発明の背景
本発明は、血管平滑筋細胞増殖および／または血管平滑筋細胞遊走、内膜肥厚および動脈硬化等の細胞増殖性血管病変、動脈硬化症および経皮的冠動脈形成術後の再狭窄等の血管障害疾患に対する予防および／または治療の効果を発現する飲食物に関する。
近年、欧米において、狭心症や心筋梗塞といった虚血性心疾患や脳卒中、脳塞栓症等の脳血管疾患が、その死亡率の高さゆえに大きな社会問題になっている。また日本においても、食生活の欧米化や高齢化に伴い、上記疾患が死亡原因の一つとして急増している。これら疾患は、動脈硬化によって生じる血管内腔の狭小化や血管壁の弾力性消失等の血管病変により誘導される。
動脈硬化の成立は、単一ではなく、複数の要因と誘因とによっているが、大別して、その主たる要因を２つに分ける事ができる。１つは動脈内皮損傷による各種網内系細胞の凝集と、それ以降におこる血管平滑筋細胞増殖因子の放出、そして中膜由来の血管平滑筋細胞の動脈硬化巣への遊走及びそこでの増殖であり、他の１つは、コレステロールを含む高脂血症による血管内皮細胞、血管平滑筋細胞の形質転換、そして動脈硬化巣での増殖である。すなわち、血管平滑筋細胞の内膜への遊走、および内膜での増殖によって生じる細胞繊維性の肥厚により、血管内腔の狭小化等の細胞増殖性血管病変が生じる。
血管の狭小化を外科的に治療する方法の一つに、経皮的冠動脈形成術（Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ Ｔｒａｎｓｌｕｍｉｎａｌ Ｃｏｒｏｎａｒｙ Ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ：以下、ＰＴＣＡと略す）がある。これは大腿動脈などからバルーンカテーテルを遠隔的に挿入していき、狭窄部でバルーンを膨らませ、物理的に血管を拡張させる手術であり、施術直後の優れた症状改善率が臨床的に評価されている。
しかしながら、ＰＴＣＡ施行後に再び狭窄が起こる例がある。この再狭窄部位は、血管平滑筋細胞を主とする細胞繊維性内膜肥厚であることが知られている。また、血管平滑筋細胞の増殖、内膜への遊走、マトリックス沈着等の結果により生じる内膜肥厚は、動脈硬化性疾患、高血圧、虚血性心疾患、脳血管疾患においても発症の主な要因となっている。さらに、心臓、肝臓、腎臓、血管等の臓器移植後における血管狭窄も血管平滑筋細胞の増殖が関与している。
狭心症や心筋梗塞の治療薬としては、抗血栓薬や血管拡張薬等が主として用いられているが、ＰＴＣＡ後の再狭窄および動脈硬化によって招来される血管内腔の狭小化や血管の弾力性消失を治療するには至っておらず、これまでのところ血管平滑筋細胞増殖が関与する動脈硬化性疾患、虚血性心疾患および脳血管疾患を薬物で治療することには限界があるため、血管内腔の狭小化の原因となる内膜肥厚や動脈硬化等の細胞増殖性血管病変を予防あるいは治療できる飲食物が渇望されている。
本発明に関わるトリテルペン類とは、一般にイソプレン単位６個から成る五環性の化合物で、炭素数は３０個を基本とするが、生合成過程で転移、酸化、脱離あるいはアルキル化され炭素数が前後するものも含まれる。これらの効果としては、概して、抗炎症効果、抗発癌プロモーター効果（日本油化学会誌，４９，５７１，２０００）等が知られている。特にウルソール酸やオレアノール酸に関しては、抗高脂血症効果があることが知られており、さらにウルソール酸は高脂血症に伴うアテローム性動脈硬化症に対する効果を有することも知られている（Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ，９１，４９２７９ｒ．，１９８１、あるいは、Ｆａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｏｋｓｉｋｏｌｏｇｙ，４５，６６−７０，１９８２）。しかしながら、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体が、血管平滑筋細胞に対する効果を有することは、これまで、全く知られていなかった。
発明の開示
本発明は、血管平滑筋細胞増殖や遊走を抑制し、内膜肥厚および動脈硬化等の細胞増殖性血管病変や、動脈硬化症およびＰＴＣＡ後の再狭窄等の血管障害疾患を予防および／または治療するために、これらに対する非常に優れた効果を有する血管障害疾患用飲食物を提供することを課題とする。
本発明者らは、前記課題を達成する為に鋭意検討した結果、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物が、血管平滑筋細胞増殖抑制効果、血管平滑筋細胞遊走抑制効果、抗細胞増殖性血管病変効果、抗血管障害疾患効果等により、血管平滑筋細胞増殖および／または血管平滑筋細胞遊走によって生じる動脈硬化および内膜肥厚等の細胞増殖性血管病変や、動脈硬化症およびＰＴＣＡ後の再狭窄等の血管障害疾患に対し、優れた予防および／または治療効果を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物に関し、また、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする血管平滑筋細胞遊走抑制用飲食物に関する。
また、本発明は、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする抗細胞増殖性血管病変用飲食物に関し、好ましくは、前記細胞増殖性血管病変が血管平滑筋細胞増殖および／または血管平滑筋細胞遊走に起因する抗細胞増殖性血管病変用飲食物に関し、好ましくは、前記細胞増殖性血管病変が内膜肥厚である抗内膜肥厚用飲食物に関し、好ましくは、前記細胞増殖性血管病変が動脈硬化である抗動脈硬化用飲食物に関する。
また本発明は、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする血管障害疾患用飲食物に関し、好ましくは、前記血管障害疾患が細胞増殖性血管病変に起因する血管障害疾患用飲食物に関し、好ましくは、前記血管障害疾患が動脈硬化症である抗動脈硬化症用飲食物に関し、好ましくは前記血管障害疾患がＰＴＣＡ後の再狭窄であるＰＴＣＡ後の抗再狭窄用飲食物に関する。
本発明はまた、オリーブの脱脂物をエタノール溶液で処理して得られる抽出物を含有する血管血管障害疾患用飲食物に関する。
本発明はまた、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分として含有する血管平滑筋細胞増殖又は血管平滑筋細胞が関与する病変又は病態に関与する疾患の予防用又は治療用飲食物に関する。
本発明はまた、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分として含有する、内膜肥厚、動脈硬化、細胞増殖性血管病変、冠動脈硬化症、腹部大動脈硬化症、閉塞性動脈硬化症、腎動脈硬化症、頚動脈硬化症、眼底動脈硬化症、脳動脈硬化症、動脈硬化症、経皮的冠動脈形成術後の再狭窄、心筋梗塞、狭心症、虚血性心疾患、脳梗塞、脳卒中又は脳血管疾患の予防用又は治療用飲食物に関する。
本発明はまた、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物の、血管障害疾患用飲食物を製造するための使用に関する。
本発明はまた、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を含有する血管障害疾患用飲食物用原料に関する。
本発明はまた、オリーブの脱脂物をエタノール溶液で処理して得られる抽出物を含有する血管障害疾患用飲食物用原料に関する。
発明を実施するための最良の形態
本発明は、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物に関する。五環性トリテルペン類のうち、オレアナン系トリテルペン類、ウルサン系トリテルペン類及びルパン系トリテルペン類が好ましい。中でも、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸又はベツリンが好ましい。特に、マスリン酸、エリトロジオール及びウバオールが好ましい。さらに特にマスリン酸が好ましい。
また、本発明は、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする血管平滑筋細胞遊走抑制用飲食物に関する。五環性トリテルペン類のうち、オレアナン系トリテルペン類、ウルサン系トリテルペン類及びルパン系トリテルペン類が好ましい。中でも、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸又はベツリンが好ましい。特に、マスリン酸、エリトロジオール及びウバオールが好ましい。さらに特にマスリン酸が好ましい。
これらの物質は、イソプレン単位６個から成るトリテルペン類のうち五環性の化合物であり、自然界においては様々な植物体に多く存在する物質群である。これらは、天然には植物体から抽出して得ることができ、また、その中のいくつかは人工的に合成され、既に試薬等として販売されているものもあり、いずれも好適に使用することができる。天然原料から抽出されたものが好ましい。
これらは血管平滑筋細胞増殖抑制および／または血管平滑筋細胞遊走抑制といった抗動脈硬化効果を有し、これらの効果は、培養細胞による試験法で評価することができる。この評価方法によれば、従来の抗動脈硬化用飲食物として知られているα−トコフェロール（Ｄ．Ｂｏｓｃｏｂｏｉｎｉｋ ｅｔ ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，２８６（１），２６４−２６９（１９９１））と比較しても、２〜２０倍の抗動脈硬化効果を有することがわかる。
ここで、有効成分として含有するとは、その血管平滑筋細胞増殖抑制効果および／または血管平滑筋細胞遊走抑制効果を発揮する程度に含有するということであるが、その含量は特に制限されず、摂取の頻度、摂取量、使用の目的によって適宜調整すれば良い。特に限定されないが、例えば、０．０００１質量％以上、好ましくは０．０００１〜９９．９９質量％、より好ましくは０．００１〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．００５〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．０１〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．０５〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．１〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．５〜９９．９９質量％、さらに好ましくは１〜９９．９９質量％である。
また、本発明は、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする抗細胞増殖性血管病変用飲食物に関し、好ましくは、前記細胞増殖性血管病変が血管平滑筋細胞増殖および／または血管平滑筋細胞遊走に起因する抗細胞増殖性血管病変用飲食物に関し、好ましくは、前記細胞増殖性血管病変が内膜肥厚である抗内膜肥厚用飲食物に関し、好ましくは、前記細胞増殖性血管病変が動脈硬化である抗動脈硬化用飲食物に関する。五環性トリテルペン類のうち、オレアナン系トリテルペン類、ウルサン系トリテルペン類及びルパン系トリテルペン類が好ましい。中でも、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸又はベツリンが好ましい。特に、マスリン酸、エリトロジオール及びウバオールが好ましい。さらに特にマスリン酸が好ましい。これらは抗細胞増殖性血管病変効果、例えば内膜肥厚抑制効果および／または抗動脈硬化効果を有し、これらの効果は、動物による試験法で評価することができる。
ここで、有効成分として含有するとは、抗細胞増殖性血管病変効果、例えば内膜肥厚抑制効果および／または抗動脈硬化効果を発揮する程度に含有するということであるが、その含量は特に制限されず、摂取の頻度、摂取量、使用の目的によって適宜調整すれば良い。特に限定されないが、例えば、０．０００１質量％以上、好ましくは０．０００１〜９９．９９質量％、より好ましくは０．００１〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．００５〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．０１〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．０５〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．１〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．５〜９９．９９質量％、さらに好ましくは１〜９９．９９質量％である。
また本発明は、五環性トリデルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする血管障害疾患用飲食物に関し、好ましくは、前記血管障害疾患が細胞増殖性血管病変に起因する血管障害疾患用飲食物に関し、好ましくは、前記血管障害疾患が動脈硬化症である抗動脈硬化症用飲食物に関し、好ましくは、前記血管障害疾患がＰＴＣＡ後の再狭窄であるＰＴＣＡ後の抗再狭窄用飲食物に関する。五環性トリテルペン類のうち、オレアナン系トリテルペン類、ウルサン系トリテルペン類及びルパン系トリテルペン類が好ましい。中でも、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸又はベツリンが好ましい。特に、マスリン酸、エリトロジオール及びウバオールが好ましい。さらに特にマスリン酸が好ましい。これらは抗血管障害疾患効果、例えば抗動脈硬化症効果および／または抗再狭窄効果を有し、これらの効果は、動物および臨床による試験法で評価することができる。
ここで、有効成分として含有するとは、抗血管障害疾患効果、例えば抗動脈硬化症効果および／または抗再狭窄効果を発揮する程度に含有するということであるが、その含量は特に制限されず、摂取の頻度、摂取量、使用の目的によって適宜調整すれば良い。特に限定されないが、例えば、０．０００１質量％以上、好ましくは０．０００１〜９９．９９質量％、より好ましくは０．００１〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．００５〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．０１〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．０５〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．１〜９９．９９質量％、さらに好ましくは０．５〜９９．９９質量％、さらに好ましくは１〜９９．９９質量％である。
本発明は、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物および／または血管平滑筋遊走抑制用飲食物および／または抗内膜肥厚用飲食物・抗動脈硬化用飲食物等の抗細胞増殖性血管病変用飲食物および／または抗動脈硬化症用飲食物・ＰＴＣＡ後の抗再狭窄用飲食物等の血管障害疾患用飲食物に関する。これらの物質は、トリテルペン類の１種であり、イソプレン単位６個から成る五環性の化合物であり、天然の植物から得ることも、人工的に得ることもでき、市販品も好適に利用することができる。天然原料から抽出されたものが好ましい。また、ここで、有効成分として含有するとは、その各目的の効果を発揮する程度に含有するということである。
本発明はまた、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分として含有する血管平滑筋細胞増殖又は血管平滑筋細胞が関与する病変又は病態に関与する疾患の予防用又は治療用飲食物に関する。五環性トリテルペン類のうち、オレアナン系トリテルペン類、ウルサン系トリテルペン類及びルパン系トリテルペン類が好ましい。中でも、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸又はベツリンが好ましい。特に、マスリン酸、エリトロジオール及びウバオールが好ましい。さらに特にマスリン酸が好ましい。
本発明はまた、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分として含有する、内膜肥厚、動脈硬化、細胞増殖性血管病変、冠動脈硬化症、腹部大動脈硬化症、閉塞性動脈硬化症、腎動脈硬化症、頚動脈硬化症、眼底動脈硬化症、脳動脈硬化症、動脈硬化症、経皮的冠動脈形成術後の再狭窄、心筋梗塞、狭心症、虚血性心疾患、脳梗塞、脳卒中又は脳血管疾患の予防用又は治療用飲食物に関する。五環性トリテルペン類のうち、オレアナン系トリテルペン類、ウルサン系トリテルペン類及びルパン系トリテルペン類が好ましい。中でも、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸又はベツリンが好ましい。特に、マスリン酸、エリトロジオール及びウバオールが好ましい。さらに特にマスリン酸が好ましい。
本発明はまた、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を含有する血管障害疾患用飲食物用原料に関する。五環性トリテルペン類のうち、オレアナン系トリテルペン類、ウルサン系トリテルペン類及びルパン系トリテルペン類が好ましい。中でも、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸又はベツリンが好ましい。特に、マスリン酸、エリトロジオール及びウバオールが好ましい。さらに特にマスリン酸が好ましい。
生理的に許容される塩とは、特に五環性トリテルペン酸のカルボキシル基から誘導される塩であり（部分構造：−ＣＯＯＸ；Ｘは任意の陽イオン性物質を示す。）、本発明における天然原料からの単離物に本来的に含まれているものも含む。本発明においては、通常飲食物または医薬組成物で用いられている塩であれば特に限定はされない。例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム等のアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウム、バリウム、亜鉛等のアルカリ土類金属塩、アンモニア、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、プロピルアミン、ブチルアミン、テトラブチルアミン、ペンチルアミン、ヘキシルアミン等のアルキルアミン塩、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、プロパノールアミン、ジプロパノールアミン、イソプロパノールアミン、ジイソプロパノールアミン等のアルカノールアミン塩、ピペラジン、ピペリジン等のその他の有機アミン塩、リジン、アルギニン、ヒスチジン、トリプトファン等の塩基性アミノ酸塩等の塩が挙げられる。これらのうち、アルカリ金属塩、アルキルアミン塩、アルカノールアミン塩及び塩基性アミノ酸塩が好ましい一概にこれらの塩類は、その元となる五環性トリテルペン類に比べて、より水溶性を示すため、本発明においては、特に水系の血管障害疾患用飲食物等に適用する場合に好ましい。
また、誘導体とは、生化学的あるいは人工的に形成可能な誘導体であり、本発明においては、可能な誘導体であれば特に限定はされないが、例えば、アルコールエステル基を有する誘導体、脂肪酸エステル基を有する誘導体、アルコキシ基を有する誘導体、アルコキシメチル基を有する誘導体、あるいは配糖体等が挙げられる。これらのうち、特にアルコールエステル基を有する誘導体、脂肪酸エステル基を有する誘導体、アルコキシ基を有する誘導体、アルコキシメチル基を有する誘導体は、その元となるマスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸、ベツリンに比べて、より脂溶性を示すため、本発明においては、特に油系の血管障害疾患用飲食物等に適用する場合に好ましく、配糖体は、その元となる五環性トリテルペン類に比べて、より水溶性を示すため、本発明においては、特に水系の血管障害疾患用飲食物等に適用する場合に好ましい。
これらの誘導体は、一部は天然にも存在し、また、上述の通り人工により形成させることで得ることができる。また、本発明の誘導体を再度誘導体化して、それらの塩を使用することもできる。
このように、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸及びベツリンを、生理的に許容される適当な塩や誘導体の形態にすることにより、水溶性又は油溶性を向上させることができ、従って、ハンドリング性・品質・血管平滑筋細胞増殖抑制効果・血管平滑筋細胞遊走抑制効果等を向上させた製品を設定することができる。
アルコールエステル基とは、一般的なカルボキシル基とアルコール類との脱水反応の結果として形成される官能基を示す（部分構造：−ＣＯＯＲ；Ｒは任意の炭化水素系官能基を示す。）。すなわち、本発明における五環性トリテルペン類の、アルコールエステル基を有する誘導体とは、特に、そのカルボキシル基とアルコール類から形成可能な誘導体を示す。この際のアルコール類に特に制限は無いが、例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、アリルアルコール、ｎ−ブタノール、ｓｅｃ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、エチレングリコール、トリメチルシリルアルコール、トリエチルシリルアルコール、フェノール、ベンジルアルコール、糖類等が挙げられる。このうち、エタノール、トリエチルシリルアルコール、メタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール又はトリメチルシリルアルコールから形成される誘導体が好ましい。
脂肪酸エステル基とは、一般的な水酸基と脂肪酸類との脱水反応の結果として形成される官能基を示す（部分構造：−ＯＣＯＲ；Ｒは任意の炭化水素系官能基を示す。）。すなわち、本発明における五環性トリテルペン類の、脂肪酸エステル基を有する誘導体とは、特に、その水酸基と脂肪酸類から形成可能な誘導体を示す。この際の脂肪酸類に特に制限は無いが、例えば、酢酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、吉草酸、イソ吉草酸、ピバル酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ウンデカン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、エライジン酸、バクセン酸、リノール酸、リノエライジン酸、リノレン酸、γ−リノレン酸、アラキジン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ベヘン酸、ドコサヘキサエン酸、リグノセリン酸、セロチン酸、モンタン酸、メリシン酸等が挙げられる。このうち、酢酸、無水酢酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、エライジン酸、リノール酸、リノエライジン酸、リノレン酸、γ−リノレン酸、アラキジン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ベヘン酸又はドコサヘキサエン酸から形成される誘導体が好ましい。
アルコキシ基とは、一般的な水酸基とアルコール類との脱水反応の結果として形成される官能基を示す（部分構造：−ＯＲ；Ｒは任意の炭化水素系官能基を示す。）。すなわち、本発明における五環性トリテルペン類の、アルコキシ基を有する誘導体とは、特に、その水酸基とアルコール類から形成可能な誘導体を示す。この際のアルコール類に特に制限は無いが、例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、アリルアルコール、ｎ−ブタノール、ｓｅｃ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、エチレングリコール、トリメチルシリルアルコール、トリエチルシリルアルコール、フェノール、ベンジルアルコール、糖類等が挙げられる。このうち、エタノール、トリエチルシリルアルコール、メタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール又はトリメチルシリルアルコールから形成される誘導体が好ましい。
アルコキシメチル基とは、一般的なヒドロキシメチル基とアルコール類との脱水反応の結果として形成される官能基を示す（部分構造：−ＣＨ２ＯＲ；Ｒは任意の炭化水素系官能基を示す。）。すなわち、本発明における五環性トリテルペン類の、アルコキシメチル基を有する誘導体とは、特に、そのヒドロキシメチル基とアルコール類から形成可能な誘導体を示す。この際のアルコール類に特に制限は無いが、例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、アリルアルコール、ｎ−ブタノール、ｓｅｃ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、エチレングリコール、トリメチルシリルアルコール、トリエチルシリルアルコール、フェノール、ベンジルアルコール、糖類等が挙げられる。このうち、エタノール、トリエチルシリルアルコール、メタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール又はトリメチルシリルアルコールから形成される誘導体が好ましい。
また、本発明における配糖体とは、上記のアルコールエステル基を有する誘導体、アルコキシ基を有する誘導体、アルコキシメチル基を有する誘導体のうち、特に、五環性トリテルペン類のカルボキシル基、水酸基、ヒドロキシメチル基と糖類から形成可能な誘導体を示す（部分構造：−ＣＯＯＲ、−ＯＲ、−ＣＨ２ＯＲ；Ｒは任意の糖類を示す。）。この際の糖類に特に制限は無いが、例えば、グルコース、マンノース、ガラクトース、フルクトース、キシロース、アラビノース、フコース、ラムノース、グルコサミン、ガラクトサミン、グルクロン酸等が挙げられ、何れもα体、β体どちらでもよい。またこれらの配糖体は、単糖でもよいし、二糖以上の様々な組合せのオリゴ糖でもよい。これらの中には、通常天然に存在し、サボニンという総称で知られているものも有るが、本発明においては、これらのいずれを用いてもよい。
本発明における五環性トリテルペン類等は上述の通りであるが、特に抗動脈硬化効果の高さの面からは、オレアナン系トリテルペン類、ウルサン系トリテルペン類、ルパン系トリテルペン類およびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体が好ましい。それぞれ、オレアナン系トリテルペン類については一般式（Ｉ）に、ウルサン系トリテルペン類については一般式（ＩＩ）に、ルパン系トリテルペン類については一般式（ＩＩＩ）に示される骨格を有する五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体である。また、それぞれの式中の官能基については、上記と同様である。
（式中、Ｒ１、Ｒ２は水素原子（−Ｈ）、水酸基（−ＯＨ）、アルコキシ基（−ＯＲ）、アルコールエステル基（−ＯＣＯＲ）を示し、Ｒ３はメチル基（−ＣＨ３）、ヒドロキシメチル基（−ＣＨ２ＯＨ）、アルコキシメチル基（−ＣＨ２ＯＲ）、カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）、脂肪酸エステル基（−ＣＯＯＲ）、カルボン酸塩（−ＣＯＯＸ）を示す。）
（式中、Ｒ１は水素原子（−Ｈ）、水酸基（−ＯＨ）、アルコキシ基（−ＯＲ）、アルコールエステル基（−ＯＣＯＲ）を示し、Ｒ２はメチル基（−ＣＨ３）、ヒドロキシメチル基（−ＣＨ２ＯＨ）、アルコキシメチル基（−ＣＨ２ＯＲ）、カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）、脂肪酸エステル基（−ＣＯＯＲ）、カルボン酸塩（−ＣＯＯＸ）を示す。）
（式中、Ｒ１は水素原子（−Ｈ）、水酸基（−ＯＨ）、アルコキシ基（−ＯＲ）、アルコールエステル基（−ＯＣＯＲ）を示し、Ｒ２はメチル基（−ＣＨ３）、ヒドロキシメチル基（−ＣＨ２ＯＨ）、アルコキシメチル基（−ＣＨ２ＯＲ）、カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）、脂肪酸エステル基（−ＣＯＯＲ）、カルボン酸塩（−ＣＯＯＸ）を示す。）
本発明において特に制限は無いが、例えば、オレアナン系トリテルペン類として、マスリン酸、オレアノール酸、エリトロジオール、β−アミリン、ヘデラゲニン、グリチルレチン酸等が挙げられ、ウルサン系トリテルペン類として、ウルソール酸、ウバオール、α−アミリン、キノボ酸、タラキサステロール、α−ヒドロキシウルソール酸等が挙げられ、ルパン系トリテルペン類として、ベツリン酸、ベツリン、ルペオール等が挙げられる。また、これらの生理的に許容される塩および誘導体については、前述と同様である。それらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体を使用する場合には、オレアナン系トリテルペン類、ウルサン系トリテルペン類、ルパン系トリテルペン類およびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体の由来は制限されず、天然から得られるもの、人工的に合成されたもの、市販品等何れも使用することができるが、本発明が飲食物であることを考慮に入れると、天然物を用いることが好ましい。
上述の通り、本発明においては、五環性トリテルペン類のうちのオレアナン系トリテルペン類（Ｉ）、ウルサン系トリテルペン類（ＩＩ）、ルパン系トリテルペン類（ＩＩＩ）およびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体が好ましいが、抗動脈硬化効果の強さの面から更に、オレアナン系トリテルペンとしてマスリン酸、エリトロジオールが好ましく、ウルサン系トリテルペンとしてウルソール酸、ウバオールが好ましく、ルパン系トリテルペンとしてベツリン酸、ベツリンが好ましく、当然に、それらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体が好ましい。
マスリン酸、エリトロジオールは、何れもオレアナン系トリテルペン類の一種であり、各種植物中に存在することが知られている物質である。また、これらの生理的に許容される塩および誘導体については、前述と同様である。本発明の血管障害疾患用飲食物等において、マスリン酸、エリトロジオール、それらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体を使用する場合には、これらの物質の由来は制限されず、天然から得られるもの、人工的に合成されたもの、市販品等何れも使用することができる。
本発明においては、抗動脈硬化効果等の高さ、安定供給の面で、マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩が最も好ましい。マスリン酸（ｍａｓｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）は、オレアナン系トリテルペンの一種で、化学式（ＩＶ）に示す構造であり、効果としては、抗炎症効果や抗ヒスタミン効果を有することが知られている。天然には、オリーブ、ホップ、ハッカ、ザクロ、チョウジ、セージ、ナツメ等に存在することが知られている。本発明の血管障害疾患用飲食物等において、マスリン酸、その生理的に許容される塩および誘導体の由来は制限されず、天然から得られるもの、人工的に合成されたもの、市販品等何れも使用することができるが、経口用途を考慮に入れると、例えば、オリーブ、ホップ、ハッカ、ザクロ、チョウジ、セージ、ナツメ等の天然から得られるものが好ましく、特にオリーブから得られるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩は原料供給や含量の面で非常に好ましい。これらの原料、特にはオリーブ植物から、水および／または有機溶媒により抽出処理することで得ることができ、さらに濃縮・精製することで高濃度の天然由来マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を簡便かつ大量に得ることができる。
尚、本明細書において、「オリーブ」は、オリーブ植物及び／又はオリーブ油及び／又はオリーブ油製造工程で得られる生成物を意味する。
本発明において、マスリン酸の生理的に許容される塩および誘導体については前記記載と同様である。すなわち、その生理的に許容される塩とは化学式（ＩＶ）における−ＣＯＯＨから誘導されるものであり、その塩の種類は通常飲食物または医薬組成物で用いられるものであれば特に限定はされない。具体的には、例えば、マスリン酸の塩として、マスリン酸ナトリウム、マスリン酸カリウム、マスリン酸アンモニウム、マスリン酸ジメチルアンモニウム、マスリン酸カルシウム、マスリン酸マグネシウム等が挙げられる。このうち、マスリン酸ナトリウム及びマスリン酸カリウムが好ましい。
また、マスリン酸の誘導体としては、例えば、何れか一個所が誘導体化されているものとして、マスリン酸メチルエステル、マスリン酸エチルエステル、マスリン酸ｎ−プロピルエステル、マスリン酸イソプロピルエステル、マスリン酸ｎ−ブチルエステル、マスリン酸トリメチルシリルエステル、マスリン酸トリエチルシリルエステル、マスリン酸−β−Ｄ−グルコピラノシルエステル、マスリン酸−β−Ｄ−ガラクトピラノシルエステル、３−Ｏ−アセチル−マスリン酸、３−Ｏ−プロピオニル−マスリン酸、３−Ｏ−ブチリル−マスリン酸、３−Ｏ−バレリル−マスリン酸、３−Ｏ−カプリル−マスリン酸、３−Ｏ−ラウリル−マスリン酸、３−Ｏ−ミリスチル−マスリン酸、３−Ｏ−パルミチル−マスリン酸、３−Ｏ−パルミトオレイル−マスリン酸、３−Ｏ−ステアリル−マスリン酸、３−Ｏ−ステアロイル−マスリン酸、３−Ｏ−オレイル−マスリン酸、３−Ｏ−バクセニル−マスリン酸、３−Ｏ−リノレイル−マスリン酸、３−Ｏ−リノレニル−マスリン酸、３−Ｏ−アラキジル−マスリン酸、３−Ｏ−アラキドニル−マスリン酸、３−Ｏ−ベヘニル−マスリン酸、２−Ｏ−アセチル−マスリン酸、２−Ｏ−プロピオニル−マスリン酸、２−Ｏ−ブチリル−マスリン酸、２−Ｏ−バレリル−マスリン酸、２−Ｏ−カプリル−マスリン酸、２−Ｏ−ラウリル−マスリン酸、２−Ｏ−ミリスチル−マスリン酸、２−Ｏ−パルミチル−マスリン酸、２−Ｏ−パルミトオレイル−マスリン酸、２−Ｏ−ステアリル−マスリン酸、２−Ｏ−ステアロイル−マスリン酸、２−Ｏ−オレイル−マスリン酸、２−Ｏ−バクセニル−マスリン酸、２−Ｏ−リノレイル−マスリン酸、２−Ｏ−リノレニル−マスリン酸、２−Ｏ−アラキジル−マスリン酸、２−Ｏ−アラキドニル−マスリン酸、２−Ｏ−ベヘニル−マスリン酸、３−Ｏ−メチル−マスリン酸、３−Ｏ−エチル−マスリン酸、３−Ｏ−ｔ−ブチル−マスリン酸、３−Ｏ−トリエチルシリル−マスリン酸、３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−マスリン酸、３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−マスリン酸、３−Ｏ−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−マスリン酸、２−Ｏ−メチル−マスリン酸、２−Ｏ−エチル−マスリン酸、２−Ｏ−ｔ−ブチル−マスリン酸、２−Ｏ−トリエチルシリル−マスリン酸、２−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−マスリン酸、２−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−マスリン酸、２−Ｏ−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−マスリン酸等が挙げられるこのうち、マスリン酸エチルエステル、マスリン酸トリエチルシリルエステル、３−Ｏ−アセチル−マスリン酸、２−Ｏ−アセチル−マスリン酸、２−Ｏ−トリエチルシリル−マスリン酸、３−Ｏ−ステアロイル−マスリン酸及び２−Ｏ−ステアロイル−マスリン酸が好ましい。以上には、誘導体として１基のみ誘導体化されているものを挙げたが、当然、これらのうち誘導される位置および種類が可能な２基以上が誘導体化されたものでもよい。例えば、マスリン酸又は上述の好ましいマスリン酸エステルの２，３−Ｏ−ジアセチル体、２，３−Ｏ−ジトリエチルシリル体及び２，３−ジステアロイル体が好ましいものとしてあげられる。また、配糖体については単糖のもののみ挙げたが、当然、様々な糖類からなる群より選ばれる二糖以上のオリゴ糖でもよい。
エリトロジオール（ｅｒｙｔｈｒｏｄｉｏｌ）は、オレアナン系トリテルペンの一種で、化学式（Ｖ）の様な構造であり、効果としてはこれまでに、抗炎症効果（Ｐｌａｎｔａ．Ｍｅｄ．ＶＯＬ．６１，Ｎｏ．２，１８２−１８５ １９９５）等を有することが知られている。天然には、オリーブ、ヒマワリ、キンセンカ、アラビアゴムノキ、コウキシタン、ナガバカコノキ等に存在することが知られている。本発明の血管障害疾患用飲食物等において、エリトロジオールまたはそれらの誘導体の由来は制限されず、天然から得られるもの、人工的に合成されたもの、市販品等何れも使用することができるが、経口用途を考慮に入れると、例えば、オリーブ、ヒマワリ、キンセンカ、アラビアゴムノキ、コウキシタン、ナガバカコノキ等の天然から得られるものが好ましい。特に、オリーブが好ましく、具体的にはオリーブ植物及び／又はオリーブ油製造工程で得られる生成物から得られるものが好ましい。
エリトロジオールについて、その生理的に許容される塩や誘導体については前述と同様である。
ここで、誘導体について以下に制限されないが、例えば、何れか一個所が誘導体化されているものとして、３−Ｏ−アセチル−エリトロジオール、３−Ｏ−プロピオニル−エリトロジオール、３−Ｏ−ブチリル−エリトロジオール、３−Ｏ−バレリル−エリトロジオール、３−Ｏ−カプリル−エリトロジオール、３−Ｏ−ラウリル−エリトロジオール、３−Ｏ−ミリスチル−エリトロジオール、３−Ｏ−パルミチル−エリトロジオール、３−Ｏ−パルミトオレイル−エリトロジオール、３−Ｏ−ステアリル−エリトロジオール、３−Ｏ−ステアロイル−エリトロジオール、３−Ｏ−オレイル−エリトロジオール、３−Ｏ−バクセニル−エリトロジオール、３−Ｏ−リノレイル−エリトロジオール、３−Ｏ−リノレニル−エリトロジオール、３−Ｏ−アラキジル−エリトロジオール、３−Ｏ−アラキドニル−エリトロジオール、３−Ｏ−ベヘニル−エリトロジオール、２８−Ｏ−アセチル−エリトロジオール、２８−Ｏ−プロピオニル−エリトロジオール、２８−Ｏ−ブチリル−エリトロジオール、２８−Ｏ−バレリル−エリトロジオール、２８−Ｏ−カプリル−エリトロジオール、２８−Ｏ−ラウリル−エリトロジオール、２８−Ｏ−ミリスチル−エリトロジオール、２８−Ｏ−パルミチル−エリトロジオール、２８−Ｏ−パルミトオレイル−エリトロジオール、２８−Ｏ−ステアリル−エリトロジオール、２８−Ｏ−ステアロイル−エリトロジオール、２８−Ｏ−オレイル−エリトロジオール、２８−Ｏ−バクセニル−エリトロジオール、２８−Ｏ−リノレイル−エリトロジオール、２８−Ｏ−リノレニル−エリトロジオール、２８−Ｏ−アラキジル−エリトロジオール、２８−Ｏ−アラキドニル−エリトロジオール、２８−Ｏ−ベヘニル−エリトロジオール、３−Ｏ−メチル−エリトロジオール、３−Ｏ−エチル−エリトロジオール、３−Ｏ−ｔ−ブチル−エリトロジオール、３−Ｏ−トリエチルシリル−エリトロジオール、２８−Ｏ−メチル−エリトロジオール、２８−Ｏ−エチル−エリトロジオール、２８−Ｏ−ｔ−ブチル−エリトロジオール、２８−Ｏ−トリエチルシリル−エリトロジオール、３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−エリトロジオール、３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−エリトロジオール、３−Ｏ−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−エリトロジオール、２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−エリトロジオール、２８−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−エリトロジオール、２８−Ｏ−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−エリトロジオール等が挙げられる。このうち、３−Ｏ−アセチル−エリトロジオール及び２８−Ｏ−アセチル−エリトロジオールが好ましい。以上には、誘導体として１基のみ誘導体化されているものを挙げたが、当然、これらのうち誘導される位置および種類が可能な２基以上が誘導体化されたものでもよい。例えば、３，２８−Ｏ−ジアセチル−エリトロジオールが好ましいものとしてあげられる。また、配糖体については単糖のもののみ挙げたが、当然、様々な糖類からなる群より選ばれる二糖以上のオリゴ糖でもよい。
ウルソール酸、ウバオール、は、何れもウルサン系トリテルペン類の一種であり、各種植物中に存在することが知られている物質である。また、これらの生理的に許容される塩および誘導体については、前述と同様である。本発明の血管障害疾患用飲食物等において、ウルソール酸、ウバオール、それらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体を使用する場合には、これらの物質の由来は制限されず、天然から得られるもの、人工的に合成されたもの、市販品等何れも使用することができるが、経口用途を考慮に入れると、天然物を用いることが好ましい。
ウルソール酸（ｕｒｓｏｌｉｃ ａｃｉｄ）は、ウルサン系トリテルペンの一種で、化学式（ＶＩ）で示される構造の化合物で、効果としてはこれまでに、抗炎症効果、抗動脈硬化効果、抗糖尿病効果、抗高脂血症効果（Ｊｉｅ Ｌｉｕ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，４９，５７−６８，１９９５）等を有することが知られている。天然には、リンゴ、サクランボ、ウワウルシ等の果実や葉に広く分布することが知られている。本発明の血管障害疾患用飲食物等において、ウルソール酸、それらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体の由来は制限されず、天然から得られるもの、人工的に合成されたもの、市販品等何れも使用することができるが、経口用途を考慮に入れると、例えば、リンゴ、サクランボ、ウワウルシ等の天然から得られるものが好ましい。
ウルソール酸について、その生理的に許容される塩や誘導体については前述と同様である。
ここで、その生理的に許容される塩について以下に制限されないが、例えば、ウルソール酸の塩として、ウルソール酸ナトリウム、ウルソール酸カリウム、ウルソール酸アンモニウム、ウルソール酸ジメチルアンモニウム、ウルソール酸カルシウム、ウルソール酸マグネシウム等が挙げられる。
ウルソール酸の誘導体としては、例えば、何れか一個所が誘導体化されているものとして、ウルソール酸メチルエステル、ウルソール酸エチルエステル、ウルソール酸ｎ−プロピルエステル、ウルソール酸イソプロピルエステル、ウルソール酸ｎ−ブチルエステル、ウルソール酸トリメチルシリルエステル、ウルソール酸トリエチルシリルエステル、ウルソール酸−β−Ｄ−グルコピラノシルエステル、ウルソール酸−β−Ｄ−ガラクトピラノシルエステル、３−Ｏ−アセチル−ウルソール酸、３−Ｏ−プロピオニル−ウルソール酸、３−Ｏ−ブチリル−ウルソール酸、３−Ｏ−バレリル−ウルソール酸、３−Ｏ−カプリル−ウルソール酸、３−Ｏ−ラウリル−ウルソール酸、３−Ｏ−ミリスチル−ウルソール酸、３−Ｏ−パルミチル−ウルソール酸、３−Ｏ−パルミトオレイル−ウルソール酸、３−Ｏ−ステアリル−ウルソール酸、３−Ｏ−ステアロイル−ウルソール酸、３−Ｏ−オレイル−ウルソール酸、３−Ｏ−バクセニル−ウルソール酸、３−Ｏ−リノレイル−ウルソール酸、３−Ｏ−リノレニル−ウルソール酸、３−Ｏ−アラキジル−ウルソール酸、３−Ｏ−アラキドニル−ウルソール酸、３−Ｏ−ベヘニル−ウルソール酸、３−Ｏ−メチル−ウルソール酸、３−Ｏ−エチル−ウルソール酸、３−Ｏ−ｔ−ブチル−ウルソール酸、３−Ｏ−トリエチルシリル−ウルソール酸、３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−ウルソール酸、３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−ウルソール酸、３−Ｏ−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−ウルソール酸等が挙げられる。以上には、誘導体として１基のみ誘導体化されているものを挙げたが、当然、これらのうち誘導される位置および種類が可能な２基以上が誘導体化されたものでもよい。また、配糖体については単糖のもののみ挙げたが、当然、様々な糖類からなる群より選ばれる二糖以上のオリゴ糖でもよい。
ウバオール（ｕｖａｏｌ）は、ウルサン系トリテルペンの一種で、化学式（ＶＩＩ）の様な構造であり、効果としてはこれまでに、抗炎症効果（Ｐｌａｎｔａ．Ｍｅｄ．ＶＯＬ．６１，Ｎｏ．２，１８２−１８５ １９９５）、グリセロリン酸脱水素酵素阻害効果（特開平９−６７２４９）等を有することが知られている。天然には、オリーブ、ウワウルシ、セージ、アラビアゴムノキ、カユプテ等に存在することが知られている。本発明の血管障害疾患用飲食物等において、ウバオールまたはそれらの誘導体の由来は制限されず、天然から得られるもの、人工的に合成されたもの、市販品等何れも使用することができるが、経口用途を考慮に入れると、例えば、オリーブ、ウワウルシ、セージ、アラビアゴムノキ、カユプテ等の天然から得られるものが好ましい。特に、オリーブが好ましく、具体的にはオリーブ植物及び／又はオリーブ油製造工程で得られる生成物から得られるものが好ましい。
ウバオールについて、その生理的に許容される塩や誘導体については前述と同様である。
ここで、誘導体について以下に制限されないが、例えば、何れか一個所が誘導体化されているものとして、３−Ｏ−アセチル−ウバオール、３−Ｏ−プロピオニル−ウバオール、３−Ｏ−ブチリル−ウバオール、３−Ｏ−バレリル−ウバオール、３−Ｏ−カプリル−ウバオール、３−Ｏ−ラウリル−ウバオール、３−Ｏ−ミリスチル−ウバオール、３−Ｏ−パルミチル−ウバオール、３−Ｏ−パルミトオレイル−ウバオール、３−Ｏ−ステアリル−ウバオール、３−Ｏ−ステアロイル−ウバオール、３−Ｏ−オレイル−ウバオール、３−Ｏ−バクセニル−ウバオール、３−Ｏ−リノレイル−ウバオール、３−Ｏ−リノレニル−ウバオール、３−Ｏ−アラキジル−ウバオール、３−Ｏ−アラキドニル−ウバオール、３−Ｏ−ベヘニル−ウバオール、２８−Ｏ−アセチル−ウバオール、２８−Ｏ−プロピオニル−ウバオール、２８−Ｏ−ブチリル−ウバオール、２８−Ｏ−バレリル−ウバオール、２８−Ｏ−カプリル−ウバオール、２８−Ｏ−ラウリル−ウバオール、２８−Ｏ−ミリスチル−ウバオール、２８−Ｏ−パルミチル−ウバオール、２８−Ｏ−パルミトオレイル−ウバオール、２８−Ｏ−ステアリル−ウバオール、２８−Ｏ−ステアロイル−ウバオール、２８−Ｏ−オレイル−ウバオール、２８−Ｏ−バクセニル−ウバオール、２８−Ｏ−リノレイル−ウバオール、２８−Ｏ−リノレニル−ウバオール、２８−Ｏ−アラキジル−ウバオール、２８−Ｏ−アラキドニル−ウバオール、２８−Ｏ−ベヘニル−ウバオール、３−Ｏ−メチル−ウバオール、３−Ｏ−エチル−ウバオール、３−Ｏ−ｔ−ブチル−ウバオール、３−Ｏ−トリエチルシリル−ウバオール、２８−Ｏ−メチル−ウバオール、２８−Ｏ−エチル−ウバオール、２８−Ｏ−ｔ−ブチル−ウバオール、２８−Ｏ−トリエチルシリル−ウバオール、３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−ウバオール、３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−ウバオール、３−Ｏ−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−ウバオール、２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−ウバオール、２８−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−ウバオール、２８−Ｏ−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−ウバオール等が挙げられる。このうち、３−Ｏ−アセチル−ウバオール及び２８−Ｏ−アセチル−ウバオールが好ましい。以上には、誘導体として１基のみ誘導体化されているものを挙げたが、当然、これらのうち誘導される位置および種類が可能な２基以上が誘導体化されたものでもよい。例えば、３，２８−Ｏ−ジアセチル−ウバオールが好ましいものとしてあげられる。また、配糖体については単糖のもののみ挙げたが、当然、様々な糖類からなる群より選ばれる二糖以上のオリゴ糖でもよい。
ベツリン酸、ベツリン、は、何れもルパン系トリテルペン類の一種であり、各種植物中に存在することが知られている物質である。また、これらの生理的に許容される塩および誘導体については、前述と同様である。本発明の血管障害疾患用飲食物等において、ベツリン酸、ベツリン、それらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体を使用する場合には、これらの物質の由来は制限されず、天然から得られるもの、人工的に合成されたもの、市販品等何れも使用することができるが、経口用途を考慮に入れると、天然物を用いることが好ましい。
ベツリン酸（ｂｅｔｕｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）は、ルパン系トリテルペンの一種で、化学式（ＶＩＩＩ）の様な構造であり、効果としてはこれまでに、制癌効果、抗炎症効果、創傷治療促進効果（特公平４−２６６２３）、アルコール吸収抑制効果（特開平７−５３３８５）、発毛促進効果（特開平９−１５７１３９）等を有することが知られている。天然には、センブリ、チョウジ、ブドウ果皮、オリーブ等に遊離状態で、チクセツニンジン、ニンジン、サトウダイコン等にはサポニンとして存在することが知られている。本発明の血管障害疾患用飲食物等において、ベツリン酸、それらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体の由来は制限されず、天然から得られるもの、人工的に合成されたもの、市販品等何れも使用することができるが、経口用途を考慮に入れると、例えば、センブリ、チョウジ、ブドウ、オリーブ、チクセツニンジン、ニンジン、サトウダイコン等の天然から得られるものが好ましい。特に、オリーブから得られるものが好ましく、具体的には、オリーブ植物及び／又はオリーブ油製造工程で得られる生成物から得られるものが好ましい。
ベツリン酸について、その生理的に許容される塩や誘導体については前述と同様である。
ここで、その生理的に許容される塩について以下に制限されないが、例えば、ベツリン酸の塩として、ベツリン酸ナトリウム、ベツリン酸カリウム、ベツリン酸アンモニウム、ベツリン酸ジメチルアンモニウム、ベツリン酸カルシウム、ベツリン酸マグネシウム等が挙げられる。このうち、ベツリン酸ナトリウム及びベツリン酸カリウムが好ましい。
ベツリン酸の誘導体としては、例えば、何れか一個所が誘導体化されているものとして、ベツリン酸メチルエステル、ベツリン酸エチルエステル、ベツリン酸ｎ−プロピルエステル、ベツリン酸イソプロピルエステル、ベツリン酸ｎ−ブチルエステル、ベツリン酸トリメチルシリルエステル、ベツリン酸トリエチルシリルエステル、ベツリン酸−β−Ｄ−グルコピラノシルエステル、ベツリン酸−β−Ｄ−ガラクトピラノシルエステル、３−Ｏ−アセチル−ベツリン酸、３−Ｏ−プロピオニル−ベツリン酸、３−Ｏ−ブチリル−ベツリン酸、３−Ｏ−バレリル−ベツリン酸、３−Ｏ−カプリル−ベツリン酸、３−Ｏ−ラウリル−ベツリン酸、３−Ｏ−ミリスチル−ベツリン酸、３−Ｏ−パルミチル−ベツリン酸、３−Ｏ−パルミトオレイル−ベツリン酸、３−Ｏ−ステアリル−ベツリン酸、３−Ｏ−ステアロイル−ベツリン酸、３−Ｏ−オレイル−ベツリン酸、３−Ｏ−バクセニル−ベツリン酸、３−Ｏ−リノレイル−ベツリン酸、３−Ｏ−リノレニル−ベツリン酸、３−Ｏ−アラキジル−ベツリン酸、３−Ｏ−アラキドニル−ベツリン酸、３−Ｏ−ベヘニル−ベツリン酸、３−Ｏ−メチル−ベツリン酸、３−Ｏ−エチル−ベツリン酸、３−Ｏ−ｔ−ブチル−ベツリン酸、３−Ｏ−トリエチルシリル−ベツリン酸、３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−ベツリン酸、３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−ベツリン酸、３−Ｏ−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−ベツリン酸等が挙げられる。このうち、ベツリン酸エチルエステルが好ましい。以上には、誘導体として１基のみ誘導体化されているものを挙げたが、当然、これらのうち誘導される位置および種類が可能な２基以上が誘導体化されたものでもよい。また、配糖体については単糖のもののみ挙げたが、当然、様々な糖類からなる群より選ばれる二糖以上のオリゴ糖でもよい。
ベツリン（ｂｅｔｕｌｉｎ）は、ルパン系トリテルペンの一種で、化学式（ＩＸ）の様な構造であり、効果としてはこれまでに、生体タンパク質変性抑制効果（特開平９−６７２５３）、グリセロリン酸脱水素酵素阻害効果（特開平９−６７２４９）、リパーゼ阻害効果（特開平１０−２６５３２８）、肝疾患予防効果（特開平１１−２０９２７５）等を有することが知られている。天然には、シラカバの樹皮等に存在することが知られている。本発明の血管障害疾患用飲食物等において、ベツリンまたはそれらの誘導体の由来は制限されず、天然から得られるもの、人工的に合成されたもの、市販品等何れも使用することができるが、経口用途を考慮に入れると、例えば、シラカバの樹皮等の天然から得られるものが好ましい。
ベツリンについて、その生理的に許容される塩や誘導体については前述と同様である。
ここで、誘導体について以下に制限されないが、例えば、何れか一個所が誘導体化されているものとして、３−Ｏ−アセチル−ベツリン、３−Ｏ−プロピオニル−ベツリン、３−Ｏ−ブチリル−ベツリン、３−Ｏ−バレリル−ベツリン、３−Ｏ−カプリル−ベツリン、３−Ｏ−ラウリル−ベツリン、３−Ｏ−ミリスチル−ベツリン、３−Ｏ−パルミチル−ベツリン、３−Ｏ−パルミトオレイル−ベツリン、３−Ｏ−ステアリル−ベツリン、３−Ｏ−ステアロイル−ベツリン、３−Ｏ−オレイル−ベツリン、３−Ｏ−バクセニル−ベツリン、３−Ｏ−リノレイル−ベツリン、３−Ｏ−リノレニル−ベツリン、３−Ｏ−アラキジル−ベツリン、３−Ｏ−アラキドニル−ベツリン、３−Ｏ−ベヘニル−ベツリン、２８−Ｏ−アセチル−ベツリン、２８−Ｏ−プロピオニル−ベツリン、２８−Ｏ−ブチリル−ベツリン、２８−Ｏ−バレリル−ベツリン、２８−Ｏ−カプリル−ベツリン、２８−Ｏ−ラウリル−ベツリン、２８−Ｏ−ミリスチル−ベツリン、２８−Ｏ−パルミチル−ベツリン、２８−Ｏ−パルミトオレイル−ベツリン、２８−Ｏ−ステアリル−ベツリン、２８−Ｏ−ステアロイル−ベツリン、２８−Ｏ−オレイル−ベツリン、２８−Ｏ−バクセニル−ベツリン、２８−Ｏ−リノレイル−ベツリン、２８−Ｏ−リノレニル−ベツリン、２８−Ｏ−アラキジル−ベツリン、２８−Ｏ−アラキドニル−ベツリン、２８−Ｏ−ベヘニル−ベツリン、３−Ｏ−メチル−ベツリン、３−Ｏ−エチル−ベツリン、３−Ｏ−ｔ−ブチル−ベツリン、３−Ｏ−トリエチルシリル−ベツリン、２８−Ｏ−メチル−ベツリン、２８−Ｏ−エチル−ベツリン、２８−Ｏ−ｔ−ブチル−ベツリン、２８−Ｏ−トリエチルシリル−ベツリン、３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−ベツリン、３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−ベツリン、３−Ｏ−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−ベツリン、２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−ベツリン、２８−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−ベツリン、２８−Ｏ−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−ベツリン等が挙げられる。このうち、３−Ｏ−アセチル−ベツリン及び２８−Ｏ−アセチル−ベツリンが好ましい。以上には、誘導体として１基のみ誘導体化されているものを挙げたが、当然、これらのうち誘導される位置および種類が可能な２基以上が誘導体化されたものでもよい。例えば、３，２８−Ｏ−ジアセチル−ベツリンが好ましい。また、配糖体については単糖のもののみ挙げたが、当然、様々な糖類からなる群より選ばれる二糖以上のオリゴ糖でもよい。
本発明は、上記、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物に関する。ここで、有効成分として含有するとは、血管平滑筋細胞増殖抑制効果を発現する程度に含有するということである。
本発明において、血管平滑筋細胞増殖抑制効果とは、動脈硬化巣内に侵入した血管平滑筋細胞が動脈硬化巣内で増殖することを抑制することを示し、結果的には、動脈硬化巣が血管内膜に生成することを予防したり、既に存在する動脈硬化巣がそれ以上肥大しないように、あるいは縮小させたりすることが期待できる。本発明の血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物は、特に動脈硬化の増生等に対する予防および／または治療用として使用するものである。予防用としての使用とは、内膜へと遊走してきた血管平滑筋細胞の増殖を抑制し、動脈硬化が発生しないようにすることを目的として使用することを示す。治療用としての使用とは、既に内膜内に存在する血管平滑筋細胞のそれ以上の増殖を抑制したり、あるいは、増殖した血管平滑筋細胞を速やかに減少させる等により、総血管平滑筋細胞を減少させ、動脈硬化巣の増生を抑制したり、動脈硬化巣の破裂を阻止することを目的として使用することを示す。従って本発明はまた、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群から選ばれる化合物を有効成分として含有する血管平滑筋細胞増殖が病態に関与する病変又は病態に関与する疾患の予防用又は治療用飲食物に関する。
本発明で血管平滑筋細胞増殖抑制効果の評価に用いた方法は、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの抗動脈硬化薬物のスクリーニング法として既知の方法であり（特開平５−５６７９６）、スクリーニングが容易で、迅速且つ多大な動物の犠牲が回避できる点が特徴である。本発明では、培養血管平滑筋細胞の有する酸化還元能により蛍光物質を生成する試薬を用い、その蛍光物質の生成量を蛍光強度の強弱により判定することで、増殖抑制効果の有無を検討している。
本発明における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体の血管平滑筋細胞増殖抑制効果は、血管平滑筋細胞を用いた試験法にて示される。ここで一般に、動脈壁中膜に存在する血管平滑筋細胞とは、収縮と弛緩を繰り返し、血流を調節する機能を有し、構造的には、α−アクチンを含む繊維成分に富む。本発明において対象としている血管平滑筋細胞とは、平滑筋増殖因子等の刺激によってフェノタイプが合成型に変換したものであり、このタイプは繊維成分が粗であるため収縮能を失い、逆に、増殖能、遊走能、多量の結合織産生能を獲得し、ある場合には変性リポタンパクを取込み泡沫化するので、動脈硬化症発症の一因となるものである。本発明で用いた血管平滑筋細胞は、ラット大動脈由来の増殖型培養血管平滑筋細胞株であり、この細胞は通常に培養した場合、倍数時間２５時間の増殖能で、培養面上に均一に単層を形成する。これに対して、この培養系に血管平滑筋細胞増殖抑制効果を有する物質を存在させると、血管平滑筋細胞の増殖が抑えられ相対的に細胞の酸化還元能が抑制され、生成される蛍光物質の量も減少し蛍光強度が減少する。この相対的な蛍光強度の度合いから、血管平滑筋細胞増殖抑制効果を見積もることができる。
上記試験法での評価によると、本発明における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体の血管平滑筋細胞増殖抑制効果を、公知の抗動脈硬化用飲食物であるα−トコフェロールと比較すると、例えば、マスリン酸では約１０〜１４倍、マスリン酸の塩では約６〜１０倍、エリトロジオールでは約１０〜１４倍、ウルソール酸では約６〜１０倍、ウバオールでは約４〜８倍、ベツリン酸では約４〜８倍、ベツリンでは約４〜８倍、マスリン酸エチルエステルでは約６〜１０倍、アセチル化マスリン酸では約６〜１０倍、トリエチルシリル化マスリン酸では約４〜８倍、ステアリル化マスリン酸エチルでは約６〜１０倍、アセチル化エリトロジオールでは約４〜８倍、ウルソール酸エチルエステルでは約６〜１０倍、アセチル化ウバオールでは約４〜６倍、ベツリン酸エチルでは約４〜６倍、アセチル化ベツリンでは約４〜６倍という、高い血管平滑筋細胞増殖抑制効果を有していることが分かる。すなわち、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体を含有することにより、高い血管平滑筋細胞増殖抑制効果を享受できるものである。
また、上記、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体は、血管平滑筋細胞遊走抑制効果を有する。すなわち本発明は、より直接的に、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする血管平滑筋細胞遊走抑制用飲食物に関する。ここで、有効成分として含有するとは、その血管平滑筋細胞遊走抑制効果を発現する程度に含有するということである。
本発明において、血管平滑筋遊走抑制効果とは、血管傷害や高脂血症等により正常値を逸脱した血液成分より増殖能を獲得した中膜由来の血管平滑筋細胞が、血液中の遊走因子の濃度勾配に従って、血管中膜から血管内膜もしくは血管内皮細胞下の動脈硬化巣へと移動（＝遊走）していくのを抑制することを示し、結果的には、血管平滑筋細胞の遊走を抑制することで動脈硬化巣が生成することを予防したり、既に存在する動脈硬化巣に血管平滑筋細胞が遊走しないようにすることが期待できる。すなわち、本発明の血管平滑筋細胞遊走抑制用飲食物は、血管平滑筋細胞の中膜から内膜内への遊走を抑制し、動脈硬化巣が発生しないようにすることを目的とした、動脈硬化巣の増生等に対する予防用として使用するものである。本発明では、血管平滑筋細胞が遊走因子により活性化され、遊走因子の濃度の濃い方へと遊走していった細胞数を計測し、対照群と比較することで遊走抑制効果の有無を判定している。従って本発明はまた、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸、ベツリン、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分として含有する血管平滑筋細胞遊走が関与する病変又は病態に関与する疾患の予防用又は治療用飲食物に関する。
本発明における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体の血管平滑筋細胞遊走抑制効果は、血管平滑筋細胞を用いた試験法にて示される。本発明で用いた血管平滑筋細胞とは、ラット大動脈由来の増殖型培養血管平滑筋細胞株であり、この細胞に遊走因子である血小板活性化因子を効果させると、その濃度の濃い方へ細胞が遊走する。これに対して、遊走因子と共に血管平滑筋細胞遊走抑制効果を有する物質を存在させると、細胞の遊走数が減少する。この相対的な細胞数の度合いから、血管平滑筋細胞遊走抑制効果を見積もることができる。
上記試験法での評価によると、本発明における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体の血管平滑筋細胞遊走抑制効果を、公知の抗動脈硬化用飲食物であるα−トコフェロールと比較すると、例えば、マスリン酸では約２５〜３０倍、マスリン酸の塩では約２５〜３０倍、ウルソール酸では約２５〜３０倍、マスリン酸エチルエステルでは約２５〜３０倍、アセチル化マスリン酸では約２５〜３０倍、トリエチルシリル化マスリン酸では約２４〜２７倍、ステアリル化マスリン酸エチルでは約２５〜３０倍、ウルソール酸エチルエステルでは約２４〜２７倍という、非常に高い血管平滑筋細胞遊走抑制効果を有していることが分かる。すなわち、五環性トリテルペン類およびその生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体を含有することにより、その非常に強力な血管平滑筋細胞遊走抑制効果を享受できるものである。特にこれらは、血管平滑筋細胞増殖抑制効果も有するため、非常に好ましい。
本発明は、上述のごとく、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする抗細胞増殖性血管病変用飲食物に関する。ここで、細胞増殖性血管病変とは、血管平滑筋細胞の遊走および異常増殖によって血管内膜の肥厚や動脈硬化が発生した血管組織部位のことであり、冠動脈硬化、腹部大動脈硬化、腎動脈硬化、頚動脈硬化、眼底動脈硬化、脳動脈硬化等の動脈硬化病変部や、ＰＣＴＡ施行後の再狭窄部を指す。本発明の抗細胞増殖性血管病変用飲食物は、特に血管平滑筋細胞増殖および／または血管平滑筋細胞遊走に起因する血管内膜の肥厚や動脈硬化に対する効果により、内膜肥厚や動脈硬化の予防および／または治療効果を有する。
また、本発明は、前記細胞増殖性血管病変が内膜肥厚である、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする抗内膜肥厚用飲食物に関する。ここで、有効成分として含有するとは、内膜肥厚抑制効果を発現する程度に含有するということである。また、内膜肥厚抑制効果とは、血管平滑筋細胞の遊走および異常増殖による血管内膜の肥厚化を抑制することを示し、結果的には、動脈硬化症や、心筋梗塞、心不全等の虚血性心疾患、脳梗塞、脳卒中などの脳血管疾患の予防および／または治療が期待できる。
本発明における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体の内膜肥厚抑制効果は、動物を用いた試験法にて示される。すなわち、物理的に動脈の内皮細胞を剥離することで当該部位に炎症が生じ、その部位の内膜に血管平滑筋細胞が遊走し増殖することで内膜が肥厚化する。それに対して、内膜肥厚抑制効果を有する物質を動物に投与すると肥厚化が抑制される。この抑制度合いから内膜肥厚抑制効果を見積もることができる。
上記試験法での評価によると、本発明における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体の内膜肥厚抑制効果を、対照群である綿実油と比較すると、例えば、マスリン酸では約４０〜６０％抑制、マスリン酸の塩では約３５〜５５％抑制、エリトロジオールでは約４０〜６０％抑制、ウルソール酸では約３０〜５０％抑制、ウバオールでは約２５〜４５％抑制、ベツリン酸では約１５〜３５％抑制、ベツリンでは約１５〜３５％抑制という、高い内膜肥厚抑制効果を有していることが分かる。すなわち、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体を含有することにより、高い内膜肥厚抑制効果を享受できるものである。
本発明は、前記、細胞増殖性血管病変が動脈硬化である、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする抗動脈硬化用飲食物に関する。本発明の抗動脈硬化用飲食物は、経口および／または非経口で投与することで、抗動脈硬化効果を発現する。
抗動脈硬化効果とは、動脈硬化巣内の血管平滑筋細胞の増殖抑制および／または増殖型血管平滑筋細胞の動脈硬化巣内への遊走抑制を意図している。一般に、動脈硬化とは、動脈内皮損傷が引き金となって収縮型から増殖型へと形質転換した血管平滑筋細胞が、中膜から内膜へと遊走し内膜内で増殖することで血管内膜が肥厚して発生するものと考えられている。したがって、血管平滑筋細胞の遊走や増殖を抑制することで血管内皮の肥厚化を阻止することができれば、動脈硬化症や虚血性心疾患、脳血管疾患等の血管疾患を予防、改善することが可能である。この点において、本発明の抗動脈硬化用飲食物は、血管平滑筋細胞増殖抑制効果および／または血管平滑筋細胞遊走抑制効果を有する五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を含有するため、動脈硬化症や虚血性心疾患、脳血管疾患等の血管疾患の発症を最小限に抑えることが期待でき、非常に好ましい。すなわち、本発明の抗動脈硬化用飲食物は、摂取することによりその抗動脈硬化効果を発現するものであり、虚血性心疾患や脳血管疾患等を改善あるいは防止し、延命率の延長等に大きく寄与するものである。特に、マスリン酸、ウルソール酸およびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする抗動脈硬化用飲食物は、血管平滑筋細胞増殖抑制効果および血管平滑筋細胞遊走抑制効果を有し、強力な抗動脈硬化用飲食物として使用することができ、非常に好ましい。
本発明における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体の抗動脈硬化効果は、動物を用いた試験法にて示される。すなわち、高コレステロール食を長期に渡り摂食させることで大動脈に動脈硬化を発症させる。それに対して、抗動脈硬化効果を有する物質を動物に投与すると大動脈の動脈硬化が抑制される。この抑制度合いから抗動脈硬化効果を見積もることができる。
上記試験法での評価によると、本発明における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体の抗動脈硬化効果を、対照である高コレステロール食群と比較すると、例えば、マスリン酸では約４０〜６０％抑制、マスリン酸の塩では約４０〜６０％抑制、エリトロジオールでは約５０〜７０％抑制、ウルソール酸では約４０〜６０％抑制、ウバオールでは約３０〜５０％抑制、ベツリン酸では約２５〜４５％抑制、ベツリンでは約２５〜４５％抑制という、高い抗動脈硬化効果を有していることが分かる。すなわち、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体を含有することにより、高い抗動脈硬化効果を享受できるものである。
また本発明は、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする血管障害疾患用飲食物に関する。ここで、血管障害疾患とは、主に前記細胞増殖性血管病変に起因する疾患であり、血管平滑筋細胞の増殖や血管内膜への遊走により動脈硬化や血管内膜肥厚化等の血管障害が発生した結果惹起される疾患のことである。具体的には冠動脈硬化症、腹部大動脈硬化症、閉塞性動脈硬化症、腎動脈硬化症、頚動脈硬化症、眼底動脈硬化症、脳動脈硬化症等の動脈硬化症や、ＰＴＣＡ後の再狭窄、心筋梗塞・狭心症等の虚血性心疾患、脳梗塞・脳卒中等の脳血管疾患を言う。
すなわち、本発明の血管障害疾患用飲食物は、血管障害の発生に関与する血管平滑筋細胞に対する効果により、血管平滑筋細胞を主とした細胞増殖性血管病変の発生による動脈硬化症、ＰＴＣＡ後の再狭窄、虚血性心疾患、脳血管疾患等の予防および／または治療効果を有する。予防効果としては、血管平滑筋細胞の増殖および／または遊走を抑制することで、動脈硬化巣や血管内膜肥厚が発生しないようにしたり、動脈硬化症やＰＴＣＡ後の再狭窄等の血管障害疾患を予防することを示す。治療効果としては、それ以上の血管平滑筋細胞の増殖および／または遊走を抑制、あるいは、増殖した血管平滑筋細胞の速やかな減少等により、総血管平滑筋細胞を減少させ、動脈硬化巣や血管内膜肥厚の増生を抑制したり、動脈硬化巣の破裂を阻止したり、内膜肥厚を解消することで血管障害疾患を治療することを示す。
本発明は、前記血管障害疾患が動脈硬化症である、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする抗動脈硬化症用飲食物に関する。ここで動脈硬化症とは、動脈壁が肥厚し弾力性を失う多くの疾患の包括的な用語であり、全身性心血管障害を指す。具体的には、冠動脈硬化症、腹部大動脈硬化症、腎動脈硬化症、頚動脈硬化症、眼底動脈硬化症、脳動脈硬化症等を指す。すなわち、本発明は、動脈硬化巣の生成に関与する血管平滑筋細胞に対する効果をもって、上記物質を有効成分とする抗動脈硬化症用飲食物に関する。特に、マスリン酸、ウルソール酸およびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする抗動脈硬化症用飲食物は、血管平滑筋細胞増殖抑制効果および血管平滑筋細胞遊走抑制効果を有することから、強力な抗動脈硬化症用飲食物として使用することができ、非常に好ましい。
本発明は、前記血管障害疾患がＰＴＣＡ後の再狭窄である、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とするＰＴＣＡ後の抗再狭窄用飲食物に関する。本発明の抗再狭窄用飲食物は、経口摂取することで、前述した、内膜肥厚抑制効果を発現する。
一般に、再狭窄とは、ＰＴＣＡ施行後に同一部位に血管平滑筋細胞を主とする細胞繊維性の内膜肥厚の結果、当該部位が狭小化することであることが知られている。したがって、血管平滑筋細胞の遊走や増殖を抑制することで血管内膜の肥厚化を阻止することができれば、ＰＴＣＡ後の再狭窄を予防、治療することが可能である。この点において、本発明のＰＴＣＡ後の抗再狭窄用飲食物は、血管平滑筋細胞増殖抑制効果および／または血管平滑筋細胞遊走抑制効果等を有する五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を含有するため、動脈硬化や血管内膜肥厚が阻止され、ＰＴＣＡ後の再狭窄による虚血性心疾患の発症を最小限に抑えることが期待でき、非常に好ましい。すなわち、本発明のＰＴＣＡ後の抗再狭窄用飲食物は、摂取することによりその内膜肥厚抑制効果を発現するものであり、虚血性心疾患を改善あるいは防止し、延命率の延長等に大きく寄与するものである。特に、マスリン酸、ウルソール酸およびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする抗再狭窄用飲食物は、血管平滑筋細胞増殖抑制効果および血管平滑筋細胞遊走抑制効果を有することから、強力な抗再狭窄用飲食物として使用することができ、非常に好ましい。
五環性トリテルペン類およびそれらのアルコールエステル基を有する誘導体、脂肪酸エステル基を有する誘導体、アルコキシ基を有する誘導体、アルコキシメチル基を有する誘導体は、概して脂溶性なので、油系、あるいは乳化系の血管障害疾患用飲食物等に好適に配合することができる。また、特に油脂あるいは油脂加工品としての摂取においては、油とともに吸収されることが期待されるため、吸収性の面で好ましい。
また、五環性トリテルペン類の生理的に許容される塩あるいは配糖体は、概して水溶性を示すので、水系あるいは乳化系等の血管障害疾患用飲食物に、均一に溶解ないしは分散させて含有させることで好適に配合することができる。特に飲料等は水系あるいは乳化系での製品化が多いので、この場合、必要に応じて五環性トリテルペン類を、その生理的に許容される塩あるいは配糖体とすることで好適に配合することができる。
さらに、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体は、強い効果を有し少量の血管障害疾患用飲食物等への配合で、通常必要とされる血管平滑筋細胞増殖抑制効果、血管平滑筋細胞遊走抑制効果等を得ることができるので、コスト面でのメリットがあるとともに、配合比の面から他の成分を配合できる余裕が生じるので、その他の機能をさらに充実させることができ、好ましい。
当然、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体の配合量を増やすことで、極めて優れた血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物、血管平滑筋細胞遊走抑制用飲食物、抗細胞増殖性血管病変用飲食物、血管障害疾患用飲食物等の製造が、本発明により可能である。
本発明における五環性トリテルペン類は、上述の通り、天然物として植物等に存在している事が知られており、ほとんどのものがそれらの植物を通して、食経験があるものであり、過剰摂取しない限り生体に対する悪影響はないとされている。
実際に動物に投与した場合では、例えばマスリン酸の場合、ＬＤ５０値は、２０００ｍｇ／体重ｋｇ以上であり、極めて安全性の高いことが確認できる。このことは、血管平滑筋細胞増殖抑制効果、血管平滑筋細胞遊走抑制効果等を有する五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体を安全に投与することができることを示す。
本発明の血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物は、継続的な摂取をすることで、より好適な効果を得ることができる。本発明の血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物の配合量は、一概には規定されず、トリテルペン類の種類、予防か治療かという使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を踏まえ、必要とする効果の強さに応じて適宜決めればよい。以下に限定されないが、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％であれば良い。何れにせよ含量が高いほど効果が強いが、使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を考慮し、含量を調整することが必要である。
本発明中の血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物中に有効成分としてマスリン酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物中に有効成分としてエリトロジオールおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物中に有効成分としてウルソール酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物中に有効成分としてウバオールおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物中に有効成分としてベツリン酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の血管平滑筋細胞増殖抑制中に有効成分としてベツリンおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明の血管平滑筋細胞遊走抑制用飲食物は、継続的な摂取をすることで、より好適な効果を得ることができる。本発明の血管平滑筋細胞遊走抑制用飲食物における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物の配合量は、一概には規定されず、トリテルペン類の種類、予防か治療かという使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を踏まえ、必要とする効果の強さに応じて適宜決めればよい。以下に限定されないが、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％であれば良い。何れにせよ含量が高いほど効果が強いが、使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を考慮し、含量を調整することが必要である。
本発明中の血管平滑筋細胞遊走抑制用飲食物中に有効成分としてマスリン酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の血管平滑筋細胞遊走抑制用飲食物中に有効成分としてウルソール酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明の抗細胞増殖性血管病変用飲食物は、継続的な摂取をすることで、より好適な効果を得ることができる。本発明の抗細胞増殖性血管病変用飲食物における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物の配合量は、一概には規定されず、トリテルペン類の種類、予防か治療かという使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を踏まえ、必要とする効果の強さに応じて適宜決めればよい。以下に限定されないが、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％であれば良い。何れにせよ含量が高いほど効果が強いが、使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を考慮し、含量を調整することが必要である。
本発明中の抗細胞増殖性血管病変用飲食物中に有効成分としてマスリン酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗細胞増殖性血管病変用飲食物中に有効成分としてエリトロジオールおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗細胞増殖性血管病変用飲食物中に有効成分としてウルソール酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗細胞増殖性血管病変用飲食物中に有効成分としてウバオールおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗細胞増殖性血管病変用飲食物中に有効成分としてベツリン酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗細胞増殖性血管病変用飲食物中に有効成分としてベツリンおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明の抗内膜肥厚用飲食物は、継続的な摂取をすることで、より好適な効果を得ることができる。本発明の抗内膜肥厚用飲食物における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物の配合量は、一概には規定されず、トリテルペン類の種類、予防か治療かという使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を踏まえ、必要とする効果の強さに応じて適宜決めればよい。以下に限定されないが、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％であれば良い。何れにせよ含量が高いほど効果が強いが、使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を考慮し、含量を調整することが必要である。
本発明中の抗内膜肥厚用飲食物中に有効成分としてマスリン酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗内膜肥厚用飲食物中に有効成分としてエリトロジオールおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗内膜肥厚用飲食物中に有効成分としてウルソール酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗内膜肥厚用飲食物中に有効成分としてウバオールおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗内膜肥厚用飲食物中に有効成分としてベツリン酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗内膜肥厚用飲食物中に有効成分としてベツリンおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明の抗動脈硬化用飲食物は、継続的な摂取をすることで、より好適な効果を得ることができる。本発明の抗動脈硬化用飲食物における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物の配合量は、一概には規定されず、トリテルペン類の種類、予防か治療かという使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を踏まえ、必要とする効果の強さに応じて適宜決めればよい。以下に限定されないが、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％であれば良い。何れにせよ含量が高いほど効果が強いが、使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を考慮し、含量を調整することが必要である。
本発明中の抗動脈硬化用飲食物中に有効成分としてマスリン酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗動脈硬化用飲食物中に有効成分としてエリトロジオールおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗動脈硬化用飲食物中に有効成分としてウルソール酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗動脈硬化用飲食物中に有効成分としてウバオールおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗動脈硬化用飲食物中に有効成分としてベツリン酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の抗動脈硬化用飲食物中に有効成分としてベツリンおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明の血管障害疾患用飲食物は、上述の通り五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を含有することを特徴とし、その用途は任意であるが、例えば、保健機能食品、健康食品、治療食品等の広い分野で、血管障害疾患用飲食物として用いることができる。この時、本発明の血管障害疾患用飲食物の配合量は、用途、投与形態、投与対象の種、年齢、性別、体重、症状の程度、健康状態などの条件により異なるので、一概に規定されないが、当然、血管平滑筋細胞の増殖抑制、遊走抑制による動脈硬化の発生や増生に対する予防および／または治療に効果を有する量である。
本発明の血管障害疾患用飲食物は、継続的な摂取をすることで、より好適な効果を得ることができる。本発明の血管障害疾患用飲食物における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物の配合量は、一概には規定されず、トリテルペン類の種類、予防か治療かという使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を踏まえ、必要とする効果の強さに応じて適宜決めればよい。以下に限定されないが、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％である。
本発明中の血管障害疾患用飲食物中に有効成分としてマスリン酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の血管障害疾患用飲食物中に有効成分としてエリトロジオールおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の血管障害疾患用飲食物中に有効成分としてウルソール酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の血管障害疾患用飲食物中に有効成分としてウバオールおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の血管障害疾患用飲食物中に有効成分としてベツリン酸およびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
本発明中の血管障害疾患用飲食物中に有効成分としてベツリンおよびその生理的に許容される塩またはそれらの誘導体を含有する場合、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．００１〜６０質量％、さらに好ましくは０．０１〜５０質量％、さらに好ましくは０．１〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３０質量％含有するのが好ましい。
含量が高いほど効果が強いが、使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を考慮し、含量を調整することが必要である。
本発明の血管障害疾患用飲食物の五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体を摂取することにより、好適に抗動脈硬化効果を得るための所用量は、摂取の形態、対象者の性別、体重、体調等により異なり、特に制限されないが、例えば、０．００１ｇ／日以上、好ましくは０．０１ｇ／日以上、特に好ましくは０．１ｇ／日以上である。
本発明の、血管障害疾患が動脈硬化症である抗動脈硬化症用飲食物は、継続的な摂取をすることで、より好適な効果を得ることができる。本発明の抗動脈硬化症用飲食物における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物の配合量は、一概には規定されず、トリテルペン類の種類、予防か治療かという使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を踏まえ、必要とする効果の強さに応じて適宜決めればよい。以下に限定されないが、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％であれば良い。何れにせよ含量が高いほど効果が強いが、使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を考慮し、含量を調整することが必要である。
本発明の、血管障害疾患がＰＴＣＡ後の再狭窄である抗再狭窄用飲食物は、継続的な摂取をすることで、より好適な効果を得ることができる。本発明の抗再狭窄用飲食物における五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物の配合量は、一概には規定されず、トリテルペン類の種類、予防か治療かという使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を踏まえ、必要とする効果の強さに応じて適宜決めればよい。以下に限定されないが、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％であれば良い。何れにせよ含量が高いほど効果が強いが、使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を考慮し、含量を調整することが必要である。
特に、マスリン酸およびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体は、血管平滑筋細胞増殖抑制効果、血管平滑筋細胞遊走抑制効果、内膜肥厚抑制や抗動脈硬化等の抗細胞増殖性血管病変効果、抗動脈硬化症やＰＴＣＡ後の抗再狭窄等の抗血管障害疾患効果等、非常に強い効果を持ちあわせる為、好ましい。すなわち、マスリン酸およびその生理的に許容される塩、またはその誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする、血管平滑筋細胞増殖抑制用飲食物および／または血管平滑筋細胞遊走抑制用飲食物、抗内膜肥厚および抗動脈硬化等の抗細胞増殖性血管病変用飲食物、抗動脈硬化症およびＰＴＣＡ後の抗再狭窄等の血管障害疾患用飲食物に関する。また、後述するが、マスリン酸は、オリーブ植物という比較的定常的に栽培され、食用油として既に搾油されている植物から得ることも可能であるため、食経験を有する点で安全性に優れ、好ましい。さらに、定常的に供給できる点で低コスト化が可能であり、非常に好ましい。
この場合、本発明の、マスリン酸を含有する各目的の効果を有する飲食物は、継続的な摂取をすることで、より好適な効果を得ることができる。特にマスリン酸およびその生理的に許容される塩、またはその誘導体は、上述のごとく、既に食経験を有する天然物から得られるものも存在するので、健康食品等としても好ましい。その際のマスリン酸およびその生理的に許容される塩、またはその誘導体の配合量は、一概には規定されず、予防か治療かという使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を踏まえ、必要とする効果の強さに応じて適宜決めればよい。以下に限定されないが、好ましくは０．００００１〜９０質量％、より好ましくは０．０００１〜８０質量％、さらに好ましくは０．００１〜７０質量％、さらに好ましくは０．０１〜６５質量％、さらに好ましくは０．１〜６０質量％、さらに好ましくは０．２〜５５質量％、さらに好ましくは０．４〜５０質量％、さらに好ましくは０．６〜４５質量％、さらに好ましくは０．８〜４０質量％、さらに好ましくは１．０〜３５質量％、さらに好ましくは２．０〜３０質量％であれば良い。何れにせよ含量が高いほど効果が強いが、使用の目的や使用する期間、量、使用対象の年齢、性別、体重等を考慮し、含量を調整することが必要である。
また本発明の飲食物には、機能の向上、特に、血管平滑筋細胞増殖抑制効果、血管平滑筋細胞遊走抑制効果、内膜肥厚抑制や抗動脈硬化等の抗細胞増殖性血管病変効果、抗動脈硬化症やＰＴＣＡ後の抗再狭窄等の抗血管障害疾患効果等の相乗的な向上、血管平滑筋細胞増殖抑制効果、血管平滑筋細胞遊走抑制効果、内膜肥厚抑制や抗動脈硬化等の抗細胞増殖性血管病変効果、抗動脈硬化症やＰＴＣＡ後の抗再狭窄等の抗血管障害疾患効果等の補助、吸収性の向上等を目的として、その他の生理活性成分等を配合することができる。特に制限は無いが、例えば、相乗的な効果が期待できる成分、抗酸化成分、体内での吸収性を向上させ効果の効率を上げるための油性成分、栄養強化のための各種ビタミン類、ミネラル類、アミノ酸類等が挙げられる。
相乗的な効果が期待できる成分としては、ブラシカステロール、カンペステロール、ステグマステロール、７−エルゴステロール、シトステロール、イソフコステロール、７−スチグマステロール、シクロアルテノール、２４−メチレンシクロアルタノール、シクロブラシノール等の植物ステロール類、ジンゲロール、クルクミン、ベルガモティン、ＡＣＡ等のフェニルプロパノイド類、フラボン、カテキン、ケルセチン、ロイコアントシアニジン、ルテオリン、カルダモニン、ノビレチン等のフラボノイド類、β−カロチン、アスタキサンチン等のカロテノイド類及びその誘導体、ペクチン等の食物繊維類、アリキシン、フェルラ酸およびその誘導体、等が挙げられる。これらの成分は、本発明における五環性トリテルペン類との相乗効果が期待できるため、好ましい。
抗酸化成分としては、通常飲食物等に使用されているものであれば特に制限は無いが、例えば、ビタミンＣ及びその誘導体並びにそれらの塩、トコフェロールやトコトリエノールおよびそれらの誘導体、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸カルシウム二ナトリウム、没食子酸やエラグ酸等のタンニン類及びそれらの誘導体、亜硫酸ナトリウムや次亜硫酸ナトリウムや二硫化硫黄等の硫酸系化合物、γ−オリザノール等のフェルラ酸誘導体、ルチン及びその誘導体、セサミン、エピセサミン、セサミノール、セサモリン、セサモール等のリグナン類およびそれらの配糖体、β−カロチン等のカロテノイド類及びその誘導体、フラボン、カテキン、ケルセチン、イソケルセチン、ロイコアントシアニジン、ゲニスチン、ゲニステイン、６“−Ｏ−アセチルゲニスチン、６“−Ｏ−マロニルゲニスチン、ダイズイン、ダイゼイン、６“−Ｏ−アセチルダイズイン、６“−Ｏ−マロニルダイズイン、グリシチン、グリシテイン、６“−Ｏ−アセチルグリシチン、６“−Ｏ−マロニルグリニチン、プエラリン、ケルセチン、ケンフェロー、ミロエステロール等のフラボノイド類、ユビキノンやビタミンＫ等のキノン類、スーパーオキシドディムスターゼ、カタラーゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ等の酵素類、アオイ花抽出物、アスペルギルステレウス抽出物、甘草油性抽出物、グローブ抽出物、グアヤク脂、生コーヒー豆抽出物、米ぬか油抽出物、カンナ抽出物、セージ抽出物、セリ抽出物、テンペ抽出物、菜種油抽出物、ピメンタ抽出物、ブルーベリー抽出物、プロポリス抽出物、ペパー抽出物、メラロイカ抽出物、ユーカリ抽出物、リンドウ抽出物、ソバ抽出物、アズキ抽出物、ローズマリー抽出物、オリーブ粕抽出物や大豆粕抽出物等の油粕抽出物、大豆胚芽抽出物、チアミン類及びその塩、リボフラビン、酢酸リボフラビン等のリボフラビン類、塩酸ピリドキシン、ピリドキシンジオクタノエート等のピリドキシン類、ニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル等のニコチン酸類、ビリルビン、マンニトール、トリプトファン、ヒスチジン、ノルジヒドログアイアレチン酸等があげられる。これらの抗酸化剤は、その抗酸化作用による生活習慣病予防効果や抗老化効果等により、人体等に対する総合的な相乗効果も期待できるため、好ましい。
油性成分としては、大豆油、菜種油、ゴマ油、オリーブ油等の植物油脂、ラード、牛脂、魚油等の動物油脂の他、特に制限は無いが、例えば、天然および化学反応や酵素反応により得られた、ＭＣＴ、ＭＬＣＴ、ジグリセライド、モノグリセライドや、脂肪酸の構造を設計した構造油脂等が挙げられる。
栄養強化のための各種ビタミン類、ミネラル類、アミノ酸類等については、特に制限はないが、食品添加物公定書に定められるものが望ましい。
その他、本発明の飲食物には、通常の飲食物に使用されている原材料を配合・使用することができる。特に制限は無いが、例えば、みそ、醤油、ソース、ケチャップ、ブイヨン、焼肉のタレ、カレールー、シチューの素、スープの素、だしの素等の各種調味料、豚脂、牛脂、乳脂等の動物性油脂、鯨油、イワシ油、ニシン油等の海産物性油脂、大豆油、菜種油、綿実油、米油、コーン油、胡麻油、落花生油、ヒマワリ油、紅花油、椿油、オリーブ油、亜麻仁油、桐油、ヒマシ油、ヤシ油、パーム油、カカオ脂等の植物性油脂、キサンタンガム等の増粘剤、砂糖、グラニュー糖、乳糖、果糖、ブドウ糖、ソルビトール、ハチミツ等の甘味剤、ＭＳＧ（モノソディウムグルタミン）等のうまみ調味料、米酢、リンゴ酢、酒精酢等の食酢、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、酒石酸等の酸味剤、安息香酸ナトリウム等の合成保存料、小麦粉、脱脂大豆、小麦ふすま、小麦胚芽等のシリアル原料、食塩、こしょう、フレーバー等が挙げられる。特にオリーブ油は、本発明におけるマスリン酸等を含有するため、非常に好ましい。マスリン酸、その生理的に許容される塩等を高度に含有するように製造されたオリーブ油等が好ましい。
上記各成分は使用目的によって適宜設計、配合することができる。吸収性や作用効果の種類によって効果を相乗、補完することや使用形態として好ましい態様とすることができる。また、例えばイソフラボン類及びその誘導体は水溶性に優れ、概して油溶性物質である本発明で対象とする特定の五環性トリテルペン類と同時に生体に作用させることで、抗エストロゲン阻害効果を含め、水及び脂質媒介性の様々な代謝経路を経た、同時作用による効果が発揮され、その効果は相乗的になることが期待できる。さらには、本発明で対象とする特定の五環性トリテルペン類とイソフラボノイド等を同時に配合した血管障害疾患用飲食物等はイソフラボノイドの抗酸化性や抗エストロゲン様作用等の生理活性が同時にかつ相乗的に活性化されることが期待できる。
本発明の飲食物について、下記に具体例を列記するが、本発明はこれらに制限されるものではない。本発明の飲食物としては、菓子、加工食品、調合油脂類、油脂加工品、乳製品及び飲料等の各種飲食物があげられる。また、その形状・性状は特に制限されず、固体状、半固体状、ゲル状、液体状及び粉末状等のいずれでもよい。また、その形態等について特に制限はないが、例えば、通常の形態の他、流動食品、経腸栄養食品、健康食品、乳幼児用食品等の形態をとることができる。具体的には、おかき、煎餅、おこし、饅頭、飴等の和菓子、クッキー、ビスケット、クラッカー、シリアル食品、パイ、カステラ、ドーナッツ、プリン、スポンジケーキ、ワッフル、バタークリーム、カスタードクリーム、シュークリーム、チョコレート、チョコレート菓子、キャラメル、キャンデー、キューインガム、ゼリー、ホットケーキ、パン、菓子パン等の各種洋菓子、ポテトチップ等のスナック菓子、アイスクリーム、アイスキャンデー、シャーベット等の氷菓、乳酸飲料、乳酸菌飲料、濃厚乳性飲料、果汁飲料、果肉飲料、機能性飲料、炭酸飲料等の清涼飲料水、緑茶、紅茶、コーヒー、ココア等の嗜好品及びこれらの飲料、日本酒、ワイン、ブランディー、ウイスキー、薬用酒などの酒類、牛乳、発酵乳、加工乳、チーズ等の乳製品、豆乳、豆腐等の大豆加工食品、ジャム、果実のシロップ漬、フラワーペースト、ピーナツペースト、フルーツペースト等のペースト類、漬物類、うどんの麺、パスタ等の穀物製品類、ハム、ソーセージ、ベーコン、ドライソーセイジ、ビーフジャーキー、ハンバーグ等の畜肉製品類、魚肉ハム、魚肉ソーセージ、かまぼこ、ちくわ、はんぺん等の魚貝類製品、魚、貝等の干物、鰹、鯖、鰺等の各種節、ウニ、イカ等の塩辛、スルメ、魚等のみりん干、鮭等の燻製品、のり、小魚、貝、山菜、椎茸、昆布等の佃煮、カレー、シチュー等のレトルト食品、みそ、醤油、ソース、ケチャップ、ブイヨン、焼肉のタレ、カレールー、シチューの素、スープの素、だしの素等の各種調味料、米飯類、調合油脂やマーガリン、ショートニング、マヨネーズ、ドレッシング等の油脂加工品や、調合油脂を含有する各種レンジ及び冷凍食品等が挙げられる。特に、継続的な摂取という面からは、米飯や各種調味料や、調合油脂やマーガリン、ショートニング、マヨネーズ、ドレッシング等の油脂加工品が好ましい。
本発明の飲食物における五環性トリテルペン類は、元来、概して脂溶性の物質であるので、溶解性の面からも本発明の飲食物として調合油脂や調合油脂加工食品等は好ましい。この様な調合油脂として、特に制限はないが、例えば、天然あるいは人工的に得た五環性トリテルペン類を通常の油脂に溶かし込んで含有させた調合油脂が挙げられ、また、植物種子の圧搾・抽出条件を調整し種子中の五環性トリテルペン類を圧搾・抽出油に高濃度に含有させた調合油脂や、精製条件を調整することで油中に存在する五環性トリテルペン類を残存させた調合油脂等が挙げられる。また、該五環性トリテルペン類高含有油脂と他の油脂を混合することもでき、この場合、該他の油脂に含まれる微量成分の生理活性効果との相乗効果を期待することができる。
五環性トリテルペン類は油糧原料である植物からも得られることから、製造の点からも調合油脂は好ましいといえ、更にこの調合油脂の加工品であるマーガリン、ショートニング、マヨネーズ、ドレッシング等の調合油脂加工品は好ましいといえる。
同様に、本発明の上記調合油脂等を使用した製品も良好である。ここで、使用とは原料として使用することと、揚げ物や炒め物等に使用するいわゆる調合油脂としての使用の双方を示す。
ここで、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体の飲食物への使用に関して特に制限は無いが、油系の飲食物に対しては、五環性トリテルペン類、あるいはアルコールエステル基を有する誘導体、脂肪酸エステル基を有する誘導体、アルコキシ基を有する誘導体、アルコキシメチル基を有する誘導体が好ましい。これらは、比較的脂溶性であるため、好適に油系の飲食物へ適用することができる。また当然、五環性トリテルペン類の生理的に許容される塩あるいは配糖体を配合することも可能であるが、この場合には、乳化剤を用いることが好ましい。
また、概して、水系の飲食物に対しては、五環性トリテルペン類の生理的に許容された塩、あるいは配糖体が好ましい。これらは、比較的水溶性であるため、好適に水系の飲食物へ適用することができる。また当然、五環性トリテルペン類あるいはその誘導体を配合することも可能であるが、この場合には、乳化剤を用いることが好ましい。
本発明の飲食物を飲食することで、血管平滑筋細胞増殖抑制効果、血管平滑筋細胞遊走抑制効果、内膜肥厚抑制や抗動脈硬化等の抗細胞増殖性血管病変効果、抗動脈硬化症やＰＴＣＡ後の抗再狭窄等の抗血管障害疾患効果等を有する五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体を体内に吸収することにより効果を奏する。飲食物という形態であるため、医薬品のような労力も必要なく、継続的に摂取することができるため好ましい。
上記、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体は、合成することも、天然物から抽出することもできる。天然には、それぞれに前述した植物体から抽出することにより、詳しくは水及び／又は有機溶媒で抽出処理し、さらに濃縮処理及び／又は分画・精製処理することによりで得ることができる。すなわち、各植物体から、水および／または有機溶媒で抽出でき、さらにその抽出物から、溶媒抽出法、不純物との溶解度差を利用する方法、分別沈殿法、再結晶法、イオン交換樹脂法、液体クロマトグラフ法等を単独または適宜組み合わせて、あるいは反復使用することによって分離精製することができる。
天然物からの単離物を使用して飲食物とした場合、天然物由来の夾雑物の影響が排除され、無色〜淡色および／または無臭〜無臭に近い状態になるので好ましい。従って、天然物から、本発明で対象とする特定の五環性トリテルペン類及びそれらの生理的に許容できる塩又はそれらの誘導体を単離することにより、供する料理の風味等に影響を与えることなく調理できる。特に、オリーブ等の原料とする天然物の風味を必要としない料理にも配合できる。従って、本発明の飲食物は、原料として用いられる天然物の種類に影響されることなく調理又は配合可能な飲食物を含む。
さらに、オリーブやオリーブ油をそのままの形態で摂取した場合、本発明で対象とする五環性トリテルペン類を少量しか摂取できないが、天然物から単離した五環性トリテルペン類を配合した飲食物を摂取すれば、本発明で対象とする特定の五環性トリテルペン類を比較的容易に多量に摂取することができる。
また、オリーブ等に含まれる五環性トリテルペン類は概して脂溶性物質であるため、通常は油脂中に存在することが多く、このため、水系の飲食物に配合するのは困難であるが、天然物から単離した五環性トリテルペン類であれば、油系の飲食物にでも水系の飲食物にでも配合することができる。清涼飲料等の水系飲食物にすることにより、本発明で対象とする五環性トリテルペン類の例えば数ｇ〜数１０ｇを容易に摂取することが可能となる。
さらにまた、天然物から単離した特定の五環性トリテルペン類を含有する本発明の飲食物は、本発明の体内への吸収を阻害する不純物又は夾雑物が除去されていることから、好適な本発明の効果、すなわち血管平滑筋細胞増殖抑制効果、血管平滑筋細胞遊走抑制効果等を得ることが可能となるので好ましい。
以下、マスリン酸の抽出例を示す。
前述の通り、マスリン酸およびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体は、天然には、前記の植物体から抽出することで得ることができるが、特に、マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩は、オリーブ植物等から、水および／または有機溶媒で抽出でき、さらにその抽出物から、溶媒抽出法、不純物との溶解度差を利用する方法、分別沈殿法、再結晶法、イオン交換樹脂法、液体クロマトグラフ法等を単独または適宜組み合わせて、あるいは反復使用することによって分離精製することができる。
オリーブ植物（Ｏｌｅａ ｅｕｒｏｐａｅａ Ｌ．）は、国産、欧州産などの産地、食用あるいは搾油用を問わず使用できる。本発明の血管障害疾患用飲食物に含有されるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩は、天然植物であるオリーブ植物の主に、実または種子から得ることができ、さらに、その種皮、葉、茎、芽から得ることができる。また、これらの乾燥物、粉砕物、脱脂物からも好適に得ることができる。このうち、脱脂された実（果皮含む）や果皮の乾燥物及び粉砕物が好ましい。さらに、オリーブ油の製造工程で生じる生成物、例えば圧搾残査、抽出残査、搾油残査、圧搾油、抽出油、脱ガム油滓、脱酸油滓、ダーク油、廃脱色剤、脱臭スカム、搾油ジュース、排水及び廃濾過材から得ることができる。このうち、搾油残査が好ましい。
また、上記オリーブ植物の果実やその脱脂物等に、添水する等により加水した場合、あるいは蒸気により蒸す等の加湿処理を行った場合、これらオリーブ植物の果実やその脱脂物等が適度に膨潤するので、抽出効率が良くなり好ましい。
特に、オリーブ植物の脱脂物には、マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩が高濃度で存在し、かつ、得られたマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩から油分を除去する必要がないため好ましい。
当該脱脂物は、食油精製工程中に産出するオリーブ搾油残査、またはヘキサン等による抽出残査を原料とすることができる。
また、オリーブ植物または当該脱脂物に含まれる脂質成分をペンタン、ヘキサン、ヘプタン等の炭化水素、酢酸エチルエステル等の低級脂肪酸アルキルエステル、ジエチルエーテル等の公知の非水溶性有機溶媒の１種又は２種以上で抽出除去し、更に必要に応じてこの洗浄処理を繰り返した脱脂物も好適に利用できる。
上記オリーブ植物から水および／または有機溶媒で抽出することにより、本発明の血管障害疾患用飲食物に含有されるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を得ることができる。
オリーブ植物からマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を得るために用いる有機溶媒としては、親水性有機溶媒、疎水性有機溶媒のいずれでもよい。具体的には、親水性有機溶媒として、メチルアルコール、エチルアルコール、グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等のアルコール、アセトン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、１，４−ジオキサン、ピリジン、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、酢酸等の公知の有機溶媒が挙げられ、疎水性有機溶媒として、ヘキサン、シクロヘキサン、四塩化炭素、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、ベンゼン、トルエン等の公知の有機溶媒が挙げられる。また、これらの有機溶媒は１種または２種以上を組み合わせて使用することができる。
工業的には、例えば植物組織への浸透性、抽出効率等からは、親水性有機溶媒を用いることが好ましく、また含水親水性有機溶媒を用いることが好ましい。具体的にはメチルアルコール、エチルアルコール、グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等のアルコール、アセトン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル等の有機溶媒およびこれらの含水溶媒が挙げられる。これらの中からなる群より選ばれる、１種または２種以上により、オリーブ植物から、本発明の血管障害疾患用飲食物に含有されるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を得ることができる。
抽出条件は、特に限定されないが、例えば、温度は５℃〜９５℃、好ましくは１０℃〜９０℃、さらに好ましくは１５℃〜８５℃で、常温でも好適に抽出することができる。温度が高いほうが、抽出効率が高くなる傾向はある。圧力は、常圧でも、加圧でも、吸引等による減圧でも好適に抽出することができる。また、抽出効率を向上させるため、振とう抽出や、攪拌機等のついた抽出機でも抽出することができる。抽出時間は、他の抽出条件によるが、数分〜数時間であり、長時間なほど十分な抽出がなされるが、生産設備、収率等の生産条件によって適宜決めれば良い。
また、抽出に使用する溶媒は、水を単独で使用する場合、有機溶媒を単独で使用する場合、水と有機溶媒とを混合して使用する場合のいずれの場合にも、原料に対し１〜１００倍量（「質量／質量」。以下同様。）、好ましくは１〜２０倍量を使用することができる。
また、人体等への安全性等を考えれば、特に、水、含水低級アルコール、無水低級アルコールの何れかにより抽出することが好ましい。このうち、無水低級アルコールがより好ましく、無水エタノールが特に好ましい。
さらに、得られるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩の収率や、抗動脈硬化効果の強さをも考慮に入れた場合、低級アルコール含量が１０質量％以上である含水低級アルコールで抽出することが好ましい。さらには低級アルコール含量が１０質量％〜９５質量％の含水アルコールを使用することが好ましく、最も好ましくは低級アルコール含量が３０質量％〜９５質量％に調節された含水低級アルコールが好ましい。
ここで、本発明で使用するアルコールは、メチルアルコール、エチルアルコール、１−プロパノール、１−ブタノール等の１級アルコール、２−プロパノール、２−ブタノール等の２級アルコール、２−メチル−２−プロパノール等の３級アルコールさらにエチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等の液状多価アルコール等の公知の溶媒が挙げられ、これらの溶媒は１種または２種以上を組み合わせて使用することができる。
低級アルコールとは、炭素数が１〜４である公知のアルコール、例えば、前述の１、２、３級、もしくは、液状多価のアルコール等があげられ、これらの１種または２種以上を組み合わせて使用することができる。
このようにして得られた粗抽出物及び／又は粗抽出液から、溶媒、水分を除去することで、本発明におけるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を得ることができる。
溶媒、水分の除去は減圧蒸留、減圧・真空乾燥、凍結乾燥、スプレードライ等の公知の方法で行うことができる。
もちろん、溶媒、水分を含んだままでも良く特に状態は制限されない。
脱脂物からの抽出物は、トリグリセライドやステロール、トコフェロール等の油溶性成分は含有していないので、これらを除去、精製する必要がないため、好ましい。加えて、脱脂物とは、搾油後の残査を含むので、オリーブ油を搾油した圧搾粕および抽出粕を使用できることから、オリーブの極めて優れた有効利用方法であり、通常は廃棄または飼料等に使用されるものを利用するため、生産コストの面から見ても優れた方法といえる。
さらに、オリーブ植物から抽出されるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩の抗動脈硬化効果をより一層引き出すためには、本発明の血管障害疾患用飲食物に含有させるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を濃縮処理等することが好ましい。
濃縮条件は、特に限定されないが、例えば、水への溶解性を利用した方法が挙げられる。本発明の血管障害疾患用飲食物に含有されるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩は、比較的極性が低く、難水溶性の化合物である。この性質を利用して、オリーブ植物からの粗抽出物を水に溶解しにくい成分および／または水に溶解しない成分、つまり難水溶性等の成分と水に容易に溶ける成分とに分けることで、大幅に濃縮することができる。オリーブ植物からの粗抽出物に含まれる難水溶性等の成分は、オリーブ植物からの粗抽出物全体と比べても、大幅に抗動脈硬化効果に優れており、マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩が濃縮されていることが確認できる。
難水溶性等の成分は、オリーブ植物からの粗抽出物を水に添加・攪拌した後、析出している部分をろ過等により採取することで簡易に得ることができる。
また、本発明の血管障害疾患用飲食物に含有されるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩は、必要に応じて、一般的な溶剤の組み合わせによる液−液分配により濃縮することができる。溶剤の組み合わせは一概に規定し難いが、例えば、水−疎水性有機溶媒の組み合わせが挙げられ、疎水性有機溶媒としては、ヘキサン、四塩化炭素、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、ｎ−ブタノール、ベンゼン、トルエン等の公知の有機溶媒が挙げられる。このうち、ヘキサン、酢酸エチル、ｎ−ブタノールが好ましい。
マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩は難水溶性であるため、疎水性有機溶媒相を分取することで、不要な水溶性成分を除去することができる。溶媒を除去することで、容易にマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を濃縮することができる。
さらに、本発明の血管障害疾患用飲食物に含有されるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩は、上述した抽出物および／または濃縮物から分画・精製処理することが好ましい。これにより上記濃縮以上に濃縮することができ、目的とする成分を単離することができる。
分画・精製処理することの利点としては、抗動脈硬化効果等を非常に向上させることができることに加え、不純物を除去することができること等が挙げられる。すなわち、該分画・精製処理した場合、マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を白色結晶として得ることができるため、血管障害疾患用飲食物に余計な色をつけることなく好適に配合することができる等のメリットがあり、好ましい。
分画・精製処理の方法については一概に規定し難いが、例えば、再結晶法、分別沈殿法、クロマトグラフィーを利用する方法などが挙げられる。特にクロマトグラフィーの中でも液体クロマトグラフィーを利用する方法は、本発明の血管障害疾患用飲食物に含有されるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を分解することなく、収率良く分画・精製出来るので、好ましい。液体クロマトグラフィーとしては、具体的に、順相液体クロマトグラフィー、逆相液体クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、ペーパークロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等が挙げられるが、本発明の血管障害疾患用飲食物に含有されるマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を分画・精製処理する際には、いずれの方法を用いることができる。とりわけ、分離能、処理量、工程数等を考慮に入れると、順相液体クロマトグラフィー、逆相液体クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）が好ましい。
ここで、順相液体クロマトグラフィーとは、例えば以下のような方法を指す。すなわち、例えばシリカゲルを固定相、ヘキサン−酢酸エチル混液、クロロホルム−メタノール混液等を移動相としたカラムを作成し、オリーブ植物からの粗抽出物あるいはその濃縮物を負荷率０．１〜５％（ｗｔ（質量）／ｖ（体積））で供し、単一移動相による連続的溶出法あるいは溶媒極性を順次増加させる段階的溶出法により、所定の画分を溶出させる方法である。
逆相液体クロマトグラフィーとは、例えば以下のような方法を指す。すなわち、例えばオクタデシルシランを結合させたシリカ（ＯＤＳ）を固定相、水−メタノール混液、水−アセトニトリル混液、水−アセトン混液等を移動相としたカラムを作成し、オリーブ植物からの粗抽出物あるいはその濃縮物を負荷率０．１〜５％（ｗｔ（質量）／ｖ（体積））で供し、単一溶媒による連続的溶出法あるいは溶媒極性を順次低下させる段階的溶出法により、所定の画分を溶出させる方法である。
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）とは、原理的には、上記順相液体クロマトグラフィーあるいは逆相液体クロマトグラフィーと同様のものであり、より迅速かつ高分離能での分画・精製を行うためのものである。
上記手法を１種または２種以上組み合わせることで、マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を非常に濃縮でき、かつ、不純物が除去された状態で得ることができるため好ましい。
さらに、上記手法を１種または２種以上組み合わせることで、マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩の純度を調整することができ、必要に応じた抗動脈硬化効果の強さ、特性等を設計することもできる。
前述した濃縮処理について、好ましくは繰り返し濃縮処理することができ、さらには異なる濃縮処理を組み合わせることができる。同様に、分画・精製処理について、好ましくは繰り返し分画・精製処理することができ、さらには異なる分画・精製処理を組み合わせることができる。さらに、濃縮処理を行った後に分画・精製処理しても良く、分画・精製処理を行った後に分画・精製処理しても良く、濃縮処理した後に分画・精製処理を行い更に濃縮処理することもできる。当然、前述の組み合わせ以外の組み合わせでも良い。
上記に記載した抽出処理、濃縮処理、分画および／または精製処理等を様々に組み合わせることによって、マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を好適に得ることができる。その組み合わせについては特に限定されないが、一連の処理の具体例としては以下のような方法が挙げられる。
例えば、オリーブ植物を水および／または親水性有機溶媒で抽出処理した後、得られた抽出液について親水性有機溶媒の一部または全部を除去し、必要により水を加えて撹拌し、水層部に析出した水不溶分を回収することで濃縮する。析出した水不溶分は、ろ過や遠心分離等のよって回収することができるが、この回収効率の向上のため、必要に応じ水溶液に対して水の添加・攪拌等の処理を行うことができる。また、オリーブ植物から得られる抽出液の水および／または親水性有機溶媒を除去した乾固状態の抽出物についても、上記同様に水の添加・攪拌等の処理を行い、ろ過等によりその水不溶分を回収することで濃縮処理することができる。この濃縮方法によれば、水系での処理であるので、溶剤を用いた濃縮よりも安全性に優れ、また、使用できる機器の範囲も広いため好ましい。また、油分がほとんど含まれていないため、濃縮・精製の効率にも優れており、好ましい。
これらの濃縮物を順相および／または逆相クロマトグラフィーおよび／または再結晶にて分画・精製処理することにより、高純度に精製されたマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を好適に得ることができる。
また、オリーブ植物から得られる抽出液について親水性有機溶媒を除去し、残った水溶液に対して、必要に応じて水を添加し、更に疎水性有機溶媒を添加することで、水−疎水性有機溶媒での液−液分配により濃縮処理することができる。また、乾固状態の抽出物についても、上記同様に水を添加し、更に疎水性有機溶媒を添加することで、水−疎水性有機溶媒での液−液分配により濃縮処理することができる。これらの濃縮物を順相および／または逆相クロマトグラフィーおよび／または再結晶にて分画・精製処理することにより、高純度に精製されたマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を得ることができる。
ここで、液−液分配の際に添加する水の量は分配処理し得る量を用いれば特に限定されないが、乾固された抽出物の質量当り１〜１００倍量が好ましく、より好ましくは５〜５０倍量、さらに好ましくは１０〜３０倍量程度である。
また、水−疎水性有機溶媒での液−液分配において、水と疎水性有機溶媒とは、水：疎水性有機溶媒＝９：１〜１：９（体積比）で使用するのが好ましく、８：２〜２：８で使用するのがより好ましい。
また、オリーブ植物及び／又はオリーブ油製造工程で得られる生成物から得られるマスリン酸と生理的に許容されるその塩との混合物中のマスリン酸及び生理的に許容されるそれらの塩の合計の含有率が、９５％以上であるのが好ましく、より好ましくは９５％〜９９．９９％である。当該含有率は、例えば、ガスクロマトグラフィーにより測定することができる。
本発明の血管障害疾患用飲食物は、マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を含有させることができるが、前記抽出物及び濃縮物を含有させることでも本発明の血管障害疾患用飲食物を得ることもできる。また、濃縮、精製等の度合いを調整することで、マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩の濃度等を調整することができ、血管障害疾患用飲食物へ好適に配合することができる。
さらに、他の抗動脈硬化物質を配合して使用することができ、これにより、詳細な抗動脈硬化効果の設計が可能であり、また、他の抗動脈硬化物質との相乗効果により大幅な抗動脈硬化効果の強化も期待できる。
オリーブ油にはマスリン酸が含有されていることから、本発明の血管障害疾患用飲食物について、油性成分としてさらにオリーブ油を使用することで、さらに好適な抗動脈硬化効果等が得られるため好ましい。
また、オリーブ植物からマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩を抽出する場合には、同時にオレアノール酸および／またはその生理的に許容される塩が抽出されるが、このオレアノール酸および／またはその生理的に許容される塩は、マスリン酸との相溶性に優れている点から、これらの混合物を本発明の血管障害疾患用飲食物に直接配合することができる。これにより、それぞれが有する生理効果について相乗効果が期待でき、特にはマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩の本発明における抗動脈硬化効果について相乗効果が期待できるため好ましい。マスリン酸および／またはその生理的に許容される塩をオリーブ植物から抽出、分離精製等するに際し、その条件を調整することで、オレアノール酸および／またはその生理的に許容される塩との混合物として得ることもでき、オリーブ植物からそれぞれ別々にマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩、オレアノール酸および／またはその生理的に許容される塩を単離し、後に混合することでも得ることができる。また、それぞれ異なる原料から得られたマスリン酸および／またはその生理的に許容される塩と、オレアノール酸および／またはその生理的に許容される塩を混合した物でも良い。
本発明はマスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸、ベツリンおよびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体からなる群より選ばれる化合物を有効成分とする血管障害疾患用飲食物に関する。これらのマスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸、ベツリンおよびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体は血管平滑筋細胞増殖抑制効果および／または血管平滑筋細胞遊走抑制効果、内膜肥厚抑制および抗動脈硬化等の抗細胞増殖性血管病変効果、抗動脈硬化症およびＰＴＣＡ後の抗再狭窄等の抗血管障害疾患効果に優れている。また、本発明におけるマスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸、ベツリンおよびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体は、天然植物から得たもの、人工的に得られたもの、何れも好適に使用でき、特に各種製剤原料とする場合、その純度は高いものほど好ましい。
本発明の具体的な実施態様として、オリーブの脱脂粕をエタノール溶液で抽出処理し、乾燥することにより濃縮し、次いでクロマトグラフィーにかけて精製したマスリン酸を０．５質量％以上の量で含有する食用調合油脂があげられる。
また、本発明の具体的な実施態様として、オリーブの搾油粕をエタノール溶液で抽出処理し、乾燥することにより濃縮し、次いでクロマトグラフィーにかけて精製したマスリン酸を１質量％以上含有するドレッシングがあげられる。
本発明の具体的な実施態様として、オリーブの搾油粕をエタノール溶液で抽出処理し、乾燥することにより濃縮し、次いでクロマトグラフィーにかけて精製したマスリン酸を１質量％以上の量で含有する食用調合油脂があげられる。
本発明の具体的な実施態様として、オリーブの脱脂粕をエタノール溶液で抽出処理し、乾燥することにより濃縮し、次いでクロマトグラフィーにかけて精製したマスリン酸を０．５質量％以上の量で含有するマーガリンがあげられる。
また、本発明の具体的な実施態様として、オリーブの搾油粕をエタノール溶液で抽出処理し、乾燥することにより濃縮し、次いでクロマトグラフィーにかけて精製したマスリン酸を１質量％以上含有するマヨネーズがあげられる。
実施例
次に、実施例を挙げ、本発明をさらに説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
実施例に使用した五環性トリテルペンとして、エリトロジオール（フナコシ社製）、ウルソール酸（和光純薬社製）、ウバオール（フナコシ社製）、ベツリン酸（フナコシ社製）、ベツリン（フナコシ社製）については、試薬として購入した。ＨＰＬＣグレードのものはそのまま用い、そうでないものは、沸点まで加熱したエタノールに飽和になるまで溶解した後、冷却して再結晶させたものを濾過、乾固して用いた。マスリン酸については、以下に実例を挙げて説明するが、オリーブ植物から抽出、精製し、純度９５％であることを確認したものを用いた。
＜製造例１＞
国内産のオリーブ（Ｏｌｅａ ｅｕｒｏｐａｅａ Ｌ．）の乾燥果実（種子を含む）５００ｇを破砕し、３Ｌのヘキサンを加え３時間抽出した。これを４度繰り返した脱脂果実（脱脂粕）について、種子を除去した後、粉砕し、再度５倍量のヘキサンで３時間抽出することで、完全に油分を除去した脱脂粕２２９ｇを得た。この脱脂粕に１０倍量のエタノール含量が６０質量％の含水エタノール水溶液を加え、室温で激しく攪拌しながら３時間抽出した。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して抽出物１１２．７ｇを得た。
この抽出物１００ｇに、水２Ｌを加え、室温で１時間、激しく攪拌した。全量を遠心分離で処理した後、上澄みはデカンテーションにより除去し、残った沈殿を乾燥して濃縮物１０．０ｇを得た。
次にこの濃縮物を、約４０倍量（４００ｇ）のシリカゲルを充填したカラムを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分画した。まず、充填したゲルの１０倍量（４０００ｍＬ）のヘキサン：酢酸エチル＝３：１の溶離液で雑多な不要分を溶出させた後、さらに２．５倍量（１０００ｍＬ）のヘキサン：酢酸エチル＝１：１の溶離液で雑多な不要分を溶出させた。続いて充填したゲルの１０倍量（４０００ｍＬ）のヘキサン：酢酸エチル＝１：１の溶離液で目的とするマスリン酸を溶出させて、粗マスリン酸画分を得た。この画分からヘキサンおよび酢酸エチルを除去後、真空乾燥し粗マスリン酸分画物を１．９６ｇ得た。
さらにこの粗マスリン酸分画物を、約３０倍量（６０ｇ）のオクタデシルシリカゲルを充填したカラムを用いたＯＤＳカラムクロマトグラフィーで精製した。まず、充填したゲルの１０倍量（６００ｍＬ）のメタノール：水＝８：２の溶離液で雑多な不要分を溶出させた。続いて充填したゲルの３０倍量（１８００ｍＬ）のメタノール：水＝８：２の溶離液で目的とするマスリン酸を溶出させて、精製マスリン酸画分を得た。この画分からメタノールを除去後、真空乾燥し精製マスリン酸１を１．５１ｇ得た。
ここで、ＮＭＲ、ＭＳ等の解析から、この精製マスリン酸１は、その一部がナトリウム塩およびカリウム塩の状態で、残りの大部分が遊離酸の状態であることを確認した。また、これらの純度をＧＣで測定し、マスリン酸としての純度が９５％以上であることを確認した。
＜製造例２＞
イタリア産のオリーブ（Ｏｌｅａ ｅｕｒｏｐａｅａ Ｌ．）を搾油し得られた搾油残査（搾油粕）１ｋｇに、１０倍量のエタノール含量が６５質量％の含水エタノール水溶液を加え、室温で激しく攪拌しながら３時間抽出した。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固し抽出物を２０．２ｇ得た。
この抽出物に、ｎ−ブタノール１Ｌ、水１Ｌを加えて１０分間攪拌した後、ｎ−ブタノール相と水相に分けた。ｎ−ブタノール相のｎ−ブタノールを除去後、真空乾燥し濃縮物を１３．３ｇ得た。
次にこの濃縮物を、約４０倍量（５００ｇ）のシリカゲルを充填したカラムを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分画した。まず、充填したシリカゲルの１０倍量（５０００ｍＬ）のヘキサン：酢酸エチル＝３：１の溶離液で雑多な不要分を溶出させた後、さらに２．５倍量（１２５０ｍＬ）のヘキサン：酢酸エチル＝１：１の溶離液で雑多な不要分を溶出させた。続いて充填したシリカゲルの１０倍量（５０００ｍＬ）のヘキサン：酢酸エチル＝１：１の溶離液で目的とするマスリン酸を溶出させて、粗マスリン酸画分を得た。この画分からヘキサンおよび酢酸エチルを除去後、真空乾燥し粗マスリン酸分画物を２．６６ｇ得た。
さらにこの粗マスリン酸分画物を、約３０倍量（８０ｇ）のオクタデシルシリカゲルを充填したカラムを用いたＯＤＳカラムクロマトグラフィーで精製した。まず、充填したゲルの１０倍量（８００ｍＬ）のメタノール：水＝８：２の溶離液で雑多な不要分を溶出させた。続いて充填したゲルの３０倍量（２４００ｍＬ）のメタノール：水＝８：２の溶離液で目的とするマスリン酸を溶出させて、精製マスリン酸画分を得た。この画分からメタノールを除去後、真空乾燥し精製マスリン酸２を２．０６ｇ得た。
ここで、ＮＭＲ、ＭＳ等の解析から、この精製マスリン酸２は、その一部が遊離酸の状態で、残りの大部分がナトリウムやカリウム等の塩の状態であることを確認した。また、これらの純度をＧＣで測定し、マスリン酸としての純度が９７％以上であることを確認した。
＜製造例３＞
オリーブ油製造工程で得られるイタリア産のオリーブの抽出残渣（搾油残渣をさらに抽出工程で処理した脱脂粕）１ｋｇに、１０倍量のエタノールを加え、５５℃に加温して激しく攪拌しながら３時間抽出した。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して、抽出物３５ｇを得た。
次にこの抽出物を、約４０倍量（１４００ｇ）のシリカゲルを充填したカラムを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。まず、充填したシリカゲルの約１０倍量（１４Ｌ）のヘキサン：酢酸エチル＝３：１の溶離液で、雑多な不要分を溶出させた後、さらに２．５倍量（３５００ｍＬ）のヘキサン：酢酸エチル＝１：１の溶離液で、雑多な不要分を溶出させ、さらに、充填したシリカゲルの１０倍量（１４Ｌ）のヘキサン：酢酸エチル＝１：１の溶離液で、目的とするマスリン酸を溶出させて、粗マスリン酸画分を得た。この画分からヘキサンおよび酢酸エチルを除去後、真空乾燥し粗マスリン酸分画物５．９０ｇを得た。
さらにこの粗マスリン酸分画物を焼く３０倍量（１８０ｇ）のオクタデシルシリカゲルを充填したカラムを用いたＯＤＳカラムクロマトグラフィーで精製した。まず、充填したゲルの１０倍量（１８００ｍｌ）のメタノール：水＝８：２の溶離液で雑多な不要分を溶出させた。続いて充填したゲルの３０倍量（５４００ｍｌ）のメタノール：水＝８：２の溶離液で目的とするマスリン酸を溶出させて、精製マスリン酸画分を得た。この画分からメタノールおよび水を除去後、真空乾燥し精製マスリン酸３を５．３６ｇ得た。
ここで、ＮＭＲ、ＭＳ等の解析から、この精製マスリン酸３は、この精製マスリン酸１は、その一部がナトリウム塩およびカリウム塩の状態で、残りの大部分が遊離酸の状態であることを確認した。また、これらの純度をＧＣで測定し、マスリン酸としての純度が９７％以上であることを確認した。
マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸、ベツリンの誘導体としては、以下のようにして得た。
＜合成例１＞ マスリン酸エチル
マスリン酸４．５ｇとトリエチルアミン１．０ｇをクロロホルム５０ｍＬに溶解し、塩化チオニル１．１ｇをクロロホルム１０ｍＬに溶解したものを、氷冷下、滴下しながら、１時間攪拌した。続いて、エタノール３．２ｇを加え、トリエチルアミン１．０ｇをクロロホルム１０ｍＬに溶解したものを氷冷下、滴下しながら、３時間攪拌した。反応終了後、クロロホルム溶解分を抽出し、クロロホルムを溜去して得た粗反応物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、マスリン酸エチルエステルを３．５ｇ得た。
＜合成例２＞ ２，３−Ｏ−ジ−アセチル−マスリン酸
マスリン酸２．０ｇをピリジン１００ｍＬに溶解し、無水酢酸５０ｍＬを加え、一晩攪拌した。ピリジン及び無水酢酸を溜去した後、残留物をエーテルに溶かし、このエーテル相を１Ｎ塩酸水溶液で一回、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で一回、純水で３回洗浄した後、硫酸マグネシウムを加えて一晩放置した。濾過により硫酸マグネシウムを除去し、エーテルを溜去して得た粗反応物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、２，３−Ｏ−ジ−アセチル−マスリン酸を２．２ｇ得た。
＜合成例３＞ ２，３−Ｏ−ジ−トリエチルシリル−マスリン酸トリエチルシリルエステル
マスリン酸１．０ｇを無水ジメチルフォルムアミド２００ｍＬに溶解し、イミダゾール１４４．０ｍｇおよびトリエチルシリルクロライド３５０□Ｌを０□で加え、密栓して２時間攪拌した。ジメチルフォルムアミドを溜去した後、残留物をエーテルに溶かし、このエーテル相を１Ｎ塩酸水溶液で一回、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で一回、純水で３回洗浄した後、硫酸マグネシウムを加えて一晩放置した。濾過により硫酸マグネシウムを除去し、エーテルを溜去して得た粗反応物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、２，３−Ｏ−ジ−トリエチルシリル−マスリン酸トリエチルシリルエステルを１．５ｇ得た。
＜合成例４＞ ２，３−Ｏ−ジ−ステアリルマスリン酸エチル
合成例１で得たマスリン酸エチル１．０ｇを無水トルエン５０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン５．０ｇを加え、さらにステアリン酸クロライド６．０ｇを氷冷下で徐々に添加しながら、１時間攪拌し、徐々に室温に戻しながら９時間攪拌した。１Ｎ塩酸水溶液を適量加え、エーテルで抽出し、エーテル相はさらに飽和炭酸水素ナトリウム溶液で一回、純水で３回洗浄した後、硫酸マグネシウムを加えて一晩放置した。濾過により硫酸マグネシウムを除去し、エーテルを溜去して得た粗反応物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、２，３−Ｏ−ジ−ステアリルマスリン酸エチルを１．２ｇ得た。
＜合成例５＞ ３，２８−Ｏ−ジ−アセチル−エリトロジオール
エリトロジオール５．０ｇをピリジン２５０ｍＬに溶解し、無水酢酸１００ｍＬを加え、一晩攪拌した。ピリジン及び無水酢酸を溜去した後、残留物をエーテルに溶かし、このエーテル相を１Ｎ塩酸水溶液で一回、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で一回、純水で３回洗浄した後、硫酸マグネシウムを加えて一晩放置した。濾過により硫酸マグネシウムを除去し、エーテルを溜去して得た粗反応物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、３，２８−Ｏ−ジ−アセチル−エリトロジオールを５．４ｇ得た。
＜合成例６＞ ウルソール酸エチル
ウルソール酸５．０ｇとトリエチルアミン１．１ｇをクロロホルム５０ｍＬに溶解し、塩化チオニル１．２ｇをクロロホルム１０ｍＬに溶解したものを、氷冷下、滴下しながら、１時間攪拌した。続いて、エタノール３．５ｇを加え、トリエチルアミン１．１ｇをクロロホルム１０ｍＬに溶解したものを氷冷下、滴下しながら、３時間攪拌した。反応終了後、クロロホルム溶解分を抽出し、クロロホルムを溜去して得た粗反応物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、ウルソール酸エチルエステルを３．８ｇ得た。
＜合成例７＞ ３，２８−Ｏ−ジ−アセチル−ウバオール
ウバオール５．０ｇをピリジン２５０ｍＬに溶解し、無水酢酸１００ｍＬを加え、一晩攪拌した。ピリジン及び無水酢酸を溜去した後、残留物をエーテルに溶かし、このエーテル相を１Ｎ塩酸水溶液で一回、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で一回、純水で３回洗浄した後、硫酸マグネシウムを加えて一晩放置した。濾過により硫酸マグネシウムを除去し、エーテルを溜去して得た粗反応物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、３，２８−Ｏ−ジ−アセチル−ウバオールを５．４ｇ得た。
＜合成例８＞ ベツリン酸エチル
ベツリン酸５．０ｇとトリエチルアミン１．１ｇをクロロホルム５０ｍＬに溶解し、塩化チオニル１．２ｇをクロロホルム１０ｍＬに溶解したものを、氷冷下、滴下しながら、１時間攪拌した。続いて、エタノール３．５ｇを加え、トリエチルアミン１．１ｇをクロロホルム１０ｍＬに溶解したものを氷冷下、滴下しながら、３時間攪拌した。反応終了後、クロロホルム溶解分を抽出し、クロロホルムを溜去して得た粗反応物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、ベツリン酸エチルエステルを３．８ｇ得た。
＜合成例９＞ ３，２８−Ｏ−ジ−アセチル−ベツリン
ベツリン５．０ｇをピリジン２５０ｍＬに溶解し、無水酢酸１００ｍＬを加え、一晩攪拌した。ピリジン及び無水酢酸を溜去した後、残留物をエーテルに溶かし、このエーテル相を１Ｎ塩酸水溶液で一回、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で一回、純水で３回洗浄した後、硫酸マグネシウムを加えて一晩放置した。濾過により硫酸マグネシウムを除去し、エーテルを溜去して得た粗反応物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、３，２８−Ｏ−ジ−アセチル−ベツリンを５．４ｇ得た。
実施例１
＜血管平滑筋細胞増殖抑制効果の評価＞
ラット由来血管平滑筋細胞株Ａ７ｒ５（ＡＴＣＣより購入）を、３ｘ１０６細胞／７５ｃｍ２組織培養フラスコ（Ｎｕｎｃ社製）の密度で、１０％牛胎児血清を含むＤＭＥＭ培地（ナカライテスク社製）にて培養した。対数増殖期後半に入る１１日後に、細胞を１ｘ１０４細胞／０．３２ｃｍ２マルチプルウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｓｔａｒ社製）の密度で移植し、２．５％牛胎児血清を含むＤＭＥＭ培地にて、五環性トリテルペン類を、表１に記載の濃度になるように加えた状態で４８時間培養した。培養開始後４４時間目にＡｌａｍａｒＢｌｕｅＴＭ（Ａｌａｍａｒ社製）を加え、更に４時間培養した。培養終了後、細胞による酸化還元反応によって生じた蛍光物質を蛍光分光光度計で測定し、コントロール群の蛍光強度と比較することより細胞増殖抑制率を算出した。その際、五環性トリテルペン類による細胞毒性を知るために、細胞形態をも観察した。
（評価基準） 五環性トリテルペン類を溶かした溶媒のみを加えた群をコントロール群とし、コントロール群で得られた蛍光強度を１００％とした時の、被検物質添加群の蛍光強度から、増殖抑制率を算出した。すなわち、数式１の通りである。
上記方法によって血管平滑筋細胞増殖抑制効果を評価した。その結果を増殖抑制率として表１に示す。
表１から、比較としたオレアノール酸にはほとんど血管平滑筋細胞増殖抑制効果はなかった。これに対して、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸、ベツリンおよびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体の血管平滑筋細胞増殖抑制効果は非常に強いことが分かった。なお、培養終了後の細胞形態の観察により、検討した濃度での五環性トリテルペン類の細胞毒性は全く認められなかった。
これにより、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸、ベツリンおよびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体は、非常に優れた血管平滑筋細胞増殖抑制効果を有することが明らかになった。
実施例２
＜血管平滑筋細胞遊走抑制効果の評価＞
ラット由来血管平滑筋細胞株Ａ７ｒ５（ＡＴＣＣより購入）を、３ｘ１０５細胞／７５ｃｍ２組織培養フラスコ（Ｎｕｎｃ社製）の密度で、１０％牛胎児血清を含むＤＭＥＭ培地（ナカライテスク社製）にて培養した。対数増殖期後半に入る１１日後に、０．３２ｃｍ２マルチプルウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｓｔａｒ社製）に設置したケモタキセル（倉敷紡績社製）の上室に、培養細胞を５ｘ１０４細胞／セルの密度で移植し、下室に２５ｎｇ／ｍｌの血小板由来活性化因子のＢ鎖ホモダイマー（ＰＤＧＦ−ＢＢ：Ｓｉｇｍａ社製）を含むＤＭＥＭ培地と、五環性トリテルペン類を、表２に記載の濃度となるように加えた状態で、６時間培養した。培養終了後、ケモタキセルの膜下面に移動した細胞数を、Ｄｉｆｆ−Ｑｕｉｋ染色（国際試薬社製）により細胞を染色した後に計測し、コントロール群の細胞数と比較することより細胞遊走抑制率を算出した。
（評価基準） 五環性トリテルペン類を溶かした溶媒のみを加えた群をコントロール群とし、コントロール群で得られた遊走細胞数を１００％とした時の、被検物質添加群の細胞数から、遊走抑制率を算出した。すなわち、数式２の通りである。
上記方法によって血管平滑筋細胞遊走抑制効果を評価した。その結果を遊走抑制率として表２に示す
表２から、比較としたエリトロジオール、ウバオール、ベツリン酸、ベツリンには全く血管平滑筋細胞遊走抑制効果はなかった。また、オレアノール酸は、公知の抗動脈硬化用飲食物であるα−トコフェロールと同程度の抑制効果しか示さなかった。これに対して、マスリン酸、ウルソール酸およびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体の血管平滑筋細胞遊走抑制効果は、非常に強いことが分かった。
これにより、マスリン酸、ウルソール酸およびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体は、非常に優れた血管平滑筋細胞遊走抑制効果を有することが明らかになった。
実施例３
＜動物における内膜肥厚抑制効果の確認試験＞
ウィスター系雌ラット（１５週令）をＡＩＮ−９３組成の粉末調製飼料で１週間予備飼育した後、８群（１群４匹）に分けた。ペントバルビタール麻酔下で背位固定し、左外頚動脈を露出させ、外頚動脈よりカテーテルを総頚動脈分岐部まで挿入した。その部分でバルーンを膨らませ回転をかけながら外頚動脈まで引くことで内皮細胞を剥離した。この操作を４回繰り返した後、手術部位を縫合した。表４に示す各被験物質を綿実油に懸濁し、２００ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、ゾンデを用いて強制的に経口投与した。引き続きＡＩＮ−９３組成の粉末調製飼料で飼育を行い、２週間後、ペントバルビタール麻酔下で開胸し、心臓弓部より１０％リン酸緩衝／ホルマリン液で灌流した後、内皮細胞を剥離した左外頚動脈を摘出した。当該部位をホルマリン固定、パラフィン包埋し、組織切片を作製後、エラスチカ・ワンギーソン染色を行った。各切片の内膜および中膜の面積を、顕微鏡下でデジタルカメラ（オリンパス社製）で撮影した画像を解析することで測定した。
（評価基準） 五環性トリテルペン類を懸濁させた綿実油のみを加えた群をコントロール群とし、コントロール群で得られた内膜に対する中膜の面積比を１００％とした時の、五環性トリテルペン類投与群の内膜に対する中膜の面積比から、内膜肥厚抑制率を算出した。すなわち、数式３の通りである。
上記方法によって内膜肥厚抑制効果を評価した。その結果を内膜肥厚抑制率として表４に示す
表３から、評価したマスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸、ベツリンおよびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体は内膜肥厚抑制効果を有することが分かった。
これにより、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸、ベツリンおよびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体は、優れた内膜肥厚抑制効果を有することが明らかとなり、再狭窄用飲食物として有用であることが分かった。
実施例４
＜動物における抗動脈硬化効果の確認試験＞
ＮＺＷウサギ（雄、２〜２．５ｋｇ）を、コレステロールを１％含むＡＩＮ−９３組成の粉末調製飼料（コレステロール食）で１週間予備飼育した後、８群（１群５羽）に分け、表３に示す各被験物質を１％含むコレステロール食で、１日１回の制限給餌（４０ｇ／ｋｇ）にて８週間飼育した。８週間後、ペントバルビタール麻酔下で殺処分、解剖し、大動脈を摘出した。ホルマリン固定後、ＳｕｄａｎＩＶ染色し、大動脈内腔総面積および動脈硬化病変面積を、顕微鏡下でデジタルカメラ（オリンパス社製）で撮影した画像を解析することで測定した。
（評価基準） コレステロール食を与えた群をコントロール群とし、コントロール群で得られた大動脈内腔総面積に対する動脈硬化病変面積の割合を１００％とした時の、五環性トリテルペン類添加コレステロール食を与えた群の大動脈内腔総面積に対する動脈硬化病変面積の割合から、動脈硬化抑制率を算出した。すなわち、数式４の通りである。
上記方法によって抗動脈硬化抑制効果を評価した。その結果を動脈硬化抑制率として表４に示す
表４から、評価したマスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸、ベツリンおよびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体は動脈硬化抑制効果を有することが分かった。
これにより、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸、ウバオール、ベツリン酸、ベツリンおよびそれらの生理的に許容される塩、またはそれらの誘導体は、優れた動脈硬化抑制効果を有することが明らかとなり、抗動脈硬化用飲食物として有用であることが分かった。
実施例５
＜動物における急性毒性試験＞
急性毒性試験は以下の方法で行った。ウィスター系雌ラット（６週齢、平均体重１６０ｇ）をＡＩＮ−９３組成の粉末調製飼料で１週間予備飼育した後、平均体重が均等になるように６群（１群８匹）に分け、それぞれにマスリン酸投与群、エリトロジオール投与群、ウルソール酸投与群、ウバオール投与群、ベツリン酸投与群、ベツリン投与群とした。各被験物質を綿実油に懸濁し、２０００ｍｇ／体重ｋｇになるように、ゾンデを用いて強制的に経口投与した。引き続きＡＩＮ−９３組成の粉末調製飼料で飼育を行い、投与後２週間の予後状態を観察し、２週間後に解剖による内臓状態の検視を行った。
結果としては、投与後２週間において、何れの群においても死亡例はなく、また、解剖による内臓の所見でも特に異常は見られなかった。このことから各五環性トリテルペンのＬＤ５０値は２０００ｍｇ／体重ｋｇ以上であり、安全性に極めて優れており、また、血管障害疾患用飲食物の形態として、経口摂取することも可能であることが分かった。
実施例６ 食用調合油脂
精製マスリン酸１ ５．０ｇ
大豆白絞油 ８４５．０ｇ
ＭＣＴ １５０．０ｇ
上記配合比率にて、大豆白絞油とＭＣＴの混合油に精製マスリン酸１を添加し、６０℃の温度を保ちながら、攪拌機を用いて全体が清澄になるまで十分に混合、溶解を行い、食用調合油脂を製造した。
実施例７ ドレッシング
水 ４６．６ｇ
キサンタンガム ０．１ｇ
果糖ぶどう糖液糖 ５．０ｇ
食塩 ５．０ｇ
ＭＳＧ ０．３ｇ
米酢（酸度１０％） １０．０ｇ
こしょう 適量
製造例２の精製マスリン酸２ １．０ｇ
ＭＬＣＴ ３２．０ｇ
上記配合比率にて、まずＭＬＣＴを除く原材料を、攪拌機付きの加温可能な容器に投入し、プロペラ攪拌機を用いて１００ｒｐｍで攪拌しながら品温が９０℃になるまで加熱し、品温を９０℃に保持しながら２５分間攪拌を行った。その後、品温が２０℃になるまで冷却してＭＬＣＴと合わせてドレッシングを得た。
実施例８ 清涼飲料
合成例５の３，２８−Ｏ−ジ−アセチル−エリトロジオール ０．５ｇ
ハチミツ １５．０ｇ
クエン酸 ０．１ｇ
ｄｌ−リンゴ酸 ０．１ｇ
Ｄ−ソルビトール液（７０％） １０．０ｇ
安息香酸ナトリウム ０．１ｇ
香料 適量
精製水 全量１００ｇとする残余
上記原料を均一に混合し、健康用飲料を得た。
実施例９ シリアル食品
合成例７の３，２８−Ｏ−ジ−アセチル−ウバオール １５．０ｇ
小麦粉 ３０．０ｇ
脱脂大豆 １８．５ｇ
小麦ふすま １５．０ｇ
小麦胚芽 １１．５ｇ
グラニュー糖 １０．０ｇ
上記配合比率にて混合したものを、加水、成型し、オーブンで加熱乾燥して、球形状のシリアル食品を得た。
実施例１０ 食用調合油脂
製造例３の精製マスリン酸３ １０．０ｇ
ミックストコフェロール １．０ｇ
米油 ９８９．０ｇ
上記配合比率にて、米油に精製マスリン酸３とミックストコフェロールを添加し、６０℃の温度を保ちながら、攪拌機を用いて全体が清澄になるまで十分に混合、溶解を行い、食用調合油脂を製造した。
実施例１１ 食用調合油脂
製造例１の精製マスリン酸１ ５．０ｇ
植物ステロール １．０ｇ
紅花油 ９８９．０ｇ
上記配合比率にて、紅花油に精製マスリン酸１と植物ステロールを添加し、６０℃の温度を保ちながら、攪拌機を用いて全体が清澄になるまで十分に混合、溶解を行い、食用調合油脂を製造した。
実施例１２ マーガリン
菜種油 ４２．０ｇ
菜種硬化油 ４２．０ｇ
水 １４．０ｇ
食塩 ０．５ｇ
レシチン ０．５ｇ
モノグリセリド ０．４ｇ
製造例１の精製マスリン酸１ ０．５ｇ
香料 適量
カロチン 微量
上記原料を常法により混合し、コンビネーターを用い急冷混捏処理してマーガリンを得た。
実施例１３ マヨネーズ
大豆サラダ油 ７４．０ｇ
水 ８．４ｇ
砂糖 １．０ｇ
グルタミン酸ナトリウム ０．３ｇ
粉末マスタード ０．３ｇ
食塩 １．０ｇ
米酢 ４．０ｇ
製造例２の精製マスリン酸２ １．０ｇ
加塩卵黄 １０．０ｇ
上記配合比率にて、まず大豆サラダ油、加塩卵黄を除く原材料を、混合攪拌しながら９０℃まで加熱し、９０℃に保持しながら２５分間攪拌を行った。２０℃まで冷却した後、大豆サラダ油、加塩卵黄を合わせて減圧下で撹拌し、マヨネーズを得た。
本発明の血管障害疾患用飲食物によれば、五環性トリテルペン類、それらの生理的に許容される塩及びそれらの誘導体は、血管平滑筋細胞増殖抑制効果および／または血管平滑筋細胞遊走抑制効果、内膜肥厚抑制および抗動脈硬化等の抗細胞増殖性血管病変効果、抗動脈硬化症およびＰＴＣＡ後の抗再狭窄等の抗血管障害疾患効果に優れており、天然由来であるため安心感や安全性を付与でき、容易に、かつ、継続的な摂取により、好適な効果を享受することができる。Background of the Invention
The present invention relates to cell proliferative vascular lesions such as vascular smooth muscle cell proliferation and / or vascular smooth muscle cell migration, intimal thickening and arteriosclerosis, vascular disorders such as arteriosclerosis and restenosis after percutaneous coronary angioplasty. The present invention relates to foods and drinks that exhibit preventive and / or therapeutic effects on diseases.
In recent years, ischemic heart diseases such as angina pectoris and myocardial infarction and cerebrovascular diseases such as stroke and cerebral embolism have become major social problems in Europe and the United States due to their high mortality. Also in Japan, the above diseases are rapidly increasing as one of the causes of death with the westernization of dietary habits and aging. These diseases are induced by vascular lesions such as narrowing of the blood vessel lumen and loss of elasticity of the blood vessel wall caused by arteriosclerosis.
The establishment of arteriosclerosis depends on not a single factor but a plurality of factors and incentives, but it can be roughly divided into two main factors. One is the aggregation of various reticulo-endothelial cells due to arterial endothelial damage, the subsequent release of vascular smooth muscle cell growth factor, and the migration of vascular smooth muscle cells from the media to the atherosclerotic lesions and proliferation there. Yes, another is the transformation of vascular endothelial cells, vascular smooth muscle cells by hyperlipidemia containing cholesterol, and proliferation in atherosclerotic lesions. That is, migration of vascular smooth muscle cells into the intima and cell fibrous thickening caused by proliferation in the intima cause cell proliferative vascular lesions such as narrowing of the blood vessel lumen.
One of the methods for surgically treating narrowing of blood vessels is percutaneous transluminal coronary angioplasty (hereinafter abbreviated as PTCA). This is a procedure in which a balloon catheter is remotely inserted from the femoral artery, etc., the balloon is inflated at the stenosis, and the blood vessel is physically dilated. I have.
However, there are cases where stenosis occurs again after PTCA is performed. This restenosis site is known to be a fibrous intimal thickening mainly composed of vascular smooth muscle cells. Intimal hyperplasia resulting from the proliferation of vascular smooth muscle cells, migration to the intima, matrix deposition, etc. is also a major factor in the onset of atherosclerotic disease, hypertension, ischemic heart disease, and cerebrovascular disease. Has become. Furthermore, vascular stenosis after transplantation of organs such as heart, liver, kidney, and blood vessels also involves the proliferation of vascular smooth muscle cells.
Antithrombotics and vasodilators are mainly used as treatments for angina pectoris and myocardial infarction, but the narrowing of the blood vessel lumen and the elasticity of blood vessels caused by restenosis and arteriosclerosis after PTCA are mainly used. The treatment of atherosclerotic diseases, ischemic heart diseases and cerebrovascular diseases, in which vascular smooth muscle cell proliferation has been implicated so far, has been limited. There is a need for foods and drinks that can prevent or treat cell proliferative vascular lesions such as intimal thickening and arteriosclerosis that cause lumen narrowing.
The triterpenes according to the present invention are generally pentacyclic compounds consisting of six isoprene units and having basically 30 carbon atoms. Is also included. As these effects, anti-inflammatory effects, anti-tumor promoter effects (Journal of the Japan Oil Chemists' Society, 49, 571, 2000) and the like are generally known. Particularly, ursolic acid and oleanolic acid are known to have an antihyperlipidemic effect, and ursolic acid is also known to have an effect on atherosclerosis associated with hyperlipidemia ( Chemical Abstracts, 91, 49279r., 1981, or Pharmacology and Toksiology, 45, 66-70, 1982). However, it has never been known that pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives have an effect on vascular smooth muscle cells.
Disclosure of the invention
The present invention inhibits vascular smooth muscle cell proliferation and migration and prevents and / or treats cell proliferative vascular lesions such as intimal hyperplasia and arteriosclerosis, and vascular disorders such as arteriosclerosis and restenosis after PTCA. Therefore, an object of the present invention is to provide a food and drink for a vascular disorder having a very excellent effect on them.
The present inventors have conducted intensive studies to achieve the above object, and as a result, compounds selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts, and their derivatives, were found to be vascular smooth muscle cells. Arteriosclerosis and intimal hyperplasia caused by vascular smooth muscle cell proliferation and / or vascular smooth muscle cell migration due to growth inhibitory effect, vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect, anti-cell proliferative vascular lesion effect, anti-vascular disorder disease effect, etc. The present inventors have found that the present invention has an excellent preventive and / or therapeutic effect on cell proliferative vascular lesions and vascular disorders such as arteriosclerosis and restenosis after PTCA, and completed the present invention.
That is, the present invention relates to a food and beverage for inhibiting vascular smooth muscle cell proliferation, which comprises, as an active ingredient, a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof, and derivatives thereof, The present invention relates to a food and drink for inhibiting vascular smooth muscle cell migration, which comprises, as an active ingredient, a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives.
Further, the present invention relates to a food and drink for an anti-cell proliferative vascular lesion containing a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof and derivatives thereof as an active ingredient, preferably A food or beverage for an anti-cell proliferative vascular lesion, wherein the cell proliferative vascular lesion is caused by vascular smooth muscle cell proliferation and / or vascular smooth muscle cell migration, preferably, the cell proliferative vascular lesion is intimal hyperplasia The present invention relates to a food and beverage for anti-intimal thickening, and preferably to a food and beverage for anti-atherosclerosis wherein the cell proliferative vascular lesion is arteriosclerosis.
The present invention also relates to foods and drinks for vascular disorders containing a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives as active ingredients, preferably The disease relates to food and drink for a vascular disorder caused by a cell proliferative vascular lesion, preferably, the vascular disorder relates to an anti-atherosclerotic food and drink in which arteriosclerosis is present, and preferably the vascular disorder is obtained after PTCA. The present invention relates to an anti-restenotic food and drink after PTCA which is restenosis.
The present invention also relates to a food and drink for vascular vascular diseases, comprising an extract obtained by treating a defatted olive with an ethanol solution.
The present invention also involves vascular smooth muscle cell proliferation or vascular smooth muscle cells containing as an active ingredient a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives. The present invention relates to a food or drink for preventing or treating a disease associated with a lesion or a disease state.
The present invention also includes a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof and derivatives thereof as an active ingredient, intimal hyperplasia, arteriosclerosis, cell proliferative vascular lesion. , Coronary atherosclerosis, abdominal aortic sclerosis, obstructive atherosclerosis, renal atherosclerosis, carotid atherosclerosis, fundus atherosclerosis, cerebral atherosclerosis, atherosclerosis, restenosis after percutaneous coronary angioplasty, The present invention relates to a food or drink for preventing or treating myocardial infarction, angina pectoris, ischemic heart disease, cerebral infarction, stroke or cerebrovascular disease.
The present invention also relates to the use of a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof, and derivatives thereof for producing a food or drink for a vascular disease.
The present invention also relates to a raw material for food and drink for vascular disorders, comprising a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts, and their derivatives.
The present invention also relates to a raw material for food and drink for vascular disorders, which contains an extract obtained by treating defatted olives with an ethanol solution.
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
TECHNICAL FIELD The present invention relates to a food and drink for inhibiting vascular smooth muscle cell proliferation, which comprises, as an active ingredient, a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof, and derivatives thereof. Of the pentacyclic triterpenes, oleanane triterpenes, ursan triterpenes and lupine triterpenes are preferred. Among them, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid or betulin is preferred. Particularly, maslinic acid, erythrodiol and ubaol are preferred. Particularly preferred is maslinic acid.
The present invention also relates to a food and drink for inhibiting vascular smooth muscle cell migration, which comprises, as an active ingredient, a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts, and their derivatives. Of the pentacyclic triterpenes, oleanane triterpenes, ursan triterpenes and lupine triterpenes are preferred. Among them, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid or betulin is preferred. Particularly, maslinic acid, erythrodiol and ubaol are preferred. Particularly preferred is maslinic acid.
These substances are pentacyclic compounds among triterpenes composed of six isoprene units, and are a group of substances that are abundant in various plants in nature. These can be naturally obtained by extracting from a plant body, and some of them are artificially synthesized and some are already sold as reagents. Can be. Those extracted from natural raw materials are preferred.
These have anti-atherosclerotic effects such as inhibition of vascular smooth muscle cell proliferation and / or inhibition of vascular smooth muscle cell migration, and these effects can be evaluated by a test method using cultured cells. According to this evaluation method, α-tocopherol (D. Boscoboinik et al., Arch. Biochem. Biophys., 286 (1), 264-269 (1991)) known as a conventional anti-atherosclerotic food or drink. It can be seen that the anti-atherosclerosis effect is 2 to 20 times as large as that of
Here, the term “containing as an active ingredient” means that the substance is contained to such an extent that the vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect and / or the vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect is exhibited, but the content is not particularly limited. May be adjusted as appropriate according to the frequency, intake, and purpose of use. Although not particularly limited, for example, 0.0001% by mass or more, preferably 0.0001 to 99.99% by mass, more preferably 0.001 to 99.99% by mass, and still more preferably 0.005 to 99.99% by mass. %, More preferably 0.01 to 99.99% by mass, further preferably 0.05 to 99.99% by mass, further preferably 0.1 to 99.99% by mass, and still more preferably 0.5 to 99.99% by mass. It is 99% by mass, more preferably 1 to 99.99% by mass.
Further, the present invention relates to a food and drink for an anti-cell proliferative vascular lesion containing a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof and derivatives thereof as an active ingredient, preferably A food or beverage for an anti-cell proliferative vascular lesion, wherein the cell proliferative vascular lesion is caused by vascular smooth muscle cell proliferation and / or vascular smooth muscle cell migration, preferably, the cell proliferative vascular lesion is intimal hyperplasia The present invention relates to a food and beverage for anti-intimal thickening, and preferably to a food and beverage for anti-atherosclerosis wherein the cell proliferative vascular lesion is arteriosclerosis. Of the pentacyclic triterpenes, oleanane triterpenes, ursan triterpenes and lupine triterpenes are preferred. Among them, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid or betulin is preferred. Particularly, maslinic acid, erythrodiol and ubaol are preferred. Particularly preferred is maslinic acid. They have an anti-cell proliferative vascular pathological effect, such as an intimal hyperplasia inhibitory effect and / or an anti-atherosclerotic effect, and these effects can be evaluated in animal tests.
Here, the term "containing as an active ingredient" means that it is contained to such an extent that an anti-cell proliferative vascular lesion effect, for example, an intimal hyperplasia-suppressing effect and / or an anti-atherosclerotic effect is exhibited, but the content is particularly limited. Instead, it may be appropriately adjusted depending on the frequency of intake, the amount of intake, and the purpose of use. Although not particularly limited, for example, 0.0001% by mass or more, preferably 0.0001 to 99.99% by mass, more preferably 0.001 to 99.99% by mass, and still more preferably 0.005 to 99.99% by mass. %, More preferably 0.01 to 99.99% by mass, further preferably 0.05 to 99.99% by mass, further preferably 0.1 to 99.99% by mass, and still more preferably 0.5 to 99.99% by mass. It is 99% by mass, more preferably 1 to 99.99% by mass.
The present invention also relates to foods and drinks for vascular disorders containing a compound selected from the group consisting of pentacyclic tridelpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives as active ingredients. The disease relates to food and drink for vascular disorders caused by cell proliferative vascular lesions, preferably, the vascular disorder relates to food and drink for anti-arteriosclerosis in which the vascular disorders are arteriosclerosis. The present invention relates to an anti-restenotic food and drink after PTCA, which is restenosis. Of the pentacyclic triterpenes, oleanane triterpenes, ursan triterpenes and lupine triterpenes are preferred. Among them, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid or betulin is preferred. Particularly, maslinic acid, erythrodiol and ubaol are preferred. Particularly preferred is maslinic acid. They have anti-vascular disease effects, such as anti-atherosclerotic and / or anti-restenotic effects, which can be evaluated in animal and clinical tests.
Here, to contain as an active ingredient means to contain an anti-vascular disorder disease effect, for example, an anti-atherosclerosis effect and / or an anti-restenosis effect, but the content is not particularly limited, It may be adjusted appropriately depending on the frequency of intake, the amount of intake, and the purpose of use. Although not particularly limited, for example, 0.0001% by mass or more, preferably 0.0001 to 99.99% by mass, more preferably 0.001 to 99.99% by mass, and still more preferably 0.005 to 99.99% by mass. %, More preferably 0.01 to 99.99% by mass, further preferably 0.05 to 99.99% by mass, further preferably 0.1 to 99.99% by mass, and still more preferably 0.5 to 99.99% by mass. It is 99% by mass, more preferably 1 to 99.99% by mass.
The present invention relates to a food and drink and / or vascular smooth muscle for inhibiting vascular smooth muscle cell proliferation, which comprises, as an active ingredient, a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives. Food and drink for anti-cell proliferative vascular lesions such as food and drink for migratory suppression and / or food and drink for anti-intimal thickening and food and drink for anti-atherosclerosis, and food and drink for anti-atherosclerosis and anti-restenosis after PTCA The present invention relates to foods and drinks for vascular disorders such as foods and drinks. These substances are a kind of triterpenes, and are pentacyclic compounds composed of six isoprene units, which can be obtained from natural plants or artificially, and commercially available products are suitably used. be able to. Those extracted from natural raw materials are preferred. In addition, the term “containing as an active ingredient” as used herein means that the compound is contained to such an extent that the effect of each purpose is exhibited.
The present invention also involves vascular smooth muscle cell proliferation or vascular smooth muscle cells containing as an active ingredient a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives. The present invention relates to a food or drink for preventing or treating a disease associated with a lesion or a disease state. Of the pentacyclic triterpenes, oleanane triterpenes, ursan triterpenes and lupine triterpenes are preferred. Among them, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid or betulin is preferred. Particularly, maslinic acid, erythrodiol and ubaol are preferred. Particularly preferred is maslinic acid.
The present invention also includes a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof and derivatives thereof as an active ingredient, intimal hyperplasia, arteriosclerosis, cell proliferative vascular lesion. , Coronary atherosclerosis, abdominal aortic sclerosis, obstructive atherosclerosis, renal atherosclerosis, carotid atherosclerosis, fundus atherosclerosis, cerebral atherosclerosis, atherosclerosis, restenosis after percutaneous coronary angioplasty, The present invention relates to a food or drink for preventing or treating myocardial infarction, angina pectoris, ischemic heart disease, cerebral infarction, stroke or cerebrovascular disease. Of the pentacyclic triterpenes, oleanane triterpenes, ursan triterpenes and lupine triterpenes are preferred. Among them, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid or betulin is preferred. Particularly, maslinic acid, erythrodiol and ubaol are preferred. Particularly preferred is maslinic acid.
The present invention also relates to a raw material for food and drink for vascular disorders, comprising a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts, and their derivatives. Of the pentacyclic triterpenes, oleanane triterpenes, ursan triterpenes and lupine triterpenes are preferred. Among them, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid or betulin is preferred. Particularly, maslinic acid, erythrodiol and ubaol are preferred. Particularly preferred is maslinic acid.
The physiologically acceptable salt is, in particular, a salt derived from the carboxyl group of a pentacyclic triterpene acid (partial structure: -COOX; X represents any cationic substance) and is a natural salt in the present invention. It also includes those originally contained in isolates from raw materials. In the present invention, the salt is not particularly limited as long as it is a salt usually used in foods and drinks or pharmaceutical compositions. For example, alkali metal salts such as sodium, potassium, lithium and the like, alkaline earth metal salts such as calcium, magnesium, barium and zinc, ammonia, methylamine, dimethylamine, trimethylamine, ethylamine, diethylamine, triethylamine, propylamine, butylamine, tetraamine Alkylamine salts such as butylamine, pentylamine, and hexylamine; alkanolamine salts such as ethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, propanolamine, dipropanolamine, isopropanolamine, and diisopropanolamine; and other organic amines such as piperazine and piperidine. And salts of basic amino acid salts such as salts, lysine, arginine, histidine, tryptophan and the like. Of these, alkali metal salts, alkylamine salts, alkanolamine salts and basic amino acid salts are preferred.In general, these salts are more water-soluble than the pentacyclic triterpenes from which they are derived, The present invention is particularly preferable when applied to foods and drinks for water-based vascular diseases.
The derivative is a derivative that can be formed biochemically or artificially. In the present invention, the derivative is not particularly limited as long as it is a possible derivative. For example, a derivative having an alcohol ester group and a fatty acid ester group may be used. Derivatives, derivatives having an alkoxy group, derivatives having an alkoxymethyl group, and glycosides. Of these, derivatives having an alcohol ester group, derivatives having a fatty acid ester group, derivatives having an alkoxy group, and derivatives having an alkoxymethyl group are, for example, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, uvaol, betulin Acids and betulin show more lipophilicity, and therefore, in the present invention, they are particularly preferable when they are applied to foods and drinks for oil-based vascular disorders, and glycosides are pentacyclic triterpenes from which they are derived. Since the compound is more water-soluble than the compounds, it is preferable in the present invention particularly when it is applied to foods and drinks for water-based vascular disorders.
Some of these derivatives exist in nature, and can be obtained by artificial formation as described above. In addition, the derivatives of the present invention can be re-derivatized and their salts can be used.
As described above, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid and betulin can be formed into appropriate physiologically acceptable salts and derivatives to improve water solubility or oil solubility. Therefore, it is possible to set a product having improved handling properties, quality, vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect, vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect, and the like.
The alcohol ester group refers to a functional group formed as a result of a general dehydration reaction between a carboxyl group and an alcohol (partial structure: -COOR; R represents an arbitrary hydrocarbon-based functional group). That is, the derivative having an alcohol ester group of the pentacyclic triterpene in the present invention particularly refers to a derivative which can be formed from the carboxyl group and the alcohol. There is no particular limitation on the alcohols at this time, but for example, methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, allyl alcohol, n-butanol, sec-butanol, tert-butanol, ethylene glycol, trimethylsilyl alcohol, triethylsilyl alcohol, phenol , Benzyl alcohol, saccharides and the like. Of these, derivatives formed from ethanol, triethylsilyl alcohol, methanol, n-propanol, isopropanol or trimethylsilyl alcohol are preferred.
The fatty acid ester group indicates a functional group formed as a result of a dehydration reaction between a general hydroxyl group and a fatty acid (partial structure: -OCOR; R represents an arbitrary hydrocarbon-based functional group). That is, the derivative having a fatty acid ester group of the pentacyclic triterpene in the present invention particularly refers to a derivative which can be formed from the hydroxyl group and the fatty acid. There are no particular restrictions on the fatty acids at this time, for example, acetic acid, propionic acid, butyric acid, isobutyric acid, valeric acid, isovaleric acid, pivalic acid, caproic acid, caprylic acid, capric acid, undecanoic acid, lauric acid, myristin Acid, palmitic acid, palmitoleic acid, stearic acid, oleic acid, elaidic acid, vaccenic acid, linoleic acid, linoleic acid, linolenic acid, γ-linolenic acid, arachidic acid, arachidonic acid, eicosapentaenoic acid, behenic acid, docosahexaenoic acid Lignoceric acid, cellotic acid, montanic acid, melicic acid and the like. Among them, acetic acid, acetic anhydride, caproic acid, caprylic acid, capric acid, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, palmitoleic acid, stearic acid, oleic acid, elaidic acid, linoleic acid, linoleic acid, linolenic acid, γ- Derivatives formed from linolenic acid, arachidic acid, arachidonic acid, eicosapentaenoic acid, behenic acid or docosahexaenoic acid are preferred.
The alkoxy group indicates a functional group formed as a result of a dehydration reaction between a general hydroxyl group and an alcohol (partial structure: -OR; R represents an arbitrary hydrocarbon-based functional group). That is, the derivative having an alkoxy group of the pentacyclic triterpene in the present invention particularly refers to a derivative which can be formed from the hydroxyl group and the alcohol. There is no particular limitation on the alcohols at this time, but for example, methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, allyl alcohol, n-butanol, sec-butanol, tert-butanol, ethylene glycol, trimethylsilyl alcohol, triethylsilyl alcohol, phenol , Benzyl alcohol, saccharides and the like. Of these, derivatives formed from ethanol, triethylsilyl alcohol, methanol, n-propanol, isopropanol or trimethylsilyl alcohol are preferred.
The alkoxymethyl group indicates a functional group formed as a result of a general dehydration reaction between a hydroxymethyl group and an alcohol (partial structure: -CH2OR; R represents an arbitrary hydrocarbon-based functional group). That is, the derivative having an alkoxymethyl group of the pentacyclic triterpene in the present invention particularly refers to a derivative which can be formed from the hydroxymethyl group and an alcohol. There is no particular limitation on the alcohols at this time, but for example, methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, allyl alcohol, n-butanol, sec-butanol, tert-butanol, ethylene glycol, trimethylsilyl alcohol, triethylsilyl alcohol, phenol , Benzyl alcohol, saccharides and the like. Of these, derivatives formed from ethanol, triethylsilyl alcohol, methanol, n-propanol, isopropanol or trimethylsilyl alcohol are preferred.
In addition, the glycoside in the present invention is a derivative having an alcohol ester group, a derivative having an alkoxy group, or a derivative having an alkoxymethyl group, particularly, a carboxyl group, a hydroxyl group, a hydroxymethyl group of a pentacyclic triterpene. A derivative that can be formed from a group and a saccharide is shown (partial structure: -COOR, -OR, -CH2OR; R represents an arbitrary saccharide). The saccharide at this time is not particularly limited, and includes, for example, glucose, mannose, galactose, fructose, xylose, arabinose, fucose, rhamnose, glucosamine, galactosamine, glucuronic acid, and the like. . These glycosides may be monosaccharides or oligosaccharides of various combinations of disaccharides or more. Some of these usually exist naturally and are generally known as savonin, but in the present invention, any of these may be used.
The pentacyclic triterpenes and the like in the present invention are as described above, but particularly from the aspect of high anti-atherogenic effect, oleanane-based triterpenes, ursan-based triterpenes, lupine-based triterpenes, and their physiologically useful properties. Acceptable salts, or derivatives thereof, are preferred. Pentacyclic triterpenes having a skeleton represented by general formula (I) for oleanane-based triterpenes, general formula (II) for ursan-based triterpenes, and general formula (III) for lupine-based triterpenes, respectively , Their physiologically acceptable salts and their derivatives. The functional groups in each formula are the same as described above.
Although not particularly limited in the present invention, for example, oleanane-based triterpenes include maslinic acid, oleanolic acid, erythrodiol, β-amyrin, hederagenin, glycyrrhetinic acid, and the like, and ursan-based triterpenes include ursolic acid and ubaol. , Α-amyrin, quinovonic acid, taraxasterol, α-hydroxyursolic acid, and the like, and examples of the lupine triterpenes include betulinic acid, betulin, lupeol, and the like. The physiologically acceptable salts and derivatives thereof are the same as described above. When a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof is used, oleanane-based triterpenes, ursan-based triterpenes, lupine-based triterpenes and their physiologically acceptable salts, or derivatives thereof The origin of the is not limited, can be used those obtained from nature, artificially synthesized, commercially available products, etc., taking into account that the present invention is a food and drink Preferably, it is used.
As described above, in the present invention, among the pentacyclic triterpenes, oleanane-based triterpenes (I), ursan-based triterpenes (II), lupine-based triterpenes (III), and physiologically acceptable salts thereof Or derivatives thereof are preferred, but from the viewpoint of the strength of the anti-atherosclerotic effect, oleic acid-based triterpenes are preferably maslinic acid and erythrodiol, ursane-based triterpenes are preferably ursolic acid and uvaol, and lupan-based triterpenes are betulin. Acids and betulin are preferred, and of course, their physiologically acceptable salts or their derivatives.
Maslinic acid and erythrodiol are both oleanane-based triterpenes and are substances known to be present in various plants. The physiologically acceptable salts and derivatives thereof are the same as described above. In foods and drinks for vascular diseases of the present invention, when using maslinic acid, erythrodiol, a physiologically acceptable salt thereof, or a derivative thereof, the origin of these substances is not limited, Any of those obtained from nature, artificially synthesized, and commercially available products can be used.
In the present invention, maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof are most preferable in terms of high anti-atherosclerosis effect and stable supply. Maslinic acid is a kind of oleanane-based triterpene and has a structure represented by the chemical formula (IV), and is known to have an anti-inflammatory effect and an antihistamine effect. In nature, it is known to be present in olives, hops, mint, pomegranate, cloves, sage, jujube and the like. In the food and drink for vascular disorders of the present invention, the origin of maslinic acid, its physiologically acceptable salts and derivatives is not limited, and any of those obtained from nature, artificially synthesized, commercially available products, etc. However, in consideration of oral use, those obtained from natural sources such as olives, hops, peppermint, pomegranate, cloves, sage, and jujube are preferable, and maslinic acid and / or olives obtained from olives are particularly preferable. Or a physiologically acceptable salt thereof is very preferable in terms of raw material supply and content. These raw materials, especially olive plants, can be obtained by extraction treatment with water and / or an organic solvent, and further concentrated and purified to obtain a high concentration of naturally occurring maslinic acid and / or its physiologically acceptable maslinic acid. Salt can be obtained easily and in large quantities.
In this specification, “olive” means an olive plant and / or olive oil and / or a product obtained in an olive oil production process.
Examples of the derivative of maslinic acid include, for example, those in which any one portion is derivatized, maslinic acid methyl ester, maslinic acid ethyl ester, maslinic acid n-propyl ester, maslinic acid isopropyl ester, maslinic acid n- Butyl ester, trimethylsilyl maslinate, triethylsilyl masinate, maslinic acid-β-D-glucopyranosyl ester, maslinic acid-β-D-galactopyranosyl ester, 3-O-acetyl-maslinic acid, 3-O -Propionyl-massic acid, 3-O-butyryl-massic acid, 3-O-valeryl-massic acid, 3-O-capryl-massic acid, 3-O-lauryl-massic acid, 3-O-myristyl-massic acid , 3-O-palmityl-maslinic acid, 3-O-palmitoolei Le-maslinic acid, 3-O-stearyl-maslinic acid, 3-O-stearoyl-maslinic acid, 3-O-oleyl-maslinic acid, 3-O-vaccenyl-maslinic acid, 3-O-linoleyl-maslinic acid, 3-O-linolenyl-maslinic acid, 3-O-arachidyl-maslinic acid, 3-O-arachidonyl-maslinic acid, 3-O-behenyl-maslinic acid, 2-O-acetyl-maslinic acid, 2-O-propionyl -Maslinic acid, 2-O-butyryl-maslinic acid, 2-O-valeryl-maslinic acid, 2-O-capryl-maslinic acid, 2-O-lauryl-maslinic acid, 2-O-myristyl-maslinic acid, 2 -O-palmityl-maslinic acid, 2-O-palmitoleyl-maslinic acid, 2-O-stearyl-maslinic acid, 2-O-stearoyl-maslinic acid, 2-O-O Il-maslinic acid, 2-O-vaccenyl-maslinic acid, 2-O-linoleyl-maslinic acid, 2-O-linolenyl-maslinic acid, 2-O-arachidyl-maslinic acid, 2-O-arachidonyl-maslinic acid, 2-O-behenyl-massic acid, 3-O-methyl-massic acid, 3-O-ethyl-massic acid, 3-Ot-butyl-massic acid, 3-O-triethylsilyl-massic acid, 3- O-β-D-glucopyranosyl-maslinic acid, 3-O-β-D-galactopyranosyl-maslinic acid, 3-O-β-D-glucuronopyranosyl-maslinic acid, 2-O-methyl- Maslinic acid, 2-O-ethyl-maslinic acid, 2-Ot-butyl-maslinic acid, 2-O-triethylsilyl-maslinic acid, 2-O-β-D-glucopyranosyl-maslinic acid, 2-O- β-D- Lactopyranosyl-maslinic acid, 2-O-β-D-glucuronopyranosyl-maslinic acid and the like. Among these, ethyl maslinate, triethylsilyl maslinate, 3-O-acetyl-maslinic acid, 2- O-acetyl-maslinic acid, 2-O-triethylsilyl-maslinic acid, 3-O-stearoyl-maslinic acid and 2-O-stearoyl-maslinic acid are preferred. In the above description, only one derivative is derivatized, but of course, two or more derivatizable derivable positions and types may be derivatized. For example, preferred are 2,3-O-diacetyl, 2,3-O-ditriethylsilyl and 2,3-distearoyl of maslinic acid or the above-mentioned preferred maslinic acid esters. Although only glycosides are listed as glycosides, naturally, oligosaccharides of two or more disaccharides selected from the group consisting of various saccharides may be used.
Erythrodiol is a kind of oleanane-based triterpene and has a structure similar to that of the chemical formula (V). -185 1995). In nature, it is known to be present in olives, sunflowers, calendulas, gum arabic, kouxitan, Nagabaka Konoki and the like. In the food and drink for vascular disorders of the present invention, the origin of erythrodiol or a derivative thereof is not limited, and any of those obtained from nature, artificially synthesized, and commercially available products can be used. However, in consideration of oral use, those obtained from natural sources such as olives, sunflowers, calendula, gum arabic, kouxitan, and Nagakakonoki are preferable. Olives are particularly preferred, and specifically those obtained from the products obtained in the olive plant and / or olive oil production process.
Here, the derivative is not limited to the following, but, for example, when any one of the derivatives is derivatized, 3-O-acetyl-erythrodiol, 3-O-propionyl-erythrodiol, 3-O- Butyryl-erythrodiol, 3-O-valeryl-erythrodiol, 3-O-capryl-erythrodiol, 3-O-lauryl-erythrodiol, 3-O-myristyl-erythrodiol, 3-O- Palmityl-erythrodiol, 3-O-palmitooleyl-erythrodiol, 3-O-stearyl-erythrodiol, 3-O-stearoyl-erythrodiol, 3-O-oleyl-erythrodiol, 3-O- Baxenyl-erythrodiol, 3-O-linoleyl-erythrodiol, 3-O-linolenyl-erythrodiol, 3 O-arachidyl-erythrodiol, 3-O-arachidonyl-erythrodiol, 3-O-behenyl-erythrodiol, 28-O-acetyl-erythrodiol, 28-O-propionyl-erythrodiol, 28- O-butyryl-erythrodiol, 28-O-valeryl-erythrodiol, 28-O-capryl-erythrodiol, 28-O-lauryl-erythrodiol, 28-O-myristyl-erythrodiol, 28- O-palmityl-erythrodiol, 28-O-palmitooleyl-erythrodiol, 28-O-stearyl-erythrodiol, 28-O-stearoyl-erythrodiol, 28-O-oleyl-erythrodiol, 28- O-vaccenyl-erythrodiol, 28-O-linoleyl-erythrodiol , 28-O-linolenyl-erythrodiol, 28-O-arachidyl-erythrodiol, 28-O-arachidonyl-erythrodiol, 28-O-behenyl-erythrodiol, 3-O-methyl-erythrodiol , 3-O-ethyl-erythrodiol, 3-O-t-butyl-erythrodiol, 3-O-triethylsilyl-erythrodiol, 28-O-methyl-erythrodiol, 28-O-ethyl- Erythrodiol, 28-Ot-butyl-erythrodiol, 28-O-triethylsilyl-erythrodiol, 3-O-β-D-glucopyranosyl-erythrodiol, 3-O-β-D-galacto Pyranosyl-erythrodiol, 3-O-β-D-glucuronopyranosyl-erythrodiol, 28-O-β-D-glucopyranosyl- Littrow diol, 28-O-β-D- galactopyranosyl - erythrodiol, 28-O-β-D- glucuronolactone pyranosyl - erythro diol. Of these, 3-O-acetyl-erythrodiol and 28-O-acetyl-erythrodiol are preferred. In the above description, only one derivative is derivatized, but of course, two or more derivatizable derivable positions and types may be derivatized. For example, 3,28-O-diacetyl-erythrodiol is preferred. Although only glycosides are listed as glycosides, naturally, oligosaccharides of two or more disaccharides selected from the group consisting of various saccharides may be used.
Ursolic acid and Ubaol are all types of ursan triterpenes, and are substances known to be present in various plants. The physiologically acceptable salts and derivatives thereof are the same as described above. When using ursolic acid, ubaol, a physiologically acceptable salt thereof, or a derivative thereof in the food and drink for a vascular disorder disease of the present invention, the origin of these substances is not limited, and natural Any of those obtained, artificially synthesized, commercially available products and the like can be used, but in consideration of oral use, it is preferable to use natural products.
Ursolic acid is a kind of ursan triterpene, and is a compound having a structure represented by the chemical formula (VI). It is known to have a blood effect (Jie Liu, Journal of Ethnopharmacology, 49, 57-68, 1995) and the like. Naturally, it is known that it is widely distributed in fruits and leaves such as apples, cherries, and uwa-urushi. In foods and drinks for vascular disorders of the present invention, the origin of ursolic acid, their physiologically acceptable salts, or their derivatives is not limited, those obtained from nature, those artificially synthesized, Any of commercially available products can be used, but in view of oral use, those obtained from natural sources such as apples, cherries, and uwaushi are preferable.
Here, the physiologically acceptable salts thereof are not limited to the following, but, for example, as salts of ursolic acid, sodium ursoleate, potassium ursoleate, ammonium ursoleate, dimethyl ammonium ursoleate, calcium ursoleate, magnesium ursoleate And the like.
As the ursolic acid derivative, for example, any one of which is derivatized, ursolic acid methyl ester, ursolic acid ethyl ester, ursolic acid n-propyl ester, ursolic acid isopropyl ester, ursolic acid n-butyl ester , Trimethylsilyl ursolic acid, triethylsilyl ursolic acid, ursolic acid-β-D-glucopyranosyl ester, ursolic acid-β-D-galactopyranosyl ester, 3-O-acetyl-ursolic acid, 3-O-propionyl -Ursolic acid, 3-O-butyryl-ursolic acid, 3-O-valeryl-ursolic acid, 3-O-capryl-ursolic acid, 3-O-lauryl-ursolic acid, 3-O-myristyl-ursolic acid, 3 -O-palmityl-urso Oleic acid, 3-O-palmitooleyl-ursolic acid, 3-O-stearyl-ursolic acid, 3-O-stearoyl-ursolic acid, 3-O-oleyl-ursolic acid, 3-O-bacenyl-ursolic acid, 3 -O-linoleyl-ursolic acid, 3-O-linolenyl-ursolic acid, 3-O-arachidyl-ursolic acid, 3-O-arachidonyl-ursolic acid, 3-O-behenyl-ursolic acid, 3-O-methyl- Ursolic acid, 3-O-ethyl-ursolic acid, 3-O-t-butyl-ursolic acid, 3-O-triethylsilyl-ursolic acid, 3-O-β-D-glucopyranosyl-ursolic acid, 3-O- β-D-galactopyranosyl-ursolic acid, 3-O-β-D-glucuronopyranosyl-ursolic acid, and the like. In the above description, only one derivative is derivatized, but of course, two or more derivatizable derivable positions and types may be derivatized. Although only glycosides are listed as glycosides, naturally, oligosaccharides of two or more disaccharides selected from the group consisting of various saccharides may be used.
Uvaol is a kind of ursan-based triterpene and has a structure similar to the chemical formula (VII). 1995) and glycerophosphate dehydrogenase inhibitory effect (JP-A-9-67249). In nature, it is known to be present in olives, awaurushi, sage, gum arabic, cajeput and the like. In the food and drink for vascular disorders of the present invention, the origin of Ubaol or a derivative thereof is not limited, and those obtained from nature, those artificially synthesized, and any commercially available products can be used. Taking oral use into account, those obtained from natural sources such as olives, awaurushi, sage, gum arabic and cajeput are preferred. Olives are particularly preferred, and specifically those obtained from the products obtained in the olive plant and / or olive oil production process.
Here, the derivative is not limited to the following, but, for example, any one of which is derivatized may be 3-O-acetyl-ubaol, 3-O-propionyl-ubaol, 3-O-butyryl-ubaol, 3-O-valeryl-ubaol, 3-O-capryl-ubaol, 3-O-lauryl-ubaol, 3-O-myristyl-ubaol, 3-O-palmityl-ubaol, 3-O-palmitooleyl-ubaol, 3- O-stearyl-ubaol, 3-O-stearoyl-ubaol, 3-O-oleyl-ubaol, 3-O-vaccenyl-ubaol, 3-O-linoleyl-ubaol, 3-O-linolenyl-ubaol, 3-O- Arachidyl-ubaol, 3-O-arachidonyl-ubaol, 3-O-behenyl-ubaau , 28-O-acetyl-ubaol, 28-O-propionyl-ubaol, 28-O-butyryl-ubaol, 28-O-valeryl-ubaol, 28-O-capryl-ubaol, 28-O-lauryl-ubaol, 28 -O-myristyl-ubaol, 28-O-palmityl-ubaol, 28-O-palmitooleyl-ubaol, 28-O-stearyl-ubaol, 28-O-stearoyl-ubaol, 28-O-oleyl-ubaol, 28-O -Baxenyl-ubaol, 28-O-linoleyl-ubaol, 28-O-linolenyl-ubaol, 28-O-arachidyl-ubaol, 28-O-arachidonyl-ubaol, 28-O-behenyl-ubaol, 3-O-methyl -Ubaol, 3-O-ethyl-Ubao , 3-O-t-butyl-ubaol, 3-O-triethylsilyl-ubaol, 28-O-methyl-ubaol, 28-O-ethyl-ubaol, 28-Ot-butyl-ubaol, 28-O- Triethylsilyl-ubaol, 3-O-β-D-glucopyranosyl-ubaol, 3-O-β-D-galactopyranosyl-ubaol, 3-O-β-D-glucuronopyranosyl-ubaol, 28- O-β-D-glucopyranosyl-ubaol, 28-O-β-D-galactopyranosyl-ubaol, 28-O-β-D-glucuronopyranosyl-ubaol and the like. Of these, 3-O-acetyl-ubaol and 28-O-acetyl-ubaol are preferred. In the above description, only one derivative is derivatized, but of course, two or more derivatizable derivable positions and types may be derivatized. For example, 3,28-O-diacetyl-ubaol is preferred. Although only glycosides are listed as glycosides, naturally, oligosaccharides of two or more disaccharides selected from the group consisting of various saccharides may be used.
Betulinic acid and betulin are all lupine-based triterpenes and are substances known to be present in various plants. The physiologically acceptable salts and derivatives thereof are the same as described above. When using betulinic acid, betulin, a physiologically acceptable salt thereof, or a derivative thereof in the food or drink for a vascular disorder disease of the present invention, the origin of these substances is not limited, and natural Any of those obtained, artificially synthesized, commercially available products and the like can be used, but in consideration of oral use, it is preferable to use natural products.
Betulinic acid is a kind of lupine triterpene and has a structure like chemical formula (VIII). Its effects have been shown to be an anti-cancer effect, an anti-inflammatory effect, and a wound treatment promoting effect (Japanese Patent Publication No. 26623), alcohol absorption suppressing effect (JP-A-7-53385), hair growth promoting effect (JP-A-9-157139), and the like. In nature, it is known that it exists as a saponin in carrots, carrots, grape skins, olives, and the like, and in carrots, carrots, sugar beets, and the like. In foods and drinks for vascular disorders of the present invention, the origin of betulinic acid, their physiologically acceptable salts, or their derivatives is not limited, and those obtained from nature, those artificially synthesized, Any of commercially available products can be used, but in consideration of oral use, natural products such as assembly, clove, grape, olive, carrot, carrot, and sugar beet are preferable. In particular, those obtained from olives are preferable, and specifically, those obtained from products obtained in an olive plant and / or olive oil production process are preferable.
Here, the physiologically acceptable salt is not limited to the following, but, for example, salts of betulinic acid include sodium betulinate, potassium betulinate, ammonium betulinate, dimethylammonium betrate, calcium betrate, magnesium betulinate, and the like. Is mentioned. Of these, sodium betulinate and potassium betulinate are preferred.
As a derivative of betulinic acid, for example, any one of which is derivatized, betulinic acid methyl ester, betulinic acid ethyl ester, betulinic acid n-propyl ester, betulinic acid isopropyl ester, betulinic acid n-butyl ester , Betulinic acid trimethylsilyl ester, betulinic acid triethylsilyl ester, betulinic acid-β-D-glucopyranosyl ester, betulinic acid-β-D-galactopyranosyl ester, 3-O-acetyl-betulinic acid, 3-O-propionyl -Betulinic acid, 3-O-butyryl-betulinic acid, 3-O-valeryl-betulinic acid, 3-O-capryl-betulinic acid, 3-O-lauryl-betulinic acid, 3-O-myristyl-betulinic acid, 3 -O-palmityl-betulinic acid, 3-O-palmitooleyl-be Tulinic acid, 3-O-stearyl-betulinic acid, 3-O-stearoyl-betulinic acid, 3-O-oleyl-betulinic acid, 3-O-vaccenyl-betulinic acid, 3-O-linoleyl-betulinic acid, 3- O-linolenyl-betulinic acid, 3-O-arachidyl-betulinic acid, 3-O-arachidonyl-betulinic acid, 3-O-behenyl-betulinic acid, 3-O-methyl-betulinic acid, 3-O-ethyl-betulinic acid Acid, 3-O-t-butyl-betulinic acid, 3-O-triethylsilyl-betulinic acid, 3-O-β-D-glucopyranosyl-betulinic acid, 3-O-β-D-galactopyranosyl-betulinic acid Acid, 3-O-β-D-glucuronopyranosyl-betulinic acid and the like. Of these, betulinic acid ethyl ester is preferred. In the above description, only one derivative is derivatized, but of course, two or more derivatizable derivable positions and types may be derivatized. Although only glycosides are listed as glycosides, naturally, oligosaccharides of two or more disaccharides selected from the group consisting of various saccharides may be used.
Betulin is a kind of lupine-based triterpene and has a structure similar to the formula (IX). It is known to have an effect (JP-A-9-67249), a lipase inhibitory effect (JP-A-10-265328), a liver disease preventing effect (JP-A-11-209275), and the like. It is known in nature that it is present in birch bark and the like. In the food and drink for vascular disorders of the present invention, the origin of betulin or a derivative thereof is not limited, and those obtained from nature, artificially synthesized, and commercially available products can be used. Taking oral use into account, those obtained from nature, such as birch bark, are preferred.
Here, the derivative is not limited to the following, but, for example, when any one of the derivatives is derivatized, 3-O-acetyl-betulin, 3-O-propionyl-betulin, 3-O-butyryl-betulin, 3-O-valeryl-betulin, 3-O-capryl-betulin, 3-O-lauryl-betulin, 3-O-myristyl-betulin, 3-O-palmityl-betulin, 3-O-palmitoleyl-betulin, 3- O-stearyl-betulin, 3-O-stearoyl-betulin, 3-O-oleyl-betulin, 3-O-vacenyl-betulin, 3-O-linoleyl-betulin, 3-O-linolenyl-betulin, 3-O- Arachidyl-betulin, 3-O-arachidonyl-betulin, 3-O-behenyl-betulin, 28-O-acetyl-betulin, 2 -O-propionyl-betulin, 28-O-butyryl-betulin, 28-O-valeryl-betulin, 28-O-capryl-betulin, 28-O-lauryl-betulin, 28-O-myristyl-betulin, 28-O -Palmityl-betulin, 28-O-palmitoleyl-betulin, 28-O-stearyl-betulin, 28-O-stearoyl-betulin, 28-O-oleyl-betulin, 28-O-vaccenyl-betulin, 28-O-linoleyl -Betulin, 28-O-linolenyl-betulin, 28-O-arachidyl-betulin, 28-O-arachidonyl-betulin, 28-O-behenyl-betulin, 3-O-methyl-betulin, 3-O-ethyl-betulin , 3-O-t-butyl-betulin, 3-O-triethylsilyl-betulin, 28- -Methyl-betulin, 28-O-ethyl-betulin, 28-O-t-butyl-betulin, 28-O-triethylsilyl-betulin, 3-O-β-D-glucopyranosyl-betulin, 3-O-β- D-galactopyranosyl-betulin, 3-O-β-D-glucuronopyranosyl-betulin, 28-O-β-D-glucopyranosyl-betulin, 28-O-β-D-galactopyranosyl- Betulin, 28-O-β-D-glucuronopyranosyl-betulin and the like. Of these, 3-O-acetyl-betulin and 28-O-acetyl-betulin are preferred. In the above description, only one derivative is derivatized, but of course, two or more derivatizable derivable positions and types may be derivatized. For example, 3,28-O-diacetyl-betulin is preferred. Although only glycosides are listed as glycosides, naturally, oligosaccharides of two or more disaccharides selected from the group consisting of various saccharides may be used.
The present invention relates to a food and beverage for inhibiting vascular smooth muscle cell proliferation, comprising as an active ingredient a compound selected from the group consisting of the pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts, and their derivatives. Here, to contain as an active ingredient means to contain it to such an extent that the vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect is exhibited.
In the present invention, the vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect indicates that vascular smooth muscle cells that have invaded the arteriosclerotic lesions are inhibited from growing in the arteriosclerotic lesions. It can be expected to prevent the formation of an intima in the intima or to prevent the existing atherosclerotic lesions from further hypertrophy or to reduce them. The food and drink for inhibiting vascular smooth muscle cell proliferation of the present invention is used for prevention and / or treatment of arteriosclerosis and the like. The term "preventive use" refers to use for the purpose of suppressing the proliferation of vascular smooth muscle cells that have migrated to the intima and preventing atherosclerosis from occurring. Therapeutic use refers to the suppression of further proliferation of vascular smooth muscle cells already present in the intima, or the rapid reduction of proliferated vascular smooth muscle cells, and the like. It is used for the purpose of reducing the growth of atherosclerotic lesions and preventing the rupture of atherosclerotic lesions. Therefore, the present invention also provides a vascular smooth muscle cell containing a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, a physiologically acceptable salt thereof and a derivative thereof as an active ingredient, a pathological change involving vascular smooth muscle cell proliferation, or The present invention relates to a food or drink for preventing or treating a disease associated with a disease state.
The method used for evaluating the vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect in the present invention is a known method for screening anti-atherosclerotic drugs in vitro (Japanese Patent Laid-Open No. 5-56796). The feature is that a great deal of animal sacrifice can be avoided. In the present invention, by using a reagent that generates a fluorescent substance by the redox ability of the cultured vascular smooth muscle cells, the amount of the fluorescent substance is determined based on the intensity of the fluorescence intensity, thereby examining the presence or absence of the growth inhibitory effect. I have.
The vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect of the pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives in the present invention is shown by a test method using vascular smooth muscle cells. In general, vascular smooth muscle cells present in the media of the arterial wall have a function of regulating blood flow by repeating contraction and relaxation, and are structurally rich in fiber components including α-actin. The vascular smooth muscle cells targeted in the present invention are those in which the phenotype has been converted to a synthetic form by stimulation of smooth muscle growth factor or the like, and this type loses contractility because the fiber component is coarse, and conversely, In addition, it has the ability to proliferate, migrate, and produce a large amount of connective tissue. In some cases, it takes in denatured lipoprotein and foams it, which contributes to the onset of arteriosclerosis. The vascular smooth muscle cells used in the present invention are a cultured vascular smooth muscle cell line derived from rat aorta, and when cultured normally, have a proliferative capacity of multiple hours of 25 hours and are uniformly distributed on the culture surface. Form a single layer. On the other hand, when a substance having an inhibitory effect on vascular smooth muscle cell proliferation is present in this culture system, the proliferation of vascular smooth muscle cells is suppressed, the redox ability of the cells is relatively suppressed, and the generated fluorescent substance And the fluorescence intensity decreases. From this relative degree of fluorescence intensity, the vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect can be estimated.
According to the evaluation in the above test method, the pentacyclic triterpenes of the present invention, the vascular smooth muscle cell growth inhibitory effect of their physiologically acceptable salts and their derivatives, with a known anti-atherosclerotic food and drink Compared to a certain α-tocopherol, for example, about 10 to 14 times for maslinic acid, about 6 to 10 times for maslinic acid salt, about 10 to 14 times for erythrodiol, about 6 to 10 times for ursolic acid, and ubaol About 4 to 8 times, about 4 to 8 times for betulinic acid, about 4 to 8 times for betulin, about 6 to 10 times for maslinic acid ethyl ester, about 6 to 10 times for acetylated maslinic acid, and about 6 to 10 times for triethylsilylated maslin. About 4 to 8 times for acid, about 6 to 10 times for stearylated ethyl masphosphate, about 4 to 8 times for acetylated erythrodiol, and about 6 to 1 for ursolic acid ethyl ester. Fold, about 4-6 times the acetylated uvaol, the betulinic acid ethyl about 4-6 fold, of about 4-6 times the acetylated betulin, it is found to have high vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect. That is, by containing pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives, a high vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect can be obtained.
Further, the pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts, and their derivatives have an inhibitory effect on vascular smooth muscle cell migration. That is, the present invention more directly relates to a food and drink for inhibiting vascular smooth muscle cell migration, which comprises as an active ingredient a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof and derivatives thereof. About. Here, to contain as an active ingredient means to contain it to such an extent that the effect of inhibiting vascular smooth muscle cell migration is exhibited.
In the present invention, the vascular smooth muscle migration inhibitory effect is a vascular smooth muscle cell derived from the media that has acquired a proliferative ability from a blood component that has deviated from a normal value due to vascular injury or hyperlipidemia, etc. In accordance with the concentration gradient of the blood vessel, the migration (= migration) from the vascular media to the vascular intima or the atherosclerotic lesion under the vascular endothelial cells is suppressed, and as a result, the migration of vascular smooth muscle cells Can be expected to prevent the formation of atherosclerotic lesions or to prevent vascular smooth muscle cells from migrating into existing atherosclerotic lesions. That is, the food and drink for inhibiting vascular smooth muscle cell migration of the present invention is intended to suppress migration of vascular smooth muscle cells from the media to the intima, and to prevent the occurrence of arteriosclerotic nests. It is used as a preventive agent against the increase of hardened nests. In the present invention, the number of cells in which vascular smooth muscle cells are activated by a migration factor and migrate toward a higher concentration of a migration factor is counted, and the presence or absence of a migration inhibitory effect is determined by comparing with the control group. are doing. Therefore, the present invention also provides a blood vessel containing, as an active ingredient, a compound selected from the group consisting of maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid, betulin, physiologically acceptable salts thereof and derivatives thereof. The present invention relates to a food or drink for the prevention or treatment of a disease associated with a pathology or pathology involving smooth muscle cell migration.
The vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect of the pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives in the present invention is shown by a test method using vascular smooth muscle cells. The vascular smooth muscle cell used in the present invention is a proliferating cultured vascular smooth muscle cell line derived from rat aorta. Runs. On the other hand, if a substance having an inhibitory effect on vascular smooth muscle cell migration is present together with the migration factor, the number of cell migration decreases. From this relative degree of cell number, the vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect can be estimated.
According to the evaluation in the above test method, the pentacyclic triterpenes in the present invention, the vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect of their physiologically acceptable salts and their derivatives, with known anti-atherosclerotic food and drink Compared with a certain α-tocopherol, for example, about 25 to 30 times for maslinic acid, about 25 to 30 times for maslinic acid salt, about 25 to 30 times for ursolic acid, about 25 to 30 times for maslinic acid ethyl ester, Very high, about 25 to 30 times for acetylated maslinic acid, about 24 to 27 times for triethylsilylated maslinic acid, about 25 to 30 times for stearylated maslinic acid, and about 24 to 27 times for ursolic acid ethyl ester It turns out that it has a vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect. That is, by containing a pentacyclic triterpene and a physiologically acceptable salt thereof, or a derivative thereof, it is possible to enjoy a very strong inhibitory effect on vascular smooth muscle cell migration. In particular, they are also very preferable because they also have a vascular smooth muscle cell growth inhibitory effect.
The present invention relates to a food and drink for an anti-cell proliferative vascular lesion containing a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof and derivatives thereof as an active ingredient, as described above. Here, the cell proliferative vascular lesion refers to a vascular tissue site in which intimal thickening or arteriosclerosis has occurred due to migration and abnormal proliferation of vascular smooth muscle cells. , Arteriosclerotic lesions such as carotid atherosclerosis, fundus arteriosclerosis, and cerebral arteriosclerosis, and restenosis after PCTA. The food and drink for anti-cell proliferative vascular lesions of the present invention are particularly effective in reducing intimal hypertrophy and atherosclerosis due to their effects on intimal hypertrophy and atherosclerosis caused by vascular smooth muscle cell proliferation and / or vascular smooth muscle cell migration. It has a prophylactic and / or therapeutic effect.
Further, the present invention provides, as an active ingredient, a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof, and derivatives thereof, wherein the cell proliferative vascular lesion is intimal hyperplasia. It relates to food and drink for anti-intimal thickening. Here, to contain as an active ingredient means to contain to the extent that the effect of suppressing intimal hyperplasia is exhibited. In addition, the effect of suppressing intimal hyperplasia means suppressing the intimal hypertrophy due to migration and abnormal proliferation of vascular smooth muscle cells. Prevention and / or treatment of cerebrovascular diseases such as blood heart disease, cerebral infarction and stroke can be expected.
The effects of the pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives according to the present invention on the intimal hyperplasia are shown by test methods using animals. In other words, physically exfoliating the endothelial cells of the artery causes inflammation in the site, and vascular smooth muscle cells migrate and proliferate in the intima of the site, thereby thickening the intima. In contrast, when a substance having an intimal thickening inhibitory effect is administered to an animal, the thickening is suppressed. From this degree of suppression, the intimal thickening suppression effect can be estimated.
According to the evaluation in the above test method, the pentacyclic triterpenes in the present invention, the intimal thickening inhibitory effect of their physiologically acceptable salts and their derivatives, when compared with cottonseed oil as a control group, for example, About 40-60% inhibition with maslinic acid, about 35-55% inhibition with maslinic acid salt, about 40-60% inhibition with erythrodiol, about 30-50% inhibition with ursolic acid, about 25-45% with uvaol It can be seen that the compounds have a high intimal hyperplasia suppressing effect of about 15-35% inhibition with betulinic acid and about 15-35% inhibition with betulin. That is, by containing a pentacyclic triterpene, a physiologically acceptable salt thereof, and a derivative thereof, a high intimal hyperplasia suppressing effect can be obtained.
The present invention provides an anti-arterial which contains, as an active ingredient, a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, a physiologically acceptable salt thereof and a derivative thereof, wherein the cell proliferative vascular lesion is arteriosclerosis. It relates to food and drink for curing. The anti-atherosclerotic food and drink of the present invention exerts an anti-atherosclerotic effect when administered orally and / or parenterally.
The anti-atherosclerotic effect is intended to suppress the proliferation of vascular smooth muscle cells in the atherosclerotic lesion and / or to suppress the migration of proliferating vascular smooth muscle cells into the atherosclerotic lesion. In general, atherosclerosis is defined as the vascular smooth muscle cell that has been transformed from a contractile type to a proliferative type, triggered by arterial endothelial damage, migrates from the media to the intima, and proliferates in the intima. It is thought to be caused by thickening of the membrane. Therefore, if the thickening of the vascular endothelium can be prevented by suppressing the migration and proliferation of vascular smooth muscle cells, vascular diseases such as arteriosclerosis, ischemic heart disease, and cerebrovascular disease can be prevented and improved. It is possible. In this regard, the anti-atherosclerotic food and drink of the present invention may be a pentacyclic triterpene having a vascular smooth muscle cell growth inhibitory effect and / or a vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect, a physiologically acceptable salt thereof, Since it contains a compound selected from the group consisting of these derivatives, it can be expected to minimize the occurrence of vascular diseases such as arteriosclerosis, ischemic heart disease, and cerebrovascular disease, which is very preferable. That is, the anti-atherosclerotic food and drink of the present invention is one that expresses its anti-atherosclerotic effect by ingestion, improves or prevents ischemic heart disease or cerebrovascular disease, and prolongs the survival rate. It will greatly contribute. In particular, maslinic acid, ursolic acid and a physiologically acceptable salt thereof, or an anti-atherosclerotic food or drink containing as an active ingredient a compound selected from the group consisting of derivatives thereof, has a vascular smooth muscle cell growth inhibitory effect and It has a vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect and can be used as a powerful anti-atherosclerotic food and drink, and is very preferable.
The anti-atherogenic effect of the pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives in the present invention is shown by a test method using animals. That is, aortic arteriosclerosis is caused in the aorta by feeding a high cholesterol diet for a long time. In contrast, when a substance having an anti-atherosclerotic effect is administered to an animal, arteriosclerosis of the aorta is suppressed. The anti-atherosclerotic effect can be estimated from this degree of suppression.
According to the evaluation in the above test method, the anti-atherogenic effect of the pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives in the present invention, as compared with the control high cholesterol diet group, About 40-60% inhibition with maslinic acid, about 40-60% inhibition with maslinic acid salt, about 50-70% inhibition with erythrodiol, about 40-60% inhibition with ursolic acid, about 30-50% with uvaol. %, About 25-45% of betulinic acid and about 25-45% of betulin have a high anti-atherosclerotic effect. That is, by containing a pentacyclic triterpene, a physiologically acceptable salt thereof, and a derivative thereof, a high anti-atherosclerosis effect can be enjoyed.
In addition, the present invention relates to a food and drink for vascular disorders containing as an active ingredient a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof, and derivatives thereof. Here, the vascular disorder disease is a disease mainly caused by the cell proliferative vascular lesion, and vascular disorders such as arteriosclerosis and thickening of the intimal membrane due to proliferation of vascular smooth muscle cells and migration to the intima. Is a disease caused as a result of the occurrence of Specifically, arteriosclerosis such as coronary atherosclerosis, abdominal aortic sclerosis, obstructive arteriosclerosis, renal arteriosclerosis, carotid arteriosclerosis, fundus arteriosclerosis, cerebral arteriosclerosis, restenosis after PTCA, It refers to ischemic heart disease such as myocardial infarction and angina, and cerebrovascular disease such as cerebral infarction and stroke.
That is, the food and drink for a vascular disorder disease of the present invention has an effect on vascular smooth muscle cells involved in the occurrence of vascular disorders, and thus has an arteriosclerosis due to the occurrence of a cell proliferative vascular lesion mainly composed of vascular smooth muscle cells and after PTCA. Has a prophylactic and / or therapeutic effect on restenosis, ischemic heart disease, cerebrovascular disease and the like. As a preventive effect, by suppressing proliferation and / or migration of vascular smooth muscle cells, arteriosclerotic foci and intimal hyperplasia are prevented from occurring, and vascular disorders such as arteriosclerosis and restenosis after PTCA are performed. To prevent the disease. The therapeutic effect is to suppress further proliferation and / or migration of vascular smooth muscle cells or to reduce total vascular smooth muscle cells by rapidly decreasing the number of proliferated vascular smooth muscle cells, thereby reducing atherosclerotic lesions and blood vessels. It shows the treatment of vascular disorders by suppressing intimal hyperplasia, preventing rupture of atherosclerotic lesions, and eliminating intimal hyperplasia.
The present invention provides an anti-atherosclerosis comprising, as an active ingredient, a compound selected from the group consisting of a pentacyclic triterpene, a physiologically acceptable salt thereof and a derivative thereof, wherein the vascular disorder is arteriosclerosis. For food and drink. Here, arteriosclerosis is a comprehensive term for many diseases in which the arterial wall thickens and loses elasticity, and refers to systemic cardiovascular disorders. Specifically, it refers to coronary atherosclerosis, abdominal aortic sclerosis, renal atherosclerosis, carotid atherosclerosis, fundus atherosclerosis, cerebral atherosclerosis and the like. That is, the present invention relates to an anti-atherosclerotic food and drink containing the above-mentioned substance as an active ingredient, having an effect on vascular smooth muscle cells involved in the formation of atherosclerotic lesions. In particular, anti-atherosclerosis food and drink containing as an active ingredient a compound selected from the group consisting of maslinic acid, ursolic acid and their physiologically acceptable salts, or derivatives thereof, have a vascular smooth muscle cell growth inhibitory effect Since it has an effect of inhibiting vascular smooth muscle cell migration, it can be used as a powerful anti-atherosclerosis food and drink, and is very preferable.
The present invention provides a method for treating a vascular disorder, wherein the vascular disorder is restenosis after PTCA, wherein the active ingredient is a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof, and derivatives thereof. Food and drink for anti-restenosis. The anti-restenotic food and drink of the present invention exerts the aforementioned intimal hyperplasia suppressing effect when ingested orally.
In general, it is known that restenosis is a narrowing of the site after PTCA as a result of intimal hyperplasia of cellular fibrils mainly composed of vascular smooth muscle cells in the same site. Therefore, if the intimal thickening of the blood vessel can be prevented by suppressing the migration and proliferation of vascular smooth muscle cells, restenosis after PTCA can be prevented and treated. In this respect, the food and drink for anti-restenosis after PTCA of the present invention include pentacyclic triterpenes having a vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect and / or a vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect, and their physiologically acceptable It is expected to contain at least one compound selected from the group consisting of salts and their derivatives, thereby preventing arteriosclerosis and intimal hyperplasia and minimizing the onset of ischemic heart disease due to restenosis after PTCA. Yes, very good. In other words, the anti-restenotic food and drink after PTCA of the present invention is one that exerts its intimal hyperplasia-suppressing effect by ingestion, improves or prevents ischemic heart disease, and has a great effect on elongation of life expectancy and the like. It will contribute. In particular, maslinic acid, ursolic acid and their physiologically acceptable salts, or anti-restenotic food and drink containing a compound selected from the group consisting of derivatives thereof as an active ingredient, the vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect and Since it has a vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect, it can be used as a powerful anti-restenotic food or drink, and is very preferable.
Pentacyclic triterpenes and their derivatives having an alcohol ester group, derivatives having a fatty acid ester group, derivatives having an alkoxy group, and derivatives having an alkoxymethyl group are generally fat-soluble, so they are oil-based or emulsified vascular disorders. It can be suitably blended in foods and drinks for diseases and the like. In particular, when ingested as a fat or oil or a processed fat or oil, it is expected to be absorbed together with the oil, so that it is preferable in terms of absorbability.
In addition, since physiologically acceptable salts or glycosides of pentacyclic triterpenes generally show water solubility, they are uniformly dissolved or dispersed in aqueous or emulsified foods and drinks for vascular disorders. By doing so, it can be suitably blended. In particular, beverages and the like are often commercialized in an aqueous system or an emulsified system. In this case, if necessary, a pentacyclic triterpene is preferably compounded by forming a physiologically acceptable salt or glycoside thereof. be able to.
In addition, pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives have a strong effect and can be added to a small amount of foods and drinks for vascular disorders, and are usually required for vascular smooth muscle. Cell growth inhibitory effect, vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect, etc. can be obtained, so there is a merit in cost, and since there is room to mix other components in terms of the mixing ratio, other functions are further added. It can be enhanced and is preferable.
Naturally, by increasing the blending amount of the pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives, extremely excellent food and drink for inhibiting vascular smooth muscle cell proliferation and food and drink for inhibiting vascular smooth muscle cell migration The present invention enables the production of foods, foods and drinks for anti-cell proliferative vascular lesions, foods and drinks for vascular disorders and the like.
As described above, the pentacyclic triterpenes in the present invention are known to exist in plants and the like as natural products, and most of them have dietary experience through those plants, and It is said that there is no adverse effect on the living body unless it is done.
When actually administered to an animal, for example, in the case of maslinic acid, the LD50 value is 2000 mg / kg of body weight or more, and it can be confirmed that the safety is extremely high. This means that pentacyclic triterpenes having a vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect, a vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect, etc., their physiologically acceptable salts and their derivatives can be safely administered. Show.
The food / drink for suppressing vascular smooth muscle cell proliferation of the present invention can obtain more favorable effects by taking it continuously. Pentacyclic triterpenes in the food and drink for inhibiting vascular smooth muscle cell proliferation of the present invention, the amount of the compound selected from the group consisting of physiologically acceptable salts thereof and derivatives thereof is not unconditionally defined. Based on the type of triterpenes, purpose of use such as prevention or treatment, period of use, amount, age, sex, body weight, etc. of the use, it may be appropriately determined according to the required effect strength. Although not limited to the following, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 80% by mass, further preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, Preferably 0.1 to 60% by mass, more preferably 0.2 to 55% by mass, more preferably 0.4 to 50% by mass, more preferably 0.6 to 45% by mass, and still more preferably 0.8 to 50% by mass. It may be 40% by mass, more preferably 1.0 to 35% by mass, even more preferably 2.0 to 30% by mass. In any case, the higher the content, the stronger the effect. However, it is necessary to adjust the content in consideration of the purpose of use, the period of use, the amount, the age, sex, weight, etc. of the use.
When maslinic acid and its physiologically acceptable salts or derivatives thereof are contained as an active ingredient in the food and drink for inhibiting vascular smooth muscle cell proliferation in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably Is 0.0001 to 80% by mass, more preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, further preferably 0.1 to 60% by mass, and further preferably 0.2 to 55% by mass. % By mass, more preferably 0.4 to 50% by mass, further preferably 0.6 to 45% by mass, further preferably 0.8 to 40% by mass, further preferably 1.0 to 35% by mass, and further preferably The content is preferably 2.0 to 30% by mass.
When erythrodiol and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food or beverage for suppressing vascular smooth muscle cell proliferation in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, It is preferably 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and further preferably 1.0 to 40% by mass. The content is preferably 30% by mass.
When ursolic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food or beverage for suppressing vascular smooth muscle cell proliferation in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably Is 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and further preferably 1.0 to 30% by mass. It is preferred that the content be contained by mass%.
When ubaol and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food or beverage for suppressing vascular smooth muscle cell proliferation in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and further preferably 1.0 to 30% by mass. %.
When betulinic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food or beverage for suppressing vascular smooth muscle cell proliferation in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably Is 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and further preferably 1.0 to 30% by mass. It is preferred that the content be contained by mass%.
When betulin and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient during the inhibition of vascular smooth muscle cell proliferation in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001% by mass. To 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and still more preferably 1.0 to 30% by mass. Is preferred.
The food / drink for suppressing vascular smooth muscle cell migration of the present invention can obtain more favorable effects by taking it continuously. The pentacyclic triterpenes in the food and drink for inhibiting vascular smooth muscle cell migration of the present invention, the amount of the compound selected from the group consisting of physiologically acceptable salts and derivatives thereof are not necessarily defined. Based on the type of triterpenes, purpose of use such as prevention or treatment, period of use, amount, age, sex, body weight, etc. of the use, it may be appropriately determined according to the required effect strength. Although not limited to the following, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 80% by mass, further preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, Preferably 0.1 to 60% by mass, more preferably 0.2 to 55% by mass, more preferably 0.4 to 50% by mass, more preferably 0.6 to 45% by mass, and still more preferably 0.8 to 50% by mass. It may be 40% by mass, more preferably 1.0 to 35% by mass, even more preferably 2.0 to 30% by mass. In any case, the higher the content, the stronger the effect. However, it is necessary to adjust the content in consideration of the purpose of use, the period of use, the amount, the age, sex, weight, etc. of the use.
When maslinic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food or beverage for suppressing vascular smooth muscle cell migration in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably Is 0.0001 to 80% by mass, more preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, further preferably 0.1 to 60% by mass, and further preferably 0.2 to 55% by mass. % By mass, more preferably 0.4 to 50% by mass, further preferably 0.6 to 45% by mass, further preferably 0.8 to 40% by mass, further preferably 1.0 to 35% by mass, and further preferably The content is preferably 2.0 to 30% by mass.
When ursolic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food or drink for suppressing vascular smooth muscle cell migration in the present invention, the content is preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably. Is 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and further preferably 1.0 to 30% by mass. It is preferred that the content be contained by mass%.
The food and beverage for anti-cell proliferative vascular lesions of the present invention can obtain more favorable effects by ingesting continuously. The amount of the compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives in the food and drink for anti-cell proliferative vascular lesions of the present invention is not unconditionally defined. Based on the type of triterpene, purpose of use such as prevention or treatment, period of use, amount, age, sex, body weight, etc. of the target, it may be appropriately determined according to the required effect strength. Although not limited to the following, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 80% by mass, further preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, Preferably 0.1 to 60% by mass, more preferably 0.2 to 55% by mass, more preferably 0.4 to 50% by mass, more preferably 0.6 to 45% by mass, and still more preferably 0.8 to 50% by mass. It may be 40% by mass, more preferably 1.0 to 35% by mass, even more preferably 2.0 to 30% by mass. In any case, the higher the content, the stronger the effect. However, it is necessary to adjust the content in consideration of the purpose of use, the period of use, the amount, the age, sex, weight, etc. of the use.
When maslinic acid and its physiologically acceptable salts or derivatives thereof are contained as an active ingredient in the anti-cell proliferative vascular lesion food and drink in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably Is 0.0001 to 80% by mass, more preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, further preferably 0.1 to 60% by mass, and further preferably 0.2 to 55% by mass. % By mass, more preferably 0.4 to 50% by mass, further preferably 0.6 to 45% by mass, further preferably 0.8 to 40% by mass, further preferably 1.0 to 35% by mass, and further preferably The content is preferably 2.0 to 30% by mass.
When erythrodiol and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food and drink for an anti-cell proliferative vascular lesion in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, It is preferably 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and further preferably 1.0 to 70% by mass. The content is preferably 30% by mass.
When ursolic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food or beverage for anti-cell proliferative vascular lesions in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably Is 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and further preferably 1.0 to 30% by mass. It is preferred that the content be contained by mass%.
When ubaol and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food or drink for an anti-cell proliferative vascular lesion in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and further preferably 1.0 to 30% by mass. %.
When betulinic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food and drink for an anti-cell proliferative vascular lesion in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably Is 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and further preferably 1.0 to 30% by mass. It is preferred that the content be contained by mass%.
When betulin and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food and drink for an anti-cell proliferative vascular lesion in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and further preferably 1.0 to 30% by mass. %.
The food / drink for anti-intimal thickening of the present invention can obtain more favorable effects by continuous ingestion. The amount of the compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives in the food and drink for anti-intimal thickening of the present invention is not unconditionally specified, and triterpenes are not limited. It may be appropriately determined according to the strength of the required effect, based on the type of the class, the purpose of use such as prevention or treatment, the period of use, the amount, the age, sex, weight, and the like of the target. Although not limited to the following, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 80% by mass, further preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, Preferably 0.1 to 60% by mass, more preferably 0.2 to 55% by mass, more preferably 0.4 to 50% by mass, more preferably 0.6 to 45% by mass, and still more preferably 0.8 to 50% by mass. It may be 40% by mass, more preferably 1.0 to 35% by mass, even more preferably 2.0 to 30% by mass. In any case, the higher the content, the stronger the effect. However, it is necessary to adjust the content in consideration of the purpose of use, the period of use, the amount, the age, sex, weight, etc. of the use.
When maslinic acid and its physiologically acceptable salts or derivatives thereof are contained as an active ingredient in the anti-intimal thickening food or drink of the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0% by mass. 0.0001 to 80% by mass, more preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, further preferably 0.1 to 60% by mass, and still more preferably 0.2 to 55% by mass. , More preferably 0.4 to 50% by mass, more preferably 0.6 to 45% by mass, further preferably 0.8 to 40% by mass, further preferably 1.0 to 35% by mass, and further preferably 2. It is preferably contained in an amount of 0 to 30% by mass.
When erythrodiol and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food for anti-intimal thickening in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and still more preferably 1.0 to 30% by mass. %.
When ursolic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the anti-intimal thickening food or drink of the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0% by mass. 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and still more preferably 1.0 to 30% by mass. It is preferred to contain.
When Ubaol and its physiologically acceptable salts or derivatives thereof are contained as an active ingredient in the anti-intimal thickening food or drink of the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.1% by mass. 0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, more preferably 1.0 to 30% by mass. Is preferred.
When betulinic acid and its physiologically acceptable salts or derivatives thereof are contained as an active ingredient in the food and drink for anti-intimal thickening in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0% by mass. 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and still more preferably 1.0 to 30% by mass. It is preferred to contain.
When betulin and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the anti-intimal thickening food or drink of the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.1 to 90% by mass. 0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, more preferably 1.0 to 30% by mass. Is preferred.
The anti-arteriosclerosis food and drink of the present invention can obtain more favorable effects by ingesting continuously. The compounding amount of the compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives in the anti-atherosclerotic food and drink of the present invention is not unconditionally specified, and triterpenes May be determined as appropriate according to the strength of the required effect, based on the type of the drug, the purpose of use such as prevention or treatment, the period of use, the amount, the age, sex, and weight of the subject. Although not limited to the following, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 80% by mass, further preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, Preferably 0.1 to 60% by mass, more preferably 0.2 to 55% by mass, more preferably 0.4 to 50% by mass, more preferably 0.6 to 45% by mass, and still more preferably 0.8 to 50% by mass. It may be 40% by mass, more preferably 1.0 to 35% by mass, even more preferably 2.0 to 30% by mass. In any case, the higher the content, the stronger the effect. However, it is necessary to adjust the content in consideration of the purpose of use, the period of use, the amount, the age, sex, weight, etc. of the use.
When maslinic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the anti-arteriosclerosis food or drink of the present invention, the amount is preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.1% by mass. 0001 to 80% by mass, more preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, further preferably 0.1 to 60% by mass, more preferably 0.2 to 55% by mass, More preferably, 0.4 to 50% by mass, more preferably 0.6 to 45% by mass, further preferably 0.8 to 40% by mass, further preferably 1.0 to 35% by mass, and further preferably 2.0% by mass. It is preferably contained in an amount of from 30 to 30% by mass.
When erythrodiol and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the anti-arteriosclerotic food or drink of the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0% by mass. 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and still more preferably 1.0 to 30% by mass. It is preferred to contain.
When ursolic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the anti-atherosclerotic food or drink of the present invention, the content is preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.1 to 90% by mass. 0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, more preferably 1.0 to 30% by mass. Is preferred.
When Ubaol and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the anti-atherosclerotic food or drink of the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001% by mass. To 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and still more preferably 1.0 to 30% by mass. Is preferred.
When betulinic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the anti-arteriosclerosis food or drink of the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.1% by mass. 0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, more preferably 1.0 to 30% by mass. Is preferred.
When betulin and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the anti-arteriosclerosis food or drink in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001% by mass. To 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and still more preferably 1.0 to 30% by mass. Is preferred.
The food and drink for a vascular disorder disease of the present invention is characterized by containing a compound selected from the group consisting of pentacyclic triterpenes, physiologically acceptable salts thereof and derivatives thereof as described above, and uses thereof. Can be used as a food and drink for vascular disorders in a wide range of fields such as health foods, health foods and therapeutic foods. At this time, the amount of the food and drink for a vascular disease of the present invention is not specified unconditionally because it varies depending on conditions such as the use, administration form, species to be administered, age, sex, body weight, degree of symptoms, and health condition. Of course, the amount is effective in preventing and / or treating arteriosclerosis occurrence and hyperplasia due to inhibition of proliferation and migration of vascular smooth muscle cells.
The food and drink for vascular disorders of the present invention can obtain more favorable effects by ingesting continuously. The amount of the compound selected from the group consisting of the pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives in the food and drink for a vascular disorder disease of the present invention is not generally defined, and triterpenes May be determined as appropriate according to the strength of the required effect, based on the type of the drug, the purpose of use such as prevention or treatment, the period of use, the amount, the age, sex, and weight of the subject. Although not limited to the following, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 80% by mass, further preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, Preferably 0.1 to 60% by mass, more preferably 0.2 to 55% by mass, further preferably 0.4 to 50% by mass, further preferably 0.6 to 45% by mass, more preferably 0.8 to 50% by mass. It is 40% by mass, more preferably 1.0 to 35% by mass, and still more preferably 2.0 to 30% by mass.
When maslinic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food and drink for a vascular disorder disease according to the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.1 to 90% by mass. 0001 to 80% by mass, more preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, further preferably 0.1 to 60% by mass, more preferably 0.2 to 55% by mass, More preferably, 0.4 to 50% by mass, more preferably 0.6 to 45% by mass, further preferably 0.8 to 40% by mass, further preferably 1.0 to 35% by mass, and further preferably 2.0% by mass. It is preferably contained in an amount of from 30 to 30% by mass.
When erythrodiol and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food or drink for a vascular disorder disease according to the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0% by mass. 0.0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and still more preferably 1.0 to 30% by mass. It is preferred to contain.
When ursolic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food and drink for a vascular disorder disease according to the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.1 to 90% by mass. 0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, more preferably 1.0 to 30% by mass. Is preferred.
When ubaol and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food or drink for a vascular disorder disease in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001% by mass. To 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and still more preferably 1.0 to 30% by mass. Is preferred.
When betulinic acid and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food and drink for a vascular disorder disease in the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.1% by mass. 0001 to 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, more preferably 1.0 to 30% by mass. Is preferred.
When betulin and a physiologically acceptable salt thereof or a derivative thereof are contained as an active ingredient in the food and drink for a vascular disorder disease according to the present invention, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001% by mass. To 70% by mass, more preferably 0.001 to 60% by mass, further preferably 0.01 to 50% by mass, further preferably 0.1 to 40% by mass, and still more preferably 1.0 to 30% by mass. Is preferred.
The higher the content, the stronger the effect. However, it is necessary to adjust the content in consideration of the purpose of use, the period of use, the amount, the age, sex, weight, etc. of the target.
By taking the pentacyclic triterpenes, the physiologically acceptable salts thereof, and their derivatives of the food and drink for vascular disorders according to the present invention, the dose required to suitably obtain an anti-atherosclerotic effect is determined by taking And it is not particularly limited, but is, for example, 0.001 g / day or more, preferably 0.01 g / day or more, and particularly preferably 0.1 g / day or more.
The food and beverage for anti-arteriosclerosis of the present invention, in which the vascular disease is arteriosclerosis, can obtain more favorable effects by continuous ingestion. The compounding amount of the compound selected from the group consisting of the pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives in the food and drink for anti-atherosclerosis of the present invention is not generally defined, and triterpenes are not limited. It may be appropriately determined according to the strength of the required effect, based on the type of the class, the purpose of use such as prevention or treatment, the period of use, the amount, the age, sex, weight, and the like of the target. Although not limited to the following, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 80% by mass, further preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, Preferably 0.1 to 60% by mass, more preferably 0.2 to 55% by mass, more preferably 0.4 to 50% by mass, more preferably 0.6 to 45% by mass, and still more preferably 0.8 to 50% by mass. It may be 40% by mass, more preferably 1.0 to 35% by mass, even more preferably 2.0 to 30% by mass. In any case, the higher the content, the stronger the effect. However, it is necessary to adjust the content in consideration of the purpose of use, the period of use, the amount, the age, sex, weight, etc. of the use.
The anti-restenotic food and drink according to the present invention, in which the vascular disorder is restenosis after PTCA, can obtain more favorable effects by continuous ingestion. The compounding amount of the compound selected from the group consisting of the pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives in the anti-restenotic food and drink of the present invention is not generally defined, and triterpenes May be determined as appropriate according to the strength of the required effect, based on the type of the drug, the purpose of use such as prevention or treatment, the period of use, the amount, the age, sex, and weight of the subject. Although not limited to the following, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 80% by mass, further preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, Preferably 0.1 to 60% by mass, more preferably 0.2 to 55% by mass, more preferably 0.4 to 50% by mass, more preferably 0.6 to 45% by mass, and still more preferably 0.8 to 50% by mass. It may be 40% by mass, more preferably 1.0 to 35% by mass, even more preferably 2.0 to 30% by mass. In any case, the higher the content, the stronger the effect. However, it is necessary to adjust the content in consideration of the purpose of use, the period of use, the amount, the age, sex, weight, etc. of the use.
In particular, maslinic acid and their physiologically acceptable salts, or derivatives thereof, have an inhibitory effect on vascular smooth muscle cell proliferation, an inhibitory effect on vascular smooth muscle cell migration, anti-cell proliferation such as intimal hyperplasia inhibition and anti-atherosclerosis. It is preferable because it has very strong effects such as vascular disease effect, anti-arteriosclerosis, and anti-vascular disease effects such as anti-restenosis after PTCA. That is, a food or beverage for inhibiting vascular smooth muscle cell proliferation and / or a food or beverage for inhibiting vascular smooth muscle cell migration, comprising as an active ingredient a compound selected from the group consisting of maslinic acid and its physiologically acceptable salts or derivatives thereof. The present invention relates to foods and drinks for anti-cell proliferative vascular lesions such as anti-intimal thickening and anti-atherosclerosis, and foods and drinks for vascular disorders such as anti-atherosclerosis and anti-restenosis after PTCA. Also, as will be described later, maslinic acid is cultivated relatively regularly, such as olive plants, and can be obtained from plants that have already been crushed as edible oil. preferable. Furthermore, cost reduction is possible because it can be constantly supplied, which is very preferable.
In this case, the food and drink containing maslinic acid according to the present invention, which has the desired effects, can obtain more favorable effects by continuous ingestion. In particular, as described above, maslinic acid and its physiologically acceptable salts or derivatives thereof are preferable as health foods and the like because some of them are obtained from natural products that have already experienced eating. The amount of maslinic acid and the physiologically acceptable salt thereof or the derivative thereof at that time is not necessarily defined, and the purpose of use or period of use, amount, age of use, whether prevention or treatment, Based on gender, weight, etc., it may be appropriately determined according to the required effect strength. Although not limited to the following, preferably 0.00001 to 90% by mass, more preferably 0.0001 to 80% by mass, further preferably 0.001 to 70% by mass, further preferably 0.01 to 65% by mass, Preferably 0.1 to 60% by mass, more preferably 0.2 to 55% by mass, more preferably 0.4 to 50% by mass, more preferably 0.6 to 45% by mass, and still more preferably 0.8 to 50% by mass. It may be 40% by mass, more preferably 1.0 to 35% by mass, even more preferably 2.0 to 30% by mass. In any case, the higher the content, the stronger the effect. However, it is necessary to adjust the content in consideration of the purpose of use, the period of use, the amount, the age, sex, weight, etc. of the use.
The foods and drinks of the present invention have improved functions, in particular, an inhibitory effect on vascular smooth muscle cell proliferation, an inhibitory effect on vascular smooth muscle cell migration, an anti-cell proliferative vascular lesion effect such as intimal hyperplasia or anti-atherosclerosis, Synergistic improvement of anti-vascular disorders such as anti-restenosis after arteriosclerosis and PTCA, vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect, vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect, intimal hyperplasia suppression and anti-arteriosclerosis Other physiologically active ingredients may be added for the purpose of improving the anti-cell proliferative vascular lesion effect, the anti-arteriosclerosis or the anti-vascular disorder disease effect such as anti-restenosis after PTCA, and improving the absorbability. it can. Although there is no particular limitation, for example, a component that can be expected to have a synergistic effect, an antioxidant component, an oily component for improving the absorption in the body to increase the efficiency of the effect, various vitamins and minerals for fortification , Amino acids and the like.
Components that can be expected to have a synergistic effect include brassicasterol, campesterol, stegmasterol, 7-ergosterol, sitosterol, isofucosterol, 7-stigmasterol, cycloartenol, 24-methylenecycloartanol, cyclobrush Phenylpropanoids such as plant sterols such as knol, gingerol, curcumin, bergamotin, and ACA; flavonoids such as flavone, catechin, quercetin, leucoanthocyanidin, luteolin, cardamonin, and nobiletin; and carotenoids such as β-carotene and astaxanthin. And its derivatives, dietary fibers such as pectin, alixin, ferulic acid and its derivatives, and the like. These components are preferable because a synergistic effect with the pentacyclic triterpenes in the present invention can be expected.
The antioxidant component is not particularly limited as long as it is commonly used in foods and drinks, for example, vitamin C and its derivatives and salts thereof, tocopherol and tocotrienol and their derivatives, dibutylhydroxytoluene, butyl Hydroxyanisole, disodium ethylenediaminetetraacetate, calcium disodium ethylenediaminetetraacetate, tannins such as gallic acid and ellagic acid and derivatives thereof, sulfuric compounds such as sodium sulfite, sodium hyposulfite and sulfur disulfide, γ-oryzanol and the like Ferulic acid derivatives, rutin and its derivatives, lignans and their glycosides such as sesamin, episesamin, sesaminol, sesamolin and sesamol, carotenoids and their derivatives such as β-carotene, flavone, catechin, quercetin , Isoquercetin, leucoanthocyanidin, genistin, genistein, 6 "-O-acetylgenistin, 6" -O-malonylgenistin, soybean, daidzein, 6 "-O-acetyl soybean, 6" -O-malonyl soybean, Glycitin, glycitein, 6 "-O-acetyl glycitin, 6" -O-malonyl glinitine, puerarin, quercetin, kaempero, flavonoids such as miloesterol, quinones such as ubiquinone and vitamin K, superoxide dismutase , Catalase, glutathione peroxidase and other enzymes, mallow flower extract, Aspergillus terreus extract, licorice oil extract, glove extract, guaiac oil, raw coffee bean extract, rice bran oil extract, canna extract, sage extract , Seri extract, tempeh Extract, rapeseed oil extract, Pimenta extract, Blueberry extract, Propolis extract, Pepper extract, Melaleuca extract, Eucalyptus extract, Gentian extract, Buckwheat extract, Adzuki bean extract, Rosemary extract, Olive cake Oil cake extract such as extract or soybean meal extract, soybean embryo extract, thiamines and salts thereof, riboflavin, riboflavin such as riboflavin acetate, pyridoxine hydrochloride, pyridoxine such as pyridoxine dioctanoate, nicotinamide, Examples include nicotinic acids such as benzyl nicotinate, bilirubin, mannitol, tryptophan, histidine, nordihydroguaiaretic acid and the like. These antioxidants are preferable because they can also be expected to have a comprehensive synergistic effect on the human body and the like due to their antioxidant effects, such as a lifestyle-related disease-preventing effect and an anti-aging effect.
As the oily component, soybean oil, rapeseed oil, sesame oil, vegetable oils such as olive oil, lard, beef tallow, other animal oils such as fish oil, there is no particular limitation, for example, obtained by natural and chemical reactions and enzymatic reactions, Examples include MCT, MLCT, diglyceride, monoglyceride, and structured fats and oils whose fatty acid structures are designed.
There are no particular restrictions on various vitamins, minerals, amino acids and the like for fortification, but those specified in the official food additive standard are desirable.
In addition, the food and drink of the present invention can be blended and used with raw materials used for ordinary food and drink. Although there is no particular limitation, for example, various seasonings such as miso, soy sauce, sauce, ketchup, bouillon, grilled meat sauce, curry roux, stew ingredients, soup ingredients, dashi ingredients, animals such as lard, tallow, milk fat, etc. Marine oils such as oils, whale oil, sardine oil, herring oil, soybean oil, rapeseed oil, cottonseed oil, rice oil, corn oil, sesame oil, peanut oil, sunflower oil, safflower oil, camellia oil, olive oil, linseed oil, paulownia oil, castor oil Vegetable oils such as oil, coconut oil, palm oil, cocoa butter, thickeners such as xanthan gum, sugars, granulated sugar, lactose, fructose, glucose, sorbitol, honey and other sweeteners, MSG (monosodium glutamine), etc. Umami seasoning, vinegar such as rice vinegar, apple vinegar and refined vinegar; acidulants such as citric acid, malic acid, lactic acid and tartaric acid; synthetic preservatives such as sodium benzoate; flour; defatted soybean; wheat Suma, serial raw materials such as wheat germ, salt, pepper, flavors and the like. Particularly, olive oil is very preferable because it contains maslinic acid and the like in the present invention. Olive oil or the like manufactured to contain maslinic acid, a physiologically acceptable salt thereof, or the like at a high level is preferable.
The above components can be appropriately designed and blended depending on the purpose of use. Synergistic and complementary effects can be obtained depending on the type of absorption and the effect, and a preferable embodiment can be obtained as a use form. Further, for example, isoflavones and derivatives thereof are excellent in water solubility, and by acting on a living body at the same time as a specific pentacyclic triterpene targeted in the present invention, which is an oil-soluble substance, it is possible to obtain an antiestrogen-inhibiting effect. In addition, an effect by simultaneous action via various metabolic pathways mediated by lipid and lipid is exerted, and the effect can be expected to be synergistic. Furthermore, foods and drinks for vascular disorders in which a specific pentacyclic triterpene and an isoflavonoid, etc., which are simultaneously targeted by the present invention, simultaneously have physiological activities such as antioxidant and antiestrogenic effects of isoflavonoids. It can be expected to be activated synergistically.
Specific examples of the food and drink of the present invention are listed below, but the present invention is not limited thereto. Examples of the food and drink of the present invention include various foods and drinks such as confectionery, processed foods, prepared oils and fats, processed oils and fats, dairy products and beverages. The shape and properties are not particularly limited, and may be any of solid, semi-solid, gel, liquid, powder, and the like. The form and the like are not particularly limited. For example, in addition to the usual form, liquid foods, enteral nutrition foods, health foods, foods for infants, and the like can be used. Specifically, Japanese sweets such as oysters, rice crackers, rice crackers, buns, candy, cookies, biscuits, crackers, cereal foods, pies, castellas, donuts, puddings, sponge cakes, waffles, butter cream, custard cream, cream puffs, chocolate, Various sweets such as chocolate confectionery, caramel, candy, cue gum, jelly, hot cake, bread, confectionery bread, snack confectionery such as potato chips, ice cream, ice candy, ice confectionery such as sherbet, lactic acid drink, lactic acid bacteria drink, concentrated milk drink , Fruit juice drinks, pulp drinks, functional drinks, soft drinks such as carbonated drinks, green tea, tea, coffee, cocoa, etc. and these drinks, alcoholic beverages such as sake, wine, brandy, whiskey, medicinal liquor, Milk, fermented milk, processed milk, cheese, etc. Products, processed soybean foods such as soy milk, tofu, jams, fruit syrup pickles, pastes such as flower paste, peanut paste, fruit paste, cereal products such as pickles, udon noodles, pasta, ham, sausage, bacon Meat products such as dried sausage, beef jerky, hamburger, fish and shellfish products such as fish meat ham, fish sausage, kamaboko, chikuwa, hampan, dried fish such as fish and shellfish, various sections such as bonito, mackerel, sea urchin, sea urchin, Salted fish such as squid, dried squid, smoked fish such as mirin dried fish, salmon, seaweed, small fish, shellfish, wild vegetables, shiitake mushrooms, tsukudani such as kelp, curry, stew and other retort foods, miso, soy sauce, sauce, ketchup , Bouillon, grilled meat sauce, curry roux, stew ingredients, soup ingredients, dashi ingredients and other seasonings, cooked rice, mixed oils and fats, margarine, shortening, ma Nezu, fat processed products and the like dressings include various ranges and frozen foods to contain formulatory oil. Particularly, from the viewpoint of continuous ingestion, cooked rice and various seasonings, and processed oils and fats such as mixed oils and fats, margarine, shortening, mayonnaise, and dressing are preferable.
Since the pentacyclic triterpenes in the food and drink of the present invention are originally fat-soluble substances in general, mixed fats and oils and processed foods and the like are preferable as the food and drink of the present invention from the viewpoint of solubility. There is no particular limitation on such a prepared oil and fat, and examples thereof include a prepared oil containing natural or artificially obtained pentacyclic triterpenes dissolved in a normal oil and fat, and crushing of plant seeds.・ Extraction conditions are adjusted to squeeze the pentacyclic triterpenes in the seeds ・ Prepared fats and oils containing a high concentration in the extracted oil and pentacyclic triterpenes present in the oil by adjusting the refining conditions remain And the like. Further, the pentacyclic triterpene-rich fats and oils can be mixed with other fats and oils, and in this case, a synergistic effect with the physiologically active effect of a trace component contained in the other fats and oils can be expected.
Since pentacyclic triterpenes can be obtained from plants as oil raw materials, it can be said that formulated oils and fats are preferable from the viewpoint of production, and furthermore, the processed oils and fats such as margarine, shortening, mayonnaise, dressing, etc. Oil and fat products are preferred.
Similarly, products using the above-mentioned blended fats and oils of the present invention are also good. Here, the term “use” refers to both use as a raw material and use as so-called blended oils and fats used for fried foods and stir-fries.
Here, there are no particular restrictions on the use of pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives in foods and drinks, but pentacyclic triterpenes are used in oil-based foods and drinks. Alternatively, a derivative having an alcohol ester group, a derivative having a fatty acid ester group, a derivative having an alkoxy group, and a derivative having an alkoxymethyl group are preferable. Since these are relatively fat-soluble, they can be suitably applied to oil-based foods and drinks. Of course, a physiologically acceptable salt or glycoside of a pentacyclic triterpene can be blended, but in this case, it is preferable to use an emulsifier.
In general, physiologically acceptable salts of pentacyclic triterpenes or glycosides are preferable for aqueous foods and drinks. Since these are relatively water-soluble, they can be suitably applied to water-based foods and drinks. Of course, pentacyclic triterpenes or derivatives thereof can be blended, but in this case, it is preferable to use an emulsifier.
By eating and drinking the food and drink of the present invention, vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect, vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect, anti-cell proliferative vascular lesion effect such as intimal hyperplasia suppression and anti-atherosclerosis, anti-arteriosclerosis and The effect is exhibited by absorbing pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts, and their derivatives into the body, which have an anti-vascular disorder disease effect such as anti-restenosis after PTCA. Since it is in the form of food and drink, it is preferable because it can be ingested continuously without the need for labor like pharmaceuticals.
The above pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives can be synthesized or extracted from natural products. Naturally, it can be obtained by extracting each of the above-mentioned plants, specifically, by performing an extraction treatment with water and / or an organic solvent, followed by a concentration treatment and / or a fractionation / purification treatment. That is, each plant can be extracted with water and / or an organic solvent, and further from the extract, a solvent extraction method, a method utilizing the difference in solubility with impurities, a fractional precipitation method, a recrystallization method, an ion exchange resin method, Separation and purification can be performed by using a liquid chromatography method alone or in an appropriate combination, or by using repeatedly.
It is preferable to use food and drink using an isolated product from a natural product because the influence of impurities derived from the natural product is eliminated and the color becomes a colorless to pale color and / or an odorless to almost odorless state. Therefore, by isolating, from natural products, specific pentacyclic triterpenes and physiologically acceptable salts or derivatives thereof, which are the objects of the present invention, without affecting the flavor and the like of dishes to be served. Can cook. In particular, it can be blended in dishes that do not require the flavor of natural products such as olives. Therefore, the foods and drinks of the present invention include foods and drinks that can be cooked or blended without being affected by the type of natural product used as a raw material.
Furthermore, when olives and olive oil are ingested as they are, only small amounts of the pentacyclic triterpenes targeted by the present invention can be consumed, but foods and drinks containing pentacyclic triterpenes isolated from natural products are consumed. Then, a large amount of the specific pentacyclic triterpenes targeted by the present invention can be relatively easily ingested.
In addition, since pentacyclic triterpenes contained in olives and the like are generally fat-soluble substances, they are usually often present in fats and oils. Therefore, it is difficult to mix them with water-based foods and drinks, but natural If the pentacyclic triterpene is isolated from a product, it can be added to an oil-based food or water-based food or drink. By making it an aqueous food or drink such as a soft drink, it is possible to easily ingest, for example, several g to several tens g of the pentacyclic triterpenes targeted in the present invention.
Furthermore, the food and drink of the present invention containing specific pentacyclic triterpenes isolated from a natural product are preferable because impurities or contaminants that inhibit absorption into the body of the present invention are removed. The effect of the present invention, that is, vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect, vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect, and the like can be obtained, which is preferable.
Hereinafter, an example of the extraction of maslinic acid will be described.
As described above, maslinic acid and a physiologically acceptable salt thereof, or a derivative thereof can be naturally obtained by extracting from the above-mentioned plant. Physiologically acceptable salts can be extracted from olive plants and the like with water and / or an organic solvent, and the extract is further subjected to a solvent extraction method, a method using a solubility difference with impurities, a fractional precipitation method, a recrystallization. Method, an ion-exchange resin method, a liquid chromatography method, or the like, alone or in an appropriate combination, or by repeated use, and can be separated and purified.
Olive plants (Olea europaea L.) can be used irrespective of the locality of production in Japan, Europe, etc., edible or oiled. The maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof contained in the food and drink for a vascular disorder disease of the present invention can be obtained mainly from a natural olive plant, a fruit or a seed. It can be obtained from seed coats, leaves, stems and buds. Moreover, it can also be suitably obtained from these dried, pulverized and degreased products. Of these, defatted fruits (including pericarp) and dried and crushed pericarp are preferred. Further, products generated in the process of producing olive oil, such as pressed residue, extracted residue, pressed residue, pressed oil, extracted oil, degummed soap, deoxidized soap, dark oil, waste decolorizer, deodorized scum, It can be obtained from oiled juices, wastewater and waste filter media. Of these, oil residue is preferred.
In addition, when humidifying treatment such as steaming with steam, or when humidifying treatment is performed by adding water to the fruit or the defatted product of the above-mentioned olive plant, the olive plant fruit or the defatted product thereof swells appropriately. Therefore, the extraction efficiency is improved, which is preferable.
In particular, the defatted olive plant contains maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof at a high concentration, and contains maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof. This is preferable because it is not necessary to remove
The defatted product can be made from olive oil residue produced during the edible oil refining process or residue extracted with hexane or the like.
In addition, the lipid component contained in the olive plant or the defatted product may be one or two or more of known water-insoluble organic solvents such as hydrocarbons such as pentane, hexane and heptane, lower fatty acid alkyl esters such as ethyl acetate, and diethyl ether. A defatted material obtained by extracting and removing the seeds or more and repeating this washing treatment as necessary can also be suitably used.
By extracting the olive plant with water and / or an organic solvent, maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof contained in the food and drink for vascular disorders of the present invention can be obtained.
The organic solvent used to obtain maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof from olive plants may be either a hydrophilic organic solvent or a hydrophobic organic solvent. Specifically, alcohols such as methyl alcohol, ethyl alcohol, glycerin, propylene glycol, and 1,3-butylene glycol, acetone, tetrahydrofuran, acetonitrile, 1,4-dioxane, pyridine, dimethyl sulfoxide, N , N-dimethylformamide, acetic acid and the like, and known organic solvents such as hexane, cyclohexane, carbon tetrachloride, chloroform, dichloromethane, 1,2-dichloroethane, diethyl ether, ethyl acetate, benzene, and toluene. And other known organic solvents. These organic solvents can be used alone or in combination of two or more.
Industrially, a hydrophilic organic solvent is preferably used, and a hydrated hydrophilic organic solvent is preferably used, for example, from the viewpoint of permeability into plant tissue, extraction efficiency, and the like. Specific examples include alcohols such as methyl alcohol, ethyl alcohol, glycerin, propylene glycol, and 1,3-butylene glycol, organic solvents such as acetone, tetrahydrofuran, and acetonitrile, and aqueous solvents thereof. From one or more selected from the group consisting of these, maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof contained in the food and drink for vascular disorders of the present invention are obtained from olive plants. be able to.
Although the extraction conditions are not particularly limited, for example, the temperature is 5 ° C. to 95 ° C., preferably 10 ° C. to 90 ° C., and more preferably 15 ° C. to 85 ° C. Even at room temperature, extraction can be suitably performed. The higher the temperature, the higher the extraction efficiency tends to be. The pressure can be suitably extracted at normal pressure, under pressure, or under reduced pressure by suction or the like. Further, in order to improve the extraction efficiency, the extraction can be carried out by shaking extraction or an extractor equipped with a stirrer or the like. The extraction time is several minutes to several hours, depending on other extraction conditions, and the longer the time, the more the extraction is performed. However, the extraction time may be determined as appropriate according to production conditions such as production equipment and yield.
Further, the solvent used for the extraction, when using water alone, when using an organic solvent alone, in any case of using a mixture of water and an organic solvent, 1 to the raw material, A 100-fold amount (“mass / mass”; the same applies hereinafter), preferably a 1- to 20-fold amount can be used.
Further, in consideration of the safety to the human body and the like, it is particularly preferable to extract with any of water, water-containing lower alcohol and anhydrous lower alcohol. Of these, anhydrous lower alcohols are more preferred, and absolute ethanol is particularly preferred.
Furthermore, in consideration of the yield of the obtained maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof and the strength of the anti-atherosclerotic effect, the hydrated lower alcohol having a lower alcohol content of 10% by mass or more is considered. It is preferable to extract with Further, it is preferable to use a water-containing alcohol having a lower alcohol content of 10% by mass to 95% by mass, and most preferably a water-containing lower alcohol having a lower alcohol content adjusted to 30% by mass to 95% by mass.
Here, alcohols used in the present invention include primary alcohols such as methyl alcohol, ethyl alcohol, 1-propanol and 1-butanol, secondary alcohols such as 2-propanol and 2-butanol, and 2-methyl-2-propanol. And known solvents such as liquid polyhydric alcohols such as ethylene glycol, propylene glycol, and 1,3-butylene glycol. These solvents may be used alone or in combination of two or more. it can.
The lower alcohol is a known alcohol having 1 to 4 carbon atoms, for example, the above-mentioned primary, secondary, tertiary, or liquid polyhydric alcohols, and one or more of these are combined. Can be used.
The maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof in the present invention can be obtained by removing the solvent and water from the crude extract and / or crude extract thus obtained.
The removal of the solvent and water can be performed by a known method such as vacuum distillation, vacuum / vacuum drying, freeze drying, and spray drying.
Of course, the solvent or water may be contained, and the state is not particularly limited.
The extract from the defatted product is preferable because it does not contain oil-soluble components such as triglyceride, sterol, and tocopherol, so that it is not necessary to remove and purify these components. In addition, since defatted matter includes residue after oiling, it is possible to use pressed cake and extracted cake obtained by pressing olive oil, so it is an extremely effective method of effectively using olives, and is usually used for disposal or feed. It is an excellent method from the viewpoint of production cost, because it uses the one that is used.
Furthermore, in order to further enhance the anti-atherogenic effect of maslinic acid extracted from olive plants and / or a physiologically acceptable salt thereof, maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof contained in the food and drink for vascular disorders of the present invention. Alternatively, a physiologically acceptable salt thereof is preferably subjected to a concentration treatment or the like.
The concentration conditions are not particularly limited, and include, for example, a method utilizing solubility in water. The maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof contained in the food and drink for vascular disorders of the present invention is a compound having relatively low polarity and poor water solubility. By utilizing this property, the crude extract from olive plants is divided into components that are hardly soluble in water and / or components that are not soluble in water, that is, components that are poorly water-soluble and components that are easily soluble in water. It can be concentrated significantly. The components, such as poor water solubility, contained in the crude extract from the olive plant have a significantly superior anti-atherosclerotic effect even compared to the whole crude extract from the olive plant, and maslinic acid and / or its physiological properties Can be confirmed to be concentrated.
Components having poor water solubility can be easily obtained by adding a crude extract from an olive plant to water, stirring, and collecting a precipitated portion by filtration or the like.
The maslinic acid and / or its physiologically acceptable salt contained in the food and drink for vascular disorders according to the present invention may be concentrated by liquid-liquid distribution using a combination of common solvents, if necessary. Can be. The combination of solvents is generally difficult to define, but for example, a water-hydrophobic organic solvent combination may be used.Examples of the hydrophobic organic solvent include hexane, carbon tetrachloride, chloroform, dichloromethane, 1,2-dichloroethane, and diethyl ether. And known organic solvents such as ethyl acetate, n-butanol, benzene, and toluene. Of these, hexane, ethyl acetate and n-butanol are preferred.
Since maslinic acid and / or its physiologically acceptable salts are poorly water-soluble, unnecessary water-soluble components can be removed by separating the hydrophobic organic solvent phase. By removing the solvent, maslinic acid and / or its physiologically acceptable salt can be easily concentrated.
Furthermore, maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof contained in the food and drink for vascular disorders of the present invention is preferably subjected to fractionation and purification from the above-mentioned extract and / or concentrate. As a result, the concentration can be more than the above concentration, and the target component can be isolated.
The advantages of the fractionation / purification treatment include not only that the anti-atherosclerosis effect and the like can be greatly improved, but also that impurities can be removed. That is, when the fractionation / purification treatment is performed, maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof can be obtained as white crystals, so that the food and drink for vascular disorders can be suitably added without adding an extra color. It is preferable because it has the merit that it can be blended.
The method of fractionation / purification treatment is difficult to specify in general, but examples thereof include a recrystallization method, a fractional precipitation method, and a method utilizing chromatography. In particular, a method utilizing liquid chromatography among the chromatography methods can be used to separate maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof contained in the food and drink for vascular disorders of the present invention in a good yield. It is preferable because it can be purified and purified. Specific examples of liquid chromatography include normal-phase liquid chromatography, reverse-phase liquid chromatography, thin-layer chromatography, paper chromatography, and high-performance liquid chromatography (HPLC). Any method can be used for fractionating and purifying maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof contained in food and drink for food use. In particular, normal phase liquid chromatography, reverse phase liquid chromatography, and high performance liquid chromatography (HPLC) are preferable in consideration of the separation ability, the throughput, the number of steps, and the like.
Here, normal phase liquid chromatography refers to, for example, the following method. That is, for example, a column was prepared using silica gel as a stationary phase, a hexane-ethyl acetate mixture, a chloroform-methanol mixture, or the like as a mobile phase, and a crude extract from olive plants or a concentrate thereof was loaded at 0.1 to 5% ( (wt (mass) / v (volume)), and a predetermined fraction is eluted by a continuous elution method using a single mobile phase or a stepwise elution method in which the solvent polarity is gradually increased.
The reverse phase liquid chromatography refers to, for example, the following method. That is, for example, a column was prepared using silica (ODS) to which octadecylsilane was bound as a stationary phase, a water-methanol mixture, a water-acetonitrile mixture, a water-acetone mixture, or the like as a mobile phase, and a crude extract from olive plants or The concentrate is supplied at a load rate of 0.1 to 5% (wt (mass) / v (volume)), and a predetermined concentration is determined by a continuous elution method using a single solvent or a stepwise elution method in which the solvent polarity is gradually reduced. This is a method for eluting a minute.
High performance liquid chromatography (HPLC) is, in principle, the same as the above normal phase liquid chromatography or reverse phase liquid chromatography, and is used for fractionation and purification with higher speed and higher resolution. Things.
By combining one or more of the above methods, maslinic acid and / or its physiologically acceptable salt can be very concentrated and can be obtained in a state in which impurities have been removed, which is preferable.
Furthermore, by combining one or more of the above methods, the purity of maslinic acid and / or its physiologically acceptable salt can be adjusted, and the strength and properties of the anti-atherosclerotic effect as required Etc. can also be designed.
The above-mentioned concentration treatment can be preferably repeated, and further, different concentration treatments can be combined. Similarly, regarding the fractionation / purification treatment, the fractionation / purification treatment can be preferably repeated, and different fractionation / purification treatments can be combined. Furthermore, fractionation / purification treatment may be performed after concentration treatment, fractionation / purification treatment may be performed after fractionation / purification treatment, and fractionation / purification treatment may be performed after concentration treatment and further concentration It can also be processed. Of course, a combination other than the above-mentioned combination may be used.
By variously combining the above-described extraction treatment, concentration treatment, fractionation and / or purification treatment, maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof can be suitably obtained. The combination is not particularly limited, but a specific example of the series of processes includes the following method.
For example, after an olive plant is subjected to extraction treatment with water and / or a hydrophilic organic solvent, part or all of the hydrophilic organic solvent is removed from the obtained extract, and water is added if necessary, followed by stirring. The water-insoluble content precipitated in the solution is recovered and concentrated. The precipitated water-insoluble matter can be recovered by filtration, centrifugation, or the like. To improve the recovery efficiency, the aqueous solution can be subjected to treatment such as addition and stirring of water as needed. The extract in the dry state obtained by removing the water and / or hydrophilic organic solvent from the extract obtained from the olive plant is also subjected to the treatment such as addition and stirring of water in the same manner as described above, and the water-insoluble is obtained by filtration or the like. The concentration treatment can be performed by collecting the components. According to this concentration method, since the treatment is performed in an aqueous system, safety is superior to concentration using a solvent, and a wide range of equipment can be used. Further, since it contains almost no oil, it is excellent in the efficiency of concentration and purification, and is thus preferable.
By fractionating and purifying these concentrates by normal phase and / or reverse phase chromatography and / or recrystallization, highly purified maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof can be obtained. It can be suitably obtained.
Further, the hydrophilic organic solvent is removed from the extract obtained from the olive plant, water is added to the remaining aqueous solution as needed, and a hydrophobic organic solvent is further added, whereby water-hydrophobic organic solvent is added. Concentration can be performed by liquid-liquid distribution with a solvent. Also, the extract in the dry state can be concentrated by liquid-liquid partitioning with a water-hydrophobic organic solvent by adding water and further adding a hydrophobic organic solvent as described above. By fractionating and purifying these concentrates by normal phase and / or reverse phase chromatography and / or recrystallization, highly purified maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof can be obtained. Obtainable.
Here, the amount of water to be added at the time of liquid-liquid distribution is not particularly limited as long as an amount capable of performing the distribution treatment is used, but is preferably 1 to 100 times the mass of the dried extract, more preferably 5 to 5 times. The amount is about 50 to 50 times, more preferably about 10 to 30 times.
Further, in the liquid-liquid distribution in the water-hydrophobic organic solvent, the water and the hydrophobic organic solvent are preferably used in a ratio of water: hydrophobic organic solvent = 9: 1 to 1: 9 (volume ratio), More preferably, it is used at a ratio of 8: 2 to 2: 8.
Also, the total content of maslinic acid and a physiologically acceptable salt thereof in a mixture of maslinic acid obtained from an olive plant and / or a product obtained in an olive oil production process and a physiologically acceptable salt thereof. The rate is preferably 95% or more, more preferably 95% to 99.99%. The content can be measured, for example, by gas chromatography.
The food and drink for a vascular disorder disease of the present invention can contain maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof. Food and drink can also be obtained. Further, by adjusting the degree of concentration, purification, etc., the concentration of maslinic acid and / or its physiologically acceptable salt can be adjusted, and it can be suitably blended in foods and drinks for vascular disorders. it can.
Furthermore, other anti-atherosclerotic substances can be blended and used, thereby enabling a detailed anti-atherosclerotic effect design and a synergistic effect with other anti-atherosclerotic substances. The arteriosclerosis effect can be expected to be enhanced.
Since olive oil contains maslinic acid, the use of olive oil as an oily component in the food and drink for vascular disorders of the present invention is preferred because a more favorable anti-atherosclerotic effect and the like can be obtained.
When maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof is extracted from an olive plant, oleanolic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof is simultaneously extracted. Alternatively, a physiologically acceptable salt thereof is excellent in compatibility with maslinic acid, so that these mixtures can be directly blended with the food and drink for vascular disorders of the present invention. This is preferable because a synergistic effect can be expected with respect to the physiological effects of each, and in particular, a synergistic effect can be expected with respect to the anti-atherosclerotic effect of maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof in the present invention. When extracting maslinic acid and / or its physiologically acceptable salt from olive plants, separating and purifying it, etc., by adjusting the conditions, as a mixture with oleanolic acid and / or its physiologically acceptable salt It can also be obtained by separately isolating maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof, oleanolic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof from olive plants separately, and then mixing them. it can. Further, a mixture of maslinic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof obtained from different raw materials and oleanolic acid and / or a physiologically acceptable salt thereof may be used.
The present invention relates to a vascular disorder containing as an active ingredient a compound selected from the group consisting of maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid, betulin and physiologically acceptable salts thereof, or derivatives thereof. Food and drink. These maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid, betulin and their physiologically acceptable salts, or derivatives thereof, have a vascular smooth muscle cell growth inhibitory effect and / or a vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect. It is excellent in the effects, anti-cell proliferative vascular lesion effects such as suppression of intimal hyperplasia and anti-atherosclerosis, and anti-vascular disease effects such as anti-atherosclerosis and anti-restenosis after PTCA. In addition, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid, betulin and physiologically acceptable salts thereof or derivatives thereof in the present invention can be obtained from natural plants or artificially obtained. Any of these can be suitably used, and in particular, when used as various drug materials, the higher the purity, the better.
As a specific embodiment of the present invention, an edible oil containing maslinic acid in an amount of 0.5% by mass or more, which is obtained by extracting defatted olive cake with an ethanol solution, concentrating by drying, and then purifying by chromatography. Compound oils and fats.
A specific embodiment of the present invention is a dressing containing maslinic acid in an amount of 1% by mass or more, which is obtained by extracting olive oil cake with an ethanol solution, concentrating it by drying, and then purifying it by chromatography. .
As a specific embodiment of the present invention, an edible oil and fat containing maslinic acid in an amount of 1% by mass or more, which is obtained by extracting olive oil cake with an ethanol solution, concentrating by drying, and then purifying by chromatography. Is raised.
As a specific embodiment of the present invention, a margarine containing maslinic acid in an amount of 0.5% by mass or more, which is obtained by extracting defatted olive meal with an ethanol solution, concentrating by drying, and then purifying by chromatography. Is raised.
Further, as a specific embodiment of the present invention, mayonnaise containing 1% by mass or more of maslinic acid, which is obtained by extracting olive oil cake with an ethanol solution, concentrating by drying, and then purifying by chromatography. .
Example
Next, the present invention will be further described with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples.
As the pentacyclic triterpene used in the examples, erythrodiol (Funakoshi), ursolic acid (Wako Pure Chemical), ubaol (Funakoshi), betulinic acid (Funakoshi), betulin (Funakoshi) ) Was purchased as a reagent. The HPLC grade was used as it was, and the others were dissolved in ethanol heated to the boiling point until saturation, then cooled and recrystallized, filtered and dried. The maslinic acid will be described below with reference to actual examples, but the one extracted and purified from olive plants and confirmed to have a purity of 95% was used.
<Production Example 1>
500 g of dried fruits (including seeds) of domestically produced olives (Olea europaea L.) were crushed, and 3 L of hexane was added and extracted for 3 hours. The defatted fruit (defatted cake) obtained by repeating this process four times was removed from seeds, crushed, and extracted again with 5 times the amount of hexane for 3 hours to obtain 229 g of defatted cake from which oil was completely removed. To this defatted lees, a 10-fold amount of a water-containing aqueous ethanol solution having an ethanol content of 60% by mass was added, and the mixture was extracted at room temperature with vigorous stirring for 3 hours. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain 112.7 g of an extract.
2 L of water was added to 100 g of the extract, and the mixture was vigorously stirred at room temperature for 1 hour. After treating the whole amount by centrifugation, the supernatant was removed by decantation, and the remaining precipitate was dried to obtain 10.0 g of a concentrate.
Next, this concentrate was fractionated by silica gel column chromatography using a column packed with about 40 times the amount (400 g) of silica gel. First, miscellaneous unnecessary components were eluted with a 10-fold amount (4000 mL) of hexane: ethyl acetate = 3: 1 eluent of the packed gel, and then 2.5-fold (1000 mL) of hexane: ethyl acetate = Miscellaneous unnecessary components were eluted with a 1: 1 eluent. Subsequently, the desired maslinic acid was eluted with a 10-fold (4000 mL) hexane: ethyl acetate = 1: 1 eluent of the packed gel to obtain a crude maslinic acid fraction. After removing hexane and ethyl acetate from this fraction, vacuum drying was performed to obtain 1.96 g of a crude maslinic acid fraction.
Further, this crude maslinic acid fraction was purified by ODS column chromatography using a column packed with about 30 times (60 g) octadecyl silica gel. First, miscellaneous unnecessary components were eluted with a 10-fold (600 mL) methanol: water = 8: 2 eluent of the packed gel. Subsequently, the desired maslinic acid was eluted with an eluent of methanol: water = 8: 2 30 times the volume of the packed gel (1800 mL) to obtain a purified maslinic acid fraction. After removing methanol from this fraction, vacuum drying was performed to obtain 1.51 g of purified maslinic acid 1.
Here, from analysis by NMR, MS, and the like, it was confirmed that a part of the purified maslinic acid 1 was in a sodium salt state and a potassium salt state, and the remaining majority was in a free acid state. The purity of these was measured by GC, and it was confirmed that the purity as maslinic acid was 95% or more.
<Production Example 2>
To 1 kg of oiled residue (oiled cake) obtained by pressing Italian olives (Olea europaea L.), a 10-fold amount of a water-containing aqueous ethanol solution having an ethanol content of 65% by mass was added. Time extracted. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain 20.2 g of an extract.
1 L of n-butanol and 1 L of water were added to this extract, and the mixture was stirred for 10 minutes, and then separated into an n-butanol phase and an aqueous phase. After removing the n-butanol in the n-butanol phase, vacuum drying was performed to obtain 13.3 g of a concentrate.
Next, this concentrate was fractionated by silica gel column chromatography using a column packed with about 40 times (500 g) of silica gel. First, miscellaneous unnecessary components are eluted with a 10-fold (5000 mL) hexane: ethyl acetate = 3: 1 eluent of the packed silica gel, and then a 2.5-fold (1250 mL) hexane: ethyl acetate = Miscellaneous unnecessary components were eluted with a 1: 1 eluent. Subsequently, the desired maslinic acid was eluted with a 10-fold (5000 mL) eluent of hexane: ethyl acetate = 1: 1 of the packed silica gel to obtain a crude maslinic acid fraction. After removing hexane and ethyl acetate from this fraction, vacuum drying was performed to obtain 2.66 g of a crude maslinic acid fraction.
Further, the crude maslinic acid fraction was purified by ODS column chromatography using a column packed with about 30 times (80 g) octadecyl silica gel. First, miscellaneous unnecessary components were eluted with an eluent of methanol: water = 8: 2, 10 times the volume (800 mL) of the packed gel. Subsequently, the target maslinic acid was eluted with an eluent of methanol: water = 8: 2 of 30 times the amount (2400 mL) of the packed gel to obtain a purified maslinic acid fraction. After removing methanol from this fraction, it was vacuum-dried to obtain 2.06 g of purified maslinic acid 2.
Here, from analysis by NMR, MS and the like, it was confirmed that a part of the purified maslinic acid 2 was in a free acid state, and the remaining majority was in a salt state such as sodium or potassium. Further, their purity was measured by GC, and it was confirmed that the purity as maslinic acid was 97% or more.
<Production Example 3>
To 1 kg of an Italian olive extraction residue obtained in the olive oil production process (defatted lees obtained by further processing the squeezed residue in the extraction process), add 10 times the amount of ethanol, warm to 55 ° C., and stir vigorously for 3 hours. Extracted. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated and dried to obtain 35 g of an extract.
Next, this extract was subjected to silica gel column chromatography using a column packed with about 40 times the amount (1400 g) of silica gel. First, miscellaneous unnecessary components are eluted with an eluent of hexane: ethyl acetate = 3: 1 of about 10 times (14 L) of the packed silica gel, and then 2.5 times (3500 mL) of hexane: acetic acid Miscellaneous unnecessary components were eluted with an eluent of ethyl = 1: 1, and the desired maslinic acid was eluted with an eluent of hexane: ethyl acetate = 1: 1 of 10 times the volume of the packed silica gel (14 L). Elution gave a crude maslinic acid fraction. After removing hexane and ethyl acetate from this fraction, vacuum drying was performed to obtain 5.90 g of a crude maslinic acid fraction.
Further, the crude maslinic acid fraction was purified by ODS column chromatography using a column packed with 30 times (180 g) of octadecyl silica gel which was baked. First, miscellaneous unnecessary components were eluted with an eluent of methanol: water = 8: 2, 10 times the volume of the packed gel (1800 ml). Subsequently, the target maslinic acid was eluted with an eluent of methanol: water = 8: 2 30 times the amount of the packed gel (5400 ml) to obtain a purified maslinic acid fraction. After removing methanol and water from this fraction, vacuum drying was performed to obtain 5.36 g of purified maslinic acid 3.
Here, from the analysis of NMR, MS, and the like, it is found that the purified maslinic acid 3 is partially in the form of sodium salt and potassium salt and the remaining maslinic acid 1 is mostly in the state of free acid. It was confirmed. Further, their purity was measured by GC, and it was confirmed that the purity as maslinic acid was 97% or more.
Derivatives of maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid, and betulin were obtained as follows.
<Synthesis Example 1> Ethyl maslinate
4.5 g of maslinic acid and 1.0 g of triethylamine were dissolved in 50 mL of chloroform, and 1.1 g of thionyl chloride dissolved in 10 mL of chloroform were stirred under ice-cooling for 1 hour while dropping. Subsequently, 3.2 g of ethanol was added, and a solution prepared by dissolving 1.0 g of triethylamine in 10 mL of chloroform was stirred for 3 hours while dropwise adding the mixture under ice-cooling. After completion of the reaction, chloroform-dissolved components were extracted, and the crude reaction product obtained by distilling off chloroform was purified by silica gel column chromatography to obtain 3.5 g of maslinic acid ethyl ester.
<Synthesis Example 2> 2,3-O-di-acetyl-maslinic acid
2.0 g of maslinic acid was dissolved in 100 mL of pyridine, 50 mL of acetic anhydride was added, and the mixture was stirred overnight. After distilling off pyridine and acetic anhydride, the residue was dissolved in ether, and the ether phase was washed once with a 1N aqueous hydrochloric acid solution, once with a saturated sodium hydrogen carbonate solution and three times with pure water, and then magnesium sulfate was added. Left overnight. The crude reaction product obtained by removing magnesium sulfate by filtration and distilling ether off was purified by silica gel column chromatography to obtain 2.2 g of 2,3-O-di-acetyl-maslinic acid.
<Synthesis Example 3> 2,3-O-di-triethylsilyl-maslinic acid triethylsilyl ester
1.0 g of maslinic acid was dissolved in 200 mL of anhydrous dimethylformamide, and 144.0 mg of imidazole and 350 ml of triethylsilyl chloride were dissolved. □ L is 0 □ And sealed, and stirred for 2 hours. After distilling off the dimethylformamide, the residue was dissolved in ether, and the ether phase was washed once with a 1N aqueous hydrochloric acid solution, once with a saturated sodium hydrogen carbonate solution and three times with pure water, and then added with magnesium sulfate. Left overnight. Magnesium sulfate was removed by filtration, and the crude reaction product obtained by distilling ether was purified by silica gel column chromatography to obtain 1.5 g of 2,3-O-di-triethylsilyl-massic acid triethylsilyl ester. Obtained.
<Synthesis example 4> Ethyl 2,3-O-di-stearyl masphosphate
1.0 g of ethyl masphosphate obtained in Synthesis Example 1 was dissolved in 50 mL of anhydrous toluene, 5.0 g of triethylamine was added, and further, 6.0 g of stearic acid chloride was gradually added under ice-cooling, followed by stirring for 1 hour. The mixture was stirred for 9 hours while gradually returning to room temperature. An appropriate amount of a 1N aqueous hydrochloric acid solution was added, and the mixture was extracted with ether. The ether phase was further washed once with a saturated sodium hydrogen carbonate solution and three times with pure water, and then added with magnesium sulfate, and allowed to stand overnight. Magnesium sulfate was removed by filtration, and the crude reaction product obtained by distilling ether was purified by silica gel column chromatography to obtain 1.2 g of ethyl 2,3-O-di-stearyl masphosphate.
<Synthesis Example 5> 3,28-O-di-acetyl-erythrodiol
5.0 g of erythrodiol was dissolved in 250 mL of pyridine, 100 mL of acetic anhydride was added, and the mixture was stirred overnight. After distilling off pyridine and acetic anhydride, the residue was dissolved in ether, and the ether phase was washed once with a 1N aqueous hydrochloric acid solution, once with a saturated sodium hydrogen carbonate solution and three times with pure water, and then magnesium sulfate was added. Left overnight. The crude reaction product obtained by removing magnesium sulfate by filtration and distilling ether off was purified by silica gel column chromatography to obtain 5.4 g of 3,28-O-di-acetyl-erythrodiol.
<Synthesis Example 6> Ethyl ursolic acid
5.0 g of ursolic acid and 1.1 g of triethylamine were dissolved in 50 mL of chloroform, and 1.2 g of thionyl chloride dissolved in 10 mL of chloroform was stirred for 1 hour while dropwise adding the mixture under ice-cooling. Subsequently, 3.5 g of ethanol was added, and a solution prepared by dissolving 1.1 g of triethylamine in 10 mL of chloroform was stirred for 3 hours while dropwise adding the mixture under ice cooling. After completion of the reaction, chloroform-dissolved components were extracted, and the crude reaction product obtained by distilling off chloroform was purified by silica gel column chromatography to obtain 3.8 g of ursolic acid ethyl ester.
<Synthesis Example 7> 3,28-O-di-acetyl-ubaol
5.0 g of Ubaol was dissolved in 250 mL of pyridine, 100 mL of acetic anhydride was added, and the mixture was stirred overnight. After distilling off pyridine and acetic anhydride, the residue was dissolved in ether, and the ether phase was washed once with a 1N aqueous hydrochloric acid solution, once with a saturated sodium hydrogen carbonate solution and three times with pure water, and then magnesium sulfate was added. Left overnight. Magnesium sulfate was removed by filtration, and the crude reaction product obtained by distilling ether was purified by silica gel column chromatography to obtain 5.4 g of 3,28-O-di-acetyl-ubaol.
<Synthesis Example 8> Ethyl betulinate
5.0 g of betulinic acid and 1.1 g of triethylamine were dissolved in 50 mL of chloroform, and 1.2 g of thionyl chloride was dissolved in 10 mL of chloroform, and the mixture was stirred for 1 hour while dripping under ice cooling. Subsequently, 3.5 g of ethanol was added, and a solution prepared by dissolving 1.1 g of triethylamine in 10 mL of chloroform was stirred for 3 hours while dropwise adding the mixture under ice cooling. After completion of the reaction, chloroform-dissolved components were extracted, and the crude reaction product obtained by distilling off chloroform was purified by silica gel column chromatography to obtain 3.8 g of betulinic acid ethyl ester.
<Synthesis Example 9> 3,28-O-di-acetyl-betulin
5.0 g of betulin was dissolved in 250 mL of pyridine, 100 mL of acetic anhydride was added, and the mixture was stirred overnight. After distilling off pyridine and acetic anhydride, the residue was dissolved in ether, and the ether phase was washed once with a 1N aqueous hydrochloric acid solution, once with a saturated sodium hydrogen carbonate solution and three times with pure water, and then magnesium sulfate was added. Left overnight. The crude reaction product obtained by removing magnesium sulfate by filtration and distilling ether off was purified by silica gel column chromatography to obtain 5.4 g of 3,28-O-di-acetyl-betulin.
Example 1
<Evaluation of vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect>
Rat derived vascular smooth muscle cell line A7r5 (purchased from ATCC) 6 Cells / 75cm 2 The cells were cultured at a density of a tissue culture flask (Nunc) in a DMEM medium (Nacalai Tesque) containing 10% fetal bovine serum. Eleven days after the latter half of the logarithmic growth phase, cells were 4 Cells / 0.32cm 2 The cells were transplanted at a density of a multiple well plate (manufactured by Corning Costar), and pentacyclic triterpenes were added to a DMEM medium containing 2.5% fetal bovine serum so as to have a concentration shown in Table 1. Culture was performed for 48 hours. Forty-four hours after the start of the culture, AlamarBlue TM (Manufactured by Alamar) was added, and the cells were further cultured for 4 hours. After the completion of the culture, the fluorescent substance generated by the redox reaction of the cells was measured with a fluorescence spectrophotometer, and the cell growth inhibition rate was calculated by comparing with the fluorescence intensity of the control group. At that time, the cell morphology was also observed to determine the cytotoxicity of the pentacyclic triterpenes.
(Evaluation Criteria) Propagation was performed based on the fluorescence intensity of the test substance-added group when the group to which only the solvent in which the pentacyclic triterpenes were dissolved was used as the control group and the fluorescence intensity obtained in the control group was 100%. The suppression rate was calculated. That is, Equation 1 is satisfied.
The vascular smooth muscle cell proliferation inhibitory effect was evaluated by the above method. The results are shown in Table 1 as the growth inhibition rate.
From Table 1, it was found that oleanolic acid used for comparison had almost no vascular smooth muscle cell growth inhibitory effect. In contrast, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid, betulin and their physiologically acceptable salts, or derivatives thereof, have a very strong vascular smooth muscle cell growth inhibitory effect. Do you get it. Observation of the cell morphology after the completion of the culturing revealed that the pentacyclic triterpenes did not show any cytotoxicity at the concentrations examined.
Thereby, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid, betulin and their physiologically acceptable salts, or derivatives thereof, have a very excellent vascular smooth muscle cell growth inhibitory effect Was revealed.
Example 2
<Evaluation of vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect>
Rat derived vascular smooth muscle cell line A7r5 (purchased from ATCC) 5 Cells / 75cm 2 The cells were cultured at a density of a tissue culture flask (Nunc) in a DMEM medium (Nacalai Tesque) containing 10% fetal bovine serum. 11 days after the second half of the logarithmic growth phase, 0.32 cm 2 5 × 10 5 cultured cells were placed in the upper chamber of Chemotaxel (Kurashiki Boseki) installed in a multiple well plate (Corning Costar). 4 Cells were transplanted at a cell / cell density, and a DMEM medium containing 25 ng / ml platelet-derived activator B-chain homodimer (PDGF-BB: manufactured by Sigma) and pentacyclic triterpenes in the lower chamber are shown in Table 2. The cells were cultured for 6 hours in the state where they were added to the concentrations described. After completion of the culture, the number of cells that migrated to the lower surface of the chemotaxel membrane was measured after the cells were stained by Diff-Quik staining (manufactured by International Reagents), and the cell migration inhibition rate was calculated by comparing the number of cells with the control group. did.
(Evaluation Criteria) The group to which only the solvent in which the pentacyclic triterpenes were dissolved was taken as a control group, and the number of migrated cells obtained in the control group was taken as 100%. The migration inhibition rate was calculated. That is, Equation 2 is satisfied.
The vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect was evaluated by the above method. The results are shown in Table 2 as migration inhibition rates.
From Table 2, it was found that erythrodiol, ubaol, betulinic acid, and betulin, which were compared, had no vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect. In addition, oleanolic acid showed only the same level of inhibitory effect as α-tocopherol, which is a known anti-atherosclerotic food and drink. On the other hand, it was found that maslinic acid, ursolic acid and their physiologically acceptable salts, or derivatives thereof, have a very strong inhibitory effect on vascular smooth muscle cell migration.
This revealed that maslinic acid, ursolic acid and their physiologically acceptable salts, or derivatives thereof, have a very excellent vascular smooth muscle cell migration inhibitory effect.
Example 3
<Confirmation test of intimal thickening inhibitory effect in animals>
Wistar female rats (15-week-old) were preliminarily reared for one week on a powder-prepared feed having an AIN-93 composition, and then divided into eight groups (four rats per group). Under pentobarbital anesthesia, the dorsal position was fixed, the left external carotid artery was exposed, and a catheter was inserted from the external carotid artery to the common carotid bifurcation. The endothelial cells were detached by inflating the balloon at that portion and pulling it to the external carotid artery while rotating. After repeating this operation four times, the surgical site was sutured. Each test substance shown in Table 4 was suspended in cottonseed oil and orally administered at a dose of 200 mg / kg once a day by using a sonde. After breeding with a powdered feed having an AIN-93 composition, two weeks later, the chest was opened under anesthesia with pentobarbital, and the heart was perfused with a 10% phosphate buffer / formalin solution, and the endothelial cells were detached. The external carotid artery was removed. The site was fixed in formalin and embedded in paraffin, and a tissue section was prepared, followed by staining with Elastica-Wangiesson. The intima and media areas of each section were measured by analyzing images taken with a digital camera (Olympus) under a microscope.
(Evaluation Criteria) A group to which only cottonseed oil in which pentacyclic triterpenes were suspended was set as a control group, and the pentacyclic triterpene was obtained when the area ratio of the media to the inner membrane obtained in the control group was 100%. From the area ratio of the media to the media in the triterpene-administered group, the intimal thickening inhibition rate was calculated. That is, Equation 3 is as follows.
The intimal thickening inhibitory effect was evaluated by the above method. The results are shown in Table 4 as the intimal thickening inhibition rate.
From Table 3, it was found that the evaluated maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid, betulin and their physiologically acceptable salts, or derivatives thereof, have an intimal hyperplasia inhibitory effect.
Thereby, maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid, betulin and their physiologically acceptable salts, or derivatives thereof, have been revealed to have an excellent intimal thickening inhibitory effect, It was found to be useful as a food and drink for restenosis.
Example 4
<Confirmation test of anti-atherosclerosis effect in animals>
NZW rabbits (male, 2-2.5 kg) were preliminarily reared for 1 week on a powdered feed (cholesterol diet) having an AIN-93 composition containing 1% cholesterol, and then divided into 8 groups (5 birds per group). The animals were bred for 8 weeks on a cholesterol diet containing 1% of each of the test substances shown in No. 3 under a once-daily restricted feeding (40 g / kg). Eight weeks later, they were killed and dissected under pentobarbital anesthesia, and the aorta was removed. After formalin fixation, SudanIV staining was performed, and the total area of the aortic lumen and the area of atherosclerotic lesion were measured by analyzing an image taken with a digital camera (Olympus) under a microscope.
(Evaluation criteria) A cholesterol diet supplemented with a pentacyclic triterpene was defined as a control group in which the cholesterol diet was fed, and the ratio of the area of atherosclerotic lesion to the total area of the aortic lumen obtained in the control group was 100%. The arteriosclerosis inhibition rate was calculated from the ratio of the area of the atherosclerotic lesion to the total area of the aortic lumen in the given group. That is, Equation 4 is as follows.
The anti-atherosclerosis inhibitory effect was evaluated by the above method. The results are shown in Table 4 as arteriosclerosis inhibition rate.
From Table 4, it was found that the evaluated maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid, betulin, and their physiologically acceptable salts, or their derivatives have an arteriosclerosis-inhibiting effect.
This reveals that maslinic acid, erythrodiol, ursolic acid, ubaol, betulinic acid, betulin and their physiologically acceptable salts, or derivatives thereof, have an excellent arteriosclerosis inhibitory effect, It was found to be useful as a food and drink for arteriosclerosis.
Example 5
<Acute toxicity test in animals>
The acute toxicity test was performed by the following method. Wistar female rats (6 weeks old, average weight 160 g) were preliminarily reared for one week on a powdered diet having an AIN-93 composition, and then divided into 6 groups (8 rats per group) so that the average weight was equal. There were a maslinic acid administration group, an erythrodiol administration group, a ursolic acid administration group, an ubaol administration group, a betulinic acid administration group, and a betulin administration group. Each test substance was suspended in cottonseed oil and orally administered by force using a sonde to give 2000 mg / kg of body weight. Subsequently, the animals were bred with a powdered feed having an AIN-93 composition, the prognosis was observed two weeks after the administration, and two weeks later, the internal organs were examined by dissection.
As a result, there were no deaths in any of the groups 2 weeks after the administration, and no abnormalities were found in the visceral findings by dissection. From this, the LD50 value of each pentacyclic triterpene is 2000 mg / kg of body weight or more, which is extremely excellent in safety and can be taken orally as a form of food and drink for vascular disorders. Do you get it.
Example 6 Edible oils and fats
Purified maslinic acid 1 5.0 g
845.0 g of soybean white squeezed oil
MCT 150.0g
At the above mixing ratio, purified maslinic acid 1 was added to the mixed oil of soybean white squeezed oil and MCT and, while maintaining the temperature of 60 ° C, thoroughly mixed and dissolved using a stirrer until the whole became clear, An edible oil mixture was produced.
Example 7 Dressing
46.6 g of water
Xanthan gum 0.1g
Fructose glucose liquid sugar 5.0g
5.0 g of salt
MSG 0.3g
Rice vinegar (acidity 10%) 10.0g
Pepper
Purified maslinic acid 2 of Preparation Example 2 1.0 g
MLCT 32.0g
At the above mixing ratio, the raw materials excluding MLCT are first put into a warmable container equipped with a stirrer, and heated to 90 ° C. while stirring at 100 rpm using a propeller stirrer until the temperature reaches 90 ° C. Stirring was performed for 25 minutes while maintaining the temperature. Thereafter, the product was cooled until the product temperature reached 20 ° C., and a dressing was obtained in combination with the MLCT.
Example 8 Soft drink
0.5 g of 3,28-O-di-acetyl-erythrodiol of Synthesis Example 5
Honey 15.0g
0.1 g of citric acid
dl-malic acid 0.1 g
D-sorbitol solution (70%) 10.0 g
Sodium benzoate 0.1g
Appropriate amount of fragrance
Purified water Residue to total 100g
The above raw materials were uniformly mixed to obtain a health drink.
Example 9 Cereal food
15.0 g of 3,28-O-di-acetyl-ubaol of Synthesis Example 7
Flour 30.0g
18.5 g of defatted soybean
Wheat bran 15.0g
Wheat germ 11.5g
Granulated sugar 10.0g
The mixture at the above mixing ratio was added with water, molded, and heated and dried in an oven to obtain a spherical cereal food.
Example 10 Edible formulated oil and fat
Purified maslinic acid 3 of Production Example 3 10.0 g
Mixed tocopherol 1.0g
989.0 g of rice oil
At the above mixing ratio, refined maslinic acid 3 and mixed tocopherol are added to rice oil, and while maintaining the temperature of 60 ° C., the mixture is thoroughly mixed and dissolved using a stirrer until the whole becomes clear, and the edible oil mixture is added. Manufactured.
Example 11 Edible formulated oil and fat
Purified maslinic acid 1 of Production Example 1 5.0 g
1.0 g of plant sterol
Safflower oil 989.0g
At the above mixing ratio, purified maslinic acid 1 and plant sterol are added to safflower oil, and while maintaining the temperature of 60 ° C., the mixture is thoroughly mixed and dissolved using a stirrer until the whole becomes clear. Manufactured.
Example 12 Margarine
Rapeseed oil 42.0g
Hardened rapeseed oil 42.0g
14.0 g of water
0.5g of salt
Lecithin 0.5g
Monoglyceride 0.4g
0.5 g of purified maslinic acid of Production Example 1
Appropriate amount of fragrance
Carotene trace
The above-mentioned raw materials were mixed by a conventional method, and rapidly cooled and kneaded using a combinator to obtain margarine.
Example 13 Mayonnaise
74.0 g of soybean salad oil
8.4 g of water
1.0g sugar
Sodium glutamate 0.3g
Powder mustard 0.3g
Salt 1.0g
Rice vinegar 4.0g
Purified maslinic acid 2 of Preparation Example 2 1.0 g
Salted egg yolk 10.0g
At the above mixing ratio, first, the raw materials except for the soybean salad oil and the salted egg yolk were heated to 90 ° C. while mixing and stirring, and stirred for 25 minutes while maintaining the temperature at 90 ° C. After cooling to 20 ° C., the soybean salad oil and the salted egg yolk were combined and stirred under reduced pressure to obtain mayonnaise.
According to the food and drink for vascular disorders of the present invention, the pentacyclic triterpenes, their physiologically acceptable salts and their derivatives have an inhibitory effect on vascular smooth muscle cell proliferation and / or vascular smooth muscle cell migration. It has an excellent effect, anti-cell proliferative vascular lesion effect such as intimal hyperplasia suppression and anti-atherosclerosis, and anti-vascular disease disease effects such as anti-atherosclerosis and anti-restenosis after PTCA. And safety can be imparted, and suitable effects can be enjoyed easily and continuously through ingestion.