JPH07258081A - Carcinostatic and grp receptor antagonistic agent - Google Patents

Abstract

PURPOSE:To obtain the carcinostatic containing a compound represented by the specified formula as the active ingredient, exhibiting a remarkably strong antagonistic activity against gastrin releasing peptide receptor and useful as various kinds of medicines such as an anti-lung cancer agent. CONSTITUTION:This carcinostatic contains a compound of the formula (R is H or 3-methyl-2-butenyl) as the active ingredient. In addition, this compound is obtained recommendably, e.g. by extracting the underground part of a mattock belonging to Moraceae.

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は、次の式（Ｉ）で表され
る化合物の新規用途に関する。FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to a novel use of a compound represented by the following formula (I).

【０００２】[0002]

【化３】 [Chemical 3]

【０００３】式中、Ｒは、水素又は３−メチル−２−ブ
テニルを表す。本発明に係る上記化合物は、ガストリン
リリージングペプチド（ＧＲＰ）レセプターの拮抗活性
が、従来の非ペプチド性のＧＲＰレセプター拮抗物質に
比べて極めて強いので、抗ガン剤やその他様々な医薬品
として有用である。In the formula, R represents hydrogen or 3-methyl-2-butenyl. The compound according to the present invention has a gastrin-releasing peptide (GRP) receptor antagonistic activity which is extremely stronger than conventional non-peptide GRP receptor antagonists, and is therefore useful as an anti-cancer agent and various other pharmaceutical agents. .

【０００４】[0004]

【従来の技術】ＧＲＰは、哺乳類において強いガストリ
ン分泌刺激作用を持つペプチドとして見出され、ボンベ
シンファミリーに属するペプチドとして分類されている
（日本臨牀、第４８巻、第５号、１０５頁以下、１９９
０年）。GRP is found as a peptide having a strong gastrin secretion stimulating action in mammals and is classified as a peptide belonging to the bombesin family (Nippon Rinji, Vol. 48, No. 5, p. 105, 199 or less).
0 years).

【０００５】ＧＲＰのレセプターは、脳、下垂体、膵腺
房細胞に存在し、消化管ホルモンの分泌促進、胃酸・膵
外分泌促進、胆嚢収縮、血圧上昇、抗利尿作用、黄体形
成ホルモン分泌刺激、甲状腺刺激ホルモン分泌抑制等様
々な生理活性に関与している。また、ヒトの肺ガンの約
２５％を占める小細胞肺ガン（ＳＣＬＣ）のガン細胞に
もレセプターの存在が確認されており、ＧＲＰは、小細
胞肺ガン及び前立腺ガン等のガン細胞のオートクリン増
殖の増殖因子として作用することが示唆されている（ネ
イチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、第３６１巻、８２３−８２
６頁、１９８５年）。ＧＲＰレセプター拮抗剤は、これ
らのガン細胞の増殖を抑制することにより医薬品として
の利用が期待されている（キャンサー リサーチ（Ｃａ
ｎｃｅｒＲｅｓ．）、第５１巻、５９８０−５９８６
頁、１９９１年）。The GRP receptor is present in the brain, pituitary gland and pancreatic acinar cells, and promotes secretion of gastrointestinal hormones, promotion of gastric acid / pancreatic exocrine secretion, gallbladder contraction, blood pressure increase, antidiuretic action, luteinizing hormone secretion stimulation, It is involved in various physiological activities such as suppression of thyroid-stimulating hormone secretion. The presence of the receptor has also been confirmed in cancer cells of small cell lung cancer (SCLC), which accounts for about 25% of human lung cancer, and GRP is an autocrine of cancer cells such as small cell lung cancer and prostate cancer. It has been suggested to act as a growth factor for growth (Nature, vol. 361, 823-82).
6 pages, 1985). The GRP receptor antagonist is expected to be used as a medicine by suppressing the growth of these cancer cells (Cancer Research (Ca
ncerRes. ), Vol. 51, 5980-5986
P., 1991).

【０００６】ＧＲＰレセプター拮抗作用をもつ非ペプチ
ド性化合物の報告例は殆どなく、わずかにＣＰ−７００
３０及びＣＰ−７５９９８が知られている程度であった
（バイオオーガニック アンド メディシナル ケミス
トリー レターズ（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄ
ｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒ
ｓ）、第１２巻、第４号、３３３−３３８頁、１９９２
年）。There are almost no reports of non-peptidic compounds having GRP receptor antagonistic activity, and only a small amount of CP-700
30 and CP-75998 were known (Bioorganic & Med Chemistry Letters (Bioorganic & Med).
icinal Chemistry Letter
s), Vol. 12, No. 4, pp. 333-338, 1992.
Year).

【０００７】[0007]

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的の第一
は、強いＧＲＰレセプター拮抗活性を有する非ペプチド
系化合物を発見する点にあった。また、第二の目的とし
て、この作用に基づき従来とは異なる作用機作の抗ガン
剤やその他様々な医薬品を創成するところにあった。The first object of the present invention was to find a non-peptide compound having a strong GRP receptor antagonistic activity. In addition, as a second purpose, based on this action, an anti-cancer agent and a variety of other medicinal products having a mechanism of action different from conventional ones were created.

【０００８】[0008]

【課題を解決するための手段】本発明者らは鋭意検討の
結果、栽培種のクワの地下部の抽出物に、ＧＲＰレセプ
ター拮抗活性を示す物質が含まれていることを発見し、
単離を行ったところ、このものが式（Ｉ）で示される化
合物であることが判った。式中、Ｒが水素のものはクワ
ノンＧ（Ｋｕｗａｎｏｎ Ｇ）、Ｒが３−メチル−２−
ブテニルのものはクワノンＨ（Ｋｕｗａｎｏｎ Ｈ）で
公知の物質である。その後、これらのものについてＧＲ
Ｐレセプターの拮抗剤としての活性を調べたところ、上
記のＣＰ−７００３０及びＣＰ−７５９９８等をはるか
に凌駕する優れた拮抗活性を有することを見出し、本発
明を完成した。Means for Solving the Problems As a result of intensive studies, the present inventors have found that a substance showing a GRP receptor antagonistic activity is contained in an underground extract of a cultivated mulberry,
Upon isolation, this was found to be a compound of formula (I). In the formula, R is hydrogen when it is Kuwanon G, and R is 3-methyl-2-
Butenyl is a known substance for Kuwanon H. Then GR about these things
When the activity of the P receptor as an antagonist was investigated, it was found that it has an excellent antagonist activity far superior to those of CP-70030 and CP-75998, and the present invention was completed.

【０００９】クワ科植物クワ（Ｍｏｒｕｓ ｂｏｍｂｙ
ｃｉｓ）は、古くからその葉をカイコの餌とするため栽
培されてきたが、その根皮は生薬桑白皮として市販さ
れ、消炎、利尿、去痰等の目的に使用されてきた。上記
クワの根皮の抽出物には血圧降下作用が認められ、その
活性成分はクワノンＧ及びクワノンＨを含むクワノン
類、マルベロフラン類であることが知られている。その
他フェノール成分、トリテルペン、アルカロイド等も単
離されており、特にフェノール成分はｃＡＭＰフォスフ
ォジエステラーゼ阻害作用を有することが知られてい
る。Moraceous plant mulberry (Morus bomby
cis) has been cultivated for a long time as a bait for silkworms, but its root bark is marketed as a crude drug mulberry bark and has been used for the purpose of anti-inflammatory, diuretic, expectorant, etc. It is known that the extract of mulberry root bark has an antihypertensive effect, and its active ingredients are quanones containing guanone G and guanone H, and marberofurans. Other phenolic components, triterpenes, alkaloids, etc. have been isolated, and in particular, the phenolic components are known to have a cAMP phosphodiesterase inhibitory action.

【００１０】従って、クワノンＧ及びクワノンＨは、公
知の物質であるが、これまでＧＲＰレセプター拮抗活性
を有することは全く知られていなかった。本発明者らの
研究によれば、従来知られている非ペプチド性ＧＲＰレ
セプター拮抗剤のＣＰ−７００３０及びＣＰ−７５９９
８のＩＣ₅₀が１．５〜３μＭであると報告されているの
に対してクワノンＧ及びクワノンＨはそれより３〜１０
倍高い活性を有していた。[0010] Therefore, quanon G and quanon H are known substances, but it has never been known that they have GRP receptor antagonistic activity. According to the studies by the present inventors, the conventionally known non-peptide GRP receptor antagonists CP-70030 and CP-7599
8 has been reported to have an IC ₅₀ of 1.5 to 3 μM, whereas quanon G and quanone H have a reported IC ₅₀ of 3 to 10 μM.
It had twice as much activity.

【００１１】上記クワノンＧ及びクワノンＨは、ＧＲＰ
がオートクリン増殖の増殖因子として働くと考えられて
いる小細胞肺ガン、前立腺ガン等に有効である。また、
ＧＲＰがレセプターに結合することにより惹起される様
々な生理活性の調節物質としても作用しうる。従って、
クワノンＧ又はクワノンＨを有効成分として含有する薬
剤は、例えば、胃酸分泌抑制剤、胆汁分泌抑制剤、整腸
剤、血圧降下剤、利尿剤、黄体形成ホルモン分泌抑制
剤、甲状腺刺激ホルモン分泌亢進剤等の用途にも使用す
ることができる。The above-mentioned Quanon G and Quanon H are GRP
Is effective for small cell lung cancer, prostate cancer, etc., which are thought to act as growth factors for autocrine proliferation. Also,
It can also act as a regulator of various physiological activities caused by binding of GRP to a receptor. Therefore,
The drug containing quanon G or quanon H as an active ingredient is, for example, a gastric acid secretion inhibitor, a bile secretion inhibitor, an intestinal agent, a blood pressure lowering agent, a diuretic, a luteinizing hormone secretion inhibitor, a thyroid stimulating hormone secretagogue, etc. It can also be used for applications.

【００１２】クワノンＧ又はクワノンＨはそのまま又は
医薬的に許容される無毒性かつ不活性の担体と共に、ヒ
トを含む動物に投与される。クワノンＧ及びクワノンＨ
はそれぞれ単独又は混合物として投与することができ
る。[0012] Quanone G or Quanone H is administered to animals including humans as it is or together with a pharmaceutically acceptable non-toxic and inert carrier. Quanon G and Quanon H
Each can be administered alone or as a mixture.

【００１３】担体としては、固形、半固形、又は液状の
希釈剤、充填剤、及びその他の処方用の助剤一種以上
が、例えば、０．１％〜９９．５％、好ましくは０．５
〜９０％の割合で用いられる。本発明抗ガン剤又はＧＲ
Ｐレセプター拮抗剤は、経口的又は非経口的に安全に投
与することができる。非経口の投与形態として、例え
ば、組織内投与等の局所投与、皮下投与、筋肉内投与、
動・静脈内投与、経直腸投与等が挙げられる。周知慣用
の技術手段を用いてこれらの投与方法に適した製剤型を
調製すればよい。As the carrier, one or more solid, semi-solid or liquid diluents, fillers, and other auxiliary agents for formulation are used, for example, 0.1% to 99.5%, preferably 0.5.
Used at a rate of ~ 90%. The anticancer agent or GR of the present invention
The P receptor antagonist can be safely administered orally or parenterally. As a parenteral administration form, for example, local administration such as tissue administration, subcutaneous administration, intramuscular administration,
Intramuscular / intravenous administration, transrectal administration and the like can be mentioned. Formulation forms suitable for these administration methods may be prepared using well-known and conventional technical means.

【００１４】抗ガン剤又はＧＲＰレセプター拮抗剤とし
ての投与量は、患者の年齢、体重、投与経路、疾病の種
類や程度等を考慮した上で設定することが望ましいが、
ヒトへの投与の場合、通常は、成人に対して有効成分量
として、経口的に１０〜２０００ｍｇ／日、好ましくは
５０〜１０００ｍｇ／日で投与するのが一般的である。
また、非経口的には、投与経路により大きく異なるが、
通常、１〜２００ｍｇ／日、好ましくは５〜１００ｍｇ
／日の範囲で投与すればよい。場合によっては、これ以
下で充分であるし、また逆にこれ以上の投与量を必要と
することもある。また１日２〜４回に分割して投与する
こともできる。The dose as an anti-cancer agent or GRP receptor antagonist is preferably set in consideration of the patient's age, body weight, administration route, type and degree of disease, etc.
In the case of administration to humans, it is general to administer 10 to 2000 mg / day, preferably 50 to 1000 mg / day, orally as an active ingredient amount to an adult.
Also, parenterally, depending on the route of administration,
Usually 1 to 200 mg / day, preferably 5 to 100 mg
It may be administered in the range of / day. In some cases, lower doses may be sufficient, and conversely, higher doses may be required. It can also be divided into 2 to 4 times a day for administration.

【００１５】経口投与は固形又は液状の用量単位、例え
ば、末剤、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、シロップ
剤、エリキシル剤又は懸濁剤その他の剤型によって行う
ことができる。Oral administration can be carried out in solid or liquid dosage units such as powders, powders, granules, tablets, capsules, syrups, elixirs or suspensions and other dosage forms.

【００１６】末剤は活性物質を適当な細かさにすること
により製造される。散剤は活性物質を適当な細かさと
し、ついで同様に細かくした医薬用担体、例えば澱粉、
マンニトールのような可食性炭水化物その他賦形剤と混
合することにより製造される。必要に応じ嬌味剤、保存
剤、分散剤、着色剤、香料その他のものを混じてもよ
い。Powders are prepared by milling the active substance into suitable granules. The powders are made up of a suitable finely divided active substance and then a finely divided pharmaceutical carrier, such as starch,
It is manufactured by mixing with edible carbohydrates such as mannitol and other excipients. If desired, a flavoring agent, a preservative, a dispersant, a coloring agent, a fragrance and the like may be mixed.

【００１７】カプセル剤は、まず上述のようにして粉末
状にした末剤や散剤又は顆粒剤を、例えばゼラチンカプ
セルのようなカプセル外皮の中へ充填することにより製
造される。また、充填前に滑沢剤や流動化剤、例えばコ
ロイド状のシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウ
ム、ステアリン酸カルシウム、固形のポリエチレングリ
コール等を任意に混合しておいてもよい。崩壊剤や可溶
化剤、例えばカルボキシメチルセルロース、カルボキシ
メチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロ
ピルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、カル
ボキシスターチナトリウム、炭酸カルシウム、炭酸ナト
リウム等を添加すれば、カプセル剤が摂取されたときの
医薬の有効性を改善することができる。The capsule is manufactured by first filling the powdered powder, powder or granules as described above into the capsule shell such as a gelatin capsule. Further, a lubricant or a fluidizing agent such as colloidal silica, talc, magnesium stearate, calcium stearate, or solid polyethylene glycol may be optionally mixed before filling. Disintegrators and solubilizers such as carboxymethylcellulose, carboxymethylcellulose calcium, low-substituted hydroxypropylcellulose, croscarmellose sodium, sodium carboxystarch, calcium carbonate, sodium carbonate, etc. The effectiveness of the drug can be improved.

【００１８】また、本品の微粉末を植物油、ポリエチレ
ングリコール、グリセリン、界面活性剤中に懸濁分散
し、これをゼラチンシートで包んで軟カプセル剤とする
ことができる。Further, the fine powder of this product may be suspended and dispersed in vegetable oil, polyethylene glycol, glycerin and a surfactant, and this may be wrapped with a gelatin sheet to give a soft capsule.

【００１９】顆粒剤は、粉末状にした活性物質と上述の
賦形剤や崩壊剤を混合したものに、必要に応じ結合剤
（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒ
ドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ヒド
ロキシプロピルメチルセルロース、ゼラチン、ポリビニ
ルピロリドン、ポリビニルアルコール等）、及び、湿潤
剤（例えばシロップ、澱粉糊、アラビアゴム、セルロー
ス溶液又は高分子物質溶液等）を加えて練合し、ついで
篩を強制通過させて調製することができる。このように
粉末を顆粒化するかわりに、まず打錠機にかけたのち、
得られる不完全な形態のスラグを破砕して顆粒にするこ
ともできる。あらかじめ溶解遅延化剤（例えば、パラフ
ィン、ワックス、硬化ヒマシ油等）、再吸収剤（例え
ば、四級塩等）又は吸着剤（例えばベントナイト、カオ
リン、リン酸ジカルシウム等）等を混合しておいてもよ
い。The granules are prepared by mixing the powdered active substance with the above-mentioned excipients and disintegrants, and if necessary, a binder (for example, sodium carboxymethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose, methyl cellulose, hydroxypropyl methyl cellulose, Gelatin, polyvinylpyrrolidone, polyvinyl alcohol, etc.) and wetting agent (eg, syrup, starch paste, gum arabic, cellulose solution or polymer solution, etc.) and kneading, and then forcibly passing through a sieve to prepare You can Instead of granulating the powder in this way, first put it on a tablet machine and then
The resulting imperfect form of the slag can also be crushed into granules. A dissolution retarder (eg, paraffin, wax, hydrogenated castor oil, etc.), resorbent (eg, quaternary salt, etc.) or adsorbent (eg, bentonite, kaolin, dicalcium phosphate, etc.) is mixed in advance. You may stay.

【００２０】錠剤は、このようにして作られる顆粒剤
に、滑沢剤としてステアリン酸、ステアリン酸塩、タル
ク、ミネラルオイルその他を添加し打錠することにより
調製することができる。こうして製造した素錠に更にフ
ィルムコーティングや糖衣を施してもよい。A tablet can be prepared by adding stearic acid, a stearate salt, talc, mineral oil or the like as a lubricant to the granules thus produced and tableting. The uncoated tablets thus produced may be further subjected to film coating or sugar coating.

【００２１】また活性物質は、上述のように顆粒化やス
ラグ化の工程を経ることなく、流動性の不活性担体と混
合した後直接打錠してもよい。シェラックの密閉被膜か
らなる透明又は半透明の保護被覆、糖や高分子材料の被
覆、及び、ワックスよりなる磨上被覆等も用いることが
できる。The active substance may be directly tableted after mixing with a fluid inert carrier without undergoing the steps of granulation and slag formation as described above. A transparent or translucent protective coating consisting of a shellac sealing coating, a coating of sugar or polymer material, and a polish coating consisting of wax can also be used.

【００２２】他の経口投与剤型、例えばシロップ剤、エ
リキシル剤及び懸濁剤等もまたその一定量が活性物質の
一定量を含有するように用量単位形態にすることができ
る。シロップ剤は、活性物質を適当な香味水溶液に溶解
して製造され、またエリキシル剤は非毒性のアルコール
性担体を用いることにより製造される。懸濁剤は、活性
物質を非毒性担体中に分散させることにより処方され
る。懸濁化剤や乳化剤（例えば、エトキシ化されたイソ
ステアリルアルコール類、ポリオキシエチレンソルビト
ールエステル類）、保存剤、嬌味剤（例えば、ペパミン
ト油、サッカリン）その他もまた任意に添加することが
できる。Other oral dosage forms such as syrups, elixirs and suspensions may also be in dosage unit form so that a given quantity contains a certain amount of active substance. Syrups are prepared by dissolving the active substance in a suitable flavor aqueous solution, and elixirs are prepared by using a non-toxic alcoholic carrier. Suspensions are formulated by dispersing the active substance in a nontoxic carrier. Suspending agents and emulsifying agents (eg, ethoxylated isostearyl alcohols, polyoxyethylene sorbitol esters), preservatives, flavoring agents (eg, peppermint oil, saccharin), etc. can also be optionally added. .

【００２３】必要に応じて、経口投与のための用量単位
処方はマイクロカプセル化してもよい。この処方はまた
被覆をしたり、高分子・ワックス等の中に活性物質を埋
めこんだりすることにより作用時間の延長や持続放出を
もたらすこともできる。If desired, dosage unit formulations for oral administration can be microencapsulated. This formulation can also be provided with coatings or by embedding the active substance in polymers, wax or the like to prolong the duration of action and to provide sustained release.

【００２４】皮下、筋肉内又は動・静脈内投与は、液状
用量単位形態、例えば溶液や懸濁液の形態の注射剤とす
ることによって行うことができる。これらのものは、活
性物質の一定量を、注射の目的に適合する非毒性の液状
担体、例えば水性や油性の溶剤に溶解又は懸濁し、つい
で該溶液又は懸濁液を滅菌することにより製造される。
また、粉末又は凍結乾燥した活性物質の一定量をバイア
ルにとり、その後バイアルとその内容物を滅菌し密閉し
てもよい。この場合、投与直前に溶解又は混合するため
に、予備的なバイアルや担体を準備しておいてもよい。
注射液を等張にするために非毒性の塩や塩溶液を添加し
てもよく、さらに安定化剤、保存剤、懸濁化剤及び乳化
剤等を併用することもできる。Subcutaneous, intramuscular or intra-arterial / intravenous administration can be carried out in the form of a liquid dosage unit, for example, an injection in the form of a solution or suspension. These are prepared by dissolving or suspending a fixed amount of the active substance in a non-toxic liquid carrier compatible with the purpose of injection, such as an aqueous or oily solvent, and then sterilizing the solution or suspension. It
Alternatively, a fixed amount of the powdered or lyophilized active substance may be placed in a vial, and then the vial and its contents may be sterilized and sealed. In this case, a preliminary vial or carrier may be prepared for dissolution or mixing immediately before administration.
A non-toxic salt or salt solution may be added to make the injection solution isotonic, and a stabilizer, a preservative, a suspending agent, an emulsifier and the like may be used in combination.

【００２５】経直腸投与剤型は、疎水性又は親水性の坐
剤基剤、例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、高
級エステル類（例えばパルミチン酸ミリスチルエステ
ル）及びそれらの混合物に活性物質を練合することによ
って調製することができる。For rectal administration, a hydrophobic or hydrophilic suppository base such as polyethylene glycol, cocoa butter, higher esters (eg myristyl palmitate) and mixtures thereof with the active substance is incorporated. Can be prepared by.

【００２６】[0026]

【実施例】以下に実施例、試験例及び製剤例を掲げて本
発明をさらに詳しく説明するが、本発明の範囲がこれら
により限定されるものではない。EXAMPLES The present invention will be described in more detail below with reference to Examples, Test Examples and Formulation Examples, but the scope of the present invention is not limited thereto.

【００２７】実施例１クワノンＧ及びクワノンＨの単離 栽培種のクワの地下部５ｋｇをメチルアルコール１５Ｌ
ずつで４日間２回冷浸し、抽出液を減圧乾固した。得ら
れたエキス１５０ｇのうち６０ｇを酢酸エチルと水で分
配し、酢酸エチル層を減圧乾固してさらにｎ−ヘキサン
と９０％メチルアルコールで分配した。９０％メチルア
ルコール層を減圧乾固して得た残渣２５．８１ｇの半量
についてクロマトレックスＯＤＳ（５００ｇ、富士デヴ
ィソン社製）のカラムを用い、分離しながらその溶出液
を高速液体クロマトグラフィー（デベロシルＯＤＳ Ｈ
Ｇ−５、４．６×１５０ｍｍ、メチルアルコール−水の
７：３混合溶液で溶出）で分析した。メチルアルコール
−水の１：１混合溶液（１０００ｍｌ）、２：１混合溶
液（９００ｍｌ）で溶出した後、２：１混合溶液（２５
０ｍｌ）、３：１混合溶液（２００ｍｌ）で順に溶出し
たところ、保持時間１６．２分のピークを示す分画が得
られた。この分画を回収後、更にメチルアルコール−水
の３：１混合溶液（４５０ｍｌ）で溶出すると、保持時
間２３．７分のピークを示す分画が得られた。上記残り
半量の試料についても同様に処理し、保持時間１６．２
分のピークを示す画分を合計２．３３ｇ、保持時間２
３．７分のピークを示す画分を合計２．６８ｇ得た。Example 1 5 kg of the underground part of mulberry, which is an isolated cultivated variety of guanone G and guanone H, was added with 15 L of methyl alcohol.
The extract was dried under reduced pressure to dryness twice for 4 days. 60 g of 150 g of the obtained extract was partitioned with ethyl acetate and water, the ethyl acetate layer was dried under reduced pressure, and further partitioned with n-hexane and 90% methyl alcohol. Half of the residue (25.81 g) obtained by drying the 90% methyl alcohol layer under reduced pressure was chromatolex ODS (500 g, manufactured by Fuji Devison Co., Ltd.), and the eluate was separated by high performance liquid chromatography (develocyl ODS). H
G-5, 4.6 × 150 mm, eluted with a 7: 3 mixed solution of methyl alcohol-water). After elution with a 1: 1 mixed solution of methyl alcohol-water (1000 ml) and a 2: 1 mixed solution (900 ml), a 2: 1 mixed solution (25
(0 ml) and 3: 1 mixed solution (200 ml) were sequentially eluted, and a fraction showing a peak with a retention time of 16.2 min was obtained. After this fraction was collected and further eluted with a 3: 1 mixed solution of methyl alcohol-water (450 ml), a fraction showing a peak with a retention time of 23.7 minutes was obtained. The remaining half amount of the sample was treated in the same manner, and the retention time was 16.2.
2.33 g of fractions showing a peak of minutes, retention time 2
A total of 2.68 g of fractions showing a peak at 3.7 minutes were obtained.

【００２８】保持時間１６．２分のピークを示す分画の
うち１．４４ｇを、更に遠心液液分配クロマトグラフィ
−（ｎ−ヘキサン−塩化メチレン−メチルアルコール−
水の１０：４０：３４：１６混合溶液、下降法）により
分離し、５３９ｍｇの分画を得た。そのうち１０５ｍｇ
を、高速液体クロマトグラフィー（デベロシルＯＤＳＨ
Ｇ−５、２０×２５０ｍｍ、メチルアルコール−水の
４：１混合溶液で溶出、リサイクル３回）で精製して化
合物１を８０ｍｇ得た。Of the fractions showing a peak with a retention time of 16.2 minutes, 1.44 g was further subjected to centrifugal liquid-liquid partition chromatography (n-hexane-methylene chloride-methyl alcohol-).
The mixture was separated by a 10: 40: 34: 16 mixed solution of water, a descending method) to obtain 539 mg of a fraction. 105 mg of which
By high performance liquid chromatography (Develocyl ODSH
G-5, 20 × 250 mm, eluted with a 4: 1 mixed solution of methyl alcohol-water and recycled 3 times) to obtain 80 mg of Compound 1.

【００２９】また、保持時間２３．７分のピークを示す
分画のうち２．２８ｇを、高速液体クロマトグラフィー
（デベロシルＯＤＳ ＨＧ−５、２０×２５０ｍｍ、メ
チルアルコール−水の４：１混合溶液で溶出）、次いで
遠心液液分配クロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン−塩化
メチレン−メチルアルコール−水の１０：４０：３４：
１６の混合溶液、上昇法）により分離し、９１３ｍｇの
分画を得た。そのうち１０３ｍｇを高速液体クロマトグ
ラフィー（デベロシルＯＤＳ ＨＧ−５、２０×２５０
ｍｍ、メチルアルコール−水の４：１混合溶液で溶出、
リサイクル４回）で精製して化合物２を５９ｍｇ得た。Further, 2.28 g of the fraction showing a peak with a retention time of 23.7 minutes was subjected to high performance liquid chromatography (develocyl ODS HG-5, 20 × 250 mm, 4: 1 mixed solution of methyl alcohol-water). Elution) and then centrifugal liquid-liquid partition chromatography (n-hexane-methylene chloride-methyl alcohol-water 10:40:34:
Separation by a mixed solution of 16 and ascending method) to obtain 913 mg of a fraction. 103 mg of that was analyzed by high performance liquid chromatography (Developerosil ODS HG-5, 20 × 250).
mm, eluted with a 4: 1 mixed solution of methyl alcohol-water,
The product was purified by recycling 4 times) to obtain 59 mg of compound 2.

【００３０】上記保持時間１６．２分のピークを有する
分画を精製して得た化合物１は、ｍｐ＝１９９−２０４
℃、ＩＲ吸収ピーク（Ｎｕｊｏｌ）のν_max （ｃｍ^-1）
＝３２９２、２９１４、２８４８、１６４９、１６２
０、１４５６、［α］_D ＝−４９１．２°（ＭｅＯＨ、
ｃ＝０．５８２）であり、既知のクワノンＧの標品のデ
ータと一致した。また、ＨＰＬＣ、ＴＬＣのデータも既
知のクワノンＧの標品のものと一致し、化合物１はクワ
ノンＧと同定された。化合物１の４００ＭＨｚ ¹Ｈ−
ＮＭＲスペクトルでは、シグナルが幅広となり、測定温
度を上昇させるといくつかのコンフォーマー（ｃｏｎｆ
ｏｒｍｅｒ）の存在を示唆した。 ¹Ｈ−ＮＭＲ δ（Ｄ
ＭＳＯ−ｄ₆ ）：１．４３、１．５１、１．６０、１．
８２、３．０６、３．６０、４．２１、４．４１、５．
０８、５．１１、５．８８、５．９１、５．９３、５．
９６、６．１０、６．３８、６．４９、６．５２、７．
０４、７．２５。Compound 1 obtained by purifying a fraction having a peak with a retention time of 16.2 minutes had an mp of 199-204.
℃, IR absorption peak (Nujol) ν _max (cm ^-1 )
= 3292, 2914, 2848, 1649, 162
0, 1456, [α] _D = −491.2 ° (MeOH,
c = 0.582), which was in agreement with the data of the known Quannon G preparation. Moreover, the data of HPLC and TLC were also in agreement with those of the known standard product of Kwanon G, and Compound 1 was identified as Kwanon G. Compound 1 400MHz ¹ H-
In the NMR spectrum, the signal becomes broader, and some conformers (conf) increase with increasing measurement temperature.
The existence of an (ormer) was suggested. ¹ H-NMR δ (D
MSO-d _6): 1.43,1.51,1.60,1.
82, 3.06, 3.60, 4.21, 4.41, 5.
08, 5.11, 5.88, 5.91, 5.93, 5.
96, 6.10, 6.38, 6.49, 6.52, 7.
04, 7.25.

【００３１】上記保持時間２３．７分のピークを有する
分画を精製して得た化合物２は、ｍｐ＝１７７−１８２
℃、ＩＲ吸収ピーク（Ｎｕｊｏｌ）のν_max （ｃｍ^-1）
＝３２９８、２９１４、２８４８、１６４８、１６２
６、１４５８、［α］_D ＝−４７４．６°（ＭｅＯＨ、
ｃ＝０．５３９）であり、クワノンＨの標品のデータと
一致した。また、ＨＰＬＣ、ＴＬＣのデータもクワノン
Ｈの標品のものと一致し、化合物２はクワノンＨと同定
された。化合物２の４００ＭＨｚ ¹Ｈ−ＮＭＲスペク
トルでは、シグナルが幅広となり、測定温度を上昇させ
るといくつかのコンフォーマー（ｃｏｎｆｏｒｍｅｒ）
の存在を示した。 ¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ＤＭＳＯ−
ｄ₆ ）：１．４２、１．５０、１．５５、１．６０、
１．６２、１．８０、３．０１、３．０９、３．６０、
４．２１、４．４１、４．９９、５．０７、５．９１、
５．９４、５．９６、６．１０、６．３７、６．４９、
７．０４、７．１２。Compound 2 obtained by purifying the fraction having a peak with a retention time of 23.7 minutes had mp = 177-182.
℃, IR absorption peak (Nujol) ν _max (cm ^-1 )
= 3298, 2914, 2848, 1648, 162
6, 1458, [α] _D = -474.6 ° (MeOH,
c = 0.539), which was in agreement with the data of the standard product of Quanon H. Moreover, the data of HPLC and TLC were also in agreement with those of the standard product of Quanon H, and Compound 2 was identified as Quanon H. In the 400 MHz ¹ H-NMR spectrum of Compound 2, the signal became broad and some conformers were observed when the measurement temperature was increased.
The presence of ¹ H-NMR δ (DMSO-
d _6): 1.42,1.50,1.55,1.60,
1.62, 1.80, 3.01, 3.09, 3.60,
4.21, 4.41, 4.99, 5.07, 5.91,
5.94, 5.96, 6.10, 6.37, 6.49,
7.04, 7.12.

【００３２】製剤例１ クワノンＧ １００ｍｇ 乳糖 １０９ｍｇ トウモロコシ澱粉 ５５ｍｇ 低置換度ヒドロキシプロピルセルロース ３０ｍｇ ヒドロキシプロピルメチルセルロース ４．５ｍｇ ステアリン酸マグネシウム １．５ｍｇ 計 ３００ｍｇ ヒドロキシプロピルメチルセルロース及びステアリン酸
マグネシウムを除く上記処方成分を均一に混合した後、
ヒドロキシプロピルメチルセルロース５％（ｗ／ｗ）水
溶液を結合剤として湿式造粒法にて打錠用顆粒を製造し
た。これにステアリン酸マグネシウムを混合した後、打
錠機を用いて直径９ｍｍ、１錠重量３００ｍｇに成形
し、内服錠とした。Formulation Example 1 Quanone G 100 mg Lactose 109 mg Corn starch 55 mg Low-substituted hydroxypropylcellulose 30 mg Hydroxypropylmethylcellulose 4.5 mg Magnesium stearate 1.5 mg Total 300 mg The above ingredients except hydroxypropylmethylcellulose and magnesium stearate were uniformly mixed. After mixing
Granules for tableting were produced by a wet granulation method using a 5% (w / w) aqueous solution of hydroxypropylmethyl cellulose as a binder. This was mixed with magnesium stearate and then molded into a tablet with a diameter of 9 mm and a tablet weight of 300 mg using a tableting machine.

【００３３】製剤例２ クワノンＧ １００ｍｇ 乳糖 ４４２．５ｍｇ マンニトール ４４２．５ｍｇ ヒドロキシプロピルセルロース １５ｍｇ 計 １０００ｍｇ ヒドロキシプロピルメチルセルロースを除く上記処方成
分を均一に混合した。これにヒドロキシプロピルセルロ
ース５％（ｗ／ｗ）水溶液を結合剤として湿式造粒を行
い、細粒剤とした。Formulation Example 2 Quanone G 100 mg Lactose 442.5 mg Mannitol 442.5 mg Hydroxypropyl cellulose 15 mg Total 1000 mg The above ingredients except for hydroxypropylmethyl cellulose were uniformly mixed. Wet granulation was performed using a 5% (w / w) aqueous solution of hydroxypropyl cellulose as a binder to obtain a fine granule.

【００３４】製剤例３ クワノンＨ １００ｍｇ 乳糖 １０９ｍｇ トウモロコシ澱粉 ５５ｍｇ 低置換度ヒドロキシプロピルセルロース ３０ｍｇ ヒドロキシプロピルメチルセルロース ４．５ｍｇ ステアリン酸マグネシウム １．５ｍｇ 計 ３００ｍｇ ヒドロキシプロピルメチルセルロース及びステアリン酸
マグネシウムを除く上記処方成分を均一に混合した後、
ヒドロキシプロピルメチルセルロース５％（ｗ／ｗ）水
溶液を結合剤として湿式造粒法にて打錠用顆粒を製造し
た。これにステアリン酸マグネシウムを混合した後、打
錠機を用いて直径９ｍｍ、１錠重量３００ｍｇに成形
し、内服錠とした。Formulation Example 3 Quanone H 100 mg Lactose 109 mg Corn starch 55 mg Low-substituted hydroxypropylcellulose 30 mg Hydroxypropylmethylcellulose 4.5 mg Magnesium stearate 1.5 mg Total 300 mg The above ingredients except hydroxypropylmethylcellulose and magnesium stearate were uniformly mixed. After mixing
Granules for tableting were produced by a wet granulation method using a 5% (w / w) aqueous solution of hydroxypropylmethyl cellulose as a binder. This was mixed with magnesium stearate and then molded into a tablet with a diameter of 9 mm and a tablet weight of 300 mg using a tableting machine.

【００３５】製剤例４ クワノンＨ １００ｍｇ 乳糖 ４４２．５ｍｇ マンニトール ４４２．５ｍｇ ヒドロキシプロピルセルロース １５ｍｇ 計 １０００ｍｇ ヒドロキシプロピルメチルセルロースを除く上記処方成
分を均一に混合した。これにヒドロキシプロピルセルロ
ース５％（ｗ／ｗ）水溶液を結合剤として湿式造粒を行
い、細粒剤とした。Formulation Example 4 Quanone H 100 mg Lactose 442.5 mg Mannitol 442.5 mg Hydroxypropyl cellulose 15 mg Total 1000 mg The above ingredients except hydroxypropylmethyl cellulose were uniformly mixed. Wet granulation was performed using a 5% (w / w) aqueous solution of hydroxypropyl cellulose as a binder to obtain a fine granule.

【００３６】試験例１ ¹²⁵Ｉ−標識ＧＲＰのレセプターへの結合に対する阻害
作用 ２４穴培養プレートに培養したマウス繊維芽細胞を、各
種濃度のクワノンＧ又はクワノンＨの存在下並びに非存
在下で、１００ｐＭの ¹²⁵Ｉ−標識ＧＲＰとともに３７
℃で１時間インキュベートした。反応終了後、細胞を充
分洗浄し、回収した細胞をガンマカウンターにかけて、
細胞に結合した ¹²⁵Ｉ−標識ＧＲＰに基づく放射活性を
測定した。特異的結合は、非放射性ＧＲＰを１０^-6Ｍ含
む条件下で得た非特異的結合を差し引くことにより求め
た。細胞に対する ¹²⁵Ｉ−標識ＧＲＰの特異的結合を５
０％阻害するクワノンＧ及びクワノンＨの濃度（Ｉ
Ｃ₅₀）を表１に示した。Test Example 1 Inhibition of binding of ¹²⁵ I-labeled GRP to a receptor
Action Mouse fibroblasts cultured in a 24-well culture plate were incubated with 100 pM ¹²⁵ I-labeled GRP in the presence and absence of various concentrations of guanone G or guanone H.
Incubated at 0 ° C for 1 hour. After the reaction was completed, the cells were thoroughly washed, the collected cells were placed on a gamma counter,
Radioactivity based on ¹²⁵ I-labelled GRP bound to cells was measured. The specific binding was determined by subtracting the non-specific binding obtained under the condition containing 10 ^-6 M of non-radioactive GRP. 5 specific binding of ¹²⁵ I-labeled GRP to cells
Concentration of guanone G and quinone H that inhibit 0% (I
C ₅₀ ) is shown in Table 1.

【００３７】[0037]

【表１】 [Table 1]

【００３８】[0038]

【発明の効果】本発明に係るクワノンＧ及びクワノンＨ
は、数少ない非ペプチド性のＧＲＰレセプター拮抗剤で
あり、従来の非ペプチド性拮抗物質に比べて極めて強い
作用を有するため、これらを有効成分として含有する薬
剤は、抗ガン剤及びＧＲＰレセプター拮抗剤として有用
である。EFFECT OF THE INVENTION Quanone G and Quanone H according to the present invention
Is a few non-peptide GRP receptor antagonists, and has an extremely strong action as compared with conventional non-peptide antagonists. Therefore, drugs containing these as active ingredients are used as anti-cancer agents and GRP receptor antagonists. It is useful.

Claims (4)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 式（Ｉ）で表される化合物を有効成分と
して含有することを特徴とする抗ガン剤。 【化１】 式中、Ｒは、水素又は３−メチル−２−ブテニルを表
す。1. An anticancer agent comprising a compound represented by formula (I) as an active ingredient. [Chemical 1] In the formula, R represents hydrogen or 3-methyl-2-butenyl. 【請求項２】 抗ガン剤が抗肺ガン剤である請求項１記
載の抗ガン剤。2. The anticancer agent according to claim 1, wherein the anticancer agent is an antipulmonary cancer agent. 【請求項３】 抗ガン剤が抗前立腺ガン剤である請求項
１記載の抗ガン剤。3. The anticancer agent according to claim 1, wherein the anticancer agent is an antiprostate cancer agent. 【請求項４】 式（Ｉ）で表される化合物を有効成分と
して含有することを特徴とするＧＲＰレセプター拮抗
剤。 【化２】 式中、Ｒは、水素又は３−メチル−２−ブテニルを表
す。4. A GRP receptor antagonist comprising a compound represented by formula (I) as an active ingredient. [Chemical 2] In the formula, R represents hydrogen or 3-methyl-2-butenyl.