KR101099197B1 - 유상 발효에 의한 항암 조성물의 제조방법 - Google Patents
유상 발효에 의한 항암 조성물의 제조방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은, 암세포의 성장을 억제하는 조성물을 제조하기 위하여 백화사설초와 여정실 열매를 식물효소법으로 발효시켜 얻은 항암 발효유지조성물에 관한 것이다. 이러한 본 발명에 따르면, 전통적인 방법에 의한 건강에 유익한 약재 및 건강식품을 제조하는 방법보다 편리하게 섭취할 수 있도록 하기 위하여 연질 캡슐로 충진할 수 있어, 암환자의 상태에 따라 일정한 개수의 캡슐을 정량으로 조제할 수 있을 뿐만 아니라, 암환자가 손쉽게 섭취할 수 있는 효과가 있다.
항암, 발효, 식용유지, 여정실 열매, 백화사설초
Description
본 발명은 유상(油狀) 발효에 의한 항암 조성물의 제조방법에 관한 것이다.
현대인에게 가장 큰 위험으로 대두되고 사회적인 이슈가 되고 있는 암이라는 질병의 증가는 환경오염에 따라 보다 심각해지고 있다. 그리고 자연사 또는 질병에 의한 사망자의 60~70%가 각종 암에 의한 사망으로 확인되고 현재 인구당 4명중 1명이 암환자라는 공포스런 결과들이 발표되고 있다.
따라서 현대 의학은 이를 해결하려는 과학적인 시도를 하고 있고 천연약물을 통한 치료방법 또한 끊임없이 연구되고 있다.
상기 천연약물 중에서 암에 효과가 있는 것으로 알려진 여정실 열매와 백화시설초에 대한 개략적인 개요와 연구과정을 설명하면 다음과 같다.
여정목은 물푸레나무과의 광나무(Ligustrum japonicum) 또는 쥐똥나무(Ligustrum obtusifolium)를 일컫는 것으로, 우리나라 남해안과 제주도, 일본, 대만, 중국 등에 자생한다. 그 열매인 여정실은 전통적으로 한약재로 사용되어 왔 으며, 지혈, 건위, 강장, 지한, 토혈, 혈변, 피로회복 등에 이용된 것으로 알려져 있다. 그리고 최근 문헌에 의하면, 비만, 변비, 뇌신경계질환(뇌졸증, 치매), 염증, 육모 등에 효험이 있으며 항산화활성, 항바이러스활성, 간보호효능, 항암활성 등이 보고되고 있다.
한편, 백화사설초(Oldenlandia diffusa)는 쌍낚시풀이라고도 하는데, 꽃 빛깔이 희고 잎 모양이 뱀의 혀를 닮았다 해서 붙여진 이름이다. 그리고 백화사설초는 산지의 습지에서 자라고, 높이 10∼30cm이며, 밑에서 가지가 갈라져서 옆으로 자라거나 곧게 선다. 또는 잎은 마주나고 줄 모양이며 톱니가 없으나 가장자리가 깔깔하고 주맥만 나타나며, 길이 1∼3.5cm이고 너비 1.5∼3mm이다.
최근에 각종 논문 등 실험결과를 통해서 백화사설초가 항암 효과가 매우 뛰어난 것으로 보고되고 있다. 즉, 백화사설초는 위암이나 간암, 식도암, 직장암, 방광암 등에 효과가 있다고 한다. 그리고 백화사설초는 갖가기 종양과 염증에도 매우 뛰어난 효과가 있어 소화기계와 임파계 종양에 효과가 좋다.
이와 같은, 백화사설초와 여정실 열매를 이용하여 사람을 치료하거나 건강에 유익하도록 제조 및 가공하는 데 있어서, 전통적인 방법으로는 혼합 탕제, 원료를 분쇄하여 환으로 제조하거나, 소주 등 알콜에 침지하여 침출주를 만들거나 하여 섭취하였다.
그러나 이러한 전통 한의약재를 간편하게 섭취하도록 연질 캡슐로 충진하는 것은 전통적인 방법으로는 용이하지 않았다. 이는 전통적인 방법에 의해 얻은 원료 나 완제품들은 탕재(수용성), 분말, CO2 추출용액(수용성), 소주 등 알콜 침출주(연질 캡슐 붕해를 촉진하는 알콜 및 수용성), 설탕을 첨가하여 발효시켜 얻은 발효액(수용성) 등은 연질 캡슐에 충진이 가능하다 하더라도 1시간 이내에 붕해되어 보존이 불가능하다는 문제점이 있었다. 왜냐하면, 연질 캡슐에 충진되는 원료는 지용성 유지성분으로 가공된 원료이어야지, 수용성 원료는 연질 캡슐로 충진이 불가능하기 때문이다.
따라서 최종 산물이 유지성분이 아닌 수용성 액체일 경우 연질 캡슐에 충진할 수 없으며, 농축액일 경우 연질 캡슐로 충진이 가능하지만 충진 후 보관이 어렵고 장기간 보관할 경우 충진된 캡슐 내부의 농축 액기스가 굳어 섭취후 분해가 되지 않아 농축액의 캡슐 충진은 효과적인 방법이 아니다. 특히 암환자와 같이 중병을 가진 사람이 섭취할 경우 더욱 붕해 속도가 빠르거나 혹은 섭취후의 흡수가 빠르게 진행될 수 있도록 굳지 않아야 한다.
다시 말해, 종래의 전통적인 방법으로는 연질 캡슐로 여정실 열매와 백화사설초 조성물을 제조하는 것이 불가능할 뿐만 아니라 시도되지도 않았고, 연질 캡슐로 제조하기 위해서는 반드시 최종 산물이 지용성 유지성분이어야 하는데, 종래의 전통적인 방법에 의한 제조로는 여정실 성분과 백화사설초 성분이 함유된 유지성분을 얻을 수 없었다.
아울러, 여정실 열매는 겉피는 무른 피막이고, 속피는 단단한 피갑으로 싸여 있고 피갑속에 단백질과 지방질이 많이 함유되어 있는 배아가 있는 일반 씨앗과 같 아서, 이를 발효시킨다는 것이 용이하지 않았다.
또한 종래의 제조방법에 의한 여정실 열매와 백화사설초 조성물은 어떠한 방법으로 제조되었을 때 항암에 효과적인지 여부가 분명치 않았다. 따라서 항암에 효과가 있다고 알려져 있음에도 불구하고, 여정실 열매와 백화사설초의 폭넓은 활용은 이루어지지 않고 있다.
따라서, 본 발명은 상기와 같은 종래의 문제점을 감안하여 창안한 것으로, 본 발명의 목적은, 전통적인 방법에 의한 건강에 유익한 약재 및 건강식품을 제조하는 방법보다 편리하게 섭취할 수 있도록 하기 위하여 연질 캡슐로 충진할 수 있는 항암 발효유지조성물을 제공하기 위한 것이다.
본 발명의 다른 목적은, 연질 캡슐로 충진하여 보존이 용이하고 섭취에 편리하면서도 항암 및 암세포의 성장을 억제하는데 탁월한 효과를 발휘하는 항암 발효유지조성물을 제공하기 위한 것이다.
상기한 바와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 특징에 따르면, 제1발명은 유상 발효에 의한 항암 조성물의 제조방법에 관한 것으로, 여정실 열매와 여정실 열매에 대해 1~5중량%의 주정알콜을 혼합하여 20~30시간 숙성하는 단계; 상기 여정실 열매와 주정알콜에 대해 25~65중량%의 식물성 식용유지를 상기 여정실 열매 및 주정알콜와 혼합한 제1혼합물을 발효기에 투입하는 단계; 상기 발효기의 내부온도를 20~38℃로 하여 상기 제1혼합물을 30~60일간 발효하는 단계; 상기 발효된 제1혼합물을 압착하여 제1발효유지조성물을 추출하는 단계; 수분함량 20~35%로 건조된 백화사설초를 상기 백화사설초와 동일한 중량의 식물성 식용유지와 혼합한 제2혼합물을 발효기에 투입하는 단계; 상기 발효기의 내부온도를 20~38℃로 하여 상기 제2혼합물을 30~60일간 발효하는 단계; 상기 발효된 제2혼합물을 압착하여 제2발효유지조성물을 추출하는 단계; 및 상기 제1발효유지조성물과 제2발효유지조성물을 혼합하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 한다.
제2발명은, 항암 발효유지조성물에 관한 것으로, 여정실 열매와 여정실 열매에 대해 1~5중량%의 주정알콜을 혼합하여 20~30시간 숙성하는 단계; 상기 여정실 열매와 동일한 중량의 수분함량 20~35%로 건조된 백화사설초와, 상기 여정실 열매와 주정알콜 및 백화사설초에 대해 25~65중량%의 식물성 식용유지를 상기 여정실 열매 및 주정알콜와 혼합한 제3혼합물을 발효기에 투입하는 단계; 상기 발효기의 내부온도를 20~38℃로 하여 상기 제3혼합물을 30~60일간 발효하는 단계; 및 상기 발효된 제3혼합물을 압착하여 제3발효유지조성물을 추출하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 한다.
제3발명은, 제1발명 또는 제2발명에서, 상기 주정알콜의 도수는 15~25도인 것을 특징으로 한다.
제4발명은, 제1발명 또는 제2발명에서, 상기 발효기는 진공상태로 발효할 수 있는 진공유화기인 것을 특징으로 한다.
제5발명은, 제4발명에서, 상기 발효단계에서는, 상기 제1 내지 제3혼합물을 1분당 40~100회로 매일 3~5시간 동안 교반하는 것을 특징으로 한다.
제6발명은, 제1발명 또는 제2발명에서, 상기 식물성 식용유지는, 포도씨유, 대두유, 옥배유, 올리브유, 호박씨유, 해바라기씨유, 아마씨유, 채종유 중 하나인 것을 특징으로 한다.
상기 목적과 그 목적을 이루기 위한 기술적 해결방법을 통해 얻어지는 본 발명에 따르면, 전통적인 방법에 의한 건강에 유익한 약재 및 건강식품을 제조하는 방법보다 편리하게 섭취할 수 있도록 하기 위하여 연질 캡슐로 충진할 수 있어, 암환자의 상태에 따라 일정한 개수의 캡슐을 정량으로 조제할 수 있을 뿐만 아니라, 암환자가 손쉽게 섭취할 수 있는 효과가 있다.
또한 본 발명에 따르면, 연질 캡슐로 충진하여 보존이 용이하고 섭취에 편리하면서도 항암 및 각종 암세포의 성장을 억제하는데 탁월한 효과를 발휘할 수 있어, 다양한 종류의 암 치료에 폭넓게 사용할 수 있는 하는 장점이 있다.
이하, 도면을 참조하여 본 발명에 대하여 상세히 설명하기로 한다.
<제1실시예>
도 1은 본 발명에 따른 항암 발효유지조성물의 제1실시예를 도시한 순서도이다.
도시된 바와 같이, 본 실시예에서는 여정실 열매와 백화사설초를 별도로 발효한 후 각각으로부터 발효유지조성물을 얻고, 그 발효유지조성물을 섞음으로써 항암 발효유지조성물을 제조하는 과정으로 이루어진다. 특히 본 실시예에 따른 발효과정은 식물효소법에 의해 이루어진다.
여기서 식물효소법이란, 배지가 무산소 상태에서 효소의 활성이 이루어지고 배지가 발효되는 과정을 의미한다. 예를 들면, 사람이 음식을 섭취하면 섭취된 음 식을 분해하는 각종 분해액과 함께 음식물을 소화시키고 이 과정에서 효소에 의해 유기물을 생산하고 유기물이 사람의 체내에 흡수되어 영양분을 얻는데, 이러한 과정이 식물효소법에 의한 발효과정과 유사하다.
본 실시예에 따른 제조방법을 보다 상세히 설명하면, 여정실 열매를 발효하기 위해서 먼저 여정실 열매를 수확한 후, 세척하여 불순물을 제거하고 분쇄기에 투입하여 분쇄한다. 그러면 여정실 열매는, 과육 속에 있는 단단한 피막이 분쇄되어 씨방과 과육이 혼합되도록 분쇄되어 약간의 반족 상태로 된다.
이후, 여정실 열매와 여정실 열매에 대해 1~5중량%의 주정알콜을 혼합하여 20~30시간 정도 숙성한다. 이때 숙성하는 온도는 대략 30℃정도인 것이 바람직하고, 상기 주정알콜의 도수는 15~25 범위인 것이 바람직하다(단계 S10).
이렇게 숙성된 여정실 열매와 주정알콜에 대해 25~65중량%의 식물성 식용유지를 상기 여정실 열매와 주정알콜에 혼합하여 제1혼합물을 생성하고 이를 발효기에 투입한다. 이때 사용되는 발효기는 진공상태에서 발효할 수 있는 진공유화기인 것이 바람직하다.
즉, 본 발명에서 얻고자 하는 조성물은 여정실 열매의 피막과 함께 식용유지를 용매로 하여 침지하고 여정실 열매가 식물효소법으로 장기간 발효되도록 한다. 이 과정은 발효기를 사용하는 것과 완전히 밀폐된 진공 유화기를 사용하는 두가지방안이 고려될 수 있다. 그러나 발효기는 발효과정에서 약간의 산소가 유입될 여지가 있으므로, 발효기간 동안 산소의 유입을 차단하여 온도조절을 하며 효과적으로 발효되도록 진공 유화기를 사용하는 것이 보다 바람직하다.
그리고 상기 식물성 식용유지는 포도씨유, 대두유, 옥배유, 올리브유, 호박씨유, 해바라기씨유, 아마씨유, 채종유 중 하나를 선택하여 사용된다. 특히 상기 식물성 식용유지 중에서, 항암에 효능이 있는 것으로 기대되는 아마씨유와 포도씨유를 사용하는 것이 보다 바람직하다(단계 S20).
진공 유화기에서는, 진공이 유지되는 상태로 내부온도를 20~38℃로 하여 1분당 40~100회로 매일 3~5시간 교반하면서 상기 제1혼합물을 30~60일간 발효하게 된다. 이때 교반은 식물성 식용유지 안에서 제1혼합물이 단단하게 뭉쳐지는 것을 방지하기 위한 것으로, 단 하루라도 교반하지 않으면 식용유지 아래로 제1혼합물은 내려 앉게 된다. 따라서 발효가 효과적으로 일어나도록 하기 위하여 상기와 같이 교반하는 것이다(단계 S30).
발효가 완료된 제1혼합물은 압착하여 발효유지조성물(이하 "제1발효유지조성물"이라 칭함)을 추출한다(단계 S40).
다음으로, 백화사설초를 발효한다.
즉, 백화사설초를 수확하여 세척하고, 이물질 및 불순물을 제거한 다음, 수분함량 20~35%로 건조한다. 그리고 이렇게 건조된 백화사설초를 3~15㎝ 크기로 절단하여 상기 백화사설초에 대해 50~200중량%의 식물성 식용유지와 혼합한 제2혼합물을 발효기에 투입한다. 이때의 발효기도 역시 진공유화기를 사용한다.
한편, 백화사설초를 완전히 건조된 건초를 사용하는 경우에는, 상기 건초와 생초를 1:1 비율로 혼합하여 사용할 수도 있다. 물론 수분함량 20~35%로 건조한 백화사설초를 사용하는 경우도 생초를 상기와 같은 비율로 혼합하여 사용할 수도 있 다. 이때에는 주정 알콜을 투입하여 상기 건조된 백화사설초에 습기가 있도록 하고 생초를 반죽 상태로 분쇄하여 혼합함으로써 백화사설초의 발효가 보다 쉽게 할 수 있다(단계 S50).
이 후, 진공유화기 내부온도를 20~38℃로 하여 1분당 40~100회로 매일 3~5시간 교반하면서 제2혼합물을 30~60일간 발효한다(단계 S60).
발효가 완료된 제2혼합물은 압착되어 발효유지조성물(이하 "제2발효유지조성물"이라 칭함)이 추출된다(단계 S70).
그리고 상기에서 얻어진 제1발효유지조성물과 제2발효유지조성물을 혼합하여 본 실시예에 따른 항암 발효유지조성물을 완성한다(단계 S80).
이와 같이 제조된 항암 발효유지조성물은 다양한 양의 연질 캡슐로 체형화된다. 연질 캡슐로 체형화되는 양은 예를 들면 200~1200㎎의 범위 내에서 필요에 따라 결정될 수 있다.
<제2실시예>
도 2는 본 발명에 따른 항암 발효유지조성물의 제2실시예를 도시한 순서도이다.
도시된 바와 같이, 본 실시예에서는 여정실 열매와 백화사설초를 서로 섞은 상태에서 발효하여 여정실 열매와 백화사설초가 함께 발효된 발효유지조성물을 얻음으로써 항암 발효유지조성물을 제조하는 과정으로 이루어진다.
보다 상세히 설명하면, 먼저 제1실시예와 마찬가지로 여정실 열매와 여정실 열매에 대해 1~5중량%의 주정알콜을 혼합하여 20~30시간 숙성한다(단계 S110).
그리고 숙성된 여정실 열매와 주정알콜에 백화사설초와 식물성 식용유지를 혼합한 제3혼합물을 발효기에 투입한다. 이때 백화사설초는 여정실 열매와 거의 동일한 중량을 첨가하고, 수분함량 20~35% 건조된 것을 사용한다. 또한 식물성 식용유지는 상기 여정실 열매, 주정알콜 및 백화사설초에 대해 25~65중량%를 첨가한다. 아울러, 상기 발효기로는 제1실시예와 마찬가지로 진공유화기가 사용된다(단계 S120).
발효온도, 발효기간 및 교반조건도 제1실시예와 동일하게 하여 발효한다(단계 S130).
이렇게 발효가 완료된 제3혼합물을 압착하여 발효유지조성물(이하 "제3발효유지조성물"이라 칭함)을 얻는다. 그리고 이렇게 얻은 제3발효유지조성물은 이미 여정실 열매와 백화사설초가 혼합된 상태이므로, 상기 제3발효유지조성물이 바로 본 발명에 따른 항암 발효유지조성물로 된다(단계 S140).
이와 같이 제조된 항암 발효유지조성물도 다양한 양의 연질 캡슐로 체형화된다.
<실험방법>
제1실시예와 제2실시예에서 제조된 항암 발효유지조성물은 실제로 거의 동일한 성분으로 이루어져 있으므로, 제1실시예에서의 방법으로 제조된 항암 발효유지조성물로 이하의 실험을 실시하였다.
그리고 본 실험에서 사용한 암세포주는 폐암 세포주 1종(A549), 유방암 세포주 1종(MCF-7), 간암 세포주 1종(HepG2)로 (사)한국세포주 은행으로부터 구입하여 사용하였다.
또한 암세포주 증식억제 활성은 MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide, a tetrazole)를 이용한 방법으로 평가하였다. 즉, 24-well plate에 well 당 1 mL 배지를 이용, 1.5 × 105의 암세포를 넣고, 24시간 배양한 후, 항암 발효유지조성물를 농도별로 첨가하고 다시 24시간 배양하였다. 세포배양이 종료된 이후, 배지를 제거하고 PBS용액으로 2회 세척한 후, well 당 400 uL의 MTT 시약을 넣고 3시간 반응을 시킨 다음, acidic isopropanol (0.04 M HCl in isopropanol)을 well 당 200 uL를 넣어 생존한 암세포의 효소반응에 의하여 형성된 MTT 유도체인 formazan dye (보라색)의 강도를 570 nm 파장의 microplate reader (Tecan model Sunrise)에서 측정하였다 (reference 파장 690nm).
<실험결과>
항암 발효유지조성물을 이용하여 3종류의 암세포주(폐암, 유방암, 간암)에 대한 증식억제 활성을 조사한 결과, 모든 암 세포주에 대하여 항암 발효유지조성물의 암세포증식억제 활성이 높은 것으로 나타났다.
보다 상세히 설명하면, 도 3 내지 도 5에서 'Conc.'는 항암 발효유지조성물의 농도를 나타내고, '% of control'은 암세포의 개체수를 최초의 개체수에 대한 % 로 나타낸 것이다.
이때, 폐암세포(도 3 참조)와 유방암세포(도 4 참조)의 경우, 항암 발효유지조성물 0.125% 이상 농도에서 세포수가 급격히 감소하는 것으로 나타났으며, 간암세포(도 5 참조)의 경우는 0.5% 이상의 농도에서 세포수가 급격히 감소하는 것이 관찰되었다.
따라서 본 발명에 따른 항암 발효유지조성물은 암세포 증식을 억제하는 활성이 강한 것으로 나타났으며, 항암 또는 암예방 식품 또는 천연물신약 소재로 개발될 수 있을 것으로 예상된다.
본 발명의 권리는 위에서 설명된 실시예에 한정되지 않고 청구범위에 기재된 바에 의해 정의되며, 본 발명의 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 청구범위에 기재된 권리범위 내에서 다양한 변형과 개작을 할 수 있다는 것은 자명하다.
도 1은 본 발명에 따른 항암 발효유지조성물의 제1실시예를 도시한 순서도,
도 2는 본 발명에 따른 항암 발효유지조성물의 제2실시예를 도시한 순서도,
도 3 내지 도 5는 본 발명에 따른 항암 발효유지조성물의 암세포 성장 억제효과를 실험한 결과표이다.
Claims (6)
- 여정실 열매와 여정실 열매에 대해 1~5중량%의 주정알콜을 혼합하여 20~30시간 숙성하는 단계;상기 여정실 열매와 주정알콜에 대해 25~65중량%의 식물성 식용유지를 상기 여정실 열매 및 주정알콜과 혼합한 제1혼합물을 발효기에 투입하는 단계;상기 발효기의 내부온도를 20~38℃로 하여 무산소 상태에서 상기 제1혼합물을 30~60일간 발효시키는 단계;상기 발효된 제1혼합물을 압착하여 제1발효유지조성물을 추출하는 단계;수분함량 20~35%로 건조된 백화사설초를 상기 백화사설초와 동일한 중량의 식물성 식용유지와 혼합한 제2혼합물을 발효기에 투입하는 단계;상기 발효기의 내부온도를 20~38℃로 하여 무산소 상태에서 상기 제2혼합물을 30~60일간 발효시키는 단계;상기 발효된 제2혼합물을 압착하여 제2발효유지조성물을 추출하는 단계; 및상기 제1발효유지조성물과 제2발효유지조성물을 혼합하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 유상 발효에 의한 항암 조성물의 제조방법.
- 여정실 열매와 여정실 열매에 대해 1~5중량%의 주정알콜을 혼합하여 20~30시간 숙성하는 단계;상기 여정실 열매와 동일한 중량의 수분함량 20~35%로 건조된 백화사설초와, 상기 여정실 열매와 주정알콜 및 백화사설초에 대해 25~65중량%의 식물성 식용유지를 상기 여정실 열매 및 주정알콜와 혼합한 제3혼합물을 발효기에 투입하는 단계;상기 발효기의 내부온도를 20~38℃로 하여 무산소 상태에서 상기 제3혼합물을 30~60일간 발효시키는 단계; 및상기 발효된 제3혼합물을 압착하여 제3발효유지조성물을 추출하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 유상 발효에 의한 항암 조성물의 제조방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서,상기 주정알콜의 도수는 15~25도인 것을 특징으로 하는 유상 발효에 의한 항암 조성물의 제조방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서,상기 발효기는 진공유화기인 것을 특징으로 하는 유상 발효에 의한 항암 조성물의 제조방법.
- 제4항에 있어서,상기 발효단계에서는, 상기 제1 내지 제3혼합물을 1분당 40~100회로 매일 3~5시간 동안 교반해 주는 것을 특징으로 하는 유상 발효에 의한 항암 조성물의 제조방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서,상기 식물성 식용유지는, 포도씨유, 대두유, 옥배유, 올리브유, 호박씨유, 해바라기씨유, 아마씨유, 채종유 중 하나인 것을 특징으로 하는 유상 발효에 의한 항암 조성물의 제조방법.
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