JP6671611B2 - 低温発酵性乳酸菌および低温発酵性乳酸菌を用いた発酵飼料の製造法 - Google Patents
低温発酵性乳酸菌および低温発酵性乳酸菌を用いた発酵飼料の製造法 Download PDFInfo
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Description
また、本発明は、前記菌株を含有してなる発酵飼料製造用の微生物製剤、及び、前記菌株を混合することを特徴とする、良質な発酵飼料(詳しくは、サイレージ、発酵TMR飼料)の製造方法に関するものである。
さらに、本発明は、発酵飼料を輸入飼料と置き換えることで輸入飼料から持ち込まれる残留農薬を排除または低減した飼料の製造方法、及び、堆肥の製造方法に関するものである。
日本において、牧草・飼料作物など粗飼料の生産量の約70%以上が、サイレージに調製・加工されている。飼料作物はトウモロコシが一般的であるが、飼料米や飼料イネの利用も進められている。
一般的なサイレージは、牧草・飼料作物に付着した野生細菌による「自然発酵」にて調製される。乳酸菌による発酵が進んだ乳酸含量の高いサイレージが良質とされる。それに対して、酪酸型や酢酸型の発酵をしたサイレージは劣質とされ、嗜好性・採食量が優れたものではない。
さらに、サイレージの調製や貯蔵過程において、カビの発生や劣質な発酵により、ロールを廃棄するケースが少なくない。
発酵飼料の調製には、野生細菌による自然発酵が利用されてきた。そのため、寒冷地や高地など外気温が低い環境下では充分な発酵が行えず、低温期に於いて良質な発酵飼料を安定且つ確実に製造できないでいる。
日本においては、廃棄される食品や食品製造工程で排出される食品残渣の増加が問題となっている。資源循環型社会の構築および環境負荷の低減などの観点から、低・未利用飼料資源を有効に活用した高品質な飼料の調製技術が求められ、食品残渣などを発酵させた混合飼料である「発酵TMR飼料」への利用が検討されている。
近年、サイレージ発酵の品質改善を目的として、サイレージ発酵スターターに乳酸菌製剤や繊維分解酵素セルラーゼが応用されるようになった。
乳酸菌製剤をサイレージの発酵スターターとして用いることによって、サイレージの発酵品質の改善効果が認められている(非特許文献1〜3、特許文献1,2参照)。これらの乳酸菌は、サイレージ発酵において乳酸菌が産生した乳酸によりpHが低下し、腐敗菌を抑制し、乳酸型の良質なサイレージを生産する。
「発酵TMR飼料」においては、低・未利用飼料資源には、多様な素材を含むことから、栄養要求性が低く、且つ、様々な発酵性糖質を乳酸発酵できる乳酸菌が求められている。
乳酸発酵による良質な飼料イネサイレージの製造を目的に、乳酸菌製剤「畜草1号(雪印種苗株式会社製)」が(独)農業・生物系特定産業技術研究機構畜産草地研究所(以下、畜産草地研究所)と埼玉県農林総合研究センター、雪印種苗株式会社で共同開発されている(非特許文献4、特許文献3参照)。
「畜草1号」は、畜産草地研究所が発見したラクトバシラス・プランタラム 畜草1号株であり、耐酸性が高く、乳酸発酵能に優れた乳酸菌とされる。
畜草1号株にラクトコッカス・ラクティス SBS0001株を混合した乳酸菌製剤「畜草1号プラス(雪印種苗株式会社製)」は、イネホールクロップサイレージの発酵品質の早期安定から長期保存性の改善を目的に開発された、飼料用イネサイレージ専用の乳酸菌製剤である。SBS0001株は、初期の発酵が速い特徴を持ち、畜草1号株と混合発酵することにより、発酵初期から安定した乳酸発酵を行う事を目的としている。
しかしながらサイレージ発酵、及び、発酵TMR飼料のサイレージ発酵スターターにおいて、寒冷地や高地における低温環境下での良好な発酵性に着目した乳酸菌製剤はなく、低温環境下に於けるサイレージや発酵TMR飼料の品質改善に十分な効果を発揮できなかった。
クロピラリドとは、国外で広葉雑草の防除に使用されるホルモン型除草剤の成分である。クロピラリドは、土壌残留性が高いため、日本では使用が認められていない。
クロピラリドに汚染された輸入飼料を牛が摂食すると、クロピラリドは牛のフンに***される。クロピラリドに汚染された牛のフンから堆肥を作ることで、トマト、大豆、サヤエンドウ、ナス、パセリ、セルリー、ニンジン、ひまわり、菊などの農作物に甚大な被害をもたらしたことから、社会問題化している。
また、資源循環型社会の構築および環境負荷の低減などの観点から、低・未利用飼料資源を有効に活用した高品質な発酵飼料を製造する微生物及び製造技術を提供することを目的とする。
さらに、本発明による発酵飼料を混合することで輸入飼料の使用量を削減又は排除することで、コスト削減を実現し、且つ、輸入飼料に含まれた残留農薬に起因する数々の問題を解決する技術を提供することを目的とする。
そして本発明者は、「低温増殖性に優れ、且つ、幅広い糖質資化性を有する乳酸菌」を利用することに着目した。
このC5127Di株を、発酵飼料原料(特に、飼料米や飼料イネを含む飼料作物や牧草などのサイレージ原料、および、発酵TMR飼料原料など)に混合することで、発酵飼料の製造に高い適性を有することを見いだし、さらに、8℃以下の低温環境下にて良好なサイレージ発酵を行うことを見いだした。
低温環境下で製造した発酵TMR飼料は香りも良く、乳牛に与えたところ、嗜好性が良く下痢などの臨床症状も認められなかったことから、良質な発酵TMR飼料であることが示された。
本発明は、これらの知見に基づいて完成したものである。
請求項2に係る本発明は、糖質資化性、及び、低温増殖性及び、低温発酵性に優れ、且つ、外気温8℃以下から発酵飼料原料が凍結しない低温度帯においても良質な発酵飼料製造に高い適性を有した新規乳酸菌 ラクトバシラス・カルバタス C5127Di株に関するものである。
請求項3に係る本発明は、発酵飼料用原料に、請求項1または2に記載の菌株を混合することを特徴とする、発酵飼料の製造方法に関するものである。
請求項4に係る本発明は、前記発酵飼料用原料が、サイレージ用原料又は発酵TMR飼料用原料である、請求項3に記載の発酵飼料の製造方法に関するものである。
請求項5に係る本発明は、請求項1または2に記載の菌株を含有してなる発酵飼料製造用の微生物製剤に関するものである。
請求項6に係る本発明は、請求項1または2に記載の菌株にて製造した発酵飼料と輸入飼料の合計100質量%に対して、請求項1または2に記載の菌株にて製造した発酵飼料1〜100質量%と、輸入飼料0〜99質量%を含有する、輸入飼料に含まれる残留農薬を排除又は低減した飼料の製造方法に関するものである。
請求項7に係る本発明は、請求項1または2に記載の菌株にて製造した発酵飼料と輸入飼料の合計100質量%に対して、請求項1または2に記載の菌株にて製造した発酵飼料1〜100質量%と、輸入飼料0〜99質量%を含有する、輸入飼料に含まれる残留農薬を排除又は低減した堆肥の製造方法に関するものである。
これらにより本発明は、通常の発酵飼料に適した外気温10〜40℃における発酵飼料の製造に高い適性を有するのみならず、さらに低い温度帯(外気温8℃以下で且つ発酵飼料原料が凍結しない温度帯)において、牧草・飼料作物や発酵TMR原料の発酵を可能とする。そして、乳酸菌が増殖した良質(低pHであり、乳酸含量が多く、アンモニア態チッソ含量が低い)な発酵飼料(サイレージ、発酵TMR飼料)を製造することを可能とする。
また、本発明は、前記菌株を含有してなる発酵飼料製造用の微生物製剤、及び、前記菌株を混合することを特徴とする、良質な発酵飼料(詳しくは、サイレージ、発酵TMR飼料)の製造方法に関する。
さらに、本発明は、前記菌株にて調製した発酵飼料を輸入飼料と置き換えることで輸入飼料から持ち込まれる残留農薬を排除または低減した飼料の製造方法、及び、堆肥の製造方法に関する。
本発明の乳酸菌は、ラクトバシラス・カルバタス (Lactobacillus curvatus)である。特にラクトバシラス・カルバタスに属する乳酸菌のうち、ラクトバシラス・カルバタス C5127Di株である。本発明にいうC5127Diは秋田県と秋田十條化成株式会社で独自に菌株に付与した番号である。本ラクトバシラス・カルバタス C5127Di株は牧草であるオーチャードグラスより、本発明者の1人によって初めて分離されたものである。
このように分離した酸生産菌1,562株から、10℃における生育を指標に、低温増殖性を有する酸生産菌の選抜を行った。10℃に冷却したMRS液体培地に1,562株を個別に植菌し、10℃で4日間培養した結果、増殖性を示した300株を得た。
この300株から、さらに低温増殖性に優れた酸生産菌を選抜するため、6℃に冷却したMRS液体培地に300株を個別に植菌し、6℃で7日間静置培養したところ、増殖性を示した14株を得た。
この9株を0.017%のBCP(ブロモクレゾールパープル、pH指示薬)を含むMRS液体培地に1/100量接種したものを8℃で培養し、色相の変化指標にpH低下を確認したところ、9株全てが3日以内にpHが低下した。
この結果から、9株いずれも低温発酵性に優れることが判った。
このように分離した低温増殖性および低温発酵性に優れた酸生産菌9株の糖質資化性は、API50 CH / CHL(日本ビオメリュー社製)を用いて調べた。
その結果、最も多様な20糖の糖質を資化するC5127Di株を選択した。C5127Di株の分離源は、オーチャードグラスであった。
この様にして選択したC5127Di株の菌学的性質を調べた。16SリボソームDNA(rDNA)の塩基配列の相同性の解析(Mori, K. et al.:Int. J. Syst. Bacteriol., 47巻、54-57 、1997) により、乳酸菌に属する細菌の一種であるラクトバシラス・カルバタスと99.9%の相同性を示した。糖質資化能による分類をAPI50 CH / CHL(日本ビオメリュー社製)により行ったところ、ラクトバシラス・カルバタスの標準株とは異なる糖質資化性を示すこと、且つ、マンニトール及びメリビオースの資化性を有しない特徴から、本菌はラクトバシラス・カルバタスに属する新規な菌株と同定し、菌株番号をC5127Diとした。以下、 C5127Di株と表記する。
ここで、「優れた乳酸発酵能」と「優れた低温発酵性」と「優れた低温増殖性」は、低温環境下で良質な発酵飼料(低pHであり、乳酸や有機酸を多く含む)を製造する上で必須な性質である。
さらに、「優れた乳酸発酵能」としては、C5127Di株をMRS液体培地にて培養した場合、pH 3.90付近で発酵が停止する性質から、良質な発酵飼料に求められるpH範囲であるpH 4.0〜4.5の範囲にある発酵飼料を製造する能力を有するものである。
本発明においては、前記新規乳酸菌株を、発酵飼料原料に混合することが必須である。
混合の方法としては、原料中に偏りなく、好ましくは均一になるように行うことが望ましい。例えば、菌株を水や培養液等に溶いて(懸濁や混和して)噴霧する方法や、混合攪拌する方法などで行うことができる。
混合する菌株の量としては、原料1kgに対して106〜109菌数レベル(具体的には108菌数レベル程度)で混合することが望ましいが、105〜1010菌数レベルで混合することもできる。
菌株の混合時期としては、サイレージ発酵を開始する前に行うことが望ましいが、サイレージ 発酵の途中の段階で混合を行ってもよい。
なお、当該新規乳酸菌株に加えて、別途他の有用な微生物(例えば、硝酸塩や亜硝酸塩の低減作用を有する微生物、セルラーゼやヘミセルラーゼなどの多糖分解酵素を有する微生物、家畜の整腸作用を有するプロバイオティクス微生物など)や各種酵素製剤(セルラーゼやヘミセルラーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、キチナーゼなどの多糖分解酵素、タンパク質分解酵素、脂質分解酵素など)を 混合してもよい。
また、発酵TMR飼料を調製する場合も、通常の発酵TMR飼料の調製法と同様の条件に加えて、さらに低温度帯の条件で行うことが出来る。通常の発酵TMR飼料の調製法とは、約40〜70%の水分含量に調製し、嫌気条件で、外気温(10〜40℃程度)で14日以上放置することで、発酵させることができる。さらに、本発明では、発酵TMR素材が凍結しない限り発酵TMR飼料の調製を行える。具体的には、約40〜70%の水分含量に調製し、嫌気条件で、外気温(0〜40℃程度)で14日以上放置することで、発酵TMR飼料を調製することができる。発酵TMR飼料の調製は、フレコンバック法、ロールベール法、などで行うことができる。
当該サイレージ発酵過程においては、混合した新規乳酸菌株は、8℃以下の低温度環境中においても飼料中に増殖し、良好に乳酸を生産する。特に8℃以下の環境であれば、一般的な微生物は生育が困難になり、本発明の乳酸菌が優先的に生育できる。そのため、上記発酵過程を経て得られた発酵飼料は、乳酸含量が高く、且つ、酪酸及び酢酸やアンモニア態窒素含量の低い良質な飼料となる。
これらにより、発酵飼料中のpHは低下したものとなり、腐敗微生物が抑制されるため、有機物の腐敗分解が抑制される。
また、本発明の新規乳酸菌株はMRS液体培地に於いてpH3.9付近で発酵が停止する性質を有することから、本発明により製造した発酵飼料は、良質な発酵飼料の目安とされるpH 4.0〜4.5の範囲に発酵を容易に収束することができる。
本発明においては、上記新規乳酸菌株を含有してなる微生物製剤の形態にして提供することができる。
微生物製剤の形態としては、上記新規乳酸菌株を凍結乾燥状態にして粉末状の形態、賦型剤等と混ぜて固形にした形態、カプセルに充填する形態、液体アンプルの形態、凍結菌体の形態などを挙げることができる。好ましくは、凍結乾燥製剤の形態が好適である。
また、本発明では、上記新規乳酸菌株に加えて、上記した別途他の有用菌株や酵素製剤を混合して含有してなる剤の形態とすることもできる。
また、本発明の微生物製剤の使用量としては、原料1kgに対して106〜109菌数レベル(具体的には108菌数レベル程度)で混合することが望ましいが、105〜1010菌数レベルで混合することもできる。
ラクトバシラス・カルバタスの標準菌株であるJCM 1096T株(以下、JCM 1096T株と記す)は、C5127Di株の同定に用いた。
ラクトバシラス・サケイ KLB 3138aC株 (以下、KLB 3138aC株またはKLB 3138aCと記す)は、本発明者らが所有する菌株の中で、最も低温増殖性の優れた菌株であることから、低温増殖性及び低温発酵性の比較対照として用いた。
市販されている飼料イネサイレージ調製用乳酸菌製剤「畜草1号プラス(雪印種苗株式会社製)」(以下、市販品、または、市販株、または、市販乳酸菌製剤と記す)を、市販乳酸菌製剤の代表例として比較対照に用いた。
本乳酸菌は秋田県畜産試験場の有する圃場より、許可を得て採取した牧草・飼料作物(牧草としてリードカナリーグラス及びオーチャードグラス、飼料作物としてトウモロコシを含む)及び、発酵飼料の断片 2gを、塩化ナトリウム0.9%, 蒸留水5mlの組成からなる生理食塩水を、121℃で15分間滅菌処理してなる滅菌生理食塩水中に縣濁した。続いて、この縣濁液1mlを、炭酸カルシウム0.8%, 寒天1.5%を加えたLactobacilli MRS培地(組成:プロテオースペプトン1%、牛肉エキス1%、酵母エキス0.5%、ブドウ糖2%、Tween 80 0.1%、クエン酸アンモニウム0.5%、硫酸マグネシウム0.01%、硫酸マンガン0.005%、リン酸二カリウム0.2%、ディフコ社製)20mlの組成からなるMRS寒天培地で混釈培養を行い、30℃,3日間培養し、炭酸カルシウムを溶解して得られるクリアゾーンを形成したコロニーから純粋に分離したものである。その結果、牧草・飼料作物など172サンプルから、酸生産菌として1,562株を得た。
実施例1にて得られた酸生産菌1,562株から、10℃における生育を指標に、低温増殖性を有する酸生産菌の選抜を行った。本来清澄なMRS液体培地に酸生産菌を植菌すると、生育に伴って濁りを生じる。この濁りを指標として、10℃に冷却したMRS液体培地に1,562株を個別に植菌し、10℃で4日間培養した。その結果、濁りを生じた300株を得た。
この300株は、さらに低温増殖性に優れた酸生産菌を選抜するため、6℃に冷却したMRS液体培地に300株を個別に植菌し、6℃で7日間静置培養した。その結果、濁りを生じた14株を得た。
その結果を図1に示す。低温増殖性に優れた酸生産菌として、ABS=600nmの値が1.1未満の5株(点線で記す)を除外し、ABS=600nmの値が1.1以上の9株(実線で記す)を得た。
この9株を0.017%のBCP(ブロモクレゾールパープル、pH指示薬)を含むMRS液体培地に1/100量接種したものを8℃で培養し、色相の変化指標にpH低下を確認したところ、9株全てが3日以内にpHが低下した。
この結果から、9株はいずれも低温発酵性に優れることが判った。
実施例2にて得られた低温増殖性および低温発酵性に優れた酸生産菌9株の糖質資化性は、API50 CH / CHL(日本ビオメリュー社製)を用いて調べた。その結果、最も多様な20糖の糖質を資化したC5127Di株を選択した。C5127Di株の分離源は、オーチャードグラスであった。
実施例3にて得られた低温増殖性に優れ、且つ、糖質資化性に優れた酸生産菌であるC5127Di株の菌学的性質を調べた。16SリボソームDNA(rDNA)の塩基配列の相同性の解析(Mori, K. et al.:Int. J. Syst. Bacteriol., 47巻、54-57 、1997) により、乳酸菌に属する細菌の一種であるラクトバシラス・カルバタスと99.9%の相同性を示した。
糖質資化能による分類をAPI50 CH / CHL(日本ビオメリュー社製)により行ったところ、標準株であるラクトバシラス・カルバタス JCM 1096T株とは異なる糖質資化性を示すこと、且つ、マンニトール及びメリビオースの資化性を有しない特徴から、本菌はラクトバシラス・カルバタスに属する新規な菌株と同定し、菌株番号をC5127Diとした。以下、 C5127Di株と表記する。
また、C5127Di株の8℃における増殖特性を図2に示す。
本発明に用いられる乳酸菌の培養及び調製は、次の方法により行った。C5127Di株の比較対照として、発明者らが保有する中で最も優れた低温増殖性を有していたラクトバシラス・サケイ KLB 3138aC株を低温増殖性の比較対照に用いた。また、競合する先行技術の比較対照として、市販されている飼料イネサイレージ調製用乳酸菌製剤「畜草1号プラス(雪印種苗株式会社製)」を市販株として比較に用いた。
市販株については、培地容積の1/1000重量の乳酸菌製剤をLactobacilli MRS培地に添加し、30℃で18時間培養後、遠心分離機にて集菌し、ペレットを回収した。
これらのペレットを滅菌生理食塩水で2回洗浄後、1x108 cells / mlとなるように滅菌生理食塩水にて懸濁した。
以下、特に断りのない場合は、この様にして調製した乳酸菌株を使用した。
本発明に用いられる乳酸菌 C5127Di株の低温度域における飼料米発酵適性は、次の方法により決定した。C5127Di株の比較対照として、KLB 3138aC株及び市販株を用いた。また、コントロールとして、乳酸菌無添加区を用意した。
乳酸菌添加区では、4℃において市販株はpH 5.9であり、KLB 3138aC株はpH 4.4であったが、C5127Di株はpH 4.3と、最もpHを下げることが出来た。
同様に、6℃においては、市販株はpH 5.4、KLB 3138aC株はpH 4.3であったが、C5127Di株はpH 4.2と、最もpHを下げることが出来た。
8℃においては、市販株はpH 4.3であり、KLB 3138aC株はpH 4.2であったが、C5127Di株はpH 4.2と、目立った差は無くなった。
本発明に用いられる乳酸菌 C5127Di株の低温度域における飼料米の発酵日数は、次の方法により決定した。C5127Di株の比較対照として、KLB 3138aC株及び市販株を用いた。また、コントロールとして、乳酸菌無添加区を用意した。
この結果から、市販品と比較して充分短期間に、低温度で発酵を行えることが判った。
さらに21日目においては、市販株はpH 5.9、KLB 3138aC株はpH 4.4であったが、C5127Di株はpH 4.3と、最もpHを下げることが出来た。
28日目においては、市販株はpH 5.7であり、KLB 3138aC株はpH 4.3であったが、C5127Di株はpH 4.2と、必要且つ充分な乳酸発酵を4℃において行えることが判った。
本発明に用いられる乳酸菌 C5127Di株の低温度域における飼料米の発酵に求められる乳酸菌添加菌数は、次の方法により決定した。C5127Di株の比較対照として、KLB 3138aC株及び市販株を用いた。
一般的に、乳酸菌製剤の使用量は終濃度1x105 cells / g以上となるように推奨されている。この結果から、低温度域においても乳酸菌添加量を1/10に減らすことが可能であり、従来の市販乳酸菌製剤よりも低コスト化が実現された。
さらに終濃度1x105 cells / g試験区においては、市販株はpH 5.9、KLB 3138aC株はpH 4.4であったが、C5127Di株はpH 4.3と、最もpHを下げることが出来た。
終濃度1x106 cells / g試験区においては、市販株はpH 5.4であり、KLB 3138aC株はpH 4.3であったが、C5127Di株はpH 4.2と、必要且つ充分な乳酸発酵を4℃において行えることが判った。
本発明に用いられる乳酸菌 C5127Di株の低温度域におけるTMR原料を基質とした発酵適性は、次の方法により決定した。C5127Di株の比較対照として、KLB 3138aC株及び市販株を用いた。また、コントロールとして、乳酸菌無添加区を用意した。
また、従来の市販乳酸菌製剤では、低温環境下に置いて発酵TMRを製造できないことが判った。
本発明に用いられる乳酸菌 C5127Di株の低温度域におけるTMR原料を基質とした実規模発酵適性は、次の方法により決定した。C5127Di株の比較対照として、KLB 3138aC株を用いた。
さらに、通常のTMRは輸入飼料である配合飼料とビートパルプにデントコーンサイレージやロールベールサイレージを混ぜて調製される。食品残渣の利用に関して、配合飼料及びビートパルプの使用量を減らし、国産食品残渣への置き換えを検討した。
表6の通りの重量配分にあるTMR原料1000kgに対して1x109個cell / mlを含む乳酸菌培養液を1リットル添加し、常法に従いロールベールサイレージとして2014年10月1日(以下、秋期と表記)と2014年11月28日(以下、厳寒期と表記)に調製し、屋外にて保管および発酵した。また、C5127Di株とKLB 3138aC株の培養液を混合して添加した混合培養物も用意した。30日目のロールベールサイレージを開封し、pHを測定する事で実規模発酵TMR適性を検討した。
また、通常のLactobacilli MRS培地は動物由来成分を含んでいるため、飼料に添加することが出来ない。そのため、動物由来成分を排除した培地にて、培養液を作成し、本試験に使用した。試験開始時のTMR原料のpHは7.13であった。
厳寒期に30日間保存した後のpH変化は、KLB 3138aC株はpH 4.56、C5127Di株はpH 4.58であった。
さらに、C5127Di株とKLB3138aC株の培養液を混合して調製した発酵TMRは、秋期はpH 4.05、厳寒期はpH 4.58であった。
発酵TMRはpH 4.5以下を目標に製造される。これらの結果から、厳寒期の結果は、若干pHが高いが、許容範囲であった。
外気温が低い時期に於いても優れた発酵性を有することから、寒冷地や高地など、さらに広範な利用が期待される。
また、環境にやさしく、安全性に優れている。
新規サイレージ調製(製造)用添加物として、飼料メーカーへの技術移転が期待される。
Claims (6)
- 20糖もの多様な糖質を資化する優れた発酵性を有し、4℃の低温環境下において増殖性および発酵性に優れ、且つ、外気温8℃以下から発酵飼料原料が凍結しない低温度帯においてpH4.0〜4.6の範囲にある良質な発酵飼料を30日以内に製造できる高い適性を有し、且つ、低・未利用資源から良質な発酵飼料の製造に高い適性を有した乳酸菌 ラクトバシラス・カルバタス C5127Di株。
- 発酵飼料用原料に、請求項1に記載の菌株を混合することを特徴とする、発酵飼料の製造方法。
- 前記発酵飼料用原料が、サイレージ用原料又は発酵TMR飼料用原料である、請求項2に記載の発酵飼料の製造方法。
- 請求項1に記載の菌株を含有してなる発酵飼料製造用の微生物製剤。
- 請求項1に記載の菌株にて製造した発酵飼料と輸入飼料の合計100質量%に対して、請求項1に記載の菌株にて製造した発酵飼料1〜100質量%と、輸入飼料0〜99質量%を含有する、輸入飼料に含まれる残留農薬を排除又は低減した飼料の製造方法。
- 請求項1に記載の菌株にて製造した発酵飼料と輸入飼料の合計100質量%に対して、請求項1に記載の菌株にて製造した発酵飼料1〜100質量%と、輸入飼料0〜99質量%を含有する、輸入飼料に含まれる残留農薬を排除又は低減した堆肥の製造方法。
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