JPH0643160A - ネオプテリン測定における体液処理用試薬および体液処理方法 - Google Patents
ネオプテリン測定における体液処理用試薬および体液処理方法Info
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 ネオプテリンに対する特異的抗体および検出
システムを用いるネオプテリンの免疫学的測定における
体液の処理のための試薬および方法を提供する。 【構成】 試薬はヘキサシアノ鉄（III）酸カリウム等
の酸化剤を含み、反応要素のインキュベーションを全て
酸化剤の存在下で行うことを特徴とする。
システムを用いるネオプテリンの免疫学的測定における
体液の処理のための試薬および方法を提供する。 【構成】 試薬はヘキサシアノ鉄（III）酸カリウム等
の酸化剤を含み、反応要素のインキュベーションを全て
酸化剤の存在下で行うことを特徴とする。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ネオプテリンに対する
特異的抗体および検出システムを用いるネオプテリンの
免疫学的測定における体液処理に併用する試薬および該
試薬を用いた体液処理方法に関する。
特異的抗体および検出システムを用いるネオプテリンの
免疫学的測定における体液処理に併用する試薬および該
試薬を用いた体液処理方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】１９７９年に、悪性の、あるいはウイル
ス性の疾患を有する患者の尿中にネオプテリンが発見さ
れて以来、ネオプテリンは多種疾患の多数の患者の細胞
性免疫の状態を確認するためのパラメターとして確立さ
れてきた。
ス性の疾患を有する患者の尿中にネオプテリンが発見さ
れて以来、ネオプテリンは多種疾患の多数の患者の細胞
性免疫の状態を確認するためのパラメターとして確立さ
れてきた。
【０００３】ネオプテリンは、動植物界に広く分布する
複素環式化合物であるプテリジン類に属する。プテリジ
ン類のいくつかの生物学的機能はよくわかっているが、
ネオプテリンの生物学的役割については今までのところ
全くわかっていない。
複素環式化合物であるプテリジン類に属する。プテリジ
ン類のいくつかの生物学的機能はよくわかっているが、
ネオプテリンの生物学的役割については今までのところ
全くわかっていない。
【０００４】ネオプテリンは、インターフェロンγの誘
導に続いて単球／マクロファージによって産生される。
インターフェロンγはそれ自身が細胞性免疫の活性化に
直接関与しており、活性化されたＴ−リンパ球が刺激さ
れた時に形成される。
導に続いて単球／マクロファージによって産生される。
インターフェロンγはそれ自身が細胞性免疫の活性化に
直接関与しており、活性化されたＴ−リンパ球が刺激さ
れた時に形成される。
【０００５】細胞性免疫は、ウイルス感染症、細胞内寄
生虫疾患、敗血症、移植片拒絶反応、自己免疫疾患およ
び腫瘍形成等の一連の疾患において決定的な役割を果た
している。体液中のネオプテリンの濃度上昇は細胞性免
疫系の活性化の程度を直接に反映している。したがっ
て、体液中のネオプテリン濃度の測定は、細胞性免疫の
状態をモニターするために非常に適した方法である。
生虫疾患、敗血症、移植片拒絶反応、自己免疫疾患およ
び腫瘍形成等の一連の疾患において決定的な役割を果た
している。体液中のネオプテリンの濃度上昇は細胞性免
疫系の活性化の程度を直接に反映している。したがっ
て、体液中のネオプテリン濃度の測定は、細胞性免疫の
状態をモニターするために非常に適した方法である。
【０００６】悪性腫瘍および／またはウイルス疾患の場
合の細胞性免疫状態の確認のための体液中のネオプテリ
ンの測定は、例えば、欧州特許（ＥＰ）１２４４４に記
述されている。体液中、好ましくは血清および尿中のネ
オプテリンの測定のためのこれまでの通常の方法として
は、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）（J. Chr
omatogr. 277, 61, 1982）およびラジオイムノアッセイ
（Chem. Biol. Pteridines, 815 ff. W. de Gruyter, B
erlin-New York, 1983）がある。しかし、両方法にはい
くつかの欠点がある。ＨＰＬＣによるネオプテリンの測
定は、比較的手の込んだ処理が必須である。次いで、各
分析にさらに１０〜１５分を要し、したがって、試料が
比較的多数の場合には自動化を行っても多くの時間と労
力が要求される。ラジオイムノアッセイは特別な認可を
得た研究室でしか行うことができず、放射性汚染された
使用済溶液や廃棄物の安全廃棄処理のためには特別のガ
イドラインに従わなくてはならない。
合の細胞性免疫状態の確認のための体液中のネオプテリ
ンの測定は、例えば、欧州特許（ＥＰ）１２４４４に記
述されている。体液中、好ましくは血清および尿中のネ
オプテリンの測定のためのこれまでの通常の方法として
は、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）（J. Chr
omatogr. 277, 61, 1982）およびラジオイムノアッセイ
（Chem. Biol. Pteridines, 815 ff. W. de Gruyter, B
erlin-New York, 1983）がある。しかし、両方法にはい
くつかの欠点がある。ＨＰＬＣによるネオプテリンの測
定は、比較的手の込んだ処理が必須である。次いで、各
分析にさらに１０〜１５分を要し、したがって、試料が
比較的多数の場合には自動化を行っても多くの時間と労
力が要求される。ラジオイムノアッセイは特別な認可を
得た研究室でしか行うことができず、放射性汚染された
使用済溶液や廃棄物の安全廃棄処理のためには特別のガ
イドラインに従わなくてはならない。
【０００７】本発明の基盤となるネオプテリン測定のた
めの競合的イムノアッセイにおいては、プラスチック容
器の内側表面、マイクロタイタープレートのウェル、ポ
リスチレン球、ポリスチレンラテックス球またはガラス
球等に、ネオプテリン特異性抗体を被覆して固相とす
る。例えば、分析すべきネオプテリンを含む試料と、ネ
オプテリン及びマーカー酵素からなる接合体をマイクロ
タイタープレートのウェルにピペットで注入する。試料
および接合体中のネオプテリンに固相上の限られた結合
部位に対して競合させる。試料中のネオプテリンが高濃
度であれば、接合体の固相への結合は少なくなり、その
結果、全ての非結合物質を洗浄除去した後に、使用した
マーカー酵素に特異的な基質反応を行った際の呈色度が
低くなる。
めの競合的イムノアッセイにおいては、プラスチック容
器の内側表面、マイクロタイタープレートのウェル、ポ
リスチレン球、ポリスチレンラテックス球またはガラス
球等に、ネオプテリン特異性抗体を被覆して固相とす
る。例えば、分析すべきネオプテリンを含む試料と、ネ
オプテリン及びマーカー酵素からなる接合体をマイクロ
タイタープレートのウェルにピペットで注入する。試料
および接合体中のネオプテリンに固相上の限られた結合
部位に対して競合させる。試料中のネオプテリンが高濃
度であれば、接合体の固相への結合は少なくなり、その
結果、全ての非結合物質を洗浄除去した後に、使用した
マーカー酵素に特異的な基質反応を行った際の呈色度が
低くなる。
【０００８】試料中のネオプテリン濃度の定量は、正確
に測定されたネオプテリン濃度の標準溶液を用いて得ら
れた結果をプロットした検量線により行うことができ
る。正常人の血清中のネオプテリンの平均濃度は約５nm
ol／ｌであり、約１０〜１５nmol／ｌを越える値は異常
とみなされる。少なくともネオプテリン１nmol／ｌの濃
度の検出という高感度がこのイムノアッセイには要求さ
れるので、血清試料は試薬類と直接混和しなくてはなら
ない。すなわち、このアッセイでは血清を希釈せずに用
いなくてはならない。しかし、そのような方法では、通
常試料として用いられる新鮮血清のネオプテリン測定で
は実際よりも過大な値が得られることが明らかになっ
た。例えば、５nmol／ｌの濃度では、測定値は１００％
以上もの誤った過大な値で得られた。
に測定されたネオプテリン濃度の標準溶液を用いて得ら
れた結果をプロットした検量線により行うことができ
る。正常人の血清中のネオプテリンの平均濃度は約５nm
ol／ｌであり、約１０〜１５nmol／ｌを越える値は異常
とみなされる。少なくともネオプテリン１nmol／ｌの濃
度の検出という高感度がこのイムノアッセイには要求さ
れるので、血清試料は試薬類と直接混和しなくてはなら
ない。すなわち、このアッセイでは血清を希釈せずに用
いなくてはならない。しかし、そのような方法では、通
常試料として用いられる新鮮血清のネオプテリン測定で
は実際よりも過大な値が得られることが明らかになっ
た。例えば、５nmol／ｌの濃度では、測定値は１００％
以上もの誤った過大な値で得られた。
【０００９】血清に含まれる他の成分による測定への干
渉の除去は、ふつうは高希釈度の血清を用いることによ
って達成できる。しかし、この場合には要求される感度
を達成するためにはそれは不可能である。さらに、加熱
や変性剤によって試料を変性させることは、ネオプテリ
ンの測定に適していない。しかし、この干渉は血清の保
存中に減衰すること、したがってネオプテリン濃度は時
間が経った血清試料においては正確に測定できること
が、他の方法で得られるネオプテリン測定値との高い相
関関係から、明らかになった。しかし、ネオプテリン測
定は、ふつうは新鮮血清を用いて行わなければならず、
これらの状況下で得られる誤った過大測定値は、診断に
おいて最大の欠点となる。
渉の除去は、ふつうは高希釈度の血清を用いることによ
って達成できる。しかし、この場合には要求される感度
を達成するためにはそれは不可能である。さらに、加熱
や変性剤によって試料を変性させることは、ネオプテリ
ンの測定に適していない。しかし、この干渉は血清の保
存中に減衰すること、したがってネオプテリン濃度は時
間が経った血清試料においては正確に測定できること
が、他の方法で得られるネオプテリン測定値との高い相
関関係から、明らかになった。しかし、ネオプテリン測
定は、ふつうは新鮮血清を用いて行わなければならず、
これらの状況下で得られる誤った過大測定値は、診断に
おいて最大の欠点となる。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、ネオ
プテリンの免疫学的測定における体液処理のための試薬
および処理方法を提供することにあり、これによって新
鮮な体液中のネオプテリンについても正確な測定が可能
になる。
プテリンの免疫学的測定における体液処理のための試薬
および処理方法を提供することにあり、これによって新
鮮な体液中のネオプテリンについても正確な測定が可能
になる。
【００１１】
【課題を解決するための手段】本発明の試薬は、ネオプ
テリンに対する特異的抗体および検出システムを用いる
ネオプテリンの免疫学的測定における体液処理に併用す
る試薬であって、酸化剤を含むことを特徴とする、本発
明はさらに、全ての反応物のインキュベーションを酸化
剤の存在下で行うことを特徴とする、ネオプテリンに対
する特異的抗体および検出システムを用いるネオプテリ
ンの免疫学的測定における体液処理方法に関する。
テリンに対する特異的抗体および検出システムを用いる
ネオプテリンの免疫学的測定における体液処理に併用す
る試薬であって、酸化剤を含むことを特徴とする、本発
明はさらに、全ての反応物のインキュベーションを酸化
剤の存在下で行うことを特徴とする、ネオプテリンに対
する特異的抗体および検出システムを用いるネオプテリ
ンの免疫学的測定における体液処理方法に関する。
【００１２】驚いたことに、本発明による試薬および方
法によれば、新鮮血清を用いた場合においてもネオプテ
リンはイムノアッセイにより正確に測定できることが見
出された。本発明の試薬は、ネオプテリンに特異的な抗
体の免疫学的活性およびマーカー酵素の酵素活性を損な
わず、通常の臨床試薬で用いられる２〜８℃の保存温度
で少なくとも１年間安定である。
法によれば、新鮮血清を用いた場合においてもネオプテ
リンはイムノアッセイにより正確に測定できることが見
出された。本発明の試薬は、ネオプテリンに特異的な抗
体の免疫学的活性およびマーカー酵素の酵素活性を損な
わず、通常の臨床試薬で用いられる２〜８℃の保存温度
で少なくとも１年間安定である。
【００１３】適当な酸化剤は、ヘキサシアノ鉄（III）
酸カリウムまたはナトリウム、鉄（III）塩／キレート
剤、過硫酸塩、過ホウ酸塩およびニトロプルシドであ
り、好ましくは０．０５〜１００mmol／ｌ、好ましくは
０．５〜５０mmol／ｌの濃度のヘキサシアノ鉄（III）
酸カリウムである。同様の結果は、他の酸化剤、例えば
鉄（III）塩／キレート剤、好ましくは硝酸鉄（III）／
ＥＤＴＡ、の組み合わせによって約０．２５〜２５mmol
／ｌの濃度範囲においても得られる。
酸カリウムまたはナトリウム、鉄（III）塩／キレート
剤、過硫酸塩、過ホウ酸塩およびニトロプルシドであ
り、好ましくは０．０５〜１００mmol／ｌ、好ましくは
０．５〜５０mmol／ｌの濃度のヘキサシアノ鉄（III）
酸カリウムである。同様の結果は、他の酸化剤、例えば
鉄（III）塩／キレート剤、好ましくは硝酸鉄（III）／
ＥＤＴＡ、の組み合わせによって約０．２５〜２５mmol
／ｌの濃度範囲においても得られる。
【００１４】本発明による酸化剤は、高イオン強度で、
５〜１０、好ましくは７〜８のｐＨ範囲で緩衝された水
溶液として用い得る。用いられる緩衝液形成用物質とし
ては、ｐＨ範囲を５〜１０、好ましくは７〜８に保持で
きて、かつ試料中の成分と干渉しないもので、臨床化学
において知られている全ての緩衝液形成用物質またはそ
れらの組み合わせが挙げられる。緩衝液の形態として
は、例えば、燐酸塩緩衝液、トリス緩衝液、クエン酸塩
緩衝液およびヘペス緩衝液などが適しているが、燐酸塩
緩衝液が好ましい。緩衝液の濃度は、５０〜３００mmol
／ｌ、好ましくは１５０〜２５０mmol／ｌの範囲とする
ことができる。本発明による酸化剤は、臨床化学で一般
的な約１５〜４０℃の温度範囲で最適の活性を示す。
５〜１０、好ましくは７〜８のｐＨ範囲で緩衝された水
溶液として用い得る。用いられる緩衝液形成用物質とし
ては、ｐＨ範囲を５〜１０、好ましくは７〜８に保持で
きて、かつ試料中の成分と干渉しないもので、臨床化学
において知られている全ての緩衝液形成用物質またはそ
れらの組み合わせが挙げられる。緩衝液の形態として
は、例えば、燐酸塩緩衝液、トリス緩衝液、クエン酸塩
緩衝液およびヘペス緩衝液などが適しているが、燐酸塩
緩衝液が好ましい。緩衝液の濃度は、５０〜３００mmol
／ｌ、好ましくは１５０〜２５０mmol／ｌの範囲とする
ことができる。本発明による酸化剤は、臨床化学で一般
的な約１５〜４０℃の温度範囲で最適の活性を示す。
【００１５】ネオプテリンに対する特異的抗体の調製お
よび抗体の固相への結合は、文献から既知である。抗
体、抗原およびハプテンのマーカー酵素による標識法に
も、同様によく知られた方法が利用できる。本発明によ
る試験においては、好ましくはペルオキシダーゼおよび
アルカリホスファターゼをマーカー酵素として試薬側の
ネオプテリンに結合させるが、他のマーカー酵素を用い
てもよい。
よび抗体の固相への結合は、文献から既知である。抗
体、抗原およびハプテンのマーカー酵素による標識法に
も、同様によく知られた方法が利用できる。本発明によ
る試験においては、好ましくはペルオキシダーゼおよび
アルカリホスファターゼをマーカー酵素として試薬側の
ネオプテリンに結合させるが、他のマーカー酵素を用い
てもよい。
【００１６】検出システムは、臨床診断学において既知
の、基質、緩衝剤、ディタージェント、呈色物質等から
なり、これには使用マーカー酵素に応じた代表的な基質
溶液が含まれる。
の、基質、緩衝剤、ディタージェント、呈色物質等から
なり、これには使用マーカー酵素に応じた代表的な基質
溶液が含まれる。
【００１７】血清中のネオプテリン測定のためのイムノ
アッセイは、次のようにして行われる。本発明による試
薬溶液と、標準溶液、対照溶液または試料とを、ウェル
の内側表面をネオプテリン特異性抗体で被覆したマイク
ロタイターの空のウェルにピペットで注入する。一定時
間インキュベートした後に、ネオプテリン−酵素接合体
緩衝溶液を加えて、インキュベーションを続ける。洗浄
処理の後、マーカー酵素の代表的な基質溶液をピペット
でウェルに注入する。次いで、基質反応を停止試薬を用
いて終結させて、形成された色素の吸光度の吸収極大を
測定する。試料の濃度を、プロットした検量線から確定
する。試料中のネオプテリン濃度は、測定される吸光度
に反比例する。
アッセイは、次のようにして行われる。本発明による試
薬溶液と、標準溶液、対照溶液または試料とを、ウェル
の内側表面をネオプテリン特異性抗体で被覆したマイク
ロタイターの空のウェルにピペットで注入する。一定時
間インキュベートした後に、ネオプテリン−酵素接合体
緩衝溶液を加えて、インキュベーションを続ける。洗浄
処理の後、マーカー酵素の代表的な基質溶液をピペット
でウェルに注入する。次いで、基質反応を停止試薬を用
いて終結させて、形成された色素の吸光度の吸収極大を
測定する。試料の濃度を、プロットした検量線から確定
する。試料中のネオプテリン濃度は、測定される吸光度
に反比例する。
【００１８】
実施例１ ネオプテリンとホースラディッシュペルオキシダーゼの
接合体を用いるネオプテリンの測定
接合体を用いるネオプテリンの測定
【００１９】
【表１】 測定方法：塩化ナトリウム等張溶液に０．０５％ポリオ
キシエチレンソルビタンモノラウレートを含む３００μ
ｌの洗浄溶液を、ウェルの内側表面をネオプテリン−特
異性抗体で被覆したマイクロタイタープレートのウェル
にピペットで注入して、３０分間静置する。この液体を
各ウエルから完全に除去した後に、５０μｌの上記組成
の本発明の試薬溶液を各ウェルにピペットで注入してか
ら、５０μｌづつの標準溶液、対照溶液または試料溶液
を各ウェルに加える。３０分間の室温でのインキュベー
ションの後に、５０μｌの十分な量のネオプテリン−ホ
ースラディッシュペルオキシダーゼ接合体を含む緩衝液
を加えて、室温でさらに６０分間インキュベーションを
続ける。上記の洗浄溶液で２回洗浄した後に、１００mm
ol／ｌのクエン酸塩緩衝液（ｐＨ４．３）に３．８mmol
／ｌの濃度で２、２′−アジノ−ジ−（３−エチルベン
ゾチアゾリン−スルホネート）を溶かした基質溶液（１
５０μｌ）をピペットで各ウェルに注入する。室温でさ
らに３０分間静置した後に、０．０９５％アジ化ナトリ
ウム溶液で基質の反応を停止して、形成された色素の吸
光度を４０５ｎｍで測定する。試料の濃度を、プロット
した検量線から確定する。試料中のネオプテリン濃度
は、測定される吸光度に反比例する。
キシエチレンソルビタンモノラウレートを含む３００μ
ｌの洗浄溶液を、ウェルの内側表面をネオプテリン−特
異性抗体で被覆したマイクロタイタープレートのウェル
にピペットで注入して、３０分間静置する。この液体を
各ウエルから完全に除去した後に、５０μｌの上記組成
の本発明の試薬溶液を各ウェルにピペットで注入してか
ら、５０μｌづつの標準溶液、対照溶液または試料溶液
を各ウェルに加える。３０分間の室温でのインキュベー
ションの後に、５０μｌの十分な量のネオプテリン−ホ
ースラディッシュペルオキシダーゼ接合体を含む緩衝液
を加えて、室温でさらに６０分間インキュベーションを
続ける。上記の洗浄溶液で２回洗浄した後に、１００mm
ol／ｌのクエン酸塩緩衝液（ｐＨ４．３）に３．８mmol
／ｌの濃度で２、２′−アジノ−ジ−（３−エチルベン
ゾチアゾリン−スルホネート）を溶かした基質溶液（１
５０μｌ）をピペットで各ウェルに注入する。室温でさ
らに３０分間静置した後に、０．０９５％アジ化ナトリ
ウム溶液で基質の反応を停止して、形成された色素の吸
光度を４０５ｎｍで測定する。試料の濃度を、プロット
した検量線から確定する。試料中のネオプテリン濃度
は、測定される吸光度に反比例する。
【００２０】実施例２ 新鮮血清および保存血清の測定値の比較
【００２１】
【表２】 表１は、新鮮血清および保存血清中のネオプテリンの濃
度を増加していった場合の実験結果を示す。実施例１で
得られた本発明の試薬溶液の使用によって新鮮血清中の
ネオプテリン濃度のみかけの増加を効果的に抑えること
ができる。
度を増加していった場合の実験結果を示す。実施例１で
得られた本発明の試薬溶液の使用によって新鮮血清中の
ネオプテリン濃度のみかけの増加を効果的に抑えること
ができる。
【００２２】実施例３ ネネオプテリン測定値に及ぼすヘキサシアノ鉄（III）
酸カリウムの添加濃度の影響 ネオプテリンの測定を実施例１にしたがって（血清番号
１および２）、およびホースラディッシュペルオキシダ
ーゼ（ＨＲＰ）の代わりにアルカリホスファターゼ（Ａ
Ｐ）を用いる以外は実施例１と同様にして（血清番号３
および４）行った。 基質：燐酸パラ−ニトロフェニル 停止試薬：０．１mol／ｌ水酸化ナトリウム溶液 測定波長：４０５ｎｍ 本発明による試薬溶液中のヘキサシアノ鉄（III）酸カ
リウムの濃度を種々変更した場合の健康被検者からの新
鮮血清中のネオプテリン測定の結果を表２に示す。
酸カリウムの添加濃度の影響 ネオプテリンの測定を実施例１にしたがって（血清番号
１および２）、およびホースラディッシュペルオキシダ
ーゼ（ＨＲＰ）の代わりにアルカリホスファターゼ（Ａ
Ｐ）を用いる以外は実施例１と同様にして（血清番号３
および４）行った。 基質：燐酸パラ−ニトロフェニル 停止試薬：０．１mol／ｌ水酸化ナトリウム溶液 測定波長：４０５ｎｍ 本発明による試薬溶液中のヘキサシアノ鉄（III）酸カ
リウムの濃度を種々変更した場合の健康被検者からの新
鮮血清中のネオプテリン測定の結果を表２に示す。
【００２３】
【表３】 表２の結果は、試薬溶液中にヘキサシアノ鉄（III）酸
カリウムを加えない場合には、新鮮血清中のネオプテリ
ン濃度は少なくとも２倍ないし３倍と明らかに高すぎる
値であることを示している。この場合、イムノアッセイ
にネオプテリン−ペルオキシダーゼ接合体あるいはネオ
プテリン−アルカリホスファターゼ接合体のいずれが用
いられたかは重要ではない。本発明による好ましい濃度
範囲において、ネオプテリン濃度は確立されたＨＰＬＣ
およびＲＩＡ法による測定値ときわめてよく一致するこ
とが認められる。ヘキサシアノ鉄（III）酸カリウムの
代わりにヘキサシアノ鉄（III）酸ナトリウム、硝酸鉄
（III）／ＥＤＴＡ、過硫酸カリウム、過ホウ酸ナトリ
ウムまたはニトロプルシドナトリウムを用いても、同様
の結果が得られる。
カリウムを加えない場合には、新鮮血清中のネオプテリ
ン濃度は少なくとも２倍ないし３倍と明らかに高すぎる
値であることを示している。この場合、イムノアッセイ
にネオプテリン−ペルオキシダーゼ接合体あるいはネオ
プテリン−アルカリホスファターゼ接合体のいずれが用
いられたかは重要ではない。本発明による好ましい濃度
範囲において、ネオプテリン濃度は確立されたＨＰＬＣ
およびＲＩＡ法による測定値ときわめてよく一致するこ
とが認められる。ヘキサシアノ鉄（III）酸カリウムの
代わりにヘキサシアノ鉄（III）酸ナトリウム、硝酸鉄
（III）／ＥＤＴＡ、過硫酸カリウム、過ホウ酸ナトリ
ウムまたはニトロプルシドナトリウムを用いても、同様
の結果が得られる。
【００２４】
【発明の効果】本発明の酸化剤を含む試薬をネオプテリ
ンのイムノアッセイにおける試薬と試料等の反応に併用
することで、試料として血清や尿等の体液を希釈するこ
となく直接用いても正確な測定値を得ることが可能とな
った。
ンのイムノアッセイにおける試薬と試料等の反応に併用
することで、試料として血清や尿等の体液を希釈するこ
となく直接用いても正確な測定値を得ることが可能とな
った。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ヴィルフリート ラウテンベルク ドイツ連邦共和国 デー−6100 ダルムシ ュタット フランクフルター シュトラー セ 250 (72)発明者 アルヌルフ ホイプナー ドイツ連邦共和国 デー−6100 ダルムシ ュタット フランクフルター シュトラー セ 250
Claims (5)
- 【請求項１】 ネオプテリンに対する特異的抗体および
検出システムを用いるネオプテリンの免疫学的測定にお
ける体液処理に併用する試薬であって、酸化剤を含むこ
とを特徴とする試薬。 - 【請求項２】 酸化剤としてヘキサシアノ鉄（III）酸
カリウムを含むことを特徴とする請求項１に記載の試
薬。 - 【請求項３】 ０．０５〜１００mmol／ｌのヘキサシア
ノ鉄（III）酸カリウムを含むことを特徴とする請求項
２に記載の試薬。 - 【請求項４】 全ての反応物のインキュベーションを酸
化剤の存在下で行うことを特徴とする、ネオプテリンに
対する特異的抗体および検出システムを用いるネオプテ
リンの免疫学的測定における体液処理方法。 - 【請求項５】 全ての反応要素のインキュベーションを
ヘキサシアノ鉄（III）酸カリウムの存在下で行うこと
を特徴とする請求項４に記載の体液処理方法。
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|---|---|---|---|
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| DE4215275A DE4215275A1 (de) | 1992-05-09 | 1992-05-09 | Mittel und Verfahren zur Behandlung von Körperflüssigkeiten bei der Bestimmung von Neopterin |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2012529018A (ja) * | 2009-06-05 | 2012-11-15 | ベー．エル．アー．ハー．エム．エス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 呼吸困難を起こした患者における細菌感染の検出 |
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| US4978632A (en) * | 1988-12-15 | 1990-12-18 | Kallestad Diagnostics, Inc. | Method of pre-treating samples in peroxidase-catalyzed enzyme assays |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2012529018A (ja) * | 2009-06-05 | 2012-11-15 | ベー．エル．アー．ハー．エム．エス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 呼吸困難を起こした患者における細菌感染の検出 |
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