JPH10245395A - Antipruritic derived from kochiae fructus - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To prepare antipruritic derived from Kochiae fructus (a dried fruit of Kochia scoparia (L.) Schrad) having excellent antihistaminic activities, and further antiallergic and antiinflammatory activities, hardly causing side effects by using an alcohol extract of the Kochiae fructus as an active ingredient. SOLUTION: The objective antipruritic derived from Kochiae fructus having excellent antihistaminic activities and hardly causing side effect is obtained by formulating at least one kind of momordin Ic and 2'-O-β-D- glucopyranosylmomordin Ic. The momordin Ic and the 2'-O-β-D- glucopyranosylmomordin Ic are obtained by pulverizing the Kochiae fructus, thermally extracting the pulverized Kochiae fructus with 70% moisture ethanol, filtering the extract under heating, condensing the filtrate under reduced pressure, freeze-drying the condensed filtrate to provide a dried 70% ethanol extract, thermally extracting the dried 70% ethanol extract with methanol, obtaining a methanol extract from the extract by the same way, adding water to the methanol extract, extracting the methanol extract containing the added water with ethyl acetate, further extracting the water layer with n-butanol, and fractionating the n-butanol extract by a silica gel column chromatography to provide the momordin Ic and the 2'-O-β-D-glucopyranosylmomordin Ic.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は地膚子のアルコール
抽出エキス又はそのオレアナン系サポニン成分であるモ
モルジンＩｃ及び２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル
モモルジンＩｃの少なくともいずれか１種を有効成分と
する抗掻痒剤に関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to at least one of momorudin Ic and 2'-O-β-D-glucopyranosyl momorudin Ic, which are extracts of skin alcohol or their oleanane-based saponins. As an active ingredient.

【０００２】[0002]

【従来の技術および発明が解決しようとする課題】掻痒
あるいは痒みは多くの皮膚疾患にみられる特異的な自覚
症状であり、いろいろな原因に由来するが、その発症原
因は必ずしも明らかにされているわけではない。その誘
発原因のひとつとしてアレルギーが挙げられる。アレル
ギー反応はＩ〜ＩＶ型に分類されており、掻痒を誘発す
る代表的なものとしてＩ型（即時型）のじん麻疹やアト
ピー性皮膚炎とＩＶ型（遅延型）の薬疹やウルシなどに
よる接触性皮膚炎がある。”痒み”は掻きたくなる皮膚
の特殊な感覚で、皮膚科領域において上述のアトピー性
皮膚炎，老人性の乾燥肌，透析患者の掻痒などは極めて
深刻な病態である。また、掻痒は炎症の主徴候のひとつ
で、痛みの弱刺激とか、皮膚の痛覚受容体に隣接する掻
痒受容体への刺激とも言われており、軽度の炎症や炎症
の初期及びその終末期に伴うことが多い。掻く行為は血
行促進による改善作用の一つであるが、ときには皮膚の
損傷をきたし、細菌感染などにより原疾患の皮膚炎を増
悪させることがある。それ故、掻痒を抑えることは原疾
患の治療にも密接な関係がある。BACKGROUND OF THE INVENTION Pruritus or pruritus is a specific subjective symptom of many skin diseases and originates from various causes. Do not mean. One of the causes is allergy. Allergic reactions are classified into types I to IV, and are typically caused by type I (immediate type) urticaria or atopic dermatitis and type IV (delayed type) drug eruptions and urushi If you have contact dermatitis. "Itching" is a special sensation in the skin that makes you want to scratch, and in the dermatology field, the above-mentioned atopic dermatitis, senile dry skin, and pruritus in dialysis patients are extremely serious conditions. In addition, pruritus is one of the main signs of inflammation, and is also called weak irritation of pain or irritation to pruritic receptors adjacent to pain receptors on the skin. Often accompanied. Scratching is one of the improving effects by promoting blood circulation, but sometimes causes skin damage and exacerbates the dermatitis of the primary disease due to bacterial infection or the like. Therefore, suppressing pruritus is closely related to the treatment of the underlying disease.

【０００３】”痒み”の治療法は対症療法として、止痒
剤（抗掻痒剤）が局所的には外用剤として種々用いられ
ている。止痒剤はその種類も多く、掻痒に対してのみ有
効のものもあるが、むしろアレルギー、網内皮系、植物
神経あるいは内分泌系に影響し、更に消炎効果の結果痒
みを軽減させるものが多い。日常汎用されている止痒剤
には抗ヒスタミン剤があるが、他に抗プラスミン剤、Ｓ
Ｈ系製剤（還元グルタチオン，チオ硫酸ナトリウムな
ど）、ビタミン剤（Ｂ2 群) 、ホルモン剤、植物神経遮
断剤、肝機能亢進剤などがある。また、漢方薬にも有効
なものが知られている。本発明者らは生薬からの掻痒剤
の開発研究として、地膚子に抗掻痒作用があることを見
いだした。地膚子に抗掻痒作用があることはこれまで知
られていなかった。In the treatment of "itch", various antipruritic agents (antipruritic agents) are locally used as external preparations as symptomatic treatments. Many antipruritic agents are effective only against pruritus, but rather affect allergies, reticuloendothelial system, plant nerves, or endocrine systems, and in many cases reduce antipruritus as a result of the anti-inflammatory effect. Antihistamines are commonly used as antipruritic agents.
H-based preparations (reduced glutathione, sodium thiosulfate, etc.), vitamins (group B2), hormones, plant nerve blockers, liver function enhancers and the like. In addition, effective herbal medicines are known. The present inventors have found that there is an anti-pruritic effect on the dermis as a research for the development of a pruritus from crude drugs. It has not been known that the skin has an antipruritic effect.

【０００４】地膚子（じふし）はアカザ科(Chenopodiac
eae)のホウキギ(Kochia scoparia(L.) Schrad. (=Cheno
podium scoparia L.) の乾燥果実であり、その主な産地
は中国（河北，山西，河南，山東省などに主産）と韓国
である。地膚子は解毒，利尿薬として、淋病，小便不
利，水腫，脚気，湿瘡，疥癬などの掻痒に応用されてい
る〔難波恒雄著，原色和漢薬図鑑（上）２２８頁，
（株）保育社〕。その薬理作用については、水浸剤(1:
3) がin vitroでシェーンライン黄癬菌、オーズアン小
胞子菌などの皮膚真菌に対して抑制作用を有することが
知られている〔（株）小学館，中薬大辞典第二巻１１０
６頁〕。また、地膚子は皮膚糸状菌に対して発育阻止す
ること〔Cao, R. L.ら, Chin. J. Dermat. 5, 286-290
(1957)〕及びヒスタミン或いは塩化バリウムによって惹
起されるモルモットの摘出回腸の収縮を阻止することが
知られている〔Itokawa, H. ら, Shoyakugaku Zasshi 3
7, 223-228(1983) 〕。更に最近、地膚子には抗ＩＶ型
アレルギー作用があることが報告されている〔戴岳ら，
中国薬科大学学報 25, 44-48(1994)〕。[0004] Jiushi is a family of Chenopodiac.
kochia of eae) (Kochia scoparia (L.) Schrad. (= Cheno
podium scoparia L.) is a dried fruit, and its main production areas are China (mainly produced in Hebei, Shanxi, Henan, Shandong, etc.) and Korea. Dermatology has been applied as a detoxifying and diuretic to pruritus such as gonorrhea, piss disadvantages, edema, beriberi, eczema, and scabies.
(Childcare company). Regarding its pharmacological action, water immersion (1:
3) is known to have an inhibitory effect on skin fungi such as Schonlein's bacillus bacillus and Aozuan microspores in vitro [Shogakukan Co., Ltd .;
Page 6]. In addition, dermatophytes inhibit growth against dermatophytes [Cao, RL et al., Chin. J. Dermat. 5, 286-290.
(1957)] and is known to inhibit contraction of the isolated ileum of the guinea pig induced by histamine or barium chloride [Itokawa, H. et al., Shoyakugaku Zasshi 3].
7, 223-228 (1983)]. More recently, it has been reported that the skin has an anti-type IV allergic effect [Daidake et al.
Chinese Pharmaceutical University Journal 25, 44-48 (1994)].

【０００５】一方、地膚子の含有成分の研究がなされて
おり、地膚子にはトリテルペノイドサポニン，油１５％
が含まれており、そのオレアナン系サポニン成分である
モモルジンＩｃ(momordin Ic) ，２’−Ｏ−β−Ｄ−グ
ルコピラノシルモモルジンＩｃ(2'-O-β-D-glucopyrano
sylmomordin Ic) ，モモルジンＩＩｃ (momordin IIc)
など５種のトリテルペノイドサポニンが見出されている
〔Y. Wenら, Planta Medica, 61, 450-452(1995)〕。[0005] On the other hand, studies have been made on the components contained in the skin, and the skin contains triterpenoid saponin, 15% oil.
And its oleanane-based saponins, such as momordin Ic and 2′-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic (2′-O-β-D-glucopyrano).
sylmomordin Ic), momordin IIc
Five types of triterpenoid saponins have been found [Y. Wen et al., Planta Medica, 61, 450-452 (1995)].

【０００６】モモルジンＩｃ，２’−Ｏ−β−Ｄ−グル
コピラノシルモモルジンＩｃ及びモモルジンＩＩｃの化
学名と化学構造式は次の通りである。The chemical names and chemical structural formulas of momordin Ic, 2'-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic and momordin IIc are as follows.

【０００７】モモルジンＩｃ： ３β−（［Ｏ−β−Ｄ
−キシロピラノシル（１→３）−Ｏ−β−Ｄ−グルコピ
ラヌロノシル］オキシ）−オレアン−１２−エン−２８
−オイック アシッド（化１）[0007] Momordin Ic: 3β-([O-β-D
-Xylopyranosyl (1 → 3) -O-β-D-glucopyranuronosyl] oxy) -olean-12-ene-28
-Oic Acid

【０００８】[0008]

【化１】 Embedded image

【０００９】２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモモ
ルジンＩｃ（化２）[0009] 2'-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic

【００１０】[0010]

【化２】 Embedded image

【００１１】モモルジンＩＩｃ：３β−（［Ｏ−β−Ｄ
−キシロピラノシル（１→３）−Ｏ−β−Ｄ−グルコピ
ラヌロノシル］オキシ）−オレアン−１２−エン−２８
−オイック アシッド ２８−β−Ｄ−グルコピラノシ
ル エステル（化３）Momordin IIc: 3β-([O-β-D
-Xylopyranosyl (1 → 3) -O-β-D-glucopyranuronosyl] oxy) -olean-12-ene-28
-Oic Acid 28-β-D-glucopyranosyl ester

【００１２】[0012]

【化３】 Embedded image

【００１３】本発明の目的は、地膚子のアルコール抽出
エキス又はそのオレアナン系サポニン成分であるモモル
ジンＩｃ及び／又は２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシ
ルモモルジンＩｃを有効成分とする抗掻痒剤を提供する
ことにある。It is an object of the present invention to use as an active ingredient molmudin Ic and / or 2'-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic, which is an extract of skin alcohol or its oleanan saponin component. An object of the present invention is to provide an antipruritic agent.

【００１４】[0014]

【課題を解決するための手段】本発明者らは、地膚子の
アルコール抽出エキス及びそのサポニン成分であるモモ
ルジンＩｃと２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモモ
ルジンＩｃに優れた抗掻痒作用があることを見いだし、
これらを有効成分とする抗掻痒剤（止痒剤）の提供を可
能とした。DISCLOSURE OF THE INVENTION The present inventors have found that alcohol extract of dermis is excellent and its saponin components momordin Ic and 2'-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic are excellent. Have an anti-pruritic effect,
It has become possible to provide an antipruritic agent (antipruritic) containing these as active ingredients.

【００１５】本明細中でアルコール抽出エキスとは、特
に断りのないかぎり、低級アルコール又は含水低級アル
コールを用いて抽出したエキスを意味し、ここで、低級
アルコールとは炭素数１〜５の直鎖状又は分岐状のアル
コールを意味する。In the present specification, an alcohol-extracted extract means an extract extracted using a lower alcohol or a hydrated lower alcohol unless otherwise specified. Here, the lower alcohol is a straight-chain alcohol having 1 to 5 carbon atoms. Means a branched or branched alcohol.

【００１６】本発明の抗掻痒剤の有効成分である地膚子
のアルコール抽出エキスは、一般の生薬学的抽出方法で
得ることができる。すなわち、地膚子を粉砕した後、例
えば１０倍量のメタノール又は７０％含水エタノール
（以下、７０％エタノールと略記）で熱時抽出して得る
ことができる。また、サポニン成分のモモルジンＩｃ，
２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモモルジンＩｃと
モモルジンＩＩｃは、地膚子アルコール抽出エキスから
常法により分離・精製して得ることができる。すなわ
ち、当該アルコール抽出エキスに水を加え、酢酸エチル
で脱脂し、脱脂後の水層を更にｎ−ブタノールで抽出し
てｎ−ブタノール抽出物を得る。この抽出物をカラムク
ロマトグラフィーに付して、モモルジンＩｃ，２’−Ｏ
−β−Ｄ−グルコピラノシルモモルジンＩｃとモモルジ
ンＩＩｃをそれぞれ単離することができる。[0016] The alcohol extract of dermis, which is an active ingredient of the antipruritic agent of the present invention, can be obtained by a general biopharmaceutical extraction method. That is, it can be obtained by pulverizing the ground skin and then hot-extracting it with, for example, 10 times the amount of methanol or 70% aqueous ethanol (hereinafter abbreviated as 70% ethanol). Also, the saponin component momordin Ic,
2′-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic and momorudin IIc can be obtained by separating and purifying from an extract of skin alcohol extract by a conventional method. That is, water is added to the alcohol extract, defatted with ethyl acetate, and the defatted aqueous layer is further extracted with n-butanol to obtain an n-butanol extract. This extract was subjected to column chromatography to obtain momordin Ic, 2'-O
-Β-D-glucopyranosyl momordin Ic and momordin IIc can be isolated.

【００１７】このようにして得られる地膚子アルコール
抽出エキス及びそのサポニン成分であるモモルジンＩｃ
と２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモモルジンＩｃ
は、後述のごとく、優れた抗ヒスタミン作用を有し、し
かも副作用も少ないので、抗掻痒剤（止痒剤）として有
用である。また、これら抽出エキス及びサポニン成分は
優れた抗アレルギー作用および抗炎症作用をも有するの
で、抗アレルギー剤および抗炎症剤としても有用であ
る。したがって、地膚子アルコール抽出エキス及びモモ
ルジンＩｃと２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモモ
ルジンＩｃは、抗アレルギー作用および抗炎症作用を併
せもつ抗掻痒剤として、痒疹，皮膚掻痒，湿疹・皮膚
炎，じん麻疹，アレルギー性鼻炎，アレルギー性結膜
炎，即時型喘息などの治療に使用することが可能であ
る。The alcohol extract extracted from the skin of the skin thus obtained and its saponin component momordin Ic
And 2'-O-β-D-glucopyranosyl momorudin Ic
Is useful as an antipruritic (antipruritic) because it has an excellent antihistamine action and has few side effects as described below. In addition, since the extracted extract and the saponin component also have excellent antiallergic and antiinflammatory effects, they are also useful as antiallergic and antiinflammatory agents. Therefore, the alcohol extract of dermis and momorudin Ic and 2′-O-β-D-glucopyranosyl momorudin Ic are antipruritic agents having both antiallergic action and antiinflammatory action as prurigo, skin pruritus, It can be used to treat eczema / dermatitis, urticaria, allergic rhinitis, allergic conjunctivitis, immediate asthma, etc.

【００１８】本発明の抗掻痒剤の有効成分である地膚子
アルコール抽出エキス又はモモルジンＩｃ及び／又は
２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモモルジンＩｃ
は、それ自体あるいは必要に応じて他の公知の添加剤、
例えば賦形剤，結合剤，崩壊剤,滑沢剤, 抗酸化剤，コ
ーティング剤，界面活性剤, 流動性促進剤, 矯味矯臭
剤,着色剤, 可塑剤，香料などを添加・混合し、常法に
より錠剤, カプセル剤，顆粒剤, 細粒剤, 散剤, 液剤な
どの経口剤として、あるいは注射剤, 外用剤，座剤,吸
入剤, 点鼻剤, 点眼剤などの非経口剤として投与するこ
とができる。該液剤としては、例えば懸濁液，エマルジ
ョン，シロップ剤，エリキシル剤が挙げられる。また、
該外用剤としては、例えば軟膏剤, クリ−ム, 乳液, リ
ニメント剤, ローション剤が挙げられる。The extract of skin alcohol extract or momordin Ic and / or 2'-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic, which is an active ingredient of the antipruritic agent of the present invention.
Is itself or if necessary other known additives,
For example, excipients, binders, disintegrants, lubricants, antioxidants, coating agents, surfactants, flowability enhancers, flavoring agents, coloring agents, plasticizers, fragrances, etc. Oral preparations such as tablets, capsules, granules, fine granules, powders, and liquids, or parenteral preparations such as injections, external preparations, suppositories, inhalants, nasal drops, eye drops, etc. be able to. Examples of the liquid include suspensions, emulsions, syrups, and elixirs. Also,
Examples of the external preparation include ointments, creams, emulsions, liniments, and lotions.

【００１９】医薬品として許容される添加物は、一般的
に製剤に用いられるものである。賦形剤としては、例え
ばブドウ糖, 白糖, 乳糖, マンニトール, キシリトー
ル, ソルビトール, 結晶セルロース, カルボキシメチル
セルロースナトリウム, リン酸水素カルシウム, デンプ
ン, カルボキシメチルスターチナトリウム, デキストリ
ン, α−シクロデキストリン, β−シクロデキストリ
ン, カルボキシビニルポリマー, 軽質無水ケイ酸, 酸化
チタン, メタケイ酸アルミン酸マグネシウム, ポリエチ
レングリコール, 中鎖脂肪酸トリグリセリドが挙げられ
る。Pharmaceutically acceptable additives are those generally used in pharmaceuticals. Excipients include, for example, glucose, sucrose, lactose, mannitol, xylitol, sorbitol, crystalline cellulose, sodium carboxymethylcellulose, calcium hydrogen phosphate, starch, sodium carboxymethyl starch, dextrin, α-cyclodextrin, β-cyclodextrin, Examples include carboxyvinyl polymers, light silicic anhydride, titanium oxide, magnesium aluminate metasilicate, polyethylene glycol, and medium chain fatty acid triglycerides.

【００２０】結合剤としては、例えば結晶セルロース,
メチルセルロース, エチルセルロース, ヒドロキシプロ
ピルセルロース, ヒドロキシプロピルメチルセルロー
ス, ポリビニルピロリドン, ポリビニルアルコール, ア
ラビアゴム, α化デンプン, プルラン, ゼラチン, 寒
天, タラガント, アルギン酸ナトリウム, アルギン酸プ
ロピレングリコールエステルが挙げられる。As the binder, for example, crystalline cellulose,
Examples include methylcellulose, ethylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, polyvinylpyrrolidone, polyvinylalcohol, gum arabic, pregelatinized starch, pullulan, gelatin, agar, tarragant, sodium alginate, and propylene glycol alginate.

【００２１】崩壊剤としては、例えば結晶セルロース,
カルボキシメチルセルロース, 低置換度ヒドロキシプロ
ピルセルロース, カルボキシメチルセルロースナトリウ
ム,カルボキシメチルセルロースカルシウム, クロスカ
ルメロースナトリウム, デンプン, ヒドロキシプロピル
スターチ, 部分α化デンプンが挙げられる。Examples of disintegrants include crystalline cellulose,
Examples include carboxymethylcellulose, low-substituted hydroxypropylcellulose, sodium carboxymethylcellulose, carboxymethylcellulose calcium, croscarmellose sodium, starch, hydroxypropyl starch, and partially pregelatinized starch.

【００２２】滑沢剤としては、例えばステアリン酸, ス
テアリン酸アルミニウム, ステアリン酸マグネシウム,
ステアリン酸カルシウム, ステアリン酸ポリオキシル,
セタノール, タルク, 硬化油, ショ糖脂肪酸エステル,
ジメチルポリシロキサン, ポリエチレングリコール, ロ
ウ類, 水素添加植物油が挙げられる。Examples of the lubricant include stearic acid, aluminum stearate, magnesium stearate,
Calcium stearate, polyoxyl stearate,
Cetanol, talc, hydrogenated oil, sucrose fatty acid ester,
Examples include dimethylpolysiloxane, polyethylene glycol, waxes, and hydrogenated vegetable oils.

【００２３】抗酸化剤としては、例えば没食子酸プロピ
ル, ジブチルヒドロキシトルエン,ブチルヒドロキシア
ニソール, α−トコフェロール, クエン酸が挙げられ
る。Examples of the antioxidant include propyl gallate, dibutylhydroxytoluene, butylhydroxyanisole, α-tocopherol, and citric acid.

【００２４】コーティング剤としては、例えばメチルセ
ルロース, エチルセルロース, ヒドロキシプロピルセル
ロース, ヒドロキシプロピルメチルセルロース, ヒドロ
キシプロピルメチルセルロースフタレート, ヒドロキシ
プロピルメチルセルロースアセテートサクシネート, カ
ルボキシメチルエチルセルロース, 酢酸フタル酸セルロ
ース, ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテー
ト, アミノアルキルメタアクリレートコポリマー, メタ
アクリル酸コポリマー, セルロースアセテートサフタレ
ート, セルロースアセテートトリメリテート, ポリビニ
ルアセテートサフタレート, セラックが挙げられる。Examples of the coating agent include methylcellulose, ethylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose phthalate, hydroxypropylmethylcellulose acetate succinate, carboxymethylethylcellulose, cellulose acetate phthalate, polyvinyl acetal diethylaminoacetate, aminoalkyl meta Examples include acrylate copolymer, methacrylic acid copolymer, cellulose acetate saphthalate, cellulose acetate trimellitate, polyvinyl acetate saphthalate, and shellac.

【００２５】界面活性剤としては、例えばポリオキシエ
チレン硬化ヒマシ油, モノステアリン酸グリセリン, モ
ノステアリン酸ソルビタン, モノパルミチン酸ソルビタ
ン,モノラウリン酸ソルビタン, ポリソルベート類, ラ
ウリル硫酸ナトリウム, マクロゴール類, ショ糖脂肪酸
エステル, 大豆レシチンが挙げられる。Examples of the surfactant include polyoxyethylene hydrogenated castor oil, glycerin monostearate, sorbitan monostearate, sorbitan monopalmitate, sorbitan monolaurate, polysorbates, sodium lauryl sulfate, macrogols, sucrose fatty acid Esters and soybean lecithin.

【００２６】流動性促進剤としては、例えば軽質無水ケ
イ酸, 乾燥水酸化アルミニウムゲル, 合成ケイ酸アルミ
ニウム, ケイ酸マグネシウムが挙げられる。矯味矯臭剤
としては、例えばクエン酸, アジピン酸, アスコルビン
酸, メントールが挙げられる。着色剤としては、例えば
タール色素, 酸化チタンが挙げられる。可塑剤として
は、例えばクエン酸トリメチル, トリアセチン, セタノ
ールが挙げられる。Examples of the fluidity promoter include light anhydrous silicic acid, dried aluminum hydroxide gel, synthetic aluminum silicate and magnesium silicate. Examples of the flavoring agent include citric acid, adipic acid, ascorbic acid, and menthol. Examples of the coloring agent include a tar dye and titanium oxide. Examples of the plasticizer include trimethyl citrate, triacetin, and cetanol.

【００２７】本発明の抗掻痒剤の有効成分の投与量は、
有効成分の性状, 投与経路, 年齢,体重, 症状により適
宜増減するが、地膚子アルコール抽出エキスでは１日当
たり約１mg〜１０mg/kg 、サポニン成分のモモルジンＩ
ｃ及び／又は２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモモ
ルジンＩｃでは１日当たり約０．１mg〜１mg/kg である
のが望ましい。本発明の好ましい具体例は地膚子アルコ
ール抽出エキス又はモモルジンＩｃ及び／又は２’−Ｏ
−β−Ｄ−グルコピラノシルモモルジンＩｃと製剤上の
補助成分とからなるものである。また、本発明の他の好
ましい具体例は上記１日当たりの投与量を１回ないし数
回に分けて投与することもできる。The dose of the active ingredient of the antipruritic agent of the present invention is
It depends on the nature of the active ingredient, the route of administration, age, body weight, and symptoms. The extract of skin alcohol extracts is about 1 mg to 10 mg / kg per day, and the saponin component momordin I
Desirably, c and / or 2'-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic is about 0.1 mg to 1 mg / kg per day. A preferred embodiment of the present invention is an extract of alcohol extracted from skin, or momordin Ic and / or 2'-O.
-Β-D-glucopyranosylmomorzin Ic and auxiliary ingredients in the preparation. In another preferred embodiment of the present invention, the daily dose can be administered once or several times.

【００２８】[0028]

【発明の効果】本発明の抗掻痒剤の有効成分である地膚
子アルコール抽出エキス及びそのサポニン成分のモモル
ジンＩｃと２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモモル
ジンＩｃは、優れた抗掻痒作用，抗アレルギー作用およ
び抗炎症作用を有し、また、副作用も少ないので、抗ア
レルギー作用および抗炎症作用を併せもつ抗掻痒剤とし
て有用である。EFFECTS OF THE INVENTION The alcohol extract extracted from the skin and the saponin components momordin Ic and 2'-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic, which are the active ingredients of the antipruritic agent of the present invention, are excellent. It has antipruritic, antiallergic and antiinflammatory effects and has few side effects, and is therefore useful as an antipruritic agent having both antiallergic and antiinflammatory effects.

【００２９】[0029]

【実施例】実施例を挙げて本発明を更に説明する。The present invention will be further described with reference to examples.

【００３０】（実施例１） 抗掻痒作用：(Example 1) Anti-pruritic effect:

【００３１】(1a) 地膚子の７０％エタノール抽出エキ
スの調製：(1a) Preparation of extract of 70% ethanol extract of skin:

【００３２】中国産地膚子を粉砕した後、１０倍量の７
０％含水エタノールで１時間、２回熱時抽出した。抽出
液を熱時濾過し、濾液を減圧下に濃縮し、凍結乾燥を施
して、乾燥７０％エタノール抽出エキス（以下、ＫＳ−
ｅｘｔと略記）を１３．４％の収率で得た。また、７０
％含水エタノールをメタノールに代え、１０倍量のメタ
ノールで３時間、３回熱時抽出した。抽出液を熱時濾過
し、濾液を減圧下に濃縮乾涸して、メタノール抽出エキ
ス（以下、ＫＭ−ｅｘｔと略記）を１０．６％の収率で
得た。After pulverizing Chinese native skin, 10 times the amount of 7
The mixture was extracted twice with hot ethanol at 0% twice for 1 hour. The extract was filtered while hot, the filtrate was concentrated under reduced pressure, freeze-dried, and dried with 70% ethanol extract (hereinafter referred to as KS-
ext) in a yield of 13.4%. Also, 70
% Methanol was replaced with methanol, and the mixture was extracted with 10 volumes of methanol for 3 hours while heating. The extract was filtered while hot, and the filtrate was concentrated to dryness under reduced pressure to obtain a methanol extract (hereinafter abbreviated as KM-ext) in a yield of 10.6%.

【００３３】(1b) 地膚子由来サポニンのモモルジンＩ
ｃ，２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモモルジンＩ
ｃ及びモモルジンＩＩｃの単離：(1b) Momorgin I, a saponin derived from dermis
c, 2'-O-β-D-glucopyranosyl momordin I
Isolation of c and momordin IIc:

【００３４】上記メタノール抽出エキスに水を加え、酢
酸エチルで抽出し、有機層から酢酸エチル抽出物（収
率：２．２６％）を得た。水層は更にｎ−ブタノールで
抽出処理し、ｎ−ブタノール抽出物（収率：３．９８
％）を得た。ｎ−ブタノール抽出物をシリカゲルカラム
クロマトグラフィーに付し、クロロホルム／メタノール
／水，（７：３：１），（６：４：１）で順次展開溶出
し、フラクション１（収率：１．５１％）とフラクショ
ン２（収率：１．５４％）を得た。更に、フラクション
１をオクタデシルシラン（以下、ＯＤＳと略記）カラム
クロマトグラフィーに付し、８０％含水メタノール，メ
タノールで順次展開溶出し、モモルジンＩｃを得た（収
率：０．２５％）。また、フラクション２を分取用高速
液体クロマトグラフィー（ＯＤＳ−Ａ）に付し、８０％
含水メタノール／１％酢酸水溶液で溶出し、モモルジン
ＩＩｃ（収率：０．０８６％），２’−Ｏ−β−Ｄ−グ
ルコピラノシルモモルジンＩｃ（収率：０．１６％）及
び２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモモルジンＩＩ
ｃ（収率：０．００４２％）をそれぞれ得た。Water was added to the above methanol extract, and the mixture was extracted with ethyl acetate. An ethyl acetate extract (yield: 2.26%) was obtained from the organic layer. The aqueous layer was further subjected to an extraction treatment with n-butanol to obtain an n-butanol extract (yield: 3.98).
%). The n-butanol extract was subjected to silica gel column chromatography, and eluted sequentially with chloroform / methanol / water, (7: 3: 1) and (6: 4: 1) to obtain fraction 1 (yield: 1.51). %) And fraction 2 (yield: 1.54%). Further, the fraction 1 was subjected to octadecylsilane (hereinafter abbreviated as ODS) column chromatography, and eluted sequentially with 80% aqueous methanol and methanol to obtain momordin Ic (yield: 0.25%). In addition, fraction 2 was subjected to preparative high performance liquid chromatography (ODS-A),
Elution was carried out with aqueous methanol / 1% acetic acid aqueous solution, and momordin IIc (yield: 0.086%), 2′-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic (yield: 0.16%) and 2 '-O-β-D-glucopyranosyl momorudin II
c (yield: 0.0042%) was obtained.

【００３５】(2) Compound 48/80 誘発掻痒モデル（皮
下) の作製：(2) Preparation of Compound 48 / 80-induced pruritus model (subcutaneous):

【００３６】１８時間絶食したｄｄＹ系雄性マウス（６
週令，２６〜３０g ）の背部皮下に各用量の、ヒスタミ
ン遊離剤Compound 48/80生理食塩水０．１ml（０，１
０，３０，５０，１００，１５０μg ／マウス）を注射
し、マウスの掻痒行動を惹起させた。掻痒行動の判定
は、マウスが注射部位を後肢にて引っ掻き行動を掻痒行
動とし、注射直後より５分間隔で６０分間、その回数を
計数することにより掻痒行動を評価判定した。結果を図
１に示す。[0036] Male ddY mice (6
Histamine releasing agent 0.1 ml (0.1) of subcutaneous histamine releasing agent.
(0, 30, 50, 100, 150 μg / mouse) to induce pruritic behavior of the mice. The pruritic behavior was evaluated by judging the behavior of the mouse scratching the injection site with the hind limbs at the hind limbs and counting the number of times at intervals of 5 minutes for 60 minutes immediately after the injection. The results are shown in FIG.

【００３７】(3) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）の抗掻痒作用：(3) Antipruritic effect of a 70% ethanol extract (KS-ext) of the skin:

【００３８】上述のCompound 48/80誘発掻痒モデル（皮
下) を用いて評価した。すなわち、１８時間絶食したｄ
ｄＹ系雄性マウス（６週令，２６〜３０g ；１群１３匹
使用）に被検体を経口投与し、その１時間後にマウスの
背部皮下に０．１％Compound48/80生理食塩水０．１ml
（１００μg ／マウス）を注射し、マウスの掻痒行動を
惹起させた。注射直後より１０分間、マウスが注射部位
を後肢にて引っ掻く回数を計数することにより掻痒行動
の抑制を評価判定した。対照薬として、抗ヒスタミン剤
であるジフェンヒドラミン(Diphenhydramine) を用い
た。結果を表１に示す。Evaluation was performed using the above-described Compound 48 / 80-induced pruritus model (subcutaneous). That is, d for 18 hours
The subject was orally administered to dY male mice (6 weeks old, 26-30 g; 13 mice per group), and 1 hour later, 0.1 ml of 0.1% Compound 48/80 physiological saline was injected subcutaneously into the back of the mice.
(100 μg / mouse) to induce pruritic behavior of the mice. For 10 minutes immediately after the injection, the number of times the mouse scratched the injection site with the hind limbs was counted to evaluate and judge the suppression of the pruritic behavior. As a control drug, diphenhydramine, an antihistamine, was used. Table 1 shows the results.

【００３９】[0039]

【表１】 [Table 1]

【００４０】 有意差検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１Significance test: * p <0.05; ** p <0.01

【００４１】表１から明らかなように、ＫＳ−ｅｘｔ投
与群はそれぞれ５００ mg/kgでcompound 48/80誘発掻痒
に対して、有意な抑制作用を示した。As is clear from Table 1, each of the KS-ext-administered groups showed a significant inhibitory effect on compound 48 / 80-induced pruritus at 500 mg / kg.

【００４２】(4) 地膚子由来モモルジンＩｃ，２’−Ｏ
−β−Ｄ−グルコピラノシルモモルジンＩｃ及びモモル
ジンＩＩｃの抗掻痒作用：(4) Momorgin Ic, 2'-O derived from skin
Anti-pruritic effect of -β-D-glucopyranosyl momordin Ic and momordin IIc:

【００４３】上記(3) と同様にして、モモルジンＩｃ，
２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモモルジンＩｃと
モモルジンＩＩｃの抗掻痒作用を評価した。但し、１群
１３〜１５匹使用。ＥＤ₅₀値は５０％有効量を表し、Li
chfield-Wilcoxon法により求めた。対照薬として、ジフ
ェンヒドラミン(Diphenhydramine) を用いた。結果を図
２に示す。In the same manner as in the above (3), momordin Ic,
The anti-pruritic effect of 2′-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic and momordin IIc was evaluated. However, 13 to 15 animals were used per group. ED ₅₀ values represent 50% effective dose, Li
It was determined by the chfield-Wilcoxon method. Diphenhydramine was used as a control. The results are shown in FIG.

【００４４】図２から明らかなように、モモルジンＩｃ
投与群と２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモモルジ
ンＩｃ投与群はcompound 48/80誘発掻痒に対し有意な抑
制作用を示したが、モモルジンＩＩｃ投与群は抑制しな
かった。As is apparent from FIG. 2, momordin Ic
The administration group and the 2′-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic administration group showed a significant inhibitory effect on the compound 48 / 80-induced pruritus, but the momordin IIc administration group did not.

【００４５】（実施例２） 抗アレルギー作用：Example 2 Antiallergic Action:

【００４６】(1）地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）および地膚子由来モモルジンＩｃとモ
モルジンＩＩｃのラットの受動的皮膚アナフィラキシィ
ー（以下ＰＣＡと略記）反応に及ぼす影響（抗Ｉ型アレ
ルギー作用）：(1) Effects of 70% Ethanol Extract Extract (KS-ext) and Skin-Derived Momordin Ic and Momordin IIc on Passive Cutaneous Anaphylaxis (hereinafter abbreviated as PCA) Reaction in Rats (Anti-I Type allergic action):

【００４７】(i) 抗卵白アルブミンラット血清の調製：
Stotland and Shareの方法に準じた。すなわち、１mg
の卵白アルブミン（以下ＥＷＡと略記）と１０mgの水酸
化アルミニウムゲルを含む生理食塩水０．５mlをWistar
系雄性ラットの足蹠皮内に４分割して投与し、同時に百
日咳死菌(Bordetella pertussis)２ｘ１０¹⁰個／mlを含
む生理食塩水１mlを腹腔内に投与し、感作した。７日後
上述のＥＷＡ生理食塩水をラットの両大腿部筋肉内に投
与し、さらに百日咳死菌２ｘ１０¹⁰個／mlを含む生理食
塩水を腹腔内に投与して追加感作した。追加感作７日後
腹大動脈から採血して、抗ＥＷＡラット血清を得た。血
清は−８０℃で凍結保存した。尚、この血清の抗体価は
ラット４８時間ＰＣＡ反応にて検定し、１：３２であっ
た。(I) Preparation of anti-ovalbumin rat serum:
According to the method of Stotland and Share. That is, 1 mg
0.5 ml of physiological saline containing ovalbumin (hereinafter abbreviated as EWA) and 10 mg of aluminum hydroxide gel
The male rats were intravenously administered in four divided doses into the footpad skin, and at the same time, 1 ml of physiological saline containing 2 × ^{10 10} cells / ml of Bordetella pertussis was intraperitoneally administered to sensitize. Seven days later, the above-mentioned EWA physiological saline was administered into both thigh muscles of the rats, and furthermore, physiological saline containing 2 × ^{10 10} cells / ml of pertussis killed was intraperitoneally administered for additional sensitization. Seven days after the boost, blood was collected from the abdominal aorta to obtain anti-EWA rat serum. Serum was stored frozen at -80 ° C. The antibody titer of the serum was 1:32 as determined by a PCA reaction for 48 hours in rats.

【００４８】(ii)ＰＣＡ反応試験： Wistar系雄性ラッ
ト（１群６〜８匹）の背部を剪毛し、皮内に８倍、もし
くは１６倍に希釈した抗ＥＷＡラット血清を０．０５ml
／匹の割合で、それぞれ１点ずつ合計２点注射し感作し
た。４８時間後、ＥＷＡ２mgを含む１％エバンスブルー
生理食塩水０．５mlを尾静脈から注射し、３０分後に放
血致死させ、８倍希釈の血清により生じた青斑部の面積
および漏出色素量を測定した。漏出色素量の測定は片山
らの方法に従った。すなわち、この青斑部を細切し、1N
KOH１mlを加え、３７℃, ４８時間インキュベ−トした
後、0.6N H₃PO₄２．５mlで中和し、アセトン６．５mlで
よく混和抽出した。３０００ｒｐｍ，１０分間遠心し、
６２０ｎｍでその上清液の吸光度を測定し、その色素量
を予め作製したエバンスブルーの検量線より求めた。被
検体はＰＣＡ誘発１時間前に１回経口投与した。結果を
表２に示す。(Ii) PCA reaction test: Wistar male rats (6 to 8 rats per group) were shaved at the back, and 0.05 ml of 8- or 16-fold diluted anti-EWA rat serum was intradermally diluted.
The mice were sensitized by injecting 1 point each for 2 points in total. Forty-eight hours later, 0.5 ml of 1% Evan's blue saline containing 2 mg of EWA was injected via the tail vein. 30 minutes later, the mice were exsanguinated and killed. did. The amount of the leaked dye was measured according to the method of Katayama et al. That is, this blue spot is finely cut and 1N
After adding 1 ml of KOH and incubating at 37 ° C. for 48 hours, the mixture was neutralized with 2.5 ml of 0.6NH ₃ PO ₄ and mixed and extracted well with 6.5 ml of acetone. Centrifuge at 3000 rpm for 10 minutes,
The absorbance of the supernatant was measured at 620 nm, and the amount of the dye was determined from a calibration curve of Evans Blue prepared in advance. Subjects were orally administered once one hour before PCA induction. Table 2 shows the results.

【００４９】[0049]

【表２】 [Table 2]

【００５０】有意差検定：＊ｐ＜０．０１Significance test: * p <0.01

【００５１】表２より明らかなように、ＫＳ−ｅｘｔ投
与群とモモルジンＩｃ投与群はＰＣＡ反応による色素の
漏出を有意に抑制した。As is clear from Table 2, the KS-ext administration group and the momordin Ic administration group significantly suppressed the leakage of the dye due to the PCA reaction.

【００５２】(2) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）のＩｇＥ抗体産生に及ぼす影響：(2) Effect of 70% Ethanol Extract (KS-ext) on IgE Antibody Production:

【００５３】(i) ＩｇＥ抗体産生: Levin and Vaz の
方法に従った。すなわち、１mgのＥＷＡと１．５mgの水
酸化アルミニウムゲルの混合液０．２mlをＢＡＬＢ／ｃ
系雌生マウス（１群１０〜１２匹）に腹腔内投与した。
免疫後７，１４，２１日目に眼底静脈洞から採血し、常
法により得た血清をＩｇＥ抗体価の測定に使用した。Ｋ
Ｓ−ｅｘｔ〔投与量５０，２００および５００mg/kg ：
０．２％カルボキシメチルセルロースナトリウム（以
下、ＣＭＣ−Ｎａと略記）に懸濁〕は免疫日から１日１
回連日経口投与した。(I) IgE antibody production: According to the method of Levin and Vaz. That is, 0.2 ml of a mixture of 1 mg of EWA and 1.5 mg of aluminum hydroxide gel was applied to BALB / c.
The mice were intraperitoneally administered to female live mice (10 to 12 mice per group).
On days 7, 14, and 21 after immunization, blood was collected from the fundus sinus, and serum obtained by a conventional method was used for measurement of IgE antibody titer. K
S-ext [dose 50, 200 and 500 mg / kg:
Suspended in 0.2% sodium carboxymethylcellulose (hereinafter abbreviated as CMC-Na)] once a day from the day of immunization.
Oral administration was repeated daily.

【００５４】(ii)ＩｇＥ抗体価の測定： ラット４８時
間ＰＣＡ反応により測定した。すなわち、Wistar系雄性
ラット（１群３匹）の背部を剪毛し、皮内に各血清を生
理食塩水で倍々希釈系で希釈したものを０．１mlずつ注
射した。４８時間後、ＥＷＡ２mgを含む１％エバンスブ
ルー生理食塩水０．５mlを尾静脈から注入し、３０分後
に放血致死させ、背部の皮を剥ぎ、血清により生じた直
径５mm以上の青斑をプラスとして判定し、ＩｇＥ抗体価
とした。(Ii) Measurement of IgE antibody titer: It was determined by rat PCA reaction for 48 hours. That is, the backs of Wistar male rats (3 rats per group) were shaved, and 0.1 ml of each serum was diluted intradermally with a two-fold dilution with physiological saline. Forty-eight hours later, 0.5 ml of 1% Evan's blue physiological saline containing 2 mg of EWA was infused through the tail vein. After 30 minutes, the rats were sacrificed by exsanguination, and the back was peeled off. It was determined and used as IgE antibody titer.

【００５５】(iii) （実験結果） ＫＳ−ｅｘｔ５０，
２００，５００mg/kg のいづれの投与群においても、抗
原感作１週間，２週間および３週間後でもＩｇＥ抗体価
は抑制しなかった。したがって、ＩｇＥ抗体産生には影
響を及ぼさなかった。(Iii) (Experimental results) KS-ext50,
In any of the 200 and 500 mg / kg administration groups, the IgE antibody titer was not suppressed even after 1 week, 2 weeks and 3 weeks of antigen sensitization. Therefore, it did not affect IgE antibody production.

【００５６】(3) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）及びモモルジンＩｃのcompound 48/80
によるラット腹腔内マストセルからのヒスタミン遊離に
及ぼす影響：(3) Compound 48/80 of dermatological extract 70% ethanol extract (KS-ext) and momordin Ic
Effect of lipase on histamine release from intraperitoneal mast cells in rats:

【００５７】(i) ラット腹腔内マストセル浮遊液の調
製： ラットからの腹腔内マストセルの分離はUvnas an
d Thonの方法に準じて行った。すなわち、ラットを断頭
瀉血し、ただちにハンクス液（１０U/mlのヘパリン含
有）１０mlを腹腔内に注入した。９０秒間腹部を静かに
マッサージした後、腹腔内液を採取し、４０％フィコー
ル溶液２mlに静かに重層し、室温で３０分間放置後、５
℃, １２００ｒｐｍ, １０分間遠心分離を行い、フィコ
ール層上のマストセルを集めた。このマストセルはリン
酸緩衝液（以下、ＰＢＳと略記）（ｐＨ７．０）に浮遊
させ、遠心分離による洗浄を３回繰り返し、再びＰＢＳ
に浮遊（マストセル数２．９ｘ１０⁶ 個／ml）させた。
この浮遊液中のマストセル含有率は８５−９０％で、生
存率はトルイジンブルー（０．１％，５０％エタノール
溶液) 染色法で９０％以上であることを確認した。(I) Preparation of rat intraperitoneal mast cell suspension: Isolation of intraperitoneal mast cells from rats was performed using Uvnas an
d Performed according to Thon's method. That is, rats were decapitated and immediately intraperitoneally injected with 10 ml of Hanks' solution (containing 10 U / ml heparin). After gently massaging the abdomen for 90 seconds, the intraperitoneal fluid was collected, gently overlaid on 2 ml of 40% Ficoll solution, left at room temperature for 30 minutes, and then
Centrifugation was performed at 1200 ° C. and 1200 rpm for 10 minutes to collect mast cells on the Ficoll layer. This mast cell was suspended in a phosphate buffer (hereinafter, abbreviated as PBS) (pH 7.0), washed three times by centrifugation, and then washed again with PBS.
(Mast cell number: 2.9 × 10 ⁶ cells / ml).
The mast cell content in this suspension was 85-90%, and the viability was confirmed to be 90% or more by toluidine blue (0.1%, 50% ethanol solution) staining method.

【００５８】(ii)ヒスタミン遊離反応試験： (i)に述べ
た方法で得られたマストセル浮遊液１．８mlを３７℃,
１０分間プレインキュベートした後、被検液（１０％ジ
メチルスルホキシド／ＰＢＳに溶解）を０．１ml加え、
１０分間インキュベートし、更にcompound 48/80（最終
濃度１０ mg/ml）０．１mlを加えて１５分間インキュベ
ートした。氷冷により反応を停止し、５℃, １２００ｒ
ｐｍ，５分間遠心分離を行い、上清及び沈渣を得た。上
清中のヒスタミン量をShore らの方法に準じて測定し
た。すなわち、上清０．７mlに水１．４ml, 1N NaOH
０．４ml, １％オルト−フタルジアルデヒド／メタノー
ル溶液０．１mlを加えて、４分間放置後、3NHCl溶液
０．２mlで反応を停止させた。反応終了１０分後に５
℃, ３０００ｒｐｍ，５分間遠心分離し、上清の蛍光を
励起波長３６０ｎｍ, 蛍光波長４５０ｎｍで測定（日立
蛍光分光光度計６５０−１０Ｓ）し、既知濃度のヒスタ
ミン検量線からヒスタミン量を求めた。また、マストセ
ルに残留するヒスタミン量は沈渣にＰＢＳ２mlを加えて
超音波処理、更に凍結融解法でマストセルからヒスタミ
ンを遊離させ、上記と同様の方法で測定し、ヒスタミン
遊離率を求めた。(Ii) Histamine release reaction test: 1.8 ml of the mast cell suspension obtained by the method described in (i) was used at 37 ° C.
After preincubation for 10 minutes, 0.1 ml of a test solution (dissolved in 10% dimethyl sulfoxide / PBS) was added,
After incubating for 10 minutes, 0.1 ml of compound 48/80 (final concentration 10 mg / ml) was added, and the mixture was incubated for 15 minutes. The reaction was stopped by ice cooling, and the reaction was stopped at 5 ° C and 1200r.
By centrifugation at pm for 5 minutes, a supernatant and a sediment were obtained. The amount of histamine in the supernatant was measured according to the method of Shore et al. That is, 1.4 ml of water and 1 N NaOH were added to 0.7 ml of the supernatant.
0.4 ml of a 1% ortho-phthaldialdehyde / methanol solution (0.1 ml) was added thereto, and the mixture was allowed to stand for 4 minutes. Thereafter, the reaction was stopped with a 3N HCl solution (0.2 ml). 5 minutes after the end of the reaction
The mixture was centrifuged at 3,000 rpm for 5 minutes at ℃, and the fluorescence of the supernatant was measured at an excitation wavelength of 360 nm and a fluorescence wavelength of 450 nm (Hitachi Fluorescence Spectrophotometer 650-10S), and the amount of histamine was determined from a histamine calibration curve of a known concentration. The amount of histamine remaining in the mast cell was determined by adding 2 ml of PBS to the sediment, sonicating and releasing histamine from the mast cell by freeze-thawing method, and measuring the histamine release rate in the same manner as described above.

【００５９】(iii) （実験結果） 被検体ＫＳ−ｅｘｔ
（１０，５０，２００および５００μg/ml）およびモモ
ルジンＩｃ（１０，５０，１００および２００μg/ml）
はいづれもcompound 48/80によるラット腹腔内マストセ
ルからのヒスタミン遊離には影響を及ぼさなかった。(Iii) (Experimental results) Subject KS-ext
(10, 50, 200 and 500 μg / ml) and momordin Ic (10, 50, 100 and 200 μg / ml)
None of them had any effect on histamine release from rat intraperitoneal mast cells by compound 48/80.

【００６０】（実施例３） 急性炎症抑制作用：(Example 3) Acute inflammation inhibitory action:

【００６１】(1) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）及びモモルジンＩｃのラットのカラゲ
ニン誘発足蹠浮腫に及ぼす影響：(1) Effects of 70% Ethanol Extract (KS-ext) and Momorgin Ic on Carrageenin-Induced Footpad Edema in Rats:

【００６２】絶食したWistar系雄性ラット（１５０〜１
８０g ）にＫＳ−ｅｘｔ又はモモルジンＩｃ（０．２％
ＣＭＣ−Ｎａに懸濁) を経口投与し、その１時間後にラ
ットの右後肢足蹠皮下に１％λ−カラゲニン生理食塩水
を０．１ml注射し、浮腫を惹起させた。反応惹起前およ
び惹起０．５〜５時間後までの浮腫を水容積置換法にて
測定し、浮腫率として求めた。ＫＳ−ｅｘｔについては
結果を図３に示す。また、モモルジンＩｃについては結
果を図４に示す。図４においては各用量での１時間と３
時間後の浮腫率を求めた。対照薬にインドメタシン(ind
ometacin) をおいた。Fasted male Wistar rats (150-1)
80 g) to KS-ext or momordin Ic (0.2%
CMC-Na) was orally administered, and one hour later, 0.1 ml of 1% λ-carrageenin physiological saline was injected subcutaneously into the right hind footpad of the rat to induce edema. The edema before the induction of the reaction and up to 0.5 to 5 hours after the induction was measured by a water volume replacement method, and the edema was determined as an edema rate. The results for KS-ext are shown in FIG. FIG. 4 shows the results for momordin Ic. In FIG. 4, 1 hour and 3
The edema rate after time was determined. Indomethacin (ind
ometacin).

【００６３】図３，４から明らかなように、モモルジン
ＩｃとＫＳ−ｅｘｔ投与群はカラゲニン誘発浮腫形成を
有意に抑制する傾向を示した。As is clear from FIGS. 3 and 4, the group administered with momordin Ic and KS-ext showed a tendency to significantly inhibit carrageenin-induced edema formation.

【００６４】(2) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）のマウスのヒスタミン誘発足蹠浮腫お
よびセロトニン誘発足蹠浮腫に及ぼす影響：(2) Influence of dermatological extract 70% ethanol extract (KS-ext) on histamine-induced footpad edema and serotonin-induced footpad edema in mice:

【００６５】絶食したｄｄＹ系雄性マウス（１８〜２０
g ，１群１２匹）にＫＳ−ｅｘｔ（０．２％ＣＭＣ−Ｎ
ａに懸濁) を経口投与し、その１時間後にマウスの右後
肢足蹠皮下にヒスタミンまたはセロトニン生理食塩水を
５μl （５μg ／マウス）を注射し、浮腫を惹起させ
た。反応惹起前および惹起１０，２０，３０分後におけ
る右後肢足蹠の体積をdial thickness gaugeを用いて測
定し、浮腫率として求めた。結果を図５（ヒスタミン）
および図６（セロトニン）に示す。The fasted ddY strain male mice (18-20
g, KS-ext (0.2% CMC-N)
The suspension was orally administered, and one hour later, 5 μl (5 μg / mouse) of histamine or serotonin saline was injected subcutaneously into the right hind footpad of the mouse to induce edema. The volume of the right hind footpad before the induction of the reaction and at 10, 20, and 30 minutes after the induction was measured using a dial thickness gauge, and the edema rate was determined. Fig. 5 (Histamine)
And FIG. 6 (serotonin).

【００６６】図５，６から明らかなように、ＫＳ−ｅｘ
ｔ投与群はヒスタミン誘発浮腫とセロトニン誘発浮腫形
成を有意に抑制した。As apparent from FIGS. 5 and 6, KS-ex
The t administration group significantly suppressed histamine-induced edema and serotonin-induced edema formation.

【００６７】(3) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）の酢酸誘発毛細血管透過性亢進に及ぼ
す影響：(3) Effect of extract of dermis 70% ethanol extract (KS-ext) on acetic acid-induced increase in capillary permeability:

【００６８】Whittle らの方法に準じて試験した。すな
わち、絶食したｄｄＹ系雄性マウス（１８〜２０g ，１
群１２匹）にＫＳ−ｅｘｔ（０．２％ＣＭＣ−Ｎａに懸
濁)を経口投与し、その１時間後に４％ポンタミンスカ
イブルー生理食塩水１０ml／kgを尾静脈注射し、１５分
後に０．７％酢酸生理食塩水１０mg／kgを腹腔内注射
し、更に２０分後にマウスを断頭致死させ、腹腔内に滲
出した色素を生理食塩水で洗い集め、全量１０mlとした
後1N NaOH ０．１mlを添加し、５９０ｎｍで吸光度を測
定した。結果を表３に示す。The test was conducted according to the method of Whittle et al. That is, fasted ddY male mice (18-20 g, 1
KS-ext (suspended in 0.2% CMC-Na) was orally administered to group 12 mice), 1 hour later, 10 ml / kg of 4% pontamine sky blue saline was injected into the tail vein, and 15 minutes later The mice were intraperitoneally injected with 10 mg / kg of 0.7% acetic acid saline, and the mice were sacrificed by decapitation 20 minutes later. 1 ml was added and the absorbance was measured at 590 nm. Table 3 shows the results.

【００６９】[0069]

【表３】 [Table 3]

【００７０】 有意差検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１Significance test: * p <0.05; ** p <0.01

【００７１】表３から明らかなように、ＫＳ−ｅｘｔ投
与群は酢酸誘発毛細血管透過性亢進に伴う色素の漏出を
有意に抑制した。As is clear from Table 3, the KS-ext-administered group significantly suppressed the leakage of the pigment associated with acetic acid-induced increase in capillary permeability.

【００７２】(4) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）のマウスのアラキドン酸誘発耳介浮腫
に及ぼす影響：(4) Effect of 70% Ethanol Extract Extract (KS-ext) on Arachidonic Acid-Induced Ear Edema in Mice:

【００７３】絶食したｄｄＹ系雄性マウス（１８〜２０
g ，１群１２匹）にＫＳ−ｅｘｔ（０．２％ＣＭＣ−Ｎ
ａに懸濁) を経口投与し、その1 時間後にマウスの右耳
にアラキドン酸を含むアセトン溶液２０μl （２ mg /
マウス）を塗布し、浮腫を惹起させた。反応惹起前およ
び惹起１時間後における右耳の体積をdial thicknessga
ugeを用いて測定し、浮腫率として求めた。結果を表４
に示す。Fasted ddY male mice (18-20)
g, KS-ext (0.2% CMC-N)
a), and one hour later, 20 μl of an acetone solution containing arachidonic acid (2 mg /
Mouse) was applied to induce edema. The volume of the right ear before and 1 hour after the induction of the reaction was determined by dial thicknessga.
The edema was measured using an uge. Table 4 shows the results
Shown in

【００７４】[0074]

【表４】 [Table 4]

【００７５】有意差検定：＊ｐ＜０．０５Significance test: * p <0.05

【００７６】表４から明らかなように、ＫＳ−ｅｘｔ５
００mg/kg 投与群はアラキドン酸誘発耳介浮腫形成を有
意に抑制した。As is clear from Table 4, KS-ext5
The 00 mg / kg group significantly suppressed arachidonic acid-induced pinna edema formation.

【００７７】（実施例４） 抗侵害受容作用：(Example 4) Antinociceptive action:

【００７８】地膚子７０％エタノール抽出エキス（ＫＳ
−ｅｘｔ）の酢酸ライジングに及ぼす影響：Whittle ら
の方法に準じて試験した。すなわち、絶食したｄｄＹ系
雄性マウス（２０〜２５g ，１群１２匹）にＫＳ−ｅｘ
ｔ（０．２％ＣＭＣ−Ｎａに懸濁)を経口投与し、その
１時間後に１％酢酸生理食塩水１０ml／kgを腹腔内注射
し、その５分後よりマウスのライジングを１０分間計数
した。結果を表５に示す。[0086] A 70% ethanol extract of dermis (KS)
-Ext) Effect on acetic acid rising: tested according to the method of Whittle et al. That is, KS-ex was added to fasted ddY strain male mice (20 to 25 g, 12 mice per group).
t (suspended in 0.2% CMC-Na) was orally administered, 1 hour later, 10 ml / kg of 1% acetic acid saline was intraperitoneally injected, and 5 minutes later, the writhing of the mice was counted for 10 minutes. . Table 5 shows the results.

【００７９】[0079]

【表５】 [Table 5]

【００８０】有意差検定：＊ｐ＜０．０５Significance test: * p <0.05

【００８１】表５から明らかなように、ＫＳ−ｅｘｔ５
００mg/kg 投与群は酢酸誘発ライジングを有意に抑制し
た。As is clear from Table 5, KS-ext5
The 00 mg / kg group significantly suppressed acetic acid-induced writhing.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図１】１８時間絶食したｄｄＹ系雄性マウスの背部皮
下に各用量のCompound 48/80生理食塩水０．１mlを注射
したときのマウスの掻痒行動を示す。横軸は皮下注射後
の経過時間（分）を表し、縦軸は引っ掻き回数を表す。
━は生理食塩水（コントロール）、−○−は１０μg 、
−■−（黒四角）は３０μg 、−△−は５０μg、−▽
−は１００μg および−●−は１５０μg をマウスに注
射した場合を示す。FIG. 1 shows the pruritic behavior of ddY male mice that had been fasted for 18 hours when 0.1 ml of Compound 48/80 saline was injected subcutaneously into the back subcutaneously of the mice. The horizontal axis represents the elapsed time (minutes) after the subcutaneous injection, and the vertical axis represents the number of scratches.
━ is physiological saline (control),-○-is 10 μg,
-■-(black square) is 30 µg,-△-is 50 µg,-▽
-Indicates that 100 μg and-●-indicate that 150 μg were injected into mice.

【図２】マウスのCompound 48/80誘発掻痒モデルにおけ
るモモルジンＩｃ，２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシ
ルモモルジンＩｃ，モモルジンＩＩｃ及びジフェンヒド
ラミン（対照薬）の抗掻痒作用を示す。横軸は各試験薬
の投与量(mg/kg) を表し、縦軸は引っ掻き回数を表す。FIG. 2 shows the antipruritic effect of momordin Ic, 2′-O-β-D-glucopyranosyl momordin Ic, momordin IIc and diphenhydramine (control) in a compound 48 / 80-induced pruritus model in mice. The horizontal axis represents the dose (mg / kg) of each test drug, and the vertical axis represents the number of scratches.

【図３】ラットのカラゲニン誘発足蹠浮腫における地膚
子７０％エタノール抽出エキス（ＫＳ−ｅｘｔ）の経口
投与での抑制効果を示す。横軸は足蹠浮腫後の経過時間
（時間）を表し、縦軸は浮腫率を表す。・・・はコント
ロール、−●−は５０mg/kg 、−△−は２００mg/kg お
よび−■−（黒四角）は５００mg/kg 投与した場合を示
す。有意差検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１FIG. 3 shows the inhibitory effect of oral administration of a 70% ethanol extract (KS-ext) on carrageenan-induced footpad edema in rats. The horizontal axis represents the elapsed time (time) after footpad edema, and the vertical axis represents the edema rate. .. Indicates a control,-コ ン ト ロ ー ル-indicates 50 mg / kg,-△-indicates 200 mg / kg, and-■-(solid square) indicates the case of administration of 500 mg / kg. Significance test: * p <0.05; ** p <0.01

【図４】ラットのカラゲニン誘発足蹠浮腫におけるモモ
ルジンＩｃとインドメタシンの経口投与での１時間と３
時間後の抑制効果を示す。横軸は投与量(mg/kg) を表
し、縦軸は浮腫率を表す。インドメタシンはｉｎｄｏ．
と略記した。有意差検定は記号ｐで示される。FIG. 4: 1 hour and 3 hours of oral administration of momordin Ic and indomethacin in carrageenan-induced footpad edema in rats
The suppression effect after time is shown. The horizontal axis represents the dose (mg / kg), and the vertical axis represents the edema rate. Indomethacin is available at indo.
Abbreviated. The significance test is indicated by the symbol p.

【図５】マウスのヒスタミン誘発足蹠浮腫におけるＫＳ
−ｅｘｔの経口投与での抑制効果を示す。横軸は足蹠浮
腫後の経過時間（分）を表し、縦軸は浮腫率を表す。・
・はコントロール、−●−は５０mg/kg 、−△−は２０
０mg/kg および−■−（黒四角）は５００mg/kg 投与し
た場合を示す。有意差検定：＊ｐ＜０．０５FIG. 5. KS in histamine-induced footpad edema in mice
-Shows the inhibitory effect of oral administration of ext. The horizontal axis represents the elapsed time (minutes) after footpad edema, and the vertical axis represents the edema rate.・
* Is control,-●-is 50 mg / kg,-△-is 20
0 mg / kg and-■-(solid square) indicate the case where 500 mg / kg was administered. Significance test: * p <0.05

【図６】マウスのセロトニン誘発足蹠浮腫におけるＫＳ
−ｅｘｔの経口投与での抑制効果を示す。横軸は足蹠浮
腫後の経過時間（分）を表し、縦軸は浮腫率を表す。・
・はコントロール、−●−は５０mg/kg 、−△−は２０
０mg/kg および−■−（黒四角）は５００mg/kg 投与し
た場合を示す。有意差検定：＊＊ｐ＜０．０１FIG. 6: KS in serotonin-induced footpad edema in mice
-Shows the inhibitory effect of oral administration of ext. The horizontal axis represents the elapsed time (minutes) after footpad edema, and the vertical axis represents the edema rate.・
* Is control,-●-is 50 mg / kg,-△-is 20
0 mg / kg and-■-(solid square) indicate the case where 500 mg / kg was administered. Significance test: ** p <0.01

Claims (3)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 地膚子のアルコール抽出エキスを有効成
分とする抗掻痒剤。1. An anti-pruritic agent comprising an extract of skin alcohol as an active ingredient. 【請求項２】 モモルジンＩｃ及び２’−Ｏ−β−Ｄ−
グルコピラノシルモモルジンＩｃの少なくともいずれか
１種を有効成分とする抗掻痒剤。2. Mormordin Ic and 2′-O-β-D-
An anti-pruritic agent comprising at least one of glucopyranosylmomorzin Ic as an active ingredient. 【請求項３】 ２’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルモ
モルジンＩｃを有効成分とする抗掻痒剤。3. An anti-pruritic agent comprising 2'-O-β-D-glucopyranosyl momorudin Ic as an active ingredient.