JPS63269998A - 光学活性カルボン酸及びその対掌体エステルの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、一般式 ％式％（ （式中Ｒ１はアルキル基、アラルキル基又はアリール基
、馬はアルキル基、ｎは１又は２を示す）で表わされる
光学活性カルボン酸及びその対掌体エステμの製造法に
関する。

〔従来の技術〕

式Ｉの力μポン酸及びその対掌体エステ〃は光学活性を
有する種々の生理活性物質を合成するための原料として
利用されている。従来、式Ｉの光学活性カルボン酸の製
造法としては、あらかじめ有機合成的にラセミ体の力μ
ボン酸を合成したのち、光学分割剤を用いて分割する方
法、すなわち物理化学的に一方の光学活性体とその対掌
体とに分別する方法が知られている（特開昭５５−１１
８４５５号、同５６−８１５５７号、同５７−１８８５
６５号、ヨーロッバ特許公開第７９２００４７７号各明
細書参照）。

一方、光学活性カルボン酸エステルは力μポン酸を分割
したのち、エステル化反応を行ない、光学活性エステル
に導く方法などがとられている。

〔発明が解決しようとする問題点〕

しかしこれらの方法では、高価な分割剤が多量に必要と
されること、この分割剤が不純物として製品中に混入し
やすいこと、分割工程が複雑であることなどの欠点があ
り、工業的な製法としては必ずしも満足できるものでは
ない。

これらの欠点を改良する方法として本発明者らは、式Ｉ
で表わされる光学活性カルボン酸やその対掌体エステル
を微生物の作用により製造する方法を先に提案した。（
特開昭６０−１２９９３号、同６０−３０６９２号、同
６０−１４１２９７号参照） 本発明者らは、更に微生物を用いてラセミ体のカルボン
酸エステルを不斉加水分解する方法に関して鋭意研究を
行った結果、新たにグオトリクム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕ
ｍ　　）属の微生物を用いることによシ、弐Ｉの光学活
性力〃ポン酸及びその対本体エステルを効率よく製造で
きることを見出した。

〔問題点を解決するだめの手段〕

本発明は、一般式 ％式％［：］ （式中烏はアμキ７Ｌ’基を示し、ＲＩ　、Ｒ２及びｎ
は前記の意味を有する）で表わされるエステルに、エス
テル結合を不斉加水分解する能力を有するゲオトリクム
（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　　）属に属する微生物の培養
液、菌体又は菌体処理物を作用させることを特徴とする
、一般式 ％式％［：］ （式中Ｒ，、Ｒ，及びｎは前記の意味を有する）で表わ
される光学活性カルボン酸及びその対掌体エステルの製
造法である。

式■及び式■の化合物の置換基Ｒ１のだめのアルキル基
としては例えばメチμ基、エチμ基など、アクμキ／Ｌ
／基としては例えばベンジ／Ｉ／基、アリー／ｌ／基と
しては例えばフエニル基が挙げられる。

本発明に用いられるエステ／Ｉ／＠としては、例えばＳ
−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸メチル、Ｓ−アセ
チｐ−γ−メμカプトーα−メチル−ｎ−酪酸メチル、
Ｓ−ベンゾイル−β−メルカプトイソ酪酸メチＡ／、Ｓ
−フェニルアセチル−β−メルカプトイソ醋酸メチルな
どが挙げられる。

本発明に用いられるゲオトリクム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕ
ｍ；属の微生物は、前記の化合物〔■〕のエステル結合
を不斉加水分解する能力を有する微生物であり、例えば
、ゲオトリカム・エスピーＭＲ−５０２２（Ｇｅｏｔｒ
ｉｃｈｕｍ　ｓｐ、　ＭＲ−３０２２）が挙げられる。

本菌株は、広島系大竹地区の土壌から採取されたもので
あり、工業技術院微生物工業技術研究所に倣工研菌寄第
９５１８号として寄託されている。

本菌株は、主に形態観察により、公知属のゲオトリカム
（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　　）属に属する菌株と同定さ
れた。以下その菌学的性質を記す。

囚　各培地における生育状況 （１）　Ｍ　Ｙ寒天培地；寒天平板上で２５℃で２週間
培養した。生育は良好で、生成したコロニーは、日数が
経過するとともにはゾ同心円状に拡大した。コロニーの
性状は酵母様であり、表面は乳白色を呈し、やや情調で
扁平に***し周辺は波状となる。

（２）コーンミール寒天培地及びポテト寒天培地でのス
ライド培養： ２５℃で培養。隔壁を有する分生子形成菌糸を生成、菌
糸の切断により円柱状の分生子となる。

（３）　Ｍ　Ｙ液体培地及び麦芽汁培地：２５℃で静置
培養した。隔壁を有する菌糸が形成された。***により
増殖し、分生子を形成する。

その大きさは（１０〜１５）μｍＸ（２０〜４０）、ａ
ｍであった。１週間の培養で、培地の表面に皮膜を形成
し、沈殿物は綿状であった。

（Ｂ）生理試験 （１）発酵性：なし く２）炭素源の資化性：３０℃で最長３週間振盪培養し
た。培養３日日、１週間、３週間で資化された炭素源の
種類及び３週間の培養でも資化されなかった炭素源を記
す。

１）３日日で資化されたもの Ｌ−アフビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−グルコース、
Ｄ−マンノース、Ｄ−ガフクトース、マμドース、シュ
ークロース、ラクトース、メリビオース、セロビオース
、トレハロース、ラフィノース、α−メチμｍＤ−グμ
コシド、アルブチン、デキストリン、イノジット、エタ
ノ−、ル′ １１）１週間で資化されたもの ム 上記炭素源以外にＬ−ヲ夢ノース、メレジトース ｌ１１）　　３週間で資化されたもの 、上記炭素源以外にＤ−アブビノース、アトニット、Ｄ
−マンニット、Ｄ−ソルビット、コハク酸塩 ＩＶ）　　資化しない炭素源 Ｌ−ソルボース、ズルシット、クエン酸塩 （３）硝酸塩の資化性：資化性あり （４）尿素の分解性：ウレアーゼ活性あり微生物の培養
は、液体培養でも、固体培養でも行うことができる。培
地としては、微生物が通常資化しうる炭素源、窒素源、
ビタミン、ミネヲ〜などの成分を適宜配合したものが用
いられる。微生物の加水分解能を向上させるため、培地
にエステルを少量添加してもよい。培養は微生物が生育
可能である温度及びｐＨで行われるが、通常５０℃以下
の温度で、ｐＨ２〜１１の範囲で行われる。微生物の生
育を促進させるために通気攪拌を行ってもよい。

加水分解反応を行うに際しては、培養の開始時又は途中
で培地にエステ／Ｉ／　（ｎ）を添加してもよく、あら
かじめ微生物を培養したのち培養液にエステル（ｎ）を
添加してもよい。また増殖した微生物の菌体を遠心分離
等によシ採取し、これをエステルを含む反応媒体に加え
てもよい。

この場合菌体は取り扱い上の便宜から、乾燥菌体例えば
凍結乾燥菌体、噴霧乾燥菌体又は有機溶媒例えばアセト
ン、トルエン等で処理した菌体、あるいは菌体破壊物、
菌体抽出物等の菌体処理物を用いることもできる。反応
媒体としては例えばイオン交換水又は緩衝液が用いられ
る。

反応媒体又は培養液中のエステルの濃度は［ＬＯ１〜５
０重量％が好ましい。エステｐは水に懸濁した状態で加
えることもできる。メタノ−〜、アセトンなどの有機溶
媒を反応液に加えてエステルの溶解性を向上させること
もできる。反応液のｐａは２〜１１、好ましくは５〜８
の範囲である。反応が進行するに伴い生成した力μボン
酸により反応液のｐＨが低下してくるが、この場合は適
当な中和剤で最適ｐＩ（に維持することが好ましい。反
応温度は５〜５０℃が好ましい。

反応液又は培養液からの生成物の分離精製は通常の方法
例えば抽出、再結晶、カフムクロマトグフフイ等により
行うことができる。

下記実施例中のチは重量％を意味する。

実施例 ゲオトリクム・エスピーＭＲ−３０２２（微工研菌寄第
９３１８号）をグルコース１チ、ペプトン１５％、肉エ
キスＣＬ５％、酵母エキスＯ１ｄから成る液体培地（ｐ
Ｈ７，０）１００＋ｄに植菌し、３０℃１日間振盪培養
を行った。培養終了後、培養液を遠心分離し、得られた
菌体の全量をイオン交換水で洗浄したのち、Ｍ／１０燐
酸緩衝液（ｐＨ７，０）５０−に懸濁した。この菌体ｓ
濁液に出−８−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸メチ
ル２．５−を加え、３０℃で４８時間振盪して反応させ
た。

この時のＳ−アセチμ−β−メμカプトイソ酪酸メチ〜
の分解率は４９俤であった。反応液をｐＨ７，０に調整
し、Ｓ−アセチμｍβ−メμカプトイソ酪酸メチ〃を酢
酸エチルで抽出した。

次いで水層のｐａを硫酸で２．０に下げたのち、水層中
のＳ−アセチル−β−メμカプトイソ酪酸を酢酸エチル
で抽出した。抽出液に無水硫酸ナトリウムを加えて脱水
処理したのち、溶媒を蒸発除去した。抽出された８−ア
セチμｍβ−メμカプトイソ酪酸及びＳ−アセチル−β
−メルカプトイソ酪酸メチルの比旋光度をユニオン技研
社製旋光度針（ＰＭ１ｍＩ型）で測定した。

結果を表１に示す。

これから、光学活性力μボン酸とその対掌体エステルが
生成していることが判る。

表　　１

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿１はアルキル基、アラルキル基又はアリール
   基、Ｒ＿２及びＲ＿３はアルキル基、ｎは１又は２を示
   す）で表わされるエステルに、エステル結合を不斉加水
   分解する能力を有するゲオトリクム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈ
   ｕｍ）属に属する微生物の培養液、菌体又は菌体処理物
   を作用させることを特徴とする、一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿１、Ｒ＿２及びｎは前記の意味を有する）で
   表わされる光学活性カルボン酸及びその対掌体エステル
   の製造法。