JPH05153982A - 新規変異株及びそれを用いるグリセリンの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 生育ｐＨ範囲がｐＨ2.５〜7.０であり、且つ
培養時に副生するマンニトールの量が主生成物であるグ
リセリンの１／１５以下（濃度比）であることを特徴と
する人工変異株トルロプシスｓｐ．ＳＮ−７６７８菌株
（微工研菌寄第１２５０２号）並びに該トルロプシスｓ
ｐ．ＳＮ−７６７８菌株（微工研菌寄第１２５０２号）
を、発酵性糖類を含む培地に接種して好気的に培養し、
培養液からグリセリンを分離、採取することを特徴とす
るグリセリンの製造方法。 【効果】 本発明の新規変異株ＳＮ−７６７８株は、発
酵性糖類からのグリセリンへの変換率（対糖収率）が極
めて高く、かつマンニトール等の副生物の産生が著しく
少ないという特性を有している。そのため、本菌株を用
いることにより、グリセリンの商業的な発酵生産が可能
である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は新規変異株及びそれを用
いるグリセリンの製造方法に関し、更に詳細には、トル
ロプシス属に属する新規な人工変異株であるトルロプシ
スｓｐ．ＳＮ−７６７８菌株及び当該変異株を用いて発
酵性糖類をグリセリンに変換することを特徴とする、発
酵法によるグリセリンの製造方法に関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】発酵法
によるポリオール類の製造方法、就中トルロプシス属に
属する微生物を使用してグリセリンを製造する方法は公
知である。例えば特公昭４７−８５８９号公報にはトル
ロプシス・マンニトファシエンス(T. mannitofaciens)
を使用する方法が述べられており、また同４７−２０３
９３号公報にはトルロプシス・アノーマラ(T.anomala)
を使用する方法が述べられている。更に、G.H.Hajny
他；Applied Miclobiology,8:5(1960)にはトルロプシス
・マグノリア(T.magnoliae)を使用する方法が述べられ
ている。

【０００３】しかしながら、これら公知の方法で用いら
れている微生物は耐糖性が低く実用的でなかったり、あ
るいはポリオール類への変換率が必ずしも十分でないこ
とから、未だ工業的に利用されていない。また、Vijaik
ishore他；Applied Biochemistry and Biotechnology,
vol 13, 1986, にはピヒア・ファリノサ(Pichia farino
sa) を使用する方法が述べられているが、この方法は培
地をアルカリ性に保つことが必要である。そのため、こ
の方法では対糖比１０％という多量の炭酸ナトリウムを
使用しなければならず、その後の処理に要する負担が極
めて大きいという欠点がある。

【０００４】更に、特開昭６２−２１５０９号公報及び
同６２−９６０８９公報には、本発明者らによりトルロ
プシスｓｐ．ＳＮ−１８菌株（微工研菌寄第７５９３
号）を用いてグルコースなどの発酵性糖類からグリセリ
ンを製造する方法が開示されている。この方法は、比較
的高濃度の糖質を用いてグリセリンを製造することを可
能にするものであるが、相当量のマンニトールを副生す
るという欠点があり、それに伴うグリセリン収率の低さ
及び精製の複雑さの点で未だ満足できる方法とは言い難
い。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記のよ
うな従来方法の欠点を改良するべく、種々検討した結
果、上記トルロプシスｓｐ．ＳＮ−１８菌株（微工研菌
寄第７５９３号）から誘導された変異株であるトルロプ
シスｓｐ．ＳＮ−７６７８菌株がマンニトールの副生が
少なく、且つ高いグリセリン生産能を有することを見出
し、本発明に到達した。

【０００６】即ち、本発明は生育ｐＨ範囲がｐＨ2.５〜
7.０であり、且つ培養時に副生するマンニトールの量が
主生成物であるグリセリンの１／１５以下（濃度比）で
あることを特徴とするトルロプシスｓｐ．ＳＮ−７６７
８菌株（微工研菌寄第１２５０２号）並びに当該トルロ
プシスｓｐ．ＳＮ−７６７８菌株を、発酵性糖類を含む
培地に接種して好気的に培養し、培養液からグリセリン
を分離、採取することを特徴とするグリセリンの製造方
法に関する。

【０００７】本発明のトルロプシスｓｐ．ＳＮ−７６７
８菌株は、親株であるトルロプシスｓｐ．ＳＮ−１８菌
株から人工的変異手段により造成された変異株であっ
て、具体的にはトルロプシスｓｐ．ＳＮ−１８菌株に紫
外線を照射した後、引き続きＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ
−Ｎ”−ニトロソグアニジンなどの突然変異誘起剤を使
用して処理することにより誘発された新規変異株であ
る。

【０００８】本変異株は、トルロプシスｓｐ．ＳＮ−１
８菌株を親株として変異したものであり、且つ後記する
ように親株に極めて近似した性質を有していることか
ら、トルロプシス属に属する新規な変異株であると判断
し、トルロプシスｓｐ．ＳＮ−７６７８菌株と命名し
た。

【０００９】次に、本変異株の菌学的性質を示す。 １．培地上の生育状況 (1) 顕微鏡的所見 栄養細胞の大きさ（＊１） ２〜６ｘ２〜６μ 栄養細胞の形状（＊１） 円形 栄養細胞の増殖法（＊１） 多極出芽 菌糸体（＊２） 形成せず （註）＊１ ＹＭ寒天培地に２７℃、５日間培養 ＊２ ポテトグルコース寒天によるスライド培養

【００１０】(2) 寒天斜面（＊３） 生育 良好 光沢 白色（光沢なし） 色素 ２週間以上培養すると橙
黄色のコロニー （註）＊３ ＹＭ寒天培地 (3) 液体培養（＊４） 表面生育 皮膜形成 濁度 透明 沈査 大 （註）＊４ ＹＭ寒天培地

【００１１】２．子のう胞子の形成 ポテトグルコース寒天培地 形成せず コーンミール寒天培地 形成せず ＹＭ寒天培地 形成せず ニンジンエキス寒天培地 形成せず Ｖ８寒天培地 形成せず

【００１２】３．生理学的性質 酸素要求量 好気的 生育温度 ３６℃以下 最適生育温度 ２８〜３０℃ 生育ｐＨ 2.５〜7.０ （初発ｐＨ2.５〜8.０) 最適生育ｐＨ 4.０〜6.０ ＫＮＯ₃ 資化生（＊５） 微弱 （ＮＨ₄)₂ ＳＯ₄ 資化生（＊５）有り 脂肪の分解（＊６） 無し 尿素の分解 無し ゼラチンの液化 有り

【００１３】グルコースの 生育可能最高濃度（＊７） （７０％） 生育最適濃度（＊７） （４０％） 塩化ナトリウムの 生育可能最高濃度（＊８） （１３％以上） 生育最適濃度（＊８） （７％） カロチノイドの生成 無し 有機酸の生成 有り デンプン様物質の生成 無し ビタミンの要求性（＊５） 有り （註）＊５ Wickerham の合成培地を用いたJ.Lodderら
の方法により判定 ＊６ 牛脂を使用 ＊７ 液体培地 ＊８ ３０％（Ｗ／Ｖ）グルコース液体培地中での生育

【００１４】４．糖の発酵性（＊５） グルコース ＋ ラクトース − ガラクトース ＋ メリビオース − スクロース ＋ ラフイノース ＋ マルトース −

【００１５】５．糖の資化性（＊５） グルコース ＋ Ｄ−キシロース − ガラクトース ＋ エリスリトール − Ｄ−アラビノース ＋ Ｌ−アラビノース ＋ Ｄ−ソルボース − Ｌ−ソルボース ＋ Ｄ−リボース − スクロース ＋ Ｌ−ラムノース −

【００１６】 マルトース ＋ エタノール − セロビオース − トレハロース − アドニトール − ラクトース − ズルシトール − メリビオース ＋ ラフイノース ＋ Ｄ−ソルビトール ＋ メレジトース − α−メチル−Ｄ−グルコシド − イヌリン ＋ サリシン − イノシトール − 可溶性デンプン − ＤＬ−乳酸 − コハク酸 − クエン酸 −

【００１７】本菌株は、工業技術院微生物工業技術研究
所に「微生物受託番号 微工研菌寄第１２５０２号」と
して寄託されている。この様に、本発明の変異株トルロ
プシスｓｐ．ＳＮ−７６７８菌株は親株（野性株）であ
るトルロプシスｓｐ．ＳＮ−１８菌株と極めて類似した
菌学的性質を有する。しかしながら、本変異株は生育ｐ
Ｈ範囲がｐＨ2.５〜7.０で親株に比較してやや狭いこと
及び後記実施例に示すように、工業生産に適した安価な
培地であるコーンスチープリカーを主体とする培地に於
いても高いグリセリン生産能を保持し、マンニトール等
の副生物の生成も極めて少なく、菌株を好適な条件（例
えば本明細書中に述べられている培養条件）で培養した
場合のマンニトールの副生量は主生成物であるグリセリ
ンの１／１５以下（濃度比）に抑えられる点で親株と相
違を有している。

【００１８】次に、本発明の変異株を用いるグリセリン
の製造法について説明する。尚、以下の説明中で用いる
％は特にことわりのない限り、容量（Ｗ／Ｖ）％であ
る。本菌株の培養は、炭素源，窒素源，無機塩類等を含
む液体培地を用いて好気的条件下に攪拌培養により実施
されることが望ましい。

【００１９】当該液体培地の主炭素源としては、上記変
異株が資化して目的とするグリセリンを生成しうるもの
であれば任意に使用でき、例えばグルコース，フラクト
ース，マンノース等の発酵性糖類が使用されるが、これ
らの糖質の使用量は培地全体の１０〜６０％、好ましく
は２０〜５０％の範囲で添加使用される。

【００２０】窒素源としては当該変異株により利用可能
な窒素化合物、例えば酵母エキス，トリプトン，麦芽エ
キス，カザミノ酸，コーンスチープリカー等が使用され
る。また、硫酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、硝酸
アンモニウムなどのアンモニウム塩類も使用可能であ
る。その他、培地に加える無機塩類としては、例えばリ
ン酸，マグネシウム，カリウム，カルシウム，鉄などの
塩類が使用される。更に、必要に応じて当該変異株の生
育に必要な各種の有機物，無機物あるいは通常用いられ
る消泡剤などを添加することができる。

【００２１】培養は、前記組成の液体培地に本菌株を直
接接種するか、または別に前培養によって得られる本菌
株の種培養液を接種して行われる。この種培養液の調製
は、例えば常法により斜面培養した本菌株をグルコース
３０％に酵母エキス１％またはコーンスチープリカー3.
３％を含むｐＨ４〜６の液体培地に１白金耳接種して２
６〜３６℃の温度で２〜５日間培養することにより行な
われる。

【００２２】培養温度は本菌株が生育しうる範囲内、即
ち２６〜３６℃で行なわれるが、特に好ましくは２８〜
３０℃の範囲である。培地のｐＨは2.５〜7.０、特に4.
０〜6.０の範囲が好ましい。また、培養期間は培養条
件、使用する培地の種類及び炭素源である糖質の濃度等
により異なるが、通常４〜８日間程度である。培養は、
培地の栄養源が最大限に利用され、かつ培養液のグリセ
リンの生成量が最高に達した時点で培養を終了させるこ
とができるように、培養液中のグリセリン量をガスクロ
マトグラフィー，高速液体クロマトグラフィー等の周知
の方法により測定しながら行なうことが望ましい。

【００２３】培養液中に蓄積されたグリセリンは、培養
終了後、常法によって培養液中から分離される。即ち、
斯かる場合に当該分野において通常使用されている周知
の手段、例えば濾過，遠心分離，イオン交換又は吸着ク
ロマトグラフィー，溶媒抽出，蒸留などの操作が必要に
応じて適宜組合せて用いられる。一例を挙げれば、培養
液から濾過，遠心分離などによって菌体を除去し、次い
でこの液を活性炭等で処理して着色物質などを除き、更
にイオン交換樹脂により脱イオンした後、液を濃縮して
シロップとする。これを更に減圧（真空）蒸留により精
製してグリセリンを得る。

【００２４】

【実施例】次に、本発明を実施例により詳しく説明す
る。 実施例１ （変異株の造成） トルロプシスｓｐ．ＳＮ−１８菌株をグルコース３０
％，酵母エキス１％を含む１００ｍｌの液体培地に接種
し、温度３０℃で３日間振とう培養して培養物を得た。
次に、上記培養物を３０％グルコース液で１０００倍に
希釈し、３０％グルコース，１％酵母エキス，1.５％寒
天を含む寒天培地に１００μｌ宛塗布し、３０ｃｍの距
離から１５ｗの紫外線ランプ（東芝殺菌灯「ＧＬ１
５」）を４５秒照射し、その後３０℃で４日間静置培養
した。生じたコロニーを２０％グリセリン，１％酵母エ
キス，1.５％寒天を含む培地を検定培地としてレプリカ
法によりグリセリン資化性の落ちた菌株を選抜した。

【００２５】次に、上記処理で選抜した菌株を、グルコ
ース３０％，酵母エキス１％を含む１００ｍｌの液体培
地に接種し、温度３０℃で３日間振とう培養して培養物
を得た。上記で得られた培養物から遠心分離により菌体
を分離し、更にこの菌体を５０ｍＭ燐酸緩衝液（ｐＨ＝
７）で３回洗浄した後、再び同緩衝液に懸濁した（１０
⁸ ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）。この懸濁液を最終濃度２５０μ
ｇ／ｍｌのＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ”−ニトロソ
グアニジンで３０分間処理した。

【００２６】処理後、常法により菌体を分離し、さらに
緩衝液で洗浄した後、２０％グリセリン，１％酵母エキ
スを含む培地中で最終濃度１０μｇ／ｍｌの抗生物質ナ
イスタチンで２時間処理した。菌体を緩衝液で洗浄後、
上記のグルコースを含む寒天培地に塗布し、３０℃で４
日間静置培養した。生じたコロニーは、２０％マンニト
ール，１％酵母エキス，1.５％寒天を含む培地を検定培
地としてレプリカ法によりマンニトール資化性の落ちた
菌株を選抜した。

【００２７】次に、上記により選抜した菌株を、グルコ
ース３０％，酵母エキス１％を含む５０ｇの液体培地に
接種し、温度３０℃で２日間振とう培養し培養物を得
た。この培養物を上記と同様の操作により最終濃度５０
０μｇ／ｍｌのＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ”−ニト
ロソグアニジンで１時間処理し、更にこの処理菌体を上
記と同様に１０％マンニトール，１％酵母エキスを含む
培地中でナイスタチン処理を行なった。

【００２８】処理後、菌体液を上記のグルコースを含む
寒天培地に塗布し、３０℃で４日間静置培養し、生育し
た菌体を選抜して変異株トルロプシスｓｐ．ＳＮ−７６
７８菌株（ＦＥＲＭ Ｐ−１２５０２）を得た。

【００２９】実施例２ （ａ）種培養液の調製 グルコース３０％，酵母エキス１％，寒天1.５％から成
る斜面培地にトルロプシスｓｐ．ＳＮ−７６７８菌株
（ＦＥＲＭ Ｐ−１２５０２）の菌体を塗布し、３０℃
で２日間静置培養した。次に、グルコース３０％，酵母
エキス１％を含む液体培地（ｐＨ5.５）５０ｍｌを入れ
た５００ｍｌ容量の三角フラスコに上記菌株の斜面培養
菌体を１白金耳植菌し、３０℃で２日間振とう培養して
培養物を得た。

【００３０】（ｂ）本培養 グルコース５０％，コーンスチープリカー3.２７％，酢
酸アンモニウム0.０７％及びＫＮＯ₃ 0.１％を含む液体
培地（グルコース及びコーンスチープリカー，酢酸アン
モニウム，ＫＮＯ₃ は予め別々に滅菌したものを使用）
３リットルを５リットル容量の発酵槽に入れ、上記
（ａ）で調製したトルロプシスｓｐ．ＳＮ−７６７８菌
株（ＦＥＲＭ Ｐ−１２５０２）の種培養液５０ｍｌを
加え、温度３０℃、通気量0.３３ｖｖｍ、回転速度８０
０ｒｐｍで水酸化カリウムによりｐＨを５に保持しなが
ら６日間培養を行なった。

【００３１】培養終了後、高速液体クロマトグラフィー
（ＨＰＬＣ）により培養液の分析を行なった結果、グル
コースは完全に消費されており、培養液中のグリセリン
含量は２９％（収率５８％），マンニトール含量は0.５
％（収率１％）であった。

【００３２】次に、この培養液から遠心分離により菌体
を除去し、更に活性炭による脱色及びイオン交換樹脂
（ＩＲＡ−１４０：ＩＲ−１２０＝２：１）による脱塩
を行なった。次いで、溶出液を３０％以上に濃縮し、ス
チレン−ジビニルベンゼン系の陽イオン交換樹脂を充填
したカラムを用いてグリセリンを精製した。精製された
物質は、ＴＭＳ誘導体を用いたガスクロマトグラフィ
ー，高速液体グラフィー，Ｆ−キット・グリセロールに
よる同定から標品のグリセリンに一致することが確認さ
れた。

【００３３】実施例３ （ａ）種培養液の調製 グルコース３０％，酵母エキス１％及び寒天1.５％から
なる斜面培地にトルロプシスｓｐ．ＳＮ−７６７８菌株
（ＦＥＲＭ Ｐ−１２５０２）の菌体を塗布し、３０℃
で２日間静置培養した。次に、グルコース３０％，コー
ンスチープリカー3.３％を含む液体培地（初発ｐＨ５）
５０ｍｌを入れた５００ｍｌ容量の三角フラスコに上記
斜面培養菌体を１白金耳植菌し、３０℃で２２０ｒｐ
ｍ、２日間振とう培養して培養物を得た。更に、上記培
養物を同上の培地３リットルを仕込んだ５リットル容ジ
ャーファーメンターに植菌し、３０℃、0.５ｖｖｍ、４
００ｒｐｍの条件で２日間培養し、本培養用の種菌液と
した。

【００３４】（ｂ）本培養 ３０リットル容ジャーファーメンターに、４０％グルコ
ース，3.４％コーンスチープリカー，0.０６％酢酸アン
モニウム及び0.１％ＫＮＯ₃ から成る液体培地（グルコ
ース及びコーンスチープリカー，酢酸アンモニウム，Ｋ
ＮＯ₃ は予め別々に滅菌したものを使用）１５リットル
を仕込み、上記（ａ）で調製したトルロプシスｓｐ．Ｓ
Ｎ−７６７８菌株の種菌培養液３００ｍｌ（植菌量２
％）を加え、攪拌機の回転数を２３０〜３８０ｒｐｍで
変化させて培養を行なった。なお、その他の培養条件は
通気量0.５ｖｖｍ，缶内圧0.５ｋｇ／ｃｍ²,温度３０
℃，初発及び保持ｐＨ＝５とした。培養終了後、ＨＰＬ
Ｃ，分光光度計により培養液のグリセリン，マンニトー
ル及び濁度の測定を行なった。その結果を第１表に示
す。

【００３５】

【表１】

【００３６】実施例４ グルコース４０％，硫酸アンモニウム0.２％を主体とす
る液体培地に各種濃度のコーンスチープリカー（ＣＳ
Ｌ）を加えた培地を３０リットル容ジャーファーメンタ
ーに５リットル仕込み、実施例３（ａ）で調製したトル
ロプシスｓｐ．ＳＮ−７６７８菌株（ＦＥＲＭ Ｐ−１
２５０２）の種培養液３００ｍｌを植菌し、下記の条件
で培養を行なった。

【００３７】通気量 0.５５ｖｖｍ 缶内圧 0.５ｋｇ／ｃｍ² 培養温度 ３０℃ 攪拌数 ２８０ｒｐｍ 植菌量 ４％ 初発ｐＨ ５ 保持ｐＨ ５

【００３８】培養終了後、ＨＰＬＣ，分光光度計により
培養液のグリセリン，マンニトール及び濁度の測定を行
なった。その結果を第２表に示す。

【００３９】

【表２】

【００４０】実施例５ ３０リットル容ジャーファーメンターに、グルコース４
０％，コーンスチープリカー2.５％，硫酸アンモニウム
0.２％から成る液体培地１５リットルを仕込み、実施例
３（ａ）で調製したトルロプシスｓｐ．ＳＮ−７６７８
菌株（ＦＥＲＭＰ−１２５０２）の種培養液３００ｍｌ
（植菌量２％）を加え、水酸化カリウムを用い、初発ｐ
Ｈを５に調整したのち、保持ｐＨを3.０〜5.０の間で変
化させ培養を行なった。結果を第３表に示す。

【００４１】

【表３】

【００４２】実施例６ グルコース３０％，酵母エキス1.５％，酒石酸カリウム
1.５％を含む液体培地（グルコース以外の成分は別に滅
菌した後に加える）３リットルを５リットル容の発酵槽
に入れて実施例２（ａ）で調製したトルロプシスｓｐ．
ＳＮ−７６７８菌株（ＦＥＲＭ Ｐ−１２５０２）の種
培養液５０ｍｌを加え、温度３０℃，通気量１ｖｖｍ，
回転速度８００ｔｐｍの条件で５日間培養を行なった。

【００４３】培養終了後、ＨＰＬＣ，分光光度計により
培養液の分析を行なったところ、グルコースは完全に消
費されており、培養液中のグリセリン含量は１5.７％
（収率５2.４％），マンニトールは生成しなかった。

【００４４】比較例１ 酵母エキス１％，グルコース３０％を含む培地５０ｍｌ
をそれぞれ５００ｍｌ容三角フラスコに入れ、１２０℃
で１５分間滅菌を行ない、冷却後スラントより親株（Ｓ
Ｎ−１８株）または変異株（ＳＮ−７６７８株 ＦＥＲ
Ｍ Ｐ−１２５０２）の菌体を１白金耳ずつ植菌した。
２日間３０℃で培養後、遠心分離器で菌体を分離し、新
鮮なグルコース液で３回洗浄した。洗浄後の菌体を２０
％及び３０％のグルコース液に懸濁し、４ｍｌずつ試験
管に分注した。最終濃度0.５％になるように酒石酸カリ
ウムを加え、６日間往復振盪培養を行なった。

【００４５】培養終了後、ＨＰＬＣにより培養液の分析
を行なった結果、対消費グルコース当たりのグリセリン
収率と、副生物のマンニトール収率は第４表に示す通り
であった。

【００４６】

【表４】

【００４７】比較例２ 培地中の炭素減（糖質）の濃度及び窒素源の種類を種々
に変えて、本発明の変異株（ＳＮ−７６７８ ＦＥＲＭ
Ｐ−１２５０２）及び親株（ＳＮ−１８株）を下記の
方法に従って培養し、両菌株のグリセリン産生量（収
率）及びマンニトール産生量（収率）を比較した。

【００４８】１）試験Ａ コーンスチープリカー2.６％，硫酸アンモニウム0.０５
％，グルコース３０％，４０％または５０％を含む培地
をそれぞれ５００ｍｌ容量の瘤付き三角フラスコに入
れ、１２０℃で１５分間滅菌を行なった。冷却後、培地
のｐＨを5.０に調整し、これに種培養液１％を接種した
後、３０℃、２２０ｒｐｍの条件で４〜７日間培養液の
ｐＨを５以上に調整しつつ培養した。培養終了後、培養
液中のグリセリン，マンニトール及びグルコースの量を
ＨＰＬＣで測定した。結果を第５表に示す。

【００４９】

【表５】

【００５０】２）試験Ｂ 培地はDifco Nitrogen Base W/O Amino Acid & Ammoniu
m Sulfate を基本とし、これに硫酸アンモニウム（Ａ
Ｓ），酢酸アンモニウム（ＡＡｃ），カザミノ酸，酵母
エキス，コーンスチープリカー（ＣＳＬ）等の窒素源を
加えたものを使用した。なお、窒素源の添加量は（終濃
度標準量で）0.５％とし、他に酒石酸カリウムを１％添
加した。培養は、それぞれの培地に種培養液１％を接種
した後、３０℃で７日間振とう培養し、終了後、試験管
内容物を適宜希釈してグリセリン（ＧＬ）及びマンニト
ール（ＭＮ）の量を測定した。結果を第６表に示す。

【００５１】

【表６】

【００５２】第５表及び第６表の結果から、本発明の変
異株のグリセリン高生産性及び副生マンニトールの低生
産性という特徴は培地中の基質の種類，濃度などの違い
にほとんど影響されることなく、常に保持されているこ
とが確認された。

【００５３】

【発明の効果】本発明の新規変異株ＳＮ−７６７８株
は、発酵性糖類からのグリセリンへの変換率（対糖収
率）が極めて高く、かつマンニトール等の副生物の産生
が著しく少ないという特性を有している。そのため、本
菌株を用いることにより、グリセリンの商業的な発酵生
産が可能である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 春見 隆文 茨城県つくば市吾妻２−14−911−204 (72)発明者 貝沼 圭二 茨城県つくば市東２−29−４ (72)発明者 西田 清隆 埼玉県岩槻市城南１−１−28−201 (72)発明者 若生 勝雄 埼玉県行田市持田５−10−２ (72)発明者 落合 敏郎 埼玉県川口市朝日２−１−18 ＬＧ川口 309 (72)発明者 川口 嶽 埼玉県行田市壱里町21−６ (72)発明者 小田 恒郎 東京都秋川市下世継128

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 生育ｐＨ範囲がｐＨ2.５〜7.０であり、
   且つ培養時に副生するマンニトールの量が主生成物であ
   るグリセリンの１／１５以下（濃度比）であることを特
   徴とする人工変異株トルロプシスｓｐ．ＳＮ−７６７８
   菌株（微工研菌寄第１２５０２号）。
2. 【請求項２】 トルロプシスｓｐ．ＳＮ−７６７８菌株
   （微工研菌寄第１２５０２号）を、発酵性糖類を含む培
   地に接種して好気的に培養し、培養液からグリセリンを
   分離、採取することを特徴とするグリセリンの製造方
   法。