KR100806859B1 - 잎새버섯 추출물을 함유하는 건강 음료 - Google Patents

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Abstract

본 발명에 따르면, 잎새버섯 추출물을 유효성분으로 함유하는 건강 음료가 제공된다.
이와 같은 건강 음료에 의하면, 간 보호 효과를 갖는 잎새버섯 추출물을 첨가함으로써, 간 독소물질으로 인하여 간이 손상되는 것을 예방할 수 있으며, 누구나 쉽게 섭취하도록 할 수 있으며, 그 기호성을 높인 건강 음료를 제공하는 장점을 갖는다.
잎새버섯, 음료

Description

잎새버섯 추출물을 함유하는 건강 음료{health beverage containing extract of Grifola frondosa}
본 발명은 건강 음료에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 간 독소물질으로 인하여 간이 손상되는 것을 예방할 수 있으며, 누구나 쉽게 섭취하도록 할 수 있으며, 그 기호성을 높인 건강 음료에 관한 것이다.
인체의 중요한 장기인 간은 인체의 약 5%정도를 차지하는 비교적 큰 기관으로서, 물질대사의 해독 및 생명유지에 필수적인 물질을 생성, 저장하는 중요한 장기이다. 생체 이물질들은 간의 대사를 통해 비활성화되어 배설되거나 혹은 활성이 강한 물질로 대사되어 독성을 유발하는데, 이는 간의 대사 능력에 따라 좌우하는 것으로 알려져 있다. 이 외에 혈당조절, 단백질 합성 및 분해, 콜레스테롤 합성, 비타민 대사 및 저장, 호르몬 등의 대사를 조절할 뿐만 아니라 완충작용이 있어 간 질환이 있더라도 초기에는 잘 느끼지 못하나 상당히 진전된 후에야 진단이 되는 특징이 있다.
한편, 간독성 유발 물질로는 사염화탄소, 클로로포름, 에탄올 및 브로모벤젠 등이 있으며, 대표적 간 독소인 사염화탄소(carbon tetrachloride, CCl4)는 화학반응에 의해 세포파괴를 유발시키는 물질로써 소포체의 기능을 저하시키고 지방의 축적을 일으키며, 심하면 세포괴사를 초래한다고 알려져 있다. 사염화탄소는 유지, 고무, 수지의 용제 등에 이용되며 산업현장에서 쉽게 노출되는 환경물질의 하나로써, 세포의 손상을 일으키는 대표적인 간 독소이다. 사염화탄소의 독성은 과산화물의 생성과 관련이 있는 것으로 보고되었으나 아직 그 기전이 명확하게 밝혀져 있지 않다. 사염화탄소(CCl4)는 세포 파괴를 일으키는 물질로서, 소포체에서 유리기(free radical)인 CCl3·(trichloromethyl radical)로 대사되거나, 혹은 CCl3·(트리클로로메틸 라디칼)이 O2 2 -와 반응하여 생성된 Cl3COO·(trichloromethyl peroxy radical)로 산화되어, 세포막의 고도 불포화지방산(polyenoic acid)을 과산화시킨다. 이에 따라, 소포체의 기능이 저하되고 지방이 축적되며, 간 지방의 알킬기 또는 간 세포의 핵에 존재하는 DNA와 공유결합 하기도 하고, 심하면 세포괴사를 초래한다고 연구, 보고되었다. 또한, 사염화탄소의 중간대사산물인 유리기들을 추적한 결과 CO2, Cl3COO·, COCl2 및 O2 등이 사염화탄소의 독성을 매개하는 것으로 알려져 있다. 이에 따라, 상기와 같은 독성물질로 인한 간 손상을 보호할 수 있는 천연 식물에 대한 연구가 이루어져 오고 있다.
한편, 버섯은 담자균과 자낭균 중 자실체를 형성하는 고등 균류로서 풍부한 영양소를 골고루 함유하고 있고 독특한 향기와 맛을 가지는 동시에 식용 및 약용으 로 널리 이용되어 최근 각광받고 있는 기능성 식품 중의 하나이다. 이러한 버섯은 당질, 단백질, 비타민 및 무기질 등의 영양소가 풍부할 뿐만 아니라, 자실체 및 균사체의 추출물이 체질개선이나 각종 병의 예방과 치료에 효과가 있는 것으로 밝혀져 건강식품이나 의약품으로서의 용도가 크게 증가하고 있다. 그 중에서도 버섯의 항암활성에 관한 연구가 다수 보고되어 있으며, 많은 연구가 진행 중에 있다.
이러한 항암 작용 이외에도 버섯의 항산화효과, 항종양활성, 항알레르기 효과, 혈압강하 효과, 항세균성 효과, 항바이러스 효과, 혈소판 응집저해 효과, 면역증강 효과 등 여러 방면에서 약리작용 및 효능이 있는 것으로 보고되었으며, 한방에서는 버섯을 약재로 사용함과 동시에 의약품의 소재로도 이용되고 있다.
이 중 잎새버섯(Grifola frondosa(Dicks. ex Fr.) S.F.Gray)은 민주름목 구멍장이버섯과(Polyporaceae)에 속하는 버섯으로서 가을에 졸참나무, 물푸레나무의 뿌리 근처에 사물 기생하여 다발로 발생하는 백색 목재부후균으로, 한국, 동아시아, 유럽, 북미 등에 분포되어 있다. 이러한 잎새버섯은 뭉툭한 대에서 무수한 가지꼴로 갈라지며 그 위에 다소 두껍고 구두칼형의 작은 갓을 형성한다. 갓의 크기는 2-5cm이고 두께는 2-4mm이며, 전체의 크기는 15-30cm이다. 표면은 초기에 흑색이나 후에 옅은 흑갈색으로 되고 그 위에 불완전한 둥근 무늬가 있으며, 조직은 부드럽고 백색을 띤다. 대의 기부(基部)는 굵고 바로 윗부분에서 여러 개의 분지로 갈라져 산호모양을 이루며 조직은 단단하며 충실하나 잘 부서진다. 이러한 잎새버섯은 식용 담자균류의 일종으로 향과 맛이 좋아서 일본에서는 송이버섯과 더불어 고급버섯으로 취급되고 있다. 이러한 잎새버섯을 음료로 이용하고 있는 적용사례는 아직까지 보고된 바 없다.
본 발명은 상기의 문제점을 해결하기 위하여 창출된 것으로서, 간 독소물질으로 인하여 간이 손상되는 것을 예방할 수 있으며, 누구나 쉽게 섭취하도록 할 수 있으며, 그 기호성을 높인 건강 음료를 제공하는데 그 목적이 있다.
상기의 목적을 달성하기 위한 본 발명의 건강 음료는 잎새버섯 추출물을 유효성분으로 포함한다.
여기서, 상기 잎새버섯 추출물은 C1 내지 C4의 알코올 및 물로 이루어진 군에서 선택된 하나의 용매 또는 하나 이상의 혼합용매를 이용하여 추출하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 음료 총 100중량부에 대하여, 잎새버섯 추출물이 0.1-4.0중량부 포함된 것이 바람직하다.
게다가, 상기 음료는 올리고당, 대추농축액, 녹차농축액, 둥글레농축액, 비타민 C, 사과농축액 및 배농축액으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 또는 하나 이상의 혼합물이 첨가되는 것이 바람직하다.
뿐만 아니라, 상기 음료는 음료 총 100중량부에 대하여, 잎새버섯 추출물 0.1-4.0중량부, 올리고당 0-20중량부, 대추농축액 0-5중량부, 녹차농축액 0-4중량부, 둥글레농축액 0-3중량부, 비타민C 0-0.2중량부 및 사과농축액 0-3중량부를 포함하는 것이 바람직하다.
이하, 본 발명의 일실시예에 따른 건강 음료를 설명하도록 한다.
본 발명의 일실시예에 따른 건강 음료는 잎새버섯 추출물, 올리고당, 대추농축액, 녹차농축액, 둥글레농축액, 비타민 C 및 과일농축액을 포함한다.
상기 잎새버섯 추출물은 C1 내지 C4의 알코올 및 물로 이루어진 군에서 선택된 하나의 용매 또는 하나 이상의 혼합용매를 이용하여 추출한다. 이러한 잎새버섯 추출물은 전체 음료 100중량부에 0.1-4.0중량부 포함되도록 한다. 상기의 범위로 잎새버섯 추출물을 첨가하면, 맛, 향, 색 모두 만족시킬 수 있는 건강 음료를 제조할 수 있다.
이러한 잎새버섯은 간 보호 효과를 갖는 것으로, 상기와 같이 잎새버섯 추출물을 함유하도록 제조된 건강 음료를 섭취함으로써, 간 독성물질로부터 간을 보호할 수 있는 효과를 얻을 수 있다.
상기 올리고당, 대추농축액, 녹차농축액, 둥글레농축액, 비타민 C 및 과일농축액은 각각 음료 총 100중량부에 대하여, 0-20중량부, 0-5중량부, 0-4중량부, 0-3중량부, 0-0.2중량부 및 0-3중량부 포함되도록 한다. 이러한 범위로 각 구성분을 첨가함으로써, 맛, 향, 색 모두 만족시킬 수 있는 건강 음료를 제조할 수 있게 된다.
본 발명의 건강 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 잎새버섯 추출물을 함유하는 것 외에는 액체 성분에 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라 이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 크실리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등), 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 음료에는 여러가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제,안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다
참고예 1. 실험재료 및 실험방법
1) 실험재료
본 발명의 건강 음료에 함유되는 올리고당은 청정원에서 구입하였으며, 이러한 올리고당은 옥수수100%올리고당™으로, 이소말토올리고당 99% 및 말토올리고당 1%이 함유되어 있다.
또한, 대추농축액, 녹차농축액, 둥굴레농축액, 비타민 C, 사과농축액 및 배농축액은 MSC(주)로부터 공급받아 사용하였으며, 이러한 대추농축액은 그 당도가 60brix, 녹차농축액은 68brix, 둥글레농축액은 50brix, 사과농축액은 50brix, 배농축액은 61brix가 되도록 농축된 것이다.
잎새버섯 자실체는 일본 동경 지바현 시장에서 건조된 잎새버섯을 구입하였다.
2) 관능검사
본 발명의 실시예에 따르면, 관능검사는 성인 남녀 20명을 대상으로 실시하였으며, 각 첨가제 별로 농도를 달리하여 첨가한 후에 음료의 맛(Taste), 향(Flavor), 색(Color), 종합적인 기호도(Overall acceptability)를 평가하였다.
평가 방법은 7점 채점법(96)으로 아주 나쁘다(1점), 나쁘다(2점), 조금 나쁘다(3점), 보통이다(4점), 조금 좋다(5점), 좋다(6점), 아주 좋다(7점)로 실시하였다.
3) 색도 및 당도검사
본 발명의 실시예에 따르면, 각 첨가제를 농도별로 첨가하여 색도와 당도검사를 실시하였다. 색도는 제조한 단계별 음료 40ml씩을 1회용 페트리디쉬(petridish)에 부어서 Digital Color Measuring/Difference Calculating Meter(Model CR-200, Minolta, Japan)로 측정하였다. 상기에서 측정된 값은 Hunter의 “L", “a", “b"값으로 표현하였다. 이때 사용한 표준백색판의 색도는 L= 96.43, a= +0.03, b= +1.79이었다.
또한, 본 발명의 실시예에서, 당도 검사는 굴절당도계(Hand refractometer; ATAGO S-28, Japan)로 측정하였다.
4) 통계처리
본 연구에서 얻어진 결과의 통계 처리는 SPSS 12.0 for windows program을 이용하여 실험군당 평균(mean)±표준편차(S.D.)로 나타내었으며, 각 군의 평균차에 대한 통계적 유의성 검정은 Duncan의 다중검증법(DMRT : Duncan's multiple range test)으로 실시하였다.
실시예 1. 잎새버섯 추출물 추출
잎새버섯 추출물을 얻기 위하여, 먼저, 잎새버섯 자실체를 잘게 분쇄한 다음, 각각 물과 메탄올을 용매로 이용하여 추출하였다.
먼저, 메탄올을 용매로 하여 잎새버섯 추출물을 얻는 과정을 설명하면, 분쇄된 잎새버섯 시료에 20중량배량의 메탄올을 가한 다음, 40℃로 조절된 항온 수조에서 12시간 동안 3회에 걸쳐 반복하여 추출하였다. 이 추출액을 여과한 다음, 회전식 농축기(rotary evaporator, EYELA Co., Japan)를 이용하여 용매를 제거하였다. 다음으로, 용매가 제거된 시료를 증류수로 용해하고 동결건조하여 잎새버섯 추출물을 얻었다.
물을 용매로 하여 잎새버섯 추출물을 얻는 과정은 상기 메탄올을 용매로 하여 잎새버섯 추출물을 얻는 과정과, 사용되는 용매만 제외하고 동일하므로, 반복적인 설명은 생략하도록 한다.
실시예 2. 잎새버섯 및 잎새버섯 추출물의 성분 분석
잎새버섯의 일반 성분 분석은 공인분석화학회(AOAC)에 등재된 시험법에 준하여 실시하였다. 수분은 105℃ 건조법, 조단백질은 micro-Kjeldahl 법, 조지방은 Soxhlet법, 조회분은 550℃ 직접 회분법을 사용하여 측정하였으며, 조섬유는 0.13M H2SO4, 0.23M KOH로 분해한 후 건조 및 회화시켜 정량하였다.
또한, 메탄올 및 물을 이용하여 추출된 잎새버섯 추출물의 수율 값은 추출액 일정량을 취하여 동결건조한 다음 건물 중량을 구하고, 추출액 조제에 사용한 원료 건물량에 대한 백분율로 계산하였다.
상기의 잎새버섯 및 잎새버섯 추출물의 성분 분석 결과는 다음 표 1에 나타내었다.
잎새버섯 잎새버섯 추출물(메탄올) 잎새버섯 추출물(물)
수분 8.59±0.69 6.91±0.43 9.14±0.40
조단백질 32.55±3.24 10.13±0.53 44.66±0.26
조지방 1.10±0.64 1.63±0.20 0.74±0.33
조회분 7.04±0.12 11.98±0.85 12.49±0.79
조섬유 13.80±0.18 0.22±0.05 0.20±0.04
탄수화물 36.90±0.21 69.13±0.12 32.77±0.12
수율 - 28.7% 49.2%
표 1을 참조하면, 잎새버섯 자실체의 일반성분은 수분 8.59%, 단백질 32.55%, 지방 1.10%, 회분 7.04%, 섬유 13.80%로 나타났다.
또한, 잎새버섯 자실체를 메탄올 및 물을 용매로 이용하여 추출한 후, 추출물에 대한 일반 성분을 분석한 결과, 전반적으로 비슷한 함량이 나타났으나, 단백질 함량에서는 메탄올을 이용한 추출물보다 물을 이용한 추출물이 4배 이상 많았다.
잎새버섯을 각각 메탄올 및 물을 이용하여 추출 및 동결건조한 후 각 추출용매별로 측정한 수율은, 물을 이용한 잎새버섯 추출물이 49.2%로 메탄올을 이용한 잎새버섯 추출물 28.7%보다 훨씬 많았다. 이에 따라, 아래 실시예들에서는 물을 용매로 이용한 잎새버섯 추출물을 이용하여 건강 음료를 제조하였으며, 아래 참고예에서 실험재료로 사용하였다.
참고예 1. 간독성 실험을 위한 실험동물 모델
잎새버섯 추출물의 간보호 효과를 알아보기 위하여, 간독성 실험을 실시하였다. 실험동물은 외견상 건강한 5주령의 Sprague-Dawley종 웅성 랫트 80마리(Orient Co., Korea)를 구입하여 일주일간 일반 고형 사료로 안정화시킨 후 실험에 사용하였다. 실험기간 중 사료와 물은 자유로이 공급하였고, 사육실의 온도는 25±1℃, 상대습도는 50±10%로 유지시켰다. 점등관리는 자동조명조절기에 의해 12시간 명암주기(light-dark cycle)로 조절하였다. 실험군은 평균체중이 165±10g인 것을 난괴법에 의하여 각 군당 7마리씩 6군으로 나누어 케이지에 1마리씩 분리하여 2주간 사육하였다.
상기 6군의 모든 실험동물군은 14일간 기본적으로 정상 식이를 하였으며, 그에 추가하여 각 실험군마다 다음과 같은 처리를 실시하였다.
정상군( NOR )
실험기간 동안 흰쥐에 증류수를 1g/㎏/day의 용량으로 14일 동안 경구투여 후 올리브 오일(olive oil)을 1㎖/㎏의 용량으로 3일간 투여하였다.
사염화탄소 투여군( CON )
흰쥐에 증류수를 1g/㎏/day의 용량으로 14일 동안 경구투여 후 사염화탄소(CCl4)를 동량의 올리브 오일에 용해하여 1㎖/㎏의 용량으로 3일간 간독성을 유발하였다.
제1 시료 투여군( GF Ι)
흰쥐에 잎새버섯 추출물을 0.5g/㎏/day의 용량으로 14일 동안 경구투여 후 사염화탄소를 동량의 올리브 오일에 용해하여 1㎖/㎏의 용량으로 3일간 간독성을 유발하였다.
제2 시료 투여군( GF Ⅱ)
흰쥐에 잎새버섯 추출물을 1g/㎏/day의 용량으로 14일 동안 경구투여 후 사염화탄소를 동량의 올리브 오일에 용해하여 1㎖/㎏의 용량으로 3일간 간독성을 유발하였다.
제3 시료 투여군( GF Ⅲ)
흰쥐에 잎새버섯 추출물을 2g/㎏/day의 용량으로 14일 동안 경구투여 후 사염화탄소를 동량의 올리브 오일에 용해하여 1㎖/㎏의 용량으로 3일간 간독성을 유발하였다.
양성 대조군( VTC )
흰쥐에 비타민 B, C 복합제(vitamin BC complex)를 1g/㎏/day의 용량으로 14일 동안 경구투여 후 사염화탄소를 동량의 올리브 오일에 용해하여 1㎖/㎏의 용량으로 3일간 간독성을 유발하였다.
참고예 2. 간독성 실험을 위한 실험동물 모델로부터 혈청분리
상기 참고예 3의 6개 실험군에서, 2주간 사육한 실험동물은 도살 전 12시간 동안 물을 제외한 식이는 중단하였으며 에테르(ether)로 마취시킨 다음 복부 중앙선을 따라 개복한 후 쥐의 심장 박동이 유지되고 있는 상태에서 복부대동맥으로부터 채혈하였다. 채취한 혈액은 해파린 튜브에 바로 주입하여 3000rpm, 4℃에서 20분간 원심분리 한 뒤 혈청을 분리하였으며, 혈청은 -70℃에서 냉동 보관하면서 각각의 분석실험에 사용하였다.
참고예 3. 간독성 실험을 위한 실험동물 모델의 혈청분석
실험 동물에서 간독성을 측정하는 방법을 혈액의 생화학적 분석, 간의 분비능 측정, 간 조직의 구성 성분의 변화 및 조직병리 검사로 크게 4가지로 분류된다. 이 중 가장 일반적으로 사용하는 방법은 혈액의 생화학적 분석과 조직병리 검사이며, 혈액의 생화학적 분석 중 혈청 효소 활성측정법은 지난 25년간 표준 간독성 평가법으로 이용되어 왔다. 본 실험예에서는 간독성의 지표로써, 간세포의 손상 여부를 알아보기 위하여 aspartate aminotransferase (AST)와 alanine aminotransferase(ALT)를 측정하였다.
아미노기 전이 효소 (Aminotransferase)는 aspartate aminotransferase(AST)와 alanine aminotransferase(ALT)로 존재하며, 아미노산(amino acid)과 α-케토산(α-keto acid) 사이에서 아미노기 전이반응을 촉매하는 효소이다. AST와 ALT는 알코올, 유기용매 및 기타 독성물질에 의해 간의 실질 세포가 손상을 받았을 때 항진되어 나타나므로 간 장해의 지표가 되는 것으로 알려져 있다.
AST와 ALT는 모든 장기에 존재하지만 AST는 심장, 간, 골격근에 많고, ALT는 간에 많아 간독성의 지표로 널리 이용되고 있다. AST, ALT등의 효소 활성도의 상승은 간 손상으로 인한 간 세포의 괴사와 간 조직의 파괴가 진행됨에 따라 아미노기 전이 효소(transaminase)가 혈중으로 유리되어 그 활성이 증가하므로 간세포의 변성 및 괴사의 지표가 된다.
이러한 혈청 중의 AST 및 ALT의 효소 활성도는 Rentiman-Frankel의 방법에 따라 조제된 아산제약의 키트를 사용하여 측정하였다. 먼저, AST 및 ALT 각각 키트 중 기질액 1.0㎖를 37℃에서 5분간 반응시켰다, 그 다음으로, 상기 참고예 5에서 분리된 각 실험군의 혈청 0.2㎖를 첨가한 뒤 잘 혼합하여 37℃에서 AST는 60분, ALT는 30분간 반응시켰다. 그 다음, 키트 중 정색시액 1.0㎖를 첨가해 잘 혼합하여 실온에서 20분간 발색시켰다. 여기에 0.4N 수산화나트륨 수용액(NaOH) 10.0㎖를 가하여 혼합한 뒤 실온에서 10분간 방치한 후 505㎚에서 흡광도를 측정하였고, 그 활성도를 표준 검량선에 준하여 산정하였다. 이 때, 활성도는 혈청 ㎖당 Karmen unit로 나타내었다.
상기의 각 실험군에서 측정된 혈청 AST 및 ALT의 활성 변화는 다음 표 2에 나타내었다.
AST(Karmen unit/㎖) ALT(Karmen unit/㎖)
NOR 134.71±27.21 59.80±14.05
CON 230.10±11.77 142.17±14.45
VTC 157.06±3.66 75.53±12.49
GF Ι 188.53±8.88 100.41±5.19
GF Ⅱ 184.45±5.73 102.86±10.59
GF Ⅲ 166.26±4.10 83.42±12.04
표 2를 참조하면, 간손상 진단을 위한 일반적 지표로 사용되고 있는 AST의 활성은 사염화탄소만을 투여한 대조군인 CON(230.10±11.77KA unit)에서 정상군인 NOR(134.71±27.11KA unit)에 비해 70.8%의 AST 활성 증가를 나타내었다. 반면, 잎새버섯 추출물을 투여한 실험군(GF)에서는 대조군(CON)에 비하여 현저히 억제되었는데, GF Ⅰ군(188.53±8.88KA unit), GF Ⅱ군(184.45±5.73KA unit) 및 GF Ⅲ군(166.26±4.10KA unit)으로 대조군(CON)보다 AST 활성이 각각 30.3, 33.8 및 47.4%로 낮았다.
또한, ALT 활성에서도 AST와 유사한 경향을 나타내었다. 즉, 대조군(CON)과 비교하여 GF Ι, Ⅱ 및 Ⅲ군에서 ALT 활성이 29.3%, 27.6%, 41.3%로 낮았으며, 특히 GF Ⅲ군은 양성대조군(VTC)과 유사한 활성을 나타내었다.
상기와 같이, 사염화탄소 처리로 인하여 대조군(CON)에서 혈청 AST와 ALT의 활성이 현저하게 증가한 것은 사염화탄소에 의하여 간 실질세포에서 손상이 일어남으로써 이들 효소들의 간외 방출이 증가된다는 보고와 일치하는 결과이다. 또한, 상기와 같이 잎새버섯 추출물을 사염화탄소 투여 전에 먼저 14일간 투여한 실험동물(GF 군)에서 AST와 ALT 활성이 유의성 있게 감소하는 현상을 보아, 사염화탄소 투여로 유발되는 실험동물의 간손상을 예방적으로 감소시키는 것이라고 추정할 수 있었다.
실시예 3. 잎새버섯 추출물 첨가량에 따른 관능검사
잎새버섯 추출물 첨가량에 따른 건강음료의 관능검사를 실시하기 위하여, 식용수 100중량부에 대하여, 상기 실시예1의 추출된 잎새버섯 추출물을 각각 0.1, 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0중량부가 첨가되도록 용액을 제조하였다. 상기에서 제조된 용액을 대상으로 각각 관능검사를 실시하였다.
상기의 관능검사 결과는 다음 표 3에 나타내었다.
잎새버섯추출물 색 향 맛 종합기호도
0.1중량부 3.80±1.48 3.90±1.10 4.10±0.74 3.70±0.95
0.5중량부 4.00±1.41 4.30±0.95 3.80±1.14 4.20±0.79
1.0중량부 4.70±1.49 4.20±1.14 4.30±0.95 4.50±0.71
2.0중량부 3.50±0.85 3.70±1.49 2.70±1.06 3.00±1.33
3.0중량부 2.60±0.97 3.70±1.49 2.40±1.51 2.30±0.95
4.0중량부 2.30±1.64 3.40±1.58 1.80±0.79 1.80±0.92
F 값 4.499 0.664 9.302 8.951
먼저, 표 3에서 각각의 색, 향, 맛 및 종합기호도에서 F 값에 나타낸 *는 p<0.001, **는 p<0.01, *는 p<0.05를 의미한다. 또한, 잎새버섯추출물에 따른 각각의 색도, 향, 맛 및 종합기호도의 유의성은 5%인 것으로 나타났다.
상기의 F의 *, **, ***가 의미하는 바와 유의성 수치는 본 발명의 모든 실시예에서 측정된 관능 검사 결과에서 모두 동일하므로, 반복적 기재는 생략하도록 한다.
표 3을 참조하면, 향의 경우 잎새버섯 추출물의 첨가 농도가 높을수록 특유의 버섯향으로 인해 점수가 낮아진 것을 알 수 있다. 또한, 색도에 있어서 진한 색보다는 1.0중량부 이하로 첨가된 것을 선호하였으며, 맛과 종합적인 기호도에서도 1.0중량부 이하로 잎새버섯 추출물을 첨가한 음료가 2.0중량부이상 첨가한 음료보다 높은 점수가 나타났다. 따라서, 잎새버섯 추출물의 최적 농도는 1.0중량부가 가장 적합한 것으로 나타났다.
실시예 4. 당 첨가량에 따른 관능검사
당 첨가량에 따른 건강음료의 관능검사를 실시하기 위하여, 당의 농도가 각각 다르게 첨가되도록 용액을 제조하였다. 여기서, 잎새버섯추출물은 상기 실시예 3에서 높은 점수로 측정된 0.5중량부 또는 1.0중량부 첨가되도록 하였다.
먼저, 전체 용액 100중량부에 대하여, 잎새버섯 추출물 0.5중량부를 첨가한 다음, 올리고당을 각각 0, 5, 10, 15, 20중량부 첨가되도록 용액을 제조하였다.
상기와 같이 제조된 용액의 관능검사를 실시하였으며, 그 결과는 아래 표 4에 나타내었다.
올리고당 색도 향 맛 종합기호도
0중량부 4.27±1.16 3.13±1.13 3.07±1.39 3.27±1.22
5중량부 4.27±1.22 3.73±0.96 3.60±1.06 3.87±0.99
10중량부 4.80±1.15 4.33±1.11 4.40±0.91 4.60±1.06
15중량부 4.20±1.26 4.33±0.82 4.60±1.30 4.13±0.99
20중량부 4.13±0.92 4.33±0.98 4.60±1.35 4.47±1.19
F 값 0.808 4.279 4.819 3.539
표 4를 참조하면, 색을 제외한 다른 항목에서는 전체적으로 올리고당을 첨가하지 않은 음료보다 올리고당을 첨가한 음료의 기호도가 매우 좋은 것으로 나타났다. 그리고 올리고당 함량 10중량부-20중량부의 경우 모든 검사 항목에서 점수가 높아지는 것으로 나타났으나 유의적 차이는 없었다.
따라서, 잎새버섯 추출물 0.5중량부 첨가된 건강 음료에서는 올리고당이 10중량부 되도록 첨가하는 것이 가장 적합하였다.
다음으로, 전체 용액 100중량부에 대하여, 잎새버섯 추출물 1.0중량부를 첨가하고, 올리고당을 각각 0, 5, 10, 15, 20중량부 첨가되도록 용액을 제조하였다. 상기와 같이 제조된 용액의 관능검사를 실시하였으며, 그 결과는 아래 표 5에 나타내었다.
올리고당 색도 향 맛 종합기호도
0중량부 3.93±1.33 3.73±1.49 2.73±1.33 2.93±1.44
5중량부 3.87±1.25 4.00±1.13 3.40±1.40 3.47±1.19
10중량부 4.47±1.36 4.27±1.33 4.53±1.06 4.60±0.92
15중량부 4.20±1.33 4.40±.91 4.73±1.49 4.54±1.31
20중량부 4.00±1.00 4.40±0.83 4.60±1.50 4.47±1.46
F 값 0.560 0.923 6.315 5.273
표 5를 참조하면, 색과 향에서는 올리고당을 15중량부와 20중량부 첨가한 건강 음료의 점수가 가장 높았으나 유의적 차이는 없었다. 그러나 맛에서는 올리고당 함량 15중량부가 4.7±1.5로 가장 높았으며, 종합적인 기호도에서는 올리고당 함량 10중량부에서 4.6±0.9로 가장 높았다. 이 결과, 잎새버섯 추출물 1.0중량부 첨가된 음료에서도 잎새버섯 추출물 0.5중량부 첨가된 음료와 마찬가지로 올리고당을 10중량부 첨가하는 것이 가장 적합하였다.
마지막으로, 잎새버섯 추출물 0.5중량부와 1.0중량부에 적합한 당의 농도를 측정하기 위하여 관능검사를 실시하였다. 여기서, 전체 용액 100중량부에 대하여 첨가되는 잎새버섯 추출물 대 올리고당의 비율이 각각 0.5:10, 0.5:15, 0.5:20, 1.0:10, 1.0:15가 되도록 용액을 제조하였다. 상기와 같은 관능검사 실시 결과는 다음 표 6에 나타내었다.
버섯추출물:올리고당 색도 향 맛 종합기호도
0.5:10 4.82±1.08 4.45±0.69 5.00±1.10 5.18±0.87
0.5:15 4.64±0.92 4.54±0.93 4.45±1.21 4.73±0.90
0.5:20 5.00±1.18 4.64±0.81 4.27±0.65 4.27±0.65
1.0:10 3.64±1.21 3.45±1.04 3.00±0.89 3.00±1.00
1.0:15 3.82±1.25 3.55±1.13 3.63±1.03 3.55±1.44
F 값 4.215 3.227 6.636 8.405
표 6을 참조하면, 잎새버섯 추출물 1.0중량부를 첨가한 것보다 0.5중량부를 첨가한 음료를 더 선호하는 것으로 나타났으며, 색과 향은 잎새버섯 추출물 0.5중량부에 올리고당을 20중량부 첨가한 음료가 점수가 높았으나, 당은 10중량부 첨가한 음료와 유의적 차이는 없었다. 맛에서는 잎새버섯 추출물 0.5중량부에 올리고당 10중량부를 넣은 음료가 가장 높은 수치가 나타났으며, 종합적인 기호도에서도 역시 같은 경향으로 나타났다.
올리고당 첨가량을 달리하여 관능검사를 한 결과 전체 용액 100중량부에 대하여, 잎새버섯 추출물 0.5중량부, 올리고당 10중량부를 첨가하는 것이 건강 음료로써 가장 적합한 것으로 판단하였다.
버섯음료의 맛을 향상시키기 위한 부재료로써, 하기 실시예 5 내지 실시예 7에서는, 녹차, 대추, 둥글레 농축액을 농도별로 첨가하여 사용하였다. 이 재료들은 많은 연구자들에 의해 항암, 항균, 항산화, 항알레르기, 심장질환 및 당뇨병 등과 같은 다양한 생리 기능이 있는 것으로 밝혀져 한방에서도 기를 보충하기 위한 재료로 오래전부터 사용되었으며, 오늘날에는 여러 식품의 주재료 또는 부재료로서 사용되고 있는 것이다.
실시예 5. 녹차 농축액 첨가량에 따른 관능검사
먼저, 녹차 농축액 첨가량에 따른 관능검사를 실시하기 위하여, 전체 용액 100중량부에 대하여 잎새버섯 추출물 0.5중량부와 올리고당 10중량부이 첨가된 용액에, 녹차 농축액을 각각 0중량부, 1중량부, 2중량부, 3중량부 및 4중량부 첨가되도록 하여 용액을 제조하였다. 이렇게 제조된 각각의 용액을 대상으로 관능검사를 실시한 결과를 다음 표 7에 나타내었다.
녹차 색 향 맛 종합기호도
0중량부 4.06±1.65 3.25±1.24 3.88±1.31 3.56±1.55
1중량부 4.81±1.22 4.44±0.81 4.56±0.89 4.38±1.09
2중량부 4.50±1.09 4.44±0.89 4.69±1.30 4.75±1.18
3중량부 4.19±1.05 4.50±1.32 3.88±1.36 3.88±1.02
4중량부 3.50±0.97 4.38±1.45 3.00±1.50 3.13±1.09
F 값 3.321 2.612 4.373 4.593
표 7을 참조하면, 색의 경우 녹차를 첨가하지 않는 음료보다 녹차를 첨가한 음료를 더 선호하는 것으로 나타났다. 또한, 맛과 종합적인 기호도에서는 녹차 첨가량이 많아질수록 수치가 낮아지는 것으로 나타났는데, 이것은 녹차 첨가량이 증가하면 녹차 특유의 쓴맛이 증가하여 오히려 거부감을 일으킨 것으로 판단된다. 이에 따라, 전반적 평가에서 녹차 농축액이 음료 총 100중량부에 대하여 2중량부 포함된 음료의 선호도가 가장 좋은 것으로 조사되었다.
실시예 6. 대추 농축액 첨가량에 따른 관능검사
대추 농축액 첨가량에 따른 관능검사를 실시하기 위하여, 전체 용액 100중량부에 대하여 잎새버섯 추출물 0.5중량부, 올리고당 10중량부 및 녹차 농축액 2중량부를 첨가하고, 대추 농축액이 각각 0중량부, 1중량부, 2중량부, 3중량부 및 4중량부 첨가되도록 하여 용액을 제조하였다.
상기와 같이 제조된 음료의 관능검사 결과를 아래 표 8에 나타내었다.
대추 농축액 색 향 맛 종합기호도
0중량부 4.27±1.28 3.73±0.96 4.27±0.88 4.27±0.88
1중량부 4.53±1.13 4.40±0.83 4.27±0.96 4.73±0.80
2중량부 5.00±0.93 4.60±0.83 4.87±0.83 4.93±0.88
3중량부 5.07±0.88 4.67±0.82 4.13±0.99 4.67±1.11
4중량부 4.73±0.88 4.00±1.13 3.73±1.49 3.93±1.49
5중량부 5.00±0.93 4.07±1.10 3.53±1.46 3.73±1.58
F 값 1.469 2.248 2.551 2.528
표 8을 참조하면, 전체 용액 100중량부에 대하여 대추 농축액이 각각 0중량부, 1중량부, 2중량부, 3중량부 및 4중량부 첨가되도록 한 각각의 음료는 색과 향에서는 유의적 차이가 없었으나, 맛에서는 대추 농축액 첨가량이 증가할수록 점수가 낮아지는 것을 확인할 수 있었다. 종합적인 기호도도 맛과 비슷한 경향이 나타났으나 대추 농축액을 2중량부 첨가한 음료가 가장 좋았으며 95%에서 유의성이 있었다.
실시예 7. 둥글레 농축액 첨가량에 따른 관능검사
둥글레 농축액 첨가량에 따른 관능검사를 실시하기 위하여, 전체 용액 100중량부에 대하여 잎새버섯 추출물 0.5중량부, 올리고당 10중량부, 녹차 농축액 2중량부 및 대추 농축액 2중량부가 포함되도록 한 다음, 둥글레 농축액이 각각 0중량부, 1중량부, 2중량부 및 3중량부 첨가되도록 하여 각각의 음료를 제조하였다.
상기와 같이 제조된 음료의 관능검사 결과를 아래 표 9에 나타내었다.
둥글레 농축액 색 향 맛 종합기호도
0중량부 4.33±0.90 4.33±1.45 3.13±1.19 3.40±1.06
1중량부 4.87±1.25 4.73±0.96 4.67±1.11 5.00±0.93
2중량부 4.47±1.19 4.60±1.24 4.13±1.24 4.33±1.23
3중량부 3.53±1.13 3.80±0.94 2.93±0.80 2.93±0.80
F 값 3.723 1.876 8.392 12.489
표 9를 참조하면, 상기 제조된 각각의 용액 모든 관능검사 항목에서, 전체 용액 100중량부에 대하여 둥글레 농축액이 1중량부 첨가된 음료에서, 가장 높은 수치가 나타났다. 둥글레 농축액의 첨가량이 많을수록 진한 둥글레 향과 맛이 버섯 특유의 향과 섞여 오히려 낮은 점수대가 나타나는 것을 확인할 수 있다. 이에 따라, 둥글레 농축액은 전체 용액 100중량부에 대하여 1중량부 첨가하는 것이 가장 적합한 것으로 판단되었다.
실시예 8. 비타민 C 첨가량에 따른 관능검사
비타민 C 첨가량에 따른 관능검사를 실시하기 위하여, 전체 용액 100중량부에 대하여 잎새버섯 추출물 0.5중량부, 올리고당 10중량부, 녹차 농축액 2중량부, 대추 농축액 1중량부 및 둥글레 농축액 1중량부가 포함되도록 한 다음, 비타민 C가 각각 0, 0.01, 0.05, 0.1, 0.2중량부 첨가되도록 하여 음료를 제조하였다.
상기와 같이 제조된 음료의 관능검사 결과를 아래 표 10에 나타내었다.
비타민 C 색 향 맛 종합기호도
0중량부 4.14±1.17 4.43±1.16 4.57±1.16 4.57±1.02
0.01중량부 4.79±1.05 4.64±1.01 5.00±1.04 4.79±0.80
0.05중량부 4.79±0.97 4.14±0.66 3.79±1.37 4.07±1.07
0.1중량부 4.43±1.02 3.64±0.84 3.14±0.95 3.14±0.77
0.2중량부 4.50±1.02 3.86±1.03 2.50±0.94 2.86±0.66
F 값 0.930 2.545 11.972 13.269
표 10을 참조하면, 전체 용액 100중량부에 대하여 비타민 C를 0.01중량부 첨가한 음료가 다른 음료에 비해 가장 높은 수치를 나타냈으며, 비타민 C의 첨가량이 증가할수록 색을 제외한 모든 항목에서 낮은 점수가 나타났다.
실시예 9. 과일 농축액 첨가량에 따른 관능검사
과일 농축액 첨가량에 따른 관능검사를 실시하기 위하여, 전체 용액 100중량부에 대하여 잎새버섯 추출물 0.5중량부, 올리고당 10중량부, 녹차 농축액 2중량부, 대추 농축액 1중량부, 둥글레 농축액 1중량부 및 비타민 C 0.01중량부가 포함되도록 한 다음, 사과농축액 또는 배농축액이 1.0, 2.0 및 3.0중량부 포함되도록 각각의 음료를 제조하였다.
상기와 같이 제조된 음료의 관능검사 결과를 아래 표 11에 나타내었다.
과일 농축액 색 향 맛 종합기호도
0중량부 5.08±0.86 4.38±1.19 4.31±0.48 4.38±1.12
1.0중량부(배) 4.08±1.39 4.31±1.32 4.62±0.77 3.77±1.09
2.0중량부(배) 4.24±1.17 4.77±1.24 4.77±0.93 4.38±1.19
3.0중량부(배) 4.31±1.03 4.69±1.18 4.23±0.44 4.38±0.87
1.0중량부(사과) 4.38±0.96 4.69±0.85 4.77±0.60 4.69±0.85
2.0중량부(사과) 4.69±1.03 5.46±0.52 5.15±0.55 5.38±0.65
3.0중량부(사과) 4.69±1.11 5.69±0.48 4.61±0.50 4.46±1.05
F 값 1.295 3.425 3.128 3.073
표 11을 참조하면, 상기와 같이 과일 농축액의 첨가량을 달리한 음료에서 색은 과일 농축액을 첨가하지 않은 음료가 과일 농축액을 첨가한 음료보다 점수가 높았으나 95% 유의수준에서 차이는 없었다. 또한, 향은 사과 농축액이 배 농축액보다 높은 점수를 나타내었으며, 첨가량이 증가할수록 점수가 높았다. 맛과 종합적인 기호도에 있어서, 배 농축액보다 사과 농축액이 높은 수치를 나타냈으며, 특히, 사과 농축액 2.0중량부를 첨가한 음료가 가장 점수가 높았다. 사과 농축액 3.0중량부를 첨가한 음료는 향은 좋은 것으로 나타났으나 사과의 신맛이 너무 강하여 오히려 맛과 종합적인 기호도에서는 점수가 낮았다. 관능검사 결과, 전체 음료 100중량부에 대하여 사과 농축액을 2.0중량부 첨가하여 음료를 제조하는 것이 가장 좋은 것으로 판단된다.
실시예 10. 잎새버섯 추출물, 올리고당, 대추농축액, 녹차농축액, 둥글레농 축액, 비타민 C, 사과농축액을 포함하는 음료의 관능검사
상기의 실시예 3 내지 9에서 실시한 관능검사를 토대로, 전체 용액 100중량부에 대하여 잎새버섯 추출물 0.5중량부, 녹차 농축액 2중량부, 대추 농축액 1중량부, 둥글레 농축액 1중량부 및 비타민 C 0.01중량부 포함되도록 한 다음, 최종적으로 첨가되는 당을 재조정하기 위하여, 올리고당이 각각 6, 8, 10, 12중량부 첨가되도록 음료를 제조하였다.
상기와 같이 제조된 각각의 음료를 대상으로 실시한 관능검사의 결과는 다음 표 12에 나타내었다.
올리고당 색 향 맛 종합기호도
6중량부 4.40±1.07 5.00±0.94 4.10±0.88 4.00±0.94
8중량부 4.00±1.15 5.30±0.67 5.30±0.95 5.40±0.52
10중량부 4.10±1.10 4.60±0.97 4.70±0.95 4.60±0.84
12중량부 4.20±1.23 3.90±0.74 3.40±1.07 3.50±0.85
F 값 0.224 5.197 7.119 10.339
표 12에 의하면, 올리고당을 8중량부, 10중량부 첨가한 음료가 모든 항목에서 선호도가 높았으며 이 중 8중량부가 가장 적합한 것으로 조사되었다. 반면에 올리고당 6중량부를 첨가한 음료는 색과 향에서 차이가 없었으나 맛과 기호도 측면에서는 낮은 점수대가 나타났다. 또한, 올리고당 12중량부를 첨가한 음료는 색을 제외한 모든 항목에서 낮은 점수대가 나타났는데 음료로서는 당도가 높은 것을 선호하지 않는다는 것을 알 수 있었다. 이로써, 음료 제조시 각종 첨가제의 첨가에 따라 당도가 변함에 따라 최종적으로 당의 첨가농도를 재조정하는 것이 바람직한 것이며 잎새버섯을 첨가한 음료로는 당의 함량을 8중량부로 조정하는 것이 좋은 것으로 판단된다.
이상과 같이, 본 발명은 비록 한정된 실시예와 도면에 의해 설명되었으나, 본 발명은 이것에 의해 한정되지 않으며 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 본 발명의 기술 사상과 아래에 기재될 청구범위의 균등 범위 내에서 다양한 수정 및 변형이 가능함은 물론이다.
상술한 바와 같이, 본 발명의 건강 음료에 의하면,
간 보호 효과를 갖는 잎새버섯 추출물을 첨가함으로써, 간독소물질으로 인하여 간이 손상되는 것을 예방할 수 있으며, 누구나 쉽게 섭취하도록 할 수 있으며, 그 기호성을 높인 건강 음료를 제공한다.

Claims (5)

  1. 음료 총 100중량부에 대하여, 잎새버섯 물추출물 0.1-4.0중량부, 올리고당 5-20중량부, 대추농축액 1-3중량부, 녹차농축액 1-2중량부, 둥글레농축액 1-2중량부, 비타민C 0.01-0.05중량부 및 사과농축액 0-3중량부를 포함하는 것을 특징으로 하는 건강 음료.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 잎새버섯 물추출물이 잎새버섯 자실체 분쇄물에 물을 가한 후, 40℃의 항온 수조에서 12시간 동안 추출하고, 상기 추출액을 여과한 후 농축기를 이용하여 물을 제거함으로써 얻어진 것을 특징으로 하는 건강음료.
  3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서,
    상기 잎새버섯 물추출물이 0.5-1.0중량부로 포함된 것을 특징으로 하는 건강 음료.
  4. 삭제
  5. 제 3항에 있어서,
    음료 총 100중량부에 대하여, 잎새버섯 물추출물 0.5중량부, 올리고당 8중량부, 대추농축액 1중량부, 녹차농축액 2중량부, 둥글레농축액 1중량부 및 비타민C 0.01중량부를 포함하는 것을 특징으로 하는 건강 음료.
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