JPH03503635A

JPH03503635A - ヒトにおいて逆転写酵素を抑制するクマリン類

Info

Publication number: JPH03503635A
Application number: JP1503059A
Authority: JP
Inventors: ロイセル，フリッツ; タープリー，ウイリアム・ジイ; ドラック，レスター; アルタウス，アイリーン・ダブリュー
Original assignee: ジ・アップジョン・カンパニー
Priority date: 1988-03-01
Filing date: 1989-02-08
Publication date: 1991-08-15
Also published as: WO1989007939A3; EP0403535A1; DK195690D0; AU4074789A; WO1989007939A2; DK195690A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】ヒトにおいて逆転写酵素を抑制するクマリン類／発明の分野本発明は、ヒト免疫不全ウィルスに感染した患者の新規治療である。

類は公知である；しかしながら、該化合物のいずれもヒト免疫不全ウィルスまたはその株類に感染したヒトを治療するのに有用であることが知られていない。

米国において１００万ないし１５０万人と見積もられる人々がヒト・レトロウィルス、後天性免疫不全症候群の病因たるヒト免疫不全ウィルス１梨、ＨＩＶ−１に感染している［「エイズ緊急Ｓ２−ピリオンプログラム（Ｓ２−Ｂｉｌｌｉｏｎ　Ｐｒｏｇｒａｍ　Ｕｒｇｅｄ　ｆｏｒ　ＡＩＤＳ）Ｊ　、ノルマン・シイ（！ｌｏｒｍａｎ、　Ｃ，）、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、　　２３４巻。

６６１−６６２頁（１９８６）］。感染した者のうち、２５万人と見積もられる人々はこれから先５年以内にエイズに進展するであろう［「エイズの疫学：現況および将来予測（Ｔｈｅ　Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ　ｏｆＡＩＤＳ　：　Ｃｕｒｒｅｎｔ　５ｔａｔｕｓ　ａｎｄ　Ｆｕｔｕｒｅ　Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ）　Ｊ −カラン°ジェイ。

ダブリニーら（Ｃｕｒｒａｎ、Ｊ、Ｌ、ｅｔ　ａｌ）　＋　サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）。

２２９巻、４７２０号、１３５２−１３５７頁（１９８５）コ。

１９８７年３月２０日、ＦＤＡは、最近最初のエピソードとなった二ニーモジステイス・カリニイ・ニューモニア（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓｃａｒｉｎｆｉ　ｐｎｅｕｓｏｎｉａ）でのエイズ患者、二ニーモジステイス・カリニイ弓１−モニア（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ　ｃａｒｉｎｉｉ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）以外の疾患でのエイズ患者、または末梢血液中、２００／ａｍ’未満の絶対ＣＤ４リンパ球数を持つウィルス感染患者を治療するための化合物シトプシン（ＡＺＴ）の使用を認可した。ＡＺＴはウィルス逆転写酵素、ヒト免疫不全ウィルス複製に必要な酵素の公知抑制剤である。

ある種の抗生物質類およびポリアニオン性染料類がレトロウィルス逆転写酵素を抑制することが当該分野で知られている。本発明で特許請求する化合物はいずれもヒト免疫不全ウィルス逆転写酵素を特別に抑制することは知られていなかった。

及咀９！わ本発明は、６−ブロモ−３−［（ｍ−クロロフェニル）カルバモイルコークマリン、６−ブロモ−３−［（α、α、α−トリフルオローｍ−）ルイル）カルバモイルコークマリン、６−ブロモ−３−［（２，５−ジクロロフェニル）カルバ、モイルコークマリン、［［ビス（４−ヒドロキシ−２−オキソ−２Ｈ−１−ベンゾビラン−３−イル）−メチル］シクロベンタジエニルコシクロベンタジエニルー鉄、３−シンナモイル−４−ヒドロキシ−クマリン、ヘキサクロロクマリン、７−アセトキシクマリンまたは［１−（２−オ牛ソー２Ｈ−１−ベンゾピラン− ３−イル）エチリデン］−ヒドラジンカルボン酸フェニルメチルエステルまたはその医薬上許容される塩よりなる群から選択される化合物の有効量をヒト免疫不全ウィルスの１または１を越える株に感染したヒトに投与することを特徴とする該患者を治療する方法である。

発明の詳細な記載本出願において、ヒト免疫不全ウィルスなる語は、当業者に明らかなごとく、ヒト免疫不全ウィルス夏型、ヒト免疫不全ウィルス■型、またはその株類を意味し、これらは同一のウィルス科に属し、ヒト免疫不全ウィルスｌまたは■型としてヒトにおいて同様の生理学的影響を生じる。

本発明で特許請求する方法を実施するのに用いる各化合物の構造式は、知られていれば、構造チャートに示す。以下の化合物二６−ブロモ−３−［（ｍ−クロロフェニル）カルバモイルコークマリン、６−ブロモ−３−［（α、α、α−トリフルオローｍ−）ルイル）カルバモイルコークマリンおよび６−ブロモ−３−［（２，５−ジクロロフェニル）カルバモイルコークマリンは商業的に入手した。

化合物３−シンナモイル−４−ヒドロキシ−クマリンの調製は「ツル・ヘミ−・デス・４−ヒドロキシクマリン類（Ｚｕｒ　Ｃｈｅｍｉｅ　ｄｅｓ４−Ｈｙｄｏｘｙ−ｃｕｍａｒｉｎｓ）　Ｊ　、モナートシエフテ拳フル・ヘミ−（Ｍｏｎａｔｓｈｅｆｔｅ　ｆｕｒ　ｃｈｅｍｉ）、　８７巻、４３９−４４６頁（１９５６）に記載されている。化合物７−アセト牛シクマリンはヘミシェ・ベリヒテ（Ｃｈｅｗ、　Ｂｅｒ−）＋　　１２巻、９９３−９９９　（１８７９）に記載されている。化合物へキサクロロクマリンは、光の存在下で、クマリンのエタノール溶液に塩素を通気すると調製される。溶液にもはや検出可能な出発物質が存在しなくなると、溶媒を除去し、ポリ塩素化生成物の混合物をクロマトグラフィーによって分離する。化金物［［ビス−（４−ヒドロキシ−２−オキソ−２Ｈ−１ −ベンゾピラン−３−イル）−メチルコシクロペンタジェニルコシクロペンタジェニル−鉄は、スリパンら（Ｓｕｌｌｊｖａｎ、　ａｔ　ａｌ）、ＪＡＣ３゜６５巻、７−１２月、２２８８−２２９１頁（１９４３）、「４−ヒドロキシクマリン類の研究■　アルデヒド類のヒドロキシクマリン類との縮合（Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　４−ｈｙｄｒｏｘｙｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ＩＩ　Ｔｈｅ　Ｃｏｎｄｅｎ−ｓａｔｉｏｎ　ｏｒ　Ａｌｄｅｈｙｄｅｓ　ｗｉｔｈ　Ｈｙｄｒｏｘｙｃｏｕｍａｒｉｎｓ）Ｊに記載されている　　　　　′一般的な手法により、商業的に入手可能な４−ヒドロ牛シクマリン２．０当量と商業的に入手可能なフェロセンカルボキシアルデヒド１．５当量とをエタノール中で縮合させることによって調製される。

化合物Ｅｌ−（２−オキソ−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル）エチリデンコーヒドラジンカルボン酸フェニルメチルエステルは、無水メタノール中の氷酢酸の存在下で、商業的に入手可能な３−アセチルクマリンを商業的に入手可能なベンジルカルバザードと縮合させることによって調製される。試薬を還流し、水で希釈し、冷却し、濾過して結晶性化合物を得る。

これらの化合物類またはその医薬上許容される塩は本発明で特許請求する方法を実施するにおいて、使用し、投与することができる。

医薬上許容される塩とは、処方、安定性、患者許容性および生物利用性のごとき特性において親化合物と同等であることが製剤化学者に明らかである本発明で特許請求する化合物の塩をいう。

当業者ならば、本発明で特許請求する方法を実施するのに用いる化合物を適当な医薬投与形に処方する方法は分かるであろう。投与形の例は錠剤またはカプセル剤のごとき経口処方、あるいは滅菌液剤のごとき非経口処方を包含する。

本発明で特許請求する方法を実施するのに用いる化合物を経口投与する場合、有効量は１日につき１ｋｇ当たり約１ないし１００ｍｇである。７０ｋｇのヒトについての典型的な単位用量は１日当たり工ないし４回摂取で約２００ｍｇないし１０００ｍｇとなろう。固体または液体投与形いずれも経口投与に調製できる。

固体組成物は本発明で特許請求する方法を実施するのに用いる化合物を、タルク、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、硫酸カルシウム、スターチ、ラクトース、アカ、シア、メチルセルロース、または機能的に同様の医薬賦形剤および担体と混合することによって調製される。カプセル剤は、本発明で特許請求する方法を実施するのに用いる化合物を不活性な医薬賦形剤と混合し、該混合物を適当なサイズのハードゼラチンカプセルに入れることによって調製される。ソフトゼラチンカプセル剤は、本発、明で特許請求する方法を実施するのに用いる化合物と植物油または軽質液状ベテロラタムのごとき適当な不活性油とのスラリーを機械カプセル化することによって調製される。シロ・ノブ剤は、本発明で特許請求する方法を実施するのに用いる化合物を適当な水性ピヒクルに溶解し、糖、芳香フレーバー剤および保存剤を添加することによって調製される。エリキシル剤は、エタノールのごときヒドロアルコール性ビヒクル、砂糖またはサッカリンのごとき適当な甘味剤および芳香フレーバー剤を用いて調製される。懸濁剤は水性ビヒクルとアカシア、トラガカント、またはメチルセルロースのごとき懸濁化剤とで調製される。

本発明で特許請求する方法を実施するのに用いる化合物を非経口投与する場合、注射または静脈注入によって投与できる。有効量は１日につき１ｋｇ当たり約１ないし１００ｍｇである。非経口液剤は、本発明で特許請求する方法を実施するのに用いる化合物を水に溶解し、溶液を濾過滅菌し、しかる後に適当な密封可能なバイアルまたはアンプルに入れることによって調製される。非経口懸濁剤は、滅菌懸濁ビヒクルを用い、本発明で特許請求する方法を実施するのに用いる化合物をエチレンオキシドまたは適当なガスで滅菌し、しかる後にビヒクル中に懸濁させる以外は実質的に同様に調製される。

正確な投与経路、用量、または投与の頻度は当業者ならば容易に決定できるであろうし、それは、年令、一般的な身体状態、または治療されるべき患者に特別の他の臨床的兆候に依存する。

治療されるべき患者は＝１）測定可能なウィルス抗体または抗原いずれかが血清中に存在することによって判断して１または１を越える株のヒト免疫不全ウィルスに感染した者、および２）ｉ）播種性ヒストブラスマ症、１１）インボリアシス（ｉｓｏｐｏｒｉａｓｉｇ）、１１１）二ニーモジステイス・二ニーモニア（ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ　ｐｎｅｕａ＋ｏｎｉａ）を包含する気管支および肺カンジダ症、１１・）非ホジキン（Ｈｏｄｇｋｉｎ）リンパ樺またはＶ）カボージ肉騰のごときはっきりした兆候いずれかのエイズ感染を有し、６０才未満の者；または抹消血液中、２００／ａｍ’未満の絶対ＣＤリンパ球数を有する者であろう。治療は、患者において、終始、本明細書中に開示する化合物の抑制レベルを維持することよりなり、第２のエイズ決定感染の兆候が生じて別の治療が要求されるまで継続する。

当業者ならばミさらに技巧を凝らすことなく、本発明を最大限に実施できる。以下の実施例は、１または１を越える株のヒト免疫不全ウィルスに感染したヒトを治療するための、本発明で特許請求する化合物の使用方法をさらに詳しく記載する。これらの実施例は例示に過ぎず、これまでの開示を限定するものではない。

当業者ならば、実施例から適当な変法を直ちに理解するであろう。各実施例において、本発明で特許請求するいずれの化合物も特定の実施例で用いる化合物と置き換えることができる。

ヘキサクロロクマリン　　　　　　５０ｇｍラクトース　　　　　　　　　　　１００ｇｍコーンスターチ　　　　　　　　　２０ｇｍタルク　　　　　　　　　　　　　２０ｇｍステアリン酸マグネシウム　　　　　２ｇｍより、各カプセルかへキサクロロクマリン５０ｍｇを含有する経口用ツーピース・ハードゼラチンカプセル１０００個を調製する。

該ヘキサクロロクマリンを他の成分に添加し、混合し、常法によりカプセル化する。

ヘキサクロロクマリン　　　　　　５０ｇｍラクトース　　　　　　　　　　　　７５ｇｍコーンスターチ　　　　　　　　　５０ｇｍステアリン酸ヤグネシウム　　　　　４ｇｍ軽質液体ペテロラタム　　　　　　　５ｇｍ　　　″より、各々がヘキサクロロクマリン５０ｍｇを含有する錠剤１０００個を調製する。

該へキサクロロクマリンを他の成分に添加し、混合し、スラップ化する。力をかけて該スラップを１６番のスクリーンを通し、該スラツジを粉砕する。次いで、得られた顆粒を圧縮して錠剤とする。

亥施月１　非経口液剤溶液１リツトル中にヘキサクロロクマリン１５０ｍｇを含有する非経口静脈注射用滅菌水性溶液を以下の：ヘキサクロロクマリン　　　　　１５０ｇｍ注射用水、適量　　　　　　　１０００ｇｍより調製する。

該へ牛すクロロクマリンを滅菌し、滅菌水に添加し、滅菌容器に充填し、密封する。

本発明の有用性は、本発明において特許請求する方法を実施するのに使用する化合物がウィルス逆転写酵素、ヒト免疫不全ウィルス複製について必須の酵素を抑制する能力によって証明される。この酵素は、それを他の公知細胞ポリメラーゼと区別する特徴を有し、それは未感染細胞では見い出されないユニークな酵素である。ウィルス逆転写酵素は、ボッ・ニス・ビイら（Ｇｏｆｆ、　Ｓ、　Ｐ、、　ｅｔ　ａｌ）、ジャーナル・オブ管バイｏａジー（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｖｉｒｏｌｏｇｙ）、　　５９巻。

３号、７４３−７４５頁（１９８６）、「エシェリヒア・コリにおけるヒトＴ− りンホトロピック・ウィルス■型（ＨＴＬＶ−［［／ＬＡＶ）の逆転写酵素の活性の発現（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＲｅｖｅｒｓｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ　　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　　ｏｆ　　Ｈｕｍａｎ　　Ｔ−１ｙｓｐｈｏｔｒｏｐｉｃ　　Ｖｉｒｕｓ　　Ｔｙｐｅ@　１ｉｎ　Ｅｓｈｅｒｉｃｈａ　ｃｏｌｉ）　Ｊによって記載されている方法に従って調製した細菌クローンからの抽出物に見い出される。この酵素の抑制は、ＤＮＡに取り込まれた放射能活性プレカーサーのレベルを測定する細胞フリーアッセイで決定される。クライト・ディ・シイら（Ｋｌｅｉｄ、　Ｄ、Ｇ、、ｅｔ　ａｌ）、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、　　２１４巻、４５２５号、１１２５− １１２９頁（１９８１）、「足および口の病気用のクローン化ビルラ蛋白ワクチン：ウシおよびブタにおける応答（Ｃ１ｏｎｅｄ　Ｖｆｒｌａ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｖａｃｃｉｎｅ　ｆｏｒ　Ｆｏｏｔ−ａｎｄ−Ｍｏｕｔｈ　Ｄｉｓｅａｓｅ　：Ｒｅ５ｐｏｎｓｅｓ　ｉｎ　Ｃａｔｔｌｅ　ａｎｄ　５ｗ１ｎｅ）Ｊの手法に従って調製した抽出物ヲ抑制剤、２０ｍＭジチオスレイトール、６０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０５％ＮＰ−４０，１０ｍＭ塩化マグネシウム、５０ｍＭｌ−１７２ｐＨ８，３，１０μＭ［”Ｓ］−標識ｆｔキシヌ’１Ｌｙｔ’／Ｖ−５’− トリホスフェート、ｉｏμｇ／ｍ２ＲＮＡ鋳型（ポ’）ｒｃ＊たはポリｒＡ）および５ｕｇ／ｍＱＤＮＡプライマー（オリゴｄＧまたはオリゴｄＴ）の混合物中、３７℃で３０分間インキニベートする。

放射性標識プレカーサーの取り込みは、反応混合物をＤＥ８１ベーパー上にスポットし、該ペーパーを洗浄して取り込まれなかったプレカーサーを除去し、乾燥し、カウントすることによって決定される。第１表は本発明で特許請求する方法を実施するのに用いる化合物についてのアッセイの結果を含む。

第１表化合物（０，１ｍＭ）　　　　　　　　　　　　　　　　％抑制６−ブロモー３ −［（ｍ−クロロフェニル）−２８カルバモイルコークマリン、６−ブロモ−３−［（α、α、α−３１トリフルオロ−ｍ−トルイル）− カルバモイルコークマリン、６−ブロモ−３−［（２，５−ジクロロフェニル）−４２カルバモイル］−クマリン、［［ｔ’ス（４−ヒｔ’ａ牟シー２−ｔ＋ｖ−２８−６０１−ベンゾピラン−３ −イル）−メチル−］−シシクロペンタジェニルジシクロペンタジェニル鉄、３ −シンナモイル−４−ヒドロキシ−クマリン、３５ヘキサクロロクマリン、　　　　　　　　　　　　　　　　３４［：１−（２−オ牛ソー２Ｈ−１−ベンゾビラン−３１３−イル）エチリデンコーヒドラジンヵルボン酸−フェニルメチルエステル、７−アセトキシクマリン　　　　　　　　　　　　　　　２３構造チヤート６−ブ。！−３−［（ｍ−クロロフェニル）−３−シンナモイル−４−ヒドロキシ−クマリンカルバモイルコークマリン６−ブロモ−３−［α、α、α−トリフルオロ−ヘキサク。、：１り、リン−トルイル）カルバモイルニークマリン６−ブロモ−３−［（２，５−ジクロロフェニル）−［１−（２−オキソ−２Ｈ−１−ベンゾビラン−カルバモイルコークマリン　　　　　　　　　　　　３−イル）エチリデン〕−ヒドラジンカルボン酸 −フェニルメチルエステル暴内Ｍ＋ｅａａ番＾−＃ｊａ勧。＊に＊、ｐ（−コｒ／ＵＳ！１９１００４！１０

Claims

【特許請求の範囲】１．６−プロモ−３−［（ｍ−クロロフェニル）カルバモイル］−クマリン、６ −プロモ−３−［（α，α，α−トリフルオロ−ｍ−トルイル）カルバモイル］ −クマリン、６−プロモ−３−［（２，５−ジクロロフェニル）カルバモイル］ −クマリン、［［ビス（４−ヒドロキシ−２−オキソ−２Ｈ−１−ベンゾピラン −３−イル）−メチル］シクロベンタジエニル］シクロベンタジエニル−鉄、３ −シンナモイル−４−ヒドロキシ−クマリン、へキサクロロクマリン、７−アセトキシクマリンまたは［１−（２−オキソ−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル）エチリデン］−ヒドラジンカルボン酸フェニルメチルエステルまたはその医薬上許容される塩よりなる群から選択される化合物の、ヒト免疫不全ウイルスの１または１を越える株に感染したヒトを治療するのに医薬品を製造するための使用。２．化合物の有効量が約１ないし１００ｍｇ／ｋｇ／日である請求の範囲第１項記載の方法。３．該化合物が６−ブロモ−３−［（ｍ−クロロフェニル）カルバモイル］−クマリンである請求の範囲第１項記載の方法。３．該化合物が６−ブロモ−３−［（α，α，α−トリフルオロ−ｍ−トルイル）カルバモイル］−クマリンである請求の範囲第１項記載の方法。５．該化合物が６−ブロモ−３−［（２，５−ジクロロフェニル）カルバモイル］−クマリンである請求の範囲第１項記載の方法。６．該化合物が［［ビス（４−ヒドロキシ−２−オキソ−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル）−メチル］シクロベンタジエニル］シクロべンタジエニル−鉄である請求の範囲第１項記載の方法。７．該化合物が３−シンナモイル−４−ヒドロキシ−クマリンである請求の範囲第１項記載の方法。８．該化合物がヘキサクロロクマリンである請求の範囲第１項記載の方法。９．該化合物が７−アセトキシクマリンである請求の範囲第１項記載の方法。１０．該化合物が［１−（２−オキソ−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル）エチリデン］−ヒドラジンカルボン酸フェニルメチルエステルである請求の範囲第１項記載の方法。