JPWO2015002082A1 - 画像処理装置、病理診断支援システム、画像処理プログラム及び病理診断支援方法 - Google Patents
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Abstract
Description
この点、本発明者が特許文献3の技術について検討を重ねたところ、上記の通り、通常、細胞形態画像と蛍光画像全体とを重ね合わせる場合、基本的には位置合わせのズレは大きな問題にならなかったが、細胞核のみを観察対象とする場合には、特に位置合わせが重要となることがわかってきた。すなわち、細胞形態画像から抽出した観察対象細胞(観察すべき細胞核)は非常に小さい場合が多く、そこでの特定のタンパク質の発現を正確に定量するためには、極めて正確に画像を位置合わせする必要があることがわかってきており、観察対象細胞内での特定のタンパク質の発現を正確に定量しうるさらなる改良が望まれる。
組織切片における細胞の形態を表す細胞形態画像と、前記組織切片の同一範囲における特定タンパクの発現を蛍光輝点で表す蛍光画像とを入力する入力手段と、
前記細胞形態画像と前記蛍光画像とで共通に検出される情報源に基づき、前記細胞形態画像と前記蛍光画像とを位置合わせする位置合わせ手段と、
を備えることを特徴とする画像処理装置が提供される。
前記画像処理装置と、
前記画像処理装置で使用される、前記細胞形態画像と前記蛍光画像とを取得する画像取得装置と、
を備えることを特徴とする病理診断支援システムが提供される。
コンピュータを、
組織切片における細胞の形態を表す細胞形態画像と、前記組織切片の同一範囲における特定タンパクの発現を蛍光輝点で表す蛍光画像とを入力する入力手段、
前記細胞形態画像と前記蛍光画像とで共通に検出される情報源に基づき、前記細胞形態画像と前記蛍光画像とを位置合わせする位置合わせ手段、
として機能させるための画像処理プログラムが提供される。
組織切片における細胞の形態を表す細胞形態画像と、前記組織切片の同一範囲における特定タンパクの発現を蛍光輝点で表す蛍光画像とを用いる病理診断支援方法であって、
前記細胞形態画像と前記蛍光画像とで共通に検出される一定の染色試薬で前記組織切片を染色する工程と、
染色後の前記組織切片から、前記細胞形態画像と前記蛍光画像とを取得する工程と、
前記一定の染色試薬による染色情報に基づき、前記細胞形態画像と前記蛍光画像とを位置合わせする工程と、
を有することを特徴とする病理診断支援方法が提供される。
図1に、本実施の形態における病理診断支援システム100の全体構成例を示す。病理診断支援システム100は、所定の染色試薬で染色された人体の組織切片の顕微鏡画像を取得し、取得された顕微鏡画像を解析することにより、観察対象の組織切片における特定の生体物質の発現を定量的に表す特徴量を出力するシステムである。
顕微鏡画像取得装置1Aは、照射手段、結像手段、撮像手段、通信I/F等を備えて構成されている。照射手段は、光源、フィルター等により構成され、スライド固定ステージに載置されたスライド上の組織切片に光を照射する。結像手段は、接眼レンズ、対物レンズ等により構成され、照射した光によりスライド上の組織切片から発せられる透過光、反射光、又は蛍光を結像する。撮像手段は、CCD(Charge Coupled Device)センサー等を備え、結像手段により結像面に結像される像を撮像して顕微鏡画像のデジタル画像データを生成する顕微鏡設置カメラである。通信I/Fは、生成された顕微鏡画像の画像データを画像処理装置2Aに送信する。本実施の形態において、顕微鏡画像取得装置1Aは、明視野観察に適した照射手段及び結像手段を組み合わせた明視野ユニット、蛍光観察に適した照射手段及び結像手段を組み合わせた蛍光ユニットが備えられており、ユニットを切り替えることにより明視野/蛍光を切り替えることが可能である。
図2に、画像処理装置2Aの機能構成例を示す。図2に示すように、画像処理装置2Aは、制御部21、操作部22、表示部23、通信I/F24、記憶部25等を備えて構成され、各部はバス26を介して接続されている。
その他、画像処理装置2Aは、LANアダプターやルーター等を備え、LAN等の通信ネットワークを介して外部機器と接続される構成としてもよい。
明視野画像は、HE(ヘマトキシリン−エオジン)染色試薬を用いて染色された組織切片を、顕微鏡画像取得装置1Aにおいて明視野で拡大結像及び撮影することにより得られる顕微鏡画像である。ヘマトキシリンは青紫色の色素であり、細胞核、骨組織、軟骨組織の一部、漿液成分など(好塩基性の組織等)を染色する。エオジンは赤〜ピンク色の色素であり、細胞質、軟部組織の結合組織、赤血球、線維素、内分泌顆粒など(好酸性の組織等)を染色する。図3に、HE染色を行った組織切片を撮影した明視野画像の一例を示す。図3に示すように、HE染色を行った組織切片を撮影した明視野画像においては、組織切片における細胞の形態が表れている。すなわち、明視野画像は組織切片における細胞の形態を表す細胞形態画像である。かかる明視野画像では、細胞核は、周囲の細胞質よりも濃い色(青紫色)で周囲と区別して表れており、細胞核の形態をはっきり捉えることができる。
蛍光画像は、特定の生体物質と特異的に結合及び/又は反応する生体物質認識部位が結合した蛍光物質を内包したナノ粒子(蛍光物質内包ナノ粒子と呼ぶ)を含む染色試薬を用いて染色された組織切片に対し、顕微鏡画像取得装置1Aにおいて所定波長の励起光を照射して蛍光物質内包ナノ粒子を発光(蛍光)させ、この蛍光を拡大結像及び撮影することにより得られる顕微鏡画像である。即ち、蛍光画像に現れる蛍光は、組織切片における、生体物質認識部位に対応する特定の生体物質の発現を示すものである。図4に、蛍光画像の一例を示す。
ここで、蛍光画像の取得方法について、この蛍光画像の取得に際して用いられる染色試薬(蛍光物質内包ナノ粒子)、染色試薬による組織切片の染色方法等も含めて詳細に説明する。
蛍光画像の取得のための染色試薬に用いられる蛍光物質としては、蛍光有機色素及び量子ドット(半導体粒子)を挙げることができる。200〜700nmの範囲内の波長の紫外〜近赤外光により励起されたときに、400〜1100nmの範囲内の波長の可視〜近赤外光の発光を示すことが好ましい。
量子ドットは必要に応じて、有機ポリマー等により表面処理が施されているものを用いてもよい。例えば、表面カルボキシ基を有するCdSe/ZnS(インビトロジェン社製)、表面アミノ基を有するCdSe/ZnS(インビトロジェン社製)等が挙げられる。
本実施の形態において蛍光物質内包ナノ粒子とは、蛍光物質がナノ粒子内部に分散されたものをいい、蛍光物質とナノ粒子自体とが化学的に結合していても、結合していなくてもよい。
ナノ粒子を構成する素材は特に限定されるものではなく、ポリスチレン、ポリ乳酸、シリカ等を挙げることができる。
本実施の形態に係る生体物質認識部位とは、目的とする生体物質と特異的に結合及び/又は反応する部位である。目的とする生体物質は、それと特異的に結合する物質が存在するものであれば特に限定されるものではないが、代表的にはタンパク質(ペプチド)および核酸(オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド)、抗体等が挙げられる。したがって、そのような目的とする生体物質に結合する物質としては、前記タンパク質を抗原として認識する抗体やそれに特異的に結合する他のタンパク質等、および前記核酸にハイブリタイズする塩基配列を有する核酸等が挙げられる。具体的には、細胞表面に存在するタンパク質であるHER2に特異的に結合する抗HER2抗体、細胞核に存在するエストロゲン受容体(ER)に特異的に結合する抗ER抗体、細胞骨格を形成するアクチンに特異的に結合する抗アクチン抗体等があげられる。中でも抗HER2抗体及び抗ER抗体を蛍光物質内包ナノ粒子に結合させたものは、乳癌の投薬選定に用いることができ、好ましい。
以下、組織切片の染色方法について述べる。以下に説明する染色方法は病理切片組織に限定せず、細胞染色にも適用可能である。
また、以下に説明する染色方法が適用できる切片の作製法は特に限定されず、公知の方法により作製されたものを用いることができる。
キシレンを入れた容器に病理切片を浸漬させ、パラフィンを除去する。温度は特に限定されるものではないが、室温で行うことができる。浸漬時間は、3分以上30分以下であることが好ましい。また、必要により浸漬途中でキシレンを交換してもよい。
次いで、エタノールを入れた容器に病理切片を浸漬させ、キシレンを除去する。温度は特に限定されるものではないが、室温で行うことができる。浸漬時間は、3分以上30分以下であることが好ましい。また、必要により浸漬途中でエタノールを交換してもよい。
次いで、水を入れた容器に病理切片を浸漬させ、エタノールを除去する。温度は特に限定されるものではないが、室温で行うことができる。浸漬時間は、3分以上30分以下であることが好ましい。また、必要により浸漬途中で水を交換してもよい。
公知の方法にならい、目的とする生体物質の賦活化処理を行う。賦活化条件に特に定めはないが、賦活液としては、0.01Mクエン酸緩衝液(pH6.0)、1mMEDTA溶液(pH8.0)、5%尿素、0.1Mトリス塩酸緩衝液等を用いることができる。加熱機器は、オートクレーブ、マイクロウェーブ、圧力鍋、ウォーターバス等を用いることができる。温度は特に限定されるものではないが、室温で行うことができる。温度は50−130℃、時間は5−30分で行うことができる。
次いで、PBS(Phosphate Buffered Saline:リン酸緩衝生理食塩水)を入れた容器に、賦活化処理後の切片を浸漬させ、洗浄を行う。温度は特に限定されるものではないが、室温で行うことができる。浸漬時間は、3分以上30分以下であることが好ましい。また、必要により浸漬途中でPBSを交換してもよい。
生体物質認識部位が結合された蛍光物質内包ナノ粒子のPBS分散液を病理切片に載せ、目的とする生体物質と反応させる。蛍光物質内包ナノ粒子と結合させる生体物質認識部位を変えることにより、さまざまな生体物質に対応した染色が可能となる。数種類の生体物質認識部位が結合された蛍光物質内包ナノ粒子を用いる場合には、それぞれの蛍光物質内包ナノ粒子PBS分散液を予め混合しておいてもよいし、別々に順次病理切片に載せてもよい。
温度は特に限定されるものではないが、室温で行うことができる。反応時間は、30分以上24時間以下であることが好ましい。
蛍光物質内包ナノ粒子による染色を行う前に、BSA含有PBS等、公知のブロッキング剤を滴下することが好ましい。
次いで、PBSを入れた容器に、染色後の切片を浸漬させ、未反応蛍光物質内包ナノ粒子の除去を行う。温度は特に限定されるものではないが、室温で行うことができる。浸漬時間は、3分以上30分以下であることが好ましい。また、必要により浸漬途中でPBSを交換してもよい。カバーガラスを切片に載せ、封入する。必要に応じて市販の封入剤を使用してもよい。
なお、HE染色試薬を用いて染色を行う場合、カバーガラスによる封入前にHE染色を行う。
染色した病理切片に対し顕微鏡画像取得装置1Aを用いて、広視野の顕微鏡画像(蛍光画像)を取得する。顕微鏡画像取得装置1Aにおいて、染色試薬に用いた蛍光物質の吸収極大波長及び蛍光波長に対応した励起光源及び蛍光検出用光学フィルターを選択する。
蛍光画像の視野は、3mm2以上であることが好ましく、30mm2以上であることがさらに好ましく、300mm2以上であることがさらに好ましい。
ここで、本件出願人は、以下に説明するように、一実施例として、Cy5内包シリカナノ粒子(以下、ナノ粒子1という。)を作製し、ナノ粒子1に対して抗HER2抗体を結合させた標識材料Aを作製した。また、CdSe/ZnS内包シリカナノ粒子(以下、ナノ粒子2という)を作製し、ナノ粒子2に対して抗HER2抗体を結合させた標識材料Bを作製した。そして、作製した標識材料A、B及び比較例としての標識材料C、Dを用いて予めFISHスコアを測定したヒト***組織の隣接切片を用いて免疫染色を行って視野を変えて複数の蛍光画像を取得し、各蛍光画像に現れている蛍光輝点の数を計測してFISHスコアとの関連を調べる実験を行った。
(合成例1:蛍光有機色素内包シリカ:Cy5内包シリカナノ粒子の合成)
下記工程(1)〜(5)の方法により、Cy5内包シリカナノ粒子(ナノ粒子1)を作製した。
工程(1):Cy5のN−ヒドロキシスクシンイミドエステル誘導体(GEヘルスケア社製)1mg(0.00126mmol)とテトラエトキシシラン400μL(1.796mmol)を混合した。
工程(2):エタノール40mLと14%アンモニア水10mLを混合した。
工程(3):工程(2)で作製した混合液を室温下で撹拌しているところに、工程(1)で調製した混合液を添加した。添加開始から12時間撹拌を行った。
工程(4):反応混合物を10000Gで60分遠心分離を行い、上澄みを除去した。
工程(5):エタノールを加え、沈降物を分散させ、再度遠心分離を行った。同様の手順でエタノールと純水による洗浄を1回ずつ行った。
得られたナノ粒子1を走査型電子顕微鏡(SEM;日立(登録商標)社製S−800型)で観察したところ、平均粒径は110nm、変動係数は12%であった。
下記工程(1)〜(5)の方法により、CdSe/ZnS内包シリカナノ粒子(以下、ナノ粒子2という。)を作製した。
工程(1):CdSe/ZnSデカン分散液(インビトロジェン社Qdot655)10μLとテトラエトキシシラン40μLを混合した。
工程(2):エタノール4mLと14%アンモニア水1mLを混合した。
工程(3):工程(2)で作製した混合液を室温下で撹拌しているところに、工程(1)で作製した混合液を添加した。添加開始から12時間撹拌を行った。
工程(4):反応混合物を10000Gで60分遠心分離を行い、上澄みを除去した。
工程(5):エタノールを加え、沈降物を分散させ、再度遠心分離を行った。同様の手順でエタノールと純水による洗浄を1回ずつ行った。
得られたナノ粒子2を走査型電子顕微鏡で観察したところ、平均粒径は130nm、変動係数は13%であった。
下記工程(1)〜(12)の方法により、蛍光物質内包シリカナノ粒子に対して抗体を結合させた。ここでは、ナノ粒子1を用いた例を示すが、ナノ粒子2についても同様である。
工程(1):1mgのナノ粒子1を純水5mLに分散させた。次いで、アミノプロピルトリエトキシシラン水分散液100μLを添加し、室温で12時間撹拌した。
工程(2):反応混合物を10000Gで60分遠心分離を行い、上澄みを除去した。
工程(3):エタノールを加え、沈降物を分散させ、再度遠心分離を行った。同様の手順でエタノールと純水による洗浄を1回ずつ行った。
得られたアミノ基修飾したシリカナノ粒子のFT−IR測定を行ったところ、アミノ基に由来する吸収が観測でき、アミノ基修飾されたことが確認できた。
工程(5):工程(4)で調整した溶液に、最終濃度10mMとなるようSM(PEG)12(サーモサイエンティフィック社製、succinimidyl−[(N−maleomidopropionamid)−dodecaethyleneglycol]ester)を混合し、1時間反応させた。
工程(6):反応混合液を10000Gで60分遠心分離を行い、上澄みを除去した
工程(7):EDTAを2mM含有したPBSを加え、沈降物を分散させ、再度遠心分離を行った。同様の手順による洗浄を3回行った。最後に500μLのPBSを用いて再分散させた。
工程(9):反応混合物についてゲルろ過カラムにより過剰のDTTを除去し、還元化抗HER2抗体溶液を得た。
工程(11):10mMメルカプトエタノール4μLを添加し、反応を停止させた。
工程(12):反応混合物を10000Gで60分遠心分離を行い、上澄みを除去した後、EDTAを2mM含有したPBSを加え、沈降物を分散させ、再度遠心分離を行った。同様の手順による洗浄を3回行った。最後に500μLのPBSを用いて再分散させ、抗HER2抗体が結合された蛍光物質内包シリカナノ粒子を得た。
下記工程(1)〜(10)の方法により、作製した抗体結合標識材料A〜Dを用い、予めFISHスコアを測定したヒト***組織の隣接切片を用いて免疫染色を行った。染色切片はコスモバイオ社製の組織アレイスライド(CB−A712)を用いた。FISHスコアで1〜9の24切片を用いた。
工程(2):エタノールを入れた容器に病理切片を30分浸漬させた。途中3回エタノールを交換した。
工程(3):水を入れた容器に病理切片を30分浸漬させた。途中3回水を交換した。
工程(4):10mMクエン酸緩衝液(pH6.0)に病理切片を30分浸漬させた。
工程(5):121度で10分オートクレーブ処理を行った。
工程(6):PBSを入れた容器に、オートクレーブ処理後の切片を30分浸漬させた。
工程(7):1%BSA含有PBSを組織に載せて、1時間放置した。
工程(8):1%BSA含有PBSで0.05nMに希釈した抗HER2抗体が結合された標識材料A〜Dを、各組織切片に載せて3時間放置した。
工程(9):PBSを入れた容器に、染色後の切片をそれぞれ30分浸漬させた。
工程(10):Merck Chemicals社製Aquatexを滴下後、カバーガラスを載せ封入した。
各標識材料A〜Dを用いて染色した組織切片について、視野(観察面積)を変えて複数の蛍光画像を取得し、画像解析ソフトにより、各蛍光画像から蛍光輝点の数(輝点数)を計測した。
なお、顕微鏡は、カールツアイス社製正立顕微鏡Axio Imager M2を用い、対物レンズを20倍に設定し、630〜670nmの波長を有する励起光を照射して、組織切片から発せられる蛍光を結像し、顕微鏡設置カメラ(モノクロ)により蛍光画像(画像データ)を取得し、画像解析ソフトにより輝点数を計測した。なお、上記カメラは画素サイズ6.4μm×6.4μm、縦画素数1040個、横画素数1388個(撮像領域8.9mm×6.7mm)を有している。
また、各標識材料A〜Dについて、各視野において、計測された輝点数とFISHスコアとの相関係数Rを算出した。FISHスコアは、HER2遺伝子の過剰発現レベルと対応しており、FISHスコアの値が大きいほど、HER2遺伝子の過剰発現レベルが高いことを示している。
以下、病理診断支援システム100において、上記説明した蛍光画像及び明視野画像を取得して解析を行う動作について説明する。ここでは、特定のタンパク質(ここでは、乳癌組織におけるKi67タンパクとする。以下、特定タンパクと呼ぶ。)を認識する生体物質認識部位が結合した蛍光物質内包ナノ粒子を含む染色試薬を用いて染色された組織切片を観察対象とする場合を例にとり説明するが、これに限定されるものではない。
その後、顕微鏡画像取得装置1Aにおいて、(a1)〜(a5)の手順により明視野画像及び蛍光画像が取得される。
(a1)操作者は、HE染色試薬と蛍光物質内包ナノ粒子を含む染色試薬とによりそれぞれ染色された組織切片をスライドに載置し、そのスライドを顕微鏡画像取得装置1Aのスライド固定ステージに設置する。
(a2)明視野ユニットに設定し、撮影倍率、ピントの調整を行い、組織上の観察対象の領域を視野に納める。
(a3)撮像手段で撮影を行って明視野画像の画像データを生成し、画像処理装置2Aに画像データを送信する。
(a4)ユニットを蛍光ユニットに変更する。
(a5)視野及び撮影倍率を変えずに撮像手段で撮影を行って蛍光画像の画像データを生成し、画像処理装置2Aに画像データを送信する。
なお、HE染色を同時に行わない場合においては、組織の自家蛍光が微弱なため励起光の波長の範囲は、一般的な200nm〜700nmの範囲で特に限定せずとも自家蛍光と蛍光物質内包ナノ粒子からの蛍光の発光差を確保して両者を区別して認識可能とする(両者の光量差10%(1.1倍)以上)を確保することができる。
図10に、画像処理装置2Aにおける画像解析処理のフローチャートを示す。図10に示す画像解析処理は、制御部21と記憶部25に記憶されているプログラムとの協働により実行される。
図11に、ステップS2における処理の詳細フローを示す。ステップS2の処理は、制御部21と記憶部25に記憶されているプログラムとの協働により実行される。
次いで、モノクロ画像に対し予め定められた閾値を用いて閾値処理が施され、各画素の値が2値化される(ステップS202)。図12Bに、閾値処理後の二値画像の一例を示す。
なお、後述する蛍光輝点の抽出におけるラベルの番号と区別するため、コンピュータの保持できる最大値をMAXとし、現在までに行ったラベリング回数をLabel_tempとすると、新たな細胞核にはラベルLabel_nucleusとして、MAX−Label_tempが付与される。例えば、101個目の細胞核にラベルを付与する場合、Label_temp=100であるので、MAX=65536とすると、Label_nucleusとして65436が付与される。ラベリング処理後、処理は図10のステップS3に移行する。
細胞核の面積Aについては、予め細胞核画像に対応した基準となる長さを測定することで画素(ピクセル)の大きさを算出し、ステップ2で抽出された各細胞核内の画素数を積算することにより、細胞核の面積Aが決定される。
細胞核の平均濃度Bは、細胞核内の各画素(ピクセル)のグレイスケールに変換した輝度信号値を求め、その平均値を算出することにより決定される。
ピクセル輝度バラツキCは、細胞核内の各画素(ピクセル)の輝度信号値の標準偏差を算出することにより決定される。
細胞核の円形度D及び扁平率Eは、ステップ2で抽出された各細胞核について、細胞核画像から得られる一定の値を、下記式(d)、(e)に当てはめることで決定される。
(円形度D)=4πS/L2 … (d)
(扁平率F)=(a−b)/a … (e)
ただし、式(d)中、「S」は細胞核の面積(細胞核の面積A)を、「L」は細胞核の外周長をそれぞれ表す。式(e)中、「a」は長半径を、「b」は短半径をそれぞれ表す。
核縁の核面積に対する太さの割合Fの算出にあたっては、まず、細胞核の中心部から80%の面積の輝度信号値の平均値Laveを求め、細胞核外縁部の20%の面積領域について、画素(ピクセル)の輝度信号値がLaveに対し20%以上低い値を有する領域を細胞核の核縁とした。次に、その核縁の面積を求め、細胞核全体の面積(細胞核の面積A)との比を算出することにより、核縁の核面積に対する太さの割合Fが決定される。
(i)細胞核の面積Aが、算出されたすべての細胞核の面積Aのうち、上位60%以上、好ましくは上位50%以上、更に好ましくは上位40%以上に含まれる
(ii)細胞核の平均濃度Bが、算出されたすべての細胞核の平均濃度Bのうち、下位50%以下、好ましくは下位40%以下、更に好ましくは上位30%以下に含まれる
(iii)細胞核領域内のピクセル輝度バラツキ(σ値)Cが、細胞核画像を、8ビット画像でかつグレイスケールに変換した画像において、σ≧30、好ましくはσ≧40、更に好ましくはσ≧50である
(iv)細胞核の円形度Dが、0.8以下、好ましくは0.6以下、更に好ましくは0.4以下である
(v)細胞核の扁平率Eが、0.6以下、好ましくは0.4以下、更に好ましくは0.2以下である
(vi)核縁の核面積に対する太さの割合Fが、3%以上、好ましくは5%以上、更に好ましくは10%以上である
なお、上記(i)〜(vi)の条件、すなわち細胞特徴量の各因子(細胞核の面積A〜核縁の核面積に対する太さの割合F)は任意に選択され適宜変更されてもよいし、各因子中の閾値も任意に選択され適宜変更されてもよい。もちろん、細胞特徴量の因子として上記とは異なる別の因子が使用されてよい。
図13に、ステップS5における処理の詳細フローを示す。ステップS5の処理は、制御部21と記憶部25に記憶されているプログラムとの協働により実行される。
次いで、R成分が抽出された画像にTophat変換が施される(ステップS502)。Tophat変換は、入力画像の各画素の値から、入力画像に最小値フィルター及び最大値フィルターをこの順でかけた画像の、対応する画素の値を減算する処理である。最小値フィルターは、注目画素の近傍の画素(例えば、3×3画素)のうちの最小値で注目画素の値を置き換えるものである。最大値フィルターは、注目画素の近傍の画素(例えば、3×3画素)のうちの最大値で注目画素の値を置き換えるものである。Tophat変換により、濃淡プロファイル上の小突起(近傍の画素に比べて輝度の高い領域)を抽出することができる。これにより、蛍光輝点候補画像を得ることができる。図14Aに、蛍光輝点候補画像の一例を示す。
当該位置合わせに用いられる明視野画像はステップS2で得られた細胞核画像(図12C参照)であり、当該位置合わせに用いられる蛍光画像はステップS5で得られた蛍光輝点画像(図14B参照)である。
明視野画像と蛍光画像とで共通に検出される情報源としては、明視野画像及び蛍光画像の両方で認識可能な情報が用いられ、本実施形態では組織切片の染色材料であるエオジンの染色情報が用いられる。
エオジンの染色情報からは、明視野画像及び蛍光画像の各画像においてその画像を特徴付ける画像特徴量が算出される。当該画像特徴量としては、明視野画像及び蛍光画像の両方で観察できるコントラスト情報やエッジ情報、輪郭情報等が算出され用いられる。
コントラスト情報としては、特定領域やその特定領域と画像全体との間の色差や輝度差の情報が用いられ、必要に応じ二値化処理が施され、情報そのものが強調される。
エッジ情報及び輪郭情報は、明視野画像及び蛍光画像の各画像を画像処理することより得られる。画像処理方法としては、キャニー法やアンシャープマスク法が好ましく用いられる。
詳しくは、明視野画像のエオジンの染色情報から、明視野画像におけるコントラスト情報、エッジ情報及び輪郭情報が算出される。これと同様に、蛍光画像のエオジンの染色情報からも、蛍光画像におけるコントラスト情報、エッジ情報及び輪郭情報が算出される。そしてこれら情報同士が比較され、その共通点を合致させることにより、明視野画像と蛍光画像との位置合わせが行われる。コントラスト情報、エッジ情報及び輪郭情報の比較では、これら情報のうち、少なくとも1つの情報同士が比較されればよく、例えばコントラスト情報同士のみが比較されてもよいし、コントラスト情報、エッジ情報及び輪郭情報のすべての情報同士が比較されてもよい。
例えば、コントラスト情報同士を比較する場合には、図15に示すように、明視野画像と蛍光画像とで、左端側の特定領域30と右端側の特定領域32とにおけるコントラスト情報を対比させ、それら特定領域30、32における各共通点(濃淡)が合致するよう、各画像が重ね合わされる(位置合わせされる)。このとき、明視野画像と蛍光画像は、特定領域30、32における各共通点が合致するよう、画像自体が拡大又は縮小されてもよい。
第3の染色試薬としては、蛍光画像中の蛍光輝点源の蛍光粒子(すなわち上記蛍光物質内包ナノ粒子)と発光波長が重ならない蛍光粒子や、明らかに大きさ(粒子径)や形状の異なる、可視光及び蛍光の両方で観察される蛍光粒子を含む染色試薬が挙げられる。当該蛍光粒子は発光波長、粒子径及び形状の少なくとも1つが異なっていればよく、例えば発光波長のみが異なっていてもよいし、発光波長、粒子径及び形状のすべてが異なっていてもよい。
具体的に当該蛍光粒子としては、粒子径が1.0〜5.0μmの蛍光粒子が好ましく用いられ、例えば、蛍光色素であるFITCやAlexa Fluor(登録商標)488をシリカに内包させた粒子が挙げられる。
第3の染色試薬による染色情報を情報源とした場合も、明視野画像と蛍光画像とを位置合わせするときは、上記と同様、コントラスト情報、エッジ情報及び輪郭情報等の画像特徴量が算出され、それら画像特徴量に基づき、明視野画像と蛍光画像とが正確に位置合わせされる。
詳しくは、明視野画像と蛍光画像とを重ね合わせた状態において、ステップS3で決定した観察対象細胞に対応する部分の蛍光輝点数が算出される。観察対象細胞上に重なる蛍光輝点数は、癌の悪性度や進行度の指標となる特定タンパクの発現状況を示す。
悪性度の判定や治療計画に用いる統計方法としては、特に限定されないが、例えば、観察対象細胞上の蛍光輝点数の総計値を観察対象細胞数で除した値や、観察対象細胞上の蛍光輝点数の総計値を観察対象細胞の総面積で除した値が用いられ、また観察対象細胞上の蛍光輝点数をヒストグラム化して一定数以上の蛍光輝点を有する観察対象細胞数の比率等も好ましく用いられる。
例えば、ステップS8では、観察対象細胞上の蛍光輝点数が予め定められた複数の閾値を超えるか否かに基づいて、特定タンパクの発現状況が複数の段階に分類され、高発現領域、中発現領域、低発現領域、極低発現領域といった態様で区分けされる。その後、明視野画像上に、分類結果に応じて異なる表示態様で区分け(例えば、色分け)された画像が生成され、解析結果画面231として表示部23に表示出力される。
タンパク発現状況表示231cには、明視野画像上に、特定タンパクの高発現領域、中発現領域、低発現領域、極低発現領域が色分けして表示されている。特定タンパクの発現状況に応じて色分けして表示されるので、医師は、癌の悪性度の指標となる特定タンパクの過剰発現、その広がりを効率よく把握することが可能となり、適切な治療計画を立てることが可能となる。
例えば、タンパク発現状況表示231cのみを表示することとしてもよい。また、操作部22からの切り替え指示に応じて明視野画像231aとタンパク発現状況表示231cを切り替え表示することとしてもよい。また、解析結果画面231に表示する明視野画像231a、蛍光輝点画像231b、タンパク発現状況表示231cは、観察しやすいように何れか又は全てを拡大縮小して表示することとしてもよい。
さらに、操作部22からの指示に応じて、明視野画像231aと蛍光輝点画像231bとを単に重ね合わせた画像を表示することとしてもよく、かかる場合にはその重ね合わせた画像により、特定タンパクの発現状況を医師に視覚的に提示し、判断を促すこともできる。
操作部22により印刷ボタン231dが押下されると、制御部21により解析結果のデータが通信I/F24やLAN等の通信ネットワークを介して図示しないプリンタに送信され、解析結果が印刷出力される。また、操作部22により送信ボタン231eが押下されると、制御部21により解析結果のデータが通信I/F24やLAN等の通信ネットワークを介して外部機器(例えば、PACS(Picture Archiving and Communication System for medical application))に送信される。
特に、明視野画像と蛍光画像との位置合わせでは、各画像で共通に検出される情報源としてエオジンの染色情報を用いて、かかる染色情報から各画像における画像特徴量を算出しその共通点を一致させるから、明視野画像と蛍光画像とが正確に位置合わせされる。かかる場合、細胞特徴量から決定された明視野画像の観察対象細胞に対し蛍光画像の蛍光輝点が正確に重ねられるから、結果的に明視野画像と蛍光画像との正確な位置合わせにより、観察対象細胞内での特定タンパクの発現を正確に定量することができる。
2A 画像処理装置
3A ケーブル
21 制御部
22 操作部
23 表示部
24 通信I/F
25 記憶部
26 バス
100 病理診断支援システム
Claims (8)
- 組織切片における細胞の形態を表す細胞形態画像と、前記組織切片の同一範囲における特定タンパクの発現を蛍光輝点で表す蛍光画像とを入力する入力手段と、
前記細胞形態画像と前記蛍光画像とで共通に検出される情報源に基づき、前記細胞形態画像と前記蛍光画像とを位置合わせする位置合わせ手段と、
を有することを特徴とする画像処理装置。 - 請求項1に記載の画像処理装置において、
前記情報源が一定の染色試薬による染色情報であり、
前記位置合わせ手段が、前記細胞形態画像と前記蛍光画像との前記各染色情報から、各画像における画像特徴量を算出し、それら画像特徴量に基づき、前記細胞形態画像と前記蛍光画像とを位置合わせすることを特徴とする画像処理装置。 - 請求項2に記載の画像処理装置において、
前記情報源が前記一定の染色試薬とは異なる他の染色試薬による他の染色情報であり、
前記位置合わせ手段が、前記細胞形態画像と前記蛍光画像との前記各他の染色情報から、各画像における画像特徴量を算出し、それら画像特徴量に基づき、前記細胞形態画像と前記蛍光画像とを位置合わせすることを特徴とする画像処理装置。 - 請求項3に記載の画像処理装置において、
前記他の染色試薬には、前記蛍光画像中の蛍光輝点源の蛍光粒子に対し、発光波長、粒子径及び形状の少なくとも1つが異なる他の蛍光粒子が含まれていることを特徴とする画像処理装置。 - 請求項1〜4のいずれか一項に記載の画像処理装置において、
前記形態観察画像から、細胞核の面積、細胞核の平均濃度、細胞核の輝度バラツキ、細胞核の円形度、細胞核の扁平率及び細胞核の核縁の核面積に対する太さのうち、少なくとも1つの因子を含む細胞特徴量を算出する算出手段と、
前記細胞特徴量に基づき、観察対象となる観察対象細胞を決定する決定手段と、
前記観察対象細胞に対応する位置合わせ後の前記蛍光画像の蛍光輝点数に基づき、前記観察対象細胞における前記特定タンパクの発現状況を判定する判定手段と、
を有することを特徴とする画像処理装置。 - 請求項1〜5のいずれか一項に記載の画像処理装置と、
前記画像処理装置で使用される、前記細胞形態画像と前記蛍光画像とを取得する画像取得装置と、
を備えることを特徴とする病理診断支援システム。 - コンピュータを、
組織切片における細胞の形態を表す細胞形態画像と、前記組織切片の同一範囲における特定タンパクの発現を蛍光輝点で表す蛍光画像とを入力する入力手段、
前記細胞形態画像と前記蛍光画像とで共通に検出される情報源に基づき、前記細胞形態画像と前記蛍光画像とを位置合わせする位置合わせ手段、
として機能させるための画像処理プログラム。 - 組織切片における細胞の形態を表す細胞形態画像と、前記組織切片の同一範囲における特定タンパクの発現を蛍光輝点で表す蛍光画像とを用いる病理診断支援方法であって、
前記細胞形態画像と前記蛍光画像とで共通に検出される一定の染色試薬で前記組織切片を染色する工程と、
染色後の前記組織切片から、前記細胞形態画像と前記蛍光画像とを取得する工程と、
前記一定の染色試薬による染色情報に基づき、前記細胞形態画像と前記蛍光画像とを位置合わせする工程と、
を有することを特徴とする病理診断支援方法。
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US10219742B2 (en) | 2008-04-14 | 2019-03-05 | Novadaq Technologies ULC | Locating and analyzing perforator flaps for plastic and reconstructive surgery |
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US10492671B2 (en) | 2009-05-08 | 2019-12-03 | Novadaq Technologies ULC | Near infra red fluorescence imaging for visualization of blood vessels during endoscopic harvest |
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CN107209118B (zh) * | 2014-09-29 | 2021-05-28 | 史赛克欧洲运营有限公司 | 在自体荧光存在下生物材料中目标荧光团的成像 |
CA2963450A1 (en) | 2014-10-09 | 2016-04-14 | Novadaq Technologies Inc. | Quantification of absolute blood flow in tissue using fluorescence-mediated photoplethysmography |
JP6375925B2 (ja) * | 2014-12-15 | 2018-08-22 | コニカミノルタ株式会社 | 画像処理装置、画像処理システム、画像処理プログラム及び画像処理方法 |
US9784665B1 (en) * | 2014-12-29 | 2017-10-10 | Flagship Biosciences, Inc. | Methods for quantitative assessment of muscle fibers in muscular dystrophy |
JP6372370B2 (ja) * | 2015-01-23 | 2018-08-15 | コニカミノルタ株式会社 | 生体物質定量方法、画像処理装置、及びプログラム |
JP6520961B2 (ja) | 2015-02-10 | 2019-05-29 | コニカミノルタ株式会社 | 生体物質定量方法、病理診断支援システム及びプログラム |
EP3312605A4 (en) * | 2015-06-16 | 2018-05-30 | Konica Minolta, Inc. | Image processing device, image processing method and image processing program |
US20170064287A1 (en) * | 2015-08-24 | 2017-03-02 | Itseez3D, Inc. | Fast algorithm for online calibration of rgb-d camera |
JP6578928B2 (ja) * | 2015-12-16 | 2019-09-25 | コニカミノルタ株式会社 | 蛍光画像の合焦位置特定システム、合焦位置特定方法および合焦位置特定プログラム |
USD817966S1 (en) * | 2016-01-26 | 2018-05-15 | Sony Corporation | Portion of display panel or screen with animated graphical user interface |
JP6922444B2 (ja) * | 2016-11-11 | 2021-08-18 | コニカミノルタ株式会社 | 蛍光ナノ粒子を用いた、病理学的完全奏効(pCR)の予測を支援するための検査支援方法 |
US11275087B2 (en) * | 2016-11-11 | 2022-03-15 | Konica Minolta, Inc. | Test support method for supporting prediction of pathological complete response (pCR) using fluorescent nanoparticles |
JPWO2018143406A1 (ja) * | 2017-02-06 | 2019-12-26 | コニカミノルタ株式会社 | 画像処理装置及びプログラム |
WO2018145193A1 (en) | 2017-02-10 | 2018-08-16 | Novadaq Technologies ULC | Open-field handheld fluorescence imaging systems and methods |
DE102017107348B4 (de) * | 2017-04-05 | 2019-03-14 | Olympus Soft Imaging Solutions Gmbh | Verfahren zur zytometrischen Analyse von Zellproben |
WO2019032723A1 (en) * | 2017-08-09 | 2019-02-14 | Allen Institute | IMAGE PROCESSING SYSTEMS, DEVICES, AND METHODS FOR GENERATING AN IMAGE HAVING PREDICTIVE MARKING |
CN112132772B (zh) * | 2019-06-24 | 2024-02-23 | 杭州迪英加科技有限公司 | 一种病理切片实时判读方法、装置及*** |
CN111323362A (zh) * | 2020-03-17 | 2020-06-23 | 宁波江丰生物信息技术有限公司 | 一种基于荧光切片的循环肿瘤细胞检测***及检测方法 |
JP2023098287A (ja) | 2021-12-28 | 2023-07-10 | 株式会社Screenホールディングス | 画像表示方法、コンピュータープログラムおよび記録媒体 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010019656A (ja) * | 2008-07-10 | 2010-01-28 | Univ Of Tokushima | 蛍光集団の評価装置、コンピュータ実行可能な蛍光集団の評価プログラム、及び蛍光集団の評価システム |
JP2010085219A (ja) * | 2008-09-30 | 2010-04-15 | Nec Soft Ltd | 顕微質量分析の二次元解析画像と、光学顕微鏡撮影の二次元可視画像との自動的位置重ね合わせ方法 |
JP2012065800A (ja) * | 2010-09-22 | 2012-04-05 | Olympus Corp | 蛍光観察装置 |
US20120082978A1 (en) * | 2006-09-15 | 2012-04-05 | Linda Pilarski | Cell Analysis On Microfluidic Chips |
JP2013506129A (ja) * | 2009-09-29 | 2013-02-21 | ゼネラル・エレクトリック・カンパニイ | 蛍光画像を用いて明視野画像を生成するためのシステム及び方法 |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS57153367A (en) | 1981-03-18 | 1982-09-21 | Toshiba Corp | Diagnostic device of cell |
JP5040597B2 (ja) | 2007-11-06 | 2012-10-03 | 日本電気株式会社 | 評価システム、評価方法および評価プログラム |
JP5438962B2 (ja) * | 2008-12-25 | 2014-03-12 | シスメックス株式会社 | 細胞画像表示装置 |
JP2012013804A (ja) * | 2010-06-29 | 2012-01-19 | Sony Corp | 画像処理装置、画像処理システム、画像処理方法及びプログラム |
JP5733939B2 (ja) | 2010-10-05 | 2015-06-10 | 三菱電機株式会社 | 情報提供システム |
WO2012066827A1 (ja) | 2010-11-19 | 2012-05-24 | オリンパス株式会社 | 生体試料調製方法 |
-
2014
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Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20120082978A1 (en) * | 2006-09-15 | 2012-04-05 | Linda Pilarski | Cell Analysis On Microfluidic Chips |
JP2010019656A (ja) * | 2008-07-10 | 2010-01-28 | Univ Of Tokushima | 蛍光集団の評価装置、コンピュータ実行可能な蛍光集団の評価プログラム、及び蛍光集団の評価システム |
JP2010085219A (ja) * | 2008-09-30 | 2010-04-15 | Nec Soft Ltd | 顕微質量分析の二次元解析画像と、光学顕微鏡撮影の二次元可視画像との自動的位置重ね合わせ方法 |
JP2013506129A (ja) * | 2009-09-29 | 2013-02-21 | ゼネラル・エレクトリック・カンパニイ | 蛍光画像を用いて明視野画像を生成するためのシステム及び方法 |
JP2012065800A (ja) * | 2010-09-22 | 2012-04-05 | Olympus Corp | 蛍光観察装置 |
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Publication number | Publication date |
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