JP7429968B2 - 害虫抵抗性誘導剤及び植物の害虫防除方法 - Google Patents
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Description
〔1〕 α-ヨノンを有効成分として含有し、アザミウマ科昆虫に対する抵抗性を植物に誘導する、害虫抵抗性誘導剤。
〔2〕 α-ヨノンを有効成分として含有し、ヤガ科昆虫に対する抵抗性を植物に誘導する、害虫抵抗性誘導剤。
〔3〕 〔1〕又は〔2〕に記載の害虫抵抗性誘導剤を、植物体に接触又は吸収させる、植物の害虫防除方法。
〔4〕 前記植物体が、双子葉植物である、〔3〕に記載の植物の害虫防除方法。
〔5〕 前記植物体が、ナス科植物、アブラナ科植物又はウリ科植物である、〔3〕又は〔4〕に記載の植物の害虫防除方法。
アザミウマ科(Thripidae)昆虫としては、例えば、ミカンキイロアザミウマ(Frankliniella occidentalis)、ミナミキイロアザミウマ(Thrips palmi)、チャノキイロアザミウマ(Scirtothrips dorsalis)、ネギアザミウマ(Thrips tabaci)、ヒラズハナアザミウマ(Frankliniella intonsa)等が挙げられる。中でも、ミカンキイロアザミウマ(Frankliniella occidentalis)又はミナミキイロアザミウマ(Thrips palmi)が好ましい。
ヤガ科(Noctuidae)昆虫としては、多くの属が存在し、例えば、Spodoptera属、Athetis属、Polyphaenis属、Trachea属、Orthogonia属、Actinotia属、Phlogophora属、Apamea属、Sapporia属、Bambusiphila属、Atrachea属、Capsula属、Sesamia属、Dryobotodes属、Xylena属、Lithophane属、Eupsilia属、Rhynchaglaea属、Mesorhynchaglaea属、Sugitania属、Incertobole属、Telorta属、Antivaleria属、Nyctycia属、Cosmia属等が挙げられるが、中でも、Spodoptera属に属するものがより好ましい。Spodoptera属に属するものとしては、例えば、ハスモンヨトウ(Spodoptera litura)、シロイチモジヨトウ(Spodoptera exigua)、シロナヨトウ(Spodoptera mauritia acronyctoides)、ツマジロクサヨトウ(Spodoptera frugiperda)等が挙げられるが、中でも、ハスモンヨトウ(Spodoptera litura)が特に好ましい。
<24時間α-ヨノン処理のトマトにおけるミカンキイロアザミウマ生存数に対する防除効果の検定>
α-ヨノンは市販品(富士フィルム和光純薬株式会社製)を用いた。α-ヨノンはエタノールで所定濃度(1μM、10μM、100μM及び300μM(μmol/L))に希釈した。なお、対照区として、エタノールのみからなる溶液(0μM)も調製した。
<24時間β-ヨノン処理のトマトにおけるミカンキイロアザミウマ生存数に対する防除効果の検定>
α-ヨノンの異性体であるβ-ヨノン処理による防除効果を、実施例1に記載の方法に準じて行った。β-ヨノン(「β-イオノン」、「(E)-4-(2,6,6-トリメチルシクロヘキサ-1-エニル)ブタ-3-エン-2-オン」)は、下記式(2)で表される化合物である。検定においては、最終濃度1μM、10μM、100μM及び300μMのβ-ヨノン(富士フィルム和光純薬株式会社製)を含むエタノール溶液及びエタノールのみからなる溶液(0μM)について、実施例1に記載の方法を用いてトマトを処理した後、当該トマトにミカンキイロアザミウマの雌成虫をトマト1株あたり20頭放飼し、生存数を計測した。なお、エタノールのみからなる溶液(0μM)で処理したトマトを対照とした。
<ミカンキイロアザミウマに対するα-ヨノンの毒性の検定>
トマト葉を、ガラス板(7.5cm×2.5cm)上に置いた予め水を含ませた脱脂綿の上に載せ、さらにその上にアクリル製マンジャーセル(7.5cm×2.5cm、セル内径:1.5cm)を載せた。ペトリ皿に0.5μLのα-ヨノン(原液、300μM)を滴下し、その上に1頭のミカンキイロアザミウマ2齢幼虫を置き、面相筆で当該幼虫を液上で5秒間転がし、濾紙で余分な液を吸い取った。その後、マンジャーセル内のトマト葉に載せ、24℃±1℃、16時間明期/8時間暗期条件下で制御した恒温室内に置いた。48時間後、生存率(検定開始時の幼虫数に対する検定後の幼虫の生存数の百分率)を調べた。α-ヨノン液に代えて、0.5μLのエタノールで同様に処理したものを、対照区とした。
<トマト遺伝子の発現誘導に対するα-ヨノン処理の効果の検定>
ポットで栽培した3週齢以上4週齢以下のトマトを透明樹脂製円柱容器(約1000mL体積;14cm高×10cm直径)に置いた。次いで、100μLの所定濃度(1μM、10μM、100μM及び300μM)のα-ヨノン液及びエタノール(0μM)を入れた1.5mLマイクロチューブを当該容器の内壁にテープで固定し、7cm×5cmに切り抜いた箇所にナイロンメッシュを貼付した蓋を載せ、さらに、α-ヨノン蒸気が当該容器から漏れるのを防ぐために食品用ラップフィルムで蓋全体を覆い、24℃±1℃、16時間明期/8時間暗期条件下で制御した恒温室内に置いた。24時間後、トマト葉を採取し、直ちに液体窒素で凍結し、全RNA抽出に用いた。トマト葉からの全RNA抽出、RNAからのcDNA合成、cDNAを用いたSYBR法によるリアルタイムPCRは既報(非特許文献3及び4)に従った。サリチル酸応答性遺伝子であるSlGLuB(トマトのβ-glucanase遺伝子)及びSlPR3a(トマトの酸性キチナーゼIII)、ロリオライド応答性遺伝子であるSlLin5(トマトのinvertase)、並びに、ジャスモン酸応答性遺伝子であるSlPR3b(トマトの塩基性キチナーゼIII)、SlLapA1(トマトのleucine aminopeptidase)及びSlPin2(トマトのproteinase inhibitor II)の発現誘導に対するα-ヨノンの効果を調べた。なお、各遺伝子の発現量は、トマトのアクチン遺伝子(Accession number:BT012695)の発現量で補正した。
<トマト遺伝子の発現誘導に対するβ-ヨノン処理の効果の検定>
α-ヨノンの光学異性体であるβ-ヨノン処理によるトマト遺伝子の発現誘導に対する効果を、実施例3に記載の方法に準じて行った。検定においては、最終濃度300μMのβ-ヨノン(富士フィルム和光純薬株式会社製)を含むエタノール溶液及びエタノールのみからなる溶液(0μM)について、実施例3に記載の方法を用いてトマトを24時間処理した後、トマト葉を採取し、トマト葉におけるSlGLuB及びSlPR3bの発現量を調べた。
β-ヨノンは、アザミウマに対する殺虫効果や忌避効果があるといわれている。しかしながら、比較例1及び2の結果から明らかであるように、β-ヨノンはトマトに対してアザミウマ科昆虫に対する抵抗性やSlGLuB及びSlPR3b等のマーカー遺伝子の発現を誘導する効果がないことが示された。
<植物ホルモンの蓄積に対するα-ヨノン処理の効果の検定>
ポットで栽培した3週齢以上4週齢以下のトマトを透明樹脂製円柱容器(約1000mL体積;14cm高×10cm直径)に置いた。次いで、100μLの所定濃度(1μM、10μM、100μM及び300μM)のα-ヨノン液及びエタノール(0μM)を入れた1.5mLマイクロチューブを当該容器の内壁にテープで固定し、7cm×5cmに切り抜いた箇所にナイロンメッシュを貼付した蓋を載せ、さらに、α-ヨノン蒸気が当該容器から漏れるのを防ぐために食品用ラップフィルムで蓋全体を覆い、24℃±1℃、16時間明期/8時間暗期条件下で制御した恒温室内に置いた。24時間後、トマト葉を採取し、直ちに液体窒素で凍結し、植物ホルモン抽出に用いた。植物ホルモンであるサリチル酸及びジャスモン酸の定量は既報(非特許文献3及び4)に従った。なお、エタノールのみからなる溶液(0μM)で処理したトマトを対照とした。
<48時間α-ヨノン処理のシロイヌナズナにおけるミカンキイロアザミウマ生存数に対する防除効果の検定>
2ヶ月齢のシロイヌナズナの葉から打ち抜いた葉片(1cm直径)を、予め各ウェルあたり0.8mLの300μMのα-ヨノン液を添加した48穴マイクロタイタープレートに置き、24℃±1℃、16時間明期/8時間暗期条件下で制御した恒温室内に置いた。48時間後、ミカンキイロアザミウマの雌成虫を葉片1株あたり1頭放飼し、直ちに蓋をし、上記と同じ条件下で栽培した。3日後に、産卵数を計測した。なお、エタノールのみからなる溶液(0μM)で処理したトマトを対照(コントロール)とした。
<48時間α-ヨノン処理のトマトにおけるハスモンヨトウ生存数及び体重に対する防除効果の検定>
3週齢以上4週齢以下のトマトの葉を、予め各濃度のα-ヨノン液を添加したガラス製ペトリ皿(16cm直径)に置き、24℃±1℃、16時間明期/8時間暗期条件下で制御した恒温室内に置いた。48時間後、トマト葉を取り出し、一枚の葉あたり一つの透明樹脂製円柱容器(約1000mL体積;14cm高×10cm直径)内に置き、一葉あたり10頭のハスモンヨトウ幼虫を葉の表面に放飼し、直ちに蓋をし、上記と同じ条件下で栽培した。栽培中に葉が乾燥するのを防ぐために、葉柄を、予め1mLの蒸留水を添加した1.5mLマイクロチューブに突き刺した。5日後に、生存数及び体重を計測した。なお、エタノールのみからなる溶液(0μM)で処理したトマトを対照(コントロール)とした。
以上のことから、α-ヨノンは、アザミウマ科昆虫と異なる摂食様式を示す咀嚼性のハスモンヨトウ(ヤガ科昆虫)の幼虫に対する抵抗性を植物に誘導できることが明らかとなった。
<24時間α-ヨノン処理のキュウリにおけるミナミキイロアザミウマ生存数に対する防除効果の検定>
ポットで栽培した3週齢のキュウリ株を透明樹脂製円柱容器(約1000mL体積;14cm高×10cm直径)に置き、実施例1に記載の方法に準じて、300μMのα-ヨノン液とエタノール(0μM)を容器内で固定し、各溶液の蒸気にキュウリを24時間曝した。各溶液を入れた1.5mLマイクロチューブを取り出し、ミナミキイロアザミウマの雌成虫をキュウリ1株あたり10頭放飼し、直ちに蓋をし、と同じ条件下で栽培した。14日後に、24℃±1℃、16時間明期/8時間暗期条件下で生存数を計測した。
以上のことから、α-ヨノンは、キュウリ(ウリ科植物)にも、トマト(ナス科植物)及びシロイヌナズナ(アブラナ科植物)と同様に、ミカンキイロアザミウマと同じアザミウマ科昆虫に属するミナミキイロアザミウマに対する抵抗性を誘導できることが明らかとなった。
Claims (5)
- α-ヨノンを有効成分として含有し、アザミウマ科昆虫に対する抵抗性を植物に誘導する、害虫抵抗性誘導剤。
- α-ヨノンを有効成分として含有し、ヤガ科昆虫に対する抵抗性を植物に誘導する、害虫抵抗性誘導剤。
- 請求項1又は2に記載の害虫抵抗性誘導剤を、植物体に接触又は吸収させる、植物の害虫防除方法。
- 前記植物体が、双子葉植物である、請求項3に記載の植物の害虫防除方法。
- 前記植物体が、ナス科植物、アブラナ科植物又はウリ科植物である、請求項3又は4に記載の植物の害虫防除方法。
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Title |
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α-Ionone, an Apocarotenoid, Induces Plant Resistance to Western Flower Thrips, Frankliniella occidentalis, Independently of Jasmonic Acid,Molecules,2019年12月19日,pp.1-10,doi: 10.3990/molecules25010017 |
害虫抵抗性誘導剤の素材として有望な天然物質の発見,環境報告書2020,2020年,17 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2021028319A (ja) | 2021-02-25 |
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