관여하는 미생물에 의해 분비되는 효소에 의한 유기산 생성이 김치에 특유한 향미를 부여하게 되는데 주재료인 배추나 무우이외에 여러가지 부재료와 양념을 첨가하고 소금의 농도를 조정하여 숙성발효시킨 한국고유의 전통식품이다.
김치의 발효과정에서 발생하는 미생물의 연구에 의하면 발생초기 10일 까지는 호기성세균의 증가를 보였다가 차차 혐기성세균의 생육이 활발한 반면, 호기성세균은 감소하여 50일에 가서 최저의 생균수를 나타낸다. 김치숙성중 초기에는 호기성세균인 Achromobacter, Flavobacterium 및 Pseudomonas속이 증식하나 수일이내에 초기의 주발효균인 Leuconostoc, Streptococcus 중기의 Pediococcus가 번식하며 유산이 0.2% 내외가 되면 호기성 세균의 생육은 저해되고 중기 이후로 Lactobacillus plantarum과 Lactobacillus brevis가 증가하여 산미를 갖게된다.
그러므로 김치숙성에 관여하는 미생물은 주로 혐기성균이며, 그 중에서도 유산균의 역할이 큰것을 알 수 있다. 유산균은 발효과정에서 젖산(lactic acid) 등을 비롯한 많은 유기산을 분비하여 유해세균을 억제하는 기능을 가지고 있고 최근, 프로바이오틱스, 프리바이틱스, 포스트바이오틱스 제품으로 복합유산균과 대사생성물이 함유되어있는 제품이 가축을 비롯한 사람이 섭취하는 식품으로 각광을 받고 있다.
Lactobacillus 유산균은 축산용 생균제에 가장 많이 사용되는 균으로써 장내 미생물 균총을 안정화 시키고 유해세균을 억제하여 설사를 예방하고 가축사료의 이용률을 향상시키고 가축의 면역력을 증강시키는 효과가 있는 것으로 알려져있다.
특히, 2011년 7월 사료내 항생제의 사용이 금지가 되면서 항생제 대체제로써 유산균의 중요성이 증가되고 유산균 함유 사료첨가제의 생산 및 판매가 급증하였다. 이후, 유기축산에 대한 관심과 필요성으로 최종소비자인 인간을 위한 안전한 축산물을 생산하는 것은 시대적인 새로운 패러다임이 제시되고 있다.
밀집사육과 사료의 단백질 과다함유로 발생되는 돈사내 악취발생을 억제하고 유해균으로 인한 질병을 억제하기 위한 대안으로 특허문헌 0001 및 0002와 같이 유익미생물의 사료첨가, 음수첨가 및 축산 내 살포 또는 안개분무 등이 계속적으로 연구되어지고 있다.
특허문헌 0001은 락토바실러스 플란타룸 CU03 (lactobacillus plantarum CU 03) KACC 91103 및 이를 유효성분으로 함유한 생균 활성제에 관한 것으로서, 내산성, 내담즙성 및 유산생성능력을 가져 생균 활성제로서 조건을 충분히 갖추고 있을 뿐만 아니라, 분변의 부패시에 발생되는 악취생성과정에 관여하는 미생물의 수를 억제함과 동시에 악취생성의 주요 성분이 되는 암모니아 생성량을 현저하게 저하시키는 특성을 가지고 있다.
특허문헌 0002는 유산균주 락토바실러스 플란타럼(Lactobacill plantarum) KCCM ATCC14917로 혐기발효된 이탈리안 라이그라스를 포함하는 가축분뇨의 악취저감용 사료첨가제에 관한 것으로서, 양돈사료에 포함되는 섬유소원을 강화하여 축분에서 발생하는 악취를 저감할 수 있는 이점을 가지고 있다.
그러나, 특허문헌 0001 및 0002의 락토바실러스 플란타럼 등은 여름철 같은 고온성 날씨에 보존성이 떨어지고 열에 약해 펠렛사료 제조시 균수가 급감하여 사용상 제약이 있다. 또한, 발효사료(고상발효,TMR) 제조시 열발생으로 유산균의 생존력이 크게 감소하여 사용하는데 어려움이 많았다.
KR10-0654427B1 (2006.11.29) KR10-2015-0055998A (2015.05.22)
이와 같은 종래의 문제점을 해결하기 위한 본 발명은 70℃의 고온에서도 균수의 변동성 없는 등 내열성이 우수하고, 40℃에서 90일동안 방치하더라도 균수의 변동성 없이 생균수를 유지하는 등 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 SW004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제, 미생물제 및 탈취제를 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명은,
내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 SW004(Lactobacillus plantarum SW004) 균주(기탁번호: KFCC11894P)를 제공한다.
특히, 상기 균주는 김치로부터 분리되고, 40℃에서 90일 이상 보존이 가능한 것을 특징으로 한다.
아울러, 본 발명은 락토바실러스 플란타럼 SW004(Lactobacillus plantarum SW004) 균주(기탁번호: KFCC11894P) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 사료첨가제를 제공한다.
삭제
삭제
나아가 본 발명은 락토바실러스 플란타럼 SW004(Lactobacillus plantarum SW004) 균주(기탁번호: KFCC11894P)의 배양액을 함유하는 것을 특징으로 하는 탈취제를 제공한다.
본 발명의 락토바실러스 플란타럼 SW004(Lactobacillus plantarum SW004) 균주(기탁번호: KFCC11894P)는 내산성,내담즙성 및 탈취성 뿐만 아니라 내열성 및 보존성이 우수함에 따라, 기존의 락토바실러스 플란타럼과 달리 여름철 등의 고온 환경에서 보관시 생균수의 감소를 방지하기 위해 냉장고 등에 보관하여야 하는 번거로움이 없는 등 보관 및 사용편의성이 우수한 효과가 있다.
나아가, 본 발명의 락토바실러스 플란타럼 SW004(Lactobacillus plantarum SW004) 균주(기탁번호: KFCC11894P)를 이용한 사료첨가제, 미생물제 및 탈취제의 경우 여름철 등의 고온 환경에서 상온에서 장시간 방치하여 사용하더라도 내산성, 내담즙성 및 탈취성 등의 제효과가 우수한 효과가 있다.
도 1은 락토바실러스 플란타럼 SW004 균주의 전자현미경 사진이다.
이하, 본 발명의 내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 SW004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제, 미생물제 및 탈취제를 실시예를 들어 상세히 설명하면 다음과 같고, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 권리범위가 이에 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1]: 균주의 분리 및 동정
항아리에서 오랫동안 보관된 묵은 김치에서 일정량을 샘플링하고 샘플링한 전체를 마쇄한 후에 멸균거즈로 여과하였다. 여과액을 멸균수를 이용하여 단계적으로 희석한 후 100 μL 를 취해 2% 탄산칼슘(CaCO3)이 첨가된 MRS(Lactobacilli MRS agar, Difco) 평판배지에 1차적으로 도말하여 30℃에서 배양하였다. 배양 중 투명환을 나타내고 집락을 형성하는 균주들을 분리하여 pH indicator인 0.006% BCP (Bromocresol Purple, Sigma, St. Louis, MO, USA)를 포함한 MRS 평판배지에 2차적으로 도말하여 25℃에서 24시간 동안 배양하였다. 그 중 BCP의 보라색 배지가 노란색으로 변하는 군집을 각각 취하여 3차적으로 새로운 BCP배지에 도말하였으며, 분리된 균주의 균학적 특성 확인을 통해 유산균을 분리하여 선발하였다. 유산균은 MRS 평판배지와 MRS 액체배지에 접종하여 25℃에서 12시간동안 배양하여 4℃에서 냉장보관하여 실험에 사용하였다.
상기 선발된 유산균에 대해 하기 실시예에서와 같이 내산성과 내담즙성을 측정하였다. 내산성과 내담즙성이 우수한 균주의 경우, 그램 염색성이 양성, 세포형태가 간균(桿菌), 카탈라아제가 음성, 운동성이 음성, 아포 형성이 음성 및 락트산 생산능이 양성인 것으로부터, 락토바실러스속에 속하는 균주인 것을 확인하였고, 락토바실러스 플란타럼에 속하는 유산균이 최종 선발되었고, 최종 선발된 유산균의 전자현미경 사진은 도 1과 같다.
최종 선발된 균주는 미생물의 동정을 위한 16S rDNA 염기서열 분석 결과, 서열번호 1의 핵산서열을 갖는 것으로 나타났다.
선발된 유산균의 16S rDNA 서열에 대해 National Center for Biotechnology Information(NCBI, www.ncbi.nlm.nih.gov)의 Basic Local Alignment Search Tool(BLAST) 검색 엔진의 유사도 분석을 통해 수행한 결과, 락토바실러스 플란타럼에 속하는 것으로 나타났다. 이에, 본 발명의 미생물을 락토바실러스 플란타럼 SW004(Lactobacillus plantarum SW004)으로 명명하였으며, 한국미생물보존센터에 2021년 8월 25일자로 기탁하였다(수탁번호 KFCC 11894P).
[내산성 및 내담즙성 검증]
실시예 1의 락토바실러스 플란타럼 SW004과 시중 미생물제에서 분리한 유산균 3종에 대해 각각 장내 생존능을 측정하기 위하여 내산성 및 내담즙성을 실험하였다.
내산성은 실시예 1의 락토바실러스 플란타럼 SW004과 시중 미생물제에서 분리한 유산균 3종을 각각 0.05M Sodium phosphate buffer pH 2.5에 각각 접종한 후 30℃에서 2시간 배양하여 Lactobacilli MRS 한천배지에 도말 및 생균수 측정하여 검증하였고, 그 결과는 표 1과 같다.
pH 7.0 pH 2.5 (pH2.5/pH7.0)×100
A사 Lactobacillus
plantarum		 7.62±0.39 6.45±0.02 85%
B사 Lactobacillus acidophilus 7.53±0.40 6.81±0.27 90%
C사 Lactobacillus
casei		 7.39±0.34 6.28±0.54 85%
Lactobacillus plantarum SW004 7.45±0.04 7.38±0.18 99%
*생균수 측정 후 Log값 변환
그리고 내담즙성은 실시예 1의 락토바실러스 플란타럼 SW004과 시중 미생물제에서 분리한 유산균 3종을 각각 0.3% oxgall에 넣은 Lactobacilli MRS broth에 접종한 후 30℃에서 8시간 배양하여 Lactobacilli MRS 한천배지에 도말 및 생균수 측정하여 검증하였고, 그 결과는 표 2와 같다.
무처리 ox 0.3 (ox 0.3/Control)×100
A사 Lactobacillus
plantarum		 7.66±0.02 6.37±0.04 83%
B사 Lactobacillus acidophilus 7.59±0.04 6.66±0.04 88%
C사 Lactobacillus
casei		 7.45±0.04 6.39±0.04 86%
Lactobacillus plantarum SW004 7.48±0.04 7.31±0.04 98%
*생균수 측정 후 Log값 변환
표 1 및 표 2의 결과와 같이, 락토바실러스 플란타럼 SW004은 내산성 및 내담즙성 테스트에서 배양 시간의 경과에 따른 균수를 비교한 결과, 99% 내산성과, 98% 내담즙성을 갖는 것으로 확인되는 등 타사의 균주에 비해 내산성 및 내담즙성이 우수하였다. 이는 락토바실러스 플란타럼 SW004가 가축체내에서 위액의 영향을 받지 않고 장까지 도달할 수 있으며, 장내에서는 담즙의 영향을 받지 않고 생존할 수 있음을 나타낸다.
[실시예 2] 락토바실러스 플란타럼 SW004 배양액의 제조
물 1L에 Lactobacilli MRS broth 배지를 55g을 삼각플라스크에 넣고 고압멸균(121℃, 1.5기압, 15분)시킨 후 락토바실러스 플란타럼 SW004 종균을 접종하고 35℃에서 36시간 인큐베이터에서 정치배양하여 락토바실러스 플란타럼 SW004 배양액을 제조하였다.
이때 제조된 락토바실러스 플란타럼 SW004 배양액을 0.9% NaCl이 함유된 생리식염수가 함유된 테스트 튜브에 9ml에 배양액을 1ml를 넣고 10배씩 단계희석하여 락토바실러스 플란타럼 SW004 혼탁추출물을 100㎕씩 Lactobacilli MRS 한천배지에 로딩하여 도말한뒤 48시간 35℃ Incubator에서 배양하고 Colony수를 측정하여 생균수를 측정하였다. 락토바실러스 플란타럼 SW004 배양액의 생균수는 2.3×109 c.f.u/ml 이었다.
[고상발효 안정성 검증]
실시예 2의 락토바실러스 플란타럼 SW004 배양액과 시중 미생물제에서 분리한 유산균 3종의 배양액을 각각 곡물부산물인 쌀겨에 중량비 미강 100kg : 유산균 배양액 100kg 비율로 혼합하여 500L 고상발효기에서 넣고 3일 동안 발효시켰고, 이때 발효열이 55~60℃까지 발생하였다.
곡물부산물에 오염되어 있는 잡균의 총균수와 처리된 유산균의 고상발효시 함량을 검사하였고, 그 결과를 표 3으로 나타냈다. 미강에 함유되어 있는 잡균은 2.4×108 cfu/g 이상이었다.
3일 고상발효후 총균수 cfu/g
A사 Lactobacillus plantarum 잡균 1.9×107
Lactobacillus plantarum 4.7×103
B사 Lactobacillus acidphilus 잡균 7.3×108
Lactobacillus acidphilus 1.6×102
C사 Lactobacillus casei 잡균 2.1×107
Lactobacillus casei 5.5×104
Lactobacillus plantarum SW004 잡균 1.8×101
Lactobacillus plantarum SW004 7.7×108
표 3의 결과에 따르면 시중에서 판매되고 있는 유산균의 배양액을 첨가한 군에서는 잡균이 약간 감소하거나 증가하는 경향을 보였고, 고온으로 인해 유산균이 성장하지 못하는 결과를 보였다. 그러나, 실시예 2의 Lactobacillus plantarum SW004의 배양액은 잡균을 현저히 감소시키고 유산균의 생균수가 타제품의 유산균에 비해 월등히 많은 생균수를 유지하고 있어 고상발효의 안정성이 뛰어나고, 내열성 및 잡균에 대한 억제력이 우수하다.
[악취 저감능력 검증]
실시예 2의 락토바실러스 플란타럼 SW004의 배양액을 0.1% 첨가한 사료를 비육돈에 급여한 돈사, 무첨가 돈사, 유산균 배양액을 50% 희석하여 30분당 1분간격으로 안개분무한 돈사에 대해 30일 경과후 암모니아, 황화수소, 트리메틸아민, 메틸메르캅탄 이상의 4가지 악취를 측정하여 악취에 대한 저감능력을 시험하였다.
비육돈사의 분뇨를 모두 비우고 30일 경과 후 돈방 중앙의 공기시료를 채취, 각 시료에 대한 악취물질 채취 후 조사 대상 성분들의 특성을 감안하여 황화합물, 암모니아 성분들은 Lung Sampler(ACEN, Korea)를 이용한 PEA(polyester aluminum) bag으로 채취하였다. 양돈장에서 채취한 시료는 4가지(GC/FPD, GC/MS, HPLC, UV/Vis 분광광도계)의 분석시스템을 활용하여 조사 실시하였고, 그 결과를 표 4로 나타냈다.
암모니아
(ppb)		 황화수소
(ppb)		 트리메틸아민
(ppb)		 메틸메르캅탄
(ppb)
무첨가군 18,765 1,016 64.3 59.7
유산균 배양액 살포군 3,931 129 2.3 2.8
유산균 사료첨가제 첨가군 5.263 204 3.1 3.6
표 4의 결과에 따르면 유산균 배양액 살포군과 유산균 사료첨가제 첨가군이 무첨가군에 비해 악취성분인 암모니아, 황화수소, 트리메틸아민, 메틸메르캅탄의 농도가 전체적으로 유의성 있게 감소하였으며 이는 악취감소에 우수한 균주임을 입증하고 있다.
[탈취 성능시험]
실시예 2의 락토바실러스 플란타럼 SW004의 배양액과, 시중에 미생물 탈취제로 판매되고 있는 4개 제품에 대한 악취에 대한 탈취 성능을 시험하였다.
구체적으로 실시예 2의 락토바실러스 플란타럼 SW004의 배양액과, 시중에 미생물 탈취제로 판매되고 있는 4개 제품을 모두 50배 희석하여 20㎖를 11ℓ크기 반응기에 넣고 밀봉하였다. 시험가스의 초기 농도를 암모니아 100 μ㏖/㏖(ppm), 트리메탈아민 30μ㏖/㏖(ppm), 황화수소 50μ㏖/㏖(ppm), 메틸메르캅탄 4μ㏖/㏖(ppm)으로 주입하고 시험가스의 농도를 30분에서 측정하고 이를 시료 농도라 하였다. 시험가스의 농도는 KS I 2218 : 2009에 의해 측정하였다. 시험 중 온도는 23±5℃, 습도는 50±10%를 유지하였다. 이와는 별도로 시료가 없는 상태에서 상기 과정과 동일한 시험을 진행하고 이를 blank 농도라 하였다. 각 시간대별로 시험가스의 제거율은 다음 식에 의해 계산하였고, 그 결과를 표 5로 나타냈다.
시험가스의 제거율(%) = [{(blank 농도)-(시료의 농도)}/(blank 농도)] X 100
시험 항목 시험 항목 초기농도(ppm) 농도 감소율(%)

A사 미생물 탈취제		 암모니아(NH3) 100 43.6
트리메틸아민[(CH3)3N] 30 37.2
황화수소(H2S) 50 5.9
메틸메르캅탄(CH3SH) 4 8.4

B사 미생물 탈취제		 암모니아(NH3) 100 32.0
트리메틸아민[(CH3)3N] 30 26.2
황화수소(H2S) 50 3.5
메틸메르캅탄(CH3SH) 4 4.4

C사 미생물 탈취제		 암모니아(NH3) 100 53.0
트리메틸아민[(CH3)3N] 30 57.5
황화수소(H2S) 50 7.1
메틸메르캅탄(CH3SH) 4 6.3

D사 미생물 탈취제		 암모니아(NH3) 100 23.8
트리메틸아민[(CH3)3N] 30 34.7
황화수소(H2S) 50 12.3
메틸메르캅탄(CH3SH) 4 9.4

락토바실러스 플란타럼 SW004 배양액		 암모니아(NH3) 100 99.0
트리메틸아민[(CH3)3N] 30 98.2
황화수소(H2S) 50 89.5
메틸메르캅탄(CH3SH) 4 91.4
표 5의 결과에 따르면 시중에 미생물 탈취제로 판매되고 있는 4개 제품과 실시예 2의 락토바실러스 플란타럼 SW004의 배양액에 대한 악취에 대한 탈취 성능을 분석한 결과 실시예 2의 락토바실러스 플란타럼 SW004의 배양액이 암모니아, 트리메틸아민, 황화수소, 메틸메르캅탄의 전체적인 농도감소율이 타제품에 비해 현격이 우수하였으며 탈취력이 뛰어난것으로 확인되었다.
[실시예 3] 락토바실러스 플란타럼 SW004 배양액의 동결건조물의 제조
working volume 700L 1톤 발효조에 증류수 700L, 포도당 10kg, Yeast extract 3.375kg, Peptone 3.375kg, Sodium acetate 1.5kg, Dipotassium phosphate 1kg, Amonnium citrate 0.6kg, Magnesium sulfate 0.1kg, Manganese sulfate 0.05kg을 50rpm으로 교반하면서 넣고 121℃에서 1시간 고압멸균한후 35℃이하로 식힌 후 실시예 2에서 제조된 락토바실러스 플란타럼 SW004 배양액을 3L 접종한후 35℃, 20rpm으로 36시간 배양한후 17,000rpm으로 원심분리하여 셀 케이크를 회수한 뒤 Skim milk, MSG, 증류수를 넣고 충분히 교반하여 균질액을 만들었다.
유산균 균질액(동결건조 시료)을 동결건조기에 넣어 -40℃로 예비동결(18시간 이상)을 진행하고, 콜드트랩 온도는 -80℃로 낮추고 진공도 50mTorr이하로 진공이 걸린 조건에서 -40℃에서 0℃까지 24시간, 0℃에서 30℃까지 36시간에 올려서 건조를 하였다. 건조가 완료된 시료는 파우더 믹서로 분쇄하여 동결건조물을 제조하였다. 완성된 동결건조물은 10kg이었고 생균수는 1.5×1011 c.f.u/g 이었다.
[내열성 검증]
실시예 3의 락토바실러스 플란타럼 SW004 동결건조물과 시중에서 판매되는 유산균 동결건조물을 70℃ 항온조에서 7시간 방치한후 생균수를 측정하였고, 그 결과를 표 6으로 나타냈다.
열처리 전 열처리 후
A사 제품
Lactobacillus plantarum		 1.5×1010 c.f.u/g 3.7×108 c.f.u/g
B사 제품
Lactobacillus acidphilus		 2.3×1010 c.f.u/g 7.6×108 c.f.u/g
C사 제품
Lactobacillus casei		 1.7×1010 c.f.u/g 4.8×107 c.f.u/g
D사 제품
Lactobacillus plantarum		 2.4×1010 c.f.u/g 1.5×108 c.f.u/g
Lactobacillus plantarum SW004 1.6×1011 c.f.u/g 9.8×1010 c.f.u/g
표 6에서 확인되는 바와 같이, 실시예 3의 락토바실러스 플란타럼 SW004의 동결건조물이 시중에서 판매되고 있는 유산균 동결건조물에 비해 70℃의 고온에서도 균수에 변동이 없이 생균수를 유지하고있어 고온에 강한 내열성 균주임을 확인할 수 있다.
[유산균 보존성 검증]
실시예 3의 락토바실러스 플란타럼 SW004 동결건조물과 시중에서 판매되는 유산균 동결건조물을 40℃ Incubator에서 90일 방치한후 생균수를 측정하였고, 그 결과를 표 7로 나타냈다.
처리 전 처리 후
A사 제품
Lactobacillus plantarum		 1.5×1010 c.f.u/g 5.9×106 c.f.u/g
B사 제품
Lactobacillus acidphilus		 2.3×1010 c.f.u/g 3.5×107 c.f.u/g
C사 제품
Lactobacillus casei		 1.7×1010 c.f.u/g 5.3×106 c.f.u/g
D사 제품
Lactobacillus plantarum		 2.4×1010 c.f.u/g 9.1×105 c.f.u/g
Lactobacillus plantarum SW004 1.6×1011 c.f.u/g 1.1×1011 c.f.u/g
표 7에서 확인되는 바와 같이 실시예 3의 락토바실러스 플란타럼 SW004의 동결건조물이 시중에서 판매되고 있는 유산균 동결건조물에 비해 40℃에서도 균수에 변동이 없이 생균수를 유지하고있어 보존성이 매우 우수하다.
한국미생물보존센터(국내) KFCC11894P 20210825

Claims (6)

  1. 내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 SW004(Lactobacillus plantarum SW004) 균주(기탁번호: KFCC11894P).
  2. 제1항에 있어서,
    상기 균주는 김치로부터 분리된 것을 특징으로 하는 락토바실러스 플란타럼 SW004 균주.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 균주는 40℃에서 90일 이상 보존이 가능한 것을 특징으로 하는 락토바실러스 플란타럼 SW004 균주.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 사료첨가제.
  5. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 균주의 배양액을 함유하는 것을 특징으로 하는 탈취제.
  6. 삭제
KR1020220023044A 2022-02-22 2022-02-22 내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 sw004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제 및 탈취제 KR102390970B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220023044A KR102390970B1 (ko) 2022-02-22 2022-02-22 내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 sw004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제 및 탈취제

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220023044A KR102390970B1 (ko) 2022-02-22 2022-02-22 내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 sw004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제 및 탈취제

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR102390970B1 true KR102390970B1 (ko) 2022-04-26

Family

ID=81390082

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020220023044A KR102390970B1 (ko) 2022-02-22 2022-02-22 내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 sw004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제 및 탈취제

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102390970B1 (ko)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100654427B1 (ko) 2005-09-23 2006-12-06 심명식 악취생성방지 및 탈취활성을 가지는 락토바실러스 플란타룸ｃｕ03 ｋａｃｃ 91103
US20110117068A1 (en) * 2006-08-18 2011-05-19 Organobalance Gmbh Probiotic microorganisms for the reduction of manure odor
KR20150055998A (ko) 2013-11-14 2015-05-22 대한민국(농촌진흥청장) 가축분뇨의 악취저감용 사료첨가제 및 이를 포함하는 사료
KR20180095021A (ko) * 2015-12-18 2018-08-24 와커 헤미 아게 실록산 수지 조성물
KR101971241B1 (ko) * 2018-01-29 2019-04-22 서명수 내열성이 우수한 사료 첨가제 및 이의 제조방법

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100654427B1 (ko) 2005-09-23 2006-12-06 심명식 악취생성방지 및 탈취활성을 가지는 락토바실러스 플란타룸ｃｕ03 ｋａｃｃ 91103
US20110117068A1 (en) * 2006-08-18 2011-05-19 Organobalance Gmbh Probiotic microorganisms for the reduction of manure odor
KR20150055998A (ko) 2013-11-14 2015-05-22 대한민국(농촌진흥청장) 가축분뇨의 악취저감용 사료첨가제 및 이를 포함하는 사료
KR20180095021A (ko) * 2015-12-18 2018-08-24 와커 헤미 아게 실록산 수지 조성물
KR101971241B1 (ko) * 2018-01-29 2019-04-22 서명수 내열성이 우수한 사료 첨가제 및 이의 제조방법

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103232944B (zh) 一种秸秆与粪便混合堆肥微生物菌剂
CA2938052C (en) Rapid acting lactobacillus strains and their use to improve aerobic stability of silage
KR101845709B1 (ko) 락토바실러스 플란타룸 ｋｃｃ―２６ 및 이를 포함하는 조성물
CN110257302B (zh) 具有抗氧化能力的乳酸菌菌株的筛选方法及应用
CN107981034B (zh) 一株布氏乳杆菌hew-a666及其应用
CN116103208B (zh) 唾液乳杆菌在抗氧化上的应用
JP2886285B2 (ja) 飼料中のカビ制御
JP2016526900A (ja) 単離された微生物株ラクトバチルス・プランタルムｔａｋ５９ ｎｃｉｍｂ４２１５０およびその使用
CN102851232A (zh) 一株乳酸菌Lactobacillus parafarraginis ZH1及其应用
KR102675187B1 (ko) 락토바실러스 플란타룸 kcc-24 및 이를 포함하는 조성물
KR102430377B1 (ko) 악취 제거 또는 저감 효과를 나타내는 락토바실러스 파라카세이 l002 균주, 이를 포함하는 악취 제거 또는 저감용 조성물 및 이를 이용하여 악취를 제거 또는 저감하는 방법
Park et al. Physiological characteristics and GABA production of Lactobacillus plantarum K255 isolated from kimchi
KR102390970B1 (ko) 내열성 및 보존성이 우수한 락토바실러스 플란타럼 sw004 균주 및 이를 이용한 사료첨가제 및 탈취제
KR20160063024A (ko) 락토바실러스 플란타룸 kcc-24 및 이를 포함하는 조성물
KR101665334B1 (ko) 축산악취의 감소 및 면역활성 효과를 가지는 로도박터 스페로이데스 cb 8521 및 이를 이용한 미생물제
CN115161234B (zh) 一株贝莱斯芽孢杆菌及其在青贮防腐的应用
CN106591176B (zh) 一种戊糖乳杆菌及其应用
CN108102975A (zh) 一株用于发酵青绿饲料的植物乳杆菌及其菌剂的生产方法
JP6671611B2 (ja) 低温発酵性乳酸菌および低温発酵性乳酸菌を用いた発酵飼料の製造法
KR20170045190A (ko) 락토바실러스 플란타룸 kcc-24 및 이를 포함하는 조성물
KR20020057427A (ko) 신규한 유산균 페디오코커스 에시디락티시 및 이의 용도
WO2019063056A1 (en) STRAINS OF LACTOBACILLUS BUCHNERI BIOCC 203 DSM 32650 AND LACTOBACILLUS BUCHNERI BIOCC 228 DSM 32651 MICROORGANISMS AND THEIR USE
CN109943505A (zh) 一种用于无害化处理粪渣卧床垫料的复合益生菌菌剂
Samuel et al. Isolation and identification of antagonistic Lactobacillus spp. isolated from dairy products against selected pathogens
CN117106619B (zh) 一株富硒植物乳植杆菌kd-2及其在发酵乳和奶粉中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
A302 Request for accelerated examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant