JPS63309175A - 変異酵母の培養法 - Google Patents

変異酵母の培養法

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JPS63309175A
JPS63309175A JP62142350A JP14235087A JPS63309175A JP S63309175 A JPS63309175 A JP S63309175A JP 62142350 A JP62142350 A JP 62142350A JP 14235087 A JP14235087 A JP 14235087A JP S63309175 A JPS63309175 A JP S63309175A
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JP
Japan
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yeast
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caproic acid
cerulenin
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Eiji Ichikawa
英治 市川
Yoji Hata
洋二 秦
Satoshi Imayasu
今安 聰
Koji Suginami
杉並 孝二
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GETSUKEIKAN KK
Gekkeikan Sake Co Ltd
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GETSUKEIKAN KK
Gekkeikan Sake Co Ltd
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、香りの高いアルコール飲料等の製造法に関す
るものである。
さらに詳細には、本発明は、突然変異によって香気成分
のうちカプロン酸及び/又はカプロン酸エチルを多く生
成するようになった変異酵母を用いて、各種アルコール
飲料、食品、さらには、香料を製造する方法に関するも
のである。
一般に、香りは、アルコール飲料や食品の品質を決定す
る重要な要素であり、香気エステルであるカプロン酸エ
チルは、リンゴの香りに似た好ましい香気成分の一つと
なっている。このカプロン酸エチルは、酵母によってカ
プロン酸とエタノールから生成するものであるが、一般
的にはその生成量はあまりにも少い。
即ち1本発明者らの研究の結果、酵母において、カプロ
ン酸エチルの生成の律速となっているのは力、プロン酸
であることが明らかになった。そして、このカプロン酸
は、酵母の脂肪酸生合成系の途中で生成されているが、
カプロン酸として蓄積されずに、次の化合物に変化して
しまうので、カプロン酸から誘導されるカプロン酸エチ
ルの量は、ごくわずかとなる。
そこで1本発明者らは、脂肪酸合成酵素に変異を有し、
カプロン酸の量の多い変異酵母を求めて鋭意研究したと
ころ、これを多く生成する変異酵母を選択取得する方法
を見出し、さらにこの変異酵母を用いて、香りの高いア
ルコール飲料等を製造する方法を開発したものである。
本発明において変異酵母を得るには、変異方法としては
、−いかなる方法でもよい、変異の物理的方法としては
、紫外線照射、放射線照射などがあり、化学的方法とし
ては、変異剤1例えば、エチルメタンサルホネート、N
−メチル−N−ニトロ−N−ニトロソグアニジン、亜硝
酸、アクリジン系色素などの溶液に懸濁させる変異方法
がある。
本発明においては、これらの変異方法が適宜使用できる
が、変異酵母の選別に特色を有するものである。すなわ
ち変異株の生育培地にセルレニンを含有させなければな
らない。
セルレニンは、脂肪酸合成酵素を阻害する抗生物質とし
て知られており、セルレニンに対して耐性を獲得したと
いうことは脂肪酸合成酵素もしくはその機能に変化が生
じたことを意味している。
そこで、このセルレニン耐性株の性質を検討したところ
カプロン酸を含む中級脂肪酸が親株よりも増加した株が
多数存在することを見出した。
セルレニンの添加は、固体培地、液体培地のいずれでも
よく、25μM程度添加して使用する。
処理酵母としては、清酒酵母、焼酎酵母、ビール酵母、
ワイン酵母、パン酵母のいずれの酵母でもセルレニン耐
性株を得ることができる。
各種酵母を変異処理した後、セルレニン含有培地に移し
、30℃、1週間程度培養して生育した菌株を分離し、
これから、カプロン酸をよく生成する酵母を採用すれば
よい。
ここに得られる変異酵母は、清酒酵母、焼酎酵母、ビー
ル酵母、ワイン酵母、パン酵母のいずれにおいてもカプ
ロン酸をよく生成するようになっているので、これらを
用いて清酒、焼酎、ビール。
ワイン、パンなどを製造すれば、カプロン酸エチルの多
いそれぞれの製品を製造することができる。
実施例1 日本醸造協会7号酵母より分離した1倍体酵母(以下に
−7−14と略す)を、YPD培地(酵母エキス1%、
ペプトン2%、ブドウ糖2%)5@Qに植苗し、1日培
養した後、菌体を集菌、洗浄した。この洗浄菌体に、0
.2Mリン酸緩衝液(PH8,0) 5 mff140
%ブドウ糖溶液0.25@R,エチルメタンサルホネー
ト0.25+*Rを加え、 30℃で1時間ゆっくり攪
拌しながら変異処理を行った。処理後、菌体を滅菌水で
洗浄し、セルレニン(最終濃度25μM)を含むYPD
寒天培地(YPD培地に寒天2%を加えたもの)に塗抹
した。この培地に生育した多数のセルレニン耐性株をY
NBC培地(ディフコ製イーストニトロゲンベース0.
67%、ブドウ糖2%、カザミノ酸1%)に植菌し、3
0℃、3日間培養して培地中のカプロン酸濃度を測定し
た。ここで親株に比して、カプロン酸生産能が向上した
株7−C−8を得た。この菌株は、微工研にFER1’
1−P−8452として寄託されている。 7−C−8
と親株であるに−7−HをYNBC培地で30℃、3日
間培養した場合の培地中のカプロン第1表のように7−
C−8株は親株と比べて約6倍のカプロン酸を生成する
ことがわかった。
実施例2 変異酵母77−C−8(FERP−8452)および協
会7号酵母を用いて、次の第2表に示す仕込配合で清酒
を製造した。
第2表 酵母は培養酵母を湿菌体重量で、2gを加え15℃で、
15日間醗酵させた。ここに得られた清酒の成分を第3
表に示す。
第3表 この結果、清酒の香気成分の中で、特に重要なものの一
つとされているカプロン酸エチルが親株の約5倍に増加
しており官能検査でもリンゴ様の香りが強く認められた
また、カプロン酸エチルの基質の−っであるカプロン酸
が親株に比べ、約6倍に増加していた。
セルレニンは、脂肪酸合成酵素の阻害剤であることや、
酵母においてカプロン酸の生合成は、脂肪酸合成酵素に
よって行なわれることにより、この耐性株は脂肪酸合成
酵素に変異が起って、カプロン酸の生成量が増加したも
のと考えられる。
実施例3 変異酵母77−C−8(FERP−8452)およびワ
イン酵母Saccharomyces carevis
iae(IAM 4274)でワインを醸造した。
新鮮な甲州種ブドウ果汁にブドウ糖を補糖して、糖分2
4%に調整した。この果汁IQに対してそれぞれの酵母
を湿菌体重量として2gを加え18℃で7日間醗酵させ
た。ここで得られたワインの成分を第4表に示す。
第4表 7−C−8を使用したワインは、カプロン酸エチルがI
AM 4274の5倍と高く、官能的に、も、今までの
ワインとは異なる新しいタイプのものであった。
実施例4 変異酵母77−C−8(FERP−8452)およびワ
イン酵母Saccharomyees cerevis
iae(IAM 4274)を用いてブランデーを製造
した。
新鮮な甲州種ブドウ果汁に、ブドウ糖を補糖して、14
分を24%に調整した。この果汁IQにそれぞれの酵母
を湿菌体重量として2gを加え18℃で7日間醗酵させ
た。得られた醗酵液をロータリーエバポレーターを用い
、減圧下で蒸留した。これによって得られたブランデー
の成分を第5表に示す。
第5表 ?−C−8を使用したブランデーはカプロン酸エチル濃
度が高く、官能的にも従来のブランデーとは異なるもの
であった。
実施例5 変異酵母7−C−8(FERN P−8452)および
ビール酵母Saccharomycas uvarum
(IFO0565)を使用してビールを醸造した。
麦芽160gに水1aを加え、加熱糖化した後、濾過し
て麦汁を得た。これにホップ2gを加え、煮沸した後、
ホップを除き、冷却後加水して全量をIQとした。この
麦汁1Ωにそれぞれの酵母を湿菌体重量として2gを加
え、15℃で10日間醗酵した。ここで得られたビール
の成分を第6表に示す。
第6表 第6表に示すように、7−C−8で醸造したビールは、
カプロン酸エチル濃度が高く、官能的にも今までのビー
ルとは異なる新しいタイプのビールであった。
実施例6 変異酵母7−C−8(FERN P−8452)および
ビール酵母Saccharomycas uvaru■
(IFO0565)を用いてウィスキーを製造した。麦
芽160gに水IQを加え、加熱糖化した後濾過して麦
汁を得た。これを冷却した後加水して全量をIQとした
。この麦汁IQにそれぞれの酵母を湿菌体重量として2
gを加え。
15℃で10日間醗酵を行なった。この醗酵液をロータ
リー・エバポレーターで減圧下で蒸留してウィスキーを
得た。ここで得られたウィスキーの成分を第7表に示す
第7表 第7表に示すように、7−C−8で製造したウィスキー
は、カプロン酸エチル濃度が高く、また官能的にも今ま
でのウィスキーとは異なるものであった。
実施例7 変異酵母77−C−8(FERP−8452)および醸
造協会焼酎2号酵母を使用して、第8表に示す仕込配合
で第8表の仕込配合に、培養酵母を、湿菌体重量として
2gを加え、1段仕込を行った。15℃で14日間醗酵
させた後、醪をロータリー・エバポレーターで減圧下で
蒸留した。得られた焼酎の成分を第9表に示す。
7−C−8を使用した焼酎は、カプロン酸エチルの濃度
が高く、官能的にも新しいタイプの焼酎であった。

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. (1)突然変異によって香気成分のうちカプロン酸及び
    /又はカプロン酸エチルを多く生成するようになった変
    異酵母を使用することを特徴とするアルコール飲料等の
    製造法。
  2. (2)突然変異による香気成分のうちカプロン酸及び/
    又はカプロン酸エチルを多く生成する変異酵母が、各種
    酵母を変異処理し、セルレニン含有培地で、生育した菌
    株から取得されたものである特許請求の範囲第1項記載
    のアルコール飲料等の製造法。
JP14235087A 1987-06-09 1987-06-09 変異酵母の培養法 Expired - Lifetime JPH0746982B2 (ja)

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