JP7197793B2 - mRNA成熟阻害剤 - Google Patents
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[3] 前記[1]又は[2]のmRNA成熟阻害剤としては、腫瘍の治療又は再発予防に用いられることが好ましい。
[4] 本発明の第二の態様に係るmRNA成熟阻害剤の製造方法は、コーヒーの可溶性成分をメタノール抽出し、得られたメタノール抽出物から、液体クロマトグラフィーにより前記式(1)で表される化合物を含む画分を分取する。
[5] 前記[4]のmRNA成熟阻害剤の製造方法としては、前記コーヒーの可溶性成分が、焙煎コーヒー豆の可溶性成分であることが好ましい。
以降の実験において、各化合物のmRNA成熟阻害活性は、非特許文献4に記載されているRNA-FISH(Fluorescence in Situ Hybridization)を利用した方法に準じて行った。RNA-FISHには、ヒト骨肉腫細胞から樹立された培養細胞株U2OS細胞を用いた。U2OS細胞は、10%FBS(ウシ胎児血清)含有DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)中で、37℃、5%二酸化炭素環境下で培養した。
焙煎コーヒー豆の可溶性成分から、mRNA成熟阻害活性を有する化合物を単離し、同定した。焙煎コーヒー豆の可溶性成分としては、インスタントコーヒー(商品名:〈〈ブレンディ〉インスタントコーヒー〉、味の素AGF社製)を用い、中圧カラムクロマトグラフィーを繰り返すことによる分画精製を行い、mRNA成熟阻害活性のある画分からmRNA成熟阻害活性を備える化合物を同定した。中圧カラムクロマトグラフィーには、シリカゲル(Wakogel C-200、粒子サイズ75~150μm)を充填したカラムを用いた。インスタントコーヒーの分画精製のフローと各フラクションの回収量を図1に示す。最終的に6段階の精製で、3種類の単一の活性化合物を単離した。
カテコール関連物質及びカフェ酸関連物質について、実施例1と同様にしてmRNA成熟阻害活性を測定した。被験化合物は、レソルシノール(50μM、100μM、250μM)、カフェ酸エチル(200μM)、フェルラ酸メチル(200μM)、フェルラ酸エチル(200μM)、桂皮酸メチル(200μM)、桂皮酸エチル(200μM)、及びクマル酸メチル(200μM)とした。
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Journal of Agricultural and Food Chemistry,2014年,Vol.62,p.5054-5060 |
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