KR101620654B1

KR101620654B1 - 제2 항증식제와 조합하여 （-）-트랜스-3-（5,6-디하이드로-4ｈ-피롤로［3,2,1-ｉｊ］퀴놀린-1-일）-4-（1ｈ-인돌-3-일）피롤리딘-2,5-디온을 포함하는 조성물

Info

Publication number: KR101620654B1
Application number: KR1020117021339A
Authority: KR
Inventors: 토마스 씨 케이 챤; 데니스 에스 프랑스; 겐이치 이시이; 파올로 푸치
Original assignee: 아르퀼 인코포레이티드; 교와 핫꼬 기린 가부시키가이샤
Priority date: 2009-02-12
Filing date: 2010-02-11
Publication date: 2016-05-12
Also published as: AU2010213696A1; BRPI1007972A2; JP5687209B2; AU2010213696B2; TW201043626A; CN102481299A; US9642847B2; CA2752232A1; JP2012517477A; WO2010093789A8; CA2752232C; KR20110118817A; IL214348A0; EP2396003B1; US20150328208A1; HK1164159A1; US20100297075A1; ZA201105611B; WO2010093789A2; TWI460178B

Abstract

본 발명은 세포 증식성 질환의 치료를 필요로 하는 피험체에게 치료 유효량의 피롤로퀴놀리닐-피롤-2,5-디온 화합물 또는 피롤로퀴놀리닐-피롤리딘-2,5-디온 화합물을 치료 유효량의 제2 항증식제와 조합하여 투여하여 암과 같은 세포 증식성 질환을 치료하는 방법을 제공한다.

Description

제2 항증식제와 조합하여 （-）-트랜스-3-（5,6-디하이드로-4Ｈ-피롤로［3,2,1-ＩＪ］퀴놀린-1-일）-4-（1Ｈ-인돌-3-일）피롤리딘-2,5-디온을 포함하는 조성물{A COMPOSITION COMPRISING (-)-TRANS-3-(5,6-DIHYDRO-4H-PYRROLO[3,2,1-IJ]QUINOLIN-1-YL)-4-(1H-INDOL-3-YL)PYRROLIDINE-2,5-DIONE IN COMBINATION WITH A SECOND ANTI-PROLIFERATIVE AGENT}

관련 출원에 대한 상호 참조

본원은 2009년 2월 12 일자에 출원된 미국 가출원 제61/152,138호 및 2009년 4월 17일자에 출원된 미국 가출원 제61/170,471호의 이익을 주장한다. 이들 출원의 각각의 내용은 본원에 참조문헌으로 그 전문이 포함된다.

암은 미국에서 심장 질환에 이어 두 번째 사망 원인이다. (Cancer Facts and Figures 2004, American Cancer Society, Inc.) 최근 암의 진단 및 치료에 있어 진보가 이루어졌음에도 불구하고, 암이 초기에 발견되는 경우에는 수술 및 방사선 요법이 치유책일 수 있으나 전이 질환에 대한 현 약물 요법은 대부분 일시적 처방이고 거의 장기 치유를 제공하지 못한다. 신규 화학 요법이 시중 도입되고 있음에도 불구하고, 내성 종양의 치료에 있어 단일 요법으로 효과적이거나, 제1선 요법과 제2선 및 제3선 요법으로서의 기존의 제제와 조합되어 효과적인 신규 약물이 여전히 요구되고 있다.

암 세포는 정의상 이질적이다. 예를 들면, 단일 조직 또는 세포 유형 내에, 다중 돌연변이성 "메카니즘"이 암의 발병을 초래할 수 있다. 그러므로, 이질성은 상이한 개체에서 기원한 동일한 조직 및 동일한 형태의 종양으로부터 취한 암 세포들 사이에 빈번히 존재한다. 일부 암과 연관된, 빈번히 관찰되는 돌연변이 "메카니즘"은 상호 조직 유형별로 상이할 수 있다(예를 들면, 결장암을 유도하는, 빈번히 관찰되는 돌연변이 "메카니즘"은 백혈병을 유도하는, 빈번히 관찰되는 "메카니즘"과 상이할 수 있다). 따라서, 특정 암이 특정 화학 요법제에 반응할지의 여부를 예측하는 것은 종종 어렵다. (Cancer Medicine, 5th Edition, Bast et al. ed., B.C. Decker Inc., Hamilton, Ontario)

유방암은 여성에서 가장 흔히 진단되는 비피부암이고, 폐암 다음에 여성에서 암 사망 중에서 2번째를 차지한다. (Cancer Facts and Figures 2004, American Cancer Society, Inc.) 유방암에 대한 현행 치료 선택으로는 수술, 방사선 요법 및 타목시펜, 아로마타제 억제제, 허셉틴^®(트라추주맙), TAXOL^®(파클리탁셀), 사이클로포스파미드, 메토트렉세이트, 독소루비신(Adriamycin^®) 및 5-플루오로우라실(5-FU)과 같은 물질에 의한 화학 요법/호르몬 치료를 들 수 있다. 암 진단 및 치료에서의 개선에도 불구하고, 유방암 발병률은 1980년 이후로 계속해서 증가하고 있다. 2004년에, 여성에서 약 215,000건의 새로운 유방암 사례가 예상되며, 남성에서 약 1,450건의 새로운 유방암 사례가 예상된다. Id. 따라서, 유방암을 치료하기 위한 신규 화합물 및 방법이 필요하다.

정상 세포의 성장 및 분화를 조절하는 세포 신호전달 경로의 성분은, 이상 조절되는 경우에 세포 증식성 질환 및 암의 발병을 초래한다. 세포 신호 단백질에서의 돌연변이는 그러한 단백질이 세포 주기에서 부적절한 수준으로 또는 부적절한 시점에 발현되거나 활성화되게 할 수 있으며, 그 결과 비조절 세포 성장 또는 세포-세포 부착성의 변화를 초래할 수 있다. 예를 들면, 돌연변이, 유전자 재배열, 유전자 증폭, 및 수용체 및 리간드 양자 모두의 과다발현에 의한 수용체 티로신 키나제의 이상 조절은 인간 암의 발병 및 진행과 연루되어 왔다.

c-Met 수용체 티로신 키나제는 산란 인자로도 공지된 간세포 성장 인자(HGF)에 대한 유일하게 공지된 고친화도 수용체이다. c-Met 세포외 리간드 결합 도메인에 대한 HGF의 결합은 c-Met의 세포내 부분에서 다수의 티로신 잔기의 포스포릴화 및 수용체 다중화를 발생시킨다. c-Met의 활성화는 Gab-1, Grb-2, She 및 c-Cb1과 같은 어댑터 단백질의 결합 및 포스포릴화 및 PI3K, PLC-γ, STAT, ERK 1 및 2 및 FAK와 같은 신호 트랜스듀서를 후속적으로 활성화시킨다. c-Met 및 HGF는 인간 암에서 이상조절되고, 질환 진행 및 전이 동안 세포 성장, 종양 세포 파종 및 종양 침습의 조절곤란을 야기할 수 있다. (예를 들면, 문헌[Journal of Clinical Investigation 109: 863-867 (2002) and Cancer Cell pp 5-6 July 2004) c-Met 및 HGF는 다양한 암에서 주변 조직에 비해 고도로 발현되고, 이의 발현은 빈약한 환자 예후와 상관관계된다. (예를 들면, 문헌[Journal of Cellular Biochemistry 86: 665-677 (2002); Int. J. Cancer (Pred. Oncol) IA: 301-309 (1997); Clinical Cancer Research 9: 1480-1488 (2003); Cancer Research 62: 589-596 (2002)] 참조) 이론에 의해 구속되고자 의도함이 없이, c-Met 및 HGF는 DNA 손상 물질에 의해 유도되는 세포 사멸에 대해 종양을 보호할 수 있고, 그러므로 종양의 화학물질 저항성 및 방사성 저항성에 기여할 수 있다. 이론에 의해 구속되고자 의도함이 없이, c-Met의 억제제는 유방암을 비롯한 증식성 질환의 치료에 있어서 치료학적 물질로서 유용할 수 있다. (예를 들면 문헌[Cancer and Metastasis Reviews 22: 309-325 (2003)] 참조)

본원에 인용된 참조문헌은 청구된 본 발명에 대한 선행 기술인 것으로 인정되지 않는다.

본 발명은 세포 증식성 질환의 치료를 필요로 하는 피험체에게 치료 유효량의 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 이의 프로드럭 또는 대사물질을 1종 이상의 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제와 단독으로 또는 치료 유효량의 제2 항증식제와 1종 이상의 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제와 조합하여 투여하여 세포 증식성 질환을 치료하는 세포 증식성 질환을 치료하는 방법을 제공한다.

화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물은 (+)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온, (-)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온, (+)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 또는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온일 수 있다. 바람직하게는, 화합물은 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온이다.

제2 항증식제는 키나제 억제제, 알킬화제, 항생제, 대사길항물질, 해독제, 인터페론, 다클론 또는 단일클론 항체, HER2 억제제, 히스톤 데아세틸라제 억제제, 호르몬, 유사분열 억제제, MTOR 억제제, 탁산 또는 탁산 유도체, 아로마타제 억제제, 안트라사이클린, 미소관 표적화 약물, 토포이소머라제 활성 억제제 또는 시티딘 유사체 약물일 수 있다. 바람직하게는, 키나제 억제제는 세린/트레오닌 키나제 억제제 또는 티로신 키나제 억제제이다. 바람직한 키나제 억제제로는 소라페닙, 수니티닙, 엘로티닙, 이마티닙 및 게피티닙을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 바람직한 알킬화제로는 시스플라틴 또는 카르보플라틴을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 바람직한 대사길항물질로는 젬시타빈, 플루오로우라실(5-FU), TS-1 또는 카페시타빈을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 바람직한 유사분열 억제제로는 캄프토테신 또는 이리노테칸을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 바람직한 탁산 또는 탁산 유도체로는 파클리탁셀 또는 도세탁셀을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

세포 증식성 질환은 전암 상태 또는 암일 수 있다. 세포 증식성 질환은 혈액 종양 또는 악성 종양 또는 고형 종양(또는 종양들)일 수 있다. 암의 치료 방법은 종양 크기의 감소를 포함한다. 대안적으로 또는 또한, 암은 전이 암이고, 이 치료 방법은 전이 암 세포 침습의 억제를 포함한다. 상기 방법은 추가로 방사선 요법을 포함할 수 있다. 암은 폐암, 소세포 폐암, 비소세포 폐암(NSCLC: non-small cell lung cancer), 결장암, 유방암, 췌장암, 전립선암, 신장암, 자궁경부암, 뇌암, 위암(gastric/stomach cancer), 자궁암, 장암, 간암, 만성 골수성 백혈병, 흑색종, 난소암, 전좌 관련 신세포 암종(RCC: renal cell carcinoma), 폐포성 연부 육종(ASPS), 투명 세포 육종(CCS: clear cell sarcoma) 또는 간세포 암종(HCC: hepatocellular carcinoma)일 수 있다.

증식성 질환을 갖는 세포는 c-Met 코딩 DNA를 포함할 수 있다. 대안적으로 또는 또한, 증식성 질환을 갖는 세포는 구성적으로 증강된 c-Met 활성을 갖는다. 바람직하게는, 세포 증식성 질환은 암, 특히 높은 수치로 c-Met를 발현하거나 활성 c-Met를 발현하는 암이다. 따라서, 본 발명은 세포가 높은 수치로 c-Met를 발현하거나 활성 c-Met를 발현하는 세포 증식성 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명은 추가로 단백질 키나제 C의 활성을 현저히 억제하지 않고 c-Met의 활성을 선택적으로 조절하는 것을 포함하는 세포 증식성 질환의 치료 방법을 제공한다.

바람직하게는, 피험체는 포유동물이다. 더 바람직하게는, 피험체는 인간이다.

바람직하게는, 본원에 기재된 방법의 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물은 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온이고, 2 일 제공되는 360 ㎎의 용량으로 투여한다. 대안적으로, 조성물을 720 ㎎의 최대 1일 용량으로 투여한다.

바람직하게는, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 제2 항증식제를 정맥내, 경구 또는 복강내 투여한다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 포함하는 조성물의 투여와 동시에, 투여 전에 또는 투여 후에 제2 항증식제를 투여할 수 있다. 바람직하게는, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 포함하는 조성물을 투여한 후 24 시간 내에 제2 항증식제를 투여한다.

또한, 본 발명은 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 이의 프로드럭 또는 대사물질을 포함하는 조성물 및 제2 항증식제를 포함하는 개개의 바이알을, 상기 조성물 및 제2 항증식제를 투여하기 위한 설명서와 함께 포함하는, 피험체에서 세포 증식성 질환을 치료하기 위한 키트를 제공한다.

달리 정의되지 않은 한, 본원에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야가 통상 이해하는 동일한 의미를 갖는다. 명세서에서, 단수 형태는 또한 상황이 달리 명확히 기술하지 않는 한 복수를 포함한다. 본원에 기재된 방법 및 물질과 유사한 또는 동등한 방법 및 물질을 본 발명의 실행 또는 교시에서 사용할 수 있지만, 적합한 방법 및 물질이 하기 기재되어 있다. 본원에 언급된 모든 공보, 특허 출원, 특허 및 다른 참조문헌은 참조문헌으로 포함된다. 본원에 인용된 참조문헌은 청구된 본 발명에 선행 기술인 것으로 인정되지 않는다. 상충되는 경우에, 정의를 비롯하여 본 명세서가 지배할 것이다. 추가로, 물질, 방법 및 실시예는 오직 예시이고 제한으로 의도되지 않는다.

본 발명의 다른 특징 및 이점은 하기 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용 및 특허청구범위로부터 명확하다.

도 1은 (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 화학 구조를 도시한 것이다.
도 2a 및 도 2b는 약리학적 상승 작용을 평가하기 위해 사용되는 계산 도구의 평가에 사용되는 도면이다. 도 2a 패널은 조합 지수(CI) 계산을 보여주는 것이고, 도 2b 패널은 약효등효도(isobologram) 분석 그래프를 보여주는 것이다.
도 3은 NCI-H522 NSCLC 이종이식편 모델에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙의 항증식성 효과를 보여주는 그래프이다.
도 4는 다양한 암 세포주에 대한 소라페닙 및 수니티닙과 조합된 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 조합 항증식성 효과를 보여주는 그래프이다.
도 5는 다양한 암 세포주에 대한 소라페닙 및 수니티닙과 조합된 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 조합 항증식성 효과를 보여주는 예시이다.
도 6은 NCI-H441 인간 폐 종양 이종이식편 모델에서 엘로티닙과 조합된 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 항증식성 효과를 보여주는 그래프이다.
도 7은 NCI-H441 인간 폐 종양 이종이식편 모델에서 게피티닙과 조합된 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 항증식성 효과를 보여주는 그래프이다.
도 8은 췌장 세포주에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 젬시타빈의 조합 치료에 대한 용량 반응 곡선을 보여주는 그래프이다.
도 9는 비히클(대조군), (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(A 제제), 도세탁셀(DTX) 또는 이들의 조합의 다양한 용량에 의한 치료 이후 이의 초기 체적의 비(V/Vo)로서 이종이식편 모델에서 MKN-45 인간 위 종양의 체적을 도시한 그래프이다. #는 스튜던트 t 검정에 의한 DTX 치료 단독에 대한 p<0.05를 나타낸다. ##는 스튜던트 t 검정에 의한 DTX 치료 단독에 대한 p<0.01을 나타낸다.
도 10은 비히클, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(A 제제), 도세탁셀(DTX) 또는 이들의 조합의 다양한 용량에 의한 치료 이후 이의 초기 체적의 비(V/Vo)로서 이종이식편 모델에서 Hsc-39 인간 위 종양의 체적을 도시한 그래프이다. #는 스튜던트 t 검정에 의한 DTX 치료 단독에 대한 p<0.05를 나타낸다. ##는 스튜던트 t 검정에 의한 DTX 치료 단독에 대한 p<0.01을 나타낸다.
도 11은 비히클, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(A 제제), 5-FU 또는 이들의 조합의 다양한 용량에 의한 치료 이후 이의 초기 체적의 비(V/Vo)로서 이종이식편 모델에서 MKN-45 인간 위 종양의 체적을 도시한 그래프이다. #는 5-FU 치료 단독에 대한 p<0.05를 나타낸다. *는 스튜던트 t 검정에 의한 A 제제 치료 단독에 대한 p<0.05를 나타낸다.
도 12는 비히클, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(A 제제), TS-1 또는 이들의 조합의 다양한 용량에 의한 치료 이후 이의 초기 체적의 비(V/Vo)로서 이종이식편 모델에서 MKN-45 인간 위 종양의 체적을 도시한 그래프이다. #는 TS-1 치료 단독에 대한 p<0.05를 나타낸다. *는 스튜던트 t 검정에 의한 A 제제 치료 단독에 대한 p<0.05를 나타낸다.
도 13은 비히클, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(A 제제), 카페시타빈 또는 이들의 조합의 다양한 용량에 의한 치료 이후 이의 초기 체적의 비(V/Vo)로서 이종이식편 모델에서 MKN-45 인간 위 종양의 체적을 도시한 그래프이다. #는 카페시타빈 치료 단독에 대한 p<0.05를 나타낸다. *는 스튜던트 t 검정에 의한 A 제제 치료 단독에 대한 p<0.05를 나타낸다.
도 14는 비히클, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(A 제제), CDDP 또는 이들의 조합의 다양한 용량에 의한 치료 이후 이의 초기 체적의 비(V/Vo)로서 이종이식편 모델에서 MKN-45 인간 위 종양의 체적을 도시한 그래프이다.

1. 치료 방법

본 발명은 (a) 치료 유효량의 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 이의 프로드럭 또는 대사물질을 단독으로 또는 (b) 치료 유효량의 제2 항증식제와 조합하여 포함하는 세포 증식성 질환을 치료하기 위한 약학 조성물을 제공한다. 1종 이상의 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제는 임의로 조성물 중에 포함된다.

제2 항증식제는 바람직하게는 제2 화학치료제이다.

세포 증식성 질환은 전암 상태 또는 암일 수 있다. 세포 증식성 질환은 혈액 종양 또는 악성 종양 또는 고형 종양(또는 종양들)일 수 있다. 상기 암의 치료 방법은 종양 크기의 감소를 포함한다. 대안적으로 또는 또한, 암은 전이 암이고, 상기 치료 방법은 전이 암 세포 침습의 억제를 포함한다.

제2 화학치료제(항신생제 또는 항증식제라고도 칭함)는 www.cancer.org/docroot/cdg/cdg_O.asp에 기재된 알킬화제; 항생제; 대사길항물질; 해독제; 인터페론; 다클론 또는 단일클론 항체; EGFR 억제제; HER2 억제제; 히스톤 데아세틸라제 억제제; 호르몬; 유사분열 억제제; MTOR 억제제; 멀티키나제 억제제; 세린/트레오닌 키나제 억제제; 티로신 키나제 억제제; VEGF/VEGFR 억제제; 탁산 또는 탁산 유도체, 아로마타제 억제제, 안트라사이클린, 미소관 표적화 약물, 토포이소머라제 활성 억제제, 분자 표적 또는 효소의 억제제(예를 들면, 키나제 억제제), 시티딘 유사체 약물 또는 임의의 화학치료제, 항신생 또는 항증식제일 수 있다.

알킬화제의 예로는 사이클로포스파미드(Cytoxan; Neosar); 클로람부실(Leukeran); 멜팔란(Alkeran); 카르무스틴(BiCNU); 부술판(Busulfex); 로무스틴(CeeNU); 다카르바진(DTIC-Dome); 옥살리플라틴(Eloxatin); 카르무스틴(Gliadel); 이포스파미드(Ifex); 메클로르에타민(Mustargen); 부술판(Myleran); 카르보플라틴(Paraplatin); 시스플라틴(CDDP; Platinol); 테모졸로마이드(Temodar); 티오테파(Thioplex); 벤다무스틴(Treanda); 또는 스트렙토조신(Zanosar)을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

항생제의 예로는 독소루비신(Adriamycin); 독소루비신 리포소말(Doxil); 미톡산트론(Novantrone); 블레오마이신(Blenoxane); 다우노루비신(Cerubidine); 다우노루비신 리포소말(DaunoXome); 닥티노마이신(Cosmegen); 에피루비신(Ellence); 이다루비신(Idamycin); 플리카마이신(Mithracin); 미토마이신(Mutamycin); 펜토스타틴(Nipent); 또는 발루비신(Ⅴalstar)을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

대사길항물질의 예로는 플루오로우라실(Adrucil); 카페시타빈(Xeloda); 하이드록시우레아(Hydrea); 머캅토푸린(Purinethol); 페메트렉세트(Alimta); 플루다라빈(Fludara); 넬라라빈(Arranon); 클라드리빈(Cladribine Novaplus); 클로파라빈(Clolar); 시타라빈(Cytosar-U); 데시타빈(Dacogen); 시타라빈 리포소말(DepoCyt); 하이드록시우레아(Droxia); 프랄라트렉세이트(Folotyn); 플록수리딘(FUDR); 젬시타빈(Gemzar); 클라드리빈(Leustatin); 플루다라빈(Oforta); 메토트렉세이트(MTX; Rheumatrex); 메토트렉세이트(Trexall); 티오구아닌(Tabloid); TS-1 또는 시타라빈(Tarabine PFS)을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

해독제로는 아미포스틴(Ethyol) 또는 메스나(Mesnex)를 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

인터페론의 예로는 인터페론 알파-2b(Intron A) 또는 인터페론 알파-2a(Roferon-A)를 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

다클론 또는 단일클론 항체의 예로는 트라추주맙(Herceptin); 오파투무맙(Arzerra); 베바시주맙(Avastin); 리툭시맙(Rituxan); 세툭시맙(Erbitux); 파니투무맙(Vectibix); 토시투모맙/요오드, 토시투모맙(Bexxar); 알렘투주맙(Campath); 이브리투모맙(In-111 Zevalin); 젬투주맙(Mylotarg); 에쿨리주맙(Soliris); 이브리투모맙(Y-90 Zevalin); 데노수맙 또는 이브리투모맙(Zevalin)을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

EGFR 억제제의 예로는 게피티닙(Iressa); 라파티닙(Tykerb); 세툭시맙(Erbitux); 엘로티닙(Tarceva); 파니투무맙(Vectibix); PKI-166; 카네르티닙(CI-1033); 마투주맙(Emd7200) 또는 EKB-569를 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

HER2 억제제의 예로는 트라추주맙(Herceptin); 라파티닙(Tykerb) 또는 AC-480을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

히스톤 데아세틸라제 억제제의 예로는 보리노스타트(Zolinza)를 들 수 있지만, 이것으로 제한되지는 않는다.

호르몬의 예로는 타목시펜(Soltamox; Nolvadex); 랄록시펜(Evista); 메게스트롤(Megace); 루프롤라이드(Lupron; Lupron Depot; Eligard; Viadur); 풀베스트란트(Faslodex); 레트로졸(Femara); 트리프토렐린(Trelstar LA; Trelstar Depot); 엑세메스탄(Aromasin); 고세렐린(Zoladex); 비칼루타미드(Casodex); 아나스트로졸(Arimidex); 플루옥시메스테론(Androxy; Halotestin); 메드록시프로게스테론(Provera; Depo-Provera); 에스트라무스틴(Emcyt); 플루타미드(Eulexin); 토레미펜(Fareston); 디가레릭스(Firmagon); 닐루타미드(Nilandron); 아바레릭스(Plenaxis); 또는 테스토락톤(Teslac)을 들 수 있지만, 이것으로 제한되지는 않는다.

유사분열 억제제의 예로는 파클리탁셀(Taxol; Onxol; Abraxane); 도세탁셀(Taxotere); 빈크리스틴(Oncovin; Vincasar PFS); 빈블라스틴(Velban); 에토포사이드(Toposar; Etopopho; VePesid); 테니포사이드(Vumon); 익사베필론(Ixempra); 노코다졸; 에포틸론; 비노렐빈(Navelbine); 캄프토테신(CPT); 이리노테칸(Camptosar); 토포테칸(Hycamtin); 암사크린 또는 라멜라린 D(LAM-D)를 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

mTOR 억제제의 예로는 에버롤리무스(Afinitor) 또는 템시롤리무스(Torisel); 라파뮨, 리다포롤리무스; 또는 AP23573을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

키나제 억제제의 예로는 베바시주맙(표적 VEGF), BIBW 2992(표적 EGFR 및 Erb2), 세툭시맙/얼비툭스(표적 Erb1), 이마티닙/글레빅(표적 Bcr-Ab1, PDGFR 및 c-Kit), 트라추주맙(표적 Erb2), 게피티닙/이레사(표적 EGFR), 라니비주맙(표적 VEGF), 페갑타닙(표적 VEGF), 엘로티닙/타세바(표적 Erb1), 닐로티닙(표적 Bcr-Ab1), 라파티닙(표적 Erb1 및 Erb2/Her2), GW-572016/라파티닙 디토실레이트(표적 HER2/Erb2), 파니투무맙/벡티빅스(표적 EGFR), 반데티닙(표적 RET/VEGFR), E7080(다중 표적, 예컨대 RET 및 VEGFR), 허셉틴(표적 HER2/Erb2), PKI-166(표적 EGFR), 카네르티닙/CI-1033(표적 EGFR), 수니티닙/SU-11464/수텐트(표적 EGFR 및 FLT3), 마투주맙/Emd7200(표적 EGFR), EKB-569(표적 EGFR), Zd6474(표적 EGFR 및 VEGFR), PKC-412(표적 VEGR 및 FLT3), 바탈라닙/Ptk787/ZK222584(표적 VEGR), CEP-701(표적 FLT3), SU5614(표적 FLT3), MLN518(표적 FLT3), XL999(표적 FLT3), VX-322(표적 FLT3), Azd0530(표적 SRC), BMS-354825(표적 SRC), SKI-606(표적 SRC), CP-690(표적 JAK), AG-490(표적 JAK), WHI-P 154(표적 JAK), WHI-P131(표적 JAK), 소라페닙/넥사바(표적 RAF 키나제, VEGFR-1, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-β, KIT, FLT-3 및 RET), 다사티닙/스프라이셀(BCR/Ab1 및 Src), AC-220(표적 Flt3), AC-480(표적 모든 HER 단백질, "pan-HER"), 모테사닙 디포스페이트(표적 VEGF1-3, PDGFR 및 c-kit), 데노수맙(표적 RANKL, SRC 억제), AMG888(표적 HER3) 및 AP24534(다중 표적, 예컨대 Flt3)를 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

멀티키나제 억제제의 예로는 소라페닙(Nexavar); 수니티닙(Sutent); BIBW 2992; E7080; Zd6474; PKC-412; 모테사닙; 또는 AP24534를 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

세린/트레오닌 키나제 억제제의 예로는 에릴/에아수딜 하이드로클로라이드; 라파뮨(표적 mTOR/FRAPl); 데포롤리무스(표적 mTOR); 세르티칸/에버롤리무스(표적 mTOR/FRAP1); AP23573(표적 mTOR/FRAP1); 에릴/파수딜 하이드로클로라이드(표적 RHO); 플라보피리돌(표적 CDK); 셀리시클립/CYC202/로스코비트린(표적 CDK); SNS-032/BMS-387032(표적 CDK); 루복시스타우린(표적 PKC); Pkc412(표적 PKC); 브리오스타틴(표적 PKC); KAI-9803(표적 PKC); SF1126(표적 PI3K); VX-680(표적 Aurora 키나제); Azdl 152(표적 Aurora 키나제); Arry-142886/AZD-6244(표적 MAP/MEK); SCIO-469(표적 MAP/MEK); GW681323(표적 MAP/MEK); CC-401(표적 JNK); CEP-1347(표적 JNK); 및 PD 332991(표적 CDK)을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

티로신 키나제 억제제의 예로는 엘로티닙(Tarceva); 게피티닙(Iressa); 이마티닙(Gleevec); 소라페닙(Nexavar); 수니티닙(Sutent); 트라추주맙(Herceptin); 베바시주맙(Avastin); 리툭시맙(Rituxan); 라파티닙(Tykerb); 세툭시맙(Erbitux); 파니투무맙(Vectibix); 에버롤리무스(Afinitor); 알렘투주맙(Campath); 젬투주맙(Mylotarg); 템시롤리무스(Torisel); 파조파닙(Votrient); 다사티닙(Sprycel); 닐로티닙(Tasigna); 바탈라닙(Ptk787; ZK222584); CEP-701; SU5614; MLN518; XL999; VX-322; Azd0530; BMS-354825; SKI-606 CP-690; AG-490; WHI-P154; WHI-P131; AC-220; 또는 AMG888을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

VEGF/VEGFR 억제제의 예로는 베바시주맙(Avastin); 소라페닙(Nexavar); 수니티닙(Sutent); 라니비주맙; 페갑타닙; 또는 반데티닙을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

아로마타제 억제제의 예로는 아미노글루테쓰이미드, 테스토락톤(Teslac), 아나스트로졸(Arimidex), 레트로졸(Femara), 엑세메스탄(Aromasin), 보로졸(Rivizor), 포메스탄(Lentaron), 파드로졸(Afema), 4-안드로스테네-3,6,17-트리온(6-옥소), 1,4,6-안드로스타트리엔-3,17-디온(ATD) 및 4-하이드록시안드로스테네디온을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

안트라사이클린의 예로는 다우노루비신(Daunomycin), 독소루비신(Adriamycin), 에피루비신, 이다루비신 및 발루비신을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

시티딘 유사체의 예로는 젬시타빈, 아자시티딘(예를 들면, 5-아자시티딘) 및 시토신 아라비노사이드(cytarabin, araC, Cytosar)를 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

미소관 표적화 약물의 예로는 파클리탁셀, 도세탁셀, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 노코다졸, 에포틸론 및 나벨빈을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

토포이소머라제 활성 억제제의 예로는 테니포사이드, 에토포사이드, 아드리아마이신, 캄프토테신, 다우노루비신, 닥티노마이신, 미톡산트론, 암사크린, 에피루비신 및 이다루비신을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

탁산 또는 탁산 유도체의 예로는 파클리탁셀 및 도세탁셀을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

일반적인 화학치료, 항신생, 항증식제의 예로는 알트레타민(Hexalen); 이소트레티노인(Accutane; Amnesteem; Claravis; Sotret); 트레티노인(Vesanoid); 아자시티딘(Vidaza); 보르테조밉(Velcade), 아스파라기나제(Elspar); 레바미솔(Ergamisol); 미토탄(Lysodren); 프로카바진(Matulane); 페가스파가제(Oncaspar); 데니루킨 디프티톡스(Ontak); 포르피머(Photofrin); 알데스루킨(Proleukin); 레날리도마이드(Revlimid); 벡사로텐(Targretin); 탈리도마이드(Thalomid); 템시롤리무스(Torisel); 삼산화비소(Trisenox); 베르테포르핀(Visudyne); 미모신(Leucenol);(1 M 테가푸르-0.4 M 5-클로로-2,4-디하이드록시피리미딘-1 M 칼륨 옥소네이트) 또는 스타틴(예를 들면, 로바스타틴, 아토르바스타틴, 세리바스타틴, 플루바스타틴, 메바스타틴, 피타바스타틴, 프라바스타틴, 로수바스타틴 및 심바스타틴)을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

다른 양태에서, 제2 화학치료제는 사이토카인, 예컨대 G-CSF(과립구 콜로니 자극 인자)일 수 있다. 다른 양태에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체를 방사선 요법과 조합하여 투여할 수 있다. 방사선 요법을 또한 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 및 다수의 물질 치료의 일부로서 본원에 기재된 다른 화학치료제와 조합하여 시행할 수 있다. 또 다른 양태에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체를 표준 화학 요법 조합, 예컨대 CMF(사이클로포스파미드, 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실), CAF(사이클로포스파미드, 아드리아마이신 및 5-플루오로우라실), AC(아드리아마이신 및 사이클로포스파미드), FEC(5-플루오로우라실, 에피루비신 및 사이클로포스파미드), ACT 또는 ATC(아드리아마이신, 사이클로포스파미드 및 파클리탁셀), 리툭시맙, 젤로다(카페시타빈), 시스플라틴(CDDP), 카르보플라틴, TS-1(1:0.4:l의 몰 비의 테가푸르, 기메스타트 및 오타스타트 칼륨), 캄프토테신-11(CPT-11, 이리노테칸 또는 Camptosar™) 또는 CMFP(사이클로포스파미드, 메토트렉세이트, 5-플루오로우라실 및 프레드니손)(이들로 제한되지는 않음)과 조합하여 투여할 수 있다.

바람직한 양태에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 다형 또는 용매화물을 효소의 억제제, 예컨대 수용체 또는 비수용체 키나제와 투여할 수 있다. 본 발명의 수용체 및 비수용체 키나제는 예를 들면 티로신 키나제 또는 세린/트레오닌 키나제이다. 본 발명의 키나제 억제제는 소형 분자, 폴리핵산, 폴리펩티드 또는 항체이다.

바람직한 조합 치료는 엘로티닙과 조합되어 투여되는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온, 소라페닙과 조합되어 투여되는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온, 수니티닙과 조합되어 투여되는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온; 카페시타빈과 조합되어 투여되는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온; 카르보플라틴과 조합되어 투여되는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 시스플라틴과 조합되어 투여되는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 특정 양태에서, 피험체 또는 환자는 1일 1회 150 ㎎으로 투여되는 엘로티닙과 1일 2회 360 ㎎으로 투여되는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 조합을 투여받는다. 다른 양태에서, 피험체 또는 환자는 1일 2회 200 ㎎으로 투여되는 소라페닙과 1일 2회 360 ㎎으로 투여되는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 조합을 투여받는다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온에 대한 바람직한 제형으로는 캡슐 및 정제를 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

본 예들은 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온이 소라페닙, 수니티닙, 엘로티닙, 게피티닙, 시스플라틴, 카르보플라틴 또는 카페시타빈과 조합되어 투여될 때 실험실내 및 생체내 다양한 암에 대해 적어도 상가 항증식성 효과를 나타낸다. 이 암으로는 폐암, 소세포 폐암, 비소세포 폐암, 결장암, 유방암, 췌장암, 전립선암, 신장암, 자궁경부암, 뇌암, 위암, 자궁암, 장암, 간암, 만성 골수성 백혈병, 흑색종, 난소암, 전좌 관련 신세포 암종(RCC), 폐포성 연부 육종(ASPS), 투명 세포 육종(CCS) 및 간세포 암종(HCC)을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 이 조합 치료의 항증식성 효과는 이환 세포가 c-Met를 구조적으로 발현 또는 과발현하는 세포 증식성 질환 및 암에서 증가/증강된다. 또한, 상승 항증식성 효과는 유방암, 자궁경부암, 폐암, 소세포 폐암, 비소세포 폐암, 흑색종, 결장암, 췌장암, 신장암 및 위암에서 소라페닙과 조합된 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온에 의해; 위암에서 수니티닙과 조합된 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온에 의해; 폐암, 소세포 폐암, 비소세포 폐암 및 결장암에서 엘로티닙과 조합된 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온에 의해; 그리고 췌장암에서 시스플라틴과 조합된 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온에 의해 나타난다.

본 발명의 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체를 투여에 적합한 약학 조성물에 혼입할 수 있다. 이 조성물은 통상적으로 화합물(즉, 활성 화합물 포함) 및 약학적으로 허용되는 부형제 또는 담체를 포함한다. 본원에서 사용되는 "약학적으로 허용되는 부형제" 또는 "약학적으로 허용되는 담체"는 약학 투여에 적합한 임의의 그리고 모든 용매, 분산 매체, 코팅, 항박테리아 및 항진균 물질, 등장성 및 흡수 지연 물질 등을 포함하도록 의도된다. 적합한 담체는 당해 분야에서 표준 참조문헌인 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences]의 가장 최근의 개정판에 기재되어 있다. 이러한 담체 또는 희석제의 바람직한 예로는 물, 식염수, 링거액, 덱스트로스 용액 및 5% 인간 혈청 알부민을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

약학적으로 허용되는 담체로는 고체 담체, 예컨대 락토스, 테라 알바, 수크로스, 활석, 젤라틴, 한천, 펙틴, 아카시아, 스테아르산마그네슘, 스테아르산 등을 들 수 있다. 액체 담체의 예로는 시럽, 땅콩 오일, 올리브 오일, 물 등을 들 수 있다. 유사하게, 담체 또는 희석제로는 당해 분야에 공지된 시간 지연 물질, 예컨대 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트 단독 또는 왁스, 에틸셀룰로스, 하이드록시프로필메틸셀룰로스, 메틸메타크릴레이트와의 조합 등을 들 수 있다. 다른 충전제, 부형제, 향료 및 다른 첨가제, 예컨대 당해 분야에 공지된 것은 또한 본 발명에 다른 약학 조성물 중에 포함될 수 있다. 리포솜 및 비수성 비히클, 예컨대 고정 오일을 또한 사용할 수 있다. 약학적 활성 물질에 대한 이러한 매체 및 물질의 사용은 당해 분야에 널리 공지되어 있다. 임의의 종래 매체 또는 물질이 활성 화합물과 불상용성인 경우를 제외하고, 조성물 내 이의 사용이 고려된다. 보충 활성 화합물이 또한 조성물 내 혼입될 수 있다.

일 양태에서, 치료 유효량(예를 들면, 종양 성장의 억제, 종양 세포의 사멸, 세포 증식성 질환의 치료 또는 예방 등을 통해 원하는 치료학적 효과를 성취하기에 충분한 유효 수준)의 (활성 성분으로서의) 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체를 종래 절차에 따라 표준 약학 담체 또는 희석제와 배합하여 (즉, 본 발명의 약학 조성물을 제조함으로써) 제조한 적합한 제형으로 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체를 투여한다. 이 절차는 원하는 제제를 얻기에 적합한 혼합, 과립 및 압축 또는 용해 성분을 포함할 수 있다.

본원에서 사용되는 "피험체"는 임의의 포유동물, 예를 들면, 인간, 영장류, 마우스, 래트, 개, 고양이, 소, 말, 돼지, 양, 염소, 낙타일 수 있다. 바람직한 양태에서, 피험체는 인간이다.

본원에서 사용되는 "치료를 필요로 하는 피험체"는 세포 증식성 질환을 앓는 피험체 또는 집단에 비해 크게 세포 증식성 질환을 발생시킬 위험이 증가된 피험체이다. 일 양태에서, 치료를 필요로 하는 피험체는 전암 상태를 갖는다. 바람직한 양태에서, 치료를 필요로 하는 피험체는 암을 앓는다.

본원에서 사용되는 "세포 증식성 질환"이란 용어는 세포의 비조절 또는 비정상 성장 또는 둘 다가 암이거나 암이 아닐 수 있는 원치않는 병증 또는 질환을 발생시킬 수 있는 병증을 의미한다. 본 발명의 세포 증식성 질환의 예는 세포 분할이 조절 완화되는 각종의 병증을 포함한다. 세포 증식성 질환의 예로는 신생물, 양성 종양, 악성 종양, 전암 상태, 상피내 종양, 피낭 종양, 전이 종양, 액체 종양, 고형 종양, 면역 종양, 혈액 종양, 암, 암종, 백혈병, 림프종, 육종 및 신속히 분할하는 세포를 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 본원에서 사용되는 "신속히 분할하는 세포"란 용어는 동일 조직 내에 이웃 또는 인접 세포 중에서 예상 또는 관찰되는 것을 초과하거나 이보다 높은 속도로 분할하는 임의의 세포로서 정의된다. 세포 증식성 질환은 전암 또는 전암 상태를 들 수 있다. 세포 증식성 질환으로는 암을 들 수 있다. 바람직하게는, 본원에 제공된 방법은 암의 증상을 치료 또는 경감시키기 위해 사용한다. "암"이란 용어는 고형 종양 및 혈액 종양 및/또는 악성 종양을 포함한다. "전암 세포" 또는 "전암성 세포"는 전암 또는 전암 상태인 세포 증식성 질환을 나타내는 세포이다. "암 세포" 또는 "암성 세포"는 암인 세포 증식성 질환을 나타내는 세포이다. 임의의 재현 가능한 측정 수단을 이용하여 암 세포 또는 전암성 세포를 확인할 수 있다. 암 세포 또는 전암성 세포를 조직학적 테이핑 또는 조직 샘플(예를 들면, 생검 샘플)의 병기에 의해 확인할 수 있다. 암 세포 또는 전암성 세포를 적절한 분자 마커의 사용을 통해 확인할 수 있다.

비암성 상태 또는 장애의 예로는 류마티스성 관절염; 염증; 자가면역 질환; 림프증식성 상태; 말단 비대증; 류마티스성 척추염; 골관절염; 통풍, 다른 관절염 병증; 패혈증; 패혈성 쇽; 내독소 쇽; 그람 음성 패혈증; 독성 쇽 증후군; 천식; 성인 호흡 곤란 증후군; 만성 폐쇄성 폐 질환; 만성 폐 염증; 염증성 장 질환; 크론씨병; 건선; 습진; 궤양성 대장염; 췌장 섬유증; 간 섬유증; 급성 및 만성 신장 질환; 과민성 대장 증후군; 피레시스(pyresis); 재협착; 대뇌 말라리아; 뇌졸중 및 허혈 손상; 신경 외상; 알츠하이머병; 헌팅턴병; 파킨슨병; 급성 및 만성 통증; 알레르기 비염; 알레르기 결막염; 만성 심부전; 급성 관상 증후군; 악액질; 말라리아; 나병; 레슈마니아증; 라임병; 라이터 증후군; 급성 건막염; 근변성, 혈액낭염; 건염; 건염; 헤르니아, 파열 또는 탈출 척추 원반 증후군; 골화석증; 혈전증; 재협착; 규폐증; 폐 육종; 골 흡수 질환, 예컨대 골다공증; 이식편대 숙주 반응; 다발성 경화증; 루푸스; 섬유근육통; AIDS 및 다른 바이러스 질환, 예컨대 헤르페스 조스터, 단순 포진 I 또는 II, 인플루엔자 바이러스 및 사이토메갈로바이러스; 및 당뇨병을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

암의 예로는 부신피질 암종, AIDS 관련 암, AIDS 관련 림프종, 항문암, 직장항문암, 항문관의 암, 맹장암, 소아 소뇌 성상세포종, 소아 대뇌 성상세포종, 기저 세포 암종, 피부암(비흑색종), 담관암, 간외 담도암, 간내 담도암, 방광암, 방광암, 골 및 관절 암, 골육종 및 악성 섬유성 조직구종, 뇌암, 뇌 종양, 뇌간 신경교종, 소뇌 성상세포종, 대뇌 성상세포종/악성 신경교종, 상의세포종, 수모세포종, 천막상부 원시신경외배엽 종양, 시각 경로 및 시상하부 신경교종, 유방암, 기관 선종/유암, 유암종, 위장, 신경계 암, 신경계 림프종, 중추 신경계 암, 중추 신경계 림프종, 자궁경부암, 소아 암, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 골수 증식성 질환, 결장암, 결장 암, 피부 T 세포 림프종, 림프성 신생물, 균상 식육종, 세자리 증후군, 자궁내막암, 식도암, 외두개골 생식 세포 종양, 고환외 생식 세포 종양, 간외 담도암, 눈암, 안구 흑색종, 망막아세포종, 담낭암, 위암, 위장 유암종, 위장관 기질 종양(GIST), 생식 세포 종양, 난소 생식 세포 종양, 임신성 융모성 종양 신경교종, 두경부암, 간세포암(간암), 호치킨 림프종, 하인두암, 안구 흑색종, 안암, 라도 세포 종양(내분비 췌장), 카포시 육종, 신장암, 신장암, 후두암, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 유무 세포 백혈병, 구순 및 구강암, 간암, 폐암, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, AIDS 관련 림프종, 비호치킨 림프종, 원발성 중추 신경계 림프종, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 수모세포종, 흑색종, 안구(눈) 흑색종, 머켈 세포 암종, 악성 중피종, 중피종, 전이 편평 목 암, 구상암, 혀암, 복합 내분비선 신생물 증후군, 균상 식육종, 골수이형성 증후군, 골수이형성/골수 증식성 질환, 만성 골수성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 다발성 골수종, 만성 골수 증식성 질환, 비인두암, 신경아세포종, 구순암, 구강암, 구인두암, 난소암, 난소 상피 암, 난소 저악성 잠재성 종양, 췌장암, 라도 세포 췌장암, 부비강 및 비강 암, 부갑상선암, 음경암, 인두암, 크롬친화세포종, 송과체아세포종 및 천막상부 원시신경외배엽 종양, 하수체 종양, 형질 세포 신생물/다발성 골수종, 흉막폐아세포종, 전립선암, 직장암, 신우 및 수뇨관 암, 이행상피암, 망막아세포종, 횡문근육종, 침샘암, 육종 종양의 유잉 패밀리, 카포시 육종, 자궁암, 자궁 육종, 피부암(비흑색종), 피부암(흑색종), 머켈 세포 피부암종, 소장암, 연조직 육종, 편평 세포 암종, 위암, 천막상부 원시신경외배엽 종양, 고환암, 식도암, 흉선종, 흉선종 및 흉선 암종, 갑상선암, 신우 및 수뇨관 및 다른 비뇨 기관의 이행상피암, 임신성 융모성 종양, 요도암, 자궁내막 자궁암, 자궁 육종, 자궁체부암, 질암, 외음부암 및 윌름 종양을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

"혈액계의 세포 증식성 질환"은 혈액계 세포를 포함하는 세포 증식성 질환이다. 일 양태에서, 혈액계의 세포 증식성 질환으로는 림프종, 백혈병, 골수성 신생물, 비만 세포 신생물, 골수이형성증, 양성 단일클론 감마글로불린병증, 림프종양 육아종증, 림프종모양 구진증, 진성 다혈구증, 만성 골수성 백혈병, 특발성 골수 화생증 및 진성 혈소판증가증을 들 수 있다. 다른 양태에서, 혈액계의 세포 증식성 질환으로는 혈액계 세포의 증생, 이형성증 및 화생증을 들 수 있다. 바람직한 양태에서, 본 발명의 조성물은 본 발명의 혈액암 또는 본 발명의 혈액 세포 증식성 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암을 치료하기 위해 사용할 수 있다. 일 양태에서, 본 발명의 혈액암으로는 다발성 골수종, 림프종(예컨대, 호치킨 림프종, 비호치킨 림프종, 소아 림프종 및 림프구성 및 피부 기원의 림프종), 백혈병(예컨대, 소아 백혈병, 유모 세포 백혈병, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병 및 비만 세포 백혈병), 골수성 신생물 및 비만 세포 신생물을 들 수 있다.

"폐의 세포 증식성 질환"은 폐 세포를 포함하는 세포 증식성 질환이다. 일 양태에서, 폐의 세포 증식성 질환은 폐 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식성 질환을 포함한다. 일 양태에서, 폐의 세포 증식성 질환으로는 폐암, 폐의 전암 또는 전암 상태, 폐의 양성 성장 또는 병변 및 폐의 악성 성장 또는 병변 및 폐 이외의 신체에서의 조직 및 기관에서의 전이 병변을 들 수 있다. 바람직한 양태에서, 본 발명의 조성물을 폐의 폐암 또는 세포 증식성 질환을 치료하기 위해 사용할 수 있다. 일 양태에서, 폐암은 모든 형태의 폐의 암을 포함한다. 다른 양태에서, 폐암으로는 악성 폐 신생물, 상피내 암종, 정형 유암종 및 비정형 유암종을 들 수 있다. 다른 양태에서, 폐암으로는 소세포 폐암("SCLC"), 비소세포 폐암("NSCLC"), 편평 세포 암종, 선암, 소세포 암종, 대세포 암종, 선편평 세포 암종 및 중피종을 들 수 있다. 다른 양태에서, 폐암으로는 "반흔암", 세기관지 암종, 거대 세포 암종, 방추상 세포 암종 및 대세포 신경내분비 암종을 들 수 있다. 다른 양태에서, 폐암으로는 조직학적 및 미세구조학적 이질성을 갖는 폐 신생물(예를 들면, 혼합 세포 유형)을 들 수 있다.

일 양태에서, 폐의 세포 증식성 질환으로는 폐 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식성 질환을 들 수 있다. 일 양태에서, 폐의 세포 증식성 질환으로는 폐암, 폐의 전암 상태를 들 수 있다. 일 양태에서, 폐의 세포 증식성 질환으로는 폐의 증생, 화생증 및 이형성증을 들 수 있다. 다른 양태에서, 폐의 세포 증식성 질환으로는 석면 유발 증생, 편평 화생증 및 양성 반응성 중피 화생증을 들 수 있다. 다른 양태에서, 폐의 세포 증식성 질환으로는 원주 상피의 중층 편평 상피로의 대체 및 점막 이형성증을 들 수 있다. 다른 양태에서, 흡입된 손상 환경 물질, 예컨대 담배 흡연 및 석면에 노출된 개인은 폐의 세포 증식성 질환을 발생시킬 위험 증가에 있을 수 있다. 다른 양태에서, 개인에서 폐의 세포 증식성 질환을 발생시킬 것으로 예견될 수 있는 선행 폐 질환으로는 만성 간질성 폐 질환, 괴사성 폐 질환, 강피증, 류마티스성 질환, 유육종증, 간질성 폐렴, 결핵, 반복 폐렴, 특발성 폐 섬유증, 육아종, 석면증, 섬유성 폐포염 및 호치킨 질환을 들 수 있다.

"결장의 세포 증식성 질환"은 결장 세포를 포함하는 세포 증식성 질환이다. 바람직한 양태에서, 결장의 세포 증식성 질환은 결장암이다. 바람직한 양태에서, 본 발명의 조성물을 사용하여 결장암 또는 결장의 세포 증식성 질환을 치료할 수 있다. 일 양태에서, 결장암은 모든 형태의 결장의 암을 포함한다. 다른 양태에서, 결장암으로는 산발성 및 유전성 결장암을 들 수 있다. 다른 양태에서, 결장암으로는 악성 결장 신생물, 상피내 암종, 정형 유암종 및 비정형 유암종을 들 수 있다. 다른 양태에서, 결장암으로는 선암, 편평 세포 암종 및 선편평 세포 암종을 들 수 있다. 다른 양태에서, 결장암은 유전성 비폴립성 결장 암, 가족성 대장 폴립증, 가드너 증후군, 포이츠-예거 증후군, 터로코트 증후군 및 소아성 용종증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 유전성 증후군과 관련된다. 다른 양태에서, 결장암은 유전성 비폴립성 결장 암, 가족성 대장 폴립증, 가드너 증후군, 포이츠-예거 증후군(Peutz-Jeghers syndrome), 터로코트 증후군(Turcot's syndrome) 및 소아성 용종증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 유전성 증후군에 의해 유발된다.

일 양태에서, 결장의 세포 증식성 질환으로는 결장 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식성 질환을 들 수 있다. 일 양태에서, 결장의 세포 증식성 질환으로는 결장암, 결장의 전암 상태, 결장의 선종 폴립 및 결장의 속발성 병변을 들 수 있다. 일 양태에서, 결장의 세포 증식성 질환으로는 선종을 들 수 있다. 일 양태에서, 결장의 세포 증식성 질환은 결장의 증생, 화생증 및 이형성증을 특징으로 한다. 다른 양태에서, 개인에서 결장의 세포 증식성 질환을 발생시킬 것으로 예견될 수 있는 선행 결장 질환으로는 선행 결장암을 들 수 있다. 다른 양태에서, 개인에서 결장의 세포 증식성 질환을 발생시킬 것으로 예견될 수 있는 현재 질환으로는 크론씨병 및 궤양성 대장염을 들 수 있다. 일 양태에서, 결장의 세포 증식성 질환은 p53, ras, FAP 및 DCC로 이루어진 군으로부터 선택되는 유전자의 돌연변이와 관련된다. 다른 양태에서, 개인은 p53, ras, FAP 및 DCC로 이루어진 군으로부터 선택되는 유전자의 돌연변이의 존재로 인해 결장의 세포 증식성 질환을 발생시킬 위험 증가를 갖는다.

"전립선의 세포 증식성 질환"은 전립선 세포를 포함하는 세포 증식성 질환이다. 일 양태에서, 전립선의 세포 증식성 질환은 전립선 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식성 질환을 포함한다. 일 양태에서, 전립선의 세포 증식성 질환은 전립선암, 전립선의 전암 또는 전암 상태, 전립선의 양성 성장 또는 병변 및 전립선의 악성 성장 또는 병변 및 전립선 이외의 신체에서의 조직 및 기관에서의 전이 병변을 들 수 있다. 다른 양태에서, 전립선의 세포 증식성 질환으로는 전립선의 증생, 화생증 및 이형성증을 들 수 있다.

"피부의 세포 증식성 질환"은 피부 세포를 포함하는 세포 증식성 질환이다. 일 양태에서, 피부의 세포 증식성 질환은 피부 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식성 질환을 포함한다. 일 양태에서, 피부의 세포 증식성 질환은 피부의 전암 또는 전암 상태, 피부의 양성 성장 또는 병변, 흑색종, 악성 흑색종 및 피부의 다른 악성 성장 또는 병변 및 피부 이외의 신체에서의 조직 및 기관에서의 전이 병변을 들 수 있다. 다른 양태에서, 피부의 세포 증식성 질환으로는 피부의 증생, 화생증, 건선 및 이형성증을 들 수 있다.

"난소의 세포 증식성 질환"은 난소의 세포를 포함하는 세포 증식성 질환이다. 일 양태에서, 난소의 세포 증식성 질환은 난소의 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식성 질환을 포함한다. 일 양태에서, 난소의 세포 증식성 질환으로는 난소의 전암 또는 전암 상태, 난소의 양성 성장 또는 병변, 난소암, 난소의 악성 성장 또는 병변 및 난소 이외의 신체에서의 조직 및 기관에서의 전이 병변을 들 수 있다. 다른 양태에서, 난소의 세포 증식성 질환으로는 난소 세포의 증생, 화생증 및 이형성증을 들 수 있다.

"유방의 세포 증식성 질환"은 유방 세포를 포함하는 세포 증식성 질환이다. 일 양태에서, 유방의 세포 증식성 질환은 유방 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식성 질환을 포함한다. 일 양태에서, 유방의 세포 증식성 질환으로는 유방암, 유방의 전암 또는 전암 상태, 유방의 양성 성장 또는 병변 및 유방의 악성 성장 또는 병변 및 유방 이외의 신체에서의 조직 및 기관에서의 전이 병변을 들 수 있다. 다른 양태에서, 유방의 세포 증식성 질환으로는 유방의 증생, 화생증 및 이형성증을 들 수 있다.

일 양태에서, 유방의 세포 증식성 질환은 유방의 전암 상태이다. 일 양태에서, 본 발명의 조성물을 사용하여 유방의 전암 상태를 치료할 수 있다. 일 양태에서, 유방의 전암 상태으로는 유방의 비정형 증생, 유관 상피내암종(DCIS), 내관성 암종, 소엽성 상피내암종(LCIS), 소엽성 종양형성 및 유방의 0병기 또는 0기 성장 또는 병변(예를 들면, 0병기 또는 0기 유방암 또는 상피내 암종)을 들 수 있다. 다른 양태에서, 유방의 전암 상태를 미국 암 연합 위원회(AJCC: American Joint Committee on Cancer)가 승인한 TNM 분류 계획에 따라 분류하고, 원발성 종양(T)을 T0 또는 Tis의 병기로 배정하고; 영역 림프절(N)을 N0의 병기로 배정하고; 원격 전이(M)를 MO의 병기로 배정한다.

바람직한 양태에서, 유방의 세포 증식성 질환은 유방암이다. 바람직한 양태에서, 유방암을 치료하는 데 본 발명의 조성물을 사용할 수 있다. 일 양태에서, 유방암은 모든 형태의 유방암을 포함한다. 일 양태에서, 유방암으로는 원발성 상피 유방암을 들 수 있다. 다른 양태에서, 유방암으로는 유방이 다른 종양, 예컨대 림프종, 육종 또는 흑색종에 의해 관여되는 암을 들 수 있다. 다른 양태에서, 유방암으로는 유방의 암종, 유방의 유관 암종, 유방의 소엽성 암종, 유방의 비분화 암종, 유방의 낭육종 가엽, 유방의 혈관육종 및 유방의 원발성 림프종을 들 수 있다. 일 양태에서, 유방암으로는 Ⅰ, Ⅱ, ⅢA, ⅢB, ⅢC 및 Ⅳ 병기 유방암을 들 수 있다. 일 양태에서, 유방의 유관 암종으로는 여드름, 점액소(콜로이드), 수질, 림프구성 침윤을 갖는 수질, 유두상, 경화형 및 선관상으로 이루어진 군으로부터 선택되는 조직학적 유형을 갖는 침습성 암종, 우세한 내관성 성분을 갖는 침습성 상피내 암종, 염증성 유방암 및 유방의 유관 암종을 들 수 있다. 일 양태에서, 유방의 소엽성 암종으로는 우세한 상피내 성분을 갖는 침습성 소엽성 암종, 침습성 소엽성 암종 및 침윤성 소엽성 암종을 들 수 있다. 일 양태에서, 유방암 파제트병, 내관성 암종을 갖는 파제트병 및 침습성 유관 암종을 갖는 파제트병을 들 수 있다. 다른 양태에서, 유방암은 조직학적 및 미세조직학적 이종성(예를 들면, 혼합 세포 유형)을 갖는 유방 신생물을 들 수 있다.

바람직한 양태에서, 유방암을 치료하는 데 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 사용할 수 있다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암으로는 가족성 유방암을 들 수 있다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 유방암은 산발성 유방암을 들 수 있다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암은 남성 피험체에서 발생한다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암은 여성 피험체에서 발생한다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암은 폐경전 여성 피험체 또는 폐경후 여성 피험체에서 발생한다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암은 30세 이상의 피험체 또는 30세 미만의 피험체에서 발생한다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암은 50세 이상의 피험체 또는 50세 미만의 피험체에서 발생한다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암은 70세 이상의 피험체 또는 70세 미만의 피험체에서 발생한다.

일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암을 BRCA1, BRCA2 또는 p53에서 가족성 또는 자연 돌연변이를 확인하기 위해 분류한다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암을 HER2/neu 유전자 증폭을 갖는 것, HER2/neu를 과발현하는 것 또는 낮은, 중간 또는 높은 수준의 HER2/neu 발현을 갖는 것으로서 분류한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 유방암을 에스트로겐 수용체(ER), 프로게스테론 수용체(PR), 인간 표피 성장 인자 수용체-2, Ki-67, CA15-3, CA 27-29 및 c-Met로 이루어진 군으로부터 선택되는 마커에 대해 분류한다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암을 ER-unknown, ER-rich 또는 ER-poor로서 분류한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 유방암을 ER 음성 또는 ER 양성으로서 분류한다. 유방암의 ER 타이핑을 임의의 재현 가능한 수단에 의해 수행할 수 있다. 바람직한 양태에서, 유방암의 ER 타이핑을 문헌[Onkologie 27: 175-179 (2004)]에 기재된 바대로 수행할 수 있다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암을 PR-unknown, PR-rich 또는 PR-poor로서 분류한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 유방암을 PR 음성 또는 PR 양성으로서 분류한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 유방암을 수용체 양성 또는 수용체 음성으로서 분류한다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암을 CA 15-3 또는 CA 27-29 또는 둘 다의 혈액 수치 증가와 관련되는 것으로서 분류한다.

일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암으로는 유방의 국소 종양을 들 수 있다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암으로는 음성 감시 림프절(SLN) 생검과 관련된 유방의 종양을 들 수 있다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암으로는 양성 감시 림프절(SLN) 생검과 관련된 유방의 종양을 들 수 있다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 유방암으로는 하나 이상의 양성 보조 림프절과 관련된 유방의 종양을 들 수 있고, 보조 림프절을 임의의 적용 가능한 방법에 의해 분류한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 유방암으로는 임파절 음성 상태(예를 들면, 임파절 음성) 또는 임파절 양성 상태(예를 들면, 임파절 양성)를 갖는 것으로 분류된 유방의 종양을 들 수 있다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 유방암으로는 신체 다른 위치로 전이된 유방의 종양을 들 수 있다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 유방암을 뼈, 폐, 간 또는 뇌로 이루어진 군으로부터 선택되는 위치로 전이되는 것으로서 분류한다. 다른 양태에서 치료하고자 하는 유방암을 전이, 국소적, 지역적, 국소-지역적, 국소 진행된, 원발성, 다중심성, 양측성, 동측성, 대측성, 새로 진단된, 재발성 및 수술 불가능으로 이루어진 군으로부터 선택되는 특징에 따라 분류한다.

일 양태에서, 집단에 비해 크게 유방암을 발생시킬 위험이 증가된 피험체에서 유방의 세포 증식성 질환을 치료 또는 예방하기 위해 또는 유방암을 치료 또는 예방하기 위해 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 사용할 수 있다. 일 양태에서, 집단에 비해 크게 유방암을 발생시킬 위험이 증가된 피험체는 유방암의 가족력 또는 개인력을 갖는 여성 피험체이다. 다른 양태에서, 집단에 비해 크게 유방암을 발생시킬 위험이 증가된 피험체는 BRCA1 또는 BRCA2 또는 둘 다에서 생식선 또는 자발 돌연변이를 갖는 여성 피험체이다. 일 양태에서, 집단에 비해 크게 유방암을 발생시킬 위험이 증가된 피험체는 BRCA1 또는 BRCA2 또는 둘 다에서 유방암 및 생식선 또는 자발 돌연변이의 가족력을 갖는 여성 피험체이다. 다른 양태에서, 집단에 비해 크게 유방암을 발생시킬 위험이 증가된 피험체는 30세 초과, 40세 초과, 50세 초과, 60세 초과, 70세 초과, 80세 초과 또는 90세 초과인 여성이다. 일 양태에서, 집단에 비해 크게 유방암을 발생시킬 위험이 증가된 피험체는 유방의 비정형 증생, 유관 상피내암종(DCIS), 내관성 암종, 소엽성 상피내암종(LCIS), 소엽성 종양형성 또는 유방의 0병기 성장 또는 병변(예를 들면, 0병기 또는 0기 유방암 또는 상피내 암종)을 갖는 피험체이다.

다른 양태에서, 치료하고자 하는 유방암을 Scarff-Bloom-Richardson 시스템에 따라 조직학적으로 등급화하고, 유방 종양을 1, 2 또는 3의 유사분열 수 점수; 1, 2 또는 3의 핵 다형성 점수; 1, 2 또는 3의 소관 형성 점수; 및 3 내지 9의 전체 Scarff-Bloom-Richardson 점수로 배정한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 유방암을 1 병기, 1-2 병기, 2 병기, 2-3 병기 또는 3 병기로 이루어진 군으로부터 선택되는 유방암 치료에 대한 국제 협의(International Consensus Panel on Breast Cancer)에 따라 종양 병기로 배정한다.

일 양태에서, 치료하고자 하는 암을 미국 암 연합 위원회(AJCC) TNM 분류 시스템에 따라 분류하고, 종양(T)을 TX, T1, T1mic, T1a, T1b, T1c, T2, T3, T4, T4a, T4b, T4c 또는 T4d의 병기로 배정하고; 영역 림프절(N)을 NX, NO, N1, N2, N2a, N2b, N3, N3a, N3b 또는 N3c의 병기로 배정하고; 원격 전이(M)를 MX, MO 또는 M1의 병기로 배정한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 암을 병기 Ⅰ, 병기 ⅡA, 병기 ⅡB, 병기 ⅢA, 병기 ⅢB, 병기 ⅢC 또는 병기 Ⅳ로서 미국 암 연합 위원회(AJCC) 분류에 따라 분류한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 암을 GX 병기(예를 들면, 병기를 평가할 수 없음), 1 병기, 2 병기, 3 병기 또는 4 병기로서 AJCC 분류에 따라 병기를 배정한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 암을 pNX, pNO, PNO(I-), PNO(I+), PNO(mol-), PNO(mol+), PN1, PN1(mi), PN1a, PN1b, PN1c, pN2, pN2a, pN2b, pN3, pN3a, pN3b 또는 pN3c의 AJCC 병리학적 분류(pN)에 따라 분류한다.

일 양태에서, 치료하고자 하는 암은 직경이 약 2 센티미터인 것으로 결정된 종양을 포함한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 암은 직경이 약 2 내지 약 5 센티미터인 것으로 결정된 종양을 포함한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 암은 직경이 약 3 센티미터인 것으로 결정된 종양을 포함한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 암은 직경이 5 센티미터 초과인 것으로 결정된 종양을 포함한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 암을 잘 분화된, 적절히 분화된, 빈약하게 분화된 또는 비분화된 것으로 미시적 외관에 의해 분류한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 암을 유사분열 수(예를 들면, 세포 분할의 양) 또는 핵 다형성(예를 들면, 세포에서의 변화)과 관련하여 미시적 외관에 의해 분류한다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 암을 괴사 구역(예를 들면, 사멸 또는 퇴행 세포의 구역)과 관련되는 것으로 미시적 외관에 의해 분류한다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 암을 비정상 핵형을 갖는 것, 비정상 수의 염색체를 갖는 것 또는 외관이 비정상인 하나 이상의 염색체를 갖는 것으로서 분류한다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 암을 이수체, 삼수체, 사수체인 것으로서 또는 변경된 배수성을 갖는 것으로서 분류한다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 암을 염색체 전좌 또는 전체 염색체의 결실 또는 중복 또는 염색체의 일부의 결실, 중복 또는 증폭의 구역을 갖는 것으로서 분류한다.

일 양태에서, 치료하고자 하는 암을 DNA 세포 분석법, 유세포 분석법 또는 영상 세포 분석법에 의해 평가한다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 암은 세포 분할의 합성 단계(예를 들면, 세포 분할의 S 상)에서 세포의 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% 또는 90%를 갖는 것으로서 분류된다. 일 양태에서, 치료하고자 하는 암은 낮은 S 비율 또는 높은 S 비율을 갖는 것으로서 분류된다.

본원에서 사용되는 "정상 세포"는 "세포 증식성 질환"의 일부로서 분류되지 않는 세포이다. 일 양태에서, 정상 세포는 원치않는 병증 또는 질환의 발생을 야기할 수 있는 비조절 또는 비정상 성장이 부족하다. 바람직하게는, 정상 세포는 정상적으로 기능하는 세포 주기 검사 조절 메커니즘을 보유한다.

본원에서 사용되는 "세포를 접촉시키는 것"은 화합물 또는 다른 물질 조성물이 세포와 직접 접촉되거나, 세포에서 원하는 생물학적 효과를 유도하기에 충분히 가까운 상태를 의미한다.

본원에서 사용되는 "후보 화합물"은 화합물이 조사관 또는 임상의가 추구하는 세포, 조직, 시스템, 동물 또는 인간에서의 원하는 생물학적 또는 의학적 반응을 발생시키는지를 결정하기 위해 하나 이상의 실험실내 또는 생체내 생물학적 검정에서 시험되는 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 의미한다. 일 양태에서, 후보 화합물은 화학식 Ⅲ 또는 화학식 Ⅲa의 화합물이고, 다른 양태에서, 후보 화합물은 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물이다. 바람직한 양태에서, 생물학적 또는 의학적 반응은 암의 치료이다. 다른 양태에서, 생물학적 또는 의학적 반응은 세포 증식성 질환의 치료 또는 예방이다. 일 양태에서, 실험실내 또는 생체내 생물학적 검정은 효소 활성 검정, 전기영동 이동도 검정, 리포터 유전자 검정, 실험실내 세포 생존능력 검정 및 검정을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

본원에서 사용되는 "단일 요법"은 이를 필요로 하는 피험체에게 단독 활성 또는 치료 화합물의 투여를 의미한다. 바람직하게는, 단일 요법은 치료 유효량의 활성 화합물의 투여를 포함한다. 예를 들면, (±)- 시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온에 의한 암 단일 요법은 암의 치료를 요하는 피험체에게 치료 유효량의 (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체의 투여를 포함한다. 단일 요법은 다수의 활성 화합물의 조합이 투여되고, 바람직하게는 조합의 각각의 성분이 치료 유효량으로 존재하는 병용 요법과 대비될 수 있다. 일 양태에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물에 의한 단일 요법은 원하는 생물학적 효과를 유발하는 데 있어서 병용 요법보다 더 효과적이다. 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 단일 요법 유효성은 PCT 공보 제WO 2006/086484호에 기재되어 있다.

본원에서 사용되는 "치료하는"은 질환, 병증 또는 장애를 퇴치할 목적을 위한 환자의 조절 및 관리를 기술하는 것이고, 증상 또는 합병증을 감소 또는 경감시키는 것 또는 질환, 병증 또는 장애를 제거하는 것을 들 수 있다.

본원에서 사용되는 "예방하는"은 질환, 병증 또는 장애의 증상 또는 합병증의 발병을 중지시키는 것을 기술하는 것이다.

일 양태에서, 암 치료에 의해 종양 크기가 감소한다. 종양 크기 감소를 또한 "종양 퇴행"이라 언급할 수 있다. 바람직하게는, 치료 후, 종양 크기는 치료 전 그 크기에 비해 5% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 종양 크기는 10% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 20% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 30% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 40% 이상 감소하고; 훨씬 더 바람직하게는, 50% 이상 감소하고; 가장 바람직하게는, 75% 이상 감소한다. 종양 크기를 임의의 재현 가능한 측정 수단에 의해 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 종양 크기를 종양 직경으로서 측정할 수 있다.

다른 양태에서, 암 치료에 의해 종양 체적이 감소한다. 바람직하게는, 치료 후, 종양 체적은 치료 전 그 체적에 비해 5% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 종양 체적은 10% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 20% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 30% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 40% 이상 감소하고; 훨씬 더 바람직하게는, 50% 이상 감소하고; 가장 바람직하게는, 75% 이상 감소한다. 종양 체적을 임의의 재현 가능한 측정 수단에 의해 측정할 수 있다.

다른 양태에서, 암 치료에 의해 종양 수가 감소한다. 바람직하게는, 치료 후, 종양 수는 치료 전 그 수에 비해 5% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 종양 수는 10% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 20% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 30% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 40% 이상 감소하고; 훨씬 더 바람직하게는, 50% 이상 감소하고; 가장 바람직하게는, 75% 이상 감소한다. 종양 수를 임의의 재현 가능한 측정 수단에 의해 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 육안에 또는 특정 확대율에서 가시적인 종양을 계수하여 종양을 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 특정 확대율은 2배, 3배, 4배, 5배, 10배 또는 5O배이다.

다른 양태에서, 암 치료에 의해 원발성 종양 부위로부터 먼 기관 또는 다른 조직에서의 전이 병변 수가 감소한다. 바람직하게는, 치료 후, 전이 병변 수는 치료 전 수에 비해 5% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 전이 병변 수는 10% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 20% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 30% 이상 감소하고; 더 바람직하게는, 40% 이상 감소하고; 훨씬 더 바람직하게는, 50% 이상 감소하고; 가장 바람직하게는, 75% 이상 감소한다. 전이 병변 수를 임의의 재현 가능한 측정 수단에 의해 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 육안에 또는 특정 확대율에서 가시적인 전이 병변을 계수하여 전이 병변 수를 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 특정 확대율은 2배, 3배, 4배, 5배, 1O배 또는 5O배이다.

다른 양태에서, 암 치료에 의해 담체만을 투여받는 집단에 비해 치료된 피험체의 집단의 평균 생존 시간을 증가시킨다. 바람직하게는, 평균 생존 시간은 30 일 이상 증가하고; 더 바람직하게는, 60 일 이상; 더 바람직하게는, 90 일 이상; 가장 바람직하게는, 120 일 이상 증가한다. 집단의 평균 생존 시간 증가를 임의의 재현 가능한 수단에 의해 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 예를 들면 활성 화합물에 의한 치료 개시 후 집단에 대한 평균 생존의 길이를 계산하여 집단의 평균 생존 시간 증가를 측정할 수 있다. 다른 바람직한 양태에서, 예를 들면 활성 화합물에 의한 1회 치료 완료 후 집단에 대한 평균 생존의 길이를 계산하여 집단의 평균 생존 시간 증가를 또한 측정할 수 있다.

다른 양태에서, 암 치료에 의해 치료되지 않은 피험체의 집단에 비해 치료된 피험체의 집단의 평균 생존 시간을 증가시킨다. 바람직하게는, 평균 생존 시간은 30 일 이상 증가하고; 더 바람직하게는, 60 일 이상; 더 바람직하게는, 90 일 이상; 가장 바람직하게는, 120 일 이상 증가한다. 집단의 평균 생존 시간의 증가를 임의의 재현 가능한 수단에 의해 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 예를 들면 활성 화합물에 의한 치료 개시 이후 집단에 대한 평균 생존의 길이를 계산하여 집단의 평균 생존 시간의 증가를 측정할 수 있다. 다른 바람직한 양태에서, 예를 들면 활성 화합물에 의한 1회 치료 완료 후 집단에 대한 평균 생존의 길이를 계산하여 집단의 평균 생존 시간의 증가를 또한 측정할 수 있다.

다른 양태에서, 암 치료에 의해 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체가 아닌 약물에 의한 단일 요법을 투여받는 집단에 비해 치료된 피험체의 집단의 평균 생존 시간을 증가시킨다. 바람직하게는, 평균 생존 시간은 30 일 이상; 더 바람직하게는, 60 일 이상; 더 바람직하게는, 90 일 이상; 가장 바람직하게는, 120 일 이상 증가한다. 집단의 평균 생존 시간의 증가를 임의의 재현 가능한 수단에 의해 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 예를 들면 활성 화합물에 의한 치료 개시 이후 집단에 대한 평균 생존의 길이를 계산하여 집단의 평균 생존 시간의 증가를 측정할 수 있다. 다른 바람직한 양태에서, 예를 들면 활성 화합물에 의한 1회 치료 완료 후 집단에 대한 평균 생존의 길이를 계산하여 집단의 평균 생존 시간의 증가를 또한 측정할 수 있다.

다른 양태에서, 암 치료에 의해 담체만을 투여받은 집단에 비해 치료된 피험체의 사망률을 감소시킨다. 다른 양태에서, 암 치료에 의해 치료되지 않은 집단에 비해 치료된 피험체의 집단의 사망률을 감소시킨다. 추가의 양태에서, 암 치료에 의해 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체가 아닌 약물에 의한 단일 요법을 투여받은 집단에 비해 치료된 피험체의 집단의 사망률을 감소시킨다. 바람직하게는, 사망률은 2% 이상; 더 바람직하게는, 5% 이상; 더 바람직하게는, 10% 이상; 가장 바람직하게는, 25% 이상 감소한다. 바람직한 양태에서, 임의의 재현 가능한 수단에 의해 치료된 피험체의 집단의 사망률의 감소를 측정할 수 있다. 다른 바람직한 양태에서, 예를 들면 활성 화합물에 의한 치료 개시 이후 집단에 대한 단위 시간마다 질환 관련 사망의 평균 수를 계산하여 집단의 사망률의 감소를 측정할 수 있다. 다른 바람직한 양태에서, 예를 들면 활성 화합물에 의한 1회 치료 완료 후 집단에 대한 단위 시간마다 질환 관련 사망의 평균 수를 계산하여 집단의 사망률의 감소를 또한 측정할 수 있다.

다른 양태에서, 암 치료에 의해 종양 성장 속도를 감소시킨다. 바람직하게는, 치료 후, 종양 성장 속도를 치료 전 수에 비해 적어도 5% 감소시키고; 더 바람직하게는, 종양 성장 속도를 적어도 10% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 20% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 30% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 40% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 50% 감소시키고; 훨씬 더 바람직하게는, 적어도 50% 감소시키고; 가장 바람직하게는, 적어도 75% 감소시킨다. 임의의 재현 가능한 측정 수단에 의해 종양 성장 속도를 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 단위 시간마다 종양 직경의 변화에 따라 종양 성장 속도를 측정한다.

다른 양태에서, 암 치료에 의해 종양 재성장을 감소시킨다. 바람직하게는, 치료 후, 종양 재성장은 5% 미만이고; 더 바람직하게는, 종양 재성장은 10% 미만; 더 바람직하게는, 20% 미만; 더 바람직하게는, 30% 미만; 더 바람직하게는, 40% 미만; 더 바람직하게는, 50% 미만; 훨씬 더 바람직하게는, 50% 미만; 가장 바람직하게는, 75% 미만이다. 임의의 재현 가능한 측정 수단에 의해 종양 재성장을 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 예를 들면 치료에 뒤따르는 이전 종양 위축 이후 종양의 직경의 변화를 측정하여 종양 재성장을 측정한다. 다른 바람직한 양태에서, 치료가 중지된 후 재발생하는 종양의 실패로 종양 재성장의 감소를 표시한다.

다른 양태에서, 세포 증식성 질환의 치료 또는 예방에 의해 세포 증식의 속도를 감소시킨다. 바람직하게는, 치료 후, 세포 증식의 속도를 적어도 5%; 더 바람직하게는, 적어도 10%; 더 바람직하게는, 적어도 20%; 더 바람직하게는, 적어도 30%; 더 바람직하게는, 적어도 40%; 더 바람직하게는, 적어도 50%; 훨씬 더 바람직하게는, 적어도 50%; 가장 바람직하게는, 적어도 75% 감소시킨다. 임의의 재현 가능한 측정 수단에 의해 세포 증식의 속도를 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 예를 들면 단위 시간마다 조직 샘플 내 분할 세포의 수를 측정하여 세포 증식의 속도를 측정한다.

다른 양태에서, 세포 증식성 질환의 치료 또는 예방에 의해 증식 세포의 비를 감소시킨다. 바람직하게는, 치료 후, 증식 세포의 비를 적어도 5%; 더 바람직하게는, 적어도 10%; 더 바람직하게는, 적어도 20%; 더 바람직하게는, 적어도 30%; 더 바람직하게는, 적어도 40%; 더 바람직하게는, 적어도 50%; 훨씬 더 바람직하게는, 적어도 50%; 가장 바람직하게는, 적어도 75% 감소시킨다. 임의의 재현 가능한 측정 수단에 의해 증식 세포의 비를 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 예를 들면 조직 샘플 내 비분할 세포의 수에 대해 분할 세포의 수를 정량화하여 증식 세포의 비를 측정한다. 다른 바람직한 양태에서, 증식 세포의 비를 유사분열 지수와 동일하다.

다른 양태에서, 세포 증식성 질환의 치료 또는 예방에 의해 세포 증식의 영역 또는 구역의 크기를 감소시킨다. 바람직하게는, 치료 후, 세포 증식의 영역 또는 구역의 크기를 치료 전 그 크기에 비해 적어도 5% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 10% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 20% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 30% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 40% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 50% 감소시키고; 훨씬 더 바람직하게는 적어도 50% 감소시키고; 가장 바람직하게는 적어도 75% 감소시킨다. 세포 증식의 영역 또는 구역의 크기를 임의의 재현 가능한 측정 수단에 의해 측정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 세포 증식의 면적 또는 크기의 직경 또는 폭으로서 세포 증식의 영역 또는 구역의 크기를 측정할 수 있다.

다른 양태에서, 세포 증식성 질환의 예방 또는 치료에 의해 비정상 외관 또는 형태를 갖는 세포의 수 또는 비를 감소시킨다. 바람직하게는, 치료 후, 비정상 형태를 갖는 세포의 수를 치료 전 그 크기에 비해 적어도 5% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 10% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 20% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 30% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 40% 감소시키고; 더 바람직하게는, 적어도 50% 감소시키고; 훨씬 더 바람직하게는, 적어도 50% 감소시키고; 가장 바람직하게는, 적어도 75% 감소시킨다. 비정상 세포 외관 또는 형태를 임의의 재현 가능한 측정 수단에 의해 측정할 수 있다. 일 양태에서, 비정상 세포 형태를 현미경 검사로 예를 들면 도립 조직 배양 현미경을 사용하여 측정한다. 일 양태에서, 비정상 세포 형태는 핵 다형성 형태를 취한다.

본원에서 사용되는 용어 "선택적으로"는 다른 집단에서보다 한 집단에서 더 높은 빈도로 발생하는 경향을 의미한다. 일 양태에서, 비교된 집단은 세포 집단이다. 바람직한 양태에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체는 정상 세포가 아니라 암 또는 전암성 세포에 선택적으로 작용한다. 다른 바람직한 양태에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체는 하나의 분자 표적(예를 들면, c-Met)을 선택적으로 조절하도록 작용하지만 다른 분자 표적(예를 들면, 단백질 키나제 C)을 현저히 조절하도록 작용하지 않는다. 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 키나제와 같은 효소의 활성을 선택적으로 억제하는 방법을 제공한다. 바람직하게는, B 집단과 비교하여 A 집단에서 2배 이상 더 흔히 발생하는 경우 B 집단에 비해 A 집단에서 사건이 선택적으로 발생한다. 더 바람직하게는, A 집단에서 5배 이상 더 흔히 발생하는 경우 사건이 선택적으로 발생한다. 더 바람직하게는, B 집단과 비교하여 A 집단에서 10배 이상; 더 바람직하게는, 50배 이상; 훨씬 더 바람직하게는, 100배 이상; 가장 바람직하게는, 1000배 이상 더 흔히 발생하는 경우 A 집단에서 사건이 선택적으로 발생한다. 예를 들면, 세포 사멸은 정상 세포와 비교하여 암 세포에서 2배 이상 흔히 발생하는 경우 암 세포에서 선택적으로 발생한다고 일컬어질 것이다.

바람직한 양태에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체는 분자 표적(예를 들면, c-Met)의 활성을 조절한다. 일 양태에서, 조절한다는 것은 분자 표적의 활성을 자극 또는 억제한다는 것을 의미한다. 바람직하게는, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물은 오직 상기 화합물의 존재가 부족하다는 것을 제외하고 동일한 조건 하에 분자 표적의 활성에 비해 분자 표적의 활성을 적어도 2배 자극 또는 억제하는 경우 분자 표적의 활성을 조절한다. 더 바람직하게는, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물은 오직 상기 화합물의 존재가 부족하다는 것을 제외하고 동일한 조건 하에 분자 표적의 활성에 비해 분자 표적의 활성을 적어도 5배, 적어도 10배, 적어도 20배, 적어도 50배, 적어도 100배 자극 또는 억제하는 경우 분자 표적의 활성을 조절한다. 분자 표적의 활성을 임의의 재현 가능한 수단에 의해 측정할 수 있다. 분자 표적의 활성을 실험실내 또는 생체내 측정할 수 있다. 예를 들면, 분자 표적의 활성을 효소 활성 검정 또는 DNA 결합 검정에 의해 실험실내 측정할 수 있거나, 리포터 유전자의 발현을 평가하기 위해 분자 표적의 활성을 생체내 측정할 수 있다.

일 양태에서, 화합물의 추가가 오직 상기 화합물의 존재가 부족하다는 것을 제외하고 동일한 조건 하에 분자 표적의 활성에 비해 10% 이상 분자 표적의 활성을 자극 또는 억제하지 않는 경우 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체는 분자 표적의 활성을 현저히 조절하지 않는다. 바람직한 양태에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물은 단백질 키나제 C의 활성을 현저히 조절하지 않는다.

본원에서 사용되는 용어 "동질효소 선택적"은 효소의 제2 이소폼과 비교하여 효소의 제1 이소폼의 우선적인 억제 또는 자극(예를 들면, 키나제 동질효소 베타와 비교하여 키나제 동질효소 알파의 우선적인 억제 또는 자극)을 의미한다. 바람직하게는, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물은 생물학적 효과를 성취하는 데 필요한 용량에서 최소 4배 차이, 바람직하게는 10배 차이, 더 바람직하게는 50배 차이를 보여준다. 바람직하게는, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물은 억제 범위에 걸쳐 이 차이를 보여주고, 관심 있는 분자 표적에 대한 IC₅₀, 즉 50% 억제에서 차이가 예시된다.

바람직한 양태에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체를 이를 필요로 하는 세포 또는 피험체에게 투여하면 c-Met의 활성이 조절(즉, 자극 또는 억제)된다. 본원에서 사용되는 c-Met의 활성은 c-Met에 의해 수행되는 임의의 생물학적 기능 또는 활성을 의미한다. 예를 들면, c-Met의 기능은 다운스트림 표적 단백질의 포스포릴화를 포함한다. c-Met의 다른 기능은 자동포스포릴화, 어댑터 단백질, 예컨대 Gab-1, Grb-2, She, SHP2 및 c-Cb1의 결합 및 신호 트랜스듀서, 예컨대 Ra, Src, PI3K, PLC-γ, STAT, ERK 1 및 2 및 FAK의 활성화를 포함한다. c-Met 넛다운은 세포 유형 특이적 방식으로 암 세포 성장을 억제하는 것으로 보인다. MDA-MB-231, NCI-H661, NCI-H441, MIA PaCa-2, HT29 및 MKN-45 인간 암 세포. c-Met 넛다운은 세포 유형 특이적 방식의 카스파세 의존적 아폽토시스를 포함한다. 따라서, 본 발명은 세포가 높은 수치에서 c-Met를 발현하거나, 활성 c-Met를 발현하는 세포 증식성 질환의 치료에 관한 것이다.

바람직한 양태에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체를 이를 필요로 하는 세포 또는 피험체에게 투여하면 ERK 1 또는 ERK 2 또는 둘 다의 활성이 조절(즉, 자극 또는 억제)된다. 본원에서 사용되는 ERK 1 또는 ERK 2의 활성은 ERK 1 또는 ERK 2에 의해 수행되는 임의의 생물학적 기능 또는 활성을 의미한다. 예를 들면, ERK 1 또는 ERK 2의 기능은 다운스트림 표적 단백질의 포스포릴화를 포함한다.

일 양태에서, 활성화는 물질 조성물(예를 들면, 단백질 또는 핵산)을 원하는 생물학적 기능을 수행하기에 적합한 상태에 배치하는 것을 의미한다. 일 양태에서, 활성화될 수 있는 물질 조성물은 또한 불활성화 상태를 갖는다. 일 양태에서, 활성화된 물질 조성물은 억제 또는 자극 생물학적 기능 또는 둘 다를 가질 수 있다.

일 양태에서, 상승은 물질 조성물(예를 들면, 단백질 또는 핵산)의 원하는 생물학적 활성의 증가를 의미한다. 일 양태에서, 상승은 물질 조성물의 농도 증가를 통해 발생할 수 있다.

본원에서 사용되는 "세포 주기 검사 경로"는 세포 주기 검사의 조절에 관련되는 생화학적 경로를 의미한다. 세포 주기 검사 경로는 세포 주기 검사를 포함하는 하나 이상의 기능에 대해 자극 또는 억제 효과 또는 둘 다를 가질 수 있다. 세포 주기 검사 경로는 적어도 2종의 물질 조성물, 바람직하게는 단백질을 포함하고, 이들 둘 다 세포 주기 검사의 조절에 기여한다. 세포 주기 검사 경로는 세포 주기 검사 경로의 하나 이상의 구성원의 활성화를 통해 활성화될 수 있다. 바람직하게는, 세포 주기 검사 경로는 생화학적 신호 전달 경로이다.

본원에서 사용되는 "세포 주기 검사 조절자"는 적어도 부분적으로 세포 주기 검사의 조절에서 기능할 수 있는 물질 조성물을 의미한다. 세포 주기 검사 조절자는 세포 주기 검사를 포함하는 하나 이상의 기능에 대해 자극 또는 억제 효과 또는 둘 다를 가질 수 있다. 일 양태에서, 세포 주기 검사 조절자는 단백질이다. 다른 양태에서, 세포 주기 검사 조절자는 단백질이 아니다.

일 양태에서, 암 또는 세포 증식성 질환의 치료에 의해 세포가 사멸하고, 바람직하게는, 세포 사멸에 의해 집단에서의 세포 수가 적어도 10% 감소한다. 더 바람직하게는, 세포 사멸은 적어도 20% 감소; 더 바람직하게는, 적어도 30% 감소; 더 바람직하게는, 적어도 40% 감소; 더 바람직하게는, 적어도 50% 감소; 가장 바람직하게는, 적어도 75% 감소를 의미한다. 집단에서의 세포 수를 임의의 재현 가능한 수단에 의해 측정할 수 있다. 일 양태에서, 집단에서의 세포 수를 형광 활성 세포 분류법(FACS)에 의해 측정한다. 다른 양태에서, 집단에서의 세포 수를 면역형광 현미경법에 의해 측정한다. 다른 양태에서, 집단에서의 세포 수를 광학 현미경법에 의해 측정한다. 다른 양태에서, 세포 사멸을 측정하는 방법은 문헌[Li et al., (2003) Proc Natl Acad Sci USA. 100(5): 2674-8]에 기재되어 있다. 일 양태에서, 세포 사멸은 아폽토시스에 의해 발생한다.

바람직한 양태에서, 유효량의 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체는 정상 세포에 현저히 세포독성이 아니다. 치료 유효량의 화합물의 투여가 세포 사멸을 정상 세포의 10% 이상으로 유도하지 않는 경우 치료 유효량의 화합물은 정상 세포에 현저히 세포독성이 아니다. 치료 유효량의 화합물의 투여가 세포 사멸을 정상 세포의 10% 이상으로 유도하지 않는 경우 치료 유효량의 화합물은 정상 세포의 생존능력에 현저히 영향을 미치지 않는다. 일 양태에서, 세포 사멸은 아폽토시스에 의해 발생한다.

일 양태에서, 세포를 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체와 접촉시키면 암 세포에서 세포 사멸이 선택적으로 유도 또는 활성화된다. 바람직하게는, 이를 필요로 하는 피험체에게 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체를 투여하면 암 세포에서 세포 사멸이 선택적으로 유도 또는 활성화된다. 다른 양태에서, 세포를 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체와 접촉시키면 세포 증식성 질환에 의해 이환되는 하나 이상의 세포에서 세포 사멸이 선택적으로 유도된다. 바람직하게는, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체를 이를 필요로 하는 피험체에게 투여하면 세포 증식성 질환에 의해 이환되는 하나 이상의 세포에서 세포 사멸이 선택적으로 유도된다. 바람직한 양태에서, 본 발명은 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체를 이를 필요로 하는 피험체에게 투여하여 암을 치료 또는 예방하는 방법에 관한 것이고, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 프로드럭, 대사물질, 유사체 또는 유도체를 투여하면 세포 주기의 G1상 및/또는 S상에서 세포의 축적, 정상 세포에서 상당량의 세포 사멸이 없는 암 세포에서 세포 사멸을 통한 세포독성, 적어도 2의 치료 지수를 갖는 동물에서 항종양 활성 및 세포 주기 검사의 활성화 중 하나 이상이 발생한다. 본원에서 사용되는 "치료 지수"는 효과 용량으로 나눈 최대 허용 용량이다. 당업자는 본원에 기재된 공지 기술 또는 균등 기술의 자세한 사항에 대해 일반 참조문헌 본문을 참조할 수 있다. 이 본문으로는 문헌[Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley and Sons, Inc. (2005); Sambrook et al, Molecular Cloning, A Laboratory Manual (3d ed.), Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, New York (2000); Coligan et al., Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons, N.Y.; Enna et al., Current Protocols in Pharmacology, John Wiley & Sons, N.Y.; Fingl et al., The Pharmacological Basis of Therapeutics (1975), Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, 18th edition (1990)]을 들 수 있다. 이 본문은 물론 또한 본 발명의 양태를 만들거나 사용하는 것에 있어서 언급될 수 있다.

2. 피롤로퀴놀리닐 -피롤-2,5- 디온 및 피롤로퀴놀리닐 - 피롤리딘 -2,5- 디온

하기 화학식 Ⅲ 및 화학식 Ⅲa의 피롤로퀴놀리닐-피롤-2,5-디온 화합물은 다음과 같다:

[상기 식 중,

R1, R2 및 R3은 독립적으로 수소, F, Cl, Br, I, -NR5R6, -(C₁-C₆)알킬, -(C₁-C₆) 치환 알킬, -(C₃-C₉)사이클로알킬, -(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬, -O-(C₁-C₆)알킬, -O-(C₁-C₆) 치환 알킬, -O-(C₃-C₉)사이클로알킬 및 -O-(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴로 이루어진 군으로부터 선택되고;

R4는 독립적으로 수소, -(C₁-C₆)알킬, -CH₂R7로 이루어진 군으로부터 선택되고;

R5, R6은 독립적으로 수소 및 -(C₁-C₆)알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;

R7은 독립적으로 -O-P(=O)(OH)₂, -0-P(=O)(-OH)(-O-(C₁-C₆)알킬), -0-P(=O)(-O-(C₁-C₆)알킬)₂, -0-P(=0)(-0H)(-O-(CH₂)-페닐), -O-P(=0)(-O-(CH₂)-페닐)₂, 카르복실산 기, 아미노 카르복실산 기 및 펩티드로 이루어진 군으로부터 선택되고;

Q는 아릴, 헤테로아릴, -O-아릴, -S-아릴, -O-헤테로아릴 및 -S-헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고;

X는 -(CH₂)-, -(NR8)-, S 및 O로 이루어진 군으로부터 선택되고;

R8은 독립적으로 수소, -(C₁-C₆)알킬, -(C₁-C₆) 치환 알킬, -(C₃-C₉)사이클로알킬, -(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬 및 -O-(C₁-C₆)알킬, -C(=O)-O-(C₁-C₆)알킬 및 -C(=O)-O-(C₁-C₆) 치환 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;

Y는 -(CH₂)- 또는 결합으로 이루어진 군으로부터 선택되고; 여기서 상기 아릴, 헤테로아릴, -O- 아릴, -S-아릴, -O-헤테로아릴 및 -S-헤테로아릴 기는 F, Cl, Br, I, -NR5R6, -(C₁-C₆)알킬, -(C₁-C₆) 치환 알킬, -(C₃-C₉)사이클로알킬, -(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬, -O-(C₁-C₆)알킬, -O-(C₁-C₆) 치환 알킬, -O-(C₃-C₉)사이클로알킬, -O-(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬, -아릴, -아릴-(C₁-C₆)알킬, -아릴-O-(C₁-C₆)알킬, -O-아릴, -O-(C₁-C₄)알킬-아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, -O-(C₁-C₄)알킬-헤테로사이클 및 -(S(=O)₂)-(C₁-C₆)알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있고;

m은 1 또는 2이다].

화학식 Ⅲa의 화합물의 경우, Q는 아릴, 헤테로아릴, -O-아릴, -S-아릴, -O-헤테로아릴 및 -S-헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 단 R4가 수소 또는 (C₁-C₄)알킬일 때, Q는 3-인돌릴 또는 치환된 3-인돌릴이 아니다.

화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 피롤로퀴놀리닐-피롤리딘-2,5-디온 화합물은 다음과 같다:

[상기 식 중,

R7은 독립적으로 -O-P(=O)(OH)₂, -O-P(=O)(-OH)(-O-(C₁-C₆)알킬), -O-P(=O)(-O-(C₁-C₆)알킬)₂, -O-P(=O)(-OH)(-O-(CH₂)-페닐), -O-P(=O)(-O-(CH₂)-페닐)₂, 카르복실산 기, 아미노 카르복실산 기 및 펩티드로 이루어진 군으로부터 선택되고;

Q는 아릴, 헤테로아릴, -O-아릴, -S-아릴, -O- 헤테로아릴 및 -S-헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고;

X는 -(CH₂)-, -(NR8)-, S 및 O로 이루어진 군으로부터 선택되고;

R8은 독립적으로 수소, -(C₁-C₆)알킬, -(C₁-C₆) 치환 알킬, -(C₃-C₉)사이클로알킬, -(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬 및 -0-(C₁-C₆)알킬, -C(=O)-O-((C₁-C₆)알킬 및 -C(=O)-O-((C₁-C₆) 치환 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;

m은 1 또는 2이다].

2.1. 정의

"알킬"이란 용어는 불포화 없이 탄소 및 수소를 포함하는 라디칼을 의미한다. 알킬 라디칼은 직쇄 또는 분지쇄일 수 있다. 알킬 라디칼의 예로는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 헥실, t-부틸, sec-부틸 등을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 알킬 기를 범위로 표시할 수 있고, 따라서 예를 들면 (C₁-C₆) 알킬 기는 직쇄 또는 분지쇄 알킬 주쇄에서 1개 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 알킬 기이다. 치환 및 비치환 알킬 기는 독립적으로 (C₁-C₅)알킬, (C₁-C₆)알킬, (C₁-C₁₀)알킬, (C₃-C₁₀)알킬 또는 (C₅-C₁₀)알킬일 수 있다. 달리 명확히 기술하지 않는 한, "알킬"이란 용어는 "사이클로알킬"을 포함하지 않는다.

"사이클로알킬" 기는 "고리 부분"에서 표시된 수의 탄소 원자를 갖는 환식 알킬 기를 의미하고, 여기서 "고리 부분"은 축합, 스피로 또는 가교 고리 구조 중 하나 이상의 고리 구조로 이루어질 수 있다. 예를 들면, C₃ 내지 C₆ 사이클로알킬 기(예를 들면, (C₃-C₆)사이클로알킬)는 고리 내 3개 및 6개의 탄소 원자를 갖는 고리 구조이다. 범위가 주어지지 않을 경우, 사이클로알킬은 고리 부분에서 3개 내지 9개의 탄소 원자((C₃-C₉)사이클로알킬)를 갖는다. 사이클로알킬 기의 예로는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸 및 아다만틸을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 바람직한 사이클로알킬 기는 고리 구조 내에 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 또는 3개 내지 9개의 탄소 원자를 갖는다.

치환 알킬 및 치환 사이클로알킬이란 용어는 불소, 아릴, 헤테로아릴, -O-(C₁-C₆)알킬 및 -NR5R6(여기서, R5 및 R6은 독립적으로 수소 및 -(C₁-C₆)알킬로 이루어진 군으로부터 선택됨)으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 상기 정의된 알킬 및 사이클로알킬 기를 의미한다.

"아릴"이란 용어는 1개, 2개 또는 3개의 방향족 고리를 갖는 방향족 탄소환식 기를 의미한다. 아릴 기의 예로는 페닐, 나프틸 등을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 아릴 기는 하나 이상의 추가의 4원 내지 9원의 비방향족 탄소환식 또는 이종환식 고리와 축합된 1개, 2개 또는 3개의 방향족 고리 구조를 포함한다. 축합된 아릴 기의 예로는 벤조사이클로부타닐, 인다닐, 테트라하이드로나프틸레닐, 1,2,3,4-테트라하이드로페난트레닐, 테트라하이드로안트라세닐, 1,4-디하이드로-1,4-메타노나프탈레닐, 벤조디옥솔릴을 들 수 있다.

"헤테로아릴"이란 용어는 방향족 고리 내에 1개 내지 4개의 이종 원자(예컨대, 질소, 황 또는 산소)를 포함하는 1개, 2개 또는 3개의 방향족 고리를 갖는 헤테로방향족(헤테로아릴) 기를 의미한다. 헤테로아릴 기는 하나 이상의 추가의 4-9원의 비방향족 고리와 축합된 1개 내지 4개의 이종 원자를 포함하는 1개, 2개 또는 3개의 방향족 고리 구조를 포함한다. 방향족 고리 내에 단일 유형의 이종 원자를 포함하는 헤테로아릴 기를 이들이 포함하는 헤테로 원자의 유형으로 표시하고, 따라서 질소 함유 헤테로아릴, 산소 함유 헤테로아릴 및 황 함유 헤테로아릴은 각각 하나 이상의 질소, 산소 또는 황 원자를 포함하는 헤테로방향족 기를 말한다. 헤테로아릴 기의 예로는 피리딜, 피리미디닐, 트리아졸릴, 퀴놀릴, 퀴나졸리닐, 티아졸릴, 벤조[b]티오페닐, 푸라닐, 이미다졸릴, 인돌릴 등을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

"헤테로사이클릴" 또는 "헤테로사이클"이란 용어는 축합, 스피로 또는 가교되어 추가 고리를 형성할 수 있는 안정한 포화 또는 불포화 비방향족 고리 구조를 의미한다. 각각의 헤테로사이클은 1개 이상의 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1개 내지 4개의 이종 원자로 이루어진다. "헤테로사이클릴" 또는 "헤테로사이클"은 안정한 비방향족 3원 내지 7원 단환식 이종환식 고리 구조 및 8원 내지 11원 이환식 이종환식 고리 구조를 포함한다. 헤테로사이클릴 라디칼은 안정한 구조를 발생시키는 임의의 내향 고리 탄소 또는 질소 원자에서 부착될 수 있다. 바람직한 헤테로사이클은 3원 내지 7원 단환식 헤테로사이클(더 바람직하게는 5원 내지 7원 단환식 헤테로사이클) 및 8원 내지 10원 이환식 헤테로사이클을 포함한다. 이러한 기의 예로는 피페리디닐, 피페라지닐, 피라닐, 피롤리디닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 옥소피페리디닐, 옥소피롤리디닐, 옥소아제피닐, 아제피닐, 이속소졸릴, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로푸라닐, 디옥솔릴, 디옥시닐, 옥사티올릴, 디티올릴, 설포라닐, 디옥사닐, 디옥솔라닐, 테트라하이드로푸로디하이드로푸라닐, 테트라하이드로피라노디하이드로-푸라닐, 디하이드로피라닐, 테트라하이드로푸로푸라닐, 테트라하이드로피라노푸란, 퀴누클리디닐(1-아자비사이클로[2.2.2]옥타닐) 및 트로파닐(8-메틸-8-아자비사이클로[3,2,1]옥타닐)을 들 수 있다.

Q 치환기의 목적을 위해, "치환된 3-인돌릴"이란 용어는 F, Cl, Br, I, -NR5R6(여기서, R5, R6은 수소 및 -(C₁-C₆)알킬로 이루어진 군으로부터 선택됨), -(C₁-C₆)알킬, -(C₁-C₆) 치환 알킬, -(C₃-C₉)사이클로알킬, -(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬, -0-(C₁-C₆)알킬, -0-(C₁-C₆) 치환 알킬, -0-(C₃-C₉)사이클로알킬, -0-(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬, -아릴, -아릴-(C₁-C₆)알킬, -아릴-O-(C₁-C₆)알킬, -O-아릴, -O-(C₁-C₆)알킬-아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, -O-(C₁-C₆)알킬-헤테로사이클 및 -(S(=O)₂)-(C₁-C₆)알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 3-인돌릴 기를 의미한다.

R7 치환기의 목적을 위해, "카르복실산 기"란 용어는 -O-C(=O)-(C₁-C₆)알킬, -O-C(=O)-(C₃-C₉)사이클로알킬, -O-C(=O)-아릴, -O-C(=O)-헤테로아릴, -O-C(=O)-헤테로사이클, -O-C(=O)-(C₁-C₆)알킬-아릴, -O-C(=O)-(C₁-C₆)알킬-헤테로아릴 또는 -O-C(=O)-(C₁-C₆)알킬-헤테로사이클 형태의 기를 의미한다. "카르복실산 기" 내에 F, Cl, Br, I, -OH, -SH, -NR5R6, -(C₁-C₆)알킬, -(C₁-C₆) 치환 알킬, -(C₃-C₉)사이클로알킬, -(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬, -0-(C₁-C₆)알킬, -0-(C₁-C₆) 치환 알킬, -S-(C₁-C₆)알킬, -0-(C₃-C₉)사이클로알킬, -0-(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬, -아릴, -O-아릴, -0-(C₁-C₆)알킬-아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, -O-(C₁-C₆)알킬-헤테로사이클, -(S(=O)₂)-(C₁-C₆)알킬, -NH-C(=NH)-NH₂(즉, 구아니도), -COOH 및 -C(=O)-NR5R6(여기서, R5 및 R6은 수소 및 -(C₁-C₆)알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택됨)으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 -O-C(=O)-(C₁-C₆)알킬, -O-C(=O)-(C₃-C₉)사이클로알킬, -O-C(=O)-아릴, -O-C(=O)-헤테로아릴, -O-C(=O)-헤테로사이클, -O-C(=O)-(C₁-C₆)알킬-아릴, -O-C(=O)-(C₁-C₆)알킬-헤테로아릴 또는 -O-C(=O)-(C₁-C₆)알킬-헤테로사이클 형태의 기가 포함된다. 또한, R7 치환기의 목적을 위해, "아미노 카르복실산 기"란 용어는 -NR5R6(여기서, R5 및 R6은 수소 및 (C₁-C₆)알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택됨) 형태의 하나 이상의 독립적으로 선택된 아미노 기를 보유하는 상기 기재된 치환기로 치환된 카르복실산 기를 비롯한 카르복실산 기를 의미한다.

본 발명의 일 양태에서, R7은 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민, 글루탐산, 글리신, 히스티딘, 이소루신, 루신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프롤린, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신, 발린 또는 이들의 입체이성체 또는 라세미 혼합물을 비롯한(이들로 제한되지는 않음) 알파 아미노산 또는 이미노산이다. 본 발명의 다른 양태에서, R7은 L-알라닌, L-아르기닌, L-아스파라긴, L-아스파르트산, L-시스테인, L-글루타민, L-글루탐산, L-글리신, L-히스티딘, L-이소루신, L-루신, L-리신, L-메티오닌, L-페닐알라닌, L-프롤린, L-세린, L-트레오닌, L-트립토판, L-티로신 및 L-발린으로 이루어진 군으로부터 선택되는 알파 아미노산 또는 이미노산이다.

R7 치환기의 목적을 위해, "펩티드"란 용어는 가수분해시 각각 2종, 3종, 4종 또는 5종의 아미노산 또는 이미노산(예를 들면, 프롤린)을 배출하는 디펩티드, 트리펩티드, 테트라펩티드 또는 펜타펩티드를 의미한다. R7의 목적을 위해, 펩티드는 에스테르 결합을 통해 분자의 나머지에 결합한다. 일 양태에서, R7의 펩티드는 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민, 글루탐산, 글리신, 히스티딘, 이소루신, 루신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프롤린, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신, 발린 또는 이들의 입체이성체 또는 라세미 혼합물을 비롯한(이들로 제한되지는 않음) 알파 아미노산 또는 이미노산으로 이루어지고; 이 양태의 더 바람직한 버전에서, 에스테르 결합에 포함된 카르복실 기는 측쇄 카르복실과 반대로 펩티드의 카르복실 말단 COOH 기이다. 본 발명의 다른 양태에서, R7은 L-알라닌, L-아르기닌, L-아스파라긴, L-아스파르트산, L-시스테인, L-글루타민, L-글루탐산, L- 글리신, L-히스티딘, L-이소루신, L-루신, L-리신, L-메티오닌, L-페닐알라닌, L-프롤린, L- 세린, L-트레오닌, L-트립토판, L-티로신 및 L-발린으로 이루어진 군으로부터 선택되는 알파 아미노산 또는 이미노산이고; 이 바람직한 양태의 더 바람직한 버전에서, 에스테르 결합에 포함된 카르복실 기는 측쇄 카르복실과 반대로 펩티드의 카르복실 말단 COOH 기이다.

2.2. 바람직한 화합물

바람직한 양태에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물(여기서, Q는 아릴, 헤테로아릴, -O-아릴, -S-아릴, -O-헤테로아릴 및 -S-헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 단 Q는 3-인돌릴 또는 치환된 3-인돌릴이 아님)이 포함된다. 다른 바람직한 양태에서, Q는 아릴, 헤테로아릴, -O-아릴, -S-아릴, -O-헤테로아릴 및 -S-헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 단 R4가 수소, 사이클로알킬 또는 알킬일 때, Q는 3-인돌릴 또는 치환된 3-인돌릴이 아니다. 또 다른 바람직한 양태에서, Q는 아릴, 헤테로아릴, -O-아릴, -S-아릴, -O-헤테로아릴 및 -S-헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 단 R4가 수소, (C₃-C₄)사이클로알킬 또는 (C₁-C₄)알킬일 때, Q는 3-인돌릴 또는 치환된 3-인돌릴이 아니다. 다른 바람직한 양태에서, Q는 3-인돌릴 또는 치환된 3-인돌릴이고, 단 R4는 수소, 사이클로알킬 또는 알킬이 아니다. 또 다른 바람직한 양태에서, Q는 3-인돌릴 또는 치환된 3-인돌릴이고, 단 R4는 수소, (C₃-C₄)사이클로알킬 또는 (C₁-C₄)알킬이 아니다.

다른 바람직한 양태는 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물(여기서, R4는 -CH₂R7임)을 포함한다. 이 화합물은 상응하는 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물(여기서, R4는 H임)의 프로드럭 형태로서 작용할 수 있다. 프로드럭 형태는 가수분해에 의해 개열하여 상응하는 R4가 H인 화합물을 배출한다. 상응하는 하이드록시메틸렌 유도체를 생성하는 효소 또는 비효소 경로에 의해 가수분해가 발생할 수 있고, 후속적인 가수분해시, R4가 H인 화합물이 배출된다. 하나의 이러한 바람직한 양태에서, R4는 -CH₂R7이고, 여기서 R7은 -O-P(=O)(OH)₂, -O-P(=O)(-OH)(-O-(C₁-C₆)알킬) 또는 -O-P(=O)(-O-(C₁-C₆)알킬)₂이다. R7이 -O-P(=O)(-O-(C₁-C₆)알킬)₂인 일 양태에서, 알킬 기는 독립적으로 선택된다. 다른 바람직한 양태에서, R4는 -CH₂R7이고, 여기서 R7은 카르복실산 기 또는 아미노 카르복실산 기이다. 또 다른 바람직한 양태에서, R7은 펩티드이고; 더 바람직한 양태에서, 펩티드는 펩티드 쇄의 카르복실 말단 COOH 기와 형성된 에스테르 결합을 통해 화합물의 나머지에 결합한다. R4가 -CH₂R7이고, R7이 펩티드인 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 다른 바람직한 분리 및 독립 양태에서, 펩티드는 디펩티드, 트리펩티드, 테트라펩티드 또는 펜타펩티드일 수 있다. R7 관능기의 펩티드에 대한 바람직한 아미노산 조성물은 상기 기재되어 있다.

화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 양태는 X가 -(NR8)-, S 및 O로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 R8이 독립적으로 수소, -(C₁-C₆)알킬, -(C₁-C₆) 치환 알킬, -(C₃-C₉)사이클로알킬, -(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬 및 -O-(C₁-C₆)알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 포함한다. 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 다른 양태는 X가 -CH₂-인 것을 포함한다. 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 다른 양태에서, X는 산소(O)이다. 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 다른 양태에서, X는 황(S)이다. 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 또 다른 양태에서, X는 -(NR8)-이고, 여기서 R8은 독립적으로 수소, -(C₁-C₆)알킬, -(C₁-C₆) 치환 알킬, -(C₃-C₉)사이클로알킬, -(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬 및 -O-(C₁-C₆)알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 발명의 다른 바람직한 양태는 화학식 Ⅲ 또는 화학식 Ⅲa의 화합물을 포함하고, 여기서 Q는 헤테로아릴 또는 임의로 치환된 헤테로아릴 기이다. 화학식 Ⅲ 또는 화학식 Ⅲa의 화합물의 4개의 분리된 대안적인 바람직한 양태에서, Q는 임의로 치환된 단환식 헤테로아릴 기, 임의로 치환된 이환식 헤테로아릴 기, 임의로 치환된 이환식 헤테로아릴 기이고, 단 이환식 헤테로아릴 기는 인돌릴 기 또는 치환 인돌릴 또는 임의로 치환된 삼환식 헤테로아릴 기가 아니다. 임의의 치환기가, 존재하는 경우, 독립적으로 아릴, 헤테로아릴, -O-아릴, -S-아릴, -O-헤테로아릴 및 -S-헤테로아릴에 대해 언급된 것으로부터 선택된다.

본 발명의 바람직한 양태에서 Q가 헤테로아릴 또는 임의로 치환된 헤테로아릴 기인 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물이 포함된다. 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 4개의 분리된 대안적인 바람직한 양태에서, Q는 임의로 치환된 단환식 헤테로아릴 기, 임의로 치환된 이환식 헤테로아릴 기, 임의로 치환된 이환식 헤테로아릴 기이고, 단 이환식 헤테로아릴 기는 인돌릴 또는 임의로 치환된 삼환식 헤테로아릴 기가 아니다. 더 바람직한 양태에서, Q는 임의로 치환된 질소 함유 헤테로아릴 기이다. 관련 양태에서, Q는 임의로 치환된 인돌릴이다. 임의의 치환기는, 존재하는 경우, 독립적으로 아릴, 헤테로아릴, -O-아릴, -S-아릴, -O-헤테로아릴 및 -S-헤테로아릴에 대해 언급된 것으로부터 선택된다.

본 발명의 바람직한 양태는 라세미 혼합물을 비롯한 화학식 Ⅳa 및 화학식 Ⅳb의 화합물의 혼합물을 포함한다. 다른 바람직한 양태에서, 화학식 Ⅳa 및 화학식 Ⅳb의 화합물은 (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 분리 거울상이성체이다. 이 양태에서, (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 제제를 출발 물질 1,2,3,4-테트라하이드로퀴놀린 및 인돌-3-아세트아미드로 시작하여 혼합물로서 제조한다. 1,2,3,4-테트라하이드로퀴놀린을 실시예 1, 단계 1-5에 기재된 바대로 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)옥소아세트산 메틸 에스테르로 전환시킨다. 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)옥소아세트산 메틸 에스테르를 실시예 1, 단계 6에 기재된 바대로 인돌-3-아세트아미드와 반응시켜 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온을 생성시킨다. 이후, (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 혼합물을 절차 B를 사용하여 실시예 2에 기재된 바대로 촉매 수소화에 의해 제조한다.

본 발명의 바람직한 양태는 또한 라세미 혼합물을 비롯한 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물의 혼합물을 포함한다. 다른 바람직한 양태에서, 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물은 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 분리 거울상이성체이다. 이 양태에서, 우선 상기 기재된 바대로 (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 제조하여 화합물을 혼합물로서 제조한다. 이후, 시스 화합물의 혼합물을 tert-부탄올 중의 칼륨 tert-부톡사이드의 혼합물로 처리하여 실시예 3에 기재된 바대로 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 혼합물을 얻는다.

본 발명의 화합물의 모든 입체이성체가, 라세미 혼합물의 결정질 형태 및 개별 이성체의 결정질 형태를 비롯하여, 혼합물로 또는 순수한 또는 실질적으로 순수한 형태로 고려된다. 본 발명에 따른 화합물의 정의는 모든 가능한 입체이성체(예를 들면, 각각의 비대칭 중심에 대한 R 및 S 배치) 및 이의 혼합물을 포함한다. 이는 매우 특별히 라세미 형태 및 특정한 활성을 갖는 단리된 광학 이성체를 포함한다. 라세미 형태를 예를 들면 부분입체이성체 유도체의 분별 결정, 분리 또는 결정, 키랄 컬럼 크로마토그래피 또는 초임계 유체 크로마토그래피에 의한 분리와 같은 물리적 방법에 의해 분할할 수 있다. 개별 광학 이성체를 예를 들면 광학적 활성 산에 의한 염 형성 이후 결정과 같은 종래 방법에 의해 라세미체로부터 얻을 수 있다. 추가로, 이중 결합에서 E 및 Z 배치와 같은 모든 기하 이성체가 달리 기재되지 않은 한 본 발명의 범위 내에 있다. 본 발명의 특정 화합물은 토토머 형태로 존재할 수 있다. 상기 화합물의 모든 이러한 토토머 형태는 달리 기재되지 않은 한 본 발명의 범위 내에 있다. 또한, 본 발명은 유사체 또는 유도체의 하나 이상의 위치 이성체 혼합물을 포함한다.

본원에서 사용되는 "염"이란 용어는 약학적으로 허용되는 염이고, 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 포스페이트, 설페이트, 수소 설페이트, 알킬설포네이트, 아릴설포네이트, 아세테이트, 벤조에이트, 시트레이트, 말레에이트, 푸마레이트, 숙시네이트, 락테이트 및 타르트레이트를 비롯한 산 부가염; 알칼리 금속 양이온, 예컨대 Na, K, Li, 알칼리 토금속염, 예컨대 Mg 또는 Ca 또는 유기 아민 염을 들 수 있다.

본원에서 사용되는 "대사물질"이란 용어는 생체내 상기 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물에 유사한 활성을 나타내는 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 유사체 또는 유도체의 대사의 생성물을 의미한다.

본원에서 사용되는 "프로드럭"이란 용어는 하나 이상의 프로-잔기(pro-moiety), 예컨대 아미노산 잔기 또는 다른 수용성 잔기에 공유 결합된 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 의미한다. 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물은 가수분해, 산화 및/또는 효소 배출 메커니즘을 통해 프로-잔기로부터 배출될 수 있다. 일 양태에서, 본 발명의 프로드럭 조성물은 수성 용해도 증가, 안정성 개선 및 약물동력학 프로파일 개선의 추가 이점을 나타낸다. 원하는 프로드럭 특성을 얻기 위해 프로-잔기를 선택할 수 있다. 예를 들면, 프로-잔기, 예를 들면, 아미노산 잔기 또는 다른 수용성 잔기, 예컨대 R4 내에 포스페이트는 용해도, 안정성, 생체이용률 및/또는 생체내 전달 또는 흡수에 기초하여 선택할 수 있다.

3. 피롤로퀴놀리닐 -피롤-2,5- 디온 및 피롤로퀴놀리닐 - 피롤리딘 -2,5- 디온의 합성

보호기의 사용을 비롯하여 유기 분자 및 작용기 형질전환 및 조작의 제조를 위한 표준 합성 방법 및 절차는 당해 분야에서의 표준 참조문헌 본문 또는 과학 문헌으로부터 얻을 수 있다. 임의의 하나의 또는 다수의 출처로 제한됨이 없이, 유기 합성의 인정되는 참조 문헌으로는 문헌[Smith, M.B.; March, J. March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5^th ed.; John Wiley & Sons: New York, 2001; and Greene, T.W.; Wut, P.G. M. Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd; John Wiley & Sons: New York, 1999]을 들 수 있다. 다음의 합성 방법의 설명은 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 제조를 위한 일반적인 절차를 예시하기 위해 설계되고, 이를 제한하지 않는다.

3.1. R4 가 수소인 피롤로퀴놀리닐 -피롤-2,5- 디온 및 피롤로퀴놀리닐 - 피롤리딘 -2,5- 디온의 합성을 위한 일반적인 절차

본 발명은 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 피롤로퀴놀리닐-피롤-2,5-디온 화합물을 제공한다. 화학식 I의 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)옥소아세트산 에스테르와 화학식 Ⅱ의 아미드와의 반응으로 시작하여, 반응식 1에 도시된 바대로 R4가 수소인 화학식 Ⅲa의 화합물을 비롯하여 화학식 Ⅲ의 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온을 형성하는 일련의 반응에 의해 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물의 제조를 성취할 수 있다.

[반응식 1]

3.1.1. R4 가 수소인 화학식 Ⅲ의 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5- 디온의 합성

염기의 존재 하에 테트라하이드로푸란(THF), 테트라하이드로피란, 디에틸 에테르 등을 비롯한(이들로 제한되지는 않음) 임의의 적합한 무수 극성 비양성자성 용매 중에 R4가 수소인 화학식 Ⅲa의 화합물을 비롯하여 화학식 Ⅲ의 화합물을 제조하기 위한 화학식 I의 에스테르 및 화학식 Ⅱ의 화합물의 축합을 수행한다. 반응의 목적을 위해, 적합한 화학식 I의 에스테르로는 알킬 에스테르(여기서, R9는 (C₁-C₄) 알킬 기임)를 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않고, 바람직한 에스테르로는 메틸 및 에틸 에스테르를 들 수 있다. 반응에 적합한 염기로는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, n-부탄올, 이소부탄올 및 tert-부탄올의 알칼리 금속염을 비롯한(이들로 제한되지는 않음) 저분자량 알킬 알콜의 알칼리 금속염을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않다. 저분자량 알킬 알콜의 바람직한 알칼리 금속염으로는 나트륨 및 칼륨염을 들 수 있고, 칼륨 tert-부톡사이드(tBuOK)가 바람직한 염기이다. 통상적으로, 반응을 0℃에서 2 시간 동안 수행하지만, 시간 및 온도 둘 다 화학식 I 및 화학식 Ⅱ의 화합물에 존재하는 특정한 치환기 및 이용되는 용매에 따라 변경할 수 있다. 반응 온도는 -78℃로부터 37℃로 변할 수 있고, 바람직하게는 -35℃ 내지 25℃ 또는 더 바람직하게는 -15℃ 내지 10℃이다. 반응 시간은 일반적으로 이용되는 온도와 역으로 변할 수 있고, 약 15 분 내지 24 시간, 더 바람직하게는, 30 분 내지 12 시간, 더 바람직하게는 1 내지 6 시간의 적합한 시간이 이용될 수 있다.

3.1.2. R4 가 수소인 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물의 제조

아연-수은에 의한 환원(절차 A), 촉매 수소화(절차 B) 및 메탄올 중 마그네슘에 의한 환원(절차 C)을 비롯한(이들로 제한되지는 않음) 각종의 절차를 이용하여 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb를 갖는 상응하는 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 생성시키기 위한 화학식 Ⅲ 및 화학식 Ⅲa의 화합물(여기서, R4는 수소임)의 환원을 수행할 수 있다. 반응식 1에 표시한 바대로, 환원 반응 및 선택 조건에 따라, 반응은 원칙적으로 주로 화학식 Ⅳa 및 화학식 Ⅳb의 화합물 또는 주로 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 대안적으로 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물의 혼합물을 생성시킨다.

아연-수은 환원 물질에 의한 화학식 Ⅲ 또는 화학식 Ⅲa의 화합물의 직접 환원에 의해 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물의 혼합물을 제조할 수 있다. Zn 분말을 HgCl₂ 탈염수와 혼합한 후 HCl에 의해 산성화시켜 제조된 새로운 환원 물질에 의해 일반적으로 반응을 수행한다. 건조한 후, 고체 환원 물질(아연-수은)은 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온의 환원에 대해 실시예 2, 절차 A에 기재된 바대로 건조 HCl 가스 분위기 하에 환류하는 건조 에탄올 중에 화학식 Ⅲ 또는 화학식 Ⅲa의 화합물의 환원에 적합하다.

피롤리딘-2,5-디온을 제조하는 대안적인 방법은 주로 화학식 Ⅳa 및 화학식 Ⅳb의 (±)-시스 피롤리딘-2,5-디온으로 이루어지는 혼합물을 생성시키는 촉매 수소화이다. 수소 1 분위기 하에 48 시간 동안 귀금속 촉매 위로 무수 알콜 중에 화학식 Ⅲ 또는 화학식 Ⅲa의 화합물의 촉매 수소화를 수행할 수 있다. 환원을 수행하기 위해 n-프로필 알콜, 이소프로필 알콜, 에탄올 또는 메탄올을 비롯한 각종의 저분자량 알킬 알콜을 사용할 수 있다. 바람직하게는 알콜은 에탄올 또는 메탄올이고, 가장 바람직하게는 메탄올이다. 화학식 Ⅲ 또는 화학식 Ⅲa의 화합물의 환원을 위해 챠콜상 귀금속 촉매(예를 들면, 백금, 팔라듐, 로듐, 루테늄 등)가 바람직하다. 더 바람직한 양태에서, 귀금속 촉매는 활성화된 챠콜상 팔라듐이다. 수소 1 분위기 하에 실온(25℃)에서 12∼48 시간 동안 화학식 Ⅲa 또는 화학식 Ⅲ의 화합물의 환원이 일반적으로 피롤리딘-2,5-디온의 제조에 적합하지만, 수소 압력, 반응 시간 및 반응 온도는 변할 수 있다. 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온의 촉매 수소화가 실시예 2, 절차 B에 기재되어 있다.

금속 환원 물질에 의해 무수 알콜 중에 환원에 의해 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물의 혼합물을 생성시키기 위해 화학식 Ⅲa 또는 화학식 Ⅲ의 피롤-2,5-디온을 환원시킬 수 있다. 바람직한 금속으로는 나트륨, 칼슘 및 마그네슘을 들 수 있고, 바람직한 금속 환원 물질로서 마그네슘을 들 수 있다. 마그네슘 조각과 함께 메탄올, 에탄올, n-프로판올 및 이소프로판올로 이루어진 군으로부터 선택되는 알콜 중에 화학식 Ⅲ 또는 화학식 Ⅲa의 화합물을 환류시켜 반응을 통상적으로 불활성 질소 분위기 하에 30 분 내지 2 시간 동안 수행한다. 바람직한 양태에서, (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 제조를 위해 실시예 2, 절차 C에 기재된 바대로 메탄올 중에 약 40 분 동안 반응을 수행한다.

시스 배치에서 피롤리딘 고리 치환기를 갖는 화학식 Ⅳa 및/또는 화학식 Ⅳb의 화합물을 극성 양성자성 용매 중에 염기에 의한 처리에 의해 치환기가 트랜스 배치로 있는 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물의 혼합물 또는 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 모든 4개의 이성체의 혼합물로 전환시킬 수 있다. 통상적으로, 반응은 알콜 용매 중의 (C₁-C₄) 알킬 알콜(예를 들면, 메탄올 중의 나트륨 또는 칼륨 메톡사이드, 에탄올 중의 나트륨 또는 칼륨 에톡사이드, tert-부탄올 중의 나트륨 또는 칼륨 tert-부톡사이드)의 알칼리 금속염을 이용하고, tert-부탄올 중의 칼륨 tert-부톡사이드를 바람직한 알칼리 금속염 및 용매 혼합물로서 이용한다. 반응을 일반적으로 0℃로부터 반응 혼합물의 환류 온도로 4 내지 48 시간 동안 수행한다. 더 바람직한 양태에서, 반응을 실온(25℃)으로부터 혼합물의 환류 온도로 8 내지 24 시간 동안 수행하고, 훨씬 더 바람직한 양태에서, 반응을 tert-부탄올 중의 칼륨 tert-부톡사이드의 혼합물 중에 약 50℃에서 약 16 시간 동안 수행한다. 짧은 반응 시간 및 낮은 온도는 화학식 Ⅳa 및/또는 화학식 Ⅳb의 화합물을 여전히 포함하는 혼합물의 형성을 장려한다.

3.1.3. 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물로의 아릴 또는 헤테로아릴 치환기의 도입

화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물 상에 치환 또는 비치환 아릴 또는 헤테로아릴 붕소산과 방향족 할로겐 치환기의 반응에 의해 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 방향족 고리로의 추가의 치환 및 비치환 아릴 또는 헤테로아릴 치환기의 도입을 수행할 수 있다. 반응을 통상적으로 아릴 또는 헤테로아릴 브로마이드 또는 요오다이드, 더 바람직하게는 아릴브로마이드 또는 헤테로아릴브로마이드를 보유하는 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 혼합물을 아릴 또는 헤테로아릴 붕소산과 5 부 톨루엔, 5 부 에탄올, 1 부 불포화 NaHCO₃ 및 2 부 물로 이루어지는 용매 혼합물 중에 테트라키스트리페닐포스핀 팔라듐의 존재 하에 질소 하에 5 시간 동안 100℃로 가열하여 수행한다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고 농축시킨다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제한다. 바람직한 양태에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 할로겐화 화합물은 아릴 또는 헤테로아릴 기 Q 작용기에서 할로겐을 보유하여 Q 치환기에 붕소산이 공여하는 치환 아릴 또는 헤테로아릴 기가 도입된다. 더 바람직한 양태에서, Q 작용기는 브롬화 방향족 또는 헤테로방향족 Q 작용기이다. 다른 더 바람직한 양태에서, 붕소산과 반응된 할로겐화 Q 작용기는 할로겐화 3-인돌릴이다. 실시예 31-34는 브롬화 Q 작용기(여기서, Q는 브롬화 3-인돌릴임)를 이용하여 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물로의 치환 및 비치환 방향족 기의 도입을 기술하는 것이다.

2-티에닐붕소산, 3-티에닐붕소산 및 2-나프틸붕소산을 비롯한 방향족 및 헤테로방향족 붕소산은 Sigma-Aldrich(미국 미주리주 세인트 루이스)를 비롯한 각종의 상업용 구입처로부터 구입 가능하다. 대안적으로, n-부틸리튬의 존재 하에 트리이소프로필 붕산염과의 반응 후 수성 HCl에 의한 급냉에 의해 상응하는 아릴 또는 헤테로아릴 브로마이드로부터 방향족 및 헤테로방향족 붕소산을 제조할 수 있다. (예를 들면, 문헌[W. Li, et. al., J. Organic Chem. 67: 5394-97 (2002); C. M. Marson, et. al, Tetrahedron 59: 4377-81 (2003)] 참조).

3.1.4. R4 가 - CH ₂ R7 인 화학식 Ⅲ, IHa , Ⅳa, Ⅳb, Ⅴa 및 Ⅴb의 화합물의 제조

R4가 수소인 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 R4가 -CH₂R7인 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물로 전환시킬 수 있다. 전환은 반응식 2에 도시된 부분 구조로 나타낸 바와 같은 화합물의 하이드록시메틸렌 유도체의 제조에 의해 시작한다.

[반응식 2]

R4가 H인 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물과 테트라하이드로푸란(THF) 중의 수성 포름알데하이드와의 반응에 의해 하이드록시메틸렌 유도체의 제조를 수행한다. 통상적인 반응 조건은 반응물을 실온에서 14∼16 시간 동안 교반하면서 물 중의 동일 부피의 THF 및 37% 포름알데하이드를 이용한다. 반응 시간 및 온도는 1 시간 내지 48 시간으로 변할 수 있고, 온도는 0℃로부터 50℃로 또는 더 바람직하게는 10℃로부터 37℃로 변할 수 있다. 완료시, 반응물을 물과 유기 용매, 통상적으로 에틸 아세테이트에 분배한다. 유기 층을 황산나트륨 상에 건조시키고, 농축시키고 필요한 대로 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 하이드록시메틸렌 생성물을 생성시킨다. 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온, 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-1-하이드록시메틸-4-(1H-인돌-3-일)-피롤리딘-2,5-디온의 하이드록시메틸렌 유도체의 제조는 실시예 56, 단계 1에 기재되어 있다.

인산 화합물과 하이드록시메틸렌 유도체 사이의 포스페이트 에스테르 결합의 형성에 적합한 임의의 반응에 의해 원하는 하이드록시메틸렌 유도체 및 적합하게 치환된 인산으로부터 R4가 -CH₂R7이고, R7이 포스페이트(-O-P(=O)(OH)₂), 모노알킬 포스페이트(예를 들면, -O-P(=O)(-OH)(-O-(C₁-C₆)알킬)), 디알킬 포스페이트(예를 들면, -O- P(=O)(-O-(C₁-C₆)알킬)₂) 모노벤질포스페이트 에스테르(-O-P(=O)(-OH)(-O-(CH₂)-페닐)) 또는 디벤질포스페이트 에스테르(-O-P(=O)(-O-(CH₂)-페닐)₂)인 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 제조할 수 있다. 바람직한 방법에서, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 하이드록시메틸렌 유도체와 적합하게 보호된 포스포르아미데이트와의 반응 후에 탈보호에 의해 포스페이트 에스테르의 형성을 수행한다. 원하는 포스포르아미데이트와의 반응을 통상적으로 실온에서 무수 THF 중에 수행한다. 포스포르아미데이트의 첨가 후에, 반응을 테트라졸(아세토니트릴 중의 3%)로 처리하고 5 분 내지 1 시간 동안 교반한 후, 반응물을 -78℃로 냉각시킨다. 냉각된 반응물을 m-클로로퍼벤조산으로 처리하고, -78℃에서 5 분 동안 교반한 후, 반응물을 실온으로 가온시키고 5 분 동안 추가로 교반한다. 용매 제거 후, 생성물을 에틸 아세테이트 헥산을 사용하여 실리카 겔 상에서 섬광 크로마토그래피로 정제한다. 보호기를 적합한 탈보호 반응에 의해 제거한다. 이용되는 포스포르아미데이트가 디벤질포스포르아미데이트인 경우, 수소 1 분위기 하에 실온에서 Pd/C 상에 화합물의 수소화에 의해 벤질 보호기를 제거할 수 있다. 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-1-하이드록시메틸-4-(1H-인돌-3-일)-피롤리딘-2,5-디온으로부터 인산 모노-[3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5-디옥소-피롤리딘-1-일메틸]에스테르의 제조가 실시예 56, 단계 2-3에 기재되어 있다.

에스테르 결합 형성에 적합한 조건 하에 원하는 하이드록시메틸렌 유도체를 카르복실산 또는 아미노 카르복실산(아미노산)과 커플링하여 R7이 카르복실산 기 또는 아미노 카르복실산 기인 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 제조할 수 있다. 에스테르 결합 형성을 유도하기 위해 DCC(디사이클로헥실카르보디이미드), HBTU(O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트) 또는 BOP((벤조트리아졸-1-일옥시)트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트)를 비롯한 각종의 탈수 물질을 사용할 수 있다. 바람직한 양태에서, 반응을 HBTU 및 DIEPA(N,N-디이소프로필에틸아민)의 존재 하에 실온에서 10 시간 내지 24 시간 동안 무수 THF 중에 수행한다. 탈수 반응 완료 후, 용매를 감압 하에 제거하고 화합물을 유기 용매(예를 들면, 에틸 아세테이트) 중에 채우고 물로 세척한다. 유기 층을 건조시키고 잔류물을 필요한 대로 실리카 겔 크로마토그래피로 정제한다.

R7이 아미노 카르복실산 기인 경우, 아미노 카르복실산 기를 도입하기 위한 출발 물질은 적합하게 보호된 아민을 포함해야 한다. 카르보벤질옥시 보호된 아민(예를 들면, 반응은 N-카르보벤질옥시 글리신 또는 N-카르보벤질옥시 알라닌 등을 이용할 수 있음)을 비롯한 각종의 적합한 아민-보호기를 유리하게 사용할 수 있다. 후속적인 탈보호는 유리 생성물을 생성시킨다. 사용되는 보호기가 카르보벤질옥시인 경우, 메탄올 중에 현탁된 아민 보호된 생성물을 챠콜상 팔라듐(Pd/C)의 존재 하에 수소 1 분위기 하에 실온에서 1∼3 시간 동안 에틸 아세테이트 중의 HCl(4 M)로 처리하여 탈보호를 수행할 수 있다. 실시예 58 내지 실시예 60은 R7이 카르복실산 기 또는 아미노 카르복실산 기인 화합물의 제조를 기술한 것이다.

원하는 하이드록시메틸렌 유도체를 유리 카르복실산 기를 보유하는 펩티드와 커플링시켜 에스테르 결합을 형성하여 R7이 펩티드인 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 제조할 수 있다. 종래 N 보호기로 보호되는 예를 들면 보호된 유리 아민 기를 보유하는 적합하게 보호된 펩티드를 이용하여 에스테르 결합 내 하이드록시메틸렌 기 및 펩티드의 카르복실 작용기의 결합을 수행할 수 있다. 에스테르 결합 형성에 적합한 조건은 R4가 -CH₂R7이고, R7이 카르복실산 기 또는 아미노 카르복실산 기인 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 제조에 대해 기재된 것과 같은 탈수 물질을 이용하는 것을 들 수 있다.

3.1.5. R4 가 -( C ₁ - C ₆ ) 알킬인 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물의 제조

R4가 H인 원하는 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 적합한 염기의 존재 하에 실온에서 (C₁-C₆)알킬 할라이드(여기서, 할라이드는 바람직하게는 Cl, Br 또는 I임)와 반응시켜 R4가 -(C₁-C₆)알킬인 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 제조할 수 있다. 적합한 염기로는 유기 염기, 예컨대 칼륨 tert-부톡사이드, 메톡사이드 나트륨 및 무기 염기, 예컨대 KOH, NaOH 및 K₂CO₃을 들 수 있다. 적합한 용매로는 극성 비양성자성 용매, 예컨대 DMSO, THF, 디옥산 또는 다른 에테르 또는 DMF를 들 수 있다. 대안적인 양태에서, R4가 H인 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 유기 염기 또는 무기 염기와 반응시켜 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물의 짝염기를 생성시키고, 이후 짝염기를 알킬할라이드와 반응시킨다. 알킬 기가 화학식 Ⅲ 또는 화학식 Ⅲa의 화합물로 도입되는 경우, 얻어진 알킬화 화합물을 환원시켜 I(b)(1) 섹션에 기재된 환원 절차를 이용하여 화학식 Ⅳa 및 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물 또는 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물의 혼합물을 생성시킬 수 있다. 실시예 61은 알킬화제로서 요오도메탄을 사용하는 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1-메틸인돌-3-일)-1-메틸 피롤-2,5-디온의 제조 및 촉매 수소화에 의한 환원에 의해 (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1-메틸인돌-3-일)-1-메틸 피롤리딘-2,5-디온을 생성시키는 것을 기재한 것이다.

R4가 H인 원하는 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 디에틸조디카르복실레이트(DEAD) 및 트리페닐포스핀의 존재 하에 (C₁-C₆)알킬 알콜과 반응시켜 R4가 -(C₁-C₆)알킬 기인 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 화합물을 또한 제조할 수 있다. (예를 들면, 문헌[Mitsunobu, O.; Wade, M.; Sano, T.J. Am Chem. Soc. 94: 694 (1972); Hughe, D. L., Organic Reactions, 42; 335-656 (1992)] 참조). 반응을 테트라하이드로푸란(THF), 디클로로메탄, 클로로포름, 아세토니트릴 및 벤젠을 비롯한 각종의 용매 중에 수행할 수 있고, 바람직하게는 용매는 THF이다.

3.1.6. 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb의 화합물의 분리

화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 구조를 갖는 개별 생성물의 단리가 바람직한 경우, 생성물을 하나 이상의 크로마토그래피 매체에서 크로마토그래피로 분리할 수 있다. 크로마토그래피를 제조 규모로 또는 분석 규모로 수행하여 샘플 중에 존재하는 생성물의 정체성 및 순도를 결정할 수 있다. 실리카, 역상, 이온 교화, 키랄 크로마토그래피 매체 또는 이들의 임의의 조합을 비롯한(이들로 제한되지는 않음) 임의의 적합한 크로마토그래피 매체를 분리에 유리하게 사용할 수 있고, 화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 및 화학식 Ⅴb를 갖는 생성물의 분리에 대한 구체적인 크로마토그래피 매체 및 조건의 적합성은 화합물에 존재하는 치환기에 따라 달라진다. 바람직한 양태에서, HPLC를 사용하여 크로마토그래피 분리를 수행한다. 다른 바람직한 양태에서, 초임계 유체 크로마토그래피를 사용하여 분리를 수행한다. 초임계 유체 크로마토그래피를 사용하는 경우, CO₂ 또는 CO₂와 아세토니트릴(ACN), 메탄올, 에탄올, 이소프로판올 또는 헥산을 비롯한 다른 용매와의 혼합물이 바람직한 이동상이고, CO₂와 메탄올과의 혼합물이 가장 바람직하다. ChiralCel OA, OB, OD 또는 OJ; CHIRALPak AD 또는 AS; Cyclobond I, Ⅱ 또는 Ⅲ; 및 Chirobiotic T, V 및 R 매체를 비롯한 각종의 크로마토그래피 매체(정지상)를 초임계 유체 크로마토그래피에서 사용할 수 있다.

더 바람직한 양태에서, 생성물이 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴb의 개별 이성체인 경우, 키랄 매체에서 초임계 유체 크로마토그래피를 사용하여 2종 이상의 이성체 형태를 포함하는 혼합물을 분리할 수 있다. 더 바람직한 일 양태에서, CHIRALPAK^® AD 컬럼(Daicel (U.S.A.) Inc. Fort Lee, NJ)에서 분리를 수행한다. 그 양태에서, 생성물을 메탄올과 아세토니트릴의 혼합물 또는 아세토니트릴 중에 AD 컬럼에 적용하고, 컬럼을 후속적으로 CO₂(65%) 중의 35% 메탄올로 용리시킨다. CHIRALPAK^® AD 컬럼 상에 3(R),4(S)-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 3(S),4(R)-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 분리가 실시예 4에 기재되어 있다. (+)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 분리가 실시예 5에 기재되어 있다.

화학식 Ⅲ, 화학식 Ⅲa, 화학식 Ⅳa, 화학식 Ⅳb, 화학식 Ⅴa 또는 화학식 Ⅴa의 화합물의 개별 라세미 형태를 또한 예를 들면 부분입체이성체 유도체의 분별 결정 또는 결정과 같은 물리적 방법에 의해 분할할 수 있다. 또한, 종래 방법, 예컨대, 예를 들면, 광학 활성 산과의 염 형성, 적용 가능한 경우, 이후 결정화에 의해 라세미 혼합물로부터 개별 광학 이성체를 얻을 수 있다.

3.2. Y가 결합인 화학식 I 및 화학식 Ⅱ의 화합물의 제조

화학식 Ⅲ 및 화학식 Ⅲa의 피롤로퀴놀리닐-피롤-2,5-디온의 합성에 사용되는 화학식 I 및 화학식 Ⅱ의 화합물을 하기에 기재된 것과 같은 각종의 합성 경로를 통해 구입하거나 얻을 수 수 있다.

3.2.1. Y가 결합인 화학식 I의 화합물의 제조

X가 -(CH₂)-, -(NR8)-, S 및 O로 이루어진 군으로부터 선택되고, R8이 수소, -(C₁-C₆)알킬, -(C₁-C₆) 치환 알킬, -(C₃-C₉)사이클로알킬, -(C₃-C₉) 치환 사이클로알킬 및 -O-(C₃-C₉)알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, m이 1 또는 2인 화학식 A의 상응하는 화합물로부터 화학식 I의 화합물을 제조할 수 있다. 화학식 A의 화합물의 예로는 1,2,3,4-테트라하이드로퀴놀린, 1,2,3,4-테트라하이드로-퀴녹살린, 3,4-디하이드로-2H-벤조[1,4]옥사진, 3,4-디하이드로-2H-벤조[1,4]티아진, 2,3,4,5-테트라하이드로-1H-벤조[b]아제핀, 2,3,4,5-테트라하이드로-1H-벤조[b][1,4]디아제핀, 6,7,8,9-테트라하이드로-5-옥사-9-아자-벤조사이클로헵텐 또는 2,3,4,5-테트라하이드로-벤조[b][1,4]티아제핀을 들 수 있다. 화학식 A의 화합물의 상응하는 화학식 B의 3-치환-2-옥소프로피온산 에틸 에스테르의 전환에 의해 제조가 시작된다. 화학식 B의 에틸 에스테르를 고리화하여 화학식 C의 화합물을 형성시키고, 이것을 유리 산 D로 전환시키고, 이것을 탈카르복실레이트하여 원하는 삼환식 생성물 E를 생성시킨다. 삼환식 생성물 E와 염화옥살릴을 후속적으로 반응시키고 알콜 염기 중에 후처리하여 상응하는 화학식 I의 화합물을 생성시킨다. 반응식 3은 화학식 A의 화합물로 시작하는 반응 순서를 설명하고 있고, 이것은 추가로 1,2,3,4-테트라하이드로퀴놀린 및 브로모에틸피루베이트(3-브로모-피루브산 에틸 에스테르)로부터 화학식 I의 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)옥소아세트산 메틸 에스테르의 제조를 위한 실시예 1, 단계 1-5에 기재되어 있다.

반응식 3의 반응 순서를 통한 화학식 I의 화합물로의 화학식 A의 화합물의 전환을 위한 일부 적합한 조건이 본원에 기재되어 있다. 화학식 A의 화합물을 실온에서 약 24 시간 동안 무수 에테르, 예컨대 THF 중의 브로모에틸 피루베이트의 처리에 의해 상응하는 화학식 B의 3-치환-2-옥소프로피온산 에틸 에스테르로 전환시킬 수 있다. 약 125℃에서 30 분 내지 2 시간, 바람직하게는 1 시간 동안 2-메톡시에탄올 중의 무수 MgCl₂에 의해 화학식 B의 3-치환-2-옥소프로피온산 에틸 에스테르를 처리하여 상응하는 화학식 C의 삼환식 카르복실산 에스테르를 형성시킨다. 화학식 D의 유리 산으로의 이 화합물의 후속 전환을 수성 염기 중의 가수분해에 의해 수행할 수 있다. 바람직한 양태에서, 반응을 공용매로서 알콜의 존재 하에 NaOH 또는 KOH를 비롯한(이들로 제한되지는 않음) 수성 염기 중에 수행한다. 바람직한 알콜 공용매로는 메탄올, 에탄올, n-프로판올 및 이소프로판올을 들 수 있고, 더 바람직한 공용매로서 에탄올을 들 수 있다. 반응은 통상적으로 혼합물을 환류로 2 시간 동안 가열하여 수행하지만, 반응의 시간 및 온도는 필요한 대로 변할 수 있다. 화학식 D의 화합물의 산화 탈카르복실화를 방향족 산의 탈카르복실화에 적합한 각종의 절차에 의해 수행할 수 있다. 바람직한 양태에서, 유리 산을 퀴놀론 중의 구리-크로마이트(CuO-Cr₂O₃)와 약 2 시간 동안 가열하여 화학식 E의 탈카르복실화된 생성물을 생성시켜 화학식 D의 화합물의 탈카르복실화를 수행한다. 염화옥살릴과의 반응 이후 무수 알콜의 혼합물 및 알콜의 알칼리 금속염, 바람직하게는 메톡사이드 나트륨 또는 나트륨 에톡사이드에 의해 처리하여 화학식 I의 화합물로의 화학식 E의 화합물의 전환을 수행할 수 있다. 염화옥살릴과 화학식 E의 화합물과의 반응을 통상적으로 약 -78℃ 내지 약 10℃의 온도에서 에테르를 비롯한 무수 극성 비양성자성 용매 중에 수행한다. 바람직한 양태에서, 반응을 용매로서 에테르를 사용하여 약 -25℃ 내지 약 5℃의 온도에서 수행한다. 더 바람직한 양태에서, 반응을 0℃에서 수행한다. 반응을 수행하기에 바람직한 용매로는 테트라하이드로푸란(THF), 테트라하이드로피란, 디에틸 에테르 등을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

[반응식 3] Y가 결합인 화학식 I의 화합물의 제조

3.2.2. 화학식 Ⅱ의 화합물의 제조

치환 아세트아미드인 화학식 Ⅱ의 화합물을 상업적으로 구입 가능한 출발 물질로부터 구입하거나 제조할 수 있다. 인돌-3-아세트아미드, 2-(5-메틸-1H-인돌-3-일)아세트아미드, 2-(5-메톡시-1H-인돌-3-일)아세트아미드, 2-(4-하이드록시-1H-인돌-3-일)아세트아미드, 2-페닐아세트아미드, 2-(4-메틸페닐)아세트아미드, 4-하이드록시페닐아세트아미드, 4-하이드록시페닐아세트아미드, N-사이클로펜틸-2-(4-하이드록시-2-옥소-1,2-디하이드로-3-퀴놀리닐)아세트아미드, 2-펜옥시아세트아미드, 2-(2-메틸펜옥시)아세트아미드, 2-(4-플루오로펜옥시)아세트아미드, 2-(4-피리디닐)아세트아미드 및 2-[(4-클로로페닐)설파닐] 아세트아미드를 비롯한 상업적으로 구입 가능한 아세트아미드는 Sigma Aldrich Chemical Co.(미국 미주리주 세인트 루이스)를 비롯한 각종의 공급원으로부터 구입 가능하다. 화학식 Ⅱ의 화합물을 또한 유리 산의 이의 산 염화물로의 전환 이후 암모니아와의 반응에 의해 이의 상응하는 유리 산으로부터 제조할 수 있다.

3.3. 피롤로퀴놀리닐 - 피롤리딘 -2,5- 디온의 제조를 위한 추가 경로

상기 기재된 피롤로퀴놀리닐-피롤리딘-2,5-디온의 제조를 위한 경로 이외에, (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온에 대해 예시된 화합물을 제조하는 추가 경로가 실시예 62 내지 실시예 64에 기재되어 있다.

4. 약학 조성물 및 제제

본 발명의 약학 조성물을 이의 의도하는 투여 경로에 맞도록 제제화한다. 투여 경로의 예로는 비경구, 예를 들면, 정맥내, 피내, 피하, 경구(예를 들면, 흡입), 경피(국소) 및 경점막 투여를 들 수 있다. 비경구, 피내 또는 피하 적용에 사용되는 용액 또는 현탁액으로는 무균 희석제, 예컨대 주사용수, 식염수, 고정유, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 다른 합성 용매; 항박테리아 물질, 예컨대 벤질 알콜 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예컨대 아스코르브산 또는 아황산수소나트륨; 킬레이트화 물질, 예컨대 에틸렌디아민테트라아세트산; 완충제, 예컨대 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트 및 긴장성을 조절하기 위한 물질, 예컨대 염화나트륨 또는 덱스트로스의 성분을 들 수 있다. pH를 산 또는 염기, 예컨대 염산 또는 수산화나트륨에 의해 조정할 수 있다. 비경구 제제는 앰플, 1회용 주사기 또는 유리 또는 플라스틱으로 만들어진 다용량 바이알에 포함될 수 있다.

본 발명의 화합물 또는 약학 조성물을 화학치료학적 치료에 현재 이용되는 많은 널리 공지된 방법에서 피험체에게 투여할 수 있다. 예를 들면, 암의 치료를 위해, 본 발명의 화합물을 종양에 직접 주사하거나, 혈류 또는 체강에 주사하거나, 경구로 섭취하거나, 패치에 의해 피부를 통해 도포할 수 있다. 선택된 용량은 효과적인 치료를 구성하기에 충분해야 하지만 허용되지 않는 부작용을 야기할 정도로 높아서는 안 된다. 질환 병증의 상태(예를 들면, 암, 전암 등) 및 환자의 건강을 바람직하게는 치료 동안 및 치료 후 합당한 기간 동안 면밀히 관찰해야 한다.

본원에서 사용되는 "치료 유효량"이란 용어는 확인된 질환 또는 병증을 치료, 경감 또는 예방하기 위한 또는 검출 가능한 치료 또는 억제 효과를 나타내기 위한 약학 제제를 의미한다. 당해 분야에 공지된 임의의 검정 방법에 의해 그 효과를 검출할 수 있다. 피험체에 대한 정확한 유효량은 피험체의 체중, 몸집 및 건강; 병증의 성질 및 정도; 및 투여에 선택된 치료제 또는 치료제의 조합에 따라 달라진다. 소정의 상황에 대한 치료 유효량을 임상의의 기술 및 판단 내에 있는 일상 실험에 의해 결정할 수 있다. 바람직한 양태에서, 치료하고자 하는 질환 또는 병증은 암이다. 다른 양태에서, 치료하고자 하는 질환 또는 병증은 세포 증식성 질환이다.

임의의 화합물의 경우, 치료 유효량을 예를 들면 신생 세포의 세포 배양 검정에서 또는 동물 모델, 일반적으로 래트, 마우스, 토끼, 개 또는 돼지에서 초기에 평가할 수 있다. 동물 모델을 또한 사용하여 적절한 농도 범위 및 투여 경로를 결정할 수 있다. 이후, 이 정보를 사용하여 인간에서 유용한 용량 및 투여 경로를 결정할 수 있다. 치료학적/예방학적 효율 및 독성을 세포 배양 또는 실험 동물에서 표준 약학 절차, 예를 들면, ED₅₀(집단 50%에서 치료학적으로 효과적인 용량) 및 LD₅₀(집단 50%에 치사인 용량)에 의해 결정할 수 있다. 독성과 치료 효과 사이의 용량비는 치료 지수이고, 이것을 LD₅₀/ED₅₀ 비로서 표현할 수 있다. 큰 치료 지수를 나타내는 약학 조성물이 바람직하다. 용량은 이용되는 제형, 환자의 민감도 및 투여 경로에 따라 이 범위 내에 변할 수 있다.

용량 및 투여를 조정하여 충분한 수치의 활성 물질(들)을 제공하거나 원하는 효과를 유지한다. 고려할 수 있는 인자로는 질환 상태의 중증도, 피험체의 일반적인 건강, 연령, 체중 및 피험체의 성별, 식이, 투여 시간 및 빈도, 약물 조합(들), 반응 민감도 및 치료에 대한 내약성/반응을 들 수 있다. 장기간 작용 약학 조성물을 특정 제제의 반감기 및 청소율에 따라 매 3일 내지 4일, 매주 또는 매 2주 1회 투여할 수 있다.

본 발명의 활성 화합물을 포함하는 약학 조성물을 일반적으로 공지된 방식으로, 예를 들면, 종래 혼합, 용해, 과립, 드라제 제조, 가루화, 유화, 캡슐화, 포괄법 또는 동결 건조 공정에 의해 제조할 수 있다. 약학 조성물을 약학적으로 사용될 수 있는 제제로의 활성 화합물의 가공을 촉진하는 부형제 및/또는 보조제를 포함하는 1종 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 사용하여 종래 방식으로 제제화할 수 있다. 물론, 적절한 제제는 선택된 투여 경로에 따라 달라진다.

주사 용도에 적합한 약학 조성물로는 무균 수용액(이때, 수용성) 또는 분산액 및 무균 주사 용액 또는 분산액의 즉시 제조를 위한 무균 분말을 들 수 있다. 정맥내 투여를 위해, 적합한 담체로는 생리 식염수, 정균수, Cremophor EL™(BASF, Parsippany, NJ.) 또는 인산염 완충 식염수(PBS)를 들 수 있다. 모든 경우에, 조성물은 무균이어야 하고, 용이한 주사능이 존재하는 정도로 유체이어야 한다. 조성물은 제조 및 저장 조건 하에 안정해야 하고, 미생물, 예컨대 박테리아 및 진균의 오염 작용에 대해 보존되어야 한다. 담체는 예를 들면 물, 에탄올, 폴리올(예를 들면, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등) 및 적합한 이들의 혼합물을 포함하는 용매 또는 분산 매체일 수 있다. 적절할 유동성을 예를 들면 레시틴과 같은 코팅의 사용에 의해, 분산의 경우 필요한 입자 크기의 유지에 의해 그리고 계면활성제의 사용에 의해 유지할 수 있다. 미생물 작용의 예방을 다양한 항박테리아 및 항진균 물질, 예를 들면, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 아스코르브산, 티메로살 등에 의해 성취할 수 있다. 많은 경우에, 조성물 중에 등장성 물질, 예를 들면, 당, 폴리알콜, 예컨대 만니톨, 소르비톨, 염화나트륨이 포함되는 것이 바람직할 수 있다. 예를 들면, 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴과 같은 흡수를 지연시키는 조성물 물질 중에 포함시켜 주사용 조성물의 연장된 흡수가 일어날 수 있다.

활성 화합물을 필요한 양으로 적절한 용매 중에 상기 열거된 성분 중 1종 또는 조합과 필요한 대로 배합시킨 후 무균 여과시켜 무균 주사 용액을 제조할 수 있다. 일반적으로, 활성 화합물을 염기성 분산 매체 및 상기 열거된 것으로부터 필요한 다른 성분을 포함하는 무균 비히클로 배합시켜 분산액을 제조한다. 무균 주사 용액의 제조를 위한 무균 분말의 경우에, 제조 방법은 이미 무균 여과된 이의 용액으로부터 활성 성분 + 임의의 추가의 원하는 성분의 분말을 생성시키는 진공 건조 및 동결 건조이다.

경구 조성물은 일반적으로 불활성 희석제 또는 먹을 수 있는 약학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 경구 조성물은 젤라틴 캡슐 중에 포함되거나 정제에 압축될 수 있다. 경구 치료 투여의 목적을 위해, 활성 화합물을 부형제와 혼입할 수 있고 정제, 트로키 또는 캡슐 형태로 사용할 수 있다. 구강청결제로서 사용하기 위해 유체 담체를 사용하여 경구 조성물을 또한 제조할 수 있고, 유체 담체 중의 화합물을 경구로 적용하고 빨거나 뱉거나 삼킨다. 약학적 상용성 결합제 및/또는 보조제 물질이 조성물의 일부로서 포함될 수 있다. 정제, 환제, 캡슐, 트로키 등은 유사한 성질의 임의의 다음의 성분 또는 화합물: 결합제, 예컨대 미세결정질 셀룰로스, 트라가칸스 검 또는 젤라틴; 부형제, 예컨대 전분 또는 락토스, 붕괴 물질, 예컨대 알긴산, 프리모겔(Primogel) 또는 옥수수 전분; 활택제, 예컨대 스테아르산마그네슘 또는 스테로테스(Sterotes); 유동화제, 예컨대 콜로이드성 이산화규소; 감미 물질, 예컨대 수크로스 또는 사카린; 또는 항 물질, 예컨대 페퍼민트, 메틸 살리실레이트 또는 오렌지 향을 포함할 수 있다.

흡입에 의한 투여를 위해, 화합물을 적합한 추진제, 예를 들면, 이산화탄소와 같은 가스를 포함하는 가압 컨테이너 또는 디스펜서 또는 분무기로부터 에어로졸 스프레이 형태로 전달한다.

전신 투여는 또한 경점막 또는 경피 수단에 의할 수 있다. 경점막 또는 경피 투여에 의해, 투과하고자 하는 장벽에 적절한 침투제를 제제에서 사용한다. 이 침투제는 일반적으로 당해 분야에 공지되어 있고, 예를 들면 경점막 투여를 위해, 세제, 담즙 염 및 푸시딘산 유도체를 포함한다. 경점막 투여는 비강 스프레이 또는 좌제를 사용하여 성취할 수 있다. 경피 투여를 위해, 활성 화합물을 당해 분야에 일반적으로 공지된 연고, 고약, 겔 또는 크림으로 제제화한다.

일 양태에서, 활성 화합물을 임플란트 및 마이크로캡슐화 전달 시스템을 비롯한 조절 방출 제제로서 신체로부터 신속한 제거에 대해 화합물을 보호하는 약학적으로 허용되는 담체와 함께 제조한다. 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리언하이드라이드, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리락트산과 같은 생체분해성, 생체적합성 중합체를 사용할 수 있다. 이러한 제제를 제조하기 위한 방법은 당업자에게 명확하다. 물질을 또한 Alza Corporation 및 Nova Pharmaceuticals, Inc.로부터 상업적으로 구입할 수 있다. 리포소말 현탁액(예컨대, 바이러스 항원에 대한 단일클론 항체에 의해 감염된 세포로 표적화된 리포솜)을 또한 약학적으로 허용되는 담체로서 사용할 수 있다. 이것을 당업자에게 공지된 방법, 예를 들면 미국 특허 제4,522,811호에 기재된 방법에 따라 제조할 수 있다.

투여 용이성 및 투여 균일성을 위해 단위 제형으로 경구 또는 비경구 조성물을 제제화하는 것이 특히 유리할 수 있다. 본원에서 사용되는 단위 제형은 치료하고자 하는 피험체를 위해 통합 용량으로서 적합한 물리적으로 별개인 단위를 의미하고; 각각의 단위는 필요한 약학 담체와 함께 원하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 소정 분량의 활성 화합물을 포함한다. 본 발명의 단위 제형을 위한 설명은 활성 화합물의 독특한 특징 및 성취하고자 하는 특정한 치료 효과에 의해 기술되어 있고 직접적으로 이에 따라 달라진다.

치료 적용에서, 본 발명에 따라 사용되는 약학 조성물의 용량은 선택된 용량에 영향을 미치는 다른 인자들 중에서 물질, 수혜 환자의 연령, 체중 및 임상 병증 및 치료제를 투여하는 임상의 또는 주치의의 경험 및 판단에 따라 달라진다. 일반적으로, 용량은 종양 성장을 느리게 하고, 바람직하게는 이를 퇴행시키고, 또한 바람직하게는 암을 완전히 퇴행시키기에 충분해야 한다. 용량은 1일 약 0.01 ㎎/㎏ 내지 약 3000 ㎎/㎏ 범위일 수 있다. 바람직한 양태에서, 용량은 1일 약 1 ㎎/㎏ 내지 약 1000 ㎎/㎏ 범위일 수 있다. 일 양태에서, 용량은 단일, 분할 또는 연속 용량으로 1일 약 0.1 ㎎ 내지 약 50 g; 약 0.1 ㎎ 내지 약 25 g; 약 0.1 ㎎ 내지 약 10 g; 약 0.1 ㎎ 내지 약 3 g; 또는 약 0.1 ㎎ 내지 약 1 g/일 범위일 수 있다(그 용량은 환자 체중(단위: ㎏), 신체 표면적(단위: m) 및 연령(단위: 세)에 대해 조정될 수 있음). 유효량의 약학 물질은 임상의 또는 다른 자격 있는 관찰자가 확인한 객관적으로 확인 가능한 개선을 제공하는 것이다. 예를 들면, 환자에서 종양 퇴행을 종양의 직경을 참조하여 측정할 수 있다. 종양 직경의 감소는 퇴행을 나타낸다. 퇴행은 또한 치료가 중단된 후 재발생하는 종양의 실패로 표시한다. 본원에서 사용되는 "용량 효과적인 방식"이란 용어는 피험체 또는 세포에서 원하는 생물학적 효과를 생성하기 위한 활성 화합물의 양을 의미한다.

바람직하게는, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 720 ㎎의 최대 1일 용량에 대해 1일 2회 360 ㎎의 용량으로 투여한다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 임의로 피험체 또는 환자에게 20 ㎎의 최대 1일 용량에 대해 1일 2회 10 ㎎의 초기 용량으로 투여하고, 720 ㎎의 최대 1일 용량에 대해 1일 2회 360 ㎎의 투여로 용량 상승시킨다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 바람직한 제형으로는 당의정, 정제, 환제 및 동결 건조 분말을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 예를 들면, 피험체 또는 환자에 720 ㎎의 최대 1일 용량에 대해 1일 2회 1개의 360 ㎎의 당의정 또는 대안적으로, 1일 2회 2개의 180 ㎎의 당의정을 투여한다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 당의정 또는 정제를 또한 60 ㎎의 용량으로 제제화한다.

약학 조성물을 본원에 기재된 임의의 화합물의 공제제를 포함한다.

약학 조성물은 투여에 대한 설명서와 함께 컨테이너, 팩 또는 디스펜서 내 포함될 수 있다.

[실시예]

본 발명의 상이한 특징을 추가로 기재하기 위해 하기 실시예를 제공하였다. 실시예는 또한 본 발명을 실행하기 위한 유용한 방법론을 시사하고 있다. 이 실시예는 청구된 본 발명을 제한하지 않는다.

실시예 1. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5- 디온의 제법

단계 1

무수 테트라하이드로푸란(300 ㎖) 중의 1,2,3,4-테트라하이드로퀴놀린(100 ㎖)의 용액에, 브로모에틸피루베이트(53 ㎖)를 30 분 동안 적하하였다. 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과시키고 고형분을 테트라하이드로푸란(100 ㎖)으로 세척하였다. 여액을 증발 건조시켜 3-(3,4-디하이드로-2H-퀴놀린-1-일)-2-옥소프로피온산 에틸 에스테르를 갈색 오일 117 g으로서 얻었다.

단계 2

무수 염화마그네슘(29.4 g, 0.31 mol)을 2-메톡시에탄올(400 ml) 중에 현탁시키고 혼합물을 125℃에서 15 분 동안 교반하였다. 이후, 2-메톡시에탄올(100 ml) 중의 3-(3,4-디하이드로-2H-퀴놀린-1-일)-2-옥소프로피온산 에틸 에스테르(76.57 g 0.31 mol)의 용액을 첨가하고 혼합물을 125℃에서 60 분 동안 교반하였다. 혼합물을 환류에서 추가로 5 시간 교반하고, 냉각시키고 증발 건조시켰다. 이후, 잔류물을 2 M 염산(500 ㎖)으로 산성화시키고 디클로로메탄(3×500 ㎖)으로 추출하였다. 이후, 합한 유기 층을 5% 중탄산나트륨 용액으로 세척하고 무수 황산마그네슘에서 건조시킨 후 증발 건조시켰다. 이후, 잔류물을 에틸 아세테이트/헥산(1:4)으로 용리시키면서 실리카 겔 크로마토그래피 컬럼에서 정제하여 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르(31.0 g, 47%)를 얻었다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 7.9 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.79 (s, 1H), 7.17 (m, 1H), 6.99 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 4.37 (m, 2H), 4.18 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 3.0 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.24 (t, 2H, J = 6 Hz), 1.42 (t, 3H, J = 7.2 Hz).

단계 3

에탄올(200 ㎖) 및 물(200 ㎖) 중의 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르(31 g, 0.14 mol)의 용액에 수산화나트륨(30.8 g, 0.77 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 2 시간 동안 환류로 가열한 후 실온으로 냉각시키고 물(2.64 L)로 희석하였다. 이후, 혼합물을 디클로로메탄(2×300 ㎖)으로 세척하고 수성 층을 농축 염산으로 pH 1.0으로 산성화시켰다. 형성된 침전물을 여과로 수집하고, 물로 세척하고 건조시켜 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-카르복실산을 진황색 고형분(23 g, 85%)으로서 생성시켰다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.95 (brs, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.69 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.06 (t, 1H, J = 6.8 Hz), 6.92 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 4.19 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.91 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.11 (t, 2H, J = 5.6 Hz).

단계 4

5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-카르복실산(37.5 g, 0.186 mol), 크롬산구리(13.5 g, 43 mmol) 및 퀴놀린(180 ㎖)을 교반하면서 2 시간 동안 185℃로 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 디클로로메탄(1 L)으로 희석하고 하이플로(hyflo)에서 여과시켰다. 여액을 2 M 염산(2×600 ㎖) 그리고 2 M 수산화나트륨(150 ㎖)으로 2회 세척한 후 증발 건조시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트/헥산(1:6)으로 용리시키면서 실리카 겔 크로마토그래피에서 정제하여 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린(21 g, 72%)을 담황색 고형분으로서 얻었다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 7.44 (dd, 1H, J = 0.8 및 7.6 Hz), 7.07 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 7.01 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 6.9 (dd, 1H, J = 0.8 및 6.8 Hz), 6.43 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 4.16 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.99 (t, 2H, J = 6.4 Hz), 2.24 (m, 2H).

단계 5

0℃에서의 무수 에테르(300 ㎖) 중의 5,6-디하이드로-4H-피롤로퀴놀린(4.0 g, 25.3 mmol)의 용액에 염화옥살릴(2.22 ㎖, 25.3 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30∼45 분 동안 교반한 후 -78℃로 냉각시켰다. 이후, 메탄올(0.5M)(60 ㎖) 중의 메톡사이드 나트륨을 천천히 첨가하고 혼합물을 실온으로 가온시켰다. 이후, 혼합물을 에틸 아세테이트(200 ㎖)로 희석하고, 물(100 ㎖)로 세척한 후 포화 수성 염화나트륨(50 ㎖)으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨에서 건조시키고 증발 건조시켰다. 잔류물을 조립 실리카 겔의 2 인치 플러그를 통해 여과된 에틸 아세테이트(100 ㎖) 중에 용해하고 증발시켜 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)옥소아세트산 메틸 에스테르를 황색 고형분(5.3 g, 85%)으로서 얻었다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.3 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.04 (d, 1H), 4.2 (t, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.0 (t, 2H), 2.3 (t, 2H).

단계 6

0℃에서의 무수 테트라하이드로푸란 중의 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)옥소아세트산 메틸 에스테르(1.0 g, 4.12 mmol) 및 인돌-3-아세트아미드(0.8 g, 4.5 mmol)의 용액을 칼륨 t-부톡사이드(테트라하이드로푸란 중 1M)(12.4 ㎖, 12.4 mmol)의 용액에 30 분 동안 적하하였다. 혼합물을 0℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 이후, 농축 염산(10 ㎖)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 이후, 혼합물을 에틸 아세테이트(200 ㎖)로 희석하고, 물(50 ㎖) 및 포화 염화나트륨 수용액(50 ㎖)으로 2회 세척하고 유기 층을 무수 황산나트륨에서 건조시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트/헥산(1:4)으로 용리시키면서 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온을 선홍색 고형분(1.2 g, 80%)으로서 얻었다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.5 (brs, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.63 (d, 1H, J = 2.8 Hz), 7.44 (s, 1H), 7.35 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.16 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.11 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 6.86 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 6.80 (d, 1H, J = 7.2 Hz),6.64 (t, 1H, J = 8 Hz), 6.57 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.2 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.96 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.24 (m, 2H).

실시예 2. (±)- 시스 -3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온 및 (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴노린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 제법

(±)-시스 화합물, (±)-트랜스 화합물 또는 이들의 혼합물의 제제를 절차 A 내지 절차 C 각각에 기재된 바대로 환원 조건 하에 얻었다.

절차 A: Zn/Hg에 의한 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온의 환원.

3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온의 환원을 위한 활성 아연-수은 환원 물질을 금속 아연 및 HgCl₂로부터 제조하였다. 아연 분말(2.5 g) 및 염화수은(Ⅱ)(0.25 g)을 탈염수(3 ㎖) 중에 현탁시키고 20 분 동안 교반하였다. 이후, 농축 염산 몇 방울을 첨가하고 혼합물을 수 분 동안 교반하였다. 고형분을 여과시키고, 탈염수(50 ㎖) 및 에탄올(50 ㎖)로 세척하고 건조시켰다.

건조 에탄올(50 ㎖) 중에 상기한 바대로 제조된 Zn(Hg) 환원 물질의 현탁액에 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온(0.35 g, 95.4 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 30∼60 분 동안 환류로 가열하면서 건조 염화수소 가스를 천천히 혼합물을 통해 통과시켰다. 이후, 혼합물을 냉각시키고, 여과시키고 증발 건조시켰다. 이후, 5% 탄산칼륨 용액(150 ㎖) 및 에틸 아세테이트(300 ㎖)를 첨가하였다. 유기 층을 무수 황산마그네슘에서 건조시키고 증발시켜 (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(0.2g)의 약 2:1 혼합물을 얻었다.

절차 B: 탄소상 팔라듐의 존재 하의 수소에 의한 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온의 환원.

3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온(16 g, 43.6 mmol)과 10% 탄소상 팔라듐(Pd/C, 습식 촉매)(8 g)의 현탁액을 실온에서 48 시간 동안 메탄올(600 ㎖) 중 수소의 1 분위기 하에 교반하였다. 이후, 촉매를 셀라이트 층을 통해 여과시키고 여액을 증발 건조시켰다. 잔류물을 메탄올 중에 재용해하고 생성물을 냉수를 첨가하여 침전시켰다. 침전물을 여과시키고, 물로 세척하고 진공 하에 건조시켜 (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(9.2 g)을 생성시켰다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.56 (s, 1H), 10.66 (s, 1H), 7.43 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.14 (d, 2H, J = 8 Hz), 6.86-6.97 (m, 4H), 6.78 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 6.69 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 4.88 (dd, 2H, J = 9.2 및 45.6 Hz), 3.88 (m, 2H), 2.76 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 1.94 (t, 2H, J = 6 Hz).

절차 C: 메탄올 중의 마그네슘에 의한 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온의 환원.

마그네슘 조각(3.05 g, 0.125 mol)을 무수 메탄올(100 ㎖) 중의 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온(2.56 g, 6.97 mmol)의 용액에 첨가하고 40 분 동안 질소 분위기 하에 환류로 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 에틸 아세테이트(300 ㎖)에 붓고, IM 염산(300 ㎖) 및 물(500 ㎖)로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨에서 건조시키고 증발 건조시켰다. 이후, 잔류물을 헥산 중의 40∼50% 에틸 아세테이트를 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 연분홍 고형분(2.3 g)으로서 생성시켰다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.54 (s, 1H), 11.03 (s, 1H), 7.32-7.4 (m, 4H), 7.17 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 7.07 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 6.96 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 6.82-6.89 (m, 2H), 4.5 (dd, 2H, J = 7.2 및 20 Hz), 4.07 (t, 2H, J = 5.2 Hz), 2.87 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.08 (m, 2H).

실시예 3. (±)- 시스 -3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온으로부터의 (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H-피롤로[ 3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

(±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(378 ㎎, 1.02 mmol)의 제제를 tert-부탄올(10 ㎖) 및 칼륨 t-부톡사이드(11 ㎎, 98 μmol) 중에 16 시간 동안 50℃로 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(100 ㎖)에 붓고 물(100 ㎖)로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨에서 건조시키고 증발 건조시켜 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 황갈색 분말(276 ㎎)로서 얻었다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.54 (s, 1H), 11.03 (s, 1H), 7.32-7.4 (m, 4H), 7.17 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 7.07 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 6.96 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 6.82-6.89 (m, 2H), 4.5 (dd, 2H, J = 7.2 및 20 Hz), 4.07 (t, 2H, J = 5.2 Hz), 2.87 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.08 (m, 2H).

실시예 4. 3(R),4(S)-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온과 3(S),4(R)-3-(5,6- 디하이드로 -4H-피롤로[ 3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일N) 피롤리딘 -2,5- 디온의 크로마토그래피 분리

메탄올(10 ㎖) 및 아세토니트릴(6 ㎖) 중의 (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(135 ㎎)의 혼합물을 3.5 ㎖/분의 유속으로 35% 메탄올/CO₂로 용리시키면서 키랄 AD 컬럼 20 mm×250 mm를 사용하여 제조용 초임계 유체 크로마토그래피에 처리하였다. 3(R),4(S)-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온으로 배정된 4.55 분(60 ㎎)에서의 더 빠른 용리 피크 및 3(S),4(R)-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온으로 배정된 6.05 분(56 ㎎)에서의 더 느린 용리 피크를 얻었다. 절대 입체화학 배정은 오로지 관련 화합물의 상대 보유 시간에 기초하고 반전될 수 있다.

실시예 5. 3(R),4(R)-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온과 3(S),4(S)-3-(5,6- 디하이드로 -4H-피롤로[ 3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 크로마토그래피 분리

아세토니트릴(1 ㎖) 중의 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(200 ㎎)의 혼합물을 3.5 ㎖/분의 유속으로 35% 메탄올/CO₂로 용리시키면서 CHIRALPAK^® AD 컬럼(Daicel, U.S.A.) 20 mm×250 mm를 사용하여 제조용 초임계 유체 크로마토그래피에 처리하였다. 크로마토그래피에 의해 (-)-3(R),4(R)-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온으로 배정된 음의 광학 회전을 갖는 트랜스 이성체(82 ㎎)의 더 빠른 용리 피크 및 (+)-3(S),4(R)-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온으로 배정된 양의 광학 회전을 갖는 트랜스 이성체(86 ㎎)의 더 느린 용리 피크를 생성시켰다. 절대 입체화학 배정은 오로지 관련 화합물의 상대 보유 시간에 기초하고 반전될 수 있다. 모든 광학 회전 측정을 589 ㎚에서 25℃에서 클로로포름 중에 수행하였다.

49℃에서의 저속 증발 및 증기 응력 기술을 이용하여 트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 크로마토그래피로 분리된 (+) 또는 (-) 이성체의 결정을 2,2,2-트리플루오로에탄올로부터 제조할 수 있다. 증기 응력 기술에 의해 제조된 것과 같은 시드 결정을 이용하는 증발에 의해 실온에서 에탄올로부터 이 이성체의 결정을 또한 제조할 수 있다.

실시예 6. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(2- 트리플루오로메틸 - 페닐 )-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 2'-트리플루오로메틸페닐 아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2-트리플루오로메틸-페닐)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.16 (s, 1H), 7.83 (d, 2H, J = 7.2 Hz), 7.58 (m, 2H), 7.37 (d, 1H, J = 1.6 Hz), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 6.66 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 5.96 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.2 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.95 (t, 2H, J = 6.4 Hz), 2.22 (m, 2H).

실시예 7. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-티오펜-2-일-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 2-티에닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-티오펜-2-일-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 7.87 (s, 1H), 7.49 (d, 1H, J = 5.2 Hz), 7.37 (s, 1H), 7.3 (d, 1H, J = 4 Hz), 7.02 (t, 1H, J = 4 Hz), 6.89-6.98 (m, 2H), 6.53 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 4.92 (t, 2H, J = 6 Hz), 3.04 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.31 (m, 2H).

실시예 8. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(3- 메톡시 -페닐)-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 3-메톡시페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(3-메톡시-페닐)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.01 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.23 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 7.09 (m, 2H), 6.87-6.92 (m, 2H), 6.73 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 6.14 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.25 (t, 2H, J = 5.2 Hz), 2.99 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.67 (m, 2H).

실시예 9. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-피리딘-2-일-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 피리딘-2-일아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-피리딘-2-일-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.58 (d, 1H, J = 4.4 Hz), 8.12 (s, 1H), 7.78 (dt, 1H, J = 1.6 및 7.6 Hz), 7.68 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.31 (s, 1H), 7.25 (m, 1H), 6.87 (d, 1H, J = 6 Hz), 6.68 (t, 1H, J = 8 Hz), 5.91 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 4.24 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.97 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.25 (m, 2H).

실시예 10. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(4- 메톡시 - 페닐 )-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 4-메톡시페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(4-메톡시-페닐)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 7.95 (s, 1H), 7.5 l (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 6.85-6.89 (m, 3H), 6.75 (t, 1H, J = 8 Hz), 6.24 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.26 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 3.82 (s, 3H), 2.99 (t, 2H, J = 6.4 Hz), 2.27 (m, 2H).

실시예 11. 3- 벤조[1,3]디옥솔 -5-일-4-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 3,4-(메틸렌디옥시)페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-벤조[1,3]디옥솔-5-일-4-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 7.98 (s, 1H), 7.04-7.07 (m, 2H), 6.90 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.76-6.82 (m, 2H), 6.30 (d, 1H, J = 8 Hz), 5.98 (s, 2H), 4.26 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.99 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.28 (m, 2H).

실시예 12. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4- 페닐 -피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-페닐-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.01 (s, 1H), 7.52 (m, 2H), 7.35 (m, 3H), 7.27 (s, 1H), 6.87 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.7 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 6.08 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.26 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.99 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.27 (m, 2H).

실시예 13. 3- 벤조[b]티오펜 -2-일-4-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 2-벤조티오페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-벤조[b]티오펜-2-일-4-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.11 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.01 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.84 (s, 1H), 7.45 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.3 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 7.15 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 6.71 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 6.43 (t, 1H, J = 1.6 Hz), 5.99 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.26 (t, 2H, J = 5.2 Hz), 2.86 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.1 (m, 2H).

실시예 14. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(3- 펜옥시 - 페닐 )-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 3-펜옥시페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(3-펜옥시-페닐)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.03 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.43 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 7.28 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.15 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 7.03 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 6.92 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 6.8 (s, 1H), 6.76 (t, 1H, J = 8 Hz), 6.60 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 6.08 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.27 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.97 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.16 (m, 2H).

실시예 15. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4 (3- 클로로 - 페닐 )-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 3-클로로페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(3-클로로-페닐)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.11 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.47-7.43 (m, 2H), 7.36 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 7.29 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 6.86 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 6.68 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 5.97 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.31 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.93 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.16 (m, 2H).

실시예 16. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(2- 클로로 - 페닐 )-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 2-클로로페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2-클로로-페닐)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.1 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.55 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.45-7.49 (m, 1H), 7.36 (d, 2H, J = 4.4 Hz), 6.81 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.58 (t, 1H, J = 8 Hz), 5.92 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 4.27 (m, 2H), 2.89 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.11 (m, 2H).

실시예 17. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(2,5- 디메톡시 - 페닐 )-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 2,5-디메톡시페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2,5-디메톡시-페닐)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 10.93 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.8 l (d, 1H, J = 7.6 Hz), 6.77 (s, 1H), 6.6 (t, 1H, J = 8 Hz), 5.92 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.26 (t, 2H, J = 5.2 Hz), 3.63 (s, 3H), 3.3 (s, 3H), 2.9 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.11 (m, 2H).

실시예 18. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(2- 클로로 -4- 플루오로 - 페닐 )-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2-클로로-4-플루오로-페닐)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.11 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.57 (dd, 1H, J = 2.8 및 9.2 Hz), 7.44 (dd, 1H, J = 6.8 및 8.4 Hz), 7.28 (dt, 1H, J = 2.4 및 8.4 Hz), 6.84 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.66 (t, 1H, J = 8 Hz), 5.98 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.27 (m, 2H), 2.9 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.11 (m, 2H).

실시예 19. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-나프탈렌-1-일-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 1-나프틸아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-나프탈렌-1-일-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.1 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.02 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.97 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.75 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.43-7.55 (m, 3H), 7.37 (t, 1H, J = 8 Hz), 6.66 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 6.27 (t, 1H, J = 8 Hz), 5.57 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.24 (t, 2H, J = 5.2 Hz, 2.83 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.08 (m, 2H).

실시예 20. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(2,6- 디클로로 - 페닐 )-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 2,6-디클로로페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2,6-디클로로-페닐)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.23 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.53-7.62 (m, 3H), 6.85 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.64 (t, 1H, J = 8.4 Hz), 6.01 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.27 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.9 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.11 (m, 2H).

실시예 21. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(2- 브로모 - 페닐 )-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 2-브로모페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2-브로모-페닐)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.09 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.75 (m, 1H), 7.37 (m, 2H), 7.33 (m, 1H), 6.81 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.58 (t, 1H, J = 8 Hz), 5.95 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.26 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.9 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.11 (m, 2H).

실시예 22. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-인돌-1-일-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 N-인돌릴-2-아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-인돌-1-일-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.21 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.58 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.52 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 7.01 (m, 2H), 6.91 (t, 1H, J = 6.8 Hz), 6.74 (d, 1H, J = 2.8 Hz), 6.71 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.4 (t, 1H, J = 8 Hz), 5.63 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.28 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 2.85 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.11 (m, 2H).

실시예 23. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-피리딘-3-일-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 피리딘-3-일아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-피리딘-3-일-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.14 (s, 1H), 8.53 (m, 2H), 8.12 (s, 1H), 7.78 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.41 (dd, 1H, J = 4.8 및 8 Hz), 6.86 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.66 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 5.97 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 4.3 (t, 2H, J = 5.2 Hz), 2.93 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.16 (m, 2H).

실시예 24. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(5- 브로모 -1H-인돌-3-일)-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 5-브로모-1H-인돌-3-일아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-브로모-1H-인돌-3-일)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.77 (s, 1H), 10.92 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.69 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 7.33 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.10 (dd, 1H, J = 2 및 8.4 Hz), 6.99 (d, 1H, J = 1.6 Hz), 6.76 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.55 (t, 1H, J = 8 Hz), 6.36 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.25 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.92 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.17 (m, 2H).

실시예 25. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-피리딘-4-일-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 피리딘-4-일아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-피리딘-4-일-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.17 (s, 1H), 8.53 (m, 2H), 8.54 (d, 2H, J = 6 Hz), 8.17 (s, 1H), 7.32 (d, 2H, J = 4.8 Hz), 6.88 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.69 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 5.93 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.31 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.94 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.16 (m, 2H).

실시예 26. 3-비페닐-4-일-4-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 4-페닐페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-비페닐-4-일-4-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR(아세톤-d₆) 400 MHz δ: 8.08 (s, 1H), 7.6-7.73 (m, 7H), 7.48 (t, 2H, J = 6.8 Hz), 7.39 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.84 (d, 1H, J = 8 Hz), 6.65 (t, 1H, J = 8.4 Hz), 6.23 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 5.97 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 4.38 (m, 2H), 2.98 (m, 2H), 2.28 (m, 2H).

실시예 27. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(4- 메탄설포닐 - 페닐 )-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 4-메탄설포닐페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(4-메탄설포닐-페닐)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.09 (s, 1H), 7.9 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.71 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.64 (s, 1H), 6.91 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.73 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 5.95 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 4.29 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 3.06 (s, 3H), 3.0 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.29 (m, 2H).

실시예 28. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(2- 트리플루오로메틸 -퀴놀린-4-일- 설파닐 )-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 2-[[2-(트리플루오로메틸)-4-퀴놀리닐]티오]아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2-트리플루오로메틸-퀴놀린-4-일-설파닐)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.3 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 8.11 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 8.05 (s, 1H), 7.68-7.82 (m, 4H), 7.23 (s, 1H), 6.83 (m, 2H), 4.21 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.92 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.21 (m, 2H).

실시예 29. 3-(4- 벤조일옥시페닐 )-4-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 4-벤질옥시페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(4-벤조일옥시페닐)-4-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 7.95 (s, 1H), 7.5 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 7.33-7.43 (m, 6H), 6.93 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 6.88 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.73 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 6.23 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 5.08 (s, 2H), 4.25 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.99 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.27 (m, 2H).

실시예 30. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-[4-(2-모르폴린-4-일- 에톡시 )- 페닐 ]-피롤-2,5- 디온의 제법

실시예 1, 단계 6에서 인돌-3-아세트아미드 대신에 4-(2-모르폴린-4-일-에톡시)-페닐아세트아미드를 사용하여 실시예 1, 단계 1-6에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-[4-(2-모르폴린-4-일-에톡시)-페닐]-피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 7.95 (s, 1H), 7.48 (m, 3H), 6.86 (m, 3H), 6.74 (t, 1H, J = 8 Hz), 6.23 (d, 1H, J = 8. Hz), 4.26 (t, 2H, J = 5.2 Hz), 4.16 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 3.77 (t, 4H, J = 4.8 Hz), 2.99 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.87 (t, 2H, J = 5.2 Hz), 2.65 (m, 4H), 2.28 (m, 2H).

실시예 31. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(5-1- 나프틸 -1H-인돌-3-일)피롤-2,5- 디온의 제법

톨루엔(4 ㎖), 에탄올(4 ㎖), 포화 NaHCO₃(1 ㎖) 및 물(2 ㎖) 중의 1-나프틸 붕소산(41 ㎎, 0.24 mmol), (실시예 24에서 제조된) 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-브로모-1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온(88 ㎎, 0.2 mmol), 테트라키스트리페닐포스핀 팔라듐(5 mol%)의 혼합물을 100℃에서 질소 하에 5 시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 에틸 아세테이트(3×15 ㎖)로 추출하고 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트/헥산(1:4)으로 용리시키면서 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4(5-1-나프틸-1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온을 선홍색 고형분(70 ㎎, 71%)으로서 얻었다. ¹H NMR (CD₃OD) δ: 1.80-1.92 (m, 2H), 2.72-2.80 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.94-3.99 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 6.50-6.58 (m, 3H), 6.66 (s, 1H), 6.72 (m, 1H), 6.98 (dd, J = 8.4 Hz, J' = 2.0 Hz, 1H), 7.00-7.50 (m, 2H), 7.28 (dd, J = 6.8 Hz, J' = 8.4 Hz, 1H), 7.38-7.43 (m, 2H), 7.61 (s, 1H), 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H).

실시예 32. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(5- 페닐 -1H-인돌-3-일)피롤-2,5- 디온의 제법

1-나프틸 붕소산 대신에 페닐 붕소산을 사용하여 실시예 31의 방법에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-페닐-1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CD₃OD) δ: 2.10-2.18 (m, 2H), 2.90 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 4.18 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 6.63 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.75-6.83 (m, 5H), 7.11-7.20 (m, 3H), 7.22 (dd, J = 8.4 Hz, J' = 1.2 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.93 (s, 1H).

실시예 33. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(5-(4- 메톡시페닐 )-1H-인돌-3-일)피롤-2,5- 디온의 제법

1-나프틸 붕소산 대신에 4-메톡시페닐 붕소산을 사용하여 실시예 31의 방법에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-(4-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CD₃OD) δ: 2.09-2.18 (m, 2H), 2.90 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.15 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 6.62-6.68 (m, 2H), 6.73 (s, 4H), 6.77-6.82 (m, 2H), 7.18 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.91 (s, 1H).

실시예 34. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(5-(3- 메틸페닐 )-1H-인돌-3-일)피롤-2,5- 디온의 제법

1-나프틸 붕소산 대신에 3-메틸페닐 붕소산을 사용하여 실시예 31의 방법에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-(3-메틸페닐)-1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (CD₃OD) δ: 2.00-2.10 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 2.81-2.88 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.03-4.11 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 6.50 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.64 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.74-6.81 (m, 3H), 6.86 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.03 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.22 (dd, J = 8.4 Hz, J' = 2.0 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.90 (s, 1H).

실시예 35. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴노린 -1-일)-4-(5- 브로모 -1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

실시예 24에서 제조된 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-브로모-1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온을 실시예 2, 절차 C에 기재된 바대로 메탄올 중의 Mg로 환원시켜 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-브로모-1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰다. ¹H NMR (CD₃OD) δ: 2.18-2.26 (m, 2H), 2.96 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.12 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.40 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.86-6.96 (m, 2H), 7.08 (s, 1H), 7.13-7.30 (m, 5H)

실시예 36. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(5- 페닐 -1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

실시예 32에서 제조된 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-페닐-1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온을 실시예 2, 절차 C에 기재된 바대로 메탄올 중의 Mg로 환원시켜 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-페닐-1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰다. ¹H NMR (CD₃OD) δ: 2.00-2.16 (m, 2H), 2.94 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.92-3.99 (m, 1H), 4.00-4.08 (m, 1H), 4.36 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 6.4 Hz IH), 6.88-6.97 (m, 2H), 7.04 (s, 1H), 7.12-7.15 (m, 1H), 7.17-7.47 (m, 9H).

실시예 37. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴노린 -1-일)-4-(5-(1- 나프틸 )-1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

실시예 31에서 제조된 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-1-나프틸-1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온을 실시예 2, 절차 C에 기재된 바대로 메탄올 중의 Mg로 환원시켜 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-(1-나프틸)-1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰다. ¹H NMR (CD₃OD) δ: 1.85-1.95 (m, 1H), 1.95-2.05 (m, 1H), 2.74-2.88 (m, 2H), 3.72-3.83 (m, 1H), 3.88-3.98 (m, 1H), 4.40 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.62 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.78 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.07-7.13 (m, 2H), 7.18-7.23 (dd, J = 8.4 Hz, J = 1.6 Hz, 2H), 7.27-7.34 (m, 2H), 7.41-7.49 (m, 3H), 7.78-7.83 (dd, J = 8.4 Hz, J = 3.2 Hz, 2H), 7.86-7.90 (d, J = 7.6 Hz, 1H).

실시예 38. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(5-(4- 메톡시페닐 )-1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

실시예 33에서 제조된 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-(4-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온을 실시예 2, 절차 C에 기재된 바대로 메탄올 중의 Mg로 환원시켜 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-(4-메톡시페닐)-1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰다. ¹H NMR (CD₃OD) δ: 2.03-2.22 (m, 2H), 2.98 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.97-4.06 (m, 1H), 4.06-4.14 (m, 1H), 4.38 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.67 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.91-7.00 (m, 2H), 7.08 (s, 2H), 7.17-7.27 (m, 4H), 7.31 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.8 Hz, 1H).

실시예 39. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(5-(3- 메틸페닐 )-1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

실시예 34에서 제조된 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-(3-메틸페닐)-1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온을 실시예 2, 절차 C에 기재된 바대로 메탄올 중의 Mg로 환원시켜 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(5-(3-메틸페닐)-1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰다. ¹H NMR (CD₃OD) δ: 1.98-2.18 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.85-3.00 (m, 2H), 3.90-3.98 (m, 1H), 3.98-4.09 (m, 1H), 4.35 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.88-6.99 (m, 2H), 7.00-7.10 (m, 3H), 7.13-7.26 (m, 5H), 7.36 (m, 2H).

실시예 40. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴노린 -1-일)-4-(2- 클로로 -4- 플루오로페닐 ) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

0℃에서의 무수 테트라하이드로푸란(5 ㎖) 중의 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)옥소아세트산 메틸 에스테르(0.243 g, 1 mmol) 및 2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드(1 mmol)의 용액에 칼륨 t-부톡사이드(테트라하이드로푸란 중 1 M)(2.5 ㎖, 2.5 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 이후, 농축 염산(0.5 ㎖)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 이후, 혼합물을 에틸 아세테이트(20 ㎖)로 희석하고, 물(2×15 ㎖) 및 포화 염화나트륨 수용액(15 ㎖)으로 세척하였다. 이후, 유기 층을 무수 황산나트륨에서 건조시키고 감압 하에 농축시켜 오일을 생성시켰다. 이 잔류물을 무수 메탄올(15 ㎖) 중에 희석하고 얻은 용액에 오븐 건조된 마그네슘 조각(0.5 g, 20.5 mmol)을 넣고 Mg 조각이 완전히 용해할 때까지 또는 2 시간 동안 통풍 바이알에서 70℃에서 교반하였다. 이후, 바이알을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트(25 ㎖)로 희석하고 10% 염산(2×25 ㎖) 및 포화 염화나트륨 수용액(20 ㎖)으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트/헥산 구배(40 분 동안 10% 에틸 아세테이트 내지 50% 에틸 아세테이트)로 용리시키면서 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2-클로로-4-플루오로페닐)피롤리딘-2,5-디온(25.6 ㎎, 6.7%)을 생성시켰다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 12.5 (s, 1H), 7.52 (t, 1H, J = 6.4 Hz), 7.49 (dd, 1H, J = 6.4 2.4 Hz), 7.34 (s, 1H), 7.21(td, 1H, J = 6.0 2.8 Hz), 7.10 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 6.87 (m, 2H), 4.67 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 4.51 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 2.90 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.11 (t, 2H, J = 5.2 Hz).

실시예 41. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴노린 -1-일)-4-(2,6- 디클로로페닐 ) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드를 2,6-디클로로페닐아세트아미드로 대체하여 실시예 40에 따라 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2,6-디클로로페닐)피롤리딘-2,5-디온을 제조하였다. 수율 52.2 ㎎, 13.0%. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.82 (s, 1H), 7.34 (m, 3H), 7.10 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.87 (m, 2H), 5.16 (d, 1H J = 7.6 Hz), 5.10 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 2.91 (t, 2H, J = 6.0 Hz) 2.10 (m, 2H).

실시예 42. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴노린 -1-일)-4-(4- 브로모페닐 ) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드를 4-브로모페닐아세트아미드로 대체하여 실시예 40에 따라 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(4-브로모페닐)피롤리딘-2,5-디온을 제조하였다. 수율 33.1 ㎎, 8.1%. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.55 (s, 1H), 7.53 (dt, 2H, J = 8.8 2.0 Hz), 7.34 (dt, 3H, J = 8.0 2.0 Hz), 7.15 (dd, 1H, J = 7.6 1.0 Hz), 6.86 (m, 2H), 4.53 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 4.37 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 4.10 (t, 2H, J = 1.6 Hz), 2.90 (t, 2H, J = 2.0 Hz), 2.12 (t, 2H, J = I.8 Hz).

실시예 43. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(4- 클로로페닐 ) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드를 4-클로로페닐아세트아미드로 대체하여 실시예 40에 따라 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(4-클로로페닐)피롤리딘-2,5-디온을 제조하였다. 수율 32.7 ㎎, 9.0%. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.54 (s, 1H), 7.40 (m, 4H), 7.33 (s, 1H), 7.15 (dd, 1H, J = 6.8 0.8 Hz), 6.86 (m, 2H), 4.54 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.38 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 4.10 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.90 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.11 (m, 2H).

실시예 44. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(4- 트리플루오로메톡시페닐 ) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드를 4-트리플루오로메톡시페닐아세트아미드로 대체하여 실시예 40에 따라 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(4-트리플루오로메톡시페닐)피롤리딘-2,5-디온을 제조하였다. 수율 67.8 ㎎, 16.4%. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.56 (s, 1H), 7.52 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.35 (s, 1H), 7.33 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 7.15 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.86 (m, 2H), 4.58 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 4.45 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 4.10 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.90 (t, 2H, J = 6.0), 2.10 (t, 2H, J = 5.6).

실시예 45. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(티오펜-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드를 티오펜-3-일아세트아미드로 대체하여 실시예 40에 따라 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(티오펜-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 제조하였다. 수율 50.3 ㎎, 15.0%. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.50 (s, 1H), 7.52 (m, 1H), 7.49 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.21 (dd, 1H, J = 4.0 1.2 Hz), 7.16 (d, 1H, 7.6 Hz), 6.89 (d, 1H, J = 4.4 Hz), 6.85 (t, 1H, J = 6.8 Hz), 4.56 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 4.41 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 4.10 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.90 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.10 (m, 2H).

실시예 46. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴노린 -1-일)-4-(2- 플루오로페닐 ) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드를 2-플루오로페닐아세트아미드로 대체하여 실시예 40에 따라 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2-플루오로페닐)피롤리딘-2,5-디온을 제조하였다. 수율 30.6 ㎎, 8.8%. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.64 (s, 1H), 7.36 (m, 3H), 7.17 (m, 3H), 6.84 (m, 2H), 4.44 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 4.40 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 4.10 (s, 2H), 2.88 (s, 2H), 2.09 (s, 2H).

실시예 47. (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴노린-1-일)-4-(2-티오펜-2-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드를 2-티오펜-2-일아세트아미드로 대체하여 실시예 40에 따라 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2-티오펜-2-일)피롤리딘-2,5-디온을 제조하였다. 수율 30.6 ㎎, 8.8%. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.58 (s, 1H), 7.45 (dd, 1H, J = 5.2 0.8 Hz), 7.40 (s, 1H), 7.22 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.12 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 6.99 (dd, 1H, J = 5.2 및 3.6 Hz), 4.63 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 4.60 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 2.90 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.12 (t, 2H, J = 6.0 Hz).

실시예 48. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(2.4- 디클로로페닐 ) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드를 2,4-디클로로페닐아세트아미드로 대체하여 실시예 40에 따라 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2,4-디클로로페닐)피롤리딘-2,5-디온을 제조하였다. 수율 20.9 ㎎, 5.2%. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.65 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.51 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.43 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.34 (s, 1H), 7.12 (m, 1H), 6.87 (m, 2H), 4.65 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 4.55 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 4.10 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.90 (t, 2H, J = 6.0), 2.12 (t, 2H, J = 6.0 Hz).

실시예 49. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4- 페닐 - 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드를 페닐아세트아미드로 대체하여 실시예 40에 따라 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-페닐-피롤리딘-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.511 (s, 1H), 7.24-7.36 (m, 6H), 7.13 (d, 1H, Z = I.2), 6.8-6.88 (m, 2H), 4.49 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 4.3 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 4.08 (m, 2H), 2.88 (m, 2H), 2.088 (m, 2H).

실시예 50. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(2- 클로로페닐 )- 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드를 2-클로로페닐아세트아미드로 대체하여 실시예 40에 따라 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2-클로로페닐)-피롤리딘-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.655 (s, 1H), 7.41-7.48 (m, 2H), 7.27-7.35 (m, 3H, J = 7.2), 7.87 (d, 1H, J = 7.6), 6.81-6.88 (m, 2H), 4.632 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 4.494 (d, 1H, J = 7.2), 4.07-4.10 (m, 2H), 2.884 (m, 2H), 2.09 (m, 2H).

실시예 51. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(N- 메틸인돌 -3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

2-클로로-4-플루오로페닐아세트아미드를 N-메틸인돌-3-일아세트아미드로 대체하여 실시예 40에 따라 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(N-메틸인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.55 (s, 1H), 7.44-7.34 (m, 4H), 7.2-7.18 (m, 2H), 7.01 (t, 1H), 6.82-6.89 (m, 2H), 4.49 (dd, 2H), 4.093 (t, 2H), 4.093 (t, 2H), 3.73 (s, 3H), 2.89 (t, 2H), 2.07 (m, 2H).

실시예 52. (±)- 시스 -3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(4-메 톡시 페닐)- 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

실시예 10에서 제조된 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4(4-메톡시-페닐)-피롤-2,5-디온을 실시예 2, 프로토콜 B의 방법을 이용하여 환원시켜 (+)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(4-메톡시페닐)-피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.62 (s, 1H), 7.15 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 6.8-6.93 (m, 4H), 6.7 (s, 1H), 6.55 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 4.8 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.48 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 3.96 (m, 2H), 3.63 (s, 3H), 2.87 (t, 2H, J = 6 Hz), 2.10 (m, 2H).

실시예 53. (±)- 시스 -3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(2,5-디 메톡 시페닐)- 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

실시예 17에서 제조된 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2,5-디메톡시-페닐)-피롤-2,5-디온을 실시예 2, 프로토콜 B의 방법을 이용하여 환원시켜 (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2,5-디메톡시페닐)-피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.0 (s, 1H), 7.19 (d, 1H, J = 1.6 Hz), 6.89 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 6.77 (d, 2H, J = 7.2 Hz), 6.44-6.51 (m, 3H), 4.84 (d, 2H, J = 9.6 Hz), 3.88-4.00 (m, 2H), 3.6 (s, 3H), 3.49 (s, 3H), 2.8 (m, 2H), 2.05 (m, 2H).

실시예 54. (±)- 시스 -3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(2-클로로-4- 플루오로 - 페닐 )- 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

실시예 18에서 제조된 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2-클로로-4-플루오로-페닐)-피롤-2,5-디온을 실시예 2, 프로토콜 B의 방법을 이용하여 환원시켜 (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(2-클로로-4-플루오로-페닐)-피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.82 (s, 1H), 7.02-7.18 (m, 4H), 6.7-6.85 (m, 3H), 5.01 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 4.79 (d, 2H, J = 9.6 Hz), 3.96 (m, 2H), 2.79 (m, 2H), 1.97 (m, 2H).

실시예 55. (±)- 시스 -3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(3-클 로로 페닐)- 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

실시예 15에서 제조된 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(3-클로로-페닐)-피롤-2,5-디온을 실시예 2, 절차 B의 방법을 이용하여 환원시켜 (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(3-클로로페닐)-피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.66 (s, 1H), 7.13 (d, 1H, J = 8 Hz), 6.95-7.02 (m, 5H), 6.78 (t, 1H, J = 1.6 Hz), 6.7 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 4.84 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 4.65 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 3.9-4.03 (m, 2H), 2.79 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 1.97 (m, 2H).

실시예 56. (±)-인산 모노-[트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-일]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5- 디옥소 - 피롤리딘 -1- 일메틸 ]에스테르의 제법

단계 1

테트라하이드로푸란(30 ㎖) 중의 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(3.0 g, 8.13 mmol, 실시예 2, 절차 C에서 제조됨) 및 포름알데하이드(30 ㎖, 물 중의 37%)를 실온에서 14∼16 시간 동안 교반하였다. 이후, 혼합물을 에틸 아세테이트(50 ㎖) 및 물(50 ㎖) 중에 채웠다. 유기 층을 염수로 세척하고 황산나트륨에서 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고 잔류물을 EtOAc/헥산 1:1로 용리되는 실리카 겔 크로마토그래피 컬럼을 사용하여 정제하여 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-1-하이드록시메틸-4-(1H-인돌-3-일)-피롤리딘-2,5-디온 2.5 g(77%)을 오렌지색 발포 고형분(2.5 g, 77%)으로서 생성시켰다.

단계 2

무수 테트라하이드로푸란(5 ㎖) 중의 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-1-하이드록시메틸-4-(1H-인돌-3-일)-피롤리딘-2,5-디온(0.06 g)을 디벤질포스포르아미데이트(0.156 ㎖, 3.5 당량)로 처리한 후 테트라졸(아세토니트릴 중의 3% 용액, 2 ㎖)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20 분 동안 교반하고 -78℃로 냉각시켰다. 디클로로메탄(2 ㎖) 중의 m-클로로퍼벤조산(70%, 0.162 g)의 용액을 -78℃에서 첨가하였다. -78℃에서 5 분 후, 반응물이 실온이 되게 하고 5 분 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 잔류물을 에틸 아세테이트, 헥산으로 용리시키면서 실리카 컬럼에서 섬광 크로마토그래피로 정제하여 인산 디벤질 에스테르 트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5-디옥소-피롤리딘-1-일 메틸 에스테르를 고형분(70 ㎎)으로서 생성시켰다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.10 (s, 1H), 7.32-7.39 (m, 12H), 6.84-7.24 (m, 2H), 5.49 (brs, 2H), 5.03 (m, 4H), 4.61 (dd, 2H), 4.06 (brs, 2H), 2.87 (brs, 2H), 2.07 (brs, 2H).

단계 3

메탄올(2 ㎖) 중의 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5-디옥소-피롤리딘-1-일-메틸 에스테르의 인산 디벤질 에스테르(0.160 g) 및 Pd/C(10%, 20 ㎎)를 실온에서 수소 1 분위기 하에 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트에서 여과시키고 용매를 제거하여 (±)-인산 모노-[트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5-디옥소-피롤리딘-1-일메틸]에스테르(0.110 g)를 생성시켰다.

실시예 57. (±)-트랜스-2-아미노-프로피온산-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-일]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5- 디옥소 - 피롤리딘 -1-일 메틸 에스 테르의 제법

단계 1

테트라하이드로푸란(8 ㎖) 중의 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-1-하이드록시메틸-4-(1H-인돌-3-일)-피롤리딘-2,5-디온(0.5 mmol)의 용액에 N-카르보벤질옥시 알라닌(1.1 당량)을 첨가한 후 HBTU(1.5 당량) 및 DIPEA(2.2 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 잔류물을 에틸 아세테이트 및 물(1:1, 15 ㎖) 중에 채웠다. 유기 층을 분리하고 건조시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 N-카르보벤질옥시 보호 생성물을 얻었다.

단계 2

메탄올(8 ㎖) 중의 단계 1로부터 얻은 N-카르보벤질옥시 보호 생성물(0.5 mmol)의 용액 및 에틸 아세테이트 중의 4 M HCl 몇 방울 및 10% Pd/C(10% w/w)를 실온에서 수소 1 분위기 하에 2 시간 동안 교반하였다. 이후, 혼합물을 셀라이트에서 여과시키고 용매를 제거하여 최종 생성물 (±)-트랜스-2-아미노-프로피온산-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5-디옥소-피롤리딘-1-일 메틸 에스테르를 얻었다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.10 (s, 1H), 8.57 (s, 2H), 6.84-7.41 (m, 9H), 5.61 (m, 2H), 4.62 (dd, 2H), 4.07 (brs, 2H), 3,72(brm, 1H), 2.87 (brs, 2H), 2.23 (s, 6H), 2.08 (brs, 2H), 1.40 (d, J = 6.4 Hz, 3H).

실시예 58. (±)-트랜스-2-아미노-아세트산-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-일]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5- 디옥소 - 피롤리딘 -1-일 메틸 에스 테르의 제법

N-카르보벤질옥시 알라닌을 N-카르보벤질옥시 글리신으로 대체하여 실시예 57에서처럼 (±)-트랜스-2-아미노-아세트산-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5-디옥소-피롤리딘-1-일 메틸 에스테르를 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.19 (s, 1H), 8.46 (s, 2H), 6.82-7.43 (m, 9H), 5.61 (s, 2H), 4.65 (dd, 2H), 4.08 (brt, J = 5.6 Hz, 2H), 3.88 (brs, 2H), 2.87 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.48 (s, 2H), 2.08 (t, J = 4.8 Hz, 2H).

실시예 59. (±)-트랜스-2-디메틸아미노-아세트산-3-(5,6- 디하이드로 -4H-피롤로[3,2,1- ij]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5- 디옥소 - 피롤리딘 -1-일 메틸 에스테르의 제법

테트라하이드로푸란(8 ㎖) 중의 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-1-하이드록시메틸-4-(1H-인돌-3-일)-피롤리딘-2,5-디온(0.5 mmol)의 용액에 N,N-디메틸글리신(1.1 당량)을 첨가한 후 HBTU(1.5 당량) 및 DIPEA(N,N-디이소프로필에틸아민, 2.2 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 잔류물을 에틸 아세테이트 및 물(1:1, 15 ㎖) 중에 채웠다. 유기 층을 분리하고 건조시켜 잔류물을 생성시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 헥산으로 용리되는 실리카 겔 컬럼에서 크로마토그래피로 정제하여 (±)-트랜스-2-디메틸아미노-아세트산-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5-디옥소-피롤리딘-1-일 메틸 에스테르를 생성시켰다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.10 (s, 1H), 6.82-7.41 (m, 9H), 5.70 (m, 2H), 4.62 (dd, 2H), 4.07 (brs, 2H), 3.23 (s, 2H), 2.87 (brs, 2H), 2.23 (s, 6H), 2.08 (brs, 2H).

실시예 60. (±)-트랜스-이소니코틴산-3-(5,6- 디하이드로 -4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5- 디옥소 - 피롤리딘 -1-일 메틸 에스테르의 제법

N,N-디메틸글리신을 4-카르복시피리딘으로 대체하여 실시예 59에서처럼 (±)-트랜스-이소니코틴산 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-2,5-디옥소-피롤리딘-1-일 메틸 에스테르를 제조하였다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.19 (s, 1H), 8.83 (d, 2H), 7.83 (d, 2H), 6.83-7.42 (m, 9H), 5.88 (s, 2H), 4.65 (dd, 2H), 4.05 (brt, 2H), 2.86 (brs, 2H), 2.08 (brs, 2H).

실시예 61. 3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(l- 메틸인돌 -3-일)-1- 메틸 피롤-2,5- 디온 및 (±)- 시스 -3-(5,6- 디하이드로 -4H-피롤로[ 3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(1- 메틸인돌 -3-일)-1- 메틸 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

단계 1: 무수 디메틸포름아미드(5 ㎖) 중의 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤-2,5-디온(100 ㎎, 실시예 1 참조)의 용액에 탄산칼륨(0.5 g) 및 요오드화메틸(0.1 ㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 48 시간 동안 교반한 후 에틸 아세테이트(100 ㎖)에 붓고, 물(100 ㎖)로 세척하고, 무수 황산나트륨에서 건조시키고 증발시켜 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(l-메틸인돌-3-일)-1-메틸 피롤-2,5-디온을 적색 고형분(93 ㎎)으로서 얻었다.

단계 2: 메탄올(5 ㎖) 및 에틸아세테이트(5 ㎖) 중의 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(l-메틸인돌-3-일)-1-메틸 피롤-2,5-디온(93 ㎎)의 용액에 10% Pd-C(50 ㎎)를 첨가하고 혼합물을 수소 1 분위기 하에 실온에서 48 시간 동안 교반하였다. 톨루엔(50 ㎖)을 첨가하고 혼합물을 수소 1 분위기 하에 실온에서 다시 2 시간 동안 교반하였다. 이후, 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과시키고 증발 건조시켜 잔류물을 생성시켰다. 잔류물을 헥산 중의 35∼40% 에틸아세테이트로 용리시키면서 실리카 겔 크로마토그래피를 사용하여 정제하여 (±)-시스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1-메틸인돌-3-일)-1-메틸 피롤리딘-2,5-디온을 담황색 고형분(53 ㎎)으로서 얻었다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 7.23 (s, 1H), 7.05-7.07 (m, 2H), 7.01 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.92-6.97 (m, 1H), 6.85 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 6.74 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 6.64 (d, 2H, J = 6.4 Hz), 4.78 (m, 2H), 3.75-3.84 (m, 2H), 3.45 (s, 3H), 3.27 (s, 3H), 2.79 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 1.98 (m, 2H).

실시예 62. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

1H-인돌 및 3,4-디브로모-1-페닐-피롤-2,5-디온을 메틸 마그네슘 브로마이드의 존재하여 반응시켜 3-브로모-4-(1H-인돌-3-일)-1-페닐-피롤-2,5-디온을 생성시킴으로써 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 제조할 수 있다. 3-브로모-4-(1H-인돌-3-일)-1-페닐-피롤-2,5-디온을 후속적으로 톨루엔 중의 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 및 LiHMDS(리튬 헥사메틸디실란) 또는 (5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-보란디올 및 Pd(PPh₃)₄(테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐)과 반응시켜 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-1-페닐-피롤-2,5-디온을 생성시켰고, 이것을 실시예 2 절차 C에서처럼 메탄올 중의 Mg로 처리하여 환원시키고 탈보호시킨 후 탄소상 팔라듐에서 촉매 수소화하여 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰다. Bnz는 벤질이다.

실시예 63. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일N)-4-(1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

1-알릴-7-브로모-1H-인돌을 디클로로메탄과 같은 극성 비양성자성 용매 중의 (COC1)₂(염화옥살릴) 및 메톡사이드 나트륨과 반응시켜 (1-알릴-7- 브로모-1H-인돌-3-일)-옥소-아세트산 메틸 에스테르를 생성시켜 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 제조할 수 있고, 이것을 후속적인으로 THF 중의 2-(1H-인돌-3-일)-아세트아미드 및 tBuOK(칼륨 tert-부톡사이드)와 반응시켜 3-(1-알릴-7-브로모-1H-인돌-3-일)-4-(1H-인돌-3-일)-피롤-2,5-디온을 생성시켰다. 실시예 2 절차 C에서처럼 환류 메탄올 중의 Mg로 3-(1-알릴-7-브로모-1H-인돌-3-일)-4-(1H-인돌-3-일)-피롤-2,5-디온을 환원시켜 3-(1-알릴-7- 브로모-1H-인돌-3-일)-4-(1H-인돌-3-일)-피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰고, 이것을 9-BBN(9-보라비사이클로[3.3.1]노난) 및 Pd(PPh₃)₄(테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐)으로 처리하여 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰다.

실시예 64. (±)- 시스 -3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3.2,1-ij]퀴놀린 -1-일N)-4-(1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온 및 (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H-피롤로[ 3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일N)-4-(1H-인돌-3-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

THF와 같은 극성 비양성자성 용매 중의 LDA(리튬 디이소프로필아미드)와 같은 염기의 존재 하에 (1H-인돌-3-일)-옥소-아세트산 메틸 에스테르 및 (5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-아세트산 메틸 에스테르의 반응으로 시작하여 2-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-3-(1H-인돌-3-일)-부트-2-엔디오산 디메틸 에스테르를 생성시켜 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 시스 이성체 및 트랜스 이성체를 제조할 수 있다. 대안적으로, THF 중의 염기(예를 들면, LDA)의 존재 하에 (1H-인돌-3-일)-아세트산 메틸 에스테르 및 (5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-옥소-아세트산 메틸 에스테르의 반응에 의해 2-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-3-(1H-인돌-3-일)-부트-2-엔디오산 디메틸 에스테르를 제조할 수 있다. 귀금속 촉매(예를 들면, 챠콜상 Pd)에서 촉매 수소화에 의해 2-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-3-(1H-인돌-3-일)-부트-2-엔디오산 디메틸 에스테르를 환원시켜 2-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-3-(1H-인돌-3-일)-숙신산 디메틸 에스테르를 얻었고, 이것을 벤질아민(PhCH₂NH₂)과 반응시켜 시스 및 트랜스 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-1-페닐-피롤리딘-2,5-디온의 혼합물을 생성시켰다. 챠콜상 Pd(Pd-C)에서 수소 수소화하여 시스 이성체 및 트랜스 이성체의 혼합물을 탈보호할 수 있어 시스 및 트랜스 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-피롤리딘-2,5-디온의 혼합물을 얻을 수 있다. 시스 이성체 및 트랜스 이성체를 분리할 수 있어 (예를 들면, 실시예 4 및 실시예 5에서처럼 크로마토그래피에 의해) 모두 4개의 시스 이성체 및 트랜스 이성체를 얻을 수 있다. 시스 이성체 및 트랜스 이성체의 탈보호 혼합물을 (실시예 3에서처럼) tert-부탄올 중의 칼륨 tert-부톡사이드 또는 THF와 tert-부탄올의 혼합물로 50℃에서 처리하여 트랜스 이성체인 혼합물을 주로 생성시킬 수 있다. 대안적으로, 2-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-3-(1H-인돌-3-일)-숙신산 디메틸 에스테르를 승온에서 메탄올 중의 암모니아와 반응시켜 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-zy]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-피롤리딘-2,5-디온의 시스 이성체를 주로 생성시킬 수 있고, 이것을 (실시예 3에서처럼) tert-부탄올 중의 칼륨 tert-부톡사이드 또는 THF와 tert-부탄올의 혼합물과 함께 50℃에서 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)-피롤리딘-2,5-디온의 트랜스 이성체를 주로 생성시킬 수 있다.

실시예 65. 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일N)-4-(3-메톡시페닐)-1H-피롤-2,5-디온의 제법

무수 테트라하이드로푸란(5 ㎖) 중의 5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)옥소아세트산 메틸 에스테르(0.50 g, 2.05 mmol)와 2-(3-메톡시페닐)아세트아미드(0.37 g, 2.26 mmol)의 혼합물에 칼륨 tert-부톡사이드(테트라하이드로푸란 중의 1.0 M, 6.17 ㎖, 6.17 mmol)를 0℃에서 적하하였다. 혼합물을 0℃에서 3 시간 동안 교반한 후 농축 염산(1.5 ㎖)을 0℃에서 첨가하였다. 얻은 혼합물을 1 시간 동안 교반하고, 에틸 아세테이트(150 ㎖)로 희석하고, 물(2×50 ㎖)로 세척하고, 무수 황산나트륨에서 건조시키고 농축시켜 오렌지색 고형분 0.91 g을 얻었다. 잔류물을 헥산 중의 20∼40% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(3-메톡시페닐)-1H-피롤-2,5-디온을 얻었다. Mp 99∼101℃; ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.01 (s, 1H), 7.81 (bs, 1H), 7.20-7.25 (m, 1H), 7.06-7.08 (m, 2H), 6.85-6.91 (m, 2H), 7.25 (t, 1H), 6.13 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.24 (t, 2H), 3.66 (s, 3H), 2.97 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.22-2.26 (m, 2H).

실시예 66. 3-[4-( 벤질옥시 ) 페닐 ]-4-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-1H-피롤-2,5- 디온의 제법

2-(3-메톡시페닐)아세트아미드 대신에 2-(4-(벤질옥시)페닐)아세트아미드를 사용하여 실시예 65에 따라 3-[4-(벤질옥시)페닐]-4-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-1H-피롤-2,5-디온을 제조하였다. Mp 262∼265℃; ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 10.96 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.33-7.45 (m, 7 H), 6.99 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 6.83 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.63 (t, 1H), 6.09 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.27 (m, 2H), 2.92 (m, 2H), 2.15 (m, 2H).

실시예 67. 3-(5,6- 디하이드로 -4H-피롤로[3,2,1- ij] 퀴놀린-1-일)-4-(4- 플루오로페닐 )-1H-피롤-2,5- 디온의 제법

2-(3-메톡시페닐)아세트아미드 대신에 2-(4-플루오로페닐)아세트아미드를 사용하여 실시예 65에 따라 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(4-플루오로페닐)-1H-피롤-2,5-디온을 제조하였다. Mp 234∼235℃; ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.05 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.42-7.46 (m, 2H), 7.71-7.22 (m, 2H), 6.83 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.65-6.69 (m, 1H), 6.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.21 (s, 2H), 2.92 (bs, 2H), 2.15 (bs, 2H).

실시예 68. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H-피롤로[3,2,1- ij] 퀴놀린-1-일)-4-(3- 메톡시페닐 ) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

무수 메탄올 중의 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(3-메톡시페닐)-1H-피롤-2,5-디온(0.73 g, 2.04 mmol), 마그네슘(0.89 g, 36.7 mmol)의 혼합물을 1.5 시간 동안 환류로 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 담황색 용액을 에틸 아세테이트(200 ㎖)로 희석하고, 1.0 M 염산(2×50 ㎖), 물(100 ㎖)로 세척하고, 황산나트륨에서 건조시키고 농축시켜 연갈색 고형분을 얻었다. 잔류물을 헥산 중의 40∼50% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 실리카 겔에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2,5-디온을 담황색 고형분으로서 생성시켰다. Mp 87∼91℃; ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.73 (s, 1H), 7.25-7.30 (m, 1H), 7.14 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.93-7.01 (m, 3H), 6.77-6.86 (m, 3H), 4.36 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.24 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.18(t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.97 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.19-2.24 (m, 2H).

실시예 69. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H-피롤로[3,2,1- ii1 퀴놀린-1-일)-4-(3- 하이드록시페닐 ) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

디클로로메탄(10 ㎖) 중의 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(3-메톡시페닐)피롤리딘-2,5-디온의 용액에 질소 분위기 하에 -78℃에서 붕소 트리브로마이드(디클로로메탄 중의 1.0 M)(5.2 ㎖)를 천천히 첨가하였다. 얻은 혼합물을 -78℃에서 30 분 동안 및 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -78℃로 냉각시킨 후 메탄올(5 ㎖)을 첨가하여 급냉시켰다. 혼합물을 실온으로 가온시키고 실온에서 30 분 동안 유지시켰다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(80 ㎖)으로 희석하고, 포화 수성 중탄산나트륨(15 ㎖), 물(15 ㎖) 및 포화 염화나트륨(15 ㎖)으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨에서 건조시키고 농축 건조시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트:헥산:디클로로메탄(5:5:1, v/v)으로 용리시키면서 실리카 겔에서 섬광 크로마토그래피로 정제하여 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(3-하이드록시페닐)피롤리딘-2,5-디온을 갈색 고형분(1.15 g, 63%)으로서 얻었다; Mp 108∼110℃. ¹H NMR (CDC1₃) 400 MHz δ: 8.69 (s, 1H), 7.18 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 7.12 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 6.99 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 6.97 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 6.93 (d, 1H, J = 6.4 Hz), 6.76 (m, 1H), 6.69 (d, 1H, J = 1.6 Hz), 5.67 (brs, 1H), 4.32 (d, 1H, J = 6.0 Hz), 4.20 (d, 1H, J = 6.0 Hz), 4.07 (t, 2H, J = 5.6 Hz), 2.96 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.19 (m, 2H), LC/MS: 347.3 [M+H].

실시예 70. (±)-트랜스-3-(5,6- 디하이드로 -4H- 피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린 -1-일)-4-(4- 플루오로페닐 ) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

실시예 67에 따라 제조된 3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(4-플루오로페닐)-1H-피롤-2,5-디온을 실시예 68의 방법을 이용하여 환원시켜 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(4-플루오로페닐)피롤리딘-2,5-디온 1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(4-플루오로페닐)-1H-피롤-2,5-디온을 생성시켰다. Mp 208∼210℃; ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.52 (s, 1H), 7.40-7.43 (m, 2H), 7.32 (m, 1H), 7.13-7.17 (m, 3H), 6.82-6.89 (m, 2H), 4.53 (m, 1H), 4.36 (m, 1H), 4.09 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.89 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.09-2.11 (m, 2H).

실시예 71. (±)-트랜스-3-[4-( 벤질옥시 ) 페닐 ]-4-(5,6- 디하이드로 -4H-피롤로[3,2,1- ij]퀴놀린 -1-일) 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

실시예 66에 따라 제조된 3-[4-(벤질옥시)페닐]-4-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-1H-피롤-2,5-디온을 실시예 68의 방법을 이용하여 환원시켜 (±)-트랜스 3-[4-(벤질옥시)페닐]-4-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)피롤리딘-2,5-디온을 생성시켰다. Mp 91∼93℃; ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.47 (s, 1H), 7.25-7.43 (m, 8 H), 7.15 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.82-6.96 (m, 4 H), 5.07 (s, 2H), 4.45 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.24 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.07-4.10 (m, 2H), 2.87-2.90 (m, 2H), 2.09-2.10 (m, 2H).

실시예 72. (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(4-하이드록시페닐)피롤리딘-2,5-디온의 제법

(±)-트랜스-3-[4-(벤질옥시)페닐]-4-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)피롤리딘-2,5-디온(0.2 g)과 Pd/C(10% w/w, 0.076 g)의 혼합물을 수소 가스 1 분위기 하에 밤새 교반하였다. 촉매를 셀라이트 패드를 통해 여과시키고 농축시켰다. 잔류물을 헥산 중의 30∼40% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 실리카 겔에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (±)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(4-하이드록시페닐)피롤리딘-2,5-디온 0.07 g을 담황색 고형분으로서 얻었다. Mp 105∼107℃; ¹H NMR(아세톤-d₆) 400 MHz δ: 10.27 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.17-7.21 (m, 4 H), 6.80-6.91 (m, 4 H), 4.39 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.22 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.13 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.92 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 2.15-2.19 (m, 2H).

실시예 73. 7-[4-(1H-인돌-3-일)-2,5- 디옥소 -2,5- 디하이드로 -1H-피롤-3-일]-3,4-디 하이 드로-1H-[1,4] 디아제피노r6 ,7J- fo1 인돌-2- 카르복실산 벤질 에스테르의 제법

단계 1

1,2-디클로로에탄(60 ㎖) 중의 7-포르밀 인돌(2.4 g, 16.6 mmol)의 용액에 아미노에탄올(1.2 ㎖, 19.8 mmol) 이어서 빙초산(2.0 ㎖) 및 나트륨 트리아세트옥시보로하이드라이드(3.5 g, 16.6 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 물(10 ㎖) 및 1.0 M 수산화나트륨(10 ㎖)을 첨가하여 반응 혼합물을 급냉시켰다. 이후, 유기 층을 분리하고 수성 층을 1,2-디클로로에탄(40 ㎖)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 포화 중탄산나트륨(2×30 ㎖), 물(2×50 ㎖)로 세척하고, 무수 황산나트륨에서 건조시키고 증발 건조시켰다. 2-[(1H-인돌-7-일메틸)-아미노]-에탄올(4.4 g)을 오일로서 얻었다. LCMS (M+H) = 189.

단계 2

1,2-디클로로에탄(40 ㎖) 중의 2-[(1H-인돌-7-일메틸)-아미노]-에탄올(4.4 g)의 용액에 트리에틸아민(4.85 ㎖, 34.6 mmol) 이어서 벤질 클로로포르메이트(3.57 ㎖, 25.34 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 물(20 ㎖) 및 1.0 M 수산화나트륨(10 ㎖)을 첨가하여 혼합물을 급냉시켰다. 유기 층을 분리하고 수성 층을 1,2-디클로로에탄(20 ㎖)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 1.0 M 염산(20 ㎖), 물(20 ㎖)로 세척하고, 무수 황산나트륨에서 건조시키고 증발 건조시켰다. 잔류물을 헥산 중의 20% 에틸 아세테이트 내지 헥산 중의 40% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (2-하이드록시-에틸)-(1H-인돌-7-일메틸)-카밤산 벤질 에스테르(2.79 g, 52% 2단계에 대한 합한 수율)를 무색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 9.97 (brs, 1H), 7.75-6.9 (m, 8H), 6.54 (brs, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.9-4.6 (m, 3H), 3.85-3.57 (m, 2H), 3.55-3.23 (m, 3H); LCMS M+H = 325.

단계 3

디클로로메탄(50 ㎖) 중의 (2-하이드록시-에틸)-(1H-인돌-7-일메틸)-카밤산 벤질 에스테르(2.79 g, 8.61 mmol)의 용액에 트리에틸아민(1.56 ㎖, 11.2 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 메탄설포닐 클로라이드(0.74 ㎖, 9.47 mmol)를 적하 방식으로 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온시키고 2 시간 동안 교반하였다. 이후, 혼합물을 물(30 ㎖) 및 1.0 M 수산화나트륨(10 ㎖)으로 급냉시켰다. 유기 층을 분리하고 수성 층을 디클로로메탄(20 ㎖)으로 추출하였다. 합한 추출물을 1.0 M 염산(20 ㎖), 물(30 ㎖)로 세척하고, 무수 황산나트륨에서 건조시키고 증발 건조시켰다. 메탄설폰산 2-[벤질옥시카르보닐-(1H-인돌-7-일메틸)-아미노]-에틸 에스테르(3.46 g)를 오일로서 얻었다.

단계 4

0℃로 냉각된 디메틸포름아미드(20 ㎖) 중의 메탄설폰산 2-[벤질옥시카르보닐-(1H-인돌-7-일메틸)-아미노]-에틸 에스테르(3.46 g, 8.61 mmol)의 용액에 광유 중의 수소화나트륨(60%)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반한 후 물(40 ㎖)을 첨가하여 급냉시켰다. 수성 층을 에틸 아세테이트(4×20 ㎖)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(3×30 ㎖)로 세척하고, 무수 황산나트륨에서 건조시키고 증발 건조시켰다. 잔류물을 디클로로메탄으로 용리시키면서 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 3,4-디하이드로-1H-[1,4]디아제피노[6,7,1-hi]인돌-2-카르복실산 벤질 에스테르(1.95 g, 74% 2단계에 대한 합한 수율)를 무색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 7.6-7.45 (m, 1H), 7.4-7.2 (m, 5H), 7.17-6.9 (m, 3H), 6.6-6.48 (m, 1H), 5.2-5.05 (m, 2H), 5.0-4.82 (m, 2H), 4.4-4.2 (m, 2H), 4.1-3.95 (m, 2H); LCMS (M+H) = 307.

단계 5

0℃에서의 무수 테트라하이드로푸란(10 ㎖) 중의 3,4-디하이드로-1H-[1,4]디아제피노[6,7,1-hi]인돌-2-카르복실산 벤질 에스테르(557 ㎎, 1.8 mmol)의 용액에 염화옥살릴(238 ㎕, 2.7 mmol) 이어서 염화옥살릴(340 ㎕, 3.85 mmol) 추가 분획을 첨가하였다. 모든 출발 물질이 소모될 때까지 혼합물을 0℃에서 교반한 후 -78℃로 냉각시켰다. 이후, 메탄올 중의 메톡사이드 나트륨(0.5 M)(10 ㎖)을 천천히 첨가하고 혼합물을 실온으로 가온시켰다. 실온에서 1 시간 후 혼합물을 이후 에틸 아세테이트(200 ㎖)로 희석하고 물(300 ㎖)로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨에서 건조시키고 증발 건조시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트/헥산(1:1)으로 용리시키면서 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 7-메톡시옥살릴-3,4-디하이드로-1H-[1,4]디아제피노[6,7,1-hi]인돌-2-카르복실산 벤질 에스테르를 담황색 고형분(481 ㎎, 67%)으로서 얻었다. ¹H NMR (CDCl₃) 400 MHz δ: 8.26-8.36 (m, 2H), 7.22-7.37 (m, 6H), 7.10 (dd, 1H, J = 32.8 및 7.2 Hz), 5.11 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 4.94 (d, 2H, J = 22.4 Hz), 4.41-4.48 (m, 2H), 4.01-4.05 (m, 2H), 3.93 (m, 3H).

단계 6

0℃에서의 무수 테트라하이드로푸란(14 ㎖) 중의 7-메톡시옥살릴-3,4-디하이드로-1H-[1,4]디아제피노[6,7,1-hi]인돌-2-카르복실산 벤질 에스테르(481 ㎎, 1.22 mmol) 및 인돌-3-아세트아미드(234 ㎎, 1,34 mmol)의 용액에 칼륨 t-부톡사이드(412 ㎎, 3.67 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 이후, 농축 염산(5 ㎖)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 이후, 혼합물을 에틸 아세테이트(300 ㎖)로 희석하고, 물(500 ㎖)로 세척하고 유기 층을 무수 황산나트륨에서 건조시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트/헥산(1:1)으로 용리시키면서 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 7-[4-(1H-인돌-3-일)-2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-3-일]-3,4-디하이드로-1H-[1,4]디아제피노[6,7,1-hi]인돌-2-카르복실산 벤질 에스테르를 밝은 오렌지색/적색 고형분(1.2 g, 80%)으로서 얻었다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.66 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 10.94 (s, 1H), 7.69-7.75 (m, 2H), 7.19-7.38 (m, 6H), 6.98 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 6.73-6.89 (m, 3H), 6.60-6.66 (m, 2H), 4.90-5.08 (m, 2H), 4.50 (m, 2H), 3.95 (m, 2H).

실시예 74. (±)-트랜스-7-[4-(1H-인돌-3-일)-2,5- 디옥소 - 피롤리딘 -3-일]-3,4-디 하이 드로-1H-[1,4] 디아제피노 [6,7,1- hi ]인돌-2- 카르복실산 벤질 에스테르의 제법

마그네슘 조각(195 ㎎, 8.0 mmol)을 무수 메탄올(20 ㎖) 중의 7-[4-(1H-인돌-3-일)-2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-3-일]-3,4-디하이드로-1H-[1,4]디아제피노[6,7,1-hi]인돌-2-카르복실산 벤질 에스테르(230 ㎎, 0.44 mmol)의 용액에 첨가하고 질소 분위기 하에 1.5 시간 동안 환류로 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 에틸 아세테이트(200 ㎖)에 붓고 1 M 염산(100 ㎖)으로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨에서 건조시키고 증발 건조시켰다. 이후, 잔류물을 헥산 중의 50∼60% 에틸 아세테이트를 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (±)-트랜스-7-[4-(1H-인돌-3-일)-2,5-디옥소-피롤리딘-3-일]-3,4-디하이드로-1H-[1,4]디아제피노[6,7,1-hi]인돌-2-카르복실산 벤질 에스테르를 회백색 고형분(205 ㎎)으로 생성시켰다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.56 (s, 1H), 11.03 (d, 1H, J = 2 Hz), 7.21-7.43 (m, 10H), 7.09 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 6.92-7.00 (m, 2H), 6.82-6.89 (m, 3H), 5.04 (s, 2H), 4.87 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 4.54 (dd, 2H, J = 7.6 및 28.8 Hz), 4.30 (m, 2H), 3.92 (m, 2H).

실시예 75. (±)-트랜스-3-(1H-인돌-3-일)-4-(1,2,3,4- 테트라하이드로 -[1,4]디아제피노[ 6,7,1-hi]인돌 -7-일)- 피롤리딘 -2,5- 디온의 제법

무수 메탄올(15 ㎖) 중의 (±)-트랜스-7-[4-(1H-인돌-3-일)-2,5-디옥소-피롤리딘-3-일]-3,4-디하이드로-1H-[1,4]디아제피노[6,7,1-hi]인돌-2-카르복실산 벤질 에스테르(161 ㎎, 0.31 mmol) 및 10% 탄소상 팔라듐(100 ㎎)을 수소 1 분위기 하에 16 시간 동안 교반하였다. 이후, 촉매를 셀라이트 층을 통해 여과시키고 여액을 증발 건조시켜 (±)-트랜스-3-(1H-인돌-3-일)-4-(1,2,3,4-테트라하이드로-[1,4]디아제피노[6,7,1-hi]인돌-7-일)-피롤리딘-2,5-디온을 회백색 고형분(95 ㎎)으로서 생성시켰다. ¹H NMR (DMSO-d₆) 400 MHz δ: 11.04 (d, 1H, J = 1.6 Hz), 7.35-7.42 (m, 4H), 7.24 (dd, 1H, J = 2.8 및 5.6 Hz), 7.09 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 6.89-6.98 (m, 3H), 4.52 (dd, 2H, J = 7.2 및 24.8 Hz), 4.11 (s, 2H), 4.07-4.10 (m, 2H), 3.14-3.17 (m, 2H).

실시예 76. 다양한 항증식성 질환 및 암의 치료를 위한 c- Met 억제제와 소라페닙 및 수니티닙의 조합

물질 및 방법

달리 기재되지 않은 한, 다음의 물질 및 방법을 본원에 기재된 생물학적 검정에 적용하였다.

세포 배양 및 시약: NCI-H441, PC-3, MIA PaCa-2, HeLa, HT-29 및 A549 암 세포주(American Type Culture Collection)를 10% 소 태아 혈청, 100 단위/㎖ 페니실린, 100 ㎍/㎖ 스트렙토마이신 및 2 mM L-글루타민을 포함하는 둘베코 변형 이글 배지 중에 배양하였다.

약효등효도 분석: 각각의 세포주 및 약물 복합제에 대해, 72 시간 IC₅₀ 값을 각각의 개별 약물에 대해 그리고 MTT 증식 종점 검정 또는 콜로니 형성 검정에 의해 종점 고정 비율로 조합하여 결정하였다. 예를 들면, IC₅₀ 값이 각각 1 μM 및 5 μM인 약물 A 및 약물 B의 경우에, 종점 비율은 1:5이다. 따라서, 최고 조합 농도(8X 내지 0.125, 여기서 X는 IC₅₀ 비율 농도이다)의 연속 희석을 이용하여 용량 반응 곡선을 생성시켰다. 노출되지 않은 대조군에 비해 이 검정에서 세포 증식의 억제 정도를 0.0(억제 없음) 내지 1.0(완전한 세포 사멸을 나타내는 MTT 또는 MTS 시약의 세포 전환 없음) 범위인 "효과"로 표시하였다. 2회 독립 실험을 각각의 세포주/약물 조합에 대해 수행하였다. 이후, Calcusyn™(Biosoft, Cambridge, UK) 데이터 분석 소프트웨어에 의해 데이터를 분석하였다.

세포 생존 분석. 일부 실험에서, 세포 생존율을 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐 테트라졸룸 브로마이드(MTT) 검정에 의해 결정하였다. 간단히 말하면, 세포를 웰당 5∼10,000개 세포로 96웰 플레이트에 플레이팅하고, 완전 성장 배지 중에 24 시간 동안 배양하고, 이후 다양한 약물 및 약물 조합으로 72 시간 동안 처리하였다. MTT를 첨가하여 최종 농도를 0.5 ㎎/㎖로 만들고, 1 시간 동안 항온처리한 후, 570 ㎚에서 마이크로플레이트 판독기를 사용하여 세포 생존능력을 평가하였다. 데이터를 치료되지 않은 대조군으로 정규화하고 마이크로 엑셀에 의해 분석하였다.

세포 증식 검정. 지수로 성장하는 세포를 6웰 플레이트에서 웰당 2,000개 세포로 시딩하고 24 시간 동안 부착시켰다. 이후, 증가하는 농도의 개별 약물 및 약물을 조합하여 배지에 추가 24 시간 동안 첨가하였다. 24 시간 노출 후, 약물을 제거하고 새로운 배지를 다음 14∼21 일 동안 첨가하여 콜로니를 형성시켰다. 세포를 고정하고 GIEMSA(Gibco BRL)로 염색하였다. 50개 이상의 세포의 콜로니를 생존자로서 기록하고 세포 생존 백분율을 좌표 표시하여 IC₅₀ 값을 결정하였다.

본원에 기재된 연구는 본원에 도시된 화학식 Ⅴa의 화합물, 즉 c-Met 수용체 티로신 키나제의 소형 분자 억제제인 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 다중 표적화된 키나제 억제제인 소라페닙과 조합하여 사용하였다.

일련의 유전자형 및 조직 기원을 포함하는 일련의 64개의 인간 암 세포주는 광범위한 화합물 농도에 걸쳐 72 시간 MTS 세포독성 검정에서 생존하였다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙을 72 시간 MTS 검정에 대해 체커보드 3배 희석으로 구성하였다.

본 실시예에서, 2개의 독립 실험을 병렬로 수행하였다. 표 1에 기재된 조합 지수(CI)를 계산하기 위해 챠우(Chou) 알고리즘을 이용하였다.

복합 지수를 챠우의 방법에 따라 결정하였다 {Chou, T.-C. 1991). The median-effect principle and the combination index for quantitation of synergism and antagonism, p. 61-102. In T.-C. Chou and D. C. Rideout (ed.), Synergism and antagonism in chemotherapy. Academic Press, San Diego, Calif}. 도 2a 패널은 C⁰ _A 및 C⁰ _B가 각각 약물 A와 약물 B의 혼합물과 동일한 효과를 성취하는 약물 A 및 약물 B의 별개 농도라는 것을 보여준다. 약효등효도 분석은 약물 조합을 상승 작용, 상가 작용 또는 길항 작용으로서 분류하였다. 구체적으로, 도 2b 패널은 약물 A 단독의 용량이 A = 20이고, 약물 B 단독의 용량의 B = 100인 특정 효과(예를 들면, 최대의 50%)에 대한 약효등효도 분석을 보여준다. 이 교차점을 연결하는 직선은, 그 효능에 기초하여, 동일한 효과를 제공해야 하는 상가 작용(additivity) 선이다. 실제 용량 쌍 예컨대 Q 지점은 이 효과를 더 적은 분량으로 획득하고 초상가 또는 상승 작용이지만, R 지점으로 표시한 용량 쌍은 더 많은 분량이 필요하고 따라서 저상가성이라는 것을 의미하였다. 선 아래 보이는 P와 같은 지점은 단순히 상가성일 것이다.

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 소라페닙의 조합 데이터가 표 2에 기재되어 있고, 수니티닙과의 조합 데이터는 표 3에 기재되어 있다. 화합물 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 이 표에서 "A 제제"로서 확인되었다. 암 세포주의 정체성 및 조직 기원을 나타냈다. 결과는 조합 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙이 3개의 NSCLC 세포주(NCI-H522, NCI-H358, NCI-H460), MDA-MB-231(유방), A375(흑색종), HCC1395 유방암 세포주, Caki-1 신세포 암종, HeLa 자궁경부암종 세포주 및 A431 유피 암종에서 상승 세포독성을 나타낸다는 것을 보여주고, Colo205 및 SW480 결장암 세포주, NCI-H358(NSCLC) 세포주 및 3개의 간세포 암종(JHH-4, PLC/PRF/5, SK-Hep-1)을 비롯한(이들로 제한되지는 않음) 40개의 다른 세포주에서 상가 세포독성을 보여준다. 표 2는 상가 또는 상승 작용(초상가성)이 관찰되는 인간 암 세포주에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙의 조합 세포독성을 보여준다. 표 3은 상가 또는 상승 작용(초상가성)이 관찰되는 인간 암 세포주에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 수니티닙의 조합 세포독성을 보여준다.

실험실내 NCI-H522 NSCLC 세포주에 대한 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙의 항증식성 효과를 또한 평가하였다. 세포를 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 0.14 내지 33 μM 및 소라페닙 0.015 내지 100 μM의 증가 농도로 72 시간 동안 처리하였다. 세포 성장을 상업적으로 구입 가능한 표준 MTS 시약[Promega(Madison, WI)로부터 얻은 내부 염인 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-5-(3 카르복시메톡시페닐)-2-(4-설포페닐)-2H-테트라졸룸] 검정을 이용하여 평가하였다. 약효등효도를 좌표 표시하고, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙의 상승 작용을 보여주는 조합 지수를 결정하였다.

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙의 생체내 항증식성 효과를 또한 평가하였다. 확립된 피하 NCI-H522 NSCLC 종양을 갖는 암컷 Ncr nu/nu 마우스를 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온, 소라페닙, 제제 둘 다 또는 비히클 대조군의 표시 용량으로 21 일(8∼29 일) 동안 경구 영양법에 의해 치료하였다. 모든 섭생을 21 일 동안 1일 1회 경구로 투여하였다. 종양 크기를 접종 후 표시 일수에 치료 동안 주기적으로 평가하였다. 도 3은 (A 제제로 나타낸) (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙의 조합 치료의 그래프 표현으로, NCI-H522 NSCLC 이종이식편 모델에서 효과를 보여준다. 이 결과를 치료 기간 동안 10개의 종양의 종양 중량 ± SEM의 평균으로서 나타낸다. 화합물 둘 다 모든 코호트에서 매우 내약성이고, 체중 증가에 대한 부작용이 관찰되지 않았고, 이것은 이 2종의 제제가 탁월하게 생체내 조합 가능하다는 것을 보여준다.

종합하면, 이러한 전임상 데이터는 c-Met 억제제, 예컨대(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 키나제 억제제, 예컨대 소라페닙의 조합 치료가 실험실내 및 생체내 광범위 암 세포주에 대해 매우 고무적인 항증식성 활성을 나타낸다는 것을 보여준다.

실시예 77. 소안구증 전사 인자 관련 종양의 치료를 위한 c- Met 억제제와 소라페닙의 조합

임상 연구에서, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온에 의한 단일 요법 치료는 매우 내약성이고, 광범위 종양 및 용량에 걸쳐 종양 반응 및 연장된 안정한 질환을 발생시켰다. 바람직한 임상 치료에 의한 적응증으로는 MiT(소안구증 전사 인자: Microphthalmia Transcription Factor) 관련 종양, 비소세포 폐암 및 췌장 선암을 들 수 있다. 투명 세포 육종(CCS), 포상 연부 육종(ASPS) 및 전좌 관련 신세포 암종(RCC)을 비롯한 MiT 종양은 이 종양의 진행을 발생시키는 c-Met의 과발현의 원인이 되는 공통 염색체 이상을 통해 생물학적으로 관련된다. 유사한 임상 연구는 키나제 억제제, 예컨대 소라페닙에 의한 조합 치료 및 단일 요법 치료 둘 다에 대한 간세포 암종(HCC)에 관한 것이다.

국립 암 연구소에 따르면, 미국에서 HCC의 새로운 21,370건의 사례가 2008년에 추정되었고, 18,410건의 사망이 질환에 의해 야기되는 것으로 추정되었다. 미국에서, 증가하는 HCC 발병도는 주로 C형 간염 감염 및 간경변과 관련된다. 절제 불가능한 HCC를 앓는 환자를 위해 승인된 제1 약물은 소라페닙이다. 소라페닙 치료 후 질환 진행을 경험한 환자 또는 소라페닙에 내약성일 수 없는 환자에 대해, 입증된 임상 이익을 갖는 대안적인 치료가 가능하지 않았다. 따라서, 소라페닙 치료가 선택이 아닌 진행된 HCC를 않는 환자에서 신규 치료 접근법에 대한 높은 충족되지 못한 의학 수요가 존재하였다.

c-Met 및 이의 리간드인, 간세포 성장 인자(HGF)의 과발현은 HCC를 앓는 환자에서 빈약한 예후와 관련된다. 비정상적으로 활성화될 때, c-Met는 암 세포 성장, 생존, 혈관신생, 침습 및 전이를 비롯한 인간 암의 양태에서 다수의 역할을 담당하였다. HCC와 관련된 과학 문헌은 c-Met 경로의 비정상 활성화의 증거를 제공하였다. 또한, c-Met 및 HGF의 조절곤란은 이 질환에서 공통적인 것으로 보인다. 세포 증식은 간암 진행의 원인이 되는 중심 메커니즘이고, c-Met는 이 과정에서 중요한 역할을 담당하는 것으로 생각된다.

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙을 조합한 이러한 임상 연구에서, 환자를 1일 2회(bid) 360 ㎎의 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 bid 200 ㎎의 소라페닙으로 치료하였다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙에 의한 치료와 관련되는 환자의 말초 혈액에서 간세포 성장 인자(HGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 및 가용성 c-Met의 동적 변화를 평가하기 위해 환자를 또한 스크리닝하였다. 조합 치료의 결과는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온에 의한 단일 요법 치료와 비교할 때 상가 및 상승 항증식성 효과를 보여준다.

실시예 78. 다양한 항증식성 질환 및 암의 치료를 위한 c-Met 억제제와 키나제 억제제의 조합

단일 물질로서 임상 반응을 보여주는 I상 데이터를 보완하기 위해, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 2종의 시판되는 티로신 키나제 억제제(TKI), 소라페닙(실시예 76 및 실시예 77에서도 도시됨) 및 수니티닙의 잠재적 상승 작용을 평가하였다. 일련의 유전자형 및 조직 기원을 포함하는 일련의 64개의 인간 암 세포주를 광범위 화합물 농도에 걸쳐 72 시간 MTS 세포독성 검정에서 조사하였다. 약효등효도 분석은 약물 조합을 상승 작용, 상가 작용 또는 길항 작용으로서 분류하였다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 소라페닙의 조합은 3개의 NSCLC 세포주(NCI-H522, NCI-H358, NCI-H460), MDA-MB-231(유방), A375(흑색종), HCC1395 유방암 세포주, Caki-1 신세포 암종, HeLa 자궁경부암종 세포주 및 A431 유피 암종(실시예 89 참조)에서 상승 세포독성을 나타냈다. Colo205 및 SW480 결장암 세포주, NCI-H358(NSCLC) 세포주 및 3종의 간세포 암종(JHH-4, PLC/PRF/5, SK-Hep-1)을 비롯한(이들로 제한되지는 않음) (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온/소라페닙 복합제에 의해 40개의 인간 암 세포주에서 상가 작용이 나타났다. 이 데이터는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온에 대한 조합 치료 섭생의 설계에서 유익할 수 있다.

일련의 여러 인간 암 세포주에 대해 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 소라페닙 및 수니티닙과 조합하여 실험실내 조합 세포독성 연구를 수행하였다. 광범위 조합 효과가 관찰되었고, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 수니티닙과 비교하여 상승 또는 상가 세포독성 효과의 더 높은 발생이 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙에 의해 입증되었다. 흥미롭게도, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 수니티닙이 상승 세포독성을 나타낸 2종의 세포주는 둘 다 c-Met 유전자 증폭으로 인해 활성화된 c-Met를 발현하는 것으로 알려져 있다(SNU-16 위 암종 및 SCH 위 융모암 세포주)(표 3). 화합물 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 이 표에서 "A 제제"인 것으로 확인되었다. 관찰된 효과가 조직 유형 특이적이 아니지만, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙에 의해 상승 작용을 나타내는 세포주는 유방암종 세포주(HCC1395 및 MDA-MB-231) 및 3종의 비소세포 폐암종(NSCLC), NCI-H460, NCI-H358 및 NCI-H522를 발현하는 2종의 c-Met를 포함하였고, 모두 c-Met 발현 또는 유전자 증폭을 입증하였다. NCI-H522 NSCLC 세포주는 c-Met 유전자 증폭을 나타내고 높은 수치의 HGF를 분비하지만, 혈청 기아시 높은 구성 수치의 포스포-c-Met를 나타내지 않는 것으로 알려져 있다. 그럼에도 불구하고, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙은 무흉선 마우스 이종이식편 모델에서 경구로 동시 투여될 때 증강된 항종양 효능을 나타냈다(도 3). (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 소라페닙은 소라페닙에 현재 승인된 임상 적응증인 시험된 5개의 간세포 암종(HCC)에서 가산 세포독성을 나타냈다. 관련 동물 모델에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 시판 중인 TKI의 상승 또는 상가 세포독성 효과의 재현은 임상 활성의 적응증을 나타낸 경구로 투여되고 매우 내약성인 신규 항암 약물 후보인 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온에 대한 잠재적 임상 발전 전략을 지도하였다.

(도 4에서 A 제제로 나타낸) (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 소라페닙 또는 수니티닙의 조합 데이터는 도 4 및 도 5에 도시된 바대로 1/조합 지수로 나타냈다.

실시예 79. 비소세포 폐암 및 결장암의 치료를 위한 c- Met 억제제와 엘로티닙의 조합

NCI-H441 비소세포 폐암 세포(NSCLC)에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 엘로티닙의 효과를 시험하였다. 엘로티닙은 표피 성장 인자 수용체의 억제제이고, 화학 요법 섭생 이전 하나 이상의 실패 후 국소 진행된 또는 전이된 비소세포 폐암에 의한 환자의 치료에 적응증을 갖고, 국소 진행된, 절제 불가능한 또는 전이된 췌장암에 의한 환자의 최우선 치료에 적응증을 갖는다. 엘로티닙의 IC₅₀은 대략 1 μM인 것으로 예상되었고, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 IC₅₀은 NCI-H441 NSCLC 세포에 대해 300 nM인 것으로 예상되었고, 따라서 1:3의 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온:엘로티닙 비를 사용하였다. HT29 결장암 세포에 대해 1:33(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온:엘로티닙을 사용하였다. 독립 실험에 의해 측정할 때 NCI-H441 세포주에 대해 CI는 ED₅₀에서 0.45∼1 범위였고, Ht29 세포주에 대해 CI는 0.72였다(표 4). 화합물 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 이 표에서 "A 제제"로서 확인되었다. 각각의 실험에 대해 중앙 효과 도면 및 약효등효도를 수행하였다. 이 데이터는 비소세포 폐암 세포(NSCLC) 및 결장암 세포 둘 다에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 엘로티닙의 상가 내지 상승 항증식성 효과를 입증하는 것이다.

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 엘로티닙의 효과를 NCI-H441 NSCLC 인간 종양 이종이식편 모델에서 시험하였다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 4 주 동안 매주 5 일(qd×5×4) 경구로 300 ㎎/㎏으로 매일 투여하였다. 엘로티닙을 4 주 동안 매주 5 일 경구로 100 ㎎/㎏ 또는 50 ㎎/㎏으로 매일 투여하였다. 표 5 및 도 6에 도시된 바대로, 모든 연구에서, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 엘로티닙의 조합은 단일 요법 치료에 비해 개선된 항증식성 효과를 나타냈고, 데이터는 비소세포 폐암에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 엘로티닙의 적어도 상가 효과 및 가능하게는 상승 효과를 입증하였다. 화합물 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 표 5 및 도 6에서 "A 제제"로서 확인되었다.

실시예 80. 결장암 및 폐암의 치료에 대한 c- Met 억제제와 게피트닙의 조합

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 게피티닙의 효과를 HT29 결장암 세포에서 시험하였다. 게피티닙은 EGF 수용체의 억제제이다. 게피티닙의 IC₅₀은 대략 5 μM인 것으로 예상되었고, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 IC₅₀은 HT29 결장암종 세포에 대해 150 nM인 것으로 예상되었고, 따라서 1:33의 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온:게피티닙 비율을 이용하였다. CI는 ED₅₀에서 1.27였다(표 6). 화합물 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 이 표에서 "A 제제"로서 확인되었다. 각각의 실험에 대해 중앙 효과 도면 및 약효등효도를 수행하였다. 이 데이터는 결장암 세포에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 게피티닙의 적어도 상가 항증식성 효과를 입증하는 것이다.

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 게피티닙의 효과를 NCI-H441 인간 폐 종양 이종이식편 모델에서 시험하였다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 4 주 동안 매주 5 일(qd×5×4) 경구로 300 ㎎/㎏으로 매일 투여하였다. 게피티닙을 4 주 동안 매주 5 일 경구로 50 ㎎/㎏으로 매일 투여하였다. 표 7 및 도 7에 도시된 바대로, 모든 연구에서, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 게피티닙의 조합은 단일 요법 치료에 비해 개선된 항증식성 효과를 나타냈고, 데이터는 비소세포 폐암에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 게피티닙의 적어도 가산 효과 및 가능하게는 상승 효과를 입증하였다. 화합물 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 표 7 및 도 7에서 "A 제제"로서 확인되었다.

실시예 81. 췌장암의 치료를 위한 c- Met 억제제와 카르보플라틴의 조합

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 DNA 합성 억제제 카르보플라틴의 조합을 MIA PaCa-2 췌장 종양 세포에서 시험하였다. 카르보플라틴은 다른 치료학적 물질과 조합될 때 췌장 및 전립선암 둘 다에서 유리한 것으로 보고되어 있다. 카르보플라틴의 IC₅₀은 대략 25∼50 μM인 것으로 예상되었고, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 IC₅₀은 MIA PaCa-2 세포에 대해 150 nM인 것으로 예상되었다. 더 농도에서 카르보플라틴의 불용성으로 인해, 달리 기재되지 않은 한, 1:50의 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온:아르보플라틴 비율을 이용하였다. MIA PaCa-2 세포의 경우, CI는 50% 유효 용량(ED₅₀)에서 1.09∼1.45 범위였다(표 8). 화합물 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 이 표에서 "A 제제"로서 확인되었다. 각각의 실험에 대해 중앙 효과 도면 및 약효등효도를 수행하였다. 이 데이터는 췌장암 세포에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 카르보플라틴의 적어도 상가 항증식성 효과를 입증하는 것이다. 이 약물 조합에서 관찰된 약간의 변동성은 아마도 더 높은 용량 범위에서 카르보플라틴의 용해도 문제로 인한 것이다.

실시예 82. 췌장암의 치료를 위한 c- Met 억제제와 시스플라틴의 조합

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 DNA 합성 억제제 시스플라틴의 효과를 MIA PaCa-2 췌장 종양 종양 세포에서 시험하였다. 게피티닙은 EGF 수용체의 억제제이다. 시스플라틴 의 IC₅₀은 대략 5∼15 μM인 것으로 예상되었고, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 IC₅₀은 MIA PaCa-2 세포에 대해 150 nM인 것으로 예상되었다. 달리 기재되지 않은 한, 1:50의 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온:시스플라틴 비율을 이용하였다. MIA PaCa-2 세포의 경우, CI는 ED₅₀에서 0.74∼0.79였다(표 9). 화합물 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 이 표에서 "A 제제"로서 확인되었다. 각각의 실험에 대해 중앙 효과 도면 및 약효등효도를 수행하였다. 이 데이터는 췌장암 세포에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 시스플라틴의 상승 항증식성 효과를 입증하는 것이다.

실시예 83. 위암의 치료를 위한 c- Met 억제제와 다양한 화학 치료 물질의 조합

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 5-FU, TS-1, 카페시타빈 및 시스플라틴(CDDP)의 효과를 MKN-45 인간 위 종양 이종이식편 모델에서 시험하였다(도 11 내지 도 14). (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 2 주 동안 매주 5 일(qd×5×2) 경구로 300 ㎎/㎏으로 매일 투여하였다. 5-FU를 2 주 동안 매주 5 일 정맥내로 10 ㎎/㎏으로 매일 투여하였다. TS-1을 2 주 동안 매주 5 일 경구로 10 ㎎/㎏으로 매일 투여하였다. 카페시타빈을 2 주 동안 매주 5 일 경구로 360 ㎎/㎏으로 매일 투여하였다. CDDP를 2 주 동안 정맥내로 5 ㎎/㎏으로 매주 투여하였다. 표 10에 도시된 바대로, 모든 연구에서, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 이 화합물의 조합은 단일 요법 치료에 비해 개선된 항증식성 효과를 나타냈고, 데이터는 위암에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 5-FU, TS-1, 카페시타빈 및 시스플라틴의 적어도 상가 항증식성 효과를 입증하였다.

실시예 84. 결장암의 치료를 위한 c- Met 억제제와 이마티닙의 조합

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 이마티닙(Gleevec)의 효과를 HT29 결장암 세포에서 시험하였다. 이마티닙은 Abelson 원암유전자, c-키트 및 PDGF-R(혈소판 유래 성장 인자 수용체)의 억제제이고, 만성 골수성 백혈병(CML), 위장관 기질 종양(GIST) 및 여러 다른 악성 종양의 치료에 적응증을 갖는다. 이마티닙의 IC₅₀은 대략 10 μM인 것으로 예상되었고, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 IC₅₀은 HT29 세포에 대해 150 nM인 것으로 예상되었고, 따라서 1:66의 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온:이마티닙 비율을 이용하였다. CI는 ED₅₀에서 1.22였다(표 11). 화합물 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 이 표에서 "A 제제"로서 확인되었다. 각각의 실험에 대해 중앙 효과 도면 및 약효등효도를 수행하였다. 이 데이터는 결장암 세포에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 이마티닙의 거의 상가 항증식성 효과를 입증하는 것이다.

실시예 85. 췌장암의 치료를 위한 c- Met 억제제와 젬시타빈의 조합

c-Met는 처음에 활성화된 암유전자로서 1980년대에 발견되었고(Cooper, C. S. et al. (1984). Nature 311, 29-33), 구조적으로 다른 RTK 패밀리와 구별되는 Ron을 비롯한 RTK의 서브패밀리의 원형 구성원이다. c-Met는 산란 인자로서도 알려진 간세포 성장 인자(HGF)에 대한 유일한 공지된 고친화도 수용체이다(Birchmeier, C. et al. (2003). Nat Rev Mol Cell Biol 4, 915-925). 실험실내 및 생체내 실험은 이 수용체 성장 인자 쌍이 배발생, 세포 증식, 생존, 분화, 운동성 및 침습을 비롯한 다수의 생리학적 세포 반응에 관여하는 것으로 나타났다(Birchmeier, C. et al. (2003). Nat Rev Mol Cell Biol 4, 915-925). 후속적으로, HGF 및/또는 c-Met는 육종 및 암종을 비롯한 여러 유형의 인간 고형 종양에서 그리고 c-Met 발현 정도가 종종 빈약한 환자 예후와 관련되는 이의 관련 전이에서 흔히 과발현되는 것으로 밝혀졌다(Birchmeier, C. et al. (2003). Nat Rev Mol Cell Biol 4, 915-925). c-Met 돌연변이의 활성화는 인간 신장 유두상 암종의 산발성 및 유전된 형태 둘 다에 기재되어 있고(Danilkovitch-Miagkova, A., and Zbar, B. (2002). J Clin Invest 109, 863-867), met의 게놈 증폭은 위 암종과 관련되는 것으로 밝혀졌다(Nakajima, M. et al. Cancer 85, 1894-1902). 이소성 HGF 및/또는 c-Met 과발현은 인간 이종이식편 종양 보유 마우스 및 형질전환 마우스 모델 둘 다에서 종양 형성 및 전이를 유도할 수 있다(Takayama, H. et al. (1997). Proc Natl Acad Sci USA 94, 701-706). 종합하면, 이 데이터는 종양 형성 및 전이 진행에서 c-Met 활성화된 네트워크의 기능 관련성에 대한 유력한 증거를 제공하고, 따라서 c-Met는 매력적인 암 치료 표적이다.

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 생화학적 검정에서 및 다수의 세포 기반 검정에서 c-Met 활성을 억제하는 것으로 보인다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 임상 실험으로 진행되었고, 전이 질환을 앓는 말기 암 환자에서 종양 반응의 신호를 나타내면서 매우 내약성이었다(Rosen, L. et al. (2006) 18^th EORTC-NCI-AACR Symposium on Molecular Targets and Cancer Therapeutics (7-10 November 2006, Prague, Czech Republic). Eur J Cancer Suppl 4, 196).

잠재적으로 Ⅱ상 임상 실험을 알리기 위해, 췌장암 치료를 위해 사용되는 치료의 현행 약물 표준인 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 젬시타빈을 사용하여 실험실내 조합 연구를 이용하였다. 이 연구의 목적은 상이한 계산 방법을 이용하고 CalcuSyn™ 소프트웨어(Biosoft)에 의해 얻은 데이터를 비교하여 인간 췌장암 세포주에 대한 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 젬시타빈 조합의 효과를 독립적으로 요약하는 것이다.

MIA PaCa-2(PACA2라고도 칭함), PANC-1, CFPAC-1 및 Hs766T 인간 췌장 세포주를 10% 소 태아 혈청(FBS), 페니실린, 스트렙토마이신 및 훈기존이 보충된 DMEM에서 유지하였다. AsPC-1 세포를 10% FBS, 페니실린, 스트렙토마이신 및 훈기존이 보충된 RPMI에서 유지하였다. HPAF-II 세포를 10% FBS, 페니실린, 스트렙토마이신 및 훈기존이 보충된 MEM에서 유지하였다. MTS 세포독성 검정을 위해, 세포를 웰당 2,000개 세포로 96웰 플레이트에서 플레이팅하고, 증가 농도의 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 젬시타빈을 조합하여 72 시간 동안 항온처리하였다. MTS 시약(Promega, Madison, WI)을 각 웰에 첨가하고, 플레이트를 37℃에서 4 시간 동안 항온처리하였다. 각 웰의 흡광도를 마이크로플레이트 판독기를 사용하여 492 ㎚에서 측정하였다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 또는 젬시타빈(GEM) 단독에 의한 예비 실험을 수행하여 각 세포주에 대한 각각의 개별 화합물의 IC₅₀을 결정하고 농도 범위를 또한 결정하였다. 약물 조합 분석에 대한 (도 8에서 A 제제로 나타낸) (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 젬시타빈의 용량 범위의 배치를 추가로 결정하였다. IC₅₀ 계산 및 IC₅₀ 값 결정은 표 12 및 도 8에 도시되어 있다.

이 연구의 결과는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 젬시타빈의 조합이 PANC-1, HPAF-II 및 AsPC-1 인간 췌장암 세포주에서 상승 항증식성 효과를 제공한다는 것을 보여준다. 모든 3개의 췌장 세포주는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 젬시타빈의 조합 치료에 민감하였다. 이 연구의 결과는 선행 작업을 요약한 것이고, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 젬시타빈의 조합이 시험된 6개 중 3개의 췌장 세포주에서 상승 작용이라는 것을 확인시켜 준다.

실시예 86. 췌장암, 결장암 및 전립선암의 치료 c- Met 억제제와 탁소테레의 조합

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 탁소테레의 효과를 MIA PaCa-2 췌장 종양 세포, PC-3 전립선 종양에서 시험하였다. 각각의 세포주의 경우, 탁소테레의 IC₅₀ 값은 대략 5 nM인 것으로 예상되었고, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온의 IC₅₀은 MIA PaCa-2 세포의 경우 150 nM이고, PC-3 세포의 경우 1 μM인 것으로 예상되었다. 이 세포주의 경우, 예상된 IC₅₀ 값에 따라 200∼1000:1의 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온:탁소테레를 사용하였다. MIA PaCa-2 세포의 경우, CI는 ED₅₀에서 0.99였고(표 15), 따라서 조합 효과가 상가성이었다. 화합물(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 이 표에서 "A 제제"로서 확인되었다. 각각의 실험에 대해 중앙 효과 도면 및 약효등효도를 수행하였다.

PC-3 세포에서 이 조합을 또한 시험하였고, 여기서 조합 지수는 ED₅₀에서 0.68 내지 1.51 범위였다(표 16). 화합물 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 이 표에서 "A 제제"로서 확인되었다.

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 탁소테레를 이종이식편 연구에서 조합으로 투여할 때 유리한 효과를 갖는 것으로 입증되었다. 72 시간 MTT 데이터가 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 탁소테레의 조합이 상가성이라는 것을 제시하지만, MTT 검정을 세포 사멸의 작용의 탁소테레의 메커니즘으로 인해 세포 사멸의 가장 정확한 검정일 수 있다. 따라서, 콜로니 형성을 이용한 추가의 조합 세포 사멸 검정을 수행하여 세포 사멸에 대한 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 탁소테레의 장기간 효과를 포착하였다. 콜로니 형성 검정을 PC-3, HT29 및 MIA PaCa-2 세포에서 수행하여 이 조합의 효과가 상승 작용인지를 결정하였다. 콜로니 형성 검정에 의해, MIA PaCa-2 세포에 대한 CI는 0.43였고, 이것은 상승 작용을 나타낸다. HT-29 세포에 대해 약간의 상승 작용 내지 상가 작용이 또한 관찰되었고, PC-3 세포에 대해 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온:탁소테레 혼합물은 상가성이었다.

단기간 MTT 검정과 조합된 이 데이터는 췌장암 세포, 전립선암 세포 및 결장암 세포에 대한 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 탁소테레의 상승 항증식성 효과를 입증하는 것이다.

실시예 87. 암 치료를 위한 실험실내 c- Met 억제제와 화학치료제의 조합

c-Met는 간세포 성장 인자(HGF)를 위한 고친화도 수용체이다(Weidner K. M. et al. J Cell Biol. 1993 Apr;121(1): 145-54). c-Met와 HGF의 상호작용에 의해 Gab1, c-Cb1 및 PI3 키나제를 비롯한 여러 다운스트림 신호 전달 성분에 대한 결합 자리를 제공하고 이를 활성화하는 여러 티로신에서 자동포스포릴화가 발생한다(Bardelli A. et al. Oncogene. 1997 Dec 18;15(25): 3103-11). 변경된 c-Met 수치 및 과활성화된 c-Met는 신장암, 결장암 및 유방암을 비롯한 각종의 인간 종양에서 입증되었고 따라서 c-Met는 매력적인 암 치료 표적이다(Traxler P. et al. Med Res Rev. 2001 Nov; 21(6):499-512). (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 생화학적 검정 및 다수의 세포 기반 검정에서 c-Met 활성을 억제하는 것으로 보인다. (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 임상 실험으로 진행되었고, 전이 질환을 앓는 말기 암 환자에서 종양 반응의 신호를 나타내면서 매우 내약성이었다.

잠재적으로 Ⅱ상 임상 실험을 알리기 위해, 현재 임상 사용되는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 다수의 화학치료제(젬시타빈, 도세탁셀 및 카르보플라틴)을 사용하여 실험실내 조합 연구를 이용하였다.

MIA PaCa-2(PACA2로도 칭함), PANC-1, CFPAC-1, Hs766T, DU-145, PC-3 및 SK-OV-3 세포를 10% 소 태아 혈청(FBS), 페니실린, 스트렙토마이신 및 훈기존이 보충된 DMEM에서 유지하였다. AsPC-1 및 22Rv-I 세포를 10% 소 태아 혈청(FBS), 페니실린, 스트렙토마이신 및 훈기존이 보충된 RPMI 1640에서 유지하였다. HPAF-II 세포를 10% 소 태아 혈청(FBS), 페니실린, 스트렙토마이신 및 훈기존이 보충된 MEM에서 유지하였다. For MTS 검정, 세포를 웰당 2,000개 세포로 96웰 플레이트에서 플레이팅하고, 젬시티빈, 도세탁셀 또는 카르보플라틴과 조합된 다양한 용량의 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온으로 72 시간 동안 항온처리하였다. 약물 조합 분석을 위한 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온, 젬시티빈, 도세탁셀 및 카르보플라틴의 용량 범위의 배치를 결정하였다. MTS를 각 웰에 첨가하고 플레이트를 37℃에서 4 시간 동안 항온처리하였다. 각 웰의 흡광도를 마이크로플레이트 판독기를 사용하여 492 ㎚에서 측정하였다. 다양한 세포주 중에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 젬시티빈, 도세탁셀 또는 카르보플라틴의 조합 지수를 CalcuSyn™(Biosoft)에 의해 결정하였다.

다양한 세포주에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 젬시타빈, 도세탁셀 및 카르보플라틴의 조합 지수를 분석하였다.

실시예 85에 기재된 바대로, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 젬시타빈의 조합은 5개 중 3개의 인간 췌장암 세포주에서 일련 범위의 상승 항증식성 효과를 나타냈다.

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 도세탁셀의 조합은 표 17에 기재된 바대로 3개 중 2개의 인간 전립선암 세포주, 즉 22RV1 및 DU145에서 일련 범위의 상승 항증식성 효과를 입증하는 것이다.

(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온과 카르보플라틴의 조합은 SK-OV-3 난소암종 세포주에서 약간의 길항 효과를 입증하는 것이다.

실시예 88. 위암의 치료를 위한 생체내 c- Met 억제제와 도세탁셀의 조합

위암 세포에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온 및 도세탁셀(DTX)을 포함하는 조합 치료의 연구 효과에 이종이식편 모델은 사용하였다. 구체적으로, 위암 세포주 MKN-45 및 Hsc-39을 시험하였다. MKN-45 인간 위 종양 이종이식편 모델에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(A 제제) 및 도세탁셀(DTX)의 상승 항증식성 효과의 증거가 표 18 및 도 9에 기재되어 있다. 유사하게, Hsc-39 인간 위 종양 이종이식편 모델에서 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온(A 제제) 및 도세탁셀(DTX)의 상승 항증식성 효과의 증거가 표 19 및 도 10. 표 18에 기재되어 있다.

Claims

치료 유효량의 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 조성물과, 치료 유효량의 제2 항증식제를 포함하는, 환자에서 암을 치료하기 위한 약학 조성물로서, 상기 제2 항증식제는 소라페닙 또는 엘로티닙이고, 제2 항증식제가 소라페닙인 경우, 암은 간암 또는 비소세포 폐암이고; 제2 항증식제가 엘로티닙인 경우, 암은 비소세포 폐암 또는 결장암인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 상기 암은 고형 종양(들)인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 상기 암 치료는 종양 크기의 감소를 포함하는 것인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 암은 전이 암인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 상기 암 치료는 전이 암 세포 침습의 억제를 포함하는 것인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 간암은 간세포 암종인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 암 세포는 c-Met 코딩 DNA를 함유하는 것인 약학 조성물.
제7항에 있어서, 세포는 구성적으로 증강된 c-Met 활성을 갖는 것인 약학 조성물.
제1항에 있어서, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 0.1 ㎎/일 내지 10 g/일의 용량 범위에서 투여에 적당한 것인 약학 조성물.
제9항에 있어서, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 0.1 ㎎/일 내지 5 g/일의 용량 범위에서 투여에 적당한 것인 약학 조성물.
제10항에 있어서, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 10 ㎎/일 내지 1 g/일의 용량 범위에서 투여에 적당한 것인 약학 조성물.
제11항에 있어서, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 720 ㎎의 1일 최대 용량에서 투여에 적당한 것인 약학 조성물.
제12항에 있어서, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온은 1일 2회에 제공되는 360 ㎎의 용량에서 투여에 적당한 것인 약학 조성물.
제1항에 있어서, (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 포함하는 조성물 및 제2 항증식제는 정맥내, 경구 또는 복강내 투여에 적당한 것인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 제2 항증식제는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 포함하는 조성물의 투여와 동시에, 투여 전에 또는 투여 후에 투여하기에 적당한 것인 약학 조성물.
제15항에 있어서, 제2 항증식제는 (-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온을 포함하는 조성물이 투여된 후 24 시간 내에 투여하기에 적당한 것인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 1종 이상의 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 더 포함하는 것인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 상기 제2 항증식제는 1종 이상의 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 것인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 환자는 인간인 약학 조성물.
(-)-트랜스-3-(5,6-디하이드로-4H-피롤로[3,2,1-ij]퀴놀린-1-일)-4-(1H-인돌-3-일)피롤리딘-2,5-디온, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 조성물, 및 제2 항증식제를 함유하는 개개의 바이알을 포함하는, 피험체에서 암을 치료하기 위한 키트로서, 상기 제2 항증식제는 소라페닙 또는 엘로티닙이고, 제2 항증식제가 소라페닙인 경우, 암은 간암 또는 비소세포 폐암이고; 제2 항증식제가 엘로티닙인 경우, 암은 비소세포 폐암 또는 결장암인 키트.
제20항에 있어서, 간암은 간세포 암종인 키트.
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