JPS58155099A - コリンエステラ−ゼ定量用試薬 - Google Patents
コリンエステラ−ゼ定量用試薬Info
- Publication number
- JPS58155099A JPS58155099A JP57039654A JP3965482A JPS58155099A JP S58155099 A JPS58155099 A JP S58155099A JP 57039654 A JP57039654 A JP 57039654A JP 3965482 A JP3965482 A JP 3965482A JP S58155099 A JPS58155099 A JP S58155099A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- acetic acid
- determination
- choline
- kinase
- reagent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/44—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving esterase
- C12Q1/46—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving esterase involving cholinesterase
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/832—Bacillus
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、コリンエスデフーゼ（以下ＣｈＥトＩＩ称す
る。）の定量用試薬に関するものである。
る。）の定量用試薬に関するものである。
近年、酵素と疾病との関係についての研売が進むことに
より、疾病を診断するために生体内酵素の活性を測定す
ることが広く行われるようになっている。 Ｃｂｌｇは
そのような生体内酵素の一つであって、その活性が肝機
能と密接な関係を有していることから、肝疾患の診断に
広く利用されるよう区なっている。
より、疾病を診断するために生体内酵素の活性を測定す
ることが広く行われるようになっている。 Ｃｂｌｇは
そのような生体内酵素の一つであって、その活性が肝機
能と密接な関係を有していることから、肝疾患の診断に
広く利用されるよう区なっている。
ｌＩ在臨床検査寓などで用いられているＣｈｌの定量方
法には。
法には。
（１） ７−ｋ ？ルスリンを基！として、ｐＨ変化を
測定する方法。
測定する方法。
（２）基質にチオコリンエステ〃を用い、遊離するＳＲ
基を測定する方法。
基を測定する方法。
（８）ベンシイＶコリンなどを基質とし、遊離するコリ
ンをスリンオキＶ〆−ゼな用い、 Ｈ，Ｏ，とじて測定
する方法。
ンをスリンオキＶ〆−ゼな用い、 Ｈ，Ｏ，とじて測定
する方法。
などがある、これらのうち、（１）の方法が古くから検
査室ｃ］［り入れられている標準的な方法であるが、至
適ｐＢ１−維持できないとか、ｐＨ変化が必ずしも指示
薬の変色＠直と平行しない・ことなどのために一度が悪
＜ 、 （意Ｌ （１）の方法にとってかわられつつあ
るのが現状である。しかし、（荀では共存８Ｈ化合物に
よる誤差、（荀ではＨ，Ｏ，電量にまつわる諸関電や発
色系のフェノ−ｊｌｃよる妨害４などの間−があり、現
在のところいずれも満足できるまでには至っていない、
また、いずれも国際単位を呼称しながら正常範囲の数字
が大巾Ｃ＠なるといつた不部会な現象が認められ、検査
室を１乱に陥っている。したがって、標準化が叫ばれる
ようになり、４１一方法の見直しの機運がある。このよ
うな事情から、（ｌ）の方法を基礎とした。より高精度
の方法があれば、最も理想に近い方法であるということ
がで館る。
査室ｃ］［り入れられている標準的な方法であるが、至
適ｐＢ１−維持できないとか、ｐＨ変化が必ずしも指示
薬の変色＠直と平行しない・ことなどのために一度が悪
＜ 、 （意Ｌ （１）の方法にとってかわられつつあ
るのが現状である。しかし、（荀では共存８Ｈ化合物に
よる誤差、（荀ではＨ，Ｏ，電量にまつわる諸関電や発
色系のフェノ−ｊｌｃよる妨害４などの間−があり、現
在のところいずれも満足できるまでには至っていない、
また、いずれも国際単位を呼称しながら正常範囲の数字
が大巾Ｃ＠なるといつた不部会な現象が認められ、検査
室を１乱に陥っている。したがって、標準化が叫ばれる
ようになり、４１一方法の見直しの機運がある。このよ
うな事情から、（ｌ）の方法を基礎とした。より高精度
の方法があれば、最も理想に近い方法であるということ
がで館る。
そこで１本発明者らは、かかる観点Ｃ＠み。
ＣｈＥの定量が上記（１）の方法を基礎にしながら、短
時間で精度良く行える定量用試薬を提供することを目°
的として鋭意ｉ１ｆ！Ｉｌｌた結果、酢酸キナーゼを一
成分として含有せしめて酢酸キナーゼの酵素作用を利用
すると、上記の目的がすべて達成されることを見い出し
９本部＠ＩＣ１ｌ達した。
時間で精度良く行える定量用試薬を提供することを目°
的として鋭意ｉ１ｆ！Ｉｌｌた結果、酢酸キナーゼを一
成分として含有せしめて酢酸キナーゼの酵素作用を利用
すると、上記の目的がすべて達成されることを見い出し
９本部＠ＩＣ１ｌ達した。
すなわち１本発明は、アセチルコリンを含むコリンエス
デフニゼ走歇用試＠Ｃおいて、酢酸キナーゼとアデノ゛
Ｖン三リン酸を含有することを特徴とするコリンエステ
ラーゼ定量用試薬である。
デフニゼ走歇用試＠Ｃおいて、酢酸キナーゼとアデノ゛
Ｖン三リン酸を含有することを特徴とするコリンエステ
ラーゼ定量用試薬である。
本発明の試薬について説明すると、基質としてアセチル
コリンな使用し、生体試料中のＣｈＫを作用させると、
基質は酢酸とコリンとに分解する。
コリンな使用し、生体試料中のＣｈＫを作用させると、
基質は酢酸とコリンとに分解する。
ここで、ｐＨ変化を測定すれば、（１）の方法になるが
、ここに酢酸キナーゼが存在するとアデノＶンミリー酸
（以下ＡＴＰという、）を補基質として酢酸はアセチμ
リン酸に変化す、る、こつ反応式を王妃に示す。
、ここに酢酸キナーゼが存在するとアデノＶンミリー酸
（以下ＡＴＰという、）を補基質として酢酸はアセチμ
リン酸に変化す、る、こつ反応式を王妃に示す。
酢酸キナーゼ
酢酸＋ＡＴＰ アセチル１４
＋ アデノＶン二リン酸この酢酸キナーゼの作用は、酢
−のみに基質特異性を有するものであって、他の有機酸
、無機酸などが共存、していても作用するものではない
０次いで、ここで生成したアセチｗｇン酸又はアデノＶ
ン二リン酸（以ＦＡＤＰという、）を定量すればｃｈΣ
の定量は完了する。この際、ア竜チにりン酸１よ適当な
色源体と度広させれば、可視部の比色法で定量可能であ
り、ムＤＰはビシピン酸キナーゼと乳酸脱水素酵素との
共役酵素系を使用することにより定量可能である。特に
、後者の方法は全反応系を酵素系として行うものであり
、共存物質の参響を受けにくく極めて有利な方法である
。この場合の反応式を下ｉ３ｃ示す、 、６４４
秒−イ ＡＤＰ＋ホスホエノーＶピルビ糧□ンＡＴＰ＋ビＶビ４
和−１１−索 ６ビ糧＋１ｉＡＤＨ乳酸＋ＭＡＤ＋ （ただし、 ＭＡＤＨは還元層β−ニコチンアミドー
アゾ＝ン・ｖｌにフレオド。
＋ アデノＶン二リン酸この酢酸キナーゼの作用は、酢
−のみに基質特異性を有するものであって、他の有機酸
、無機酸などが共存、していても作用するものではない
０次いで、ここで生成したアセチｗｇン酸又はアデノＶ
ン二リン酸（以ＦＡＤＰという、）を定量すればｃｈΣ
の定量は完了する。この際、ア竜チにりン酸１よ適当な
色源体と度広させれば、可視部の比色法で定量可能であ
り、ムＤＰはビシピン酸キナーゼと乳酸脱水素酵素との
共役酵素系を使用することにより定量可能である。特に
、後者の方法は全反応系を酵素系として行うものであり
、共存物質の参響を受けにくく極めて有利な方法である
。この場合の反応式を下ｉ３ｃ示す、 、６４４
秒−イ ＡＤＰ＋ホスホエノーＶピルビ糧□ンＡＴＰ＋ビＶビ４
和−１１−索 ６ビ糧＋１ｉＡＤＨ乳酸＋ＭＡＤ＋ （ただし、 ＭＡＤＨは還元層β−ニコチンアミドー
アゾ＝ン・ｖｌにフレオド。
Ｎｈｆは、酸化■β−＝β−ニコチンアミド−アデニン
クレオドを表わす、 ）この）ＩＡＤＨの紫外部（５４
０ｎｍ）の吸４光度を測定することにより、極めて賽＆
に高精度の定量を行うことができる。また、ピルビン酸
キナーゼの作用により生、成ＡＤＰをムＴＰに再生する
ことができるので１．酢酸キナーゼの酢酸に対する作用
が増、強され極めて・高感度の測定がＩＪ亀となる。
クレオドを表わす、 ）この）ＩＡＤＨの紫外部（５４
０ｎｍ）の吸４光度を測定することにより、極めて賽＆
に高精度の定量を行うことができる。また、ピルビン酸
キナーゼの作用により生、成ＡＤＰをムＴＰに再生する
ことができるので１．酢酸キナーゼの酢酸に対する作用
が増、強され極めて・高感度の測定がＩＪ亀となる。
本発明でいう酢酸キナ−（とは、常用病であり、正式、
にはムＴＰ、：アセテートホス傘トツン、スフ、エラ１
．−ゼ（町Ｃ２，７，２，１）である。、本発明−を宍
施するだめの酢酸キナーゼとしては・微生物由来のもの
、動物組織由来のもや、など各種のものを使、用するこ
とができるか−、キナ−ぜ類は−ａに不安定であるので
、バチＳ／ス・ステアロサー叱フイｐス、ス＞Ｖブト−
！イ１−セス・ｔ−毛、アセチクム、アクロモバクタ−
Ｖ−２などのような好熱菌の産生する耐熱性の酢酸キナ
ーゼを使用するのが有利である。特にこれらの中では、
精製の春易さ、比活性の高さなどから、バチルス・スデ
アロナーモフイルスからのものが最も好重しい、また全
反応系を酵素、系として行う場合には、前記した゛よう
にピルビン酸キナ−、ゼ及び乳酸脱水素酵素が使用され
るが、これらの酵素も微生物由来のもの、動物組織、由
来のものなど各種のものを使用することができる。その
中でも安定性から、特にピ〃ビン酸キナーゼの場合、バ
チルス・ステアａサー４フイＡ／スやナーマス属の微生
物のような好熱菌の産生する耐熱性のものを使用するの
が有利である。
にはムＴＰ、：アセテートホス傘トツン、スフ、エラ１
．−ゼ（町Ｃ２，７，２，１）である。、本発明−を宍
施するだめの酢酸キナーゼとしては・微生物由来のもの
、動物組織由来のもや、など各種のものを使、用するこ
とができるか−、キナ−ぜ類は−ａに不安定であるので
、バチＳ／ス・ステアロサー叱フイｐス、ス＞Ｖブト−
！イ１−セス・ｔ−毛、アセチクム、アクロモバクタ−
Ｖ−２などのような好熱菌の産生する耐熱性の酢酸キナ
ーゼを使用するのが有利である。特にこれらの中では、
精製の春易さ、比活性の高さなどから、バチルス・スデ
アロナーモフイルスからのものが最も好重しい、また全
反応系を酵素、系として行う場合には、前記した゛よう
にピルビン酸キナ−、ゼ及び乳酸脱水素酵素が使用され
るが、これらの酵素も微生物由来のもの、動物組織、由
来のものなど各種のものを使用することができる。その
中でも安定性から、特にピ〃ビン酸キナーゼの場合、バ
チルス・ステアａサー４フイＡ／スやナーマス属の微生
物のような好熱菌の産生する耐熱性のものを使用するの
が有利である。
、本発明の試薬は、ｆ４．えば従来の試薬に酢酸キナ−
（とムＴＰとを含有せしめるが、その使用量としては９
例えばア竜チ〃コリン２０〜２００臘植、酢酸キナーゼ
５〜５０７１／ｄ、ムＴＰ１．５〜轟である。また、金
反臀、系を酵素系とする場合には、ピルビン酸キナ−（
５〜６０μ／ｄ、乳酸脱水素酵素１〜２０μ／ｄ、ホス
ホエノールピルビン酸０．１〜２ｍＭ、口ｔＤＨ０，１
＝ｌｌ１Ｍ１１度使用すればよい。
（とムＴＰとを含有せしめるが、その使用量としては９
例えばア竜チ〃コリン２０〜２００臘植、酢酸キナーゼ
５〜５０７１／ｄ、ムＴＰ１．５〜轟である。また、金
反臀、系を酵素系とする場合には、ピルビン酸キナ−（
５〜６０μ／ｄ、乳酸脱水素酵素１〜２０μ／ｄ、ホス
ホエノールピルビン酸０．１〜２ｍＭ、口ｔＤＨ０，１
＝ｌｌ１Ｍ１１度使用すればよい。
本発明の試薬を用いる場合９反応温度としては通常の臨
床化学検査などに用いる温度が好適であり９例えば５７
℃の温度で好都合に使用することができる。またｐＨと
しては１例えば６．５〜８．５特に７．０〜８．０が好
ましい、更に反応時間としては、数分程度でよい。
床化学検査などに用いる温度が好適であり９例えば５７
℃の温度で好都合に使用することができる。またｐＨと
しては１例えば６．５〜８．５特に７．０〜８．０が好
ましい、更に反応時間としては、数分程度でよい。
本発明の試薬を用いることにより、臨床上重要ナコリン
エスデフーゼの定量を極めて春易に、かつ短時間で精度
良く行うことができる。
エスデフーゼの定量を極めて春易に、かつ短時間で精度
良く行うことができる。
次に本発明を実施例により具体的に説明する。
実施例１
ＡＴＰ５ｍＭ、ホスホエノールピルビン酸１ｍＭ。
ＮＡＤＨ０，５ｍＭ、 種化マグネＶクム２０臘Ｍ、ピ
〃ビン酸キナーゼ１０μ／ｄ、乳酸脱水素酵素１０μ／
ｍ。
〃ビン酸キナーゼ１０μ／ｄ、乳酸脱水素酵素１０μ／
ｍ。
嘆化アセチ〃コリン５０ｍＭを含有するリン酸カリウム
緩衝液（５０ｍＭ、 ｐＨ７，２）にバチＶスーｘテア
ロサーモフイルスを給源とする酢酸キナ−（１０μ／ｄ
を加えて試薬液とした。
緩衝液（５０ｍＭ、 ｐＨ７，２）にバチＶスーｘテア
ロサーモフイルスを給源とする酢酸キナ−（１０μ／ｄ
を加えて試薬液とした。
次にこの試薬液に対し、全量０．５−となるようにして
種々の容量のコントロー〃血清を加え、５７℃で３分間
酵素反応を行ってＩＩＡＤＩＩの“５４０ｎｌｌ Ｋお
ける吸光度変化を測定した。その結果、第１図に示すよ
うにきれいな直線関係で標準曲線が得られた。
種々の容量のコントロー〃血清を加え、５７℃で３分間
酵素反応を行ってＩＩＡＤＩＩの“５４０ｎｌｌ Ｋお
ける吸光度変化を測定した。その結果、第１図に示すよ
うにきれいな直線関係で標準曲線が得られた。
第１図は９反応液０．５ｄ中のコントローＶ血清の量と
５４０ｎｍＣおける吸光度変化との関係を示す図で、横
軸にコントロール血清の°量、縦軸に吸光度変化を示す
。 特許出願人 ユニチカ株式会社 手続補正書（自発） 昭和５８年６月９日 特許庁長官殿 １、事件の表示 特願昭５７−３９６５４号 ２、発明の名称 コリンエステラーゼ定量用試葭 ３、補正をする者 事件との関係 特許出■人 住所 尼崎市東本町１丁目５０番地 〒５４１ 住所 大阪市東区北久太部町４丁目６８番地名称
ユ ＝ｑＰ 力 株式貴社 特許部電話 ０６−２８
１−５２５８ （ダイヤルイン）４π＼ ４、補正の対象 ！１１１１＋書の発明の詳細な説明の欄５、補正の内容 （１）明細書第６頁第１８行目、第２０行目、第７貫第
１行目、第１６行目及び第２０行目のｒ ｕ ／ ｗｌ
Ｊをｒｕ／ｓｌＪと訂正する。
５４０ｎｍＣおける吸光度変化との関係を示す図で、横
軸にコントロール血清の°量、縦軸に吸光度変化を示す
。 特許出願人 ユニチカ株式会社 手続補正書（自発） 昭和５８年６月９日 特許庁長官殿 １、事件の表示 特願昭５７−３９６５４号 ２、発明の名称 コリンエステラーゼ定量用試葭 ３、補正をする者 事件との関係 特許出■人 住所 尼崎市東本町１丁目５０番地 〒５４１ 住所 大阪市東区北久太部町４丁目６８番地名称
ユ ＝ｑＰ 力 株式貴社 特許部電話 ０６−２８
１−５２５８ （ダイヤルイン）４π＼ ４、補正の対象 ！１１１１＋書の発明の詳細な説明の欄５、補正の内容 （１）明細書第６頁第１８行目、第２０行目、第７貫第
１行目、第１６行目及び第２０行目のｒ ｕ ／ ｗｌ
Ｊをｒｕ／ｓｌＪと訂正する。
Claims (1)
- （１）アセチμコリンを含むコリンエメテツーセ定量用
試ｌＩｃおいて、酢酸キナーゼとアデノＶンミリン酸を
含有することを特徴とするコリンニステラー４５Ｉ！量
用試鶏。 （！）酢酸キナーゼが、耐熱性の酢酸キナーゼである特
許請求の範囲第１項お載の試薬。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57039654A JPS58155099A (ja) | 1982-03-12 | 1982-03-12 | コリンエステラ−ゼ定量用試薬 |
| DE8383301381T DE3381569D1 (de) | 1982-03-12 | 1983-03-14 | Reagenz zum nachweis von cholinesterase. |
| US06/474,940 US4596772A (en) | 1982-03-12 | 1983-03-14 | Reagent for assaying cholinesterase |
| EP83301381A EP0089210B1 (en) | 1982-03-12 | 1983-03-14 | Reagent for assaying cholinsterase |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57039654A JPS58155099A (ja) | 1982-03-12 | 1982-03-12 | コリンエステラ−ゼ定量用試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58155099A true JPS58155099A (ja) | 1983-09-14 |
| JPH026520B2 JPH026520B2 (ja) | 1990-02-09 |
Family
ID=12559067
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57039654A Granted JPS58155099A (ja) | 1982-03-12 | 1982-03-12 | コリンエステラ−ゼ定量用試薬 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4596772A (ja) |
| EP (1) | EP0089210B1 (ja) |
| JP (1) | JPS58155099A (ja) |
| DE (1) | DE3381569D1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6131099A (ja) * | 1984-07-25 | 1986-02-13 | Unitika Ltd | コリンエステラ−ゼ定量用試薬 |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0624515U (ja) * | 1992-07-22 | 1994-04-05 | 洋次 國本 | 傘入れ袋 |
| DK1133571T3 (da) | 1998-11-23 | 2006-10-23 | Proteome Sciences Inc | Fremgangsmåder og sammensætning til smertebehandling |
| GB9902659D0 (en) | 1999-02-05 | 1999-03-31 | Microbiological Res Authority | Assay with reduced background |
| US20080050762A1 (en) * | 2001-02-13 | 2008-02-28 | Corey Michael J | Methods and compositions for coupled luminescent assays |
| DE10124799A1 (de) * | 2001-05-21 | 2002-11-28 | Basf Ag | Nachweisverfahren zur Identifizierung von Hydrolasen |
| EP2971280B1 (en) | 2013-03-15 | 2018-08-29 | Arizona Board of Regents on behalf of Arizona State University | Biosensor microarray compositions and methods |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5831194B2 (ja) * | 1979-05-23 | 1983-07-04 | ユニチカ株式会社 | 酢酸キナ−ゼ含有量の高い菌体の製造法 |
| EP0029976B1 (en) * | 1979-11-22 | 1985-01-23 | Unitika Ltd. | A biologically pure culture of strain ifo 14093 and a process for producing an intracellular component herefrom |
| JPS6016231B2 (ja) * | 1979-11-22 | 1985-04-24 | ユニチカ株式会社 | 耐熱性酢酸キナ−ゼの製造法 |
| JPS6154992A (ja) * | 1984-08-27 | 1986-03-19 | 株式会社日立製作所 | 冊子の自動ペ−ジ替え装置 |
-
1982
- 1982-03-12 JP JP57039654A patent/JPS58155099A/ja active Granted
-
1983
- 1983-03-14 EP EP83301381A patent/EP0089210B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-03-14 US US06/474,940 patent/US4596772A/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-03-14 DE DE8383301381T patent/DE3381569D1/de not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6131099A (ja) * | 1984-07-25 | 1986-02-13 | Unitika Ltd | コリンエステラ−ゼ定量用試薬 |
| JPH0573400B2 (ja) * | 1984-07-25 | 1993-10-14 | Unitika Ltd |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE3381569D1 (de) | 1990-06-21 |
| EP0089210A2 (en) | 1983-09-21 |
| US4596772A (en) | 1986-06-24 |
| JPH026520B2 (ja) | 1990-02-09 |
| EP0089210A3 (en) | 1984-10-31 |
| EP0089210B1 (en) | 1990-05-16 |
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