KR101826367B1

KR101826367B1 - 균질 측정법 및 측정 시약

Info

Publication number: KR101826367B1
Application number: KR1020127016902A
Authority: KR
Inventors: 히로시 다카하시; 유키 다카하시; 치에 가네코
Original assignee: 세키스이 메디칼 가부시키가이샤
Priority date: 2009-11-30
Filing date: 2010-11-30
Publication date: 2018-02-06
Also published as: CN102687014A; WO2011065573A1; CN102687014B; CN107632147A; JPWO2011065573A1; US20120258552A1; EP2508885A1; CA2781166A1; EP2508885B1; KR20120113745A; CA2781166C; EP2508885A4; JP5806939B2

Abstract

본 발명은 불용성 담체 입자를 이용하는 균질 측정법, 특히 항체나 항원 등을 담지시킨 불용성 담체 입자를 이용하는 응집 측정법, 보다 구체적으로는 LTIA에 있어서, 검체 유래의 매트릭스 효과를 감소시킴과 동시에, 상이한 사양의 자동 분석 장치 사이에서의 측정 정밀도 차이를 개선한 측정 방법 및 자동 분석 장치용의 측정 시약의 제공을 과제로 한다. 불용성 담체 입자를 이용한 균질 측정법, 특히 항체나 항원 등을 담지시킨 불용성 담체 입자를 이용하는 응집 측정법, 보다 구체적으로는 LTIA에서의 자동 분석 장치용 측정 시약에 있어서, 측정 시약에 실리콘계 소포제를 첨가 처방함으로써, 검체 유래의 매트릭스 효과를 감소시킴과 동시에, 측정 시약의 기본적인 성능을 변동시키지 않고, 상이한 사양의 자동 분석 장치 사이에서의 측정 정밀도의 폭을 개선할 수 있었다.

Description

균질 측정법 및 측정 시약 {HOMOGENOUS MEASUREMENT METHOD AND MEASURING REAGENT}

본 발명은 불용성 담체 입자를 이용하는 균질 측정법, 특히 항체나 항원 등을 담지시킨 불용성 담체 입자를 이용하는 응집 측정법에 있어서, 측정 시약 중에 실리콘계 소포제를 함유시키는 것을 특징으로 하고, 검체 유래의 매트릭스 효과를 감소시킴과 동시에, 상이한 사양의 자동 분석 장치 사이에서의 측정 정밀도 차이를 개선한 자동 분석 장치용의 측정 시약에 관한 것이다.

최근 들어 자동 분석 장치를 이용하여 행하는 임상 검사에 있어서, 자동 분석 장치의 분주 기능의 향상과 이에 대응하는 임상 검사약(이하, 「검사 시약」이라고 하는 경우가 있음)의 개발에 의해, 자동 분석시에서의 측정 시료(이하, 「검체」라고 하는 경우가 있음)나 검사 시약의 소량화가 실현되고 있다.

이들 임상 검사약 중, 불용성 담체 입자를 이용한 균질 측정법, 특히 라텍스 응집 면역 측정법(LTIA)은 고감도인 점에서 측정 대상이 확대되고 있지만, 검사 시약의 소량화에 따른 과제가 있고, 동일한 검사 시약을 상이한 사양의 복수의 자동 분석 장치에서 공통적으로 사용 가능하게 하기 위한 과제도 존재한다.

검사 시약의 소량화에 따른 과제의 하나는 혈청 등의 피험자로부터 채취한 검체 유래의 매트릭스 효과(matrix effect)의 감소이다. 매트릭스 효과란, 예를 들면 정제된 측정 대상물을 포함하는 완충액을 검체로 하여 측정한 경우의 감도에 대하여, 상기 완충액 검체와 동 농도의 측정 대상물을 포함하는 동일 용량의 혈청 등의 피험자로부터 채취한 검체를 측정한 경우의 감도가 증대하거나 감소하는 현상을 말하며, 이러한 감도의 증감이 혈청 등의 피험자로부터 채취한 검체 중의 성분(혈청 중의 측정 대상물 이외의 물질 등)의 존재에 기인하여 생기는 것을 말한다. 또한, 본 명세서에 있어서 혈청 등의 피험자로부터 채취한 검체를 「생물 검체」라고 하는 경우가 있다.

임상 검사에서의 종래의 측정 대상물은 생물 검체 중에서의 양이 비교적 많기 때문에, 생물 검체를 희석하여 매트릭스 효과를 감소시키거나, 또는 교정용 기준(캘리브레이터)이나 검사 시약에 생물 검체 유래 성분 등(예를 들면, 혈청이나 알부민)을 함유시켜 측정시에서의 생물 검체와 교정용 기준의 조성을 근사시켜 매트릭스 효과를 감소시키는 방법이 채용되어 왔다. 그러나, 희석에 의한 매트릭스 효과의 감소 방법은 생물 검체 중의 측정 대상물의 양이 측정계의 감도와 합치하지 않는 경우에는 채용할 수 없고, 교정용 기준이나 검사 시약으로의 혈청 성분 등의 첨가는 검사 시약의 점도 상승이나 발포를 가져오는 경우가 있어, 소량화를 전제로 한 분주에 악영향을 주는 경우가 있다.

또한, 동일한 검사 시약을 상이한 사양의 복수의 자동 분석 장치에서 공통적으로 사용 가능하게 하기 위한 과제로서는, 동일한 검사 시약을 사용한 경우이더라도 자동 분석 장치의 기종에 따라 측정치의 정확성이나 재현성(이하, 총칭하여 「측정 정밀도」라고 하는 경우가 있음)에 폭(이하, 「성능 저하」라고 하는 경우가 있음)을 발생시키는 경우(이하, 이 현상 전체를 「기종간 차이」라고 하는 경우가 있음)가 있는 것을 들 수 있다. 이 성능 저하 현상은 특정 검사 시약을 특정 자동 분석 장치에 적용한 경우에 발생하기 때문에, 유통되고 있는 상이한 사양의 모든 종류의 자동 분석 장치를 대상으로 하여 망라적으로 시약 성능을 검증하는 것이 실질적으로 곤란한 검사 시약의 개발 단계에서는 예측이 곤란하고, 검사 시약이 의료 시설 등에서 사용되게 된 다음 현재화하는 경우가 많아 큰 과제로 되어 있다.

이전부터 임상 검사약에서는, 자동 분석 장치의 몇몇 기종을 대상으로, 검사 시약을 사용하는 기종마다 권장되는 측정 조건(파라미터)을 예시하는 것이 행해지고 있지만, 파라미터의 변경만으로는 상기한 기종간 차이는 개선되지 않는 경우가 있다. 또한, 하나의 측정 항목(검사 항목)에 대하여 자동 분석 장치의 기종마다 적합한 처방의 검사 시약이 복수 개발되어 있는 경우도 있지만, 자동 분석 장치의 기종수는 많아, 특정 자동 분석 장치(기종)를 대상으로 하여 개개에 적합한 처방의 검사 시약을 개발하는 것은 작업량이나 경제 효율의 면 등에서 문제가 있다.

현재까지 불용성 담체 입자를 이용한 자동 분석용 균질 측정법 시약, 특히 LTIA용 시약에 있어서, 매트릭스 효과의 감소 방법은 충분히 검토되어 있지 않고, 자동 분석 장치의 기종 사이에 발생하는 성능차의 발생 원인이나 개선 방법은 밝혀져 있지 않다.

LTIA용 시약에 대해서는, 증점 효과가 알려져 있는 덱스트란 황산과 기포 발생 효과가 알려져 있는 알부민을 동시에 함유하는 시약에 소포제를 처방한 LTIA용 시약이 알려져 있다(특허문헌 1, 2). 특허문헌 1에는 1.25％ 내지 1.75％의 덱스트란 황산나트륨 및 2.0％의 지방산 비함유 인간 혈청 알부민을 함유하는 시약에, 0.01％의 소포제 1410(다우 코닝사 제조)을 처방한 시약을 사용하여 LTIA 측정을 행한 것이 기재되어 있고, 특허문헌 2에는 1％의 덱스트란 황산나트륨 및 0.5％의 소 혈청 알부민을 함유하는 시약에, 0.005％의 소포제(다우 코닝사 제조: 1410)를 처방한 시약을 사용하여 LTIA 측정을 행한 것이 기재되어 있다. 그러나, 양 문헌 모두 본 출원 시점에서의 자동 분석 장치에 의한 측정에서의 통상의 총액량(검체와 시약(시액)의 총액량: 200 μL 전후)보다 다량인 300 μL를 총액량으로 하는 경우에 대한 기재인 점 등, 검체 및 시약(시액)의 소량화를 전제로 하고 있지 않고, 소포제의 매트릭스 효과 감소에 대한 관여나 자동 분석 장치의 기종간 차이의 발생 원인이나 개선 방법은 일절 언급되어 있지 않다. 또한, 본 명세서에서는 시약이 액상인 경우, 시약액 또는 단순히 시액이라 하는 경우가 있다.

또한, 항체나 항원 등을 담지시킨 불용성 담체를 이용하는 결합 어세이를 원리로 하는 각종 측정법에 있어서, 비특이적인 반응의 억제를 목적으로 하여, 측정 시약의 구성 시약의 일부, 예를 들면 세정액이나 반응 완충액 등에 계면 활성제가 포함되어 있는 경우가 많지만, 계면 활성제가 존재하면 그의 성질상 반응액의 교반·혼화시 등에 기포가 발생하기 쉬워져 측정 정밀도에 영향을 주기 때문에, 특허문헌 3에 기재된 비균질 효소 면역 측정법과 같이, 소포제의 첨가에 의해 계면 활성제에 의한 기포 발생을 억제하는 방법이 보고되어 있다. 또한, 특허문헌 4에 기재된 폴리뉴클레오티드의 증폭 및 검출 시약에 있어서는, 마이크로미터 크기의 미세한 시약(시액) 유로를 특징으로 하는 마이크로 유체 디바이스로의 적용을 고려하여 소포제의 첨가가 제안되어 있다.

또한, 자동 분석 장치에 대해서는, 예를 들면 특허문헌 5에 있어서 자동 분석 장치 세정용 세제에 포함되는 계면 활성제에 의한 기포의 발생을 소포제에 의해 해소하는 제안이 이루어져 있기는 하지만, 이것은 장치의 세정에서의 과제, 즉 기기의 보수에 따른 과제의 해결 수단으로서, 검체 측정에서의 사용은 의도되어 있지 않고, 당연히 측정 정밀도에 주는 효과에 대해서는 언급되어 있지 않다. 게다가, 애당초 균질 측정법에는 세정 조작이 없기 때문에, 세정에 의해 세제가 반응계에 혼입되는 것과 같은 사태는 발생할 수 없다.

상기 특허문헌 1 내지 5에서 보는 바와 같이, 현재까지 불용성 담체 입자를 이용한 자동 분석 장치용 균질 측정법 시약, 특히 LTIA용 시약에 있어서, 매트릭스 효과의 감소, 자동 분석 장치의 기종간 차이의 개선을 목적으로 하여 소포제가 사용되는 경우는 없었다.

일본 특허 공개 (평)07-301632호 공보 일본 특허 공개 (평)11-014628호 공보 일본 특허 공개 (평)09-068529호 공보 일본 특허 공표 제2006-507002호 공보 일본 특허 공개 제2008-82777호 공보

본 발명은 불용성 담체 입자를 이용하는 균질 측정법, 특히 항체나 항원 등을 담지시킨 불용성 담체 입자를 이용하는 응집 측정법, 보다 구체적으로는 LTIA에 있어서, 생물 검체 유래의 매트릭스 효과를 감소시킴과 동시에, 상이한 사양의 자동 분석 장치 사이에서의 측정 정밀도 차이를 개선한 측정 방법 및 자동 분석 장치용의 측정 시약의 제공을 과제로 한다.

본 발명자들은 불용성 담체 입자를 이용한 균질 측정법, 특히 항체나 항원 등을 담지시킨 불용성 담체 입자를 이용하는 응집 측정법, 보다 구체적으로는 LTIA에서의 자동 분석 장치용 측정 시약에서의 상기 과제를 해결하기 위해 다양한 시점에서 검증을 시도한 바, 측정 시약에 실리콘계 소포제를 첨가 처방함으로써, 생물 검체 유래의 매트릭스 효과를 감소시킴과 동시에, 측정 시약의 기본적인 성능을 변동시키지 않고, 상이한 사양의 자동 분석 장치 사이에서의 측정 정밀도의 폭을 개선할 수 있음을 발견하여 본 발명의 측정 시약을 완성하였다.

본 발명은 이하의 구성을 갖는다.

(1) 불용성 담체 입자를 이용하는 자동 분석 장치용 균질 측정법 시약으로서, 구성 시약 중에 실리콘계 소포제를 함유하며,

상기 구성 시약 중의 단백질 농도는 2 w/v％ 미만이고, 자동 분석 장치에 의해 분취되는 검체 및 시약액의 총액량이 300 μL 미만이면서 불용성 담체 입자를 함유하는 시약액량이 총액량의 20 v/v％ 이상 50 v/v％ 이하인 경우에 이용되는 것임을 특징으로 하는 측정 시약.

(2) 상기 불용성 담체 입자가 측정 대상 물질에 대한 고친화성 물질 또는 측정 대상 물질 유사 물질을 담지시킨 불용성 담체 입자인 상기 (1)에 기재된 측정 시약.

(3) 실리콘계 소포제가 오일형, 오일 컴파운드형, 용액형, 자기 유화형, 에멀전형 및 이들의 혼합물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 상기 (1) 또는 (2)에 기재된 측정 시약.

(4) 구성 시약 중의 실리콘계 소포제의 농도가 0.0001 내지 0.1％인 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 하나에 기재된 측정 시약.

(5) 자동 분석 장치가 교반 및/또는 혼화 기능을 갖고, 해당 기능의 사양이 직접형 또는 비접촉형인 상기 (1) 내지 (4) 중 어느 하나에 기재된 측정 시약.

(6) 자동 분석 장치를 사용한 균질 측정법으로서,

이하의 공정을 포함하는 측정법:

1) 측정 대상 물질을 포함하는 검체 및 시약을 분취하는 공정 (여기서, 상기 시약은 하나 또는 복수의 구성 시약을 포함하고, 상기 구성 시약 중 적어도 하나가 불용성 담체 입자를 포함하며, 구성 시약 중의 단백질 농도가 2 w/v％ 미만임);

2) 실리콘계 소포제의 존재 하에서, 검체 및 시약의 총액량이 300 μL 미만이면서 불용성 담체 입자를 함유하는 시약액량이 총액량의 20 v/v％ 이상 50 v/v％ 이하가 되도록 혼화하는 공정; 및

3) 상기 측정 대상 물질을 검출하는 공정.

또한, 본 발명은 이하의 양태도 갖는다.

(7) 불용성 담체 입자가 측정 대상 물질에 대한 고친화성 물질, 또는 측정 대상 물질 유사 물질을 담지시킨 불용성 담체 입자인 상기 (6)에 기재된 측정법.

(8) 실리콘계 소포제가 오일형, 오일 컴파운드형, 용액형, 자기 유화형, 에멀전형 및 이들의 혼합물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 상기 (6) 또는 (7)에 기재된 측정법.

(9) 구성 시약 중의 실리콘계 소포제의 농도가 0.0001 내지 0.1％인 상기 (6) 내지 (8) 중 어느 한 항에 기재된 측정법.

(10) 자동 분석 장치가 교반 및/또는 혼화 기능을 갖고 있고 해당 기능의 사양이 직접형 또는 비접촉형인 상기 (6) 내지 (9) 중 어느 한 항에 기재된 측정법.

본 발명에 의해, 생물 검체 유래의 매트릭스 효과를 받지 않고, 자동 분석 장치의 사양에 상관없이 고정밀도로 측정이 가능한, 불용성 담체 입자를 이용한 균질 측정법에 기초한 자동 분석 장치용의 응집 측정 시약을 제공하는 것이 가능해졌다.

도 1은 대조 시약 1 및 본 발명 시약 1을 사용하여, 3종의 파라미터(조건 A 내지 C)로 혈청 검체 A 및 B를 각각 5회 연속 측정했을 때의 측정치의 변동을 나타내는 그래프이다(실시예 2).

(균질 측정법)

본 발명에 있어서 균질 측정법이란, 검체와 시액의 혼화 용액(반응액) 중에서 측정 대상 물질에 의해 진행하는 반응을 B/F(결합/비결합) 분리를 행하지 않고 특이적으로 검출하는 측정법을 가리키며, B/F 분리 조작에 의해 측정 반응에 관여하지 않은 잉여 성분을 완전히 세정·제거한 후, 주반응을 진행시켜 검출하는 비균질 측정법과 대비하여 호칭되는 측정법을 말한다.

(자동 분석 장치)

본 발명에 있어서 자동 분석 장치란, 주로 임상 검사에서의 사용을 목적으로 하여 각 회사로부터 제조·판매되고 있는 것을 가리킨다. 구체적인 예로서, 히타치 하이테크놀로지즈사 제조의 자동 분석 장치 시리즈, 도시바 메디칼 시스템즈사 제조의 TBA 시리즈, 니혼 덴시사 제조의 BM 시리즈, 벡크만 코울터 바이오메디칼사 제조, 세키스이 메디칼사 제조 등의 이른바 범용 시약형 자동 분석 장치나, 근적외 측정 장치 LPIA(등록상표)(미쯔비시 가가쿠 메디언스사 제조), 산란광 강도 측정 장치(데이드 베링사 제조) 등의 이른바 전용 시약형 자동 분석 장치, 또한 광학적 측정이 가능한 혈액 응고 측정 장치 등을 들 수 있고, 기종의 명칭이나 크기(이른바 대형기·소형기)를 불문한다.

이들 자동 분석 장치는 통상적으로 이하와 같은 동작에 의해 검체의 측정을 행한다. 본 발명에 바람직한, 2개의 구성 시약을 포함하는 검사 시약(2 시액계 시약)을 사용하는 경우를 예로 하여 측정 공정에 따라 설명한다. 우선 검체 및 제1 시약을 순차적으로 분취한 후에 흡광도 측정용 셀을 겸하는 반응조에 분주하고 혼화한다. 다음으로 제2 시약을 분취, 반응조에 분주하고 혼화한 후, 일정 시간 내의 광학적 변화를 측정한다. 이러한 공정에 대응하는 기능·사양을 임상 검사용으로서 유통되고 있는 많은 자동 분석 장치는 공통적으로 구비하고 있다.

그 한편으로, 검체나 시약의 분취·분주나 용액의 교반·혼화 등, 각 공정에서의 기능이나 사양의 상세한 내용은 자동 분석 장치 사이에 상이하여, 예를 들면 교반·혼화 공정에 관해서는 검체량, 시약량의 소량화와 동시에 다양화가 진행되고 있어, 각종 형상의 프로브를 반응액 중에서 회전시켜 교반하고 반응액을 혼화하는 방식(히타치 하이테크놀로지즈사 제조의 히타치(HITACHI) 7180 등), 피에조 소자 진동 프로브가 발생하는 진동을 이용하여 반응액을 혼화하는 방식(도시바 메디칼 시스템즈사 제조의 TBA120FR 등)과 같은 직접형(접촉형)에 더하여, 반응조 중의 반응액을 초음파에 의해 진동시켜 반응액을 혼화하는 방식(히타치 하이테크놀로지즈사 제조의 히타치 9000 등), 검체나 시약을 분주하는 프로브로부터의 용액 토출력을 이용하여 반응액을 혼화하는 방식, 반응조 자체를 진탕하여 반응액을 혼화하는 방식(모두 세키스이 메디칼사 제조의 CP2000 등)과 같은 비접촉형(간접형)이 보급되기 시작하고 있다. 또한, 본 명세서 중, 자동 분석 장치가 갖는 기능인 교반·혼화란 해당 장치가 「교반」만의 기능을 갖는 경우, 「혼화」만의 경우, 또는 「교반 및 혼화」의 양 기능을 갖는 경우를 모두 포함하는 의미로 이용된다.

이들 교반·혼화에서의 기기의 사양은 각각 기본 원리가 다른 점에서 교반·혼화의 능력에 차이를 주는 것으로 생각되며, 최근의 자동 분석 장치를 이용한 임상 검사에 있어서는, 교반·혼화 능력의 차이에 기인하여 반응이 불균일하게 되어 있는 것이 현재화되고 있을 가능성을 생각할 수 있다. 게다가 직접적인 비교가 곤란한 용액(검체나 시액)의 분취·분주의 기구나 각 부품의 재질의 차이 등을 고려하면, 측정 시약에 미치는 물리적인 영향은 자동 분석 장치마다 전혀 다른 것으로 생각된다. 본 발명은 이러한, 교반·혼화 시에 기기의 사양차에 기인하는 것으로 생각되는 자동 분석 장치에서의 기종간 차이가 발생하는 경우에 바람직하게 사용할 수 있다.

(실리콘계 소포제)

발포는 기상 액상 간의 계면 현상으로서, 액체가 얇은 막이 되어 공기를 포위함으로써 기포가 형성된다. 기포의 생성에는 표면 장력, 점도(점성) 등이 영향을 미치고 있고, 계면 활성제나 고분자 화합물이 발포 인자로서 알려져 있다. 기포의 표면에서는 계면 활성 물질이 소수기를 기상(氣相)을 향해 규칙적으로 배열되어 있다고 생각되고 있지만, 본 발명에 있어서 소포란, 계면 활성 물질의 규칙적인 구조 배열의 형성이나 유지에 대하여 간섭함으로써 기포의 발생을 억제하는 억포 작용 및 기포를 파괴하는 파포 작용, 나아가 기포끼리를 들러붙게 하여 액면에 상승시키는 탈기 작용을 의미하며, 본 발명에서 사용되는 실리콘계 소포제는 상기 중 어느 하나의 작용을 갖고 있으면 좋지만, 복수의 작용을 겸비하는 성분이 바람직하다.

본 발명의 측정 시약에서의 실리콘계 소포제는 균질 측정법의 성분으로서 이용 가능하면 특별히 제한은 없지만, 실리콘계 소포제로서는 폴리알킬실록산을 함유하는 것을 특징으로 하는 실리콘계 소포제를 들 수 있다.

본 발명에 사용되는 폴리알킬실록산은 하기 화학식 1로 표시되는 구조를 갖는다.

(화학식 1)

여기서, R은 수소 원자, 알킬기, 치환 알킬기, 방향족기 등의 관능기일 수 있으며, 구체적으로는 하기 화학식 2로 표시되는 기를 들 수 있다.

(화학식 2)

상기 R은 보다 바람직하게는 메틸기 또는 페닐기이다. 또한, 상기 화학식 1에 있어서, R은 모두 동일할 수도 있고, R이 상이한 2종 이상의 기일 수도 있다. 상기 R이 상이한 2종 이상의 기인 경우에는, 그 폴리알킬실록산은 단독 중합체일 수도 있고, 하기 화학식 3으로 표시되는 블록 공중합체일 수도 있다.

본 실시 형태에 있어서, 중합도, 즉 상기 화학식 1에서의 n 또는 하기 화학식 3에서의 n+m의 값은 50 이하로 할 수 있지만, 바람직하게는 중합도는 1 내지 20이다. 중합도가 이 범위를 상회하면, 상온에서 점성이 매우 높아져, 균일한 분산이 곤란해진다.

(화학식 3)

상기 폴리알킬실록산으로서, 구체적으로는 중합도 1 내지 20의 디메틸폴리실록산, 디페닐폴리실록산, 폴리메틸페닐실록산, 폴리메틸에폭시프로필실록산을 들 수 있다.

폴리알킬실록산의 시판품(제품)의 예로서는, TSF451, THF450, FQF501, YSA6403, TSA720, YSA02, TSA750, TSA750S, YSA6406, TSA780, TSA7341, TSA739, TSA732, TSA732A, TSA772, TSA730, TSA770, TSA775, YMA6509, TSA737B, TSA737S, TSA737F(이상 GE 도시바 실리콘사 제조), KM-73, KM-73A, KM-73E, KM-70, KM-71, KM-75, KM-85, KM-72, KM-72F, KM-72S, KM-72FS, KM-89, KM-90, KM-98, KM-68-1F, KS-508, KS-530, KS-531, KS-537, KS-538, KS-66, KS-69, KF-96, KS-604, KS-6702, FA-630, KS-602A, KS-603, FA-600, KM-88P, KM-91P, KM-601S(이상, 신에쓰 실리콘사 제조), SH200, SH203, FS1265, SH5500, SC5540, BY28-503, SH7PA, SH5510, SH5561, SH5507, SH8730, SM5511, SM5571, SM5515, SM5512, DC200, FS1265, DC71, DC74, DB-100, F-16, DC75, 1266, 1283, DKQ1-1183, DKQ1-1086, DKQ1-071, 80, 544, EPL, 025, 1224, 1233, DKQ1-1247, 013A, 1277, CE, C-에멀전(Emulsion), AFE, 92, 93, DB-110N, DC2-4248S(도레이 다우코닝사 제조)를 들 수 있다. 또한, 상술한 각종 폴리알킬실록산은 단독으로 또는 2종 이상 혼합하여 사용할 수도 있다.

또한, 본 발명의 측정 시약에 실리콘계 소포제로서, 디메틸폴리실록산에 반응기를 도입한 변성 실리콘, 메틸폴리실록산을 포함하는 소수기와 폴리알킬렌옥사이드를 포함하는 친수기로 구성되고, 계면 활성제와 유사한 구조를 갖는 실리콘 계면 활성제, 및 실리콘 레진으로 이루어지는 군 중에서 소포 작용을 갖는 것을 선택하여 함유시킬 수도 있고, 이들의 혼합물은 본 발명의 실리콘계 소포제에 포함된다.

본 발명의 실리콘계 소포제로서 이용되는 실리콘 제품의 제형(형상, 성상으로부터의 분류)의 예로서는, 오일형, 오일 컴파운드형, 용액형, 자기 유화형, 에멀전형 등을 들 수 있다. 일반적으로, 오일형은 실리콘 오일 단체로 이용하는 것을 가리키며, 용액형은 실리콘 오일을 유기 용제에 희석한 것을 가리킨다. 컴파운드형은 실리콘 오일에 미분말 실리카 등을 배합한 것을 가리키고, 에멀전형은 실리콘 오일을 비이온성 계면 활성제 등으로 유화한 것을 가리킨다. 자기 유화형은 실리콘 오일의 구조 중에 알킬렌옥시기 등을 도입한 것을 가리키며, 변성 실리콘 오일 등이라고도 불리는 것을 포함한다. 분말형은 실리콘 오일을 흡유성의 분말에 흡착시켜 분체화한 것이다. 이들 중, 자기 유화형 및 에멀전형의 실리콘계 소포제가 본 발명의 측정 시약 중에 유화되어 안정적으로 분산하기 쉬워 바람직하게 사용할 수 있다. 또한, 본 명세서에 있어서 「실리콘」이란 단어와 「실리콘 오일」이란 단어는 특별히 언급하지 않는 한 관용적으로 이용하고 있다.

본 발명의 실리콘계 소포제의 조성을 예시하면, 디메틸 실리콘, 변성 실리콘, 실리콘 오일+용제, 실리콘 오일+실리카, 수용성 실리콘/수용성 유기물, 실리콘 컴파운드·유화제·물 등을 들 수 있다.

본 발명의 측정 시약에 있어서 실리콘계 소포제로서 이용되는 실리콘 제품은, 예를 들면 모멘티브 퍼포먼스 머터리얼즈 재팬 고도 가이샤, 도레이 다우코닝 실리콘 가부시끼가이샤, 신에쓰 가가쿠 고교 가부시끼가이샤, 빅케미 재팬 가부시끼가이샤 등으로부터 시판되고 있다(또한, 본 명세서에서는 제조회사와 판매회사를 특별히 구별하지 않음). 소포 작용을 갖는 실리콘 제품 중에서 측정 시약의 주반응으로의 영향이나 시액의 안정성을 검증한 후에 최적의 것을 선택하여 적절히 이용할 수 있다. 또한, 본 발명에서의 실리콘(silicone)은 실리콘(silicon)이라 칭해지는 경우도 있다.

상기한 실리콘계 소포제의 시판품 중, GE 도시바 실리콘사 또는 모멘티브 퍼포먼스 머터리얼즈 재팬 고도 가이샤로부터 입수 가능한 YSA6406(자기 유화하는 오일 컴파운드형 실리콘계 소포제: 알킬 변성 실리콘 오일, 폴리에테르 변성 실리콘, 실리카, 유화제 등을 함유함)이나 TSA7341(에멀전형 소포제: 폴리알킬실록산, 실리카 등을 함유함), TSA775(에멀전형 소포제: 폴리알킬폴리실록산, 폴리에테르 변성 실리콘 오일, 실리카, 유화제 등을 함유함)를 바람직한 예로서 들 수 있다.

상기 실리콘 제품은 많은 경우, 공업용이나 식품 첨가용과 같이 용도에 따라 분류되어 있지만, 임상 검사 시약용이라는 카테고리는 존재하지 않고 적용을 위한 지표도 존재하지 않는다. 따라서, 본 발명에서는 우선 적용하고 싶은 측정 시약에 있어서 각종 실리콘계 소포제 첨가시의 측정 감도의 변동을 확인하고, 영향이 작은 성분을 선택하는 것이 바람직하다.

본 발명의 측정 시약에 포함되는 실리콘계 소포제의 양은 항원-항체 반응 등의 주반응에 강한 영향을 미치지 않고, 시액의 안정성에 영향을 주지 않는 것을 한도로 하며 제한은 없다. 실리콘계 소포제의 첨가 농도에 대해서는, 소포 효과 등을 지표로 하면서 실험적으로 바람직한 양을 결정할 수 있다. 소포 효과는, 예를 들면 상기 시액을 격렬히 진탕했을 때에 액면이나 기벽에 지속성의 기포를 발생시키지 않는 점이나, 상기 시액과 기포성(起泡性) 용액을 혼화하면 기포의 발생이 억제되게 되는 점 등을 지표로 하여 용이하게 확인할 수 있다. 실리콘계 소포제의 일반적인 함량으로서는 0.0001 내지 0.1％가 적당하고, 바람직하게는 0.001％ 내지 0.01％이다.

(응집 측정 시약)

본 발명의 측정 시약에 있어서, 불용성 담체에, 측정 대상 물질에 대한 고친화성 물질 또는 측정 대상 물질 유사 물질을 담지시킨 경우를 특별히 응집 측정 시약이라 한다. 본 발명의 응집 측정 시약에 있어서, 불용성 담체 입자에 담지되는 물질로서는, 단백질, 펩티드, 아미노산, 지질, 당질, 핵산, 합텐 등을 들 수 있고, 분자량의 고저 및 천연, 합성과 같은 유래에 특별히 제한은 없지만, 측정 대상 물질의 농도에 비례하여 응집이 증대하는 이른바 응집법에 있어서는, 측정 대상 물질에 대한 고친화성 물질로서 폴리클로날 항체, 모노클로날 항체(재조합형 항체 및 각 항체의 기능성 단편을 포함함)나 천연형 및 재조합형 항원의 이용이 일반적이고, 측정 대상 물질의 농도에 비례하여 응집이 감소하는 응집 저지법에 있어서는, 측정 대상 물질 및 그의 유연체(類緣體) 및 이들의 단편의 이용이 일반적이다. 각 물질의 담지 방법에 대해서는 물리 흡착, 화학 결합, 친화성에 의한 결합 등 모두 이용할 수 있다. 또한, 본 명세서에 있어서, 상기한 「측정 대상 물질 및 그의 유연체 및 이들의 단편」을 총칭하여 「측정 대상 물질 유사 물질」이라 할 수도 있다.

(불용성 담체 입자)

본 발명의 측정 시약에 있어서 불용성 담체 입자로서 이용되는 소재는, 검사 시약의 성분으로서 이용 가능한 물질이면 특별히 제한은 없지만, 구체적으로는 라텍스, 금속 콜로이드, 실리카, 카본 등을 들 수 있다. 불용성 담체 입자의 크기는 본 발명의 입자 응집 측정법 및 시약의 검출 원리에 따라 0.05 내지 1 μm까지 적절히 선택할 수 있지만, 자동 분석 장치에서의 광학적 측정에 있어서는 평균 입경 0.1 내지 0.4 μm가 범용되고 있고, 바람직하게는 0.1 내지 0.2 μm이다. 불용성 담체 입자의 평균 입경은 입도 분포계나 투과형 전자 현미경상 등으로 확인할 수 있다.

(균질 측정법의 그 밖의 시약 성분)

본 발명의 균질 측정 시약은 반응의 주성분 외에, 시료의 pH, 이온 강도, 삼투압 등을 완충하는 성분으로서, 예를 들면 아세트산, 시트르산, 인산, 트리스, 글리신, 붕산, 탄산 및 굿 완충액이나 이들의 나트륨염, 칼륨염, 칼슘염 등, 또는 NaCl, KCl 등의 무기염을 포함할 수도 있다. 또한, 불용성 담체 입자의 응집 형성을 증강시키는 성분으로서 폴리에틸렌글리콜, 폴리비닐피롤리돈, 인지질 중합체 등의 고분자를 포함할 수도 있다. 또한, 응집의 형성을 컨트롤하는 성분으로서, 단백질, 아미노산, 당류, 금속염류, 계면 활성제류, 환원성 물질이나 무질서유발(chaotropic) 물질 등 범용되는 성분을 1 종류, 또는 복수의 성분을 조합하여 포함할 수도 있다. 본 발명의 측정 시약에 있어서는, 기포성을 갖는 성분에 대해서도 문제없이 적용할 수 있다. 또한, 상기 중 어느 하나의 경우이더라도 본 발명의 측정 시약을 구성하는 각 시약 중에 첨가되어 있는 단백질의 농도는 2 w/v％ 미만이고, 자동 분석 장치에 의한 측정시(검체와 시액의 총액량 중)에서의 최종 농도는 1 w/v％ 미만이다.

상기 단백질의 농도에 관한 기재는 반응의 주성분 이외의 성분에 관한 기재이고, 불용성 담체 입자에 담지되어 있는 단백질(측정 대상 물질에 대한 고친화성 물질 또는 측정 대상 물질 유사 물질) 및 블로킹을 위해 피복되어 있는 단백질은 상기 농도에는 포함되지 않는다.

(측정 시료 및 측정 대상)

본 발명의 응집 측정 시약은 다양한 생물 유래 시료를 측정 시료로 할 수 있고 특별히 한정되지 않는다. 예를 들면, 혈액, 혈청, 혈장, 뇨 등의 체액을 바람직한 예로서 들 수 있다. 측정 대상으로서는 단백질, 펩티드, 아미노산, 지질, 당질, 핵산, 합텐 등을 들 수 있지만, 이론적으로 측정 가능한 분자이면 특별히 제한은 없다. 예로서 CRP(C 반응성 단백질), Lp(a), MMP3(매트릭스 메탈로프로테이나아제 3), 항 CCP(환상 시트룰린화 펩티드) 항체, 항인지질 항체, RPR, IV형 콜라겐, PSA, BNP(뇌성 나트륨 이뇨 펩티드), NT-proBNP, 인슐린, 마이크로알부민, 시스타틴 C, RF(류마티스 인자), CA-RF, KL-6, PIVKA-II, FDP, D 이량체, SF(가용성 피브린), TAT(트롬빈-안티트롬빈 III 복합체), PIC, PAI, XIII 인자, 펩시노겐 I·II나, 페니토인, 페노바르비탈, 카르바마제핀, 발프로산, 테오필린 등을 들 수 있다.

(측정 시약의 구성 및 사용 방법)

본 발명의 자동 분석 장치용 측정 시약은 하나 또는 둘 이상의 구성 시약에 의해 구성된다. 그 중 하나의 구성 시약은 상술한 불용성 담체 입자를 포함하고, 해당 구성 시약과 동일한 구성 시약 또는 상이한 구성 시약은 실리콘계 소포제를 포함한다. 여기서 실리콘계 소포제는 모든 구성 시약에 포함되어 있을 수도 있고, 측정시의 혼액 상태에서 소포 효과를 발휘할 수 있으면, 구성 시약 중 어느 하나에 선택적으로 포함될 수도 있다. 구성 시액의 일부에 선택적으로 실리콘계 소포제가 포함되는 경우에는, 실리콘계 소포제를 포함하는 구성 시액과 그 밖의 구성 시액을 검체 측정시와 동일한 액량비로 혼화한 후, 상기 혼액을 격렬히 진탕하고, 액면이나 기벽에 지속성의 기포를 발생시키지 않는 것을 지표로 하여, 그의 소포 효과를 용이하게 확인할 수 있다. 또한, 상기한 바와 같이 본 발명 측정 시약을 구성하는 각 구성 시약 중의 단백질 농도는 2 w/v％ 미만이고, 자동 분석 장치에 의한 측정시(검체와 시액의 총액량 중)에서의 최종 농도는 1 w/v％ 미만이 되도록 설계되어 있다.

(측정 시약의 사용 방법)

본 발명의 측정 시약이 제1 시약 및 제2 시약의 두 구성 시약을 포함하고, 불용성 담체가 어느 한쪽의 시약에 함유되어 있는 경우, 측정에 사용할 때의 제1 시약과 제2 시약의 액량비는 4:1 내지 1:1이 바람직하다. 자동 분석 장치에 의해 분취되는 검체 및 시액의 총액량은 300 μL 미만이고, 불용성 담체 입자를 함유하는 시액량이 총액량의 20 v/v％ 이상 50 v/v％ 이하이다. 여기서 측정 대상 물질에 대한 고친화성 물질 또는 측정 대상 물질 유사 물질을 담지시킨 불용성 담체 입자의 자동 분석 장치에 의한 측정시(검체와 시액의 총액량 중)의 농도는 0.05 내지 0.3 w/v％이다.

<실시예>

이하, 실시예에 의해 본 발명을 상세히 설명하지만, 본 발명은 이들로 한정되는 것은 아니다.

〔실시예 1〕 매트릭스 효과의 감소

본 발명에 따른 매트릭스 효과의 감소를 확인하였다.

(1) 시약: SS 타입 퓨어 오토(등록상표) S CRP 라텍스(세키스이 메디칼사 제조)

(1-1) 제1 시약

(i) 대조 시약 1

SS 타입 퓨어 오토(등록상표) S CRP 라텍스 완충액 제1액

(ii) 본 발명 시약 1

대조 시약 1에, 실리콘계 소포제 YSA6406(모멘티브 퍼포먼스 머터리얼즈 재팬 고도 가이샤 제조)을 최종 농도 0.001％가 되도록 첨가하여 본 발명 시약 1로 하였다.

(1-2) 제2 시약

SS 타입 퓨어 오토(등록상표) S CRP 라텍스 라텍스 시액 제2 액

또한, 본 제2 시약 중의 단백질 농도는 0.3 w/v％ 정도였다.

(1-3) 캘리브레이터

SS 타입 퓨어 오토(등록상표) S CRP 라텍스 캘리브레이터

(2) 자동 분석 장치: TBA120FR(도시바 메디칼 시스템즈사 제조)

파라미터 조건

(i) 액량: 검체-제1 시약(대조 시약 1 또는 본 발명 시약 1)-제2 시약

조건 A: 3 μL-210 μL-70 μL,

조건 B: 2.5 μL-175 μL-58 μL,

조건 C: 2 μL-140 μL-47 μL

(ii) 분석법: 레이트법(측광 포인트 19-28)

(iii) 측정 파장: 604 nm

(iv) 캘리브레이션: 스플라인

(3) 측정 시료

혈청 검체: CRP 농도 0.5 mg/dL

모의 검체: CRP 농도 0.5 mg/dL, 0.1％ BSA를 포함하는 20 mM 트리스-염산 완충액(pH 7.5), 혈청 성분을 포함하지 않음.

(4) 측정 방법

2 종류의 제1 시약(대조 시약 1, 본 발명 시약 1)을 사용하고, 검체 및 시약의 양비를 고정하여 반응시의 총액량만을 변동시킨 3종의 파라미터(조건 A 내지 C)로 2 종류의 검체(혈청 검체, 모의 검체)를 각각 5회 연속 측정하여 평균치 및 변동 계수를 산출하고, 정확성과 재현성을 확인하였다.

표 1에 측정 결과를 나타내었다. 대조 시약 1에서의 2종의 검체의 측정 정밀도를 비교하면, 조건 A 내지 C 중 어디에서나 혈청 검체와 모의 검체의 측정 재현성에 차이가 보였고, 혈청 성분을 포함하지 않는 모의 검체의 재현성은 변동계수 5％ 전후로 현저히 불량하였다. 또한, 혈청 검체의 측정 재현성은 조건 A 내지 C 중 어디에서나 양호했지만, 총액량을 감량시킨 조건 C에 있어서 모의 검체와 비교하면, 측정치가 10％ 이상 저하되어 있어 정확성의 불량이 보였다. 이상의 결과로부터, 대조 시약 1의 측정 정밀도는 검체 유래의 매트릭스 성분에 의해 큰 영향을 받고 있는 것으로 생각되었다. 한편, 본 발명 시약 1에서의 2종의 검체의 측정 정밀도를 비교하면, 조건 A 내지 C 중 어디에서나 검체종을 막론하고 측정치의 정확성, 재현성은 거의 동등하여 대조 시약 1에서 보인 혈청 검체와 모의 검체(혈청 성분을 포함하지 않음)의 측정치의 차이는 축소되어 있었다. 특히, 조건 C에서의 혈청 검체와 모의 검체의 측정치의 차이는 3％가 되어, 본 발명 시약 1에 의한 차이의 축소는 현저하였다. 이상으로부터, 대조 시약 1에 있어서는 검체 중의 성분에 따라 반응의 재현성이 다를 뿐만 아니라 총액량의 조건에 따라서는 측정치 자체가 변화되어 매트릭스의 영향이 큰 데 반해, 본 발명 시약 1에 있어서는 시료의 성분에 관계없이 동등한 성능이 유지되고 있는 것이 확인되었다.

〔실시예 2〕 총액량 변동에 의한 영향의 감소

본 발명에 따른 매트릭스 효과의 개선을 확인하였다.

(1) 시약 및 자동 분석 장치

측정 시료로서, 혈청 검체 A 및 B를 사용하는 것 이외에는 실시예 1에 기재된 제1 시약((i) 대조 시약 1, (ii) 본 발명 시약 1), 제2 시약, 캘리브레이터, 자동 분석 장치, 파라미터 조건을 사용하였다.

또한, 파라미터 조건 중 액량만 다시 게재한다.

조건 A: 3 μL-210 μL-70 μL(총액량: 283 μL),

조건 B: 2.5 μL-175 μL-58 μL(총액량: 235.5 μL),

조건 C: 2 μL-140 μL-47 μL(총액량: 189 μL)

(2) 측정 방법

2 종류의 제1 시약(대조 시약 1, 본 발명 시약 1)을 사용하고, 검체 및 시약의 양비를 고정하여 반응시의 총액량만을 변동시킨 3종의 파라미터(조건 A 내지 C)로 혈청 검체 A 및 B를 각각 5회 연속 측정하였다.

도 1에 측정 결과를 나타내었다. 대조 시약 1에 있어서는, 2종의 검체 모두 총액량의 감량에 따라 측정치가 변동(본 실시예에서는 저하)하고 있어, 대조 시약 1은 총액량의 영향을 받고 있는 것으로 생각되었다. 한편, 본 발명 시약 1에 있어서는, 조건 A 내지 C 중 어디에서나 혈청 검체 A 및 B의 측정치는 거의 일정하였다. 이상으로부터, 대조 시약 1은 정확한 측정치를 산출하는 데 어느 레벨 이상의 총액량을 요하는 데 반해, 본 발명 시약 1은 총액량의 조건에 상관없이 정확한 측정치를 나타내는 것이 확인되었다.

〔실시예 3〕 자동 분석 장치의 교반 장치에 의한 영향의 감소(1)

SS 타입 퓨어 오토(등록상표) S CRP 라텍스(세키스이 메디칼사 제조)를 이용하고, 9000 시리즈 히타치 자동 분석 장치(히타치 하이테크놀로지즈사 제조. 반응조 중의 반응액을 초음파에 의해 진동시켜, 반응액을 혼화하는 방식의 교반·혼화 기능을 탑재)에서의 측정으로, 본 발명에 따른 정밀도 향상을 확인하였다.

(1) 시약: SS 타입 퓨어 오토(등록상표) S CRP 라텍스

(1-1) 제1 시약

(i) 대조 시약 1

실시예 1에 기재된 대조 시약 1

(ii) 본 발명 시약

대조 시약 1에, 실리콘계 소포제 YSA6406 또는 TSA7341(모멘티브 퍼포먼스 머터리얼즈 재팬 고도 가이샤 제조)을 각각 최종 농도 0.001％가 되도록 첨가하여, 각각 본 발명 시약 1, 2로 하였다.

(1-2) 제2 시약

실시예 1에 기재된 제2 시약

(1-3) 캘리브레이터

실시예 1에 기재된 캘리브레이터

(2) 자동 분석 장치: 히타치 자동 분석 장치 9000

초음파에 의한 진동을 이용한 비접촉 방식에 의해, 반응조 중의 혼액 교반을 행한다.

파라미터 조건

(i) 액량: 검체-제1 시약-제2 시약: 3 μL-150 μL-50 μL

(ii) 분석법: 2 포인트 엔드법(측광 포인트 38-70)

(iii) 측정 파장: 주파장 570 nm/부파장 800 nm

(iv) 캘리브레이션: 스플라인

(3) 측정 시료

혈청 검체 1, 2

(4) 측정 방법

제1 시약으로서 대조 시약 1, 본 발명 시약 1 또는 2를 이용하고, 9000 시리즈 히타치 자동 분석 장치로 검체 5회 연속 측정시의 동시 재현성을 비교하였다.

표 2에 나타낸 바와 같이 혈청 검체 1, 2의 측정 재현성은 대조 시약에서의 변동계수(％) 3.90, 1.43인 데 반해, 본 발명 시약 1에서는 각각 1.73, 0.68, 본 발명 시약 2에서는 각각 2.52, 0.54로, 어느 것에서나 재현성의 향상이 보였다.

〔실시예 4〕 자동 분석 장치의 교반 장치에 의한 영향의 감소(2)

실시예 3에 기재된 본 발명 시약 1 및 2를 이용하여, 자동 분석 장치 코아프레스타 2000(세키스이 메디칼사 제조. 검체, 시약을 분주하는 프로브로부터의 용액 토출력을 이용하여 반응액을 혼화하는 방식 및 반응조 자체를 진탕하여 반응액을 혼화하는 방식의 교반·혼화 기능을 탑재)의 측정에서의 정밀도 향상을 확인하였다.

(1) 시약: 실시예 1과 동일.

(2) 자동 분석 장치: 코아프레스타 2000

반응조를 직접 진탕하여 혼액 교반을 행하는 모드를 이용하였다.

파라미터 조건

(i) 액량: 검체-제1 시약-제2 시약: 3 μL-150 μL-50 μL

(ii) 분석법: 엔드법(측광 포인트 4-33)

(iii) 측정 파장: 570 nm

(iv) 캘리브레이션: 스플라인

(3) 측정 시료: 실시예 3과 동일．

(4) 측정 방법

본 발명 시약 1 및 2와 대조 시약을 이용하여 코아프레스타 2000으로 검체 5회 연속 측정시의 동시 재현성을 비교하였다.

표 3에 나타낸 바와 같이 혈청 검체 1, 2의 측정 재현성은 대조 시약에서의 변동계수(％) 1.47, 1.19인 데 반해, 본 발명 시약 1에서는 각각 0.92, 0.84, 본 발명 시약 2에서는 각각 0.67, 1.17로, 모두 재현성의 향상이 보였다.

본 결과로부터, 교반·혼화의 사양이 상이한 자동 분석 장치에 있어서도 본 발명의 시약에 의한 측정 정밀도의 향상이 확인되었다.

이상의 결과로부터 실리콘계 소포제를 함유하는 본 발명의 측정 시약은 비접촉형의 교반 기구를 채용한 자동 분석 장치에 있어서, 종래의 측정 시약보다 재현성이나 정확성과 같은 측정 정밀도가 향상되어 있는 것이 확인되었다.

본 발명에 의해, 검체 유래의 매트릭스 효과를 받지 않고, 자동 분석 장치의 사양에 상관없이 고정밀도로 측정이 가능한, 불용성 담체 입자를 이용한 균질 측정법에 기초한 자동 분석 장치용의 응집 측정 시약을 제공하는 것이 가능해졌다.

Claims

불용성 담체 입자를 이용하는 자동 분석 장치용 균질 측정법에 기초한 면역 응집 측정 시약으로서, 상기 불용성 담체 입자가 측정 대상 물질에 대한 고친화성 물질, 또는 측정 대상 물질, 그의 유연체 또는 이들의 단편을 담지시킨 불용성 담체 입자이고, 구성 시약 중에 실리콘계 소포제를 함유하며,
상기 구성 시약 중의 단백질 농도는 2 w/v％ 미만이고, 자동 분석 장치에 의해 분취되는 검체 및 시약액의 총액량이 300 μL 미만이면서 불용성 담체 입자를 함유하는 시약액량이 총액량의 20 v/v％ 이상 50 v/v％ 이하인 경우에 이용되며,
여기서 상기 불용성 담체 입자는 라텍스인 것을 특징으로 하는 측정 시약.
제1항에 있어서, 실리콘계 소포제가 오일형, 오일 컴파운드형, 용액형, 자기 유화형, 에멀전형 및 이들의 혼합물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 측정 시약.
제1항 또는 제2항에 있어서, 구성 시약 중의 실리콘계 소포제의 농도가 0.0001 내지 0.1％인 측정 시약.
제1항 또는 제2항에 있어서, 자동 분석 장치가 교반 및/또는 혼화 기능을 갖고, 해당 기능의 사양이 직접형 또는 비접촉형인 측정 시약.
제4항에 있어서, 직접형의 교반 및/또는 혼화 기능의 사양이,
프로브를 반응액 중에서 회전시켜 교반하고 반응액을 혼화하는 방식, 또는 피에조 소자 진동 프로브가 발생하는 진동을 이용하여 반응액을 혼화하는 방식이고,
비접촉형의 교반 및/또는 혼화 기능의 사양이,
반응조 중의 반응액을 초음파에 의해 진동시켜 반응액을 혼화하는 방식, 검체나 시약을 분주하는 프로브로부터의 용액 토출력을 이용하여 반응액을 혼화하는 방식, 또는 반응조 자체를 진탕하여 반응액을 혼화하는 방식인 측정 시약.
자동 분석 장치를 사용한 균질 측정법에 기초한 면역 응집 측정법으로서, 이하의 공정을 포함하는 측정법:
(1) 측정 대상 물질을 포함하는 검체 및 시약을 분취하는 공정 (여기서, 상기 시약은 하나 또는 복수의 구성 시약을 포함하고, 상기 구성 시약 중 적어도 하나가 불용성 담체 입자를 포함하며, 구성 시약 중의 단백질 농도가 2 w/v％ 미만이고, 상기 불용성 담체 입자가 측정 대상 물질에 대한 고친화성 물질, 또는 측정 대상 물질, 그의 유연체 또는 이들의 단편을 담지시킨 불용성 담체 입자이고, 상기 구성 시약 중 적어도 하나가 실리콘계 소포제를 포함함);
(2) 검체 및 시약의 총액량이 300 μL 미만이면서 불용성 담체 입자를 함유하는 시약액량이 총액량의 20 v/v％ 이상 50 v/v％ 이하가 되도록 혼화하는 공정; 및
(3) 상기 측정 대상 물질을 검출하는 공정,
여기서, 상기 불용성 담체 입자는 라텍스임.
제6항에 있어서, 실리콘계 소포제가 오일형, 오일 컴파운드형, 용액형, 자기 유화형, 에멀전형 및 이들의 혼합물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 측정법.
제6항 또는 제7항에 있어서, 자동 분석 장치가 교반 및/또는 혼화 기능을 갖고, 해당 기능의 사양이 직접형 또는 비접촉형인 측정법.
제8항에 있어서, 직접형의 교반 및/또는 혼화 기능의 사양이,
프로브를 반응액 중에서 회전시켜 교반하고 반응액을 혼화하는 방식, 또는 피에조 소자 진동 프로브가 발생하는 진동을 이용하여 반응액을 혼화하는 방식이고,
비접촉형의 교반 및/또는 혼화 기능의 사양이,
반응조 중의 반응액을 초음파에 의해 진동시켜 반응액을 혼화하는 방식, 검체나 시약을 분주하는 프로브로부터의 용액 토출력을 이용하여 반응액을 혼화하는 방식, 또는 반응조 자체를 진탕하여 반응액을 혼화하는 방식인 측정법.
삭제
삭제
삭제
삭제