KR100617648B1

KR100617648B1 - 혈장 또는 혈청을 함유하는 아벨리노 각막 이영양증 치료용약학 조성물

Info

Publication number: KR100617648B1
Application number: KR1020060018038A
Authority: KR
Inventors: 김응권; 유내춘; 유원민
Original assignee: 김응권; 메디제네스(주)
Priority date: 2005-02-25
Filing date: 2006-02-24
Publication date: 2006-09-05
Also published as: KR20060094904A; WO2006091038A1; US20080299212A1; JP2008531553A

Abstract

본 발명은 아벨리노 각막 이영양증 치료제에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 약제학적으로 유효량의 혈장 또는 혈청을 유효성분으로 함유하는 아벨리노 각막 이영양증 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 따른 약학조성물은 라식수술에 의하여 아벨리노 각막 이영양증이 심화된 환자의 각막 상의 하이알린 과립을 분해하여 증상을 호전시키는 효과가 있다.

아벨리노 각막 이영양증, 혈장, 혈청, 약학 조성물

Description

혈장 또는 혈청을 함유하는 아벨리노 각막 이영양증 치료용 약학 조성물{Pharmaceutical Composition for Treating Avellino Cornea Dystrophy Comprising Blood Plasma or Serum}

도 1은 아벨리노 각막 이영양증 이형접합자의 우측 안구 사진이다.

도 2는 아벨리노 각막 이영양증 환자의 라식수술 후 생성된 각막편을 인산염 완충액(PBS) 및 혈청에 2일간 침지해 둔 상태의 사진(15.75배)이다.

도 3은 환자의 라식수술로 인하여 과립침전물이 심하게 생성된 환자를 대상으로, 각막편 제거전(A), 각막편 제거 직후(B) 및 혈장을 함유하는 액상적하제를 8일간 투여한 후(C)의 사진이다.

도 4는 환자의 라식수술로 인하여 과립침전물이 심하게 생성된 환자를 대상으로, 각막편 제거전(좌), 액상적하제를 투여한 후 (우)의 사진이다.

본 발명은 아벨리노 각막 이영양증 치료제에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 약제학적으로 유효량의 혈장 또는 혈청을 활성성분으로 함유하는 아벨리노 각막 이영양증 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.

아벨리노 각막 이영양증 (Avellino corneal dystrophy)은 눈의 각막속에 하이알린이라는 하얀 물질이 반점을 형성하면서 각막이 혼탁해져 점차 시력이 약화되고 실명에 이르게되는 유전병이다 (도 1). 이 병은 βIG-H3 유전자에서 124번 아미노산에 해당하는 코돈 CGC(아르기닌)가 CAC(히스티딘)로의 점 돌연변이에 의해 발생한다 (Munier, F.L. et al., Nat. Genet., 15:247, 1997). 이러한 이상 유전자를 가지고 있으면 100% 증상이 나타나며, 대부분 청소년기부터 증상이 시작된다. 최근에는 라식 수술이 보편화되고 자외선 등으로 각막이 손상되는 경우가 잦아지고, 급격히 병이 진행되어 널리 알려지게 됐다.

아벨리노 각막 이영양증은 1988년 처음 알려진 이후 (Holland, E.J. et al., Ophthalmology, 99:1564,1992; Kennedy, S.M. et al., Br. J. Ophthalmol., 80:489,1996; Dolmetsch, A.M. et al., Can. J. Ophthalmol. 31:29, 1996; Afshari N. A. et al., Arch. Ophthalmol., 119:16, 2001; Stewart H. S., Hum. Mutat., 14:126, 1999), 최근에 이르러 βIG-H3 단백질에 대한 생화학적 연구 결과들이 보고되고 있다(Kim, J.E. et al., Investigative Ophthalmology & Visual Science, 43:3, 2002; Park, S.J. et al., Peptides, 25:199, 2004). 그러나, 지금까지 뚜렷한 치료제가 개발되지 않고 있다. 게다가, 본 발명자에 의해 처음으로 밝혀진 바에 따르면 라식 수술을 받은 환자가 아벨리노 각막 이영양증의 Heterozygote인 경우, 발병하거나 급격히 진행되는 것으로 나타났다(Kim, E.K. et al., Cornea, 21:223, 2002; Kim, E.K. et al., Ophthalmology, 111:463, 2004).

따라서, 아벨리노 각막 이영양증을 치료할 수 있는 약물 및/또는 치료법의 개발이 시급히 요구되고 있는 실정이나, 아직까지 이에 대한 보고는 없는 실정이다.

이에, 본 발명자들은 효과적인 아벨리노 각막 이영양증 치료를 위한 약제를 개발하고자 예의 노력한 결과, 혈액 속의 혈장 또는 혈청을 아벨리노 환자의 각막 절단면에 투여한 경우, 환자의 각막 상의 하이알린 과립이 효과적으로 분해되는 것을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명의 목적은 아벨리노 각막 이영양증 환자의 각막에 투여하여 하이알린 과립을 효과적으로 제거할 수 있는 아벨리노 각막 이영양증 치료용 약학 조성물을 제공하는데 있다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 약제학적으로 유효량의 혈장 또는 혈청을 유효성분으로 함유하는 아벨리노 각막 이영양증 치료용 약학 조성물을 제공한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명에서는 바이러스 불활성화 처리를 거친 혈장 또는 혈청을 포함하는 액상적하제를 제조하고, 상기 액상적하제를 라식 수술 후 아벨리노 각막 이영양증이 심화된 환자의 각막편을 제거한 각막 절단면에 투여하여, 환자의 각막 상의 백색의 하이알린 과립이 용해되어 없어지는 것을 확인하고, 혈장 또는 혈청의 아벨리노 각막 이영양증 치료제로서의 용도를 확인하였다.

혈장(blood plasma)은 전형적으로 포유동물의 혈액 속의 유형 성분, 즉 세포 및 세포 단편이 분리된 담황색의 액체 성분을 가리키며, 그 성분은 여러 문헌을 통하여 잘 알려져 있다(Westerman, P., Plasma Proteins,VII-1 to VII-13, 2002; 및 Wendy, Y.C. et al., Plasma Proteins Pocket Guide, Foundation for Blood Research- 이들의 문헌의 전체 내용은 본원에 참고로 원용된다).

본 발명에서 활성 성분으로 사용하는 혈청(blood serum)은 일반적으로는 혈장에서 피브리노겐과 기타 응고 인자가 제거된 부분을 의미한다.

본 발명에서 활성성분으로 사용하는 혈장 또는 혈청은 사람을 포함한 포유동물의 모든 종의 혈액에서 분리된 것을 포함하며, 예를 들면 양, 염소, 돼지, 말, 개, 소 등을 포함한 가축, 기타 영장류, 설치류 등의 혈액에서 분리된 것을 포함한다.

본 발명에서 혈장 또는 혈청은 잘 알려진 통상의 방법, 예를 들면 원심분리, 침강 또는 여과법에 의해 혈액으로부터 쉽게 분리할 수 있다. 원심분리는 혈장으로부터 혈액 세포를 침강시키는데 적합한 조건하에서 실시할 수 있다. 예를 들면, 혈액을 약 1,400g에서 약 10분 동안 원심분리하며, 혈구 및 백혈구뿐만 아니라 실질 적으로 혈소판을 포함하는 모든 세포단편을 침전시키는데 충분하다. 혈장을 함유한 상등액은 표준 기술에 의해 침강된 세포로부터 쉽게 분리할 수 있다.

상기 여과법은 혈액을 혈장으로부터 혈액 세포를 분리하기에 적합한 필터에 통과시킴으로써 수행할 수 있으며, 상기 필터는 단백질을 용이하게 투과시킬 수 있는 미세공 막인 것이 바람직하다.

혈장 또는 혈청은 채혈 후 원심분리 또는 침전시켜 얻은 신선액상혈장 상태 또는 액상제제 상태 이외에, 사용하기 전에 여러 상태로 보존하는 방법이 알려져 있으며, 예로는 신선동결제제, 동결침전제제, 동결건조제제 또는 농축제제 등의 형태를 들 수 있다. 본 발명에서는 상기와 같은 모든 형태의 혈장 또는 혈청을 사용할 수 있다.

신선동결혈장은 채혈 후 6시간 이내의 혈액을 약 1,400g에서 약 15분간 원심분리하여 혈액세포와 혈장 성분을 분리하고 약 -40~-18℃의 온도에서 동결시켜 제조한 것으로 사용 시에는 약 30℃~37℃의 온수에서 해동시켜 사용하는 것이 바람직하다.

동결침전혈장은 신선동결혈장 1단위를 약 4℃에서 녹였을 때 생기는 흰색 침전물(cold precipitated protein)(VIII:C, 피브리노겐, XIII, 피브로넥틴 등과 같은 많은 양의 인자를 포함함)을 제거한 후, 약 -40~-18℃의 온도로 재동결시킨 것이다.

동결침전제제는 1~6℃의 냉장고에서 하룻밤 방치하여 해동시키거나 또는 약 4℃ 수조에서 보다 빠르게 해동시켜 사용할 수 있다. 농축혈장은 혈액으로부터 혈 장을 분리하고, 분리된 혈장을 덱스트라노머, 세파덱스(SEPHADEX), 덱스트라민, 폴리아크릴아미드, 바이오-겔(BIO-GEL) P, 실리카 겔, 제올라이트, 데브리산(DEBRISAN), 가교된 아가로즈, 전분 또는 알기네이트 겔과 같은 농축제와 혼합하여 농축시킨 후 농축된 혈장으로부터 농축제를 분리하여 사용한다.

본 발명의 한 양태로서, 혈장 또는 혈청은 혈액 은행에서 상업적으로 시판하고 있는 것을 사용할 수 있다. 예를 들면, 혈액 은행에서 상업적으로 시판하고 있는 분말상 제제, Invitrogen Corporation의 액상 제제(예, Gibco^TM Chicken Serum, Gibco^TMGoat Serum, Gibco^TM Lamb Serum, Gibco^TM Porcine Serum, Gibco^TM Rabbit Serum) 또는 Gemini Bio-Products(미국)의 혈청제제(예, Chicken Serum(Cat.#100-161), Dog Serum(Cat.#100-160), Donor Donkey Serum(Cat.#100-151), Donor Goat Serum(Cat.#100-109), Donor Rat Serum(Cat.#100-155), Feline Serum(Cat.100-153), Guinea Pig Serum(Cat.#100-130), Monkey Serum(Cat.#100-154), Mouse Serum(Cat#100-113), Porcine Serum(Cat.#100-115), Rabbit Serum(Cat.#100-116), Rat Serum(Cat.#100-150) 또는 Sheep Serum(Cat.#100-117)을 사용할 수 있다. 이러한 제품은 여러 항원 항체, 예를 들면 B형 간염 표면항원(HBsAg) 및 C형 간염(HCV) 항체에 대해 비반응성이고 HIV-1 및 HIV-2에 대한 항체에 대해 음성인 것으로 시험결과 확인된 것이다. 이러한 제제를 제조하는데 사용되는 모든 혈장 단위들은 사전에 병원성이 없음이 검증되고 있다.

상기 제제들을 제외한 혈장 또는 혈장을 사용할 경우에는, 병원균의 잠복적 인 전파 위험성을 줄이기 위해서, 혈청 또는 혈청에 존재하는 HIV, B형 간염 바이러스 및 HCV와 같은 외피 바이러스를 불활성화시키는 것이 바람직하다. 혈장을 불활성화시키는 방법 중 범용적인 방법으로는 파스테라이제이션, 건조 열 처리, 증기처리, 트리(n-부틸)/포스페이트/폴리솔베이트 80과 같은 유기용매/세정제 처리, 낮은 pH(pH 4), 냉 에탄올 분획법(cold ethanol fractionation), 크로마토그래피, 나노여과 등이 사용되고 있으며, 최근에는 UV 등의 광 조사, 감마선 조사, 요오드 처리 등의 방법도 개발되고 있다. 바람직하게는, 혈장단위에 감마선조사, 메틸렌블루 광처리 및 증기처리를 단계적으로 연속하여 실시하여 혈장 내에 존재할 수 있는 바이러스를 불활성화시킨 후 사용하는 것이 바람직하다.

본 발명에서 사용되는 혈장 또는 혈청 분획은 가열, 동결건조 또는 기타 적합한 건조 기술에 의해 분말화된 것을 사용할 수 있다. 예를 들면, 혈장을 수일 동안(예, 약 7일 동안) -40℃ 미만의 온도에서 동결건조시켜 분말화하여 사용할 수 있다.

본 발명에 따른 혈장 또는 혈청은 액상 또는 분말상으로서 안구에 직접 적용될 수 있다. 한 양태로서, 본 발명에 따른 약학 조성물은 혈장 분말과 생리식염수를 일정한 부피비로 혼합하고 pH를 3.5 내지 8.0으로 조절하여 액상의 형태로 제형화할 수 있다. 이러한 제형은 모든 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌[Remington's Pharmaceutical Science, 15th Edition, 1975, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania 18042(Chapter 87: Blaug, Seymour)에 기술되어 있다.

추가의 관점으로서, 본 발명은 안과적으로 허용되는 담체와 함께, 약제학적으로 유효한 양의 혈청을 함유함을 특징으로 하는 약학 조성물을 제공한다.

본 발명의 약학 조성물은 완충제, 항균성 보존제, 계면활성제, 추가의 약제, 산화방지제, 긴장성 조정제, 방부제, 증점제 또는 점도 개질제 등을 포함하는 보조제 등의 성분을 함유할 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 완충제는 안과용 액제의 다른 성분과 조화되며 눈을 해칠 수 있는 해로운 특성 또는 독성을 나타내지 않는 적절한 완충제이면 어느 것이나 사용할 수 있다. 적절한 완충제의 예로는 붕산, 붕산나트륨, 인산나트륨(1 염기성 인산나트륨 1 수화물, 2 염기성 인산나트륨 7 수화물과 같은 1,2 및 3 염기성 인산염 및 이들의 혼합물을 포함)이 있다. 안과용 액제에 허용되는 생리학적 pH를 부여하도록 안과용 액제의 pH를 안정화시키기 위하여 어떤 다른 적절한 완충제든지 사용할 수 있다. 전술한 완충제는 단지 예를 든것뿐으로, 이러한 완충제는 안학 분야에 잘 알려져 있으므로, 당업자는 본 발명의 조성물에 사용될 수 있는 완충제를 적절히 선택할 수 있을 것이다.

본 발명에 있어서, 상기 항균성 보존제의 바람직한 예로는 벤즈알코늄 클로라이드, 티머로살(timerosal), 클로로부탄올, 메틸 파라벤, 프로필파라벤, 페닐에틸 알코올, 에데테이트 디소듐, 솔빅산, 오나머M(ONAMER M) 등이 포함한다.

특별히, 본 발명의 약학 조성물은 보존제로서 벤즈알코늄 클로라이드(BAK)를 사용하는 것이 바람직하다. 벤즈알코늄 클로라이드는 보존제의 역할 이외에 각막상피세포의 경계를 약화시키는 작용을 함으로써 혈청의 각막 침투를 용이하게 하여 각막 내의 하이알린을 분해할 수 있는 가능성을 높여주기 때문이다. 상기와 같은 보존제들은 통상적으로 조성물의 전체 중량을 기준으로 약 0.001중량%∼1.0중량%의 양으로 사용하는 것이 바람직하며, 특히, 벤즈알코늄 클로라이드의 경우는 약 0.01중량%~0.10 중량%로 첨가하는 것이 바람직하다.

본 발명의 약학 조성물은 당업자가 쉽게 인지할 수 있듯이 용액, 현탁액, 에멀션, 겔 및 고체 형태의 눈에 대한 삽입물 등과 같은 다양한 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물의 pH는 눈 유액의 pH 값에 거의 상응하도록 하거나 어떠한 불편 또는 염증도 일으키지 않으면서 눈이 내성을 가질 수 있도록 pH 6.8∼8.0인 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 약 pH 7.0~7.8이다. 안과용 액제를 목적하는 pH에서 안정화시키기 위하여, 유효한 소수량의 상기 완충제를 혼입시킨다. 약 6.8~8의 pH에서 안과용 액제를 완충시키기 위해 사용하는 완충제의 유효한 투입량은 광범위하게 변동될 수 있으며, 사용되는 특정 완충제 및 약학 조성물의 화학적 조성에 따라 결정될 것이다. 그러나, 허용되는 생리학적 pH에서 이 액제를 안정화시키기 위하여 안과용 수용액제 중에 혼입되는 완충제의 양이 약 0.05 내지 약 1 중량/용량%의 완충제일 때 바람직한 결과를 얻을 수 있다.

본 발명의 약학 조성물의 삼투압(π)은 일반적으로 약 1(mOsM) ~ 약 400밀리오스몰(mOsM)인 것이 바람직하고, 더욱 바람직하게는 260~340mOsM 인 것이 바람직하다. 필요한 경우, 삼투압은 적절한 양의 생리학적 및 안과적으로 허용되는 염 또는 부형제를 사용하여 조정할 수 있다. 염화나트륨이 생리액에 접근시키기에 적합 하며, 첨가되는 염화나트륨의 양은 조성물의 전체 중량을 기준으로 하여 약 0.01 ~1중량%인 것이 바람직하고, 더욱 바람직하게는 약 0.05~0.45중량% 범위로 첨가되는 것이 바람직하다. 상기 범위 내의 삼투농도를 달성하기 위하여, 염화나트륨과 함께, 또는 염화나트륨을 대신하여, 칼륨, 암모늄 등과 같은 양이온 및 클로라이드, 시트레이트, 아스코르베이트, 보레이트, 포스페이트, 바이카보네이트, 설페이트, 티오설페이트, 바이설페이트, 소듐바이설페이트, 암모늄설페이트 등과 같은 음이온으로 구성된 등가량의 하나 이상의 염도 사용될 수 있다. 또한, 삼투농도를 조정할 목적으로 만니톨, 덴스트로스, 소르비톨, 글루코오스 등과 같은 당도 사용될 수 있다.

본 발명에서 혈장 또는 혈청을 희석하기 위하여 사용되는 물은 생리학적 또는 안과적으로 유해한 어떠한 성분도 지니고 있지 않은 물을 사용한다. 전형적으로, 정화수 또는 탈염수가 사용된다.

본 발명의 약학 조성물은 아벨리노증을 나타내는 환자의 환부에 매시간 마다 또는 2시간 간격으로 일일 16회 내지 8회(수면시간 제외) 직접 투여하는 것이 바람직하며, 1회 투여량은 20~200μl인 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 40~100μl인 것이 바람직하다.

한 양태에서, 본 발명의 약학 조성물에 사용된 동결건조된 혈청 또는 혈장의 유효량은 중량을 기준으로 약 0.001 내지 90%로 사용할 수 있으며, 바람직하게는 0.005~50%를 사용할 수 있다.

본 발명의 또 다른 양태에서, 본 발명의 약학 조성물에서 상업적으로 판매되는 혈청 또는 혈장을 사용할 경우, 중량을 기준으로 1~95%(V/V)로 사용할 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

또한, 하기 실험실시예에서는 아벨리노 각막 이영양증 환자의 각막편을 제거하고 그 절삭면에 혈장 또는 혈청을 포함하는 약학 조성물을 투여하였으나, 각막 절삭면을 주변에서 자란 상피가 덮히는 3일이 지난 후에도 지속적인 하이알린 과립용해 효과를 나타내는 것을 볼 때, 각막편 제거 시술을 하지 않은 환자에게도 효과가 있을 수 있다는 것은 당업계에 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

실시예 1. 전혈로부터 액상혈장의 분리

HIV, HCV 및 HBV를 포함한 가능한 병원체에 대해 검사 결과 음성으로 판정을 받은 사람 유래의 신선한 혈액(중앙 혈액원)을 30℃의 수조에서 해동시킨 다음, 3000rpm에서 10분간 원심분리하여 적혈구 및 백혈구 등의 침전물을 제외한 상층의 담황색의 혈장을 분리하였다.

실시예 2. 전혈로부터 액상혈청의 분리

HIV, HCV 및 HBV를 포함한 가능한 병원체에 대해 검사 결과 음성으로 판정을 받은 사람 유래의 신선한 혈액을 EDTA나 헤파긴 등의 항응고제가 첨가되지 않은 유리 튜브에 수집하였다. 상기 혈액을 4℃에서 하룻밤 정치하고, 생성된 응고덩어리(clot)를 파스퇴르 피펫을 사용하여 제거하였다. 덩어리가 제거된 혈액을 4℃, 4000rpm에서 20분간 원심분리하여 상층액의 혈청을 분리하였다.

실시예 3. 혈장 및 혈청의 바이러스 불활성화

상기 얻어진 혈장 또는 혈청은 다음의 세가지 방법을 연속적으로 실시하여 혈장 또는 혈청 내에 존재할 수 있는 바이러스를 불활성화시켰다.

(a) 감마선 조사

액체혈장 또는 혈청은 15℃에서 코발트 원 ⁶⁰Co를 사용하여 1.8kGy/hr의 강도로 총 25kGy의 감마선을 조사하였다.

(b) 메틸렌블루 광처리

감마선 조사된 액체혈장 또는 혈청에 최종 농도 1μM 농도로 메틸렌블루(Methylene blue)를 첨가하고, 60,000 lux에서 1시간 동안 백색광을 조사하였다. 잔여 메틸렌블루는 여과하여 제거하였으며, -80℃에서 8시간 동안 동결시키고, -48℃에서 7일 동안 건조하여 동결건조하였다.

(c) 증기처리

동결건조된 혈장 또는 혈청은 체로 거르고, 분쇄하여 균질화시킨 후, 스텐레스스틸 탱크에서 수분 함량이 8%(w/w)가 되도록 수증기를 천천히 주입시켰다. 상기 수증기 처리된 혈장을 건조 질소로 충진된 스텐레스스틸 실린더로 옮겨 산소를 제거한 후, 60℃에서 10시간동안 가열하였다.

실시예 4. 아벨리노증 치료용 액상 적하제의 제조

실시예 3에서 바이러스 불활성화 처리된 혈장 또는 혈청은 생리식염수와 10:1의 부피비로 혼합한 다음, 상기 용액을 표 1에 나타낸 액상 적하제에 적정량 첨가하였다. 상기 액상적하제의 pH는 1N HCl(염산) 또는 1N NaOH(수산화나트륨)를 이용하여 pH 7.4로 조절하였다.

사용하고 남은 적하제는 동결건조 병, 바이알, 용기, 트레이 또는 기타 저장 용기에 담아 냉동 보존하였다.

혈장 또는 혈청을 유효성분으로 하는 아벨리노 각막 이영양증 치료용 액상적하제의 성분

성분	중량%
혈장 용액 또는 혈청 용액 (10%)	50
벤즈알코늄 클로라이드(BAK)(50%)	0.02
붕산나트륨	0.035
염화나트륨(NaCl)	0.096
염화칼륨(KCl)	0.097
EDTA	0.030
정제수	100%가 될때까지의 적정량

실험 실시예 1. 아벨리노 각막 이영양증 치료용 액상적하제의 과립침전물 제거효과

LASIK후 각막편(corneal flap)과 절삭면(stromal bed)사이에 백색의 과립형 침전물(granular corneal opacities)이 존재하는 환자로부터 말초 혈액을 채혈한 후 문헌(Wan, X.H., et al., Cornea 21:223-6, 2002)에 기술된 바와 같이 DNA 분석을 수행하였다. TGFBI 유전자의 엑손 4 서열 분석을 통해 R124H 돌연변이를 갖는 아벨리노 각막 이영양증 유전자에 대해 이형접합자(heterozygote)임을 확인하였다.

상기 아벨리노 각막 이영양증 환자로부터 얻은 각막편을 인산염 완충액 및 실시예 4의 혈청희석액에 2일간 침지해 두었다. 도 2의 A는 인산염 완충액중의 각막편 상태를 촬영한 사진이고, B는 실시예 4의 혈청희석액에서의 각막편 상태를 촬영한 사진이다. 도 2에 나타난 바와 같이, 인산염 완충액중의 각막편에는 백색 하이알린 침전물이 그대로 존재하는 반면, 혈청 희석액중의 각막편에서 상당히 많은 양의 백색 하이알린 침전물이 분해 제거된 것을 알 수 있었다.

실험 실시예 2. 아벨리노 각막 이영양증 치료용 액상적하제의 치료효과

환자의 안구에서 각막편을 제거하여 절삭면(posterior remaining stromal surface)을 노출시키고, 환자의 노출된 각막 절삭면에 상기 실시예 4에서 제조한 혈장 또는 혈청을 함유하는 액상적하제 1 방울(약 50μl) 또는 2 방울을 1시간마다 1번씩 20일간 적하하였으며, 수면시간은 적하하지 않았다.

각막 상피가 성장하여 노출된 절삭면을 주변에서 자란 상피가 덮는 데는 3일 걸렸다. 상피가 덮이고 17일간 더 적하하였으며 효과가 지속적으로 있음을 확인하였다.

도 3은 환자의 라식수술로 인하여 과립침전물이 심하게 생성된 환자를 대상으로, 각막편 제거전(A), 각막편 제거 직후(B) 및 혈장을 함유하는 액상적하제를 8일간 투여한 후(C)의 결과를 나타낸 사진으로, 도시된 바와 같이, 라식 수술 후 많은 양의 백색의 과립침전물이 각막에 존재하고 있던 환자의 각막편을 제거한 후 혈장을 함유하는 액상적하제를 투여하자, 과립침전물이 현저히 감소하였다는 것을 알 수 있었다.

도 4는 환자의 라식수술로 인하여 과립침전물이 심하게 생성된 환자를 대상으로, 각막편 제거전(좌), 혈청을 함유하는 액상적하제를 투여 한 후 (우)의 결과를 나타낸 사진이다. 도 4의 첫번째 칼럼은 37세 여자 환자의 좌안사진으로, 우측은 각막편 제거전 사진이고, 좌측은 각막편 제거 후 혈청을 함유하는 액상적하제를 3일간 투여한 후의 안구사진이다. 도 4의 두번째 칼럼은 32세 여자 환자의 우안사진으로, 우측은 각막편 제거전 사진이고, 좌측은 각막편 제거 후 혈청을 함유하는 액상적하제를 12일간 투여한 후의 안구사진이다. 도 4의 세번째 칼럼은 36세 남자 환자의 좌안사진으로, 우측은 각막편 제거전 사진이고, 좌측은 각막편 제거 후 혈청을 함유하는 액상적하제를 19일간 투여한 후의 안구사진이다. 도시된 바와 같이, 라식 수술 후 많은 양의 백색의 과립침전물이 각막에 존재하고 있던 환자의 각막편을 제거 후 혈청을 함유하는 액상적하제를 투여하자, 과립침전물이 현저히 감소하는 것을 알 수 있었다.

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당 업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시예일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

이상에서 상세히 설명한 바와 같이, 본 발명은 아벨리노 각막 이영양증 환자의 각막에 투여하여 하이알린 과립을 효과적으로 제거할 수 있는 아벨리노 각막 이영양증 치료용 약학 조성물을 제공하는 효과가 있다.

Claims

약제학적으로 유효량의 혈장 또는 혈청을 유효성분으로 함유하는 아벨리노 각막 이영양증 치료용 약학 조성물.
제1항에 있어서, 완충제, 항균성 보존제, 계면활성제, 산화방지제, 삼투압조정제, 방부제, 증점제 및 점도 개질제로 구성된 군에서 선택된 어느 하나 이상의 보조제를 추가로 함유하는 약학 조성물.
제2항에 있어서, 항균성 보존제는 벤즈알코늄 클로라이드, 티머로살(timerosal), 클로로부탄올, 메틸 파라벤, 프로필파라벤, 페닐에틸 알코올, 에데테이트 디소듐, 솔빅산 및 오나머 M(ONAMER M)으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
제3항에 있어서, 항균성 보존제는 벤즈알코늄 클로라이드인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
제1항에 있어서, 혈장 또는 혈청은 감마선조사, 메틸렌블루 광처리 및 증기처리로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상의 바이러스 불활성화법에 의해 처리된 것임을 특징으로 하는 약학 조성물.
제1항에 있어서, 혈장 또는 혈청은 동결건조된 것임을 특징으로 하는 약학 조성물.
제6항에 있어서, 동결건조된 혈장 또는 혈청의 함유량은 0.005~50중량%인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
제1항에 있어서, 용액, 현탁액, 에멀션, 겔 및 분말로 구성된 군에서 선택되는 제형을 가지는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.