JPS63159390A - Antibiotic substance mg398-hf9a and mg398-hf9b and production thereof - Google Patents

Abstract

NEW MATERIAL:Antibiotic substances MG398-hF9A (hereinafter referred to as A) and MG398-hF9B (hereinafter referred to as B), expressed by the formula [R is H for (A) and methyl for (B)] and having the following physico-chemical properties. Elementary analysis (%); (A) C, 57.44; H, 8.42; N, 7.93 and (B) C, 58.68; H, 8.58; N 8.07. Mass spectrometry; [Secondary ion mass spectrometry (SIMS)] m/Z; (A) 625 (M+1) and (B) 639 (M+1). Melting point; (A) 152-162 deg.C (decomposition) and (B) 92-107 deg.C (decomposition). Specific rotatory power; (A) [alpha]D<24>=+0.56 deg. (c=0.549, dimethyl sulfoxide) and (B) [alpha]D<24>=-9.18 deg. (c=0.512, dimethyl sulfoxide). Solubility; Both (A) and (B) are soluble in dimethyl sulfoxide, acetic acid, alkaline water, etc. USE:Capable of exhibiting powerful antimicrobial activity against yeast and molds and effective in treating preventing candidasis and mycosis. PREPARATION:Pseudonocardia azurea MG398-hF9 (FERM-P No.8865), etc., is cultivated under aerobic condition at 27-30 deg.C for 1-5 days.

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は新規な抗生物質およびその製造方法に関し、さ
らに詳しくは酵母およびカビに特に強い殺菌力を有する
プソイドノカルジア（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒ−倶搬一
属に属する微生物が生産する新規抗生物質およびこれら
の物質の発酵法による製造方法に関するものである。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION [Field of Industrial Application] The present invention relates to a novel antibiotic and a method for producing the same. The present invention relates to novel antibiotics produced by microorganisms belonging to the genus and methods for producing these substances by fermentation.

〔従来の技術〕[Conventional technology]

各種の感染症を治療する目的で既に多数の抗生物質が提
供されている。これらは一般にストレプトミセス（鉦堕
旦竺■並）属に属する微生物が産生ずるものか、または
、それらに基づく誘導体に係わるものが大部分である。A large number of antibiotics are already available for treating various infections. Most of these are generally produced by microorganisms belonging to the genus Streptomyces, or are related to derivatives based on them.

〔発明が解決しようとする問題点〕[Problem that the invention seeks to solve]

ところで感染症の多様性を考慮すると、さらに新たな部
類に属する抗生物質の提供が希求されて止まない。例え
ば、一般的な抗生物質の継続投与等により併発する真菌
性またはカンシタ症のごとき特種な感染症等に効果を奏
する低毒性の抗生物質の提供が望まれている。However, considering the diversity of infectious diseases, there is a continuing desire to provide new classes of antibiotics. For example, it is desired to provide a low-toxicity antibiotic that is effective against special infections such as fungal infections or candidiasis that occur due to continuous administration of common antibiotics.

そこで、本発明者らはストレプトミセス属以外の放線菌
を対象に有用抗生物質を検索したところ、プソイドノカ
ルジア属に属する微生物が酵母およびカビ類に特に強い
殺菌力を有する新規な抗生物質を生産することを見出し
て本発明を完成した。Therefore, the present inventors searched for useful antibiotics targeting actinomycetes other than the genus Streptomyces, and found that microorganisms belonging to the genus Pseudonocardia produced a new antibiotic with particularly strong bactericidal activity against yeast and molds. The present invention was completed by discovering the following.

なお、プソイドノカルジア属に属する微生物が生産する
抗生物質として、抗生物質４１，４９４　（特開昭５２
−１０５２９３号公報参照）やアズレオマイシン（ＡＺ
ＵＲＥＯＭＶＣＩＮ）　　（例エバ、ｆ　−’；　＋−
ナル−オフ・アンチビオティックス（Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒ
ｎａｌ　ｏｆ　Ａｎｔｉｂｉｏ−Ｌｉｃｓ）、ｖｏｌ、
３２，９８５〜９９４（１９７９）　）等が知られてい
るが、本発明の抗生物質はこれらと全く別異の化合物で
ある。In addition, as an antibiotic produced by a microorganism belonging to the genus Pseudonocardia, there is a
-105293) and azureomycin (AZ
UREOMVCIN) (e.g. Eva, f -'; +-
The Jour
nal of Antibio-Lics), vol.
32,985-994 (1979)), but the antibiotic of the present invention is a completely different compound from these.

〔問題点を解決するための手段〕[Means for solving problems]

本発明はプソイドノカルジア属に属する微生物を栄養培
地に培養して得られ、本発明者等により抗生物質ＭＧ３
９８−ｈＦ９Ａ及び抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ｂと命
名された２種の抗生物質並びにそれらの製造方法である
。The present invention is obtained by culturing microorganisms belonging to the genus Pseudonocardia in a nutrient medium, and the present inventors have developed the antibiotic MG3.
Two antibiotics named 98-hF9A and antibiotic MG398-hF9B and their production methods.

なお、本発明の抗生物質は上記のごとくプソイドノカル
ジア属に属する微生物が産生ずるものであるが、その理
化学的性質及び抗菌スペクトルが下記により特徴づけら
れるものであれば、その製造方法いかんによらず、本発
明に包含されることはいうまでもない。Although the antibiotic of the present invention is produced by a microorganism belonging to the genus Pseudonocardia as described above, it can be used regardless of the manufacturing method, as long as its physicochemical properties and antibacterial spectrum are characterized by the following. Needless to say, these are included in the present invention.

（以下、この真余白） 抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ａの理化学的性質（１１元
素分析（一酢酸塩） 実験値　　　計算（！　（Ｃｚ＋Ｈ５２Ｎ４０ｑ・ＣＨ
３ＣＯ０Ｈ）Ｃ５７，４４（％）　　　　５７．８８　
（％）ｕ　　８．４２　（％）　　　　８．２４（％）
Ｎ　　７．９３（％）　　　　８．１８（％）（２）質
量分析（Ｓｌ門Ｓ） ｍ／ｚ＝６２５（Ｍ　＋　１　） （３）融点 １５２〜１６２℃（分解） （４）比旋光度 〔α）　Ｋ”　＋０．５６゜ （ｃ　Ｏ，５４９，ジメチルスルホキシド）（５）紫外
線吸収スペクトル λ　ニー４”ｃＩ　２２８ｎｍ（ＥｉＦ、４２６）λＦ
ｍ＃””　２８３ｎ＋１（Ｅｉ２．３５０）λ　ニーＡ
ＭＮ”’２１２ｎｍ（Ｅ！’Ｊ、２２０）λ：’ｂ””
”２２８ｎｍ（Ｅｊ２ａ５５０）λ！’ａｉ、””’２
８３ｎｍ（Ｅｉ、＋５３６１）（６）赤外線吸収スペク
トル（ｃｍ−’）ＫＢｒ錠剤法による主要吸収は次のと
おりである。(Hereafter, this blank space) Physical and chemical properties of antibiotic MG398-hF9A (11 elemental analysis (monoacetate) Experimental values Calculation (! (Cz+H52N40q・CH
3CO0H) C57.44 (%) 57.88
(%)u 8.42 (%) 8.24(%)
N 7.93 (%) 8.18 (%) (2) Mass spectrometry (Sl gate S) m/z = 625 (M + 1) (3) Melting point 152-162°C (decomposition) (4) Specific optical rotation [α) K” +0.56° (c O, 549, dimethyl sulfoxide) (5) Ultraviolet absorption spectrum λ knee 4” cI 228 nm (EiF, 426) λF
m#”” 283n+1 (Ei2.350)λ Knee A
MN"'212nm (E!'J, 220)λ:'b""
"228nm (Ej2a550)λ!'ai,""'2
83 nm (Ei, +5361) (6) Infrared absorption spectrum (cm-') The main absorption by KBr tablet method is as follows.

３３８０．３０２０．２９３０，２８６０．１６８０．
１６５０．１６４０゜１６００、１５５０．１４３０．
１４００．１３２０．１１１５．　＋１００゜１０Ｂ５
．１０５０，１０００．９９５（７）水素核様６ｎ気共
鳴スペクトル（δ値）重酢酸中、４００メガヘルツの測
定値、なおＳはシングレット、ｄはダブレソ゛ト、ｔは
トリブレット、ｍはマルティプシントを表す。3380.3020.2930, 2860.1680.
1650.1640°1600, 1550.1430.
1400.1320.1115. +100°10B5
．． 1050,1000.995 (7) Hydrogen nuclear-like 6n gas resonance spectrum (δ value) Measured value at 400 MHz in diacetic acid, where S stands for singlet, d stands for doublet, t stands for triplet, and m stands for multipsint. .

１．３〜１．９（１８Ｈ、ｍ）　、　２．０〜２．１５
（４Ｈ、ｎ＋）　、　２．２３（２Ｈ、ｍ）　。1.3-1.9 (18H, m), 2.0-2.15
(4H, n+), 2.23 (2H, m).

２．６２（２）１．　ｔ）　、　３．６１　（２Ｈ、ｔ
）　、　３．９７　（１Ｈ、　ｍ）　、　４．０９．４
．１７（２１＋、八Ｂ）、４．２３（１Ｈ、＋ｍ）、４
．２７（１Ｈ、ｄ）、４．４１（１Ｈ、ｍ）。2.62(2)1. t), 3.61 (2H, t
), 3.97 (1H, m), 4.09.4
．． 17 (21+, 8B), 4.23 (1H, +m), 4
．． 27 (1H, d), 4.41 (1H, m).

５．４８〜５．６３　（２Ｈ、ｍ）　、’５．９６−６
．０６　（２Ｈ，ｍ）　、　６．１８　（１Ｈ、ｄ）　
。5.48-5.63 (2H, m),'5.96-6
．． 06 (2H, m), 6.18 (1H, d)
.

６．２３〜６．３０（２Ｈ、ｍ）、７．１８〜７．３Ｈ
１Ｈ、ｍ）（８）溶剤に対する熔解性 石油エーテル、ベンゼン、エチルエーテル、クロロホル
ム、中性水に不溶； メタノール、エタノールに難）容； ジメチルスルホキシド、酢酸、アルカリ土類金属（９）
呈色反応 ライドン−スミス、２．４−ジニトロフェニルヒドラジ
ン、坂口反応、　１０％硫酸に陽性。6.23-6.30 (2H, m), 7.18-7.3H
1H, m) (8) Soluble in solvents Petroleum ether, benzene, ethyl ether, chloroform, insoluble in neutral water; poorly soluble in methanol, ethanol) Volume; dimethyl sulfoxide, acetic acid, alkaline earth metals (9)
Color reaction Lydon-Smith, 2,4-dinitrophenylhydrazine, Sakaguchi reaction, positive for 10% sulfuric acid.

００１塩店性、酸性、中性の区別 両性物質 ａＯ動物質色 白色（粉末） 抗生物質ＭＧ３９Ｂ−ｈＦ９Ｂの理化学的性質（１）元
素分析（一酢酸塩） 実験値　　　計算値（Ｃ＋ｇｌｌｓＪｎＯｑ　・ＣＨｚ
ＣＯＯＨ）Ｃ５８，６８（％）　　　　５８．４３　（
％）Ｈ　　８．５８　（％）　　　　８．３６Ｃ％）Ｎ
　　８．０７（％）　　　　８．０２（％）（２）質量
分析（ＳＩＭＳ） ｍ／ｚ＝６３９（Ｍ　＋　１　） （３）融点 ９２〜１０７℃（分解） （４）比旋光度 〔α〕６“ゝ−−９，１８ （ｃ　Ｏ，５１２，ジメチルスルホキシド）（５）紫外
線吸収スペクトル λ　！＝４””　　２２８ｎｍ（ＨｆＦ−４０２）λ　
、−４１１１１ｃｔ　　２８３ｎｍ（Ｅｉ、、３２７）
λ　、−Ｌｌ″′ａ０’２１２ｎｍ（ＥｉＳ’ａ１．２
４０）λ讐−”””２２８ｎｍ（ＥｉＦｓ５０９）λ！
−ＡＩ″Ｎ”’２８３ｎｍ（Ｅｆｃｍ３２Ｂ）（６）赤
外線吸収スペクトル（、ｍ−’）ＫＢｒＢｒ法による主
要吸収は次のとおりである。001 Distinguish between salty, acidic and neutral amphoteric substance aO animal matter white color (powder) Physicochemical properties of antibiotic MG39B-hF9B (1) Elemental analysis (monoacetate) Experimental value Calculated value (C+gllsJnOq ・CHz
COOH) C58,68 (%) 58.43 (
%)H 8.58 (%) 8.36C%)N
8.07 (%) 8.02 (%) (2) Mass spectrometry (SIMS) m/z = 639 (M + 1) (3) Melting point 92-107°C (decomposition) (4) Specific optical rotation [α] 6"--9,18 (c O, 512, dimethyl sulfoxide) (5) Ultraviolet absorption spectrum λ !=4"" 228 nm (HfF-402) λ
, -41111ct 283nm (Ei, , 327)
λ, -Ll'''a0'212 nm (EiS'a1.2
40) λen - “””228nm (EiFs509) λ!
-AI''N'''283 nm (Efcm32B) (6) Infrared absorption spectrum (, m-') The main absorption by KBrBr method is as follows.

３３８０．３０２０．２９３０，２８６０．１６８０．
１６６０．１６４０゜１６００、１５５０．１４００．
１３２０．１１９０．１１００．１０７０゜１０４０、
９９０ （７）水素核核磁気共鳴スペクトル（δ値）重酢酸中、
４００メガヘルツの測定値、なおｄはタブレット、ｔは
トリブレット、ｍはマルティブレットを表す。3380.3020.2930, 2860.1680.
1660.1640°1600, 1550.1400.
1320.1190.1100.1070°1040,
990 (7) Hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum (δ value) in biacetic acid,
Measured value of 400 MHz, where d stands for tablet, t stands for triplet, and m stands for multibult.

０．９１（３Ｈ，ｄ）、１．１”１．９（１７Ｈ，ａ＋
）、２．０〜２．１５（４１１４）。0.91 (3H, d), 1.1”1.9 (17H, a+
), 2.0-2.15 (4114).

２．２２（２Ｈ，ｍ）　、　２．６１　（２Ｈ，ｔ）　
、　３．６２（２Ｈ、ｍ）　、　３．９１　（１Ｈ、　
ｓ）　。2.22 (2H, m), 2.61 (2H, t)
, 3.62 (2H, m) , 3.91 (1H,
s).

４．１３（２Ｈ、Ａ１１）　、　４．２２（１Ｈ、ｍ）
　、　４．２８（ｌｔｌ、　ｄ）　、　４．４１　（１
Ｈ、ｍ）　。4.13 (2H, A11), 4.22 (1H, m)
, 4.28 (ltl, d) , 4.41 (1
H, m).

５．４５〜５．６５（２Ｈ、＋ｍ）、５．９５〜６．０
７（２Ｈ，ａ）、６．１７（１Ｈ、ｄ）。5.45-5.65 (2H, +m), 5.95-6.0
7 (2H, a), 6.17 (1H, d).

６．２１〜６．３３（２Ｈ，ｍ）、７．２１〜７．３０
（１Ｈ、ｍ）（８）溶剤に対する溶解性 石油エーテル、ベンゼン、エチルエーテル、クロロホル
ム、中性水に不溶； メタノール、エタノールに難溶； ジメチルスルホキシド、酢酸、アルカリ水に可溶（９）
呈色反応 ライドン−スミス、２．４−ジニトロフェニルヒドラジ
ン、坂口反応、　１０％硫酸に陽性。6.21-6.33 (2H, m), 7.21-7.30
(1H, m) (8) Solubility in solvents Insoluble in petroleum ether, benzene, ethyl ether, chloroform, and neutral water; Slightly soluble in methanol and ethanol; Soluble in dimethyl sulfoxide, acetic acid, and alkaline water (9)
Color reaction Lydon-Smith, 2,4-dinitrophenylhydrazine, Sakaguchi reaction, positive for 10% sulfuric acid.

ＱＱｌｔｉ　ＪＪ性５酸性、中性の区別両性物質 αυ動物質色 白色（粉末） 抗生物質−Ｇ３９Ｂ−ｈＦ９Ａ及び抗生物質ＭＧ３９８
−ｈｌ＋９Ｂの生物学的性質 （１）抗菌スペクトルはそれ自体公知の寒天培地希釈法
によって測定した。その結果を第１表に示す。QQlti JJ 5 Acidic, Neutral Discrimination Amphoteric Substance αυ Animal Substance White (Powder) Antibiotic-G39B-hF9A and Antibiotic MG398
-Biological properties of hl+9B (1) The antibacterial spectrum was measured by the agar medium dilution method known per se. The results are shown in Table 1.

第　　１　　表　　（粉 第　　１　　表　（３） 低下、この頁余白） （２）毒性 マウスを使用した急性毒性試験では、ｌＯ％ジメチルス
ルホキシド生理食塩水に抗生物質を懸濁し、腹腔内注射
により１４日間観察した。Table 1 (Powder Table 1 (3) Decrease, margin of this page) (2) In acute toxicity tests using toxic mice, antibiotics were suspended in 10% dimethyl sulfoxide saline and administered by intraperitoneal injection for 14 days. Observed.

その結果、抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ａの推定ＬＤＳ
。値は１４０＋Ｂ／ｋｇ以上、抗生物質ＭＧ３９Ｂ−ｈ
Ｆ９Ｂの推定Ｌ　Ｄ　ｓ。As a result, the estimated LDS of antibiotic MG398-hF9A
. Value is over 140+B/kg, antibiotic MG39B-h
Estimated L D s of F9B.

値は５２．５〜１０５ｍｇ／ｋｇであった。The values were 52.5-105 mg/kg.

（３）作用・効果 上述のごとく、本発明の抗生物質はバクテリアに対して
は抗菌力が一般に弱いが、酵母及びカビに対して強い抗
菌力を示し、カンシタ症、真菌性症の治療・予防に有効
である。(3) Action/Effect As mentioned above, the antibiotic of the present invention generally has weak antibacterial activity against bacteria, but it exhibits strong antibacterial activity against yeast and mold, and treats and prevents candidiasis and fungal diseases. It is effective for

本発明の抗生物質は、本発明の第２の目的である製造方
法によって有利に得ることができる。The antibiotic of the present invention can be advantageously obtained by the production method which is the second object of the present invention.

すなわち、プソイドノカルジア属に属し、抗生物質ＭＧ
３９Ｂ−ｈＦ９Ａ及び抗生物質−Ｇ３９８−ｈＦ９Ｂを
生産する能力を有する微生物を栄養培地に培養し、該培
物から該抗生物質を採徹することにより製造することが
できる。That is, it belongs to the genus Pseudonocardia, and the antibiotic MG
It can be produced by culturing a microorganism capable of producing G398-hF9A and antibiotic G398-hF9B in a nutrient medium, and extracting the antibiotic from the culture.

本発明で使用する抗生物質生産菌は、前述した理化学的
性質及び生物学的性質を有する抗生物質を生産する能力
を有するものであれば、その種を問わず使用でき、広範
な微生物から選ぶことができる。かかる微生物のうち具
体的に好適なものとしては、本発明者等により東京部品
用区上大崎にある微生物化学研究所構内の土壌より分離
された放線菌であって、ＭＧ３９８−ｈＦＱ株と命名さ
れた菌株を挙げることができる。The antibiotic-producing bacteria used in the present invention can be of any species as long as it has the ability to produce antibiotics with the above-mentioned physicochemical and biological properties, and can be selected from a wide range of microorganisms. I can do it. Among these microorganisms, a specifically preferred one is actinomycetes, which was isolated by the present inventors from the soil of the Institute of Microbial Chemistry in Kamiosaki, Tokyo's Part-Yo Ward, and named strain MG398-hFQ. The following strains can be mentioned.

なお、ＭＧ３９８−ｈＦＱ株の菌学的諸性質は以下の通
りである。The mycological properties of the MG398-hFQ strain are as follows.

ｌ）形態学的性質 ′ＪＡｍ鏡下で、基中菌糸はしばしばジグザグ状を呈す
る。気菌糸は比較的長＜、２０個以上の胞子の連鎖を形
成する。らせん形成１輪生技、胞子のうはみとめられな
い、成熟した胞子は竹状（Ｂａｍｂｏｏ−１ｉｋｅ）で
あり、また求頂的な出芽（＾ｃｒｏｐｅｔａｌ　ｂｕｄ
−ｄｉｎｇ）によって作られる胞子がみられる。胞子の
大きさは０．４　Ｘ　１．０〜３．０　ミクロン位で、
その表面は平滑である。抗酸性は認められない。l) Morphological properties: Under the JAm microscope, the basal hyphae often exhibit a zigzag shape. Aerial hyphae are relatively long and form chains of 20 or more spores. Spiral formation 1 Whorl technique, spore buds are not recognized, mature spores are bamboo-like (Bamboo-1ike), and budding budding (^cropetal bud)
-ding) can be seen. The size of the spores is about 0.4 x 1.0 to 3.0 microns,
Its surface is smooth. No acid resistance is observed.

２）各種培地における生育状態 色の記載について〔〕内に示す標準は、コンテイナー・
コーポレーション・オプ・アメリカのカラー・ハーモニ
ー・マニュアル（ＣｏｎｔａｉｎｅｒＣｏｒｐｏｒａｔ
ｉｏｎ　ｏｆ　ＡｍｅｒｉｃａのＣｏ１ｏｒ　ｈａｒｍ
ｏｎｙ　ｍａｎｕａｌ）を用いた。2) Regarding the description of growth status colors in various media, the standards shown in [ ] are for containers and
Corporation of America's Color Harmony Manual
ion of America's Co1or harm
one manual) was used.

■ツユクロース・硝酸塩寒天培地（２７℃培養）うす黄
〜うず苗条（２ｇｃ、　Ｂａｍｂｏｏ）の発育上に、白
の気菌糸をうつすらと着生し、溶解性色素は、わずかに
茶色味をおびる程度である。■Tsuyuclose/nitrate agar medium (cultured at 27℃) White aerial mycelium grows on the growth of light yellow to spiral shoots (2gc, Bamboo), and the soluble pigment is slightly brownish. It is.

尚、この培地にカザミノ１１Ｉ２０．１％、ペプトン０
．２％を加えた培地で、発育はうす黄〜オリーブ灰（１
％ｉｇ＋　０ｌｉｖｅ　Ｇｒａｙ）　、気菌糸は白〜明
るい青味灰（１３Ｈｉｇ、　Ｆｏｇ　Ｂｌｕｅ）を呈す
る。溶Ｍ　性色ｇはみとめられない。。In addition, this medium contains 20.1% Casamino 11I and 0 peptone.
．． Growth was from pale yellow to olive ash (1
%ig+0live Gray), the aerial mycelium exhibits white to light bluish gray (13High, Fog Blue). Soluble M Color g is not observed. .

■グルコース・硝酸塩寒天培地（２７℃培養）うす黄（
２ｉｃ、ｌ１ｏｎｅｙ　Ｇｏｌｄ）の発育上に、白の気
菌糸を部分的に着生し、溶解性色素はみとめられない。■Glucose/nitrate agar medium (27℃ culture) pale yellow (
2ic, loney Gold), white aerial mycelia are partially attached, and no soluble pigment is observed.

■グルコース・アスパラギン寒天培地（２７°Ｃ培養）
うす黄の発育上に、白の気菌糸を着生し、溶解性色素は
みとめられない。■Glucose-asparagine agar medium (27°C culture)
White aerial mycelium grows on the pale yellow growth, and no soluble pigment is observed.

■グリセリン・アスパラギン寒天培地（ＩＳＰ−培地５
゜２７℃培養） うす黄〜うす苗条（２１ｅ、Ｍｕ５２ａｒｄ　〜２ｎｅ
、ＭｕｓＬａｒｄＧｏｌｄ）の発育上に白〜明るい青味
灰（１３ｆｅ、　Ｄｕｓｋ〜１５ｉｈ、５ｌａｔｅ）の
気菌糸を着生ずる。溶解性色素はみとめられない。■Glycerin-asparagine agar medium (ISP-Medium 5
゜27℃ culture) Light yellow to light shoots (21e, Mu52ard ~ 2ne
, MusLardGold), white to light bluish gray (13fe, Dusk to 15ih, 5late) aerial mycelia are deposited. No soluble pigments are observed.

■スターチ・無機塩寒天培地（ＩＳＰ−培ｉ１！！４．
２７℃培養） 無色〜うす苗条（２１ｅ、Ｍｕ５２ａｒｄ　）の発育上
に白の気菌糸を着生し、溶解性色素はみとめられない。■Starch/inorganic salt agar medium (ISP-medium i1!!4.
(Cultivated at 27°C) White aerial mycelia are grown on the growth of colorless to pale shoots (21e, Mu52ard), and no soluble pigments are observed.

■チロシン・寒天培地（ＩＳＰ−培地７．２７℃培養）
うす黄〜うす苗条の発育上に白〜明るい青味灰（１３ｆ
ｅ、　Ｄｕｓｋ）の気菌糸を着生し、溶解性色素はみと
められない。■Tyrosine/agar medium (ISP-medium 7.27℃ culture)
Light yellow to light shoot growth with white to bright bluish gray (13f
e, Dusk), and no soluble pigments are observed.

■栄養寒天培地（２７℃培養） うす黄の発育上に、白の気菌糸をうつすらと着生し、溶
解性色素はみとめられない。■Nutritional agar medium (cultured at 27°C) White aerial mycelium grows loosely on the pale yellow growth, and no soluble pigment is observed.

■イースト・麦芽寒天培地（ＩＳＰ−培地２，２７“Ｃ
培養）うす黄だいだい（２ｇｃ、Ｂａｍｂｏｏ）　〜う
す苗条〔３ｎｅ、７ｏｐａｚ）の発育上に白の気菌糸を
着生し、溶解性色素はみとめられない。■Yeast/malt agar medium (ISP-Medium 2, 27"C
Culture) Pale yellow daisies (2gc, Bamboo) - White aerial mycelia are grown on the growing thin shoots [3ne, 7opaz), and no soluble pigments are observed.

■オートミール・寒天培地０５Ｐ−培地３．２７℃培養
）無色〜うす黄の発育上に、白の気菌糸をうつすらと着
生し、溶解性色素はみとめられない。■Oatmeal/agar medium 05P-medium 3.27°C culture) White aerial mycelia are grown loosely on the colorless to pale yellow growth, and no soluble pigments are observed.

［相］グリセリン・硝酸塩寒天培地（２７℃培養）無色
〜うす苗条（３ｎｅ、　Ｔｏｐａｚ）の発育上に白の気
菌糸を着生し、溶解性色素はわずかに茶色味をおびる程
度である。[Phase] Glycerin/nitrate agar medium (cultured at 27°C) White aerial mycelia are grown on the growth of colorless to pale shoots (3ne, Topaz), and the soluble pigment is only slightly brownish.

■スターチ・寒天培地（２７℃培養） 無色〜うす苗条（２１ｅ、　Ｍｕ５２ａｒｄ）の発育上
に、白の気菌糸を部分的に着生する。溶解性色素はみと
められない。■Starch/agar medium (cultured at 27°C) White aerial mycelia are partially attached to the growing colorless to pale shoots (21e, Mu52ard). No soluble pigments are observed.

＠リンゴ酸石灰・寒天培地（２７℃培養）うす黄〜うず
苗条（２１ｅ、　Ｍｕ５２ａｒｄ）の発育上に、白の気
菌糸をうつすらと着生し、溶解性色素は、わずかに茶色
味をおびる程度である。@Malic acid lime/agar medium (cultured at 27°C) White aerial mycelia grow loosely on the growing pale yellow to spiral shoots (21e, Mu52ard), and the soluble pigment has a slight brownish tinge. That's about it.

■セルロース（２７℃培養） 発育は無色、白の気菌糸をうつすらと着生し、溶解性色
素はみとめられない。■Cellulose (cultured at 27°C) Growth is colorless, with white aerial mycelium growing loosely and no soluble pigments observed.

■ゼラチン穿刺培養 単純ゼラチン培地（２０℃培養）で、無色〜うす黄の発
育上に白の気菌糸をうつすらと着生し、溶解性色素はみ
とめられない。■Gelatin puncture culture In a simple gelatin medium (cultured at 20°C), white aerial mycelium grows loosely on the colorless to pale yellow growth, and no soluble pigment is observed.

■脱脂牛乳（３７℃培養） 発育はうす黄、白の気菌糸をうつすらと着生するか、又
は着生しない。溶解性色素は茶色味をおびる程度である
。■Skimmed milk (cultured at 37°C) The growth is either pale yellow or white aerial mycelia that grow loosely or do not grow. The soluble pigment only gives a brownish tinge.

３）生理学的性質 ■生育温度範囲 グルコース・アスパラギン寒天培地（グルコース１．０
％、し−アスパラギン０．０５％、リン酸二カリウム０
．０５％、紐寒天３．０％、ｐ１１３．０）を用い、２
０℃、２４℃、２７℃、３０℃、　５０℃の各温度で試
験した結果、５０℃を除いて、そのいずれの温度でも発
育したが、至ｉｍ温度は２７℃〜３０℃付近と思われる
。3) Physiological properties ■Growth temperature range Glucose-asparagine agar medium (glucose 1.0
%, asparagine 0.05%, dipotassium phosphate 0
．． 05%, string agar 3.0%, p113.0), 2
As a result of testing at each temperature of 0°C, 24°C, 27°C, 30°C, and 50°C, it grew at all temperatures except 50°C, but the ultimate temperature seems to be around 27°C to 30°C. .

■ゼラチンの液化（１５％単純ゼラチン培地５２０℃培
養；グルコース・ペプトン・ゼラチン培地、２７℃培養
） 単純ゼラチン培地においては培養後２日目頃から、グル
コース・ペプトン・ゼラチン培地では、培養後４日目頃
から液化をみとめ、その作用は中等度〜強い方である。■ Liquefaction of gelatin (15% simple gelatin medium cultured at 520°C; glucose peptone gelatin medium cultured at 27°C) From around 2 days after culture in simple gelatin medium, 4 days after culture in glucose peptone gelatin medium. Liquefaction can be seen around the time, and the effect is moderate to strong.

■スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒天培地及び
スターチ寒天培地、いずれも２７℃培養）スターチ・無
機塩寒天培地において、培養後３日目頃より氷解性がみ
とめられるが、その作用は弱い方である。スターチ寒天
培地ではみとめられない。■Hydrolysis of starch (starch/inorganic salt agar medium and starch agar medium, both cultured at 27°C) In starch/inorganic salt agar medium, ice-melting properties are observed from around 3 days after cultivation, but the effect is weaker. It is. Not observed on starch agar medium.

■脱脂牛乳の凝固・ペプトン化（脱脂牛乳、３７℃培養
） 凝固は培養後１２２日目頃り始まり、ただちに完了後、
ペプトン化を呈する。その作用は中等度〜強い方である
。なお、くりかえしの試験で凝固なしにペプトン化する
場合がある。■Coagulation and peptonization of skim milk (skimmed milk, cultured at 37°C) Coagulation begins around the 122nd day after culture, and immediately after completion,
Exhibits peptonization. The effect is moderate to strong. In addition, peptonization may occur without coagulation in repeated tests.

■メラニン様色素の生成（トリプトン・イースト・ブロ
ス、　ｌ５Ｐ−培地ｌ；ペプトン・イースト・鉄寒天培
地、　ｌ５Ｐ−培地６；チロシン寒天培地、　ｌ５Ｐ−
培地７；いずれも２７℃培養） いずれの培地でも、陰性である。■ Production of melanin-like pigment (tryptone yeast broth, l5P-medium 1; peptone yeast iron agar medium, l5P-medium 6; tyrosine agar medium, l5P-
Medium 7; all cultured at 27° C.) Negative in any medium.

■炭素源の利用性（プリドハム・ゴトリーブ寒天培地、
　ｌ５Ｐ−培地９，２７℃培養）Ｄ−クルコース、Ｌ−
アラビノース、Ｄ−キシロース。■Usability of carbon sources (Pridham-Gotlieb agar,
l5P-medium 9, 27°C culture) D-curcose, L-
Arabinose, D-xylose.

Ｄ−フラクトース、イノシトール、ラフィノース。D-fructose, inositol, raffinose.

マンニトールを利用して発育し、Ｌ−ラムノースは利用
しない。シュクロースはおそらく利用しないと思われる
。It grows using mannitol and does not use L-rhamnose. Sucrose is probably not used.

■リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天培地。■Dissolution of malic acid lime (malic acid lime agar medium.

２７℃培養） 培養後３日目頃より、発育周辺のリンゴ酸石灰を溶解し
、その作用は中等度〜強い方である。(Culture at 27°C) From about the third day after culturing, malate lime around the growth is dissolved, and its effect is moderate to strong.

■硝酸塩の還元反応（０，１％硝酸カリウム含有ペプト
ン水、　ｌ５Ｐ−培地８．２７℃培養）陽性である。■ Nitrate reduction reaction (peptone water containing 0.1% potassium nitrate, cultured in l5P medium at 8.27°C) is positive.

以上の性状を要約すると、ＭＧ３９８−ｈＦＱ株はその
形態上、基中菌糸はジグザグ状を呈し、伸長する気菌糸
の先端に竹状（Ｂａｍｂｏｏ−１ｉｋｅ）の胞子を着生
する。また、求頂的な発芽（Ａｃｒｏｐｅｔａｌ　ｂｕ
ｄｄｉｎｇ）による胞子形成をみとめる。胞子の表面は
平滑である。抗酸性はみとめられない０種々の培地でう
す黄〜うす苗条の発育上に、白〜青味灰の気菌糸を着生
し、溶解性色素はみとめられない。メラニン様色素の生
成は陰性である。スターチの氷解性は弱い方、蛋白分解
力は中等度〜強い方である。To summarize the above characteristics, the MG398-hFQ strain has a zigzag-like basal hyphae, and bamboo-like spores are attached to the tips of the elongating aerial hyphae. Also, Acropetal bu
Sporulation was observed due to spore formation. The surface of the spore is smooth. No acid resistance observed. 0 In various media, white to bluish gray aerial mycelium grows on the growth of pale yellow to pale shoots, and no soluble pigments are observed. Production of melanin-like pigments is negative. Starch has a weak ice-melting ability, and a moderate to strong proteolytic ability.

なお、ＭＧ３９８−ｈＦＱ株は、リシハリエら（Ｌｅｃ
ｈｅｖａ−１ｉｅｒ、ｅｔａｌ）　（インターナショナ
ル　ジャーナルオブ　システマティック　バクテエリオ
ロジー（ＩｎｔｅｒｎａＬｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ
　ｏｒ　Ｓｙ５２ｅｍａｔｉｃ　［ｌａｃｔｅｒｉ−ｏ
ｌｇｙ）　２０巻、４３５頁、　１９７０）　）の提唱
する細胞壁の主要構成成分のタイプｆＶＡ型を示す。す
なわち、全菌体中にメソ−２，６−ジアミツビメリン酸
および糖成分としてアラビノース、ガラクトースを有す
る。The MG398-hFQ strain was developed by Rishiharie et al.
heva-1ier, etal) (International Journal of Systematic Bacteriology)
or Sy52ematic [lacteri-o
This figure shows the fVA type of the main constituents of the cell wall proposed by (Igy) Vol. 20, p. 435, 1970). That is, the whole bacterial cell contains meso-2,6-diamitubimelic acid and sugar components such as arabinose and galactose.

以上の点から、ＭＧ３９８−ｈＦ９株は、プソイドノカ
ルジア（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄｉａ）に属する放線
菌と考えられる。プソイドノカルジアに属するものとし
て、プソイドノカルジア・サーモフイラ（Ｐｓｅｕｄｏ
ｎｏｃコｒｄ　ｉａｔｈｅｒｍＯｈ１１ａ１文献〔パー
シイ著　マニュアル　オプ　デターミイナティブ　バク
テエリオロジイ（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏ
ｆ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ
ｏｇｙ）８Ｓ、７４６頁、１９７４　）　、プソイドノ
カルジア・スピノサ（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄｉａ　
　７文献〔ヘンセン・八、及びり、シャファー著　イン
ターナショナルジャーナル　オブ　システマティノク　
バクチオロジー（Ｈｅｎｓｓｅｎ、　Ａ、＆Ｄ、５ｈａ
ｆｅｒ、　ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌ
　ｏｆ　Ｓｙ５２ｅｍａｔｉｃ　［ｌａｃｔｅｒｉｏ１
ｏｇｙ＋２１巻、２９頁。From the above points, the MG398-hF9 strain is considered to be an actinomycete belonging to Pseudonocardia. Pseudonocardia thermophila (Pseudonocardia) belongs to Pseudonocardia.
noc code iathermOh11a1 Literature [Bergey's Manual o
f Determinative Bacteriol
8S, p. 746, 1974), Pseudonocardia spinosa
7 Literature [International Journal of Systematinology, by Hensen Hachi, Andori, Schaffer]
Bactiology (Henssen, A, &D, 5ha
fer, International Journal
of Sy52ematic [lacterio1
ogy+ volume 21, page 29.

１９７１）　、ブソイドノカルジア・ファスチジオサ（
ＰＳｅｕｄｏｎｏ−ｃａｒｄｉａ　　ｆａ５２ｉｄｉｏ
ｓａ、文献；公開特許公報昭５２−１０２９３）　、プ
ソイドノカルジア・コンパクタ（Ｐｓｅｕ−ｄｏｎｏｃ
ａｒｄｉａ　　９狸赳田１文献〔ヘンセン・八、他　イ
ンターナショナル　ジャーナル　オブ　システマテイン
ク　バクチオロシイ（ｌｌｅｎｓｓｅｎ。1971), Busoidonocardia fastidiosa (
PSeudono-cardia fa52idio
sa, literature; published patent publication No. 52-10293), Pseudonocardia compacta (Pseu-donoc)
Ardia 9 Tanuki Takeda 1 Reference [Hensen Hachi, et al. International Journal of Systematics Inc. Bakuchioroshii (llenssen.

＾、、ｅｔａ１．．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏ
ｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｓｙ５２ｅｍａｔｉｃＢａＣＬｅｒ
ｊ０１０ｇＶ＋　３３巻、８２９頁、１９８３）および
プソイドノカルジア０アズレア（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｅａ
ｒｄｉａ　　ａｚｕｒａａ。^,,eta1. ．． International Jo
urnal of Sy52ematicBaCLer
j010gV+ Vol. 33, p. 829, 1983) and Pseudonocardia 0 azurea (Pseudonocardia
rdia azuraa.

文献〔オームラ他　ザ　ジャーナル　オプ　アンチイバ
イオラソクス（Ｏｍｕｒａ、　Ｓ、ｅＬａｌ、、Ｔｈｅ
　Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）　３
２巻、９８５頁、１９７９　〕があげられる。Literature [Omura, S., eLal, The
Journal of Antibiotics) 3
Volume 2, page 985, 1979].

プソイドノカルジア・サーモフィラとは、その至適温度
により、プソイドノカルジア・スピノサとは、胞子の表
面構造により、またプソイドノカルジア・ファスチジオ
サとは、その種がｌ５Ｐ＝培地９上で発育しないことに
より、さらにブソイドノカルジア・コンパクタとはその
種に特徴的な気菌糸の膨化（Ｓｈｅｌｌｉｎｇ）がある
ことにより区別される。Pseudonocardia thermophila is distinguished by its optimum temperature, Pseudonocardia spinosa by its spore surface structure, and Pseudonocardia fastidiosa by its species not growing on l5P=medium 9. It is further distinguished from Busoidonocardia compacta by the presence of shelling of aerial mycelium, which is characteristic of that species.

そこで、もっとも近縁の種と考えられるプソイドノカル
ジア・アズレアとＭＧ３９８−ｈＰｅ株とを実地に比較
検討した。その成績の大要を第２表に示す。Therefore, a comparative study was conducted between Pseudonocardia azurea, which is considered to be the most closely related species, and the MG398-hPe strain. A summary of the results is shown in Table 2.

（以下、この頁余白） 第２表のように、Ｍｃ３９８−ｈｐ９株とブソイドノカ
ルジア・アズレアとは、一致した性状を示している。わ
ずかに異なるのは、グルコース・硝酸塩寒天培地上の発
育の色、および溶解性色素である。(Hereinafter, in the margin of this page) As shown in Table 2, the Mc398-hp9 strain and Busoidonocardia azurea exhibit identical properties. Slight differences are the color of the growth on glucose-nitrate agar, and the soluble pigment.

すなわち、プソイドノカルジア・アズレアにみられる青
味灰〜オリーブ灰の色が、この株ではみとめられない。In other words, the bluish-gray to olive-gray color seen in Pseudonocardia azurea is not observed in this strain.

しかし、前述のようにＭ６３９８−ｈＦＱ株は、ペプト
ン１　カザミノ酸を加えたシニクロース・硝酸塩寒天培
地上でオリーブ灰の発育を呈するため、大きな相違とは
考えられない。また、その他の培地上での気菌糸１発育
の色は一敗する。さらに細胞壁の構成成分がタイプＩＶ
Ａ型を示し、求頂的発芽による胞子形成、竹状の胞子の
連鎖、ジグザグ状の基中菌糸などのプソイドノカルジア
・アズレアの形態的特徴が観察され、生理学的性状も合
致する。これらのことから、ＭＧ３９８−ｈＦＱ株は、
プソイドノカルジア・アズレアにきわめて近縁の種と考
えられる。そこで、ＭＧ３９８−ｈＦＱ株をプソイドノ
カルジア・アズレアＭＧ３９Ｂ−ｈＰ９（Ｐｓｅｕｄｏ
ｎｏｃａｒｄｉａａｚｕｒｅａ　ＭＧ３９８−ｈＦ９）
と同定した。なお、ＭＧ３９Ｂ−ｈＦ９株は茨城県筑波
郡谷田部町東１丁目１番３号にある工業技術院微生物工
業技術研究所に寄託申請し、昭和６１年７月２４日、微
工研菌寄第８８６５号として受託されている。However, as mentioned above, the M6398-hFQ strain exhibits olive ash growth on a synicrose/nitrate agar medium supplemented with peptone 1 casamino acids, so this is not considered to be a major difference. In addition, the color of aerial mycelium 1 growth on other media is completely different. Furthermore, the cell wall components are type IV.
It shows type A, and the morphological characteristics of Pseudonocardia azurea, such as sporulation by acrophilic germination, bamboo-like spore chains, and zigzag-like basal hyphae, are observed, and the physiological properties also match. From these facts, the MG398-hFQ strain is
It is thought to be a species very closely related to Pseudonocardia azurea. Therefore, the MG398-hFQ strain was transformed into Pseudonocardia azurea MG39B-hP9 (Pseudonocardia azurea MG39B-hP9).
nocardia azurea MG398-hF9)
was identified. The MG39B-hF9 strain was submitted to the Institute of Microbial Technology, Agency of Industrial Science and Technology, located at 1-1-3 Higashi, Yatabe-cho, Tsukuba-gun, Ibaraki Prefecture, and on July 24, 1988, it was submitted to the Institute of Microbiological Technology, No. 8865. It has been entrusted as a contract.

次にかかるプソイドノカルジ了属に属する微生物の培養
は栄養培地巾約２７〜３０℃の温度で好気的深部条件下
に撹拌しながら行うのが好ましい、そのような目的に有
用な栄養培地は砂糖、でんぷん。The next cultivation of such microorganisms belonging to the genus Pseudonocardia is preferably carried out in a nutrient medium at a temperature of about 27 to 30° C. under deep aerobic conditions with stirring. Nutrient media useful for such purposes include sugar, sugar, Starch.

グリセリン、および糖みつのような資化性炭素源、コー
ン・スチープ・リカー、大豆粉、綿実わ）５ペプトン、
肉エキス、およびホップかすのような有機窒素源、硫酸
アンモニウム、硝酸アンモニウム。Glycerin and assimilable carbon sources such as molasses, corn steep liquor, soy flour, cottonseed) 5 peptones,
Meat extracts, and organic nitrogen sources like hop residue, ammonium sulfate, and ammonium nitrate.

および塩化アンモニラｌ、のような無機窒素源を含有す
る。発酵の間に過剰の泡立らが生じた場合、植物油また
はシリコンのような消泡剤を発酵培地に加えることがで
きる６発酵のρ■が変化したら炭酸カルシウムのような
緩衝剤を加えてもよい。深部生育用タンク中の培地の通
気は、１分あたりブロスｌ容量に対し新鮮な空気約Ａな
いし２容量の割合を維持するのが好ましい。撹拌は発酵
工業において一般によく知られた攪拌手段によって行わ
れる。and ammonium chloride. If excessive foaming occurs during fermentation, an antifoaming agent such as vegetable oil or silicone can be added to the fermentation medium.If the ρ■ of the fermentation changes, a buffering agent such as calcium carbonate can be added. good. Aeration of the medium in the deep growth tank is preferably maintained at a rate of about A to 2 volumes of fresh air per 1 volume of broth per minute. Stirring is carried out by stirring means generally well known in the fermentation industry.

抗生物質の生産のための種母は、寒天墳池上ブソイドノ
カルジア・アズレアＭ０３９８−ｈＦＱ株の斜面培養か
ら得た生育物を使用する。この生育物は振盪フラスコま
たは種母タンクのいずれに接種する場合にも使用でき、
あるいは種母タンクに振盪フラスコから接種してもよい
。As a seed mother for the production of antibiotics, a growth obtained from a slant culture of Busoidonocardia azurea strain M0398-hFQ on an agar mound is used. This growth can be used to inoculate either shake flasks or seed tanks;
Alternatively, seed tanks may be inoculated from shake flasks.

この微生物の生育は通常２ないし３日で最高に達する。Growth of this microorganism usually reaches its maximum in 2 to 3 days.

しかし、使用する装置２通気、攪拌速度等が変化すれば
最高の生育に達する速度に影響を及ぼす、一般に、発酵
は充分な抗微生物活性が培地に付与されるまで行うが、
この目的には約２４時間ないし約５日の期間で充分であ
る。培養経過にともなう生産力価の経時変化はカンジダ
・アルビカンス３１４７を試験菌とする円筒平板法によ
り測定できる。However, changes in the equipment used, aeration, stirring speed, etc. will affect the speed at which maximum growth is reached. Generally, fermentation is carried out until sufficient antimicrobial activity is imparted to the medium;
A period of about 24 hours to about 5 days is sufficient for this purpose. Changes in production titer over time as the culture progresses can be measured by the cylindrical plate method using Candida albicans 3147 as the test bacterium.

本発明においては、かかる培養物から抗生物質ＭＧ３９
８−ｈＦ９Ａおよび抗生物質Ｍ０３９８−ｈＦ９Ｂを採
取するが、採取方法としては微生物の生産する代謝産物
を採取するのに通常用いられる手段を適宜に利用すれば
よい。たとえば、不純物との溶解性の差を利用する手段
、イオン交換樹脂や各種吸着剤に対する吸着親和性の差
を利用する手段、水と混ざらない溶媒による抽出などが
単独あるいは組合わせて利用される。ｎ−ブチルアルコ
ールのような有機溶媒を使用してｐＨ４，０ないし８．
０の全発酵ブロスまたは培養物から菌体を分離して得ら
れる培養濾液から抗生物質を抽出できる。また、培養物
から分離された菌体をアルコール類などの有機溶媒で抽
出して目的の抗生物質を得ることもできる。他の方法と
しては吸着剤を充填したカラムに培養濾液を通過させて
抗生物質を吸着剤に吸着させたのち、低級アルコール類
あるいは低級ケトン類などのように水と混合しうる有機
溶媒と水との混合物を使用して吸着剤から抗生物質を溶
出する方法がある。In the present invention, the antibiotic MG39 is extracted from such a culture.
8-hF9A and the antibiotic M0398-hF9B are collected, and any means commonly used for collecting metabolites produced by microorganisms may be used as appropriate. For example, methods that utilize differences in solubility with impurities, methods that utilize differences in adsorption affinity for ion exchange resins and various adsorbents, and extraction using solvents that are immiscible with water are used singly or in combination. pH 4.0 to 8.0 using an organic solvent such as n-butyl alcohol.
Antibiotics can be extracted from the whole fermentation broth of 0.0 or from the culture filtrate obtained by separating the bacterial cells from the culture. Alternatively, the target antibiotic can be obtained by extracting the bacterial cells isolated from the culture using an organic solvent such as alcohol. Another method is to pass the culture filtrate through a column packed with an adsorbent to adsorb the antibiotic to the adsorbent, and then combine it with an organic solvent that is miscible with water such as lower alcohols or lower ketones. There is a method of eluting antibiotics from adsorbents using a mixture of

この場合、吸着剤としては抗生物質の吸着に一般に使用
される物質、たとえば活性炭、吸着性樹脂などが使用で
きるが、吸着性樹脂を使う方が有利である。また、低級
アルコール類としては、たとえばメタノール、エタノー
ル、プロパツールなどが、低級ケトン類としてはたとえ
ばアセトン。In this case, the adsorbent can be a substance commonly used for the adsorption of antibiotics, such as activated carbon or an adsorbent resin, but it is more advantageous to use an adsorbent resin. Further, examples of lower alcohols include methanol, ethanol, propatool, etc., and examples of lower ketones include acetone.

メチルエチルケトンなどが利用される。具体的には培養
濾液をダイヤイオンＩＩＰ−２０（三菱化成工業株式会
社）などの吸着性樹脂を充填したカラムを通過させ、目
的の抗生物質を吸着させるのがよい。Methyl ethyl ketone etc. are used. Specifically, the culture filtrate is preferably passed through a column packed with an adsorbent resin such as Diaion IIP-20 (Mitsubishi Chemical Industries, Ltd.) to adsorb the antibiotic of interest.

カラムからの溶出は６０％アセトン水または８０％メタ
ノール水を使用し、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄ
ｉｄａ　　ａｌｂｉｃａｎｓ）に抗菌活性を示す部分を
集め、減圧下で濃縮乾固すると褐色の固形物が得られる
。この固形物を酢酸エチルなどで洗浄し、酢酸エチルに
可溶な不純物を除去すると抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９
Ａおよび抗生物質Ｍ０３９８−ｈＦ９Ｂの混合粗粉末が
得られる。For elution from the column, use 60% acetone water or 80% methanol water to elute Candida albicans (Candida albicans).
ida albicans) is collected and concentrated to dryness under reduced pressure to obtain a brown solid. When this solid substance is washed with ethyl acetate to remove impurities soluble in ethyl acetate, antibiotic MG398-hF9 is produced.
A mixed coarse powder of A and antibiotic M0398-hF9B is obtained.

また、抗生物質ＭＧ３９８−ｂＦ９Ａおよび抗生物質？
１Ｇ３９Ｂ−ｈＦ９Ｂは上記のごとく培養濾液から溶媒
で抽出することもでき、より具体的には、培養’ａＬｅ
をｐＨ４，０〜ｐＨ８，０の範囲でｎ−ブチルアルコー
ルなどで抽出するのがよい。抽出液を減圧下でｆｍ　４
１ｆｉ乾固すると褐色の固形物が得られる。こ・の固形
物を酢酸エチルなどで洗浄し、酢酸エチルに可溶な不純
物を除去すると抗生物質？１Ｇ３９８−ｈＦ９Ａおよび
抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ｂの混合粗粉末が得られる
。Also, antibiotic MG398-bF9A and antibiotic?
1G39B-hF9B can also be extracted from the culture filtrate with a solvent as described above, and more specifically, the culture 'aLe
is preferably extracted with n-butyl alcohol or the like in the range of pH 4.0 to pH 8.0. The extract was heated to FM 4 under reduced pressure.
After drying to 1 fi, a brown solid is obtained. If this solid substance is washed with ethyl acetate to remove impurities that are soluble in ethyl acetate, is it an antibiotic? A mixed coarse powder of 1G398-hF9A and antibiotic MG398-hF9B is obtained.

また、菌体からは抗生物質を採取するに際し、好ましく
はメタノール水、アセトン水を使用して溶出し、この溶
出液から溶媒を減圧下で留去した後、上記の培養濾液か
ら抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ａおよび抗生物質ＭＧ３
９８−ｈＦ９Ｂを採取する手段を利用することによって
抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ａおよび抗生物質ＭＧ３９
Ｂ−ｈＦ９Ｂの混合粗粉末を菌体からも得ることができ
る。In addition, when collecting antibiotics from bacterial cells, it is preferable to elute them using methanol water or acetone water, and after distilling off the solvent from this eluate under reduced pressure, antibiotics MG398- hF9A and antibiotic MG3
Antibiotic MG398-hF9A and antibiotic MG39 by utilizing means to collect 98-hF9B.
A mixed coarse powder of B-hF9B can also be obtained from the bacterial cells.

抗生物質ＭＧ３９８−　ｈＦ９Ａおよび抗生物質ＭＧ３
９８−ｈＦ９Ｂの混合粗粉末はさらに吸着クロマトグラ
フィーを利用して精製することができる。吸着クロマト
グラフィーとしては吸着性樹脂を用いたカラムクロマト
グラフィーが用いられる。この場合の吸着剤としてはア
ンバーライトＸＴ−２．ＭＣＩゲルＣＨＰ−２０Ｐ（三
菱化成工業株式会社）などが利用できる。カラムからの
溶出には低級アルコール類または低級ケトン類と水との
混合物の直線的濃度勾配溶出法が使用され、カンジダ・
アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ　　ａｌｌｂｉ−韮）に
抗菌活性を示す２つの区分が得られる。Antibiotic MG398- hF9A and antibiotic MG3
The mixed crude powder of 98-hF9B can be further purified using adsorption chromatography. Column chromatography using an adsorbent resin is used as the adsorption chromatography. In this case, the adsorbent is Amberlite XT-2. MCI gel CHP-20P (Mitsubishi Chemical Industries, Ltd.) etc. can be used. A linear concentration gradient elution method of a mixture of lower alcohols or lower ketones and water is used for elution from the column.
Two classes of Candida allbi are obtained which exhibit antibacterial activity.

先に溶出される抗菌活性区分から溶媒を減圧下留去して
得られる沈澱を濾別することにより淡黄色の抗生物％　
Ｍ０３９Ｂ−ｈＦＱＡ粗粉末が得られる。さらに後に溶
出される抗菌活性区分から溶媒を留去して得られる沈澱
を濾別するか、もしくはこの活性区分を減圧上濃縮乾固
することにより抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ｂ１１粉末
が得られる。The solvent is distilled off under reduced pressure from the antibacterial active fraction eluted first, and the resulting precipitate is filtered to obtain a pale yellow antibiotic percentage.
M039B-hFQA coarse powder is obtained. Furthermore, the antibiotic MG398-hF9B11 powder is obtained by distilling off the solvent from the antibacterial active fraction eluted later and filtering out the resulting precipitate, or by concentrating and drying this active fraction under reduced pressure.

抗生物質ＭＧ３９８−　ｈＦ９Ａおよび抗生物質ＭＧ３
９８−ｈＦ９Ｂ粗粉末はさらに調整的高速液体クロマト
グラフィーで精製される。Antibiotic MG398- hF9A and antibiotic MG3
The 98-hF9B crude powder is further purified by preparative high performance liquid chromatography.

調整的高速クロマトグラフィーのカラム充填剤としては
逆相化学結合型シリカゲルを用いるのがよい。展開剤と
しては低級アルコールあるいはアセトニトリルなどの有
機溶媒とρｈ２．５〜ｐＨ３，５の緩衝液とを適宜混合
したものが使用される。調整的高速液体クロマトグラフ
ィーで精製された抗生物質はそれぞれ溶出フラクション
から自然沈澱するものを濾別するか、あるしｚＬ！？容
出フラクションを吸着性樹脂に通過させてその樹脂に吸
着された抗生物質を低級アルコール類あるいは低級ケト
ン類などの水溶液で溶出し、乾固する事により抗生物質
ＭＧ３９８−ｈＦ９Ａおよび抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ
９Ｂが白色無定型固体として取得される。Reversed phase chemically bonded silica gel is preferably used as a column packing material for preparative high performance chromatography. As the developing agent, an appropriate mixture of a lower alcohol or an organic solvent such as acetonitrile and a buffer solution having a pH of 2.5 to 3.5 is used. Antibiotics purified by preparative high-performance liquid chromatography are obtained by filtering the spontaneous precipitate from the eluted fraction, or by filtering out the natural precipitate from the eluted fraction. ? The ejected fraction is passed through an adsorbent resin, and the antibiotic adsorbed on the resin is eluted with an aqueous solution of lower alcohols or lower ketones, etc., and dried to form antibiotic MG398-hF9A and antibiotic MG398-hF.
9B is obtained as a white amorphous solid.

〔実施例〕〔Example〕

以下、実施例により本発明をより詳細に説明する。 Hereinafter, the present invention will be explained in more detail with reference to Examples.

実施例１ ブソイドノカルジア・アズレアＭＧ３９８−ｈＦＱ株（
微工研菌寄第８８６５号）の斜面培養物の菌体を１１０
一種母培地（ガラクトース２％、化学用デキストリン２
％、ソイ・ペプトン１％、コーン・スチーブ・リカー０
．５％、硫酸アンモニウム０．２％、炭酸カルシウム０
．２％、ｐＨ７，４）を含む５００−容ロータリーフラ
スコに接種し、３０℃、９６時間、回転シェーカー上で
培養した。Example 1 Busoidonocardia azurea MG398-hFQ strain (
110 microorganisms of the slant culture of
Single mother medium (2% galactose, 2% chemical dextrin)
%, soy peptone 1%, corn stave liquor 0
．． 5%, ammonium sulfate 0.2%, calcium carbonate 0
．． 2%, pH 7.4) in a 500-volume rotary flask and incubated at 30°C for 96 hours on a rotating shaker.

得られた培養液を主培養培地（ガラクトース２％、化学
用デキストリン２％、ソイ・ペプトン１％、コーン・ス
チーブ・リカー０．５％、ホップかす（キリンビール株
式会社）０．５％、硫酸アンモニウム０．２％、炭酸カ
ルシウム０．２％、ｐｈ７．４）　　７１を１１０−ず
つに分注した５００−容ロータリーフラスコに２％の割
合で接種し、２８℃、１２０時間、毎分１８０回転の回
転シェーカー上で培養した。得られた培養液６．４００
−一にハイフロス−パーセル（ジョンズ・マンビルプロ
ダクト社、アメリカ）　２００ｇを加えてかきまぜたの
ち、混合物を濾過し、６，１００艷の濾液を得た。この
濾液をダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化成工業株式会社
）３５０−を充填したカラムに通過させ、水５００−お
よび３０％アセトン水溶液５００　ｍｌでカラムを洗浄
したのち、４０％アセトン水から６０％アセトン水まで
の直線的濃度勾配溶出法によって目的物を溶出した。溶
出液を適当な区分に分画して、生物検定によって各両分
を検査し、抗生物質を含む両分を集めた。活性な両分か
ら減圧下溶媒を留去したのち、残った水層１９０−から
目的の抗生物質をｎ−ブチルアルコール２００−を用い
て２回抽出した。得られたｎ−ブチルアルコール層を濃
縮乾固して８８０■の黄褐色の抗生物質ＭＧ３９８−ｈ
Ｆ９Ａ、抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ｂ混合粗扮末を得
た。The obtained culture solution was mixed with the main culture medium (2% galactose, 2% chemical dextrin, 1% soy peptone, 0.5% corn stave liquor, 0.5% hop lees (Kirin Brewery Co., Ltd.), ammonium sulfate. 0.2%, calcium carbonate 0.2%, pH 7.4) 71 was inoculated at a rate of 2% into a 500-volume rotary flask containing 110-volume portions, and heated at 28°C for 120 hours at 180 revolutions per minute. Cultured on a rotating shaker. Obtained culture solution 6.400
After adding 200 g of Hyfloth Parcel (John's Manville Products, USA) to the mixture and stirring, the mixture was filtered to obtain 6,100 filtrate. The filtrate was passed through a column packed with Diaion HP-20 (Mitsubishi Chemical Industries, Ltd.) 350-, and the column was washed with 500 ml of water and 500 ml of a 30% acetone solution, and then washed with 40% acetone water to 60% acetone. The target product was eluted by linear concentration gradient elution to water. The eluate was fractionated into appropriate fractions, each fraction was tested by bioassay, and the fractions containing the antibiotic were collected. After distilling off the solvent from both active components under reduced pressure, the objective antibiotic was extracted twice from the remaining aqueous layer 190 using n-butyl alcohol 200. The obtained n-butyl alcohol layer was concentrated to dryness to give 880 ml of yellowish brown antibiotic MG398-h.
A crude mixed powder of F9A and antibiotic MG398-hF9B was obtained.

実施例２ 実施例１で得た抗生物質ＭＧ３９８−　ｈＦ９Ａ　、抗
生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ｂ混合粗粉末８８０　ｍｇを
Ｏ，ｌＮ　ＮａＯＨ水溶液た溶解し、高速液体クロマト
グラフィー調整用カラム（■センシュー科学製、センシ
ューパックヌクレオシル（Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ）　　５
　Ｃｍ、２０φ×３００ｍ１ｌｌ〕を用い、３５％アセ
トニトリル−０，１Ｍリン酸緩衝液を移動相として流速
毎分１２−でクロマトグラフィーを行い、２５４ｎｍの
紫外線吸収を用いて）容出物を検知し、１６．８分及び
２１．２分を種火として溶出される両分をそれぞれ集め
た。２つの両分の溶出液を５℃で５日間放置すると、そ
れぞれの百分から白色沈澱が生した。前に溶出された両
分から得られた沈澱を濾別し、水洗した後減圧下乾燥し
てＭＧ３９８−ｈＦ９Ａ　９７■を白色無定型固体とし
て得た。また、後に溶出された両分から得られた沈澱を
濾別し、水洗した後減圧下乾燥してＭＧ３９Ｂ−ｈＦ９
Ｂ　Ｇ５．２　ｑｒを白色粉末としζ得た。Example 2 880 mg of antibiotic MG398-hF9A and antibiotic MG398-hF9B mixed crude powder obtained in Example 1 was dissolved in an O, IN NaOH aqueous solution, and a column for high performance liquid chromatography adjustment (■ Senshu Kagaku, Senshu Scientific Co., Ltd., Senshu Pack Nucleosil 5
Cm, 20φ x 300ml], chromatography was performed using 35% acetonitrile-0.1M phosphate buffer as the mobile phase at a flow rate of 12-min, and the ejected material was detected using ultraviolet absorption at 254 nm), The eluted fractions were collected at 16.8 minutes and 21.2 minutes, respectively. When the two eluates were left at 5° C. for 5 days, a white precipitate formed from each fraction. The precipitate obtained from both previously eluted fractions was filtered, washed with water, and then dried under reduced pressure to obtain MG398-hF9A 97■ as a white amorphous solid. In addition, the precipitate obtained from both eluted parts was filtered, washed with water, and dried under reduced pressure to obtain MG39B-hF9.
B G5.2 qr was obtained as a white powder.

〔発明の効果〕〔Effect of the invention〕

本発明は酵母及びカビに対して強い抗菌力を示し、カン
ジダ症、真菌症の治療・予防に有効である新規抗生物質
並びにその製造法を提供するものであり、極めて有用な
発明である。The present invention provides a novel antibiotic that exhibits strong antibacterial activity against yeasts and molds and is effective in treating and preventing candidiasis and mycosis, as well as a method for producing the same, and is an extremely useful invention.

特許出願人　　　　財団法人　微生物化学研究会代理人
　　新井　力（ほか２名） 手続補正書 特許庁長官　小　川　　邦　夫　殿 １、事件の表示 昭和６１年特許願第３０９６０８号 ２、発明の名称 抗生物質！、１Ｇ３９８−ｈＦ９Ａおよび抗生物質！、
ｌＧ３９８−ｈ　Ｆ９　Ｂ並びにそれらの製造方法 ３、補正をする者 事件との関係　　　特許出願人 ４、代理人 明細書及び図面 〔１）特許請求の範囲を次の通り訂正する。Patent applicant Tsutomu Arai (and 2 others) Agent of the Microbial Chemistry Research Foundation Procedural amendments Director General of the Patent Office Kunio Ogawa 1, Indication of the case 1985 Patent Application No. 309608 2, Name of the invention Antibiotics! , 1G398-hF9A and antibiotics! ,
IG398-h F9 B and their manufacturing method 3, relationship with the amended case Patent applicant 4, representative specification and drawings [1] The claims are amended as follows.

「１．　　次の構造式（１）を有する抗生物質−ＩＧ３
９８−ｈＦ９Ａまたは抗生物質！、＋　Ｇ　３９８−　
ｈ　Ｆ　９　Ｂ式中　Ｍ　０３９　ｇ　−ｈ　Ｆ　９　
ＡはＲが水素原子を示し、’、Ｉ　６３９８−　ｆｉ　
Ｆ　９　ＢはＲがメチル基を示す。"1. Antibiotic having the following structural formula (1) - IG3
98-hF9A or antibiotics! , + G 398-
h F 9 In formula B M 039 g −h F 9
In A, R represents a hydrogen atom,', I 6398- fi
In F 9 B, R represents a methyl group.

２、　プンイドノカルジア（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄ
ｉａ）　　属に員し、抗生物質ｖＧ３９８−ｈＦ９Ａお
よび抗生物質！Ｊ　Ｇ　３９ｆ！−ｈＦ９Ｂを生産する
能力を有する微生物を栄養培地に培養し、培養物から採
取することを特徴とする該抗生物質の製造方法。」 （２）　　明細書第８頁第８行〜最終行を下記の通り訂
正する。2. Pseudonocardia
ia) Member of the genus, antibiotic vG398-hF9A and antibiotic! JG 39f! - A method for producing the antibiotic, which comprises culturing a microorganism capable of producing hF9B in a nutrient medium and collecting it from the culture. (2) Page 8, line 8 to last line of the specification are corrected as follows.

「　本発明は次の構造式（１）を有する抗生物質Ｍ　Ｇ
　３９１１−ｈＦ９ＡまたはＭＧ３９８〜ｈＦ９ＢＭ　
Ｇ　３９８−　ｈ　Ｆ　９　ＡはＲが水素原子の物質で
Ｎ−（２８−（１−ヒドロキシグアニジノ）−１９−オ
キソ−２，３，５，７−テロラヒドロキシー１２．１４
．２０．２２−オクタコサテトラエノイルヨーグリシン
である。"The present invention relates to an antibiotic MG having the following structural formula (1).
3911-hF9A or MG398-hF9BM
G 398- h F 9 A is a substance in which R is a hydrogen atom, and N-(28-(1-hydroxyguanidino)-19-oxo-2,3,5,7-telorahydroxy-12.14
．． 20.22-Octacosatetraenoylyoglycine.

Ｍ　Ｇ　３９８−　ｈ　Ｆ　９　ＢはＲがメチル基の物
質でＮ−（２８−（１−ヒドロキシグアニジノ）−８−
メチル−１９−オキソ−２，３゜５．７−テロラヒドロ
キシー１２．１４．２０．２２−オクタコサテトラエノ
イルコグリシンである。MG 398- h F 9 B is a substance in which R is a methyl group, and N-(28-(1-hydroxyguanidino)-8-
Methyl-19-oxo-2,3°5.7-telorahydroxy-12.14.20.22-octacosatetraenoylcoglycine.

本発明の抗生物質はプソイドノカルジア属に嘱する微生
物を培養して得られる物質で下記物理化学的性質を有す
るものである。」 （３）　　明細書第３９頁第５行の次に下記の文を挿入
する。The antibiotic of the present invention is a substance obtained by culturing microorganisms belonging to the genus Pseudonocardia, and has the following physicochemical properties. (3) Insert the following sentence next to line 5 on page 39 of the specification.

【図面の簡単な説明】[Brief explanation of the drawing]

第１図は抗生物質！Ａ　Ｇ　３９８−　ｈ　Ｆ　９　Ａ
の４００　＋Ｊ　Ｈ□プロトンＭＮＲスペクトル（ＣＤ
３ＣＯＯＤ）、第２図は抗生物質Ｍ　０３９ｇ−ｈＦ９
Ｂの４００’Ｍ　Ｈ□プロトンＮ　！、１　ｉｔスペク
トル（ＣＤ３ＣＯＯＤ）である。」 （４）別紙の通り、図面を追加する。Figure 1 is antibiotics! A G 398- h F 9 A
400+J H□ proton MNR spectrum (CD
3COOD), Figure 2 shows antibiotic M 039g-hF9
B's 400'M H□Proton N! , 1 it spectrum (CD3COOD). (4) Add drawings as shown in the attached sheet.

Claims (1)

【特許請求の範囲】 １、プソイドノカルジア￥（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄ
ｉａ）￥属に属する微生物を栄養培地に培養して得られ
る抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ａまたは抗生物質ＭＧ３
９８−ｈＦ９Ｂ。 ２、抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ａが下記の理化学的性
質Ａ）元素分析（一酢酸塩） 実験値　計算値（Ｃ＿３＿１Ｈ＿５＿２Ｎ＿４Ｏ＿９・
ＣＨ＿３ＣＯＯＨ）Ｃ５７．４４（％）５７．８８（％
） Ｈ　８．４２（％）　８．２４（％） Ｎ　７．９３（％）　８．１８（％） Ｂ）質量分析（ＳＩＭＳ） ｍ／ｚ＝６２５（Ｍ＋１） Ｃ）融点 １５２〜１６２℃（分解） Ｄ）比旋光度 〔α〕＾２＾４＾℃＿Ｄ＋０．５６° （ｃ０．５４９、ジメチルスルホキシド） Ｅ）紫外線吸収スペクトル λ＾０＾．＾１＾Ｍ＾Ｈ＾Ｃ＾Ｌ＿ｍ＿ａ＿ｘ２２８ｎ
ｍ（Ｅ＾ｌ＾％＿１＿ｃ＿ｍ４２６）λ＾０＾．＾１＾
Ｍ＾Ｈ＾Ｃ＾Ｌ＿ｍ＿ａ＿ｘ２８３ｎｍ（Ｅ＾ｌ＾％＿
１＿ｃ＿ｍ３５０）λ＾０＾．＾１＾Ｍ＾Ｎ＾ａ＾Ｏ＾
Ｈ＿ｍ＿ａ＿ｘ２１２ｎｍ（Ｅ＾ｌ＾％＿１＿ｃ＿ｍ１
，２２０）λｈ＾０＾．＾１＾Ｍ＾Ｎ＾ａ＾Ｏ＾Ｈ＿５
＿ｈ２２８ｎｍ（Ｅ＾ｌ＾％＿１＿ｃ＿ｍ５５０λ＾０
＾．＾１＾Ｍ＾Ｎ＾ａ＾Ｏ＾Ｈ＿ｍ＿ａ＿ｘ２８３ｎｍ
（Ｅ＾ｌ＾％＿１＿ｃ＿ｍ３６１）Ｆ）赤外線吸収スペ
クトル（ｃｍ＾−＾１）ＫＢｒ錠剤法による主要吸収は
次のとおりである。 ３３８０、３０２０、２９３０、２８６０、１６８０、
１６５０、１６４０、１６００、１５５０、１４３０、
１４００、１３２０、１１１５、１１００、１０８５、
１０５０、１０００、９９５ Ｇ）水素核核磁気共鳴スペクトル（δ値） 重酢酸中、４００メガヘルツの測定値、なおｄはタブレ
ット、ｔはトリブレット、ｍはマルティブレットを表す
。 １．３〜１．９（１８Ｈ、ｍ）、２．０〜２．１５（４
Ｈ、ｍ）、２．２３（２Ｈ、ｍ）、２．６２（２Ｈ、ｔ
）、３．６１（２Ｈ、ｔ）、３．９７（１Ｈ、ｍ）、４
．０９、４．１７（２Ｈ、ＡＢ）、４．２３（１Ｈ、ｍ
）、４．２７（１Ｈ、ｄ）、４．４１（１Ｈ、ｍ）、５
．４８〜５．６３（２Ｈ、ｍ）、５．９６−６．０６（
２Ｈ、ｍ）、６．１８（１Ｈ、ｄ）、６．２３〜６．３
０（２Ｈ、ｍ）、７．１８〜７．３１（１Ｈ、ｍ）Ｈ）
溶剤に対する溶解性 石油エーテル、ベンゼン、エチルエーテル、クロロホル
ム、中性水に不溶； メタノール、エタノールに難溶； ジメチルスルホキシド、酢酸、アルカリ水に可溶 Ｉ）呈色反応 ライドン−スミス、２，４−ジニトロフェニルヒドラジ
ン、坂口反応、１０％硫酸に陽性。 Ｊ）塩基性、酸性、中性の区別 両性物質 Ｋ）物質の色 白色（粉末） を有することを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の
抗生物質。 ３、抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ｂが下記の理化学的性
質Ａ）元素分析（一酢酸塩） 実験値　計算値（Ｃ＿３＿２Ｈ＿５＿４Ｎ＿４Ｏ＿９・
ＣＨ＿３ＣＯＯＨ）Ｃ５８．６８（％）５８．４３（％
） Ｈ　８．５８（％）　８．３６（％） Ｎ　８．０７（％）　８．０２（％） Ｂ）質量分析（ＳＩＭＳ） ｍ／ｚ＝６３９（Ｍ＋１） Ｃ）融点 ９２〜１０７℃（分解） Ｄ）比旋光度 〔α〕＾２＾４＾℃＿Ｄ＝−９．１８ （Ｃ０．２１５、ジメチルスルホキシド） Ｅ）紫外線吸収スペクトル λ＾０＾．＾１＾Ｍ＾Ｈ＾Ｃ＾Ｌ＿ｍ＿ａ＿ｘ２２８ｎ
ｍ（Ｅ＾ｌ＾％＿１＿ｃ＿ｍ４０２）λ＾０＾．＾１＾
Ｍ＾Ｈ＾Ｃ＾Ｌ＿ｍ＿ａ＿ｘ２８３ｎｍ（Ｅ＾ｌ＾％＿
１＿ｃ＿ｍ３２７）λ＾０＾．＾１＾Ｍ＾Ｎ＾ａ＾Ｏ＾
Ｈ＿ｍ＿ａ＿ｘ２１２ｎｍ（Ｅ＾ｌ＾％＿１＿ｃ＿ｍ１
，２４０）λ＾０＾．＾１＾Ｍ＾Ｎ＾ａ＾Ｏ＾Ｈ＿ｓ＿
ｈ２２８ｎｍ（Ｅｌ％１ｃｍ５０９）λ＾０＾．＾１＾
Ｍ＾Ｎ＾ａ＾Ｏ＾Ｈ＿ｍ＿ａ＿ｘ２８３ｎｍ（Ｅ＾ｌ＾
％＿１＿ｃ＿ｍ３２８）Ｆ）赤外線吸収スペクトル（ｃ
ｍ＾−＾１）ＫＢｒ錠剤法による主要吸収は次のとおり
である。 ３３８０、３０２０、２９３０、２８６０、１６８０、
１６６０、１６４０、１６００、１５５０、１４００、
１３２０、１１９０、１１００、１０７０、１０４０、
９９０ Ｇ）水素核核磁気共鳴スペクトル（δ値） 重酢酸中、４００メガヘルツの測定値、なおｄはタブレ
ット、ｔはトリブレット、ｍはマルティブレットを表す
。 ０．９１（３Ｈ、ｄ）、１．１〜１．９（１７Ｈ、ｍ）
、２．０〜２．１５（４Ｈ、ｍ）、２．２２（２Ｈ、ｍ
）、２．６１（２Ｈ、ｔ）、３．６２（２Ｈ、ｍ）、３
．９１（１Ｈ、ｍ）、４．１３（２Ｈ、ＡＢ）、４．２
２（１Ｈ、ｍ）、４．２８（１Ｈ、ｄ）、４．４１（１
Ｈ、ｍ）、５．４５〜５．６５（２Ｈ、ｍ）５．９５〜
６．０７（２Ｈ、ｍ）、６．１７（１Ｈ、ｄ）、６．２
１〜６．３３（２Ｈ、ｍ）、７．２１〜７．３０（１Ｈ
、ｍ）Ｈ）溶剤に対する溶解性 石油エーテル、ベンゼン、エチルエーテル、クロロホル
ム、中性水に不溶； メタノール、エタノールに難溶； ジメチルスルホキシド、酢酸、アルカリ水に可溶 Ｉ）呈色反応 ライドン−スミス、２，４−ジニトロフェニルヒドラジ
ン、坂口反応、１０％硫酸に陽性。 Ｊ）塩基性、酸性、中性の区別 両性物質 Ｋ）物質の色 白色（粉末） を有することを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の
抗生物質。 ４、プソイドノカルジア￥（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄ
ｉａ）￥属に属し、抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ａ及び
抗生物質ＭＧ３９８−ｈＦ９Ｂを生産する能力を有する
微生物を栄養培地に培養し、培養物から採取することを
特徴とする該抗生物質の製造方法。[Claims] 1. Pseudonocardia
ia) Antibiotic MG398-hF9A or antibiotic MG3 obtained by culturing microorganisms belonging to the genus ¥ in a nutrient medium
98-hF9B. 2. The antibiotic MG398-hF9A has the following physical and chemical properties A) Elemental analysis (monoacetate) Experimental value Calculated value (C_3_1H_5_2N_4O_9・
CH_3COOH)C57.44(%)57.88(%
) H 8.42(%) 8.24(%) N 7.93(%) 8.18(%) B) Mass spectrometry (SIMS) m/z=625(M+1) C) Melting point 152-162°C ( decomposition) D) Specific optical rotation [α]^2^4^℃_D+0.56° (c0.549, dimethyl sulfoxide) E) Ultraviolet absorption spectrum λ^0^. ^1^M^H^C^L_m_a_x228n
m(E^l^%_1_c_m426)λ^0^. ^1^
M^H^C^L_m_a_x283nm(E^l^%_
1_c_m350)λ^0^. ^1^M^N^a^O^
H_m_a_x212nm(E^l^%_1_c_m1
, 220) λh^0^. ^1^M^N^a^O^H_5
_h228nm(E^l^%_1_c_m550λ^0
^． ^1^M^N^a^O^H_m_a_x283nm
(E^l^%_1_c_m361) F) Infrared absorption spectrum (cm^-^1) KBr The main absorption by the tablet method is as follows. 3380, 3020, 2930, 2860, 1680,
1650, 1640, 1600, 1550, 1430,
1400, 1320, 1115, 1100, 1085,
1050, 1000, 995 G) Hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum (δ value) Measured value at 400 MHz in deuterated acetic acid, where d represents tablet, t represents triplet, and m represents multiplet. 1.3-1.9 (18H, m), 2.0-2.15 (4
H, m), 2.23 (2H, m), 2.62 (2H, t
), 3.61 (2H, t), 3.97 (1H, m), 4
．． 09, 4.17 (2H, AB), 4.23 (1H, m
), 4.27 (1H, d), 4.41 (1H, m), 5
．． 48-5.63 (2H, m), 5.96-6.06 (
2H, m), 6.18 (1H, d), 6.23-6.3
0 (2H, m), 7.18-7.31 (1H, m)H)
Solubility in solvents Insoluble in petroleum ether, benzene, ethyl ether, chloroform, neutral water; Slightly soluble in methanol, ethanol; Soluble in dimethyl sulfoxide, acetic acid, alkaline water I) Color reaction Lydon-Smith, 2,4- Positive for dinitrophenylhydrazine, Sakaguchi reaction, and 10% sulfuric acid. J) An amphoteric substance distinguishing between basic, acidic, and neutral K) A white-skinned substance (powder) The antibiotic according to claim 1. 3. The antibiotic MG398-hF9B has the following physical and chemical properties A) Elemental analysis (monoacetate) Experimental value Calculated value (C_3_2H_5_4N_4O_9・
CH_3COOH)C58.68(%)58.43(%
) H 8.58(%) 8.36(%) N 8.07(%) 8.02(%) B) Mass spectrometry (SIMS) m/z=639(M+1) C) Melting point 92-107°C ( decomposition) D) Specific optical rotation [α]^2^4^℃_D=-9.18 (C0.215, dimethyl sulfoxide) E) Ultraviolet absorption spectrum λ^0^. ^1^M^H^C^L_m_a_x228n
m(E^l^%_1_c_m402)λ^0^. ^1^
M^H^C^L_m_a_x283nm(E^l^%_
1_c_m327)λ^0^. ^1^M^N^a^O^
H_m_a_x212nm(E^l^%_1_c_m1
,240)λ^0^. ^1^M^N^a^O^H_s_
h228nm (El%1cm509)λ^0^. ^1^
M^N^a^O^H_m_a_x283nm(E^l^
%_1_c_m328) F) Infrared absorption spectrum (c
m^-^1) The main absorption by KBr tablet method is as follows. 3380, 3020, 2930, 2860, 1680,
1660, 1640, 1600, 1550, 1400,
1320, 1190, 1100, 1070, 1040,
990 G) Hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum (δ value) Measured value at 400 MHz in deuterated acetic acid, where d represents tablet, t represents triplet, and m represents multiplet. 0.91 (3H, d), 1.1-1.9 (17H, m)
, 2.0-2.15 (4H, m), 2.22 (2H, m
), 2.61 (2H, t), 3.62 (2H, m), 3
．． 91 (1H, m), 4.13 (2H, AB), 4.2
2 (1H, m), 4.28 (1H, d), 4.41 (1
H, m), 5.45~5.65 (2H, m) 5.95~
6.07 (2H, m), 6.17 (1H, d), 6.2
1-6.33 (2H, m), 7.21-7.30 (1H
, m) H) Solubility in solvents Insoluble in petroleum ether, benzene, ethyl ether, chloroform, neutral water; Slightly soluble in methanol, ethanol; Soluble in dimethyl sulfoxide, acetic acid, alkaline water I) Color reaction Lydon-Smith , 2,4-dinitrophenylhydrazine, Sakaguchi reaction, positive for 10% sulfuric acid. J) An amphoteric substance distinguishing between basic, acidic, and neutral K) A white-skinned substance (powder) The antibiotic according to claim 1. 4. Pseudonocardia
ia) A method for producing an antibiotic, which comprises culturing in a nutrient medium a microorganism belonging to the genus ¥ and having the ability to produce the antibiotic MG398-hF9A and the antibiotic MG398-hF9B, and collecting the microorganism from the culture.