JPH07258081A

JPH07258081A - 抗ガン剤及びｇｒｐレセプター拮抗剤

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Publication number: JPH07258081A
Application number: JP6079809A
Authority: JP
Inventors: Masabumi Fujimoto; 正文藤本; Shinichi Mihara; 伸一三原; Yoshiharu Nakamura; 美春中村; Kensuke Sakurai; 謙介櫻井; Kazuya Tokura; 一也十倉
Original assignee: Shionogi and Co Ltd
Current assignee: Shionogi and Co Ltd
Priority date: 1994-03-25
Filing date: 1994-03-25
Publication date: 1995-10-09
Anticipated expiration: 2019-06-07
Also published as: JP3535207B2

Abstract

(57)【要約】（修正有）【目的】強いＧＲＰレセプター拮抗活性を有する非ペ
プチド系化合物を見いだし、またこの作用に基づき、従
来とは異なる作用機作の抗ガン剤やその他様々な医薬品
を創成する。【構成】下記式（Ｉ）に示すクワノンＧ又はクワノン
Ｈを有効成分として含有する抗ガン剤及びＧＲＰレセプ
ター拮抗剤。〔式中、Ｒは、水素又は３−メチル−２−ブテニルを表
す。〕

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、次の式（Ｉ）で表され
る化合物の新規用途に関する。

【０００２】

【化３】

【０００３】式中、Ｒは、水素又は３−メチル−２−ブ
テニルを表す。本発明に係る上記化合物は、ガストリン
リリージングペプチド（ＧＲＰ）レセプターの拮抗活性
が、従来の非ペプチド性のＧＲＰレセプター拮抗物質に
比べて極めて強いので、抗ガン剤やその他様々な医薬品
として有用である。

【０００４】

【従来の技術】ＧＲＰは、哺乳類において強いガストリ
ン分泌刺激作用を持つペプチドとして見出され、ボンベ
シンファミリーに属するペプチドとして分類されている
（日本臨牀、第４８巻、第５号、１０５頁以下、１９９
０年）。

【０００５】ＧＲＰのレセプターは、脳、下垂体、膵腺
房細胞に存在し、消化管ホルモンの分泌促進、胃酸・膵
外分泌促進、胆嚢収縮、血圧上昇、抗利尿作用、黄体形
成ホルモン分泌刺激、甲状腺刺激ホルモン分泌抑制等様
々な生理活性に関与している。また、ヒトの肺ガンの約
２５％を占める小細胞肺ガン（ＳＣＬＣ）のガン細胞に
もレセプターの存在が確認されており、ＧＲＰは、小細
胞肺ガン及び前立腺ガン等のガン細胞のオートクリン増
殖の増殖因子として作用することが示唆されている（ネ
イチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、第３６１巻、８２３−８２
６頁、１９８５年）。ＧＲＰレセプター拮抗剤は、これ
らのガン細胞の増殖を抑制することにより医薬品として
の利用が期待されている（キャンサーリサーチ（Ｃａ
ｎｃｅｒＲｅｓ．）、第５１巻、５９８０−５９８６
頁、１９９１年）。

【０００６】ＧＲＰレセプター拮抗作用をもつ非ペプチ
ド性化合物の報告例は殆どなく、わずかにＣＰ−７００
３０及びＣＰ−７５９９８が知られている程度であった
（バイオオーガニックアンドメディシナルケミス
トリーレターズ（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄ
ｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙＬｅｔｔｅｒ
ｓ）、第１２巻、第４号、３３３−３３８頁、１９９２
年）。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的の第一
は、強いＧＲＰレセプター拮抗活性を有する非ペプチド
系化合物を発見する点にあった。また、第二の目的とし
て、この作用に基づき従来とは異なる作用機作の抗ガン
剤やその他様々な医薬品を創成するところにあった。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明者らは鋭意検討の
結果、栽培種のクワの地下部の抽出物に、ＧＲＰレセプ
ター拮抗活性を示す物質が含まれていることを発見し、
単離を行ったところ、このものが式（Ｉ）で示される化
合物であることが判った。式中、Ｒが水素のものはクワ
ノンＧ（ＫｕｗａｎｏｎＧ）、Ｒが３−メチル−２−
ブテニルのものはクワノンＨ（ＫｕｗａｎｏｎＨ）で
公知の物質である。その後、これらのものについてＧＲ
Ｐレセプターの拮抗剤としての活性を調べたところ、上
記のＣＰ−７００３０及びＣＰ−７５９９８等をはるか
に凌駕する優れた拮抗活性を有することを見出し、本発
明を完成した。

【０００９】クワ科植物クワ（Ｍｏｒｕｓｂｏｍｂｙ
ｃｉｓ）は、古くからその葉をカイコの餌とするため栽
培されてきたが、その根皮は生薬桑白皮として市販さ
れ、消炎、利尿、去痰等の目的に使用されてきた。上記
クワの根皮の抽出物には血圧降下作用が認められ、その
活性成分はクワノンＧ及びクワノンＨを含むクワノン
類、マルベロフラン類であることが知られている。その
他フェノール成分、トリテルペン、アルカロイド等も単
離されており、特にフェノール成分はｃＡＭＰフォスフ
ォジエステラーゼ阻害作用を有することが知られてい
る。

【００１０】従って、クワノンＧ及びクワノンＨは、公
知の物質であるが、これまでＧＲＰレセプター拮抗活性
を有することは全く知られていなかった。本発明者らの
研究によれば、従来知られている非ペプチド性ＧＲＰレ
セプター拮抗剤のＣＰ−７００３０及びＣＰ−７５９９
８のＩＣ₅₀が１．５〜３μＭであると報告されているの
に対してクワノンＧ及びクワノンＨはそれより３〜１０
倍高い活性を有していた。

【００１１】上記クワノンＧ及びクワノンＨは、ＧＲＰ
がオートクリン増殖の増殖因子として働くと考えられて
いる小細胞肺ガン、前立腺ガン等に有効である。また、
ＧＲＰがレセプターに結合することにより惹起される様
々な生理活性の調節物質としても作用しうる。従って、
クワノンＧ又はクワノンＨを有効成分として含有する薬
剤は、例えば、胃酸分泌抑制剤、胆汁分泌抑制剤、整腸
剤、血圧降下剤、利尿剤、黄体形成ホルモン分泌抑制
剤、甲状腺刺激ホルモン分泌亢進剤等の用途にも使用す
ることができる。

【００１２】クワノンＧ又はクワノンＨはそのまま又は
医薬的に許容される無毒性かつ不活性の担体と共に、ヒ
トを含む動物に投与される。クワノンＧ及びクワノンＨ
はそれぞれ単独又は混合物として投与することができ
る。

【００１３】担体としては、固形、半固形、又は液状の
希釈剤、充填剤、及びその他の処方用の助剤一種以上
が、例えば、０．１％〜９９．５％、好ましくは０．５
〜９０％の割合で用いられる。本発明抗ガン剤又はＧＲ
Ｐレセプター拮抗剤は、経口的又は非経口的に安全に投
与することができる。非経口の投与形態として、例え
ば、組織内投与等の局所投与、皮下投与、筋肉内投与、
動・静脈内投与、経直腸投与等が挙げられる。周知慣用
の技術手段を用いてこれらの投与方法に適した製剤型を
調製すればよい。

【００１４】抗ガン剤又はＧＲＰレセプター拮抗剤とし
ての投与量は、患者の年齢、体重、投与経路、疾病の種
類や程度等を考慮した上で設定することが望ましいが、
ヒトへの投与の場合、通常は、成人に対して有効成分量
として、経口的に１０〜２０００ｍｇ／日、好ましくは
５０〜１０００ｍｇ／日で投与するのが一般的である。
また、非経口的には、投与経路により大きく異なるが、
通常、１〜２００ｍｇ／日、好ましくは５〜１００ｍｇ
／日の範囲で投与すればよい。場合によっては、これ以
下で充分であるし、また逆にこれ以上の投与量を必要と
することもある。また１日２〜４回に分割して投与する
こともできる。

【００１５】経口投与は固形又は液状の用量単位、例え
ば、末剤、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、シロップ
剤、エリキシル剤又は懸濁剤その他の剤型によって行う
ことができる。

【００１６】末剤は活性物質を適当な細かさにすること
により製造される。散剤は活性物質を適当な細かさと
し、ついで同様に細かくした医薬用担体、例えば澱粉、
マンニトールのような可食性炭水化物その他賦形剤と混
合することにより製造される。必要に応じ嬌味剤、保存
剤、分散剤、着色剤、香料その他のものを混じてもよ
い。

【００１７】カプセル剤は、まず上述のようにして粉末
状にした末剤や散剤又は顆粒剤を、例えばゼラチンカプ
セルのようなカプセル外皮の中へ充填することにより製
造される。また、充填前に滑沢剤や流動化剤、例えばコ
ロイド状のシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウ
ム、ステアリン酸カルシウム、固形のポリエチレングリ
コール等を任意に混合しておいてもよい。崩壊剤や可溶
化剤、例えばカルボキシメチルセルロース、カルボキシ
メチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロ
ピルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、カル
ボキシスターチナトリウム、炭酸カルシウム、炭酸ナト
リウム等を添加すれば、カプセル剤が摂取されたときの
医薬の有効性を改善することができる。

【００１８】また、本品の微粉末を植物油、ポリエチレ
ングリコール、グリセリン、界面活性剤中に懸濁分散
し、これをゼラチンシートで包んで軟カプセル剤とする
ことができる。

【００１９】顆粒剤は、粉末状にした活性物質と上述の
賦形剤や崩壊剤を混合したものに、必要に応じ結合剤
（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒ
ドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ヒド
ロキシプロピルメチルセルロース、ゼラチン、ポリビニ
ルピロリドン、ポリビニルアルコール等）、及び、湿潤
剤（例えばシロップ、澱粉糊、アラビアゴム、セルロー
ス溶液又は高分子物質溶液等）を加えて練合し、ついで
篩を強制通過させて調製することができる。このように
粉末を顆粒化するかわりに、まず打錠機にかけたのち、
得られる不完全な形態のスラグを破砕して顆粒にするこ
ともできる。あらかじめ溶解遅延化剤（例えば、パラフ
ィン、ワックス、硬化ヒマシ油等）、再吸収剤（例え
ば、四級塩等）又は吸着剤（例えばベントナイト、カオ
リン、リン酸ジカルシウム等）等を混合しておいてもよ
い。

【００２０】錠剤は、このようにして作られる顆粒剤
に、滑沢剤としてステアリン酸、ステアリン酸塩、タル
ク、ミネラルオイルその他を添加し打錠することにより
調製することができる。こうして製造した素錠に更にフ
ィルムコーティングや糖衣を施してもよい。

【００２１】また活性物質は、上述のように顆粒化やス
ラグ化の工程を経ることなく、流動性の不活性担体と混
合した後直接打錠してもよい。シェラックの密閉被膜か
らなる透明又は半透明の保護被覆、糖や高分子材料の被
覆、及び、ワックスよりなる磨上被覆等も用いることが
できる。

【００２２】他の経口投与剤型、例えばシロップ剤、エ
リキシル剤及び懸濁剤等もまたその一定量が活性物質の
一定量を含有するように用量単位形態にすることができ
る。シロップ剤は、活性物質を適当な香味水溶液に溶解
して製造され、またエリキシル剤は非毒性のアルコール
性担体を用いることにより製造される。懸濁剤は、活性
物質を非毒性担体中に分散させることにより処方され
る。懸濁化剤や乳化剤（例えば、エトキシ化されたイソ
ステアリルアルコール類、ポリオキシエチレンソルビト
ールエステル類）、保存剤、嬌味剤（例えば、ペパミン
ト油、サッカリン）その他もまた任意に添加することが
できる。

【００２３】必要に応じて、経口投与のための用量単位
処方はマイクロカプセル化してもよい。この処方はまた
被覆をしたり、高分子・ワックス等の中に活性物質を埋
めこんだりすることにより作用時間の延長や持続放出を
もたらすこともできる。

【００２４】皮下、筋肉内又は動・静脈内投与は、液状
用量単位形態、例えば溶液や懸濁液の形態の注射剤とす
ることによって行うことができる。これらのものは、活
性物質の一定量を、注射の目的に適合する非毒性の液状
担体、例えば水性や油性の溶剤に溶解又は懸濁し、つい
で該溶液又は懸濁液を滅菌することにより製造される。
また、粉末又は凍結乾燥した活性物質の一定量をバイア
ルにとり、その後バイアルとその内容物を滅菌し密閉し
てもよい。この場合、投与直前に溶解又は混合するため
に、予備的なバイアルや担体を準備しておいてもよい。
注射液を等張にするために非毒性の塩や塩溶液を添加し
てもよく、さらに安定化剤、保存剤、懸濁化剤及び乳化
剤等を併用することもできる。

【００２５】経直腸投与剤型は、疎水性又は親水性の坐
剤基剤、例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、高
級エステル類（例えばパルミチン酸ミリスチルエステ
ル）及びそれらの混合物に活性物質を練合することによ
って調製することができる。

【００２６】

【実施例】以下に実施例、試験例及び製剤例を掲げて本
発明をさらに詳しく説明するが、本発明の範囲がこれら
により限定されるものではない。

【００２７】実施例１クワノンＧ及びクワノンＨの単離栽培種のクワの地下部５ｋｇをメチルアルコール１５Ｌ
ずつで４日間２回冷浸し、抽出液を減圧乾固した。得ら
れたエキス１５０ｇのうち６０ｇを酢酸エチルと水で分
配し、酢酸エチル層を減圧乾固してさらにｎ−ヘキサン
と９０％メチルアルコールで分配した。９０％メチルア
ルコール層を減圧乾固して得た残渣２５．８１ｇの半量
についてクロマトレックスＯＤＳ（５００ｇ、富士デヴ
ィソン社製）のカラムを用い、分離しながらその溶出液
を高速液体クロマトグラフィー（デベロシルＯＤＳＨ
Ｇ−５、４．６×１５０ｍｍ、メチルアルコール−水の
７：３混合溶液で溶出）で分析した。メチルアルコール
−水の１：１混合溶液（１０００ｍｌ）、２：１混合溶
液（９００ｍｌ）で溶出した後、２：１混合溶液（２５
０ｍｌ）、３：１混合溶液（２００ｍｌ）で順に溶出し
たところ、保持時間１６．２分のピークを示す分画が得
られた。この分画を回収後、更にメチルアルコール−水
の３：１混合溶液（４５０ｍｌ）で溶出すると、保持時
間２３．７分のピークを示す分画が得られた。上記残り
半量の試料についても同様に処理し、保持時間１６．２
分のピークを示す画分を合計２．３３ｇ、保持時間２
３．７分のピークを示す画分を合計２．６８ｇ得た。

【００２８】保持時間１６．２分のピークを示す分画の
うち１．４４ｇを、更に遠心液液分配クロマトグラフィ
−（ｎ−ヘキサン−塩化メチレン−メチルアルコール−
水の１０：４０：３４：１６混合溶液、下降法）により
分離し、５３９ｍｇの分画を得た。そのうち１０５ｍｇ
を、高速液体クロマトグラフィー（デベロシルＯＤＳＨ
Ｇ−５、２０×２５０ｍｍ、メチルアルコール−水の
４：１混合溶液で溶出、リサイクル３回）で精製して化
合物１を８０ｍｇ得た。

【００２９】また、保持時間２３．７分のピークを示す
分画のうち２．２８ｇを、高速液体クロマトグラフィー
（デベロシルＯＤＳＨＧ−５、２０×２５０ｍｍ、メ
チルアルコール−水の４：１混合溶液で溶出）、次いで
遠心液液分配クロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン−塩化
メチレン−メチルアルコール−水の１０：４０：３４：
１６の混合溶液、上昇法）により分離し、９１３ｍｇの
分画を得た。そのうち１０３ｍｇを高速液体クロマトグ
ラフィー（デベロシルＯＤＳＨＧ−５、２０×２５０
ｍｍ、メチルアルコール−水の４：１混合溶液で溶出、
リサイクル４回）で精製して化合物２を５９ｍｇ得た。

【００３０】上記保持時間１６．２分のピークを有する
分画を精製して得た化合物１は、ｍｐ＝１９９−２０４
℃、ＩＲ吸収ピーク（Ｎｕｊｏｌ）のν_max（ｃｍ^-1）
＝３２９２、２９１４、２８４８、１６４９、１６２
０、１４５６、［α］_D＝−４９１．２°（ＭｅＯＨ、
ｃ＝０．５８２）であり、既知のクワノンＧの標品のデ
ータと一致した。また、ＨＰＬＣ、ＴＬＣのデータも既
知のクワノンＧの標品のものと一致し、化合物１はクワ
ノンＧと同定された。化合物１の４００ＭＨｚ ¹Ｈ−
ＮＭＲスペクトルでは、シグナルが幅広となり、測定温
度を上昇させるといくつかのコンフォーマー（ｃｏｎｆ
ｏｒｍｅｒ）の存在を示唆した。¹Ｈ−ＮＭＲ δ（Ｄ
ＭＳＯ−ｄ₆）：１．４３、１．５１、１．６０、１．
８２、３．０６、３．６０、４．２１、４．４１、５．
０８、５．１１、５．８８、５．９１、５．９３、５．
９６、６．１０、６．３８、６．４９、６．５２、７．
０４、７．２５。

【００３１】上記保持時間２３．７分のピークを有する
分画を精製して得た化合物２は、ｍｐ＝１７７−１８２
℃、ＩＲ吸収ピーク（Ｎｕｊｏｌ）のν_max（ｃｍ^-1）
＝３２９８、２９１４、２８４８、１６４８、１６２
６、１４５８、［α］_D＝−４７４．６°（ＭｅＯＨ、
ｃ＝０．５３９）であり、クワノンＨの標品のデータと
一致した。また、ＨＰＬＣ、ＴＬＣのデータもクワノン
Ｈの標品のものと一致し、化合物２はクワノンＨと同定
された。化合物２の４００ＭＨｚ ¹Ｈ−ＮＭＲスペク
トルでは、シグナルが幅広となり、測定温度を上昇させ
るといくつかのコンフォーマー（ｃｏｎｆｏｒｍｅｒ）
の存在を示した。¹Ｈ−ＮＭＲ δ（ＤＭＳＯ−
ｄ₆）：１．４２、１．５０、１．５５、１．６０、
１．６２、１．８０、３．０１、３．０９、３．６０、
４．２１、４．４１、４．９９、５．０７、５．９１、
５．９４、５．９６、６．１０、６．３７、６．４９、
７．０４、７．１２。

【００３２】製剤例１クワノンＧ１００ｍｇ乳糖１０９ｍｇトウモロコシ澱粉５５ｍｇ低置換度ヒドロキシプロピルセルロース３０ｍｇヒドロキシプロピルメチルセルロース４．５ｍｇステアリン酸マグネシウム１．５ｍｇ計３００ｍｇヒドロキシプロピルメチルセルロース及びステアリン酸
マグネシウムを除く上記処方成分を均一に混合した後、
ヒドロキシプロピルメチルセルロース５％（ｗ／ｗ）水
溶液を結合剤として湿式造粒法にて打錠用顆粒を製造し
た。これにステアリン酸マグネシウムを混合した後、打
錠機を用いて直径９ｍｍ、１錠重量３００ｍｇに成形
し、内服錠とした。

【００３３】製剤例２クワノンＧ１００ｍｇ乳糖４４２．５ｍｇマンニトール４４２．５ｍｇヒドロキシプロピルセルロース１５ｍｇ計１０００ｍｇヒドロキシプロピルメチルセルロースを除く上記処方成
分を均一に混合した。これにヒドロキシプロピルセルロ
ース５％（ｗ／ｗ）水溶液を結合剤として湿式造粒を行
い、細粒剤とした。

【００３４】製剤例３クワノンＨ１００ｍｇ乳糖１０９ｍｇトウモロコシ澱粉５５ｍｇ低置換度ヒドロキシプロピルセルロース３０ｍｇヒドロキシプロピルメチルセルロース４．５ｍｇステアリン酸マグネシウム１．５ｍｇ計３００ｍｇヒドロキシプロピルメチルセルロース及びステアリン酸
マグネシウムを除く上記処方成分を均一に混合した後、
ヒドロキシプロピルメチルセルロース５％（ｗ／ｗ）水
溶液を結合剤として湿式造粒法にて打錠用顆粒を製造し
た。これにステアリン酸マグネシウムを混合した後、打
錠機を用いて直径９ｍｍ、１錠重量３００ｍｇに成形
し、内服錠とした。

【００３５】製剤例４クワノンＨ１００ｍｇ乳糖４４２．５ｍｇマンニトール４４２．５ｍｇヒドロキシプロピルセルロース１５ｍｇ計１０００ｍｇヒドロキシプロピルメチルセルロースを除く上記処方成
分を均一に混合した。これにヒドロキシプロピルセルロ
ース５％（ｗ／ｗ）水溶液を結合剤として湿式造粒を行
い、細粒剤とした。

【００３６】試験例１ ¹²⁵Ｉ−標識ＧＲＰのレセプターへの結合に対する阻害
作用２４穴培養プレートに培養したマウス繊維芽細胞を、各
種濃度のクワノンＧ又はクワノンＨの存在下並びに非存
在下で、１００ｐＭの¹²⁵Ｉ−標識ＧＲＰとともに３７
℃で１時間インキュベートした。反応終了後、細胞を充
分洗浄し、回収した細胞をガンマカウンターにかけて、
細胞に結合した¹²⁵Ｉ−標識ＧＲＰに基づく放射活性を
測定した。特異的結合は、非放射性ＧＲＰを１０^-6Ｍ含
む条件下で得た非特異的結合を差し引くことにより求め
た。細胞に対する¹²⁵Ｉ−標識ＧＲＰの特異的結合を５
０％阻害するクワノンＧ及びクワノンＨの濃度（Ｉ
Ｃ₅₀）を表１に示した。

【００３７】

【表１】

【００３８】

【発明の効果】本発明に係るクワノンＧ及びクワノンＨ
は、数少ない非ペプチド性のＧＲＰレセプター拮抗剤で
あり、従来の非ペプチド性拮抗物質に比べて極めて強い
作用を有するため、これらを有効成分として含有する薬
剤は、抗ガン剤及びＧＲＰレセプター拮抗剤として有用
である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式（Ｉ）で表される化合物を有効成分と
して含有することを特徴とする抗ガン剤。【化１】式中、Ｒは、水素又は３−メチル−２−ブテニルを表
す。
【請求項２】抗ガン剤が抗肺ガン剤である請求項１記
載の抗ガン剤。
【請求項３】抗ガン剤が抗前立腺ガン剤である請求項
１記載の抗ガン剤。
【請求項４】式（Ｉ）で表される化合物を有効成分と
して含有することを特徴とするＧＲＰレセプター拮抗
剤。【化２】式中、Ｒは、水素又は３−メチル−２−ブテニルを表
す。