JPH10291926A

JPH10291926A - プロテアーゼ阻害剤

Info

Publication number: JPH10291926A
Application number: JP9117634A
Authority: JP
Inventors: Akira Ito; 明伊藤; Yuzo Yoshida; 雄三吉田
Original assignee: Shiseido Co Ltd
Current assignee: Shiseido Co Ltd
Priority date: 1997-04-21
Filing date: 1997-04-21
Publication date: 1998-11-04

Abstract

(57)【要約】【課題】プロテアーゼ阻害作用に優れ、種々の皮膚疾
患、肌荒れ、荒れ性等の改善に優れた効果を有する新規
なプロテアーゼ阻害剤を提供すること。【解決手段】キク科ヨモギ属カワラヨモギの抽出物を
含有することを特徴とするプロテアーゼ阻害剤である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明はキク科ヨモギ属カワ
ラヨモギの抽出物を配合したプロテアーゼ阻害剤に関
し、さらに詳しくは、患部においてプロテアーゼの活性
変化が認められる接触性皮膚炎、乾癬、尋常性天疱瘡、
先天性水疱瘡、その他の肌荒れ、荒れ性等の皮膚疾患の
改善、もしくは止血剤として利用可能なセリンプロテア
ーゼ阻害活性を有するプロテアーゼ阻害剤に関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】これま
で種々の皮膚疾患や肌荒れに対して改善・予防効果を有
する治療薬、皮膚外用剤、化粧料等の有効成分として
は、抗炎症作用を有する、あるいは保湿効果の高いアミ
ノ酸や多糖、脂質、抽出エキス等が、その使用効果が特
徴的であるため用いられてきた。しかしながら、その効
果は必ずしも十分ではなく、より優れた薬効剤の開発が
期待されていた。

【０００３】一方、近年、種々の皮膚疾患の病像形成に
はプロテアーゼが関与していることが明らかにされつつ
ある。例えば炎症性異常角化性疾患の代表である乾癬で
は、その患部表皮において高いプラスミノーゲンアクチ
ベーター（Plasminiogen activator：ＰＡ）活性が認め
られている。ＰＡはセリンプロテアーゼの１つである
が、Ｈａｕｓｔｅｉｎは、乾癬表皮の特に錯角化部位に
強いＰＡ活性が存在することを報告し（Arch.Klin.Exp.
Dermatol；234,1969）、ＦｒａｋｉとＨｏｐｓｕ−Ｈａ
ｖｕは、乾癬鱗屑から高濃度の塩溶液を用いてＰＡ活性
を抽出した（Arch.Dermatol.Res ；256,1976）。また、
尋常性天疱瘡においては表皮細胞内で多量に合成された
ＰＡが、細胞外に存在するプラスミノーゲン（Plasmini
ogen）をプラスミン（Plasmin ）に転換し、これが細胞
間結合物質を消化することにより細胞間に組織液が貯溜
して表皮内水泡が形成されることが、インビトロ（in v
itro）の実験系において明らかにされている（Morioka
S.et al ：J.Invest.Dermatol ；76,1981 ）。

【０００４】また、プロテアーゼは、角質層形成など表
皮の正常な角化過程においても重要な役割を果たしてい
ると考えられており（Ogawa H.,Yoshiike T.：Int.J.De
rmatol；23,1984 ）、肌改善あるいは皮膚疾患の治療薬
として、プロテアーゼ阻害剤を用いる試みがなされるよ
うになってきている。

【０００５】そこで、本発明者等は以上のような現況に
鑑み、広く種々の物質についてプロテアーゼ阻害活性を
調べた結果、キク科（Compositae) ヨモギ属(Artemisi
a) カワラヨモギ(Artemisia capillaris Thunb)の抽出
物がプロテアーゼ阻害作用を有していることを見い出
し、本発明を完成するに至った。

【０００６】

【課題を解決するための手段】すなわち、本発明は、キ
ク科（Compositae) ヨモギ属(Artemisia) カワラヨモギ
(Artemisia capillaris Thunb)の抽出物を含有すること
を特徴とするプロテアーゼ阻害剤を提供するものであ
る。

【０００７】また、本発明は、前記抽出物の含有量がプ
ロテアーゼ阻害剤全量に対して０．００５〜１０．０重
量％である前記のプロテアーゼ阻害剤を提供するもので
ある。

【０００８】

【発明の実施の態様】以下、本発明の構成について詳述
する。本発明に用いられるカワラヨモギは、本州、四
国、九州、朝鮮半島、中国、台湾、ネパール、フィリピ
ンに分布し、河岸、海岸の砂地に多く見られる多年草
で、茎は下部がやや木質で直立し、多数分枝する。根生
葉は茎に密生し、羽状に細裂し、全体が柔らかい白毛で
覆われる。花期は９〜１０月で、緑黄色の頭花を大形の
円すい花序に多数密生する。本発明に用いられる抽出物
は上記、葉、茎、根、花等、全草を抽出溶媒と共に浸漬
または加熱還流した後、濾過し、濃縮して得られる。本
発明に用いられる抽出溶媒は、通常抽出に用いられる溶
媒であれば何でもよく、特にメタノール、エタノール等
のアルコール類、含水アルコール類、アセトン、酢酸エ
チルエステル等の有機溶媒を単独あるいは組み合わせて
用いることができる。

【０００９】本発明におけるカワラヨモギの抽出物は、
プロテアーゼ阻害剤全量中、乾燥物として０．００５〜
１０．０重量％、好ましくは０．０１〜５．０重量％含
有される。０．００５重量％未満であると、本発明でい
う効果が十分に発揮されず、１０．０重量％を超えると
製剤化が難しいので好ましくない。また、プロテアーゼ
阻害剤全量中に、５．０重量％を越えて配合してもさほ
ど大きな効果の向上はみられない。

【００１０】本発明において、プロテアーゼ阻害剤のプ
ロテアーゼとは、ペプチド結合の加水分解を触媒する酵
素の総称であり、このプロテアーゼはペプチダーゼおよ
びプロテイナーゼに分類される。前者はペプチド鎖のア
ミノ基末端やカルボキシル基末端の外側より、ペプチド
結合を切り離していく酵素で、後者はペプチド鎖内部の
特定の結合を切断する酵素である。後者プロテイナーゼ
は、その活性触媒基の種類により、さらにセリン系、シ
ステイン系、アスパラギン酸系、金属系の４つに大別さ
れ、それぞれに特異的な阻害剤が存在している。本発明
におけるプロテアーゼ阻害剤とは、このうちの特にセリ
ンプロテアーゼに対して阻害活性を示すことを特徴とし
ている。

【００１１】本発明のプロテアーゼ阻害剤には、通常化
粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、例え
ば、美白剤、保湿剤、酸化防止剤、油性成分、紫外線吸
収剤、界面活性剤、増粘剤、アルコール類、粉末成分、
色材、水性成分、水、各種皮膚栄養剤等を必要に応じて
適宜配合することができる。

【００１２】その他、エデト酸二ナトリウム、エデト酸
三ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリ
ウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸等の金属イオ
ン封鎖剤、カフェイン、タンニン、ベラパミル、トラネ
キサム酸およびその誘導体、甘草抽出物、グラブリジ
ン、火棘の果実の熱水抽出物、各種生薬、酢酸トコフェ
ロール、グリチルリチン酸およびその誘導体またはその
塩等の薬剤、ビタミンＣ、アスコルビン酸リン酸マグネ
シウム、アスコルビン酸グルコシド、アルブチン、コウ
ジ酸等の美白剤、グルコース、フルクトース、マンノー
ス、ショ糖、トレハロース等の糖類なども適宜配合する
ことができる。

【００１３】本発明のプロテアーゼ阻害剤とは、製剤の
形として利用可能であり、また、例えば、軟膏、クリー
ム、乳液、ローション、パック、浴用剤等の皮膚外用剤
の形態を有するプロテアーゼ阻害剤としても利用でき、
その剤型は特に問わない。

【００１４】

【実施例】次に実施例によって本発明をさらに詳細に説
明する。尚、本発明はこれにより限定されるものではな
い。配合量は重量％である。実施例に先立ち、本発明の
植物抽出物のプロテアーゼ阻害効果に関する試験方法と
その結果について説明する。代表的な２種類のセリンプ
ロテアーゼとして、プラスミンとトリプシンに対する阻
害活性を評価した。

【００１５】１．試料（プロテアーゼ阻害剤）の調製カワラヨモギの全草５０ｇを、室温で１週間５倍量のエ
タノールに浸漬し、抽出液を濃縮乾固し、エタノール抽
出物４．８ｇを得た。この抽出物をエタノールに１％溶
かし、本発明のプロテアーゼ阻害剤を製造し、この溶液
を希釈して濃度を調整し、これを用いて以下の実験を行
った。

【００１６】２．プラスミン阻害活性の測定フィブリン平板法にて阻害率％を求めた。すなわち０．
１％のプラスミノーゲン除去フィブリノーゲンを含むベ
ロナール緩衝液（０．１２５Ｍ−ＮａＯＨを含む２５ｍ
Ｍバルビタール酸ナトリウム水溶液、ｐＨ７．４）６ｍ
ｌを９ｃｍφシャーレに注ぎ、ここに１．０Ｍ−ＣａＣ
ｌ2 を０．２ｍｌと２５Ｕ／ｍｌのトロンビン０．１ｍ
ｌを加えて静かに混和し、１時間放置した。フィブリノ
ーゲンがフィブリンに変化することによって形成された
平板上に、５Ｕ／ｍｌのプラスミンと被検試料を２９：
１の割合で混合した混合物を、３７°Ｃで１０分間保温
した後２０μｌ添加し、そのシャーレを３７°Ｃで１８
時間放置した。対照として被検試料の代わりにメタノー
ルを用いて同様の操作を行い、その後、フィブリンが溶
解して形成された溶解円の面積を測定し、下記式により
プラスミン阻害率を求めた。阻害率（％）＝１−（被検試料の溶解円面積／対照の溶
解円面積）結果を「表１」に示した。

【００１７】３．トリプシン阻害活性の測定カゼインを基質として阻害率を求めた。すなわち、２ｍ
ｌのリン酸緩衝液にトリプシン４０μｇを溶かし、これ
に６．０％のカゼインを含む０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ７．４）を０．９ｍｌと、被検試料０．１ｍｌを加え
て３７°Ｃで１０分間保温した。その後、５％のトリク
ロル酢酸３ｍｌを添加して室温に１時間放置し、３，５
００ｒｐｍで１５分間遠心後、その上澄みの２８０μｍ
の吸光度を測定した。なお、以上の操作をＴｅｓｔ
（Ｔ）、トリプシンの添加の順序をトリクロル酢酸の後
に変えたものをＣｏｎｔｒｏｌ（Ｃ）、被検試料の代わ
りにエタノールを添加したものをＳｔａｎｄａｒｄ
（Ｓ）、Ｓｔａｎｄａｒｄのトリプシン添加の順序をト
リクロル酢酸の後に変えたものをＢｌａｎｋ（Ｂ）と
し、下記式によりトリプシン阻害率を求めた。結果を
「表１」に示した。また、比較例として、すでに肌荒れ
に対する適用が知られている植物であるショウガ科（Zi
ngiberaceae)のクンイット（Kunyit;Curcuma domestic
a) のエタノール抽出物についても上記と同様の試験を
行った。その結果を併せて「表１」に示す。

【００１８】

【表１】 ──────────────────────────────────── 抽出植物試料添加濃度阻害率（％） ──────────────────────────────────── （実施例１、２）プラスミントリプシン ──────────────────────────────────── カワラヨモギ 0.1 ％ 53.2 37.4 0.01％ 18.1 14.3 ──────────────────────────────────── （比較例１、２）プラスミントリプシンクンイット 0.1 ％ 7.8 0 0.01％ 5.7 0 ────────────────────────────────────

【００１９】「表１」から分かるように、本発明のカワ
ラヨモギの抽出物を配合した実施例は、クンイット抽出
物を配合した比較例と比較して、顕著なプロテアーゼ阻
害効果が認められた。

【００２０】「実施例３：肌荒れ改善クリーム」（処方）ステアリン酸５．０重量％ステアリルアルコール５．０イソプロピルミリステート２０．０グリセリンモノステアリン酸エステル３．０プロピレングリコール８．０カワラヨモギメタノール抽出物０．０５苛性カリ０．２亜硫酸水素ナトリウム０．０１防腐剤適量香料適量イオン交換水残余（製法）イオン交換水にプロピレングリコールとカワラ
ヨモギメタノール抽出物と苛性カリを加え溶解し、加熱
して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱融解
して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を徐々に加え、
全部加え終わってからしばらくその温度に保ち反応を起
こさせる。その後、ホモミキサーで均一に乳化し、よく
かきまぜながら３０℃まで冷却する。

【００２１】「実施例４：肌荒れ改善クリーム」（処方）ステアリン酸１．０重量％ステアリルアルコール８．０水添ラノリン２．０スクワラン６．０２−オクチルドデシルアルコール７．０ポリオキシエチレン（２５モル）セチルアルコールエーテル３．０グリセリンモノステアリン酸エステル２．０プロピレングリコール７．０カワラヨモギエタノール抽出物０．５亜硫酸水素ナトリウム０．０３エチルパラベン０．３香料適量イオン交換水残余（製法）イオン交換水にプロピレングリコールを加え、
加熱して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱
融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え予備
乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化した後、よくか
きまぜながら３０℃まで冷却する。

【００２２】「実施例５：肌荒れ改善クリーム」（処方）固形パラフィン５．０重量％ミツロウ１０．０ワセリン１５．０流動パラフィン４１．０グリセリンモノステアリン酸エステル２．０ポリオキシエチレン（２０モル）ソルビタンモノラウリン酸エステル２．０石けん粉末０．１硼砂０．２カワラヨモギアセトン抽出物１．０亜硫酸水素ナトリウム０．０３エチルパラベン０．３香料適量イオン交換水残余（製法）イオン交換水に石けん粉末と硼砂を加え、加熱
溶解して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱
融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相をかきまぜ
ながら徐々に加え反応を行う。反応終了後、ホモミキサ
ーで均一に乳化し、乳化後よくかきまぜながら３０℃ま
で冷却する。

【００２３】「実施例６：肌荒れ改善乳液」（処方）ステアリン酸２．５重量％セチルアルコール１．５ワセリン５．０流動パラフィン１０．０ポリオキシエチレン（１０モル）モノオレイン酸エステル２．０ポリエチレングリコール１５００３．０トリエタノールアミン１．０カルボキシビニルポリマー０．０５（商品名：カーボポール941 ，B.F.Goodrich Chemical company ）カワラヨモギ酢酸エチルエステル抽出物０．０１亜硫酸水素ナトリウム０．０１エチルパラベン０．３香料適量イオン交換水残余（製法）少量のイオン交換水にカルボキシビニルポリマ
ーを溶解する（Ａ相）。残りのイオン交換水にポリエチ
レングリコール１５００とトリエタノールアミンを加
え、加熱溶解して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混
合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を
加え予備乳化を行い、Ａ相を加えホモミキサーで均一乳
化し、乳化後よくかきまぜながら３０℃まで冷却する。

【００２４】「実施例７：肌荒れ改善乳液」（処方）マイクロクリスタリンワックス１．０重量％密ロウ２．０ラノリン１８．０流動パラフィン８．０スクワラン５．０ソルビタンセスキオレイン酸エステル４．０ポリオキシエチレン（２０モル）ソルビタンモノオレイン酸エステル１．０プロピレングリコール７．０カワラヨモギメタノール抽出物０．０５亜硫酸水素ナトリウム０．０１エチルパラベン０．３香料適量イオン交換水残余（製法）イオン交換水にプロピレングリコールを加え、
加熱して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し、加
熱融解して７０℃に保つ（油相）。油相をかきまぜなが
らこれに水相を徐々に加え、ホモミキサーで均一に乳化
する。乳化後よくかきまぜながら３０℃まで冷却する。

【００２５】「実施例８：肌荒れ改善ゼリー」（処方）９５％エチルアルコール１０．０重量％ジプロピレングリコール１５．０ポリオキシエチレン（５０モル）オレイルアルコールエーテル２．０カルボキシビニルポリマー１．０（商品名：カーボポール940 ，B.F.Goodrich Chemical company ）苛性ソーダ０．１５Ｌ−アルギニン０．１カワラヨモギ５０％エタノール水溶液抽出物３．０ 2-ヒドロキシ-4- メトキシベンゾフェノンスルホン酸ナトリウム０．０５エチレンジアミンテトラアセテート・３ナトリウム・２水０．０５メチルパラベン０．２香料適量イオン交換水残余（製法）イオン交換水にカーボポール９４０を均一に溶
解し、一方、９５％エタノールにカワラヨモギ５０％エ
タノール水溶液抽出物、ポリオキシエチレン（５０モ
ル）オレイルアルコールエーテルを溶解し、水相に添加
する。次いで、その他の成分を加えたのち苛性ソーダ、
Ｌ−アルギニンで中和させ増粘する。

【００２６】「実施例９：肌荒れ改善美容液」（処方）（Ａ相）９５％エチルアルコール１０．０重量％ポリオキシエチレン（２０モル）オクチルドデカノール１．０パントテニールエチルエーテル０．１カワラヨモギメタノール抽出物０．０２メチルパラベン０．１５（Ｂ相）水酸化カリウム０．１（Ｃ相）グリセリン５．０ジプロピレングリコール１０．０亜硫酸水素ナトリウム０．０３カルボキシビニルポリマー０．２（商品名：カーボポール940 ，B.F.Goodrich Chemical company ）精製水残余（製法）Ａ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ｃ相にＡ
相を加えて可溶化する。次いでＢ相を加える。

【００２７】「実施例１０：肌荒れ改善パック」（処方）（Ａ相）ジプロピレングリコール５．０重量％ポリオキシエチレン（６０モル）硬化ヒマシ油５．０（Ｂ相）カワラヨモギエタノール抽出物１．５オリーブ油５．０酢酸トコフェロール０．２エチルパラベン０．２香料０．２（Ｃ相）亜硫酸水素ナトリウム０．０３ポリビニルアルコール１３．０（ケン化度９０、重合度２，０００）エタノール７．０精製水残余（製法）Ａ相、Ｂ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ａ
相にＢ相を加えて可溶化する。次いでこれをＣ相に加え
たのち充填を行う。

【００２８】「実施例１１：肌荒れ改善固形ファンデーション」（処方）タルク４３．１重量％カオリン１５．０セリサイト１０．０亜鉛華７．０二酸化チタン３．８黄色酸化鉄２．９黒色酸化鉄０．２スクワラン８．０イソステアリン酸４．０モノオレイン酸ＰＯＥソルビタン３．０オクタン酸イソセチル２．０カワラヨモギ５０％メタノール抽出物１．０防腐剤適量香料適量（製法）タルク〜黒色酸化鉄の粉末成分をブレンダーで
十分混合し、これにスクワラン〜オクタン酸イソセチル
の油性成分、カワラヨモギ５０％メタノール抽出物、防
腐剤、香料を加え良く混練した後、容器に充填、成型す
る。

【００２９】「実施例１２：肌荒れ改善乳化型ファンデ
ーション（クリームタイプ）」（処方）（粉体部）二酸化チタン１０．３重量％セリサイト５．４カオリン３．０黄色酸化鉄０．８ベンガラ０．３黒色酸化鉄０．２（油相）デカメチルシクロペンタシロキサン１１．５流動パラフィン４．５カワラヨモギエタノール抽出物５．０防腐剤適量香料適量（製法）タルク〜黒色酸化鉄の粉末成分をブレンダーで
十分混合し、これにスクワラン〜オクタン酸イソセチル
の油性成分、カワラヨモギエタノール抽出物、防腐剤、
香料を加え良く混練した後、容器に充填する。

【００３０】「実施例１３：肌荒れ改善乳化型ファンデーション（クリームタイプ）」（処方）（粉体部）二酸化チタン１０．３重量％セリサイト５．４カオリン３．０黄色酸化鉄０．８ベンガラ０．３黒色酸化鉄０．２（油相）デカメチルシクロペンタシロキサン１１．５流動パラフィン４．５ポリオキシエチレン変性ジメチルポリシロキサン４．０（水相）精製水５０．０１，３−ブチレングルコール４．５カワラヨモギエタノール抽出物０．３ソルビタンセスキオレイン酸エステル３．０防腐剤適量香料適量（製法）水相を加熱撹拌後、十分に混合粉砕した粉体部
を添加してホモミキサー処理する。更に加熱混合した油
相を加えてホモミキサー処理した後、撹拌しながら香料
を添加して室温まで冷却する。

【００３１】

【発明の効果】本発明のプロテアーゼ阻害剤は、プロテ
アーゼ阻害作用に優れ、種々の皮膚疾患、肌荒れ、荒れ
性等の改善に優れた効果を有することが期待される。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】キク科（Compositae) ヨモギ属(Artemis
ia) カワラヨモギ(Artemisia capillaris Thunb)の抽出
物を含有することを特徴とするプロテアーゼ阻害剤。
【請求項２】前記抽出物の含有量がプロテアーゼ阻害
剤全量に対して０．００５〜１０．０重量％である請求
項１記載のプロテアーゼ阻害剤。