JPWO2021132576A5 - - Google Patents

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Claims (5)

  1. a)試料中プラズモン金属メソ結晶領域を有する測定基板を用い、体液または細胞を含む培養液をそのまま又は希釈して作成した検体を接触させ、検体中のアポトーシス後の断片化DNA(細分化ヌクレオソーム)を疾病関連物質としてプラズモン金属メソ結晶に電荷捕捉させる工程と、b)このプラズモン金属メソ結晶上の捕捉された断片化DNA(細分化ヌクレオソーム)に励起光を照射して、その自家蛍光を表面プラズモン増強効果により増強し、断片化DNA(細分化ヌクレオソーム)の蛍光コロニーの蛍光画像を一定の測定領域(ROI)を決め、ブルーB波長領域の蛍光コロニー画像を悪性腫瘍に関する値として取得する工程と、c)該蛍光コロニー画像の所定の閾値以上の輝度を示すピクセルを採択する工程と、d)採択された測定領域の所定のブルーB波長領域での所定の閾値以上のピクセルの総面積値を演算する工程を含むことを特徴とする自家蛍光によるリキッド・バイオプシィ法。
  2. (削除)
  3. a)試料中プラズモン金属メソ結晶領域を有する測定基板を用い、体液または細胞を含む培養液をそのまま又は希釈して作成した検体を接触させ、検体中のアポトーシス後の断片化DNA(細分化ヌクレオソーム)を疾病関連物質としてプラズモン金属メソ結晶に電荷捕捉させる工程と、b)このプラズモン金属メソ結晶上の捕捉された断片化DNA(細分化ヌクレオソーム)に励起光を照射して、その自家蛍光を表面プラズモン増強効果により増強し、断片化DNA(細分化ヌクレオソーム)の蛍光コロニーの蛍光画像を一定の測定領域(ROI)を決め、ブルーB波長領域の蛍光コロニー画像を悪性腫瘍に関する値として及びグリーンG波長領域の蛍光コロニー画像を良性腫瘍に関する値として取得する工程と、c)該蛍光コロニー画像の所定の閾値以上の輝度を示すピクセルを採択する工程と、d)採択された測定領域の所定のB波長領域およびG波長領域での所定の閾値以上のピクセルの総面積値を求め、総面積値のRatioであるB/G又はG/B値を演算する工程を含むことを特徴とする自家蛍光によるリキッド・バイオプシィ法。
  4. 所定の閾値以上のピクセルの総面積値のB領域/G領域のRatio値で、悪性腫瘍で1.9から2.0の幅を持ち、健常者で0.2から0.8、良性腫瘍で0.1前後である請求項3記載のリキッド・バイオプシィ法。
  5. 捕捉した断片化DNA(細分化ヌクレオソーム)がメチル化されたガン抑制遺伝子、高メチル化したRB遺伝子、p16以外にp14、p53等を含む請求項1記載のリキッド・バイオプシィ法。
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