JPS59154994A - 発酵法によるアミノ酸の製造法 - Google Patents
発酵法によるアミノ酸の製造法Info
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- JPS59154994A JPS59154994A JP2886183A JP2886183A JPS59154994A JP S59154994 A JPS59154994 A JP S59154994A JP 2886183 A JP2886183 A JP 2886183A JP 2886183 A JP2886183 A JP 2886183A JP S59154994 A JPS59154994 A JP S59154994A
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- amino acids
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は発酵法によるアミノ酸の製造法に関する。さら
に詳しくは本発明はコリネ型グルタミン酸生産菌に属し
、Ｌ−アスパラギン酸を窒素源として利用して生育する
能力の増強されたアミノ酸生産性微生物を栄養培地に培
養して培養液中にアミノ酸を蓄積せしめ、該培養液から
アミノ酸を採取することを特徴とする発酵法によるアミ
ノ酸の製造法に関する。その目的とするところは、工業
的に有利なアミノ酸の製造法を提供することにある。
に詳しくは本発明はコリネ型グルタミン酸生産菌に属し
、Ｌ−アスパラギン酸を窒素源として利用して生育する
能力の増強されたアミノ酸生産性微生物を栄養培地に培
養して培養液中にアミノ酸を蓄積せしめ、該培養液から
アミノ酸を採取することを特徴とする発酵法によるアミ
ノ酸の製造法に関する。その目的とするところは、工業
的に有利なアミノ酸の製造法を提供することにある。
従来、発酵法によるアミノ酸の製造には、種々の変異株
が使用され、それらがアミノ酸の経済的な工業生産に貢
献している。しかしながら、近年アミノ酸の医薬・食品
・飼料その他への需要の増大によって益々その製造法の
改善が望まれている。
が使用され、それらがアミノ酸の経済的な工業生産に貢
献している。しかしながら、近年アミノ酸の医薬・食品
・飼料その他への需要の増大によって益々その製造法の
改善が望まれている。
本発明者らは、このような状況にかん扮み、アミノ酸生
産菌のアミノ酸生産能力の向上について鋭意研究を重ね
た結果、コリネ型グルタミン酸生産菌に属し、Ｌ−アス
パラギン酸を窒素源として利用して生育する能力の増強
された微生物を用いることによシ、アミノ酸の生産性が
著しく向上することを見い出した。このようにアミノ酸
生産性の向上する現象は、他の炭素源あるいは窒素源と
共に、Ｌ−アスパラギン酸又はその塩を発酵基質として
発酵培地に添加する場合に特に著しく認められる。
産菌のアミノ酸生産能力の向上について鋭意研究を重ね
た結果、コリネ型グルタミン酸生産菌に属し、Ｌ−アス
パラギン酸を窒素源として利用して生育する能力の増強
された微生物を用いることによシ、アミノ酸の生産性が
著しく向上することを見い出した。このようにアミノ酸
生産性の向上する現象は、他の炭素源あるいは窒素源と
共に、Ｌ−アスパラギン酸又はその塩を発酵基質として
発酵培地に添加する場合に特に著しく認められる。
とのような性質を有する微生物がすぐれたアミノ酸生産
性を有することの原因は不明であるが、Ｌ−アスパラギ
ン酸の細胞膜透過性の増大、あるいはＬ−アスパラギン
酸の代謝経路の増強が結果としてアミノ酸生成酵素類の
活性の増強をもたらすこと等が考えられる。
性を有することの原因は不明であるが、Ｌ−アスパラギ
ン酸の細胞膜透過性の増大、あるいはＬ−アスパラギン
酸の代謝経路の増強が結果としてアミノ酸生成酵素類の
活性の増強をもたらすこと等が考えられる。
従来、Ｌ−アスパラギン酸を窒素源として利用して生育
する能力の増強されたコリネ型グルタミン酸生産菌に属
する微生物を用いるアミノ酸の製造法は知られておらず
、本発明はかかる新規な知見に基づいて完成されたもの
である。
する能力の増強されたコリネ型グルタミン酸生産菌に属
する微生物を用いるアミノ酸の製造法は知られておらず
、本発明はかかる新規な知見に基づいて完成されたもの
である。
以下に本発明の詳細な説明する。
本発明に使用する微生物は、プリネ型グルタミン酸生産
菌に鵜し、アミノ酸生産性を有し、かつＬ−アスパラギ
ン酸を窒素源として利用して生育する能力の増強された
微生物である。
菌に鵜し、アミノ酸生産性を有し、かつＬ−アスパラギ
ン酸を窒素源として利用して生育する能力の増強された
微生物である。
コリネ型グルタミン酸生産菌とは、コリネバクテリウム
属、ブレビバクテリウム属、ミクロバクテリウム属等に
属するＬ−グルタミン酸生産菌を意味する。
属、ブレビバクテリウム属、ミクロバクテリウム属等に
属するＬ−グルタミン酸生産菌を意味する。
また、本発明にかかわる性質の微生物は、Ｌ−アスパラ
ギン酸を唯一の窒素源とする最少培地で、親株より速か
に生育する微生物の中から選択することができ、このよ
うな性質の微生物は通常の変異処理、あるいは細胞ね合
法あるいは、形質導入法、その他の遺伝子的技法によっ
ても得ることができる。さらに、該微生物は、他の性質
（例えば、各種栄養要求性、祭剤耐性、薬剤感受性、蓄
剤依存性等）を合せ持っていてもよい。
ギン酸を唯一の窒素源とする最少培地で、親株より速か
に生育する微生物の中から選択することができ、このよ
うな性質の微生物は通常の変異処理、あるいは細胞ね合
法あるいは、形質導入法、その他の遺伝子的技法によっ
ても得ることができる。さらに、該微生物は、他の性質
（例えば、各種栄養要求性、祭剤耐性、薬剤感受性、蓄
剤依存性等）を合せ持っていてもよい。
生産されるアミノ酸としては、Ｌ−リジン、Ｌ−スレオ
ニン、Ｌ−イソロイシン、Ｌ−アルギニン等があげられ
る。
ニン、Ｌ−イソロイシン、Ｌ−アルギニン等があげられ
る。
本発明に使用する微生物の具体例としては次のものがあ
げられる。
げられる。
すＩｈち、Ｌ−リジン生産菌としては、コリネバクテリ
ウム・グルタミクムＡＴＣＣ２１５４３（ホモ−！＝
リフ要求性−ロイシン要求性−ペニジリン耐性−チアリ
ジン耐性）から誘導しｆＣＲＬ−９−１４（微工研菌寄
第 ６？／ゲ号）及びブレビバクテリウム・ラクトフェ
ルメンタムＡＴＣＣ２１７５９（パントテン酸要求性、
チアリジン耐性）から誘導した＠６５２−２０（微工研
菌寄第 ６９／Ｓ号）を、Ｌ−スレオニン生産菌として
は、コリネバクテリウム・グルタミクムＡＴＣＣ２１６
６０（メチオニン要求性−チアリジン耐性−α−アミノ
−β−ヒドロキシ吉草酸耐性）から誘導した−４４０−
９（微工研菌寄ｇ ６９／ｉｓ号）及びブレビバクテ
リウム・フラブムＡＴＣ０２１２６９（α−アミノ−β
−ヒドロキシ吉草酸耐性）から誘導した璽３１１−６（
徽工研菌寄第 ６９７７ 号）を、Ｌ−イソロイシン生
産菌としてはコリネバクテリウム・グルタミクムＦＥＲ
Ｍ Ｐ−６８３０（アルギニン要求性−チアリジン耐性
）から誘導した−３９−２ｘ−１５（微工研菌寄第 ６
９／８号）をあげることができる。これらの菌株は、Ｌ
−アスパラギン酸を唯一の窒素源として含む最少培地で
、Ｌ−アスパラギン酸を窒素源として利用して速かに生
育できる点で親株と明確に区別することができる。
ウム・グルタミクムＡＴＣＣ２１５４３（ホモ−！＝
リフ要求性−ロイシン要求性−ペニジリン耐性−チアリ
ジン耐性）から誘導しｆＣＲＬ−９−１４（微工研菌寄
第 ６？／ゲ号）及びブレビバクテリウム・ラクトフェ
ルメンタムＡＴＣＣ２１７５９（パントテン酸要求性、
チアリジン耐性）から誘導した＠６５２−２０（微工研
菌寄第 ６９／Ｓ号）を、Ｌ−スレオニン生産菌として
は、コリネバクテリウム・グルタミクムＡＴＣＣ２１６
６０（メチオニン要求性−チアリジン耐性−α−アミノ
−β−ヒドロキシ吉草酸耐性）から誘導した−４４０−
９（微工研菌寄ｇ ６９／ｉｓ号）及びブレビバクテ
リウム・フラブムＡＴＣ０２１２６９（α−アミノ−β
−ヒドロキシ吉草酸耐性）から誘導した璽３１１−６（
徽工研菌寄第 ６９７７ 号）を、Ｌ−イソロイシン生
産菌としてはコリネバクテリウム・グルタミクムＦＥＲ
Ｍ Ｐ−６８３０（アルギニン要求性−チアリジン耐性
）から誘導した−３９−２ｘ−１５（微工研菌寄第 ６
９／８号）をあげることができる。これらの菌株は、Ｌ
−アスパラギン酸を唯一の窒素源として含む最少培地で
、Ｌ−アスパラギン酸を窒素源として利用して速かに生
育できる点で親株と明確に区別することができる。
次に、このような微生物を得る具体的な操作例を、コリ
ネバクテリウム属のＬ−インロイシン生産［１について
説明すれば次のとおシである。
ネバクテリウム属のＬ−インロイシン生産［１について
説明すれば次のとおシである。
なお、他の本発明使用菌も同様の手法で得ることができ
る。
る。
操作例
コリネバクテリウム・グルタミクムのＬ−インロイシン
生産菌ＦＥＲＭ ｐ−６ｓ３ｏを常法にｊ’） 、Ｎ
−メチル−Ｎ＋−ニトロ−Ｎ−ニトロソクアニジン処理
（２５０μｆ／ｍ１１３０℃で３０分間）した後、以下
に示すＬ−アスパラギン酸を唯一の窒素源として含む以
下に記述する最少寒天培地の表面に塗抹して３０℃で３
日間静置培養した。元来、親株であるＦＥＲＭ Ｐ−６
８３０は弱いＬ−アスパラギン酸資化能力を持っている
ので、寒天培地の表面全面に親株の細胞の弱い生育が認
められたが、その中で、１０−６〜１０−８の頻度で親
株よシ速かに生育する大きなコロニー状の変異株の発現
が認められた。これらの生育の速いコロニーを、同じく
Ｌ−アスパラギン【？を唯一の窒素源とする最少寒天培
地に塗抹して２日間３０℃で静置培養して、親株よシ明
らかに生育の速い株３０株を、シーアスパラギン酸を唯
一の窒素源として利用して生育する能力の増強された微
生物として分離した。なお、これらの菌株は、いずれも
Ｌ−アスパラギン酸の代シに硫酸アンモニウムを窒素源
として含む通常の最少寒天培地で、親株と同等の速さで
生育することを確認した。
生産菌ＦＥＲＭ ｐ−６ｓ３ｏを常法にｊ’） 、Ｎ
−メチル−Ｎ＋−ニトロ−Ｎ−ニトロソクアニジン処理
（２５０μｆ／ｍ１１３０℃で３０分間）した後、以下
に示すＬ−アスパラギン酸を唯一の窒素源として含む以
下に記述する最少寒天培地の表面に塗抹して３０℃で３
日間静置培養した。元来、親株であるＦＥＲＭ Ｐ−６
８３０は弱いＬ−アスパラギン酸資化能力を持っている
ので、寒天培地の表面全面に親株の細胞の弱い生育が認
められたが、その中で、１０−６〜１０−８の頻度で親
株よシ速かに生育する大きなコロニー状の変異株の発現
が認められた。これらの生育の速いコロニーを、同じく
Ｌ−アスパラギン【？を唯一の窒素源とする最少寒天培
地に塗抹して２日間３０℃で静置培養して、親株よシ明
らかに生育の速い株３０株を、シーアスパラギン酸を唯
一の窒素源として利用して生育する能力の増強された微
生物として分離した。なお、これらの菌株は、いずれも
Ｌ−アスパラギン酸の代シに硫酸アンモニウムを窒素源
として含む通常の最少寒天培地で、親株と同等の速さで
生育することを確認した。
これらの３０株をＬ−インロイシン発酵試験（実施例１
と同じ）にかけ、親株よシム−イソロイシン生産性のす
ぐれた菌株としてｌｊ３９−２１−１５を選択した。
と同じ）にかけ、親株よシム−イソロイシン生産性のす
ぐれた菌株としてｌｊ３９−２１−１５を選択した。
Ｌ−アスパラギン酸を唯一の窒素源とする最少培地の組
成ニゲルコースｏ、 ｓ ｙ／ｄｉ％Ｌ−７スパラギン
酸ソーダ０．１５ ｆ／ｄｉ ％ＫＨｚＰＯａ ０．１
５ ｆｌ／”’、Ｋ２ＨＰＯ４０，０５ｆ７’ｄｌ、Ｎ
ａＣＡ！ ０．０１ ｆ／ｃＬｉ、ＭｆＳＯ４−７Ｈｚ
ＯＯ，０５ｆ／ｄｉ、 ＣａＣ１ｘ ・２Ｈ＊Ｏ’１μ
ｙＡｌ 、ＭｎｃＪ 、。
成ニゲルコースｏ、 ｓ ｙ／ｄｉ％Ｌ−７スパラギン
酸ソーダ０．１５ ｆ／ｄｉ ％ＫＨｚＰＯａ ０．１
５ ｆｌ／”’、Ｋ２ＨＰＯ４０，０５ｆ７’ｄｌ、Ｎ
ａＣＡ！ ０．０１ ｆ／ｃＬｉ、ＭｆＳＯ４−７Ｈｚ
ＯＯ，０５ｆ／ｄｉ、 ＣａＣ１ｘ ・２Ｈ＊Ｏ’１μ
ｙＡｌ 、ＭｎｃＪ 、。
４Ｈ２０７μｆ／ｍｌ、ＦｅＳＯ４−７Ｈ２０１０μｙ
／ｍｔ、 チアミン−Ｈ（Ｖｏ、１μｆ／ｒｎ１．ビ
オチン３０μφ、Ｌ−アルギニ７− ＨＣＩ ５０１ｔ
ｆ／ｆｔｔｌ、寒天１．５ｆｊ／ｌｉｔ 。
／ｍｔ、 チアミン−Ｈ（Ｖｏ、１μｆ／ｒｎ１．ビ
オチン３０μφ、Ｌ−アルギニ７− ＨＣＩ ５０１ｔ
ｆ／ｆｔｔｌ、寒天１．５ｆｊ／ｌｉｔ 。
ｐＨ７，２（ＮａＯＨで言周Ｖ＞
これらの微生物を用いて、該当するアミノ酸を生産する
方法としては炭素源、窒素源、無機塩類、生育因子等を
含有する通常の栄巷培地を用いて常法により行うことが
できる。
方法としては炭素源、窒素源、無機塩類、生育因子等を
含有する通常の栄巷培地を用いて常法により行うことが
できる。
使用する炭素源としては、グルコース、シュークロース
、乳糖、糖蜜、デンプン、デンプン加水分解物などの炭
水化物、酢酸、プロピオン酸、ギ酸、乳酸、ピルビン酸
、フマール酸、リンゴ酸などの有機酸類、Ｌ−グルタミ
ン酸、Ｌ−アスパラギン等のアミノ酸姑、メタノール、
エタノール、ｎ−グロパノール等のアルコール類その他
炭化水素類が単独あるいは組み合わせて使用できる。
、乳糖、糖蜜、デンプン、デンプン加水分解物などの炭
水化物、酢酸、プロピオン酸、ギ酸、乳酸、ピルビン酸
、フマール酸、リンゴ酸などの有機酸類、Ｌ−グルタミ
ン酸、Ｌ−アスパラギン等のアミノ酸姑、メタノール、
エタノール、ｎ−グロパノール等のアルコール類その他
炭化水素類が単独あるいは組み合わせて使用できる。
窒素源としては、硫安、硝安、塩安、リン安、尿素、ア
ンモニア水、その他を使用できる。
ンモニア水、その他を使用できる。
無機塩類としてはリン酸２水素カリウム、リン酸１水素
カリウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、硫酸第
一鉄、硫酸マンガン、炭酸カルシウム等を使用できる。
カリウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、硫酸第
一鉄、硫酸マンガン、炭酸カルシウム等を使用できる。
また、栄養要求性を示す変異株の場合には、栄養物を純
標品もしくはそれらを含有する天然物として添加するこ
とが−できる。
標品もしくはそれらを含有する天然物として添加するこ
とが−できる。
本発明によれば培地中にＬ−アスパラギン酸又はその塩
を含有させることによシ、・目的アミノ酸の収量をさら
に増大させることができる。
を含有させることによシ、・目的アミノ酸の収量をさら
に増大させることができる。
かかるＬ−アスパラギン酸の塩としては特に限定はない
がナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩、カルシ
ウム塩、マグネシウム塩、アミン塩（例えばエチレンジ
アミン塩）、塩基性アミノ酸との塩（例えばオルニチン
、リジン等との均、 ） ＊が使用可能である。
がナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩、カルシ
ウム塩、マグネシウム塩、アミン塩（例えばエチレンジ
アミン塩）、塩基性アミノ酸との塩（例えばオルニチン
、リジン等との均、 ） ＊が使用可能である。
Ｌ−アスパラギン酸又はその塩の培地への添加量はアス
パラギン酸としてｏ、 ｏ ｓ ｙ／ｄ１以上が目的達
成のため必要であり、効果の限界及び経済性を考慮すれ
ば１０ ｙ／ｄ６以下であることが望ましい。もっとも
好適には０．１〜３ ｙ／ｄｉであることが好ましい。
パラギン酸としてｏ、 ｏ ｓ ｙ／ｄ１以上が目的達
成のため必要であり、効果の限界及び経済性を考慮すれ
ば１０ ｙ／ｄ６以下であることが望ましい。もっとも
好適には０．１〜３ ｙ／ｄｉであることが好ましい。
なお、Ｌ−アスパラギン酸又はその塩は炭素源や留素源
としても役立っていることはもちろんである。
としても役立っていることはもちろんである。
アミノ酸の発酵生産のための発酵条件としては、通気培
養がよく、発酵温度は２４〜３７℃、発酵日数は２〜７
日間である。発酵液のｐＨは５〜９の範囲に維持される
が、ｐＨＥ整には無機あるいは有機の酸あるいはアルカ
リ、さらには尿素、炭酸カルシウム、アンモニアガス、
リン酸マグネシウム等を使用することができる。
養がよく、発酵温度は２４〜３７℃、発酵日数は２〜７
日間である。発酵液のｐＨは５〜９の範囲に維持される
が、ｐＨＥ整には無機あるいは有機の酸あるいはアルカ
リ、さらには尿素、炭酸カルシウム、アンモニアガス、
リン酸マグネシウム等を使用することができる。
発酵液からのアミノ酸の単離は通常イオン交換樹脂法そ
の他の公知の方法を組み合わせて行われる。
の他の公知の方法を組み合わせて行われる。
以下に実施例を示す。
実施例１
コリネバクテリウム・グルタミクムのＬ−インロイシン
生産菌＠３９−２ｌ−１５（アルギニン要求性−チアリ
ジン剛性−Ｌ−アスパラギン酸資化性増強株）を、３０
０ｄ容三角フラスコ中（７）２（Ｍｔ／の種培地（グル
コースｓ ｆ／” ％ 酵母エキス１ｆ／′ｄ、１１ヘ
プト７１ Ｗ／ｄｉ 、尿素０．３ｆ／ｄｉ、ＮａＣＪ
Ｏ，２５ｆ／ＬＯ１１％コ−７・ステ４−７’ ・リ
−）） −ｏ、 ｓ ｙ／ｄｌ、ビオｆ ；／ ５０
Ｐ１／ｌ 、 ｐ Ｈ７，２）に接種し、２８℃で２４
時間、２１０ｒｐｍ。
生産菌＠３９−２ｌ−１５（アルギニン要求性−チアリ
ジン剛性−Ｌ−アスパラギン酸資化性増強株）を、３０
０ｄ容三角フラスコ中（７）２（Ｍｔ／の種培地（グル
コースｓ ｆ／” ％ 酵母エキス１ｆ／′ｄ、１１ヘ
プト７１ Ｗ／ｄｉ 、尿素０．３ｆ／ｄｉ、ＮａＣＪ
Ｏ，２５ｆ／ＬＯ１１％コ−７・ステ４−７’ ・リ
−）） −ｏ、 ｓ ｙ／ｄｌ、ビオｆ ；／ ５０
Ｐ１／ｌ 、 ｐ Ｈ７，２）に接種し、２８℃で２４
時間、２１０ｒｐｍ。
の回転数のロータリーシェーカー上で振盪培養した。こ
の種培養液２ｄを、２０＋１１４の発酵培地（１）（後
述）と、この発酵培地（１）にＬ−アスパラギン酸アン
モニウム０．５ ｆ／ｄｉを添加した２種類の発酵培地
に接種して、７２時間上記の種培養と同じ方法で培養し
た。対照として、親株であるコリネバクテリウム・グル
タミクムＦＥＲＭＰ−６８３０を同様に培養した。その
結果、蓄積したＬ−インロイシンの量は第１表に示スと
おシであシ、変異株ではＬ−イソロイシンの蓄積量が高
かった。
の種培養液２ｄを、２０＋１１４の発酵培地（１）（後
述）と、この発酵培地（１）にＬ−アスパラギン酸アン
モニウム０．５ ｆ／ｄｉを添加した２種類の発酵培地
に接種して、７２時間上記の種培養と同じ方法で培養し
た。対照として、親株であるコリネバクテリウム・グル
タミクムＦＥＲＭＰ−６８３０を同様に培養した。その
結果、蓄積したＬ−インロイシンの量は第１表に示スと
おシであシ、変異株ではＬ−イソロイシンの蓄積量が高
かった。
第１表
発酵培地（１）の組成：廃糖蜜（グルコース換算）８．
０シ弘、コーン・スチープ・リカー〇、５φ１１硫安２
シ４、尿素０．３ ｆ／ｄｉ、 ＫＦ（２ＰＯ４０，２
Ｐ／ｄｌ、Ｋ２ＨＰＯ，０，０５ｆｌ／ｄｉ、ＭｆＳＯ
４−７Ｈ２００，０５ｆ／ｄｉ。
０シ弘、コーン・スチープ・リカー〇、５φ１１硫安２
シ４、尿素０．３ ｆ／ｄｉ、 ＫＦ（２ＰＯ４０，２
Ｐ／ｄｌ、Ｋ２ＨＰＯ，０，０５ｆｌ／ｄｉ、ＭｆＳＯ
４−７Ｈ２００，０５ｆ／ｄｉ。
ＦｅＳＯ４−７Ｈ２０ｏ、ｏ ０１ ｆ／ｄｉ、ＭｎＣ
！、２−４Ｈ２００，’００１ｆ／ｄ１１ＺｎＳＯ，−
７Ｈ２０１Ｍ９／１３ 、ビオチア ５０ ｐＷ／１１
。
！、２−４Ｈ２００，’００１ｆ／ｄ１１ＺｎＳＯ，−
７Ｈ２０１Ｍ９／１３ 、ビオチア ５０ ｐＷ／１１
。
アルギニン塩酸塩５００μシ讐（ｐＨ７，４）実施例２
種菌としてコリネバクテリウム・グルタミクムのＬ−リ
ジン生産菌ＲＬ−９−１４（ＡＴＣＣ２１５４３から誘
導したＬ−アスノくラギン酸資化性増強株）およびブレ
ビバクテリウム・ラクトフェルメンタムのＬ−リジン生
産菌６５２−２０（ＡＴＣＣ２１７５９から誘導したＬ
−アスパラギン酸資化能増強株）を用いる。
ジン生産菌ＲＬ−９−１４（ＡＴＣＣ２１５４３から誘
導したＬ−アスノくラギン酸資化性増強株）およびブレ
ビバクテリウム・ラクトフェルメンタムのＬ−リジン生
産菌６５２−２０（ＡＴＣＣ２１７５９から誘導したＬ
−アスパラギン酸資化能増強株）を用いる。
これらの菌株を、グルコース４ ｆ／ｄｉ、ホＩＪ ヘ
ア’ ） ン２９／＋ｆＪ、ＫＭ２Ｐ０．０．１ ｓ
ｆ／ｄｉ、 ｘ、Ｈｐｏ４０、０５ ｆ／ｄｌ、 Ｍｆ
ＢＯ４・７ＨｘＯＯ，０’ ５ ｆ／ｄｉ、ビオチン５
０μｖ／ｌ、尿素ｏ、 ａ ｙ／ｄｉ 、酵母エキス０
．５ｆｌａｇ （ｐＨ７，２）の組成の種培地で３０℃
で２４時間振盪培養したものを、下記の組成の発酵培地
（２）とそれにＬ−アスパラギン酸アンモニウム０．５
ｔ／ｄｉを添加した培地の２通シの発酵培地に５ ％
（ｖ／ｖ）の割合で接種し、３０℃で４日間振盪培養
した。
ア’ ） ン２９／＋ｆＪ、ＫＭ２Ｐ０．０．１ ｓ
ｆ／ｄｉ、 ｘ、Ｈｐｏ４０、０５ ｆ／ｄｌ、 Ｍｆ
ＢＯ４・７ＨｘＯＯ，０’ ５ ｆ／ｄｉ、ビオチン５
０μｖ／ｌ、尿素ｏ、 ａ ｙ／ｄｉ 、酵母エキス０
．５ｆｌａｇ （ｐＨ７，２）の組成の種培地で３０℃
で２４時間振盪培養したものを、下記の組成の発酵培地
（２）とそれにＬ−アスパラギン酸アンモニウム０．５
ｔ／ｄｉを添加した培地の２通シの発酵培地に５ ％
（ｖ／ｖ）の割合で接種し、３０℃で４日間振盪培養
した。
対照として、親株であるＡＴＣＣ２１５４３とＡＴＣＣ
２１７５９を用いて、同様に培養した。
２１７５９を用いて、同様に培養した。
その結果、得られたＬ−リジン蓄積量は第２表に示すと
おシであった。
おシであった。
発酵培地（２）の組成：糖蜜（グルコース換算）９ ｆ
／ｄｉ、大豆粕硫酸分解物（大豆粕換算） ２ ％ｌ、
ＫＨ２ＰＯ４０，０７ｆｙ’ｄｔ、 ＭｆＳＯ，・７Ｈ
，００，０５−１尿素（Ｊ、 ｓ ｙ／ｄｉ 、硫安０
５シ依、ＣａＣＯ３２ｆ／ｄｌ （ｐＨ７，５、アンモ
ニア中和） 第２表 実施例３ 種菌としては、コリネバクテリウム・グルタミクムのＬ
−スレオニン生産菌４４０−９（ＡＴＣＣ２１６６０か
ら誘導したＬ−アスパラギン酸資化能増強株）及びブレ
ビバクテリウム・フラバムのＬ−スレオニン生ＡＭ３１
１−６（ＡＴＣＣ２１２６９から誘導したＬ−アスパラ
ギン酸資化能増強株）を用いる。
／ｄｉ、大豆粕硫酸分解物（大豆粕換算） ２ ％ｌ、
ＫＨ２ＰＯ４０，０７ｆｙ’ｄｔ、 ＭｆＳＯ，・７Ｈ
，００，０５−１尿素（Ｊ、 ｓ ｙ／ｄｉ 、硫安０
５シ依、ＣａＣＯ３２ｆ／ｄｌ （ｐＨ７，５、アンモ
ニア中和） 第２表 実施例３ 種菌としては、コリネバクテリウム・グルタミクムのＬ
−スレオニン生産菌４４０−９（ＡＴＣＣ２１６６０か
ら誘導したＬ−アスパラギン酸資化能増強株）及びブレ
ビバクテリウム・フラバムのＬ−スレオニン生ＡＭ３１
１−６（ＡＴＣＣ２１２６９から誘導したＬ−アスパラ
ギン酸資化能増強株）を用いる。
これらの菌株を、実施例２と同様の方法で雅培養して、
下記の組成の発酵培地（３）とそれにＬ−アスパラギン
酸アンモニウム０．５η〃ヲ籏加した培地の２通漫の発
酵培地に接種して培養した結果、第３表に示すとおシの
結果を得た。・発酵培地（３）の組成ニゲルコース８Ｖ
瀉、硫安２ ｇｚｇ、 ＫＨ２ＰＯ４０，０５ｔ／ｄｉ
、 Ｋ、ＨＰＯ４０，０５ｇ／＃。
下記の組成の発酵培地（３）とそれにＬ−アスパラギン
酸アンモニウム０．５η〃ヲ籏加した培地の２通漫の発
酵培地に接種して培養した結果、第３表に示すとおシの
結果を得た。・発酵培地（３）の組成ニゲルコース８Ｖ
瀉、硫安２ ｇｚｇ、 ＫＨ２ＰＯ４０，０５ｔ／ｄｉ
、 Ｋ、ＨＰＯ４０，０５ｇ／＃。
ＭｆＳＯ，・７Ｈ２００，１ｆ／ｄｉ 、 ＦｅＳ○、
−７Ｈ，ＯＯ，００１ｒ／＃、Ｍｎ５ｏ、 −４Ｈ２６
０，ｏ ｏ １ｙ、ｍ 、Ｌ−メチオニン１５０μυ匂
、ビオチン１００μｆ／ｌ 、 ＣａＣＯ３２ｆ／ｄｌ
（Ｉ）Ｈ７，４） 第 ３ 表
−７Ｈ，ＯＯ，００１ｒ／＃、Ｍｎ５ｏ、 −４Ｈ２６
０，ｏ ｏ １ｙ、ｍ 、Ｌ−メチオニン１５０μυ匂
、ビオチン１００μｆ／ｌ 、 ＣａＣＯ３２ｆ／ｄｌ
（Ｉ）Ｈ７，４） 第 ３ 表
Claims (5)
- （１） コリネ型グルタミン酸生産菌に属し、Ｌ−ア
スパラギン酸を（１素源としてオｌ用して生育する能力
の増強されたアミノ酸生産性微生物を栄養培地に培養し
て培養液中にアミノ酸を蓄積せしめ、該培養液からアミ
ノ酸を採取することを特徴とする発酵法によるアミノ酸
の製造法。 - （２） 栄養培地がＬ−アスパラギン酸又はその塩を
含有することを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の
アミノ酸の製造法。 - （３）アミノ酸生産性微生物がコリネパクテリウムハ、
プレビバｊチリウム属又はミクロバクテリウム属に属し
製造されるアミノ酸がＬ−リシン、Ｌ−スレオニン、Ｌ
−イソロイシン又はＬ−アルギニンである特許請求の範
囲第１項又は第２項記載のアミノ酸の製造法。 - （４）アミノ酸生産性微生物がコリネバクテリウム属又
はブレビバクテリウム属に属する微生物であシ、製造さ
れるアミノ酸がＬ−リジン又はＬ−スレオニンである特
許請求の範囲第３項記載のアミノ酸の製造法。 - （５）アミノ酸生産性微生物がコリネバクテリウム属に
属する微生物であシ、製造されるアミノ酸がＬ−インロ
イシンである特許請求の範囲第３項記載のアミノ酸の製
造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2886183A JPS59154994A (ja) | 1983-02-23 | 1983-02-23 | 発酵法によるアミノ酸の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2886183A JPS59154994A (ja) | 1983-02-23 | 1983-02-23 | 発酵法によるアミノ酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59154994A true JPS59154994A (ja) | 1984-09-04 |
| JPH0456596B2 JPH0456596B2 (ja) | 1992-09-08 |
Family
ID=12260155
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2886183A Granted JPS59154994A (ja) | 1983-02-23 | 1983-02-23 | 発酵法によるアミノ酸の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59154994A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2658205A1 (fr) * | 1990-02-15 | 1991-08-16 | Ajinomoto Kk | Procede pour la production simultanee d'un aminoacide basique et d'un aminoacide acide par fermentation. |
-
1983
- 1983-02-23 JP JP2886183A patent/JPS59154994A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2658205A1 (fr) * | 1990-02-15 | 1991-08-16 | Ajinomoto Kk | Procede pour la production simultanee d'un aminoacide basique et d'un aminoacide acide par fermentation. |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0456596B2 (ja) | 1992-09-08 |
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