JPH08208658A - New compound thiomarinol d, e and f - Google Patents

Abstract

PURPOSE: To obtain a new thiomarinol D, E and F, exhibiting antimicrobial action and useful as an antimicrobial agent, etc., for various bacteria such as Gram-positive bacteria. CONSTITUTION: These compounds are expressed by formula I [in thiomarinol D, R<1> is OH and R<2> is methyl and (n) is 6; in thiomarinol E, R<1> is OH and R<2> is H and (n) is 8; in thiomarinol F, R<1> is carbonyl and R<2> is H and (n) is 6], e.g. a compound of formula II. Furthermore, the thiomarinol D has the following physical properties. Appearance: yellow powder; molecular formula: C31 H46 N2 O9 S2 ; molecular weight: 654; infrared absorption spectrum: 3401, 1651, 1598, 1526, 1457, 1290, 1216, 1155, 1109, 1052 and 975cm<-1> ; ultraviolet absorption spectrum: λmax-nm (ε), 210 (20900), 300 (2600), 385 (8900); specific rotation: [α]D<25> =+1.48 deg. (C 0.81, methanol). These compounds of formula I are obtained by culturing Alteromonas rava.SANK-73390 strains and harvesting the compounds of formula I from the culture products.

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は抗菌作用を有する新規化
合物チオマリノ−ルＤ、ＥおよびＦ(Thiomarinol D 、E
および F) 、およびその製法に関する。FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to novel compounds Thiomarinol D, E and F (Thiomarinol D, E) having antibacterial activity.
And F), and its manufacturing method.

【０００２】[0002]

【従来の技術】海水より分離したアルテロモナス・ラバ
(Alteromonas rava) に属する微生物が、例えばチオマ
リノール（特開平５−１３２４８６号）、チオマリノー
ルＢ（特開平６−３３６４８７号）、チオマリノールＣ
（特開平６−１９９８６５号）を生産することが知られ
ている。2. Description of the Related Art Alteromonas mule isolated from seawater
Microorganisms belonging to (Alteromonas rava) include, for example, thiomarinol (JP-A-5-132486), thiomarinol B (JP-A-6-336487), thiomarinol C.
It is known to produce (JP-A-6-199865).

【０００３】更に、チオマリノールを酸化処理すること
によりチオマリノールＢ（特開平６−２０６８８４号）
が得られることも知られている。Further, thiomarinol B is treated by oxidizing thiomarinol (JP-A-6-206884).
It is also known that

【０００４】[0004]

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、海水よ
り分離したアルテロモナス・ラバ (Alteromonas rava)
に属する SANK 73390株の培養物から、抗菌作用を有す
る新規化合物チオマリノ−ルＤ、ＥおよびＦが生産され
ることを見出して本発明を完成した。DISCLOSURE OF THE INVENTION The present inventors have found that Alteromonas rava isolated from seawater.
The present invention has been completed by discovering that novel compounds thiomarinol D, E and F having an antibacterial action are produced from the culture of the SANK 73390 strain belonging to S.

【０００５】[0005]

【課題を解決するための手段】本発明のチオマリノ−ル
Ｄ、ＥおよびＦは下記の構造式を有する。The thiomarinols D, E and F of the present invention have the following structural formula.

【０００６】[0006]

【化５】 Embedded image

【０００７】式中、チオマリノ−ルＤはＲ¹ が水酸基を
示し、Ｒ² がメチル基を示し、ｎが６の整数を示す。チ
オマリノ−ルＥはＲ¹ が水酸基を示し、Ｒ² が水素原子
を示し、ｎが８の整数を示す。チオマリノ−ルＦはＲ¹
がカルボニル基を示し、Ｒ² が水素原子を示し、ｎが６
の整数を示す。In the formula, in thiomarinol D, R ¹ represents a hydroxyl group, R ² represents a methyl group, and n represents an integer of 6. In the thiomarinol E, R ¹ represents a hydroxyl group, R ² represents a hydrogen atom, and n represents an integer of 8. Thiomalinol F is R ¹
Represents a carbonyl group, R ² represents a hydrogen atom, and n represents 6
Indicates an integer.

【０００８】本発明のチオマリノ−ルＤは下記の構造式
および性状を有する。The thiomarinol D of the present invention has the following structural formula and properties.

【０００９】[0009]

【化６】 [Chemical 6]

【００１０】１）物質の性状：黄色粉末 ２）分子式：C₃₁ H₄₆ N₂ O₉ S₂ ３）分子量： 654 (FAB-MS法により測定） ４）高分解能質量分析：C₃₁ H₄₇ N₂ O₉ S₂[(M+H)⁺ FAB
-MS 法により測定］ 実測値 655.2723 計算値 655.2723 ５）赤外線吸収スペクトル：ν_maxcm^-1 臭化カリウム(KBr) 錠剤法で測定した赤外線吸収スペク
トルは、次に示す通りである。 3401、1651、1598、1526、1457、1290、1216、1155、11
09、1052975 。1) Property of substance: yellow powder 2) Molecular formula: C ₃₁ H ₄₆ N ₂ O ₉ S ₂ 3) Molecular weight: 654 (measured by FAB-MS method) 4) High resolution mass spectrometry: C ₃₁ H ₄₇ N ₂ O ₉ S ₂ [(M + H) ⁺ FAB
-Measured by MS method] Measured value 655.2723 Calculated value 655.2723 5) Infrared absorption spectrum: ν _max cm ^-1 potassium bromide (KBr) The infrared absorption spectrum measured by the tablet method is as shown below. 3401, 1651, 1598, 1526, 1457, 1290, 1216, 1155, 11
09, 1052975.

【００１１】６）紫外線吸収スペクトル：λ_max nm
（ε） メタノール中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次に
示す通りである。 210(20、900) 、300(2、600)、385(8、900) ７）比旋光度：［α］_D ²⁵ ＝＋1.48°(C 0.81 、メタノ
−ル) ８）高速液体クロマトグラフィー： 分離カラム；ＹＭＣ Ａ−３１２ (カラムサイズ、 φ6
× 150 mm、山村科学（株）製 ) 溶媒； 40 % アセトニトリル−水 流速； 1.5 ml ／分 波長； 220-450 nm （フォトダイオ−ドアレイ検出） 保持時間； 8.7 分。6) Ultraviolet absorption spectrum: λ _max nm
(Ε) The ultraviolet absorption spectrum measured in methanol is as shown below. 210 (20,900), 300 (2,600), 385 (8,900) 7) Specific rotation: [α] _D ²⁵ = + 1.48 ° (C 0.81, methanol) 8) High performance liquid chromatography : Separation column; YMC A-312 (column size, φ6
× 150 mm, Yamamura Scientific Co., Ltd.) Solvent: 40% acetonitrile-water Flow rate: 1.5 ml / min Wavelength: 220-450 nm (photodiode array detection) Retention time: 8.7 min.

【００１２】９） ¹Ｈー核磁気共鳴スペクトル：（δ：
ppm ） 重メタノール中、内部基準にテトラメチルシランを使用
して測定した核磁気共鳴スペクトル(400 MHz) は、次に
示す通りである。 0.94(3H,t,J=7.3 Hz) 、 1.01(3H,d,J=6.9 Hz)、 1.40(8
H,br.s) 、1.70(5H,m)、2.13(3H,s)、2.15(2H,m)、2.25
(1H,m)、2.40(2H,t,J=7.4 Hz) 、 3.29(1H,m)、3.54(1
H,d,J=11.3 Hz)、3.70(1H,dd,J=9.6および 1.7 Hz)、3.
77(1H,dd,J=11.3 および 2.5 Hz)、3.84(1H,dd,J=9.6お
よび 3.2 Hz)、3.92(1H, br.s)、4.09(2H,t,J=6.4 Hz)
、4.33(1H,s)、 5.45(2H,m)、6.08(1H,s)、7.08(1H,
s)。9) ¹ H-nuclear magnetic resonance spectrum: (δ:
ppm) Nuclear magnetic resonance spectrum (400 MHz) measured by using tetramethylsilane as an internal standard in deuterated methanol is as shown below. 0.94 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.01 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.40 (8
H, br.s), 1.70 (5H, m), 2.13 (3H, s), 2.15 (2H, m), 2.25
(1H, m), 2.40 (2H, t, J = 7.4 Hz), 3.29 (1H, m), 3.54 (1
H, d, J = 11.3 Hz), 3.70 (1H, dd, J = 9.6 and 1.7 Hz), 3.
77 (1H, dd, J = 11.3 and 2.5 Hz), 3.84 (1H, dd, J = 9.6 and 3.2 Hz), 3.92 (1H, br.s), 4.09 (2H, t, J = 6.4 Hz)
, 4.33 (1H, s), 5.45 (2H, m), 6.08 (1H, s), 7.08 (1H, s)
s).

【００１３】１０）¹³Ｃー核磁気共鳴スペクトル：(
δ：ppm) 重ジメチルスルホキシド中、内部基準にテトラメチルシ
ランを使用して測定した核磁気共鳴スペクトル(90 MHz)
は、次に示す通りである。 171.7(s)、167.8(s)、166.0(s)、160.8(s)、133.9(d)、
133.8(s)、133.6(s)、127.6(s)、115.2(d)、114.2(d)、
110.4(d)、 76.1(d)、74.9(d)、 72.3(d)、 69.5(d)、
64.1(t)、 63.8(d)、 62.9(t)、42.1(d)、 41.7(d)、 3
4.5(t)、 31.8(t)、 28.3(t)、 28.2(t)、28.1(t)、 2
6.8(t)、 25.2(t)、 24.8(t)、 16.9(q)、 15.6(q)、1
0.4(q)。10) ¹³ C-nuclear magnetic resonance spectrum: (
δ: ppm) Nuclear magnetic resonance spectrum (90 MHz) measured using tetramethylsilane as an internal standard in deuterated dimethyl sulfoxide.
Is as shown below. 171.7 (s), 167.8 (s), 166.0 (s), 160.8 (s), 133.9 (d),
133.8 (s), 133.6 (s), 127.6 (s), 115.2 (d), 114.2 (d),
110.4 (d), 76.1 (d), 74.9 (d), 72.3 (d), 69.5 (d),
64.1 (t), 63.8 (d), 62.9 (t), 42.1 (d), 41.7 (d), 3
4.5 (t), 31.8 (t), 28.3 (t), 28.2 (t), 28.1 (t), 2
6.8 (t), 25.2 (t), 24.8 (t), 16.9 (q), 15.6 (q), 1
0.4 (q).

【００１４】１１）薄層クロマトグラフィー： Ｒｆ値； 0.45 吸着剤； シリカゲル（メルク社製、Art.5715） 展開溶剤；ジクロロメタン：メタノール ＝ 85 ：15
。11) Thin layer chromatography: Rf value; 0.45 adsorbent; silica gel (Merck & Co., Art.5715) developing solvent; dichloromethane: methanol = 85: 15
.

【００１５】本発明のチオマリノ−ルＥは下記の構造式
および性状を有する。Thiomalinol E of the present invention has the following structural formula and properties.

【００１６】[0016]

【化７】 [Chemical 7]

【００１７】１）物質の性状：黄色粉末 ２）分子式：C₃₂ H₄₈ N₂ O₉ S₂ ３）分子量： 668 (FAB-MS法により測定） ４）高分解能質量分析：C₃₂ H₄₉ N₂ O₉ S₂[(M+H)⁺ FAB
-MS 法により測定］ 実測値 669.2875 計算値 669.2880 ５）紫外線吸収スペクトル：λ_max nm（ε） メタノール中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次に
示す通りである。 210 、300 、385 ６）高速液体クロマトグラフィー： 分離カラム；ＹＭＣ Ａ−３１２ (カラムサイズ、 φ6
× 150 mm、山村科学（株）製 ) 溶媒； 40 % アセトニトリル−水 流速； 1.5 ml ／分 波長； 220-450 nm （フォトダイオ−ドアレイ検出） 保持時間； 11.8 分。1) Property of substance: yellow powder 2) Molecular formula: C ₃₂ H ₄₈ N ₂ O ₉ S ₂ 3) Molecular weight: 668 (measured by FAB-MS method) 4) High resolution mass spectrometry: C ₃₂ H ₄₉ N ₂ O ₉ S ₂ [(M + H) ⁺ FAB
-Measured by MS method] Measured value 669.2875 Calculated value 669.2880 5) Ultraviolet absorption spectrum: λ _max nm (ε) The ultraviolet absorption spectrum measured in methanol is as shown below. 210, 300, 38 5) High performance liquid chromatography: Separation column; YMC A-312 (column size, φ6
× 150 mm, Yamamura Scientific Co., Ltd.) solvent: 40% acetonitrile-water flow rate: 1.5 ml / min wavelength: 220-450 nm (photodiode array detection) retention time: 11.8 min.

【００１８】７） ¹Ｈー核磁気共鳴スペクトル：（δ：
ppm ） 重メタノール中、内部基準にテトラメチルシランを使用
して測定した核磁気共鳴スペクトル(400 MHz) は、次に
示す通りである。 0.98(3H,d,J=6.7 Hz) 、 1.09(3H,d,J=6.4 Hz)、 1.35(1
0H,br.s)、1.65(5H,m)、2.14(3H,s)、2.17(2H,m)、2.25
(1H,m)、2.40(2H,t,J=7.4 Hz) 、 3.54(1H,d,J=11.4 H
z)、3.60(1H,m)、 3.70(1H,dd,J=9.5 および 1.5 Hz)、
3.78(1H,dd,J=11.4 および 2.5 Hz)、3.84(1H,dd,J=9.5
および 3.2 Hz)、3.92(1H, br.s)、4.08(2H,t,J=6.4 H
z) 、4.35(1H,s)、 5.46(2H,m)、6.07(1H,s)、7.08(1
H,s)。7) ¹ H-nuclear magnetic resonance spectrum: (δ:
ppm) Nuclear magnetic resonance spectrum (400 MHz) measured by using tetramethylsilane as an internal standard in deuterated methanol is as shown below. 0.98 (3H, d, J = 6.7 Hz), 1.09 (3H, d, J = 6.4 Hz), 1.35 (1
0H, br.s), 1.65 (5H, m), 2.14 (3H, s), 2.17 (2H, m), 2.25
(1H, m), 2.40 (2H, t, J = 7.4 Hz), 3.54 (1H, d, J = 11.4 H
z), 3.60 (1H, m), 3.70 (1H, dd, J = 9.5 and 1.5 Hz),
3.78 (1H, dd, J = 11.4 and 2.5 Hz), 3.84 (1H, dd, J = 9.5
And 3.2 Hz), 3.92 (1H, br.s), 4.08 (2H, t, J = 6.4 H
z), 4.35 (1H, s), 5.46 (2H, m), 6.07 (1H, s), 7.08 (1
H, s).

【００１９】８）¹³Ｃー核磁気共鳴スペクトル：( δ：
ppm) 重メタノール中、内部基準にテトラメチルシランを使用
して測定した核磁気共鳴スペクトル(100 MHz) は、次に
示す通りである。 174.4(s)、170.4(s)、168.6(s)、161.2(s)、138.0(s)、
135.7(d)、135.1(s)、129.8(d)、116.2(d)、115.8(s)、
113.6(d)、 77.5(d)、74.4(d)、 72.1(d)、 71.8(d)、
65.9(t)、 65.7(t)、 64.9(t)、45.3(d)、 44.9(d)、 3
6.6(t)、 33.4(t)、 30.4(t)、30.2(t)×2 、 30.1
(t)、 29.8(t)、 27.1(t)、 26.7(t)、20.3(q)、 16.6
(q)、16.3(q) 。8) ¹³ C-nuclear magnetic resonance spectrum: (δ:
ppm) Nuclear magnetic resonance spectrum (100 MHz) measured by using tetramethylsilane as an internal standard in deuterated methanol is as shown below. 174.4 (s), 170.4 (s), 168.6 (s), 161.2 (s), 138.0 (s),
135.7 (d), 135.1 (s), 129.8 (d), 116.2 (d), 115.8 (s),
113.6 (d), 77.5 (d), 74.4 (d), 72.1 (d), 71.8 (d),
65.9 (t), 65.7 (t), 64.9 (t), 45.3 (d), 44.9 (d), 3
6.6 (t), 33.4 (t), 30.4 (t), 30.2 (t) × 2, 30.1
(t), 29.8 (t), 27.1 (t), 26.7 (t), 20.3 (q), 16.6
(q), 16.3 (q).

【００２０】９）薄層クロマトグラフィー： Ｒｆ値； 0.50 吸着剤； シリカゲル（メルク社製、Art.5715） 展開溶剤；ジクロロメタン：メタノール ＝ 85 ：15
。9) Thin layer chromatography: Rf value; 0.50 adsorbent; silica gel (Merck & Co., Art.5715) developing solvent; dichloromethane: methanol = 85: 15
.

【００２１】本発明のチオマリノ−ルＦは下記の構造式
および性状を有する。The thiomarinol F of the present invention has the following structural formula and properties.

【００２２】[0022]

【化８】 Embedded image

【００２３】１）物質の性状：黄色粉末 ２）分子式：C₃₀ H₄₂ N₂ O₉ S₂ ３）分子量： 638 (FAB-MS法により測定） ４）高分解能質量分析：C₃₀ H₄₃ N₂ O₉ S₂[(M+H)⁺ FAB
-MS 法により測定］ 実測値 639.2411 計算値 639.2410 ５）赤外線吸収スペクトル：ν_maxcm^-1 臭化カリウム(KBr) 錠剤法で測定した赤外線吸収スペク
トルは、次に示す通りである。 3408、1698、1652、1598、1523、1455、1290、1216、11
55、1114、1053、 975。1) Property of substance: yellow powder 2) Molecular formula: C ₃₀ H ₄₂ N ₂ O ₉ S ₂ 3) Molecular weight: 638 (measured by FAB-MS method) 4) High resolution mass spectrometry: C ₃₀ H ₄₃ N ₂ O ₉ S ₂ [(M + H) ⁺ FAB
-Measured by MS method] Measured value 639.2411 Calculated value 639.2410 5) Infrared absorption spectrum: ν _max cm ^-1 Potassium bromide (KBr) The infrared absorption spectrum measured by the tablet method is as shown below. 3408, 1698, 1652, 1598, 1523, 1455, 1290, 1216, 11
55, 1114, 1053, 975.

【００２４】６）紫外線吸収スペクトル：λ_max nm
（ε） メタノール中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次に
示す通りである。 210(21、200) 、300(2、600)、385(8、500) ７）比旋光度：［α］_D ²⁵ ＝−1.66°(C 0.78 、メタノ
−ル) ８）高速液体クロマトグラフィー： 分離カラム；ＹＭＣ Ａ−３１２ (カラムサイズ、 φ6
× 150 mm、山村科学（株）製 ) 溶媒； 40 % アセトニトリル−水 流速； 1.5 ml ／分 波長； 220-450 nm （フォトダイオ−ドアレイ検出） 保持時間； 6.7 分。6) Ultraviolet absorption spectrum: λ _max nm
(Ε) The ultraviolet absorption spectrum measured in methanol is as shown below. 210 (21,200), 300 (2,600), 385 (8,500) 7) Specific rotation: [α] _D ²⁵ = -1.66 ° (C 0.78, methanol) 8) High performance liquid chromatography: Separation column; YMC A-312 (column size, φ6
× 150 mm, manufactured by Yamamura Kagaku Co., Ltd.) solvent: 40% acetonitrile-water flow rate: 1.5 ml / min wavelength: 220-450 nm (photodiode array detection) retention time: 6.7 min.

【００２５】９） ¹Ｈー核磁気共鳴スペクトル：（δ：
ppm ） 重メタノール中、内部基準にテトラメチルシランを使用
して測定した核磁気共鳴スペクトル(400 MHz) は、次に
示す通りである。 1.11(3H,d,J=6.8 Hz)、 1.40(6H,br.s)、1.65(5H,m)、2.
12(6H,s)、2.18(1H,m)、2.28(1H,m)、2.40(2H,t,J=7.4
Hz) 、3.25(1H,m)、3.50(1H,d,J=11.5 Hz)、 3.70(1H,d
d,J=9.5 および 1.5 Hz)、3.79(1H,dd,J=11.5 および
2.3 Hz)、3.85(1H,dd,J=9.5および 3.0 Hz)、3.91(1H,
br.s)、4.10(2H,m)、4.35(1H,s)、 5.52(1H,m)、 5.63
(1H,m) 、6.08(1H,s)、7.08(1H,s)。9) ¹ H-nuclear magnetic resonance spectrum: (δ:
ppm) Nuclear magnetic resonance spectrum (400 MHz) measured by using tetramethylsilane as an internal standard in deuterated methanol is as shown below. 1.11 (3H, d, J = 6.8 Hz), 1.40 (6H, br.s), 1.65 (5H, m), 2.
12 (6H, s), 2.18 (1H, m), 2.28 (1H, m), 2.40 (2H, t, J = 7.4
Hz), 3.25 (1H, m), 3.50 (1H, d, J = 11.5 Hz), 3.70 (1H, d
d, J = 9.5 and 1.5 Hz), 3.79 (1H, dd, J = 11.5 and
2.3 Hz), 3.85 (1H, dd, J = 9.5 and 3.0 Hz), 3.91 (1H,
br.s), 4.10 (2H, m), 4.35 (1H, s), 5.52 (1H, m), 5.63
(1H, m), 6.08 (1H, s), 7.08 (1H, s).

【００２６】１０）¹³Ｃー核磁気共鳴スペクトル：(
δ：ppm) 重メタノール中、内部基準にテトラメチルシランを使用
して測定した核磁気共鳴スペクトル(100 MHz) は、次に
示す通りである。 212.4(s)、174.3(s)、170.4(s)、168.6(s)、161.1(s)、
137.9(s)、135.1(s)、132.5(d)、132.4(d)、116.2(d)、
115.8(s)、113.6(d)、77.5(d)、 74.3(d)、 71.7(d)、
65.8(t)、 65.6(d)、 64.8(t)、52.0(d)、 43.7(d)、 3
6.5(t)、 33.2(t)、 30.0(t)、 29.9(t)、29.7(t)、 2
8.1(q)、 26.9(t)、 26.6(t)、 16.4(q)、 16.2(q)。10) ¹³ C-nuclear magnetic resonance spectrum: (
δ: ppm) Nuclear magnetic resonance spectrum (100 MHz) measured by using tetramethylsilane as an internal standard in deuterated methanol is as shown below. 212.4 (s), 174.3 (s), 170.4 (s), 168.6 (s), 161.1 (s),
137.9 (s), 135.1 (s), 132.5 (d), 132.4 (d), 116.2 (d),
115.8 (s), 113.6 (d), 77.5 (d), 74.3 (d), 71.7 (d),
65.8 (t), 65.6 (d), 64.8 (t), 52.0 (d), 43.7 (d), 3
6.5 (t), 33.2 (t), 30.0 (t), 29.9 (t), 29.7 (t), 2
8.1 (q), 26.9 (t), 26.6 (t), 16.4 (q), 16.2 (q).

【００２７】１１）薄層クロマトグラフィー： Ｒｆ値； 0.50 吸着剤； シリカゲル（メルク社製、Art.5715） 展開溶剤；ジクロロメタン：メタノール ＝ 85 ：15
。11) Thin layer chromatography: Rf value; 0.50 adsorbent; silica gel (Merck & Co., Art.5715) developing solvent; dichloromethane: methanol = 85:15
.

【００２８】本発明のチオマリノ−ルＤ、ＥおよびＦは
いくつかの不整炭素原子およびいくつかの二重結合を有
する。特にα、β−不飽和カルボニル部分は異性化され
る可能性がある。それ故、種々の光学および幾何異性体
が存在する。本発明においては、これらの異性体がすべ
て単一の式で示されている。従って、本発明において
は、ラセミ化合物を含むこれらの異性体およびこれらの
異性体の混合物をもすべて含むものである。立体特異的
合成法が使用される場合、または光学活性化合物が原料
化合物として使用される場合、個々の異性体は直接的に
製造してもよいし、一方、異性体の混合物が製造されれ
ば個々の異性体は常法により得てもよい。更に、これら
のチオマリノールが、溶剤和物（例えば水和物）を形成
する場合には、これらもすべて含むものである。The thiomarinols D, E and F of the present invention have some asymmetric carbon atoms and some double bonds. In particular, the α, β-unsaturated carbonyl moiety may be isomerized. Therefore, there are various optical and geometrical isomers. In the present invention, all of these isomers are represented by a single formula. Therefore, in the present invention, all of these isomers including a racemate and a mixture of these isomers are also included. If stereospecific synthetic methods are used, or if an optically active compound is used as the starting compound, the individual isomers may be prepared directly, while a mixture of isomers is prepared. Individual isomers may be obtained by a conventional method. Further, when these thiomarinols form solvates (for example, hydrates), they are all included.

【００２９】本発明のチオマリノ−ルＤ、Ｅおよび／ま
たはＦを生産する上記 SANK 73390株の由来、菌学的性
状、命名の由来は既に前述の例えば特開平５−１３２４
８６号、特開平６−３３６４８７号などに記載されてい
る。The origin, mycological properties, and origin of the SANK 73390 strain producing the thiomarinol D, E, and / or F of the present invention have already been described above, for example, in JP-A-5-1324.
No. 86, JP-A-6-336487 and the like.

【００３０】本菌株は、アルテロモナス・ラバ・ SANK
73390 （Alteromonas rava SANK 73390 ）株としてブダ
ペスト条約に従って通商産業省工業技術院微生物工業技
術研究所に国際寄託されている（寄託番号、微工研条寄
第 3381 号 (FERM BP-3381)：原寄託日、1991年 4月30
日）。This strain is Alteromonas mule SANK
73390 (Alteromonas rava SANK 73390) strain has been internationally deposited under the Budapest Treaty with the Institute for Microbial Technology, Ministry of International Trade and Industry, Ministry of International Trade and Industry (Deposit No., Micromachinery Research Institute No. 3381 (FERM BP-3381): Original deposit Sun, April 30, 1991
Day).

【００３１】以上、SANK 73390 株について説明した
が、周知の如くアルテロモナス属の菌類の諸性質は一定
したものではなく、自然的、または人工的な操作（例え
ば、紫外線照射、放射線照射、化学薬品処理等）によ
り、変異を起こし易く、本発明のSANK 73390 株もこの
点は同じである。本発明にいう SANK 73390 株はその
すべての変異株を包含する。また、これらの変異株の中
には、遺伝学的方法、例えば、組み替え、形質導入、形
質転換等により得られたものも包含される。即ち、アル
テロモナス属に属するチオマリノ−ルを生産する、SANK
73390 株、その変異株およびそれらと明確に区別され
ない菌株は、すべて SANK 73390 株に包含されるもので
ある。Although the SANK 73390 strain has been described above, it is well known that the properties of fungi of the genus Alteromonas are not constant, and natural or artificial operations (for example, ultraviolet irradiation, irradiation, chemical treatment) are performed. Etc.), and the SANK 73390 strain of the present invention is the same in this respect. The SANK 73390 strain referred to in the present invention includes all mutants thereof. Further, these mutants also include those obtained by genetic methods such as recombination, transduction, transformation and the like. That is, SANK, which produces thiomarinol belonging to the genus Alteromonas,
The 73390 strain, its mutant strains, and strains not clearly distinguished from them are all included in the SANK 73390 strain.

【００３２】本発明の新規化合物チオマリノ−ルＤ、Ｅ
および／またはＦを得るため、これらの微生物の培養は
他の発酵生成物を生産するために用いられるような培地
中で行なわれる。このような培地中には、微生物が資化
出来る炭素源、窒素源および無機塩を含有する。Thiomalinol D, E, novel compounds of the present invention
In order to obtain and / or F, cultivation of these microorganisms is carried out in a medium as used for producing other fermentation products. Such a medium contains a carbon source, a nitrogen source and an inorganic salt that can be assimilated by the microorganism.

【００３３】一般に、炭素源としてグルコース、フラク
トース、マルトース、シュークロース、マンニトール、
グリセロール、デキストリン、オート麦、ライ麦、トウ
モロコシデンプン、ジャガイモ、トウモロコシ粉、大豆
粉、綿実油、糖蜜、クエン酸、酒石酸などを単一に、あ
るいは併用して用いる事が出来る。一般には、培地量の
1ー10 重量％で変量する。Generally, carbon, glucose, fructose, maltose, sucrose, mannitol,
Glycerol, dextrin, oats, rye, corn starch, potato, corn flour, soybean flour, cottonseed oil, molasses, citric acid, tartaric acid and the like can be used alone or in combination. Generally,
It varies from 1 to 10% by weight.

【００３４】窒素源としては、一般に蛋白質を含有する
物質を発酵工程に用いる。適当な窒素源としては、大豆
粉、フスマ、落花生粉、綿実粉、カゼイン加水分解物、
ファーマミン、魚粉、コーンスチープリカー、ペプト
ン、肉エキス、イースト、イーストエキス、マルトエキ
ス等の動物系、植物系またはエキス類の窒素源、硝酸ナ
トリウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム等の無
機窒素源である。窒素源は、単一または併用して培地量
の 0.1-6重量％の範囲で用いる。As the nitrogen source, a substance containing a protein is generally used in the fermentation process. Suitable nitrogen sources include soybean flour, bran, peanut flour, cottonseed flour, casein hydrolyzate,
It is a nitrogen source for animal-based plants such as pharmamin, fish meal, corn steep liquor, peptone, meat extract, yeast, yeast extract, and malt extract, plant-based extracts, and inorganic nitrogen sources such as sodium nitrate, ammonium nitrate, and ammonium sulfate. The nitrogen sources are used alone or in combination within the range of 0.1-6% by weight of the medium amount.

【００３５】培地中に取り入れる栄養無機塩は、ナトリ
ウム、アンモニウム、カルシウム、カリウム、マグネシ
ウム、鉄、フォスフェート、サルフェート、クロライ
ド、カーボネート等のイオンを得ることの出来る通常の
塩類である。また、コバルト、マンガン、ストロンチウ
ム等の微量の金属、その他ブロマイド、フルオライド、
ボレ−ト、シリケ−ト等の微量イオンを得る塩も含む。The nutrient inorganic salts incorporated into the medium are ordinary salts capable of obtaining ions such as sodium, ammonium, calcium, potassium, magnesium, iron, phosphate, sulfate, chloride and carbonate. In addition, trace amounts of metals such as cobalt, manganese, and strontium, other bromides, fluorides,
It also includes salts for obtaining trace ions such as borate and silicate.

【００３６】液体培養に際しては、消泡剤としてシリコ
ン油、植物油、界面活性剤等が使用される。In liquid culture, silicone oil, vegetable oil, surfactant or the like is used as an antifoaming agent.

【００３７】アルテロモナス・ラバ（Alteromonas rav
a） SANK 73390 株を培養しチオマリノ−ルＤ、Ｅおよ
び／またはＦを生産する培地の pH は、5.0ー8.0 に変化
させることが出来る。[0037] Alteromonas rav
a) The pH of the medium for culturing the SANK 73390 strain and producing thiomarinol D, E and / or F can be changed to 5.0-8.0.

【００３８】菌の生育温度は 4 ℃ から 32 ℃ まで
であるが 17 ℃ から 26 ℃ の範囲が生育良好であ
り、 更にチオマリノ−ルＤ、Ｅおよび／またはＦの生産
には、20 ℃ から 26 ℃ が好適である。The growth temperature of the fungus is from 4 ° C to 32 ° C, but the growth is good in the range of 17 ° C to 26 ° C. Further, for the production of thiomarinol D, E and / or F, 20 ° C to 26 ° C. C is preferred.

【００３９】チオマリノ−ルＤ、Ｅおよび／またはＦ
は、好気的に培養して得られるが通常用いられる好気的
培養法、例えば固体培養法，振とう培養法、通気撹拌培
養法等が用いられる。Thiomalinol D, E and / or F
Can be obtained by culturing aerobically, but a commonly used aerobic culturing method, for example, a solid culturing method, a shaking culturing method, an aeration stirring culturing method or the like is used.

【００４０】小規模な培養においては、20 ℃ から 2
6 ℃で数日間振とう培養を行うのが良好である。培養は
三角フラスコ中で、１ー２段階の種の発育工程により開
始する。種発育段階の培地は、炭素源および窒素源を併
用出来る。種フラスコは定温インキュベーター中で 23
℃、1 乃至 3 日間振とうするか、または充分に成長す
るまで振とうする。成長した種は第二の種培地、または
生産培地に接種するのに用いる。中間の発育工程を用い
る場合には、本質的に同様の方法で成長させ、生産培地
に接種するためにそれを部分的に用いる。接種したフラ
スコを一定温度で 1 乃至3 日間、または生産量が最大
に達するまで振とうし、インキュベーションが終わった
らフラスコの含有物を遠心分離またはろ過する。For small-scale culture, 20 ° C to 2 ° C
It is better to perform shaking culture at 6 ° C for several days. Culturing is started in an Erlenmeyer flask by 1-2 seed development steps. The carbon medium and the nitrogen source can be used together in the medium at the seed developing stage. Seed flask in a constant temperature incubator 23
Shake at ℃ for 1 to 3 days or until it grows sufficiently. The grown seed is used to inoculate a second seed medium, or production medium. If an intermediate development step is used, it is grown in essentially the same way and partially used to inoculate the production medium. Shake the inoculated flask at constant temperature for 1-3 days or until maximum production is reached, and after incubation, centrifuge or filter the contents of the flask.

【００４１】大量培養の場合には、撹拌機、通気装置を
付けた適当なタンクで培養するのが好ましい。この方法
によれば、栄養培地をタンクの中で作成出来る。栄養培
地を120 ℃ まで加熱して滅菌し、冷却後、滅菌培地
にあらかじめ成長させてあった種を接種する。培養は 2
0 ℃乃至 26 ℃で通気撹拌して行う。この方法は、多量
の化合物を得るのに適している。In the case of large-scale culture, it is preferable to culture in a suitable tank equipped with a stirrer and an aeration device. According to this method, the nutrient medium can be prepared in the tank. Sterilize the nutrient medium by heating it to 120 ° C, cool and inoculate the sterile medium with the pre-grown seeds. Culture is 2
It is performed by aeration stirring at 0 ° C to 26 ° C. This method is suitable for obtaining large amounts of compounds.

【００４２】培養の経過に伴って生産されるチオマリノ
−ルＤ、Ｅおよび／またはＦの量の経時変化は、高速液
体クロマトグラフィーを用いて測定することが出来る。
通常は、70 時間から 150 時間の培養でチオマリノ−
ルＤ、Ｅおよび／またはＦの生産量は最高値に達する。The change with time of the amount of thiomarinol D, E and / or F produced with the progress of culture can be measured by high performance liquid chromatography.
Usually, thiomarino-
The maximum production of le D, E and / or F is reached.

【００４３】培養終了後、培養液中の液体部分及び菌体
内に存在するチオマリノ−ルＤ、Ｅおよび／またはＦ
は、菌体、その他の固形部分を珪藻土をろ過助剤とす
る、ろ過操作または遠心分離によって分別し、そのろ液
または上清中および菌体中に存在するチオマリノ−ル
を、その物理化学的性状を利用し抽出精製することによ
り得られる。例えば、ろ液または、上清中に存在するチ
オマリノ−ルＤ、Ｅおよび／またはＦは、中性または酸
性 pH 条件下で水と混和しない有機溶剤、例えば酢酸エ
チル、クロロホルム、塩化エチレン、塩化メチレンなど
の単独または、それらの組み合わせにより抽出精製する
ことができる。あるいは吸着剤として、例えば活性炭ま
たは吸着用樹脂であるアンバーライト XAD−2 、XAD −
4 ( ローム・アンド・ハース社製) 等や、ダイアイオン
HP −10、HP−20、 CHP−20、HP−50(三菱化成（株）
製) 等が使用される。チオマリノ−ルＤ、Ｅおよび／ま
たはＦを含む液を上記のごとき吸着剤の層を通過させて
不純物を吸着させて取り除くか、またはチオマリノ−ル
Ｄ、Ｅおよび／またはＦを吸着させた後、メタノール
水、アセトン水、ｎ−ブタノール水などを用いて溶出さ
せることにより得られる。また、菌体内に存在するチオ
マリノ−ルＤ、Ｅおよび／またはＦは、50-90 ％ 含水
アセトンまたは含水メタノールにより抽出し有機溶剤を
除去した後、ろ液と同様な抽出精製操作を行なうことに
より得られる。After the completion of the culture, thiomarinol D, E and / or F existing in the liquid portion of the culture medium and the cells are
Is to separate microbial cells and other solid parts by filtration operation or centrifugation using diatomaceous earth as a filter aid, and to remove thiomarinol present in the filtrate or supernatant and microbial cells of the physicochemical It can be obtained by extracting and purifying using properties. For example, thiomarinol D, E and / or F present in the filtrate or the supernatant is an organic solvent immiscible with water under neutral or acidic pH conditions such as ethyl acetate, chloroform, ethylene chloride, methylene chloride. Etc., or a combination thereof can be used for extraction and purification. Alternatively, as an adsorbent, for example, activated carbon or adsorption resin Amberlite XAD-2, XAD-
4 (made by Rohm and Haas Company)
HP-10, HP-20, CHP-20, HP-50 (Mitsubishi Kasei)
Manufactured) etc. are used. The liquid containing thiomarinol D, E and / or F is passed through a layer of the adsorbent as described above to adsorb and remove impurities, or after adsorbing thiomarinol D, E and / or F, It can be obtained by eluting with methanol water, acetone water, n-butanol water or the like. Thiomalinol D, E and / or F existing in the cells can be extracted with 50-90% hydrated acetone or hydrated methanol to remove the organic solvent and then subjected to the same extraction and purification procedure as the filtrate. can get.

【００４４】このようにして得られたチオマリノ−ル
Ｄ、Ｅおよび／またはＦは、更にシリカゲル、マグネシ
ウムーシリカゲル系のフロリジルのような担体を用いた
吸着カラムクロマトグラフィー、セファデックス LH −
20( ファルマシア社製) などを用いた分配カラムクロマ
トグラフィー、および順相、逆相カラムを用いた高速液
体クロマトグラフィー等で精製することが出来る。以上
の分離、精製の手段を単独または適宜組み合わせ反復用
いることによりチオマリノ−ルＤ、Ｅおよび／またはＦ
を分離精製することができる。The thiomarinol D, E and / or F thus obtained is further subjected to adsorption column chromatography using a carrier such as silica gel or magnesium-silica gel florisil, Sephadex LH-.
It can be purified by partition column chromatography using 20 (Pharmacia) and high performance liquid chromatography using normal phase and reverse phase columns. Thiomalinol D, E and / or F can be obtained by repeating the above-mentioned separation and purification means alone or in appropriate combination.
Can be separated and purified.

【００４５】[0045]

【作用】本発明のチオマリノ−ルＤ、Ｅおよび／または
Ｆは、文献未載の新規化合物であり、動物( 例、ヒト、
イヌ、ネコ、ウサギ等) において、グラム陽性細菌、グ
ラム陰性細菌およびマイコプラズマ菌に対し抗菌作用を
示すことから、各種細菌感染症を対照とする抗菌剤とし
て有用である。The thiomarinol D, E and / or F of the present invention is a novel compound which has not been published in the literature, and can be used in animals (eg, human,
In dogs, cats, rabbits, etc.), it shows an antibacterial action against Gram-positive bacteria, Gram-negative bacteria and Mycoplasma bacteria, and is therefore useful as an antibacterial agent against various bacterial infections.

【００４６】本発明のチオマリノ−ルＤ、Ｅおよび／ま
たはＦを医薬として用いる場合、常法に従って種々の形
態で投与される。その投与形態としては例えば散剤、顆
粒剤、錠剤、カプセル剤、シロップ剤などの形態で経口
的または注射剤（静脈内、筋肉内、皮下）、点滴剤、座
剤、塗布剤、軟膏剤などの形態で非経口的に安全に投与
することが出来る。これらの各種製剤は、常法に従って
主薬に賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味
矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コ−ティング剤、希釈剤
などの医薬の製剤技術分野において通常使用しうる既知
の補助剤を用いて製剤化することができる。投与量は対
象疾患、投与経路および投与回数などにより異なるが、
例えば成人に対しては 1 日 20 mg から 2000 mg
を、症状に応じて 1 回または数回に分けて投与するの
が好ましい。When the thiomarinol D, E and / or F of the present invention is used as a medicine, it is administered in various forms according to a conventional method. The dosage forms include, for example, powder, granules, tablets, capsules, syrups, orally or injectable (intravenous, intramuscular, subcutaneous), drip, suppository, ointment, ointment, etc. It can be safely administered parenterally in the form. These various preparations are pharmaceuticals such as an excipient, a binder, a disintegrating agent, a lubricant, a stabilizer, a flavoring agent, a solubilizing agent, a suspending agent, a coating agent, a diluent, etc. It is possible to formulate using known auxiliary agents which can be usually used in the technical field of pharmaceutical preparation. The dose varies depending on the target disease, administration route, number of administrations, etc.
20 mg to 2000 mg daily for adults
Is preferably administered once or in several divided doses depending on the symptoms.

【００４７】[0047]

【実施例】次に実施例をあげて本発明を更に具体的に説
明するが、 本発明はこれらに限定されるものではない。実施例１．チオマリノ−ルＤ、Ｅおよび／またはＦのタ
ンク培養 Ａ）培養 アルテロモナス・ラバ SANK 73390 株を、マリンアガ−
（Marine Agar、 Difco社製）斜面培地上で 22 ℃で 3
日間培養を行い、それを人工海水 3 ml に懸濁させ、そ
の 0.1 ml を無菌的に、滅菌した後述の組成の培地 100
mlを含む 500mlの三角フラスコに接種し、 23 ℃ で、
200 rpm (7 cmの回転半径) のロータリー振とう培養機
で 24 時間培養し、一次種培養とした。その 300 ml を
無菌的に滅菌した同様の組成の培地 30 リットルを含む 60
リットルのジャ−ファ−メンタ−に埴菌し、 23 ℃で、通気
（15 リットル ／分）、攪拌（165-175 rpm ）下に 20 時間
培養し、二次種培養とした。The present invention will be described in more detail with reference to examples, but the present invention is not limited thereto. Example 1. Thiomalinol D, E and / or F tag
Culture A) Culture Alteromonas mule SANK 73390 strain
(Marine Agar, manufactured by Difco) 3 on a slant medium at 22 ° C
After culturing for a day, suspend it in 3 ml of artificial seawater, and 0.1 ml of that is sterilized and sterilized.
inoculate a 500 ml Erlenmeyer flask containing 3 ml and at 23 ° C,
The cells were cultivated for 24 hours on a rotary shaker at 200 rpm (7 cm radius of gyration) and used as the primary seed culture. 60 ml containing 30 liters of similar composition medium sterilely sterilized
The bacterium was put on a liter jar fermenter and cultured at 23 ° C. for 20 hours under aeration (15 liter / min) and stirring (165-175 rpm) to obtain a secondary seed culture.

【００４８】この二次種培養液 3 リットル を無菌的に滅
菌した同様の組成の培地 300 リットルを含む 600 リットル
タンク 2 基に植菌し、23 ℃で、通気（150 リットル／
分）、攪拌（82-92 rpm ）下に 7 日間培養した。600 liters containing 300 liters of similar composition obtained by aseptically sterilizing 3 liters of this secondary seed culture
Inoculate 2 tanks and aerate (150 liter /
Min) and agitated (82-92 rpm) for 7 days.

【００４９】培地組成 グルコース 1.5 ％ バクトペプトン(Difco社製) 1.5 ％ バクトイーストエキス(Difco社製) 0.2 ％ 塩化ナトリウム 3.89 ％ 塩化マグネシウム・６水和物 2.52 ％ 硫酸ナトリウム 0.648 ％ 塩化カルシウム・２水和物 0.4767 ％ 塩化カリウム 0.11 ％ 炭酸ナトリウム 0.038 ％ クエン酸第二鉄 0.02 ％ ───────────────────────── 滅菌前の pH は7.6 であった。Medium composition Glucose 1.5% Bactopeptone (manufactured by Difco) 1.5% Bacto yeast extract (manufactured by Difco) 0.2% Sodium chloride 3.89% Magnesium chloride hexahydrate 2.52% Sodium sulfate 0.648% Calcium chloride dihydrate Product 0.4767% Potassium chloride 0.11% Sodium carbonate 0.038% Ferric citrate 0.02% ───────────────────────── pH before sterilization is 7.6 there were.

【００５０】Ｂ）単離 得られた培養液 600 リットル を、75 ％硫酸溶液で pH 3.
12 に調整し、アセトン 600 リットルを添加し、攪拌し
た。次いで、この培養液にセライト 545（米国ジョーン
ズ・マンビル・プロジェクト・コーポレーション製）
18 Kg を加えてろ過した。更に、セライト 545に吸着し
ているチオマリノール類を得るために、50 ％アセトン
水 150 リットル で洗浄した。得られたアセトン洗浄液と
ろ液を合わせた。得られた合併液に酢酸エチル 600 リット
ル を加えて抽出した。抽出液より酢酸エチル層を分取し
た。水層は更に酢酸エチル 300 リットル を加えて抽出し
た。得られた酢酸エチル抽出液を合併し、順次 5％ 炭
酸水素ナトリウム水溶液300 リットル、飽和食塩水 300 リット
ル で洗浄した。酢酸エチル抽出液を約 10 リットルまで濃縮
した。得られた濃縮液を二等分し、各々にシリカゲル 8
00 g を加えて濃縮乾固した。これを各々シリカゲル 4
Kg を用いて、ジクロロメタンで充填したカラム（2
本）に付した。これを、順次ジクロロメタン、酢酸エチ
ル、メタノールで溶出した。次いで、酢酸エチル−メタ
ノール (9 ：1)で溶出し、チオマリノールを除去した。
次いで、その前後で溶出したマイナー成分を含むフラク
ションを集めて濃縮して、チオマリノ−ルＤ、Ｅおよび
Ｆを含む黄色の油状物25 g を得た。得られた油状物を
コスモシール（ナカダイ ケスク（株）製、6.5 × 54
cm）カラムに充填し、40 ％アセトニトリルで溶出し
た。チオマリノ−ルＦを含むフラクション 101〜130 、
チオマリノ−ルＤを含むフラクション131 〜160 および
チオマリノ−ルＥを含むフラクション 206〜230 をそれ
ぞれ集めて濃縮し、それぞれ粗粉末 14.5 g 、4.9 g 、
2.8 g を得た。チオマリノ−ルＦを含む 14.5 g の粗粉
末を再度、コスモシール（5 × 27 cm）カラムに充填
し、38 ％アセトニトリルで溶出して、チオマリノ−ル
Ｆ 630 mg を含む粗粉末を得た。得られた粗粉末をセフ
ァデックス LH −20( 5 × 30 cm) カラムに付し、ジク
ロロメタン−酢酸エチル−メタノール（20：20：3 ）混
合溶剤で溶出した。高速液体クロマトグラフィー（HPL
C）でモニターして、チオマリノ−ルＦを含むフラクシ
ョンを集め、濃縮すると黄色粉末 41 mg が得られた。
得られた黄色粉末を更に、高速液体クロマトグラフィー
（センシューパック ODS H −4251、 10×250 mm、セン
シュー科学（株）製）に付して40 ％アセトニトリルで
溶出すると、チオマリノ−ルＦ 37 mg が得られた。B) Isolation 600 liters of the obtained culture broth were treated with 75% sulfuric acid solution to pH 3.
The mixture was adjusted to 12, 600 liters of acetone was added, and the mixture was stirred. Next, Celite 545 (manufactured by Jones Manville Project Corporation in the US) was added to this culture solution.
18 Kg was added and filtered. Further, in order to obtain thiomarinols adsorbed on Celite 545, it was washed with 150 liters of 50% acetone water. The obtained acetone washing liquid and the filtrate were combined. The resulting combined solution was extracted by adding 600 liters of ethyl acetate. The ethyl acetate layer was separated from the extract. The aqueous layer was further extracted by adding 300 liters of ethyl acetate. The obtained ethyl acetate extracts were combined and washed successively with 300 liter of 5% sodium hydrogen carbonate aqueous solution and 300 liter of saturated saline. The ethyl acetate extract was concentrated to about 10 liters. The concentrate obtained is divided into two equal parts, and silica gel 8
00 g was added and the mixture was concentrated to dryness. Silica gel 4
A column packed with dichloromethane (2 Kg)
Book). This was sequentially eluted with dichloromethane, ethyl acetate and methanol. Then, it was eluted with ethyl acetate-methanol (9: 1) to remove thiomarinol.
Then, fractions containing minor components eluted before and after that were collected and concentrated to obtain 25 g of a yellow oil containing thiomarinol D, E and F. The obtained oily substance was used as Cosmo Seal (Nakadai Quesque Co., Ltd., 6.5 × 54).
cm) column and eluted with 40% acetonitrile. Fractions 101-130 containing thiomarinol F,
Fractions 131 to 160 containing thiomarinol D and fractions 206 to 230 containing thiomarinol E were collected and concentrated to obtain crude powders 14.5 g, 4.9 g, respectively.
2.8 g was obtained. Cosmosir (5 x 27 cm) column was again charged with 14.5 g of crude powder containing thiomarinol F and eluted with 38% acetonitrile to obtain crude powder containing 630 mg of thiomarinol F. The obtained crude powder was applied to a Sephadex LH-20 (5 x 30 cm) column and eluted with a mixed solvent of dichloromethane-ethyl acetate-methanol (20: 20: 3). High Performance Liquid Chromatography (HPL
Fractions containing thiomarinol F were monitored by C) and concentrated to give 41 mg of a yellow powder.
The obtained yellow powder was further subjected to high performance liquid chromatography (Senshou Pack ODS H-4251, 10 × 250 mm, manufactured by Senshu Scientific Co., Ltd.) and eluted with 40% acetonitrile to give thiomarinol F 37 mg. was gotten.

【００５１】次に、チオマリノ−ルＤを含む粗粉末 4.9
g をセファデックス LH −20( 5× 30 cm) カラムに
付し、ジクロロメタン−酢酸エチル−メタノール（20：
20：3 ）混合溶剤で溶出した。高速液体クロマトグラフ
ィー（HPLC）でモニターして、チオマリノ−ルＤを含む
フラクションを集め、濃縮すると黄色粉末 39 mgが得ら
れた。得られた黄色粉末を更に、高速液体クロマトグラ
フィー（センシューパック ODS H −4251、 10×250 m
m、センシュー科学（株）製）に付して40 ％アセトニ
トリルで溶出すると、チオマリノ−ルＤ 16 mg が得ら
れた。Then, a crude powder containing thiomarinol D 4.9
g was applied to a Sephadex LH-20 (5 × 30 cm) column, and dichloromethane-ethyl acetate-methanol (20:
20: 3) Elution with mixed solvent. Fractions containing thiomarinol D were collected, monitored by high performance liquid chromatography (HPLC) and concentrated to give 39 mg of a yellow powder. The obtained yellow powder was further subjected to high performance liquid chromatography (Senshou Pack ODS H-4251, 10 × 250 m
m, Senshu Kagaku Co., Ltd.) and elution with 40% acetonitrile gave thiomarinol D 16 mg.

【００５２】次に、チオマリノ−ルＥを含む粗粉末 2.8
gをセファデックス LH −20( 5 ×30 cm) カラムに付
し、ジクロロメタン−酢酸エチル−メタノール（20：2
0：3）混合溶剤で溶出した。高速液体クロマトグラフィ
ー（HPLC）でモニターして、チオマリノ−ルＥを含むフ
ラクションを集め、濃縮すると黄色粉末 34 mgが得られ
た。得られた黄色粉末を更に、高速液体クロマトグラフ
ィー（センシューパック ODS H −4251、 10×250 mm、
センシュー科学（株）製）に付して40 ％アセトニトリ
ルで溶出すると、チオマリノ−ルＥ 27 mg が得られ
た。Then, a crude powder containing thiomarinol E 2.8
Apply g to a Sephadex LH-20 (5 x 30 cm) column and add dichloromethane-ethyl acetate-methanol (20: 2
0: 3) Elution with mixed solvent. Fractions containing thiomarinol E were collected and monitored by high performance liquid chromatography (HPLC) and concentrated to give 34 mg of a yellow powder. The obtained yellow powder was further subjected to high performance liquid chromatography (Senshou Pack ODS H-4251, 10 × 250 mm,
When subjected to Senshu Kagaku Co., Ltd. and eluted with 40% acetonitrile, 27 mg of thiomarinol E was obtained.

【００５３】試験例１．チオマリノ−ルＤ、ＥおよびＦ
の抗菌作用 一般グラム陽性および陰性細菌に対するチオマリノ−ル
Ｄ、ＥおよびＦの最小阻止濃度（MIC ）は、普通寒天培
地（栄研化学（株）製）を用いた寒天培地希釈法によっ
て測定した。結果を表１に示す。 Test Example 1. Thiomalinol D, E and F
The minimum inhibitory concentration (MIC) of thiomarinol D, E and F against general Gram positive and negative bacteria was measured by an agar medium dilution method using ordinary agar medium (Eiken Chemical Co., Ltd.). The results are shown in Table 1.

【００５４】[0054]

【表１】 ─────────────────────────────────── 被検菌 最小阻止濃度（MIC ）（μg ／ml） チオマリノール Ｄ Ｅ Ｆ ─────────────────────────────────── スタフィロコッカス アウレウス 209P ≦ 0.01 ≦ 0.01 ≦ 0.01 スタフィロコッカス アウレウス 56R ≦ 0.01 ≦ 0.01 ≦ 0.01 スタフィロコッカス アウレウス 535(MRSA) ≦ 0.01 ≦ 0.01 ≦ 0.01 エンテロコッカス フェカリス 681 0.2 0.05 0.2 エシェリシア コリ NHIJ 1.5 1.5 6.2 エシェリシア コリ 609 1.5 0.8 3.1 サルモネラ エンテリティディス 0.8 0.8 3.1 クレブシェラ ニューモニエ 806 0.8 0.8 3.1 クレブシェラ ニューモニエ 846(R) 0.4 0.4 1.5 エンテロバクタ クロアカエ 963 1.5 1.5 12.5 セラチア マルセセンス 1184 6.2 6.2 25 プロテウス ブルガリス 1420 0.1 0.2 1.5 モルガネラ モルガニー 1510 12.5 12.5 100 シュードモナス エルギノーザ 1001 0.4 0.4 3.1 シュードモナス エルギノーザ N07 1.5 0.4 3.1 シュードモナス エルギノーザ 3719 0.4 0.4 6.2 ─────────────────────────────────── 表１から明かのごとく、チオマリノ−ルＤ、ＥおよびＦ
は一般グラム陽性および陰性細菌に対して優れた効果を
示した。[Table 1] ─────────────────────────────────── Minimum inhibitory concentration (MIC) (μg) / Ml) Thiomalinol D EF ─────────────────────────────────── Staphylococcus aureus 209P ≤ 0.01 ≤ 0.01 ≤ 0.01 Staphylococcus aureus 56R ≤ 0.01 ≤ 0.01 ≤ 0.01 Staphylococcus aureus 535 (MRSA) ≤ 0.01 ≤ 0.01 ≤ 0.01 Enterococcus faecalis 681 0.2 0.05 0.2 Escherichia coli NHIJ 1.5 1.5 6.2 Escherichia coli 609 1.5 0.8 3.1 Salmonella enteritidis 0.8 0.8 3.1 Klebsiella pneumoniae 806 0.8 0.8 3.1 Klebsiella pneumoniae 846 (R) 0.4 0.4 1.5 Enterobacter B. cloacae 963 1.5 1.5 12.5 Serratia marcescens 1184 6.2 6.2 25 Proteus vulgaris 1420 0.1 0 .2 1.5 Morganella Morgany 1510 12.5 12.5 100 Pseudomonas aeruginosa 1001 0.4 0.4 3.1 Pseudomonas aeruginosa N07 1.5 0.4 3.1 Pseudomonas aeruginosa 3719 0.4 0.4 6.2 ─────────────────────── ──────────── As is clear from Table 1, thiomarinol D, E and F
Showed excellent effects on general Gram positive and negative bacteria.

【００５５】[0055]

【発明の効果】以上から、本発明の新規化合物チオマリ
ノ−ルＤ、ＥおよびＦは抗菌作用を示し、各種細菌に対
する抗菌剤として有用である。From the above, the novel compounds Thiomalinol D, E and F of the present invention exhibit antibacterial action and are useful as antibacterial agents against various bacteria.

Claims (6)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】下記の構造式を有するチオマリノールＤ、
ＥおよびＦ。 【化１】 式中、 チオマリノ−ルＤはＲ¹ が水酸基を示し、Ｒ² がメチル
基を示し、ｎが６の整数を示す。チオマリノ−ルＥはＲ
¹ が水酸基を示し、Ｒ² が水素原子を示し、ｎが８の整
数を示す。チオマリノ−ルＦはＲ¹ がカルボニル基を示
し、Ｒ² が水素原子を示し、ｎが６の整数を示す。1. Thiomalinol D having the following structural formula:
E and F. Embedded image In the formula, in the thiomarinol D, R ¹ represents a hydroxyl group, R ² represents a methyl group, and n represents an integer of 6. Thiomalinol E is R
¹ represents a hydroxyl group, R ² represents a hydrogen atom, and n represents an integer of 8. In the thiomarinol F, R ¹ represents a carbonyl group, R ² represents a hydrogen atom, and n represents an integer of 6. 【請求項２】下記の構造式を有するチオマリノールＤ。 【化２】 2. Thiomalinol D having the following structural formula: Embedded image 【請求項３】下記の構造式を有するチオマリノールＥ。 【化３】 3. Thiomalinol E having the following structural formula: Embedded image 【請求項４】下記の構造式を有するチオマリノ−ルＦ。 【化４】 4. Thiomalinol F having the following structural formula: [Chemical 4] 【請求項５】アルテロモナス属に属するチオマリノ−ル
Ｄ、Ｅおよび／またはＦ生産菌を培養し、その培養物よ
りチオマリノ−ルＤ、Ｅおよび／またはＦを採取するこ
とを特徴とするチオマリノ−ルＤ、Ｅおよび／またはＦ
の製法。5. A thiomarinol D, E and / or F-producing bacterium belonging to the genus Alteromonas is cultured, and thiomarinol D, E and / or F is collected from the culture. D, E and / or F
Manufacturing method. 【請求項６】［請求項５］において、アルテロモナス属
に属するチオマリノ−ルＤ、Ｅおよび／またはＦ生産菌
がアルテロモナス・ラバ・SANK 73390株である製法。6. The method according to claim 5, wherein the thiomarinol D, E and / or F producing bacterium belonging to the genus Alteromonas is Alteromonas mule SANK 73390 strain.