JPS6216951B2

JPS6216951B2 -

Info

Publication number: JPS6216951B2
Application number: JP51008821A
Authority: JP
Inventors: Aroshiusu Watanabe Kyoshi; Kuwan Chu Chun; Jei Fuotsukusu Jatsuku
Original assignee: SUROON KETARINGU INST FUOO KYANSAA RISAACHI
Current assignee: SUROON KETARINGU INST FUOO KYANSAA RISAACHI
Priority date: 1975-08-07
Filing date: 1976-01-28
Publication date: 1987-04-15
Also published as: DE2601755A1; GB1477993A; US4074042A; JPS5219683A; DE2601755C2

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は新規化合物プソイド−イソシチジンお
よびその酸付加塩ならびにその製造法およびその
製造に有用な中間体に関する。本発明新規化合物プソイド−イソシチジン、好
ましくはそのベータ−アノマーは活性な増殖抑制
および抗白血病剤である。プソイド−イソシチジンは既知の２・３−Ｏ−
低級アルキリデン−５−Ｏ−トリチル−Ｄ−リボ
フラノースから出発して多段階方法により容易に
得られる。好ましい出発物質は２・３−Ｏ−イソ
プロピリデン−５−Ｏ−トリチル−Ｄ−リボフラ
ノースである。最初の反応段階は前記リボフラノース出発物質
を（カルブ−低級アルコキシ−メチレン）トリフ
エニルフオスフオランでアルキル化して低級アル
キル−２−（２・３−Ｏ−低級アルキリデン−５
−Ｏ−トリチル−Ｄ−リボフラノシル）−アセテ
ートを得る。このアルキル化反応はアセトニトリ
ルのような不活性、極性有機溶媒中で高温、好ま
しくは反応混合物の還流温度で行うのがよい。ア
ルキル化試剤の低級アルコキシ基の好ましい具体
例はエトキシであつて、得られる中間体はエチル
エステル、すなわちエチル−２−（２・３−Ｏ−
イソプロピリデン−５−Ｏ−トリチル−Ｄ−リボ
フラノシル）−アセテートである。上記中間体を次いで低級アルキルホルメートと
水素化アルカリ金属とで少量の低級アルカノール
を含有する無水エーテル中でホルミル化して低級
アルキル−２−ホルミル−２−（２・３−Ｏ−低
級アルキリデン−５−Ｏ−トリチル−Ｄ−リボフ
ラノシル）−アセテートアルカリ金属エノレート
を得る。反応は室温で15〜24時間行うのが好まし
い。ホルメート試剤に利用される低級アルキルは
また選択した低級アルカノールに反影される。か
くして好ましい具体例としてはエチルホルメート
がホルミル化剤として用いられ、エタノールが低
級アルカノールとして用いられる。水素化ナトリ
ウムが本発明で選ばれる水素化アルカリである。
このようにして製造した好ましい中間体は、エチ
ル−２−ホルミル−２−（２・３−Ｏ−イソプロ
ピリデン−５−Ｏ−トリチル−Ｄ−リボフラノシ
ル）−アセテートナトリウムエノレートである。粗製の形で利用し得る前記アルカリ金属エノレ
ートを次いでグアニジン、好ましくは酸付加塩す
なわち塩酸塩と低級アルカノール性アルカリ金属
低級アルコキシドのような塩基の存在下、高温好
ましくは反応混合物の還流温度で反応させて５−
（２・３−Ｏ−低級アルキリデン−５−Ｏ−トリ
チル−Ｄ−リボフラノシル）−イソシチジンを最
初にアルフア−アノマー形に製造する。副産物の
除去はカラムクロマトグラフイーたとえばシリカ
ゲル上で容易に達成することができる。得られる
シロツプ状の粗生成物は還流低級アルカノール、
好ましくはメタノールで処理してアルフア−アノ
マーを純粋な形で晶出させることができる。しか
しながら、粗製シロツプをそれが所望のベータ−
アノマーを含有しているので更に変換に利用する
のが好ましい。上記製造段階の好ましい具体例は、用いる低級
アルカノール性アルカリ金属低級アルコキシドは
エタノール性ナトリウムエトキシドである。上記反応段階からの粗製アルフア−ベータ混合
アノマーを次いで低級アルカノール性鉱酸たとえ
ば10％メタノール性塩化水素で15〜25℃好ましく
は室温で処理して低級アルキリデンおよびトリチ
ル保護基を開裂させる。この反応混合物から沈澱
する生成物はプソイド−イソシチジン（ベータ−
アノマー）である。アルフア−アノマーは液に
見出され、溶媒を蒸発させて単離した後、前述の
低級アルカノール性鉱酸処理を用いてベータ−ア
ノマーに異性化することができる。生成物プソイ
ド−イソシチジンは鉱酸付加塩として得られ、溶
液から結晶する。あるいはまた、上記低級アルキル−２−ホルミ
ル−２−（２・３−Ｏ−低級アルキリデン−５−
Ｏ−トリチル−Ｄ−リボフラノシル）−アセテー
トアルカリ金属エノレートをジアゾ−低級アルカ
ンたとえばジアゾメタンと15〜25℃、好ましくは
室温で、エーテル好ましくはエチルエーテルのよ
うな不活性有機溶媒中で反応させる。生成物低級
アルキル−２−低級アルコキシメチリデン−２−
（２・３−Ｏ−低級アルキリデン−５−Ｏ−トリ
チル−Ｄ−リボフラノシル）−アセテートを次い
で上記のグアニジンと反応させ本発明のプソイド
−イソシチジンを製造することができる。プソイド−イソシチジンは有機および無機酸の
両方と酸付加塩を生成する。好ましい酸付加塩は
医薬として許容される酸付加塩である。医薬とし
て許容されない酸付加塩はこの技術分野でよく知
られているイオン交換技術によつて医薬として許
容される酸付加塩に変換することができる。医薬
として許容される酸付加塩の例は、塩酸塩、臭素
酸塩、硫酸塩、燐酸塩、クエン酸塩、コハク酸
塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−ト
ルエンスルホン酸塩などを包含する。プソイド−イソシチジンおよびその酸付加塩は
有用な治療剤であつて、経腸または非経口投与に
適した有機または無機不活性担体たとえば水、ゼ
ラチン、アラビアゴム、乳糖、デンプン、ステア
リン酸マグネシウム、タルク、植物油、ポリアル
キレングリコール、石油ゼリーなどのような適合
した薬学的担体と共にこれらを含有する薬剤の形
で用いられる。薬剤は固形（たとえば、錠剤、糖
剤、坐剤またはカプセル剤として）または液の形
（たとえば溶液、懸濁液または乳濁液として）に
製剤することができる。薬剤は滅菌されおよび／
あるいは保存剤、安定剤、湿潤剤または乳化剤、
浸透圧を変える塩または緩衝剤のような補薬を含
有することができる。このような薬剤はまた他の
治療剤を含有することができる。本発明化合物および特にプソイド−イソシチジ
ンのベータ−アノマーおよびその塩は、増殖抑制
剤、抗白血病剤および抗ヴイルス剤としての有用
性を示す価値ある治療剤である。すなわちプソイド−イソシチジン（ベータ−ア
ノマー）は白血病L5178Y細胞に対する試験管内
試験において0.8μｇ／mlで50％の増殖抑制を示
し、一方既知の抗白血病剤５−アザシチジンは同
じ試験で50％の増殖抑制を達成するには1.0μ
ｇ／mlを要する。更に他の白血病細胞株との試験管内試験での結
果を下記第１表に要約する。

【表】活性はまたアラビノシルシトシン耐性マウス白
血病P815／ARA−Ｃに対するマウスでの生体内
試験でプソイド−イソシチジン（ベータ−アノマ
ー）に対して証明される。毎日プソイド−イソシ
チジン60mg／Kgipの４日間の投薬で平均22.8日生
存した。対照マウスとの比較では生存は平均9.3
日であり毎日５−アザシチジン５mg／Kgの４日間
投薬で処置したマウスは平均生存19.5日であつ
た。同じ結果がプソイド−イソシチジンで白血病
L1210／Mtx（毎日40mg／Kg×10で平均生存14.7
日に対して対照では平均生存8.3日）およびマウ
ス白血病L1210／０（40mgqd×5dで平均生存21.1
日に対し対照では平均生存9.5日）で観察され
た。プソイド−イソシチジン（ベータ−アノマー）
投与単位形の製剤は約250〜2000mg、好ましくは
非経口法による投与に対しては本化合物の500〜
1000mgを含有するのが好ましい。ここに用いた「低級アルキリデン」なる語はそ
の基の１つの炭素原子を経て水素原子以外の２つ
の原子に共有的に結合しており、C₁〜C₇、好ま
しくはC₂〜C₄の直鎖または分枝鎖の飽和炭化水
素基を意味する。適当な低級アルキリデンはエチ
リデン、イソプロピリデンおよびｉ−ブチリデン
を包含する。イソプロピリデン基が好ましい低級
アルキリデンである。ここに用いた「低級アルコキシ」なる語は低級
アルキルがC₁〜C₇、好ましくはC₁〜C₄の直鎖ま
たは分枝鎖の飽和炭化水素基である低級アルキル
オキシ基を包含することを意味する。適当な低級
アルコキシ基はメトキシ、エトキシ、ｔ−ブトキ
シなどを包含する。エトキシが好ましい低級アル
コキシ基である。同様に、低級アルキル基はメチ
ル、エチル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ヘ
キシルなどを包含する。「アルカリ金属」なる語
はリチウム、ナトリウム、カリウム、ルビジウム
およびセシウムを包含することを意味する。ナト
リウムが好ましいアルカリ金属である。「低級ア
ルカノール」なる語はC₁〜C₇アルコール、好ま
しくはC₁〜C₄を有するアルコール、たとえばメ
タノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−
ブタノール、ｎ−ヘキサノールなどを包含するこ
とを意味する。次に実施例を挙げて本発明を説明する。実施例１２・３−Ｏ−イソプロピリデン−５−Ｏ−トリ
チル−Ｄ−リボフラノース（43.2ｇ、0.1モル）
と（カルベトキシメチレン）トリフエニルフオス
フオラン（37.3ｇ0.11モル）を乾燥アセトニトリ
ル（500ml、4Aモレキユラ−シーブで乾燥）に溶
解し、この溶液を還流下に４時間加熱する。溶媒
を減圧下に除去し、残渣をエーテル（約500ml）
に溶解する。この溶液を氷浴中で冷却するとトリ
フエニルフオスフインオキシドが沈澱し、これを
過して除き液を蒸発乾固する。この方法を３
回繰返しトリフエニルフオスフインオキシドの大
部分を除去する。粗生成物エチル−２−（２・３
−Ｏ−イソプロピリデン−５−Ｏ−トリチル−Ｄ
−リボフラノシル）−アセテートの収量は45ｇで
ある。この粗製物質は更に変換するのに適してい
るが、所望により溶出剤としてベンゼン−エーテ
ル（10：１）を用いてシリカゲルカラムクロマト
グラフイーによつて更に精製することができる。実施例２エチルホルメート（10ｇ、K₂CO₃上で蒸留）、
エチル２−（２・３−Ｏ−イソプロピリデン−５
−Ｏ−トリチル−Ｄ−リボフラノシル）−アセテ
ート（50.2ｇ、0.1モル）、無水エーテル（100
ml、LiAlH₄上で蒸留）および無水エタノール
（８ml）の混合物をNaH（５ｇ、0.1モル、鉱油中
50％）の２ml無水エタノールを含有する無水エー
テル（約150ml）中の懸濁液に約１時間で滴加す
る。（エーテル中の出発物質およびエチルホルメ
ートの混合物を加える直前にエタノール２mlを無
水エーテル約150mlに加える）。この混合物を室温
で一夜撹拌する。溶媒および過剰のエチルホルメ
ートを減圧下に室温（25℃）で蒸発させて除去す
る。粗エチル−２−ホルミル−２−（２・３−Ｏ
−イソプロピリデン−５−Ｏ−トリチル−Ｄ−リ
ボフラノシル）−アセテートナトリウムエノレー
ト55.2ｇからなる残渣は更に精製せずに次の段階
に直接使用する。実施例３実施例２で得られたナトリウムエノレート
（55.2ｇ、粗製）を水（500ml）に懸濁させ、この
懸濁液を80％HOACで中和し、次いでエーテル
（500ml×２）で抽出する。エーテル抽出液を水洗
し、乾燥（Na₂SO₄）し、エーテルを20℃以下で殆
んど乾燥するまで蒸発させる。残渣にジアゾメタ
ン（エーテル200ml中のＮ−メチル−N′−ニトロ
ソ−Ｎ−ニトロソグアニジン25ｇから発生させ
る）を加える。この混合物を室温で一夜放置し、
次いで蒸発させて粗生成物エチル−２−メトキシ
メチリデン−２−（２・３−Ｏ−イソプロピリデ
ン−５−Ｏ−トリチル−Ｄ−リボフラノシル）−
アセテートからなる褐色シロツプを得る。実施例４グアニジンHCl（15.0ｇ）をエタノール性ナト
リウムエトキシド（Na 4.6ｇを無水エタノール
200mlに溶解して製造）に加え、混合物を室温で
10分間撹拌し、次いでこの混合物を実施例２で製
造した粗製エノレート55.2ｇの無水エタノール
（100ml）溶液に加える。反応混合物を還流下に24
時間加熱し、氷浴中で冷却し、注意してINHClで
中和する（PH6.8〜７）。1NHClを加えている間
に、少量の生成物が沈澱する。水を加えて完全に
沈澱させる。上澄液を傾瀉し残渣の褐色シロツプ
をベンゼン（約100ml）に溶解し、乾燥
（Na₂SO₄）し、溶出剤としてベンゼン−エーテル
（30：１）を用いてシリカゲルＧ（約700ｇ）のカ
ラムでクロマトグラフイーしすべての不明の副生
成物を除去する。１の画分を集め、各画分を薄
層クロマトグラフイーでチエツクをする。最後
に、カラムをベンゼン−MeOH（19：１）で洗浄
する。溶媒を蒸発させた後に得られる粗製シロツ
プ（約７ｇ）をメタノールに取り、混合物を10分
間還流させる。結晶が生成しはじめる。（注意：
突沸！！）。冷却後、結晶（2.7ｇ）を別し５−
（２・３−Ｏ−イソプロピリデン−５−Ｏ−トリ
チル−Ｄ−リボフラノシル）−イソシトシンを分
析的に純粋な形でアルフア−アノマーとして得
る。融点251〜253℃ 微量分析（C₃₁H₃₁N₃O₅）。計算値：Ｃ、70.86；Ｈ、5.90；Ｎ、8.00、実測
値：Ｃ、70.85；Ｈ、5.81；Ｎ、7.78。 UV λmax（エタノール）291mm （PH12）277mm （PH１）259mm。実施例５５−（２・３−Ｏ−イソプロピリデン−５−Ｏ
−トリチル−Ｄ−リボフラノシル）−イソシトシ
ン混合アノマーからなる組製シロツプ（約７ｇ）
を10％メタノール性塩化水素50mlに溶解し、この
混合物を室温で一夜撹拌する。沈澱する結晶（プ
ソイド−イソシチジン・HCl760mg）を過し
液（アルフア−アノマーを含有）を蒸発乾固す
る。残渣（エタノールと共蒸発を数回行つて痕跡
の水を除去した後）を10％メタノール性塩化水素
30mlに溶解する。その後２週間の間にプソイド−
イソシチジン・HCl430mgが晶出する。ベータ−アノマー・HCl：融点215〜216℃（分解）。〔α〕^２５ _Ｄ＋120（Ｃ0.1、水）。 UV λmax（PH１）262（ε7800）（PH７）288（ε5700）（PH12）277（ε7340）。 pKa3.72±0.05および8.97±0.05。アルフア−アノマー・HCl：融点182〜183℃（分解）。〔α〕^２５ _Ｄ−164（Ｃ0.1、水）。 UV λmax（PH１）262（ε7470）（PH７）290（ε3890）および270（3980）（PH12）277（ε7170） pKa3.92±0.05および9.12±0.05。元素分析（C₉H₁₄ClN₃O₅）計算値：Ｃ、38.64；Ｈ、5.02；Ｎ、15.02；
Cl、12.70、実測値：Ｃ、38.81；Ｈ、5.12；Ｎ、
14.88；Cl、12.91。元素分析（C₉H₁₄ClN₃O₅）計算値：Ｃ、38.74；Ｈ、5.10；Ｎ、14.91；
Cl、12.82。実施例６実施例４および５に類似して、実施例３の生成
物エチル−２−メトキシメチリデン−２−（２・
３−Ｏ−イソプロピリデン−５−Ｏ−トリチル−
Ｄ−リボフラノシル）アセテートはプソイド−イ
ソシチジン塩酸塩に変換される。

Claims

【特許請求の範囲】１プソイド−イソシチジンおよびその酸付加
塩。２プソイド−イソシチジンベータ−アノマーで
ある特許請求の範囲第１項記載のプソイド−イソ
シチジンおよびその酸付加塩。３プソイド−イソシチジンベータ−アノマー塩
酸塩である特許請求の範囲第１項記載のプソイド
−イソシチジンおよびその酸付加塩。４プソイド−イソシチジンアルフア−アノマー
である特許請求の範囲第１項記載のプソイド−イ
ソシチジンおよびその酸付加塩。５プソイド−イソシチジンアルフア−アノマー
を低級アルカノール性鉱酸と反応させ、鉱酸付加
塩としてプソイド−イソシチジンベータ−アノマ
ーを溶液から結晶させることを特徴とするプソイ
ド−イソシチジンベータ−アノマーの製造法。６低級アルカノール性鉱酸がメタノール性塩化
水素である特許請求の範囲第５項記載の製造法。７ (A) ２・３−Ｏ−低級アルキリデン−５−ト
リチル−Ｄ−リボフラノースを（カルブ低級ア
ルコキシメチレン）トリフエニルフオスフオラ
ンと高温で反応させて低級アルキル−２−
（２・３−Ｏ−低級アルキリデン−５−Ｏ−ト
リチル−Ｄ−リボフラノシル）−アセテートを
製し； (B) (A)からの生成物を低級アルキルホルメートと
水素化アルカリ金属の存在下に反応させるか、
または反応させた後さらにジアゾ低級アルカン
と反応させて低級アルキル−２−（アルカリ金
属エノレート化ホルミルまたは低級アルコキシ
メチリデン）−２−（２・３−Ｏ−低級アルキリ
デン−５−Ｏ−トリチル−Ｄ−リボフラノシ
ル）−アセテートを製造し； (C) (B)からの生成物をグアニジンまたはその酸付
加塩と低級アルカノール性アルカリ金属低級ア
ルコキシドの存在下に反応させることの組合わ
せからなるプソイド−イソシチジンの製造法。８水素化アルカリ金属が水素化ナトリウム、低
級アルカノール性アルカリ金属低級アルコキシド
がエタノール性ナトリウムエトキシド、低級アル
キリデン基がイソプロピリデン、低級アルキル基
がエチル、低級アルコキシ基がエトキシおよびア
ルカリ金属エノレートがナトリウムエノレートで
ある特許請求の範囲第７項記載の製造法。