KR101048448B1 - 신규 피라졸로[4,3-ｂ]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물 - Google Patents

신규 피라졸로[4,3-ｂ]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 신규 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 흑색종 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 하기 화학식 1로 표시되는 신규 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 흑색종 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체는 티로신 키나제에 대한 억제활성을 나타내므로, 비정상적인 티로신 키나제의 활성으로 야기되는 질환, 예를 들면, 종양, 건선, 류마티즘, 당뇨병성 망막증 등의 예방 또는 치료에 유용하게 사용할 수 있다.
[화학식 1]
(상기 화학식 1에서 R1, R2 및 R3는 본 명세서에서 정의한 바와 같다)
간세포 성장 인자(HGF) 수용체(c-MET 또는 HGFR), 티로신 키나제, 피라졸로 피리딘 유도체

Description

신규 피라졸로[4,3-ｂ]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물{Novel pyrazolo[4,3-b]pyridine derivatives or pharmaceutically acceptable salt thereof, preparation method thereof and pharmaceutical composition containing the same as an active ingredient}
본 발명은 신규 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
간세포 성장 인자 수용체(c-Met 또는 HGFR) 티로신 키나제(RTK)의 리간드는 HGF 또는 분산인자(scatter factor)[L. Naldini, K.M. Weidner, E. Vigna, G. Gaudino, A. Bardelli, C. Ponzetto, G.K. Michalopoulos, Eur. Mol. Biol. Org. J. 10 (1991) 2867-2878; D.P. Bottaro, J.S. Rubin, D.L. Faletto, A.M. Chan, T.E. Kmiecik, G.F. Vande Woude, S.A. Aaronson, Science 251 (1991) 802-804]라 고 하며, 주로 간엽세포에 의해 생산되는 이종이량체성(disulfide-linked heterodimeric) 단백질이다. 리간드인 간세포 성장인자(HGF)는 수용체 c-Met과 결합하여 세포내 특정한 티로신 키나아제에 자동으로 인산화가 이루어져 활성화되면 세포성장, 생존, 신생혈관생성, 상처치유, 조직재생, 분산, 세포 운동성(motility), 침윤성(invasion), 형태발생 등을 포함하는 다양한 세포기능을 조절 한다. c-MET 및 HGF는 많은 조직에서 발현되지만, 그 발현은 정상적으로는 주로 상피 및 간엽세포로 구성된 조직에서 일어나며, 정상적인 포유동물의 발육에 필요하며, 세포 이동, 세포 증식 및 생존, 분화, 및 조직배열에서 중요한 것으로 밝혀졌다. 또한 HGF/SF는 신생혈관생성 인자이며, 상피 세포에서의 c-Met 신호전달은 신생혈관생성에 필수적인 세포 증식, 운동성, 그리고 침윤성 등 많은 것을 유도할 수 있다.
c-Met 수용체는 많은 인간 암에서 발현되는 것으로 밝혀졌다. 또한 c-Met 유전자 증폭, 돌연변이 및 재배열이 다양한 인간 암에서 관찰되었다. c-Met 및 그의 리간드인 HGF는 또한 다양한 인간 암, 예를 들면 뇌종양, 폐암, 위암, 췌장암, 대장암, 난소암, 신장 세포암, 전립선암 등에 과잉 발현이 보고되어 있다[Oncology Reports, 1998, 5, 1013]. c-Met 키나제를 활성화시키는 돌연변이를 갖는 부류는 다중 신장 종양 및 다른 조직의 종양에 걸리기 쉽다. 또한, c-Met 또는 HGF의 과발현은 폐, 간, 위, 유방 등을 포함한 많은 주요 인간 암에서 나쁜 예후 및 질환 결과와 상관되는 것으로 밝혀졌으며, c-Met는 또한 췌장암[R. M. Thomas, K Toney, C Fenoglio-Preiser, M. P. Revelo-Penafiel, S. R. Hingorani, D. A. Tuveson, S. E. Waltz, A. M. Lowy, Cancer Res 2007, 67, 6075; E. R. Camp, A. Yang, M. J. Gray, F. Fan, S. R. Hamilton, D. B. Evans, A. T. Hooper, D. S. Pereira, D. J. Hicklin, L. M. Ellis, CANCER, 2007, 109, 1031], 신경교종[B. Wullich, H.P. Sattler, U. Fischer, E. Meese, T, Anticancer Res. 1994, 14, 577-579]과 같은 치료가 어려운 암과 직접적인 관련이 있다. 특히, 위암에서는 c-Met의 과잉 발현이나 혈청 중의 HGF 수준 상승이 보고되어 있다[Int. J. Cancer, 1993, 55, 72].
그러므로 다양한 암의 성장과 세포 이동, 세포 증식 및 생존, 분화, 및 조직배열에 관여하는 간세포 성장 인자 수용체(c-MET 또는 HGFR) 티로신 키나제(RTK)의 억제는 종양형성의 정지 및 퇴행을 가능하게 할 수 있다.
종래, HGF의 신호체계를 저해하는 화합물들이 임상과 전임상에서 개발이 진행되어 왔으며, 현재 c-Met 선택적 저해제인 ARQ-197이 췌장암과 다중표적 저해제인 XL-880이 신장암 등에 대하여 임상 2상이 진행 중이고, 파이자(Pfizer)사의 PF-2341066과 MP-470은 임상 1상에서 개발이 진행중이다. 또한 MGCD265, SGX-523 그리고 구조가 공개되지 않은 화합물들이 머크(Merck)사, 암젠(Amgen)사, 존슨엔존슨(Johnson & Johnson)사 등에서 전임상 또는 임상 연구가 진행 중인 것으로 알려져 있다.
한편, 키나아제 저해제로서 피라졸로피리딘 골격을 갖는 화합물이 국제특허공개 WO07/023110과 WO2002022604호에 공지되어 있으나, 피라졸로피리딘의 N-1 위 치에 벤질 또는 아릴기가 치환된 화합물은 개시되어 있지 않다. 약효의 측면에서도 로슈(Roche)사는 P38 MAP 키나아제(WO07/023110)를, 버텍스(Vertex)사는 GSK-3, CDK-2, Aurora를 표적으로하는 키나제 저해제로서 보고되어 있을 뿐이다.
현재까지 보고된 어떠한 문헌도 피라졸로피리딘의 C-7 위치에 치환체를 가지고, N-1 위치에 벤질 또는 아릴기가 치환되어 있는 본 발명에 따른 피라졸로피리딘 유도체를 개시하고 있지 않다.
이에, 본 발명자들은 c-Met 티로신 키나제의 신호체계를 저해하는 새로운 구조의 화합물을 개발하고자 연구한 결과, 신규한 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체를 합성하고, 상기 유도체가 c-Met 티로신 키나제에 대한 우수한 억제활성이 있음을 확인하였으며, 상기 유도체들이 c-Met 티로신 키나제가 관여하는 비정상적인 세포성과 관련된 질환, 예를 들면 종양, 건선, 류마티즘 및 당뇨병성 망막증 등을 예방 및 치료하는데 유용하게 사용될 수 있음을 알아내고, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 c-Met 티로신 키나제에 대한 우수한 억제활성을 갖는 신규 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체의 제조방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 종양, 건선, 류마티즘, 당뇨병성 망막 등과 같은 c-Met 티로신 키나제가 관여하는 비정상적인 세포성장과 관련된 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 데 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 신규 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체의 제조방법을 제공한다.
나아가, 본 발명은 상기 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 c-Met 티로신 키나제가 관여하는 비정상적인 세포성장과 관련된 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112008080545015-pat00002
(상기 화학식 1에서 R1, R2 및 R3는 본 명세서에서 정의한 바와 같다)
본 발명에 따른 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체는 티로신 키나제에 대한 억제활성을 나타내므로, 비정상적인 티로신 키나제의 활성으로 야기되는 질환, 예를 들면, 종양, 건선, 류마티즘, 당뇨병성 망막증 등의 예방 또는 치료에 유용하게 사용할 수 있다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
Figure 112008080545015-pat00003
상기 화학식 1에서,
R1은 비치환되거나, 또는 할로겐, C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 및 할로겐으로 치환된 C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기로 치환된 C5~C12 아릴 C1~C4 알킬이고,
R2는 수소 또는 -NRR'이고, 여기서 R은 비치환되거나, 또는 C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 벤질 및 -C(=O)R4로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이고, 이때 R4는 C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 할로겐으로 치환된 C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 페닐 및 벤질로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이며, 상기 R'은 수소 또는 C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고,
R3은 비치환되거나, 또는 C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 및 피페리딘으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환된 피라졸; 또는 -CONR5R6 및 -NR5R6으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환된 페닐이며, 이때 R5 및 R6는 서로 독립적으로 또는 선택적으로 수소, C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬이거나; 또는 R5 및 R6는 1 이상의 N 또는 O를 포함하여 고리를 형성하여 상기 -CONR5R6 및 -NR5R6의 NR5R6부분이 몰포린기 또는 피페라진기인 것을 포함한다.
바람직하게는
상기 R1은 비치환되거나, 또는 클로로, 플루오로, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 및 트리플루오로메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기 로 치환되는 벤질 또는 나프탈레닐메틸이고,
R2는 수소 또는 -NRR'이고, 여기서 상기 R은 비치환되거나, 또는 메틸, 에틸, 벤질 및 -C(=O)R4로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이고, 이때 R4는 메틸, 에틸, 트리플루오로메틸, 페닐 및 벤질로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이며, 상기 R'은 수소, 메틸, 에틸로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이고,
R3는 1번 질소가 메틸, 에틸 및 피페리딘으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환된 피라졸; 또는 피페라진기로 치환된 아마이드 화합물이 치환된 페닐이다.
더욱 바람직하게는,
상기 R1은 벤질, 디클로로벤질, 2-클로로-6-플루오로벤질, 이소프로필벤질, 트리플루오로메틸벤질, 2,6-디클로로-3-플로오로벤질, 나프탈렌-1-일메틸 및 2-메틸나프탈렌-1-일메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이고,
R2는 수소 또는 -NRR'이고, 여기서 상기 R은 수소, 메틸, 벤질, 메틸카르보닐, 트리플루오로메틸카르보닐, 페닐카르보닐 및 벤질카르보닐로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이고, 상기 R'은 수소 또는 메틸이고,
R3는 1-메틸-1H-피라졸-4-일, 1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일 및 4-(4-메틸-피페리딘-1-일카르보닐)페닐로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이다.
본 발명에 따른 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 중 바람직한 화합물은 구체적으로 하기와 같다.
(1) 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(2) 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(3) 1-벤질-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(4) 1-벤질-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(5) 1-(2-클로로-6-플루오로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(6) 1-(2-클로로-6-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(7) 1-(4-이소프로필벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(8) 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-(3-트리플루오로메틸벤질)-1H-피라졸 로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(9) 1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(10) 1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(11) 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-나프탈렌-1-일메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(12) 1-나프탈렌-1-일메틸-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(13) 1-(2-메틸-나프탈렌-1-일메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(14) 1-(2-메틸-나프탈렌-1-일메틸)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(15) 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-나프탈렌-2-일메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
(16) 벤질-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-아민;
(17) [1-(2,6-디클로로벤젠)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-메틸아민;
(18) N-[1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4- 일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-2,2,2-트리플루오로-아세트아마이드;
(19) N-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-벤즈아마이드;
(20) N-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-]-2-페닐-아세트아마이드;
(21) N-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-아세트아마이드;
(22) N-[1-(2,6-디클로로벤질-3-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-2,2,2-트리플루오로-N-메틸-아세트아마이드;
(23) {4-[3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일]-페닐}-(4-메틸-피페라진-1-일)-메타논; 및
(24) 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘.
하기 표에는 본 발명에 따른 화학식 1의 유도체의 구조를 정리하여 나타내었다.
화합물 구조 화합물 구조
1
Figure 112008080545015-pat00004
 2
Figure 112008080545015-pat00005
3
Figure 112008080545015-pat00006
 4
Figure 112008080545015-pat00007
5
Figure 112008080545015-pat00008
 6
Figure 112008080545015-pat00009
7
Figure 112008080545015-pat00010
 8
Figure 112008080545015-pat00011
9
Figure 112008080545015-pat00012
 10
Figure 112008080545015-pat00013
11
Figure 112008080545015-pat00014
 12
Figure 112008080545015-pat00015
13
Figure 112008080545015-pat00016
 14
Figure 112008080545015-pat00017
15
Figure 112008080545015-pat00018

 16
Figure 112008080545015-pat00019
17
Figure 112008080545015-pat00020
 18
Figure 112008080545015-pat00021
19
Figure 112008080545015-pat00022
 20
Figure 112008080545015-pat00023
21
Figure 112008080545015-pat00024
 22
Figure 112008080545015-pat00025
23
Figure 112008080545015-pat00026
 24
Figure 112008080545015-pat00027
본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용되는 염뿐만 아니라, 이로부터 제조될 수 있는 가능한 용매화물 또는 수화물을 모두 포함한다.
본 발명의 화학식 1의 유도체는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산 또는 아인산과 같은 무기산류와 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류와 같은 무독성 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염류로는 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트 또는 만델레이트를 포함한다.
본 발명에 따른 산 부가염은 통상의 방법, 예를 들면, 화학식 1의 유도체를 과량의 산 수용액 중에 용해시키고, 이 염을 수혼화성 유기 용매, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴을 사용하여 침전시켜서 제조할 수 있다. 또한 이 혼합물에서 용매나 과량의 산을 증발시킨 후 건조시키거나 또는 석출된 염을 흡입 여과시켜 제조할 수도 있다.
또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용 가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고, 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속 염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하다. 또한, 이에 대응하는 은 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 음염(예, 질산은)과 반응시켜 얻는다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1의 신규 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체를 제조하는 방법을 제공한다.
본 발명은 하기 반응식 1에 나타낸 바와 같이,
유기용매 하에서 출발물질인 화학식 2의 화합물에 Boc로 보호된 하이드라진을 반응시켜 화학식 3의 화합물을 제조하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 제조된 화학식 3의 화합물에 산을 첨가하여 화학식 4의 화합물을 제조하는 단계(단계 2);
상기 단계 2에서 제조된 화학식 4의 화합물의 N-1 위치에 R1X로 표시되는 벤질할라이드 또는 아릴메틸렌할라이드를 무기염기 조건하에 반응시켜 화학식 5의 화합물을 제조하는 단계(단계 3); 및
상기 단계 3에서 제조된 화학식 5의 화합물을 팔라듐 존재하에 R3B(OH)2로 표시되는 피라졸보론산 또는 페닐보론산과 스즈끼 결합반응시켜 화학식 1a의 화합물을 제조하는 단계(단계 4)를 포함하는 화학식 1의 유도체의 제조방법을 제공한다( 제법 1 ).
Figure 112008080545015-pat00028
(상기 반응식 1에서, R1 및 R3은 화학식 1에서 정의된 바와 같고, 화학식 1a는 화학식 1로 표시되는 유도체의 일종이다.)
또한, 본 발명은 하기 반응식 2에 나타낸 바와 같이,
상기 제법 1의 단계 4에서 제조된 화학식 1a의 화합물을 아실화반응, 또는 아실화반응 후 얻어진 화합물을 알킬화반응 및 아실기 제거반응을 수행하여 C-3 위치의 아민기에 R 및 R'기를 도입시켜 화학식 1b의 화합물을 제조하는 단계(단계 5)를 더 포함하는 화학식 1로 표시되는 유도체의 제조방법을 제공한다(제법 2).
Figure 112008080545015-pat00029
(상기 반응식 2에서, R1, R3 및 -NRR'은 화학식 1에서 정의된 바와 같고, 화학식 1a 및 1b는 화학식 1로 표시되는 유도체의 일종이다.)
나아가, 본 발명은 하기 반응식 3에 나타낸 바와 같이,
유기용매 하에서 출발물질인 화학식 2의 화합물을 산 존재 하에서 메탄올과 반응시켜 화학식 8의 화합물을 제조하는 단계(단계 a);
상기 단계 a에서 제조된 화학식 8의 화합물을 환원반응시켜 알코올 유도체를 얻은 후, 산화반응을 수행하여 화학식 9의 알데히드 화합물을 제조하는 단계(단계 b);
상기 단계 b에서 제조된 화학식 9의 화합물에 하이드라진을 반응시켜 화학식 10의 화합물을 제조하는 단계(단계 c);
상기 단계 c에서 제조된 화학식 10의 화합물의 N-1 위치에 R1X로 표시되는 벤질할라이드 또는 아릴메틸렌할라이드를 무기염기 조건하에 반응시켜 화학식 11의 화합물을 제조하는 단계(단계 d); 및
상기 단계 d에서 제조된 화학식 11의 화합물을 팔라듐 존재하에 R3B(OH)2로 표시되는 피라졸보론산 또는 페닐보론산과 스즈끼 결합반응시켜 화학식 1c의 화합물을 제조하는 단계(단계 e)를 포함하는 화학식 1의 유도체의 제조방법을 제공한다(제법 3).
Figure 112008080545015-pat00030
(상기 반응식 3에서, R1 및 R3은 상기 화학식 1에서 정의된 바와 같고, 화학식 1c는 화학식 1의 유도체의 일종이다).
이하, 본 발명에 따른 상기 제법 1-3을 더욱 상세히 설명한다.
제법 1:
먼저, 본 발명에 따른 상기 단계 1은 유기용매 하에서 출발물질인 화학식 2의 화합물에 Boc로 보호된 하이드라진을 반응시켜 화학식 3의 화합물을 제조하는 단계이다.
상기 화학식 2의 화합물은 상업적으로 구입하거나 문헌[Organic Lett. 2005, 7, 577]에 제시된 방법으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 방법으로 얻은 화학식 2의 화합물을 유기용매에 넣고 Boc로 보호된 하이드라진을 넣은 후 50~110 ℃에서 가열 교반시킴으로써 화학식 3의 화합물을 제조할 수 있다.
이때 사용되는 유기용매로는 에탄올, 벤젠, 톨루엔, 테트라하이드로퓨란, 다이옥산, 디메틸포름알데히드, 디메틸술폭사이드, 디메틸아세트아마이드 등을 사용할 수 있다.
다음으로, 상기 단계 2는 상기 단계 1에서 제조된 화학식 3의 화합물에 산을 첨가하여 화학식 4의 화합물을 제조하는 단계이다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 산은 4M HCl/다이옥산 또는 트리플루오로아세트산을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않으며, 20~150 ℃에서 산처리를 함으로써 상기 화학식 4의 화합물을 얻을 수 있다.
상기 방법은 본 출원인에 의해 개발된 것으로 유사한 반응이 2-플루오로벤조 나이트릴로부터 인다졸의 합성에 많이 보고된 바 있으나, 피라졸피리딘 합성에 사용된 문헌은 보고된 바 없는 새로운 방법이다. 상기 방법을 통하여 의학적으로 유용한 중간체인 상기 화학식 4로 표시되는 유도체를 용이하게 합성할 수 있다.
다음으로, 상기 단계 3은 상기 단계 2에서 제조된 화학식 4의 화합물의 N-1 위치에 R1X로 표시되는 벤질할라이드 또는 아릴메틸렌할라이드를 무기염기 조건하에 반응시켜 화학식 5의 화합물을 제조하는 단계이다.
구체적으로 상기 R1X는 치환된 벤질브로마이드 또는 벤질클로라이드나 아릴메틸렌브로마이드 또는 아릴메틸클로라이드이고, 상기 무기염기로는 탄산나트륨, 탄산칼륨 세슘카보네이트 등을 사용할 수 있으며, 반응용매로는 아세톤, 메틸에틸케톤, 테트라하이드로퓨란, 다이옥산, 디메틸포름아마이드, 디메틸술폭사이드, N-메틸-2-피롤리돈 등을 사용할 수 있고, 반응온도는 10~100 ℃인 것이 바람직하다.
다음으로, 상기 단계 4는 상기 단계 3에서 제조된 화학식 5의 화합물을 팔라듐 존재하에 R3B(OH)2로 표시되는 피라졸보론산 또는 페닐보론산과 스즈끼 결합반응시켜 화학식 1a의 화합물을 제조하는 단계이다.
상기 단계 4는 당업계에서 통상적으로 사용되는 결합반응을 이용하여 수행할 수 있으나, 스즈끼 결합반응을 이용하는 바람직하다.
제법 2:
본 발명에 따른 상기 제법 2는 상기 제법 1을 수행한 후, 제조된 화학식 1a의 화합물의 C-3 위치의 아민기에 R 및 R'를 도입시키기 위해 다양한 치환반응을 더 수행할 수 있다. 구체적으로는, 아실화반응을 통하여 C-3 위치의 아민기가 아마이드기로 치환된 화학식 1b의 화합물을 얻을 수 있으며, 상기 아실화반응으로 얻은 아마이드 화합물의 알킬화반응 및 아실기의 제거반응을 통하여 C-3 위치의 아민기가 알킬아민으로 치환된 또 다른 화학식 1b의 화합물을 얻을 수 있다.
제법 3:
나아가, 본 발명에 따른 제법 3은 화학식 1로 표시되는 유도체의 R2가 수소로 치환된 화합물을 제조하는 방법이다. 구체적으로 상기 반응식 3의 단계 a에서와 같이, 화학식 2의 화합물을 산의 존재하에서 메탄올과 반응시켜 화학식 8의 화합물을 얻고; 상기 단계 b에서와 같이, NaBH4, LiAlH4, DIBAL-H 등의 환원제를 사용하여 환원반응시킨 후 얻어진 알코올 유도체를 PCC, ClCOCOCl/DMSO(Swern oxidation), IBX 등과 같은 산화제를 사용하여 산화반응시켜 화학식 9의 알데히드화합물을 얻을 수 있다.
이후, 상기 단계 c에서와 같이, 단계 b에서 얻은 화학식 9의 화합물에 하이드라진을 가하고 50~150 ℃로 교반하여 화학식 10의 피라졸로피리딘 화합물을 얻을 수 있다.
화학식 10의 화합물을 제법 1의 단계 3 및 4와 같은 방법에 의해, 화학식 1의 R2가 수소로 치환된 화학식 1c의 화합물을 얻을 수 있다.으-3의 위치에 목적하는 진행할 수 있다(단계 d 및 단계 e).
그러나, 본 발명에 따른 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체는 상기 합성방법에 제한되지 않으며, 이외에 이미 공지된 방법 뿐만 아니라 미공지된 방법이라도 상기 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체를 합성할 수 있는 방법이라면 제한 없이 사용될 수 있다.
이상의 제조방법을 수행하는데 있어 얻어지는 반응 중간체 화합물 또는 상기 화학식 1로 표시되는 신규 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체들은 크로마토그래피와 재결정화와 같은 통상적인 방법에 의하여 분리 및 정제될 수 있으며, 핵자기 공명에 의해 분자구조를 확인할 수 있다.
나아가, 본 발명은 화학식 1의 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 흑색종 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 화학식 1의 신규 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 티로신 키나제의 억제활성 실험에서 2.3~8.8 μM의 IC50을 나타냄으로써 c-Met에 대한 우수한 억제 활성을 나타내는 것을 알 수 있다(표 2 참조).
따라서, 본 발명의 화합물들은 티로신 키나제에 대한 억제활성을 나타내므로, 비정상적인 티로신 키나제의 활성으로 야기되는 질환, 예를 들면, 종양, 건선, 류마티즘, 당뇨병성 망막증 등의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물을 의약품으로 사용하는 경우, 상기 화학식 1로 표시되는 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물은 임상투여 시에 다양한 하기의 경구 또는 비경구 투여 형태로 제제화되어 투여될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경/연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제, 엘릭시르제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/ 또는 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/또는 폴리에틸렌 글리콜)를 함유하고 있다. 정제는 또한 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제, 및 감미제를 함유할 수 있다.
상기 화학식 1로 표시되는 유도체를 유효성분으로 하는 약학적 조성물은 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여는 피하주사, 정맥주사, 근육 내 주사 또는 흉부 내 주사를 주입하는 방법에 의한다.
이때, 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위하여 상기 화학식 1의 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 안정제 또는 완충제와 함께 물에 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고, 이를 앰플 또는 바이알 단위 투여형으로 제조할 수 있다. 상기 조성물은 멸균되고/되거나 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 보조제, 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 함유할 수 있으며, 통상적인 방법인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제제화할 수 있다.
또한, 본 발명의 화합물의 인체에 대한 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 몸무게가 70 ㎏인 성인 환자를 기준으로 할 때, 일반적으로 0.01~400 ㎎/일이며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.
이하, 실시예를 통해 본 발명을 상세히 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아 니다.
<실시예 1> 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00031
단계 1: N'-(5-브로모-2-시아노피리딘-3-일)하이드라진카르복실산 t-부틸에스트의 제조
5-브로모-3-플루오로피콜리노니트릴(0.82 g, 4.08 mmol)과 하이드라진카르복실산 t-부틸에스트(BocNHNH2; 1.08 g 8.16 mmol)를 DMSO(10 mL)에 녹인 후 Et3N(1.9 mL)을 천천히 넣어주고 95 ℃로 가열 교반하였다. 반응이 종결된 후, 에틸아세테이트(10 mL)를 가하고 소금물로 수 회 세척한 다음 황산나트륨(Na2SO4)으로 건조하였다. 이후 관크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=3:1)로 정제하여 목적화합물인 2-(5-브로모-2-시아노피리딘-3-일)하이드라진카르복실산 t-부틸에스트를 얻었다(0.72 g, 수율 56%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.20 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.51 (s, 2H), 1.48 (s, 9H).
단계 2: 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
상기 단계 1에서 제조된 N'-(5-브로모-2-시아노피리딘-3-일)하이드라진카르복실산 t-부틸에스트(0.43 g, 1.37 mmol)를 다이옥산에 용해된 4M HCl(10 mL)에 가한 후 6시간 동안 가열 환류시켰다. 이후, 휘발성 기체를 제거하고 물(10 mL)을 가하여 녹인 다음 1N NaOH 수용액을 가하여 중화시켰다. 생성된 고체는 여과하고 건조하여 목적화합물인 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민을 얻었다(142 mg, 수율 49%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 11.80 (s, 1H), 8.32 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 5.50 (s, 2H).
단계 3: 6-브로모-1-(2,6-디클로로페닐)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
상기 단계 2에서 제조된 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민(0.1 g, 0.47 mmol)과 포타슘카보네이트(0.08 g, 0.56 mmol)를 DMF(10 mL)에 가한 후 실온에서 약 30분 동안 교반 하였다. 이후, 반응용액에 2-(브로모메틸)-1,3-디클로로벤젠(0.11 g, 0.47 mmol)을 가한 후 50 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 종결된 후, 에틸아세테이트(20 mL)를 가하여 희석시킨 뒤, 물과 소금물로 세척하고 황산나트륨(Na2SO4)으로 건조하고 농축하였다. 얻은 고체를 에틸에테르로 재결정하 여 목적화합물인 6-브로모-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민을 얻었다(57 mg, 수율 33 %).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.37 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.28 ~ 7.26 (m, 1H), 5.51 (s, 2H), 4.36 (brs, 2H).
단계 4: 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
상기 단계 3에서 제조된 6-브로모-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민(0.1 g 0.27 mmol)과, Cs2CO3(0.27 g, 0.84 mmol), Pd(PPh3)2Cl2(20 mg 0.03 mmol) 및 t-부틸 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤레인-2-일)-1H-피라졸로-1-일)피페리딘-1-카르복실에스트(0.16 g, 0.42 mmol)를 디메톡시에틸렌글리콜(8 mL)와 물 (2 mL)의 혼합 용액에 넣고 85 ℃로 가열 교반하였다. 반응이 종결된 후, 물과 에틸아세테이트를 가하여 유기층을 분리하고 NaHCO3 수용액과 소금물로 세척한 다음 Na2SO4로 건조, 농축하였다. 다음으로 관크로마토그래피법(헥산:에틸아세테이트=1:1)으로 정제하여 목적화합물인 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민을 얻었다(55 mg, 수율 55 %).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.50 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.54(d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.37(s, 1H), 7.27~7.22 (m, 1H), 5.56 (s, 2H), 4.35 (brs, 2H), 3.99 (s, 3H); MS-ESI 374 (M+, 47), 213 (29), 135 (100).
<실시예 2> 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00032
단계 1~3: 6-브로모-1-(2,6-디클로로페닐)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 1의 단계 1~3과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 얻었다.
단계 4: 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
상기 단계 3에서 제조된 6-브로모-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸[4,3-b]피리딘-3-아민(70 mg, 0.19 mmol)과, Pd(PPh3)2Cl2(13 mg, 0.019 mmol), Cs2CO3(0.18 g, 0.57 mmol) 및 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤레인-2-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트(0.16 g, 0.29 mmol)를 DEM:H2O(4:1, 7.5 mL)에 녹인 후 85 ℃로 가열 교반하였다. 반응이 종결된 후 에틸아세테이트(10 mL)를 가하고 소금물로 수 회 세척한 다음 Na2SO4로 건조하고 농축하였다. 이후 관크로마토그래피법(헥산:에틸아세테이트=2:1)으로 정제하여 4-(4-(3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트를 얻었다(25 mg, 수율 24%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.50 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.56 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.36 (s, 1 H), 7.27~7.22 (m, 1H), 5.56 (s, 2H), 4.39 (brs, 2H), 4.37~4.28 (m, 2H), 2.96 (m, 2H), 2.21 (m, 2H), 2.04~1.96 (m, 2H).
상기 4-(4-(1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트(50 mg, 0.094 mmol)를 디클로로메탄(4 mL)에 녹인 다음 4M HCl(다이옥산 용액 내 4 mL)를 가한 후 교반하였다. 반응이 종결된 후 감압 농축하여 목적화합물인 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민을 얻었다(53 mg, 수율 100%).
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.21 (brs, 1H), 9.04 (brs, 1H), 8.81 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.52 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.44~7.39 (m, 1H), 5.63 (s, 2H), 4.60~4.52 (m, 1H), 3.43~3.34 (m, 2H), 3.13~3.09 (m, 2H), 2.30~2.19 (m, 4H).
<실시예 3> 1-벤질-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
단계 1~2: 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 1의 단계 1~2와 동일한 방법으로 수행하였다.
단계 3: 1-벤질-6-브로모-1H-피라졸로[4,3,-b]피리딘-3-일아민의 제조
2-(브로모메틸)-1,3-디클로로벤젠 대신 벤질브로마이드를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.36 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.20 ~ 7.07 (m, 1H), 5.52 (s, 2H), 4.35 (s, 2H).
단계 4: 1-벤질-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 1의 단계 4의 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 43%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.51 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.46 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.16 (m, 5H), 5.55 (s, 2H), 4.36 (s, 2H), 3.97 (s, 3H).).
<실시예 4> 1-벤질-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00034
단계 1~3: 1-벤질-6-브로모-1H-피라졸로[4,3,-b]피리딘-3-일아민의 제조
실시예 3의 단계 1~3과 동일한 방법으로 수행하였다.
단계 4: 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 2의 단계 4의 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.20 (brs, 1H), 9.02 (brs, 1H), 8.80 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.52 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.16 (m, 5H), 5.57 (s, 2H), 4.60~4.52 (m, 1H), 3.43 (m, 2H), 3.08 (m, 2H), 2.27 (m, 4H).
<실시예 5> 1-(2-클로로-6-플루오로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00035
단계 1~2: 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 1의 단계 1~2와 동일한 방법으로 수행하였다.
단계 3: 6-브로모-1-(2-클로로-6-플루오로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
2-(브로모메틸)-1,3-디클로로벤젠 대신 2-클로로-6-플루오로벤질브로마이드를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 65%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.37 (d, J = 1.8 ㎐, 1H), 7.84 (d, J = 1.8 ㎐, 1H), 7.28~7.24 (m, 2H), 7.05 (m, 1H), 5.41(s, 2H), 4.37 (s, 2H).
단계 4: 1-(2-클로로-6-플루오로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 1의 단계 4의 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 58%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.50 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.28~7.22 (m, 2H), 7.07~7.03 (m, 1H), 5.47 (s, 2H), 4.36 (brs, 2H), 3.99 (s, 3H); MS-ESI 356 (M+, 47), 213 (28), 185 (100).
<실시예 6> 1-(2-클로로-6-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00036
단계 1~3: 6-브로모-1-(2-클로로-6-플루오로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 5의 단계 1~3과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 얻었다.
단계 4: 1-(2-클로로-6-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 2의 단계 4의 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율 45%).
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.21 (brs, 1H), 9.01 (brs, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.56 (m, 2H), 7.40 (m, 1H), 5.60 (s, 2H), 4.57 (m, 1H), 3.37 (m, 2H), 3.12 (m, 2H), 2.24 (m, 4H).
<실시예 7> 1-(4-이소프로필벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00037
단계 1~2: 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 1의 단계 1~2와 동일한 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다.
단계 3: 6-브로모-1-(4-이소프로필벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
2-(브로모메틸)-1,3-디클로로벤젠 대신 4-이소프로필벤질 브로마이드를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 49%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.37 (d, J = 1.6 ㎐, 1H), 7.62 (d, J = 1.8 ㎐, 1H), 7.19~7.09 (m, 4H), 5.26 (s, 2H) 4.40 (s, 2H), 2.85 (m, 1H), 1.23 (d, J = 6.9 ㎐, 6H).
단계 4: 1-(4-이소프로필벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 1의 단계 4의 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 64%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.50 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.42 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.13 (m, J = 8.3 Hz, 2H), 5.31(s, 2H), 4.39 (brs, 2H), 3.97(s, 3H), 2.89(m, 1H), 1.19 (d, J = 6.9 Hz, 3H); MS-ESI 346 (M+, 35), 133 (100), 105 (20).
<실시예 8> 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-(3-트리플루오로메틸벤질)-1H-피라 졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00038
단계 1~2: 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 1의 단계 1~2와 동일한 방법으로 수행하였다.
단계 3: 6-브로모-1-(3-트리플루오로메틸벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
2-(브로모메틸)-1,3-디클로로벤젠 대신 3-트리플루오로메틸벤질 브로마이드를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 39%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.37 (d, J = 1.7 ㎐, 1H), 7.84 (d, J = 1.7 ㎐, 1H), 7.28~7.21 (m, 2H), 7.08~7.01(m, 1H), 5.41(d, J = 1.7㎐, 2H), 4.37(s, 2H).
단계 4: 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-나프탈렌-2-일메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 1의 단계 4 의 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 28%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.54 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.55~7.40 (m, 4H), 7.33 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 5.39 (s, 2H), 4.43 (brs, 2H), 3.97 (s, 3H); MS-ESI 371 (M+, 53), 213 (42), 185 (100).
<실시예 9> 1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00039
단계 1~2: 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 1의 단계 1~2와 동일한 방법으로 수행하였다.
단계 3: 6-브로모-1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
2-(브로모메틸)-1,3-디클로로벤젠 대신 2,6-디클로로-3-플루오로벤질 브로마이드를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 55%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.40 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.39~7.34 (m, 1H), 7.18 (t, J = 8.7 Hz, 1H), 5.56 (s, 2H), 4.38 (s, 2H).
단계 4: 1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 1의 단계 4의 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 61%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.52 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.63 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.37 (m, 1H), 7.17 (m, 1H), 5.55 (s, 2H), 4.37~4.31 (m, 5H), 2.97~2.89 (m, 2H), 3.96 (s, 3H).
<실시예 10> 1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00040
단계 1~3: 6-브로모-1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피 리딘-3-아민의 제조
실시예 9의 단계 1~3과 동일한 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다.
단계 4: 1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 2의 단계 4의 방법을 수행하여 4-(4-(3-아미노-1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트를 얻었다. 상기 4-(4-(1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-1H-피라졸[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트(50 mg, 0.094 mmol)를 디클로로메탄(4 mL)에 녹인 다음 4M HCl(다이옥산 용액 내 4 mL)를 가한 후 교반하였다. 반응이 종결된 후 감압 농축하여 목적화합물을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.15 (brs, 1H), 8.99 (brs, 1H), 8.78 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.46 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.42 (m, 1H), 5.62 (s, 2H), 4.55 (m, 1H), 3.42 (m, 2H), 3.13 (m, 2H), 2,26 (m, 4H).
<실시예 11> 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-나프탈렌-1-일메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00041
단계 1~2: 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 1의 단계 1~2와 동일한 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다.
단계 3: 6-브로모-1-(나프탈렌-1-일메틸)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
2-(브로모메틸)-1,3-디클로로벤젠 대신 1-브로모메틸나프탈렌을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 57%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.35 (d, J = 1.8 ㎐, 1H), 8.07 (m, 1H), 7.91~7.83 (m, 2H), 7.55~7.52 (m, 3H) 7.41 (t, J = 6.9 ㎐, 1H), 7.13 (d, J = 6.9 ㎐, 1H), 5.78 (s, 2H), 4.44 (s, 2H).
단계 4: 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-나프탈렌-1-일메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 1의 단계 4의 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 48%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.50 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 8.12~8.09 (m, 1H), 7.90~7.87 (m, H), 7.84 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.68 (s, 1 H), 7.60 (s, 1H), 7.57~7.49 (m, 2H), 7.42 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.12 (m, 1H), 5.84 (s, 2H), 4.43 (brs, 2H), 3.93 (s, 3H); MS-ESI 354 (M+, 44), 141 (100), 115 (17).
<실시예 12> 1-나프탈렌-1-일메틸-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00042
단계 1~3: 6-브로모-1-(나프탈렌-1-일메틸)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 11의 단계 1~3과 동일한 방법으로 수행하였다.
단계 4: 1-나프탈렌-1-일메틸-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 2의 단계 4 의 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율 52%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3+MeOH-d4) δ 8.85 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.12 (m, 2H), 7.91 (m, 2H), 7.81 (s, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.45 (m, 1H), 7.29 (m, 1H), 6.00 (s, 2H), 4.60 (m, 1H), 3.54 (m, 2H), 3.20 (m, 2H), 2.38 (m, 4H).
<실시예 13> 1-(2-메틸-나프탈렌-1-일메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00043
단계 1~2: 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 1의 단계 1~2와 동일한 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다.
단계 3: 6-브로모-1-(2-메틸-나프탈렌-1-일메틸)-1H-피라졸[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
2-(브로모메틸)-1,3-디클로로벤젠 대신 1-브로모메틸-2-메틸나프탈렌을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 43%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.26 (d, J = 1.8 ㎐, 1H), 8.01 (d, J = 1.8 ㎐, 1H), 7.84 (d, J = 5.4 ㎐, 2H), 7.48~7.42 (m, 3H), 7.02 (m, 1H), 5.74 (s, 2H), 4.38 (s, 2H), 2.62 (s, 3H).
단계 4: 1-(2-메틸-나프탈렌-1-일메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 1의 단계 4의 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 41%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.37 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.87~7.83 (m, 2H), 7.49~7.38 (m, 5H), 6.71 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 5.80 (s, 2H), 4.37 (brs, 2H), 3.90 (s, 3H), 2.62 (s, 3H); MS-ESI 368 (M+, 12), 214 (58), 155 (100).
<실시예 14> 1-(2-메틸-나프탈렌-1-일메틸)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00044
단계 1~3: 6-브로모-1-(2-메틸-나프탈렌-1-일메틸)-1H-피라졸[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
실시예 13의 단계 1~3과 동일한 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다.
단계 4: 1-(2-메틸-나프탈렌-1-일메틸)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 2의 단계 4의 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율 41%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3+MeOH-d4) δ 8.79 (s, 1H), 8.27 (m, 1H), 7.98 (m, 1H), 7.93 (m, 2H), 7.51~7.39 (m, 5H), 5.97 (s, 2H), 4.48 (s, 1H), 3.66 (m, 2H), 3.21 (m, 2H), 2.39 (m, 4H); MS-ESI 437 (M+, 13), 283 (18), 155 (100).
<실시예 15> 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-나프탈렌-2-일메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00045
단계 1~2: 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 1의 단계 1~2와 동일한 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다.
단계 3: 6-브로모-1-(나프탈렌-2-일메틸)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
2-(브로모메틸)-1,3-디클로로벤젠 대신 2-(브로모메틸)-나프탈렌을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 32%).
1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.36(d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.88~7.78(m, 5H), 7.57 (dd, J = 1.8, 8.4 Hz, 1H), 7.47~7.44 (m, 2H), 4.79 (s, 2H); MS-ESI 354 (M+, 3), 227 (30), 141 (100).
단계 4: 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-나프탈렌-2-일메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화합물을 이용하여 실시예 1의 단계 4의 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다(수율: 76%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.53 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.82-7.78 (m, 5H), 7.68 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.46 (m, 2H), 4.84 (s, 2H), 3.98 (s, 3H).
<실시예 16> 벤질-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00046
단계 1~3: 6-브로모-1-(2,6-디클로로페닐)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 1의 단계 1~3과 동일한 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다.
단계 4: 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민의 제조
상기 단계 3에서 제조된 6-브로모-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민(0.07g, 0.19 mmol)을 디클로로메탄(8 mL)에 녹인 후 트리에틸아민(0.053 mL, 0.38 mmol)과 (CF3CO)2O(0.03 mL, 0.21 mmol)를 0 ℃에서 천천히 넣고 교반하였다. 반응이 종결되면 물을 가한 후 유기층을 분리하고 포화 탄산수소나트륨 수용액과 소금물로 세척한 후 Na2SO4로 건조하여 N-(6-브로모-1-(2,6-디틀로로벤질)-1H-피라졸[4,3-b]피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로아세트아미드를 얻었다(100 mg, 수율 100%).
1H-NMR (300MHz, CDCl3) δ 8.87 (brs, 1H), 8.58 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.43~7.40 (m, 2H), 7.33~7.28 (m, 1H), 5.77 (s, 2H).
상기 N-(6-브로모-1-(2,6-디틀로로벤질)-1H-피라졸[4,3-b]피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로아세트아미드(0.1 g, 0.21 mmol)와, K2CO3(60 mg, 0.42 mmol), 촉매량의 요오드화칼륨(KI; 5 mg) 및 벤질브로마이드(27 μL, 0.23 mmol)를 아세톤(20 mL)에 가한 후 70 ℃로 가열 환류하였다. 반응이 종결된 후 감압 농축한 다음 에틸아세테이트(20 mL)를 가하여 녹인 후 물과 소금물로 세척하고 Na2SO4로 건조하였다. 이후 관 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=4:1)로 정제하여 N-벤질-N-(6-브로모-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로아세트아미드를 얻었다(80 mg, 수율 68%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.58 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.39~7.36 (m, 2H), 7.31~7.28 (m, 1H), 7.16 (m, 5H), 5.67 (s, 2H), 5.13 (s, 2H).
이후, 실시예 2와 동일한 방법으로 진행하여 트리플루오로아세틸기가 제거된 4-(4-(3-(벤질아미노)-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트를 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.42(d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.47 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.42~7.37 (m, 3H), 7.31~7.27 (m, 5H), 5.58 (s, 2 H), 4.80 (m, 1H), 4.60 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 4.32~4.28 (m, 3H), 2.92~2.87 (m, 2H), 2.20~2.16 (m, 2H), 2.03~1.95 (m, 2H), 1.59 (s, 9H).
상기 4-(4-(3-(벤질아미노)-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트를 디클로로메탄에 녹인 후 4M HCl을 가한 다음 교반하여 Boc 보호기를 제거함으로써 목적화합물을 얻었다(수율 98%).
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.92 (brs, 1 H), 8.73 (brs, 1 H), 8.61 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.18 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.53~7.51 (m, 2H), 7.43~7.38 (m, 1H), 7.29 (m, 2H), 7.14 (m, 3H), 5.51 (s, 2 H), 4.53~4.48 (m, 1H), 4.43 (s, 2H), 3.69~3.64 (m, 2H), 3.15~3.07 (m, 2H), 2,22~2.06 (m, 4H).
<실시예 17> [1-(2,6-디클로로벤젠)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-메틸아민의 제조
Figure 112008080545015-pat00047
상기 실시예 16의 방법을 이용하여 목적화합물을 얻었다(수율 99%).
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.90 (brs, 1H), 8.71 (brs, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.52 (m, 2H), 7.42 (m, 1H), 5.51 (s, 2H), 4.53 (m, 1H), 3.39 (m. 2H), 3.14 (m. 2H), 2.70 (s, 3H), 2.22~1.96 (m, 4H).
<실시예 18> N-[1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-2,2,2-트리플루오로-아세트아마이드의 제조
Figure 112008080545015-pat00048
상기 실시예 10의 단계 4에서 제조된 4-(4-(3-아미노-1-(2,6-디클로로-3-플 루오로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트(40 mg 0.07 mmol)를 디클로로메탄(4 mL)에 녹인 후 트리에틸아민(0.02 mL, 0.14 mmol)과 (CF3CO)2O(0.11 mL)를 0 ℃에서 천천히 넣고 교반하였다. 반응이 종결된 후 물을 가한 다음 유기층을 NaHCO3 수용액과 소금물로 세척한 후 Na2SO4로 건조한 다음 감압 농축하여 4-(4-(1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-3-(2,2,2-트리플루오로아세트아미도)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트를 얻었다(30 mg, 수율 65%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.69 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.74 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.37 (m, 1H), 7.21 (m, 1H), 5.79 (s, 2H), 4.34~4.43 (m, 3H), 2.93 (m, 2H), 2.21 (m, 2H), 1.98 (m, 2H), 1.48 (s, 9H).
상기 4-(4-(1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-3-(2,2,2-트리플루오로아세트아미도)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트를 디클로로메탄에 녹인 후 4M HCl을 가한 다음 교반하여 Boc 보호기를 제거함으로써 목적화합물을 얻었다(수율 84%).
1H-NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 9.00 (m, 2H), 8.59 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.96(s, 2H), 4.76 (m, 1H), 3.64~3.53 (m, 2H), 3.25~3.22 (m, 2H), 2.33 (m, 4H).
<실시예 19> N-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-벤즈아마이드의 제조
Figure 112008080545015-pat00049
상기 실시예 2에서 제조된 4-(4-(3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트와 벤조일클로라이드를 실시예 18에서와 동일한 방법으로 반응시켜 아미드를 얻고 Boc 보호기 제거 반응을 수행하여 목적화합물인 N-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]벤즈아미드를 얻었다(수율 89%).
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.65 (brs, 1H), 9.16 (brs, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.65~7.42 (m, 8H), 5.85 (s, 2H), 4.57 (m, 1H), 3.51 (m. 2H), 3.10 (m. 2H), 2.27 (m, 4H).
<실시예 20> N-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-]-2-페닐-아세트아마이드의 제조
Figure 112008080545015-pat00050
상기 실시예 2에서 제조된 4-(4-(3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트와 2-페닐아세틸클로라이드를 실시예 18에서와 동일한 방법으로 반응시켜 아미드를 얻고 Boc 보호기 제거 반응을 수행하여 목적화합물인 N-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-2-페닐-아세트아마이드를 얻었다(수율 92%).
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.35 (brs, 1H), 8.85 (brs, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.44 (m, 1H), 7.33~7.25 (m, 5H), 5.89 (s, 2H), 4.57 (m, 1H), 3.52 (m. 2H), 3.11 (m. 2H), 2.27 (m, 4H).
<실시예 21> N-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-아세트아마이드의 제조
Figure 112008080545015-pat00051
상기 실시예 2에서 제조된 4-(4-(3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트와 Ac2O를 실시예 18에서와 동일한 방법으로 반응시켜 아미드를 얻고 Boc 보호기 제거 반응을 수행하여 목적화합물인 N-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-아세트아마이드를 얻었다(수율 96%).
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.35 (brs, 1H), 8.85 (brs, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.44 (m, 1H), 7.33~7.25 (m, 5H), 5.89 (s, 2H), 4.57 (m, 1H), 3.52 (m. 2H), 3.11 (m. 2H), 2.27 (m, 4H).
<실시예 22> N-[1-(2,6-디클로로벤질-3-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-2,2,2-트리플루오로-N-메틸-아세트아마이드의 제조
Figure 112008080545015-pat00052
상기 실시예 18에서 제조된 4-(4-(1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-3-(2,2,2-트리플루오로아세트아미도)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트(20 mg, 0.03 mmol)를 아세톤(4 mL)에 녹인 후 K2CO3(10 mg)과 MeI(20 μL)를 가한 다음 60 ℃에서 가열 교반하였다. 반응이 종결된 후, 휘발성 기체를 제거한 다음 에틸아세테이트를 가하여 녹인 후 소금물로 세척하고 Na2SO4로 건조 후 농축하여 4-(4-(1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-3-(2,2,2-트리플루오로-N-메틸아세트아미도)-1H-피라졸[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실산 t-부틸에스트를 얻었다(13 mg, 수율 65%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.75 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.82 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.38 (m, 1H), 7.20 (m, 1H), 5.77 (s, 2H), 4.39~4.30 (m, 3H), 3.51 (s, 3H), 2.97~2.89 (m, 2H), 2.22~2.17 (m, 2H), 1.93 (m, 2H), 1.55 (s, 9H).
상기 4-(4-(1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-3-(2,2,2-트리플루오로-N-메틸아세트아미도)-1H-피라졸[4,3-b]피리딘-6-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실 산 t-부틸에스트를 디클로로메탄에 녹인 후 4M HCl을 가한 다음 교반하여 Boc 보호기를 제거함으로써 목적화합물을 얻었다(수율 82%).
1H-NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8.88 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.42 (m, 1H), 7.28 (m, 1H), 5.75 (s, 2H), 4.62 (m, 1H), 3.62 (m, 2H), 3.23 (m, 2H), 2.31 (m, 4H).
<실시예 23> {4-[3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일]-페닐}-(4-메틸-피페라진-1-일)-메타논의 제조
Figure 112008080545015-pat00053
단계 1~3: 6-브로모-1-(2,6-디클로로페닐)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민의 제조
실시예 1의 단계 1~3과 동일한 방법을 수행하여 목적화합물을 얻었다.
단계 4: {4-[3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일]-페닐}-(4-메틸-피페라진-1-일)-메타논의 제조
상기 단계 3에서 제조된 6-브로모-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-아민(0.4 g, 1.07 mmol)과, 4-(메톡시카르보닐)페닐보론산(0.21 g, 1.18 mmol), Na2CO3(0.79 g, 7.5 mmol) 및 Pd(PPh3)4(0.13 g, 0.11 mmol)를 DME/H2O 혼합용매(1:1, 14 mL)에 넣은 후 3시간 동안 가열 환류 교반시켰다. 반응이 종결된 후 실온으로 온도를 낮추고 감압 농축하여 휘발성 기체를 제거하였다. 잔류물에 디클로로메탄을 가하여 희석하고 1N HCl 수용액, 포화 NaHCO3 수용액 및 소금물로 세척한 다음 Na2SO4로 건조하였다. 이후, 관크로마토그래피법(헥산:에틸아세테이트=2:1)으로 정제하여 4-(3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)벤조산 메틸에스트를 얻었다(0.24 g, 수율 52%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.62 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.28~7.22 (m, 1H). 5.62 (s, 2H), 4.42 (brs, 2H), 3.96 (s, 3H).
상기 4-(3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)벤조산 메틸에스트(0.24 g, 0.56 mmol)를 MeOH/THF/H2O 혼합용매(1:1:1, 60 mL)에 녹인 후 LiOHH2O(0.12 g, 2.81 mmol)를 가한 다음 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 이후, 휘발성 기체를 제거한 다음 1N HCl 수용액으로 pH 4로 조절하였다. 다음으로 에틸아세테이트를 가하여 추출하고 유기층을 소금물로 세척한 후 Na2SO4로 건조, 농축하여 4-(3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)벤조 산을 얻었다(0.18 g, 수율 78%).
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.35 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.94 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.51 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.41~7.35 (m, 1H), 5.60 (s, 4H).
상기 4-(3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일)벤조산(49 mg, 0.12 mmol)과, 1-(3-다이메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염화수소(EDCI; 25 mg, 0.13 mmol), 1-하이드록시-1H-벤조트리아졸(HOBT; 18 mg, 0.13 mmol) 및 1-메틸피페라진(13 μL, 0.12 mmol)을 디메틸포름아미드(DMF; 5 mL)에 녹인 후 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 에틸아세테이트를 가하여 희석한 다음, 물과 소금물로 세척하고 Na2SO4로 건조한 후 농축하였다. 이후, 관크로마토그래피(5% MeOH/CH2Cl2)로 정제하여 목적화합물인 {4-[3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일]-페닐}-(4-메틸-피페라진-1-일)-메타논을 얻었다(12 mg, 수율 20%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.59 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.55 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.38 (m, 2H), 7.25 (m, 1H), 5.62 (s, 2H), 4.41 (brs, 2H), 3.81 (m, 2H), 3.54 (m, 2H), 2.41 (m, 4H), 2.34 (s, 3H); MS-ESI 496 (M+, 2), 411 (13), 179 (46), 70 (100).
<실시예 24> 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘의 제조
Figure 112008080545015-pat00054
단계 a
5-브로모-3-플로로피리딘-2-카르보니트릴(3.9 g, 19.4 mmol)을 메탄올:포화 HCl(1:1, 200 mL)에 가한 후 100 ℃에서 가열 교반하였다. 반응이 종결된 후 0 ℃로 냉각하고 포화 NaHCO3 수용액을 천천히 가하여 중화시킨 다음 메탄올은 감압 농축하여 제거하고 에틸아세테이트를 가하여 추출하였다. 유기층을 물과 소금물로 세척하고 MgSO4로 건조힌 후 농축한 다음 관크로마토그래피(10% 에틸아세테이트/헥산)로 정제하여 5-브로모-3-플루오로피리딘-2-카르복실산 메틸에스트를 얻었다(2.7 g, 수율 62%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.61 (dd, J = 1.0, 1.7 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 1.7, 9.3 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H).
단계 b
메탄올 (50 mL)에 NaBH4(1.91 g, 50.4 mmol)를 0 ℃에서 가한 후, 상기 단계 a에서 제조된 5-브로모-3-플루오로피리딘-2-카르복실산 메틸에스트(2.36 g, 10.1 mmol)를 녹인 THF(50 mL) 용액을 시린지 펌프를 이용하여 20분 동안 천천히 적가한 다음 실온에서 18시간 교반하였다. 포화 NaHCO3 수용액을 가한 뒤 디클로로메탄을 가하여 추출하고 소금물로 세척한 후 농축하여 (5-브로모-3-플루오로피리딘-2-일)-메탄올을 얻었다(1.7 g, 수율 83%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.49 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.79 (s, 2H), 3.57 (s, 1H).
상기 (5-브로모-3-플루오로피리딘-2-일)-메탄올(1.7 g, 8.3 mmol)을 DMSO(20 mL)에 녹인 후 IBX(4.66 g, 16.7 mmol)을 가하고 실온에서 10시간 동안 교반하였다. 에틸아세테이트(50 mL)와 물(50 mL)을 가한 후 고체물질은 셀라이트를 통하여 여과 제거하고 유기층을 분리하였다. 이후, 물과 소금물로 수 회 세척한 다음 MgSO4로 건조 후 농축하여 5-브로모-3-플로로피리딘-2-카르복사알데히드를 얻었다(1.67 g, 수율 100%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.17 (s, 1H), 8.69 (dd, J = 1.0, 1.7 Hz, 1H), 7.80 (dd, J = 1.7, 9.7 Hz, 1H).
단계 c
상기 단계 b에서 제조된 5-브로모-3-플로로피리딘-2-카르복사알데히드(0.55 g, 2.71 mmol)를 NH2NH2H2O(7 mL)에 0 ℃에서 가한 후 5분 동안 교반한 다음 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 130 ℃에서 5시간 동안 가열 교반한 후 실온으로 냉각한 다음 물을 가한 후 에틸아세테이트로 추출하였다. 유기층을 물과 소금물로 충분히 세척한 다음 Na2SO4로 건조하고 농축한 후 관크로마토그래피(40% 에틸아세테이트/헥산)로 정제하여 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘을 얻었다(0.27 g, 수율 50%).
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.59 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.98 (dd, J = 1.0, 1.8 Hz, 1H), 7.40 (m, 1H), 7.28 (m, 1H), 5.77 (s, 2H).
단계 d~e
상기 단계 c에서 제조된 6-브로모-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘을 실시예 2의 방법을 이용하여 N-디클로로벤질 치환반응, 스즈키 치환반응 및 Boc 탈보호기 반응시켜 목적화합물인 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘을 얻었다(수율 87%).
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.78 (brs, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.60 (brs, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.42 (m, 2H), 7.32 (m 1H), 5.70 (s, 2H), 4.44 (m, 1H), 3.42 (m, 2H), 3.13 (m, 2H), 2,26 (m, 4H).
<실험예> c-Met 키나아제 억제활성 측정
본 발명에 따른 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 이상세포의 증식억제활성을 세포단계에서 측정하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
구체적으로, c-Met 키나아제에 대한 저해활성을 시간분해형광도(Time-resolved fluorescence, TRF)의 일종인 분리 증강된 란탄족플루오로 면역 분석(Dissociation Enhanced Lanthanide Fluoro Immuno Assay, DELFIA; Perkin Elmer)을 이용하여 분석하였다.
그레이너 96웰 V형 바닥 플레이트에 시험화합물로서 실시예 1~24에서 제조된 화합물 또는 비교군으로서 종래 c-Met 억제제로 사용되는 PF-02341066(파이자사) 10 mL을 가하고 c-Met 효소를 섞은 티로신 키나아제 버퍼(20 mL)를 가한 후, 상기 효소 및 시험화합물을 15분 동안 혼합하여 배양하였다. 여기에 ATP용액(10 mL)을 가하여 상온에서 30분 동안 키나아제 반응을 시킨후, 50 mM 에틸렌다이아민테트라아세트산 용액(EDTA, 40 mL)을 가하여 반응을 중지시켰다. 스트렙트아비딘이 코팅된 플레이트에 반응물을 옮기고 진탕하에 배양하고 2시간 후 PBS-T 완충액(PBS 0.05% 트윈20)으로 3회 세척하였다.
유로퓸이 붙은 항-포스포타이로신 항체를 1:2,500으로 희석시켜 웰 당 100 mL씩 가하고 진탕하에 배양하고 1시간 후, PBS-T 완충액(PBS 0.05% 트윈20)으로 5회 세척하였다.
이후, 개선제(enhancement solution, 100 mL)을 가하고 5분 동안 진탕배양한 후, 왈락 인비전 2103(Wallac Envision 2103) 기기로 615/665 nm의 파장 범위에서 판독하였다.
c-Met 키나아제 효소활성을 50%로 감소시키는 상기 화합물의 IC50 또는 1 μM 농도에서 % 저해율로 나타내었다. 상기 실험을 수행한 시험화합물의 IC50는 2개씩의 데이터 세트로 결정하였고 프리즘(버전 5.01, 그래프패드) 소프트웨어를 이용하여 구하였다.
측정결과를 표 2에 나타내었다.
구분 c-Met의 IC50 (μM) 또는 % 저해율 구분 c-Met의 IC50 (μM)
또는 % 저해율
실시예 1 14% 실시예 2 4.1 μM
실시예 3 22% 실시예 4 5.9 μM
실시예 5 37% 실시예 6 3.8 μM
실시예 7 32% 실시예 8 10%
실시예 9 42% 실시예 10 4.1 μM
실시예 11 32% 실시예 12 43%
실시예 13 39% 실시예 14 3.2 μM
실시예 15 33% 실시예 16 4.3 μM
실시예 17 2.6 μM 실시예 18 2.3 μM
실시예 19 20% 실시예 20 5%
실시예 21 22% 실시예 22 3.6 μM
실시예 23 45% 실시예 24 8.8 μM
비교군 0.05 μM - -
상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 화합물, 특히 실시예 2, 4, 6, 10, 14, 16, 17, 18, 20 및 24의 화합물은 2.3~8.8 μM의 IC50을 나타냄으로써 c-Met에 대한 억제 활성을 나타내는 것을 알 수 있다. 따라서, 본 발명에 따른 화합물은 비정상적인 티로신 키나제의 활성으로 야기되는 질환, 예를 들면 종양, 건선, 류마티즘, 당뇨병성 망막증 등의 질환의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
한편, 본 발명에 따른 상기 화학식 1의 화합물은 목적에 따라 여러 형태로 제제화가 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 제제화 방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
<제제예 1> 정제의 제조(직접 가압)
활성성분 5.0 ㎎
락토오스 14.1 ㎎
크로스포비돈 USNF 0.8 ㎎
마그네슘 스테아레이트 0.1 ㎎
통상적인 정제의 제조 방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 첨가하여 균일하게 혼합하고 가압하여 정제를 제조하였다.
<제제예 2> 정제의 제조(습식 조립)
활성성분 5.0 ㎎
락토오스 16.0 ㎎
녹말 4.0 mg
프리솔베이트 80 0.3 mg
실리콘 다이옥사이드 2.7 ㎎
마그네슘 스테아레이트 2.0 ㎎
활성성분을 체로 친 후, 락토오스와 녹말을 혼합하였다. 이후, 폴리솔베이트를 순수한 물에 녹인 녹인 후, 적당량을 활성성분, 락토오스 및 녹말 혼합물에 첨가한 다음 미립화하였다. 건조 후에 미립을 제질한 후, 콜로이달 실리콘 다이옥사이드 및 마그네슘 스타아레이트와 혼합하였다. 미립을 가압하여 정제를 제조하였다.
<제제예 3> 캅셀제의 제조
활성성분 5.0 ㎎
락토오스 14.8 ㎎
폴리비닐피롤리돈 10.0 ㎎
마그네슘 스테아레이트 0.2 ㎎
통상적인 캅셀제의 제조 방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 첨가하여 균일하게 혼합한 후 적절한 크기의 젤라틴 캅셀에 충진하여 목적하는 캅셀제를 제조하였다.
<제제예 4> 주사제의 제조
활성성분 100 ㎎
만니톨 180 mg
Na2HPO4·12H2O 26 mg
증류수 2974 mg
통상적인 주사제의 제조 방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 함유시켜 주사제를 제조하였다.

Claims (9)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 1]
    Figure 112008080545015-pat00055
    (상기 화학식 1에서,
    R1은 비치환되거나, 또는 할로겐, C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 및 할로겐으로 치환된 C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기로 치환된 C5~C12 아릴 C1~C4 알킬이고,
    R2는 수소 또는 -NRR'이고, 여기서 R은 비치환되거나, 또는 C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 벤질 및 -C(=O)R4로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이고, 이때 R4는 C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 할로겐으로 치환된 C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 페닐 및 벤질로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이며, 상기 R'은 수소 또는 C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고,
    R3은 비치환되거나, 또는 C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 및 피페리딘으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환된 피라졸; 또는 -CONR5R6 및 -NR5R6으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환된 페닐이며, 이때 R5 및 R6는 서로 독립적으로 또는 선택적으로 수소, C1~C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬이거나; 또는 R5 및 R6는 1 이상의 N 또는 O를 포함하여 고리를 형성하여 상기 -CONR5R6 및 -NR5R6의 NR5R6부분이 몰포린기 또는 피페라진기인 것을 포함한다).
  2. 제1항에 있어서, 상기 R1은 비치환되거나, 또는 클로로, 플루오로, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필 및 트리플루오로메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기로 치환되는 벤질 또는 나프탈레닐메틸이고,
    R2는 수소 또는 -NRR'이고, 여기서 상기 R은 비치환되거나, 또는 메틸, 에틸, 벤질 및 -C(=O)R4로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이고, 이때 R4는 메틸, 에틸, 트리플루오로메틸, 페닐 및 벤질로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이며, 상기 R'은 수소, 메틸, 에틸로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이고,
    R3는 1번 질소가 메틸, 에틸 및 피페리딘으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환된 피라졸; 또는 피페라진기로 치환된 아마이드 화합물이 치환된 페닐인 것을 특징으로 하는 제1항의 화학식 1로 표시되는 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  3. 제1항에 있어서, 상기 R1은 벤질, 디클로로벤질, 2-클로로-6-플루오로벤질, 이소프로필벤질, 트리플루오로메틸벤질, 2,6-디클로로-3-플로오로벤질, 나프탈렌-1-일메틸 및 2-메틸나프탈렌-1-일메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이고,
    R2는 수소 또는 -NRR'이고, 여기서 상기 R은 수소, 메틸, 벤질, 메틸카르보닐, 트리플루오로메틸카르보닐, 페닐카르보닐 및 벤질카르보닐로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나이고, 상기 R'은 수소 또는 메틸이고,
    R3는 1-메틸-1H-피라졸-4-일, 1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일 및 4-(4-메틸-피페리딘-1-일카르보닐)페닐로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 제1항의 화학식 1로 표시되는 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  4. 제1항에 있어서, 상기 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체는:
    (1) 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (2) 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (3) 1-벤질-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (4) 1-벤질-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (5) 1-(2-클로로-6-플루오로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (6) 1-(2-클로로-6-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (7) 1-(4-이소프로필벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (8) 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-(3-트리플루오로메틸벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (9) 1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (10) 1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4- 일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (11) 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-나프탈렌-1-일메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (12) 1-나프탈렌-1-일메틸-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (13) 1-(2-메틸-나프탈렌-1-일메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (14) 1-(2-메틸-나프탈렌-1-일메틸)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (15) 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-나프탈렌-2-일메틸-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일아민;
    (16) 벤질-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-아민;
    (17) [1-(2,6-디클로로벤젠)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-메틸아민;
    (18) N-[1-(2,6-디클로로-3-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-2,2,2-트리플루오로-아세트아마이드;
    (19) N-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-벤즈아마이드;
    (20) N-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라 졸로[4,3-b]피리딘-3-]-2-페닐-아세트아마이드;
    (21) N-[1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-아세트아마이드;
    (22) N-[1-(2,6-디클로로벤질-3-플루오로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-피라졸로[4,3-b]피리딘-3-일]-2,2,2-트리플루오로-N-메틸-아세트아마이드;
    (23) {4-[3-아미노-1-(2,6-디클로로벤질)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘-6-일]-페닐}-(4-메틸-피페라진-1-일)-메타논; 및
    (24) 1-(2,6-디클로로벤질)-6-(1-피페리딘-4-일-1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-b]피리딘으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 제1항의 화학식 1로 표시되는 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  5. 하기 반응식 1에 나타낸 바와 같이,
    유기용매 하에서 출발물질인 화학식 2의 화합물에 t-부틸옥시카보닐(Boc)로 보호된 하이드라진을 반응시켜 화학식 3의 화합물을 제조하는 단계(단계 1);
    상기 단계 1에서 제조된 화학식 3의 화합물에 산을 첨가하여 화학식 4의 화합물을 제조하는 단계(단계 2);
    상기 단계 2에서 제조된 화학식 4의 화합물의 N-1 위치에 R1X로 표시되는 벤질할라이드 또는 아릴메틸렌할라이드를 무기염기 조건하에 반응시켜 화학식 5의 화합물을 제조하는 단계(단계 3); 및
    상기 단계 3에서 제조된 화학식 5의 화합물을 팔라듐 존재하에 R3B(OH)2로 표시되는 피라졸보론산 또는 페닐보론산과 스즈끼 결합반응시켜 화학식 1a의 화합물을 제조하는 단계(단계 4)를 포함하는 제1항의 화학식 1로 표시되는 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 제조방법:
    [반응식 1]
    Figure 112011009613454-pat00056
    (상기 반응식 1에서, R1 및 R3은 화학식 1에서 정의된 바와 같고, 화학식 1a는 화학식 1로 표시되는 유도체의 일종이다).
  6. 제5항에 있어서, 하기 반응식 2에 나타낸 바와 같이, 단계 4에서 제조된 화학식 1a의 화합물을 아실화반응, 또는 아실화반응 후 얻어진 화합물을 알킬화반응 및 아실기 제거반응을 수행하여 C-3 위치의 아민기에 R 및 R'기를 도입시켜 화학식 1b의 화합물을 제조하는 단계(단계 5)를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 제1항의 화학식 1로 표시되는 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 제조방법:
    [반응식 2]
    Figure 112008080545015-pat00057
    (상기 반응식 2에서, R1, R3 및 -NRR'은 화학식 1에서 정의된 바와 같고, 화학식 1a 및 1b는 화학식 1로 표시되는 유도체의 일종이다).
  7. 하기 반응식 3에 나타낸 바와 같이,
    유기용매 하에서 출발물질인 화학식 2의 화합물을 산 존재 하에서 메탄올과 반응시켜 화학식 8의 화합물을 제조하는 단계(단계 a);
    상기 단계 a에서 제조된 화학식 8의 화합물을 환원반응시켜 알코올 유도체를 얻은 후, 산화반응을 수행하여 화학식 9의 알데히드 화합물을 제조하는 단계(단계 b);
    상기 단계 b에서 제조된 화학식 9의 화합물에 하이드라진을 반응시켜 화학식 10의 화합물을 제조하는 단계(단계 c);
    상기 단계 c에서 제조된 화학식 10의 화합물의 N-1 위치에 R1X로 표시되는 벤질할라이드 또는 아릴메틸렌할라이드를 무기염기 조건하에 반응시켜 화학식 11의 화합물을 제조하는 단계(단계 d); 및
    상기 단계 d에서 제조된 화학식 11의 화합물을 팔라듐 존재하에 R3B(OH)2로 표시되는 피라졸보론산 또는 페닐보론산과 스즈끼 결합반응시켜 화학식 1c의 화합물을 제조하는 단계(단계 e)를 포함하는 제1항의 화학식 1로 표시되는 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 제조방법:
    [반응식 3]
    Figure 112008080545015-pat00058
    (상기 반응식 3에서, R1 및 R3은 제1항의 화학식 1에서 정의된 바와 같고, 화학식 1c는 화학식 1의 유도체의 일종이다).
  8. 제1항의 화학식 1로 표시되는 피라졸로[4,3-b]피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 종양, 건선, 류마티즘 또는 당뇨병성 망막증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  9. 삭제
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